TWI284530B - Drugs, drinks or foods with catechins or gallic acid derivatives - Google Patents
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Description
1284530 A7 ______Β7 五、發明說明(1 ) 技術領域 本發明係關於治療或預防經由雌性激素受體所引起之疾 病的醫藥、飲料或食品。 背景技術 雌性激素在人體生理學上是具有廣泛重要機能的内因性 激素。此激素主要影響及男性女性雙方之生殖系統。例 如,在成年女性,任娠及授乳過程中雌性激素爲不可或 缺。且可減低心臟病發作及骨質疏鬆症的危險性。更進一 步的,在出生前及出生後早期中雌性激素相對於雄性激素 的比率調節性分化及適當之生殖器官之適切形成。雌性激 素亦與乳房及子宮細胞之增殖也就是癌有關連,其症狀之 一已知有雌性激素依存性乳癌。另外,雌性激素依存性的 其他症狀已知有,子宮纖維症(子宮類纖維腫)、子宮内膜 炎及平滑肌細胞增殖等。在男性,雌性激素調節精子的產 生,雌性激素異常會導致單位濃度精子數減少(精子減少 症)。且前列腺肥大症已知與雄性激素有關,投與抗雄性 激素正研討中,但是近年來已確認在前列腺細胞中有雌性 激素受體細胞存在,因雌性激素受體的發現開始研討抑制 物質mepartricin作爲前列腺肥大的抑制劑。(The Prostate 38:17-27, 1999)。但是,並沒有關於雌性激素競爭雌性激素 受體抑制前列肥大的物質之報告。 且,由近年來之研究顯示,雌性激素除了與女性的生殖 及性組織的機能有關連的恆常性機能之外,亦顯示有許多 其他的恆常性機能。實際上,了解到在男性的雌性激素受 -4- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ··—------訂------丨丨·· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 ____B7__ 五、發明說明(4 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 因爲脂肪酸、兒茶酸類或沒食子酸衍生物類等阻害5 α -還原酶(5從-reductase)活性,在前列腺癌或前列腺肥大的治 療上有效的專利,已被美國Arch Development Corp.公司之 Shutsung Liao等申請中(US 5605929,W099/22728號公告,特 表平11-507022號)。這些公報中,並未有包含動物模型的 治療例的記載,只有基於過去論文(例如,P. K. Siiteri等 (1970) J.Clin. Invest. 49:1737-1745,P. C. Walsh等(1983) J· Clin. Invest. 72: 1772-1777,E. Stoner 等(1992) J. Urol. 147:1298-1302,G. J. Gormley 等(1992) Ν· Eng. J. Med· 327:1185-1191,Ν· Bruchovsky等(1988) J. Clin. Endocrinol· Metab. 67:806-816等)推 定其效果者。
經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 且,5從-還原酶的同工酶有2種類,因動物品種或組織 其分布完全相異。(Α· E· Thigpen 等(1993) J. Clin. Invest· 92:903-910 ^ David W. Russell & Jean D. Wilson (1994) Annu. Rev. Biochem. 63:25·61)。有關於人類的前列腺癌或前列腺肥大 者爲第2型的5 α -還原酶。然而,Liao等人以兒茶酸或沒 食子酸衍生物類在確認阻害上所用的是第1型的5 α -還原 酶。因此,由Liao等人的數據並不能完全清楚兒茶酸類或 沒食子酸衍生物類對於人類前列腺癌或前列腺肥大的有效 性。且,上記的特表平11_507022號中爲,沒食子酸衍生物 或兒茶酸類的沒食子酸基與5 α -還原酶無關,兒茶酸之沒 食子酸基以外的部分構造很重要。 L i ao等人認爲沒食子酸衍生物類或兒茶酸類的5 α -還原 酶的阻害作用中兒茶酸類的沒食子酸基以外的部分的構造 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(2]0 X 297公釐) 1284530
5 五 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 、發明說明( (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 很重要,沒食子酸衍生物類中無5沈-還原酶阻害活性(us 5605929號),並且,已被報導出全細胞分析的條件下完全 不阻害5泛-還原酶的活性(WO 99/22728號公報)0 如上述,關於兒茶酸類或沒食子酸衍生物類,藉由選擇 性阻斷雌性激素受體,控制經由雌性激素受體的訊號尚未 知。 發明的目的 本發明的目的係在於爲了防止内分泌擾亂物質的影響, 提供安全性良好的醫藥、飲料或食品。 發明的概要 本發明的各個發明者,藉經口攝取,與生物體内的内分 泌擾亂物質拮抗,確立遮斷該内分泌擾亂物質的篩選系 統,一意努力的結果,發現驚人的結果是與生物體内的雌 性激素受體相結合的物質中也有不顯示雌性激素樣作用 者’而完成了本發明。意即,若概略説明,本發明的第1 發明之特徵爲含有具有雌性激素受體的作動性及拮抗作用 之物質作爲有效成分,爲關於作動劑與雌性激素受體結合 而引起之疾病的治療劑或預防劑。 本發明的第二發明之特徵爲以含有、添加及/或稀釋雌 性激素受體作動性及有拮抗作用物質,是關於因作動劑與 雌性激素受體結合引起的疾病的症狀改善用或預防用飲料 或食品。 本發明的第1、2發明中,雌性激素受體作動性及有拮抗 作用的物質是不顯示雌性激素樣作用的拮抗劑,可使用下 -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) l28453〇
五、 發明說明( 述一般式I :
0H
R. (式中’ R!、R2是表示- Η、0H或·〇•汉。Η -OH。此時R4爲下述式H : , 4。尺3是表示-H或
一C
(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁}
ϋ I ϋ ϋ ϋ ϋ』:口、I ϋ ϋ I I ϋ Βϋ ^1 I %· 中所示之化合物、其衍生物或其鹽I ^ 、只)所示之化合物、沒 食子鉍、其衍生物、及其藥理學上容 各斤的鹽類中所選出之 化合物。 式I中所表示的化合物,以兒茶酸類舉例表示,例如, 表兒茶酚、表掊兒茶酚、掊酸酯、掊酸表掊酸酯、表兒茶 酸掊酸醋、掊酸掊酸醋、兒茶酸掊酸g旨、兒茶酸、格兒茶 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 ^------~____ 五、發明說明(13) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 疋以被螢光標示的複合體與候補物質之間的拮抗作用篩 選。次之’第二階段則將這些經確認與雌性激素受體有結 合活性的候補物質以已公開的方法判別雌性激素樣作用是 否存在,例如,Environ· Health Perspect· 103:113-122(1995)中 所記載的E-SCREEN ASSAY,也就是在人類乳癌由來細胞 (MCF-7)培養時添加候補物質,調查mcf_ 7的增殖活性可以 判別其爲作用劑或拮抗劑。 更進一步的,生體内有效的拮抗劑篩選法並無特別限 足’例如’實施例1記載的方法,亦即藉由投與雌性激素 受體的作用劑,再經口投與候補物質調查子宮重量的變化 可以篩選。且,此候補物質溶解於乙醇後投與,亦可以調 查其吸收效率。 該兒茶酸類例如,可被列舉有表兒茶酸、表掊兒茶酸、 表掊兒茶酸兒茶酯、表兒茶酸掊酸酯、掊兒茶酸掊酸酯、 兒茶酸掊酸酯、兒茶酸、掊兒茶酸及/或這些化合物的衍 生物。 且本發明中兒茶酸類的衍生物若有雌性激素受體作動性 及有拮抗作用並無特別限定。 本發明中被使用的沒食子酸衍生物並無特別限定,分子 中有沒食子酸構造的化合物皆可以使用。例如,與沒食子 酸的氫氧基、羧基與其他分子的官能基反應生成的酯類、 醚類、醯胺類等的化合物。特別是與具有沒食子酸的羧基 與羥基的化合物之間的酯類適合本發明。 該酯類爲醇性,可舉例有苯酚性羥基化合物與沒食子酸 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公髮) 1284530 A7 B7 \ L· 五、發明說明(14) 的醋類’戊基掊酸酯、己基掊酸酯、庚基掊酸酯、辛基掊 酸醋、壬基掊酸酯、癸基掊酸酯、十一烷基掊酸酯、十二 坑基梧酸酷、十三烷基掊酸酯、十四烷基掊酸酯、十五烷 基掊酸醋、十六烷基掊酸酯、十七烷基掊酸酯、十八烷基 梧酸醋等’特別適合者爲碳原子數8以上的脂肪醇與沒食 子酸的酯類,例如辛醇,癸醇,十六醇等與沒食子酸的酯 類特別適於本發明。且,上記的脂肪醇對於雌性激素受體 作動性及有拮抗作用保持範圍内具有支鏈或不飽和的碳氫 鍵亦可’又,碳氫鏈上的氫原子以鹵素或官能基,例如, 經基、羧基、氨基、環氧基等置換亦可。 本説明書中所謂作用劑與雌性激素受體結合而引起的疾 病可列舉有,精子數減少、雌性激素依存性癌、子宮類纖 維腫疾病、子宮内膜炎及平滑肌細胞增殖、精子減少症等 的被報導原因爲雌性激素異常反應的疾病。又,關於前列 腺肥大以抑制雌性激素的受期待的治療效果,包含在本發 明的治療劑或預防劑的對象疾病。 本説明書中,所謂對雌性激素受體之作動劑具有拮抗作 用之物質,係指與雌性激素受體結合後,對於内分泌擾亂 物質或雌性激素等作動劑所造成之雌性激素受體之結合, 具有拮抗作用之物質。 本説明書中所記載的雌性激素爲例如,可舉例有17卢_ 雖醇、動情素、結合型雌性激素(premarine(註册商 標))、馬雌性激素、170 -乙炔雌二醇等的具有雌性激素 活性的固醇類化合物。 17- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(21〇 χ 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂--------- 1284530 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製
!l· — ! ll—Γ—·· c讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·11111
H / I 1284530 A7 B7 五、發明說明(16) ;谷劑的 EGCG萃取物有,sunphenone 100S、Sunphenone DCF· 1、Simphenone la_5〇及 Sunphenone BG(其中任一個皆爲太陽 化學(股)公司製)。這些EGCG的含量各爲50、53、18、5〇% w/w且咖啡因含量各爲10% w/w,檢測範圍以下,5% w/w、3% w/w。由於已知咖啡因攝取過量會引起毒性、發 癌性、膽固醇上升作用、鈣尿症等,最好可以以減少咖啡 因等的共存雜質之茶萃取物使用爲食品較佳,而且減少咖 啡因感官面(味覺)較適宜。 本説明書中所渭「条」’意指茶[Cammellia sinensis,(L) 〇· Kuntze]的全草或其一部份之乾燥物或未處理品或部分發 酵物或完全發酵物,這些部分可單獨或任意組合使用之。 以茶葉爲抽出原料時,有各種型態者,例如由茶葉原葉至 成品茶(乾燥茶),通常的製茶步驟之任一階段者皆可,且與 發酵程度無關,例如穀物茶中麥茶、炒米茶、莠麥茶等, 葉茶中綠茶、紅茶、焙茶、抹茶、烏龍茶、A十〆茶等。 本發明的雌性激素受體中作動性及有拮抗性物質的茶萃 取物爲’含有前記之茶兒茶酸類即可,依此,可以使用茶 的粗萃取物。此茶之萃取物爲茶以溫水抽出或以有機溶媒 抽出可得。有機溶媒可使用,例如,甲醇、乙醇、正丙 醇、異丙醇、或丁醇等的低級醇、醋酸甲酷、_酸乙g旨、 醋酸丙酯、或醋酸丁酯等的低級酯類,或者丙酮,或甲基 異丁基酮等的酮類,可以單獨或適當的組合這些有機溶 媒’再以無水或偏好的含水狀態使用。 上記的水抽出及有機溶媒的抽出方法,較偏妤使用一般 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) — ^ — — κ^ίιιΦΦ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂--------- I284530 A7
五、發明說明(17) 的生藥抽出中所使用的方法。例如,對於(乾燥)茶葉i重 量單位,使用水或有機溶媒5〜20重量單位,邊攪拌,在 其沸點以下之溫度加熱循環。抽出步驟一般爲5分鐘〜7 天,最好爲實施10分鐘〜24小時,應需要可加以攪掉等的 輔助方法以縮短時間。水或有機溶媒抽出液,可藉著過遽 或離心等的適當方法分離不溶物。常法的熱水萃取物或有 機溶媒萃取物之外,這些萃取物以各種有機溶媒或吸附劑 再處理之生成物也包含於可當作本發明的合成抑制劑之有 效成分的茶萃取物中。這些茶萃取物可以應需要濃縮或乾 燥後粉末化,再更以冷水結晶化精製之。 依此所得之茶萃取物,茶(特別是茶葉)中含有的兒茶酸 類’亦即含有茶免茶酸類(例如,表兒茶酸、表格兒茶 酸、表掊兒茶酸掊酸酯、表兒茶酸掊酸酯、掊兒茶酸掊酸 酯、兒茶酸掊酸酯、掊兒茶酸)的混合物,同時含有原料 茶由來的不純物亦可。 本發明的作動劑與雌性激素受體結合引起之疾病的治療 劑或預防劑是,可以有雌性激素受體的作動性及拮抗作用 物質作爲有效成分製造之。 本發明的治療劑或預防劑爲,本發明中使用以有雌性激 素受體的作動性及拮抗作用物質作爲有效成分,以此與公 知之醫藥用擔體組合製劑化即可。該製劑之製造,一般將 在本發明中使用的有雌性激素受體的作動性及括抗作用物 質與藥學上許可的液狀或固體的擔體配合,且應需要加上 溶劑、分散劑、乳化劑、緩衝劑、安定劑、賦形劑、結合 -20- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) ——:L——Γ—φφ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂--------- 1284530 A7 五、發明說明(18 劑、崩散劑、滑澤劑等,可成爲錠劑、顆粒劑、散劑、粉 末劑、膠囊劑等的固體製劑,一般液劑、懸濁劑、乳劑等 的液劑。或可製成製劑在使用前添加適當的擔體變成液狀 的乾燥品。 醫藥用擔體爲,可應上記投與型態及劑形選擇之,若爲 經口劑,例如,澱粉、乳糖、白糖、甘露醇、幾基甲基纖 維素、玉米澱粉、無機鹽等可被利甩。且在經口劑之調劑 上,更可以配合結合劑、崩散劑、界面活性劑、潤澤劑、 流動性促進劑、矯味劑、著色劑、香料等。含有兒茶酸類 的液狀經口劑中,例如可以使其含有〇 2〇/〇〜4〇0/〇 w/w的甲 醇,成爲兒茶酸吸收性良好的製劑。 另一方面,非經口劑時,依照一般方法本發明之有效成 分之’有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質,將其衍 生物及其鹽類中選出者,使其溶解或懸濁於稀釋劑的注射 用蒸餾水、生理食鹽水、葡萄糖水溶液、注射用植物油、 芝麻油、落花生油、大豆油、玉米油、丙二醇、聚乙二醇 等’必要時加入殺菌劑、安定劑、等張化劑、無痛化劑等 調製之。 本發明的治療劑或預防劑,應製劑型態以適當的投與途 徑投與之。投與方法並無特別限定,可以内用、外用、及 注射。注射劑如,靜脈内、肌肉内、皮下、皮内等投與, 外用製劑中也包含栓劑。 本發明之治療劑或預防劑投與量依製劑型態、投與方 法、使用目的及適用於此之患者的年齡、體重、症狀作合 -21 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(21〇 x 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------IT------11 — *· 1284530 A7
五、發明說明(19) 適之$又疋’並播一定一般製劑中含有之本發明所使用之有 雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質的攝取量並無特別 限定,非毒性投與程度爲約〇 〇〇lg〜約1〇〇g/日,以約 O.OOlg〜約10g/日較好,以約〇 001g〜約5g/日爲更適宜。 當然投與量依種種條件而變動,因此也有較上記投與量少 即足夠的情況,亦有有必要超過範圍的情況。本發明的藥 劑除了可以原樣經口投與外,也可以添加在任何食品例如 酒精飲料、或茶中日常攝取。且亦可當作本發明所使用的 有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質,其作動劑與雌 性激素受體結合所引起之疾病的症狀改善或預防的食品之 原料。 飲料或食品中添加時的本發明之有雌性激素受體的作動 性及拮抗作用物質之形狀爲液狀、糊狀、粉末狀、片狀、 顆粒狀等各形狀皆可。若考量取用上的便利性或與其他添 加物混合使用時,以乾燥粉末狀、片狀、顆粒狀較好。乾 燥方法爲一般乾燥法,例如噴霧乾燥、滚筒乾燥、棚式乾 燥、眞空乾燥、冷凍乾燥等皆可行。 本發明之飲料或食品含有有雌性激素受體的作動性及拮 抗作用物質即可,爲含有、稀釋及/或添加有雌性激素受 體的作動性及拮抗作用物質後所成飲料或食品。 本發明的飲料或食品中所含有的有雌性激素受體的作動 性及拮抗作用物質的量並無特別限定,舉例表示有含有有 雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質0.0005% w/w〜90% w/w的飲料或食品。 -22- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁:> • --------^ ' — — — — — — I— *- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 以453〇 A7 五、發明說明(2〇) 本發明之飲料或食品並無特別限定,例如穀物加工品 (麵粉加工品、澱粉類加工品、預拌加工品、麵類、通心 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 粉類、麵包類、豆沙類、蕎麥類、麩、米粉、粉絲、包裝 麻薯等),油脂加工品(可塑性油脂、天婦羅油、沙拉油、 美乃茲油、沙拉醬等),大豆加工品(豆腐類、味噌、納豆 等),食用肉類加工品(火腿、培根、加壓火腿、香腸 等),水產製品(冷凍魚绞肉、魚漿板、中空魚漿條、寒片 、炸魚漿板、魚丸、筋、魚肉火腿、香腸、柴魚 末、魚卵加工品、水產罐頭、佃煮等),乳製品(原料乳、 奶油、優酪乳、奶油、起士、煉乳、奶粉、冰淇淋等), 蔬菜水果加工製品(糊類、果醬類、醃潰食品、水果飲 料、蔬菜飲料、混合飲料等),果子類(巧克力、餅乾、點 心麵包、蛋糕、儒米點心、米果類等),酒精飲料(日本 酒、中國酒、葡萄酒、威士忌、燒酒、伏特加、白蘭地、 %· 琴酒、萊姆酒、啤酒、清涼酒精飲料、水果酒、利口酒 等),嗜好飲料(綠茶、紅茶、烏龍茶、咖啡、清涼飲料、 乳酸飲料等),調味料(醬油、調味醬、醋、味琳等),罐 頭、瓶裝罐頭·袋裝罐頭食品(牛肉飯、斧飯、紅豆飯、 加里飯、其他凋理完成食品),半乾燥或濃縮食品(肝醬、 其他的司印田夕(只7 lx 7。、蕎麥麵烏龍麵湯、濃縮湯 類),乾燥食品(速食麵、速食加哩、即溶咖啡、粉末果 汁、粉末湯、速食味嗜湯、調理完成食品、調理完成飲 料、調理完成湯等),冷;東食品(壽喜燒、茶碗蒸、烤緩 魚、漢堡、燒賣、餃子、各種棒、综合水果等),固體食 -23- ^紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公餐) —- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 -------B7___ 五、發明說明(21) 品、液體食品(湯等)、辛香料類等農林產加工品,畜產加 工品、水產加工品等可列舉。 本發明的飲料或食品的製造法並無特別限定,可例舉有 調理加工及一般使用飲料或食品製造法所製造者,製造出 之飲料或食品中含有、添加及/或稀釋有效成分爲有雌性 激素受體的作動性及拮抗作用物質亦可。例如含有EGcg 粉末(Sunphenone 100S)與茶以適當濃度混合,可以得到 EGCG高含量的新香味之機能飲料或食品。以飲用濃度當 作1爲基準,茶濃度一般爲〇 〇5至4倍,以香味面而言以〇1 至2倍較好。所得之含有EGCG飲料或食品因應需要可以添 加甜味料、酸味料、香料等,亦可以追加還原劑。 且例如該飲料中添加酒精0.5〜20% w/w成爲含有EGCG飲 料亦可。在加入二氧化碳氣體使其成爲添加二氧化碳之含 有EGCG飲料亦可。 依本發明提供EGCG含量增強飲料或食品。這些飲品食 口口中的EGCG含量以0.002〜5% w/w較好、〇.〇1〜〇·5% w/w更 佳。EGCG可做爲茶萃取物添加,亦可做爲兒茶酸萃取物 添加。又,亦可添加EGCg之純化物。 藉著飲料或食品中添加或增強EGCG,提供不過度攝取 咖啡因、咖啡因減量或除去之含有EgCg飲料或食品。 依本發明,提供添加兒茶酸類酒精飲料。本説明書中所 明酒精飲料是指含有乙醇之飲料。酒精飲料中的乙醇含量 爲例如0.2〜40% w/w。 ’酉精飲料爲添加兒茶酸即可,並無特別限定可例舉添加 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂--------- 1284530 A7 B7 五 發明說明(22) 智 慧 財 員 工 消 費 合
I :兒茶酸之曰本酒、中國酒、葡萄酒、威士忌燒酒伏 特加、白蘭地、琴酒、萊姆酒、啤酒、清涼酒精飲料、水 :: 酉:利口酒等。這些酒精飲料中兒茶酸含有量與含有茶 卒取物(各酒精飲料相比較下較強化即可,咖啡因量只要 相對於兒茶酸量減低即可。 因爲酒精的存在下兒茶酸的吸收量會被增強,本發明的 酒精飲料中兒茶酸的吸收量極高。如此,僅使兒茶酸強化 已經可行,兒茶酸類之選擇性攝取變爲可能。在本發明的 酒精飲料中攝取兒茶酸時,不會有如同大量攝取茶萃取物 時的咖啡因大量攝取。依此,本發明的酒精飲料爲安全性 艮好的兒茶酸類之選擇性攝取用的對增強健康有用的酒精 飲料。 本發明的酒精飲料中兒茶酸類含量爲〇 〇 〇 4〜1 5 % w/w較 好,由感官面0.02〜1%w/w更佳。且本發明的酒精飲料中 EGCG的含有量爲續〜Q75%w/w較好,由感官面 % w/w更佳。 且相對於咖啡因EGCG的比例在0 9以上,EGCG含量爲 〇.〇卜0.5% W/W的茶飲料例如紅茶、綠茶、烏龍茶麥茶是 增強茶萃取物的風味,低咖啡因含量的新風味茶飲料。本 説明書中所提到之茶飲料是以茶爲主原料所製造的飲料。 茶飲料的製造中包含殺菌步驟^茶飲料例如以加熱殺菌。 調理及加工中’調理加工前、調理加工中、調理加工後 添加有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質皆可,將有 雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質添加人調理及加工
(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) --------訂---------^ 1284530 A7 B7 1、發明說明(23) 品或其材料中、稀釋有雌性激素受體的作動性及拮抗作用 物質亦可。飲料或食品製造中任一步驟下,可以添加有雌 性激素受體的作動性及拮抗作用物質,飲料或食品及其原 料中添加有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質,或稀 釋有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質使其含於飲料 或食品中亦可。且添加可以一次或多次皆可。依此,可簡 單的得到新的飲料或食品,即可以製造含有有效量的有雌 性激素受體的作動性及拮抗作用物質之飲料或食品。各所 經之製程也含有、添加及/或稀釋有潍性激素受體的作動 性及拮抗作用物質所成的飲料或食品,定義爲本發明之飲 料及食品。 本發明的飲料或食品爲,含有、添加及/或稀釋有雌性 激素受體的作動性及拮抗作用物質而成之飲料或食品。且 也可以濃縮此飲料或食品。只要含有其發生生理機能的所 需量之有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物質並不特別 限定飲料或食品的形狀,本發明之形狀也包含錠狀、顆粒 狀、膠囊狀等可以經口攝取的形狀。 且以濃縮物供應,攝取前稀釋至適當之範圍使用的濃縮 型食品或濃縮型飲料亦包含在本發明的食品或飲料(包括 酒精飲料、茶飲料)中。 藉著投與本發明之治療劑或預防劑,該治療劑或預防劑 中所含t拮抗劑與具有内分泌擾亂作用之物質拮抗,可以 治療或預防該物質對生物體之不良影響。再者,關於雌性 激素所引起不適當之生理症狀,本發明之治療劑或拮抗 -26- 本紙張尺度適用令國國家標準(CNS)A4 ϋ^1〇 x 297公髮) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·11111111 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 _B7_ 五、發明說明(25)
BisA,EGCG各投與80或800mg/kg。其結果表示如表4。 BisA 800 mg/kg組中子宮重量相對於對照組增力σ 了 137%。 另一方面,EGCG並未顯示增加子宮重量。 表4 組別 (n) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 7 40.4 土 2· 8 100 BisA 800 mg/kg 7 55.2 士 2·3** 137 EGCG 80 mg/kg 7 42.2±1.7 104 EGCG 800 mg/kg 6 39.3±3.2 97 平均値土標準誤差 : p<0.01 vs 對照組 (3)拮抗劑(抗雌性激素樣)作用的檢討
BisA 800 mg/kg投與的同時投與EGCG 800 mg/kg後其結果 表示如表5
BisA 80 mg/kg組中子宮重量與對照組(100%)相比較下增 加了 147%,相對於此投與EGCG則抑制至116%。 表5 ------.--1«------ 丨! I 訂·------I I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 組別 (n) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 5 37.2 士 2.4 100 BisA 800 mg/kg 4 54.7 土 5.5* 147 BisA + EGCG 800 mg/kg 6 43.0±2.7 116 平均値土標準誤差 * : p <0.05 VS 對照組 實施例2 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 __ B7_ 五、發明說明(27) 作爲一個作用劑並無作用,了解到對於BisA以拮抗劑作 用。且藉由加入適量乙醇溶解EGCG,稍少的投與量下亦 顯示其抑制子宮重量增加。EGCG爲雌性激素的拮抗劑, 精子數減少或前列腺肥大症等,並不只是因内分泌擾亂物 質所產生不適當的生理學症狀,其可以提供改善或預防異 常的雌性激素作用所引起的腫瘤惡化或子宮内膜炎、子宮 纖維化困擾者症狀的醫藥、飲料或食品。檢討egcg的乙 醇溶解液相對於4 _壬基苯g分的抗雌性激素樣作用。 曰齡16天的雌性SD系小鼠(由曰本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。 秤取相當於50 mg/kg的4 -壬基苯紛(以下稱爲Np)加入花 生油稀釋之,連續3日經口投與,第三投與日之翌日摘出 子苫測足其重量。EGCG加入乙醇使其最終濃度成爲1〇%乙 醇水溶液後,加水溶解之,在NP投與前90分鐘經口投與。 結果表示如表7。 表7 組別 (η) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 7 30·9±2.1 100 NP 50 mg/kg 7 44.4±3.2* 144 NP 50 mg/kg + EGCG 200 mg/kg 7 33·7±1.9 109 平均値士標準誤差 * : p<0.05 vs 對照組 其結果,相對於在ΝΡ 50 mg/kg組中子宮重量與對照組 (100%)相較增加144%,因EGCG 200 mg/kg的投與而被抑制 -30- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) '' (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·· ·1111111. 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 Β7 五、發明說明(28) 至 109% 0 實施例4 EGCG的抗雌性激素樣作用之乙醇濃度的研究 日齡16天的雌性SD系小鼠(由日本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。 秤取40 mg/kg BisA溶解於少量的乙醇,力口入落花生油稀 釋至乙醇的最終濃度爲5%,連續3曰皮下投與,第3曰之 翌曰摘出子宮測定重量。EGCG 200 mg/kg溶解至最終濃度 爲10%、5 %、1 %、0.5%或0 %乙醇水溶液,首先加入乙 醇溶解後,加水調整之,在投與BisA 90分鐘前經口投與。 結果表示如表8。
BisA 40 mg/kg群中與對照組(100%)相比較子宮重量增加 186%相對於此投與EGCG 200 mg/kg不含乙醇下僅抑制至161 %,乙醇5 %抑制至140%,乙醇10%抑制至138%,與不含 乙醇相較之下有意義的抑制子宮重量的增加。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) T ϋ ϋ ϋ em— ϋ ϋ -丨,β ·ϋ 1 11 ϋ ϋ ι 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 表8 組別 (η) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 7 26.9±2.3 100 BisA 40 mg/kg 7 49.9士2.1* 186 BisA +EGCG 乙醇 10 % 7 37.0 士 1.3* 138** BisA+EGCG 乙醇 5 % 7 37.6 土 1.8* 140** BisA+EGCG 乙醇 1% 7 40.1±2.0* 149 BisA+EGCG 乙醇 0.5 % 7 40.9 士 1.8* 152 BisA+EGCG 乙醇 0 % 7 43·3±1·8* 161 平均値土標準誤差 -31 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 χ 297公釐) 1284530 A7 B7 五、發明說明(29) * : p < 0.05 vs 對照組 : p<0.05 vs 乙醇 0 % (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 亦即,BisA皮下投與時,EGCG乙醇濃度5 %以上濃度投 與時,與不含乙醇EGCG投與下相較可期待有更強的雌性 激素樣作用。 實施例5 EGCG乙醇溶解液之抗雌性激素樣作用之檢討
I 日齡16天的雌性SD系小鼠(由日本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。 秤取40 mg/kg BisA溶解於少量的乙醇,加入落花生油稀 釋至乙醇的最終濃度爲5%,連續3曰皮下投與,第3曰之 翌日摘出子宮測定重量。EGCG 200 mg/kg加入乙醇溶解至 最終濃度爲10%或0 %乙醇水溶液後,加水調整之,在投 與BisA 30分鐘前經口投與。結果表示如表9。
BisA 40 mg/kg群中與對照組(100% )相比較子宮重量增加 162%相對於此投與EGCG 200 mg/kg不含乙醇下不抑制子宮 重量的增加,乙醇10%溶液下抑制至118%。 表9 組別 (η) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 6 30.8 士 3.1 100 BisA 40 mg/kg 6 50.0 士 2.7* 162 BisA +EGCG 乙醇 10 % 7 36.4±1.4* 118** BisA+EGCG 乙醇 0% 7 50·9±2.2* 165 平均値土標準誤差 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 B7 五、發明說明(30) * : p <0.05 vs 對照組 : p<0.05 vs 乙醇0 % (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 實施例6 EGCG乙醇溶解液之抗雌性激素樣作用的用量依存性 日齡16天的雌性SD系小鼠(由日本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。亦即,秤取 40 mg/kg BisA溶解於少量的乙醇,力口入落花生油稀釋至乙 醇的最終濃度爲5 %,連續3曰皮下投與,第3日之翌曰摘 出子宮測定重量。EGCG加入乙醇溶解至最終濃度爲10%乙 醇水溶液後,加水調整之,在投與BisA 30分鐘前經口投 與。結果表示如表10。
BisA 40 mg/kg群中與對照組(100%)相比較子宮重量增加 140%相對於此使用10%乙醇的EGCG水溶液中,投與40 mg/kg抑制子宮重量的增加至106%,BisA 40 mg/kg皮下投 與群中增加至160%相對於此,投與EGCG溶液40 mg/kg抑制 至 136% 〇 表1 0 組別 (n) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 6 32.7 土 1.0 100 BisA 40 mg/kg 經 口投與 6 45.7±2.3* 140 BisA+EGCG 40 mg/kg 6 34· 8 士 2· 8 106** BisA +EGCG 100 mg/kg 5 33.0 士 4.4 101** BisA 40 mg/kg皮下投與 5 52.2±2.9* 160 BisA +EGCG 40 mg/kg 5 44.4 士 1.5* 136*** BisA +EGCG 100 mg/kg 5 39.6±1.0* 121*** -33- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格mo X 297公釐) 1284530 A7 _B7_ 五、發明說明(31 ) 平均値土標準誤差 * : p <0.05 vs 對照組 : p < 0.05 vs BisA40 mg/kg 經 口投與 *** : p < 〇.〇5 vs BisA40 mg/kg 皮下投與 實施例7 使用 FP Screen-for-Competitors套件、ER· α,高感度套件 (¥2577:?311¥6^公司製),試驗了種種沒食子酸衍生物對雌 性激素結合。實驗順序基本上遵循附屬手册。種種的沒食 子酸衍生物(正辛基掊酸酯(沒食子酸正辛基酯)、正十二 基掊酸酯(正沒食子酸十二烷酯)、正十六烷基掊酸酯(沒 食子酸正十六烷酯)),溶解於DMS0中梯度稀釋做成稀釋 樣品(0·5 Μ〜〇.〇〇〇〇〇〇〇005 Μ)。此稀釋樣本1 " L中加入套件 所附之篩選緩衝液49 // L充分攪拌。再加入套件所附之10 nM_15 nM : ES1-ER( π ) complex (ESI (與 ER結合之複合體)及 ER( a )(Estrogen Receptor- α ;雌性激素受體α )之複合體)50 V L使全體積成100// L。室溫下放置1小時後,用Full-Range BEACON 2000 ( PanVera公司製)測定其激發波長:360 nm、 螢光波長:535 nm下螢光偏光度。 結果如圖1及表11所示。圖中四角形()、三角形 (▼)、及菱形(♦)各表示正十六烷基掊酸酯、正辛基掊酸 酯及正十二基掊酸酯的結果。各個沒食子酸衍生物對於雌 性激素受體的結合強度,以有50%阻害活性的濃度表示其 與ES1-ER( a ) complex競爭結合(IC5〇)。沒食子酸衍生物(正 辛基掊酸S旨、正十二基掊酸S旨、正十六娱> 基掊酸S旨)結合 -34- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Λ ·ϋ *ϋ ϋ ϋ ϋ ϋ 一一OJI ϋ βϋ ϋ ϋ 11 ϋ 1284530 A7 B7 五、發明說明(32) 強度雖有強弱,判別其對雌性激素受體有結合活性。 表11 樣品名 1。5〇 正辛基掊酸酯 3.38 X 10'6 正十二基格酸酉旨 3.11 X 10·7 正十六燒基掊酸醋 4.76 X 10·8 實施例8 培養細胞的增殖試驗是依據被稱爲Ana M. Soto等人的E-SCREEN assay 的方法(Environ. Health Perspect. 103:113-122(1995))進行。亦即,將人類乳癌由來細胞(MCF-7)以4.0 X 103細胞/ 100// L/well播種在96孔盤培養一晚後加上BisA、 BisA力口上正辛基掊酸酉旨者、及無添力口物之對照組,培養基 是使用不添加苯酚紅夕' /1/ \ 7 口改變之Eagle's培養基經活 性炭·葡聚糖處理過添加5 %之FCS者培養4天。細胞數之測 定是用MTT法。 結果表示於表12。判別出相對於對照組添加BisA下細胞 增殖1.8倍,相對於此BisA加上正辛基掊酸酯者幾乎以相同 程度抑制細胞增殖。 表12 添加物 相對細胞增加率(%) 無添加(control) 100 BisA 180 BisA+正辛基掊酸酯 91 實施例9 正辛基掊酸酯對於BisA之抗雌性激素樣作用 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------. 1284530 A7 B7 五、發明說明(33) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 日齡16天的雌性SD系小鼠(由日本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。正辛基掊酸 酯(東京化成工業)加入少量乙醇溶解後,加落花生油稀釋 至乙醇之濃度爲5 %,日齡20天之雌性SD小鼠連續3日經口 投與,最終投與日之翌日摘除子宮測定其重量。介質投與 群則使用加入5 %乙醇之花生油。將BisA溶於少量之乙醇加 入花生油稀釋至乙醇濃度爲5 %,在投與正辛基掊酸酯後 一個半小時投與之。其結果表示於表13中。在此n-Octyl Gallate表示正辛基掊酸酉旨。
BisA 40 mg/kg組中子宮重量相較於對照組(100%)增加161 %,相對於此正辛基掊酸醋126 mg/kg或25 mg/kg子宮重量 增加108%,有意義的抑制至與對照組同等程度。 表13 組別 ⑻ 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 5 30.4 士 0·7 100 BisA 40 mg/kg+介質 7 48·9±2·1* 161 BisA+n-Octyl Gallate 25 mg/kg 6 32·7±3·5 108** BisA+n-Octyl Gallate 126 mg/kg 7 32.9±3·6 108** 平均値土標準誤差 * : p <0.05 vs 對照組 : p < 0.05 vs 介質 正辛基掊酸酯顯示對於BisA有抗雌性激素樣作用。顯示 其效果與投與量相較下與EGCG同程度或強度在其上。 實施例10 -36- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 五、發明說明(34 ) 正辛基掊酸醋對於NP的抗雌性激素樣作用 日齡16天的雌㈣系小鼠(由日本SLc購人 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 進貨,待日齡19天斷奶,翌日起供做實驗用。正辛基格酸 醋(東京化成工業)加a少量乙醇落解後,力π落花生油稀釋 至乙醇之濃度爲5%,日齡2G天之雌性犯小鼠連續^日經口 投與,最終投與日之翌日摘除子宫測定其重量。介質投與 群則使用加入5%乙醇之花生油。將Νρ溶於少量之乙醇加 入花生油稀釋至乙醇濃度爲5%,在投與正辛基掊酸醋後 一個半小時投與之。其結果表示於表14中。 ΝΡ 50 mg/kg組中子宮重量與對照組(1〇〇%)相較下增加至 144%,相對於此投與正辛基掊酸酯126 111§/]^爲117%有意 義的抑制子宮重量的增加。 表14 組別 (n) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 7 33.1 士 1·2 100 NP 50 mg/kg+介質 7 47.6 士 2.3* 144 NP+n-Octyl Gallate 25 mg/kg 5 40.4 士 3·6 122 NP+n-Octyl Gallate 126 mg/kg 5 38.6 士 2·4 117** 平均値土標準誤差 * : p <0.05 vs 對照組 : ρ<0·05 vs 介質 正辛基掊酸酯對於ΝΡ若比較其用量則與EGCG具有相同 或更強的抗雌性激素樣作用。 實施例11 -37 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 B7 五、發明說明(35 ) 正辛基掊酸酯或正十六烷基掊酸酯對於BisA皮下投與的抗 雌性激素樣作用 日齡17天的雌性SD系小鼠(由日本SLC購入)與母獸同時 進貨,待日齡20天斷奶,翌日起供做實驗用。正辛基掊酸 酯或正十六烷基兒茶酯(同爲東京化成工業製造)加入少量 乙醇溶解後,加落花生油稀釋至乙醇之濃度爲5 %,曰齡 21天之雌性SD小鼠連續3日經口投與,最終投與日之翌日 摘除子宮測定其重量。介質投與群則使用加入5 %乙醇之 花生油。將BisA溶於少量之乙醇加入花生油稀釋至乙醇濃 度爲5%,皮下投與。其結果表示於表15中。在此n-Octyl Gallate表示正辛基掊酸酯n-Cetyl Gallate表示正十六烷基掊 酸酯。
BisA 40 mg/kg組中子宮重量相較於對照組(100% )增加145 %,相對於此正辛基掊酸g旨5mg/kg或25mg/kg子宮重量增加 117%或102%,有意義的抑制子宮重量的增加。且投與正 十六淀基掊酸S旨1 mg/kg或5 mg/kg有意義的抑制至109%或 104%,皆抑制成與對照組同等程度。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂---------· 表15 組別 (n) 子宮重量 (mg) 相對比 (%) 對照組 7 41.3±3.7 100 BisA 40 mg/kg+介質 7 59.7±2.7* 145 BisA +n-0ctyl Gallate 5 mg/kg 7 48.3±1.5 117** BisA +n-0ctyl Gallate 25 mg/kg 7 42·1±1·9 102** BisA +n-Cetyl Gallate 1 mg/kg 7 45·1±2·3 109** BisA +n-Cetyl Gallate 5 mg/kg 7 43·1±2·0 104** -38- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 五、 I284530 發明說明(36) 平均値土標準誤差 * : p<0.05 vs 對照組 ** ·· ρ<0·05 vs 介質 亦即,正辛基掊酸酯及正十六烷基掊酸酯,對於則3八顯 示有抗雕性激素作用。 實施例12 市售之麥茶中各添加EGCG含有物的SunphenoneDCF-Ι, 0.001 ’ 0.01,0.05,0.1,〇·5,1.0及[5% 進行感官評價。亦即 以10名陪審員,對於味、香、色總合比較本發明的添加含 有EGCG萃取物之麥茶及對照的無添加麥茶,做感官評 h。感έ坪價分爲5個階段(1良〜5惡),以平均値表示。 其結果表示如表16。 -39 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
1284530 A7 B7 五、發明說明(37) 表16 添加含有EGCG之萃取物的效果 含有EGCG 之萃取物 (%) 感官評價 總和 評價 味 香 色調 〇(對照) 4.0 3.5 2.8 3.8 普通 0.001 3.6 3.3 2.8 3.5 味道平衡尚好 味道收斂效果弱 0.004 3.3 3.2 2.8 3.3 有較深的味道 有收斂效果 有味道平衡 0.02 3.2 3.0 2.8 3.1 有較深的味道 有收斂效果 味道平衡良好 0.05 3.2 3.0 2.8 3.1 稍有刺激味 有濃厚感 0.1 3.0 3.0 2.8 3.0 有刺激味 有濃厚感 0.5 3.1 3.0 2.8 3.0 有刺激味 有濃厚感 1.0 3.2 3.0 2.8 3.1 刺激味強 深層味道平衡良好 有濃厚感 1.5 3.4 3.0 2.8 3.3 刺激味強 深層味道平衡良好 有濃厚感 2.0 3.6 3.2 2.8 3.5 刺激味使味道失去 平衡 有濃厚感 由表16得知含有EGCG之萃取物的添加量在0.02〜1.0% w/w濃厚感、深層味道、味道平衡皆良好時較好。综合評 價之評價値3.3以下的範圍爲0.004〜1.5重量%,可適當使 用。 實施例13 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
丁 ϋ I ϋ ϋ ϋ 1_1 n ·ί f,fl ϋ ϋ ·ϋ ·ϋ ϋ βϋ I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 B7 1、發明說明(38) 實施例12所調製的麥茶飲料(含有EGCG的萃取物含有Sunphenone DCF_1 0.05% w/v)中添加乙醇至成1、2、4、8、 16、20、35% v/v調製成含有EGCG組成物的茶。與實施例12 進行相同的感官評價。其結果表示如表17。 表17添加含有EGCG萃取物的效果 乙醇(% v/v) 感官評價 總和 評價 味 香 色調 0 3.2 3.0 3.0 3.1 深層味道 味道平衡良好 2 2.8 2.7 2.6 2.7 香味溫和 趨味引出 4 2.5 2.6 2.5 2.5 香味溫和 香氣散發 溫味引出 8 2.2 2.6 2.5 2.4 同上 16 2.6 2.7 2.6 2.6 同上 20 3.0 2.7 2.7 2.7 稍有酒精臭味預先 出現,增加味道深 度 35 3.0 2.8 2.7 2.8 酒精臭味預先出 現,增加味道深度 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 由表17,加入乙醇含有EGCG之茶與不加乙醇者相比 較,至2 %〜35% v/v全體香味溫和、口感良好、有將溫味 引出的傾向、香味四溢最受好評,發現到EGCG與酒精的 組合對香味提升有相乘性的效果。因此,乙醇濃度2 〇/。〜 35% v/v之範圍下總和評價顯示在2·8以下,爲適合。 本發明之高含量EGCG中EGCG與乙醇的組合對於香味提 -41 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) · " " ^ !284530 A7 B7 五、 發明說明(39) 升有相乘性的效果提供呈味性良好的酒精飲料。 實施例14 (1)使用含有EGCG萃取物(sunphenonDCF-l),調製如表u 所示配方表的加入含有EGCG萃取物的茶。關於茶,使用 市售之巴拿巴茶、綠茶、烏龍茶、驀麥茶以—般方法調製 而成者。對照物爲無添加,本發明品爲使其含有〇丨% 含EGCG萃取物。與實施例12做相同的感官性評價。其結果 表示於表19。
表19感官評價 含有EGCG飲料 項目 總和 味 香 色调 巴拿巴茶 本發明品 2.9 2.7 3.4 3.1 對照品 3.4 3.6 3.8 3.6 綠茶 本發明品 2.7 3.1 3.2 3.0 對照品 3.5 3.7 3.4 3.6 烏龍茶 本發明品 3.0 3.0 3.1 3.0 對照品 3.5 3.7 3.5 3.6 蕎麥茶 本發明品 3.1 3.2 3.2 3.1 對照品 3.7 3.6 3.6 3.6 由表19,本發明的含有EGCG萃取物與查所組合 爲,茶之香味平衡調和良好、具有單獨使用茶時所 的飲料 無法呈 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) T I · ϋ an n ϋ ϋ a^i ϋ ϋ— ·ϋ ϋ 1 1 ι -42 1284530 A7 —-----B7__ 五、發明說明(40) 現出的新深度,香味平衡充實,且呈現有刺激感苦味的新 型飲料。 且’本發明的巴拿巴(〆十八)茶飲料的EGCG量爲0.05% w/v、咖啡音量爲檢測界限値以下,本發明之綠茶飲料 EGCG含量爲0.06% w/v、咖啡因量爲〇·015% w/v,本發明的 烏邊条飲料之EGCG量爲0.05 % w/v、咖啡因量爲〇 〇〇4 % w/v、本發明之蕎麥茶飲料EGCG量爲0 05〇/。w/v、咖啡音量 爲檢測界限値以下。 這些本發明的飲料中添加乙醇至4 ο/。v/v,製造酒精飲 料。這些酒精飲料呈現良好的風味。 市售添加烏龍茶的酒精性飲料的EGCG含量爲o.ooi〇/。w/v。 (2)使用含有EGCG萃取物(Sunphenon BG),調製如表2〇所 示配方表的含有EGCG萃取物0.〇5% w/v的乙醇4% v/v之酒精 飲料及不含酒精之茶飲料。亦即,市售紅茶以一般之2作 濃度抽出,得到500毫升。依表20所示配方,調製含酒精 之檸檬茶或不含酒精之檸檬茶各1000毫升。本發明品、恭j 含有EGCG萃取物的sunphenon BG,對照品不添加。將达此 各充填至200毫升罐中,分鐘進行殺菌,製 頭。感官檢查與實施例12相同實施之。以陪審原1〇名 5階段(1良〜5惡),求平均値。其結果表示如表21。 -43- 本紙張尺度適用中國準(CNS)A4規格(210 χ 297公髮) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
1284530 發明說明(41)
不含酒精(Q/〇) 50 0.1 適量 0.02 4.5 0.05 0 3.7 總和 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 含酒精檸檬茶 本發明品 對照品 不含酒精擰檬茶 本發明品 對照品
2.9 3.4
由表21 ’本發明之加入含有EGCG之萃取物的含酒精檸 3.0 3.6
經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 ϋ n $含酒精檸檬茶有適度刺激感的味道,味到的嚴 差度好’與對照品相比味、香、色調全體平衡良好,爲評 價高的新型飲料。 更使用綠茶、烏龍茶、麥茶、紅茶,相對於咖啡因的 EGCG比在0.9以上,調製EGCG含量在001〜〇2% w/v的各種 飲料’進行殺菌後製作成茶飲料。 這種茶飲料爲在茶萃取物的風味上加上EGCG的風味有 適度刺激感覺的綠茶飲料、烏龍茶飲料、麥茶飲料、紅茶 -44 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7_ 五、發明說明(42) 飲料。 市售已殺菌之綠茶飲料其相對於咖啡因之EGCG比爲0.7 〜0.8,各EGCG含量皆未滿0.01%w/w。 又,市售已殺菌紅茶飲料其相對於咖啡因之EGCG比爲 0.6,EGCG爲 0.004%w/w。 實施例15 用含有EGCG萃取物調製湯。使用Sunphenone LA-10爲 EGCG含有萃取物,本發明爲添加此萃取物者,對照品貝 使用未添加者。表22中表示添加EGCG含有萃取物的湯類配 方。依照此配方調製湯,充填入200毫升罐中後120°C加熱 殺菌15分鐘,做成罐頭。感官評價與實施例12同樣實施 之。以陪審原10名,用5階段(1良〜5惡),求平均値。其 結果表示如表23。 表22 添加含有EGCG萃取物湯的配方 本發明品(% w/v) 對照品(%w/v) EGCG含有萃取物 0.15 0 低強度瓊脂1 0.25 0.25 乳清礦物質 0.60 0.60 豬肉抽出液 0.13 0.13 砂糖 0.10 0.10 胡椒 0.0005 0.0005 維生素C 0.02 0.02 pH 5.0 布里克斯(彳U 7夕只)度 1.1 酸度(換算成擰檬酸) 0.025 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
1 :伊那食品工業公司製 pH以擰檬酸或擰檬酸鈉調整 -45- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 1284530 A7 五、發明說明(43) 表23感官評價 湯 項目 總和 味 香 色調 本發明品 2.6 2.8 3.1 2.8 對照品 3.2 3.6 3.5 3.4 由表23 ’本發明與對照品相比較下兼有深行及濃厚感的 味道’含有EGCG萃取物的香味和豬肉抽出液香味融合很 好’成爲單有豬肉抽出液時所沒有的味道,香味柔和蔬菜 與肉的香味調和,具有隱含EGCG含有萃取物香味的調製 效果。對照品有破壞香味平衡之傾向。如此,由調理面觀 之’本發明品的EGCG含有萃取物,由其香味的特性發現 其可作爲優良的調味料。 實施例16 調味粉可混合魚粉2·4 kg、食鹽0.5 kg、谷氨醯胺蘇打〇.3 kg(共计3.2 kg),以每1 kg加3g添加上記調味粉本發明品及 對照品EGCG含有萃取物的冷凍乾燥品,依照一般方法造 粒。對各個造粒品約3.2 kg充分混合海苔0.4 kg及芝麻1.2 kg調製之。將這些調味粉灑在米飯上,與實施例12做同樣 的感官評價。其結果,與本發明對照相較下,抑制魚粉所 帶之魚臭,整體上引出深層味道,隱藏味道中發現其有辛 香調味料功能。本發明品總和言之瞭解到其提升調味粉的 品質。 實施例17 使用以一般方法調製的清酒,使用本發明品之EGCG含 -46 - 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·1111111_ 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 I284530 A7
五、發明說明(44) 有萃取物(Sunphenone 100S) ’製品每100毫升添加。對 照則使用不添加EGCG者。 與實施例12做相 同的感官性評 價。其結果表示於表24。 表24 感官評價 . 本發明品 對照 味 味道的平衡 2.8 3.5 深層味道 2.7 3.6 味感 3.0 3.6 香味 2.9 3.2 總和 2.8 3.4 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 由表24本發明品與對照相較下香味改善,味道平衡良 好,味道緊縮良好,深層味道優良的嗜好品。 實施例18 使用一般方法所調製的味眺及發酵調味料,製品每100 愛升添加本發明品之EGCG含有萃取物(SunphenonelOOS) 0.05g。對照品使用無添加EgCG者。與實施例12做相同的 感官性評價。其結果表示於表25。 表25 感官評價 味眺 發酵調味料 本發明品 對照 本發明品 對照 味道的平衡 2.9 3.0 2.9 3.2 香味 2.7 3.0 3.0 3.4 色調 2.7 3.0 3.1 3.5 總和 2.8 3.0 2.9 3.3 由表25本發明品與對照品相比較有刺激感,寄予全體味 道平衡的提升,特別是引出甜味,成爲香味改善的新型味 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1284530 A7 ___B7 五、發明說明(45) 酿及發酵調味液。 產業上利用的可能性 如以上所詳述,有雌性激素受體的作動性及拮抗作用物 質,含有此物質的食品或飲料可以有效的改善過多的雌性 激素或内分泌擾亂物質所產生的不適當的生理學症狀。亦 即可改善或預防有雌性激素受體的惡性腫瘤、子宮纖維 症、子宮内膜炎、精子減少症、前列腺肥大等。 且本發明強化兒茶酸類,提供呈現刺激性感覺的苦味, 味道的收斂、味道平衡良好的食品或飲料。 -48- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)
Claims (1)
- Ι284@β9122322號專利申請案 A8 B8 C8 中文申請專利範圍替換本(96年2月)D8 申請專利範園 一種用於治療或預防因作動劑與雌性激素受體結合所致 疾病之醫藥組合物,其特徵為含有具有雌性激素受體的 作動性及拮抗作用之物質作為有效成分,該具有雌性激 素受體作動性及有拮抗作用的物質,係由下述一般式I 所示之化合物: 0H 0H 裝R3 訂 線 (式中,R!、R2表示-H、-0H或-0-R4,R3是表示-H 或 -0H,此時R4為下述式Π : 本紙强6¾¾¾現虎(择國家標準(CNS) A4規格(210X 2&7私着). 1284530 穴、申請專利祀園 0H0H 所示之化合物)、沒食子酸、沒食子酸酿及其藥理學 上容許的鹽類中所選出一種以上的化合物。 2.根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中具有雌性 激素受體的作動性及拮抗作用之物質為兒茶酸類。 3 .根據申請專利範圍第2項之醫藥組合物,其中兒茶酸類 係選自下述⑷〜⑻的兒茶酸類、彼等之衍生物及其鹽 之一種以上者: ⑷表兒茶酸 (b) 表掊兒茶酸 (c) 表掊兒茶酸掊酸酯 (d) 表兒茶酸掊酸酯 (e) 掊兒茶酸掊酸酯 ⑴兒茶酸掊酸酯 (g) 兒茶酸;及 (h) 掊兒茶酸。 4 ·根據申請專利範圍第1項之醫藥組合物,其中沒食子酸 本紙張处2庚趣神和國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297皋釐) 1284530 b 08 、D8 六、申請專利範園 酯為碳原子數8以上的醇與沒食子酸之酯類。 5 ·根據申請專利範圍第4項之醫藥組合物,其中沒食子酸 酯為辛基掊酸酯、十二烷基掊酸酯、十六烷基掊酸酯。 6.根據申請專利範圍第1至5項中任一項之醫藥組合物, 其中作動劑為内分泌擾亂物質。 7 ·根據申請專利範圍第6項之醫藥組合物,其中内分泌擾 亂物質係由被分類為下述分類(1)〜(9)之化合物所選出 之1種以上者: (1) 戴奥辛類; (2) 有機氣系化合物類; (3) 苯酚類; (4) 苯二甲酸酯類; (5) 芳香族碳水化合物類; (6) 農藥類; (7) 有機錫化合物; (8) 雌性激素;或 ⑼滅蟻靈(Mirex)、毒殺芬(Toxaphene)、得滅克 (A 1 dicarb)或基彭(Kepone)。 8.根據申請專利範圍第7項之醫藥組合物,其中内分泌擾 亂物質為自折儉諾(zeranol)、金雀異黃酮(Genistein)、香 豆雌酉分(Coumestrol)、o,p-DDT、基彭(Kepone)、甲氧 D D T (Methoxychlor)、玉米赤黴婦酮(Zearalenone)、戴奥辛 (Dioxins)、對辛基苯酉分、壬基苯酉分、地特靈(Dieldrin)、 本紙張度適:爾國家標準(CNS) A4規格(210X 297各釐)· 1284530 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 丁基芊基苯二甲酸及雙酚A中選出之1種以上者。 9· 一種飲料或食品,其係含有、添加及/或稀釋碳原子數 8以上的醇與沒食子酸所形成的沒食子酸酿、其衍生 物及其鹽類中所選出一種以上之物質。 10. 根據申請專利範圍第9項之飲料或食品,其中沒食子酸 酯為辛基掊酸酯、十二烷基掊酸酿、十六燒基掊酸酯。 11. 一種含兒茶酸類酒精飲料,其係添加兒茶酸類而成,其 中以0 · 0 0 2〜0 · 7 5 % w/w之含量含有表掊兒茶酸掊酸酯 作為兒茶酸類。 12·根據申請專利範圍第u項之酒精飲料,其含有茶萃取 物。 13. 根據申請專利範圍第丨丨或12項之酒精飲料,其含有咖啡 因’表掊兒茶酸掊酸酯對咖啡因之比為0.9以上。 14. 一種茶飲料,其中表掊兒荼酸掊酸酯對咖啡因的比為 〇·9以上,表掊兒茶酸掊酸酯含量為〇 〇1〜〇 5% w/w,並 經殺菌步驟而得。 X
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