TW520284B - 3-deoxyglucosone inhibitor - Google Patents

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經濟部中央標準局員工消費合作社印製 520284 A7 B7 五、發明説明（1 ) 發明領城 本發明是有關美拉德反應，尤其是在其後期階段（後 期糖化或二次糖化）之中間體3 -去氣葡萄酮醛生成之抑制 劑。 以汴抟術 美拉德反應傺於1912年由法國之生化學家美拉德首先 提出之報告，為在葡萄糖等之還原糖與胺基酸或蛋白質之 間所産生之非酵素之糖化反應，因為參與食品加熱處理或 貯藏時發生褐色化、生成芳香成分、産生味道、蛋白質變 性等，因此被食品化學家視為主要之研究項目。於1968年 ，首次在生體内鑑定出血紅蛋白小成分之糖基血紅蛋白（ HbAlc),並明瞭糖基血紅蛋白在糖尿病患者體内會增加， 由於此一契機，使美拉德反應在生體内之意義及與糖尿病 併發症、動脈硬化等成人病之發症或與老化之進行之關係 受到注視。 關於在生體内之美拉德反應，伯朗里等人在1 986年提 出報告。此反應可區分為二階段，首先為蛋白質之胺基與 還原糖之醛基形成席夫鹼，經由1,2 -烯胺醇到生成安定之 阿馬多利轉位生成物為止之前期階段；然後再經過長期反 應移轉到具有螢光、褐色變化、分子交聯等特徼之美拉德 反應後期生成物（AGE)之後期階段。此蛋白質被糖化交聯 所生成之後期糖化産物由於溶解度降低、發生硬化，不易 被蛋白酶分解，因而導至組織沈澱化或硬化、變性，成為 種種疾患發症之原因。在生體内由於美拉德反應而被交聯 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 衣 _

、1T 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） 1 3 9 3 6 1 520284 A7 B7 五、發明説明（2 ) 之蛋白質有很多種，待別是代謝周轉慢之蛋白質，例如驟 原、彈性素、血紅蛋白、紅血球膜、讁磷脂、秋水仙素蛋 白（tiibnlin)、 LDL、血纖維蛋白、血清白蛋白、水晶體蛋 白、醫臓絲球體基底膜等易受到交聯聚合。由於美拉德反 應所引起之蛋白質交聯反應，即使有正常之血糖值，上述 代謝周轉缓慢之蛋白質仍會受影響，為造成蛋白質老化、 惡化之原因。由於此種糖化交聯所引起之蛋白質老化•惡 化，可以認為是隨著年齡增加，發症頻率亦增加之成人病 等之各種疾患之主要發症原因。因此，根據延遲交聯蛋白 質（後期糖化産物）之生成或是實質地加以抑制，即可提供 用於治療或預防由於老化所伴隨之疾患或是由於交聯蛋白 質産生組織沈澱或硬化、變性所引起之各種疾患之藥劑， 當然亦可延長動物之壽命。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 已知美拉德反應之中間體，亦即上述之1,2 -烯胺醇， 可以生成與蛋白質等之胺基具有極高反應性之3 -去氣鄰酮 醛糖反應中間體。3 -去氧鄰酮醛糖係由還原糖脱去1分子 水之産物，由葡萄糖或果糖所生成者為3-去氣葡萄酮醛（ 3-DG)。於美拉德後期階段産生之生成物被視為最重要者 為此3-DG。美拉德反應中會産生種種之二羰基，其中生成 量最多者為3-DG。3-DG與胺基化合物之反應性比葡萄耱等 ! 高出很多，對蛋白質形成交聯之活性極高。前述之AGE為 糖化蛋白生成之指標，經由多數研究者探索研究之結果， 目前已鑑定出幾個候補物質，其中，桕瑞玲（pyralin)、 焦啦®(pyrropyridine)、眯唑酮衍生物等之AGE化合物可 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 2 39 36 1 520284 A7 B7 五、發明説明（3 ) 視為是源自3-DG者，顯然地在生體内3-DG與蛋白質形成交 聯有很大之關聯。 如上所述，生體内由於生成交聯蛋白質所導至之蛋白 質老化或惡化是種種疾患發症、惡化之主要原因，所以不 斷地在探索在生體内能夠抑制美拉德反應之物質，例如·· 持公平6 - 6 7 8 27號公報記載有關能夠與3-DG等初期糖化産 物之羰基反應以抑制蛋白質後期糖化之美拉德反應抑制劑 ,其有效成分之列舉為胺基胍，此像本領域中最研究之物 質之一，但是還不能實用化作為醫藥品。又，可用作美拉 德反應之抑制劑於特開昭6 4 - 56 6 1 4號公報記載有氨基硫腺 類、1,3-二氨基胍、苯酰胼等，於特開平2 - 1 6 7 2 6 4號公報 記載有咔唑衍生物，於特開平3 - 2 0 48 7 4號公報記載有苯并 吡喃衍生物，於特開平6 - 3 0 5 96 4號公報記載有苯井1«唑衍 生物、苯并眯唑衍生物等，於特開平6-135968號公報記載 有海因衍生物，於待開平7-133264號公報記載有咪唑烷衍 生物等，於特開平8 - 1 57 47 3號公報記載有吡唑条1«唑烷類 等。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 於上述各公報中，愾以美拉德反應之最終生成物的交 聯聚合蛋白質或AGE (螢光強度）之生成量作為指標，以進 行測定美拉德反應之抑制活性；本發明人等則以在生體内 蛋白質交聯中最重要且活性高之反應中間體3-DG之生成量 作為指標。3-DG為參與生體内蛋白質交聯之原因物質，因 此能抑制其生成之藥劑即可作為優越之交聯蛋白質生成抑 制劑，可用性高。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 3 3 9 36 1 520284 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（4 ) 發明欲解炔：> 賭頴 蛋白質之糖交聯反應與各種疾病息息相關，本發明之 目的是對引起蛋白質糖化交聯之美拉德反應中間體3 -去氣 葡萄酮醛之生成提供一種新的生成抑制劑。 解泱賭頴方法 本發明之3-去氧葡萄酮醛（3-DG)生成抑制劑係含有構 造式（I)所示仲班酸衍生物或其藥學t所容許之塩類中至 少一種作為有效成分者。 X———(CH2)n—COOR 構造式（I) [式中，R為氫或低级烷基，X為氫、烷基、環烷基、 低级烷基環烷基、苯基或可被低级烷基、低级烷氧基、硝 基及/或鹵素取代之苯烷基，η為1至4之整數。] 審旆太發明形能 於構造式（I), R為氫或低级烷基，較好為甲基、乙基 、丙基、異丙基、丁基、異丁基、sec-丁基、tert-丁基 等磺數為1至4之直鐽或支鏈烷基。X為氫、甲基、乙基、 丙基、異丙基、丁基、異丁基、sec-丁基、tert-丁基、 戊基、異戊基、新戊基tert -戊基、己基、庚基、辛基等 碩數為1至8之直鏈或支鏈烷基，環丙基、璟丁基、環戊基 、環己基、璟庚基、環辛基等碩數為3至8之璟烷基，上述 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -訂 »丨 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 4 39 3 6 1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 520284 A7 B7 五、發明説明（5 ) 之環烷基含有甲基、乙基、丙基、異丙基等磺數為1至3之 直鏈或支鏈烷基者，苯基或可被甲基、乙基、丙基、異丙 基等碩數為1至3之直鏈或支鏈烷基、甲氣基、乙氣基、丙 氣基、異丙氣基等磺數為1至3之直鏈或支鐽烷氣基、硝基 及/或氟、氛、溴、碘等鹵素取代之苄基、苯乙基、苯丙 基、苯丁基、苯戊基、苯己基等苯基上結合有碩數為1至 5之烷基之苯烷基。 以下列舉含有上述構造式（I)所示之本發明之化合物 作為有效成分之本發明之3 -去氣葡萄酮醛生成抑制劑較佳 之實施形式。 (1) 含有以構造式（I)中R為氫之化合物作為有效成分 之3-DG生成抑制劑。 (2) 上述（1)所記載之化合物中η為1之3-DG生成抑制劑 Ο (3) 上述（2)所記載之化合物中X為苯烷基之3-DG生成 抑制劑。 (4) 上述（3)所記載之化合物中X為苯甲基之3-DG生成 抑制劑。 (5) 上述（4)所記載之化合物中X為具有硝基取代之苯 甲基之3-DG生成抑制劑。 (6) 上述（4)所記載之化合物中X為具有鹵素取代之苯 甲基之3-DG生成抑制劑。 (7) 上述（4)所記載之化合物中X為具有硝基及鹵素取 代之苯甲基之3-DG生成抑制劑。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 5 39 36 1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 520284 A7 B7 五、發明説明（6 ) 於本發明中，較理想之化合物如下所述。 [化合物1 ] 3 -羧甲基-卜甲基仲班酸 [化合物2 ] 1 - 丁基-3 -羧甲基仲班酸 [化合物3]3_羧甲基-1-異丁基仲班酸 [化合物4]3_羧甲基-1-己基仲班酸 [化合物5]3_羧甲基-卜（4 -甲基環己基）仲班酸 [化合物6] 1-苄基-3-羧甲基仲班酸 [化合物7]3_羧甲基-卜（2-甲苄基）仲班酸 [化合物8]3_羧甲基-卜（4 -甲苄基）仲班酸 [化合物9]3_羧甲基_卜（2 -甲氧苄基）仲班酸 [化合物10]3_羧甲基-1-(3 -甲氯苄基）仲班酸 [化合物11]3-羧甲基-1-(3,4 -二甲氧苄基）仲班酸 [化合物12]3-羧甲基-卜（2 -氛苄基）仲班酸 [化合物13]3_羧甲基-卜（3_氣芣基）仲班酸 [化合物14]3 -羧甲基-卜（4 -氛苄基）仲班酸 [化合物1 5 ] 1- ( 4 -溴苄基）-3 -羧甲基仲班酸 [化合物16]3 -羧甲基-1-(4 -氟苄基）仲班酸 [化合物17]3 -羧甲基-1-(2,4 -二氣苄基）仲班酸 [化合物18]3 -羧甲基-1-(3,4 -二氣苄基）仲班酸 [化合物19]3-羧甲基-卜（2-硝基苄基）仲班酸 [化合物20]3-羧甲基-1-(3-硝基苄基）仲班酸 [化合物21]3-羧甲基-1-(4 -硝基苄基）仲班酸 [化合物22]3 -羧甲基-1-(4 -氛-3-硝基苄基）仲班酸 [化合物23]3_羧甲基-卜（2_苯乙基）仲班酸 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -丁 、言 »丨 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 6 3 9 3 6 1 520284 A7 B7 五、發明説明（7 ) [化合物24]3_羧甲基-1-(2-(4 -甲基苯基）乙基）仲班酸 [化合物25]3_羧甲基-1-(2-(3,4 -二甲氣基苯基）乙基）仲 班酸 [化合物26]3 -羧甲基-1-(2-(2 -氛苯基）乙基）仲班酸 [化合物27]卜（2-(4_溴苯基）乙基）-3-羧甲基仲班酸 [化合物2 8 ]3 -羧甲基-1-(2-(3,4 -二氛苯基）乙基）仲班酸 [化合物29]3_羧甲基-1-(2-(3 -硝基苯基）乙基）仲班酸 [化合物30]3 -羧甲基-1-(3 -苯基丙基）仲班酸 [化合物31]3_羧甲基-卜（4 -苯基丁基）仲班酸 [化合物32]3_羧丙基-1-(3,4-二氯苄基）仲班酸 [化合物33] 3-羧甲基-1-苯基仲班酸 [化合物34] 1-羧甲基仲班酸 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之仲班酸衍生物包括上述構造式（I)所示化合 物在藥學上所容許之塩類，可列舉如鈉、鉀等碱金颶，鈣 、鎂等碱土金屬或鋁等金羼之塩或氨、有機胺等碱類之塩 等。本發明之仲班酸衍生物包括其金屬配位化合物，可列 舉如鋅、鎳、鈷、銅、鐵等及其配位化合物。這些塩類或 金屬配位化合物可依照公知之方法，經由遊離之本發明仲 班酸衍生物製造或是互相變換。又，本發明之化合物若有 順式-反式異構體、光學異構髏、構像異構體等立髏異構 體存在時或是以水合物狀態存在時，本發明亦包括其任何 一種立體異構體及水合物。 關於本發明之仲班酸衍生物之製法，可依照待開平2- 40368號公報所記載之方法或是以其方法為基準製造之。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） η 3 9 3 6 1 520284 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 8 3 9 3 6 1 520284 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、 發明説明（ 9 ) I 作 成 吸 入 劑 Λ 噴 霧 劑 使 用 時 % 本 發 明 之 化 合 物 可 以 以 1 丨 I 溶 液 Λ 懸 濁 液 或 是 徹 小 粉 粒 之 形 狀 與 氣 體 或 液 體 噴 射 劑 一 1 1 1 起 t 或 更 進 —^- 步 與 所 期 望 之 濕 潤 劑 或 分 散 劑 等 - 般 輔 劑 1 I 請 1 I 起 充 填 到 噴 霧 劑 容 器 内 〇 本 發 明 之 化 合 物 亦 可 以 作 成 如 噴 先 閱 1 I 讀 1 I 霧 器 或 霧 化 器 樣 之 非 加 壓 型 之 劑 型 0 背 δ 1 1 1 作 為 點 眼 劑 時 可 以 使 用 滅 菌 精 製 水 生 理 食 塩 水 等 水 意 1 1 事 1 性 溶 劑 或 是 注 射 用 非 水 性 溶 劑 作 成 溶 液 或 懸 濁 液 $ 亦 可 以 項 再 1 適 當 地 添 加 常 用 之 保 存 劑 防 腐 劑 殺 菌 劑 等 〇 1讀 本 •裝 又 隨 疾 患 種 類 之 需 要 $ 除 上 述 劑 型 外 % 亦 可 作 成 治 Ά 1 1 療 上 最 適 當 之 其 他 劑 型 $ 例 如 • 軟 音 濕 布 劑 等 0 1 1 本 發 明 之 化 合 物 所 期 望 之 投 予 量 因 投 予 對 象 劑 型 1 1 投 予 方 法 投 予 期 間 等 而 異 但 是 為 了 得 到 所 期 望 之 效 果 訂 9 一 般 成 人 一 天 經 □ 投 予 本 發 明 之 化 合 物 約 10 至 3， 0 0 0 m g » 1 | 較 好 投 予 20 至 1， 5 0 0 m 8 〇 非經口投予時（ 例 如 注 射 劑 )， 1 I 曰 之 投 予 量 較 好 為 上 述 投 予 量 之 3至10分之1 之 量 〇 1 1 作 用 % Wf 以 下 為 關 於 本 發 明 之 仲 班 酸 衍 生 物 對 於 3- DG 生 成 抑 制 1 1 活 性 之 藥 理 試 驗 結 果 0 1 1 (1 )3 -DG之測定方法 1 1 將 3- DG與 2, 3- 二 胺 基 萘 進 行 反 應 變 換 成 衍 生 物 後 測 定 1 I 其 螢 光 強 度 以 Ya m a d a 等 之 方 法 [J B i ο 1 Ch e 1 1 · n 26 9卷 1 1 I Λ 32號 20275- 20280頁（1994年 )] 為 基 準 進 行 3- DG之 定 量 1 1 〇 亦 即 $ 於 1 n 1 1之血漿中加入0 ► . 1ml 之 6 0¾ 過 氛 酸 溶 液 9 除 1 1 I 去 蛋 白 質 > 在 冰 冷 下 放 置 1小時後於4 t： 進 行 離 心 分 m rat $ 取 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 3 9 3 6 1 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 520284 A7 B7 五、發明説明（10 ) 上層澄清液0.6ΙΠ1用飽和碩酸氫鈉水溶液liBl中和。在此溶 液中加入内部標準物質之lppm之3,4 -己二酮之甲醇溶液25 /11及反應試藥2,3-二胺基萘之0.1%甲醇溶液0.11111,於 41C進行反應一晚。反應産物用4m 1乙酸乙酯抽出，用蒸發 器濃縮乾固後溶解於5 0 %甲醇水溶液，用超濾-C 3 - L G離心 組套（M i 11 i p 〇 r e公司製）過濾後作為測定用試樣。 試樣3-DG之測定像使用HPLC柱TSK-GEL、0DS-80Ts(東 梭製造、4.6xl50mift)。用缓衝液A(磷酸缓衝液：甲醇：乙 腈=7:2:1)及缓衝液B(同=4:3:3)作為移動相，柱溫為40t： ,流速為liiil/inin,從缓衝液Α開始，在20〜26分鐘内以0 〜1 0 0 %之直線斜率與缓衝液B互換，進行溶出。注入5 0 /il之試樣，用螢光（Em. 503nm、Εχ·271ηιη)檢出3-DG及内 部標準物質之衍生物。由所得高峰面積值依照内部標準法 進行定量。亦即，依照本測定法測定健康人血漿中及糖尿 病患者血漿中3-DG之濃度，由其結果確認糖尿病患者血漿 中3-DG之濃度約為健康人之2倍。 (2)被檢藥對於3-DG生成之抑制作用 於本試驗中，使用糖尿病自然發症典型動物之” 0LETF(0tsuka Long-Evans Tokushima Fatty)” [病理生理 、33卷、1號、21-26頁（ 1 99 4年）]。有0LETF老鼠由於糖負 荷，呈現顯著之高血糖引發糖尿病神經障礙之症狀之報告 。又，作為正常對照之老鼠，傺使用近緣之完全不會引發 糖尿病之 ”LET0(Long-Evans Tokushima Otsuka)"。 將20週歳之0LETF老鼠及其正常對照老鼠之LET0老鼠 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 、-口 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 10 3 9 3 6 1 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 520284 A7 B7 五、發明説明（U ) 分成五群：1)LET0對照、2)LET0 +蔗糖負荷、3)0LETF對照 、4)0LETF +蔗糖負荷、5)0LETF +蔗糖負荷+投予被撿藥等 5群。用含有30 % Μ糖之飲水使造成糖負荷，被檢藥則調 製成含有0.5 %之固體食品混在餌中投予。糖負荷及投予 被檢藥進行5値月後測定血漿中3-DG之濃度。研究接受餌 量之結果確認老鼠體重每公斤被檢藥（本發明之化合物20) 之投予量約為50〜80mg /日，結果之一例如第1簡所示。 筚1圖 如第1圖所示，正常之LET0老鼠即使有糖負荷，血漿 中之3-DG亦未增加；但是在糖尿病自然發症典型動物之 0LETF老鼠則由於糖負荷，血槳中3-DG之濃度顯著地上昇 。對於此一 3 - D G之上昇，在本發明化合物之投予群，確認 3-DG有意義地下降。 發明之效果 由上述藥理試驗之結果，很明顯地可知，本發明之化 合物對於在美拉德反應中參與形成交聯蛋白質之高活性反 應中間體3-DG之生成具有抑制作用，因此可以用於治療或 預防由於交聯蛋白質形成組織沈澱或硬化、變性所引起之 各種疾患，例如動脈硬化症、關節硬化症、冠狀動脈性疾 患、末梢循環障礙、腦血管障礙等或由於老化所引起之同 種之疾患，例如動脈粥樣硬化症、冠狀動脈性心臓病、腦 血管障礙、老人性白内障、癌症等以及糖尿病性神經障礙 、糖尿病性網膜症、腎性糖尿病、耱尿病性白内障、糖尿 病性微小血管障礙、糖尿病性動脈硬化症、糖尿病性皮虜 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -口 k纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 11 3 93 6 1 520284 A7 B7 五、發明説明（12 ) 障礙等之糖尿病併發症。 於記載有本發明之仲班酸衍生物之特開平2 - 40 3 6 8號 公報中，掲示本發明之化合物具有抑制醛耱還原酵素之作 用。關於糖尿病併發症發症之原因，已知其發症之主要機 轉為多醇代謝途徑之活性亢進及蛋白質之糖化。本發明之 化合物基於抑制3-DG生成之作用，除了可以抑制蛋白質糖 化之外，對於參與多醇代謝途徑活性亢進之醛糖還原酵素 亦具有抑制作用，因此對於耱尿病之併發症為理想之藥劑 ,可用性極高。 圖式簡蜇説明 第1圖 本發明之化合物對於抑制3-DG生成作用之研究結果。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 12 39361

Claims (1)

1. 520284 經濟部中央標準局員工福利委員會印製 附件2

   〇 H3 第861 19655號專利申請案日修心 申請專利範圍修正本 (91年11月6曰） 1· 一種3-去氧葡萄酮醛生成之抑制劑，係交聯蛋白質生成抑 制劑，作爲預防或治療由於交聯蛋白質形成組織沈澱、硬 化或變性所引起之各種疾病，亦作爲預防或治療動脈硬化 症、關節硬化症、冠狀動脈性疾病、末梢循環障礙或腦血 管障礙，以及作爲預防或治療老化者’其特徵爲含有構造 式（I)所示之仲班酸衍生物及其藥學上所容許之塩類中之 至少一種作爲有效成分； 〇 X——(CH2)n—COOR 構造式（i) 1! [式中，R爲氫或低級烷基，X爲氫、烷基、環烷基、 低級烷基環烷基、苯基或可被低級烷基、低級烷氧基、硝 基及/或鹵素取代之苯烷基，η爲1至4之整數]。 2·如申請專利範圍第1項之3_去氧葡萄酮醛生成之抑制劑’ 其中，該抑制劑係作爲預防或治療由於老化所引起之疾病 者。 3.如申請專利範圍第2項之3-去氧葡萄酮醛生成之抑制劑， 其中，該抑制劑係作爲預防或治療動脈粥樣硬化症、冠狀 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) Α4規格（210 x297公釐） 1 39361 520284 H3 動脈性心臟病、腦血管障礙、老人性白內障或癌症者。 4. 如申請專利範圍第1項之3-去氧葡萄酮醛生成之抑制劑， 其中，該抑制劑係作爲預防或治療糖尿病倂發症者。 5. 如申請專利範圍第4項之3-去氧葡萄酮醛生成之抑制劑， 其中，該抑制劑係作爲預防或治療糖尿病性神經障礙、糖 尿病性網膜症、腎性糖尿病、糖尿病性白內障、糖尿病性 微小血管障礙、糖尿病性動脈硬化症或糖尿病性皮膚障礙 者0 經濟部中央標準局員工福利委員會印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS) A4規格（210 X 297公釐） 2 39361