TW202202515A

TW202202515A - 用於修復黏膜損傷或皮膚創傷的多肽及其應用

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Publication number: TW202202515A
Application number: TW110124191A
Authority: TW
Inventors: 耿福能
Original assignee: 大陸商四川好醫生攀西藥業有限責任公司
Priority date: 2020-07-01
Filing date: 2021-07-01
Publication date: 2022-01-16
Also published as: AU2021302188A1; US20230295233A1; JP2023531282A; IL299498A; WO2022002186A1; CN113880915A; CA3184710A1; CN116133673A; KR20230031898A; EP4177259A1; CN113880915B

Abstract

本發明涉及用於修復黏膜損傷或皮膚創傷的新型多肽及其應用，本發明的多肽與已知多肽無同源性，而且能夠在體內和體外均穩定存在，具有調控幹細胞增生和分化修復黏膜損傷或皮膚創傷的效果；以及涉及所述新型多肽通過調控幹細胞增生和分化修復黏膜損傷或皮膚創傷的用途，以及用於預防、減輕或治療胃腸疾病的用途。

Description

用於修復黏膜損傷或皮膚創傷的多肽及其應用

本發明涉及用於修復黏膜損傷或皮膚創傷的新型多肽及其應用，本發明的多肽與已知多肽無同源性，而且能夠在體內和體外均穩定存在，具有調控幹細胞增生和分化，修復黏膜損傷或皮膚損傷的效果；以及涉及所述新型多肽通過調控幹細胞增生和分化修復黏膜損傷或皮膚創傷的用途，以及用於預防、減輕或治療胃腸疾病的用途。

皮膚創傷和/或黏膜損傷是很多疾病的共同病理特徵。皮膚創傷或皮膚損傷是指正常皮膚(組織)在外界致傷因子如外科手術、外力、熱、電流、化學物質、低溫以及機體內在因素如局部血液供應障礙等作用下所導致的損害。皮膚損傷常伴有皮膚完整性的破壞以及一定量正常組織的丟失，同時，皮膚的正常功能受損。也稱為傷口或者創傷。目前有包括鹼性成纖維生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子、粒-巨噬細胞集落刺激因子及生長激素等蛋白質/多肽藥物具有明顯的修復創面、護膚、抗皺和防衰老作用，但這些蛋白質/多肽藥物的胺基酸序列較長導致製備成本高、穩定性較差等缺點，因而其應用受到了一定的限制。

人體黏膜是指呼吸系統、消化系統、生殖泌尿系統等腔道或囊狀肌性器官的內層，是僅次於皮膚的人體第二大屏障，包括口腔、咽、氣管、食道、胃、腸道、陰道、膀胱等，這些器官的管壁或囊壁均有共同的分層規律，又具有與其功能相適應的特點，其胚胎起源、組織結構、病理過程、臨床表現、愈後等均有共同特點。

慢性胃炎是一種胃黏膜慢性發炎，是消化內科的常見病和多發病，臨床上將不同原因引起的胃黏膜慢性發炎(即在病理上表現為單核細胞和淋巴細胞浸潤)和(或)腺體萎縮性病變稱為慢性胃炎。以胃黏膜上皮和腺體萎縮為特徵的慢性萎縮性胃炎(chronic atrophic gastritis,CAG)，其起病隱匿、病程長、症狀無特異性、難以治癒，在慢性胃炎中占11%~31%，好發於中老年人群，發病和年齡有一定的關聯但與性別沒有關係，發病緩慢且病勢纏綿，遷延難愈，治療棘手。慢性萎縮性胃炎是胃癌發生發展重要階段被視為胃癌前病變，1978年世界衛生組織% WHO)已將CAG列為癌前狀態，其常伴假幽門腺化生和腸上皮化生，或不典型增生階段等癌前病變。尤其是伴有彌漫的腸上皮化生或不典型增生者，癌變可能性更大，業界大多數專業人士都贊同通過慢性淺表性胃炎、萎縮性胃炎、腸上皮化生、異型增生、腸型胃癌這樣的發展模式。故早期準確的診斷和治療對慢性萎縮性胃炎患者有著重要的意義。目前現代醫學治療本病主要以改善症狀、手術介入為主，在腺體萎縮、腸化生方面尚無良策。CAG為慢性胃炎轉變為胃癌的重要階段，積極治療CAG對預防其癌變、降低胃癌發病率有著深遠意義。尋求萎縮性胃炎的有效治療方法，是更好地開展胃癌預防的重要措施之一。

黏膜組織的損傷臨床上會導致慢性胃炎和消化道潰瘍等胃腸道疾病。黏膜上皮的修復有修復(restitution)和再生(regeneration或renewal)兩種不同的機制(Cur.Med.Chem.,2008,15,3133-3144)：修復或恢復一般在損傷後幾分鐘內就開始，通過細胞遷移快速修復淺表病變；再生是通過幹細胞和祖細胞的分化和增生持續再生，持續數天至數月。

表皮生長因子(EGF)是一種由53個胺基酸殘基組成的多肽，廣泛存在於多種組織器官和體液中，其可促進上皮細胞增生從而對皮膚起到保護作用。表皮生長因子主要是促進皮膚組織細胞的增生與生長，使新生的細胞替代衰老的細胞，從而起到抗衰老和護膚保健等功能。表皮生長因子已經被報導具有修復創面作用，因皮膚創面需要消毒、清創時，會應用含碘或雙氧水的消毒劑，EGF在此條件下不穩定。生長因子與胃腸吻合口癒合有關(J.Surgica lRes.2014；17：202-210)，但是EGF經胃腸口服投予時，進入體內後會發生降解，不能達到治療效果。

因此，需要一種體內外穩定、能夠治療皮膚和/或黏膜損傷，特別是胃腸道黏膜損傷的肽類物質。

為了克服現有技術的不足和缺陷，本發明的目的在於提供一類新型多肽。

第一態樣，本發明提供式(I)的化合物或其生理學上相容的鹽，其中所述式(I)的化合物如下：

H-Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Xaa₄-Xaa₅-Val-Xaa₆-Xaa₇-Xaa₈-Xaa₉-Xaa₁₀-Xaa₁₁-OH(I)

其中

Xaa₁為Pro、Gly、Ala或缺失；

Xa_a2為Ala、Leu、Ile、Gly、Cys、Ser或缺失；

Xaa₃為Ala、Pro、Gly、Leu、Ile、Cys、Ser或缺失；

Xaa₄為Glu、Gln、Asp、Asn、Leu、Ile、Val或缺失；

Xaa₅為Pro、Gly、Ala、Val或缺失；

Xaa₆為Pro、Gly或Ala；

Xaa₇為Leu、Phe、Val、Ala、Tyr、Glu、Lys、Asp、Ile、Met或缺失；

Xaa₈為Val、Leu、Gln、Ile、Met或缺失；

Xaa₉為Lys、Arg、His、Asp、Val或缺失；

Xaa₁₀為Glu、Gln、Asp、Asn或缺失；以及

Xaa₁₁為Glu、Asp、Asn、Gln或缺失，

條件是：Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃、Xaa₄、Xaa₅、Xaa₇、Xaa₈、Xaa₉、Xaa₁₀和Xaa₁₁中至多有9個是缺失的。

在一實施例中，X_aa5為Pro。

在一實施例中，X_aa6為Pro。

在一實施例中，X_aa7為Leu。

在一實施例中，式(I)化合物具有以下式(II)結構，

H-Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Xaa₄-Pro-Val-Pro-Leu-Xaa₈-Xaa₉-Xaa₁₀-Xaa₁₁-OH(II)，

其中

Xaa₁為Pro、Gly、Ala或缺失；

Xaa₂為Ala、Leu、Ile、Gly、Cys、Ser或缺失；

Xaa₃為Ala、Pro、Gly、Leu、Ile、Cys、Ser或缺失；

Xaa₄為Glu、Gln、Asp、Asn、Leu、Ile、Val或缺失；

Xaa₈為Val、Leu、Gln、Ile、Met或缺失；

Xaa₉為Lys、Arg、His、Asp、Val或缺失；

Xaa₁₀為Glu、Gln、Asp、Asn或缺失；以及

Xaa₁₁為Glu、Asp、Asn、Gln或缺失。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₁為Pro或缺失；較佳為Pro。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₂為Ala或缺失；較佳為Ala。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₃為Ala、Gly或缺失；較佳為Ala。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₄為Glu、Gln、Asp或缺失；較佳為Glu、Asp或Gln。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₈為Val或缺失；較佳為Val。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₉為Lys、Arg或缺失；較佳為Lys或缺失。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₁₀為Glu、Gln或缺失；較佳為Gln。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₁₁為Asp或缺失；較佳為Asp。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃和Xaa₄中有一個是缺失的；或者有兩個是缺失的；或者有三個是缺失的；或者都是缺失的。

在一實施例中，式(I)或(II)中的Xaa₈、Xaa₉、Xaa₁₀和Xaa₁₁中有一個是缺失的；或者有兩個是缺失的；或者有三個是缺失的；或者都是缺失的。

在一實施例中，所述化合物選自本發明化合物1-73中任一個。

在一實施例中，所述化合物選自：

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物1)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys(化合物3)；

Pro-Ala-Ala-Gln-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物10)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物26)；

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物27)；

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物30)；

Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物31)；

Pro-Val-Pro-Leu(化合物32)；

Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物28)；

Pro-Ala-Ala-Asp-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物11)；

Pro-Ala-Gly-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物48)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Glu-Asp(化合物57)；或

Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物38)。

為方便起見，在本申請中描述本發明的化合物時，省略左側的H和右側的OH。

在一實施例中，所述化合物為Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物1)。

第二態樣，本發明提供一種修復黏膜損傷的方法，所述方法包括對受試者投予本發明的化合物或其生理學上相容的鹽或使黏膜損傷與本發明的化合物或其生理學上相容的鹽接觸。在一實施例中，所述修復是通過調控幹細胞增生和分化進行的。

在一實施例中，所述黏膜損傷是消化系統、呼吸系統等腔道內黏膜損傷。

消化系統黏膜損傷與口腔、食道、胃腸疾病相關，所述口腔疾病包括口腔潰瘍、口腔炎、牙齦炎、牙周炎等；所述食道疾病包括食管炎、食管潰瘍等；所述胃腸疾病包括慢性胃炎、慢性萎縮性胃炎、急性胃炎、胃十二指腸潰瘍、功能性胃腸道疾病、消化不良、癌前病變、消化系統腫瘤、胃腸道出血、胃食管返流疾病、急慢性腸炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩病和放化療引起的黏膜損傷，但不限於此。

在較佳的實施例中，所述消化道黏膜包括胃黏膜和腸黏膜。在較佳的實施例中，慢性胃炎包括慢性萎縮性胃炎。在較佳的實施例中，所述黏膜損傷是由刺激性物質或藥物、應激狀態引起的胃黏膜損傷。所述刺激性物質如鹽酸、乙醇或酒精等，所述藥物例如非類固醇類抗炎藥阿司匹林或吲哚美辛等。

本發明提供一種預防、減輕或治療消化道疾病或消除發炎水腫的方法，所述方法包括對受試者投予本發明的化合物或其生理學上相容的鹽。所述消化道疾病包括口腔、食道、胃腸疾病相關，所述口腔疾病包括口腔潰瘍、口腔炎、牙齦炎、牙周炎等；所述食道疾病包括食管炎、食管潰瘍等；所述胃腸疾病包括慢性胃炎、慢性萎縮性胃炎、急性胃炎、胃十二指腸潰瘍、功能性胃腸道疾病、消化不良、癌前病變、消化系統腫瘤、胃腸道出血、胃食管返流疾病、急慢性腸炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩病和放化療引起的黏膜損傷；但不限於此。在一實施例中，所述消化道疾病的預防、減輕或治療是通過調控幹細胞增生和分化進行的。所述方法通過本發明的化合物或其生理學上相容的鹽對胃黏膜或腸黏膜等消化道黏膜起到保護作用或修復胃黏膜或腸黏膜等消化道黏膜的損傷，從而起到預防、減輕或治療胃腸疾病的作用。

本發明提供一種修復黏膜或皮膚創面的方法，所述方法包括對受試者投予本發明的化合物或其生理學上相容的鹽。在一實施例中，所述黏膜或皮膚創面的修復包括調控幹細胞增生和分化。

在上述本發明的方法中，本發明的化合物或其生理學上相容的鹽是通過口服、注射、皮下等方式投予的。

第三態樣，本發明提供一種修復皮膚創傷的方法，所述方法包括使皮膚創傷與本發明的化合物或其生理學上相容的鹽接觸。在較佳的實施例中，所述皮膚創傷與表皮發炎、機械及手術創面、燒傷及燙傷、潰瘍、瘺管、褥瘡、放化療引起的皮膚損傷相關，但不限於此。在一實施例中，所述皮膚創傷是指正常皮膚在外界致傷因子如外科手術、外力、熱、電流、化學物質、低溫以及機體內在因素如局部血液供應障礙等作用下所導致的損害。在一實施例中，所述皮膚創傷常伴有皮膚完整性的破壞以及一定量正常組織的丟失。在另一實施例中，所述皮膚創傷包括皮膚的正常功能受損。在一實施例中，所述皮膚創傷的恢復是通過調控幹細胞增生和分化進行的。

本發明提供一種促進HaCAT細胞增生的方法，所述方法包括使所述細胞與本發明的化合物或其生理學上相容的鹽接觸。

第四態樣，本發明提供一種使損傷的血管再生的方法，所述方法包括使損傷的血管與本發明的化合物或其生理學上相容的鹽接觸。在較佳的實施例中，所述損傷的血管包括消化道黏膜損傷和皮膚創傷導致的血管損傷。

第五態樣，本發明提供一種藥物、食品、保健品或化妝品、日用品組合物，所述組合物包括本發明的化合物或其生理學上相容的鹽以及生理學上可接受的載劑。在一實施例中，所述生理學上可接受的載劑包括醫藥上可接受的載劑或化妝品可接受的載劑。所述藥物食品、保健品或化妝品、日用品組合物可以按照製劑學或化妝品習用技術製備，包括將作為活性成分的本發明的化合物與載劑混合，按照習用技術製成所需要的劑型。可以根據需要，將本發明的組合物配製成口服施用製劑、黏膜施用製劑、注射製劑、吸入製劑和外用製劑。

本發明的多肽與已知多肽無同源性，便於人工多肽合成以獲得高純度多肽，與表皮生長因子多肽相比本發明的多肽由於僅由至多12個胺基酸殘基組成在體內穩定，而且本發明的多肽能促進幹細胞增生分化，特別是能促進胃類器官的增生和分化，參與並調控胃上皮幹細胞的增生和分化，從而可對胃腸幹細胞，表皮幹細胞損傷進行修復，具有顯著的減輕諸如慢性胃炎及消化道潰瘍的胃腸疾病病理發展、消除發炎水腫、促進消化道黏膜損傷修復和皮膚創傷修復、縮短創面癒合時間、調解免疫功能等作用。此外，本發明的多肽用於體表皮膚創面時即使經碘製劑或雙氧水消毒之後也能夠起作用或者在人工胃液、人工腸液等中也能穩定存在，而表皮生長因子用於體表皮膚時，經碘製劑或雙氧水消毒之後結構會破壞，不能發揮作用。

圖1為多肽固相合成步驟的示意圖；

圖2為化合物1對乙醇誘導的小鼠胃潰瘍的抗潰瘍作用；

圖3為化合物1對促進胃類器官的增生和分化的結果；

圖4為化合物1對促進胃類器官的分化的結果；

圖5為化合物1對慢性萎縮性胃炎小鼠的治療作用；

圖6為化合物1對慢性萎縮性胃炎大鼠胃上皮幹細胞的影響；

圖7為化合物1對慢性萎縮性胃炎大鼠的治療作用；

圖8為化合物1對HaCAT細胞的促增生作用；

圖9為斑馬魚腸下血管面積分析部位示意圖；

圖10為經本發明化合物處理後的斑馬魚腸下血管面積典型圖；以及

圖11為經本發明化合物處理後的斑馬魚腸下血管分支數。

術語“生理學上相容的鹽”是指生理學上相容的(即藥理學上可接受的)並且對將被施用本發明化合物的個體基本上無毒的鹽形式。本發明化合物的生理學上相容的鹽包括由適宜的、無毒的有機或無機酸或無機鹼形成的習用的和化學計量的酸加成鹽或鹼加成鹽。

術語“受試者”是指動物，較佳為哺乳動物，最佳為人。具體地講，術語“受試者”涉及具有皮膚創傷和/或黏膜損傷的哺乳動物或人。熟習此項技術者應理解，本發明的皮膚創傷和/或黏膜損傷的修復可出於美容目的(即非治療性目的)和治療性目的施用。為此，本申請的術語“皮膚損傷”還包括出於美容目的修復的皮膚損傷例如，皺紋(例如紫外線照射導致的皺紋)、皮膚紋、裂縫、腫塊、大毛孔(例如與附件結構如汗腺管、皮脂腺或毛囊相關的)，或不平或粗糙，皮膚失去彈性(功能性皮膚彈性蛋白喪失和/或失活)、下垂(包括眼部和下頜浮腫)、皮膚硬度喪失、皮膚緊實度喪失、皮膚變形後的回復能力喪失、變色(包括黑眼圈)、斑皰、膚色灰黃、色素過量皮膚區域例如老年斑和雀斑、角質物、異常的分化、過度角質化、彈性組織變性、膠原蛋白的破壞，以及皮膚角質，真皮，表皮層，皮膚血管系統(例如毛細血管擴張或多叉血管)，以及皮下組織，特別是靠近皮膚的皮下組織中的其它組織變化。

以下是結合具體試驗對本發明的說明，並不是對本發明保護範圍的限制。

表1書寫中所使用到試劑、溶劑的英文名或縮寫

實例1：多肽的化學合成

多肽化合物的合成採用習用固相合成方法，經過樹脂溶脹、取代、脫保護、洗滌、胺基酸溶解、胺基酸活化和縮合過程、洗滌、再脫保護多個循環過程，以及最後裂解和側鏈脫保護。

多肽固相合成步驟示意圖參見圖1。圖1中，Cl-2-Cl-Resin表示2-氯三苯甲基氯樹脂(2-Chlorotrityl Chloride Resin)；Fmoc-Aa(n)等表示9-芴基甲氧基羰基的胺基酸；DIPEA為N,N-二異丙基乙胺；DCM為二氯甲烷；PIP為六氫吡啶；DMF為N,N-二甲基甲醯胺；HOBt為1-經基苯並三唑；DIC為N,N'-二異丙基碳二亞胺；TFA為三氟乙酸；TIPS為三異丙基矽烷。

以下以化合物1(Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp)為例，示出化合物1的合成和純化的方法，所述方法包括步驟1、全保護肽樹脂的製備；2、切割、脫保護；3、純化(換鹽)凍乾。

步驟1、全保護肽樹脂的製備

(1)樹脂溶脹：稱取2-Chlorotrityl Chloride Resin 2.0192g(S=0.73mmol/g)，加入到有篩板的合成管中，用40ml二氯甲烷溶脹30min，抽濾除去二氯甲烷。

(2)製備Fmoc-Asp(OtBu)-樹脂：按樹脂、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、DIPEA，以1：1.5：1.65的莫耳比分別稱取Fmoc-Asp(OtBu)-OH、DIPEA，溶解於二氯甲烷20ml中，加入合成管中。室溫N₂鼓泡震盪1~3小時，直接向反應液中加入甲醇2ml封閉30min。然後分別用二甲基甲醯胺洗滌4次，25ml/次，抽乾樹脂。

(3)脫除Fmoc保護基：向反應器中加入20%六氫吡啶-DMF(v/v)溶液20ml，N₂鼓泡反應20min，抽乾；然後用二甲基甲醯胺洗滌6次，25ml/次，3分鐘/次，抽乾，茚三酮法檢測Fmoc脫除結果。

(4)胺基酸預活化：在250ml圓底燒瓶中加入4.38mmol的Fmoc保護的胺基酸、5.26mmol HOBt、4.60mmol DIC，用1：1的DCM-DMF(v/v)20ml溶解，-5-0℃冰浴攪拌下預活化30~60min。

(5)胺基酸連接：將已活化的保護胺基酸溶液倒入反應器中，補加適量的DCM清洗用具。室溫下N₂鼓泡反應1~3小時，茚三酮法檢測胺基酸連接是否完全，若完全，抽乾。樹脂用二甲基甲醯胺洗滌4次，25ml/次，3min/次，抽乾。每一種胺基酸、縮合劑的用量及具體反應時間見表2。

(6)第一個胺基酸縮合完成後，重複步驟(3)~(5)，按照胺基酸順序延長肽鏈至最後一個胺基酸偶聯完畢。

(7)樹脂肽用二氯甲烷洗滌6次，25ml/次，3min/次，抽乾。

表2胺基酸、縮合劑的用量

步驟2、切割、脫保護

(1)在步驟1的合成管中，加入切割劑(TFA：TIPS：H2O=95：2.5：2.5，v/v)50ml，N2鼓泡反應1.5-3小時。

(2)切割反應完成後，將切割劑抽濾至250ml圓底燒瓶中。真空濃縮至原切割劑體積的三分之一後，加入10倍現有體積的甲基第三丁基醚，攪拌30min。將所得混合溶劑過濾，並用30ml甲基第三丁基醚分別清洗3次後，將所得粗肽產品置於砂芯漏斗在通風櫥中N2吹乾，使溶劑揮發至粗肽為粉末狀。得到粗肽1.87g，粗產率85.1%。

步驟3、純化(換鹽)和凍乾

採用以下層析參數條件A，對步驟2中獲得的粗肽進行HPLC純化。具體而言，用水和/或乙腈溶解步驟2中獲得的粗肽，並經0.45μm濾膜過濾；進樣；用乙腈-水移動相梯度溶離；收集目的肽溶離液；最後進行旋蒸濃縮。

層析參數條件A：

層析柱：YMC-Actus Triart C18 30*250mm；

溶離液A：0.1%(v/v)TFA/H₂O；

溶離液B：乙腈；

流速25ml/min；

紫外檢測波長220nm；

表3梯度溶離條件

接著採用以下層析參數條件B利用HPLC法對上述步驟所獲得的產品進行換鹽，得到最終的肽化合物1。具體而言，使用95%A1+5%B平衡層析柱；然後進樣；接著採用95%A2+5%B平衡層析柱；用A1和B梯度溶離；收集目的肽溶離液；最後旋蒸濃縮並且冷凍乾燥，得到化合物1(純化收率73.3%，純度100%)。化合物1的結構經MS、¹H-NMR確認。

層析參數條件B：

層析柱：YMC-Actus Triart C18 30*250mm

溶離液A1：0.1M乙酸

溶離液A2：0.025M乙酸+0.1M乙酸銨

溶離液B：乙腈

流速25ml/min

紫外檢測波長220nm

表4梯度溶離條件

以與合成化合物1類似的方式，合成其他化合物。結果參見表5和說明書其他部分。

表5合成的化合物

注釋：雙電荷代表質譜出1/2目標峰，三電荷代表質譜出1/3目標峰；N/A代表稱量有難度，未計實際重量。

化合物1：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.27(d,J=7.6Hz,1H),8.21(d,J=7.8Hz,1H),8.09(d,J=7.5Hz,1H),8.03(d,J=7.9Hz,1H),7.99(d,J=7.4Hz,1H),7.94(dd,J=16.7,8.0Hz,2H),7.58(d,J=6.3Hz,1H),7.51(d,J=8.6Hz,1H),7.16(s,1H),6.70(s,1H),4.48(dd,J=13.3,7.9Hz,1H),4.39(dd,J=8.2,4.2Hz,1H),4.35-4.21(m,6H),4.18-4.03(m,3H),3.71-3.47(m,5H),2.93-2.69(m,4H),2.45-2.32(m,2H),2.25(t,J=7.7Hz,2H),2.08(t,J=7.9Hz,2H),2.01-1.93(m,3H),1.93-1.84(m,14H,AcOH),1.84-1.76(m,3H),1.75-1.57(m,8H),1.54-1.39(m,5H),1.36-1.27(m,2H),1.21-1.10(m,6H),0.91-0.74(m,18H).

化合物3：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.22-8.13(m,2H),8.10(s,1H),7.98(d,J=7.6Hz,1H),7.92(d,J=8.4Hz,1H),7.72(s,1H),7.59(s,1H),4.52- 4.43(m,1H),4.39-4.19(m,6H),4.12-4.04(m,1H),3.89(d,J=5.9Hz,1H),3.67-3.46(m,6H),2.85(dt,J=10.2,6.8Hz,1H),2.80-2.73(m,1H),2.69(s,2H),2.21(t,J=7.4Hz,2H),2.03-1.76(m,14H,AcOH),1.73(d,J=5.5Hz,1H),1.70-1.61(m,4H),1.61-1.52(m,3H),1.47(s,4H),1.26(s,2H),1.20-1.12(m,6H),0.91-0.83(m,9H),0.83-0.77(m,9H).

化合物4：Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,D₂O)δ 4.45-4.16(m,10H),4.04(d,J=8.1Hz,1H),3.93-3.76(m,3H),3.67-3.58(m,1H),3.42-3.28(m,2H),2.94(t,J=7.4Hz,2H),2.72(qd,J=16.4,6.0Hz,2H),2.45-2.27(m,5H),2.27-2.16(m,1H),2.11-1.86(m,17H,AcOH),1.84-1.47(m,8H),1.45-1.25(m,8H),0.91(d,J=6.8Hz,3H),0.89-0.73(m,15H).

化合物5：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,D₂O+D₃COD)δ 4.66-4.62(m,2H),4.40(dd,J=8.1,5.9Hz,1H),4.35-4.21(m,6H),4.03-3.98(m,2H),3.92-3.81(m,2H),3.78-3.71(m,1H),3.62(dt,J=10.3,7.1Hz,1H),3.39-3.30(m,2H),2.96-2.87(m,4H),2.51-2.35(m,3H),2.32(t,J=7.6Hz,2H),2.26-2.19(m,1H),2.10-1.91(m,14H,AcOH),1.91-1.78(m,2H),1.78-1.71(m,1H),1.70-1.58(m,3H),1.53(d,J=3.6Hz,3H),1.42-1.34(m,2H),1.33(d,J=7.2Hz,3H),1.30(d,J=7.2Hz,3H),0.94-0.88(m,6H),0.88-0.83(m,9H),0.82-0.79(m,3H).

化合物8：Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Gly-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.30-8.24(m,3H),8.15(d,J=7.3Hz,1H),8.11-8.03(m,2H),7.94(d,J=7.4Hz,1H),7.88(d,J=8.0Hz,1H),7.80(t,J=9.4Hz,2H),7.59(d,J=6.4Hz,1H),7.17(s,1H),6.70(s,1H),4.44-3.99(m,10H),3.82-3.57(m,7H),2.94-2.69(m,5H),2.47-2.41(m,1H),2.41-2.32(m,1H),2.21(t,J=7.9Hz,2H),2.08(t,J=7.9Hz,2H),2.03-1.79(m,11H,AcOH),1.78-1.26(m,14H),1.19(dd,J=6.9,4.7Hz,6H),0.87-0.76(m,18H).

化合物9：Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Gly-Leu

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.43(d,J=7.6Hz,1H),8.29-8.23(m,2H),8.22-8.14(m,2H),7.81(d,J=8.5Hz,1H),7.75(d,J=7.9Hz,1H),4.32-4.08(m,5H),3.78-3.69(m,4H),3.63(dd,J=16.4,5.6Hz,1H),2.98-2.86(m,2H),2.22(t,J=7.9Hz,2H),2.07-1.92(m,2H),1.92-1.86(m,1H),1.79-1.64(m,4H),1.62-1.54(m,1H),1.50-1.40(m,2H),1.19(dd,J=7.0,1.3Hz,6H),0.86-0.78(m,12H).

化合物10：Pro-Ala-Ala-Gln-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.28(d,J=7.7Hz,1H),8.14(d,J=7.8Hz,1H),8.07(d,J=7.4Hz,1H),8.04(d,J=8.0Hz,1H),8.00(d,J=7.3Hz,1H),7.95(t,2H),7.58(d,J=6.3Hz,1H),7.50(d,J=8.7Hz,1H),7.17(d,J=15.3Hz,2H),6.76(s,1H),6.70(s,1H),4.45(q,J=13.6,7.9Hz,1H),4.39(dd,J=8.3,4.1Hz,1H),4.33-4.20(m,6H),4.20-4.09(m,2H),4.09-4.02(m,1H),3.69-3.47(m,5H),2.86(dt,J=10.2,6.7Hz,1H),2.80-2.62(m,3H),2.46-2.40(m,1H),2.37(dd,J=15.5,2.7Hz,1H),2.14-2.03(m,4H),2.02-1.76(m,16H, AcOH),1.75-1.39(m,13H),1.39-1.22(m,2H),1.22-1.11(m,6H),1.00-0.68(m,18H).

化合物11：Pro-Ala-Ala-Asp-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.26(d,J=7.6Hz,1H),8.19(d,J=7.7Hz,1H),8.09(d,J=7.7Hz,1H),8.04(d,J=7.5Hz,1H),7.96(t,J=7.4Hz,2H),7.87(d,J=7.0Hz,1H),7.60(d,J=6.4Hz,1H),7.37(d,J=8.9Hz,1H),7.17(s,1H),6.70(s,1H),4.70(q,J=14.2,7.0Hz,1H),4.37-4.21(m,7H),4.16-4.10(m,2H),4.09-4.03(m,1H),3.74-3.67(m,2H),3.68-3.59(m,4H),3.49-3.45(m,1H),2.99-2.84(m,3H),2.80-2.71(m,2H),2.63(dd,J=16.5,7.5Hz,1H),2.46-2.25(m,4H),2.07(t,J=7.9Hz,2H),2.05-1.76(m,20H,AcOH),1.74-1.58(m,6H),1.56-1.42(m,5H),1.32(d,J=8.0Hz,2H),1.18(d,J=7.0Hz,3H),1.14(d,J=7.1Hz,3H),0.88-0.74(m,18H).

化合物12：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Phe-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.29(d,J=7.5Hz,1H),8.17(d,J=7.7Hz,1H),8.09(d,J=7.4Hz,1H),8.03(d,J=7.2Hz,1H),7.96(d,J=7.6Hz,1H),7.90(d,J=8.7Hz,1H),7.86(d,J=7.9Hz,1H),7.73(d,J=8.5Hz,1H),7.58(d,J=6.4Hz,1H),7.25-7.19(m,4H),7.18-7.12(m,2H),6.71(s,1H),4.54-4.44(m,2H),4.37(q,J=8.3Hz,1H),4.33-4.21(m,5H),4.19-4.10(m,2H),4.09-4.02(m,1H),3.64-3.53(m,5H),3.51-3.45(m,2H),3.00(dd,J=9.6Hz,1H),2.89-2.82(m,2H),2.80-2.71(m,3H),2.46-2.36(m,2H),2.24(t,J=7.4Hz,2H),2.08(t,J=8.0Hz,2H),2.00-1.70(m,18H,AcOH),1.69-1.64(m,2H),1.63 -1.56(m,2H),1.55-1.47(m,3H),1.34(s,2H),1.16(t,J=6.9Hz,6H),0.87-0.76(m,12H).

化合物26：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.25(s,1H),8.09(d,J=7.5Hz,1H),7.94(d,J=7.6Hz,1H),7.89(d,J=8.3Hz,2H),4.53-4.46(m,1H),4.39(dd,J=8.3,4.2Hz,1H),4.34(dd,J=8.4,3.8Hz,1H),4.31-4.19(m,3H),4.13(dd,J=15.1,7.7Hz,1H),3.71-3.49(m,5H),2.94-2.77(m,2H),2.33-2.20(m,2H),2.06-1.77(m,13H,AcOH),1.77-1.56(m,6H),1.46(t,J=7.3Hz,2H),1.25-1.11(m,6H),0.95-0.76(m,12H).

化合物27：Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,D₂O)δ 4.61(dd,J=9.6,4.4Hz,1H),4.44-4.22(m,8H),4.09-3.99(m,2H),3.85-3.72(m,2H),3.69-3.57(m,2H),2.94(t,J=7.4Hz,2H),2.79-2.63(m,2H),2.43-2.16(m,7H),2.09-1.74(m,19H,AcOH),1.73-1.47(m,7H),1.48-1.13(m,6H),1.00-0.79(m,21H).

化合物28：Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ8.28(d,J=7.8Hz,1H),8.13-7.87(m,3H),7.57(d,J=6.4Hz,1H),7.50(d,J=8.7Hz,1H),7.15(s,1H),6.69(s,1H),4.40-4.31(m,2H),4.29-4.21(m,2H),4.19-4.02(m,3H),3.67-3.60(m,1H),3.59-3.53(m,2H),2.92-2.85(m,1H),2.80-2.70(m,3H),2.47-2.38(m,1H),2.38-2.31(m,1H),2.08(t,J=7.9Hz,2H),2.04-1.76(m,14H,AcOH),1.74-1.41(m,11H),1.41-1.14(m,2H),0.91-0.74(m,18H).

化合物30：Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ8.29(d,J=7.1Hz,1H),7.89(d,J=8.6Hz,1H),7.79(d,J=8.0Hz,1H),4.54(d,J=5.4Hz,1H),4.42-4.38(m,1H),4.37-4.28(m,2H),4.09(dd,J=14.2,8.5Hz,1H),3.66-3.46(m,5H),2.28(t,J=7.4Hz,2H),2.13-1.71(m,16H,AcOH),1.71-1.58(m,2H),1.53-1.32(m,2H),1.18(d,J=6.9Hz,3H),0.90-0.83(m,9H),0.80(d,J=6.6Hz,3H).

化合物31：Glu-Pro-Val-Pro-Leu醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ7.94-7.86(m,2H),4.44(dd,J=8.3,4.5Hz,1H),4.37-4.27(m,2H),4.13(q,J=7.6Hz,1H),3.74-3.69(m,1H),3.66-3.42(m,4H),2.40-2.25(m,2H),2.06-1.58(m,17H,AcOH),1.46(t,J=7.3Hz,2H),0.89-0.84(m,9H),0.81(d,J=6.5Hz,3H).

化合物32：Pro-Val-Pro-Leu醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ8.15(d,J=9.0Hz,1H),7.91(d,J=8.0Hz,1H),4.35(dt,J=10.1,5.2Hz,2H),4.22-4.02(m,1H),3.67-3.59(m,2H),3.56(q,J=13.2,9.3Hz,1H),2.96-2.88(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.05-1.59(m,11H,AcOH),1.59-1.42(m,2H),0.91-0.72(m,12H).

化合物34：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.01(d,J=7.3Hz,1H),7.14(d,J=7.8Hz,1H),4.49(q,J=6.8Hz,1H),4.31-4.22(m,3H),3.75(dd,J=7.8,4.7Hz,1H),3.70-3.61(m,2H),2.88-2.81(m,1H),2.81-2.75(m,1H),2.27-2.13(m,2H),2.01-1.64(m,18H,AcOH),1.58(p,J=6.9Hz,2H),1.17(dd,J=10.2,7.1Hz,6H),0.78(dd,J=6.9,3.5Hz,6H).

化合物35：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.28(s,1H),8.12(d,J=7.5Hz,1H),7.90(d,J=7.7Hz,1H),4.49(dd,J=13.7,7.7Hz,1H),4.35-4.13(m,3H),3.76-3.50(m,3H),2.97-2.79(m,2H),2.33-2.18(m,2H),2.16-1.77(m,10H,AcOH),1.73-1.58(m,4H),1.26-1.13(m,6H).

化合物45：Ala-Glu-Pro-Val醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.36(d,J=7.4Hz,1H),7.46(d,J=8.0Hz,1H),4.65-4.53(m,1H),4.35(dd,J=8.6,3.4Hz,1H),3.89(dd,J=7.9,5.4Hz,1H),3.74-3.53(m,3H),2.38-2.19(m,2H),2.05-1.64(m,10H,AcOH),1.27-1.17(m,3H),0.83(d,J=7.1Hz,6H).

化合物48：Pro-Ala-Gly-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.33(d,J=7.6Hz,1H),8.27(d,1H),8.21(t,J=5.8Hz,1H),8.10(d,J=7.5Hz,1H),8.05-7.97(m,2H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),7.57(d,J=6.4Hz,1H),7.51(d,J=8.8Hz,1H),7.16(s,1H),6.70(s,1H),4.53-4.47(m,1H),4.38(dd,J=8.2,4.2Hz,1H),4.35-4.20(m,5H),4.18-4.09(m,2H),4.06(s,1H),3.75-3.50(m,8H),2.93-2.69(m,5H),2.45-2.41(m,1H),2.41-2.30(m,1H),2.25(t,J=7.3Hz,2H),2.08(t,J=7.9Hz,2H),2.01-1.76(m,15H,AcOH),1.74-1.53(m,8H),1.53-1.40(m,4H),1.33(d,J=7.2Hz,2H),1.20(t,J=9.0Hz,3H),0.91-0.73(m,18H).

化合物50：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-leu-Val-Lys-Gln-Asn醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.49(d,J=7.8Hz,1H),8.17-8.06(m,2H),8.05-7.99(m,2H),7.97(d,J=7.7Hz,1H),7.92(d,J=8.7Hz,1H),7.59 (s,1H),7.54(d,J=8.8Hz,1H),7.37(d,J=6.9Hz,1H),7.10(s,1H),6.68(d,J=15.7Hz,2H),4.48(d,J=5.1Hz,1H),4.39(dd,J=8.1,4.3Hz,1H),4.35-4.19(m,6H),4.17-4.10(m,1H),4.05-3.97(m,2H),3.67-3.48(m,6H),2.92-2.78(m,2H),2.78-2.66(m,3H),2.44-2.34(m,1H),2.33-2.20(m,3H),2.07(t,J=7.8Hz,2H),2.01-1.76(m,15H,AcOH),1.75-1.62(m,6H),1.62-1.53(m,3H),1.49-1.29(m,6H),1.19-1.12(m,6H),0.91-0.73(m,18H).

化合物51：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-leu-Val-Val-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.51(d,J=7.6Hz,1H),8.08(d,J=7.3Hz,1H),8.03-7.96(m,2H),7.95-7.89(m,2H),7.78(d,J=8.9Hz,1H),7.75-7.69(m,1H),7.61(d,J=8.8Hz,1H),7.18(s,1H),6.68(s,1H),4.51(d,J=5.4Hz,1H),4.40(dd,J=8.2,4.2Hz,1H),4.35-4.12(m,10H),4.01-3.95(m,1H),3.69-3.51(m,4H),3.09(d,J=6.4Hz,2H),2.45-2.40(m,1H),2.39-2.34(m,1H),2.27(dd,J=13.4,6.7Hz,2H),2.21-2.13(m,1H),2.06(t,J=8.0Hz,2H),2.02-1.75(m,18H,AcOH),1.75-1.58(m,5H),1.44(t,J=7.3Hz,2H),1.22(d,J=7.1Hz,3H),1.16(d,J=7.0Hz,3H),0.88(d,J=6.7Hz,3H),0.85(dd,J=6.5,2.7Hz,6H),0.83-0.77(m,15H).

化合物52：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Val-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.28(s,1H),8.17(d,J=8.0Hz,1H),8.09(d,J=7.5Hz,1H),7.99-7.92(m,2H),7.87(dd,J=16.4,8.8Hz,2H),7.68(d,J=8.5Hz,1H),7.57(d,J=6.1Hz,1H),7.17(s,1H),6.70(s,1H),4.50-4.45(m,1H),4.44-4.35(m,2H),4.32-4.21(m,4H),4.18-4.10(m,3H),4.08-3.99(m, 1H),3.66-3.49(m,6H),2.90-2.82(m,1H),2.82-2.72(m,3H),2.46-2.30(m,2H),2.27-2.23(m,1H),2.07(t,J=7.9Hz,2H),2.01-1.76(m,19H,AcOH),1.75-1.60(m,5H),1.60-1.45(m,5H),1.39-1.25(m,2H),1.20-1.10(m,6H),0.88(d,J=6.6Hz,3H),0.86-0.76(m,15H).

化合物56：Pro-Ile-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.27(d,J=7.8Hz,1H),8.17(d,J=7.3Hz,1H),8.10(d,J=9.4Hz,1H),8.05-7.97(m,2H),7.92(q,J=13.5,8.1Hz,2H),7.57(d,J=6.3Hz,1H),7.51(d,J=8.8Hz,1H),7.16(s,1H),6.70(s,1H),4.54-4.45(m,1H),4.39(dd,J=8.3,4.2Hz,1H),4.35-4.22(m,5H),4.21-4.09(m,3H),4.10-4.00(m,1H),3.67-3.48(m,6H),3.41-3.16(m,4H),2.95-2.86(m,1H),2.81-2.68(m,3H),2.47-2.41(m,1H),2.41-2.32(m,1H),2.25(t,J=7.6Hz,2H),2.08(t,J=7.9Hz,2H),2.02-1.75(m,19H,AcOH),1.75-1.55(m,9H),1.54-1.36(m,5H),1.33(d,J=7.0Hz,2H),1.15(d,J=7.1Hz,3H),0.89-0.784(m,8H),0.82-0.76(m,14H).

化合物57：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Glu-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.31(d,J=7.8Hz,1H),8.20(d,J=7.8Hz,1H),8.09(d,J=7.5Hz,1H),8.03(t,J=7.7Hz,2H),7.96-7.87(m,2H),7.58(d,J=6.3Hz,1H),7.49(d,J=8.8Hz,1H),4.49(q,J=5.3Hz,1H),4.39(dd,J=8.2,4.4Hz,1H),4.35-4.20(m,7H),4.19-4.12(m,2H),4.10-4.00(m,1H),3.67-3.49(m,7H),2.91-2.84(m,2H),2.84-2.70(m,4H),2.46-2.38(m,1H),2.38-2.33(m,1H),2.29-2.18(m,4H),2.04-1.76(m,19H,AcOH),1.76-1.55 (m,8H),1.55-1.41(m,5H),1.32(s,2H),1.21-1.11(m,6H),0.94-0.73(m,18H).

化合物58：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Asu-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.28(d,J=7.1Hz,1H),8.19(d,J=7.7Hz,1H),8.09(d,J=7.5Hz,1H),8.04(d,J=7.7Hz,1H),8.00-7.89(m,3H),7.50(d,J=8.6Hz,1H),7.44(d,J=6.0Hz,1H),7.30(s,1H),6.80(s,1H),4.56-4.46(m,2H),4.38(dd,J=8.1,4.3Hz,1H),4.35-4.20(m,6H),4.18-4.12(m,1H),4.04-4.00(m,1H),3.66-3.49(m,6H),2.93-2.84(m,1H),2.83-2.71(m,3H),2.43-2.31(m,3H),2.25(t,J=8.0Hz,2H),2.04-1.57(m,26H,AcOH),1.56-1.46(m,3H),1.46-1.43(m,2H),1.35-1.27(m,2H),1.20-1.10(m,6H),0.86(dd,J=14.8,7.9Hz,9H),0.81-0.76(m,9H).

化合物60：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Glu醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.51(d,J=8.0Hz,1H),8.17(d,J=7.8Hz,1H),8.10(d,J=7.4Hz,1H),8.04(d,J=6.2Hz,2H),7.96(d,J=7.7Hz,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),7.52(d,J=8.8Hz,1H),7.34(d,J=6.6Hz,1H),7.11(s,1H),6.71(s,1H),4.48(d,J=5.4Hz,1H),4.39(dd,J=8.1,4.3Hz,1H),4.34-4.18(m,7H),4.18-4.10(m,1H),4.07-3.99(m,1H),3.83(q,J=12.8,6.5Hz,2H),3.69-3.48(m,7H),2.92-2.83(m,1H),2.81-2.62(m,4H),2.31-2.02(m,7H),2.01-1.75(m,22H,AcOH),1.74-1.25(m,16H),1.20-1.11(m,6H),0.91-0.83(m,9H),0.81-0.76(m,9H).

化合物62：Pro-Ala-Ile-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 8.31-8.23(m,1H),8.20(d,J=7.5Hz,1H),8.03(d,J=7.7Hz,2H),7.99(d,J=7.6Hz,1H),7.93-7.85(m,2H),7.57(d,J=6.6Hz,1H),7.51(d,J=8.1Hz,1H),7.16(s,1H),6.70(s,1H),4.49(d,J=5.5Hz,1H),4.41-4.20(m,6H),4.19-4.00(m,5H),3.71-3.61(m,2H),3.61-3.47(m,4H),2.91-2.73(m,4H),2.45-2.39(m,1H),2.39-2.29(m,1H),2.24(t,J=7.1Hz,2H),2.07(t,J=7.9Hz,2H),2.02-1.76(m,20H,AcOH),1.74-1.47(m,12H),1.47-1.29(m,5H),1.16(d,J=6.9Hz,3H),1.04(d,J=8.4Hz,1H),0.89-0.84(m,8H),0.83-0.72(m,16H).

化合物66：Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Arg-Gln-Asp醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,DMSO)δ 9.30(s,1H),8.39(d,J=8.7Hz,1H),8.19(d,J=7.9Hz,1H),8.09(d,J=7.4Hz,1H),8.03(d,J=8.1Hz,1H),7.98(d,J=7.0Hz,1H),7.96-7.89(m,3H),7.52(d,J=8.9Hz,1H),7.11(s,1H),6.69(s,1H),4.49(d,J=5.3Hz,1H),4.39(dd,J=8.2,4.3Hz,1H),4.34(d,J=4.3Hz,1H),4.31-4.21(m,5H),4.20-4.10(m,3H),3.68-3.49(m,6H),3.13(d,J=6.1Hz,1H),3.00-2.93(m,1H),2.92-2.85(m,1H),2.83-2.76(m,1H),2.41-2.32(m,1H),2.25(t,J=8.2Hz,2H),2.09-2.03(m,2H),2.02-1.76(m,20H,AcOH),1.74-1.70(m,1H),1.69-1.56(m,7H),1.55-1.39(m,4H),1.22-1.11(m,6H),0.93-0.83(m,9H),0.83-0.77(m,9H).

化合物73：Val-Pro-Leu-Val醋酸鹽

¹H NMR(600MHz,MeOD)δ 4.54-4.49(m,1H),4.40(dd,J=9.2,6.0Hz,1H),4.18(d,J=5.0Hz,1H),3.99(d,J=5.3Hz,1H),3.69(dd,J=10.7,5.0Hz,1H),3.65-3.58(m,1H),2.32-2.20(m,2H),2.19-2.01(m,3H),2.00-1.86(m,4H,AcOH),1.85-1.75(m,1H),1.69-1.54(m,2H),1.12(d,J=7.0Hz,3H),1.03-1.01(m,3H),0.95(d,J=6.6Hz,3H),0.93-0.89(m,9H).

實例2：多肽(化合物1)對乙醇誘導的小鼠胃潰瘍模型的抗潰瘍作用

1、實驗動物：SPF級C57BL/6小鼠，成都藥康生物科技有限公司，動物許可證號：SCXK(川)2020-034

2、方法：實驗動物適應性餵養後，小鼠按隨機分組法分成4組，每組10隻，即：對照組(空白組)、模型組(無水乙醇造模)、陽性藥物組(替普瑞酮160mg/kg)，化合物1組(1mg/kg)。動物分組後，對照組及模型組投予純水治療外，其它投藥組投予相應藥物治療，每天一次，連續8天。第7天投予後所有動物禁食不禁水24h，於第8天投予30min後對各組(除對照組外)小鼠經口灌胃投予0.15mL的無水乙醇造模，1h後CO₂過量吸入處死動物，結紮胃賁門和夾閉幽門，摘取全胃。向胃體內注入1%甲醛溶液1mL，結紮賁門，取出胃後即放入1%甲醛溶液中固定25min。沿胃大彎剪開，生理鹽水清洗乾淨胃內容物，平鋪後計算潰瘍指數。潰瘍指數計算方法：條索狀損傷長度大於1mm者，測量其長度，每毫米計1分；若其寬度大於1mm，將計分按寬度的毫米數加倍；長度小於1mm計0.5分，將計分相加得出該動物的潰瘍指數。

3、結果：

在小鼠乙醇誘導的胃潰瘍模型中，化合物1每天一次連續8天經口灌胃可顯著使小鼠胃潰瘍指數降低，且效果優於陽性藥物組(表6)，結果表明化合物1治療胃潰瘍作用顯著。實驗結果參見圖2。

表6.受試藥對乙醇致胃潰瘍小鼠潰瘍指數的影響(n=10，

±s)

注：與對照組相比，^##P<0.01；與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

實例3：實例1獲得的部分多肽樣品對乙醇誘導的小鼠胃潰瘍模型的抗潰瘍作用

2、方法：

實驗動物適應性餵養後，實驗前1天投予後所有動物開始禁食不禁水24h。造模前實驗小鼠隨機分組：空白組5隻、模型組10隻、各投藥組每組10隻，除空白組及模型組灌胃投予純化水以外，投藥組均按照0.2mg/kg的投予劑量灌胃投予不同受試樣品，投予1小時後，各組小鼠經口灌胃投予0.9ml/kg的無水乙醇造模，1h後利用脫頸法處死動物，結紮胃賁門和夾閉幽門，摘取全胃。向胃體內注入1%甲醛溶液1mL，結紮賁門，取出胃後即放入1%甲醛溶液中。浸泡30min後取出胃組織，沿胃大彎剪開，使用生理鹽水沖洗乾淨胃內容物，平鋪後觀察並測定小鼠胃黏膜的損傷，計算潰瘍指數和潰瘍抑制率。

潰瘍指數計算方法：條索狀損傷長度大於1mm者，測量其長度，每毫米計1分；若其寬度大於1mm，將計分按寬度的毫米數加倍；長度小於1mm計0.5分，將計分相加得出該動物的潰瘍指數。

潰瘍抑制率=(模型組潰瘍指數-投藥組潰瘍指數)/模型組潰瘍指數×100%；

相對潰瘍抑制率=(測試化合物潰瘍抑制率)/(化合物1潰瘍抑制率)。

3、結果：表7示出了本發明化合物的相對潰瘍抑制率

表7小鼠乙醇造模單次投予抗潰瘍活性

*注釋：

每個化合物的抗潰瘍作用經多批試驗完成。為便於比較，抗潰瘍活性以相對潰瘍抑制率(每批試驗都以化合物1作為對照組)的平均值表示。

相對潰瘍抑制率=(測試化合物潰瘍抑制率)/(化合物1潰瘍抑制率)；

相對潰瘍抑制率>1.20，表示為“++++”；

相對潰瘍抑制率為0.9-1.20，表示為“+++”；

相對潰瘍抑制率為0.6-0.9，表示為“++”；

相對潰瘍抑制率為0.3-0.6，表示為“+”；

0<相對潰瘍抑制率<0.3，表示為“/”(極低活性)；

相對潰瘍抑制率<0，表示為“-”；

ND表示未與化合物1進行對比。

實例4：化合物1對小鼠胃類器官的影響

方法：用健康野生型小鼠的胃竇上皮組織進行類器官(organoid)培養，體視鏡下將小鼠胃竇上皮層與肌肉層分離，剪成0.5mm左右大小的小塊，放入到2.5mM的EDTA/DPBS中4℃條件下進行消化，約1h。將消化後的胃腺上皮細胞過濾離心並棄掉上清，所得的細胞沈澱重懸於基質膠中，在培養皿中加入含生長因子的類器官培養基中進行培養，對照組除生長因子外不加入受試藥物，實驗組在與對照組相同培養條件加入化合物1，用倒置顯微鏡觀察拍照其在Day1、Day3、Day5和Day7時成球和生長狀況，觀察化合物1對類器官生長的影響。

結果：與對照組相比，隨著時間的推移，在含有化合物1的培養基中類器官的生長速率明顯加快，通過對類器官直徑進行定量分析，結果表明化合物1處理的類器官體積明顯大於對照組(參見圖3，圖3中與對照組相比，*代表p<0.05)，可以顯著促進類器官的增生(統計資料也均有顯著性差異)。提取化合物1處理的類器官RNA，通過即時螢光定量PCR檢測分化相關的基因表達發現，內分泌細胞標記SST和Gastrin、頸部粘液細胞標記TFF2的mRNA水準明顯上升(參見圖4)。這些結果表明多肽化合物1能促進胃類器官的增生和分化，說明化合物1參與並調控胃上皮幹細胞的增生和分化。

實例5：化合物1對小鼠慢性萎縮性胃炎模型的治療作用

方法：小鼠(Lgr5-GFP-CreERT小鼠)慢性萎縮性胃炎採用MNNG(N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍)聯合雷尼替丁造模法：小鼠自由飲用含有MNNG(100mg/ml)的水溶液，同時每日固定時間給小鼠按照150mg/kg的劑量灌胃雷尼替丁(8mg/ml)水溶液，持續20週。造模20週後在小鼠飲用普通蒸餾水基礎上，每日灌胃化合物1(5mg/kg)，投予2週後觀察化合物1對慢性萎縮性胃炎的治療效果。

結果：組織染色結果顯示，模型組小鼠的胃體部和胃竇部腺體結構紊亂，伴隨著胃酸細胞(H⁺-K⁺-ATPase陽性)細胞數目的減少，並且胃竇部的粘膜上皮高度下降。通過2週的化合物1治療，與模型組相比，化合物1組小鼠的胃腺結構恢復正常，胃酸細胞數目顯著增多，胃竇部粘膜高度基本恢復至正常狀態，結果參見圖5。這些結果表明化合物1能夠促進小鼠慢性萎縮性胃炎的修復。

在慢性萎縮性胃炎中，上皮的修復過程需要幹細胞的參與。我們通過免疫螢光染色技術檢測胃上皮幹細胞(Lgr5⁺和AQP5⁺)的改變。實驗結果表明，與對照組相比，模型組的幹細胞數目顯著減少；與模型組相比，化合物1治療組的增生活躍的幹細胞數目(PCNA陽性的Lgr5⁺細胞和Ki67陽性的AQP5⁺細胞)也存在顯著增加，統計結果均存在顯著性差異，結果參見參看圖6。

實例6：化合物1對慢性萎縮性胃炎大鼠的治療作用

1、實驗動物

SPF級SD大鼠85隻，雌雄各半，體重160-280g，由斯貝福(北京)生物技術有限公司提供，許可證編號：SCXK(京)2016-0002。

2、實驗方法

SD大鼠85隻，適應性餵養1週後，隨機分為空白對照組10隻和慢性萎縮性胃炎造模組(簡稱CAG組)75隻。空白對照組投予每日灌胃去離子水5ml/kg，正常飲食，自由飲水。CAG組投予每日灌胃120μg/mL的MNNG(N-甲基-N-硝基-N-亞硝基胍)水溶液，5ml/kg，自由食用0.03%雷尼替丁飼料，自由飲用2%水楊酸鈉自由飲水。第15週起每週禁食18小時後灌胃高熱澱粉糊(5ml/kg，60-70℃)，且當日不再灌胃MNNG，餘處理同前。第18週起，每2週分別隨機取非空白組雌雄大鼠各2隻，取胃粘膜，病理切片觀察至模型成功(固有腺體減少+腸化)，造模過程死亡19隻大鼠。造模第25週將成模大鼠隨機分為3組，模型組、化合物1高劑量組(3mg/kg)、化合物1低劑量組(1mg/kg)。正常對照組和模型組每日灌胃等量生理鹽水，其它各組灌胃投予相應藥物，投予8週。

試驗期間每週定期檢測大鼠體重變化，測定攝食量與飲水量，觀察大鼠活動狀態等。投予8週後，大鼠禁食不禁水24小時，10%水合氯醛3.5ml/kg腹腔注射麻醉。摘離全胃，迅速沿大彎側剪開，生理鹽水漂洗後，取全小彎側及近大彎側上至食管端下至十二指腸端的胃黏膜組織，於10%中性福馬林液固定，習用石蠟包埋切片，習用HE染色，進行病理結果分析。

所有資料均採用SPSS23軟體進行處理。計量資料以Shapiro-Wilk檢定進行正態性檢定，若符合正態分佈，以均數加減標準差(X±S)表示，多組間均值比較，採用單因素方差分析(One-way ANOVA)，方差齊者用LSD法進行組間比較，方差不齊者採用Dunnett’s T3法進行組間比較，P<0.05表示差異具有統計學意義。若不符合正態分佈，進行秩和檢定，多組間比較採用Kruskal-Wallis檢定，組間兩兩比較採用Mann-Whitney檢定。等級資料同非正態分佈檢定方法。P<0.05表示差異具有統計學意義。

3、結果

3.1 大鼠一般情況

正常組大鼠體毛順滑濃密，毛色潔白有光澤。活動度較高，對飼養籠搬動、投餵食水等活動以及聲響反應度高。精神狀態佳，灌胃、稱重等操作時情緒穩定。模型組大鼠體毛枯槁稀疏，易脫落，毛色晦暗偏米黃。活動度低，喜蜷臥，對飼養籠搬動、投餵食水等活動以及聲響反應度低，精神狀態萎靡，灌胃、稱重等操作時容易出現情緒波動以及抓咬撕撓實驗操作者行為，化合物1低、高劑量組均有不同程度改善大鼠活動度、反應性等整體狀態。

3.2 大鼠體重情況

投予8週後，各組雌鼠體重無明顯差異。與正常組相比，模型組雄鼠體重明顯減輕，有統計學意義(P<0.05)；與模型組相比，化合物1低劑量組、高劑量組，雄鼠體重明顯升高，有統計學意義(P<0.05)，其餘各投藥組體重差異無統計學意義，見表8。

表8.各組投予8週後體重(g)

注：^#與正常組相比有顯著性差異(P<0.05)；*與模型組相比有顯著性差異(P<0.05)。

3.3 病理結果

大鼠胃黏膜病理切片顯微鏡下觀察：正常組大鼠黏膜各層結構清晰，腺體排列緊密、整齊，黏膜層未見慢性發炎；模型組大鼠胃黏膜見炎細胞浸潤，黏膜肌增生，固有層腺體不同程度減少，排列稀疏不規則，部分腺體擴張，未見腸上皮化生，少數見異型增生。與正常組相比，模型組發炎及萎縮評分明顯增高(P<0.05)；與模型組相比，化合物1低、高劑量組可顯著改善大鼠胃黏膜發炎、萎縮程度(P<0.05)。結果參見圖7。

實例7：化合物1對HaCAT細胞增生的促進作用

方法：將HaCAT細胞濃度調整為1.0×10⁵~5.0×10⁵/mL進行傳代培養，於37℃，5% CO₂條件下培養24~36小時用於生物學活性檢測。用胰酶消化並收集細胞，用無血清培養基配成濃度2.5×10⁴/mL接種於96孔細胞培養板中，每孔100μL，即2500個細胞/孔，於37℃，5% CO₂條件下培養過夜。再加入50μL用無血清培養基配製化合物溶液，使化合物1終濃度為0.4ug/mL；同時設置EGF對照組，即加入50μL用無血清培養基配製的重組人表皮生長因子(EGF)溶液，終濃度為100ng/mL；模型對照組，即加入等體積的無血清培養基。於37℃，5% CO₂條件下培養72小時，採用CellTiter-Glo®套組檢測HaCAT細胞株增生情況。

結果：如圖8所示，0.4μg/mL化合物1對HaCAT細胞具有顯著的促增生作用，表明化合物1對於表皮生長和皮膚損傷修復有較好的作用。圖8中，與模型對照組相比，*代表p<0.05，**代表p<0.01。

實例8：化合物1及化合物26對斑馬魚血管損傷的修復作用

方法：轉基因血管綠色螢光斑馬魚(Fli-1)的血管被綠色螢光蛋白標記，在螢光顯微鏡下清晰可見(圖9，圖9中虛線框(原圖為黃色)為分析部位腸下血管，箭頭(原圖為白色)指向為腸下血管分支)，成為觀察血管變化的模式生物。Fli-1斑馬魚，以自然成對交配繁殖方式進行。隨機選取受精後1天的Fli-1斑馬魚於6孔板中，每孔(實驗組)30尾。正常對照組用標準稀釋水處理斑馬魚，其餘各實驗組水溶投予辛伐他汀誘導3小時建立斑馬魚微血管缺失模型。3小時後，所有組別水溶液替換為標準稀釋水，終止辛伐他汀誘導。受試藥物組分別靜脈注射投予化合物1(500ng/尾)或化合物26(500ng/尾)，28℃處理2天。每組隨機選取10尾斑馬魚置於螢光顯微鏡下拍照，用NIS-Elements D 3.20高級影像處理軟體分析並採集資料，分析腸下血管分支數。

結果：模型組可見腸下血管分支數量減少。化合物1和化合物26靜脈注射可以顯著逆轉辛伐他汀造成的腸下微血管缺失，恢復斑馬魚腸下血管的分支數量。表明化合物1和化合物26可以促進血管的損傷後修復(圖10和11)。圖11中，與模型對照組比較，**p<0.01，***p<0.001。

實例9：部分多肽樣品的胃、腸穩定性試驗

方法：取待測樣品(化合物1、化合物26、化合物27、化合物28及EGF)各1mg，加水1ml溶解。取樣品溶液100ul，加水900ul，混勻，作為對照品溶液。取樣品溶液各100ul，分別加人工胃液(W)、人工腸液(X)、聚維酮碘溶液(I)、過氧化氫溶液(O)900ul，37℃恒溫水浴1小時，放冷，濾過，作為供試品溶液，用高效液相層析法分別檢測處理前及處理後的樣品峰面積，試驗結果以樣品的峰面積進行對比計算。以水稀釋後不做任何處理的原液作為對照，對比統計其他供試品溶液相應位置的峰面積(含量)變化情況。

表9多肽樣品的胃、腸穩定性試驗

注：W表示人工胃液，X表示人工腸液，I表示聚維酮碘溶液，O表示過氧化氫溶液

結果：如表9所示，4個供試品(化合物1、26、27和28)對人工胃液(W)、聚維酮碘溶液(I)和過氧化氫溶液(O)都100%保留，說明很穩定；化合物26對人工腸液(X)也極其的穩定；EGF在胃液和腸液裡都沒有保留，說明在胃液和腸液中不穩定，聚維酮碘溶液和過氧化氫溶液消毒後塗抹EGF外用也會被破壞。

實例10：化合物1對阿司匹林誘導的大鼠胃潰瘍的影響

方法：SD大鼠適應性餵養後，按Excel完全隨機分組法分成3組(每組10隻)，即：對照組、模型組、化合物1(0.3mg/kg)組。動物分組後，開始投予相應處理(對照組及模型組投予同體積純化水，化合物1組投予相應藥物治療)，每天一次，連續8天。第7天投予後，所有動物禁食不禁水24h。第8天除對照組外，化合物1組及模型組大鼠投予(或水)30min後經口灌胃投予250mg/kg阿司匹林溶液造模。造模4h後，處死動物，結紮賁門和夾閉幽門，摘取全胃。向胃體內注入1%甲醛溶液8mL，結紮幽門，取出胃後即放入1%甲醛溶液中固定，30min後沿胃大彎剪開，生理鹽水清洗乾淨胃內容物，將胃平鋪後，觀察並拍攝胃全景照片，測定潰瘍面積。

結果：每天1次連續8天經口灌胃投予化合物1(0.3mg/kg)對阿司匹林誘導胃潰瘍模型大鼠的體重變化無明顯影響，化合物1減少了阿司匹林誘導的胃潰瘍模型大鼠胃部出血點，顯著降低大鼠胃潰瘍面積。表10示出了化合物1對阿司匹林誘導的大鼠胃潰瘍的影響。

表10化合物1對阿司匹林誘導的大鼠胃潰瘍的影響。

注：^##與對照組相比，p<0.01；**與模型組相比，p<0.01

儘管本發明披露了上述實例，但本發明的實施方式並不限於上述實例，其他的任何未背離本發明的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式均包含在本發明的保護範圍之內。

<110> 大陸商四川好醫生攀西藥業有限責任公司

<120> 用於修復黏膜損傷或皮膚創傷的多肽及其應用

<130> F21W0932PCT

<141> 2021-07-01

<150> CN202010619687.2

<151> 2020-07-01

<160> 73

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物1序列

<400> 1

<210> 2

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物2序列

<400> 2

<210> 3

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物3序列

<400> 3

<210> 4

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物4序列

<400> 4

<210> 5

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物5序列

<400> 5

<210> 6

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物6序列

<400> 6

<210> 7

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物7序列

<400> 7

<210> 8

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物8序列

<400> 8

<210> 9

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物9序列

<400> 9

<210> 10

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物10序列

<400> 10

<210> 11

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物11序列

<400> 11

<210> 12

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物12序列

<400> 12

<210> 13

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物13序列

<400> 13

<210> 14

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物14序列

<400> 14

<210> 15

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物15序列

<400> 15

<210> 16

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物16序列

<400> 16

<210> 17

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物17序列

<400> 17

<210> 18

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物18序列

<400> 18

<210> 19

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物19序列

<400> 19

<210> 20

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物20序列

<400> 20

<210> 21

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物21序列

<400> 21

<210> 22

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物22序列

<400> 22

<210> 23

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物23序列

<400> 23

<210> 24

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物24序列

<400> 24

<210> 25

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物25序列

<400> 25

<210> 26

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物26序列

<400> 26

<210> 27

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物27序列

<400> 27

<210> 28

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物28序列

<400> 28

<210> 29

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物29序列

<400> 29

<210> 30

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物30序列

<400> 30

<210> 31

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物31序列

<400> 31

<210> 32

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物32序列

<400> 32

<210> 33

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物33序列

<400> 33

<210> 34

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物34序列

<400> 34

<210> 35

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物35序列

<400> 35

<210> 36

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物36序列

<400> 36

<210> 37

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物37序列

<400> 37

<210> 38

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物38序列

<400> 38

<210> 39

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物39序列

<400> 39

<210> 40

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物40序列

<400> 40

<210> 41

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物41序列

<400> 41

<210> 42

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物42序列

<400> 42

<210> 43

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物43序列

<400> 43

<210> 44

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物44序列

<400> 44

<210> 45

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物45序列

<400> 45

<210> 46

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物46序列

<400> 46

<210> 47

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物47序列

<400> 47

<210> 48

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物48序列

<400> 48

<210> 49

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物49序列

<400> 49

<210> 50

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物50序列

<400> 50

<210> 51

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物51序列

<400> 51

<210> 52

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物52序列

<400> 52

<210> 53

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物53序列

<400> 53

<210> 54

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物54序列

<400> 54

<210> 55

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物55序列

<400> 55

<210> 56

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物56序列

<400> 56

<210> 57

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物57序列

<400> 57

<210> 58

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物58序列

<400> 58

<210> 59

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物59序列

<400> 59

<210> 60

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物60序列

<400> 60

<210> 61

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物61序列

<400> 61

<210> 62

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物62序列

<400> 62

<210> 63

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物63序列

<400> 63

<210> 64

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物64序列

<400> 64

<210> 65

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物65序列

<400> 65

<210> 66

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物66序列

<400> 66

<210> 67

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物67序列

<400> 67

<210> 68

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物68序列

<400> 68

<210> 69

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物69序列

<400> 69

<210> 70

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物70序列

<400> 70

<210> 71

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物71序列

<400> 71

<210> 72

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物72序列

<400> 72

<210> 73

<211> 4

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<220>

<223> 化合物73序列

<400> 73

Claims

式(I)的化合物或其生理學上相容的鹽，其中所述式(I)的化合物如下：

H-Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Xa_a4-Xaa₅-Val-Xaa₆-Xaa₇-Xaa₈-Xaa₉-Xaa₁₀-Xaa₁₁-OH(I)

其中

Xaa₁為Pro、Gly、Ala或缺失；

Xaa₂為Ala、Leu、Ile、Gly、Cys、Ser或缺失；

Xaa₃為Ala、Pro、Gly、Leu、Ile、Cys、Ser或缺失；

Xaa₄為Glu、Gln、Asp、Asn、Leu、Ile、Val或缺失；

Xaa₅為Pro、Gly、Ala、Val或缺失；

Xaa₆為Pro、Gly或Ala；

Xaa₇為Leu、Phe、Val、Ala、Tyr、Glu、Lys、Asp、Ile、Met或缺失；

Xaa₈為Val、Leu、Gln、Ile、Met或缺失；

Xaa₉為Lys、Arg、His、Asp、Val或缺失；

Xaa₁₀為Glu、Gln、Asp、Asn或缺失；以及

Xaa₁₁為Glu、Asp、Asn、Gln或缺失，

條件是：Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃、Xaa₄、Xaa₅、Xaa₇、Xaa₈、Xaa₉、Xaa₁₀和Xaa₁₁中至多有9個是缺失的。
如請求項1所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中X_aa5為Pro。
如請求項1所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中X_aa6為Pro。
如請求項1所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中X_aa7為Leu。
如請求項1-5中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)化合物具有以下式(II)結構，

H-Xaa₁-Xaa₂-Xaa₃-Xaa₄-Pro-Val-Pro-Leu-Xaa₈-Xaa₉-Xaa₁₀-Xaa₁₁-OH(II)，

其中

Xaa₁為Pro、Gly、Ala或缺失；

Xaa₂為Ala、Leu、Ile、Gly、Cys、Ser或缺失；

Xaa₃為Ala、Pro、Gly、Leu、Ile、Cys、Ser或缺失；

Xaa₄為Glu、Gln、Asp、Asn、Leu、Ile、Val或缺失；

Xaa₈為Val、Leu、Gln、Ile、Met或缺失；

Xaa₉為Lys、Arg、His、Asp、Val或缺失；

Xaa₁₀為Glu、Gln、Asp、Asn或缺失；以及

Xaa₁₁為Glu、Asp、Asn、Gln或缺失。
如請求項1-5中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₁為Pro或缺失；較佳為Pro。
如請求項1-6中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₂為Ala或缺失；較佳為Ala。
如請求項1-7中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₃為Ala、Gly或缺失；較佳為Ala。
如請求項1-8中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₄為Glu、Gln、Asp或缺失；較佳為Glu或Gln。
如請求項1-9中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₈為Val或缺失；較佳為Val。
如請求項1-10中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₉為Lys、Arg或缺失；較佳為Lys或缺失。
如請求項1-11中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₁₀為Glu、Gln或缺失；較佳為Gln。
如請求項1-12中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₁₁為Asp或缺失；較佳為Asp。
如請求項1-13中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₁、Xaa₂、Xaa₃和Xaa₄中有一個是缺失的；或者有兩個是缺失的；或者有三個是缺失的；或者都是缺失的。
如請求項1-14中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中式(I)或(II)中的Xaa₈、Xaa₉、Xaa₁₀和Xaa₁₁中有一個是缺失的；或者有兩個是缺失的；或者有三個是缺失的；或者都是缺失的。
如請求項1所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中所述化合物選自：

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物1)

Gly-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物2)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys(化合物3)

Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物4)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物5)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Ala-Val-Lys-Gln-Asp(化合物6)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Val-Val-Lys-Gln-Asp(化合物7)

Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Gly-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物8)

Pro-Ala-Ala-Glu-Gly-Val-Gly-Leu(化合物9)

Pro-Ala-Ala-Gln-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物10)

Pro-Ala-Ala-Asp-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物11)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Phe-Val-Lys-Gln-Asp(化合物12)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Tyr-Val-Lys-Gln-Asp(化合物13)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Leu-Val-Lys(化合物14)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Val-Val-Lys(化合物15)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Ala-Leu-Val-Lys(化合物16)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Ala-Val-Val-Lys(化合物17)

Pro-Ala-Ala-Glu-Ala-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物18)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Ala-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物19)

Pro-Ala-Ala-Glu-Ala-Val-Ala-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物20)

Ala-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物21)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Phe-Val-Lys(化合物22)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Tyr-Val-Lys(化合物23)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Gly-Phe-Val-Lys(化合物24)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Ala-Phe-Val-Lys(化合物25)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物26)

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物27)

Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物28)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro(化合物29)

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物30)

Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物31)

Pro-Val-Pro-Leu(化合物32)

Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物33)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val(化合物34)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro(化合物35)

Pro-Ala-Ala-Glu(化合物36)

Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物37)

Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物38)

Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物39)

Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物40)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Ile-Val-Lys(化合物41)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Val-Val-Lys(化合物42)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Met-Val-Lys(化合物43)

Ala-Glu-Pro-Val-Pro(化合物44)

Ala-Glu-Pro-Val(化合物45)

Pro-Ala-Ala-Asn-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物46)

Pro-Ala-Ala-Leu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物47)

Pro-Ala-Gly-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物48)

Pro-Ala-Pro-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物49)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-leu-Val-Lys-Gln-Asn(化合物50)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-leu-Val-Val-Gln-Asp(化合物51)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Val-Val-Lys-Gln-Asp(化合物52)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Ile-Val-Lys-Gln-Asp(化合物53)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Met-Val-Lys-Gln-Asp(化合物54)

Pro-Leu-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物55)

Pro-Ile-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物56)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Glu-Asp(化合物57)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Asn-Asp(化合物58)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Asp-Asp(化合物59)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Glu(化合物60)

Pro-Ala-Leu-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物61)

Pro-Ala-Ile-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物62)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Leu-Lys-Gln-Asp(化合物63)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Ile-Lys-Gln-Asp(化合物64)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Met-Lys-Gln-Asp(化合物65)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Arg-Gln-Asp(化合物66)

Pro-Ala-Ala-Val-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物67)

Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物68)

Gly-Ala-Ala-Val-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物69)

Gly-Ala-Gly-Val-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物70)

Gly-Ala-Gly-Val-Gly-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物71)

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Ala-Phe-Val-Lys-Gln-Asp(化合物72)

Val-Pro-Leu-Val(化合物73)。
如請求項6所述的化合物或其生理學上相容的鹽，其中所述化合物選自

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物1)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys(化合物3)；

Pro-Ala-Ala-Gln-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物10)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物26)；

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物27)；

Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物30)；

Glu-Pro-Val-Pro-Leu(化合物31)；

Pro-Val-Pro-Leu(化合物32)；

Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物28)；

Pro-Ala-Ala-Asp-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物11)；

Pro-Ala-Gly-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物48)；

Pro-Ala-Ala-Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Glu-Asp(化合物57)；或

Glu-Pro-Val-Pro-Leu-Val-Lys-Gln-Asp(化合物38)。
如請求項1-17中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽在製備用於修復皮膚創傷或黏膜損傷的藥物中的用途。
如請求項1-17中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽在製備用於調控幹細胞增生和分化的藥物中的用途。
如請求項18所述的用途，其中所述的黏膜損傷是消化系統、呼吸系統等腔道內黏膜損傷。
如請求項20所述的用途，其中所述消化系統黏膜損傷與口腔、食道、胃腸疾病相關，所述口腔疾病包括口腔潰瘍、口腔炎、牙齦炎、牙周炎等；所述食道疾病包括食管炎、食管潰瘍等；所述胃腸疾病包括慢性胃炎、慢性萎縮性胃炎、急性胃炎、胃十二指腸潰瘍、功能性胃腸道疾病、消化不良、癌前病變、消化系統腫瘤、胃腸道出血、胃食管返流疾病、急慢性腸炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩病和放化療引起的黏膜損傷；所述皮膚創傷與表皮發炎、機械及手術創面、燒傷及燙傷、潰瘍、瘺管、褥瘡、放化療引起的皮膚損傷等疾病相關。
如請求項20所述的用途，其中所述消化系統黏膜損傷是由刺激性物質或藥物引起的或應激狀態引起的黏膜損傷。
如請求項1-17中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽在製備用於預防、減輕或治療胃腸疾病或消除發炎水腫的藥物中的用途。
一種藥物、食品、保健品或化妝品、日化品組合物，所述組合物包括如請求項1-17中任一項所述的化合物或其生理學上相容的鹽以及生理學上可接受的載劑。