TW219897B - - Google Patents

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219897 AG B6 經濟部中央標準局員工消#合作社印货 五、發明説明（1 ) [産業上之利用領域] 本發明偽關於C型肝炎檢査用試藥及檢査方法。根據最 近之研究，日本國内之非4非B型肝炎患者經估計約為2 0 0 萬人，其中C型肝炎佔9 0〜9 5 X。 [先前技藝] 關於成為C型肝炎之原因之病毒（以下簡稱為H C V ),其搆 造己繼續被閘明中，而在最近檢査H C V抗體（對H C V之抗體） 之存在為目的之試藥亦出現若千種市軎品3 為迄今賓用化之H C V「標誌.」（marker )，已知C - 1 0 0 - 3抗 嘹，相當於H C V之非_造領域N S - 3〜4之一部分者 (SCIENCE 244; 35 9 - 362, 1988),，由於使用 C-100-3抗原 為H C V標誌，在世界上首先實現H C V抗證之分析。但藉 C-100-3抗原來篩檢HCV感染者之場合，其陽性率為約70¾ ，引起所剩30¾成為疑陰性之問題；另一方面亦有下述報 告：MC-100-3 抗原所製 HCV 抗體檢 ffiffl2ELISA(Enzyaie-1 inked Immunosorbent Assay即一種利用海連接免疫吸附 劑之誨免疫测定）器材組實際篩檢輸血用血液時之陽性率 逹約1 . 5 ί；，其中约半數為疑陽性。 其後，有人倡議，使用H C V核心領域為抗原藉以提高H C V 抗體之檢出率（査出率）並提早檢査感染。利用核心領域之 蛋白抗原而製成之HCV抗體檢出用試藥組亦有若干種被研 究，而與上述利用C - 1 0 0 - 3抗原者相對地，被稱為第二代 試藥組。有人¥試：在核心領域之蛋白中設定一個相當於 抗原決定基部份之合成肽，對此组合以相當於上述非溝造 -------------------------装-------訂 绵 (請"間4背面之注"事項再塡寫本頁) 衣紙張闽中孓伶义（CNS)甲.i規格（2ί0 X 2D7 ) 219897

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Bt; 五、發明説明（2 ) 領域NS-3〜4領域中之二個抗原決定基之合成肽，藉以檢 出 HCV抗證（P「〇c. Nati· Acad. Sci. USA 88; 3647-3651 ,1991)。依照此方法，雖然在特異性（專一性）可提高至 高於利用C - 1 0 0 - 3抗原之H C V標誌者，但由於其僅預備一櫥 在核心領域之抗原決定基，無法檢出對其他抗原決定基所 産生之抗體，不能獲得充分的檢出率。 日本專利特閲平3 - 1 3 9 2 8 2號公報掲示若干與核心領域之 抗體有反應性之抗原決定基，雖然尚未達成實用化。將此 等抗原決定基以複數利用時或許可提高抗體之檢出率，但 可預料其待異性之降低，且在經濟上亦不利。 另一方面，迄今在HCV抗體之檢出上所利用之狀，其由 基因重組所得者較多，因此有易於顯現非持異反應之傾向 。例如上述C - 1 0 0 - 3抗原偽利用它與超氣物技化誨（以下 簡稱為SOD)之融合蛋白表現之基因重組産物，因此為了檢 査起因於對SOD部份之反_之凝陽性，必需藉免疫斑跡法 等之追加試驗，否則無法有效檢出H C V抗體。 再者，若使用由ARIMAiU4(後述），其一部份與HCV之核 心領域相似者，T - 7噬菌體媒介表現所得之融合蛋白為 抗原時，T-7噬菌體蛋白之抗體則引起凝陽性反應。在此 場合，藉T-7噬菌髏蛋白來吸收非特異反應，以作為疑陽 L±L· *Jkl /lg*C 性韵'策。 [本發明所欲解決之問題] 如此，使用藉基因重組所得之肽為抗原以進行抗體之撿 出之場合，必需對非待異反應有待殊之考慮。益且以目前 (-"閱"^而之注5P項再增K本頁) 219897 Λ 6 η 6 經濟部中央標準局KX工消費合作社印51 五、發明説明（3 ) 之情形而言，此等非特異反應之對策需要待殊操作並且效 果不足之情況較多。從而需求一種對HCV抗髏有高度反應 性同時維持充分持異性之抗原之出現。另一方面.除了上 述起因於融合蛋白之屬性的非特異反應之問題外，亦有基 於抗原抗髏反應之本質問題。即如前所述，若抗原偽属於 僅用一個在HCV核心領域之抗原決定基者，其HCV抗體之檢 出率則會降低，另一方面在利用複數抗原時雖然可提高檢 出率，卻有非待異反應增大之問題。一般而言，在利用某 一抗原以檢出抗證之場合，若為提高檢出率而使用高反應 性抗原時，則易於隨著反應性之提高使非待異反應增加而 造成待異性之降低（所謂「測量高度」（包含不應測出之測 定值））；反之若提高抗原之特異性，可檢出之抗髏則減少 (所諝漏檢）。可解決此種相反條件之速當抗原尚未為人所知 本發明乃鑑於先前技藝之上述實情.提供一種雖然其肽 所含胺基酸之數目及肽之種類均少，卻不必犧牲待異性即 可提高HCV抗體檢出率之高度實用性之檢査用試藥及檢査 方法為目的者。 [解決問題之手段] 該項目的可用下述手段來達成。邸本發明為一種C型肝 炎檢査用試藥，其包括：含有 序列 1 : Arg Xaa Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro (其中，Xaa表示任選之胺基酸）之一種或後數種肽，或該 狀添加下述序列2及/或序列3 序列 2 : Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg (請先閲讀背而之注意卞項#项寫木疗) 私紙張尺度边用中國團家標準（CNS)甲Ί規格（210x297公龙） 5 219897 A 6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作让印# 五、發明説明（4 ) 序列 3 : Thr Gin Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg Arg Ser Lys Asn Glu Lys 之酞所得之複數肽者。 再者，本發明為一種適於C型肝炎之檢査方法，乃對於 含有序列 1 : Arg Xaa Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro (其中Xaa表示任選之胺基酸） 之一種或複數種肽，或該肽添加下述序列2及/或序列3 序列 2 : Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg 序列 3 : Thr Gin Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg Arg Ser Lys Asn Glu Lys 之肽所得之複數肽予以檢出反應性之抗體者。 又按各胺基酸之縮寫各別代表下述胺基酸： Ala:丙胺酸 Leu:白胺酸 Arg:筋胺酸 Lys:離胺酸 A s η :天冬醛胺酸 M e t :甲硫胺酸 Asp :天冬胺酸 Phe :苯丙胺酸 Cys:胱胺酸 P「o:脯胺酸 G 1 u :麩胺酸 S e r :絲胺酸 Gin:麩醯胺酸 Thr:羥丁胺酸 G 1 y :甘胺酸 Trp :色胺酸 His:組胺酸 Tyr:酪胺酸 lie:異白胺酸 Val:纈胺酸 在序列1之10個胺基酸中，Xaa為任選之胺基酸，其選擇 之自由度較大。其他部份之胺基駿在序列未被特定時並未 —裝------.玎------ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 219897 Λ 6 15 6 經濟部中央櫺準局rr工消費合作社印¾ 五、發明説明（5) 顯示高抗原性，但在Xaa部份有某種程度之容許範圍。例 如在日本專利待開平3 - 1 3 9 2 8 2號公報所發表之H C V核心領 域之部分序列中，相當於序列1 ,其X a a之處為L e u ,但在 依照本發明之序列1中，其Xaa不限於Leu,即使Lys, Arg 亦顯示高抗原性。更確切而言，Lys比Leu更合適。 本發明之序列1〜3所示之肽之胺基酸序列雖然比習知 (例如日本專利待開平3 - 1 3 9 2 8 2號公報）序列短得相當多， 卻顯示與HCV之核心領域之實質1〜3値抗原決定基相同之 抗原機能。即利用H C V核心領域中之一個序列（對應於序列 1)、二健序列（序列1+序列2或3)或三傕序列（序列1+2 + 3)之抗原決定基構造之待定的部份序列以將相對應之肽用 作抗原時可達成待異性與反應性之相容共存，即解決藉抗 原抗體反應之檢出法之本質問題。又由於不使用融合蛋白 ,可減少非待異反應。 以下詳述本發明。本發明所需要之肽可利用化學合成品 。為含有序列1之肽可予舉出，序列1附加有數個〜20値左 右之任選之胺基酸者，或如後所述《間陳分子或載釅蛋 白修飾者。任選之胺基酸對序列1之附加像可各別對序列1 之Ν末端、C末端單獨施行者。例如亦可以參酌與序列1相 對應之HCV核心領域之若干習知序列而選定之。但不限於 此等習知序列。至於其他方法，例如亦可以使序列2或3所 示之肽與序列1之肽連接。為對序列1之肽連接以序列2或 3,在雒持反應性上較佳的是，藉胺基酸透過數個〜20個 左右之任選之肽或後述載體蛋白等予以結合。當然亦有可 (請先閲讀背面之注意事項#堝'ΡΤΤ木S) 裝· 訂- 線， 本紙張尺度边用中國國家榀準（CNS)T4規格（210x297公龙） 7 Λ 6 Η 6 經濟部中央櫺準局貝工消費合作社印焚 五、發明説明（6) 能僅由含有序列1之肽來構成本發明。 其次，將序列1與序列2及/或序列3之肽予以組合，亦即 在互相不連接之呈混合之狀態下同時用作抗原時，可獲得 比序列1或含它的肽單獨使用之情況更佳之結果。因為僅 用一種肽者有時發生檢出率之降低。在利用肽之組合之場 合，最好能使序列1之肽與序列2及/或序列3之用量比率成 為：2〜2: 1之程度。再者，在序列1與序列2, 3之組合被 使之場合，最好各別結合以載體蛋白或其他任選之肽等之 後再予混合使用。關於此點，説明如下：即序列1之X a a可 採用任選之胺基酸，因此可認為毎一不同之Xaa擁有不同 之抗原決定基，但Xaa不同之複數序列在Xaa以外之胺基酸 須屬共同之下可能具有不同之抗原決定基，因此與其使用 複數種序列1不如併用互相在對應抗原決定基上顯然不相 同之序列1與序列2,如此則容易達成檢出率之提高。但此 並非排除複數種序列1之使用，因為它有時可能有效。 為本發明使用之肽，雖然亦可將肽分子直接利用於抗原 抗醱反應；，但若預先使它與間隙分子或載體蛋白結合，則 有可能生成其反應性更優之物。例如使4-(N -順丁烯二醛 亞胺甲基）環己烷-1-羧酸磺丁二醛亞胺酯（以下簡稱為 Sulfo-SMCC)、6-[3-(2-吡啶二硫）丙醛胺]己酸磺丁二酵 亞胺酯（以下簡稱為SUlf〇-LC_SPDP)、H-U -順丁烯二醯 亞胺己醛氧）丁二醛亞胺（以下簡稱為EMCS)等之間隙分子 共價鍵結於肽之N末端時，該肽與抗髏之反應性則被提高。 (請先間讀背面之注*卞項再堝寫木抒) 裝. 線- 本紙ifc尺度边用中國國家樣準（CNS)甲4規格（210x297公及） Λ 6 Η 6 219897 五、發明説明（7 ) 再者，若透過此間隙分子使肽與人血清白蛋白（以下簡 稱為HSA)、牛血清白蛋白（以下簡稱為BSA)等之非活性載 體蛋白結合，則可獲得更佳之結果。使肽與載體蛋白結合 之際，除肽側之間隙分子外，亦可以在載體蛋白側預先導 入間隙分子。為用作載體蛋白之蛋白，最好能用實際之試 料動物由來之蛋白，亦即若以人之血清為試料使用HSA, 俾可儘量減少非特異反應。 本發明有關之肽、或其修飾物得以配合所適用之免疫分 析条之形式提供之。例如在抗原與固相樹脂珠或容器壁結 合之狀態下與檢出對象抗體進行反應之固相免疫測定法之 場合，藉物理吸附或化學結合使本發明有關之肽或其修飾 物在结合於固相樹脂珠。在利用複數種肽之場合，無論各 肽以混合物同時结合於載體，或各狀各別結合於載體後再 予以合併均可。在此例之場合，固相上之肽所捕獲之HCV 抗體可利用人•免疫球蛋白之抗體予以檢出（夾層[技術] 法）。為人•免疫球蛋白之抗醴，若使用能辨認「類別」 (例如IgG, IgA, IgM……等）之抗體，則有可能按類別分 開後檢出HCV抗醴。關於利用固相結合肽之免疫分析法， 除了該夾層法外，亦可舉出一種利用標誌抗體之競爭法 (使標誌抗髏與待測抗醴互相競爭之方法）。 在本發明中，由於所用之抗原決定基至多亦實質不過2 個之程度而已，在採用競争法之場合有可能利用單細胞糸 抗體為標誌抗體。將對所利用之肽有特異性之單細胞条抗 體，在考廉固相上之肽之配比及親合力之下，適當混合於 該肽，以用作標誌抗體即可。 本紙張尺度边用中國a家楳準（CNS)甲4規格（210x297公龙） 9 (請先閲讀背面之注意事項再填寫木奸) 裝· 線. 經濟部中央楳準局员工消f合作社印¾ 經濟部中央標準局只工消費合作社印¾ 219897 五、發明説明（8) 本發明有關之肽或其修飾物亦可予以用作標誌抗原。在 此場合，可由（夾層法）固相化之人·免疫球蛋白之抗體或 此物與（競爭法）固相化之HCV抗體所組合者來構成免疫分 析条。為各種在此例示之免疫分析条中之標誌，可利用酵 素、發光物質、螢光物質、放射性同位素等之習知物。此 等標誌藉適當間隙分子、抗生物素-生物素結合等使之結

A α ο 再者，本發明有關之肽或其修飾物亦可與乳膠粒子等組 合以應用於粒子凝聚反應或凝聚阻止反應。 依照本發明之HCV檢査用試藥或檢査方法所需之包括稀 釋液，標誌檢出用基質，陽性對照物等之各成份，可予以 適當組合以形成一試藥組之形式。例如使本發明有關之肽 結合於固相樹脂珠，以與標誌抗人IsG抗體組合而作為一 組檢定試藥。 [作用] 本發明中含有序列-1之肽乃對HCV抗體有高度反應性， 並且很難與其他抗醱發生非待異性反應。此肽舆序列-2及 /或序列-3之肽組合時可進一步提高HCV抗體之檢出率。本 發明有關之肽例如為從日本專利待開平3-139282號公報所 示之抗原決定基構造取出之部份序列或與它們有共同部份 之序列。但比該特開平3- 1 39292號公報所示之序列短得相 當多，因此其合成容易實現，又由於選擇對HCV抗髖維持 高度待異性之部份，可實現極特異性之分析。 [實施例] 本紙張尺度逍用中國》家標準（CNS) 規格（21 ί) X 297公龙） (請先閲讀背面之注意事項再堺寫木/!) 裝. 線· Λ 6 Hti ^19897 五、發明説明（9 ) 以下説明本發明之實施例。 1 .肽之合成 藉一肽合成装置（BIOSEARCH公司所製造，型式9600)合 成6種依照本發明擁有下述胺基酸序列之肽。在此，序列1 由X a a為L e u、 L y s、A r g者各別稱為字列1 a、 1 b、 1 c。序列 1舆其他胺基酸之結合點乃以•示之。 序列1 a :

Arg Leu Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro 序列2 :

Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg 序列3 :

Thr Gin Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg Arg Ser Lys Asn Glu Lys 序列la7(序列la+7種胺基酸）

Thr Arg-Arg Leu Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro*Ala Leu Met Ala Val 序列1 b 9 (序列1 b + 9種胺基酸）

Val Val Pro-Arg Lys Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro-Ala Leu Met Ala Val Lys 序列1 c 9 (序列1 c + 9種胺基酸）

Pro Thr Arg-Arg Arg Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro-Ala Leu Met Ala Val Lys 其合成傺依照階段性固相法進行者。為固相使用第三丁 氧羰胺聽基-4 -(氣甲基）-Merrif ield[氏]樹脂（渡邊化學工業 公司所製造）.而胺基遨（L體）傜Μ第三丁氧羰基（以下稱 --------------------------^------，玎-------_ (請先閲^背面之注念备項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印以 本纸張尺茂適用中家丨（CXS)甲（悦彳3· X 297公々）

經濟部中央標準局員工消費合作社印U Λ6 B6 五、發明説明（10) 為t - B 0 C )保護其胺基。再者，各胺基酸之支鐽涤各別藉下 述保護基保護者：羥丁胺酸（了 h r / T )、絲胺酸（S e「/ S ):鄰 苄基，麩胺酸（G 1 u / E ) : 7 -苄酯、筋胺酸（A r g / R ) : | - 2 - 磺醛基，離胺酸（Lys/K): 2 -氯苄氧羰基，其他胺基酸之 支鐽：無保護。 偶聯反癦係以樹脂上肽末端t-BOC胺基酸之t-BOC基藉三 氣乙酸解除保護後用Ν, Ν’-二異丙羰二亞胺使待偶聯之下 一涠胺基酸之羧基活性化，然後在室溫下混合1〜4小時以 進行反應。反應時間乃依胺基酸之種類及組合之情形而設 定者，未反《之遊雞胺基酸籍1-乙韹咪唑之乙醯化作用使 之非活性化。 所需要之反癌循環终了後，用三甲單矽烷基三氣甲磺酸 、苯基甲基硫醚、以及三氣乙酸施行保護基之去除及合成 肽之脱雞樹脂，而用乙醚來回收肽。所回收之肽藉凝膠過 濾予以粗略純化後，用〇 D S - 8 0 Τ Μ (含有水-乙睛、0 · U T F A ) 管柱施行逆相HPLC分析，而分取其高峰份。 2 .檢査用試藥之配製（1) 使用上述1.(肽之合成）所合成之肽以配製HCV抗體檢出 用之五種試藥。試藥编號與所用序列编號之相對應關係為 如下： 試藥-1 a :序列1 a 試藥-2 :序列2 試藥-3 :序列3 試藥-1 a 7 :序列1 a 7 衣纸張又適用中家彳？ilMCNS)甲4規格（210 X 297公;ΐ ) -------------------------装------tr------ <諳先閱-4背面之;±念事項再塡寫本頁) 219897 Λ6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（in 試藥-1 a 7 * 2 :序列1 a 7 +序列2 其中，序列2及序列3之使用目的在於調査序列2、序列3 單獨之效果，乃為證實依照本發明之試藥之效果，而被配 製以供比較之甬。序列1 a、 1 a 7、 2及3所示之肽乃由下述 方法予以固相化。 用5 0 in Μ炭酸缓衝液（p Η 9 . 6 )使各合成肽抗原溶解至成為 2.0W g/'mil之程度（若在2.0〜5.0w g/nil程度之濃度範圍 内，則在结果上可獲得相同之險出宰），而按1 0 0 y义各別 分注於E L I S A用微量反應器（M A X I S 0 R P C 1 2 , M u n k公司製）之各套管 (Well)中（每一管之抗原量為0 . 2 u s : 0 · 2 μ S / w ,以下皆同） 。在4 =之溫度下靜置一夜後，思洗滌液（含有0 . 9 5 ；!： T w e e η 2 0之1 0 m Μ磷酸缓衝液，ρ Η 7 . 2 ) 3 0 0 w L洗3次後予以乾燥而 各別獲得依照其序列之試藥。再者，使用序列1 a 7及序列2 所示之肽按1 : 1互相混合者，以相同之操作吸附於微量滴 定板（分注濃度0 . 2 + 0 . 2 = 0 . 4 u g / w )而獲得試藥。 另一方面準備，抗人•免疫球蛋白G單細跑糸抗體依順 丁铺二醛亞胺法藉過氧化誨標誌者（含有0.1% BS A磷酸缓衝 液，以下簡稱為P 0 D標誌抗I g G抗體）g由四甲聯苯胺0 . 1 7 mg / id文、0 . 0 1 5 %過氧化氫、以及0 . 1 2 5 Μ檸檬酸缓衝液 (ΡΗ4.2)所組成之發色基質液。 3. HCV抗體之檢出（1) 以被懷疑有HCV感染之血清檢體（20例）及正常人血清檢 體（1 0例）為試料，藉試藥-1 a、試藥-1 a 7、試藥-2、試藥- 3、及試藥-Ia7i2進行ELiSA。另關於由習知肽之B-1及 本纸張又用中家f?準（CNS)甲i規恪（210 X 297公兌） --------------------------I------#------緯 (請先間♦.·!'背面之注項再碣R本頁} 219897 Λ 6 Βΰ 五、發明説明（12 ) ARIMA*14(以下簡稱為Ν-14)所配製之試藥亦進行分析以 作比較。其中B-l、Ν-14之抗原濃度為0.1wg/w。上述序 列la等之抗原濃度為0.2wg/w,雙方之差異偽最適抗原濃 度（即不致引起敏感度降低之經濟濃度）不同所致，但均按 各抗原之最適條件來配製之事實仍不變。 B-1為相當於文獻（J. Vi「ology, 65/3, P1105-, 1991 年）所載述之HCV構造領域之胺基酸序列中自N末端起算之 第10値〜第122個之胺基酸序列之肽，而ARIMA»14偽以HCV 構造領域中之抗原決定基被報告（BIO nedica 6(2), p26- ,1991年）之肽。再者亦將使用市售之HCV抗體檢出用試藥 組（利用C - 1 0 0 - 3抗原）所得之分析結果予以比較。S外關 於一部份血清檢體實施依照免疫班跡法之藉追加試驗用市 售試藥組（「RIBA Test」，ORTHO DIAGNOSTICS公司所製 造，商品名）所行之確證試驗。其操作為如下：

在抗原固相化板之各套管各別採取檢體稀釋液（0.053： Tween 20, 0.1 250aN3, 10ηιΜδξ 酸缓衝液 pH7. 2 ) 200 wJL 及血清檢醱20m儿，以於25ΊΟ之溫度下進行反應1小時。 反應完結後，除去反應液，用洗滌液（0.05¾ Tween 20, 10mM磷酸缓衝液pH7.2)300w儿將套管洗5次，而分注POD 標誌抗U G抗體1 0 0 w儿，以於2 5 t之溫度下進行反應1小 時。反應完結後，除去反應液，而用洗滌液300W义將套 管洗5次，以將發色基質液100w义加入後，在25C之溫度 下進行反應30分鐘，用2N硫酸使反應停止後，測定450ηπ 之吸光度。其結果如表1所示。（表中，以Ρ表示試藥）。在 衣紙張適闹中阀因家深準（CNS)甲i吡洛（21〇 X 297公蓥）

U —装· 11. 線- 涇濟部中央標準局員工消費合作吐印奴

Afi Βΰ 219897 五、發明説明（13 ) 表1中，與依照免疫斑跡法之追加試驗結果（表中，以 「RIBA」示之）相較，在市售品（表中以「C-100」示之）中 出現相當多的疑陽性，但試藥- la7及試藥- la 7 *2均與RIBA 充分一致，乃證實依照本發明之試藥- la7及試藥- la?* 2之 檢出率高。又發現試藥-2及3亦具有約略相等之作用，但 與含有序列1之試藥- la、 -la7、 -la7*2對照比較時，有漏 檢之場合（檢體N〇16, 17),足見若單獨使用序列2及3,有 時會發生漏檢。亦得知，與試藥- la、 -la7相較，試藥-la7*2將檢出率提高得更多。再者，與B-1—致或不一致， 此事本身並不代表檢査用試藥之優劣，但一般而言，被懷 疑有HCV感染之檢體在B-1呈陽性者變為陰性時可認為該試 藥之檢出率低。基於此一觀點，試蕖- la、 -la7、 -137*2 乃慶於試藥-2, 3及- N-14。 (請先閱‘？-'!背面之'-i!:6p項再塡K本頁) 装- *ΤΓ. .線. 經濟部中央標準局員工消费合作钍印货 本纸張尺·;ili用中阀3孓!？準（CNS)甲I規格（210 X 2<J7公蛩） 15 五、發明説明（U) Λ 6 Π 6 被 懷 疑 Η C V 感 染 之 檢 體 經濟部中央橾準局员工消费合作杜印5i 表1 正 常 人 血 清 No Pla7 Pla P2 P3 Pla7*2 B-l K-14 c-ioo RIBA 1 1.237 + 1.173 + 1.928 + 1.8S2 + 1.933 + 2.491 + 1.229 + 3.958 4 + 2 1.170 + 1.207 J 2. 118 + 1.914 + 2.274 + 1.881 + 1.282 + 2.100 4 3 2.130 + 2.032 十 Ζ.ΒΊ2 + 2.437 4 2.432 + 3.097 + 1.517 4 3.958 + + 4 0.070 0.068 0. 100 0.090 0.108 0.052 0.013 0.934 + - 5 0.117 0.072 0.085 0.056 0.079 0.051 0.011 0.543 + - 6 0.053 0.058 0. 145 0.054 0.135 0.079 0.013 0.487 + 7 1.238 + 1.183 + 2.277 + 2.311 + 2.385 +- 2.138 + 1.640 + 1.884 + + S 0.091 0.069 0. 1δ5 0.158 0.161 0.049 0.009 0.689 + - 9 0.034 0.043 0.059 0.095 0. 109 0.045 0.010 0.278 10 0.968 +· 1.086 十 2.070 + 2.171 + 1.984 2.170 + 1.118 + 3.837 + + 11 0.080 0.087 0.084 0.048 0.097 0. 093 0.009 0.700 + - 12 0.024 0.064 0.032 0.053 0.067 0.053 0.009 1.124 + - IS 2.245 如 2. 154 + 2.404 + 2.105+ 2.101 + 2.503 + 1.194 + 3.958 hh + u 1.177 + 1.217 4- 0.884 + 0.748 + 1.013 + 2.459 •f 0.250 + 1.934 + - 15 0.563 + 0.552 + 0.717 + 0.871 + 0.853 + 2.523 + 0.513 + 3.958 + + id 0.328 + 0.348 0.077 0-075 0.372 + 2.022 0.010 0.390 17 0.291 + 0.319 + 0.082 0.128 0.418 + 1.921 + 0.009 2.505 + 18 3.388 + 3.0C8 + 1.985 + 2.158 + 2.425 + 2.113 + 1.228 4 0.178 19 3.176 + 3.267 + 1.354 1.045 + 2.317 + 1.563 + 1.415 + 0.115 20 0.090 0.075 1.380 ^ 1.108 + 1.185+ 1.024 + 0.842 + 0.124 1 0.051 0.043 0.087 0. 128 0.077 0.046 0.020 0.082 2 0.065 0.067 0.029 0.064 0.C74 0.053 0.021 0.095 3 0.078 0.038 0.085 0.065 0.086 0.073 0.015 0.108 4 0.036 0.032 0.064 0.121 0.053 0.051 0.009 0.126 5 0.042 0.044 0.113 0.057 0.047 0.087 0.011 0.115 6 0.069 0.053 0.059 0.079 0. 138 0.080 0.025 0.075 7 0.039 0.055 0.050 0.086 0.098 0.058 0.040 0.089 8 0.036 0.061 0.067 0.094 0.061 0.064 0.018 0.121 9 0.041 0.071 0.065 0.046 0.035 0.075 0.017 0.096 10 0.052 O.OS3 0.128 0.082 0.043 0.047 0.024 0.172 裝 線 π 本紙51c尺度边用中S困家楳準(CNS) Ή規格（210X297公釐） 81. 7. 20.000¾ (II) 15 Λ 6 R6 / 219897 五、發明説明U5) 然後，關於H C V陽性檢體，試用序列1 a 7及序列2以進行 抑制試驗。將固相化上所利用之序列la7及序列2之肽10 u s加入檢體稀釋液（2 0 0 y义）中，以觀察試藥-1 a 7及試藥 -2中之反應之變化。其结果如表2所示，HCV抗體陽性檢體 由於序列1 a 7之肽1 0 w s之添加而完全被抑制，即證實其持 異性高。另在序列2中亦發現HCV抗體陽性檢體完全被抑制 。以此而言，其待異性高。 (-"閲"背面之注-簧項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印3乂 表2 Pla7 P2 検体 未添加序列la7 添加序列la7 未添加序列2 添加序列2 OD 判定 QD 0D 判定 0D 1 1.237 0.110 1.928 + 0.036 2 \ 1.170 + 0.066 2.118 + 0.053 3 2.130 + 0.065 2.673 + 0.054 7 1.238 + 0.044 2.277 + 0.024 10 0.968 十 0.078 2.070 + 0.053 13 2.245 + 0.060 2.404 + 0.064 14 1. 177 + 0.075 0.884 + 0.027 15 0.563 + 0.053 0.717 + 0.031 16 0.3Z8 + 0.068 0.077 - 0.033 17 0.291 + 0.069 0.082 - 0.067 18 3.388 + 0.113 1.985 十 0.084 19 3.176 + 0.135 I.S54 + 0.081 20 0.090 - 0.085 1.380 + 0.135 农纸張尺茂適用中家作芈（CN'S)甲1現格（2U1 X 297公熗） 219897 Λ(> 經濟部中央標準局員工消費合作社印-· Β6 9 五、發明說明（16 ) 4 ·試藥 (2) 以ι.(肽之合成）所合成之肽導入有各種交聯劑者作為抗 原，以配製試藥。 各種交聯劑之導入合成肽： (A) Su lf0-SMCC之導人合成肽 使Sulf〇-SMCC(PIERCE公司製造）0.132呢與合成肽（序列 la7或2)0.5π®各別溶於100mM磷酸缓衝液（PH7.5)後予以混 合，而將液量調整至0.1nJl後，在25Ϊ：之溫度下進行反應 2小時，而添加甘胺酸10w文以停止反應。 (B) EMCS之導人合成肽 使EMCS(「同仁化學j公司所製造）0.llIlg溶於二甲基甲 酵胺10W义者與合成肽（序列la?或序列2)0.5ag各別溶於 100bM锥酸缓衝液（PH7.5)後予以混合，而將液®調整至 0.1bJI後，在251之溫度下進行反應2小時，而添加1 胺酸10 u JL以停止反應。 (C) Sulfo-LC-SPDP之導人合成肽 使Sulf〇-LC-SPDP(PIERCE公司所製造）0·15πβ與合成狀 (序列la7或2)0，5ng各別溶於100βΜ磷酸缓衝液（ΡΗ7.5)後 予以混合.而將液量調整至後，在之溫度下進 行反應2小時，而添加1Μ甘胺酸10W义以停止反應。 (D) DSS之導人合成肽·* 使DSS(PIERCE公司所製造）0.2明溶於二甲基甲醛胺50 w义，以與合成肽（序列la7或2)0.5ng —起加入100丨Μ磷酸 缓衝液（pH7.5)0,15raJl ,而在40¾之溫度下！S拌8小時以 衣纸張八及遇用中内芮家作'.MCNS)甲.*·挞洛（21U X 297公染） .裝. 訂. .線. 219897

經濟部中央標準局員工消費合作社印'viR Λ 6 Bfi 五、發明説明（17 ) 進行反應後，添加1 Μ甘胺酸1 0 w i以停止反應。 @固相化抗原之製備& 比照2 .(檢査用試藥之配製（1 ))之方法製得導入有上述 (A )〜（D )交聯劑之各抗原之固相化板。 5 . H C V抗體之檢出（2 ) 使用4 .(試藥之配製（2 ))所製之試藥，以試行藉E L I S Α法 之H C V患者血清中之抗體之測定。亦同時進行上述4 .(試藥 之配製（2 ))所得各抗原之抑制試驗 (J)葙E L I S Α法所行之H C V患者血清由之抗體之測定： 使用上述4 . @所製得之抗原固相化板，比照3 .( H C V抗 體之檢出（1 ))之方法測定H C V患者血清中之抗體。其中， 選擇很多在狀單濁時呈陰性（在Β-1呈陽性）之檢體，以調 查交聯劑之效果。 其结果示於表3及表4中。各合成肽之抗原性由於肽與交 聯劑结合而被增強，但增強效果依交聯劑之種類而不同。 Sulfo-SMCC、BMCS、以及 Sulfo-LC-SPDP均以[互相]同等 程度顯示有效，而DSS稍遜於前三者。尤其在導入有Sulfo -S M C C之序列1 a 7全然未發現任何漏檢。反觀序列2之情形 ,即使藉交聯劑之結合亦無法完全防止漏撿。一般而言. 藉交聯劑之增強效果偽在序列la7更顯著者。此外發現，B -1抗體在陰性之患者血清檢體中與交聯劑導入抗原起反應 之例子。 衣纸：中同 BI 孓 d£- (CN'S)甲 X 2D7 公$ ) 219897 Λ 6 Β6

五、發明説明（18 ) 表3 合成肽序列la7之場合 • 導入有交聯劑之肽 肽 QD 判定」 B-I 押定 検体! sulfo-SHCC EMCS 5ulf〇-LC- DSS 0D判定 0D 判定 00判定 0D判定 A 0.362 + 0.199 - 0.133 - 0.433 + 0.026 - + B 1.038 + 1.598 + 1.287 + 1.117 + 0.094 - 4 C 0.749 + 0.75B + 0.242 — 0.761 + 0.038 - + D 0.726 + 0.773 + 0.412 Π 0.480 + 0.100 - + E 0.786 + 0.604 + 0.397 + 0.955 + 0.167 - + F 0.363 4 0.264 + 0.191 - 0.264 + 0.060 - 十 G 1.600 + 1.752 + L105 + 0.943 + 0.781 + + Η 1.412 + 1.699 + 0.949 + 0.893 + 0.8A1 + + I 1.116 + 1.300 + 1.249 + 1.080 + 1.370 + + J 1.570 ^ 1.991 + 1.315 + 1.042 + 1.104 + + κ 1.399 + 1.380 + 1.251 + 1.065 + 1.952 + + L 0.432 4 — — — 0.032 - - Μ 0.126 - — — — 0.091 - - 表4 合成肽序列2之場合 検体 導入有交聯劑之肽 B-1 判定 Sulfo-SMCC EMCS Sukfo-LC- DSS 肽 0D判定 0D判定 0D判定 0D 判定 0D 判定 A 0.236 - 0.250 - 0.223 - 0.177 - 0.380 - 4 B 1.223 + 1.004 + 0.893 + 0.309 - 0.366 - + C 0.264 - 0.269 - 0.264 - 0.167 - 0.314 - 4 D 2.681 + 2.702 + 2.583 + 0.248 - 0.556 + + E 2.241 + 2.124 + 2.161 + 0.267 - 0.914 + + F 1.872 + 1.855 + 1.764 + 0.807 + 0.S33 + + Ϊ G 1.958 + 2.041 + 1.774 + 0.464 - 0.993 + + :—Η 2.408 + 2.389 + 2.236 + 0.534 + 1.924 + + ^ I 0.881 + 0.895 + 0.724 + 0.222 - 0.754 + + 1 J 1.244 + 1.426 + 1.259 + 0.254 ** 1.025 + ^ Κ 2.817 + 2.920 + 2.829 + 0.366 - •i.392 + + )，L 0.224 - — — — 0.099 - - ； Η 0.541 + — — — 0.145 - - L· ................... 1 -------丨丨 Ρ J 裝 訂 線 本纸張尺Α適用中家作氓（CNS)甲1規格（210 X 297公釐） 20 經濟部中央標準局員工消#合作吐.印·t 219897 Λ(；

Rt； 五、發明説明U9) 抑制試驗 使用已導入有S u丨f 0 - S M C C之合成肽（序列1 a 7 )以測定抗 韹之際，將合成呔、S u 1 f 〇 - S M C C導人狀、S u i f 〇 - S M C C、 B S A ( S : G Μ Α化學公司所製造）或Β - 1各別以1 0 u g加入檢體稀釋液 (2 0 0 w殳）中以觀察反應之變化：捋结果示於表5中。 其结果是，如檢體Ν所示，在Β-1及Suifo-SMCC導人合成 驮達成抑制，但在合成肽本身或S u 1 f 〇 - S M C C單獨時發現無 法抑制之例。由此證實，因交聯劑之導入，使合成肽之反 應性有明.頭的變化，而接近核心全領域適用之抗原。 表5 検体 固相抗原：序列U7 + Sulf〇-S>ICC 抑制試驗 (-) 序列1 a7 序列U7+ Su1f〇-SMCC Su1f〇-SHCC BSA B-l N 2.646 2.418 0.272 2.949 2.218 0.043 0 0.886 0. 165 0.121 0.665 0.801 0. 124 P 1.102 0.262 0.251 1.180 1.221 0.210 Q 0.495 0.294 0. 125 0.42! 0. 401 0.077 6 .試藥之配製（3 ) 使4 .(試藥之配製（2 ))所得之導入有各種交聯劑之肽與 載體蛋白結合以作為抗原而予以配製試藥。 ®Sulf〇-SMCC交聯劑導入肽抗原與載體蛋白之結合： 使BSA(SIGMA化學公司所製造）或HSA(SIGMA化學公司所數造）1 0 mg 溶於含有6 Μ脲之1 0 0 ra A E D T A溶液2 πι义。對此添加正丁醇 0 . 2 di义.及N a S Η 4 2 0 nig ,在2 5 °C之溫交下礙拌3 0分鐘後，滴 -------------------------^-------，玎------線 (-先"*·''":而之-再塡寫本頁) 219897 Λϋ Β6 五、發明説明（20) (-t閲-、背而之;±-?^冉塡冩本頁) 加100raM NaH2P〇4 1ίη义·及丙酮0.4m义·，以生成還原溶 液或還原HS A溶液。 對此溶液3 . 3 ni 添加上述4中被甘胺酸停止反應前之反 應液（S n 1 f 〇 - S M C C交聯劑導入肽抗原，參照4 . ® ( A ) ) ( 0 . 1 a殳），在4 t〕溫度下it拌3小時以進行反應後，添加5 0 m Μ之 Ν -乙基順丁烯二醛亞胺5 0 /i又以停止反應。然後用 . S E P H A D E X G - 5 0 ( P H A R M A C I A公司所製造）纯化而獲得結合於 載體蛋白之S u 1 f 〇 - S M C C交聯劑導人合成肽（以下簡稱為B S A 结合肽、H S A结合狀；。 (D固相化抗原之製備： 比照2 .(檢査用試藥之配製（1 ))之方法製成B S A结合肽、 及HSA结合肽之固相化板。 7 . H C V抗體之檢出（3 ) 使用6 .(試藥之配裂（3))所製成之固相化板，比照2 .之 方法，將依Β - 1測定抗體结果顯示陽性之H C V患者血清（5 4 例）予以測定其中之抗體。其结果示於表6中。如表δ所示 ,BSA结合肽及HSA結合肽均示互相祖同之成果。 表6 經濟部中央標準局員工消泞合作钍印谂 BSA結合抗原 HSA結合抗原 肽 頃性/検体 陽性串00 隄性/検体 陽性率（¾) 序夕!J , U7 5 3/54 9 8. 1 5 3/54 9 8 . 1 序列'2 5 1/54 9 4. 4 5 1/54 9 4.4 本·纸張H適用中闷因孓(CNS)甲.丨堤仏（21丨丨X 2D7 ) 經濟部中央標準局員工消费合作社印1'·1-』 ^19897 v ---------- ΒΓ, 五、發明説明（21) 再者，關於正常人血清以兩者商定结果，如表7所示， 在B S A結合抗原出現约2 S：之非特異陽性，而在H S A結合抗原 並未出現非持異陽性。 表7 肽 BSA結合抗原 隄性/検体 煶性平（¾) HSA結合抗原 頃性/検体 S性率（¾) 序列la7 7/259 2 . 7 1/259 0.39 序列 2 7/259 2 . 7 1/259 0 . 3 9 此外，以同一方式藉蚤知肽（B - 1及N - 1 4 )之試藥施行同一 檢體之分析，而比較兩者之結果。 8 . H C V抗體之檢出（4 ) - 由1所合成之序列lb9及lc9根據4及6誘導以下所不之抗 原（HSA结合抗原），而比照2之方法使此物在徵量反應器 (其套管分注時之抗原濃度為0 . 5 u s / v〇敏化以試行被懷疑 有HCV感染之患者撿體（I05例）中之HCV抗體之檢出 (E L I S A法）,」其結果示於表8中，另外’以其總§十不於表9 中。 雖然有若干反®性差異，但確證各具有大致同等之反應 性。 序列 lb9間隙域（Sulfo-SMCC) -HSA :(稱為 Ib9-HSA)。 序列 1 c 9 間隙域（S u 1 f 〇 - S M C C ) - H S A :(稱為 1 c 9 - H S A )。 衣紙设XJtii用中阀闪孓从（CJNS)沿洛（21()\237公4) -------------------------装------#!-----緯 <·;ί:ι·"^背而之注4疾項再填寫本頁) 23 B6 五、發明説明（22) 經濟部中央標準局員工消費合作社印贤 表8 検体No lbS-HSA 1C9-HSA | Lb9-HSA 1 C9-HSA 1 1.065=r 1 * 022寒 54 0.046 0.038' 2 1.118^ 0.980* 55 0.030 0.025 3 2.558=^ 2.551* 56 0. 187 0.345* 4 0.070 0.045 57 0.662* 0.270* 5 0.199 0-122 58 1·727χ 1 - 486* 6 0.141 0.646* 59 0.065 0.049 7 2.400* 2.094^ 60 1 ·732太 1-920^ — 8 0. 006 a 7o 7 7 0. 002 '〇T〇59 6 1 62^ 0.064 o', 2 17 0.0 67 0.125 10 1.724^ 1.963* 63 0-127 0.233* 1 I 0- 068 0.037 64 2.784^ 2.71 12 0.037 '2 7Β07Ϊ- 0.058 '~2TT22 65 66*~ 0.035 0,424^ 0.0 27 14 2.510* 1.865^ 67 0.031 0.022 15 0.604^ 0.370^ 68 2.340* 1.050^ 16 0.370* 0.308^ 69 1 .450* 0.972χ 17 CK 丨 9 0 0.159 70 0.500: 0.371 —18 0.489^ 0.406* 71 0.390^ 0.181 19 0.054 0.039 72 0.042 0.031 20 0.140 0.062 73 0.637^ 0.164 2 1 0. 237 0,137 74 2.4021 2.347* 22 0. 168 0.125 75 2.0433： Ϊ.958* 1 2S 0.084 0.055 76 0.567»： 0.629* Z4 0.072 0.029 77 0.419* 0.301* 25 2.566^ 2.374^ 78 1.733»： I. 4 88夂 26 0.4441 0.065 79 ΐ.267^ 0.949* 27 1,059^ 0.505^ 8〇1 0.083 0.056 28 0.080 0.051 8 1 0.033 0.033 29 0.052 0.035 82 έ,629^ 2.357* 30 ---γ- 0.083 **〇'7〇64 0.028 ^oToTs 83 2.026* '~〇Τ3'6^ 2.091* 2.700$ 3Z 0.078 0.070 85 2.763* 2_ 750太 33 0.437* a . 6 4 4 ^ 86 ΐ.8S5^ ΐ . 6503= 34 0.718* 0.07Ϊ 87 0.126 0 . Ϊ 13 3 5 2.882* 2』】4太 88 0.081 0.074 3 6 0.273 0.227^ 89 0.032 0.04 1 37 0.034 0.031 90 0.038 0.032 38 0.190 0.135 91 2.122^ 1.6111 39 0.639* 0.072 92 2.063* 1.840* 4 0 0-893^ 0.840^ 93 0/2& 0.344^ 4 1 0.368» 0.117 94 0.092 0.061 42 2.S72本 2.266^ 95 0.811* 1.5 16* 43 0.233 0.164 96 0,015 0.101 44 0.04 1 0.033 37 1.938* 2. 103^ 45 0.084 0.063 98 0.971^ 0.124 46 0.600* 0.450^ 9S 0.067 0.055 47- j 2.035^ 2.178* 100 0.062 0.059 48 0.420» 0-322* 101 0·585本 0.250* 49 50 0.254 0' 040 0.210* 0.030 102 —ΤδΤ 0.026 Τ. 935* 0.023 mi 51 0.035 0. 028 104 0.042 0. 038 52 0.034 0.033 105 0.115 0.103 53 0.068 0.054 (請先閱讀背面之注意事項再項寫本頁) 本纸張又度適用中國國家作準（CXS)甲；规格（LMO X 297公坌） 24 219897 五、發明説明（23 ) 表9 被懷疑有C型肝炎之105檢髏（本發明品間之比較） P 1 b 9 P 1 c 9 + ( % ) —(% ) Total + (%) 4 3 (40.9) 5 ( 4.8) 4 8 (45.7) I ~ {%) 9 ( 8. 6) 4 8 (45.7) 5 了（54·3) 1 Total 5 2 (49.5) 5 3 (50.5) 1 0 5 (100) (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印t 本纸張尺度ϋ用中固西家if準（CNS)甲烙（LMi) X 297公坌） Λ 6 Bo 2t^897- 五、發明説明（24) 9 . H C V 抗之檢[ij ( 5 ) 關於序列1 b 9及序列3各別準備其透過間隙分子（$1111'〇- S M C 0 )與H S A结合之抗原。然後將它們按1 : 1摻配以製備一 試藥（稱為Plb9*3),而比照2之方法使之在微量反應器（分 注濃度0 . 5 + 0 . 5 = 1 . 0 /i g / w )敏化，以試行各種檢體中之 H C V抗禮之撿出（E L I S A法，一部份R I A法）。另外以同一方 式Μ習知肽（B - 1及N - 1 4 )之試葉來施行上述各種檢體之分 析，而比較兩者之结杲： 為檢體，除上述被懷疑有H C V惑染之檢韹外，亦使用Β - 1 陽性檢體（]3 9例）、R F陽性檢體（5 0例），及正常人檢體U 0 0 冽）。 在此使用RF陽性檢體乃基於下述考惠：即由於FR偽風濕 病之因子且成為H C V感染疑陽性之原因，其受到R F之干涉 而變為陽性者易於發生非待異反應3 試驗結果各別示於表1 0 (被懷疑有H C V惑染之檢體）、表 13(Β-1陽性檢體）、表16(RF陽性檢證）、及表]9(正常檢體 )中。又按各表按各檢體群總計者乃示於表11、12(與表10 相對懸）、表1 4、 1 5 (與表1 3相對應）.、表1 7、 1 8 (與表1 6相 對應）及表20(與表19相對應）中3在被懷疑有HCV感染之檢 體中，發現在N - 1 4呈陰性者變為P 1 b 9 * 3陽性之例，而P 1 b 9 *3之檢出率高於B-1 (表10〜12)。表13〜15乃以B-1陽性檢 體為基準以比較P 1 b 9 * 3與N - 1 4 ,由此等表可明確得知 P 1 b 9 * 3之檢出率高於N - 1 4。另發現在R F陽性檢體中，B - 1 由於其敏惑度高而围易於受到R F干涉之影響，（但閟於此 ------------------ί ,------^------IT------.^- (請先閱"背面之注念麥項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作汪印1·'*''1- 219897

Afi ΒΓ) 五、發明説明（25) 點）Plb9*3顯示與Ν-14同等之程度，不太受到RF干涉之影 礬。（表16〜18)。此外，在正常檢體中，Plb9*3、B-1及 N-14均未檢出陽性，而發現B-1檢出傾向大（吸光度較高） ，易於形成「測量過度」，但（關於此點）P 1 b 9 * 3之檢出傾 向小於B-1而與N-14形成之[檢出傾向]差距不大（表19)。 又按，由表19之結果所算出之界限值（判定陰陽性之基準） 乃在 Plb9*3為 0.319,在 B-1 為 0.445,而在 N-14為 0.037。 如此，本發明由肽組合之Plb9*3乃在HCV抗體之檢出率 或待異性上顯示其勝過N-14而達B-1同等以上之結果。 ----------------：--------装------ΤΓ------^ (冶也閱‘？-;.背面之;iipJi!再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作钍印妓 36 219897 五、發明説明（26) 绶濟部中央標準局員工消費合汴吐；'·'. 表1 0 検体 ίϋ扣抗肢 検体 Ιΐ!相杭Ki No. Pib9*3 B-l N-14 No· Plb3哀3 B-l N-14 1 2.553 X 2.491 * 1.223 $ 51 0.099 0.058 0.010 2 1.926 X 1.881 * 1.282 * 52 0.073 0.064 0.023 3 3.110 » 3,097 * 1.517 τ 53 0.090 0.075 0.010 4 0. 102 0.052 0.013 54 0.056 0.047 0.009 5 0.200 0.051 0.01 I 55 0.058 0.05Ϊ 0.0Q9 6 0.274 0.079 0.013 56 0.125 0.050 0.009 7 3.025 2.138 * 1.640 ^ 57 2.139 ^ 2.359 * 0.915 ^ 8 0.293 0.049 0.009 58 2.799 * 2.300 * 1.210 a： 9 0.062 0.045 0.010 59 0.083 0.060 0.009 10 2.438 X 2.170 * 1.118 ^ 60 2,645 ^ 2.408 ^ 0.821 x I 1 0.070 0.093 0,009 61 0.1388 0.053 0.009 1 2 0.060 0.053 0.009 62 2.135 * 2.349 % 1.164 x 13 2.937 2.503 * 1.194 * 63 0. 113 0.051 0.009 ]4 2.737 χ 2.459 2 0.250 i 64 3.077 X 3.306 * 1-304 x 15 1.0S7 t 2.523 ^ 0.613 ^ 65 0.058 O.Obl 0.009 16 2.744 ^ 2.127* 1.253 ^ 66 2.812 ^ 2.411 x 1.484 x 17 0.082 0.098 0.028 67 0.065 0.048 0.009 18 2.537 K 826 x 1.030 3： 68 2.832 X 2.116 ^ 0.838 t 19 0.061 0.055 0.009 69 3.068 ^ 3.032 * 1.394 * 20 0. 155 0.054 0.010 70 0.422 * 0.083 0.009 21 0. 148 0.080 0. 167 71 2.877 τ 2.800 * 1.234 ^ Σ2 0.090 0. 181 0.030 72 0.052 0.051 0.009 23 0.119 0. 173 0.010 73 1.010 * 1.335 % 0. 102 24 0.082 0.054 0.020 74 2.747 x 2. 248 X 0.471 x Z5 3.046 χ 3.252 » 1.261 * 75 3.016 * 3.066 X 1.619 * 26 0.326 X 2.529 ^ 0.010 76 1.469 ^ 2.416 * 0.815 * 27 1.328 * 2.228 * 0.237 * 77 1.708 * 2.415 ^ 0.889 * Z8 0.085 0.050 0.010 78 2.334 » 2.058 » 0.01 1 29 0. 101 0.207 0.072 79 1.838 » 2.291 x 0.348 * 30 0.073 0.047 0.008 80 0.112 0.052 0.009 31 0.085 0.062 0.009 81 0.056 0.050 0.008 32 0.066 0.054 0.009 82 3.135 * 2.510 ^ 1.474 ^ 33 0.456 χ 2.022 X 0.010 83 2.776 ^ 2.833 * 1,018 * 34 0.326 ^ 0.050 0.009 84 1.205 * 2.567 * 0.472 * 35 3.187 χ Z. 833 X i.2δδ * 85 3. 144 X 1.981 ^ 1.530 » 36 0.374 * 1.921 ^ 0.009 86 2.870 ^ 1.855 ^ 1.540 ^ 37 0.068 0. 046 0.009 87 0.632 X 1. 175 * 0. 175 38 0.222 0.059 0.01 1 88 0.081 0.047 0.010 39 2.390 X 2.095 ^ 1.363 * 89 0.069 0.050 0.010 40 1.351 * 2.366 » 0.009 90 0.071 0.045 0.010 41 1.719 * 0.073 0.200 91 2.198 ^ 1.855 ^ 0.773 * 42 3.055 X 2.762 ^ 0.834 * 92 2.912 * 1.726 * 1.276 x 43 0. 132 0.051 0.009 93 2.243 » 1.227 X 0.686 * 44 0.050 0.100 0.009 94 0.226 0.057 0.009 45 0. 104 0.087 0.009 95 1.579 * 0.936 * 0.035 46 .2.822 X 2.436 * 1.427 * 96' 0-127 0.052 0.010 47 2.575 * 2.320 X 1.099 t 97 2.812 t 2. 428 % 1.384 x 48 0.234 0.087 0.009 98 2.589 * 2,304 t 1.329 ς 49 2.100 ^ 1.696 * 0.838 * 99 0.119 0.053 0.010 50 0.051 0.080 0.009 100 0. 150 0.061 0.010 104 1.088 » 2. 152 * (539) 112 0.069 0.074 (446) 145 2,671 ^ 1.889 * (1253) 】80 0.117 0.793 重 (346) 194 0.426 ^ 2.092 t (796) ( )RIAcpn (-""-#面之注意"項再塡冩本頁) —裝---------·訂-------線, (CNS) ; ίίϋ (21；) X 297 ) 23 219897 Λ 6 Β6 五、發明説明（27) 被懷ΐ有'c型肝炎之105檢醱（本發明與β-l之比較） B - 1 P1b9*3 + (%) —(% ) Total + (%) 5 3 (50.5) 3 ( 2.9) 5 6 (53.3) —(%) -1 ( 1.0) 4 8 (45.7) 4 9 (46.7) Total 5 4 (51.4) 5 1 (48. 6) 1 0 5 (100) 表1 2 被懷疑有C型肝炎之105檢體（本發明與Ν-14之比較） -------------------------- ------訂 線 (請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印贤 N - I 4 P1b9*3 + ( % ) -(%) Total + (%) 4 2 (40.0) 1 4 (13.3) 5 6 (53. 3) —(%) 〇(〇‘〇) 4 9 (46.7) 4 9 (46. 7) Total 4 2 (40.0) 6 3 (60. 0) 1 0 5 (100) 本纸張尺Λ这明中as孓C:MCNS)甲.！吼丨各（2〖(）X ：297公货） 29 219897 AG B6 五、發明説明（28) 表1 3 B-1隈ftl33例 經濟部中央標準局員工消費合作社印圮 _相抗原 Plb9*3 Β-1 Ν-14 1 "2.500 * 3.377 * 0.762 * 2 1.183 * 2.870 * 0.040 3 0.442 » 2.645 * 0.049 4 2.390 * 3.179 * 1.518 * 5 3.029 t 3.324 * 1.407 » 6 0.223 * 3.990 * 0.117 7 2.709 * 3.699 * 0.041 8 3.102 * 3.173 * 1.261 * 9 3. 067 * 3.330 * 1.S42 * 】0 2.983 * 2.980 » 1.494 * 1 1 2.910 τ 3.593 * 12 0.307 * 2.987 » 0.156 13 1.033 * 3.037 * 0.806 * 14 2.694 * 3.323 * 0.830 * 15 2.938 * 3.604 t 0.954 * 16 2.613 * 2.869 χ 1.582 * 17 2.301 t 3.D38 * 1.039 * 18 1.930 * 3.344 * 1.235 * 19 1.303 * 2.581 * 0.449 t 20 2.754 * 3.625 * 1.365 * 21 2.587 * 3.064 * 1.478 * 22 1.956 * 3.477 * 0.570 * 23 2.139 * 3.168 χ 1.487 * 24 3.008 * 3.990 » 1.280 * 25 3.049 * 3.496 * 1.836 * 26 2.875 * 3.990 * 1.685 » 27 1.155 * 2.565 χ 0.765 * 28 2.350 * 3.990 * 1.376 * 29 0.348 * 3.026 * 0.333 * 30 1.987 » 3.990 * 0.300 * 31 2.494 * 2.691 * 1.140 * 32 1.438 x 2.903 * 0.990 * 33 1.40δ * 3.000 χ 0. 113 34 2.765 * 2.705 * 1.720 * 35 1.105 * 2.840 ^ 1.04δ * 36 1.695 * 2.873 χ 1.219 » 37 2.837 * 2.712 χ 1.482 * 38 1.828 * 2.706 * 39 0.364 * 3.204 I 1.620 * 40 1.273 * 2.607 * 0.043 41 1.862 * 2.478 * 1.341 * 42 1.736 * 2.916 * 1.215 » 43 0.963 * 2.475 * 0.032 44 2.875 * 2.822 * 1.218 » 45 0.030 1.371 * 0.029 48 2.728 * 2.979 * 1.914 * 47 0.074 2.548 * 48 0.169 * 2.836 * 49 2.977 * 2.890 * 0-150 50 2.764 * 3.165 * 1.679 * ----------------：---------装-------ΤΓ------.^---- (諳先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺茂適甲中园园家丨?:準（CNS)甲4現格（210 X 297公皆） 30 319S97 AG B6 五、發明説明（29) 表1 3 逼 經濟部中央標準局R工消費合作吐印； 固相抗原 Plb9*3 B-l N-U 51 0.742 * 2.442 * 1.014 * 52 0.595 * 3.128* 1.336 * 53 2.804 * 2.622 * 1.570 * 54 1.705 * 2.662 * 1.355 * .55 0.065 1.620 * 56 1.624 * 2.781 * 0.778 * 57 0.042 2.634 * 58 0.231 * 2.440 * 0.026 59 2.354 * 2.271 * 1.730 * 60 3.259 * 2.299 » 0. 190 61 2.161 * 2.283 * 1.120 * 62 1.725 * Ε.085 * 1.663 * 63 1.957 * 2.201 * 1.786 * 64 G.997 * 1.998 x 1.124 r 65 2.876 * 2.363 * 1.526 * 66 2.989 * 2.537 χ I.815 * 67 2.883 * 2.745 t 1.783 * 68 2.414 * 2.482 * 1.388 * 69 2.309 * 2.920 * 1.126 * 70 0.301 * 2.130 * 0.144 71 1.305 * 2.458 * 0.670 * 72 2.594 » 2.811 t 0.726 * 73 2.009 » 2.512 * 1.087 * 74 0.225 * 2.541 J 75 0.842 * 2.327 x 0.844 » 76 1.296 * 2.529 t 0.472 * 77 0.149 * 1.758 * 78 2.683 * 2.218 * 2.179 * 79 1.076 * 2.438 * 0.090 80 3.018 » 2.146* 1.696 * 81 0.511* 2.586 * 0. 167 82 1.354 * 2.338 * 1.245 * 83 0.557 * 2.008 * 0.052 34 3.068 * 2.583 * 】.804 * 85 3.120 * Z.420 a： 1.577 * 86 3.290 * 3.423 * 1.622 x 87 3.043 * 3.418 * 1.441 t 88 1.665 ^ 2.732 * 0.951 * 89 0.159 ^ 2.896 * 0.053 90 2.766 * 3. 146 3： 1.S66 * 91 2.438 t 3.528 * 0. 138 92 2.791 * 2.754 * 1.687 * 93 0.715 * 2.713 ， 0.492 * 94 3.026 * 3.376 * 0.577 » 95 0.654 * 3.397 * 0.046 96 0.457 * 1.949 » 0.081 97 0.143 * 2.244 * 0.053 98 1.545 * 2.416 ϊ 0.781 * 99 0.539 » 2.029 * 0.595 x 100 2.541 x 2.199 * 1.283 * ------------------------装-------tr------ (請-1¾¾背而之注意事項再塡冩本頁) 本+¾•張又吱適用中(Ov'S)甲.1 «丨各（210 X ‘297公if ) 3t 219897 Λ 6 Β6 五、發明説明（30 ) 經濟部中央櫺準局員工消費合作社印划枚 表1 3續 固相抗原 Plb9*3 Β-1 Ν~14 101 2.778 * 2.466 * 1.310 * 102 2.761 * 2.287 * 1.875 本 103 2.474 * 2.029 * 104 2.184 * 2.313 * 0.541 * 105 0.949 * 1.986 * 0.987 * 106 0.065 0.678 χ 0.058 107 1.279 * 2.084 * 108 2.649 * 2.334 * 1.274 χ 109 2.368 * 2.314 * 1.741 * I 10 1.698 * 2. 168 * 1 11 1.092 * 2.962 * 0.953 * 112 2.064 * 3.027 * 1.601 * 113 2.865 X 3.368 * 114 0.128 3.990 * 0.031 115 2.963 a： 3.285 * 1 16 2.852 I 3.045 * 1.976 » 117 1.173 * 2.943 » 118 2.809 * 3.194 * 1.645 » 119 2.152 * 3.459 * 120 1.930 * 2.842 * 1.640 » 121 0.716 * 3.095 * 0.785 * 122 1.729 * 3.138 * 0.037 123 2.874 » 3.990 * 1.872 * 124 0.769 * 2.973 * 125 2.711 * 3.697 * 0.121 126 2.619 * 2.836 * 1.871 * 127 1.628 * 2.620 * 0.027 128 2.758 » 3.0S3 丈 1.646 * 129 2.613 * 3.129* 0.054 130 0. 171 τ 2. 142 * 131 2.965 * 3.259 * ΐ.719 * 132 3.037 * 3.482 * 1.682 * 133 2.625 s： 3.670 * 134 2.661 ^ 3.035 * 135 1.046 * 2.811 * 136 2.800 ^ 3.990 * 1.171 * 137 2.945 * 3.658 * 0.028 138 0.057 1.296 * 133 1.680 < 2.466 * 1.686 * 陰性 7/139 0/1 28/118 ( 5.0 23.7 (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) .裝- 訂 .線 本紙張尺度適闬中固國甲4说格mo X _297 ） ?2 219897 A 6 B6 五、發明説明（31) 表1 4 B — 1陽性検体1 3 9検体 (本発明與B — 1之比較) P 1 b 9 ♦ 3 B- 1 + (%) + (%) 1 3 2 (95.5) —(%) 7 ( 5.0) Total 1 3 9 (100) (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) .裝. 表1 5 B — 1陽性検体〗3 9検依中11 1 8検体 (本発明與N —〗4之比較） N - 1 4 P 1 b9*3 + ( %) -(%) Total + (%) 9 0 (76.3) 2 5 (21.2) 1 1 5 (97.5) |-(%) 0( 0.0) 3 ( 2.5) 3 ( 2. 5) Total 9 0 (76.3) 2 8 (23.7) 1 1 8 (100) 訂. 線. 經濟部中央標準局員工消費合作社印" 本纸張又度適用中sa家浮氓（CNS)甲1規格（21ί) X 297公貨） oq 219897 Λ 6 Β6 五、發明説明（32 ) 經濟部中央標準局員工消費合作社印於 表1 6 RFR8性5 0検体 No. N-14 B-1 Plb9*3 No· N-14 B-l Plb9*3 [ 0.014 0. 138 0.172 26 0.010 0.290 0.093 2 0.835* 3.397^ 2.644» 27 0.012 0.045 0.074 3 0.014 0.057 0.924* 28 0.025 0. 172 0.121 4 0.015 0.156 0.112 29 0.008 0.025 0.099 5 0.010 0. 134 0.214 30 0.008 0.142 0.263 8 0.006 0.058 0.045 31 0.018 0. 060 0.166 7 0.008 0.033 0.081 32 0.013 0.064 0.082 8 0.009 0. 167 0.093 33 0.013 0. 117 0. 122 9 0.015 0.187 0.160 34 0.014 0.237 0. 105 10 0.013 0.041 0. 105 35 0.306» 2.921» 0.95U 11 0.018 0.094 〇· m 36 0.009 0. 12! 0.086 12 0.007 0.075 0.048 37 0.008 0.069 0. 158 13 0.010 0.046 0.083 38 0.090* 0.988« 0.286 14 0.011 0.051 0.083 39 0.017 0.046 0.146 15 0·037χ 0. 173 0. 156 40 0.008 2.S9S: 1·892: 16 0.009 0.025 0.136 41 0.008 0.062 0.079 17 0.012 0.212 0. 195 42 0.009 0.067 0.055 18 0.011 1.671* 0.488* 43 0.765x 3.158* 2.539^ 13 0.387* 2.888* i.034* 44 0.024 0.706* 0.178 20 0.019 0.600* 0.282 45 0.008 0.652» 0.119 21 0.01S 0.099 0. 149 46 0.014 0.077 0.107 22 0.017 0.333 0.258 47 0.013 0-023 0.069 23 0.011 0.202 0.074 48 0.01 1 0.051 0.091 24 0.009 0.042 0.137 49 0· ill8 0.476 0.087 25 0.006 0-037 0.0S7 Cut 26 0.003 0.066 0. 101 off 0.035 0.541 0.319 ------------------------^------tr------Mil (請毛間讀背面之注意事項再塡寫本頁) 本纸張尺度通用中(CNS)甲；哫咚（210 X '297二'兌Ί 34 219897 A 6 B6 五、發明説明（33) 表1 了 RF陽性5 0検体（本発明铒B—1之比較) B - 1 Ρ1b9*3 + (%) -(°/〇 ) Total + (%) 6 (12.0) Μ 2. 0) 7 (14. 0) ~~ (%) 4 ( 8. 0) 3 9 (78.0) 4 3 (86.0) Total 1 0 (20.0) 4 0 (80.0) 5 0 (100) (諳先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 表1 8 R FPi性5 0検体（本発明與N — 1 4之比较) N — 1 4 Ρ 1 b 9 * 3 + (%) -(% ) Total + (°/〇) 4( 8.0) 3 ( 6. 0) 7 (14.0) —(%) 2( 4.0) 4 1 (82.0) 4 3 (86.0) Total j 6(12.0) 4 4 (88.0) 5 0 (100) 本纸張尺茂適用中國Η家作苹（C,vs)甲.ί峴格（210 X 297二'兌） 95 經濟部中央標準局員工消費合作社印- 219897 Λ 6 Β6 五、發明説明（34) 經濟部中央標準局員工消費合作社印"'*^ 表1 9 健常人1 0 0例 検体No. 固相抗设 検体Mo. raw抗原 Plb9*3 B-l N-14 PlbP*3 B-l N-U 101 0. 165 0.495 0.016 151 0.039 0.028 0.005 102 0. 175 0.219 0.012 152 0.251 0. 178 0.016 103 0.071 0.314 0.012 153 0.210 0-078 0.018 J04 0.066 0.123 0.010 154 0.107 0. 163 0.008 105 0.098 0.175 0.012 I5o 0.058 0.261 0.004 ]〇6 0. 155 O.OB1 0.013 156 0. 10B 0. 141 0.018 107 0.248 O.OG5 0.007 157 0.088 0.072 0.002 108 0.389 G.086 0.012 158 0.0S3 0. 109 0.009 109 0.076 0.146 0.G2! 159 0.052 0.024 0.023 110 0. 102 0-170 0.020 J60 0.095 0.207 0.014 111 0.058 0.214 0.016 181 0.042 0.022 0.007 112 0.070 0.188 0.013 162 0.051 0.039 0.007 113 0. 125 0.066 0.013 163 0. 143 0. 119 0.007 1J4 0.052 0.151 0.006 】64 0.082 1 0.031 0.005 I 15 0.083 0.243 0.014 165 0.080 0.057 0.016 116 0.068 0.067 0.007 166 0.074 i 0.049 0.014 117 0,048 0.204 0.015 167 0.070 0.033 0.008 118 0.093 0.208 0.009 168 0.058 0.088 0.006 119 0.038 0.053 0.006 J69 0.054 0.037 0.016 Ϊ20 0.074 0. 132 Γ 0.013 170 0.057 0.054 0.011 121 0. 128 0.574 0.016 171 0.053 0. 145 0.011 122 0.068 0.033 0.008 172 0. 152 0. 236 0.011 123 0.063 0.449 0.009 173 0.141 G.036 0.004 124 0.053 0.068π 0.010 174 0.053 0. 134 0.006 125 0.093 0.124 0.014 175 0.082 0.053 0.006 126 0.051 0. 109 0.008 176 0.451 0. 182 0.012 127 0.042 0.062 0.013 177 0.244 0.090 0.005 128 0.049 0.127 Ο.0Ϊ3 ]78 0.066 0.094 0.008 129 0.052 0.023 0.012 179 0.075 0.040 0.006 130 Q.oai 0.162 0.013 180 0.090 0.059 0.005 131 0.070 0. 161 0. 032 181 0.090 0. 187 0.007 132 0.056 0.083 0.014 132 0.056 0.046 0.031 133 0. 136 0.069 0.014 183 0.051 ； 0.067 O.Q07 134 0.077 0.311 0.027 m G.04I 0.025 0.005 135 0.049 0.059 0.011 185 0.093 D. 131 0,007 136 0.117 0. 177 0.0M 186 0.085 0.07δ 0.005 137 0.050 0.064 0.008 187 0.057 0. 1 16 0.005 138 0.080 0.0S1 0.012 188 0.063 0.092 0.004 139 0.063 0.192 0.014 189 0.067 0.056 0.012 140 0.084 0.042 0.017 190 0.034 0. 132 0.005 14J 0.039 r 0.087 0.012 191 0.051 0. 106 0.010 142 0.043 0.073 0.009 192 ί 0.IS2 0.096 0.014 143 0.083 0.107 0.008 193 0. 100 0.050 0.009 !44 0.084 0.198 0.014 194 0.050 0.045 0.007 145 0.068 0.029 0.008 195 0.055 0.050 0.007 146 0.069 0.087 0.010 196 0.075 0.804 0.007 147 0.090 0.035 0.028 197 0.047 0.061 0.007 M8 0.065 0_08θ 0.009 198 0.159 0.084 0.011 149 0.054 0.085 0.005 199 0.053 0.084 0.009 150 0.208 0.250 0.004 200 0.043 0.041 0.007 (請也闇讀背面之注意事項再塡寫本頁) 本纸張又度通用中囚國家漂準（CNS)甲.i現恪（210 X 297 ) 319897 μ Β6 五、發明説明（35) [發明之效果] 由實施例之结果亦可得知，本發明之H C V抗髏之檢出試 藥優於檢出率及持異性。 再者，依照本發明之序列1所示之肽，因構成該肽之胺 基酸少，由化學合成即可獲得該肽，而可排除在基因重組 所製之肽抗原多發生之非特異反應。並且以1〜2種程度之 少數肽即可實現充分之檢出率，因此在經濟上亦有利。 此外，依照本發明之肽由於導入有Sulfo-SMCC所代表之 交聯劑，與原來^無交聯劑]之肽相較，可提高對HCV核心 抗體之反應性。再者，若透過所導入之交聯劑與如HSA等 血清蛋白（作為載證蛋白）結合，則可獲得良好反應性並可 實現非持異反應之抑制。 如上所述，依照本發明可實現HCV感染之早期且正確之 檢査。 [序列表] 序列之编號：1 序列之長度：10 序列之_型：胺基酸 序列之r冓形（拓撲）：直鏈狀 序列之種類：肽 其他資訊：對HCV核心領域之抗體及反應性之狀 ¥ 歹U ： A r g Leu G1y Pro A r g Leu Gly A rg A r g Pro 1 5 10 (請毛聞汸背面之注-f項再塡寫本頁) ·-> 丁 經濟部中央標準局員工消費合作社印·s 經濟部中央標準局員工消費合作社印" 219897 / λ6

Bb 五、發明説明（36 ) 序 列 之 编號 : 2 序 列 之 長度 : 10 序 列 之 類型 : 胺 基 酸 序 列 之 _形 二 直 鐽 狀 序 列 之 種類 肽 其 他 資 訊： 對 HCV核心領 域 之 抗 體 及 反 應 性 之 肽 序 列 ; Arg Ly S G 1 y Pro A r g L e u G 1 y A r g A r g P r ο 1 5 1 0 序 列 之 编號 3 序 列 之 長度 10 序 列 之 類型 胺 基 酸 序 列 之 構形 ： 直 m 狀 序 列 之 種類 ： 肽 其 他 資 訊： 對 HC V核心領 域 之 抗 體 及 反 應 性 之 肽 序 列 Arg A r δ G 1 y Pro A Γ g L e u G 1 y A r g A r g P Γ 0 1 5 1 0 序 列 之 编號 ： 4 序 列 之 長度 * 1 1 序 列 之 類型 ； 胺 基 酸 序 列 之 構形 直 鏈 狀 序 列 之 種類 * 肽 其 他 資 訊： 對 HCV核心領 域 之 抗 體 及 反 應 性 之 肽 序歹丨j : Gin Arg Ly s Thr Ly s Arg Ser Thr Asn Arg Ar g 1 5 10 (-也^-^而之注--卜項再場寫本頁) 衣纸張又適用中阈阈家(CNS)田1規丨各（2LU X 297 X兌） 219897 Λί；

Bti 五、發明説明（37 ) 序列之编號：5 序列之長度：19 序 列 之 類型 胺 基 酸 序 列 之 _形 直 鐽 狀 序 列 之 種類 ： 肽 其 他 資 訊： 對 HCV核心 領 域之 抗體 及反 應性之肽 序 列 : Thr G i η G 1 η A Γ g L y s Thr L y s Arg Ser Thr A 1 5 10 A r g A r δ Ar g S e r L y s A s n G 1 u L y s 15 序列之编號：6 序 列 之 長度 ： 17 序 列 之 類型 ： 胺 基酸 序 列 之 :溝形 直 鐽狀 序 列 之 種類 肽 其 他 資 訊： 對 HC :V核心 領 域之 抗證及反應性之肽 序 列 ： Thr A r g A r g L e u G 1 y Pro A r g Leu Gly A r g 1 5 10 Pro A 1 a Leu Μ e t A 1 a Va 1 15 經濟部中央標準局員工消费合作社印l,i仏 序列之编號：7 序列之長度：19 序列之類型：胺基酸 序列之_形：直鐽狀 木纸張遇用中^囚孓怍氓（CNS)甲.4蜆格（210 X 297公穿） i A6 B6 219897 五、發明説明（38 ) 序列之種類：肽 其他資訊：對H C V核心領域之抗證及反應性之肽 經濟部中央標準局員工消費合作社印β 序 列 : Va 1 Val Pro A r g L y s G i y ? r o A r g L e u G 1 y A r g 1 5 10 A r g Pr 0 A 1 a Leu M e t A 1 a V a 1 L y s 15 序 列 之 m 號 • 8 序 列 之 長 度 = 1 9 序 列 類 型 * 胺 基誌 序 列 之 _形 直 鏈狀 序 列 之 锺 類 肽 其 他 資 訊 = 對 HCV核心領 域 之 抗 證 及 反 應 性 之 肽 序 列 : Pr 0 Th e A r g A r g A r g G 1 y P Γ 0 A r g L e u G 1 y A r g 1 5 10 Ar g P r 0 A 1 a Leu e t A la V a 1 L y s 15 本纸張又度述用中?3阀孓丨？^(CNS)甲！叹洛（LUO X 297公；S·)

Claims (1)

1. 修正 本年月曰補充82· 10麴 A7 ( B7 C7D7 82. 10. 26 修正龙 請專利範圍 1. 一種用於C型肝炎體外檢査之套組，'其包括：含有序 序列 1 : A「g X a a Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro (其中，Xaa為選自Leu, Lys及Arg所組成一群中之胺基酸） 之肽，或該肽添加下述序列2及/或序列3 序列 2 : Gin Arg Lys Th「Lys Arg SeFThr Asn Arg Arg 序列 3 : Thr Gin Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg Arg Ser Lys Asn Glu Lys 之肽所得之複數肽者。 2. 如申請專利範圍第1項所定義之套組，其中之肽偽與 間隙分子及/或載體蛋白结合者。 3. 如申請專利範圍第2項所定義之套組，其中該載髏蛋 白為人•血清白蛋白者。 4. 一種適於C型肝炎之體外檢査方法，乃對於含有 序列 1 : Arg Xaa Gly Pro Arg Leu Gly Arg Arg Pro (其中，Xaa為選自Leu、Lys及Arg所組成一群中之胺基酸） 之肽或該肽添加下述序列2及/或序列3 序列 2 : Gin Arg Us Thr Us Arg Ser Thr Asn Arg Arg 序列 3 : Thr Gin Gin Arg Lys Thr Lys Arg Ser Thr Asn Arg Arg. Arg Ser Lys Asn Glu Lys (請先W讀背面之注意事項再堉寫本頁) 經濟部中央櫺準局8工消費合作社印製 者 鐙 Bflu 抗 之 性 應 反 出 檢 以 予 肽 數 複 之 尋 所 肽 之 本紙張尺度通用中a國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐）