TW202140026A

TW202140026A - 包含泛素特異性加工蛋白酶１（ｕｓｐ１）抑制劑及聚（ａｄｐ－核糖）聚合酶（ｐａｒｐ）抑制劑之治療組合

Info

Publication number: TW202140026A
Application number: TW110105371A
Authority: TW
Inventors: 安德魯偉利; 所羅門申科; 帕梅拉索力凡; 法蘭克斯特邁爾; 安妮卡德佐; 漢蘭劉; 克斯汀辛克維西
Original assignee: 美商Ｋｓｑ治療公司
Priority date: 2020-02-14
Filing date: 2021-02-17
Publication date: 2021-11-01
Also published as: MX2022009818A; EP4103165A1; WO2021163530A1; AU2021218805A1; CA3168009A1; JP2023514568A; CN115066235A; EP4103165A4; US20230277533A1; IL295149A; KR20220140732A

Abstract

本揭示案提供治療組合，其包含(i)泛素特異性加工蛋白酶1 (USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑包含

、

或

Description

包含泛素特異性加工蛋白酶１（ＵＳＰ１）抑制劑及聚（ＡＤＰ－核糖）聚合酶（ＰＡＲＰ）抑制劑之治療組合

相關申請案之交叉引用

本申請案主張2021年2月8日申請之美國臨時申請案第63/146,937號、2020年5月29日申請之美國臨時申請案第63/032,245號及2020年2月14日申請之美國臨時申請案第62/976,864號之權益，各臨時申請案以引用的方式整體併入本文中。經由EFS-網以電子方式提交之序列表的引用

電子提交之序列表(名稱4195_012TW03_ Seqlisting_ST25.txt；大小：7,446位元組；創建日期：2021年2月8日)的內容以引用之方式整體併入本文中。

本揭示案提供泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制劑之治療組合。亦提供治療癌症之方法，其包括投與該等組合。

泛素為一種在轉錄後附連至靶蛋白之小(76個胺基酸)蛋白質。泛素化結果由結合於靶蛋白之泛素分子的數目及鍵拓撲決定。舉例而言，展現離胺酸48連接之聚泛素鏈的蛋白質一般靶向蛋白酶體進行降解，而單泛素化或經由其他離胺酸連接之聚泛素鏈調控非蛋白水解功能，例如細胞週期調控、DNA損傷修復、轉錄及胞吞作用。泛素化為可逆過程，且稱為去泛素化酶之酶自靶蛋白移除泛素。

USP1為一種在DNA損傷修復中起作用之去泛素化酶。USP1與UAF1(USP1相關因子1)相互作用，形成去泛素化酶活性所需之複合物。USP1/UAF1複合物使單泛素化PCNA(繁殖細胞核抗原)及單泛素化FANCD2(範可尼氏貧血(Fanconi anemia)組互補群D2)去泛素化，單泛素化PCNA及單泛素化FANCD2為分別在跨損傷合成(TLS)及範可尼氏貧血(FA)路徑中起重要功能。USP1/UAF1複合物亦使範可尼氏貧血互補群I(FANCI)去泛素化。此兩個路徑對修復由諸如順鉑(cisplatin)及絲裂黴素C(mitomycin C，MMC)之DNA交鍵劑誘發之DNA損傷而言係必不可少的。

酶之聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)家族在DNA修復及基因組完整性中起作用。PARP對於單股斷裂修復及鹼基切除修復路徑而言係關健的。關鍵酶活性為經由NAD+裂解及菸醯胺釋放將ADP-核糖添加至受質蛋白。此聚(ADP-核糖基)化(「PAR化」)活性由DNA股斷裂活化，此引起Par添加至PARP本身及其他DNA修復酶。PARP對DNA修復蛋白募集至損傷位點而言係關鍵的。

同源重組為對DNA損傷之精確修復而言關鍵的DNA修復過程。BRCA1/2 基因以及其他範可尼氏貧血路徑基因(例如RAD51D 、NBN 、ATM )為同源重組介導之DNA修復的組分。編碼同源重組因子之基因的突變在某些癌症顯現過程中起作用。PARP抑制劑預防DNA單股斷裂之修復且促進單股斷裂轉變成雙股斷裂，此引起缺乏熟練雙股斷裂機制(諸如同源重組)之癌細胞的合成致死性。

對更有效治療癌症之療法，例如組合療法仍然存在未滿足之醫學需求。

本文提供以下各物之組合：(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物；及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。本文亦提供使用此類組合治療患有癌症之個體之方法。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種治療先前接受用第一聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑治療之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與泛素特異性加工蛋白酶(USP1)抑制劑及第二PARP抑制劑，其中該第一PARP抑制劑及該第二PARP抑制劑為相同或不同PARP抑制劑。

在一個態樣中，該個體先前未接受用USP1抑制劑治療。

在一個態樣中，用第一PARP抑制劑之治療中斷或中止。在一個態樣中，中斷歷時至少一週、至少兩週、至少三週或至少四週。在一個態樣中，中斷至多四週。

在一個態樣中，在用第一PARP抑制劑治療期間個體經歷不可接受之毒性及/或不可接受之不良反應。

在一個態樣中，不可接受之毒性或不良反應為諸如血小板減少、貧血或嗜中性白血球減少之血液毒性、肺炎、呼吸困難、發燒、咳嗽、喘鳴、放射學異常、高血壓、骨髓發育不良症候群/急性骨髓性白血病(MDS/ AML)、噁心及/或疲勞。

在一個態樣中，在用第一PARP抑制劑治療期間，第一PARP抑制劑之劑量降低。在一個態樣中，第一PARP抑制劑之劑量降低至在降低之前之劑量的四分之一、三分之一、二分之一、三分之二或四分之三。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑為奧拉帕尼(olaparib)且在降低之前之劑量為每日服用400 mg兩次。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為奧拉帕尼且在降低之後之劑量為每日服用200 mg兩次或每日服用100 mg兩次。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑為尼拉帕尼(niraparib)且在降低之前之劑量為每日服用300 mg一次。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為尼拉帕尼且在降低之後之劑量為每日服用200 mg一次或每日服用100 mg一次。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑為他拉唑帕尼(talazoparib)且在降低之前之劑量為每日服用1 mg一次。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為他拉唑帕尼且在降低之後之劑量為每日服用0.75 mg一次、每日服用0.5 mg一次或每日服用0.25 mg一次。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑為盧卡帕尼(rucaparib)且在降低之前之劑量為每日服用600 mg兩次。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為盧卡帕尼且在降低之後之劑量為每日服用500 mg兩次、每日服用400 mg兩次或每日服用300 mg兩次。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。在一個態樣中，第二PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為奧拉帕尼且第二PARP抑制劑為奧拉帕尼。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為尼拉帕尼且第二PARP抑制劑為尼拉帕尼。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為他拉唑帕尼且第二PARP抑制劑為他拉唑帕尼。在一個態樣中，第一PARP抑制劑為盧卡帕尼且第二PARP抑制劑為盧卡帕尼。

在一個態樣中，第一PARP抑制劑及第二PARP抑制劑為相同PARP抑制劑。在一個態樣中，第一PARP抑制劑及第二PARP抑制劑為不同PARP抑制劑。

在一個態樣中，第二PARP抑制劑之劑量與第一PARP抑制劑之劑量相比有所降低。

在一個態樣中，USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：

(b)式II：

及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

(b)式II：

(c)式III：

在一個態樣中，USP1抑制劑及第二PARP抑制劑之耐受性良好。

在一個態樣中，USP1抑制劑減少個體對第二PARP抑制劑之暴露。

在一個態樣中，USP1抑制劑及第二PARP抑制劑抑制癌症之反彈及/或再生長。

在一個態樣中，USP1抑制劑及第二PARP抑制劑相繼經投與。在一個態樣中，USP1抑制劑及第二PARP抑制劑同時經投與。

在一個態樣中，個體為人類。

在一個態樣中，癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。在一個態樣中，癌症為乳癌。在一個態樣中，乳癌為三陰性乳癌(TNBC)。在一個態樣中，癌症為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或BRCA1突變與BRCA2突變型癌症。在一個態樣中，癌症為卵巢癌。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或p53突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症及p53突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1及BRCA2突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA2突變型癌症。在一個態樣中，癌症係選自由血液癌症及淋巴癌組成之群。

在一個態樣中，癌症包含具有升高水準之RAD51的細胞。在一個態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51蛋白水準。在一個態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51蛋白聚集點水準。在一個態樣中，自癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞中的至少10%為RAD51陽性。在一個態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51 mRNA水準。在一個態樣中，在投與之前已偵測到RAD51之升高水準。在一個態樣中，該方法進一步包括在投與之前偵測自個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。

在一個態樣中，癌症係選自由以下組成之群：DNA損傷修復路徑缺陷癌症、同源重組缺陷癌症、包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞的癌症、包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞的癌症及包含具有編碼ATM之基因中之突變的細胞的癌症。

在一個態樣中，癌症為PARP抑制劑抗性或難治性癌症。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種治療個體之癌症之方法，其包括向該個體投與USP1抑制劑，其中該癌症包含具有升高水準之RAD51之癌細胞。在一個態樣中，在投與之前已偵測到RAD51之升高水準。在一個態樣中，該方法進一步包括偵測自個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。在一個態樣中，該方法進一步包括與USP1抑制劑組合向個體投與PARP抑制劑。在一個態樣中，PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種選擇患有癌症之個體用USP1抑制劑治療之方法，其包括偵測該癌症是否包含具有升高水準之RAD51之細胞，其中若該癌症包含具有升高水準之RAD51之細胞，則選擇該個體用USP1抑制劑治療。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種活體外鑒別患有對用USP1抑制劑治療起反應之癌症之個體的方法，其包括偵測自該個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準，其中該癌症樣品中升高水準之RAD51指示該患者對用USP1抑制劑治療起反應。

在一個態樣中，本揭示案係關於至少一種能夠特異性地偵測RAD51之藥劑之活體外用途，該至少一種藥劑用於鑒別患有對用USP1抑制劑治療起反應之癌症之個體。

在本文提供之任何方法或用途之一個態樣中，用USP1抑制劑治療進一步包括與USP1抑制劑組合用PARP抑制劑治療。在一個態樣中，PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。在一個態樣中，USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：

(b)式II：

(c)式III：

在本文提供之任何方法或用途之一個態樣中，個體為人類。在一個態樣中，癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。在一個態樣中，癌症為乳癌。在一個態樣中，乳癌為三陰性乳癌(TNBC)。在一個態樣中，癌症為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或BRCA1突變與BRCA2突變型癌症。在一個態樣中，癌症為卵巢癌。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或p53突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症及p53突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA1及BRCA2突變型癌症。在一個態樣中，卵巢癌為BRCA2突變型癌症。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種延遲、減少或預防個體之腫瘤反彈的方法，其包括向該個體投與(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：

(b)式II：

(c)式III：

在一個態樣中，本揭示案係關於一種組合式組合物，其包含(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：

(b)式II：

(c)式III：

(b)式II：

(c)式III：

在一些態樣中，PARP抑制劑係選自由以下組成之群：奧拉帕尼(Lynparza®)、盧卡帕尼(Rubraca®)、尼拉帕尼(Zejula®)及他拉唑帕尼(Talzenna®)及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在一個態樣中，PARP抑制劑為尼拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在另一態樣中，PARP抑制劑為奧拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在一個態樣中，USP1抑制劑為式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在另一態樣中，USP1抑制劑為式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在另一態樣中，USP1抑制劑為式III化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在一個態樣中，本揭示案係關於組合式組合物用於製造供治療癌症用之藥物之用途。

在另一態樣中，本揭示案係關於一種醫藥組合式組合物，其包含該組合式組合物及醫藥學上可接受之載劑。

在一個態樣中，醫藥組合物用於治療癌症。

在一個態樣中，本揭示案係關於一種套組，其包含組合式組合物或醫藥組合式組合物及關於向患有癌症之個體投與組合之說明書。

在另一態樣中，本揭示案係關於一種治療個體之癌症的方法，其包括向該個體投與(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)PARP抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：

(b)式II：

(c)式III：

在該方法之一些態樣中，PARP抑制劑係選自由以下組成之群：尼拉帕尼、奧拉帕尼及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在該方法之一個態樣中，PARP抑制劑為尼拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在該方法之另一態樣中，PARP抑制劑為奧拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在該方法之一個態樣中，USP1抑制劑為式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在該方法之另一態樣中，USP1抑制劑為式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在該方法之另一態樣中，USP1抑制劑為式III化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在本揭示案之一個態樣中，USP1抑制劑或該等其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該等其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物的投與提供協同效應。

在本揭示案之一個態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以足以產生一或多種選自由以下組成之群之治療效應的治療有效量投與：(i)減小腫瘤尺寸；(ii)增加癌症腫瘤消退速率；(iii)減少或抑制癌症腫瘤生長；及(iv)減少作為單一療法投與之PARP抑制劑之毒性效應。在本揭示案之一個態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以足以產生一或多種選自由以下組成之群之治療效應的治療有效量投與：(i)減小腫瘤尺寸；(ii)增加癌症腫瘤消退速率；及(iii)減少或抑制癌症腫瘤生長。在本揭示案之一個態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以足以減少作為單一療法投與之PARP抑制劑之毒性效應的量投與。

在一個態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以足以延遲、減少或預防腫瘤反彈(快速再生長)之治療有效量投與。

在一個態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物相繼經投與。

在另一態樣中，USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物同時經投與。

在本揭示案之一個態樣中，組合投與哺乳動物。在另一態樣中，哺乳動物為人類。

在一些態樣中，癌症係選自由以下組成之群：血液癌症、淋巴癌、實體腫瘤、DNA損傷修復路徑缺陷癌症及同源重組缺失癌症。

在一些態樣中，癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。

在一些態樣中，癌症為非小細胞肺癌(NSCLC)。

在一些態樣中，癌症為結腸癌。

在一些態樣中，癌症為膀胱癌。

在一些態樣中，癌症為卵巢癌或乳癌。

在一些態樣中，癌症為卵巢癌。

在一些態樣中，癌症為乳癌。

在一些態樣中，癌症為三陰性乳癌。

在一些態樣中，癌症係選自由以下組成之群：骨癌，包括骨肉瘤及軟骨肉瘤；腦癌，包括神經膠質瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、髓母細胞瘤及腦膜瘤；軟組織癌症，包括橫紋肌樣瘤及肉瘤；腎癌；膀胱癌；皮膚癌，包括黑色素瘤；及肺癌，包括非小細胞肺癌；結腸癌、子宮癌；神經系統癌症；頭頸部癌症；胰臟癌；及子宮頸癌。

在一些態樣中，癌症為DNA損傷修復路徑缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症為BRCA1突變型癌症。在一些態樣中，BRCA1突變為生殖系突變。在一些態樣中，BRCA1突變為體細胞突變。在一些態樣中，BRCA1突變引起BRCA1缺陷。

在一些態樣中，癌症為BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，BRCA2突變為生殖系突變。在一些態樣中，BRCA2突變為體細胞突變。在一些態樣中，BRCA2突變引起BRCA2缺陷。

在一些態樣中，癌症為BRCA1突變型癌症及BRCA2突變型癌症。

在一些態樣中，癌症為BRCA1缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症為BRCA2缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症為BRCA1缺陷癌症及BRCA2缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症為PARP抑制劑難治性或抗性癌症。在一些態樣中，癌症為PARP抑制劑抗性或難治性BRCA1、BRCA2或BRCA1及BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，癌症為PARP抑制劑抗性或難治性BRCA1、BRCA2或BRCA1及BRCA2缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症具有編碼共濟失調毛細管擴張症突變(ATM)蛋白激酶之基因中的突變。在一些態樣中，ATM突變為生殖系突變。在一些態樣中，ATM突變為體細胞突變。在一些態樣中，癌症為ATM缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞。在一些態樣中，編碼p53之基因中之突變為生殖系突變。在一些態樣中，編碼p53之基因中之突變為體細胞突變。在一些態樣中，癌症包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞。

在一些態樣中，癌症具有編碼p53、BRCA1、BRCA2及ATM中之至少兩者之基因中的突變。

在一些態樣中，癌症包含具有升高水準之RAD51的細胞。在一些態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51蛋白水準。在一些態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51蛋白聚集點水準。在一些態樣中，自癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞中的至少10%為RAD51陽性。在一些態樣中，RAD51之升高水準為升高之RAD51 mRNA水準。在一些態樣中，在投與或治療之前已偵測到RAD51之升高水準。在一些態樣中，本文提供之方法或用途進一步包括在投與或治療之前偵測自個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。

在另一態樣中，本揭示案係關於一種治療USP1蛋白介導之病症及/或PARP蛋白介導之病症的方法，其包括以有效治療USP1蛋白介導之病症及/或PARP蛋白介導之病症之量向有需要之個體投與式I或II之USP1抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。在另一態樣中，本揭示案係關於一種治療USP1蛋白介導之病症及/或PARP蛋白介導之病症的方法，其包括以有效治療USP1蛋白介導之病症及/或PARP蛋白介導之病症之量向有需要之個體投與式I、式II或式III之USP1抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在另一態樣中，本揭示案係關於一種抑制USP1蛋白及/或PARP蛋白之方法，其包括使USP1蛋白及/或PARP蛋白接觸式I或II之USP1抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。在另一態樣中，本揭示案係關於一種抑制USP1蛋白及/或PARP蛋白之方法，其包括使USP1蛋白及/或PARP蛋白接觸式I、式II或式III之USP1抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及PARP抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

在一些態樣中，接觸發生於活體外。

在一些態樣中，接觸發生於活體內。

本揭示案之額外方面及優點將在隨後描述中部分地闡述，且將源自該描述，或可藉由實踐本揭示案來獲知。本揭示案之態樣及優點將藉助於尤其在隨附申請專利範圍中指出的要素及組合而實現及獲得。

應瞭解，以上概述及以下詳細描述僅為例示性及說明性的且不限制如所主張之本發明。

本揭示案之一個態樣係基於泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)蛋白抑制劑及聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑之組合的使用。組合可用於抑制USP1蛋白及/或PARP蛋白及治療對USP1蛋白及/或PARP蛋白受到抑制起反應之疾病、病症或疾患，例如癌症。

在一些態樣中，USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合提供協同效應。

在一些態樣中，USP1抑制劑及PARP抑制劑呈足以產生包含以下之治療效應之治療有效量：(i)減小腫瘤大小；(ii)增加癌症腫瘤消退速率；(iii)減少或抑制癌症腫瘤生長；及/或(iv)減少作為單一療法投與之PARP抑制劑之毒性效應。在一些態樣中，USP1抑制劑及PARP抑制劑可延遲、減少或預防腫瘤反彈(快速再生長)。

鑒於與PARP抑制劑奧拉帕尼之其他組合的耐受性尚未良好，本文提供之組合之耐受性(缺乏毒性)尤其令人意外。參見例如Samol, J.等人,Invest. New Drugs, 30:1493-500(2012)(「Further development of olaparib and topotecan in combination was not explored due to dose-limiting hematological AEs and the resulting sub-therapeutic MTD.」)。定義

除非另外定義，否則本文中使用之所有技術及科學術語具有與本揭示案所屬領域之一般技術人員通常所瞭解之含義相同的含義。萬一發生矛盾，將以本申請案為準，包括定義。此外，除非上下文另外需要，否則單數術語將包括複數且複數術語將包括單數。本文中提到之所有公開案、專利及其他參考文獻均以引用之方式整體併入以達成所有目的，如同特定且個別地指示各個別公開案或專利申請案以引用之方式併入一般。

雖然與本文所述之方法及材料類似或同等的方法及材料可用於實踐或測試本揭示案，但下文描述合適之方法及材料。材料、方法及實例僅係例示性的，且不意欲限制。本揭示案之其他特徵及優點將自以下詳細描述及申請專利範圍中顯而易見。

為進一步界定本揭示案，提供以下術語及定義。

應瞭解本文所述之實施例包括「由實施例組成」及/或「基本上由實施例組成」。如本文所用，除非另外指示，否則單數形式「一(a/an)」及「該」包括複數個提及物。本文中術語「或」之使用不意謂替代物是互斥的。

在本申請案中，除非明確闡述或所屬領域之技術人員所瞭解，否則「或」之使用意謂「及/或」。在多個附屬申請專利範圍之上下文中，「或」之使用重新提及超過一個前述獨立或附屬申請專利範圍。

術語「及/或」在用於本文中時看成特定揭示兩個指定特徵或組分每一者，有或者無另一者。因此，如例如「A及/或B」之短語中術語「及/或」意欲包括「A及B」或「A或B」、「A」(單獨)及「B」(單獨)。同樣，如例如「A、B及/或C」之短語中所用的術語「及/或」意欲涵蓋以下態樣中之每一個：A、B及C；A、B或C；A或C；A或B；B或C；A及C；A及B；B及C；A(單獨)；B(單獨)；以及C(單獨)。

如本文所用，術語「約」包括所述數目±10%。因此，「約10」意謂9至11。如所屬領域之技術人員所瞭解，本文中對「約」值或參數之提及包括(及描述)針對該值或參數本身之情況。舉例而言，關於「約X」之描述包括「X」之描述。

本揭示案涵蓋USP1抑制劑及PARP抑制劑之鹽之製備及使用，包括無毒醫藥學上可接受之鹽。醫藥學上可接受之加成鹽之實例包括無機酸及有機酸加成鹽及鹼性鹽。醫藥學上可接受之鹽包括(但不限於)金屬鹽，諸如鈉鹽、鉀鹽、銫鹽及其類似物；鹼土金屬，諸如鈣鹽、鎂鹽及其類似物；有機胺鹽，諸如三乙胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、二環己胺鹽、N,N’-二苯甲基乙二胺鹽及其類似物；無機酸鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽及其類似物；有機酸鹽，諸如檸檬酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、扁桃酸鹽、乙酸鹽、二氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、甲酸鹽及其類似物；磺酸鹽，諸如甲烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽及其類似物；及胺基酸鹽，諸如精胺酸鹽、天冬胺酸鹽、麩胺酸鹽及其類似物。如本文所用，術語「醫藥學上可接受之鹽」係指例如藉由與本揭示案之USP1抑制劑或PARP抑制劑之酸或鹼反應而獲得的在目標患者(例如哺乳動物，例如人類)中生理學上耐受之任何鹽。

酸加成鹽可藉由將特定USP1抑制劑或PARP抑制劑之溶液與醫藥學上可接受之無毒酸(諸如鹽酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、丁二酸、乙酸、檸檬酸、酒石酸、碳酸、磷酸、草酸、二氯乙酸或其類似物)之溶液混合來形成。鹼性鹽可藉由將本揭示案之USP1抑制劑或PARP抑制劑之溶液與醫藥學上可接受之無毒鹼之溶液(諸如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化膽鹼、碳酸鈉及其類似物)混合來形成。

在本揭示案之一些態樣中，在式I或式II之化合物與醫藥學上可接受之酸之間形成醫藥學上可接受之鹽。在本揭示案之一些態樣中，在式I、式II或式III之化合物與醫藥學上可接受之酸之間形成醫藥學上可接受之鹽。在一些態樣中，醫藥學上可接受之酸係選自由以下組成之群：1-羥基-2-萘甲酸、4-胺基水楊酸、抗壞血酸、己二酸、L-天冬胺酸、苯磺酸、苯甲酸、反式桂皮酸、檸檬酸、乙二碘酸、反丁烯二酸、半乳糖二酸、沒食子酸、龍膽酸、葡糖酸、D-葡糖醛酸、麩胺酸、戊二酸、乙醇酸、己酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、乳酸、順丁烯二酸、L-蘋果酸、丙二酸、R-扁桃酸、甲烷磺酸、黏液酸、萘磺酸、菸酸、草酸、棕櫚酸、對甲苯磺酸、磷酸、丙酸、糖精、水楊酸、硬脂酸、丁二酸、硫酸、L-酒石酸、香草酸及香草醛。在一些態樣中，醫藥學上可接受之酸係選自由苯甲酸沒食子酸、龍膽酸及水楊酸組成之群。

本揭示案涵蓋USP1抑制劑及/或PARP抑制劑之溶劑合物之製備及使用。溶劑合物通常不顯著地改變化合物之生理活性或毒性，因而可充當藥理學同等物。如本文所用，術語「溶劑合物」為本揭示案之USP1抑制劑或PARP抑制劑與溶劑分子之組合、物理締合及/或溶劑化，例如二溶劑合物、單溶劑合物或半溶劑合物，其中溶劑分子與本揭示案之化合物的比率分別為約2:1、約1:1或約1:2。此物理締合涉及不同程度之離子鍵及共價鍵，包括氫鍵鍵結。在某些情況下，諸如當一或多個溶劑分子併入結晶固體之晶格中時，溶劑合物可經分離。因此，「溶劑合物」涵蓋溶液期與可分離溶劑合物。本揭示案之USP1抑制劑或PARP抑制劑可呈與醫藥學上可接受之溶劑、諸如水、甲醇、乙醇及其類似物形成之溶劑合物存在，且意欲本揭示案包括本揭示案之USP1抑制劑及/或PARP抑制劑之溶劑化與非溶劑化形式。一種類型溶劑合物為水合物。「水合物」係指溶劑分子為水之溶劑合物之特定子組。溶劑合物通常可充當藥理學同等物。溶劑合物之製備為所屬領域中已知。參見例如M. Caira等人,J. Pharmaceut. Sci., 93(3) :601-611(2004)，其描述用乙酸乙酯及用水製備氟康唑(fluconazole)之溶劑合物。溶劑合物、半溶劑合物、水合物及其類似物之類似製備由以下描述：E.C. van Tonder等人,AAPS Pharm. Sci. Tech., 5(1) :Article 12(2004)，及A.L. Bingham等人,Chem. Commun. 603-604(2001)。製備溶劑合物之一典型非限制性方法將包括：在超過20℃至約25℃之溫度下使本揭示案之USP1抑制劑或PARP抑制劑溶解於所需溶劑(有機溶劑、水或其混合物)中，然後以足以形成晶體之速率冷卻溶液，且藉由已知方法，例如過濾來分離晶體。諸如紅外光譜分析之分析技術可用於證實溶劑合物晶體中溶劑之存在。

在本揭示案之一些態樣中，USP1抑制劑及/或PARP抑制劑氘化。在一些態樣中，USP1抑制劑及/或PARP抑制劑部分或完全氘化，亦即一或多個氫原子替換為氘原子。

如本文所用，「治療」為一種用於獲得有益或所需臨床結果之方法。如本文所用，「治療」涵蓋針對包括人類之哺乳動物中之疾病的治療劑之任何投與或施加。出於本揭示案之目的，有益或所需臨床結果包括(但不限於)以下任一或多種：減輕一或多種症狀、降低疾病程度、預防或延遲疾病擴散(例如轉移)、預防或延遲疾病復發、延遲或減緩疾病進展、改善疾病病況、抑制疾病或疾病進展、抑制或減緩疾病或其進展、阻止其發展及症狀緩解(無論部分還是整體)。「治療」亦涵蓋減少增生性疾病之病理性結果。本文提供之方法涵蓋此等治療態樣中之任一或多個。根據上述，術語治療無需百分百除去病症之所有態樣。

在癌症背景下，術語「治療」包括(但不限於)：抑制癌細胞生長、抑制癌細胞複製、減輕總腫瘤負荷及延遲、停止或減緩腫瘤生長、進展或轉移。

如本文所用，「延遲」意謂推遲、延滯、減緩、阻滯、穩定、抑制及/或延緩疾病(諸如癌症)之發展或進展。此延遲可具有變化之時間長度，視病史及/或治療之個體而定。

物質之「治療有效量」可根據諸如個體之疾病病況、年齡、性別及體重以及物質在個體中引起所需反應之能力的因素而變化。治療有效量亦為使治療有益作用勝過物質之任何有毒或不利影響的量。治療有效量可分一或多次投與來遞送。治療有效量係指在必需的劑量及時段下有效實現所需治療效應的量。

如本文所用，術語「組合」、「治療組合」、「組合式組合物」、「組合療法」或「醫藥組合」可包括在用於組合式投與之一種單位劑型、分開劑量單元或成套部件或說明書中的固定組合，其中USP1抑制劑及PARP抑制劑可同時獨立地投與或在時間間隔內分開投與。組合之醫藥組合物可適宜同時、分開或相繼經投與。

組合療法可提供「協同效應」且證實「協同」，亦即當一起使用之活性成分超過由該等化合物分開使用引起之作用之總和時實現的效應。協同效應可包括與分開投與時各活性成分之有效劑量相比兩種活性成分之組合之有效劑量顯著減少。協同效應亦可包括與分開投與時各活性成分之毒性相比兩種活性成分之組合之毒性減少。協同效應亦可為投與作為單一藥劑之任何活性成分所無法實現的效應。協同效應可包括(但不限於)藉由減小腫瘤大小、抑制腫瘤生長或增加個體存活率的癌症治療效應。協同效應亦可包括降低癌細胞活力、誘發癌細胞死亡及抑制或延遲癌細胞生長。例如當活性成分如下時可實現協同效應：(1)共同調配及在組合之單位劑量調配物中同時經投與或遞送；(2)連續、交替或作為分開調配物並行遞送；或(3)藉由一些其他方案。當以交替療法遞送時，當化合物相繼經投與或遞送時可實現協同效應。

USP1抑制劑與PARP抑制劑之間的協同相互作用之測定可基於自本文所述之測定獲得的結果。舉例而言，可使用Bliss獨立性模型評估組合效應。Bliss評分量化自單一藥劑增強之程度，且Bliss評分＞0表示超過僅僅累加性。在一些態樣中，Bliss評分超過10指示強協同效應。在其他態樣中，6或更大之評分指示協同效應。在一些態樣中，Bliss評分為約6、約7、約8、約9、約10、約11、約12、約13、約14、約15、約16、約17、約18、約19、約20或約25。

如本文所用，「同源重組缺陷評分」或「HRD評分」意謂腫瘤基因組不穩定性之三種量度，亦即雜合性丟失(loss of heterozygosity)、端粒對偶基因不平衡(telomeric allelic imbalance)及大片段遷移(large-scale state transitions)之算法評定。

術語「投與(administer/administering/ administration)」及其類似術語係指可用於實現治療劑遞送至所需生物作用部位之方法。可用於本文所述之藥劑及方法的投與技術可見於例如Goodman及Gilman,The Pharmacological Basis of Therapeutics , 當前版本； Pergamon；及Remington’s,Pharmaceutical Sciences ( current edition), Mack Publishing Co., Easton, Pa。兩種或更多種治療劑之投與包括同時(併發)及以任何次序連續投與。

術語「醫藥調配物」及「醫藥組合物」係指為允許活性成分之生物活性有效而呈此類形式且不含對調配物將投與之個體具有不可接受之毒性的額外組分的製劑。此類調配物可為無菌的。

如本文所用，術語「醫藥學上可接受」係指在合理醫學判斷範疇內，適合與人類及動物之組織接觸使用，無過度毒性、刺激、過敏反應或其他問題或併發症，與合理利益/風險比相稱的彼等化合物、物質、組合物及/或劑型。

「醫藥學上可接受之載劑」係指所屬領域中習知用於治療劑以一起構成用於投與個體之醫藥組合物的無毒固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、囊封材料、調配助劑或載劑。醫藥學上可接受之載劑在所採用劑量及濃度下對接受者無毒性，且與調配物之其他成分相容。醫藥學上可接受之載劑適於所採用之調配物。

「無菌」調配物係無菌的，或基本上不含活微生物及其孢子。

術語「容器」意謂適合於儲存、運送、分配及/或處置醫藥產品之任何貯器及其蓋板。

術語「插頁」或「包裝說明書」意謂伴隨醫藥產品之資訊，其提供關於如何投與產品之描述以及允許醫師、藥劑師及患者對於產品之使用作出理性決斷所需之安全性及功效資料。一般認為包裝說明書為醫藥產品之「標籤」。

如本文所用，術語「疾病」或「疾患」或「病症」係指需要及/或希望治療之疾患，且表示通常被認為是病理學疾患或功能且本身可表現為特定徵象、症狀及/或官能障礙之形式的紊亂及/或異常。如以下所示，本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑之組合可用於治療其中USP1及/或PARP蛋白之抑制提供益處之疾病及疾患，諸如增生性疾病。

術語「多肽」及「蛋白質」可互換使用以指胺基酸殘基之聚合物且不侷限於最小長度。此類胺基酸殘基之聚合物可含有天然或非天然胺基酸殘基，且包括(但不限於)肽、寡肽、胺基酸殘基之二聚體、三聚體及多聚體。該定義涵蓋全長蛋白質及其片段兩者。該等術語亦包括多肽之表現後修飾，例如糖基化、唾液酸化、乙醯化、磷酸化及其類似修飾。此外，出於本揭示案之目的，「多肽」係指包括對天然序列之修飾，諸如缺失、添加及取代(一般本質上保守的)的蛋白質，只要蛋白質維持所需活性即可。此等修飾可為故意的，如經由定點誘變，或可為偶然的，例如經由產生蛋白質之宿主之突變或因PCR擴增而引起之誤差。

如本文所用，「USP1」及「泛素特異性加工蛋白酶1」係指任何天然多肽或編碼USP1之多核苷酸。術語「USP1」涵蓋「全長」未加工USP1多肽，以及由細胞內之加工(例如移除信號肽)引起之任何形式USP1。該術語亦涵蓋USP1之天然存在之變異體，例如由剪接變異體及對偶基因變異體編碼之變異體。本文所述之USP1多肽可自多種來源，諸如自人類組織類型或自另一個來源分離，或藉由重組或合成方法製備。已知人類USP1序列且包括例如可作為UniProt No. O94782公開獲得之序列(包括同功型)。如本文所用，術語「人類USP1蛋白」係指包含如SEQ ID NO:1中所示之胺基酸序列的USP1蛋白： MPGVIPSESNGLSRGSPSKKNRLSLKFFQKKETKRALDFTDSQENEEKASEYRASEIDQVVPAAQSSPINCEKRENLLPFVGLNNLGNTCYLNSILQVLYFCPGFKSGVKHLFNIISRKKEALKDEANQKDKGNCKEDSLASYELICSLQSLIISVEQLQASFLLNPEKYTDELATQPRRLLNTLRELNPMYEGYLQHDAQEVLQCILGNIQETCQLLKKEEVKNVAELPTKVEEIPHPKEEMNGINSIEMDSMRHSEDFKEKLPKGNGKRKSDTEFGNMKKKVKLSKEHQSLEENQRQTRSKRKATSDTLESPPKIIPKYISENESPRPSQKKSRVKINWLKSATKQPSILSKFCSLGKITTNQGVKGQSKENECDPEEDLGKCESDNTTNGCGLESPGNTVTPVNVNEVKPINKGEEQIGFELVEKLFQGQLVLRTRCLECESLTERREDFQDISVPVQEDELSKVEESSEISPEPKTEMKTLRWAISQFASVERIVGEDKYFCENCHHYTEAERSLLFDKMPEVITIHLKCFAASGLEFDCYGGGLSKINTPLLTPLKLSLEEWSTKPTNDSYGLFAVVMHSGITISSGHYTASVKVTDLNSLELDKGNFVVDQMCEIGKPEPLNEEEARGVVENYNDEEVSIRVGGNTQPSKVLNKKNVEAIGLLGGQKSKADYELYNKASNPDKVASTAFAENRNSETSDTTGTHESDRNKESSDQTGINISGFENKISYVVQSLKEYEGKWLLFDDSEVKVTEEKDFLNSLSPSTSPTSTPYLLFYKKL(SEQ ID NO:1)。

USP1為充當與UAF1之複合物之一部分的去泛素化酶。USP1之「去泛素化酶活性」包括其作為USP1-UAF1複合物之一部分去泛素化的能力。

如本文所用，「PARP」或「PARP蛋白」係指酶之聚(ADP-核糖)聚合酶家族中之一或多種。該家族包括能夠催化ADP-核糖轉移至靶蛋白之酶(聚ADP-核糖基化)。PARP家族存在至少18個成員，由不同基因編碼，且共享保守催化結構域之同源性，包括PARP-1、PARP-2及PARP-3。

所屬領域中對術語「特異性結合」理解透徹，且所屬領域中亦熟知測定此類特異性結合之方法。若一分子與特定蛋白質或蛋白質之結構域的反應或締合比其與替代蛋白質或結構域的反應或締合更頻繁、更迅速、持續時間更長及/或親和力更大，則稱其展現「特異性結合」或「優先結合」。應瞭解，特異性或優先結合於第一蛋白質或結構域之分子可能或可能不特異性或優先結合於第二蛋白質或結構域。因而，「特異性結合」或「優先結合」不一定需要(不過其可包括)專一結合。一般但不一定，對結合之提及意謂優先結合。舉例而言，特異性結合於USP1、UAF1及/或USP1-UAF1複合物之USP1抑制劑可能不結合於其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)，或可能以與結合於USP1相比有所降低之親和力結合於其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)。

術語「減少(reduction/reduce)」「抑制 (inhibition/inhibit)」係指任何表型特徵之減少或停止或該特徵之發生率、程度或可能性的降低或停止。「減少」或「抑制」係指與參考相比有所降低、減少或阻止活性、功能及/或量。在一些實施例中，「減少」或「抑制」意謂能夠引起20%或更大的總體減少。在一些實施例中，「減少」或「抑制」意謂能夠引起50%或更大的總體減少。在一些實施例中，「減少」或「抑制」意謂能夠引起75%、85%、90%、95%或更大的總體減少。在一些實施例中，在一段時間內，相對於相同時段內的對照物，抑制或減少以上指示之量。

在一些態樣中，抑制USP1蛋白為USP1蛋白之一或多種活性或功能之抑制。應瞭解，可在活體外或活體內抑制一或多種USP1蛋白之活性或功能。USP1之活性及功能之非限制性實例包括去泛素化酶活性及與UAF1形成複合物，且如本文所述。一或多種USP1蛋白之活性之抑制的示例性水準包括至少10%抑制、至少20%抑制、至少30%抑制、至少40%抑制、至少50%抑制、至少60%抑制、至少70%抑制、至少80%抑制、至少90%抑制及多達100%抑制。

在一些態樣中，抑制PARP蛋白為PARP蛋白之一或多種活性或功能之抑制。應瞭解，可在活體外或活體內抑制一或多種PARP蛋白之活性或功能。本文描述PARP之活性及功能之非限制性實例。一或多種PARP蛋白之活性之抑制的示例性水準包括至少10%抑制、至少20%抑制、至少30%抑制、至少40%抑制、至少50%抑制、至少60%抑制、至少70%抑制、至少80%抑制、至少90%抑制及多達100%抑制。

術語「個體(individual/subject)」可在本文中互換使用，係指動物，例如哺乳動物，諸如人類。在一些情況下，提供治療哺乳動物之方法，該等哺乳動物包括(但不限於)人類、囓齒動物、猿、貓科動物、犬科動物、馬科動物、牛類動物、豬科動物、綿羊、山羊、哺乳類實驗動物、哺乳類家畜、哺乳類運動動物及哺乳類寵物。在一些實例中，「個體」係指需要治療疾病或病症之個體。在一些情況下，接受治療之個體可為患者，此表示個體已確定為患有與治療相關之病症，或處於感染該病症之特定風險下。

如本文所用，術語「癌症」及「腫瘤」係指或描述哺乳動物中細胞群體之特徵在於不受管制之細胞生長的生理疾患。該等術語涵蓋實體及血液癌症/淋巴癌。癌症實例包括但不限於DNA損傷修復路徑缺陷癌症。癌症之額外實例包括(但不限於)卵巢癌、乳癌(包括三陰性乳癌)、非小細胞肺癌(NSCLC)及骨肉瘤。癌症可為BRCA1或BRCA2野生型。癌症亦可為BRCA1或BRCA2突變體。癌症可進一步為PARP抑制劑抗性或難治性癌症，或PARP抑制劑抗性或難治性BRCA1或BRCA2突變型癌症。

如本文所用，術語「功能喪失型」突變係指引起基因缺乏、基因表現降低或產生具有降低活性或無活性之基因產物(例如蛋白質)。功能喪失型突變包括例如錯義突變、核苷酸插入、核苷酸缺失及基因缺失。功能喪失型突變亦包括顯性陰性突變。因此，具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞包括含有編碼p53之基因中之錯義突變的癌細胞以及缺乏編碼p53之基因之癌細胞。 USP1抑制劑

在一些態樣中，本揭示案之泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑包含如下化合物：式I：

式II：

或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。

式I之USP1抑制劑之化學名稱為6-(4-環丙基-6-甲氧基嘧啶-5-基)-1-(4-(1-異丙基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)苯甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，如美國申請案第16/721,079號中所述。

式II之USP1抑制劑之化學名稱為6-(4-環丙基-6-甲氧基嘧啶基-5-基)-1-(4-(1-甲基-4-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)苯甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，如美國申請案第16/721,079號中所述。

美國申請案第16/721,079號以引用之方式整體併入本文中。

式II：

式III：

式III之USP1抑制劑之化學名稱為6-(4-環丙基-6-甲氧基嘧啶-5-基)-1-(4-(5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)苯甲基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶，如美國申請案第16/721,079號中所述。美國申請案第16/721,079號以引用之方式整體併入本文中。

在多種態樣中，USP1抑制劑降低USP1蛋白之水準及/或抑制或降低USP1蛋白之至少一種生物活性。

在一些態樣中，USP1抑制劑特異性結合於USP1蛋白。在一些態樣中，USP1抑制劑特異性結合於USP1-UAF1複合物中之USP1蛋白。在一些態樣中，USP1抑制劑特異性結合於USP1 mRNA。在一些態樣中，USP1抑制劑特異性結合於USP1蛋白(單獨或USP1-UAF1複合物中)或USP1 mRNA。在一些態樣中，USP1抑制劑特異性結合於UAF1(單獨或USP1-UAF1複合物中)且抑制或降低USP1-UAF1複合物之形成或活性。

在一些態樣中，USP1抑制劑減少USP1-UAF1複合物之形成。在一些態樣中，USP1抑制劑降低USP1-UAF1複合物之活性。在一些態樣中，USP1抑制劑降低USP1之去泛素化酶活性。在一些態樣中，USP1抑制劑增加單泛素化PCNA。在一些態樣中，USP1抑制劑增加單泛素化FANCD2。在一些態樣中，USP1抑制劑增加單泛素化FANCI。

在一些態樣中，USP1抑制劑不結合於其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)，或以與對USP1之親和力相比有所降低至少5倍、至少10倍、至少20倍或至少100倍的親和力(亦即USP1抑制劑對其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)之K_D 比對USP1之K_D 高至少5倍、至少10倍、至少20倍或至少100倍)結合去泛素化酶其他USP蛋白質或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)。

在一些態樣中，USP1抑制劑以例如如使用美國專利申請公開案第2017/0145012號中揭示之分析所量測，少於約50 nM、約50 nM與約200 nM之間、約200 nM與約2 pM之間或超過2 pM之IC50，或例如如使用Liang等人,Nat Chem Biol 10 : 289-304(2014)中揭示之分析所量測，50 nM至1000 nM之IC50抑制USP1去泛素化酶活性。在一些態樣中，USP1抑制劑以如使用Chen等人,Chem Biol. , 18 (11):1390-1400(2011)中揭示之分析所量測之IC50抑制USP1去泛素化酶活性。在一些態樣中，USP1抑制劑不抑制其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)之活性，或以與抑制USP1去泛素化酶活性之IC50相比高至少5倍、至少10倍、至少20倍或至少100倍的IC50抑制其他去泛素化酶、其他USP蛋白或其他UAF1複合物(例如USP46-UAF1)之活性。

在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以在1 pM至100 μM或1 pM至1 μM或1 pM至500 nM或1 pM至100 nM範圍內之親和力結合於USP1蛋白。在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以約1 pM至約100 μM、約1 nM至約100 μM、約1 μM至約100 μM、約1 μM至約50 μM、約1 μM至約40 μM、約1 μM至約30 μM、約1 μM至約20 μM或約1 μM至約10 μM、約1 μM、約5 μM、約10 μM、約15 μM、約20 μM、約25 μM、約30 μM、約35 μM、約40 μM、約45 μM、約50 μM、約60 μM、約70 μM、約80 μM、約90 μM或約100 μM之親和力結合於USP1蛋白。在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以約100 nM至約1 μM、約100 nM至約900 nM、約100 nM至約800 nM、約100 nM至約700 nM、約100 nM至約600 nM、約100 nM至約500 nM、約100 nM至約400 nM、約100 nM至約300 nM、約100 nM至約200 nM、約200 nM至約1 μM、約300 nM至約1 μM、約400 nM至約1 μM、約500 nM至約1 μM、約600 nM至約1 μM、約700 nM至約1 μM、約800 nM至約1 μM、約900 nM至約1 μM、約100 nM、約200 nM、約300 nM、約400 nM、約500 nM、約600 nM、約700 nM、約800 nM或約900 nM之親和力結合於USP1蛋白。在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以約1 nM至約100 nM、1 nM至約90 nM、1 nM至約80 nM、1 nM至約70 nM、1 nM至約60 nM、1 nM至約50 nM、1 nM至約40 nM、1 nM至約30 nM、1 nM至約20 nM、1 nM至約10 nM、約10 nM至約100 nM、約20 nM至約100 nM、約30 nM至約100 nM、約40 nM至約100 nM、約50 nM至約100 nM、約60 nM至約100 nM、約70 nM至約100 nM、約80 nM至約100 nM、約90 nM至約100 nM、約1 nM、約2 nM、約3 nM、約4 nM、約5 nM、約6 nM、約7 nM、約8 nM、約9 nM、約10 nM、約20 nM、約30 nM、約40 nM、約50 nM、約60 nM、約70 nM、約80 nM、約90 nM或約100 nM之親和力結合於USP1蛋白。

在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以少於1 μM、少於500 nM、少於100 nM、少於10 nM或少於1 nM之親和力結合於USP1蛋白。在一些態樣中，USP1抑制劑以少於1 nM之親和力結合於USP1蛋白。

在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以1 pM至100 μM或1 pM至1 μM或1 pM至500 nM或1 pM至100 nM之IC₅₀ 抑制USP1活性。在一些態樣中，USP1抑制劑以約1 pM至約100 μM、約1 nM至約100 μM、約1 μM至約100 μM、約1 μM至約50 μM、約1 μM至約40 μM、約1 μM至約30 μM、約1 μM至約20 μM或約1 μM至約10 μM、約1 μM、約5 μM、約10 μM、約15 μM、約20 μM、約25 μM、約30 μM、約35 μM、約40 μM、約45 μM、約50 μM、約60 μM、約70 μM、約80 μM、約90 μM或約100 μM之IC₅₀ 抑制USP1活性。在一些態樣中，USP1抑制劑以約100 nM至約1 μM、約100 nM至約900 nM、約100 nM至約800 nM、約100 nM至約700 nM、約100 nM至約600 nM、約100 nM至約500 nM、約100 nM至約400 nM、約100 nM至約300 nM、約100 nM至約200 nM、約200 nM至約1 μM、約300 nM至約1 μM、約400 nM至約1 μM、約500 nM至約1 μM、約600 nM至約1 μM、約700 nM至約1 μM、約800 nM至約1 μM、約900 nM至約1 μM、約100 nM、約200 nM、約300 nM、約400 nM、約500 nM、約600 nM、約700 nM、約800 nM或約900 nM之IC₅₀ 抑制USP1活性。

在一些態樣中，本揭示案之USP1抑制劑以約1 nM至約100 nM、1 nM至約90 nM、1 nM至約80 nM、1 nM至約70 nM、1 nM至約60 nM、1 nM至約50 nM、1 nM至約40 nM、1 nM至約30 nM、1 nM至約20 nM、1 nM至約10 nM、約10 nM至約100 nM、約20 nM至約100 nM、約30 nM至約100 nM、約40 nM至約100 nM、約50 nM至約100 nM、約60 nM至約100 nM、約70 nM至約100 nM、約80 nM至約100 nM、約90 nM至約100 nM、約1 nM、約2 nM、約3 nM、約4 nM、約5 nM、約6 nM、約7 nM、約8 nM、約9 nM、約10 nM、約20 nM、約30 nM、約40 nM、約50 nM、約60 nM、約70 nM、約80 nM、約90 nM或約100 nM之IC₅₀ 抑制USP1活性。在一些態樣中，USP1抑制劑以少於1 μM、少於500 nM、少於100 nM、少於10 nM或少於1 nM之IC₅₀ 抑制USP1活性。在一些態樣中，USP1抑制劑以少於1 nM之IC₅₀ 抑制USP1活性。

其他示例性USP1抑制劑揭示於例如WO 2020/132269及美國臨時申請案62/857,986(各以引用之方式整體併入本文中)中。關於USP1抑制之示例性分析

所屬領域中之任何合適分析可用於測定活性，偵測結果或效應，或測定功效。參見例如美國申請案第16/721,079號。美國申請案第16/721,079號以引用之方式整體併入本文中。

在一些情況下，確定USP1抑制劑化合物是否抑制USP1去泛素化酶活性之方法量測在去泛素化酶結合之雙泛素裂解後質量之變化。舉例而言，泛素醛及泛素乙烯碸形成與去泛素化酶之共價不可逆鍵，此對去泛素化酶引起可觀察到之質量變化。類似地，雙泛素之裂解引起可觀察到之質量變化。

在一些情況下，確定USP1抑制劑化合物是否抑制USP1去泛素化酶活性之方法涉及在裂解後發光或螢光之增加，例如可在盤式讀數器上監測。此類分析可使用經由連接子鍵連接於螢光團之泛素，諸如泛素-7-胺基-4-甲基香豆素(Ub-AMC)或泛素-若丹明110。此類分析亦可使用含有異肽鍵之雙泛素。示例性雙泛素可在一種泛素上包含螢光團且在另一泛素上包含猝滅劑，使得螢光之後隨著泛素裂解而增加。此類分析亦可使用酶偶合系統，其中泛素與在自泛素釋放時只有效產生螢光酶產物之酶偶合。 PARP抑制劑

在多個態樣中，本揭示案之PARP抑制劑降低一或多種PARP蛋白之水準及/或抑制或降低一或多種PARP蛋白之至少一種生物活性。

PARP抑制劑包括例如奧拉帕尼(Lynparza®)、盧卡帕尼(Rubraca®)、尼拉帕尼(Zejula®)及他拉唑帕尼(Talzenna®)。

在一個態樣中，PARP抑制劑為尼拉帕尼(Zejula®)，其呈尼拉帕尼甲苯磺酸鹽單水合物出售。尼拉帕尼甲苯磺酸鹽單水合物之化學名稱為2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H吲哚7-甲醯胺4-甲基苯磺酸鹽水合物(1:1:1)。尼拉帕尼甲苯磺酸鹽之分子式為C₂₆ H₃₀ N₄ O₅ S，且其具有492.6 g/mol之分子量。

尼拉帕尼為在DNA修復中起作用之聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)酶PARP-1及PARP-2之抑制劑。活體外研究已顯示，尼拉帕尼誘發之細胞毒性可涉及PARP酶活性之抑制及增加PARP-DNA複合物之形成，引起DNA損傷、細胞凋亡及細胞死亡。在有或沒有BRCA1/2 缺陷之腫瘤細胞株中觀測到增加之尼拉帕尼誘發之細胞毒性。在具有BRCA1/2 缺陷之人類癌細胞株之小鼠異種移植模型中及具有具突變或野生型BRCA1/2 之同源重組缺陷的人類患者來源之異種移植腫瘤模型中尼拉帕尼減少腫瘤生長。

在另一態樣中，PARP抑制劑為奧拉帕尼(Lynparza®)。化學名稱為4-[(3-{[4-(環丙基羰基)哌嗪-1-基]羰基}-4-氟苯基)-甲基]酞嗪-1(2H )-酮。分子式為C₂₄ H₂₃ FN₄ O₃ ，且分子量為434.5 g/mol。

奧拉帕尼為聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)酶，包括PARP1、PARP2及PARP3之抑制劑。已顯示奧拉帕尼作為單一療法或在基於鉑之化學療法之後，均抑制活體外精選腫瘤細胞株之生長且減少人類癌症之小鼠異種移植模型中之腫瘤生長。在具有涉及DNA損傷之同源重組修復(HRR)且與鉑反應相關的BRCA 及非BRCA 蛋白之缺陷的細胞株及小鼠腫瘤模型中注意到在用奧拉帕尼處理之後增加的細胞毒性及抗腫瘤活性。活體外研究已顯示，奧拉帕尼誘發之癌細胞毒性可涉及PARP酶活性之抑制及增加PARP-DNA複合物之形成，引起DNA損傷及癌細胞死亡。

在一個態樣中，PARP抑制劑與本揭示案之USP1抑制劑用於抗癌組合療法中。除PARP抑制劑及USP1抑制劑外，可在組合療法之前、期間或之後使用其他療法。關於PARP抑制之示例性分析

本揭示案提供有效抑制PARP活性之化合物。所屬領域中之任何合適分析可用於測定活性，偵測結果或效應，或測定功效。參見例如Dillon等人,JBS., 8(3), 347-352(2003)；美國專利第9,566,276號。

在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以少於約50 nM、約50 nM與約200 nM之間、約200 nM與約2 pM之間或超過2 pM之IC₅₀ 抑制PARP活性。

在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以在1 pM至100 μM或1 pM至1 μM或1 pM至500 nM或1 pM至100 nM範圍內之親和力結合PARP蛋白。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約1 pM至約100 μM、約1 nM至約100 μM、約1 μM至約100 μM、約1 μM至約50 μM、約1 μM至約40 μM、約1 μM至約30 μM、約1 μM至約20 μM或約1 μM至約10 μM、約1 μM、約5 μM、約10 μM、約15 μM、約20 μM、約25 μM、約30 μM、約35 μM、約40 μM、約45 μM、約50 μM、約60 μM、約70 μM、約80 μM、約90 μM或約100 μM之親和力結合PARP蛋白。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約100 nM至約1 μM、約100 nM至約900 nM、約100 nM至約800 nM、約100 nM至約700 nM、約100 nM至約600 nM、約100 nM至約500 nM、約100 nM至約400 nM、約100 nM至約300 nM、約100 nM至約200 nM、約200 nM至約1 μM、約300 nM至約1 μM、約400 nM至約1 μM、約500 nM至約1 μM、約600 nM至約1 μM、約700 nM至約1 μM、約800 nM至約1 μM、約900 nM至約1 μM、約100 nM、約200 nM、約300 nM、約400 nM、約500 nM、約600 nM、約700 nM、約800 nM或約900 nM之親和力結合PARP蛋白。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約1 nM至約100 nM、1 nM至約90 nM、1 nM至約80 nM、1 nM至約70 nM、1 nM至約60 nM、1 nM至約50 nM、1 nM至約40 nM、1 nM至約30 nM、1 nM至約20 nM、1 nM至約10 nM、約10 nM至約100 nM、約20 nM至約100 nM、約30 nM至約100 nM、約40 nM至約100 nM、約50 nM至約100 nM、約60 nM至約100 nM、約70 nM至約100 nM、約80 nM至約100 nM、約90 nM至約100 nM、約1 nM、約2 nM、約3 nM、約4 nM、約5 nM、約6 nM、約7 nM、約8 nM、約9 nM、約10 nM、約20 nM、約30 nM、約40 nM、約50 nM、約60 nM、約70 nM、約80 nM、約90 nM或約100 nM之親和力結合PARP蛋白。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以少於1 μM、少於500 nM、少於100 nM、少於10 nM或少於1 nM之親和力結合PARP蛋白。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以少於1 nM之親和力結合PARP蛋白。

在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以1 pM至100 μM或1 pM至1 μM或1 pM至500 nM或1 pM至100 nM之IC₅₀ 抑制PARP活性。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約1 pM至約100 μM、約1 nM至約100 μM、約1 μM至約100 μM、約1 μM至約50 μM、約1 μM至約40 μM、約1 μM至約30 μM、約1 μM至約20 μM或約1 μM至約10 μM、約1 μM、約5 μM、約10 μM、約15 μM、約20 μM、約25 μM、約30 μM、約35 μM、約40 μM、約45 μM、約50 μM、約60 μM、約70 μM、約80 μM、約90 μM或約100 μM之IC₅₀ 抑制PARP活性。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約100 nM至約1 μM、約100 nM至約900 nM、約100 nM至約800 nM、約100 nM至約700 nM、約100 nM至約600 nM、約100 nM至約500 nM、約100 nM至約400 nM、約100 nM至約300 nM、約100 nM至約200 nM、約200 nM至約1 μM、約300 nM至約1 μM、約400 nM至約1 μM、約500 nM至約1 μM、約600 nM至約1 μM、約700 nM至約1 μM、約800 nM至約1 μM、約900 nM至約1 μM、約100 nM、約200 nM、約300 nM、約400 nM、約500 nM、約600 nM、約700 nM、約800 nM或約900 nM之IC₅₀ 抑制PARP活性。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以約1 nM至約100 nM、1 nM至約90 nM、1 nM至約80 nM、1 nM至約70 nM、1 nM至約60 nM、1 nM至約50 nM、1 nM至約40 nM、1 nM至約30 nM、1 nM至約20 nM、1 nM至約10 nM、約10 nM至約100 nM、約20 nM至約100 nM、約30 nM至約100 nM、約40 nM至約100 nM、約50 nM至約100 nM、約60 nM至約100 nM、約70 nM至約100 nM、約80 nM至約100 nM、約90 nM至約100 nM、約1 nM、約2 nM、約3 nM、約4 nM、約5 nM、約6 nM、約7 nM、約8 nM、約9 nM、約10 nM、約20 nM、約30 nM、約40 nM、約50 nM、約60 nM、約70 nM、約80 nM、約90 nM或約100 nM之IC₅₀ 抑制PARP活性。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以少於1 μM、少於500 nM、少於100 nM、少於10 nM或少於1 nM之IC₅₀ 抑制PARP活性。在一些態樣中，本揭示案之PARP抑制劑以少於1 nM之IC₅₀ 抑制PARP活性。敏感性癌症及鑒別敏感性癌症之方法

如本文中所證實，包含具有升高水準之RAD51之細胞的癌症對USP1抑制劑及/或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合敏感。RAD51之升高水準可為升高RAD51蛋白水準、升高RAD51蛋白聚集點水準及/或升高RAD51 mRNA水準。

本文提供多種鑒別癌症為USP1抑制劑敏感性癌症及/或對USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合敏感之癌症的方法。在一些情況下，此類方法包括偵測癌細胞中之RAD51(例如RAD51蛋白、RAD51蛋白聚集點及/或RAD51 mRNA)水準(例如使用自癌症獲得之樣品)。可使用例如免疫螢光、西方墨點法、螢光活化細胞分類術(FACS)及/或免疫組織化學偵測RAD51蛋白水準。可例如使用定量逆轉錄酶(RT)-聚合酶鏈式反應(PCR)偵測RAD51 mRNA水準。升高水準之RAD51蛋白及/或mRNA指示癌症對USP1抑制劑或對USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合敏感。

偵測RAD51及RAD51蛋白聚集點之方法提供於例如Castroviejo-Bermejo, Marta等人,EMBO Molecular Medicine 10(12): e9172(2018)中，其以引用之方式整體併入本文中。可例如使用免疫螢光偵測RAD51。可在福馬林(formalin)固定石蠟包埋之(FFPE)腫瘤樣品上，藉由對具有5個或更多個RAD51細胞核聚集點之處於細胞週期S/G2期之細胞(例如孿蛋白陽性細胞)的百分比進行評分來定量例如0.42-1.15 μm直徑之RAD51聚集點。在一些態樣中，包含具有升高水準之RAD51之細胞的癌症為至少10%之處於細胞週期S/G2期之細胞(例如孿蛋白陽性細胞)呈RAD51陽性的癌症。

在一些態樣中，一種選擇患有癌症之個體來用USP1抑制劑(視情況與PARP抑制劑組合)治療的方法包括確定該癌症是否包含具有升高水準之RAD51之細胞，其中若癌症包含具有升高水準之RAD51之細胞，則選擇該個體用視情況與PARP抑制劑組合之USP1抑制劑治療。

具有升高水準之RAD51之癌症可為同源重組缺陷癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA1突變型癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA2突變型癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA1突變與BRCA2突變型癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA1及BRCA2基因中具有有害或懷疑具有有害突變及/或例如如使用myChoice^® CDx(Myriad^® )所測定，具有正基因組不穩定性評分的癌症。使用方法

因為本揭示案之組合為USP1蛋白及PARP蛋白之抑制劑，所以本揭示案提供一種抑制USP1蛋白及/或PARP蛋白之方法，其包括使USP1及/或PARP蛋白或包含USP1及/或PARP蛋白之組合物接觸本揭示案之一或多種組合。

因為本揭示案之組合為USP1及PARP蛋白之抑制劑，所以由USP1及/或PARP蛋白介導之大量疾病、疾患或病症可藉由採用此等化合物治療。本揭示案因此一般係針對治療罹患對USP1及/或PARP蛋白之抑制起反應之疾病、疾患或病症或處於罹患該病症之風險下的動物中之該病症的方法，該方法包括向該動物投與有效量之本揭示案之一或多種組合。

本揭示案進一步針對一種抑制有需要之動物中之USP1及/或PARP蛋白的方法，該方法包括向該動物投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，本揭示案之組合可用於抑制USP1及/或PARP蛋白之活性。例如，在一些態樣中，抑制USP1及/或PARP蛋白之方法包括使USP1及/或PARP蛋白接觸本揭示案之組合。接觸可發生在活體外或活體內。

在一些態樣中，本揭示案之組合可用於治療USP1及/或PARP蛋白介導之病症。USP1及/或PARP蛋白介導之病症為已知USP1及/或PARP蛋白在其中起作用之任何病理性疾患。在一些態樣中，USP1及/或PARP介導之病症為增生性疾病，諸如癌症。在一些態樣中，本揭示案之組合可延遲、減少或預防腫瘤反彈(快速再生長)。在一些態樣中，本揭示案之組合不比單獨USP1抑制劑毒性顯著更大。在一些態樣中，本揭示案之組合不比單獨PARP抑制劑毒性顯著更大。在一些態樣中，本揭示案之組合不比單獨USP1抑制劑或單獨PARP抑制劑毒性顯著更大。

在一些態樣中，本揭示案之組合比單獨PARP抑制劑毒性小。因此，在一些態樣中，本揭示案提供一種治療先前接受用第一聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑治療之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與泛素特異性加工蛋白酶(USP1)抑制劑及第二PARP抑制劑，其中該第一PARP抑制劑及該第二PARP抑制劑為相同或不同PARP抑制劑。用第一PARP抑制劑治療可例如由於不可接受之毒性及/或不可接受之不良反應而中斷或中止。示例性毒性或不良反應包括諸如血小板減少、貧血或嗜中性白血球減少之血液毒性、肺炎、呼吸困難、發燒、咳嗽、喘鳴、放射學異常、高血壓、骨髓發育不良症候群/急性骨髓性白血病(MDS/AML)、噁心及/或疲勞。

在一些態樣中，用第一PARP抑制劑治療中斷至少一週，視情況一週至四週。在一些態樣中，中斷至少兩週，視情況兩週至四週。在一些態樣中，中斷至少三週，視情況三週至四週。在一些態樣中，中斷至少四週。在一些態樣中，中斷至多四週。

在一些態樣中，第一PARP抑制劑之劑量降低，例如降低至在降低之前之劑量的四分之一、三分之一、二分之一、三分之二或四分之三。第一PARP抑制劑可為奧拉帕尼且在降低之前之劑量可為每日服用400 mg兩次。此類劑量可降低例如至每日服用200 mg兩次或每日服用100 mg兩次。第一PARP抑制劑可為尼拉帕尼且在降低之前之劑量可為每日服用300 mg一次。此類劑量可降低例如至每日服用200 mg一次或每日服用100 mg一次。第一PARP抑制劑可為他拉唑帕尼且在降低之前之劑量可為每日服用1 mg一次。此類劑量可降低例如至每日服用0.75 mg一次、每日服用0.5 mg一次或每日服用0.25 mg一次。第一PARP抑制劑可為盧卡帕尼且在降低之前之劑量可為每日服用600 mg一次。此類劑量可降低例如至每日服用500 mg兩次、每日服用400 mg兩次或每日服用300 mg兩次。

本文提供用本揭示案之組合治療疾病及病症之多種方法。可用本揭示案之組合治療之示例性疾病及病症包括(但不限於)癌症。

在一些態樣中，提供用本揭示案之組合治療癌症之方法。此類方法包括向患有癌症之個體投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症係選自血液癌症、淋巴癌及DNA損傷修復路徑缺陷癌症。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞的癌症。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞的癌症。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具有編碼BRCA1之基因中之突變的癌細胞的癌症。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具有編碼BRCA2之基因中之突變的癌細胞的癌症。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具有編碼ATM之基因中之功能喪失型突變的癌細胞的癌症。

在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症係選自非小細胞肺癌(NSCLC)、骨肉瘤、卵巢癌及乳癌。在一些態樣中，癌症為子宮癌。在一些態樣中，癌症為腹膜癌。在一些態樣中，癌症為子宮內膜癌，在一些態樣中，癌症為卵巢癌或乳癌。在一些態樣中，癌症為卵巢癌。在一些態樣中，癌症為乳癌。在一些態樣中，癌症為三陰性乳癌。在一些態樣中，癌症為卵巢癌。在一些態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或p53突變型癌症。在一些態樣中，卵巢癌為BRCA1突變型癌症及p53突變型癌症。在一些態樣中，卵巢癌為BRCA1及BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，卵巢癌為BRCA2突變型癌症。

在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症為包含具升高水準之RAD51之癌細胞的癌症。RAD51之升高水準可為升高RAD51蛋白水準、升高RAD51蛋白聚集點水準及/或升高RAD51 mRNA水準。在一些態樣中，包含具有升高水準之RAD51之癌細胞的癌症係指自癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞(例如孿蛋白陽性細胞)中的至少10%為RAD51陽性(例如含有5個或更多個RAD51細胞核聚集點)的癌症。

具有升高水準之RAD51之癌症可為同源重組缺陷癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或BRCA1及BRCA2突變型癌症。具有升高水準之RAD51之癌症可為BRCA1及BRCA2基因中具有有害或懷疑具有有害突變及/或例如如使用myChoice^® CDx(Myriad^® )所測定，具有正基因組不穩定性評分的癌症。

在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症係選自由以下組成之群：骨癌，包括骨肉瘤及軟骨肉瘤；腦癌，包括神經膠質瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、髓母細胞瘤及腦膜瘤；軟組織癌症，包括橫紋肌樣瘤及肉瘤；腎癌；膀胱癌；皮膚癌，包括黑色素瘤；及肺癌，包括非小細胞肺癌；結腸癌、子宮癌；神經系統癌症；頭頸部癌症；胰臟癌；及子宮頸癌。在一些態樣中，有待用本揭示案之組合治療之癌症係選自由子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌組成之群。

本文提供用本揭示案之組合治療癌症之多種方法。在一些態樣中，向患有癌症之個體投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，此類方法包括(a)鑒別個體之癌症為USP1及/或PARP抑制劑敏感性癌症，接著(b)向該個體投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，此類方法包括向患有三陰性乳癌之個體投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為同源重組缺陷癌症。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療不具有同源重組路徑缺陷之癌症。

在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為BRCA1突變型癌症。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為BRCA1突變型癌症及BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，癌症不為BRCA1突變型癌症或BRCA2突變型癌症。在一些態樣中，癌症為BRCA1缺陷癌症。在一些態樣中，癌症為BRCA2缺陷癌症。在一些態樣中，癌症為BRCA1缺陷癌症及BRCA2突变型癌症。

在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為ATM突變型癌症。在一些態樣中，癌症不為ATM突變型癌症。在一些態樣中，癌症為ATM缺陷癌症。

在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為PARP抑制劑抗性或難治性癌症。在一些態樣中，本揭示案之組合用於治療癌症，其中該癌症為PARP抑制劑抗性或難治性BRCA1缺陷癌症。

在一些態樣中，癌症為BRCA1及/或BRCA2突變型癌症，其中該癌症包含具有升高水準之RAD18之細胞，例如其中RAD18之升高水準至少高達ES2細胞中之RAD18蛋白及/或mRNA水準(ES2細胞可例如自美國菌種保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC；CRL-1978)公開獲得)或其中RAD18之升高水準高於HEP3B217細胞中之RAD18蛋白及/或mRNA水準(HEP3B217細胞可例如自ATCC(HB 8064)公開獲得)。在一些態樣中，三陰性乳癌為BRCA1及/或BRCA2突變型癌症。

在一些態樣中，癌症為包含具有升高水準之RAD51，例如升高RAD51蛋白水準、升高RAD51蛋白聚集點水準及/或升高RAD51 mRNA水準之癌細胞的癌症。在一些態樣中，包含具有升高水準之RAD51之癌細胞的癌症係指自癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞(例如孿蛋白陽性細胞)中的至少10%為RAD51陽性(例如含有5個或更多個RAD51細胞核聚集點)的癌症。

在一些態樣中，本揭示案之組合與一或多種治療癌症之額外治療劑組合使用。

在一些態樣中，本文提供本揭示案之組合，其用作藥物或用於製備例如供治療癌症用之藥物。在一些態樣中，本文提供本揭示案之組合，其用於治療癌症之方法中。

在一些態樣中，提供治療包含具有升高水準之RAD51之細胞的癌症的方法。包含具有升高水準之RAD51之細胞的癌症可在本文中稱為「高RAD51癌症」。此類方法包括向患有高RAD51癌症之個體投與治療有效量之USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合。

在一些態樣中，有待用USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合治療之高RAD51癌症係選自血液癌症、淋巴癌及DNA損傷修復路徑缺陷癌症。在一些態樣中，有待用USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合治療之高RAD51癌症為同源重組缺陷癌症。

在一些態樣中，有待用USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合治療之高RAD51係選自非小細胞肺癌(NSCLC)、骨肉瘤、卵巢癌及乳癌。在一些態樣中，癌症為子宮癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為腹膜癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為子宮內膜癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為卵巢癌或乳癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為卵巢癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為乳癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為三陰性乳癌。在一些態樣中，高RAD51癌症為卵巢癌。

在一些態樣中，有待用USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合治療之高RAD51癌症係選自由以下組成之群：骨癌，包括骨肉瘤及軟骨肉瘤；腦癌，包括神經膠質瘤、神經膠質母細胞瘤、星形細胞瘤、髓母細胞瘤及腦膜瘤；軟組織癌症，包括橫紋肌樣瘤及肉瘤；腎癌；膀胱癌；皮膚癌，包括黑色素瘤；及肺癌，包括非小細胞肺癌；結腸癌、子宮癌；神經系統癌症；頭頸部癌症；胰臟癌；及子宮頸癌。在一些態樣中，有待用USP1抑制劑或USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合治療之高RAD51癌症係選自由子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌組成之群。

本文提供用本揭示案之組合治療高RAD51癌症之多種方法。在一些態樣中，向患有高RAD51癌症之個體投與治療有效量之本揭示案之組合。

在一些態樣中，此類方法包括(a)偵測癌細胞中(例如自個體獲得之癌症樣品中)RAD51(例如RAD51蛋白及/或RAD51 mRNA)之水準，接著(b)向患有包含具有升高水準之RAD51之細胞之癌症的個體投與治療有效量之USP1抑制劑。在一些態樣中，此類方法包括(a)偵測癌細胞中(例如自個體獲得之癌症樣品中)RAD51(例如RAD51蛋白及/或RAD51 mRNA)之水準，接著(b)向患有包含具有升高水準之RAD51之細胞之癌症的個體投與治療有效量之USP1抑制劑與PARP抑制劑組合。醫藥組合式組合物

本揭示案之組合可呈不存在任何其他組分之原始化學物質形式投與哺乳動物，或本揭示案之組合亦可作為含有化合物與合適醫藥學上可接受之載劑組合之醫藥組合物的一部分投與哺乳動物(參見例如Gennaro, Remington: The Science and Practice of Pharmacy with Facts and Comparisons: Drugfacts Plus, 第20版(2003)；Ansel等人, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 第7版, Lippencott Williams and Wilkins(2004)；Kibbe等人, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 第3版, Pharmaceutical Press(2000))。此類載劑可選自醫藥學上可接受之賦形劑及助劑。術語「醫藥學上可接受之載劑」或「醫藥學上可接受之媒劑」涵蓋標準醫藥載劑、溶劑、界面活性劑或媒劑中之任一者。標準醫藥載劑及其調配物描述於Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 第19版 1995中。

本揭示案之醫藥組合式組合物可使用諸如油、水、醇及此等物質之組合的液體製備成液體懸浮液或溶液。

用於活體內投與之醫藥組合式組合物可為無菌的。此容易藉由例如無菌過濾膜過濾來實現。

在本揭示案範疇內之醫藥組合式組合物包括本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑與一或多種醫藥學上可接受之載劑組合的所有組合物。在一個實施例中，本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑以有效實現其預期治療目的之量存在於組合物。

本揭示案之醫藥組合式組合物可投與可能感受到本揭示案之組合之有益作用的任何患者。在此類患者當中最主要為哺乳動物，例如人類及伴侶動物，不過本揭示案不意欲限於此。在一個態樣中，患者為人類。在另一態樣中，本揭示案之醫藥組合式組合物可投與患有PARP抑制劑抗性或難治性癌症之患者。在另一實施例中，本揭示案之醫藥組合式組合物可投與患有PARP抑制劑抗性或難治性BRCA1缺陷癌症之患者。在另一實施例中，本揭示案之醫藥組合式組合物可投與患有包含具有升高水準之RAD51、例如升高RAD51蛋白水準、升高RAD51蛋白聚集點水準及/或升高RAD51 mRNA水準之癌細胞之癌症的患者。在一些態樣中，本揭示案之醫藥組合式組合物可投與患有如下癌症之患者，其中自癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞(例如孿蛋白陽性細胞)中的至少10%為RAD51陽性(例如含有5個或更多個RAD51細胞核聚集點)。

在另一實施例中，本揭示案提供包含本揭示案之組合的套組，本揭示案之組合以促進其用於實施本揭示案之方法的方式包裝。在一個實施例中，套組包括包裝在容器(諸如密封瓶或容器)中之本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，其中標籤附著至容器或包括在套組中，描述化合物實施本揭示案之方法的用途。在一個實施例中，組合式組合物以單位劑型包裝。套組可進一步包括適合於根據預期投與途徑投與組合式組合物的裝置。在一些態樣中，本揭示案提供一種套組，其包含本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物，及用於向患有癌症之患者投與該等化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物之說明書。

在一些態樣中，本揭示案提供一種醫藥組合式組合物，其包含本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物，及醫藥學上可接受之載劑。

在一些態樣中，本揭示案提供一種醫藥組合式組合物，其包含本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物，及醫藥學上可接受之載劑，其中該組合結合於由USP1基因及/或PARP基因編碼之蛋白質。

在一些態樣中，本揭示案提供一種醫藥組合式組合物，其包含本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物，及醫藥學上可接受之載劑，其中該醫藥組合物用於治療癌症。

在一些態樣中，本揭示案提供一種醫藥組合式組合物，其包含本揭示案之USP1抑制劑及PARP抑制劑，或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物，及醫藥學上可接受之載劑，其中該醫藥組合物用於製造供治療癌症用之藥物。

在一些情況下，癌症為實體癌症。在一些情況下，癌症為血液癌症/淋巴癌。在一些情況下，癌症為DNA損傷修復路徑缺陷癌症。在一些情況下，癌症為同源重組缺陷癌症。在一些情況下，癌症包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞。在一些情況下，癌症包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞。在一些情況下，癌症係選自由以下組成之群：非小細胞肺癌(NSCLC)、骨肉瘤、卵巢癌及乳癌(包括三陰性乳癌)。在一些情況下，乳癌為卵巢癌或乳癌(包括三陰性乳癌)。在一些情況下，癌症為卵巢癌。在一些情況下，癌症為乳癌(包括三陰性乳癌)。在一些情況下，癌症為子宮癌。在一些情況下，癌症為腹膜癌。在一些情況下，癌症為子宮內膜癌。實例實例 1 ：活體外分析 群落形成分析

在多種細胞株上使用群落形成單位(CFU)分析進行活體外實驗。CFU分析包括首先確立當生長約14天時何種細胞塗鋪密度能夠在六孔板上發展明顯散佈之群落。一旦已確定此密度，在第-1天及在第0天塗鋪細胞，用DMSO或遞增濃度之USP1抑制劑或尼拉帕尼(3 nM、10 nM、30 nM、100 nM及300 nM)或遞增濃度之USP1抑制劑或奧拉帕尼(3 nM、10 nM、30 nM、100 nM及300 nM)處理孔。在第8天更換培養基，含有適當濃度之DMSO、USP1抑制劑、尼拉帕尼或奧拉帕尼。在或約第14天，當經DMSO處理之孔中明顯散佈之群落可見時，將細胞固定且在室溫下使用10%乙醇中0.1%結晶紫染色20分鐘。使培養盤成像，接著藉由將結晶紫萃取至10%乙酸中且在565 nm下量測吸光度，將各孔中之結晶紫染劑之量定量。CFU結果展示在表1及表2中。

圖1、2及3顯示來自使用式II之USP1抑制劑之群落形成分析的代表性結果。圖1顯示式II之USP1抑制劑與尼拉帕尼組合之協同效應。在圖1中所示之JHOS2細胞株中，USP1抑制劑及尼拉帕尼作為單一藥劑，高達300 nM亦幾乎無活性；然而，兩種藥劑之組合對細胞生長產生協同效應。另外，將100 nM各藥劑組合比單獨300 nM尼拉帕尼效應大。在圖2中所示之COV362細胞株中，式II之USP1抑制劑及尼拉帕尼作為單一藥劑，活性不大；但在組合時，USP1抑制劑及尼拉帕尼對細胞生長具有協同效應。另外，將100 nM各藥劑組合顯示比單獨300 nM尼拉帕尼更大的效應。圖3描繪對UWB1.289(BRCA1突變型卵巢細胞株)觀測到之協同活性。雖然UWB1.289對作為單一藥劑之USP1抑制劑及尼拉帕尼兩者均敏感，但30 nM各藥劑之組合具有與300 nM單獨尼拉帕尼同等之生長效應。

表1中之結果顯示在富含BRCA1功能喪失型突變或可能功能喪失型突變之細胞株中偵測到協同效應，此表明具有此類突變之患者可得益於USP1抑制劑與PARP抑制劑之組合療法。舉例而言，在CFU分析中操作之BRCA1突變型細胞株的總數中，8/9之細胞株顯示超過截止評分6之協同效應。

圖14顯示在HCT116卵巢癌細胞中來自使用式I之USP1抑制劑之群落形成分析的代表性結果。表2中之結果顯示在卵巢、乳房、肺及結腸癌細胞中偵測到協同效應。 IC₅₀ 值及協同效應評分之測定

藉由將兩參數希爾方程(hill equation)與劑量-反應量測結果擬合來計算IC50值。使用非線性最小二乘法來發現將模型與所量測之劑量反應之擬合的均方誤差減至最少的參數值。使用minpack.lm R套裝軟件1.2-1版執行非線性最小二乘估計。使用synergyfinder R套裝軟件1.6.1版本計算Bliss協同效應評分。突變狀態之測定

使用內部途徑測定ATM、BRCA1及BRCA2之突變。藉由GATK工具MuTect2 版本3.7-0-g56f2c1a分析CCLE RNA-seq資料，以鑒別變異體，接著使用GATK工具Funcotator 版本3.7-0-g56f2c1a分類。Funcotator 將變異體呼叫分類為「沉默」、「錯義」、「剪接位點」、「無義」或「框移」之一。手動審查被分類為剪接位點、無義或框移突變之自動突變。手動審查評定突變是否為同型接合的，且呼叫是否可歸於測序或變異體呼叫人工產物，諸如低測序深度或位於均聚物序列中之插入缺失(indel)，且概述當多次事件呼叫單一基因時對該基因之影響。手動突變審查之輸出為對基因功能之影響分類為「功能喪失」、「可能功能喪失」或「野生型」。自下載自depmap.org之CCLE_mutations.csv文檔提取出TP53之突變呼叫。實例 2 ： PDX 模型選擇

基於可用性且利用多種BRCA及HRD突變特徵選擇五個患者來源之異種移植模型。在所選模型中，基於歷史臨床資料且自來自XenTech SAS之內部產生資料，獲悉PARP抑制劑(PARPi)活性。基於此歷史資料，挑選一系列PARPi反應及非反應模型。表3顯示被挑選用於測試之模型、式I化合物之單一藥劑活性及式I化合物與奧拉帕尼之組合活性的概述。

實例 3 ：在 MDA-MB-436 BRCA1 突變型人類乳房腫瘤模型中式 I 游離鹼之抗腫瘤活性

在小鼠中使用MDA-MB-436皮下人類乳房腫瘤模型，評估與奧拉帕尼及尼拉帕尼相比式I游離鹼之USP1抑制劑之抗腫瘤活性。向來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之7-9週齡雌性NOD SCID小鼠皮下注射10×10⁶ MDA-MB-436腫瘤細胞。當腫瘤達到大約200 mm³ 之體積時，小鼠隨機化至各10隻之組中，且經由口腔管飼法給與對照物、尼拉帕尼(50 mg/kg)、奧拉帕尼(75 mg/kg)或每日30、100或300 mg/kg一次或每日30 mg/kg BID兩次式I之USP1抑制劑，歷時28天。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。使用在第28天來自處理組之平均腫瘤體積-第0天/第28天來自對照物處理之組之平均腫瘤體積-第0天來計算腫瘤生長抑制百分比(TGI)，其中第0天為處理第一天。

如圖4A所示，在較高劑量qd及BID下觀測到＞90%腫瘤生長抑制。如圖4B所示，在負載腫瘤之小鼠中高達300 mg/kg之劑量的耐受性良好。實例 4 ：在 MDA-MB-436 BRCA1 突變型人類乳房腫瘤模型中式 I 共晶之抗腫瘤活性

在小鼠中使用MDA-MB-436皮下人類乳房腫瘤模型，評估與奧拉帕尼及尼拉帕尼相比式I共晶之USP1抑制劑之抗腫瘤活性。向來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之7-9週齡雌性NOD SCID小鼠皮下注射10×10⁶ MDA-MB-436腫瘤細胞。當腫瘤達到大約200 mm³ 之體積時，小鼠隨機化至各10隻之組中，且經由口腔管飼法每日給與一次對照物、尼拉帕尼(50 mg/kg)、奧拉帕尼(100 mg/kg)或10、30、100或300 mg/kg式I之USP1抑制劑，歷時28天。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。使用在第28天來自處理組之平均腫瘤體積-第0天/第28天來自對照物處理之組之平均腫瘤體積-第0天來計算腫瘤生長抑制百分比(TGI)，其中第0天為處理第一天。

如圖5A所示，在較高劑量qd下觀測到＞90%腫瘤生長抑制。如圖5B所示，在負載腫瘤之小鼠中高達300 mg/kg之劑量之式I共晶的耐受性良好。

實例 5 ：在 MDA-MB-436 人類乳房腫瘤小鼠異種移植模型中，式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中使用MDA-MB-436皮下人類乳房腫瘤模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。向來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之7-9週齡雌性NOD SCID小鼠皮下注射10×10⁶ MDA-MB-436腫瘤細胞。當腫瘤達到大約200 mm³ 之體積時，小鼠隨機化至以下各組中：對照物、單獨式I(100 mg/kg)及單獨式I(30 mg/kg)各10隻；或單獨奧拉帕尼(50 mg/kg)、式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合組以及式I(30 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合組各5隻小鼠。經由口腔管飼法，每日向小鼠給與相關處理一次，歷時28天。

每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。使用在第28天來自處理組之平均腫瘤體積-第0天/第28天來自對照物處理之組之平均腫瘤體積-第0天來計算腫瘤生長抑制百分比(TGI)，其中第0天為處理第一天。

圖6A及6B中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在MDA-MB-436皮下小鼠模型中組合處理組具有增強之抗腫瘤活性。對於奧拉帕尼(50 mg/kg)及式I(100 mg/kg)組合研究，藉由監測體重且計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的%來評定耐受性，如圖6C所示。

在小鼠中使用MDA-MB-436皮下人類乳房腫瘤模型進行重複研究，該等研究評定式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。向來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之7-9週齡雌性NOD SCID小鼠皮下注射10×10⁶ MDA-MB-436腫瘤細胞。當腫瘤達到大約200 mm³ 之體積時，小鼠隨機化至各10隻之以下各組中且每日(qd)給與：對照物、單獨式I(100 mg/kg)、單獨式I(300 mg/kg)、單獨奧拉帕尼(50 mg/kg)、單獨奧拉帕尼(100 mg/kg)、或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)、式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(100 mg/kg)、式I(300 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)之組合組；或隨機化至6隻小鼠，每日給與兩次(BID)單獨式I(100 mg/kg BID)、式I(100 mg/kg BID)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合組。經由口腔管飼法，如以上所突出，每日一次或每日兩次(BID)向小鼠給與相關處理，歷時28天。

每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。使用在第27天來自處理組之平均腫瘤體積-第0天/第27天來自對照物處理之組之平均腫瘤體積-第0天來計算腫瘤生長抑制百分比(TGI)，其中第0天為處理第一天。

在含有10隻小鼠之所有組中，在給藥第28天，對每組6隻小鼠施以安樂死，以供離體樣品分析。在劑量終止之後，監測每組剩餘4隻小鼠之反應。

圖6D及6E中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在MDA-MB-436皮下小鼠模型中組合處理組具有增強之抗腫瘤活性。另外，與奧拉帕尼之最高劑量(100 mg/kg)相比，所有組合組均具有增強之抗腫瘤活性。對於所有組合組，藉由監測體重且計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的%來評定耐受性，如圖6F所示。所有式I與奧拉帕尼組合的耐受性均良好，其係意外的，因為並非所有奧拉帕尼組合療法的耐受性均良好。參見例如Samol, J.等人,Invest. New Drugs, 30:1493-500(2012)(「Further development of olaparib and topotecan in combination was not explored due to dose-limiting hematological AEs and the resulting sub-therapeutic MTD.」)。實例 6 ：在患者來源之乳房異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

如圖7A至7E所示，在小鼠中，使用裸小鼠中多種患者來源之乳房異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。使來自Envigo之6-9週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放20 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤建立至在60至320 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻之組中且分配至以下組中：對照物、式I(30 mg/kg)、奧拉帕尼(50 mg/kg)或式I(30 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。視腫瘤模型之生長動力學而定，每日經由口腔管飼法投與化合物一次，長達42天。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。

圖7D中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在HBCx-14患者來源之皮下小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。圖7A中之資料顯示組合在HBCx11患者來源之皮下小鼠模型中的優勢。實例 7 ：在 HBCx-11 BRCA1 突變型 HRD 高人類乳房 PDX 模型中，式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

如圖8A-8E所示，在HBCx-11 BRCA1突變型HRD高人類乳房PDX模型中，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。HBCx-11模型為RAD51高模型，且HRD高係指Myriad HRD生物標記物(定義為BRCA1及BRCA2基因中之有害或疑似有害突變及/或陽性基因組不穩定性評分(GIS)；GIS為使用自福馬林固定石蠟包埋(FFPE)之腫瘤組織試樣分離之DNA，對雜合性丟失(LOH)、端粒對偶基因不平衡(TAI)及大片段遷移(LST)之算法量測；參見myriad.com/products-services/precision- medicine/mychoice-cdx/)。使來自Envigo之6-9週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放20 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤建立至在60至200 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各10隻之組中且分配至以下組中：對照物；式I(300 mg/kg)；式I(100 mg/kg)；奧拉帕尼(50 mg/kg)；奧拉帕尼(100 mg/kg)；或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，長達49天(第0天至第48天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。

圖8A-8D中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在HBCx-11 BRCA1突變型HRD高人類乳房PDX模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。另外，與奧拉帕尼之最高劑量(100 mg/kg)相比，所有組合處理均具有增強之抗腫瘤活性。圖8E中之體重資料表明該組合的耐受性良好。實例 8 ：在裸小鼠中 HBCx-14 來源之乳房異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

如圖9A-9D所示，在小鼠中，使用裸小鼠中多種患者來源之乳房異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Envigo之6-9週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放20 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤建立至在60至130 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各10隻之組中且分配至以下組中：對照物、奧拉帕尼(50 mg/kg)或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時42天(第1天至第42天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖9A-9C中之資料表明，與同等劑量之單一藥劑奧拉帕尼相比，在HBCx-14患者來源之皮下小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。圖9D中之體重資料表明該組合的耐受性良好。實例 9. 在裸小鼠中 OV0589 患者來源之卵巢異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

如圖10A-10H所示，在小鼠中，使用裸小鼠中三種患者來源之卵巢異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之6-8週齡雌性BALB/c裸小鼠麻醉且經由腰窩中之切口皮下置放直徑為2-3 mm腫瘤碎片。當腫瘤建立至在大約90至200 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻之組中且分配至以下組中：對照物；式I(100 mg/kg)；式I(300 mg/kg)；奧拉帕尼(50 mg/kg)；奧拉帕尼(100 mg/kg)；或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。經由口腔管飼法每日投與化合物一次，歷時35天(第0天至第34天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖10A-10G中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在OV0589患者來源之卵巢皮下小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。另外，組合處理與奧拉帕尼之最高劑量(100 mg/kg)同等有效。在兩種劑量下單獨式I處理亦顯示抗腫瘤活性。體重量測指示所有處理的耐受性均良好(圖10H)。實例 10. 在裸小鼠中 ST416 患者來源之卵巢異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

如圖11A及11B所示，在小鼠中，使用裸小鼠中三種患者來源之卵巢異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自The Jackson Laboratory之6-8週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放70 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤建立至在大約65至130 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻之組中且分配至以下組中：對照物；式I(100 mg/kg)；式I(300 mg/kg)；奧拉帕尼(50 mg/kg)；奧拉帕尼(100 mg/kg)；或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時19天(第0天至第18天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖11A中之資料顯示在ST416患者來源之卵巢皮下小鼠模型中在任何處理組中均無抗腫瘤活性。體重量測指示所有處理的耐受性均良好(圖11B)。實例 11. 在裸小鼠中 CTG-0253 來源之卵巢異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中，使用裸小鼠中三種患者來源之卵巢異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Engivo之6-8週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放125 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤建立至在大約130至240 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻之組中且分配至以下組中：對照物；式I(100 mg/kg)；式I(300 mg/kg)；奧拉帕尼(50 mg/kg)；奧拉帕尼(100 mg/kg)；或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合。每日經由口腔管飼法投與化合物一次，歷時20天。每週量測體重及腫瘤體積兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。實例 12. 在裸小鼠中 CTG-0253 來源之卵巢異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中，使用裸小鼠中三種患者來源之卵巢異種移植模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Engivo之6-8週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放60 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤達到在大約100至180 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3-4隻小鼠之組中且分配至以下組中：對照物(媒劑)、式I(100 mg/kg)、式I(300 mg/kg)、奧拉帕尼(100 mg/kg)、或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(100 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時18天(第0天至第17天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。藉由計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的百分比(%)來評定耐受性。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖15A-F中之資料顯示在CTG-0253患者來源之卵巢異種移植小鼠模型中在任何處理組中均無抗腫瘤活性。圖15G中之體重資料表明該組合的耐受性良好。實例 13. 在 MDA-MB-436 人類乳房腫瘤小鼠異種移植模型中，式 I 共晶與 PARP 抑制劑尼拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中使用MDA-MB-436皮下人類乳房腫瘤模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與尼拉帕尼組合的抗腫瘤活性。向來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之7-9週齡雌性NOD SCID小鼠皮下注射10×106 MDA-MB-436腫瘤細胞。當腫瘤達到大約319 mm³ 之體積時，將小鼠隨機化至各5隻之組中且每日給與一次(qd)對照物、單獨尼拉帕尼(20 mg/kg)、單獨尼拉帕尼(50 mg/kg)、或式I(100 mg/kg)與尼拉帕尼(20 mg/kg)組合組。經由口腔管飼法，如以上所突出，每日向小鼠給與相關處理一次，歷時28天。

每週量測體重及腫瘤體積至少兩次。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。

圖12A-12C中之資料表明，與同等劑量之尼拉帕尼之單一藥劑相比，在MDA-MB-436皮下小鼠模型中組合處理組具有增強之抗腫瘤活性。另外，與尼拉帕尼之最高劑量(50 mg/kg)相比，所有組合組均具有增強之抗腫瘤活性。對於組合組，藉由監測體重且計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的%來評定耐受性，如圖12D所示。體重量測指示組合處理的耐受性良好(圖12E)。實例 14. 在未負載腫瘤之 NOD SCID 雌性小鼠中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之 DDI

在小鼠中，藉由評定隨時間之血漿全身暴露，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的藥物-藥物相互作用(DDI)。將來自Beijing Anikeeper Biotech有限公司之6-8週齡雌性NOD SCID小鼠隨機化至各4隻之組中，且每日經由口腔管飼法給與單獨式I(100 mg/kg)、單獨奧拉帕尼(50 mg/kg)或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合一次，歷時5天。

對於單獨奧拉帕尼(50 mg/kg)或與式I(100 mg/kg)組合，在第1天及第5天給藥後的以下時間點自各小鼠收集血液樣品：給藥前、0.5小時、1小時、2小時、6小時、12小時、24小時。對於單獨式I(100 mg/kg)或與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合，在第1天及第5天給藥後的以下時間點自各小鼠收集血液樣品：給藥前、1小時、2小時、4小時、8小時、12小時及24小時。

圖13A-13D中之資料顯示，式I與奧拉帕尼之共同投與既不增加式I暴露(13A及13B)，亦不增加奧拉帕尼暴露(13C及13D)。因此，組合活性並非由式I暴露或奧拉帕尼暴露增加引起。實例 15. 史伯格 - 多利大鼠 (Sprague-Dawley Rat) 及食蟹獼猴中式 I 共晶之第十天探索性毒性研究 A. 史伯格 - 多利大鼠 (Sprague-Dawley Rat) 中式 I 共晶之第十天口服探索性毒性研究

為評估式I共晶之毒性及毒物動力學，經由口腔管飼法，向雄性史伯格-多利大鼠投與式I共晶體，歷時10天。如表4中所述，每日一次(SID)或每日兩次(BID)經口給藥，向二十五隻來自(Envigo RMS公司, Indianapolis, IN)之7-8週齡雄性大鼠(褐家鼠(Rattus norvegicus ))(5隻小鼠/組)投與媒劑或測試物品，歷時十天。自大鼠周邊靜脈收集大約0.5 mL之全靜脈血樣品以測定測試物品暴露。在第1天及第10天收集樣品：在投與之前(僅第10天)及在測試物品投與之後30分鐘、1小時、2小時、4小時、8小時及24小時。在最後一劑後大約二十四小時，對所有動物施以安樂死進行屍檢。

使用Phoenix WinNonlin軟體(版本8.1或更高版本)，使用非房室方法，基於投藥途徑進行毒物動力學分析。

B. 食蟹獼猴中式 I 共晶之第十天探索性毒性研究

為評估式I共晶之毒性及毒物動力學，每日向雄性食蟹獼猴投與式I共晶，歷時10天。如表5中所述，經由口腔管飼法，向十五隻來自Orient BioResource(Alice, TX)之2-3歲雄性食蟹獼猴(食蟹猴(macaca fascicularis ))(每組3隻動物)投與媒劑或測試物品，歷時十天。觀測在活著時的毒性臨床徵象、體重變化及食物消耗。收集連續血液樣品用於血漿濃度分析，以評估全身測試物品暴露。在最後一劑後大約二十四小時(BID組為最後一劑後12小時)，對所有動物施以安樂死進行屍檢。

C. 史伯格 - 多利大鼠及食蟹獼猴中式 I 共晶之毒性結果

表6中顯示與多種PARP抑制劑相比，在史伯格-多利大鼠及食蟹獼猴中式I共晶之毒性及毒物動力學研究的概述。與劑量限制性毒性為造血毒性(骨髓功能抑制及各類血細胞減少)之多種PARP抑制劑相比，式I共晶之劑量限制性毒性為胃腸道毒性，因此與PARP抑制劑之劑量限制性毒性不相重疊。表6進一步顯示所有批准之PARP抑制劑的造血毒性均為劑量限制性的。因在投與PARP抑制劑時患者經歷不良事件而中斷臨床給藥、減少及中止PARP抑制劑係常見的，因此需要更耐受且有效之PARP抑制劑組合方案。因此，USP1抑制劑與PARP抑制劑可組合治療，其可在降低劑量下進一步增強PARP抑制劑之功效而無重疊毒性。

實例 16 ：在裸小鼠中乳房 HBCx-8 患者來源之乳房異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中，使用多種患者來源之異種移植模型，包括三陰性乳癌BRCA1突變型、TP53突變型、HRD高及RAD51高HBCx-8模型，評估式I共晶體之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。使來自Envigo之6-9週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放20 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤達到在大約60至130 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻小鼠之組中且分配至以下組中：對照物(媒劑)、式I(100 mg/kg)、奧拉帕尼(100 mg/kg)、或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(100 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時42天(第0天至第41天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。藉由計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的百分比(%)來評定耐受性。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖16A-E中之資料表明，與同等劑量之式I或奧拉帕尼之單一藥劑相比，在HBCx-8三陰性乳癌BRCA1突變型、TP53突變型、HRD高及RAD51高患者來源之異種移植小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。圖16F中之體重資料表明該組合的耐受性良好。實例 17 ：在裸小鼠中乳房 HBCx-17 患者來源之乳房異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中，使用多種患者來源之異種移植模型，包括三陰性乳癌HBCx-17模型，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Envigo之6-9週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放20 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤達到在大約60至200 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各8-10隻小鼠之組中且分配至以下組中：對照物(媒劑)、式I(100 mg/kg)、式I(300 mg/kg)、奧拉帕尼(50 mg/kg)、奧拉帕尼(100 mg/kg)、式I(100mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合、或式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(100 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時43天(第0天至第42天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。藉由計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的百分比(%)來評定耐受性。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖17A及17C-L中之資料表明，與同等劑量之式I及奧拉帕尼之單一藥劑相比，在HBCx-17患者來源之異種移植小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。圖17B中之體重資料表明該等組合的耐受性良好。實例 18 ：在裸小鼠中卵巢 CTG-0703 患者來源之異種移植模型中式 I 共晶與 PARP 抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性

在小鼠中，使用多種患者來源之異種移植模型，包括漿液性卵巢癌模型CTG-0703，評估式I共晶之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合的抗腫瘤活性。使來自Envigo之6-8週齡雌性無胸腺裸小鼠麻醉，且經由腰窩中之切口皮下置放60 mm³ 腫瘤碎片。當腫瘤達到在大約110至230 mm³ 範圍內之腫瘤體積時，將小鼠隨機化至各3隻小鼠之組中且分配至以下組中：對照物(媒劑)、式I(100 mg/kg)、式I(300 mg/kg)、奧拉帕尼(50 mg/kg)、奧拉帕尼(100 mg/kg)、式I(100 mg/kg)與奧拉帕尼(50 mg/kg)組合、或式I(100mg/kg)與奧拉帕尼(100 mg/kg)組合。經由口腔管飼法，每日投與化合物一次，歷時60天(第0天至第59天)。每週量測體重及腫瘤體積兩次。藉由計算體重變化為相對於開始處理之日(第0天)之體重的百分比(%)來評定耐受性。腫瘤體積計算為各處理組之平均值及平均值標準誤差。腫瘤消退(REG)定義為與第一天給藥相比，在研究最後一天之體積較小之腫瘤，且完全消退(CR)定義為在研究結束時無可觸知之腫瘤。

圖18A及18C-18L中之資料表明，與同等劑量之式I及奧拉帕尼之單一藥劑相比，在CTG-0703患者來源之異種移植小鼠模型中組合處理組顯示增強之抗腫瘤活性。圖18B中之體重資料表明該等組合的耐受性良好。

三種額外患者來源之卵巢癌瘤異種移植模型OV5308、OV5392及OV0243之組合研究類似於以上實例進行。在OV5308、OV5392及OV0243模型中未觀測組合活性。實例 19 ： CRISPR 致敏篩選

為進行CRISPR-Cas9抗性篩選，已知乳房及卵巢癌細胞株對USP1抑制敏感及/或PARP1抑制劑經工程改造以表現Cas9，且隨後感染表現靶向1500種基因之嚮導RNA(每個基因20種sgRNA)的慢病毒，該等基因與DNA損傷反應及DNA修復相關。使感染細胞擴增10天且分成不同的化合物治療組：DMSO(陰性對照物)、300 nM式I共晶、300 nM奧拉帕尼及150 nM式I共晶加150 nM奧拉帕尼之組合。在藥物存在下培養14天之後，收穫細胞，提取基因組DNA，且使用Illumina測序來確定嚮導表示。為確定擾動作用，使用質體文庫與即將起始化合物處理時的時間點作為參考，將各sgRNA之豐度與參考樣品相比。對於文庫中之各嚮導，計數與該嚮導相關之讀段數目，且計算對數變化倍數(logFC)，定義為：logFC=logf ₀ ((樣品計數+1)/(參考計數+1))。為確保實驗條件之間作用程度可比較，藉由自各嚮導減去各樣品之中位logFC且除以絕對中位差，產生各嚮導之Z分數，將與各嚮導相關之評分標準化。為將嚮導水準分數合計至基因水準，針對由文庫靶向之各基因，藉由採用靶向該基因之所有嚮導之中值Z分數，計算每一基因「下降評分」。使用差異依賴鑒別抗藥性機制，其中與DMSO處理相比，在藥物存在下CRISPR誘發之基因功能喪失增加細胞之適合性。對於各基因，使用費雪精確檢驗(Fisher’s Exact Test)測試藥物處理與回收之純系數目之間的相關性，其中使用本傑明霍赫伯格p-值調整(Benjamini Hochberg p-value adjustment)來控制錯誤發現。為評定篩選品質，包括未切割之中性對照嚮導，以及靶向基因組中之數千位置且強力誘發細胞死亡的陽性對照嚮導。在乳癌細胞株MDA-MB-436之篩選中，對照嚮導行為如預期，此表明在所有樣品中陽性與中性對照嚮導之間分開，且大部分嚮導對適合性無效(圖19)。重要地，在MDA-MB-436中式I共晶處理之後，諸如RAD18及UBE2A之先前描述之抗性介體的基因敲除，在最高富集之基因中(圖20)。除此等已知之抗性機制外，大量新基因呈現為式I共晶之抗性介體，此與用PARP1抑制劑奧拉帕尼處理後之抗性碰撞不同。同樣地，敲除引起對單獨式I共晶之抗性的相同基因不再引起與奧拉帕尼組合下之抗性，此表明不相重疊之抗性概況。

現已充分描述本發明，所屬領域之一般技術人員應理解，在不影響本發明之範疇或其任何實施例下，可在條件、調配物及其他參數之廣泛及同等範圍內進行本發明。

所屬領域之技術人員根據對本說明書之考慮及對本文揭示之本發明的實施，將顯而易見本發明之其他態樣。意欲本說明書及實例僅僅視為示例性的，本發明之真實範疇及精神由以下申請專利範圍指示。

本文中引用之所有專利及公開案以引用之方式整體完全併入本文中。

[圖 1 ]展示在JHOS2 BRCA1突變型卵巢癌模型中式II之USP1抑制劑與尼拉帕尼組合之協同效應。

[圖 2 ]展示在COV362 BRCA1突變型卵巢癌模型中式II之USP1抑制劑與尼拉帕尼組合之協同效應。

[圖 3 ]展示在UWB1.289 BRCA1突變型卵巢癌模型中式II之USP1抑制劑與尼拉帕尼組合之協同效應。

[圖 4A 及 4B ]展示在小鼠中使用MDA-MB-436 BRCA1突變型人類乳房腫瘤模型，與奧拉帕尼及尼拉帕尼相比式I游離鹼之USP1抑制劑之抗腫瘤活性。

[圖 5A 及 5B ]展示在小鼠中使用MDA-MB-436 BRCA1突變型人類乳房腫瘤模型，與奧拉帕尼及尼拉帕尼相比式I共晶之USP1抑制劑之抗腫瘤活性。

[圖 6A 、 6B 及 6C ]展示在MDA-MB-436人類乳房腫瘤小鼠異種移植模型中，式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。[圖 6D 及 6E ]展示在MDA-MB-436 BRCA1突變型人類乳房腫瘤小鼠模型中，在第27天(在劑量終止前最後量測；圖6D)及第55天(劑量終止後27天；圖6E)式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性增強。[圖 6F ]展示在MDA-MB-436 BRCA1突變型人類乳房腫瘤模型中式之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 7A 、 7B 、 7C 、 7D 及 7E ]展示在裸小鼠中在源自患者之乳房異種移植模型中，式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。

[圖 8A 、 8B 、 8C 及 8D ]展示在HBCx-11 BRCA1突變型HRD高人類乳房PDX模型中，式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。圖8A展示與單一療法相比組合之活性。圖8B及8C展示在個別小鼠中在50 mg/kg(圖8B)及100 mg/kg(圖8C)下奧拉帕尼單一療法之活性。圖8D展示在個別小鼠中組合之活性。[圖 8E ]展示在HBCx-11 BRCA1突變型HRD高人類乳房PDX模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 9A 、 9B 及 9C ]展示在HBCx-14 HRD高人類乳房PDX模型中，式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。圖9A展示與奧拉帕尼單一療法相比組合之活性。圖9B展示在個別小鼠中在50 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖9C展示在個別小鼠中組合之活性。[圖 9D ]展示在HBCx-14 HRD高人類乳房PDX模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 10A 、 10B 、 10C 、 10D 、 10E 、 10F 及 10G ]展示在OV0589卵巢PDX BRCA1及TP53突變模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。圖10A展示與單一療法相比組合之活性。圖10B展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖10C及10D展示在個別小鼠中在100 mg/kg(圖10C)及300 mg/kg(圖10D)下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖10E及10F展示在個別小鼠中在50 mg/kg(圖10E)及100 mg/kg(圖10F)下奧拉帕尼單一療法之活性。圖10G展示在個別小鼠中組合之活性。圖10G展示在個別小鼠中組合之活性。[圖 10H ]展示在OV0589卵巢PDX BRCA1及TP53突變模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 11A ]展示在ST416卵巢BRCA1突變PDX模型中式I之USP1抑制劑、PARP抑制劑奧拉帕尼或其組合中無一者具有活性。[圖 11B ]展示在ST416卵巢BRCA1突變PDX模型中式I之USP1抑制劑、PARP抑制劑奧拉帕尼及其組合之耐受性。

[圖 12A 、 12B 、 12C 及 12D ]展示在MDA-MB-436 TNBC CDX BRCA1突變人類乳房腫瘤模型中，式I之USP1抑制劑增強PARP抑制劑尼拉帕尼之活性。圖12A展示與單一療法相比組合之活性。圖12B及12C展示在個別小鼠中在20 mg/kg(圖12B)及50 mg/kg(圖12C)下尼拉帕尼單一療法之活性。圖12D展示在個別小鼠中組合之活性。[圖 12E ]展示在MDA-MB-436 TNBC CDX BRCA1突變人類乳房腫瘤模型中USP1抑制劑與PARP抑制劑尼拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 13A 、 13B 、 13C 及 13D ]展示在NOD SCID小鼠中在第1天(圖13A及13C)及第5天(圖13B及13D)組合之奧拉帕尼(圖13A及13B)與式I(圖13C及13D)之藥物-藥物相互作用藥物動力學。

[圖 14 ]展示在HCT116卵巢癌細胞中式I之USP1抑制劑與奧拉帕尼組合之協同效應。

[圖 15A 、 15B 、 15C 、 15D 、 15E 及 15F ]展示在CTG-0253卵巢PDX模型中式I之USP1抑制劑、PARP抑制劑奧拉帕尼或其組合中無一者具有活性。圖15A展示與單一療法相比組合之活性。圖15B展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖15C展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖15D展示在個別小鼠中在300 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖15E展示在個別小鼠中在100 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖15F展示在個別小鼠中組合(100 mg/kg奧拉帕尼+100 mg/kg式I)之活性。[圖 15G ]展示在CTG-0253卵巢PDX模型中式I之USP1抑制劑、PARP抑制劑奧拉帕尼及其組合之耐受性。

[圖 16A 、 16B 、 16C 、 16D 及 16E ]展示在HBCx-8 PDX BRCA1及TP53突變奧拉帕尼抗性模型中，式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性。圖16A展示與單一療法相比組合之活性。圖16B展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖16C展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖16D展示在個別小鼠中在100 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖16E展示在個別小鼠中組合之活性。[圖 16F ]展示在HBCx8 TNBC卵巢PDX BRCA1及TP53突變奧拉帕尼抗性模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。

[圖 17A 、 17B 、 17C 、 17D 、 17E 、 17F 及 17G ]展示在HBCx-17乳房PDX BRCA2及TP53突變HRD高模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性及耐受性。圖17A展示與單一療法相比組合之活性。圖17B展示在HBCx-17模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。圖17C展示在HBCx-17模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼(50 mg/kg)組合之抗腫瘤活性。圖17D展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖17E展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖17F展示在個別小鼠中在50 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖17G展示在個別小鼠中組合(奧拉帕尼50 mg/kg及式I 100 mg/kg)之活性。[圖17H]展示在HBCx-17模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼(100 mg/kg)組合之抗腫瘤活性。[圖17I]展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。[圖17J]展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。[圖17K]展示在個別小鼠中在100 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。[圖17L]展示在個別小鼠中組合(奧拉帕尼100 mg/kg及式I 100 mg/kg)之活性。

[圖 18A 、 18B 、 18C 、 18D 、 18E 、 18F 、 18G 、 18H 、 18I 、 18J 、 18K 及 18L ]展示在CTG-0703 BRCA1及TP53突變卵巢PDX模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼組合之抗腫瘤活性及耐受性。圖18A展示與單一療法相比組合之活性。圖18B展示在CTG-0703模型中式I共晶之USP1抑制劑與PARP抑制劑奧拉帕尼之組合的耐受性良好。圖18C展示在CTG-0703模型中式I共晶與PARP抑制劑奧拉帕尼(50 mg/kg)組合之抗腫瘤活性。圖18D展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖18E展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖18F展示在個別小鼠中在50 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖18G展示在個別小鼠中組合之活性。圖18H展示在CTG-0703模型中式I共晶與PARP抑制劑奧拉帕尼(100 mg/kg)組合之抗腫瘤活性。圖18I展示在個別小鼠中媒劑對照物之活性。圖18J展示在個別小鼠中在100 mg/kg下式I共晶之USP1抑制劑之活性。圖18K展示在個別小鼠中在100 mg/kg下奧拉帕尼單一療法之活性。圖18L展示在個別小鼠中組合之活性。

[圖 19 ]展示在CRISPR-Cas9抗性篩選中，在第4天(D4)、第7天(D7)及第14天(D14)陽性對照嚮導之表示減少，而中性對照嚮導之表示未減少。

[圖 20 ]展示在式I共晶治療下活力有差別之基因的火山圖。資料表示在用式I共晶之USP1抑制劑(USPi)處理及敲除多種基因(例如RAD18及UBE2A)後在第14天(D14)對比第0天(D0)之MDA-MB-436細胞之富集。

Claims

一種治療先前接受用第一聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑治療之個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與泛素特異性加工蛋白酶(USP1)抑制劑及第二PARP抑制劑，其中該第一PARP抑制劑及該第二PARP抑制劑為相同或不同PARP抑制劑。
如請求項1之方法，其中該個體先前未接受用USP1抑制劑治療。
如請求項1或2之方法，其中該用該第一PARP抑制劑之治療中斷或中止。
如請求項3之方法，其中該中斷歷時至少一週、至少兩週、至少三週或至少四週。
如請求項1至4中任一項之方法，其中在用該第一PARP抑制劑治療期間，該個體經歷不可接受之毒性及/或不可接受之不良反應。
如請求項1之方法，其中該不可接受之毒性或不良反應為諸如血小板減少、貧血或嗜中性白血球減少之血液毒性、肺炎、呼吸困難、發燒、咳嗽、喘鳴、放射學異常、高血壓、骨髓化生不良症候群/急性骨髓性白血病(MDS/AML)、噁心及/或疲勞。
如請求項1至6中任一項之方法，其中在用該第一PARP抑制劑治療期間，該第一PARP抑制劑之劑量降低。
如請求項7之方法，其中該第一PARP抑制劑之劑量降低至在該降低之前之劑量的四分之一、三分之一、二分之一、三分之二或四分之三。
如請求項7之方法，其中該第一PARP抑制劑為奧拉帕尼(olaparib)且在該降低之前之劑量為每日服用400 mg兩次。
如請求項7或9之方法，其中該第一PARP抑制劑為奧拉帕尼且在該降低之後之劑量為每日服用200 mg兩次或每日服用100 mg兩次。
如請求項7之方法，其中該第一PARP抑制劑為尼拉帕尼(niraparib)且在該降低之前之劑量為每日服用300 mg一次。
如請求項7或11之方法，其中該第一PARP抑制劑為尼拉帕尼且在該降低之後之劑量為每日服用200 mg一次或每日服用100 mg一次。
如請求項7之方法，其中該第一PARP抑制劑為他拉唑帕尼(talazoparib)且在該降低之前之劑量為每日服用1 mg一次。
如請求項7或13之方法，其中該第一PARP抑制劑為他拉唑帕尼且在該降低之後之劑量為每日服用0.75 mg一次、每日服用0.5 mg一次或每日服用0.25 mg一次。
如請求項7之方法，其中該第一PARP抑制劑為盧卡帕尼(rucaparib)且在該降低之前之劑量為每日服用600 mg兩次。
如請求項7或15之方法，其中該第一PARP抑制劑為盧卡帕尼且在該降低之後之劑量為每日服用500 mg兩次、每日服用400 mg兩次或每日服用300 mg兩次。
如請求項1至8中任一項之方法，其中該第一PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。
如請求項1至17中任一項之方法，其中該第二PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。
如請求項1至18中任一項之方法，其中該第一PARP抑制劑及該第二PARP抑制劑為相同PARP抑制劑。
如請求項1至19中任一項之方法，其中該第一PARP抑制劑及該第二PARP抑制劑為不同PARP抑制劑。
如請求項1至20中任一項之方法，其中該第二PARP抑制劑之劑量與第一PARP抑制劑之劑量相比有所降低。
如請求項1至21中任一項之方法，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：
(b)式II：
(c)式III：
及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項1至22中任一項之方法，其中該USP1抑制劑及該第二PARP抑制劑之耐受性良好。
如請求項1至23中任一項之方法，其中該USP1抑制劑減少該個體對該第二PARP抑制劑之暴露。
如請求項1至24中任一項之方法，其中該USP1抑制劑及該第二PARP抑制劑抑制該癌症之反彈及/或再生長。
如請求項1至25中任一項之方法，其中該USP1抑制劑及該第二PARP抑制劑相繼經投與。
如請求項1至26中任一項之方法，其中該USP1抑制劑及該第二PARP抑制劑同時經投與。
如請求項1至27中任一項之方法，其中該個體為人類。
如請求項1至28中任一項之方法，其中該癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。
如請求項29之方法，其中該癌症為乳癌。
如請求項30之方法，其中該乳癌為三陰性乳癌(TNBC)。
如請求項1至31中任一項之方法，其中該癌症為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或BRCA1突變與BRCA2突變型癌症。
如請求項29之方法，其中該癌症為卵巢癌。
如請求項33之方法，其中該卵巢癌為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或p53突變型癌症。
如請求項33或34之方法，其中該卵巢癌為BRCA1突變型癌症及p53突變型癌症。
如請求項33或34之方法，其中該卵巢癌為BRCA1及BRCA2突變型癌症。
如請求項33或34之方法，其中該卵巢癌為BRCA2突變型癌症。
如請求項1至28中任一項之方法，其中該癌症係選自由血液癌症及淋巴癌組成之群。
如請求項1至38中任一項之方法，其中該癌症包含具有升高水準之RAD51的細胞。
如請求項39之方法，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51蛋白水準。
如請求項39之方法，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51蛋白聚集點水準。
如請求項39之方法，其中自該癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞中的至少10%為RAD51陽性。
如請求項39之方法，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51 mRNA水準。
如請求項39至43中任一項之方法，其中在該投與之前已偵測到RAD51之該等升高水準。
如請求項44之方法，其進一步包括在該投與之前偵測自該個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。
如請求項1至45中任一項之方法，其中該癌症係選自由以下組成之群：DNA損傷修復路徑缺陷癌症、同源重組缺陷癌症、包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞的癌症、包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞的癌症及包含具有編碼ATM之基因中之突變的細胞的癌症。
如請求項1至46中任一項之方法，其中該癌症為PARP抑制劑抗性或難治性癌症。
一種治療個體之癌症之方法，其包括向該個體投與USP1抑制劑，其中該癌症包含具有升高水準之RAD51之癌細胞。
如請求項48之方法，其中在該投與之前已偵測到RAD51之該等升高水準。
如請求項49之方法，其進一步包括偵測自該個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。
如請求項48至50中任一項之方法，其中該方法進一步包括與該USP1抑制劑組合向該個體投與PARP抑制劑。
如請求項51之方法，其中該PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。
一種選擇患有癌症之個體用USP1抑制劑治療之方法，其包括偵測該癌症是否包含具有升高水準之RAD51之細胞，其中若該癌症包含具有升高水準之RAD51之細胞，則選擇該個體用USP1抑制劑治療。
一種活體外鑒別患有對用USP1抑制劑治療起反應之癌症之個體的方法，其包括偵測自該個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準，其中該癌症樣品中升高水準之RAD51指示該患者對用USP1抑制劑治療起反應。
一種能夠特異性偵測RAD51之至少一種藥劑的活體外用途，其用於鑒別患有對用USP1抑制劑治療起反應之癌症之個體。
如請求項53至55中任一項之方法或用途，其中該用USP1抑制劑治療進一步包括與該USP1抑制劑組合，用PARP抑制劑治療。
如請求項56之方法或用途，其中該PARP抑制劑為奧拉帕尼、尼拉帕尼、他拉唑帕尼或盧卡帕尼。
如請求項53至57中任一項之方法或用途，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：
(b)式II：
(c)式III：
及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項48至58中任一項之方法或用途，其中該個體為人類。
如請求項48至59中任一項之方法或用途，其中該癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。
如請求項60之方法，其中該癌症為乳癌。
如請求項61之方法，其中該乳癌為三陰性乳癌(TNBC)。
如請求項48至62中任一項之方法，其中該癌症為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或BRCA1突變與BRCA2突變型癌症。
如請求項60之方法，其中該癌症為卵巢癌。
如請求項64之方法，其中該卵巢癌為BRCA1突變型癌症、BRCA2突變型癌症或p53突變型癌症。
如請求項64或65之方法，其中該卵巢癌為BRCA1突變型癌症及p53突變型癌症。
如請求項64或65之方法，其中該卵巢癌為BRCA1及BRCA2突變型癌症。
如請求項64或65之方法，其中該卵巢癌為BRCA2突變型癌症。
減少或預防個體之腫瘤反彈的方法，其包括向該個體投與(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：
(b)式II：
(c)式III：
及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
一種治療個體之癌症的方法，其包括向該個體投與(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：
(b)式II：
(c)式III：
及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項69或70之方法，其中該PARP抑制劑係選自由以下組成之群：尼拉帕尼、奧拉帕尼及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項71之方法，其中該PARP抑制劑為尼拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項71之方法，其中該PARP抑制劑為奧拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項69至73中任一項之方法，其中該USP1抑制劑為該式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項69至73中任一項之方法，其中該USP1抑制劑為該式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項69至73中任一項之方法，其中該USP1抑制劑為該式III化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項69至76中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物的該投與提供協同效應。
如請求項70至77中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以足以產生一或多種選自由以下組成之群之治療效應的治療有效量投與：(i)減小腫瘤尺寸；(ii)增加腫瘤消退速率；及(iii)減少或抑制腫瘤生長。
如請求項69至78中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物以有效減少作為單一療法投與之PARP抑制劑之毒性效應的量投與。
如請求項70至79中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物延遲、減少或預防腫瘤反彈。
如請求項69至80中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物相繼經投與。
如請求項69至80中任一項之方法，其中該USP1抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物及該PARP抑制劑或該其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物同時經投與。
如請求項69至82中任一項之方法，其中該USP1抑制劑及/或該PARP抑制劑以作為單一藥劑無效之劑量投與。
如請求項69至83中任一項之方法，其中該個體為哺乳動物，視情況，其中該哺乳動物為人類。
一種組合式組合物，其包含(i)泛素特異性加工蛋白酶1(USP1)抑制劑及(ii)聚ADP-核糖聚合酶(PARP)抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物，其中該USP1抑制劑為選自由以下組成之群的化合物： (a)式I：
(b)式II：
(c)式III：
及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項85之組合物，其中該PARP抑制劑係選自由以下組成之群：尼拉帕尼、奧拉帕尼及其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項86之組合物，其中該PARP抑制劑為尼拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項86之組合物，其中該PARP抑制劑為奧拉帕尼或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項85至88中任一項之組合物，其中該USP1抑制劑為該式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項85至88中任一項之組合物，其中該USP1抑制劑為該式II化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
如請求項85至88中任一項之組合物，其中該USP1抑制劑為該式III化合物或其醫藥學上可接受之鹽、水合物、溶劑合物、非晶固體或多晶型物。
一種如請求項85至91中任一項之組合物的用途，其用於製造供治療癌症用之藥物。
一種醫藥組合物，其包含如請求項85至91中任一項之組合物及醫藥學上可接受之載劑。
如請求項93之醫藥組合物，其用於治療癌症。
一種套組，其包含如請求項85至91中任一項之組合物或如請求項93或94之醫藥組合物，及關於向患有癌症之個體投與該組合的說明書。
如請求項69至84中任一項之方法、如請求項92之用途、如請求項94之醫藥組合物或如請求項95之套組，其中該癌症係選自由以下組成之群：血液癌症、淋巴癌、DNA損傷修復路徑缺陷癌症、同源重組缺陷癌症、包含具有編碼p53之基因中之突變的癌細胞的癌症及包含具有編碼p53之基因中之功能喪失型突變的癌細胞的癌症。
如請求項69至84、92、94、95或96中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症係選自由以下組成之群：肺癌、非小細胞肺癌(NSCLC)、結腸癌、膀胱癌、骨肉瘤、卵巢癌、皮膚癌、子宮癌、腹膜癌及子宮內膜癌及乳癌。
如請求項69至84、92、94、95或96中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為卵巢癌或乳癌。
如請求項69至84、92、94、95或96中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為卵巢癌。
如請求項69至84、92、94、95或96中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為乳癌。
如請求項69至84、92、94、95或96中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為三陰性乳癌。
如請求項69至84、92、94至101中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為DNA損傷修復路徑缺陷癌症。
如請求項102之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為同源重組缺陷癌症。
如請求項69至84、92、94至103中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為BRCA1突變型癌症。
如請求項69至84、92、94至103中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為BRCA2突變型癌症。
如請求項69至84、92、94至103中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為BRCA1突變型癌症及BRCA2突變型癌症。
如請求項69至84、92、94至106中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症為PARP抑制劑抗性或難治性癌症。
如請求項69至84、92、94至107中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症包含具有編碼ATM之基因中之突變的癌細胞。
如請求項69至84、92、94至108中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中該癌症包含具有升高水準之RAD51的細胞。
如請求項109之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51蛋白水準。
如請求項109之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51蛋白聚集點水準。
如請求項109之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中自該癌症獲得之樣品中處於細胞週期S/G2期之細胞中的至少10%為RAD51陽性。
如請求項109之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中RAD51之該等升高水準為升高之RAD51 mRNA水準。
如請求項109至113中任一項之方法、用途、醫藥組合物或套組，其中在該投與或該治療之前已偵測到RAD51之該等升高水準。
如請求項114之方法或用途，其進一步包括在該投與或該治療之前偵測自該個體獲得之癌症樣品中的RAD51水準。
一種治療USP1蛋白介導之病症及/或PARP蛋白介導之病症的方法，其包括向有需要之個體投與有效治療該USP1蛋白介導之病症及/或該PARP蛋白介導之病症之量的如請求項85至91中任一項之組合物或如請求項93之醫藥組合物。
一種抑制USP1蛋白及/或PARP蛋白之方法，其包括使USP1蛋白及/或PARP蛋白接觸如請求項85至91中任一項之組合物或如請求項93之醫藥組合物。
如請求項117之方法，其中該接觸發生於活體外。
如請求項117之方法，其中該接觸發生於活體內。