TWI290835B - Fine particle subconjunctival administration drug delivery system - Google Patents

Description

1290835 玫、發明說明 .....J - ； ..Ϊ- . Λ·..·.:....· I :： . ： (發明說明應敘明：發明所屬之技術銪Μ · 5又力Γ川蜀（议術请域、先則技術、內容、實施方式及圖式簡單說明） (一）發明所屬之技術領 本發明係關於網膜、脈絡膜、視神經等後眼部之藥物輸 送系統。 (二）先前技術

網月旲、脈絡Μ及視神經等之後眼部疾病多爲難治性疾病 ’因此寄望具功效治療法之開發。對於眼疾病，點眼藥投 與樂物之治療是最普遍的，但網膜、脈絡膜及視神經等之 後眼部藥物幾乎不移行。再者，即使移行也極難持續組織 中的藥物濃度。 因此，對後眼部疾病之藥物投與方法，已嘗試靜脈注射 、經口投與、玻璃狀體注射。靜脈注射或經口投與，目標 部位後眼部之藥物移行量極微量，且不欲之藥物全身作用（ 副作用）也強烈顯現。

由於玻璃狀體注射是直接注射藥物於眼內，後眼部之藥 物移行量比靜脈注射或經口投與多。有關玻璃狀體注射之 後眼部藥物輸送系統，總論整理於j 0 u r n a 1 0 f 0 c u 1 a r pharmacology and therapeutics , ( 200 1 ) 17/4，393-401 。然而，玻璃狀體注射爲需要高度技術之投與法，由於伴 隨相當的痛苦，病人的負擔也很大，因此多次投與極爲困 難。 對於這些投與法，結膜下注射的技術比較簡便，因此比 _ 6 - 1290835 玻璃狀體注射的眼組織障害少，且對病人的負擔也少。結 膜下注射後的藥物移行性亦已被發表（Inves t . Ophthalmol . Visual Sci. 18(3)250-255，1979)，由於半衰期非常短， 長時間持續藥物的後眼部組織中濃度是困難的。因此，爲 持續藥物的組織中濃度而必須多次投與，多次投與使病人 的負擔變大。 爲避免多次投與’已知之持續眼內藥物濃度之方法爲靜 脈內投與藥物-高分子結合體之方法（Inves t . Ophthalmol . Visual Sci. 40 ( 1 ) 2690 - 2696，1 99 9 )，或注入含有藥物之 微小球於玻璃狀體之方法（特開2 0 0 0 - 2 4 7 8 7 1 )。 如上所述，習知技術中，結膜下注射後持續藥物的組織 中濃度是困難的’因此希望硏發由結膜下注射之後眼部之 持續的藥物輸送系統。 (三）發明內容 發明之掲示 由本發明者們努力硏究的結果發現：若結膜下投與含有 藥物之徐放性微粒子，非常有用於作爲後眼部之持續的藥 物輸送系統。 本發明係關於結膜下投與含有藥物之微粒子而用於後眼 部之藥物輸送系統。又本發明係關於具有含藥物之微粒子 之注射劑，可使藥物移行於後眼部之結膜下注射劑。由結 膜下投與含有藥物之微粒子，比靜脈注射或經口投與之後 眼部的移行性更佳’全身作用的副作用也較少。且相較於 玻璃狀體注射，因手技簡便病人的負擔也較少。再者，藉 一 7- 1290835 由含有樂物於微粒子’可長時間維持目標組織中的藥物濃 度。 本發明中組成微粒子之材料以生物體分解性或生物體溶 解性高分子爲佳，具體例如聚乳酸、乳酸-乙醇共聚物、乳 酸-己內酯共聚物、聚硬石膏、聚原酸酯、聚胺己內酯、聚 丙烯基氰基丙烯酸酯、聚羥烷醇酸、聚磷酸酯、聚胺基酸 、聚α -羥基酸等之生物體分解性高分子；動物膠（ge丨a t丨n ) 、膠原（c ο 1 1 a g e η )、透明質酸、葡聚糖、澱粉、藻酸鈉、 洋菜膠、支鏈源粉（pullulan)、白蛋白、角叉萊膠 (carrageenin)、果膠、黃原膠、葛倫膠（gelan gum)、酪 蛋白、殼聚糖、血纖維蛋白質等之天然高分子；間丙烯酸 共聚物、聚乙烯醇、羥丙基甲基纖維素、羥丙基甲基纖維 素乙酸酯、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、甲基纖維素、 聚乙烯吡咯酮、聚乙二醇、聚烷基丙烯醯酸等之合成高 分子。 這些高分子物質的分子量無特別限制可依據微粒子所含 之藥物種類、藥物的有效治療濃度、藥物的放出期間等適 宜選擇。 本發明中微粒子的粒子徑較佳爲 50nm〜150 //m。粒子徑 5 Onm以下之微粒子製造困難，粒子徑150// m以上因粒子太 大不宜作爲注射劑。更佳之粒子徑爲2 0 0 n m〜7 5 // m。 本發明之藥物輸送系統可用於網膜、脈絡膜及視神經之 疾病的治療或預防。具體的疾病例如種種原因引起之炎症 ，病毒或細菌的感染症，網膜脈絡膜血管新生引起之炎症 一 8 - 1290835 ，網膜缺血引起之疾病，青光眼引起之視神經障害。更具 體說明如葡萄膜炎，細胞巨大病毒網膜炎，老化性黃斑變 性症，糖尿病性網膜症，增殖性玻璃狀體網膜症，網膜剝 離，網膜色素變性症，網膜中心靜脈閉塞症，網膜中心動 脈閉塞症等。

微粒子所含之藥物無特別限制，可依據所針對的疾病適 宜選擇藥物。具體例如β -美沙松（b e t a m e t h a s ο n e )，德沙美 沙松（dexamethasone)，氟經脫皮留醇（triamcinolone)， 脫氫皮留醇（prednisolone)，氟美沙酮（fluoromethalone) ，經可體松（hydrocortisone)，黃體酮（progesterone)等 之類固醇劑或其衍生物；溴芬艾克（b r 〇 m 〇 f e n a c )，代可羅 芬艾克（diclofenac)等之抗炎症劑；TNF - α抑制劑、PDE-IV 抑制劑、ICE抑制劑等之細胞激素抑制劑，環孢子素 (c y c 1 〇 s ρ 〇 r i η )、太可利馬斯（t a c r ο 1 i m u s )等之免疫抑制劑 :甘環微爾（gancyclovir)、阿環微爾（acyclovir)、干擾 素冷等之抗病毒劑；歐福羅生素（ofloxacin)、克拉力黴素 (clarithromycin)、紅黴素（erythromycin)等之抗菌劑； 氟尿嚼Π定、胺甲碟D令（m e t h 〇 t r e X a t e )、MMP抑制劑等之抗 癌劑；內司達丁（ endos t at in)、VEGF抑制劑、反意義寡核 苷酸、PKC抑制劑、附著因子抑制劑、血管靜止性類固醇 等之血管新生抑制劑；MK-801、塞摩羅（thymolol )、肌酸 (c r e a t i n e )、牛磺酸（t a u r i n e )、BDNF等神經保護劑，神 經營養因子、乙醯羅拉醯胺（acetazolamide)等之碳酸酐酶 抑制劑；尿激酶等之血栓溶解劑等等。藥物含於微粒子中 一 9- 1290835 ，可爲平均分散於微粒子內之基質型或以藥物作爲核心將 微粒子膠囊化之膠囊型爲佳。 微粒子含有之藥物量可依據對應之藥物種類、有效治療 濃度、藥物的放出期間、症狀等適宜增減。藥物的含有量 爲微粒子重量的0.01〜95%，較佳爲重量的0.1〜20%。 本發明之微粒子可使用習知製粉所用之粉碎法，相分離 法（凝聚法），噴霧乾燥法，超臨界流體法，界面沉著法， 界面反應法製造。更具體例如界面沉著法之液中乾燥法（J . Control. Release, 2, 3 43 - 3 52，（ 1 9 85 ))，界面反應法之 界面聚合法（Int· J. Pharm·， 28， 125-132 (1986))，自 動乳化溶劑擴散法（J. Control. Release，25，89-98 ( 1 993 ))等等。從這些製造法，考慮微粒子的粒子徑或所含 之藥物種類、性質或含量等等，可適宜選擇適當的製造法 〇 微粒子的具體製造例如含有抗炎症劑β -美沙松之藥物， 使用之微粒子材料聚乳酸，於下述實施例顯示含有藥物之 微粒子製造例。 本發明之效果以下述之網脈絡膜藥物濃度測定試驗項詳 細說明，使用β -美沙松爲藥物例，結膜下投與含有β -美沙 松之微粒子，測定網脈絡膜中之藥物濃度，發現可持續網 脈絡膜中之藥物濃度。 本發明之藥物輸送系統，微粒子係被投與於結膜下。結 膜下之投與方法可使用常用的結膜下注射。如先前技術項 所述，結膜下注射手技比較簡便，而且病人的負擔也較少 -1 0 - 1290835 再者，使用本發明之系統後，可十分有效率送達藥物至 目標部位之網膜、脈絡膜或視神經等後眼部，故可減低藥 物的投與量，亦可期待副作用的減輕效果。 用於本發明藥物輸送系統之微粒子，爲可投與於結膜下 ，投與劑型以注射劑爲佳。注射劑可使用廣泛使用之注射 劑製劑化技術製備。舉例而言，可將氯化鈉等滲透壓調整 劑，磷酸鈉等緩衝劑，聚山梨酸酯80等界面活性劑，甲基 纖維素等增黏劑之常用添加劑及微粒子，添加至注射用蒸 餾水以製備製劑。再者，可使用不用針之高壓式注射器， 不做成注射劑而能原封不動投與微粒子。 以下顯示微粒子之製造例，製劑之製備例，藥物濃度測 定試驗及脈絡膜血管新生抑制試驗之結果。 (四）實施方式 1施本發明之最佳熊樣 1.含有藥物之微粒子之製造方法 可用於本發明藥物輸送系統之微粒子之製造例如下所示 〇 β-美沙松（0.025g)及重量平均分子量20000之聚乳酸 (〇.25g)溶解於苯甲醇（1.5mL)，所得溶液爲藥物/聚合物溶 液。於均質器中均質化（5000rpm)2 · 0%( w/v )聚乙烯醇水溶 液（3 OinL )，滴下藥物/聚合物溶液於其中。滴下終了後，開 始均質化此混合物5分鐘製備0/W乳液。使用攪拌機攪梓 (3 00。111)超純水，滴下製備之0/%乳液於其中，滴下終了 1290835 後，開始攪拌1小時。攪拌終了後，離心分離所得懸浮液 ，去除上淸液。爲洗淨沉澱物’添加超純水（3 OmL )以分散 沉澱，再次離心分離去除上淸液。此項操作再進行一次。 經由篩子篩選洗淨之沉澱物得到粒子徑50ηπι〜75//m之粒子 。經由冷凍乾燥所得粒子得到含有β -美沙松之微小球。 2. 製劑之製備方法 含有β-美沙松之微小球粉末（ 442mg)分散於4mL溶劑中 (0.4%(〜^)聚山梨酸酯80/2.6%(〜^)甘油水溶液），所得 分散液爲含有β -美沙松之微小球注射劑。 3. 網脈絡內藥物濃度測定試驗 使用含有β -美沙松之微小球注射劑，依照下述方法測定β -美沙松之網脈絡膜內濃度。使用下述之β -美沙松懸浮劑作 爲對照組進行濃度測定。比較β -美沙松之微小球投與組與 懸浮劑投與組之β -美沙松的網脈絡膜內濃度。爲構成 1 % ( w / ν )濃度β -美沙松之β -美沙松懸浮劑，將β -美沙松懸浮 於溶劑中（0 · 4 % ( w / ν )聚山梨酸酯8 0 / 2 · 6 % ( w / ν )甘油水溶液） 〇 1) 將鹽酸氧伯普甘（HC1 oxybuprocaine)(0.5%(w/v)) 眼藥水點藥於日本白兔的兩眼以麻醉眼表面。 2) 使用27G針之注射器，每一眼投與100 // L含β-美沙 松之微小球注射劑於上部結膜下。由於微小球中之β -美沙 松含有率爲約4 · 6 % ( w / ν )，因此β -美沙松含的投與量爲約 5〇〇 Μ g。對照組是使用27G針之注射器，每一眼投與50 # l 之1%(W/V)P_美沙松懸浮劑於上部結膜下。 -12- 1290835 3)投與後第2、7、14、21、28日屠宰兔子，摘出各眼 球後回收網脈絡膜，以高速液相色層分析測定網脈絡膜內 之β -美沙松濃度。 藥物經時的濃度推移結果示於表1。從表1明確得知β _ 美沙松懸浮劑於網脈絡膜內之β -美沙松濃度，在7日後爲 約0 · 9 6 // g / g組織，1 4日後則在偵測界限以下。相較於此 ’含有β -美沙松之微小球於網脈絡膜內之β -美沙松濃度， 即使在2 8日後爲約0 · 0 9 // g / g組織，可維持網脈絡膜中藥 物濃度。 表1網脈絡膜中之β-美沙松濃度（//g/g組織） 對照組（懸浮劑） 微小球注射劑 投與2曰後 0.54± 0.35 0.70± 0.26 7日後 0.96± 0.54 0.18 14日後 偵測界限以下 0·17± 0.06 21日後 偵測界限以下 0.10± 0.02 28日後 偵測界限以下 0.09± 0.02 (表中所示網脈絡膜中之β -美沙松濃度爲3或4眼的平均 値土標準誤差。微小球注射劑之7曰値，因4眼中有2眼 在偵測界限以下，故以2眼的平均値表示。） 4.脈絡膜血管新生抑制試驗 含有β -美沙松之微小球注射劑的脈絡膜血管新生抑制效 果，使用雷射誘發大鼠脈絡膜血管新生模式，以下述方法 進行檢討。使用僅含有溶劑（0 · 4 % ( w / ν )聚山梨酸酯 80/2 .6%(w/v)甘油水溶液）之微小球注射劑作爲對照，進行 1290835 如下述之操作。 1 )於大鼠經由肌肉內投與 5%(w/v)鹽酸氯胺酮（HC1 ketamine)注射液及2%(w/v)鹽酸艾克司拉寧（HC1 xylazine) 注射液之混合物（7 : 1 ) lnil/kg將大鼠全身麻醉，對兩眼點 藥 0.5%(w/v)卓皮卡麥（tropicamide)/0.5%(w/v)鹽酸脫氫 腎上腺素（HC1 phenylephrine)眼藥水使之散瞳後，以氪雷 射光凝固裝置進行光凝固。光凝固係將焦點對準於網脈深 層並避開粗的網膜血管，每1眼於8處散布狀地實施（凝固 條件：點大小100 μ m，出力1 OOmW，凝固時間0 · 1秒）。光 凝固後，進行眼底攝影，確認雷射照射部位。 2) 光凝固後緊接著使用裝有30G針之微針筒，於大鼠 上部結膜下每一眼投與5 0 // 1含有β -美沙松之微小球注射 劑。對照組是於上部結膜下每一眼投與50 // 1僅含有溶劑 (0.4%(w/v)聚山梨酸酯 80/2.6%(w/v)甘油水溶液）之微小 球注射劑。 3) 光凝固14日及28日後，從尾靜脈注入10%(w/v)螢 光素水溶液0 . 1 m 1，然後進行螢光眼底攝影。以螢光眼底 攝影不能看到螢光漏出點者判定爲陰性，可看到螢光漏出 點者爲陽性。依照下述計算式，從相較於雷射照射8處的 點爲陽性點之比例，算出血管新生表現率（％ )。再者，顯示 太過輕度螢光者以發現2點爲陽性1計數。 新生血管表現率（％) = (螢光漏出點數/雷射照射點數U100 所得結果以平均値±標準誤差表示。統計分析是使用 Student’s t檢定。具統計意義爲兩側5%。 - 14- 1290835 含有β -美沙松之微小球的脈絡膜血管新生抑制效果示於 表2。光凝固I4日後之對照組的血管新生表現率爲60. 9土 4.4%，含有美沙松之微小球的血管新生表現率爲12. 5 土 2 . 4%，顯示具統計意義之脈絡膜血管新生抑制作用。再者 ，光凝固28日後之對照組的血管新生表現率爲73 · 4± 6 · 0% ，含有β _美沙松之微小球的血管新生表現率爲1 2 · 5 ± 2 · 4% ，顯示具統計意義之脈絡膜血管新生抑制作用。根據以上 結果淸楚明白，經由結膜下投與含有β -美沙松之微小球， 即使在1 4日及28日後仍顯示脈絡膜血管新生抑制作用。 表2含有β-美沙松之微小球之血管新生表現率（％) 對照組 微小球組 14曰後 60.9± 4.4 12.5± 2.4 28日後 73.4± 6.0 12.5± 2.4 (表中各組之血管新生表現率以8眼的平均値±標準誤差 表示） 產業上之可利用件 藉由本發明可提供結膜下投與之後眼部之優良藥物輸送 系統。 )圖式之簡蜇説明：無 - 15 -

Claims (1)

1. 年月日修(更)正本 96· 8. - t]_ 第9210365ΤΪ「微粒結膜下投與藥物輸送系統」專利申請案 (2007年δ月1曰修正） 拾、.申請專利範圍. 1 · 一種藥物輸送系統’其係於結膜下投與含有藥物之微粒 子之後眼部之藥物輸送系統，該微粒子的粒子徑爲 200nm〜1 5 0 μηι 〇 2 · —種結膜下注射劑，其係具有含藥物之微粒子之結膜下 注射劑，該微粒子的粒子徑爲2 0 0 n m〜1 5 0 μ m，且可使藥 物移行於後眼部。 3 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中微粒子的 粒子徑爲200nm〜75μπι。 4 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中該微粒子 係由生物體分解性或生物體溶解性高分子所組成。 5 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中後眼部爲 網膜、脈絡膜、視神經、玻璃狀體、或水晶體。 6 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中藥物係爲 網I吴、脈絡膜、視神經、玻璃狀體、或水晶體疾病之治 療或預防用藥物。 7 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，宜φ藥物爲抗 炎症劑’免疫抑制劑’抗病毒劑’抗癌劑，血管新生抑 制劑’抗血检劑’視神經保護劑’抗菌劑或抗真菌劑。 8·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中微粒子是以聚 乳酸形成之微小球。 9 ·如申請專利範圍第1項之藥物輸送系統，其中藥彳勿爲β _ II、沙 1290835 松（betamethasone) 〇 1 〇.如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中微粒子的粒 子徑爲200nm〜75//m。 1 1.如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中該微粒子係 由生物體分解性或生物體溶解性高分子所組成。 1 2.如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中後眼部爲網 膜、脈絡膜、視神經、玻璃狀體、或水晶體。 1 3.如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中藥物係爲網 膜、脈絡膜、視神經、玻璃狀體、或水晶體疾病之治療或 預防用藥物。 14. 如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中藥物爲抗炎 症劑，免疫抑制劑，抗病毒劑，抗癌劑，血管新生抑制劑 ，抗血栓劑，視神經保護劑，抗菌劑或抗真菌劑。 15. 如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中微粒子是以 聚乳酸形成之微小球。 16·如申請專利範圍第2項之結膜下注射劑，其中藥物爲β-美 沙松（b e t a m e t h as ο n e) 〇