TW397685B - Pharmaceutical composition for prophylaxis and traetment of retinal diseases - Google Patents

Description

經濟部中央標準局員工消費合作社印製 一 修王1 ffi. 3. 補充. B7五、發明説明（ί> ) 製劑型式而定。然而，於所列舉之具«例中，本化合物 之劑量為，於注射劑為近約1至約10 G毫克/天/成人 (一天），於經口製劑為近約10至約1000毫克/ 一次/成 人（一天數次），於眼滴劑為近約D.D1至約5 W/V%製劑 投予數次/天/成人，各以數滴，而於眼_資為近約 0. 01至約5w/w%投予數次/天/成人。 本發明之組成物可内含具有預防及治療視網膜疾病藥 理活性之其他成分和/或具有他種藥理活性之其他成分 ,只要其對本發明目的無不良影锻。 下列藥理數據和實施例為用於進一步掲示和説明本發 明且並不意欲做為其偈限。 藥理學 1. 本化合物於鼠視網膜局部缺血之電視網膜圖（ERG)改 變上之功效 本發明之功效為於使用鼠視網膜局部缺血模型（其為 藉由首先將鼠之眼内壓（簡稱"Ι0Ρ")升高以致使其眼組 織局部缺血且於其後使其重獲灌注而産生）之電視網膜 圖（E R G )中所觀察到的變化進行研究。 試驗化合物：磷酸與L-抗鹿血酸和DL-cr-生育酚之二 酯的鉀鹽（簡稱” EPC-K”）。 試驗方法：使用塍重250至340克之七至九週齡SD公鼠 做為試驗動物。 將各試驗動物一眼之Ι0Ρ暫時升高，並以ERG測量評估 其所迪成之降低的視網膜功能。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

J 訂 竦 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央榇準局員工消費合作社印製 A7 B7__ 五、發明説明（，） 發明背聚 本發明傈醐於預防及治療視期膜疾病之藥學组成物。 更詳言之，本發明你_於預防及治療視網膜疾病之蕖學 組成物及方法，其内含具有抗壤血酸和生育酚之磷酸的 二酸或二酯之蕖理容許·» 已知各種視網膜疾病•此類視钃膜疾病之例包括； (a) 由一種或以上全身性疾病所引起之視钃膜的血管 疾病和發炎性或變性損赛如糖尿病，离愈壓，動鼷硬化 ，貧血，白血病，某些结餘组織疾病（如全身性红斑性 狼瘡，硬皮病），和某些先天性代謝異常（如戴黼克司二 氏病，福格徳-史庇格勒氏病）；和 (b) 位於視網膜中之疾病包括此類之視網膜血管疾病 (如早熟性的視綱膜病，視钃膜靜脈閉合，視網膜動脈 閉合，和視網膜靜脈外膜炎 >,由視網膜脱落或損傷所 引起之視網膜發炎或變性，伴》老化之視網膜變性疾病 (如老年性盤狀斑變性），和先天性視钃膜變性疾病。 為治療患者之视網膜疾病，且於其由一種或以上全耳 性疾病所引起之情形中，可對患者施予各別全身性起因 性治療，例如，對离血壓投予降血壓藥物，和對耱尿病 投予降血糖__。然而，此些治療並不能確保相两視期 膜疾病之減輕。此外，全身性起因性治療有時對於自體 免疫疾病或先天性代謝異常並無效果或為不能採用的》 因此，乃需要以直接作用於視網膜損害為標的之治療β 因此，例如血管攘張直接加強血管壁之蕖物，或溶 本紙張尺度適用中國國家梯準（CNS ) A4規格（210X25*7公釐） ^^1- m mV m In 一. V 4 、1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 修正 * A7 B7 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印裝 五、發明説明（I2 ) 實驗2由鹼性辑__ (ALP)之EPC-K之分解性 (方法）依βίκβι苯酯法（ALP活性之標準分析法）製備 如下基霣及《I溶液。所用alp為從大腸篇衍生之産物。 基質溶掖： 10·Κ EPC-K (本發明之 a -EPC鉀鹽） 2·1 0.5Μ Tris 缓衝掖（ρΗ9.0) 2·1 4Μ 食鹽 10il 蒸籣水 5ι1 鷗溶掖： 10 單位 ALP/*1 50·Μ Tris嫌衝液（PH9.0) 100/i 單位 ALP/*1 58·Μ Tris纽衡液（pH9.0) 基質溶液2·丨保湛37t5分後•加鷗溶液或蒸皤水0.1·1而 保狙37¾ 10分或2小時。在沸水浴加热10分使反驅中止後· 以HPLC分析反鼴物中之EPC-K。 HPLC條件： 柱：Devel〇psil(0DS)4.64 X 250·β 溶液：50eM8S酸二氳納：乙驕：THF= 1 : 3 : 1 (以磷酸調為PH3.0) 流速：1.2ml/分 偵滴：UV225n雇 (結果） 加1或10w單位ALP於2.1«莫耳EPC-K後，保邋10分或2小 時之结果，EPC-K之置無顯著減少（表3)，故EPC-K不能當作 -14- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家揉率（CNS ) A4规格（210X297公漦） 83. 3.10,000 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製

五、發明説明（> ) 解血栓蕖Μ乃捩施用於耱尿病，高血壓，視期膜靜脈閉 合，或視钃膜動脈閉合中所觀察到的視網膜血管損寄情 形中。然而，此些藥物治療於功效上不足，且因此，於 實瞭上通常霈要外科治療。 Ιί懷疑（i)於上述各視網膜疾病之開始和/或發展中 可能牽涉局部缺血和氣不足和産生遇氣化反鼴和（ii)就 引起光收受視覺上之視網膜功能的專一性而諭，遇董的 光嫌可能是此些疾病的危險因索。 基此背景，本發明之發明者進行捜尋可用於治療視網 膜疾病之藥物的研究•藉由研究磷酸之二»類的藥理功 效，本發明者發現某些具有抗壊血齒和生育酚之磷酸的二 酯類可用於做為上述各種視網膜疾病之預防和治療_劑 β本發明基此發現而完成》 發明摘要 本發明提供一種用於預防及治療人類視期膜疾病之藥 學組成物，其包括（a)式I之化合物或其蕖理容許· (CH2CH2CH2CH)3 —CH：

-CH CH—OH oh-ch2 其中111和112各猜立為氳或甲基•和 <b)藥理容許載體。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） -------------"-- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)

*1T 五、發明説明（ 修正補先 A7 B7 13 經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝 ALP之基質。 表3與ALP保溫後反應物中EPC-K之殘量 殘留EPC-K U某耳） _溶液 10分後 2小時後 蒸皤水 2.1 2.0 1m 單位 ALP 2.0 2.1 10W 單位 ALP 2.1 2.1 實驗3 由磷酸二_雎（PDE)之EPC-K之分解性 依PDE活性之分析法製備 如下基霣及_溶液。所用PDE為從牛心衍生之産物。 基霣溶液： 707·Η EPC-K 0.1*1 0.1Μ甘胺醯甘肢酸雄衝液（ΡΗ7.5) 2.7·1 41·Μ硫酸鎂 0. 1»1 鷗溶液： 40 w 單位 PDE/bI 160w單位PDE/bI (以0.1M甘胺醛甘胺酸缓衝液（pH7.5) 稀釋而得） 基質溶液2.9nl保溫25t： 5分後，加_溶液0.1·1而保溫 2 5 t： 10分或2小時。在沸水浴加熱3分使反應中止後，以 HPLC分析反應物中之EPC-K。 反應物中EPC-K以外之其他物質先加熱後，加EPC-K。（反 應時間：0分） 15 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（4 ) 本發明又提供一種預防及治療人類視纗膜疾病之方法 ，其包括對該人投予治療有效量之式I化合物或其藥理 容許鹽（式I化合物和其藥理容許鹽此後稱為"本化合物"）。 本發明再又提供一種本化合物用於製備預防及治療人 類視綱膜疾病之麵學组成物的用途。 人類之視網膜疾病可一方面為由一種或以上金身性疾 病所引起的一種視網膜疾病。此類全身性疾病例包括糖 尿病，高血屋，動脈硬化，貧血，白血病，全身性紅斑 性狼瘡，硬皮病，戴薩克司二氏病，和福格徳一史庇格 勒氏病》 人類之視網膜疾病可另一方面為一種位於視網膜中之 疾病。此類位於視網膜之疾病例包括早熟性的視網膜病 ，視網膜靜腯閉合，視期膜動脈閉合，視纗膜靜脈外膜 炎，視網膜脱落，和老年性盤狀斑變性。 上述所指之藥學组成物可以經口製_(如粉爾，粒_， 藥Η或醪囊），注射剤或眼滴_之型式。 式I化合物可依美國專利Ho.4 ,564,686或4,914, 197 製備，其所掲示者於此併入參考。 本化合物為此》已知具有各種本銳明害所掲示者以外 之其他用途。此蕕已知之用途為（a)做為抗白内障 做為預防和治療更年期陣礙之藥爾，和於美國専利No. 4,564 ,686中用於化粧品之美虜功效；（b>於美囲専利 Νο·4, 914,197中做為消炎_ ; (c)於美团専利Ho.4 , 888 ,329 中做為抗潰瘍(d)於美國専利No.4 ,948,786中用於 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I- ^^1' B—^1 ^af ·ϋ In *I ......... n (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 397685 修正 8 Μ Β7

UtiC 五、發明説明（μ屮 (結果） 加4或16w單位PDE於70.7tf莫耳EPC-Κ後，EPC-Κ之量無 顯著減少（表4),故EPC-K不能當作PDE之基質。 表4與PDE保溫後反應物中EPC-K之殘置 . 殘留EPC-K (η契耳） 梅溶液 0分 10分 2小時 4 tf單位PDE 65.2 69.0 1 6 w單位P D E 70.7 66.5 67.4 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（▲) 預防和治療罌官中之局部缺血疾病；（β)於8P-A2 -0430045 中做為Maillard反應抑_爾•·和（f)於美國專利Ho· 5 , 3 0 6 , 7 1 3中做為抗氣化_ » 如上所述，式I化合物可以其式I所示之游離型式或 其藥理容許鹽型式用於本發明之目的。此類藥理容許* 之例包括鐮金颺顗如銪鹽和鉀，和鐮土金羼衋如鈣鹽和 鎂鹽《然而，其他《類只要為藥理容許者均可使用。 本發明之藥學组成物可包括一種或以上之本化合物。 _面之籣單描述 鼷1為面願示於E視網膜局部缺血4 5分鏟後以霣视 綱膜_ UR6)所觀察到之EPC-K於a-波振輻恢後上之功效。 横轎代表灌注恢愎後之時間（h=小時，d =天），而鑀_ 為a-波振輻之恢復率（％ )。 2為_面顯示於思視網膜局部缺血4 5分鏞後以E£G 所觀察到之EPC-K於b-波振帽恢復上之功效。横輪代表 灌注恢愎後之時間（h=小畤，d=天），而设_為1)-波撅 輻之恢復率 _3為_面顯示於鼠视網膜局部缺血4 5分鐘後以ER6 所襯察到之EPC-K於a-波潛在性恢復上之功致。镄_代 表灌注恢復後之時間（h=小時，d=天），而縱_為&-波 漕在時間之恢後率（％)。 詳細討論 本化合物具有非常低的毒性且安全性優異。例如，式 I所代表之化合物之一的鉀鹽，邸磷酸輿L-抗壤血酸和 本紙張尺度適用中國國家榡準（CNS > A4規格（210X297公釐） .n. i· n^i ^—^1 ^ϋ· In n^i I nn ml---^ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 A7 B7 五、發明説明（^ ) DL-« -生育酚之二_的鉀》(此後稱為"EPC-K")具有不 低於5克/公斤ρ.ο.(»)且不低於100毫克/公斤i.v.(鼠） 之LDso值。此非常低的毒性利於本化合物用於本發明之 目的。 可使用本發明預防和治療之視钃膜疾病包括： (a) 由一種或以上全身性疾病所引起之視網膜的血管 疾病和發炎性或變性損害如耱尿病，离血壓，動脈硬化 ，貧血，白血病，某些结締組織疾病（如全身性紅斑性 狼瘡，硬皮病，和某些先天性代榭異常（如戴醯克司二 氏病，福格徳-史庇格勒氏病）；和 (b) 位於視網膜中之疾病包括此類之視鋦膜血管疾病（ 如早熟性的視網膜病，視綱膜腫臛閉合，視纗膜動脈閉 合，和視網膜靜脈外膜炎），由視網膜脱落或損傷所引起 之視網膜發炎或變性，伴隨老化之視網膜變性疾病（如 老年性盤狀斑變性），和先天性视網膜變性疾病》 本化合物可以經口或非經口製劑之任一型式用於預防 及治療視钃膜疾病之目的。此類製爾之實例包括：眼滴 爾，眼蕖膏，蓁片，騮囊，顆粒，和注射_，其均可以 傳統方法製備。此類製劑可視所需，内含傅统之添加物 包括赋形劑，黏合崩散爾，分散M,吸收增強 緩衡_，界面活性助溶劑，保存爾，乳化_，等張 化Μ ,安定劑和PH調整爾等。 本化合物用於預防及治療視網膜疾病之爾量視欲預防 及治療之視網膜疾病類型，患者年齡和體重，和症狀及 本紙張尺度逋用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^^1- ^^^1 iL·— HI I— m I— In ^^^1 m n ^^^1、【^ (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 一 修王1 ffi. 3. 補充. B7五、發明説明（ί> ) 製劑型式而定。然而，於所列舉之具«例中，本化合物 之劑量為，於注射劑為近約1至約10 G毫克/天/成人 (一天），於經口製劑為近約10至約1000毫克/ 一次/成 人（一天數次），於眼滴劑為近約D.D1至約5 W/V%製劑 投予數次/天/成人，各以數滴，而於眼_資為近約 0. 01至約5w/w%投予數次/天/成人。 本發明之組成物可内含具有預防及治療視網膜疾病藥 理活性之其他成分和/或具有他種藥理活性之其他成分 ,只要其對本發明目的無不良影锻。 下列藥理數據和實施例為用於進一步掲示和説明本發 明且並不意欲做為其偈限。 藥理學 1. 本化合物於鼠視網膜局部缺血之電視網膜圖（ERG)改 變上之功效 本發明之功效為於使用鼠視網膜局部缺血模型（其為 藉由首先將鼠之眼内壓（簡稱"Ι0Ρ")升高以致使其眼組 織局部缺血且於其後使其重獲灌注而産生）之電視網膜 圖（E R G )中所觀察到的變化進行研究。 試驗化合物：磷酸與L-抗鹿血酸和DL-cr-生育酚之二 酯的鉀鹽（簡稱” EPC-K”）。 試驗方法：使用塍重250至340克之七至九週齡SD公鼠 做為試驗動物。 將各試驗動物一眼之Ι0Ρ暫時升高，並以ERG測量評估 其所迪成之降低的視網膜功能。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

J 訂 竦 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印裝 A7 B7___ 五、發明説明（7 ) IOP之偵_ :使用尿烷（0.7克/公斤，i.v.)和xylazine( 2毫克/公斤，i.··)麻醉動物。動物之IOP以—經由聚 乙烯管畏度連接至一自角膜基質插入前腔之27測量針的 壓力傅導器偵澜〇 IOP負椅：眼组織之局部缺血為藉由IOP升离至毫克 所産生，其僳藉由令使用肝燐臢以制血掖篇固之生理食 水，經由一自角膜基質插入前腔且經由管長度達接至 一使用肝燐麻以制血篏縵固之生理食_水容籌的27_量 計，導入前腔45分鐘而産生· 藹《ERG:竄之ER6為於産生局部缺血前和於恢愎灌注後 之時澜ft » <拥Λ條件> 高切1 KHz,低切1 Ηζβ眼晴於角_前約12.5公分以0.6 丁氬光，以10秒鐘之間隔剌激6次，並澜董其算術平均 值β 投予：将10*克/公斤之EPC-K(0.25w/v%於生理食鹽 水中）於局部缺血時段終了前靜脈内投予10分鐘<»控制 動物於局部缺血時段終了前之10分鐘同樣地接受4毫升 /公斤之生理食鹽水。 结果：_1至3顯示EPC-K投予組和對照組産生局部缺 血前和恢復灌注後之邸刻後和1,2 ,3,4,5,6, 24小時和一 星期後之各a-波，a-波潛在性振幅，和b波振輻之恢復 率的畤間横斷面_»此恢愎率定義為局部缺血後之值相 對各別局部缺血前之值之比率。 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ^1.. I ml 1 ml 1^1 ^^1 In ^^1 I In (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（S ) 於兩組中，均發現a-波和b-波於恢愎灌注後邸刻消失 ，但於恢復灌注後1小時變得可被偵測且其振輻隨著時 間逐灌增加》於EPC-K投予組和對照组間之b-波潛在性 並無差異，而如_1所示，EPC-I[投予組之a-波振輻恢 愎率大於對照組。又，如画2所示，EPC-K投予組較對 照顙示出較快之b波折輻恢復作用。再，如鼸3所示， 於EPC-K組覼察到較對照組快之a-波潛在性恢愎作用趙 向100%之值。 此些结果箱明本發明可用於治療局部缺血性之視網膜 疾病》 2.本發明於E視網膜血管閉合棋型中的預防功率 本化合物為使用S視網膜血管閉合棋型研究其預防功 效》 試驗方法：12週齡之SD公鼠以Heibutal™ (戊巴比妥銷} 麻醉。將動物（n= 8/每組）靜脈内投予2毫升/公斤之 EPC溶液（0.25w/vX之EPC-P: 5毫克/公斤）或生理食 *水。十分鐘後，靜脈内投予2毫升/公斤（4 0毫克/ 公斤）之2%rose bengal (RB)溶液。«由局部投予 MIDORIN P™(D.5 w/vX托品藥胺和〇·5 w/vX笨基麻黄 素獼酸豔：Santen製藥股份有限公司）以誘發lidriasis 。於角膜上滴入一滴SC0PIS0L™15(1.5w/vJ；羥乙基ϋ 維素：Sen ju製藥股份有限公司）後，於角膜上輕軽放置 一滑》玻璃板並以可見光（175,00 0勒克斯）照射鼷晴2分 鐘，同時以手術顙撖鏡觀察眼II底部β於照射間，觀察 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） I tm i ml n^i ^^^1 n ^^^1、ceJ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（9 ) 血管和血管閉合中之血塊形成的鰻重性，同畤以錄影帚 記錄視網膜血管中之變化。處理後20小時將動物殺死並 製備光學顳撖鏡之樣品並以病理學評估。 眼瞒底部之觀察為依下列標準進行》 <評估樣_ > 0 :正常 0 . 5 :血管繾繞 1:類黏狀血塊之形成 2 :血流部分阻斷 3:於照射匾中血流完金阻斷 結果：1)表1顙示出底部觀察之结果 表1 組 / No.l 2 3 4 5 6 7 8 平均 ±S.D. 對照組 3 3 2 2 3 3 3 3 2.75±0.46 EPC-K 10.51 1 1 1 2 1 1 .05士 0.42* •:輿對照組之差異顯著（ρ<〇.〇υ。 如表1所示，EPC-K投予組之血管外血塊形成和血管 閉合之程度較接受食鹽水之對照組輕。 2)病理學的發現 於兩組之照射部位均觀察到视網膜内層（神經結細胞 層，内叢狀靥，内核層），水腫，内外核層之紅血球皺 -11- 本紙張尺度適用中國國家橾準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ·ϋ ml In II— ^^1 in I I^i In m I ^、ve (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) Α7 Β7 五、發明説明（) 缩，視網膜剝落，視網膜下的滲出物，視細胞内外節段 之空泡形成和變性，視網膜色素上皮（RPE)之變性，視網 膜脈絡膜血管之充血和閉合血管内皮細胞障礙，和血管 中發炎細胞數之增加》然而，於EPC-Κ組中，觀察到此 些疾病之視網膜匾域小於對照組β更且，於對照組中之 視覺細睢中所觀察到之異常，即視神經孔頭水鼸，視神 經萎縮，於寡樹突神經醪霣周園之蒌编和空泡形成，於 EPC-K組中則未觀察到。 上述之眼底部覼察和病理學的發現證明本化合物可用 於預防例如由血啻閉合所引起之局部缺血所導致的視》 膜疾病。 實施例1 經口 _片： 依傅統方法，製備具有下列配方之經口麵 片。藥片可視傅統方法之霈要覆以糖衣。 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 成分 每藥 Η EPC-K 100 毫克 乳糖 75 毫克 釅粉 20 «克 聚乙二酵6000 5 毫克 -12- 本紙張尺度適用中國國家#準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） A7 B7 五、發明説明（，，） 實飽例2 注射劃： 依傅統方法，将下列成分潺合溶解並將所得溶液以濾 紙殺醣並將其無菌地填入玻璃安瓿中各5毫升，其後以 加熱密封。 成分 每1QQ毫升 EPC-K 2 0 0毫克 甘霉酵 5.0毫克 1 N氫氣化銪 讕整至pH 6 . 5 蒸鳙水 至總計100毫升 實施例3 眼滴爾： 依傅統方法，將下列成分潺合溶解並經由 濂紙殺菌以製備眼滴爾。 n n^i - I— I - - ------i n -^-1^1 - I 1 - ^^1 I. m • ^ 、vs (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 成分 每100毫升 EPC-S 0.5克 糴酸 1 . 8克 潔爾滅 0·005 克 1 N氫軀化納 調整至PH7 . 3 稍製無菌水 至總計100毫升 -1 3 _- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨OX297公釐〉 修正 * A7 B7 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印裝 五、發明説明（I2 ) 實驗2由鹼性辑__ (ALP)之EPC-K之分解性 (方法）依βίκβι苯酯法（ALP活性之標準分析法）製備 如下基霣及《I溶液。所用alp為從大腸篇衍生之産物。 基質溶掖： 10·Κ EPC-K (本發明之 a -EPC鉀鹽） 2·1 0.5Μ Tris 缓衝掖（ρΗ9.0) 2·1 4Μ 食鹽 10il 蒸籣水 5ι1 鷗溶掖： 10 單位 ALP/*1 50·Μ Tris嫌衝液（PH9.0) 100/i 單位 ALP/*1 58·Μ Tris纽衡液（pH9.0) 基質溶液2·丨保湛37t5分後•加鷗溶液或蒸皤水0.1·1而 保狙37¾ 10分或2小時。在沸水浴加热10分使反驅中止後· 以HPLC分析反鼴物中之EPC-K。 HPLC條件： 柱：Devel〇psil(0DS)4.64 X 250·β 溶液：50eM8S酸二氳納：乙驕：THF= 1 : 3 : 1 (以磷酸調為PH3.0) 流速：1.2ml/分 偵滴：UV225n雇 (結果） 加1或10w單位ALP於2.1«莫耳EPC-K後，保邋10分或2小 時之结果，EPC-K之置無顯著減少（表3)，故EPC-K不能當作 -14- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家揉率（CNS ) A4规格（210X297公漦） 83. 3.10,000 五、發明説明（ 修正補先 A7 B7 13 經濟部中央標準局貝工消费合作社印裝 ALP之基質。 表3與ALP保溫後反應物中EPC-K之殘量 殘留EPC-K U某耳） _溶液 10分後 2小時後 蒸皤水 2.1 2.0 1m 單位 ALP 2.0 2.1 10W 單位 ALP 2.1 2.1 實驗3 由磷酸二_雎（PDE)之EPC-K之分解性 依PDE活性之分析法製備 如下基霣及_溶液。所用PDE為從牛心衍生之産物。 基霣溶液： 707·Η EPC-K 0.1*1 0.1Μ甘胺醯甘肢酸雄衝液（ΡΗ7.5) 2.7·1 41·Μ硫酸鎂 0. 1»1 鷗溶液： 40 w 單位 PDE/bI 160w單位PDE/bI (以0.1M甘胺醛甘胺酸缓衝液（pH7.5) 稀釋而得） 基質溶液2.9nl保溫25t： 5分後，加_溶液0.1·1而保溫 2 5 t： 10分或2小時。在沸水浴加熱3分使反應中止後，以 HPLC分析反應物中之EPC-K。 反應物中EPC-K以外之其他物質先加熱後，加EPC-K。（反 應時間：0分） 15 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) A4规格（210X297公釐） 83. 3.10,000 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 397685 修正 8 Μ Β7

UtiC 五、發明説明（μ屮 (結果） 加4或16w單位PDE於70.7tf莫耳EPC-Κ後，EPC-Κ之量無 顯著減少（表4),故EPC-K不能當作PDE之基質。 表4與PDE保溫後反應物中EPC-K之殘置 . 殘留EPC-K (η契耳） 梅溶液 0分 10分 2小時 4 tf單位PDE 65.2 69.0 1 6 w單位P D E 70.7 66.5 67.4 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐）

Claims (1)

1. 3976B5 /Λ， Α8 Β6 C8 D8 申請專利範ί 第84104580»「視網禊疾病之預防及治療之方法及组成物 J専利案 （86年2月3日修正） Λ申請專利範匾： 1. 一種用於預防及治療人類視網膜疾病之藥學組成物， 該視網膜疾病起因於耱尿病及局限於視網膜中之疾病 ，菝自早熟性的視網膜病，視網膜靜脈閉合，視網膜 動脲閉合•視網膜剝離，其中包括（a)式I化合物或其 藥理容許鹽：

   CCH2 CM2CH2i 『3—-CH3 锖 閱 面 之 意 項 再 $ Μ i 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裝 其中1^和112各獨立為氳或甲基，和 (b)蕖理容許載醱。 2·如申請專利範醞第1項之藥學组成物，其中該組 以經口裂剤，注射劑，或眼滴劑之型式。 本紙張尺度適用中國國家樣率（CNS ) A4规格（210X297公釐） 3976B5 /Λ， Α8 Β6 C8 D8 申請專利範ί 第84104580»「視網禊疾病之預防及治療之方法及组成物 J専利案 （86年2月3日修正） Λ申請專利範匾： 1. 一種用於預防及治療人類視網膜疾病之藥學組成物， 該視網膜疾病起因於耱尿病及局限於視網膜中之疾病 ，菝自早熟性的視網膜病，視網膜靜脈閉合，視網膜 動脲閉合•視網膜剝離，其中包括（a)式I化合物或其 藥理容許鹽：

   CCH2 CM2CH2i 『3—-CH3 锖 閱 面 之 意 項 再 $ Μ i 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裝 其中1^和112各獨立為氳或甲基，和 (b)蕖理容許載醱。 2·如申請專利範醞第1項之藥學组成物，其中該組 以經口裂剤，注射劑，或眼滴劑之型式。 本紙張尺度適用中國國家樣率（CNS ) A4规格（210X297公釐）