TW202100559A - Cd19 結合分子及其用途 - Google Patents

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Abstract

本揭露提供了特異性結合至CD19的CD19結合分子，包括單特異性、雙特異性和三特異性結合分子；包含該CD19結合分子的軛合物；以及包含該CD19結合分子和軛合物的藥物組成物。本揭露進一步提供了使用該C19結合分子治療與CD19表現相關的疾病和障礙之方法。本揭露還進一步提供了被工程化以表現該CD19結合分子的重組宿主細胞，以及藉由在表現該CD19結合分子的條件下培養該宿主細胞來產生該CD19結合分子之方法。

Description

CD19結合分子及其用途
本揭露總體上關於特異性結合至CD19的CD19結合分子，包括單特異性、雙特異性和三特異性結合分子，以及它們用於治療與CD19表現相關的疾病和障礙的用途。
B細胞在分化和增殖過程中表現多種細胞表面分子。CD19係一種泛B細胞膜糖蛋白，其在前B細胞發育的早期藉由終末分化表現，從而調節B淋巴細胞的發育和功能。在大多數淋巴源性癌症、絕大多數非何杰金氏淋巴瘤(NHL)和白血病(包括慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、急性淋巴細胞性白血病(ALL)和華氏巨球蛋白血症(WM))中鑒定出CD19的表現。
博納吐單抗(Blinatumomab)係一種CD19-CD3雙特異性T細胞接合物，被批准用於治療ALL。然而，用博納吐單抗治療缺乏持久的響應，並且其特徵係復發率高。Von Stackelberg等人，2016,Journal of Clinical Oncology[臨床腫瘤學雜誌]34(36)：4381-4389。此外，博納吐單抗具有短的半衰期，這需要持續藥物暴露才能發揮足夠的功效和可控制的毒性。Porter等人 ，2013,Clin Pharmacol.[臨床藥理學雜誌]5(增刊1)：5-11。
儘管癌症治療取得了重大進展，但B細胞惡性腫瘤，如非何杰金氏淋巴瘤的B細胞亞型和慢性淋巴細胞性白血病，係癌症相關死亡之主要原因。因此，仍然需要進一步的治療劑來治療B細胞惡性腫瘤。
本揭露提供了特異性結合至人CD19的CD19結合分子(例如，抗體、其抗原結合片段)、和特異性結合至人CD19的多特異性分子。
在一個方面，本揭露提供了包含CD19抗原結合結構域或抗原結合模組(「ABM」)的單特異性CD19結合分子(例如，抗體及其抗原結合片段)。可能是單特異性的示例性CD19結合分子描述於下文中的5.2節和具體實施方式1至具體實施方式15中。
在另一方面，本揭露提供了包含本揭露CD19 ABM的多特異性結合分子(「MBM」)。
在某些實施方式中，該MBM係雙特異性結合分子(「BBM」)。本揭露之BBM包含特異性結合至人CD19的第一ABM(「ABM1」或「CD19 ABM」)和特異性結合至第二抗原的第二ABM(「ABM2」)，例如，人CD3或T細胞受體(TCR)複合物的其他組分(本文中有時被稱為「TCR ABM」)。該術語ABM1、ABM2、CD19 ABM、和TCR ABM僅僅為了方便起見使用並不旨在傳達BBM的任何特定構型。在一些實施方式中，TCR ABM結合至CD3(本文中被稱為「CD3 ABM」等)。因此，關於ABM2和TCR ABM的揭露也適用於CD3 ABM。此類多特異性分子可以用於引導CD3+效應T細胞至CD19+位點，從而允許CD3+效應T細胞攻擊並裂解CD19+細胞和腫瘤。示例性MBM的特徵描述於下文中的5.5節至5.6節和具體實施方式16至具體實施方式1190中。
本揭露還藉由提供與CD19、CD3或T細胞上的TCR複合物的其他組分，以及CD2或人腫瘤相關抗原(「TAA」)，例如除了CD19之外的B細胞抗原接合的三特異性結合分子(「TBM」)，擴展了重定向靶向T細胞裂解(RTCC)的原理。本揭露之TBM包含至少三個抗原結合模組(「ABM」)，其可以結合(i)CD19(ABM1)，(ii)TCR複合物的組分(ABM2)，和(iii)CD2或TAA(ABM3)。為了方便起見，結合至(1)人CD19，(2)CD3或TCR複合物其他組分，和(3)CD2的TBM在本文中稱為「1型TBM」。為了方便起見，結合至(1)人CD19，(2)CD3或TCR複合物其他組分，和(3)TAA的TBM在本文中稱為「2型TBM」。
不受理論的束縛，本發明人相信在1型TBM中結合CD2-和TCR複合物-接合可以刺激促進T細胞介導的腫瘤細胞裂解的主要信號通路(例如，藉由聚集TCR)和第二共刺激通路兩者以誘導T細胞增殖並潛在地克服無反應性。同樣不受理論的束縛，據信接合除CD19和TCR複合物的組分之外的TAA，與使用僅靶向CD19和TCR複合物組分的雙特異性接合物相比，藉由靶向更多數量的癌性B細胞，2型TBM將改善癌症(例如B細胞惡性腫瘤)的RTCC治療的臨床結果。
因此，在一個方面，本揭露提供了結合至(1)人CD19，(2)CD3或TCR複合物的其他組分，和(3)CD2的1型TBM。
在另一方面，本揭露提供了結合至(1)人CD19，(2)CD3或TCR複合物的其他組分，和(3)TAA的2型TBM。
除非另外明確指出或者除非上下文另有規定，否則本揭露中對TBM的引用適用於1型和2型TBM兩者。
在一些實施方式中，本揭露之MBM的每個抗原結合模組能夠在一個或多個額外的抗原結合模組中的每一個與其各自的靶結合的同時結合其各自的靶。ABM1係基於免疫球蛋白的，而ABM2和ABM3(當存在時)可以是基 於免疫球蛋白的或基於非免疫球蛋白的。因此，MBM可以包括基於免疫球蛋白的ABM或基於免疫球蛋白和基於非免疫球蛋白的ABM的任何組合。可以用於MBM的基於免疫球蛋白的ABM描述於下文中的5.3.1節和具體實施方式17至21、24至29中。可以用於MBM的基於非免疫球蛋白的ABM描述於下文中的5.3.2節和具體實施方式22至23中。結合至人CD19的示例性ABM的其他特徵描述於下文中的5.2節和具體實施方式17至21中。結合至TCR複合物的組分的示例性ABM的其他特徵描述於下文中的5.7節和具體實施方式30至621中。結合至CD2的示例性ABM的其他特徵描述於下文中的5.8節和具體實施方式726至775中。結合至TAA的示例性ABM的其他特徵描述於下文中的5.9節和具體實施方式776至894中。
MBM的ABM(或其部分)可以相互連接，例如，藉由短肽連接子(linker)或藉由Fc結構域相互連接。用於連接ABM以形成MBM之方法和組分描述於下文中的5.4節和具體實施方式895至1190中。
BBM具有至少兩個ABM(例如，BBM至少係二價的)，並且TBM具有至少三個ABM(例如，TBM至少係三價的)，但它們可以具有更大的化合價。例如，BBM可以具有三個、四個或更多個ABM(即，係三價的、四價的，或者具有大於四價的化合價)。示例性二價、三價、和四價BBM構型示出於圖1中並描述於下文中的5.5節和具體實施方式624至684中。
TBM可以具有四個ABM(即四價)、五個ABM(即五價)、或六個ABM(即六價)，條件係該TBM具有至少一個可以結合CD19的ABM，至少一個可以結合TCR複合物的組分的ABM，和至少一個可以結合CD2或TAA的ABM。示例性三價、四價、五價、和六價TBM構型示出於圖2中並描述於下文中的5.6節和具體實施方式687至724中。
本揭露進一步提供了編碼該CD19結合分子的核酸(以單個核酸或多個核酸的形式)和工程化以表現本揭露之核酸和CD19結合分子的重組宿主細胞和細胞系。示例性核酸、宿主細胞、和細胞系描述於下文中的5.10節和具體實施方式1241至1248中。
本揭露進一步提供了包含本揭露之CD19結合分子的藥物軛合物(conjugate)。為了方便起見，此類軛合物在本文中被稱為「抗體-藥物軛合物」或「ADC」，儘管一些ABM可能是非免疫球蛋白結構域。ADC的實例描述於下文中的5.12節和具體實施方式1191至1230中。
還提供了包含該CD19結合分子和ADC的藥物組成物。藥物組成物的實例描述於下文中的5.15節和具體實施方式1231中。
本文進一步提供了使用該CD19結合分子、該ADC和本揭露之該藥物組成物，例如用於治療增殖性病症(例如，癌症)(CD19在其上表現)、用於治療自體免疫疾病、和用於治療與CD19表現相關的其他疾病和病症之方法。示例性方法描述於下文中的5.16節和具體實施方式1232至1239中。
本揭露進一步提供了使用與其他的藥劑和療法組合的該CD19結、合分子、該ADC、和該藥物組成物之方法。組合療法的示例性藥劑、療法、及方法描述於下文中的5.17節和具體實施方式1240中。
[圖1A-1AH]：示例性BBM構型。圖1A示出了圖1B-1AH中示出的示例性BBM構型之組分。並未示出連接每條鏈的不同結構域的全部區(例如，省略了連接scFv的VH結構域和VL結構域的連接子、連接Fc結構域的CH2結構域 和CH3結構域的鉸鏈等)。圖1B-1F示出了二價BBM；圖1G-1Z示出了三價BBM；圖1AA-1AH示出了四價BBM。
[圖2A-2V]：示例性TBM構型。圖2A示出了圖2B-2V中示出的示例性TBM構型之組分。並未示出連接每條鏈的不同結構域的全部區(例如，省略了連接scFv的VH結構域和VL結構域的連接子、連接Fc的CH2結構域和CH3結構域的鉸鏈等)。圖2B-2P示出了三價TBM；圖2Q-2S示出了四價TBM；圖2T示出了五價TBM，並且圖2U-2V示出了六價TBM。
[圖3A-3B]：實例1的雙特異性(圖3A和圖3C)和三特異性(圖3B)構建體之示意圖。
[圖4A-4B]：CD19 BBM引發針對CD19+靶細胞的重定向T細胞毒性活性(RTCC)的能力。基於NEG258和基於NEG218的BBM兩者介導了針對CD19+靶細胞系的RTCC活性。在效應細胞：靶細胞(E：T)比為3：1的系列稀釋BBM的存在下，將Nalm6-luc(圖4A)和Karpas422-luc(圖4B)細胞與擴增的T細胞共培養。在孵育24h後測量發光信號。
[圖5A-5B]：CD19 BBM引發T細胞增殖之能力。基於NEG258和基於NEG218的BBM兩者均誘導T細胞增殖。在B：T比為1：1的系列稀釋BBM的存在下，將Karpas422-luc(圖5A)和Nalm6-luc(圖5B)細胞與擴增的T細胞共培養。在孵育96h後測量發光信號。
[圖6A-6F]：CD19 TBM引發CD2依賴性T細胞活化之能力。CD2敲除減弱了三特異性構建體的優勢。圖6A-6B示出了JNL CD2 WT(圖6A)和KO(圖6B)細胞上CD2表現的代表性流動式細胞測量術分析。抗CD2 mAb的染色(點填充長條圖)與mIgG1同種型對照的染色(斜線填充長條圖)或未染色(開放長條圖)重疊。圖6C-6F示出了在E：T比為3：1的系列稀釋BBM和TBM的存在 下，JNL CD2+ (圖6C-6D)和CD2- (圖6E-6F)細胞與CD19+ 靶細胞共培養的數據。在孵育24h後測量發光信號。
[圖7A-7B]：CD19 TBM與食蟹猴(cyno)B細胞之結合。圖7A示出了具有基於NEG218的CD19結合臂的TBM的數據，並且圖7B示出了具有基於NEG 258的CD19結合臂的TBM的數據。
[圖8A-8H]：PBMC中的食蟹猴B細胞耗盡後，CD19 TBM誘導T細胞活化之能力。在圖8A中，使用ficoll梯度離心從食蟹猴全血中分離出PBMC並將其與雙特異性或三特異性構建體一起孵育過夜。收穫樣本，並同時對CD3和CD20進行染色，以鑒定PBMC群體中的B細胞和T細胞。如6.6.1節中所述地計算B細胞耗盡的百分比。圖8B-8H示出了CD3 + T細胞上CD69和CD25表現的FACS分析結果，以確定單個(CD69 + CD25 - 或CD69 - CD25 + )或雙陽性細胞(CD69 + CD25 + )。圖8B：未處理(僅介質)；圖8C-8E：CD3hi TSP1L；圖8F-8H：CD3hi TSP1。
[圖9A-9P]：基於NEG258和基於NEG218的TBM誘導人供體細胞針對Nalm6(圖9A-9H)和Karpas422(圖9I-9P)靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。
[圖10A-10P]：具有不同CD3親和力的基於NEG258和基於NEG218的TBM誘導人供體細胞針對Nalm6(圖10A-10H)和Karpas422(圖10I-10P)靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。
[圖11A-11L]：包含CD2結合臂和包含對照溶菌酶結合臂的基於NEG258的TBM誘導人供體細胞針對Nalm6(圖11A-11H)和Karpas422(圖11I-11L)靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。
[圖12A-12C]：由基於NEG258和基於NEG218的TBM誘導T細胞細胞介素釋放。圖12A：IFN-γ；圖12B：TNF-α；圖12C：IL2。
[圖13A-13C]：基於NEG258和基於NEG218的TBM與過度表現人CD19(圖13A)或食蟹猴CD19(圖13B)的鼠300.19細胞系之結合。該TBM顯示與野生型300.19細胞系的結合可忽略不計(圖13C)。
[圖14]：CD58之示意性圖示。
[圖15]：含有CD58變體序列的TBM的重定向的T細胞毒性。
[圖16]：含有CD58變體序列的TBM的抗原非依賴性T細胞活化。以相對發光單位(RLU)表示的數據。
[圖17A-17H]：CD19和CD58在多種細胞系上的表現：圖17A-17B：CD19和CD58分別在OCI-LY-19細胞上的表現；圖17C-17D：CD19和CD58分別在Karpas-422細胞上的表現；圖17E-17F：CD19和CD58分別在托萊多細胞上的表現；圖17G-17H：CD19和CD58分別在Nalm-6細胞上的表現。
[圖18A-18B]：基於NEG258的TBM和BBM誘導人供體細胞針對Karpas422靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。圖18A和圖18B示出了使用來自兩個不同供體的T細胞的數據。
[圖19A-19F]：由基於NEG258的TBM和BBM誘導T細胞細胞介素釋放。圖19A-19B：IFN-γ(分別為供體1和供體2)；圖19C-19D：IL-2(分別為供體1和供體2)；圖19E-19F：TNF-α(分別為供體1和供體2)。X軸上的三角形表示圖中從左到右構建體之集中度降低。
[圖20]：結合至T細胞的基於NEG-258的TBM和BBM。
[圖21A-21C]：基於NEG-258的TBM和BBM介導之T細胞增殖。圖21A：OC-LY-19共培養中之T細胞增殖；圖21B：Karpas422共培養中之T細胞增殖；圖21C：托萊多共培養中之T細胞增殖。
[圖22A-22B]：基於NEG258的TBM和BBM誘導人供體細胞針對Ka.rpas422靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。圖22A和圖22B示出了使用來自兩個不同供體的T細胞的數據。
[圖23A-23J]：基於NEG258的TBM和BBM誘導人供體細胞針對多種靶細胞的重定向的T細胞毒性之能力。圖23A-23B：OC-LY-19(分別為供體1和供體2)；圖23C-23D：托萊多(分別為供體1和供體2)；圖23E-23F：Nalm6(分別為供體1和供體2)；圖23G-23H：Nalm6 KO(分別為供體1和供體2)；圖23I-23.J：K562(分別為供體1和供體2)。
[圖24A-24J]：在多種靶細胞中由基於NEG258的TBM和BBM誘導T細胞細胞介素釋放。圖24A-24B：來自OC-LY-19的TNF-α(分別為供體1和供體2)；圖24C-24D：來自托萊多的TNF-α(分別為供體1和供體2)；圖24E-24F：來自Nalm6的TNF-α(分別為供體1和供體2)；圖24G-24H：來自Nalm6 KO的TNF-α(分別為供體1和供體2)；圖24I-24J：來自K562的TNF-α(分別為供體1和供體2)。
[圖25A-25H]：用Karpas 422和OCI-LY-19細胞系再考驗RTCC測定。圖25A：測定設置。圖25B-25D：Karpas 422(分別為第一次挑戰後、第二次挑戰後、和第三次挑戰後)；圖25E-25H OCI-LY-19(分別為第一次挑戰後、第二次挑戰後、第三次挑戰後、和第四次挑戰後)。
[圖26A-26P]：用Karpas 422和OCI-LY-19細胞系再考驗T細胞表型。圖26A-26H：Karpas 422表型；圖26I-26P：OCI-LY-19表型。圖26A和26I：% IL-2+ CD4 T細胞：圖26B和26J：% IFNγ+CD4 T細胞；圖26C和26K：% IL-2+ CD8 T細胞；圖26D和26L：% IFNγ+CD8 T細胞；圖26E和26M：CD3年輕；圖26F和26N：CD4年老；圖26G和26O：CD8年輕；圖26H和26P：CD8年老。圖中的線條代表不同的T細胞供體。
[圖27A-27D]：CD3hi TSP1與CD3hi BSP1在CD19+靶細胞存在下引發T細胞增殖之能力。在存在1nM(圖27A-27B)或0.1nM(圖27C-27D)CD3hi TSP1或CD3hi BSP1且存在(圖27A和27C)或不存在(圖27B和27D)經照射的自體PBMC(T細胞耗盡)的情況下，將Nalm6-luc細胞與分選的CD28 + 或CD28 - CD8 T細胞以1：3的E：T比率共培養72h。將增殖測量為CFSE稀釋細胞在活細胞中之百分比。
[圖28A-28L]：CD3hi TSP1和CD3hi BSP1在Nalm6 CD19+靶細胞 (B：T 1：3)存在下誘導T細胞細胞介素產生之能力。圖28A-28B：當在經照射的PBMC和1nM CD3hi TSP1或1nM CD3hi BSP1存在下共培養時，產生CD28 - 和CD28 + CD8 T細胞的GzB(圖28A)和IFN-γ(圖28B)之中值螢光強度(MFI)。圖28C-28D：當在不存在經照射的PBMC和1nM CD3hi TSP1或1nM CD3hi BSP1的情況下共培養時，產生CD28 - 和CD28 + CD8 T細胞的GzB(圖28C)和IFN-γ(圖28D)之MFI。圖28E-28F：當在經照射的PBMC和0.1nM CD3hi TSP1或0.1nM CD3hi BSP1存在下共培養時，產生CD28 - 和CD28 + CD8 T細胞的GzB(圖28E)和IFN-γ(圖28F)之MFI。圖28G-28H：當在不存在經照射的PBMC和0.1nM CD3hi TSP1或0.1nM CD3hi BSP1的情況下共培養時，產生CD28 - 和CD28 + CD8 T細胞的GzB(圖28G)和IFN-γ(圖28H)之MFI。圖28I-28L：當在存在(圖28I和28K)或不存在(圖28J和28L)經照射的PBMC和1nM(圖28I和28J)或0.1nM(圖28K和圖28L)CD3hi TSP1或CD3hi BSP1的情況下共培養時，活T細胞的比例。
[圖：29A-29I]：CD3hi TSP1與CD3hi BSP1誘導T細胞表型變化之能力。圖29A：針對CCR7和CD45RO表現分選的CD28 - 和CD28 + T細胞的代表性實例。圖29B-29I：在存在(圖29B-29E)或不存在(圖29F-29I)PBMC以及存在1nM(圖29B-29C和29F-29G)或0.1nM(圖29D-29E和29H-29I)CD3hi TSP1或CD3hi BSP1的情況下共培養(E：T 1：3)72小時後根據兩個表面標記物 CD45RO和CCR7(幼稚的，CD45RO- CCR7+ ；中樞記憶(CM)，CD45RO+ CCR7+ ；效應記憶(EM)，CD45RO+ CCR7- ；和終末分化(TEMRA)，CD45RO- CCR7- )的組合表現所定義的不同T細胞群之分佈。增殖細胞(CFSE-)的數據示出於圖29B、29D、29F、和29H中。非增殖細胞(CSFE+)的數據示出於圖29C、29E、29G、和29I中。CD28-細胞的數據顯示在每個圖的左側上，並且CD28+細胞的數據顯示在圖的右側上。
[圖30A-30D]：CD3hi TSP1與CD3hi BSP1引發針對CD19+靶細胞的重定向T細胞毒性活性(RTCC)之能力。在存在1nM(圖30A和30C)或0.1nM(圖30B和30D)CD3hi BSP1、CD3hi TSP1或CD3hi TSP1C且存在(圖30A和30B)或不存在(圖30C和30D)經照射的自體PBMC(T細胞耗盡)之情況下，來自與分選的CD28 + 或CD28 - CD8 T細胞以1：3的E：T比率共培養72h的Nalm6-luc細胞的RTCC結果。(n=3)在共培養孵育結束時測量發光信號。結果表示為與未處理條件相比的倍數增加，在未處理條件下，不添加抗體以便評估由對照抗體給出的背景信號。
[圖31A-31B]：CD3hi TSP1(圖31A)和CD3med TSP1(圖31B)在OCI-LY-19皮下腫瘤模型的人PBMC過繼轉移適應中之抗腫瘤活性。
[圖32A-32B]：在OCI-LY-19皮下腫瘤模型的人PBMC過繼轉移適應中，用CD3hi TSP1(圖32A)和CD3med TSP1(圖32B)治療後之體重變化。
[圖33]：NSG小鼠人源化過程之示意圖。
[圖34A-34B]：CD3 TSP1、CD3hi BSP1和CD3med TSP1在huCD34+ NSG小鼠的DLBCL皮下腫瘤模型中的抗腫瘤活性(圖34A)，以及在huCD34+ NSG小鼠的DLBCL皮下腫瘤模型中用CD3 TSP1、CD3hi BSP1和CD3med TSP1治療後之體重變化(圖34B)。
[圖35A-35D]：在huCD34+ NSG小鼠的OCI-LY-19 DLBCL皮下腫瘤模型中用CD3hi TSP1(圖35A和35B)和CD3med TSP1(圖35C和35D)進行抗體治療後的抗腫瘤活性(圖35A和35C)和體重響應(圖35B和35D)。
[圖36A-36C]：CD3hi BSP1(圖36A)、CD3hi TSP1(圖36B)和CD3med TSP1(圖36C)在Daudi-Luc皮下腫瘤模型的人PBMC過繼轉移適應中的抗腫瘤活性。
[圖37A-37C]：在Daudi-Luc皮下腫瘤模型的人PBMC過繼轉移適應中，用CD3hi BSP1(圖37A)、CD3hi TSP1(圖37B)或CD3med TSP1(圖37C)進行抗體治療後之體重變化。
[圖38A-38C]：實例32的三特異性構建體之示意圖。圖38A：具有全長CD58部分AB2-1之TBM；圖38B：具有包含CD58的IgV樣結構域的截短CD58部分之TBM；圖38C：具有對應於抗CD2抗體Medi 507的scFv之TBM。
[圖39A-39E]：實例33的三特異性構建體之示意圖。圖39A：具有來自實例32的CD58 IgV結構域之TBM；圖39B：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有CD58 IgV結構域、抗CD3 scFab和Fc結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端；圖39C：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有CD58 IgV結構域、抗CD3 scFv和Fc結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端；圖39D：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、CD58 IgV結構域和Fc結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端；圖39E：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD58 IgV結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端。
[圖40A-40C]：實例34的三特異性構建體之示意圖。圖40A：具有來自實例32的CD58 IgV結構域之TBM；圖40B：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD19 scFv結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有CD58 IgV結構域N-末端。圖40C：具有「左」半抗體和「右」半抗體之TBM，該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD19 Fab結構域，並且該「右」半抗體對於Fc結構域具有CD58 IgV結構域N-末端。
5.1.定義
如本文所用的，以下術語旨在具有以下含義：
ABM鏈：單個ABM可以作為一個多肽鏈存在(例如，在scFv的情況下)或藉由多於一個多肽鏈的締合形成(例如，在Fab的情況下)。如本文所用的，該術語「ABM鏈」係指存在於單一多肽鏈上的ABM的全部或部分。該術語「ABM鏈」的使用旨在為了方便起見並且僅出於描述的目的，並且不意味著特定構型或生產方法。
ADCC：如本文所用的「ADCC」或「抗體依賴性細胞介導的細胞毒性」意指細胞介導的反應，其中表現FcγR的非特異性細胞毒性細胞識別靶細胞上的結合抗體並且隨後導致該靶細胞的裂解。ADCC與結合至FcγRIIIa相關；結合至FcγRIIIa的提高導致ADCC活性的提高。
ADCP：如本文所用的「ADCP」或抗體依賴性細胞介導的吞噬作用意指細胞介導的反應，其中表現FcγR的非特異性吞噬細胞識別靶細胞上的結合抗體並且隨後導致該靶細胞的吞噬作用。
另外的藥劑：為了方便起見，與本揭露之抗原結合分子組合使用的藥劑在本文中被稱為「另外的」藥劑。
抗體：如本文所用的術語「抗體」係指免疫球蛋白家族的多肽(或多肽的組)，該多肽(或多肽的組)能夠非共價、可逆地並且特異性地結合抗原。例如，天然存在的IgG類型的「抗體」係包含由二硫鍵相互連接的至少兩條重(H)鏈和兩條輕(L)鏈的四聚體。每條重鏈由重鏈可變區(本文中縮寫為VH)和重鏈恒定區組成。重鏈恒定區包含三個結構域，即CH1、CH2和CH3。每條輕鏈包含輕鏈可變區(本文中縮寫為VL)和輕鏈恒定區。該輕鏈恒定區由一個結構域(在本文縮寫為CL)組成。VH和VL區可以進一步細分為高變區，稱為互補性決定區(CDR)，其間穿插有稱為框架區(FR)的較保守區。每個VH和VL由從胺基末端排到羧基末端按以下順序排列的三個CDR和四個FR構成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。重鏈和輕鏈的可變區含有與抗原相互作用的結合結構域。抗體的恒定區可以介導免疫球蛋白與宿主組織或因子(包括免疫系統的多種細胞(例如，效應細胞)和經典補體系統的第一組分(C1q))的結合。該術語「抗體」包括但不限於：單株抗體、人抗體、人源化抗體、駱駝化(camelised)抗體、嵌合抗體、雙特異性或多特異性抗體和抗獨特型(抗Id)抗體(包括，例如，針對本揭露之抗體的抗Id抗體)。該等抗體可以屬於任何同種型/類型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD、IgA和IgY)或亞類(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)。
將輕鏈和重鏈兩者分成結構同源性區和功能同源性區。術語「恒定」和「可變」係在功能上使用。在這點上，應當理解輕鏈(VL)和重鏈(VH)部分的可變結構域均決定抗原識別和特異性。相反地，輕鏈(CL)和重鏈(CH1、CH2或CH3)的恒定結構域賦予重要生物學特性例如分泌、經胎盤移動性(transplacental mobility)、Fc受體結合、補體結合等。按照慣例，恒定區結構 域離抗體的抗原結合位點或者胺基末端越遠，它的編號越大。在野生型抗體中，可變區在N-末端並且恒定區在C-末端；CH3結構域和CL結構域實際上分別包含重鏈和輕鏈的羧基末端。
抗體片段：如本文所用的，該術語抗體的「抗體片段」係指抗體的一個或多個部分。在一些實施方式中，該等部分係抗體的一個或多個接觸結構域的一部分。在一些其他的實施方式中，該等部分係抗原結合片段(其保留了非共價地、可逆地並且特異性地結合抗原的能力)，有時在本文中被稱為「抗原結合片段」、「其抗原結合片段」、「抗原結合部分」等。結合片段的實例包括但不限於，單鏈Fv(scFv)，Fab片段，由VL、VH、CL和CH1結構域組成的單價片段；F(ab)2片段，包含藉由鉸鏈區處的二硫橋連接的兩個Fab片段的二價片段；由VH和CH1結構域組成的Fd片段；由抗體的單臂的VL和VH結構域組成的Fv片段；由VH結構域組成的dAb片段(Ward等人，1989,Nature[自然]341：544-546)；以及分離的互補決定區(CDR)。因此，該術語「抗體片段」涵蓋抗體的蛋白水解片段(例如，Fab和F(ab)2片段)和包含抗體(例如，scFv)的一個或多個部分的工程化的蛋白質。
抗體片段還可以摻入到單結構域抗體、大型抗體(maxibody)、微型抗體(minibody)、胞內抗體、雙體抗體、三體抗體、四體抗體、v-NAR和bis-scFv中(參見例如，Hollinger和Hudson,2005 Nature Biotechnology[自然生物技術]23：1126-1136)。可以將抗體片段移植到基於多肽例如III型纖網蛋白(Fn3)的支架中(參見美國專利案號6,703,199，其描述了纖網蛋白多肽單體)。
可以將抗體片段摻入包含一對串聯Fv片段(例如，VH-CH1-VH-CH1)的單鏈分子中，與互補的輕鏈多肽(例如，VL-VC-VL-VC)一起形成一對抗原結合區(Zapata等人，1995,Protein Eng.[蛋白工程]8：1057-1062；和美國專利案號5,641,870)。
抗體編號系統：在本說明書中，除非另外說明，對抗體結構域中編號的胺基酸殘基的參考基於EU編號系統(例如，在表1中)。該系統最初由Edelman等人，1969,Proc.Nat’l Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]63：78-85設計並且由Kabat等人，1991，於Sequences of Proteins of Immunological Interest[免疫學相關蛋白序列]，美國國立衛生研究院美國衛生與人力資源服務部(US Department of Health and Human Services,NIH,USA)中做了詳細描述。
抗原結合模組：如本文所用的術語「抗原結合模組」或「ABM」係指MBM具有非共價地、可逆地並且特異性結合至抗原的能力的部分。ABM可以是基於免疫球蛋白的或基於非免疫球蛋白的。如本文所用的，該術語「ABM1」和「CD19 ABM」(等)係指特異性結合至CD19的ABM，該術語「ABM2」和「TCR ABM」(等)係指特異性結合至TCR複合物組分的ABM，該術語「ABM3」係指特異性結合至CD2或TAA(取決於上下文)的ABM，該術語「CD2 ABM」(等)係指特異性結合至CD2的ABM，並且該術語「TAA ABM」(等)係指特異性結合至TAA的ABM。該術語ABM1、ABM2、和ABM3僅僅為了方便起見使用並不旨在傳達MBM的任何特定構型。在一些實施方式中，ABM2結合至CD3(本文中被稱為「CD3 ABM」等)。因此，關於ABM2和多個ABM2的揭露也適用於CD3 ABM。
抗原結合片段：該術語抗體的「抗原結合片段」係指抗體保留了非共價地、可逆地並且特異性結合至抗原的能力的部分。
抗原結合分子：該術語「抗原結合分子」係指包含一個或多個抗原結合結構域的分子，例如抗體。該抗原結合分子可以包含一個或多個多肽鏈，例如，一個、兩個、三個、四個或更多個多肽鏈。抗原結合分子中的該等多肽鏈可以與彼此直接或間接締合(例如，第一多肽鏈可以與第二多肽鏈締合，該第二多肽鏈反過來可以與第三多肽鏈締合以形成抗原結合分子，其中該第一和 第二多肽鏈直接與彼此締合，該第二和第三多肽鏈直接與彼此締合，並且該第一和第三多肽鏈藉由該第二多肽鏈間接與彼此締合)。
締合：在抗原結合分子的上下文中，該術語「締合」係指兩個或更多個多肽鏈和/或單一多肽鏈的兩個或更多個部分之間的功能性關係。特別地，該術語「締合」意指兩個或更多個多肽(或單一多肽的部分)彼此締合，例如，藉由分子相互作用非共價締合和/或藉由一個或多個二硫橋或化學交聯共價締合，從而產生功能性抗原結合分子，例如，其中抗原結合結構域可以結合其各自靶標的BBM或TBM。MBM中可能存在的締合的實例包括(但不限於)Fc結構域中的Fc區之間的締合(如在5.4.1.5節中所述之同二聚體或異二聚體)、Fab或Fv中的VH區與VL區之間的締合、以及Fab中的CH1與CL之間的締合。
B細胞：如本文所用的，該術語「B細胞」係指B細胞譜系的細胞，該細胞係淋巴細胞亞型的白血球中的一個類型。B細胞的實例包括漿母細胞、漿細胞、淋巴漿細胞樣細胞、記憶B細胞、濾泡B細胞、邊緣區B細胞、B-1細胞、B-2細胞、和調節B細胞。
B細胞惡性腫瘤：如本文所用的，B細胞惡性腫瘤係指B細胞的不受控增殖。B細胞惡性腫瘤的實例包括非何杰金氏淋巴瘤(NHL)、何杰金氏淋巴瘤、白血病、和骨髓瘤。例如，B細胞惡性腫瘤可以是但不限於：多發性骨髓瘤、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)/小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)、濾泡性淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤(MCL)、彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、邊緣區淋巴瘤、柏基特氏淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症)、毛細胞白血病、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、縱隔灰區淋巴瘤(MGZL)、脾邊緣區B細胞淋巴瘤、MALT的結外邊緣區B細胞淋巴瘤、結節邊緣區B細胞淋巴瘤、和原發性滲出性淋巴瘤、和漿細胞樣樹突狀細胞瘤。
結合序列：參考表1、12、13、14、16、或17(包括其子部分)，該術語「結合序列」意指具有一整組該表中所列出的CDR、VH-VL對、或scFv的ABM。
雙特異性結合分子：該術語「雙特異性結合分子」或「BBM」係指特異性結合至兩個抗原並且包含兩個或更多個ABM的分子。本揭露之BBM包含至少一個對CD19具有特異性的抗原結合結構域和至少一個對不同的抗原(例如TCR複合物的組分)具有特異性的抗原結合結構域。代表性BBM示出在圖1B-1AH中。BBM可以包含一個、兩個、三個、四個或甚至更多個多肽鏈。
二價：如本文所用的，在抗原結合分子的上下文中，該術語「二價」係指具有兩個抗原結合結構域的抗原結合分子。該結構域可以是相同的或不同的。因此，二價抗原結合分子可以是單特異性或雙特異性的。二價BBM可以包含特異性結合至CD19的ABM和結合至另一抗原(例如，TCR複合物的組分)的另一種ABM。
癌症：該術語「癌症」係指以異常細胞的不受控(並且常常是迅速的)生長為特徵的疾病。癌細胞可以局部或通過血流和淋巴系統擴散到身體的其他部位。本文描述了多種癌症的實例並且該實例包括但不限於：白血病、多發性骨髓瘤、無症狀性骨髓瘤、何杰金氏淋巴瘤和非何杰金氏淋巴瘤，例如，任何前述任何類型的CD19陽性癌症。該術語「癌性B細胞」係指正在經歷或已經經歷不受控增殖的B細胞。
CD3：該術語「CD3」或「分化簇3」係指T細胞受體的分化簇3共受體。CD3有助於活化細胞毒性T細胞(例如，CD8+初始T細胞)和輔助性T細胞(例如，CD4+初始T細胞)並且由四條不同的鏈構成：一條CD3γ鏈(例如，Genbank登錄號NM_000073和MP_000064(人))、一條CD3δ鏈(例如，Genbank登錄號NM_000732、NM_001040651、NP_00732和NP_001035741(人))、和 兩條CD3ε鏈(例如，Genbank登錄號NM_000733和NP_00724(人))。CD3的鏈係含有單個細胞外免疫球蛋白結構域的免疫球蛋白超家族的高度相關的細胞表面蛋白。CD3分子與T細胞受體(TCR)和ζ鏈締合以形成T細胞受體(TCR)複合物，該複合物的作用係在T淋巴細胞中產生活化信號。除非明確地另有說明，否則在本申請中對CD3的引用可以是指CD3共受體、CD3共受體複合物、或CD3共受體複合物的任何多肽鏈。
CD19：：該術語「CD19」或「分化簇19」係指分化簇19蛋白，它係在白血病先質細胞上可檢測的抗原決定簇。人和鼠胺基酸和核酸序列可以在公共數據庫中找到，例如GenBank、UniProt和Swiss-Prot。例如，人CD19的胺基酸序列可以作為UniRrot/Swiss-Prot登錄號P15391找到，並且編碼人CD19的核苷酸序列可以登錄號NM_001178098找到。CD19在大多數B譜系癌症上表現，該等B譜系癌症包括例如急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴球性白血病和非何杰金氏淋巴瘤。具有表現CD19的其他細胞在下文「與CD19表現相關的疾病」的定義中提供。它也是B細胞祖細胞的早期標記物。參見例如，Nicholson等人，1997,Mol.Immun.[分子免疫學]34(16-17)：1157-1165。
嵌合抗體：該術語「嵌合抗體」(或其抗原結合片段)係抗體分子(或其抗原結合片段)，其中(a)該恒定區或其部分被改變、置換或更換，使得該抗原結合位點(可變區)與不同或改變的類型、效應子功能和/或種類的恒定區連接，或者與賦予嵌合抗體新特性的完全不同的分子(例如酶、毒素、激素、生長因素、藥物等)連接；或(b)該可變區或其部分被改變、置換或更換為具有不同或改變的抗原特異性的可變區。例如，可以藉由用來自人免疫球蛋白的恒定區替代其恒定區來修飾小鼠抗體。由於被人恒定區置換，該嵌合抗體可以保留其識別抗原的特異性，同時與原始小鼠抗體相比在人體中具有降低的抗原性。
組合：如本文所用的，「組合」投與意指在受試者患病期間將兩種(或更多種)不同的治療遞送至受試者，例如在受試者被診斷患有障礙後並且在該障礙被治癒或清除前或者在由於其他原因終止治療前遞送兩種或多種治療。
互補性決定區：如本文所用的術語「互補決定區」或「CDR」係指抗體可變區內賦予抗原特異性和結合親和力的胺基酸的序列。例如，一般來說，每個重鏈可變區中存在三種CDR(例如，CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3)，並且每個輕鏈可變區中存在三種CDR(CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3)。給定CDR的精確胺基酸序列邊界可以使用許多眾所周知的方案中的任一種來確定，該等方案包括由以下文獻描述的那些：Kabat等人，1991,「Sequences of Proteins of Immunological Interest」[具有免疫學重要性的蛋白序列]，第5版，美國國立衛生研究院，公共衛生事業部，馬里蘭州貝塞斯達市(「卡巴特」編號方案)；Al-Lazikani等人，1997,JMB 273：927-948(「喬西亞」編號方案)，和ImMunoGenTics(IMGT)編號(Lefranc,1999,The Immunologist[免疫學者]7：132-136；Lefranc等人，2003,Dev.Comp.Immunol.[發育免疫學與比較免疫學]27：55-77(「IMGT」編號方案)。例如，對於經典形式，根據Kabat，將重鏈可變結構域(VH)中的CDR胺基酸殘基編號為31-35(CDR-H1)、50-65(CDR-H2)和95-102(CDR-H3)；並且將輕鏈可變結構域(VL)中的CDR胺基酸殘基編號為24-34(CDR-L1)、50-56(CDR-L2)和89-97(CDR-L3)。根據Chothia，將VH中的CDR胺基酸編號為26-32(CDR-H1)、52-56(CDR-H2)和95-102(CDR-H3)：並且將VL中的胺基酸殘基編號為26-32(CDR-L1)、50-52(CDR-L2)和91-96(CDR-L3)。藉由結合卡巴特和喬西亞兩者的CDR定義，CDR由人VH中的胺基酸殘基26-35(CDR-H1)、50-65(CDR-H2)和95-102(CDR-H3)和人VL中的胺基酸殘基24-34(CDR-L1)、50-56(CDR-L2)和89-97(CDR-L3)組成。根據IMGT， 將VH中的CDR胺基酸殘基編號為大約26-35(CDR-H1)、51-57(CDR-H2)和93-102(CDR-H3)，並將VL中的CDR胺基酸殘基編號為大約27-32(CDR-L1)、50-52(CDR-L2)和89-97(CDR-L3)(根據「Kabat」編號)。根據IMGT，可以使用程式IMGT/DomainGap Align確定抗體的CDR區。
並行：該術語「並行」不限於在完全相同的時間投與療法(例如，預防劑或治療劑)，而是意指將包含本揭露之抗原結合分子的藥物組成物以一種順序並在一定時間間隔內向受試者投與，使得該分子可以與一種或多種另外的療法一起發揮作用，以提供增加的益處(與如果以其他方式投與它們時相比)。
保守序列修飾：該術語「保守序列修飾」係指不顯著影響或改變CD19結合分子或其組分(例如，CD19結合結構域或Fc區)的結合特徵的胺基酸修飾。此類保守修飾包括胺基酸取代、添加和缺失。可以藉由標準技術，如定點誘變和PCR介導的誘變將修飾引入結合分子中。保守胺基酸取代係其中胺基酸殘基被具有類似側鏈的胺基酸殘基置換的取代。具有類似側鏈的胺基酸殘基的家族已在本領域中進行了定義。該等家族包括具有鹼性側鏈(例如離胺酸、精胺酸、組胺酸)、酸性側鏈(例如天冬胺酸、麩胺酸)、不帶電荷的極性側鏈(例如甘胺酸、天冬醯胺、麩醯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、酪胺酸、半胱胺酸、色胺酸)、非極性側鏈(例如丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、脯胺酸、苯丙胺酸、甲硫胺酸)、β分支側鏈(例如蘇胺酸、纈胺酸、異白胺酸)以及芳香族側鏈(例如酪胺酸、苯丙胺酸、色胺酸、組胺酸)的胺基酸。因此，結合分子中的一個或多個胺基酸殘基可以用來自相同側鏈家族的其他胺基酸殘基來置換，並且可以測試該改變的結合分子的例如與靶分子的結合和/或有效異源二聚化和/或效應子功能。
雙體抗體：如本文所用的，該術語「雙體抗體」係指具有兩個抗原結合位點的小抗體片段，其典型地由scFv鏈的配對形成。每個scFv包含連接至 相同多肽鏈(VH-VL，其中VH位於VL的N-末端或C-末端)中的輕鏈可變結構域(VL)的重鏈可變結構域(VH)。不同於典型的scFv(其中VH和VL藉由連接子分離，該連接子允許相同多肽鏈上的VH和VL配對並形成抗原結合結構域)，雙體抗體典型地包含連接子，但該連接子太短不足以允許相同鏈上的VH和VL結構域配對，從而迫使VH和VL結構域與另一條鏈的互補結構域配對並產生了兩個抗原結合位點。雙體抗體更全面地描繪於以下文獻中：例如，EP 404,097；WO 93/11161；和Hollinger等人，1993,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]90：6444-6448。
dsFv：該術語「dsFv」係指二硫鍵穩定型Fv片段。在dsFv中，VH和VL藉由結構域間二硫鍵連接。為產生此類分子，將VH和VL的框架區中的各一個胺基酸突變為半胱胺酸，其反過來形成穩定的鏈間二硫鍵。典型地，VH中的位置44和VL中的位置100突變為半胱胺酸。參見Brinkmann,2010,Antibody Engineering[抗體工程化]181-189,DOI：10.1007/978-3-642-01147-4_14。該術語dsFv涵蓋所謂的dsFv(其中VH和VL藉由鏈間二硫鍵而不是連接子肽連接的分子)或scdsFv(其中VH和VL藉由連接子和鏈間二硫鍵連接的分子)。
效應子功能：該術語「效應子功能」係指抗體分子的活性，其係由藉由抗體的結構域而不是抗原結合結構域的結合介導的，通常由效應分子的結合介導的。效應子功能包括補體介導的效應子功能，其係由例如該補體的C1組分與該抗體的結合介導的。補體的活化在細胞病原體的調理作用和裂解中是重要的。補體的活化還刺激炎症響應並且可參與自體免疫性超敏響應。效應子功能還包括Fc受體(FcR)介導的效應子功能，其可以由抗體的恒定結構域與Fc受體(FcR)的結合觸發。抗體與細胞表面上的Fc受體的結合觸發許多重要的和多種的生物響應，包括抗體包覆的顆粒的吞噬和破壞、免疫複合物的清除、殺傷細胞對抗體包覆的靶細胞的溶解(稱為抗體依賴性細胞介導的細胞毒性，或 ADCC)、炎症介質的釋放、胎盤轉移以及免疫球蛋白產生的控制。抗體的效應子功能可以藉由改變例如，增強或減少抗體對效應分子如Fc受體或補體組分的親和力來改變。通常將藉由修飾效應分子結合位點來改變結合親和力，並且在此情況下，定位感興趣的位點並以合適的方式修飾至少部分位點係適宜的。還設想，針對效應分子的抗體上的結合位點的改變不需要顯著地改變整體結合親和力，但可以改變相互作用的幾何形狀，導致效應子機制無效，如在非生產性結合中一樣。進一步設想的是，效應子功能還可以藉由修飾不直接參與效應分子結合但是以其他方式參與效應子功能的性能的位點來改變。
表位：表位或抗原決定簇係抗原的部分，該抗原可被如本文該之抗體或其他的抗原結合部分識別。表位可以是線性的或構象型的。
Fab：如本文所用的，「Fab」或「Fab區」意指包含VH、CH1、VL、和CL免疫球蛋白結構域的多肽區。該等術語可以指單獨的這一區域，或指在本揭露之抗原結合分子的背景中的這一區域。
藉由附接至VH結構域的CH1結構域與附接至VL結構域的CL結構域的締合，形成了Fab結構域。該VH結構域與該VL結構域配對以構成Fv區，並且該CH1結構域與該CL結構域配對以進一步穩定結合模組。兩個恒定結構域之間的二硫鍵可以進一步穩定Fab結構域。
Fab區可以藉由免疫球蛋白分子的蛋白水解切割(例如，使用酶例如木瓜蛋白酶)或藉由重組表現來產生。在天然免疫球蛋白分子中，藉由兩條不同的多肽鏈的締合(例如，一條鏈上的VH-CH1與另一條鏈上的VL-CL締合)，形成了Fab。該Fab區典型地重組表現，典型地在兩條多肽鏈上，儘管單鏈Fab在本文中也考慮在內。
Fc結構域：該術語「Fc結構域」係指一對締合的Fc區。這兩個Fc區二聚化以產生Fc結構域。Fc結構域中的兩個Fc區可以是相同的(這樣的Fc結 構域在本文中被稱為「Fc同型二聚體」)或彼此不同的(這樣的Fc結構域在本文中被稱為「Fc異二聚體」)。
Fc區：如本文所用的，該術語「Fc區」或「Fc鏈」意指包含IgG分子的CH2-CH3結構域的多肽，並且在一些情況下，包括鉸鏈。在人IgG1的EU編號中，該CH2-CH3結構域包含胺基酸231至胺基酸447，並且該鉸鏈係胺基酸216至胺基酸230。因此，「Fc區」的定義包括胺基酸231-447(CH2-CH3)或216-447(鉸鏈-CH2-CH3)、或其片段。在此上下文中的「Fc片段」可以含有來自N-末端和C-末端中的一者或兩者的更少的胺基酸，但仍然保留了與另一Fc區形成二聚體的能力，該能力係如使用標準方法(通常基於尺寸)可以檢測的(例如，非變性層析法、尺寸排阻層析法)。人IgH Fc區在本揭露中具有特定的用途，並且可以是來自人IgG1、IgG2或IgG4的Fc區。
Fv：該術語「Fv」係指可從免疫球蛋白衍生的最小抗體片段，其含有完整的靶識別和結合位點。該區域由以緊密、非共價締合的一個重鏈和一個輕鏈可變結構域的二聚體(VH-VL二聚體)組成。在該構型中，每個可變結構域的三個CDR相互作用以限定VH-VL二聚體表面上的靶結合位點。通常，六種CDR賦予靶標對抗體的結合特異性。然而，在一些情況下，甚至單一可變結構域(或僅包含對靶標具有特異性的三種CDR的Fv的一半)也可以具有識別並結合靶標的能力。在本文中對VH-VL二聚體的引用並不旨在傳達任何特定構型。藉由舉例但不限制的方式，該VH和VL可以以本文該之任何構型結合在一起形成半抗體，或者可以各自存在於單獨的半抗體上，並且當單獨的半抗體締合時結合在一起形成抗原結合結構域，例如形成本揭露之TBM。當存在於單一多肽鏈(例如，scFv)上時，該VH係該VL的N-末端或C-末端。
半抗體：該術語「半抗體」係指包含至少一個ABM或一條ABM鏈並且可以與包含ABM或ABM鏈的另一個分子藉由例如二硫橋或分子相互作 用(例如，Fc異二聚體之間的杵臼結構相互作用)締合的分子。半抗體可以由一條多肽鏈或多於一條多肽鏈(例如，Fab的兩條多肽鏈)組成。在實施方式中，半抗體包含Fc區。
半抗體的實例係包含抗體(例如，IgG抗體)的重鏈和輕鏈的分子。半抗體的另一實例係包含第一多肽和第二多肽的分子，該第一多肽包含VL結構域和CL結構域，該第二多肽包含VH結構域、CH1結構域、鉸鏈結構域、CH2結構域、和CH3結構域，其中VL和VH結構域形成ABM。半抗體的又一實例係包含scFv結構域、CH2結構域和CH3結構域的多肽。
半抗體可能包括多於一個ABM，例如包含(以從N-末端至C-末端的順序)scFv結構域、CH2結構域、CH3結構域、和另一scFv結構域的半抗體。
半抗體還可能包括ABM鏈，當與在另一個半抗體中的另一條ABM鏈締合時，該ABM鏈形成了完整的ABM。
因此，MBM可以包含一個，更典型地兩個，或甚至多於兩個半抗體，並且半抗體可以包含一個或多個ABM或一條或多條ABM鏈。
在一些MBM中，第一半抗體將與第二半抗體締合，例如，異源二聚體化。在其他的MBM中，第一半抗體將共價連接至第二半抗體，例如藉由二硫橋或化學交聯。在又其他的MBM中，第一半抗體將與第二半抗體藉由共價附接和非共價相互作用，例如二硫橋和杵臼結構相互作用締合。
該術語「半抗體」僅旨在用於描述性目的並且不表示特定構型或生產方法。半抗體作為「第一」半抗體、「第二」半抗體、「左」半抗體、「右」半抗體等的描述僅僅是為了方便起見和描述性目的。
六價：在抗原結合分子(例如，TBM)的上下文中，如本文所用的術語「六價」係指具有六個抗原結合結構域的抗原結合分子。儘管不同的構型(例如，結合至CD19的三個抗原結合結構域、結合至TCR複合物組分的兩個 抗原結合結構域、以及結合至CD2或TAA的一個抗原結合結構域，或結合至CD19的三個抗原結合結構域、結合至CD2或TAA的兩個抗原結合結構域、以及結合至TCR複合物組分的一個抗原結合結構域)在本揭露之範圍內，但本揭露之六價TBM通常具有三對各自結合至相同抗原的抗原結合結構域。六價TBM的實例示意性地示出於圖1U-1V中。
臼：在杵臼結構的上下文中，「臼」係指至少一條胺基酸側鏈，其凹進第一Fc鏈的介面並且因此可定位在第二Fc鏈的相鄰交界表面上的互補性「杵」中，從而穩定Fc異二聚體，並且從而例如相比於Fc同型二聚體，更有利於Fc異二聚體形成。
宿主細胞或重組宿主細胞：該術語「宿主細胞」或「重組宿主細胞」係指例如，藉由引入異源核酸，進行基因工程化的細胞。應當理解，這種術語不僅意指特定的受試者細胞，而且意指這種細胞的子代。因為某些修飾可以在後代中由於突變或環境影響而發生，這種子代可能在事實上與親代細胞不同，但仍然包括在如本文所用的術語「宿主細胞」範圍內。宿主細胞例如在染色體外異源表現載體上可以暫態地攜帶異源核酸，或例如藉由將異源核酸整合進宿主細胞基因組穩定地攜帶異源核酸。為了表現抗原結合分子的目的，宿主細胞可以是哺乳動物來源的細胞系或具有哺乳動物樣特徵的細胞系，例如猴腎細胞(COS，例如，COS-1、COS-7)、HEK293、幼侖鼠腎(BHK，例如，BHK21)、中國倉鼠卵巢(CHO)、NSO、PerC6、BSC-1、人肝細胞癌細胞(例如，Hep G2)、SP2/0、HeLa、馬-達氏牛腎(MDBK)、骨髓瘤和淋巴瘤細胞、或其衍生物和/或工程化的變體。工程化的變體包括，例如，聚糖譜(glycan profile)修飾的和/或位點特異性整合位點衍生物。
人抗體：如本文所用的，該術語「人抗體」包括具有可變區的抗體，其中框架區和CDR區兩者均衍生自人來源的序列。此外，如果抗體含有恒 定區，則恒定區也源自此類人序列，例如人種系序列，或人種系序列的突變形式或含有衍生自人框架序列分析的共有框架序列的抗體，例如，如Knappik等人，2000,J Mol Biol[分子生物學雜誌]296,57-86所述。免疫球蛋白可變結構域(例如，CDR)的結構和位置可以使用熟知的編號方案(例如，卡巴特編號方案、喬西亞編號方案、或卡巴特和喬西亞的組合)來定義(參見例如，Lazikani等人，1997,J.Mol.Bio.[分子生物學雜誌]273：927 948；Kabat等人，1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest[免疫學相關蛋白序列]，第5版，NIH公開案號91-3242美國衛生與人力資源服務部；Chothia等人，1987,J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]196：901-917；Chothia等人，1989,Nature[自然]342：877-883)。
人抗體可以包括不是由人序列編碼的胺基酸殘基(例如，藉由在體外隨機誘變或位點特異性誘變、或藉由在體內體細胞突變、或保守取代來引入突變以促進穩定性或生產)。然而，如本文所用的，術語「人抗體」不旨在包括衍生自另一種哺乳動物物種(如小鼠)的種系的CDR序列已經移植到人框架序列上的抗體。
人源化：術語非人(例如，鼠)抗體的「人源化」形式係含有源自非人免疫球蛋白的最小序列的嵌合抗體。在大多數情況下，人源化抗體係人類免疫球蛋白(受體抗體)，其中來自受體高變區的殘基被來自非人類物種(如小鼠、大鼠、兔或非人類靈長類動物)的具有所希望特異性、親和力和容量的高變區(供體抗體)的殘基置換。在一些情況下，人免疫球蛋白的框架區(FR)殘基由相應非人類殘基置換。此外，人源化抗體可以包含在受體抗體或供體抗體中未發現的殘基。進行該等修飾以進一步改善抗體性能。通常，人源化抗體將包含基本上所有如下項：至少一個，典型地兩個可變結構域，其中所有或基本上所有高變環對應於非人類免疫球蛋白的那些高變環，且所有或基本上所有FR係人類免疫球蛋白lo序列的那些FR。人源化抗體視需要還包含免疫球蛋白恒 定區(Fc)，典型地人免疫球蛋白恒定區的至少一部分。有關進一步的細節，參見Jones等人，1986,Nature[自然]321：522-525；Riechmann等人，1988,Nature[自然]332：323-329；和Presta,1992,Curr.Op.Struct.Biol.[結構生物學的研究現狀]2：593-596。另參見以下評論文章和其中引用的參考文獻：Vaswani和Hamilton,1998,Ann.Allergy,Asthma & Immunol.[過敏、氣喘和免疫學年鑒]1：105-115；Harris,1995,Biochem.Soc.Transactions[生化學會會刊]23：1035-1038；Hurle和Gross,1994,Curr.Op.Biotech.[當前生物技術觀點]5：428-433。
杵：在杵臼結構的上下文中，「杵」係指至少一條胺基酸側鏈，其從第一Fc鏈的表面突出並且因此可定位於第二Fc鏈的介面上的互補性「臼」中，從而穩定該Fc異二聚體，並且從而例如相比於Fc同型二聚體，更有利於Fc異二聚體形成。
杵臼(Knobs and holes)(或杵臼結構(knobs-into-holes))：Fc異源二聚化的一個機制在本領域中通常稱為「杵臼(knobs and holes)」、或「杵臼結構(knob-in-holes)」、或「杵臼結構(knobs-into-holes)」。該等術語係指產生空間影響以有利於Fc異二聚體(相比於Fc同型二聚體)形成的胺基酸突變，如以下所描述，例如Ridgway等人，1996,Protein Engineering[蛋白質工程]9(7)：617；Atwell等人，1997,J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]270：26；和美國專利案號8,216,805。杵臼結構突變可以與其他策略組合以改善異源二聚化，例如，如在5.4.1.6節中所述。
單株抗體：如本文所用的，該術語「單株抗體」係指衍生自相同遺傳來源的多肽，包括抗體、抗體片段、分子(包括MBM)等。
單價：如本文所用的，在抗原結合分子的上下文中，該術語「單價」係指具有單一抗原結合結構域的抗原結合分子。
多特異性結合分子：該術語「多特異性結合分子」或「MBM」係指特異性結合至至少兩個抗原並包含兩個或更多個抗原結合結構域的分子。該抗原結合結構域可以各自獨立地是抗體片段(例如，scFv、Fab、奈米抗體)、配位基、或非抗體衍生的結合物(例如，纖網蛋白、Fynomer、DARPin)。
突變或修飾：在多肽的一級胺基酸序列的上下文中，該術語「修飾」和「突變」係指相對於參考多肽多肽序列中的胺基酸取代、插入、和/或缺失。另外，該術語「修飾」進一步涵蓋對胺基酸殘基的改變，例如藉由化學軛合(例如，藥物或聚乙二醇部分的化學軛合)或翻譯後修飾(例如，糖基化)。
核酸：該術語「核酸」在本文中可與術語「多核苷酸」互換使用，並且是指呈單股或雙股形式的去氧核糖核苷酸或核糖核苷酸及其聚合物。該術語涵蓋含有已知核苷酸類似物或經修飾的骨架殘基或連接的核酸，該核酸係合成的、天然存在的和非天然存在的，具有與參考核酸類似的結合特性，並且以類似於參考核苷酸的方式代謝。此類類似物的實例包括但不限於硫代磷酸酯、胺基磷酸酯、甲基膦酸酯、手性-甲基膦酸酯、2-O-甲基核糖核苷酸、和肽-核酸(PNA)。
除非另外說明，否則特定的核酸序列還隱含地涵蓋其經保守修飾的變體(例如，簡並密碼子取代)和互補序列以及明確指示的序列。具體地，如下文詳述，簡並密碼子取代可以藉由產生如下序列而實現，在該等序列中，一個或多個所選擇的(或全部)密碼子的第三位被混合鹼基和/或去氧肌苷殘基取代(Batzer等人，1991,Nucleic Acid Res.[核酸研究]19：5081；Ohtsuka等人，1985,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]260：2605-2608；和Rossolini等人，1994,Mol.Cell.Probes[分子與細胞探針]8：91-98)。
可操作地連接：該術語「可操作地連接」係指兩個或更多個肽或多肽結構域或核酸(例如，DNA)區段之間的功能性關係。在融合蛋白或其他 多肽的上下文中，該術語「可操作地連接」意指連接兩個或更多個胺基酸區段從而產生功能多肽。例如，在抗原結合分子的上下文中，單獨的ABM(或ABM的鏈)可以藉由肽連接子序列可以操作地連接。在編碼融合蛋白的核酸，例如抗原結合分子的多肽鏈的上下文中，「可操作地連接」意指連接兩個核酸使得由該兩個核酸編碼的胺基酸序列保持在框內。在轉錄調節的上下文中，該術語係指轉錄調節序列與轉錄序列的功能性關係。例如，如果啟動子或增強子序列在適當的宿主細胞或其他表現系統中刺激或調節編碼序列的轉錄，則該啟動子或增強子序列可操作地連接至編碼序列。
五價：在抗原結合分子(例如，TBM)的上下文中，如本文所用的術語「五價」係指具有五個抗原結合結構域的抗原結合分子。本揭露之五價TBM通常具有(a)各自結合至相同抗原的兩對抗原結合結構域，和結合至第三抗原的單個抗原結合結構域，或者(b)結合至相同抗原的三個抗原結合結構域，和各自結合至單獨抗原的兩個抗原結合結構域。五價TBM的實例示意性地示出於圖1T中。
多肽和蛋白質：術語「多肽」和「蛋白質」在本文中可互換使用，係指胺基酸殘基的聚合物。該術語涵蓋胺基酸聚合物，其中一個或多個胺基酸殘基係相應天然存在的胺基酸的人工化學模擬物，以及適用於天然存在的胺基酸聚合物和非天然存在的胺基酸聚合物。另外，該術語涵蓋例如藉由一個或多個側鏈或末端的合成衍生化、糖基化、聚乙二醇化、循環排列、環化、連接至其他分子的連接子、融合至蛋白質或蛋白質結構域、和添加肽標籤或肽標記來衍生化的胺基酸聚合物。
識別：如本文所用的，該術語「識別」係指發現並與其表位相互作用(例如，結合)的ABM。
序列同一性：兩個相似的序列(例如，抗體可變結構域)的序列同一性可以藉由演算法，例如以下的演算法測量：Smith,T.F.和Waterman,M.S.(1981)「Comparison Of Biosequences[生物序列比對]，」Adv.Appl.Math.[應用數學進展]2：482[局部同源性演算法(local homology algorithm)]；Needleman,S.B.和Wunsch,CD.(1970)「A General Method Applicable To The Search For Similarities In The Amino Acid Sequence Of Two Proteins[適用於尋找兩種蛋白質胺基酸序列相似性的通用方法]，」J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]48：443[同源比對演算法(homology alignment algorithm)],Pearson,W.R.和Lipman,D.J.(1988)「Improved Tools For Biological Sequence Comparison[改進的生物序列比對工具]，」Proc.Natl.Acad.Sci.(U.S.A.)[國家科學院院刊](美國)85：2444[尋找相似性方法(search for similarity method)]；或Altschul,S.F.等人，1990,「Basic Local Alignment Search Tool[基本局部比對搜索工具]，」J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]215：403-10,「BLAST」演算法(the“BLAST”algorithm)，參見blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi。當使用任一前述演算法時，使用了預設參數(針對窗口長度、空位罰分等)。在一個實施方式中，使用BLAST演算法，使用預設參數，計算序列同一性。
視需要，在長度為至少約50個核苷酸(或在肽或多肽的情況下，至少約10個胺基酸)的區域上測定同一性，或者在一些情況下，在長度為100至500個或1000個或更多個核苷酸(或者20、50、200或更多個胺基酸)的區域上測定同一性。在一些實施方式中，同一性係在確定的結構域(例如，抗體的VH或VL)上測定的。除非另有說明，兩個序列之間的序列同一性在該兩個序列中更短一個的整個長度上測定。
單鏈Fab或scFab：該術語「單鏈Fab」和「scFab」意指多肽，該多肽包含抗體重鏈可變結構域(VH)、抗體恒定結構域1(CH1)、抗體輕鏈可 變結構域(VL)、抗體輕鏈恒定結構域(CL)和連接子，使得該VH和VL與彼此締合並且該CH1和CL與彼此締合。在一些實施方式中，抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CH1-連接子-VL-CL，b)VL-CL-連接子-VH-CH1，c)VH-CL-連接子-VL-CH1或d)VL-CH1-連接子-VH-CL。該連接子可以是具有至少30個胺基酸，例如32個與50個之間的胺基酸的多肽。該單鏈Fab藉由CL結構域和CH1結構域之間的天然二硫鍵穩定化。
單鏈Fv或scFv：如本文所用的術語「單鏈Fv」或「scFv」係指包含抗體的VH和VL結構域的抗體片段，其中該等結構域存在於單一多肽鏈中。該Fv多肽可以進一步在VH與VL結構域之間包含多肽連接子，該多肽連接子使scFv能夠形成抗原結合所希望的結構。關於scFv的綜述，參見Plückthun，於The Pharmacology of Monoclonal Antibodies[單株抗體藥理學]，第113卷，Rosenburg和Moore編，1994,Springer-Verlag[施普林格]，紐約，第269頁-第315頁。
特異性(或選擇性)結合：該術語「特異性(或選擇性)結合」至抗原或表位係指一種結合反應，其決定了在蛋白質與其他生物製品的異質群體中同源抗原或表位的存在。該結合反應可以但不需要由抗體或抗體片段介導，但也可以由例如5.3節中所述之任何類型的ABM(如配位基、DARPin等)介導。ABM典型地還具有小於5 x 10 -2 M、小於10 -2 M、小於5 x 10 -3 M、小於I0 -3 M、小於5 x 10 -4 M、小於10 -4 M、小於5 x 10 -5 M、小於10 -5 M、小於5 x 10 -6 M、小於10 -6 M、小於5 x 10 -7 M、小於10 -7 M、小於5 x 10 -8 M、小於10 -8 M、小於5 x 10 -9 M、或小於10 -9 M的離解速率常數(KD)(koff/kon)，並且以比其結合至非特異性抗原(例如，HSA)的親和力大至少兩倍的親和力結合至靶抗原。結合親和力可以使用Biacore、SPR或BLI測定來測量。該術語「特異性結合」不排除跨物種反應性。例如，「特異性結合」至來自一個物種的抗原的抗原結合模組(例如，抗體的抗原結合片段)還可以「特異性結合」至一個或多個其他的物種中的該抗原。 因此，此類跨物種反應性本身不改變抗原結合模組作為「特異性」結合物的分類。在某些實施方式中，特異性結合至人抗原的抗原結合模組與一個或多個非人哺乳動物物種，例如，靈長類動物物種(包括但不限於食蟹猴(Macaca fascicularis )、普通獼猴(Macaca mulatta )、和豚尾猴(Macaca nemestrina )中的一個或多個)或齧齒動物物種(例如，小鼠(Mus musculus ))具有跨物種反應性。在其他實施方式中，該抗原結合模組不具有跨物種反應性。
受試者：該術語「受試者」包括人和非人動物。非人類動物包括所有脊椎動物，例如哺乳動物和非哺乳動物，諸如非人類靈長類、綿羊、狗、牛、雞、兩棲動物和爬行動物。除非指出時，否則該術語「患者」或「受試者」在本文中可互換地使用。
VH結構域的串聯：如本文所用的，該術語「VH結構域(或VH)的串聯」係指一串VH結構域，其由抗體的許多相同的VH結構域組成。VH結構域中的每一個(除了串聯的末端的最後一個)的C-末端均連接至(使用或不使用連接子)另一個VH結構域的N-末端。串聯具有至少2個VH結構域，並且在具體的實施方式中，抗原結合分子具有3、4、5、6、7、8、9、或10個VH結構域。VH的串聯可以藉由使用重組方法(使用或不使用連接子)以所希望的順序連接每個VH結構域的編碼核酸(這確保了該核酸被製備為單一多肽鏈)來產生(例如，如5.4.3節所述)。該串聯中的第一VH結構域的N-末端被定義為該串聯的N-末端，而該串聯中的最後的VH結構域的C-末端被定義為該串聯的C-末端。
VL結構域的串聯：如本文所用的，該術語「VL結構域(或VL)的串聯」係指一串VL結構域，其由抗體的許多相同的VL結構域組成。VL結構域中的每一個(除了串聯的末端的最後一個)的C-末端連接至(使用或不使用連接子)另一個VL的N-末端。串聯具有至少2個VL結構域，並且在具體的實施方式中，抗原結合分子具有3、4、5、6、7、8、9、或10個VL結構域。VL的串 聯可以藉由使用重組方法(使用或不使用連接子)以所希望的順序連接每個VL結構域的編碼核酸(這確保了該核酸被製備為單一多肽鏈)來產生(例如，如5.4.3節所述)。該串聯中的第一VL結構域的N-末端被定義為該串聯的N-末端，而該串聯中的最後的VL結構域的C-末端被定義為該串聯的C-末端。
靶抗原：如本文所用的，「靶抗原」意指非共價地、可逆地並且特異性地被抗原結合結構域結合的分子。
四價：在抗原結合分子(例如，BBM或TBM)的上下文中，如本文所用的術語「四價」係指具有四個抗原結合結構域的抗原結合分子。本揭露之四價TBM通常具有結合至相同抗原(例如CD19)的兩個抗原結合結構域和各自結合至單獨抗原(例如TCR複合物的組分和CD2或TAA)的兩個抗原結合結構域。四價BBM的實例示意性地示出於圖1AA-1AH中，並且四價TBM的實例示意性地示出於圖2Q-2S中。
治療有效量：「治療有效量」係指在所需的劑量和持續時間下有效實現所希望治療結果的量。
治療(Treat、Treatment和Treating)：如本文所用的，該術語「治療(treat、treatment和treating)」係指由投與一種或多種本揭露之CD19結合分子導致的疾病或障礙(例如增殖性障礙)的進展、嚴重性和/或持續時間的減少或緩解，或者障礙的一種或多種症狀(例如，一種或多種可辨別的症狀)的緩解。在一些實施方式中，該術語「治療(treat、treatment和treating)」係指改善障礙的至少一種可測量的物理參數，如腫瘤的生長，這不一定係患者可辨別的。在其他實施方式中，該術語「治療(treat、treatment和treating)」係指藉由例如穩定可辨別的症狀來物理地，藉由例如穩定物理參數來生理地，或藉由兩者，抑制障礙的進展。在一些實施方式中，該術語「治療(treat、treatment和treating)」可以是指減少或穩定腫瘤大小或癌細胞計數。
三特異性結合分子：該術語「三特異性結合分子」或「TBM」係指特異性結合至三個抗原並包含三個或更多個抗原結合結構域的分子。本揭露之TBM包含至少一個對CD19具有特異性的抗原結合結構域、至少一個對TCR複合物的組分具有特異性的抗原結合結構域、以及至少一個對CD2或TAA具有特異性的抗原結合結構域。該抗原結合結構域可以各自獨立地是抗體片段(例如，scFv、Fab、奈米抗體)、配位基、或非抗體衍生的結合物(例如，纖網蛋白、Fynomer、DARPin)。代表性TBM示出在圖1中。TBM可以包含一個、兩個、三個、四個或甚至更多個多肽鏈。例如，圖1M中所示的TBM包含單一多肽鏈，該單一多肽鏈包含藉由ABM連接子連接的三個scFv和一個單一多肽鏈。圖1K中所示的TBM包含兩條多狀鏈，該多肽鏈包含三個藉由Fc結構域等連接的scFv。圖1J中所示的TBM包含三條多肽鏈，形成scFv、配位基和藉由Fc結構域等連接的Fab。圖1C中所示的TBM包含四條多肽鏈，形成藉由Fc結構域等連接的三個Fab。圖1U中所示的TBM包含6條多肽鏈，形成藉由Fc結構域等連接的四個Fab和兩個scFv。
三價：在抗原結合分子(例如，MBM)的上下文中，如本文所用的術語「三價」係指具有三個抗原結合結構域的抗原結合分子。本揭露之MBM典型地是雙特異性或三特異性的。雙特異性BBM特異性結合至CD19和TCR複合物的組分。三特異性TBM特異性結合至CD19、TCR複合物的組分、以及CD2或TAA。因此，三價BBM具有三個抗原結合結構域，其中兩個結合至CD19並且其中一個結合至TCR的組分，或者反之亦然。TBM具有三個各自結合至不同抗原的抗原結合結構域。三價BBM的實例示意性地示出於圖1G-1Z中，並且三價TBM的實例示意性地示出於圖2B-2V中。
腫瘤：該術語「腫瘤」可與本文中的術語「癌症」互換使用，例如，兩個術語均涵蓋實體和液體瘤，例如彌漫型或循環腫瘤。如本文所用的，術語「癌症」或「腫瘤」包括惡化前以及惡性癌症和腫瘤。
腫瘤相關抗原：該術語「腫瘤相關抗原」或「TAA」係指在癌細胞表面上完全或作為片段(例如，MHC/肽)表現的分子(典型地是蛋白質、碳水化合物、脂質或它們的一些組合)，並且其可用於優先將藥理學藥劑靶向癌細胞。在一些實施方式中，TAA係由正常細胞和癌細胞兩者表現的標記物，例如譜系標記物，例如B細胞上的CD19。在一些實施方式中，TAA係與正常細胞相比在癌細胞中過表現的細胞表面分子，例如，與正常細胞相比，1倍過表現、2倍過表現、3倍過表現或更多。在一些實施方式中，TAA係在癌細胞中不適當合成的細胞表面分子，例如，與正常細胞上表現的分子相比含有缺失、添加或突變的分子。在一些實施方式中，TAA將僅在癌細胞的細胞表面上完全或作為片段(例如，MHC/肽)表現，並且不在正常細胞的表面上合成或表現。因此，該術語「TAA」涵蓋對癌細胞特異的抗原，有時稱為腫瘤特異性抗原(「TSA」)。儘管CD19具有腫瘤相關抗原的特徵，但術語「腫瘤相關抗原」和「TAA」在整個揭露中用於指除了CD19之外的分子。
可變區：如本文所用的「可變區」或「可變結構域」意指免疫球蛋白的區，其包含基本上由Vκ、Vλ、和/或VH基因(該等基因分別組成了κ、λ、和重鏈免疫球蛋白遺傳基因座)中的任一種編碼的一個或多個Ig結構域並且含有賦予抗原特異性的CDR。「可以變重結構域」可以與「可以變輕結構域」配對以形成抗原結合結構域(「ABD」)或抗原結合模組(「ABM」)。另外，每個可變結構域包含三個高變區(「互補決定區」、「CDR」)(對於可變重結構域為CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3並且對於可變輕結構域為CDR-L1、CDR-L2、 CDR-L3)和四個框架(FR)區，其從胺基末端至羧基末端以如下順序排列：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。
載體：該術語「載體」旨在係指能夠轉運與其連接的另一多核苷酸的多核苷酸分子。一種類型的載體係「質體」，其係指環狀雙股DNA環，其中可以連接附加的DNA區段。另一種類型的載體係病毒載體，其中附加的DNA區段可以連接到病毒基因組中。某些載體能夠在引入它們的宿主細胞中自主複製(例如，具有細菌複製起點的細菌載體和附加型哺乳動物載體)。其他載體(例如，非附加型哺乳動物載體)可以在引入宿主細胞中後整合到宿主細胞的基因組中，從而與宿主基因組一起複製。此外，某些載體能夠指導與它們可操作地連接的基因的表現。這種載體在本文中稱為「重組表現載體」(或簡稱為「表現載體」)。通常，在重組DNA技術中有用的表現載體通常呈質體的形式。在本說明書中，「質體」和「載體」可以互換使用，因為質體係最常用的載體形式。然而，本揭露旨在包括這種其他形式的表現載體如病毒載體(例如，複製缺陷型逆轉錄病毒、腺病毒和腺相關病毒)，它們具有相同的功能。
VH：該術語「VH」係指抗體的免疫球蛋白重鏈(包括Fv、scFv、dsFv或Fab的重鏈)的可變區。
VL：該術語「VL」係指免疫球蛋白輕鏈(包括Fv、scFv、dsFv或Fab的輕鏈)的可變區。
VH-VL或VH-VL對：在參考VH-VL對時，無論位於相同的多肽鏈或不同的多肽鏈上，該術語「VH-VL」和「VH-VL對」係為了方便起見使用，並且不旨在傳達任何特定的方向，除非上下文中做了另外的說明。因此，包含「VH-VL」或「VH-VL對」的scFv可以具有處於任何方向的VH和VL結構域，例如，VH位於VL的N-末端或VL位於VH的N-末端。
5.2.CD19結合分子
在一個方面，本揭露提供了CD19結合分子，其包括結合至人CD19的單特異性和多特異性分子。在一些實施方式中，該CD19結合分子係單特異性結合分子。例如，單特異性結合分子可以是抗體或其抗原結合片段(例如，抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、或單一結構域抗體(SDAB))。在其他實施方式中，該CD19結合分子係多特異性(例如，雙特異性)CD19結合分子(例如，雙特異性抗體)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子係嵌合或人源化單株抗體。可以工程化嵌合和/或人源化抗體以使人患者對非人類受試者中產生的抗體或衍生自非人類抗體基因表現的抗體的免疫響應最小化。嵌合抗體包含非人類動物抗體可變區和人抗體恒定區。此類抗體保留了原始單株抗體的表位結合特異性，但當向人投與時可以具有較低的免疫原性，並且因此更可能被患者耐受。例如，小鼠抗體(例如小鼠單株抗體)的一條或多條輕鏈的可變區中的一個或全部(例如，一個、兩個或三個)和/或一條或多條重鏈的可變區中的一個或全部(例如，一個、兩個或三個)各自都可以連接到人恒定區，例如但不限於IgG1人恒定區。嵌合單株抗體可以藉由已知的重組DNA技術產生。例如，編碼非人類抗體分子的恒定區的基因可以用編碼人恒定區的基因取代(參見Robinson等人，PCT專利公開PCT/US86/02269；Akira等人，歐洲專利申請184,187；或Taniguchi,M.，歐洲專利申請171,496)。另外，可以用於產生嵌合抗體的其他合適技術描述於例如美國專利案號4,816,567、4,978,775；4,975,369；和4,816,397。
本揭露之嵌合或人源化抗體及其抗原結合片段可以基於鼠單株抗體的序列來製備。編碼重鏈和輕鏈免疫球蛋白的DNA可以從感興趣的鼠雜交瘤中獲得，並使用標準分子生物學技術工程化以含有非鼠(例如人)免疫球蛋白序列。例如，為了產生嵌合抗體，可以使用已知之方法將鼠可變區與人恒定區連接(參見例如Cabilly等人的美國專利案號4,816,567)。為產生人源化抗體， 可以使用已知之方法將鼠CDR區域插入人框架中。參見例如，美國專利案號5,225,539(屬於Winter)和美國專利案號5,530,101；5,585,089；5,693,762和6180370(屬於Queen等人)。
可以使用多種已知的技術產生人源化抗體，該等技術包括但不限於CDR移植(參見例如，歐洲專利案號EP 239,400；國際公開案號WO 91/09967；和美國專利案號5,225,539、5,530,101、和5,585,089)，飾面或表面重修(參見例如，歐洲專利案號EP 592,106和EP 519,596；Padlan,1991,Molecular Immunology[分子免疫學]，28(4/5)：489-498；Studnicka等人，1994,Protein Engineering[蛋白質工程]，7(6)：805-814；以及Roguska等人，1994,PNAS,91：969-973)、鏈改組(參見例如，美國專利案號5,565,332)、和揭露於例如以下中的技術：美國專利申請公開案號US 2005/0042664，美國專利申請公開案號US2005/0048617，美國專利案號6,407,213，美國專利案號5,766,886，國際公開案號WO 9317105，Tan等人，J.Immunol.[免疫學雜誌]，169：1119-25(2002)，Caldas等人，Protein Eng.[蛋白質工程]，13(5)：353-60(2000)，Morea等人，Methods[方法]，20(3)：267-79(2000)，Baca等人，J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]，272(16)：10678-84(1997)，Roguska等人，Protein Eng.[蛋白質工程]，9(10)：895-904(1996)，Couto等人，Cancer Res.[癌症研究]，55(23增刊)：5973s-5977s(1995)，Couto等人，Cancer Res.[癌症研究]，55(8)：1717-22(1995)，Sandhu J S,Gene[基因]，150(2)：409-10(1994)，以及Pedersen等人，J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]，235(3)：959-73(1994)。通常，框架區中的框架殘基將被來自CDR供體抗體的相應殘基取代，以改變例如改善抗原結合。該等框架取代(例如，保守性取代)係藉由已知之方法鑒定的，例如，藉由對CDR和框架殘基的相互作用建模以鑒定對抗原結合和序列比較而言重要的框架殘基，從而鑒定特定位置處的異常框架殘基。(參見例如，Queen等人，美國專利案號5,585,089；和Riechmann等人，1988,Nature[自然]，332：323)。
如本文提供的，人源化抗體或抗體片段可以包含來自非人免疫球蛋白分子的一個或多個CDR和框架區，其中構成框架的胺基酸殘基完全或大部分衍生自人種系。用於將抗體或抗體片段人源化的多種技術係熟知的，並且基本上可以按照Winter和同事之方法進行(Jones等人，Nature[自然]，321：522-525(1986)；Riechmann等人，Nattre[自然]，332：323-327(1988)；Verhoeyen等人，Science[科學]，239：1534-1536(1988))，該方法係藉由用齧齒動物CDR或CDR序列取代人抗體的相應序列，即CDR移植(EP 239,400；PCT公開案號WO 91/09967；和美國專利案號4,816,567、6,331,415、5,225,539、5,530,101、5,585,089、6,548,640)。在此類人源化抗體和抗體片段中，實質上少於完整的人可變結構域已被來自非人物種的相應序列取代。人源化抗體通常是人抗體，其中一些CDR殘基和可能一些框架(FR)殘基被來自齧齒動物抗體中的類似部位的殘基取代。抗體和抗體片段的人源化也可以藉由飾面或重修來實現(EP 592,106；EP 519,596；Padlan,1991,Molecular Immunology[分子免疫學]，28(4/5)：489-498；Studnicka等人，Protein Engineering[蛋白質工程]，7(6)：805-814(1994)；和Roguska等人，PNAS,91：969-973(1994))或鏈改組(美國專利案號5,565,332)。
用於製備人源化抗體的人可變結構域(輕鏈和重鏈兩者)的選擇係降低抗原性。根據所謂的「最佳擬合」方法，針對已知的人可變結構域序列的整個文庫篩選齧齒動物抗體的可變結構域的序列。然後接受與齧齒動物的序列最接近的人序列作為人源化抗體的人框架(FR)(Sims等人，J.Immunol.[免疫學雜誌]，151：2296(1993)；Chothia等人，J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]，196：901(1987))。另一種方法採用衍生自具有特定亞組輕鏈或重鏈的全部人抗體的共有序列的特定框架。相同的框架可以用於幾種不同的人源化抗體(參見例如Nicholson等人Mol.Immun.[分子免疫學]34(16-17)：1157-1165(1997)；Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sei.USA[美國國家科學院院刊]，89：4285(1992)；Presta等人， J.Immunol.[免疫學雜誌]，151：2623(1993)。在一些實施方式中，重鏈可變區的框架區(例如全部四個框架區)衍生自VH4_4-59種系序列。在一個實施方式中，該框架區可以包含一個、兩個、三個、四個或五個修飾，例如，取代，例如保守性取代，例如來自相應鼠序列處的胺基酸的取代。在一個實施方式中，輕鏈可變區的框架區(例如全部四個框架區)衍生自VK3_1.25種系序列。在一個實施方式中，該框架區可以包含一個、兩個、三個、四個或五個修飾，例如，取代，例如保守性取代，例如來自相應鼠序列處的胺基酸的取代。
在某些實施方式中，該CD19結合分子包含來自特定的種系重鏈免疫球蛋白基因的重鏈可變區和/或來自特定的種系輕鏈免疫球蛋白基因的輕鏈可變區。例如，此類抗體可以包含人抗體或由其組成，該人抗體包含作為特定種系序列「的產物」或「衍生自」特定種系序列的重鏈或輕鏈可變區。藉由比較人抗體的胺基酸序列與人種系免疫球蛋白的胺基酸序列並選擇在序列中與人抗體序列最接近(即，最大的同一性%)的人種系免疫球蛋白序列，可以照此來鑒定人抗體係人類種系免疫球蛋白序列的「產物」或「衍生自」人種系免疫球蛋白序列(使用本文所概述之方法)。作為特定人種系免疫球蛋白序列的「產物」或「衍生自」人種系免疫球蛋白序列的人抗體可以由於例如天然存在的體細胞突變或有意引入定點突變而含有與種系序列相比的胺基酸差異。然而，人源化抗體通常與由人種系免疫球蛋白基因編碼的胺基酸序列在胺基酸序列上至少90%同一並且含有如下胺基酸殘基，當與其他物種的種系免疫球蛋白胺基酸序列(例如，鼠種系序列)比較時，該胺基酸殘基將該抗體鑒定為衍生自人序列。在某些情況下，人源化抗體的胺基酸序列可以與由種系免疫球蛋白基因編碼的胺基酸序列至少95%、96%、97%、98%或99%或甚至至少96%、97%、98%或99%同一的。典型地，衍生自特定人種系序列的人源化抗體將展示出與由人種系免疫球蛋白基因編碼的胺基酸序列具有不大於10-20個胺基酸的差異(在引入本文 的任何偏移(skew)、pI和消融(ablation)變體之前；即，在引入本揭露之變體之前，變體的數量通常是低的)。在某些情況下，人源化抗體可以展示出與種系免疫球蛋白基因編碼的胺基酸序列具有不大於5個，或甚至不大於4、3、2、或1個胺基酸的差異(同樣，在引入本文的任何偏移、pI和消融變體之前；即，在引入本揭露之變體之前，變體的數量通常是低的)。
在一個實施方式中，該親本抗體已親和力成熟。可以使用基於結構之方法用於人源化和親和力成熟，例如，如在USSN 11/004,590中所述。可以使用基於選擇之方法來使抗體可變區人源化和/或親和力成熟，包括但不限於以下中描述之方法：Wu等人，1999,J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]294：151-162；Baca等人，1997,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]272(16)：10678-10684；Rosok等人，1996,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]271(37)：22611-22618；Rader等人，1998,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]95：8910-8915；Krauss等人，2003,Protein Engineering[蛋白質工程]16(10)：753-759。其他的人源化方法可以關於僅部分CDR的移植，包括但不限於以下中描述之方法：USSN 09/810,510；Tan等人，2002,J.Immunol.[免疫學雜誌]169：1119-1125；De Pascalis等人，2002,J.Immunol.[免疫學雜誌]169：3076-3084。
在一些實施方式中，該CD19結合分子包含ABM(其為Fab)。Fab結構域可以藉由免疫球蛋白分子的蛋白水解切割，使用酶例如木瓜蛋白酶，或藉由重組表現來產生。Fab結構域典型地包含附接至VH結構域的CH1結構域，該CH1結構域與附接至VL結構域的CL結構域配對。在野生型免疫球蛋白中，該VH結構域與該VL結構域配對以構成Fv區，並且該CH1結構域與該CL結構域配對以進一步穩定結合模組。兩個恒定結構域之間的二硫鍵可以進一步穩定Fab結構域。
在一些實施方式中，該CD19結合分子包含ABM(其為scFab)。在實施方式中，scFab片段中的抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CH1-連接子-VL-CL，或b)VL-CL-連接子-VH-CH1。在一些情況下，使用了VL-CL-連接子-VH-CH1。
在另一個實施方式中，scFab片段中的抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CL-連接子-VL-CH1或b)VL-CH1-連接子-VH-CL。
視需要，在scFab片段中，除了CL結構域與CH1結構域之間的天然二硫鍵之外，抗體重鏈可變結構域(VH)和抗體輕鏈可變結構域(VL)也藉由在以下位置之間引入二硫鍵而被二硫鍵穩定：i)重鏈可變結構域位置44與輕鏈可變結構域位置100，ii)重鏈可變結構域位置105與輕鏈可變結構域位置43，或iii)重鏈可變結構域位置101與輕鏈可變結構域位置100(根據卡巴特的EU指數編號)。
scFab片段的此類進一步的二硫鍵穩定化藉由在單鏈Fab片段的可變結構域VH和VL之間引入二硫鍵來實現。引入非天然二硫橋以穩定單鏈Fv的技術描述於以下文獻中：例如，WO 94/029350,Rajagopal等人，1997,Prot.Engin.[蛋白質工程]10：1453-59；Kobayashi等人，1998,Nuclear Medicine & Biology[核醫學和生物學]，25：387-393；和Schmidt，等人，1999,Oncogene[致癌基因]18：1711-1721。在一個實施方式中，scFab片段的可變結構域之間的視需要的二硫鍵在重鏈可變結構域位置44和輕鏈可變結構域位置100之間。在一個實施方式中，scFab片段的可變結構域之間的視需要的二硫鍵在重鏈可變結構域位置105和輕鏈可變結構域位置43之間(根據卡巴特的EU索引進行編號)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子包含ABM(其為scFv)。單鏈Fv抗體片段包含單一多肽鏈中的抗體的VH和VL結構域，能夠作為單鏈多肽 進行表現，並且保留了衍生其的完整抗體的特異性。通常，該scFv多肽進一步包含VH和VL結構域之間的多肽連接子，該連接子能夠使scFv形成所希望的結構用於靶結合。適合用於連接scFV的VH和VL鏈的連接子的實例係在5.4.3節中鑒定的ABM連接子，例如指定為L1至L58的任何連接子。
除非另有說明，否則如本文所用的，scFv可以例如相對於多肽的N-末端和C-末端以任一順序具有VL和VH可變區，即該scFv可以包含VL-連接子-VH或者可以包含VH-連接子-VL。
為產生scFv編碼核酸，該VH和VL編碼DNA片段可以操作地連接至編碼連接子的另一片段，例如編碼5.4.3節中所述之任何連接子(如胺基酸序列(Gly4~ Ser)3(SEQ ID NO：53))，使得該VH和VL序列可以作為連續單鏈蛋白質(其VL和VH區藉由柔性連接子連接)進行表現(參見例如，Bird等人，1988,Science[科學]242：423-426；Huston等人，1988,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]85：5879-5883；McCafferty等人，1990,Nature[自然]348：552-554)。
CD19結合分子還可以包含ABM(其係Fv、dsFv、(Fab’)2、單一結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域(還稱為奈米抗體))。
CD19結合分子可以包含由單一VH或VL結構域構成的單一結構域抗體，該單一VH或VL結構域表現出對CD19的充分親和力。在實施方式中，該單一結構域抗體係駱駝科動物VHH結構域(參見例如，Riechmann,1999,Journal of Immunological Methods[免疫學方法雜誌]231：25-38；WO 94/04678)。
表1A和1B(統稱為「表1」)列出了可以包括在CD19結合分子中的示例性CD19結合序列的序列。表1A中列出的序列基於CD19抗體NEG258。
Figure 109116556-A0202-12-0044-1
Figure 109116556-A0202-12-0045-2
在一些實施方式中，CD19結合分子包含如在表1A中所列出的NEG258的CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列。該CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列可以如由卡巴特(分別為SEQ ID NO：17-19和4-6)、喬西亞(分別為SEQ ID NO：20-22和7-9)或IMGT(分別為SEQ ID NO：23-25和10-12)、或組合的喬西亞和卡巴特CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列(分別為SEQ ID NO：14-16和1-3)定義。該CD19結合分子還可以包含如在表1A中所列出的抗CD19抗體NEG258的輕鏈可以變序列(SEQ ID NO：26)和/或重鏈可以變序列(SEQ ID NO：13)。
[表1B]中列出的序列基於CD19抗體NEG218。
Figure 109116556-A0202-12-0046-2922
Figure 109116556-A0202-12-0047-4
在一些實施方式中，CD19結合分子包含如在表1B中所列出的NEG218的CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列。該CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列可以如由卡巴特(分別為SEQ ID NO：43-45和30-32)、喬西亞(分別為SEQ ID NO：46-48和33-35)或IMGT(分別為SEQ ID NO：49-51和36-38)、或組合的喬西亞和卡巴特CDR-L1、CDR-L2、CDR-L3、CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列(分別為SEQ ID NO：40-42和27-29)定義。該CD19結合分子還可以包含如在表1B中所列出的抗CD19抗體NEG218的輕鏈可以變序列(SEQ ID NO：52)和/或重鏈可以變序列(SEQ ID NO：39)。
其他CD19結合分子包括已突變的胺基酸，但其CDR區與表1中所述之CDR序列仍然具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。在一些實施方式中，此類CD19結合分子包括突變型胺基酸序列，其中 當與表1中所述之CDR序列相比時，CDR區中不超過1、2、3、4或5個胺基酸已突變。
其他的CD19結合分子包括VH和/或VL結構域，該結構域包含與表1中所述之VH和/或VL序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列。在一些實施方式中，CD19結合分子包括VH和/或VL結構域，其中當與表1中所述之序列中所描述的VH和/或VL結構域相比時，不超過1、2、3、4或5個胺基酸已突變，同時保留了基本上相同的治療活性。
該CD19結合分子可以融合或化學軛合(包括共價和非共價軛合兩者)至異源蛋白質或多肽(或其片段，例如至至少10、至少20、至少30、至少40、至少50、至少60、至少70、至少80、至少90或至少100個胺基酸的多肽)上。例如，CD19結合分子可以直接或間接融合至可以檢測的蛋白質，例如，酶或螢光蛋白如在5.13節中所述之那些上。用於融合或軛合蛋白質、多肽、或肽至抗體或抗體片段上之方法係已知的並且可以用於融合或軛合蛋白質或多肽至本揭露之CD19結合分子上。參見例如，美國專利案號5,336,603、5,622,929、5,359,046、5,349,053、5,447,851、和5,112,946；歐洲專利案號EP 307,434和EP 367,166；國際公開案號WO 96/04388和WO 91/06570；Ashkenazi等人，1991,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]88：10535-10539；Zheng等人，1995,J.Immunol.[免疫學雜誌]154：5590-5600；和Vil等人，1992,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]89：11337-11341。
可以藉由基因改組、模體改組、外顯子改組和/或密碼子改組(統稱為「DNA改組」)的技術生成另外的CD19結合分子。DNA改組可以用來改變本揭露之分子或其片段的活性(例如，具有更高親和力和更低解離速率的分子或其片段)。通常參見，美國專利案號5,605,793、5,811,238、5,830,721、5,834,252、和5,837,458；Patten等人，1997,Curr.Opinion Biotechnol.[當前生物技術觀點] 8：724-33；Harayama,1998,Trends Biotechnol.[生物技術趨勢]16(2)：76-82；Hansson等人，1999,J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]287：265-76；以及Lorenzo和Blasco,1998,Biotechniques[生物技術]24(2)：308-313。可以藉由在重組之前借助易錯PCR、隨機核苷酸插入或其他方法進行隨機誘變，改變本文所述之CD19結合分子或其片段。編碼本文所述之CD19結合分子的片段的多核苷酸可以與一個或多個異源分子的一個或多個組分、模體、段、部分、結構域、片段等重組。
此外，CD19結合分子可以與標記物序列(如肽)融合以促進純化。在一些實施方式中，標記物胺基酸序列係六組胺酸肽(SEQ ID NO：54)，如pQE載體中提供的標記(凱傑公司(QIAGEN,Inc.)，伊頓大街(Eton Avenue)9259號，查茨沃思(Chatsworth)，加利福尼亞州，91311)等，其中許多係商購可得的。如Gentz等人，1989Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]86：821-824中所述，例如六組胺酸(SEQ ID NO：54)為融合蛋白的純化提供了方便。可用於純化的其他肽標籤包括但不限於對應於源自流感血凝素蛋白的表位(Wilson等人，1984 Cell[細胞]37：767)的血凝素(「HA」)標籤和「旗幟(flag)」標籤。
5.3.多特異性結合分子的抗原結合模組
典型地，MBM的一個或多個ABD包含基於免疫球蛋白的抗原結合結構域，例如抗體片段或衍生物的序列。該等抗體片段和衍生物典型地包括抗體的CDR並且可以包括更大的片段和其衍生物，例如，Fab、scFab、Fv、和scFv。
基於免疫球蛋白的ABM可以包含對VH和/或VL內的框架殘基的修飾，例如，以改善含有ABM的MBM的特性。例如，可以進行框架修飾以降低MBM的免疫原性。用於進行此類框架修飾的一種方法係將ABM的一個或多個框架殘基「回復突變」為相應的種系序列。可以藉由將框架序列與衍生出該ABM的種系序列進行比較來鑒定此類殘基。為了使框架區序列「匹配」所希望的種 系構型，可以藉由例如定點誘變將殘基「回復突變」成相應的種系序列。具有這種「回復突變的」ABM的MBM旨在為本揭露所涵蓋。
另一種類型的框架修飾包括使框架區內或甚至一個或多個CDR區內的一個或多個殘基突變以去除T細胞表位，從而降低MBM的潛在免疫原性。該方法也稱為「去免疫化」，並在Carr等人的美國專利公開20030153043中進一步詳細描述。
ABM也可以被修飾為具有改變的糖基化，這可以是有用的，例如增加MBM對其一種或多種抗原的親和力。此類碳水化合物修飾可以藉由例如改變ABM序列內的一個或多個糖基化位點來實現。例如，可以進行一個或多個胺基酸取代，這消除了一個或多個可變區框架糖基化位點，從而消除了該位點的糖基化。這種無糖基化可以增加MBM對於抗原的親和力。此種方法描述於例如Co等人的美國專利案號5,714,350和6,350,861中。
5.3.1.基於免疫球蛋白的ABM
5.3.1.1.Fab
在某些方面，ABM係Fab結構域。
Figure 109116556-A0202-12-0050-5
對於本揭露之MBM，有利的是使用Fab異源二聚化策略以允許屬於相同的ABM的Fab結構域的正確締合並且最小化屬於不同ABM的Fab結構域的異常配對。例如，可以使用下表2中所示的Fab異源二聚化策略：
Figure 109116556-A0202-12-0051-6
因此，在某些實施方式中，藉由彼此交換Fab的VL和VH結構域或彼此交換CH1和CL結構域，例如，WO 2009/080251中所述，來促進Fab的兩個多肽之間的正確締合。
還可以藉由在CH1結構域中引入一個或多個胺基酸修飾和在Fab的CL結構域中引入一個或多個胺基酸修飾和/或在VH結構域中引入一個或多個胺基酸修飾和在VL結構域中引入一個或多個胺基酸修飾，來促進正確的Fab配對。被修飾的胺基酸典型地是VH：VL和CH1：CL相互作用的一部分，使得Fab組分優先相互配對，而不是與其他Fab的組分配對。
在一個實施方式中，該一個或多個胺基酸修飾限於可變(VH、VL)和恒定(CH1、CL)結構域的保守框架殘基，如藉由殘基的卡巴特編號所 指示。Almagro,2008,Frontiers In Bioscience[生物科學前沿]13：1619-1633提供了基於卡巴特、喬西亞和IMGT編號方案的框架殘基的定義。
在一個實施方式中，該在VH和CH1和/或VL和CL結構域中引入的修飾係彼此互補的。可以基於空間和疏水性接觸、靜電/電荷相互作用或該多種相互作用的組合來實現重鏈和輕鏈介面的互補性。蛋白質表面之間的互補性在文獻中以如下術語：鎖鑰組合(lock and key fit)、杵臼結構、凸起和空腔、供體和受體等進行了廣泛的描述，其全部暗示了兩個接觸表面之間的結構和化學匹配的本質。
在一個實施方式中，該一個或多個引入的修飾引入了跨越Fab組分的介面的新的氫鍵。在一個實施方式中，該一個或多個引入的修飾引入了跨越Fab組分的介面的新的鹽橋。示例性取代描述於WO 2014/150973和WO 2014/082179中。
在一些實施方式中，該Fab結構域包含在CH1結構域中的192E取代和在CL結構域中的114A和137K取代，其中在CH1和CL結構域之間引入了鹽橋(參見Golay等人，2016,J Immunol[免疫學雜誌]196：3199-211)。
在一些實施方式中，該Fab結構域包含在CH1結構域中的143Q和188V取代和在CL結構域中的113T和176V取代，其作用係交換CH1和CL結構域之間的疏水性和極性接觸區(參見Golay等人，2016,J Immunol[免疫學雜誌]196：3199-211)。
在一些實施方式中，該Fab結構域在VH、CH1、VL、CL結構域的一些或全部中可以包含修飾以引入正交Fab介面，其促進Fab結構域的正確裝配(Lewis等人，2014 Nature Biotechnology[自然生物技術]32：191-198)。在實施方式中，在VH結構域中引入39K、62E修飾，在CH1結構域中引入H172A、F174G修飾，在VL結構域中引入1R、38D、(36F)修飾，並且在CL結構域中引入L135Y、 S176W修飾。在另一個實施方式中，在VH結構域中引入39Y修飾並且在VL結構域中引入38R多飾。
Fab結構域也可以被修飾以用工程化二硫鍵置換天然CH1：CL二硫鍵，從而提高Fab組分配對的效率。例如，可以藉由在CH1結構域中引入126C和在CL結構域中引入121C來引入工程化的二硫鍵(參見Mazor等人，2015,MAbs 7：377-89)。
還可以藉由用促進正確裝配的替代性結構域來置換CH1結構域和CL結構域來修飾Fab結構域。例如，Wu等人，2015,MAbs 7：364-76，描述了用α T細胞受體的恒定結構域置換CH1結構域並且用T細胞受體的β結構域取代CL結構域，並且藉由在VL結構域中引入38D修飾並且在VH結構域中引入39K修飾，將該等結構域置換與VL和VH結構域之間的另外的電荷-電荷相互作用配對。
ABM可以包含單鏈Fab片段，其係由抗體重鏈可變結構域(VH)、抗體恒定結構域1(CH1)、抗體輕鏈可變結構域(VL)、抗體輕鏈恒定結構域(CL)和連接子組成的多肽。在一些實施方式中，抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CH1-連接子-VL-CL，b)VL-CL-連接子-VH-CH1，c)VH-CL-連接子-VL-CH1或d)VL-CH1-連接子-VH-CL。該連接子可以是具有至少30個胺基酸，例如，32個和50個之間的胺基酸的多肽。該單鏈Fab結構域藉由CL結構域與CH1結構域之間的天然二硫鍵穩定化。
在實施方式中，單鏈Fab片段中的抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CH1-連接子-VL-CL，或b)VL-CL-連接子-VH-CH1。在一些情況下，使用了VL-CL-連接子-VH-CH1。
在另一個實施方式中，單鏈Fab片段中的抗體結構域和連接子在N-末端至C-末端的方向上具有以下順序之一：a)VH-CL-連接子-VL-CH1或b)VL-CH1-連接子-VH-CL。
視需要，在單鏈Fab片段中，除了CL結構域與CH1結構域之間的天然二硫鍵之外，抗體重鏈可變結構域(VH)和抗體輕鏈可變結構域(VL)ABM也藉由在以下位置之間引入二硫鍵而被二硫鍵穩定：i)重鏈可變結構域位置44與輕鏈可變結構域位置100，ii)重鏈可變結構域位置105與輕鏈可變結構域位置43，或iii)重鏈可變結構域位置101與輕鏈可變結構域位置100(根據卡巴特的EU指數編號)。
在一個實施方式中，單鏈Fab片段的可變結構域之間的視需要的二硫鍵在重鏈可變結構域位置44與輕鏈可變結構域位置100之間。在一個實施方式中，單鏈Fab片段的可變結構域之間的視需要的二硫鍵在重鏈可變結構域位置105與輕鏈可變結構域位置43之間(根據卡巴特的EU索引進行編號)。
5.3.1.2.scFv
在某些方面，ABM係單鏈Fv或「scFv」。適合用於連接scFV的VH和VL鏈的連接子的實例係在5.4.3節中鑒定的ABM連接子，例如指定為L1至L54的任何連接子。
為了產生編碼scFv的核酸，編碼VH和VL的DNA片段可操作地連接到編碼連接子(例如編碼5.4.3節中所述之任何ABM連接子)的另一個片段(如胺基酸序列(Gly4~ Ser)3(SEQ ID NO：53)
5.3.1.3.其他基於免疫球蛋白的ABM
MBM還可以包含具有免疫球蛋白形式的ABM，該免疫球蛋白形式除了Fab或scFv之外的例如Fv、dsFv、(Fab’)2、單一結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域(還稱為奈米抗體)。
ABM可以是由單一VH或VL結構域構成的單一結構域抗體，該單一VH或VL結構域表現出對靶標的充分的親和力。在實施方式中，該單一結構域抗體係駱駝科動物VHH結構域(參見例如，Riechmann,1999,Journal of Immunological Methods[免疫學方法雜誌]231：25-38；WO 94/04678)。
5.3.2.基於非免疫球蛋白的ABM
在某些實施方式中，MBM包含一個或多個ABM，該ABM衍生自非抗體支架蛋白質(包括但不限於：設計型錨蛋白重複序列蛋白(designed ankyrin repeat protein，DARPin)、Avimer(親合力多聚體(avidity multimer)的簡稱)、抗運載蛋白(Anticalin)/脂質運載蛋白、Centyrin、庫尼茨結構域(Kunitz domain)、Adnexin、Affilin、Affitin(也稱為Nonfitin)、打結素(Knottin)、Pronectin、Versabody、Duocalin、和Fynomer)、配位基、受體、細胞介素或趨化因子。
可以用於MBM的非免疫球蛋白支架包括在如下中列出的那些：Mintz和Crea,2013,Bioprocess International[生物製程國際期刊]11(2)：40-48的表3和4；Vazquez-Lombardi等人，2015,Drug Discovery Today[今日藥物發現]20(10)：1271-83的圖1、表1和圖I；Skrlec等人，2015,Trends in Biotechnology[生物技術趨勢]33(7)：408-18的表1和第2欄。Mintz和Crea,2013,Bioprocess International[生物製程國際期刊]11(2)：40-48的表3和4；Vazquez-Lombardi等人，2015,Drug Discovery Today[今日藥物發現]20(10)：1271-83的圖1、表1和圖I；Skrlec等人，2015,Trends in Biotechnology[生物技術趨勢]33(7)：408-18的表1和第2欄(統稱為「支架揭露」)。在具體的實施方式中，揭露內容關於Adnexin的支架揭露藉由引用併入。在另一個實施方式中，揭露內容關於Avimer的支架揭露藉由引用併入。在另一個實施方式中，揭露內容關於Affibody的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於抗運載蛋白的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於DARPin的支架揭露藉由引用併入。在又另 一個實施方式中，揭露內容關於庫尼茨結構域的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於打結素(Knottin)的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Pronectin的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Nanofitin的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Affilin的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於腺連蛋白(Adnectin)的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於ABM的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Adhiron的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Affimer的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Alphabody的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於犰狳重複蛋白(Armadillo Repeat Protein)的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Atrimer/四連接素(Tetranectin)的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Obody/OB-fold的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Centyrin的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Repebody的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於抗運載蛋白的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Atrimer的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於二環肽(bicyclic peptide)的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於cys-knot的支架揭露藉由引用併入。在又另一個實施方式中，揭露內容關於Fn3支架(包括腺連蛋白、Centryrin、Pronectin、和Tn3)的支架揭露藉由引用併入。
在實施方式中，ABM可以是設計型錨蛋白重複序列蛋白(「DARPin」)。DARPin係抗體模擬蛋白，其典型地表現出高特異性和高親和力靶蛋白結合。它們一般經基因工程化並衍生自天然錨蛋白質並且由該等蛋白 質中的至少三個、通常四個或五個重複模體組成。對於四重複或五重複DARPin，它們的分子質量分別是約14或18kDa(千道耳頓)。DARPin的實例可以見於例如美國專利案號7,417,130中。包含DARPin結合模組和基於免疫球蛋白的結合模組的多特異性結合分子揭露於，例如，美國公開案號2015/0030596 A1中。
在另一個實施方式中，ABM可以是Affibody。Affibody係熟知的並且是指衍生自葡萄球菌蛋白A的一個IgG結合結構域的基於58個胺基酸殘基蛋白結構域的親和蛋白。
在另一個實施方式中，ABM可以是抗運載蛋白。抗運載蛋白係熟知的並且是指另一抗體模擬技術，其中該結合特異性衍生自脂質運載蛋白。抗運載蛋白還可以格式化為雙重靶向蛋白，稱為Duocalin。
在另一個實施方式中，ABM可以是Versabody。Versabody係熟知的並且是指另一抗體模擬技術。它們係具有>15%半胱胺酸的3-5kDa的小蛋白質，其形成高二硫鍵密度支架，置換了典型蛋白質的疏水核。
其他的非免疫球蛋白ABM包括「A」結構域寡聚物(也稱為Avimer)(參見例如，美國專利申請公開案號2005/0164301、2005/0048512、和2004/017576)、基於Fn3的蛋白質支架(參見例如，美國專利申請公開2003/0170753)、VASP多肽、禽類胰腺多肽(Avian pancreatic polypeptide，aPP)、四連接素(基於CTLD3)、Affililin(基於γB-晶體蛋白/泛素)、打結素、SH3結構域、PDZ結構域、澱粉酶抑肽(Tendamistat)、新製癌菌素(Neocarzinostatin)、蛋白質A結構域、脂質運載蛋白、轉鐵蛋白、或庫尼茨結構域。在一個方面，用於構建MBM的ABM包含如在WO 2011/130324中所示的基於纖網蛋白的支架。
此外，在某些方面，ABM包含受體的配位基結合結構域或配位基的受體結合結構域。
5.4.連接子
預期的是，該CD19結合分子可以在一些情況下包括直接互相連接的成對的ABM或ABM鏈(例如，Fab的VH-CH1或VL-CL組分)，例如，作為沒有連接子的融合蛋白。例如，該CD19結合分子包含連接單個ABM或ABM鏈的連接子部分。連接子部分的使用可以改善靶結合，例如藉由提高CD19結合分子中ABM的柔性並且因此減少空間位阻。藉由例如，Fc結構域(各Fc結構域代表一對締合的Fc區)和/或ABM連接子，ABM或ABM鏈可以互相連接。Fc結構域的使用將典型地需要使用鉸鏈區作為ABM或ABM鏈的連接子用於最佳的抗原結合。因此，該術語「連接子」涵蓋但不限於Fc區、Fc結構域、和鉸鏈區。
可以選擇或修飾連接子以，例如提高或降低CD19結合分子的生物半衰期。例如，為了降低生物半衰期，可以將一個或多個胺基酸突變引入Fc-鉸鏈片段的CH2-CH3結構域介面區域中，使得包含該片段的CD19結合分子相比於天然Fc-鉸鏈結構域SpA結合，具有受損的葡萄球菌蛋白A(SpA)結合。在美國專利案號6,165,745中，由Ward等人進一步詳細描述了這一方法。可替代地，可以修飾CD19結合分子以提高其生物半衰期。例如，可以引入以下突變中的一種或多種：如在美國專利案號6,277,375中由Ward所述之T252L、T254S、T256F。可替代地，為了增加生物半衰期，可以在CH1或CL區內改變CD19結合分子，以含有取自IgG的Fc區的CH2結構域的兩個環的補救受體結合表位，如Presta等人的美國專利案號5,869,046和6,121,022中所述。
Fc結構域(由兩個Fc區配對形成)、鉸鏈區和ABM連接子的實例分別描述於5.4.1節、5.4.2節、和5.4.3節中。
5.4.1.Fc結構域
該CD19結合分子可以包括衍生自任何合適物種的Fc結構域。在一個實施方式中，該Fe結構域衍生自人Fc結構域。
該Fc結構域可以衍生自任何合適類型的抗體，包括IgA(包括亞類IgA1和IgA2)、1gD、IgE、IgG(包括亞類IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)、和IgM。在一個實施方式中，該Fc結構域衍生自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。在一個實施方式中，該Fc結構域衍生自IgG1。在一個實施方式中，該Fc結構域衍生自IgG4。
該Fc結構域包含兩條多肽鏈，各自被稱為重鏈Fc區。這兩個重鏈Fc區二聚化以產生Fc結構域。該Fc結構域中的這兩個Fc區可以彼此相同或不同。在天然抗體中，該Fc區典型地是同一的，但出於產生本揭露之多特異性結合分子的目的，該Fc區可有利地不同以允許異源二聚化，如下文5.4.1.5節所述。
典型地，每個重鏈Fc區包含兩個或三個重鏈恒定結構域或由其組成。
在天然抗體中，IgA、IgD和IgG的重鏈Fc區由兩個重鏈恒定結構域(CH2和CH3)構成並且IgE和IgM的Fc區由三個重鏈恒定結構域(CH2、CH3和CH4)構成。該等抗體二聚化以產生Fc結構域。
在本揭露中，該重鏈Fc區可以包含來自一個或多個不同類型(例如一個、兩個或三個不同類型)的抗體的重鏈恒定結構域。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含衍生自IgG1的CH2和CH3結構域。衍生自人IgG1的重鏈Fc區的示例性序列在SEQ ID NO：1109中給出：
Figure 109116556-A0202-12-0059-7
Figure 109116556-A0202-12-0059-8
(SEQ ID NO：1109)。
在一些實施方式中，本揭露之CD19結合分子包含Fc區，其胺基酸序列包含用5.4.1節及其子節中所述之一種或多種取代修飾的SEQ ID NO：1109的胺基酸序列。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含衍生自IgG2的CH2和CH3結構域。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含衍生自IgG3的CH2和CH3結構域。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含衍生自IgG4的CH2和CH3結構域。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含來自IgM的CH4結構域。該IgM CH4結構域典型地位於CH3結構域的C-末端。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區包含衍生自IgG的CH2和CH3結構域和衍生自IgM的CH4結構域。
將認識到，用於產生針對本揭露之CD19結合分子的重鏈Fc區的重鏈恒定結構域可以包括如上所述之天然存在的恒定結構域的變體。此類變體相比於野生型恒定結構域可以包含一個或多個胺基酸變異。在一個實例中，本揭露之該重鏈Fc區包含至少一個恒定結構域，其在序列上與野生型恒定結構域不同。將認識到，該變體恒定結構域可以比野生型恒定結構域更長或更短。例如，該變體恒定結構域與野生型恒定結構域係至少60%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少70%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少75%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少80%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少85%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少90%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少95%同一或相似的。在另一個實例中，該恒定結構域係至少99%同一或相似的。示例性Fc變體描述於下文中的5.4.1.1節至5.4.1.5節中。
IgM和IgA作為常見H2L2抗體單元的共價多聚物天然存在於人類中。當摻入J-鏈時，IgM作為五聚體存在，或者當缺乏J-鏈時，IgM作為六聚體存 在。IgA作為單體和二聚體形式存在。IgM和IgA的重鏈具有至C-末端恒定結構域的18個胺基酸的延伸，其稱為尾部(tailpiece)。該尾部包括形成多聚物中的重鏈之間的二硫鍵的半胱胺酸殘基，並且據信在聚合中具有重要作用。該尾部還含有糖基化位點。在某些實施方式中，本揭露之該CD19結合分子不包含尾部。
摻入本揭露之CD19結合分子中的該Fc結構域可以包含改變蛋白質的一個或多個功能特性的一個或多個修飾，例如血清半衰期、補體固定、Fc受體結合、和/或抗原依賴性細胞毒性。此外，CD19結合分子可以經化學修飾(例如，一個或多個化學部分可以附接至CD19結合分子)或經修飾以改變其糖基化，從而再次改變CD19結合分子的一種或多種功能特性。
抗體分子的效應子功能包括補體介導的效應子功能，其係由例如該補體的C1組分與該抗體的結合介導的。補體的活化在病原體的調理作用和直接裂解中是重要的。另外，它藉由募集和活化吞噬細胞至補體活化的位點刺激炎症響應。效應子功能包括Fc受體(FcR)介導的效應子功能，其可以由抗體的恒定結構域與Fc受體(FcR)的結合觸發。效應細胞表面上Fc受體的抗原-抗體複合物介導的交聯觸發大量重要和不同的生物學響應，包括抗體包被的顆粒的吞噬和破壞、免疫複合物的清除、殺傷細胞裂解抗體包被的靶細胞(稱為抗體依賴性細胞介導的細胞毒性、或ADCC)、炎性介質的釋放、胎盤轉運和免疫球蛋白產生的控制。
可以藉由以下方式改變Fc區：將至少一個胺基酸殘基置換為不同胺基酸殘基以改變效應子功能。例如，一個或多個胺基酸可以用不同胺基酸殘基置換，使得Fc區對效應配位基具有改變的親和力。改變親和力的效應配位基可以是例如Fc受體或補體的C1組分。例如，Winter等人在美國專利案號5,624,821和5,648,260中均描述了這一方法。修飾的Fc區還可以改變C1q結合和/或減少或消除補體依賴性細胞毒性(CDC)。例如，Idusogie等人在美國專利案號6,194,551 中描述了這一方法。修飾的Fc區還可以改變Fc區固定補體的能力。例如，Bodmer等人在PCT公開WO 94/29351中描述了這一方法。同種異型胺基酸殘基包括但不限於：IgG1、IgG2、和IgG3亞類的重鏈的恒定區以及κ同種型的輕鏈的恒定區，如Jefferis等人，2009,MAbs,1：332-338所述。
還可以修飾Fc區以「緘默」該效應子功能，例如，減少或消除CD19結合分子介導抗體依賴性細胞毒性(ADCC)和/或抗體依賴性細胞吞噬作用(ADCP)的能力。例如，可以藉由在Fc區中引入突變來實現這一目標。本領域中已描述了此類突變：LALA和N297A(Strohl,2009,Curr.Opin.Biotechnol.[當前生物技術觀點]20(6)：685-691)：和D265A(Baudino等人，2008,J.Immunol.[免疫學雜誌]181：6664-69；Strohl，同上)。緘默Fc IgG1抗體的實例包含號稱的LALA突變體，該突變體在IgG1 Fc胺基酸序列中包含L234A和L235A突變。緘默IgG1抗體的另一個實例包含D265A突變。另一緘默IgG1抗體包含所謂的DAPA突變體，該突變體包含IgG1 Fc胺基酸序列中的D265A和P329A突變。另一個緘默IgG1抗體包含N297A突變，該突變導致無糖基化/非糖基化的抗體。
可以修飾Fc區以提高含有該Fc區的CD19結合分子介導抗體依賴性細胞毒性(ADCC)和/或抗體依賴性細胞吞噬作用(ADCP)的能力，例如，藉由修飾一個或多個胺基酸殘基以提高CD19結合分子對活化Fcγ受體的親和力，或降低CD19結合分子對抑制性Fcγ受體的親和力。人活化Fcγ受體包括FcγRIa、FcγRIIa、FcγRIIIa、和FcγRIIIb，並且人抑制性Fcγ受體包括FcγRIIb。例如Presta在PCT公開WO 00/42072中描述了這一方法。此外，已經繪製了人IgG1上針對FcγRl、FcγRII、FcγRIII和FcRn的結合位點，並且已經描述了具有改善的結合的變體(參見Shields等人，J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]276：6591-6604,2001)。已經描述了單株抗體的Fc介導的效應子功能的優化例如提高的ADCC/ADCP功能(參見Strohl,2009,Current Opinion in Biotechnology[當前生物 技術觀點]20：685-691)。可以增強ADCC/ADCP功能的突變包括一個或多個選自以下的突變：G236A、S239D、F243L、P247I、D280H、K290S、R292P、S298A、S298D、S298V、Y300L、V305I、A330L、I332E、E333A、K334A、A339D、A339Q、A339T、和P396L(所有位置藉由EU編號)。
還可以修飾Fc區以提高CD19結合分子介導ADCC和/或ADCP的能力，例如，藉由修飾一個或多個胺基酸以提高CD19結合分子對活化受體的親和力，該活化受體典型地不識別該親本CD19結合分子，如FcαRI。這一方法描述於例如，Borrok等人，2015,mAbs.7(4)：743-751。
因此，在某些方面，本揭露之該CD19結合分子可以包括具有改變的效應子功能(例如但不限於結合至Fc受體，例如FcRn或白血球受體(例如，如上所述或在5.4.1.1節所述)、結合至補體(例如如上所述或在5.4.1.2節所述)、修飾的二硫鍵結構(例如如上所述或在5.4.1.3節所述)或改變的糖基化模式(例如如上所述或在5.4.1.4節所述))的Fc結構域。還可以改變Fc結構域以包括改善非對稱CD19結合分子的可以製造性的修飾，例如藉由允許異源二聚化(該異源二聚化係不同Fc區相對同一Fc區的優先配對)。異源二聚化允許CD19結合分子的產生，其中不同ABM藉由含有具有不同序列的Fc區的Fc結構域相互連接。異源二聚化策略的實例示例於5.4.1.5節(及其子節)中。
將認識到，可以按任何合適的方式組合5.4.1.1節至5.4.1.5節中所述之任何修飾以實現所希望的功能特性和/或將5.4.1.1節至5.4.1.5節中所述之任何修飾與其他修飾組合以改變該CD19結合分子的特性。在一些實施方式中，CD19結合分子包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332(EU編號)的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變的IgG1 Fc結構域。例如，CD19結合分子可以包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、 322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變的SEQ ID NO：1109的IgG1序列。
5.4.1.1.具有改變的FcR結合的Fc結構域
與對應天然免疫球蛋白相比，該CD19結合分子的Fc結構域可以示出改變的與一個或多個Fc受體(FcR)的結合。與任何具體Fc受體的結合可以被提高或降低。在一個實施方式中，該Fc結構域包含一個或多個修飾，該修飾改變其Fc-受體結合譜。
人細胞可以表現大量膜結合FcR，其選自FcαR、FcεR、FcγR、FcRn和聚糖受體。一些細胞還能夠表現可溶性(胞外結構域)FcR(Fridman等人，1993,J Leukocyte Biology[白血球生物學雜誌]54：504-512)。FcγR可以進一步藉由IgG結合親和力(高/低)和生物學作用(活化/抑制)劃分。人FcγRI廣泛地被認為係唯一的「高親和力」受體，而所有其他的都被認為係中等至低等。由於其細胞內ITIM模體，FcγRIIb係具有「抑制性」功能性的唯一受體，而由於ITAM模體或與常見FcγR--γ鏈配對，所有其他的被認為係「活化的」。FcγRIIIb在以下方面也是獨特的：儘管係活化的，但它與該細胞藉由GPI錨締合。總之，人表現六種「標準」FcγR：FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIc、FcγRIIIa、和FcγRIIIb。除了該等序列，還有大量序列或同種異型變體分散在該等家族中。該等序列中的一些據發現具有重要的功能後果並且因此有時被認為係它們自己的受體亞型。實例包括FcγRIIa H134R 、FcγRIIb I190T 、FcγRIIIa F158V 、FcγRIIIb NA1 、FcγRIIIb NA2 、和FcγRIII SH 。每個受體序列已示出對IgG的4種亞類具有不同的親和力：IgG1、IgG2、IgG3和IgG4(Bruhns,1993,Blood[血液]113：3716-3725)。其他的物種具有略微不同的FcγR數量和功能性，其中小鼠系統係目前研究最完善的並且由4 FcγR，FcγRI FcγRIIb FcγRIII FcγRIV組成(Bruhns,2012,Blood[血液]119：5640-5649)。由於細胞上的人FcγRI對IgG1/IgG3/IgG4的親和力(約10 -8 M) 和該等IgG在血清中的濃度(約10mg/ml)，細胞上的人FcγRI通常被認為被正常血清條件中的單體IgG「佔據」。因此，在其表面上攜帶FcγRI的細胞被認為能夠藉由結合的多特異性IgG替代性地對它們的抗原環境進行「篩選」或「取樣」。對IgG亞類具有較低親和力的其他受體(在約10-5 -10-7 M的範圍內)通常被認為係「未佔據的」。低親和力受體因此內在地對關於抗體的免疫複合物的檢測和藉由其的活化敏感。在抗體免疫複合物中的該提高的Fc密度導致結合親合力與低親和力FcγR的提高的功能親和力。使用許多方法，體外示出了這一點(Shields等人，2001,J Biol Chem[生物化學雜誌]276(9)：6591-6604；Lux等人，2013,J Immunol[免疫學雜誌]190：4315-4323)。這還被認為係使用抗RhD治療人ITP的主要作用方式之一(Crow,2008,Transfusion Medicine Reviews[輸血醫學評論]22：103-116)。
許多細胞類型表現多種類型的FcγR並且因此取決於生物學背景，IgG或抗體免疫複合物結合至攜帶FcγR的細胞可以具有多種的和複雜的結果。最簡單的是，細胞可以接受活化的、抑制性的或混合的信號。這可以導致以下事件，例如吞噬作用(例如，巨噬細胞和中性粒細胞)、抗原加工(例如，樹突細胞)、減少的IgG產生(例如，B細胞)或脫粒(例如，中性粒細胞、肥大細胞)。有數據支持以下結論：來自FcγRIIb的抑制性信號可以主導活化信號(Proulx,2010,Clinical Immunology[臨床免疫學]135：422-429)。
可以製備大量有用的Fc取代以改變與FcγR受體中的一個或多個的結合。導致提高的結合和降低的結合的取代可以是有用的。例如，已知提高的與FcγRIIIa的結合通常導致提高的ADCC(抗體依賴性細胞介導的細胞毒性；細胞介導的反應，其中表現FcγR的非特異性細胞毒性細胞識別靶細胞上的結合的抗體並且隨後導致靶細胞的裂解)。相似地，降低的與FcγRIIb(抑制性受體)的結合在一些情況下也可以是有益的。可用於本揭露中的胺基酸取代包括US 2006/0024298(尤其是圖41)、US 2006/0121032、US 2006/0235208、US 2007/0148170、和US 2019/0100587中所列出的那些。可使用的特定變體包括但不限於236A、239D、239E、332E、332D、239D/332E、267D、267E、328F、267E/328F、236A/332E、239D/332E/330Y、239D、332E/330L、243A、243L、264A、264V、299T、265A/297A/329A、265N/297D/329G、和265E/297Q/329S。
FcRn在維持成人和兒童的血清中的IgG的長期半衰期具有關鍵的作用。該受體在酸化囊泡(pH<6.5)中結合IgG，保護IgG分子不被降解，並且然後將其在血液中在7.4的更高pH中釋放。
FcRn不同於白血球Fc受體，並且相反地，具有與MHC I類分子的結構相似性。由β2 -微球蛋白鏈構成的異二聚體非共價附接至包括三個細胞外結構域的膜結合鏈上。該等結構域之一(包括碳水化合物鏈)與β2 -微球蛋白一起與Fc的CH2和CH3結構域之間的位點相互作用。該相互作用包括針對IgG上的組胺酸殘基製備的鹽橋，該組胺酸殘基在pH<6.5係帶正電的。在更高的pH，該His殘基失去了它們的正電荷，FcRn-IgG相互作用被減弱並且IgG解離。
在一個實施方式中，CD19結合分子包含結合至人FcRn的Fc結構域。
在一個實施方式中，該Fc結構域具有一個或多個(例如一個或兩個)Fc區，該Fc區包含在位置310處的組胺酸殘基，並且在一些情況下還包含在位置435處的組胺酸殘基。該等組胺酸殘基對於人FcRn結合係重要的。在一個實施方式中，在位置310和435處的組胺酸殘基係天然殘基，即位置310和435係未經修飾的。可替代地，該等組胺酸殘基中的一個或兩個可能由於修飾而存在。
該CD19結合分子可以包含改變Fc結合至FcRn的一個或多個Fc區。該改變的結合可以是提高的結合或降低的結合。
在一個實施方式中，該CD19結合分子包含Fc結構域，其中至少一個(和視需要兩個)Fc區包含一個或多個修飾，使得它以比相應的天然免疫球蛋白以更高的親和力和親合力結合至FcRn。
提高與FcRn受體結合並提高血清半衰期的Fc取代描述於US 2009/0163699中，包括但不限於：434S、434A、428L、308F、259I、428L/434S、259I/308F、436I/428L、436I或V/434S、436V/428L和259I/308F/428L。
在一個實施方式中，藉由用麩醯胺酸殘基取代位置250處的蘇胺酸殘基(T250Q)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用酪胺酸殘基取代位置252處的甲硫胺酸殘基(M252Y)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用蘇胺酸殘基取代位置254處的絲胺酸殘基(S254T)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用麩胺酸殘基取代位置256處的蘇胺酸殘基(T256E)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置307處的蘇胺酸殘基(T307A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用脯胺酸殘基取代位置307處的蘇胺酸殘基(T307P)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用半胱胺酸殘基取代位置308處的纈胺酸殘基(V308C)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用苯丙胺酸殘基取代位置308處的纈胺酸殘基(V308F)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用脯胺酸殘基取代位置308處的纈胺酸殘基(V308P)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置311處的麩醯胺酸殘基(Q311A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用精胺酸殘基取代位置311處的麩醯胺酸殘基(Q311R)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用白胺酸殘基取代位置428處的甲硫胺酸殘基(M428L)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用離胺酸殘基取代位置433處的組胺酸殘基(H433K)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用苯丙胺酸殘基取代位置434處的天冬醯胺殘基(N434F)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用酪胺酸殘基取代位置434處的天冬醯胺殘基(N434Y)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用酪胺酸殘基取代位置252處的甲硫胺酸殘基，用蘇胺酸殘基取代位置254處的絲胺酸殘基，和用麩胺酸殘基取代位置256處的蘇胺酸殘基(M252Y/S254T/T256E)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用脯胺酸殘基取代位置308處的纈胺酸殘基，和用酪胺酸殘基取代位置434處的天冬醯胺殘基(V308P/N434Y)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用酪胺酸殘基取代位置252處的甲硫胺酸殘基，用蘇胺酸殘基取代位置254處的絲胺酸殘基，用麩胺酸殘基取代位置256處的蘇胺酸殘基，用離胺酸殘基取代位置433處的組胺酸殘基和用苯丙胺酸殘基取代位置434處的天冬醯胺殘基(M252Y/S254T/T256E/H433K/N434F)來修飾該Fc區。
將認識到，上述所列的任一修飾可以組合以改變FcRn結合。
在一個實施方式中，該CD19結合分子包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含一個或多個修飾，使得該Fc結構域比相應的天然免疫球蛋白以更低親和力和親合力結合至FcRn。
在一個實施方式中，除了在位置310處和/或位置435處的組胺酸，該Fc區包含任何胺基酸殘基。
該CD19結合分子可以包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含提高其與FcγRIIb結合的一個或多個修飾。FcγRIIb係人類中唯一的抑制性受體並且是在B細胞上發現的唯一的Fc受體。
在一個實施方式中，藉由用天冬胺酸殘基取代位置238處的脯胺酸殘基(P238D)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置258處的麩胺酸殘基(E258A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置267處的絲胺酸殘基(S267A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用麩胺酸殘基取代位置267處的絲胺酸殘基(S267E)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用苯丙胺酸殘基取代位置328處的白胺酸殘基(L328F)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置258處的麩胺酸殘基並且用丙胺酸殘基取代位置267處的絲胺酸殘基(E258A/S267A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用麩胺酸殘基取代位置267處的絲胺酸殘基並且用苯丙胺酸殘基取代位置328處的白胺酸殘基(S267E/L328F)來修飾該Fc區。
將認識到，上述所列的任一修飾可以組合以提高FcγRIIb結合。
在一個實施方式中，提供了包含Fc結構域的CD19結合分子，該Fc結構域展示出與FcγR降低的結合。
在一個實施方式中，該CD19結合分子包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含一個或多個降低與FcγR的Fc結合的修飾。
該Fc結構域可以衍生自IgG1。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置234處的白胺酸殘基(L234A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置235處的白胺酸殘基(L235A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用精胺酸殘基取代位置236處的甘胺酸殘基(G236R)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基(N297A)或麩醯胺酸殘基(N297Q)取代位置297處的天冬醯胺殘基來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置298處的絲胺酸殘基(S298A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用精胺酸殘基取代位置328處的白胺酸殘基(L328R)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置234處的白胺酸殘基並且用丙胺酸殘基取代位置235處的白胺酸殘基(L234A/L235A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置234處的苯丙胺酸殘基並且用丙胺酸殘基取代位置235處的白胺酸殘基(F234A/L235A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用精胺酸殘基取代位置236處的甘胺酸殘基並且用精胺酸殘基取代位置328處的白胺酸殘基(G236R/L328R)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置265處的天冬胺酸殘基、用丙胺酸殘基取代位置297處的天冬醯胺殘基，並且用丙胺酸殘基取代位置329處的脯胺酸殘基(D265A/N297A/P329A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用天冬醯胺殘基取代位置265處的天冬胺酸殘基、用天冬胺酸殘基取代位置297處的天冬醯胺殘基，並且用甘胺酸殘基取代位置329處的脯胺酸殘基(D265N/N297D/P329G)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用麩胺酸鹽殘基取代位置265處的天冬胺酸殘基、用麩胺酸鹽殘基取代位置297處的天冬醯胺殘基，並且用絲胺酸殘基取代位置329處的脯胺酸殘基(D265E/N297Q/P329S)來修飾該Fc區。
將認識到，上述所列的任一修飾可以組合以降低FcγR結合。
在一個實施方式中，CD19結合分子包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含一個或多個修飾，該修飾降低Fc結合至FcγRIIIa而不影響Fc結合至FcγRII。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置239處的絲胺酸殘基(S239A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置269處的麩胺酸殘基(E269A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置293處的麩胺酸殘基(E293A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用苯丙胺酸殘基取代位置296處的酪胺酸殘基(Y296F)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置303處的纈胺酸殘基(V303A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用甘胺酸殘基取代位置327處的丙胺酸殘基(A327G)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置338處的離胺酸殘基(K338A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置376處的天冬胺酸殘基(D376A)來修飾該Fc區。
將認識到，上述所列的任一修飾可以組合以降低FcγRIIIa結合。
具有降低的FcR結合的Fc區變體可以稱為「FcγR消融變體」、「FcγR緘默變體」或「Fc敲出(FcKO或KO)」變體。針對一些治療性應用，希望的是減少或除去Fc結構域與一個或多個或全部Fcγ受體(例如，FcγR1、FcγRIIa、FcγRIIb、FcγRIIIa)的正常結合以避免另外的作用機制。即，例如，在許多實施方式中，尤其在單價結合CD3的MBM的用途中，通常希望的是消融FcγRIIIa結合以消除或顯著地降低ADCC活性。在一些實施方式中，本文所述之MBM的至少一個Fc區包含一個或多個Fcγ受體消融變體。在一些實施方式中，兩個Fc區均包含一個或多個Fcγ受體消融變體。該等消融變體描述於表3中，並且每一個可以獨立地並視需要被包括或排除，其中一些方面利用了消融變體，該消融變體選自由以下組成的組：G236R/L328R、E233P/L234V/L235A/G236del/S239K、E233P/L234V/L235A/G236del/S267K、E233P/L234V/L235A/G236del/S239K/A327G、E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/A327G、E233P/L234V/L235A/G236del、D265A/N297A/P329A、D265N/N297D/P329G、和D265E/N297Q/P329S(「del」 表示缺失，例如，G236del係指在位置236處的甘胺酸的缺失)。應當注意，本文所引用的消融變體消融FcγR結合但通常不消融FcRn結合。
Figure 109116556-A0202-12-0073-9
在一些實施方式中，本揭露之MBM包含第一Fc區和第二Fc區。在一些實施方式中，該第一Fc區和/或該第二Fc區可以包含以下突變：E233P、L234V、L235A、G236del、和S267K。
人IgG1的Fc結構域具有與Fcγ受體最高的結合，並且因此當異二聚體抗體的主鏈中的恒定結構域(或Fc結構域)係IgG1時，可以使用消融變體。
可替代地，或除了IgG1背景中的消融變體，在糖基化位置297處的突變，例如，用丙胺酸殘基(N297A)或用麩醯胺酸殘基(N297Q)取代位置297處的天冬醯胺殘基例如，可以顯著地消融與例如FcγRIIIa結合。人IgG2和IgG4與Fcγ受體的結合天然減少，並且因此那些主鏈可以在具有或不具有消融變體的情況下使用。
5.4.1.2.具有改變的補體結合的Fc結構域
該CD19結合分子可以包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含改變Fc與補體結合的一個或多個修飾。改變的補體結合可以是提高的結合或降低的結合。
在一個實施方式中，該Fc區包含降低其結合至C1q的一個或多個修飾。經典補體途徑的引發以將六聚C1q蛋白質與抗原結合的IgG和IgM的CH2結構域結合開始。
在一個實施方式中，該CD19結合分子包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區包含降低Fc與C1q結合的一個或多個修飾。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置234處的白胺酸殘基(L234A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置235處的白胺酸殘基(L235A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用麩胺酸殘基取代位置235處的白胺酸殘基(L235E)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置237處的甘胺酸殘基(G237A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置322處的離胺酸殘基(K322A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基取代位置331處的脯胺酸殘基(P331A)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由用絲胺酸殘基取代位置331處的脯胺酸殘基(P331S)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，CD19結合分子包含衍生自IgG4的Fc結構域。IgG4比IgG1具有天然更低的補體活化譜，還具有與FcγR的更弱的結合。因此，在一個實施方式中，該CD19結合分子包含IgG4 Fc結構域並且還包含提高FcγR結合的一個或多個修飾。
將認識到，上述所列的任一修飾可以組合以降低C1q結合。
5.4.1.3.具有改變的二硫鍵結構的Fc結構域
該CD19結合分子可以包括包含一個或多個修飾以產生和/或除去半胱胺酸殘基的Fc結構域。藉由在單對的多肽單體之間形成二硫橋，半胱胺酸殘基在基於Fc的多特異性結合分子的同時裝配中具有重要作用。因此，藉由改變半胱胺酸殘基的數量和/或位置，修飾CD19結合分子結構以產生具有改善的治療性質的蛋白質係可能的。
本揭露之CD19結合分子可以包含Fc結構域，其中一個或兩個Fc區(例如，兩個Fc區)包含在位置309處的半胱胺酸殘基。在一個實施方式中，藉由修飾來產生在位置309處的半胱胺酸殘基，例如，針對衍生自IgG1的Fc結構域，用半胱胺酸殘基(L309C)取代在位置309處的白胺酸殘基，針對衍生自IgG2的Fc結構域，用半胱胺酸殘基(V309C)取代在位置309處的纈胺酸殘基。
在一個實施方式中，藉由用半胱胺酸殘基取代位置308處的纈胺酸殘基(V308C)來修飾該Fc區。
在一個實施方式中，藉由將核心鉸鏈序列CPPC(SEQ ID NO：55)突變為SPPS(SEQ ID NO：56)來除去鉸鏈區中的兩個二硫鍵。
5.4.1.4.具有改變的糖基化的Fc結構域
在某些方面，提供了具有改善的可製造性的CD19結合分子，該CD19結合分子包含比相應的免疫球蛋白更少的糖基化位點。該等蛋白質具有較不複雜的翻譯後糖基化模式並且因此對於製造商來說更簡單並且花費更少。
在一個實施方式中，藉由用丙胺酸殘基(N297A)或麩醯胺酸殘基(N297Q)取代位置297處的天冬醯胺殘基來除去CH2結構域中的糖基化位點。除了改善的可製造性，該等糖基化突變體還降低了如上在本文所述之FcγR結合。
在一些實施方式中，可以製備如下的CD19結合分子，其具有改變的糖基化類型，如具有降低量的岩藻糖基殘基的低岩藻糖基化的抗體或具有提高的二等分GlcNac結構的抗體。已經證明此類改變的糖基化模式增加了抗體的ADCC能力。可以藉由例如，在具有改變的糖基化機制的宿主細胞中表現CD19結合分子，來實現此類碳水化合物修飾。本領域已描述了具有改變的糖基化機制的細胞並且該細胞可以用作表現CD19結合分子，從而產生具有改變的糖基化的CD19結合分子的宿主細胞。例如，Hang等人的EP 1,176,195描述了具有功能破壞的FUT8基因的細胞系，其編碼岩藻糖基轉移酶，使得在這種細胞系中表現的抗體表現出低岩藻糖基化。Presta在PCT公開WO 03/035835中描述了變體CHO細胞系Lecl3細胞，其將岩藻糖附接至Asn(297)連接的碳水化合物的能力降低，還導致在該宿主細胞中表現的抗體的低岩藻糖基化(還參見Shields等人，2002,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]277：26733-26740)。Umana等人在PCT公開WO 99/54342中描述了如下細胞系，該細胞系被工程化以表現糖蛋白修飾性糖基轉移酶(例如，β(1,4)-N乙醯基葡糖胺基轉移酶III(GnTIII))，使得在工程化細胞系中表現的抗體表現出增加的二等分GlcNac結構，該二等分GlcNac結構導致抗體的ADCC活性增加(還參見Umana等人，Nat.Biotech.[自然生物技術]17：176-180,1999)。
5.4.1.5.Fc異源二聚化
許多多特異性分子形式需要兩個Fc區之間的二聚化，不同於天然免疫球蛋白，該兩個Fc區可操作地連接至非同一的抗原結合結構域(或其部分，例如，Fab的VH或VH-CH1)。形成Fc結構域的兩個Fc區的不充分的異源二聚化一直係提高所希望的多特異性分子的產生的障礙並且代表了純化的挑戰。本領域可以獲得的多種方法可以用於增強可能存在於CD19結合分子(和尤其是在本揭露之MBM)中的Fc區的二聚化，例如如在以下所揭露的：EP 1870459A1；美國專利案號5,582,996；美國專利案號5,731,168；美國專利案號5,910,573；美國專利案號5,932,448；美國專利案號6,833,441；美國專利案號7,183,076；美國專利申請公開案號2006204493 A1；和PCT公開案號WO 2009/089004 A1。
本揭露提供了包含Fc異二聚體的CD19結合分子，即包含異源、非同一Fc區的Fc結構域。異源二聚化策略用於增強可操作地連接至不同的ABM(或其部分，例如，Fab的VH或VH-CH1)的Fc區的二聚化並降低可操作地連接至相同ABM或其部分的Fc區的二聚化。典型地，Fc異二聚體中的每個Fc區包含抗體的CH3結構域。該CH3結構域衍生自任何同種型、類型或亞類、和在IgG(IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)類型的一些情況下的抗體的恒定區，如前述節中所述。
典型地，除了CH3結構域，該MBM還包含其他抗體片段，如，本文所述之CH1結構域、CH2結構域、鉸鏈結構域、一個或多個VH結構域、一個或多個VL結構域、一個或多個CDR、和/或抗原結合片段。在一些實施方式中，該兩個雜多肽係形成雙特異性或多特異性分子的兩個重鏈。在CH3結構域處的兩個不同的重鏈的異源二聚化產生了所希望的抗體或抗體樣分子，而同一的重鏈的同型二聚化將降低所希望的抗體或分子的產生。在示例性實施方式中，該兩條或更多條雜多肽鏈包含兩條鏈，該兩條鏈包含CH3結構域並且形成了本揭露以 上所述之任何多特異性分子形式的分子。在實施方式中，包含CH3結構域的該兩條雜多肽鏈包含有利於該多肽的異二聚體締合的修飾(相對於未修飾的鏈)。在下表4和5.4.1.5.1節至5.4.1.5.7節中提供了修飾策略的多種實例。
Figure 109116556-A0202-12-0078-2923
Figure 109116556-A0202-12-0079-11
Figure 109116556-A0202-12-0080-12
Figure 109116556-A0202-12-0081-13
Figure 109116556-A0202-12-0082-14
Figure 109116556-A0202-12-0083-15
Figure 109116556-A0202-12-0084-16
Figure 109116556-A0202-12-0085-17
Figure 109116556-A0202-12-0086-18
可以配對以形成Fc異二聚體並且可以包含在本揭露之CD19結合分子中的示例性異源、非同一Fc序列對包括(i)SEQ ID NO：1106和SEQ ID NO：1107，和(ii)SEQ ID NO：1106和SEQ ID NO：1108。
Figure 109116556-A0202-12-0086-19
Figure 109116556-A0202-12-0087-21
Figure 109116556-A0202-12-0087-25
(SEQ ID NO：1106)
Figure 109116556-A0202-12-0087-22
Figure 109116556-A0202-12-0087-24
(SEQ ID NO：1107)
Figure 109116556-A0202-12-0087-23
Figure 109116556-A0202-12-0087-26
(SEQ ID NO：1108)
具有SEQ ID NO：1106-1108之一的胺基酸序列的Fc區可以被修飾以包括5.4.1節(包括其子節)中所述之一個或多個取代，例如包括對應於表3中所列出的消融變體的一個或多個取代。在一些實施方式中，CD19結合分子包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332(EU編號)的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變(例如5.4.1節(包括其子節)中所述之一個或多個突變)的SEQ ID NO：1106-1108之一的胺基酸序列的Fc區。例如，CD19結合分子可以包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變的SEQ ID NO：1106的胺基酸序列的Fc區和/或在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變的SEQ ID NO：1107的胺基酸序列的Fc區和/或在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、 327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5、6、或多於6處具有突變的SEQ ID NO：1108的胺基酸序列的Fc區。
5.4.1.5.1.空間變體
CD19結合分子可以包含一個或多個，例如，多個，對Fc結構域的一個或多個恒定結構域的修飾，例如，對CH3結構域的修飾。在一個實例中，本揭露之CD19結合分子包含兩個多肽，每個多肽包含抗體的重鏈恒定結構域，例如，CH2或CH3結構域。在實例中，兩個重鏈恒定結構域，例如，CD19結合分子的CH2或CH3結構域包含一個或多個修飾，該修飾允許兩個鏈之間的異二聚體締合。在一個方面，該一個或多個修飾佈置在兩條重鏈的CH2結構域上。在一個方面，該一個或多個修飾佈置在該CD19結合分子的至少兩個多肽的CH3結構域上。
Fc異源二聚化的一個機制通常稱為「杵臼(knobs and holes)」或「杵臼結構(knobs-into-holes)」。該等術語係指產生空間影響以有利於Fc異二聚體(相比於Fc同型二聚體)形成的胺基酸突變，如以下所描述，例如Ridgway等人，1996,Protein Engineering[蛋白質工程]9(7)：617；Atwell等人，1997,J.Mol.Biol.[分子生物學雜誌]270：26；美國專利案號8,216,805。杵臼結構突變可以與其他策略組合以改善異源二聚化。
在一個方面，對包含重鏈恒定結構域的CD19結合分子的第一多肽的一個或多個修飾可以產生「杵」並且對CD19結合分子的第二多肽的一個或多個修飾產生了「臼」，使得包含重鏈恒定結構域的CD19結合分子的多肽的異源二聚化產生了「杵」以與「臼」介面接合(interface)(例如，相互作用，例如，第一多肽的CH2結構域與第二多肽的CH2結構域相互作用，或第一多肽的CH3結構域與第二多肽的CH3結構域相互作用)。該杵從包含重鏈恒定結構域的CD19結合分子的第一多肽的介面上突出並且因此可定位於在與包含重鏈恒定結 構域的CD19結合分子的第二多肽的介面中的互補性「臼」中以穩定異源多聚物，並且從而有利於異源多聚物形成(例如相對於同源多聚物)。該杵可以存在於最初的介面中或可以合成引入(例如，藉由改變編碼該介面的核酸)。用於形成杵的輸入殘基通常是天然存在的胺基酸殘基並且可以選自精胺酸(R)、苯丙胺酸(F)、酪胺酸(Y)和色胺酸(W)。在一些情況下，選擇了色胺酸和酪胺酸。在實施方式中，用於形成突起的最初殘基具有小側鏈容積，例如丙胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、甘胺酸、絲胺酸、蘇胺酸或纈胺酸。
「臼」包含至少一個胺基酸側鏈，該胺基酸側鏈凹進包含重鏈恒定結構域的CD19結合分子的第二多肽的介面中並且因此容納包含重鏈恒定結構域的CD19結合分子的第一多肽的相鄰交界表面上的相應的杵。該臼可以存在於最初的介面中或可以合成方式引入(例如，藉由改變編碼介面的核酸)。用於形成臼的該輸入殘基通常是天然存在的胺基酸殘基並且在一些實施方式中選自丙胺酸(A)、絲胺酸(S)、蘇胺酸(T)和纈胺酸(V)。在一個實施方式中，該胺基酸殘基係絲胺酸、丙胺酸或蘇胺酸。在另一個實施方式中，用於形成臼的最初的殘基具有大的側鏈容積，例如酪胺酸、精胺酸、苯丙胺酸或色胺酸。
在實施方式中，在殘基366、405或407處修飾第一CH3結構域以產生「杵」或「臼」(如上所述)，並且在以下處修飾與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域以產生與第一CH3結構域的「杵」或「臼」互補的「臼」或「杵」：殘基407(如果修飾了在第一CH3結構域中的殘基366)、殘基394(如果修飾了在第一CH3結構域中的殘基405)、或殘基366(如果修飾了第一CH3結構域中的殘基407)。
在另一個實施方式中，在殘基366處修飾第一CH3結構域，並且在殘基366、368和/或407處修飾與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域，以產生與第一CH3結構域的「杵」或「臼」互補的「臼」或「杵」。在一個 實施方式中，對第一CH3結構域的修飾在位置366處引入了酪胺酸(Y)殘基。在實施方式中，對第一CH3的修飾係T366Y。在一個實施方式中，對第一CH3結構域的修飾在位置366處引入色胺酸(W)殘基。在實施方式中，對第一CH3的修飾係T366W。在一些實施方式中，對與第一CH3結構域(在位置366處進行了修飾(例如，具有在位置366處引入的酪胺酸(Y)或色胺酸(W)，例如，包含修飾T366Y或T366W))異源二聚體化的第二CH3結構域的修飾包含在位置366處的修飾、在位置368處的修飾和在位置407處的修飾。在一些實施方式中，在位置366處的修飾引入了絲胺酸(S)殘基，在位置368處的修飾引入了丙胺酸(A)，並且在位置407處的修飾引入了纈胺酸(V)。在一些實施方式中，該修飾包含T366S、L368A和Y407V。在一個實施方式中，多特異性分子的第一CH3結構域包含修飾T366Y，並且與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域包含修飾T366S、L368A和Y407V，反之亦然。在一個實施方式中，多特異性分子的第一CH3結構域包含修飾T366W，並且與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域包含修飾T366S、L368A和Y407V，反之亦然。
另外的空間或「偏移」(例如杵臼結構)修飾描述於PCT公開案號WO 2014/145806(例如，WO 2014/145806的圖3、圖4和圖12)、PCT公開案號WO 2014/110601、和PCT公開案號WO 2016/086186、WO 2016/086189、WO 2016/086196和WO 2016/182751中。KIH變體的實例包含含有L368D和K370S修飾的第一恒定鏈，其與包含S364K和E357Q修飾的第二恒定鏈配對。
適合用於任何本揭露之CD19結合分子中的另外的杵臼結構修飾對進一步描述於例如，WO 1996/027011、和Merchant等人，1998,Nat.Biotechnol.[自然生物技術]，16：677-681中。
在進一步的實施方式中，該CH3結構域可以另外地經修飾以引入一對半胱胺酸殘基。不受理論束縛，據信，引入能夠形成二硫鍵的一對半胱胺 酸殘基向包含配對的CH3結構域的異源二聚體化的CD19結合分子(例如，MBM)提供了穩定性。在一些實施方式中，該第一CH3結構域包含在位置354處的半胱胺酸，並且與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域包含在位置349處的半胱胺酸。在一些實施方式中，該第一CH3結構域包含在位置354處的半胱胺酸(例如，包含修飾S354C)和在位置366處的酪胺酸(Y)(例如，包含修飾T366Y)，並且與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域包含在位置349處的半胱胺酸(例如，包含修飾Y349C)、在位置366處的絲胺酸(例如，包含修飾T366S)、在位置368處的丙胺酸(例如，包含修飾L368A)、和在位置407處的纈胺酸(例如，包含修飾Y407V)。在一些實施方式中，該第一CH3結構域包含在位置354處的半胱胺酸(例如，包含修飾S354C)和在位置366處的色胺酸(W)(例如，包含修飾T366W)，並且與第一CH3結構域異源二聚體化的第二CH3結構域包含在位置349處的半胱胺酸(例如，包含修飾Y349C)、在位置366處的絲胺酸(例如，包含修飾T366S)、在位置368處的丙胺酸(例如，包含修飾L368A)、和在位置407處的纈胺酸(例如，包含修飾Y407V)。
可用於產生異二聚體的另外的機制有時稱為「靜電導向」，如在以下中所述：Gunasckaran等人，2010,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]285(25)：19637。這在本文中有時被稱為「電荷對」。在這一實施方式中，使用靜電將形成向異源二聚化偏移。如技術人員將理解，該等變體還可以對pI具有作用，並且因此對純化也有作用，並且因此可以在一些情況下被認為係pI變體。然而，鑒於產生了該等變體以促使異源二聚化並且該等不被用作純化工具，它們被分類為「空間變體」。該等變體包括但不限於，與D221R/P228R/K409R配對的D221E/P228E/L368E和與C220R/E224R/P228R/K409R配對的C220E/P228E/368E。
可以與其他的變體(視需要並且獨立地以任意量)組合的另外的變體，例如本文所概述的pI變體或US 2012/0149876的圖37中示出的其他空間變體。
在一些實施方式中，本文所概述的空間變體可以視需要並獨立地與任何pI變體(或其他的變體如Fc變體、FcRn變體)一起併入一個或兩個Fc區中，並且可以獨立地並且視需要被包括在本揭露之CD19結合分子內或排除在本揭露之CD19結合分子以外。
表5中可見一列合適的偏移變體，其示出在許多實施方式中有具體應用的一些變體對。在許多實施方式中有具體用途的是如下組的變體對，包括但不限於，S364K/E357Q：L368D/K370S；L368D/K370S：S364K；L368E/K370S：S364K；T411T/E360E/Q362E：D401K；L368D/K370S：S364K/E357L；和K370S：S364K/E357Q。在命名方面，該變體對「S364K/E357Q：L368D/K370S」意指Fc區之一具有雙變體組S364K/E357Q並且其他的具有雙變體組L368D/K370S。
Figure 109116556-A0202-12-0092-27
Figure 109116556-A0202-12-0093-28
Figure 109116556-A0202-12-0094-29
Figure 109116556-A0202-12-0095-30
Figure 109116556-A0202-12-0096-31
Figure 109116556-A0202-12-0097-32
在一些實施方式中，CD19結合分子包含第一Fc區和第二Fc區。在一些實施方式中，該第一Fc區包含以下突變：L368D和K370S，並且該第二Fc 區包含以下突變：S364K和E357Q。在一些實施方式中，該第一Fc區包含以下突變：S364K和E357Q，並且該第二Fc區包含以下突變：L368D和K370S。
5.4.1.5.2.可替代的杵臼(Knob and Hole)：IgG異源二聚化
可以藉由在衍生自IgG1抗體類型的CH3結構域中引入一個或多個修飾來提高包含配對的CH3結構域的CD19結合分子的多肽鏈的異源二聚化。在實施方式中，該修飾包含對一個CH3結構域的K409R修飾，該CH3結構域與第二CH3結構域中的F405L修飾配對。另外的修飾還可以，或可替代地，係在位置366、368、370、399、405、407、和409處。在一些情況下，包含此類修飾的多肽的異源二聚化在還原條件下，例如，在25℃-37℃，例如，25℃或37℃下，10-100mM 2-MEA(例如，25、50、或100mM 2-MEA)持續1-10，例如，1.5-5，例如，5小時實現。
本文所述之胺基酸置換可以使用熟知的技術引入CH3結構域中(參見例如McPherson，編輯，1991,Directed Mutagenesis：a Practical Approach[定向誘變：實用方法]；Adelman等人，1983,DNA,2：183)。
該IgG異源二聚化策略進一步描述於例如，WO 2008/119353、WO 2011/131746、和WO 2013/060867中。
在本節中所述之任一實施方式中，該CH3結構域可以另外地經修飾以引入一對半胱胺酸殘基，如5.4.1.3節所述。
5.4.1.5.3.pI(等電點)變體
一般來說，如技術人員將理解的，pI變體有兩個一般類別：提高蛋白質pI(鹼性改變)的那些和降低蛋白質pI的那些(酸性改變)。如本文所述，可以進行該等變體的所有組合：一個Fc區可以是野生型、或不會展示出與野生型顯著不同的pI的變體，並且另一個的鹼性或酸性程度可以更大。可替代地，改變每一個Fc區，其中一個鹼性程度更大而另一個酸性程度更大。
pI變體的示例性組合示出於表6中。如本文所概述並且如表6所示，該等改變相對於IgG1示出，但是可以以該方式改變所有同種型、以及同種型雜交體。在重鏈恒定結構域來自IgG2-4的情況下，還可以使用R133E和R133Q。
Figure 109116556-A0202-12-0099-33
在一個實施方式中，例如在圖1B-1W、圖1Y-1AH、圖2B-2L、和圖2N-2V形式中，pI變體的組合具有包含208D/295E/384D/418E/421D變體(當相比於人IgG1時為N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D)的一個Fc區(陰性Fab側)和包含帶正電的scFv連接子，例如，L36(在5.4.3節中所述)的第二Fc區(陽性scFv側)。然而，如技術人員將理解的，該第一Fc區包括了包含位置208的CH1結構域。因此，在不包括CH1結構域的構建體中(例如針對不使用CH1結構域作為結構域之一的MBM，例如為在圖2K中所描述的形式)，陰性pI變體Fc組可以包括295E/384D/418E/421D變體(當相對於人IgG1時，為Q295E/N384D/Q418E/N421D)。
在一些實施方式中，第一Fc區具有來自表6的一組取代並且第二Fc區連接至帶電荷的連接子(例如，選自5.4.3節中所述之那些)。
在一些實施方式中，本揭露之CD19結合分子包含第一Fc區和第二Fc區。在一些實施方式中，該第一Fc區包含以下突變：N208D、Q295E、N384D、Q418E、和N421D。在一些實施方式中，該第二Fc區包含以下突變：N208D、Q295E、N384D、Q418E、和N421D。
5.4.1.5.4.同位素變體
另外，本揭露之許多實施方式依賴於將在特定位置處的pI胺基酸從一個IgG同種型「輸入」另一個中，從而減少或消除了不需要的免疫原性被引入變體的可能性。該等變體中的許多示出於美國公開案號2014/0370013的圖21中。即，IgG1係用於各種原因(包括高效應子功能)的治療性抗體的共同同種型。然而，IgG1的重恒定區具有比IgG2更高的pI(8.10比7.31)。藉由將在特定位置處的IgG2殘基引入IgG1主鏈中，所得的Fc區的pI被降低(或提高)並且另外地表現出更長的血清半衰期。例如，IgG1在位置137處具有甘胺酸(pI 5.97)，並且IgG2具有麩胺酸(pI 3.22)；輸入麩胺酸將影響所得的蛋白質的pI。如下所述，通常需要大量胺基酸取代以顯著地影響變體抗體的pI。然而，如下文所討論的，應當注意的是，甚至IgG2分子中的改變也允許血清半衰期提高。
在其他實施方式中，產生了非同種型胺基酸變化以降低所得的蛋白質的整體電荷狀態(例如，藉由將更高pI胺基酸改變為更低pI胺基酸)，或以允許為了穩定性的結構調節，如下文進一步所述。
另外，藉由pI工程化包含兩個半抗體的CD19結合分子的重和輕恒定結構域，可以看見每個半抗體中的顯著變化。使兩個半抗體的pI相差至少0.5可以允許藉由離子交換層析法或等電子聚焦、或對等電點敏感的其他之方法的分離。
5.4.1.5.5.計算pI
包含Fc區和ABM或ABM鏈的半抗體的pI可以取決於變體重鏈恒定結構域的pI和總半抗體(包括變體重鏈恒定結構域和ABM或ABM鏈)的pI。因此，在一些實施方式中，使用美國公開2014/0370013的圖19中的圖表，基於變體重鏈恒定結構域計算pI的變化。如本文所討論的，工程化哪一個半抗體通常由半抗體的固有pI決定。可替代地，可以比對每個半抗體的pI。
5.4.1.5.6.還賦予更佳的FcRn體內結合的pI變體
在pI變體降低Fc區的pI的情況下，其可以具有改善的體內血清瀦留的附加益處。
pI變體Fc區據信為體內抗原結合分子提供了更長的半衰期，因為在pH 6在內體中結合至FcRn隔絕了Fc(Ghetie和Ward,1997,Immunol Today.[今日免疫學]18(12)：592-598)。該內體腔室然後使Fc再循環至細胞表面。一旦腔室打開至細胞外空間，更高的pH，約7.4，誘導Fc釋放回血液中。在小鼠中，Dall’Acqua等人示出，在pH 6和pH 7.4具有提高的FcRn結合的Fc突變體實際上具有降低的血清濃度和與野生型Fc相同的半衰期(Dall’Acqua等人2002,J.Immunol.[免疫學雜誌]169：5171-5180)。在pH 7.4 Fc對FcRn的親和力提高被認為可以防止Fc被釋放回血液中。因此，將提高Fc的體內半衰期的該Fc突變在更低pH下將理想地提高FcRn結合並且在更高pH下仍然允許Fc的釋放。胺基酸組胺酸在6.0至7.4的pH範圍中改變了其電荷狀態。因此，在Fc/FcRn複合物的重要位置處發現His殘基並不令人驚訝。
已有人提出，具有可變區的抗體(具有更低的等電點)還可以具有更長的血清半衰期(Igawa等人，2010,PEDS.23(5)：385-392)。然而，人們對這一發現的機制仍然知之甚少。此外，可變區在抗體之間係不同的。具有降低 的pI和延長的半衰期的恒定區變體會提供更加模組化之方法以改善如本文所述之CD19結合分子的藥物動力學特性。
5.4.1.5.7.極性橋
可以基於「極性橋」基本原理藉由引入修飾來提高包含Fc結構域的CD19結合分子(例如，MBM)的多肽鏈的異源二聚化，該基本原理係將在兩條多肽鏈的結合介面處製造殘基以與異二聚體構型中具有相似(或互補性)物理特性的殘基相互作用，同時與同型二聚體構型中具有不同物理特性的殘基相互作用。特別地，設計該等修飾從而在異二聚體形成中，極性殘基與極性殘基相互作用，而疏水殘基與疏水殘基相互作用。相比之下，在同型二聚體形成中，修飾殘基，從而極性殘基與疏水殘基相互作用。異二聚體構型中有利的相互作用和同型二聚體構型中不利的相互作用一起作用使得Fc區形成異二聚體比形成同型二聚體的可能性更大。
在示例性實施方式中，上述修飾在CH3結構域的殘基364、368、399、405、409、和411中的一個或多個位置處產生。
在一些實施方式中，將選自由S364L、T366V、L368Q、N399K、F405S、K409F和R411K組成的組的一個或多個修飾引入兩個CH3結構域之一中。可以將選自由Y407F、K409Q和T411N組成的組的一個或多個修飾引入第二CH3結構域中。
在另一個實施方式中，將選自由S364L、T366V、L368Q、D399K、F405S、K409F和T411K組成的組的一個或多個修飾引入到一個CH3結構域中，而將選自由Y407F、K409Q和T411D組成的組的一個或多個修飾引入到第二CH3結構域中。
在一個示例性實施方式中，一個CH3結構域的位置366處的蘇胺酸的最初殘基被纈胺酸置換，而另一個CH3結構域的位置407處的酪胺酸的最初殘基被苯丙胺酸置換。
在另一個示例性實施方式中，一個CH3結構域的位置364處的絲胺酸的最初殘基被白胺酸置換，而在相同CH3結構域的位置368處的白胺酸的最初殘基被麩醯胺酸置換。
在又另一個示例性實施方式中，一個CH3結構域的位置405處的苯丙胺酸的最初殘基被絲胺酸置換並且這一CH3結構域的位置409處的離胺酸的最初殘基被苯丙胺酸置換，而另一CH3結構域的位置409處的離胺酸的最初殘基被麩醯胺酸置換。
在又另一個示例性實施方式中，一個CH3結構域的位置399處的天冬胺酸的最初殘基被離胺酸置換，並且相同CH3結構域的位置411處的蘇胺酸的最初殘基被離胺酸置換，而另一CH3結構域的位置411處的蘇胺酸的最初殘基被天冬胺酸置換。
本文所述之胺基酸置換可以使用熟知的技術引入CH3結構域中(參見例如McPherson，編輯，1991,Directed Mutagenesis：a Practical Approach[定向誘變：實用方法]；Adelman等人，1983,DNA,2：183)。該極性橋策略描述於，例如，WO 2006/106905、WO 2009/089004和Gunasekaran等人，2010,JBC 285：19637-19646中。
另外的極性橋修飾描述於，例如，PCT公開案號WO 2014/145806(例如，WO 2014/145806的圖6)，PCT公開案號WO 2014/110601，和PCT公開案號WO 2016/086186、WO 2016/086189、WO 2016/086196和WO 2016/182751中。極性橋變體的實例包含含有N208D、Q295E、N384D、Q418E和N421D修飾的恒定鏈。
在本文所述之任何實施方式中，該CH3結構域可以另外地經修飾以引入一對半胱胺酸殘基，如5.4.1.3節所述。
用於增強異源二聚化的另外的策略描述於，例如，WO 2016/105450、WO 2016/086186、WO 2016/086189、WO 2016/086196、WO 2016/141378、和WO 2014/145806、和WO 2014/110601中。在本文所述之CD19結合分子中可以使用該等策略中的任一個。
5.4.1.6.異源二聚化變體和其他Fc變體的組合
如技術人員將理解的，只要Fc結構域的Fc區保留它們二聚化的能力，全部所列舉的異源二聚化變體(包括偏移和/或pI變體)可以視需要並獨立地以任何方式組合。另外，所有該等變體可以與異源二聚化形式中的任一個組合。
在pI變體的情況下，當有具體用途的實施方式在表6中示出時，根據改變Fc異二聚體中的兩個Fc區之間的pI差異以促進純化的基本原則，可以產生其他的組合。
另外，異源二聚化變體、偏移和pI中的任一個也獨立地並且視需要與Fc消融變體、Fc變體、FcRn變體組合，如本文中所通常概述的。
在一些實施方式中，可用於本揭露中的偏移和pI變體的具體組合係T366S/L368A/Y407V：T366W(視需要包括橋接二硫鍵，T366S/L368A/Y407V/Y349C：T366W/S354C)，其中一個Fc區包含Q295E/N384D/Q418E/N481D並且另一個Fc區包含帶正電的scFv連接子(當該形式包括scFv結構域時)。如技術人員將理解的，「杵臼結構」變體不改變pI，並且因此可以用在Fc異二聚體中的任一個Fc區上。
在一些實施方式中，可用於本揭露之第一和第二Fc區包括胺基酸取代S364K/E357Q：L368D/K370S，其中第一和/或第二Fc區包括消融變體取代 233P/L234V/L235A/G236del/S267K，並且第一和/或第二Fc區包含pI變體取代N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D(pl_(-)_等電_A)。
5.4.2.鉸鏈區
該CD19結合分子還可以包含鉸鏈區，例如連接抗原結合結構域至Fc區上的鉸鏈區。該鉸鏈區可以是天然的或經修飾的鉸鏈區。鉸鏈區典型地發現於Fc區的N-末端。
天然鉸鏈區係在天然存在的抗體中的Fab和Fc結構域之間通常可發現的鉸鏈區。經修飾的鉸鏈區係與天然鉸鏈區在長度和/或組成上有差異的任何鉸鏈。此類鉸鏈可以包括來自其他物種的鉸鏈區，例如人、小鼠、大鼠、兔、鯊魚、豬、倉鼠、駱駝、羊駝或山羊鉸鏈區。其他經修飾的鉸鏈區可以包含衍生自來自與該重鏈Fc區不同類型或亞類的抗體的完整的鉸鏈區。可替代地，該經修飾的鉸鏈區可以包含天然鉸鏈或重複單元的部分，其中重複中的每個單元衍生自天然鉸鏈區。在進一步的替代方案中，可以藉由將一個或多個半胱胺酸或其他殘基轉化為中性殘基，例如絲胺酸或丙胺酸，或藉由將合適放置的殘基轉化為半胱胺酸殘基來改變該天然鉸鏈區。藉由此類方式，可以提高或降低鉸鏈區中半胱胺酸殘基的數量。該方法在Bodmer等人的美國專利案號5,677,425中進一步描述。改變鉸鏈區中半胱胺酸殘基的數量可以例如，促進輕鏈和重鏈的裝配，或者提高或降低CD19結合分子的穩定性。其他經修飾的鉸鏈區可以完全係合成的並且可以被設計以具有所希望的特性如長度、半胱胺酸組成和柔性。
以下文獻中描述了許多經修飾的鉸鏈區：例如，於美國專利案號5,677,425、WO 9915549、WO 2005003170、WO 2005003169、WO 2005003170、WO 9825971和WO 2005003171中。
合適的鉸鏈序列的實例示出於表7中。
Figure 109116556-A0202-12-0106-34
在一個實施方式中，該重鏈Fc區在其N-末端處具有完整的鉸鏈區。
在一個實施方式中，該重鏈Fc區和鉸鏈區衍生自IgG4並且該鉸鏈區包含經修飾的序列CPPC(SEQ ID NO：55)。與含有序列CPPC(SEQ ID NO： 55)的IgG1相比，人IgG4的核心鉸鏈區含有序列CPSC(SEQ ID NO：65)。存在於IgG4序列中的絲胺酸殘基導致在這一區域中的柔性提高，並且因此一部分分子在相同蛋白質鏈中形成二硫鍵(鏈內二硫鍵)而不是橋接至IgG分子中的其他重鏈上以形成鏈間二硫鍵。(Angel等人，1993,Mol lmmunol[分子免疫學]30(1)：105-108)。將絲胺酸殘基改變為脯胺酸以給出與IgG1相同的核心序列允許鏈間二硫鍵在IgG4鉸鏈區中完全形成，因此降低了純化的產物中的異質性。這一改變的同種型被命名為IgG4P。
5.4.3.ABM連接子
在某些方面，本揭露提供了CD19結合分子，其中ABM的兩個或更多個組分(例如，scFv的VH和VL)、兩個或更多個ABM、或ABM和非ABM結構域(例如，二聚化結構域，如Fc區)藉由肽連接子互相連接。此類連接子在本文中被稱為「ABM連接子」，與如在例如5.12.2節中所述之用於附接藥物至CD19結合分子的ADC連接子不同。
肽連接子的範圍可以是2個胺基酸至60個或更多個胺基酸，並且在某些方面，肽連接子的範圍係3個胺基酸至50個胺基酸、4至30個胺基酸、5至25個胺基酸、10至25個胺基酸或12至20個胺基酸。在具體的實施方式中，肽連接子的長度係2個胺基酸、3個胺基酸、4個胺基酸、5個胺基酸、6個胺基酸、7個胺基酸、8個胺基酸、9個胺基酸、10個胺基酸、11個胺基酸、12個胺基酸、13個胺基酸、14個胺基酸、15個胺基酸、16個胺基酸、17個胺基酸、18個胺基酸、19個胺基酸、20個胺基酸、21個胺基酸、22個胺基酸、23個胺基酸、24個胺基酸、25個胺基酸、26個胺基酸、27個胺基酸、28個胺基酸、29個胺基酸、30個胺基酸、31個胺基酸、32個胺基酸、33個胺基酸、34個胺基酸、35個胺基酸、36個胺基酸、37個胺基酸、38個胺基酸、39個胺基酸、40個胺基酸、41個 胺基酸、42個胺基酸、43個胺基酸、44個胺基酸、45個胺基酸、46個胺基酸、47個胺基酸、48個胺基酸、49個胺基酸、或50個胺基酸。
可以使用帶電荷的和/或柔性連接子。
可以用於CD19結合分子的柔性ABM連接子的實例包括如下中所揭露的那些：Chen等人，2013,Adv Drug Deliv Rev.[先進藥物遞送綜述]65(10)：1357-1369和Klein等人，2014,Protein Engineering,Design & Selection[蛋白質工程化、設計和選擇]27(10)：325-330。特別有用的柔性連接子係(GGGGS)n(也稱為(G4S)n)(SEQ ID NO：78)。在一些實施方式中，n係1和10之間的任何數字，即，1、2、3、4、5、6、7、8、9、和10，或以上述數字中的任意兩個為端點的任何範圍，例如，1至5、2至5、3至6、2至4、1至4等。
可用於本揭露之CD19結合分子中的合適的ABM連接子的其他實例示出於下表8中：
Figure 109116556-A0202-12-0108-35
Figure 109116556-A0202-12-0109-36
Figure 109116556-A0202-12-0110-37
在多個方面，本揭露提供了CD19結合分子，該CD19結合分子包含一個或多個ABM連接子。ABM連接子中的每一個的長度範圍可以是2個胺基酸至60個胺基酸，例如，4至30個胺基酸，5至25個胺基酸，10至25個胺基酸或12至20個胺基酸，視需要選自上述表8。在具體的實施方式中，該CD19結合分子包含兩個、三個、四個、五個或六個ABM連接子。該ABM連接子可以位於CD19結合分子的一條、兩條、三條、四條或甚至更多條多肽鏈上。
5.5.雙特異性結合分子構型
示例性BBM構型示出於圖1中。圖1A示出了圖1B-1AH中所示BBM構型的組分。scFv、Fab、scFab、基於非免疫球蛋白的ABM、和Fc結構域各自可以具有針對5.3節和5.4節中的該等組分所述之特徵。圖1示出的BBM構型的組分可以藉由5.3節和5.4節中所述之任何方法(例如，藉由直接鍵、ABM連接 子、二硫鍵、用杵臼結構相互作用修飾的Fc結構域等)彼此締和。圖1中示出的多種組分的方向和締和僅僅為示例性的；如技術人員將理解的，其他的方向和締合可以是合適的(例如，在5.3節和5.4節中所述)。
BBM不限於圖1中示出的構型。可以使用的其他的構型係熟悉該項技術者已知的。參見例如，WO 2014/145806；WO 2017/124002；Liu等人，2017,Front Immunol.[免疫學前沿]8：38；Brinkmann & Kontermann,2017,mAbs 9：2,182-212；US 2016/0355600；Klein等人，2016,MAbs 8(6)：1010-20；和US 2017/0145116。
5.5.1.示例性二價BBM
該BBM可以是二價的，即，它們具有兩個抗原結合結構域，其中一個結合CD19(ABM1)並且其中一個結合第二靶抗原(ABM2)，例如，TCR複合物的組分。
示例性二價BBM構型示出於圖1B-1F中。
如圖1B-1D中所描繪，BBM可以包含兩個半抗體，其中一個包含一個ABM並且另一個包含一個ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖1B的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1C的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1D的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
如圖1E-1F所描述，二價BBM可以包含附接至Fc結構域的一個Fc區的兩個ABM。
在圖1E的實施方式中，該BBM包含Fab、scFv和Fc結構域，其中該scFv位於Fab和Fc結構域之間。
在圖1F的實施方式中，(「一臂scFv-mAb」構型)BBM包含Fab、scFv和Fc結構域，其中Fab位於scFv和Fc結構域之間。
在圖1B-1F所示的構型中，X和Y中的每一個代表ABM1或ABM2，其條件係該BBM包含一個ABM1和一個ABM2。因此，本揭露提供了如圖1B至1F中任一個所示的二價BBM，其中X係ABM1並且Y係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「B1」)。本揭露還提供了如圖1B至1F中任一個所示的二價BBM，其中X係ABM2並且Y係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「B2」)。
5.5.2.示例性三價BBM
該BBM可以是三價的，即，它們具有三個抗原結合結構域，其中一個或兩個結合CD19(ABM1)並且其中一個或兩個結合第二靶抗原(ABM2)，例如，TCR複合物的組分。
示例性三價BBM構型示出於圖1G-1Z中。
如圖1G-1N、1Q-1W、1Y-1Z中所描繪，BBM可以包含兩個半抗體，其中一個包含兩個ABM並且另一個包含一個ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖1G的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1H的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1I的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含兩個Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1J的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含兩個Fav和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1K的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含兩個scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1L的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1M的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1N的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含雙體抗體類型結合結構域和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1Q的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1R的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1S的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fc區、和第二scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1T的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1U的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含兩個Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含基於非免疫球蛋白的ABM和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1V的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含基於非免疫球蛋白的ABM和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1W的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、基於非免疫球蛋白的ABM、和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1Y的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1Z的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
可替代地，如圖1O和1P所描述，三價BBM可以包含兩個半抗體，其中每個包含一個完整的ABM(圖1O和1P中的Fab)和另一個ABM的一部分(一個係VH，另一個係VL)。該兩個半抗體藉由Fc結構域配對，因此VH和VL締和以形成完整的抗原結合Fv結構域。
該BBM可以是單鏈，如圖1X所示。圖1X的BBM包含藉由連接子連接的三個scFv結構域。
在圖1G-1Z所示的構型中，X、Y和A中的每一個代表ABM1或ABM2，其條件係該BBM包含至少ABM1和至少一個ABM2。因此，該三價MBM將包括一個或兩個ABM1和一個或兩個ABM2。在一些實施方式中，三價BBM包含兩個ABM1和一個ABM2。在其他實施方式中，本揭露之三價BBM包含一個ABM1和兩個ABM2。
因此，在本揭露中提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM1，Y係ABM1並且A係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T1」)。
本揭露進一步提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM1，Y係ABM2並且A係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T2」)。
本揭露進一步提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM2，Y係ABM1並且A係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T3」)。
本揭露進一步提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM1，Y係ABM2並且A係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T4」)。
本揭露進一步提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM2，Y係ABM1並且A係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T5」)。
本揭露進一步提供了如圖1G至1Z中任一個所示的三價BBM，其中X係ABM2，Y係ABM2並且A係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T6」)。
5.5.3.示例性四價BBM
該BBM可以是四價的，即，它們具有四個抗原結合結構域，其中一個、兩個或三個結合CD19(ABM1)並且其中一個、兩個或三個結合第二靶抗原(ABM2)，例如，TCR複合物的組分。
示例性四價BBM構型示出於圖1AA-1AH中。
如圖1AA-1AH所描繪的，四價BBM可以包含兩個半抗體，其中每個包含兩個完整的ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖1AA的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AB的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AC的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv、Fab、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AD的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和第二Fab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和第二Fab。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AE的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv、第二scFv、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、第二scFv、和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AF的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AG的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AH的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖1AA-1AH所示的構型中，X、Y、A、和B中的每一個代表ABM1或ABM2(儘管不必須以這樣的順序)，並且其條件係該BBM包含至少一個ABM1和至少一個ABM2。因此，該四價ABM將包括一個、兩個或三個ABM1和一個、兩個、或三個ABM2。在一些實施方式中，四價BBM包含三個ABM1和一個ABM2。在其他實施方式中，四價BBM包含兩個ABM1和兩個ABM2。在又其他實施方式中，四價BBM包含一個ABM1和三個ABM2。
因此，在本揭露中提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中X係ABM1並且Y、A、和B中的每一個係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 1」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中Y係ABM1並且X、A、和B中的每一個係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 2」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中A係ABM1並且X、Y、和B中的每一個係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 3」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中B係ABM1並且X、Y、和A中的每一個係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 4」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中X和Y皆為ABM1並且A和B皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 5」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中X和A皆為ABM1並且Y和B皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 6」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中X和B皆為ABM1並且Y和A皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 7」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中Y和A皆為ABM1並且X和B皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 8」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中Y和B皆為ABM1並且X和A皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 9」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中的任一個所示的四價BBM，其中A和B皆為ABM1並且X和Y皆為ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 10」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中任一個所示的四價BBM，其中X、Y、和A中的每一個係ABM1並且B係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 11」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中任一個所示的四價BBM，其中X、Y、和B中的每一個係ABM1並且A係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 12」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中任一個所示的四價BBM，其中X、A、和B中的每一個係ABM1並且Y係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 13」)。
本揭露進一步提供了如圖1AA-1AH中任一個所示的四價BBM，其中Y、A、和B中的每一個係ABM1並且X係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「Tv 14」)。
5.6.三特異性結合分子構型
示例性TBM構型示出於圖2中。圖2A示出了圖2B-1V中所示TBM構型的組分。scFv、Fab、基於非免疫球蛋白的ABM、和Fc各自可以具有針對5.3節和5.4節中的該等組分所述之特徵。圖2示出的TBM構型的組分可以藉由5.3節和5.4節中所述之任何方法(例如，藉由直接鍵、ABM連接子、二硫鍵、用杵臼結構相互作用修飾的Fc結構域等)彼此締和。圖2中示出的多種組分的方向和締和僅僅為示例性的；如技術人員將理解的，其他的方向和締合可以是合適的(例如，在5.3節和5.4節中所述)。
TBM不限於圖2中示出的構型。可以使用的其他構型係熟悉該項技術者已知的。參見例如，WO 2014/145806；WO 2017/124002；Liu等人，2017,Front Immunol.[免疫學前沿]8：38；Brinkmann & Kontcrmann,2017,mAbs 9：2,182-212；US 2016/0355600；Klein等人，2016,MAbs 8(6)：1010-20；和US 2017/0145116。
5.6.1.示例性三價TBM
本揭露之TBM可以是三價的，即，它們具有三個抗原結合結構域，其中一個結合CD19，其中一個結合TCR複合物的組分，並且其中一個結合CD2或TAA。
示例性三價TBM構型示出於圖2B至2P中。
如圖2B-2K和2N-2P中所描繪，TBM可以包含兩個半抗體，其中一個包含兩個ABM並且另一個包含一個ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖2B的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2C的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含兩個Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2D的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2E的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含兩個Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2F的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2G的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFV。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2H的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含兩個Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含基於非免疫球蛋白的ABM和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2I的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含基於非免疫球蛋白的ABM和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2J的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、基於非免疫球蛋白的ABM和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2K的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fc區、和第二scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2N的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2O的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2P的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、基於非免疫球蛋白的ABM、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含scFv和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
可替代地，如圖2L所描述，三價TBM可以包含兩個半抗體，其中每個包含一個完整的ABM和另一個ABM的一部分(一個係VH，另一個係VL)。該兩個半抗體藉由Fc結構域配對，因此VH和VL締和以形成完整的抗原結合Fv結構域。
該TBM可以是單鏈，如圖2M所示。圖2M的TBM包含藉由連接子連接的三個scFv結構域。
在圖2B-2P所示的每種構型中，被指定為X、Y和Z的每個結構域代表ABM1、ABM2、或ABM3，儘管不一定按該順序。換句話說，X可以是ABM1、ABM2、或ABM3，Y可以是ABM1、ABM2、或ABM3，並且Z可以是ABM1、ABM2、或ABM3，只要TBM包含一個ABM1、一個ABM2、和一個ABM3。
因此，在本揭露中提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM1，Y係ABM3並且Z係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T1」)。
本揭露還提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM1，Y係ABM2並且Z係ABM3(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T2」)。
本揭露進一步提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM3，Y係ABM1並且Z係ABM2(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T3」)。
本揭露又進一步提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM3，Y係ABM2並且Z係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T4」)。
本揭露又進一步提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM2，Y係ABM1並且Z係ABM3(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T5」)。
本揭露又進一步提供了如圖2B至2P中任一個所示的三價TBM，其中X係ABM2，Y係ABM3並且Z係ABM1(為了方便起見，ABM的這一構型被指定為「T6」)。
5.6.2.示例性四價TBM
本揭露之TBM可以是四價的，即，它們具有四個抗原結合結構域，其中一個或兩個結合CD19，其中一個或兩個結合TCR複合物的組分，並且其中一個或兩個結合CD2或TAA。
示例性四價TBM構型示出於圖2Q-2S中。
如圖2Q-2S所描繪的，四價TBM可以包含兩個半抗體，其中每個包含兩個完整的ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖2Q的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和第二Fab，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和第二Fab。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2R的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2S的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含scFv、Fc區、和Fab。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2Q-2S所示的構型中，X、Y、Z、和A中的每一個代表ABM1、ABM2、或ABM3(儘管不必須以這樣的順序)，並且其條件係該TBM包含至少一個ABM1、至少一個ABM2、和至少一個ABM3。因此，該四價ABM將包括針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA之一的兩個ABM。在一些情況下，四價TBM具有兩個CD19 ABM。
因此，本揭露提供了如圖2Q-2S中任一個所示的四價TBM，其中X、Y、Z、和A係針對CD19、TCR複合物的組分和CD2或TAA的ABM，如表9所示。
Figure 109116556-A0202-12-0124-39
Figure 109116556-A0202-12-0125-40
5.6.3.示例性五價TBM
本揭露之TBM可以是五價的，即，它們具有五個抗原結合結構域，其中一個、兩個、或三個結合CD19，其中一個、兩個、或三個結合TCR複合物的組分，並且其中一個、兩個或三個結合CD2或TAA。
示例性五價TBM構型示出於圖2T中。
如圖2T中所描繪，五價TBM可以包含兩個半抗體，其中一個包含兩個完整的ABM並且另一個包含一個完整的ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖2T的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、scFv和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2T所示的構型中，X、Y、Z、A、和B中的每一個代表ABM1、ABM2、或ABM3(儘管不必須以這樣的順序)，並且其條件係該TBM包含至少 一個ABM1、一個ABM2、和一個ABM3。因此，該五價TBM可以包括針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA中兩個的兩個ABM，或針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA中之一的三個ABM。在一些情況下，五價TBM具有兩個或三個CD19 ABM。在一些實施方式中，五價TBM具有三個ABM1、一個ABM2和一個ABM3。
因此，在本揭露中提供了如圖2T所示的五價TBM，其中X、Y、Z、A、和B係針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA的ABM，如表10所示。
Figure 109116556-A0202-12-0126-41
Figure 109116556-A0202-12-0127-42
Figure 109116556-A0202-12-0128-43
Figure 109116556-A0202-12-0129-44
5.6.4.示例性六價TBM
本揭露之TBM可以是六價的，即，它們具有六個抗原結合結構域，其中一個、兩個、三個、或四個結合CD19，其中一個、兩個、三個、或四個結合TCR複合物的組分，並且其中一個、兩個、三個或四個結合CD2或TAA。
示例性六價TBM構型示出於圖2U-2V中。
如圖2U-2V中所描繪，五價TBM可以包含兩個半抗體，其中一個包含兩個完整的ABM並且另一個包含一個完整的ABM，該兩個半抗體藉由Fc結構域配對。
在圖2U的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含Fab、第二Fab、Fc區、和scFv，並且該第二(或右)半抗體包含Fab、第二Fab、Fc區、和scFv。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2V的實施方式中，該第一(或左)半抗體包含第一Fv、第二Fv、第三Fv、和Fc區，並且該第二(或右)半抗體包含第一Fv、第二Fv、第三Fv、和Fc區。該第一和第二半抗體藉由形成Fc結構域的Fc區締和。
在圖2U-2V所示的構型中，X、Y、Z、A、B、和C中的每一個代表ABM1、ABM2、或ABM3(儘管不必須以這樣的順序)，並且其條件係該TBM包含至少一個ABM1、一個ABM2、和一個ABM3。因此，該六價TBM可以包括(i)針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA中每一個的兩個ABM，(ii)針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA中之一的三個ABM，或(iii)針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA中之一的四個ABM。例如，六價ABM可以包括針對CD19的三個ABM、針對CD2或TAA的兩個ABM以及針對TCR複合物的組分的一個ABM。又如，六價ABM可以包括針對CD19的三個ABM、針對TCR複合物的組分的兩個ABM以及針對CD2或TAA的一個ABM。在一些情況下，六價TBM具有兩個、三個、或四個CD19 ABM。在一些實施方式中，六價TBM具有三個CD19 ABM。在其他實施方式中，六價TBM具有四個CD19 ABM。
因此，在本揭露中提供了如圖2U-2V中任一個所示的六價TBM，其中X、Y、Z、A、B、和C係針對CD19、TCR複合物的組分、和CD2或TAA的ABM，如表11所示。
Figure 109116556-A0202-12-0130-45
Figure 109116556-A0202-12-0131-46
Figure 109116556-A0202-12-0132-47
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5.7. TCR ABM
本揭露之MBM含有特異性結合至CD19的ABM和對不同抗原具有特異性的ABM2。在本揭露之BBM、1型TBM和2型TBM中，ABM2可以結合至TCR複合物的組分。該TCR係二硫鍵連接的膜錨定異二聚體蛋白，其通常由作為與不變CD3鏈分子的複合物的部分表現的高可變α和β鏈組成。表現這一受體的T細胞被稱為α：β(或αβ)T細胞，儘管少數T細胞(稱為γδ T細胞)表現替代的受體(由可變γ和δ鏈形成)。
在實施方式中，MBM含有特異性結合至CD3的ABM。
5.7.1. CD3 ABM
該MBM可以含有特異性結合至CD3的ABM。該術語「CD3」係指T細胞受體的分化簇3共受體(或共受體複合物、或共受體複合物的多肽鏈)。NCBI登錄P04234、P07766和P09693中提供了人CD3的多肽鏈的胺基酸序列。CD3蛋白質還可以包括變體。CD3蛋白質還可以包括片段。CD3蛋白質還包括CD3胺基酸序列的翻譯後修飾。翻譯後修飾包括但不限於N-連接的和O-連接的糖基化。
在一些實施方式中，MBM可以包含ABM，該ABM係抗CD3抗體(例如，如在US 2016/0355600、WO 2014/110601、和WO 2014/145806中所述之)或其抗原結合結構域。表12A中提供了可以在MBM中使用的示例性抗CD3 VH、VL、和scFV序列。
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如由卡巴特編號方案(卡巴特等人，1991,Sequences of Proteins of Immunological Interest[具有免疫學重要性的蛋白質序列]，第5版，公共衛生事業部，美國國立衛生研究院，馬里蘭州貝塞斯達市)、喬西亞編號方案(Al-Lazikani等人，1997,J.Mol.Biol[分子生物學雜誌]273：927-948)，以及卡巴特和喬西亞編號的組合定義的許多CD3結合物的CDR序列分別在表12B-12D中提供。
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在一些實施方式中，MBM可以包含CD3 ABM，該CD3 ABM包含如由卡巴特編號定義的CD3-1至CD3-130中任一項的CDR(例如，如在表12B中所列出)。在其他實施方式中，MBM可以包含CD3 ABM，該CD3 ABM包含如由喬西亞編號定義的CD3-1至CD3-130中任一項的CDR(例如，如在表12C中所列出)。在又其他實施方式中，MBM可以包含CD3 ABM，該CD3 ABM包含如由卡巴特和喬西亞編號的組合定義的CD3-1至CD3-130中任一項的CDR(例如，如在表12D中所列出)。
在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-1的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-2的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-3的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-4的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-5的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-6的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-7的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-8的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-9的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-10的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-11的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-12的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-13的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-14的CDR序 列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-15的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-16的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-17的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-18的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-19的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-20的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-21的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-22的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-23的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-24的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-25的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-26的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-27的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-28的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-29的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-30的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-31的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-32的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-33的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-34的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-35的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-36的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-37的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-38的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-39的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-40的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-41的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-42的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-43的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-44的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-45的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-46的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-47的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM 包含CD3-48的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-49的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-50的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-51的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-52的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-53的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-54的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-55的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-56的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-57的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-58的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-59的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-60的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-61的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-62的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-63的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-64的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-65的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-66的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-67的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-68的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-69的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-70的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-71的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-72的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-73的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-74的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-75的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-76的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-77的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-78的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-79的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-80的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-81的CDR序列。在一些實 施方式中，CD3 ABM包含CD3-82的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-83的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-84的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-85的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-86的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-87的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-88的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-89的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-90的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-91的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-92的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-93的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-94的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-95的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-96的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-97的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-98的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-99的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-100的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-101的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-102的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-103的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-104的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-105的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-106的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-107的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-108的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-109的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-110的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-111的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-112的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-113的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-114的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM 包含CD3-115的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-116的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-117的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-118的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-119的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-120的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-121的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-122的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-123的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-124的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-125的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-126的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-127的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-126的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-127的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-128的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-129的CDR序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包含CD3-130的CDR序列。
MBM可以包含CD3-1至CD3-130中任一項的完整重和輕可以變序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-1的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-1的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-2的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-3的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-4的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-5的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-6的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-7的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-8的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-9的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包 含CD3-10的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-11的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-12的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-13的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-14的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-15的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-16的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-17的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-18的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-19的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-20的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-21的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-22的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-23的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-24的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-25的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-26的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-27的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-28的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-129的VH和VL序列。在一些實施方式中，MBM包含CD3 ABM，其包含CD3-130的VH和VL序列。
除了表12B-12D中所述之CDR組(即，針對CD3-1至CD3-130中每個的六個CDR的組)，本揭露提供了變體CDR組。在一個實施方式中，只要該CD3 ABM仍然能夠結合至該靶抗原，一組6個CDR與表12B-12D中所述之CDR 組可以具有1、2、3、4或5個胺基酸變化，如藉由Biacore、表面電漿共振(SPR)和/或BLI(生物膜層干涉技術，例如，Octet測定)測定中的至少一種所測量的。
除了揭露於表12A中的可變重和可變輕結構域(其形成了針對CD3的ABM)，本揭露提供了變體VH和VL結構域。在一個實施方式中，只要該ABM仍然能夠結合至靶抗原，則變體VH和VL結構域各自與表12A中所列出的VH和VL結構域可以具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個胺基酸的變化，如藉由Biacore、表面電漿共振(SPR)和/或BLI(生物膜層干涉技術，例如，Octet測定)測定中的至少一種所測量的。在另一個實施方式中，只要該ABM仍然能夠結合至該靶抗原，則變體VH和VL與揭露於表12A中的各個VH或VL係至少90%、95%、97%、98%或99%同一的，如藉由Biacore、表面電漿共振(SPR)和/或BLI(生物膜層干涉技術，例如，Octet測定)測定中的至少一種所測量的。
在一些實施方式中，MBM可以包含ABM，該ABM係如在WO 2020/052692中所述之CD3結合分子或其抗原結合結構域。表AA至表AJ-2(統稱為「表A」)列出了可以包括在CD3結合ABM中的CD3結合序列的序列。
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Figure 109116556-A0202-12-0228-299
Figure 109116556-A0202-12-0229-300
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表AA中的組C1 CDR序列係基於CD3結合分子NOV292、NOV589、NOV567和在結合物名稱中包括「sp11a」的CD3結合分子的卡巴特CDR序列、喬西亞CDR序列、IMGT CDR序列、及其組合。表AB中的組C2 CDR序列係基於CD3結合分子NOV453、NOV229、NOV580、NOV221和在結合物名稱中包括「sp9a」的CD3結合分子的卡巴特CDR序列、喬西亞CDR序列、IMGT CDR序列、及其組合。表AC中的組C3 CDR序列係基於CD3結合分子NOV123、sp10b、NOV110、和NOV832的卡巴特CDR序列、喬西亞CDR序列、IMGT CDR序列、及其組合。
WO 2020/052692的實例中所述之CD3結合分子的具體CDR序列列於表AB-1至表AH-2中。WO 2020/052692中所述之VH和VL序列分別列於表AJ-1和表AJ-2中。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含具有表AA、表AB、或表AC中列出的任一CDR共有序列的胺基酸序列的重鏈CDR。在具體的實施方式中，CD3 ABM可以包含(或可替代地，由以下組成：)選自表AA、表AB、或表AC中所述之重鏈CDR中的一個、兩個、三個、或更多個重鏈CDR。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含具有表AA、表AB、或表AC中列出的任一CDR共有序列的胺基酸序列的輕鏈CDR。在具體的實施方式中，CD3 ABM可以包含(或可替代地，由以下組成：)選自表AA、表AB、或表AC中所述之輕鏈CDR中的一個、兩個、三個、或更多個輕鏈CDR。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AA中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，在表AA中指定為X1 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X1 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AA中指定為X2 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X2 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AA中指定為X3 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AA中指定為X3 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X3 的胺基酸係Q。在一些實施方式中，在表AA中指定為X4 的胺基酸係H。在一些實施方式中，在表AA中指定為X4 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X5 的胺基酸係M。在一些實施方式中，在表AA中指定為X5 的胺基酸係L。在一些實施方式中，在表AA中指定為X6 的胺基酸係K。在一些實施方式中，在表AA中指定為X6 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AA中指定為X7 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X7 的胺基酸係K。在一些實施方式中，在表AA中指定為X55 的胺基酸係F。在一些實施方式中，在表AA中指定為X55 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X55 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X8 的胺基酸係W。在一些實施方式中，在表AA中指定為X8 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X8 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X8 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X9 的胺基酸係W。在一些實施方式中，在表AA中指定為X9 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X9 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X9 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X10 的胺基酸係H。在一些實施方式中，在表AA中指定為X10 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X11 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定 為X11 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AA中指定為X12 的胺基酸係I。在一些實施方式中，在表AA中指定為X12 的胺基酸係L。在一些實施方式中，在表AA中指定為X13 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AA中指定為X13 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AA中指定為X14 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AA中指定為X14 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AA中指定為X15 的胺基酸係D。在一些實施方式中，在表AA中指定為X15 的胺基酸係E。在一些實施方式中，在表AA中指定為X15 的胺基酸係L。在一些實施方式中，在表AA中指定為X16 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AA中指定為X16 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AA中指定為X16 的胺基酸係E。在一些實施方式中，在表AA中指定為X17 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AA中指定為X17 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X18 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AA中指定為X18 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X19 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AA中指定為X19 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X20 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AA中指定為X20 的胺基酸係L。在一些實施方式中，在表AA中指定為X21 的胺基酸係F。在一些實施方式中，在表AA中指定為X21 的胺基酸係E。在一些實施方式中，在表AA中指定為X22 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X22 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X23 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X23 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AA中指定為X24 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AA中指定為X24 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AA中指定為X25 的胺基酸係H。在一些實施方式中，在表AA中指定為X25 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AA中指定為X26 的胺基酸係F。在一些實施方式中，在表AA中指定為X26 的胺基酸係Y。在 一些實施方式中，在表AA中指定為X27 的胺基酸係W。在一些實施方式中，在表AA中指定為X27 的胺基酸係Y。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C1-1。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C1-2。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C1-3。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C1-4。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C1-5。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C1-6。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C1-7。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C1-8。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C1-9。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C1-10。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C1-11。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-12。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-13。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-14。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-15。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-16。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C1-17。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C1-18。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C1-19。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C1-20。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C1-21。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C1-22。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C1-23。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AB中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，在表AB中指定為X28 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AB中指定為X28 的胺基酸係I。在一些實施方式中，在表AB中指定為X29 的胺基酸係F。在一些實施方式中，在表AB中指定為X29 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AB中指定為X30 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AB中指定為X30 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X31 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AB中指定為X31 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X32 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AB中指定為X32 的胺基酸係K。在一些實施方式中，在表AB中指定為X33 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AB中指定為X33 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AB中指定為X34 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X34 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AB中指定為X35 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AB中指定為X35 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AB中指定為X36 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X36 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AB中指定為X37 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AB中指定為X37 的胺基酸係T。在一些實施方式中，在表AB中指定為X37 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X38 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AB中指定為X38 的胺基酸係D。在一些實施方式中，在表AB中指定為X39 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AB中指定為X39 的胺基酸係K。在一些實施方式中，在表AB中指定為X40 的胺基酸係D。在一些實施方式中，在表AB中指定為X40 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AB中指定為X41 的胺基酸係H。在一些實施方式中，在表AB中指定為X41 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在 表AB中指定為X42 的胺基酸係Q。在一些實施方式中，在表AB中指定為X42 的胺基酸係E。在一些實施方式中，在表AB中指定為X43 的胺基酸係R。在一些實施方式中，在表AB中指定為X43 的胺基酸係S。在一些實施方式中，在表AB中指定為X43 的胺基酸係G。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C2-1。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C2-2。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C2-3。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C2-4。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C2-5。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C2-6。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C2-7。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C2-8。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C2-9。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C2-10。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C2-11。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C2-12。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C2-13。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C2-14。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C2-15。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C2-16。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C2-17。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AC中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，在表AC中指定為X44 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AC中指定為X44 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AC中指定為X45 的胺基酸係H。在一些實施方式中，在表AC中指定為X45 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AC中指定為X46 的胺基酸係D。在一些實施方式中，在表AC中指定為X46 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AC中指定為X47 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AC中指定為X47 的胺基酸係G。在一些實施方式中，在表AC中指定為X48 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AC中指定為X48 的胺基酸係K。在一些實施方式中，在表AC中指定為X49 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AC中指定為X49 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AC中指定為X50 的胺基酸係N。在一些實施方式中，在表AC中指定為X50 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AC中指定為X51 的胺基酸係A。在一些實施方式中，在表AC中指定為X51 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AC中指定為X52 的胺基酸係Y。在一些實施方式中，在表AC中指定為X52 的胺基酸係F。在一些實施方式中，在表AC中指定為X53 的胺基酸係I。在一些實施方式中，在表AC中指定為X53 的胺基酸係V。在一些實施方式中，在表AC中指定為X54 的胺基酸係I。在一些實施方式中，在表AC中指定為X54 的胺基酸係H。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C3-1。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C3-2。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C3-3。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H1序列C3-4。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C3-5。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C3-6。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H2序列C3-7。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C3-8。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-H3序列C3-9。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C3-10。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C3-11。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L1序列C3-12。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C3-13。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L2序列C3-14。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C3-15。在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含CDR-L3序列C3-16。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AD-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AD-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AE-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AE-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AF-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AF-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AG-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AG-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AH-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AH-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含表AI-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列，以及表AI-2中所列出的對應CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含具有表AB-1、表AC-1、表AD-1、表AE-1、表AF-1、表AG-1、表AH-1、或表AI-1中列出的任一CDR的胺基酸序列的重鏈CDR。在具體的實施方式中，CD3 ABM可以包含(或可替代地，由以下組成：)選自表AB-1、表AC-1、表AD-1、表AE-1、表AF-1、表AG-1、表AH-1、和表AI-1中所述之重鏈CDR中的一個、兩個、三個、或更多個重鏈CDR。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含具有表AB-2、表AC-2、表AD-2、表AE-2、表AF-2、表AG-2、表AH-2、或表AI-2中列出的任一CDR的胺基酸序列的輕鏈CDR。在具體的實施方式中，CD3 ABM可以包含(或可替代地，由以下組成：)選自表AB-2、表AC-2、表AD-2、表AE-2、表AF-2、表AG-2、表AH-2、和表AI-2中所述之輕鏈CDR中的一個、兩個、三個、或更多個輕鏈CDR。
其他CD3 ABM包括已突變的胺基酸，但其CDR區與表A中所述之CDR序列仍然具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性。在一些實施方式中，此類CD3 ABM包括突變型胺基酸序列，其中當與表A中所述之CDR序列相比時，CDR區中不超過1、2、3、4或5個胺基酸已突變。
在一些實施方式中，CD3 ABM可以包含具有表A中所述之任何VH和/或VL結構域的胺基酸序列的VH和/或VL結構域。其他CD3 ABM包括VH和/或VL結構域，該結構域包含與表A中所述之VH和/或VL序列具有至少80%、85%、90%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列。在一些實施方式中，CD3 ABM包括VH和/或VL結構域，其中當與表A中所述之序列中所描述的VH和/或VL結構域相比時，不超過1、2、3、4或5個胺基酸已突變，同時保留了基本上相同的治療活性。
VH和VL序列(胺基酸序列和編碼該胺基酸序列的核苷酸序列)可以「混合並匹配」以產生其他的CD3 ABM。可以使用本領域已知的結合測定法(例如，ELISA測定法)測試這種「混合且匹配的」CD3 ABM。當鏈被混合且匹配時，來自特定VH/VL配對的VH序列應當用結構上相似的VH序列置換。來自特定VH/VL配對的VL序列應當用結構上相似的VL序列置換。
因此，在一個實施方式中，CD3 ABM包含：重鏈可變區(VH)，其包含選自表A-J1中所述之任一VH序列的胺基酸序列；和輕鏈可變區(VL)，其包含表A-J2中所述之胺基酸序列。
在一些實施方式中，特異性結合至人CD3的該抗原結合結構域係基於非免疫球蛋白的並且相反地，衍生自非抗體支架蛋白，例如在5.3.2節中所述之非抗體支架蛋白之一。在實施方式中，特異性結合至人CD3的抗原結合結構域包含WO 2017/013136中所述之Affilin-144160。Affilin-144160具有以下胺基酸序列：
Figure 109116556-A0202-12-0284-353
Figure 109116556-A0202-12-0284-354
(SEQ ID NO：305)。
5.7.2.TCR-α/β ABM
MBM可以含有特異性結合至TCR-α鏈、TCR-β鏈、或TCR-αβ二聚體的ABM。示例性抗TCR-α/β抗體係已知的(參見例如，US 2012/0034221；Borst等人，1990,Hum Immunol.[人類免疫學]29(3)：175-88(描述了抗體BMA031))。表13中提供了抗體BMA031的VH、VL、和卡巴特CDR序列。
Figure 109116556-A0202-12-0284-2927
Figure 109116556-A0202-12-0285-356
在實施方式中，TCR ABM可以包含抗體BMA031的CDR序列。在其他實施方式中，TCR ABM可以包含抗體BMA031的VH和VL序列。
5.7.3.TCR-γ/δABM
MBM可以含有特異性結合至TCR-γ鏈、TCR-δ鏈、或TCR-γδ二聚體的ABM。示例性抗TCR-γ/δ抗體係已知的(參見例如，美國專利案號5,980,892(描述了δTCS1，其藉由以登錄號HB 9578保藏於ATCC的雜交瘤產生))。
5.8.CD2 ABM
5.8.1.基於免疫球蛋白的CD2 ABM
1型TBM可以包含為抗CD2抗體或其抗原結合結構域的ABM。示例性抗CD2抗體係已知的(參見例如，US 6,849,258、CN102827281A、US 2003/0139579 A1、和US 5,795,572)。表14提供了可以包含在抗CD2抗體或其抗原結合片段中的示例性CDR、VH、和VL序列，以用於本揭露之MBM。
Figure 109116556-A0202-12-0286-2928
Figure 109116556-A0202-12-0287-358
在一些實施方式中，CD2 ABM包含CD2-1的CDR序列(SEQ ID NO：312-317)。在一些實施方式中，CD2 ABM包含CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列(分別為SEQ ID NO：318和319)。在一些實施方式中，CD2 ABM包含hu1CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列(分別為SEQ ID NO：320和321)。在一些實施方式中，CD2 ABM包含hu2CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列(分別為SEQ ID NO：318和321)。
在其他實施方式中，CD2 ABM可以包含由雜交瘤產生的抗體9D1的CDR序列，該雜交瘤於2012年5月16日保藏於中國培養物保藏委員會普通微生物中心，其保藏號為CGMCC 6132，並且其描述於CN102827281A中。在其他實施方式中，CD2 ABM可以包含由雜交瘤產生的抗體LO-CD2b的CDR序列，該雜交瘤於1999年6月22日保藏於美國模式培養物保藏所，其保藏號為PTA-802，並且其描述於US 2003/0139579 A1中。在又其他實施方式中，CD2 ABM可以包含由在重組大腸桿菌中表現選殖的構建體產生的CD2 SFv-Ig的CDR序列，該重組 大腸桿菌於1993年4月9日保藏於ATCC，其保藏號為69277，並且其描述於US5,795,572中。
在其他實施方式中，CD2 ABM可以包含抗體9D1的VH和VL序列。在其他實施方式中，CD2 ABM可以包含抗體LO-CD2b的VH和VL序列。在又其他實施方式中，CD2 ABM可以包含由在重組大腸桿菌中表現選殖的構建體產生的CD2 SFv-Ig的VH和VL序列，該重組大腸桿菌具有ATCC保藏號69277。
5.8.2.基於CD58的CD2 ABM
在某些方面，本揭露提供了1型TBM，其包含作為配位基的CD2ABM。該CD2ABM特異性結合至人CD2，其天然配位基係CD58，也稱為LFA-3。CD58/LFA-3蛋白係在多種細胞類型表面上表現(Dustin等人，1991,Annu.Rev.Immunol.[免疫學年度綜述]9：27)並在以抗原依賴性和抗原非依賴性兩種方式介導T細胞與APC的相互作用中發揮作用(Wallner等人，1987,J.Exp.Med.[實驗醫學雜誌]166：923)的糖蛋白。因此，在某些方面，該CD2ABM係CD58部分。如本文所用，CD58部分包含與CD58的CD2結合部分具有至少70%序列同一性(例如，與CD58的CD2結合部分具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性)的胺基酸序列。人CD58的序列具有Uniprot標識符P19256(www.uniprot.org/uniprot/P19256)。已經確定，含有全長CD58的胺基酸殘基30-123(即，在下表15中指定為CD58-6的序列)的CD58片段足以結合至CD2。Wan等人，1999,Cell[細胞]97：791-803。因此，在某些方面，CD58部分包含與CD58的胺基酸30-123具有至少70%序列同一性(例如，與指定為CD58-6的胺基酸序列具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、 81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性)的胺基酸序列。
CD58與CD2之間的相互作用已經藉由x射線結晶學和分子模型繪製出來。殘基E25、K29、K30、K32、D33、K34、E37、D84和K87的取代(其中編號係指成熟多肽中的)減少了與CD2的結合。Ikemizu等人，1999,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]96：4289-94。因此，在一些實施方式中，該CD58部分保留E25、K29、K30、K32、D33、K34、E37、D84和K87處的野生型殘基。
相比之下，下列取代(其中編號係指全長多肽)不影響與CD2的結合：F29S；V37K；V49Q；V86K；T113S；和L121G。因此，CD58部分可以包括一個、兩個、三個、四個、五個或所有六個前述取代。
在一些實施方式中，該CD58部分被工程化以包括一對半胱胺酸取代基，其在重組表現時產生二硫橋。可以被半胱胺酸取代以在表現時形成二硫橋的示例性胺基酸對(其中編號係指全長多肽)係(a)V45C取代和M105C取代；(b)V54C取代和G88C取代；(c)V45C取代和M114C取代；以及(d)W56C取代和L90C取代。
示例性CD58部分提供在以下表15中：
Figure 109116556-A0202-12-0289-359
Figure 109116556-A0202-12-0290-360
Figure 109116556-A0202-12-0291-361
5.8.3.基於CD48的CD2 ABM
在某些方面，本揭露提供了MBM，其包含作為CD48部分的CD2 ABM。如本文所用，CD48部分包含與CD48的CD2結合部分具有至少70%序列同一性(例如，與CD48的CD2結合部分具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性)的胺基酸序列。人CD48的序列具有Uniprot標識符P09326(www.uniprot.org/uniprot/P09326)，其包括訊息肽(胺基酸1-26)和GPI錨(胺 基酸221-243)。在某些方面，CD48部分包含與由具有Uniprot標識符P09326的胺基酸27-220組成的胺基酸序列具有至少70%序列同一性(例如，至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性)的胺基酸序列。人CD48具有Ig樣C2 I型結構域(具有Uniprot標識符P09326的胺基酸29-127)和Ig樣C22型結構域(具有Uniprot標識符P09326的胺基酸132-212)。因此，在一些實施方式中，CD48部分包含與由具有Uniprot標識符P09326的胺基酸29-212組成的胺基酸序列、與C2I型結構域(具有Uniprot標識符P09326的胺基酸29-127)和/或與Ig樣C22型結構域(具有Uniprot標識符P09326的胺基酸132-212)具有至少70%序列同一性(例如，至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性)的胺基酸序列。在一些實施方式中，CD48部分可以相對於具有Uniprot標識符P09326的序列包含一種或多種天然變體。例如，CD48部分可以包括E102Q取代。又如，CD48部分可以包含對應於CD-48同種型或其CD2結合部分(例如，具有Uniprot標識符P09326-2的同種型或其CD2結合部分)的胺基酸序列。
5.9.腫瘤相關抗原ABM
2型TBM可以包含特異性結合至腫瘤相關抗原(TAA)的ABM。在一些實施方式中，該TAA係人TAA。該抗原可能存在或不存在於正常細胞上。在某些實施方式中，與正常細胞相比，該TAA在腫瘤細胞上優先表現或上調。在其他實施方式中，該TAA係譜系標記物。
在某些實施方式中，與正常B細胞相比，該TAA在癌性B細胞上表現或上調。在其他實施方式中，該TAA係B細胞譜系標記物。
預期任何類型的B細胞惡性腫瘤都可以被本揭露之MBM靶向。可以被靶向的典型類型的B細胞惡性腫瘤包括何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤(NHL)、和多發性骨髓瘤。NHL的實例包括彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)、濾泡性淋巴瘤、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)/小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)、外膜細胞淋巴瘤(MCL)、邊緣區淋巴瘤、柏基特氏淋巴瘤、淋巴漿細胞性淋巴瘤(瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症)、毛細胞白血病、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、原發性縱隔大B細胞淋巴瘤、縱隔灰區淋巴瘤(MGZL)、脾邊緣區B細胞淋巴瘤、MALT的結外邊緣區B細胞淋巴瘤、結節邊緣區B細胞淋巴瘤、和原發性滲出性淋巴瘤。
除了CD19之外可以被MBM(例如，TBM)靶向的TAA的實例包括BCMA、CD20、CD22、CD123、CD33、CLL1、CD138(也稱為Syndecan-1、SDC1)、CS1、CD38、CD133、FLT3、CD52、TNFRSF13C(TNF受體超家族成員13C，在本領域中也稱為BAFFR：B細胞活化因子受體)、TNFRSF13B(TNF受體超家族成員13B，在本領域中也稱為TACI：跨膜活化因子和CAML交互因子)、CXCR4(C-X-C模體趨化因子受體4)、PD-L1(計劃性死亡配位基1)、LY9(淋巴細胞抗原9，在本領域中也稱為CD229)、CD200、FCGR2B(IgG受體IIb的Fc片段，在本領域中也稱為CD32b)、CD21、CD23、CD24、CD40L、CD72、CD79a、和CD79b。在一些實施方式中，該TAA係BCMA。在一些實施方式中，該TAA係CD20。在一些實施方式中，該TAA係CD22。在一些實施方式中，該TAA係CD123。在一些實施方式中，該TAA係CD33。在一些實施方式中，該TAA係CLL1。在一些實施方式中，該TAA係CD138。在一些實施方式中，該TAA係CS1。在一些實施方式中，該TAA係CD38。在一些實施方式中，該TAA係CD133。在一些實施方式中，該TAA係FLT3。在一些實施方式中，該TAA係CD52。在一些實施方式中，該TAA係TNFRSF13C。在一些實施方式中，該TAA 係TNFRSF13B。在一些實施方式中，該TAA係CXCR4。在一些實施方式中，該TAA係PD-L1。在一些實施方式中，該TAA係LY9。在一些實施方式中，該TAA係CD200。在一些實施方式中，該TAA係CD21。在一些實施方式中，該TAA係CD23。在一些實施方式中，該TAA係CD24。在一些實施方式中，該TAA係CD40L。在一些實施方式中，該TAA係CD72。在一些實施方式中，該TAA係CD79a。在一些實施方式中，該TAA係CD79b。
TAA結合ABM可以包含例如抗TAA抗體或其抗原結合片段。該抗TAA抗體或抗原結合片段可以包含例如表16中所列出抗體的CDR序列。在一些實施方式中，該抗TAA抗體或其抗原結合結構域具有表16中所列出抗體的重鏈和輕鏈可變區序列。
Figure 109116556-A0202-12-0294-2929
Figure 109116556-A0202-12-0295-363
Figure 109116556-A0202-12-0296-364
在某些實施方式中，該TAA選自BCMA和CD20。在一些實施方式中，該TAA係BCMA。「BCMA」係指B細胞成熟抗原。BCMA(也稱為TNFRSF17、BCM或CD269)係腫瘤壞死受體(TNFR)家族的成員，並且主要在終末分化的B細胞(例如記憶B細胞和漿細胞)上表現。其配位基包括B細胞活化因子(BAFF)和增殖誘導配位基(APRIL)。蛋白質BCMA由基因TNFRSF17編碼。示例性BCMA序列可獲得於Uniprot數據庫，登錄號為Q02223。
在某些方面，2型TBM包含特異性結合至BCMA的ABM3，例如抗BCMA抗體或其抗原結合結構域。該抗BCMA抗體或其抗原結合結構域可以包含例如表17A-17G中所列出的CDR、VH、VL、或scFV序列。
Figure 109116556-A0202-12-0296-365
Figure 109116556-A0202-12-0297-366
Figure 109116556-A0202-12-0298-367
Figure 109116556-A0202-12-0299-368
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Figure 109116556-A0202-12-0301-370
Figure 109116556-A0202-12-0302-371
Figure 109116556-A0202-12-0303-372
Figure 109116556-A0202-12-0304-373
Figure 109116556-A0202-12-0305-374
Figure 109116556-A0202-12-0306-375
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Figure 109116556-A0202-12-0309-378
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Figure 109116556-A0202-12-0313-382
Figure 109116556-A0202-12-0314-383
Figure 109116556-A0202-12-0314-384
Figure 109116556-A0202-12-0315-385
Figure 109116556-A0202-12-0316-386
Figure 109116556-A0202-12-0316-387
Figure 109116556-A0202-12-0317-388
Figure 109116556-A0202-12-0318-389
Figure 109116556-A0202-12-0318-390
Figure 109116556-A0202-12-0319-391
Figure 109116556-A0202-12-0320-392
Figure 109116556-A0202-12-0321-393
Figure 109116556-A0202-12-0321-394
Figure 109116556-A0202-12-0322-395
Figure 109116556-A0202-12-0323-396
Figure 109116556-A0202-12-0324-397
Figure 109116556-A0202-12-0325-398
在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-1的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-2的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-3的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-4的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-5的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-6的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-7的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-8的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-9的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-10 的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-11的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-12的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-13的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-14的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-15的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-16的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-17的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-18的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-19的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-20的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-21的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-22的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-23的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-24的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-25的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-26的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-27的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-28的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-29的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-30的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-31的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-32的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-33的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-34的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-35的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-36的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-37的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-38的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-39的CDR序列。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-40的CDR序列。
在一些實施方式中，該CDR由卡巴特編號定義，如在表17B和17E中所列出。在其他實施方式中，該CDR由喬西亞編號定義，如在表17C和17F中 所列出。在又其他實施方式中，該CDR由卡巴特和喬西亞編號的組合定義，如在表17D和17G中所列出。
在一些實施方式中，其中ABM3與BCMA結合的2型TBM可以包含BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和輕鏈可以變序列。
在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-1的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-2的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-3的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-4的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-5的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-6的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-7的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-8的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-9的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-10的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-11的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-12的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-13的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-14的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-15的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-16的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-17的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-18的 重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-19的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-20的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-21的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-22的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-23的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-24的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-25的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-26的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-27的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-28的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-29的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-30的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-31的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-32的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-33的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-34的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-35的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-36的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-37的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-38的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-39的 重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。在一些實施方式中，該ABM包含BCMA-40的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
5.10.核酸和宿主細胞
在另一方面，本揭露提供了編碼本揭露之CD19結合分子的核酸(即，多核苷酸)。在一些實施方式中，該CD19結合分子由單個核酸編碼。在其他實施方式中，該CD19結合分子由多個(例如兩個、三個、四個或更多個)核酸編碼。
單個核酸可以編碼包含單一多肽鏈的CD19結合分子、包含兩條或更多條多肽鏈的CD19結合分子、或包含多於兩條多肽鏈的CD19結合分子的一部分(例如，單個核酸可以編碼包含三條、四條或更多條多肽鏈CD19結合分子的兩條多肽鏈，或包含四條或更多條多肽鏈CD19結合分子的三條多肽鏈)。對於表現的單獨控制，編碼兩條或更多條多肽鏈的可以讀框可以在單獨的轉錄調節元件(例如，啟動子和/或增強子)的控制下。編碼兩個或更多個多肽的可以讀框還可以藉由相同的轉錄調節元件控制，並且藉由內部核糖體進入位點(IRES)序列分離，以允許翻譯進不同多肽中。
在一些實施方式中，包含兩條或更多條多肽鏈的CD19結合分子由兩種或更多種核酸編碼。編碼CD19結合分子的核酸的數量可以等於或小於CD19結合分子中的多肽鏈的數量(例如，當多於一條多肽鏈被單個核酸編碼時)。
該核酸可以是DNA或RNA(例如，mRNA)。
在另一方面，本揭露提供了宿主細胞和含有本揭露之核酸的載體。該核酸可以存在於單一載體或不同載體中，該載體存在於相同宿主細胞或不同宿主細胞中，如下文中更詳細地所述之。
5.10.1.載體
本揭露提供了包含核苷酸序列的載體，該核苷酸序列編碼本文所述之CD19結合分子或CD19結合分子組分。在一個實施方式中，該載體包含編碼本文所述之基於免疫球蛋白的ABM的核苷酸。在一個實施方式中，該載體包含編碼本文所述之Fc結構域的核苷酸。在一個實施方式中，該載體包含編碼本文所述之基於重組非免疫球蛋白的ABM的核苷酸。載體可以編碼一個或多個ABM、一個或多個Fc結構域、一個或多個基於非免疫球蛋白的ABM、或其任何組合(例如，當多種組分或子組分被編碼為單一多肽鏈時)。在一個實施方式中，載體包含本文所述之核苷酸序列。該載體包括但不限於病毒、質體、黏粒、λ噬菌體或酵母人工染色體(YAC)。
可以使用多種載體系統。例如，一類載體利用衍生自動物病毒的DNA元件，例如牛乳頭瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、桿狀病毒、逆轉錄酶病毒(勞氏肉瘤病毒、MMTV或MOMLV)或SV40病毒。另一類載體利用衍生自RNA病毒的RNA元件，例如塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus)、東部馬腦炎病毒(Eastern Equine Encephalitis virus)和黃病毒。
另外，將DNA穩定地整合進其染色體中的細胞可以藉由引入一個或多個標記物(其允許對轉染的宿主細胞進行選擇)進行選擇。該標記物可以向例如營養缺陷型宿主提供質子移變，可以提供殺微生物劑抗性(例如，抗生素)、或對重金屬如銅等的抗性。該可以選擇的標記物基因可以直接連接至待表現的DNA序列，或藉由共轉化引入相同的細胞。mRNA的最佳合成也可能需要另外的元件。該等元件可以包括拼接信號，以及轉錄啟動子、增強子、和終止信號。
一旦含有構建體的表現載體或DNA序列被製備用於表現，該表現載體可以被轉染或引入適宜的宿主細胞中。可以使用多種技術，例如像，原生質體融合、磷酸鈣沈澱、電穿孔、逆轉錄病毒轉導、病毒轉染、基因槍、基於 脂質的轉染或其他的常規技術，來實現這一目標。用於培養所得的轉染細胞和回收表現的多肽之方法和條件係熟悉該項技術者已知的，並且可以根據基於本說明書中所用的特定表現載體和哺乳動物宿主細胞進行改變或優化。
5.10.2.細胞
本揭露還提供了包含本揭露之核酸的宿主細胞。
在一個實施方式中，該宿主細胞被基因工程化以包含本文所述之一個或多個核酸。
在一個實施方式中，藉由使用表現盒使宿主細胞基因工程化。短語「表現盒」係指核苷酸序列，其能夠影響在與此類序列相容的宿主中的基因的表現。此類盒可以包括啟動子，具有或不具有內含子的可以讀框和終止信號。還可以使用在實現表現中必需或有幫助的其他因子，例如誘導型啟動子。
本揭露還提供了包含本文所述之載體的宿主細胞。
該細胞可以是但不限於真核細胞、細菌細胞、昆蟲細胞、或人細胞。合適的真核細胞包括，但不限於Vero細胞、HeLa細胞、COS細胞、CHO細胞、HEK293細胞、BHK細胞、和MDCKII細胞。合適的昆蟲細胞包括，但不限於Sf9細胞。
5.11.具有延長的體內半衰期的CD19結合分子
可以修飾本揭露之CD19結合分子以具有延長的體內半衰期。
可以使用多種策略來延長本揭露之CD19結合分子的半衰期。例如，藉由與聚乙二醇(PEG)、reCODE PEG、抗體支架、聚唾液酸(PSA)、羥乙基澱粉(HES)、白蛋白結合配位基和碳水化合物遮罩的化學連接；藉由與結合血清蛋白(如白蛋白、IgG、FcRn)的蛋白質的遺傳融合和轉移；藉由與結合血清蛋白的其他結合部分(如奈米抗體、Fab、DARPin、avimer、親合體和anticalin)偶聯(遺傳地或化學地)；藉由與rPEG、白蛋白、白蛋白的結構域、 白蛋白結合蛋白和Fc的遺傳融合；或藉由摻入奈米載體、緩釋配製物或醫療裝置中。
為了延長體內CD19結合分子的血清循環，可以藉由PEG與包含CD19結合分子的多肽的N-末端或C-末端的位點特異性軛合或經由離胺酸殘基上存在的ε-胺基，將惰性聚合物分子(如高分子量PEG)附接至具有或不具有多功能連接子的CD19結合分子。為了使CD19結合分子聚乙二醇化，在一個或多個PEG基團附接至該CD19結合分子的條件下可以使該分子與聚乙二醇(PEG)(如PEG的反應性酯或醛衍生物)反應。聚乙二醇化可以藉由醯化反應或烷基化反應採用反應性PEG分子(或類似的反應性水溶性聚合物)來進行。如本文所用的，該術語「聚乙二醇」旨在涵蓋已用於衍生化其他蛋白質的任何形式的PEG，如單(C1-C10)烷氧基-或芳氧基-聚乙二醇或聚乙二醇-馬來醯亞胺。在一個實施方式中，待聚乙二醇化的CD19結合分子係非糖基化抗體。將使用導致最小生物活性損失的直鏈或支鏈聚合物衍生化。可以藉由SDS-PAGE和質譜法密切監測軛合程度，以確保PEG分子與抗體的適當軛合。未反應的PEG可以藉由尺寸排阻層析法或藉由離子交換層析法與抗體-PEG軛合物分離。可以使用熟悉該項技術者熟知之方法，例如藉由本文所述之免疫測定，測試PEG衍生化抗體的結合活性以及體內功效。使蛋白質聚乙二醇化之方法係已知的並且可以應用於本揭露之CD19結合分子。參見例如，Nishimura等人的EP 0154316和Ishikawa等人的EP 0401384。
其他改良的聚乙二醇化技術包括重構化學正交定向工程技術(ReCODE PEG)，其經由包含tRNA合成酶和tRNA的重構系統將化學上指定的側鏈摻入生物合成蛋白中。該技術能夠將超過30個新胺基酸摻入大腸桿菌、酵母和哺乳動物細胞中的生物合成蛋白中。tRNA在琥珀密碼子所定位的任何位置摻入規範性胺基酸，從而將琥珀從終止密碼子轉換成發出摻入化學上指定的胺基酸的信號的密碼子。
重組聚乙二醇化技術(rPEG)也可以用於血清半衰期延長。該技術一般包括將300-600個胺基酸非結構化蛋白質尾部與現有的藥物蛋白質基因融合。因為這種非結構化蛋白質鏈的表觀分子量比其實際分子量大了約15倍，所以這種蛋白質的血清半衰期大大增加。與需要化學軛合和再純化的傳統PEG化相反，該製備過程大大簡化並且產物係均勻的。
聚唾液酸化係另一種技術，它利用天然聚合物聚唾液酸(PSA)來延長活性壽命和提高治療性肽和蛋白質的穩定性。PSA係唾液酸的聚合物(一種糖)。當用於蛋白質和治療肽藥物遞送時，聚唾液酸對軛合提供保護性微環境。這增加治療性蛋白在循環中的有效壽命並防止它被免疫系統識別。PSA聚合物天然存在於人體中。它被某些細菌採用，該等細菌已經進化了數百萬年以用它來包被其細胞壁。該等天然聚唾液酸化的細菌則能夠藉由分子擬態挫敗身體的防禦系統。PSA-大自然的終極秘密技術，可以容易地大量產自這種細菌並具有預定的物理特徵。即使與蛋白質偶聯，細菌PSA也是完全非免疫原性的，因為它在化學上與人體中的PSA相同。
另一種技術包括使用與CD19結合分子連接的羥乙基澱粉(「HES」)衍生物。HES係一種源自蠟質玉米澱粉的改性天然聚合物，並可以藉由人體的酶代謝。通常投與HES溶液以替代缺乏的血液體積並改善血液的流變學特性。CD19結合分子的Hes化能夠藉由增加分子的穩定性以及藉由降低腎清除率來延長循環半衰期，從而導致生物活性增加。藉由改變不同的參數如HES的分子量，可以定制多種HES CD19結合分子軛合物。
還可以生成具有增加的體內半衰期的CD19結合分子，其將一個或多個胺基酸修飾(即，取代、插入或缺失)引入IgG恒定結構域、或其FcRn結合片段(例如Fc或鉸鏈Fc結構域片段)。參見例如，國際公開案號WO 98/23289；國際公開案號WO 97/34631；和美國專利案號6,277,375。
此外，CD19結合分子可以軛合至白蛋白、白蛋白結構域、白蛋白結合蛋白或白蛋白結合抗體或其抗體片段，以使分子在體內更穩定或具有更長的體內半衰期。該等技術係熟知的，參見例如，國際公開案號WO 93/15199、WO 93/15200和WO 01/77137；和歐洲專利案號EP 413,622。
本揭露之CD19結合分子也可以與一個或多個人血清白蛋白(HSA)多肽或其部分融合。已經在WO 93/15199、WO 93/15200和EP 413 622中提出作為白蛋白融合蛋白的組分的白蛋白作為多種蛋白質的載體的用途。還已經提出使用HSA的N-末端片段用於與多肽融合(EP 399 666)。因此，藉由將該分子遺傳地或化學地融合或軛合至白蛋白，可以穩定或延長保質期，和/或保留分子在溶液中、在體外和/或在體內的活性持續延長的時間段。關於HSA融合的另外之方法可以在例如WO 2001077137和WO 200306007中找到。在實施方式中，在哺乳動物細胞系(例如，CHO細胞系)中進行融合蛋白的表現。
本揭露之CD19結合分子還可以與結合至白蛋白(例如人血清白蛋白(HSA))的抗體或其抗體片段融合。白蛋白結合抗體或其抗體片段可以是Fab、scFv、Fv、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體、駱駝科動物VHH結構域、VH或VL結構域、或全長單株抗體(mAb)。
本揭露之CD19結合分子還可以與脂肪酸融合以延長它們的半衰期。適用於連接生物分子的脂肪酸已在本領域中描述，例如在WO2015/200078、WO2015/191781、US2013/0040884中。合適的半衰期延長性脂肪酸包括定義為C6-70烷基鏈、C6-70烯基鏈或C6-70炔基鏈的那些，其中每個被至少一個羧酸(例如1、2、3或4個CO2H)取代，並視需要進一步被羥基基團取代。例如，本文所述之CD19結合分子可以與具有以下式A1、A2或A3中任一個的脂肪酸連接：
Figure 109116556-A0202-12-0335-400
R1 係CO2 H或H；
R2 、R3 和R4 彼此獨立地是H、OH、CO2 H、-CH=CH2 或-C=CH；
Ak係支鏈C6 -C30 伸烷基；
n、m和p彼此獨立地是6和30之間的整數；或醯胺、酯或其藥學上可接受的鹽。
在一些實施方式中，該脂肪酸具有式A1，例如具有式A1的脂肪酸，其中n和m獨立地為8至20，例如10至16。在另一個實施方式中，該脂肪酸部分具有式A1，並且其中R2 和R3 中的至少一個係CO2 H。
在一些實施方式中，該脂肪酸選自下式：
Figure 109116556-A0202-12-0335-399
其中Ak3 、Ak4 、Ak5 、Ak6 和Ak7 獨立地是(C8 -20 )伸烷基，R5 和R6 獨立地是(C8-20 )烷基。
在一些實施方式中，該脂肪酸選自下式：
Figure 109116556-A0202-12-0336-402
在一些實施方式中，該脂肪酸選自下式：
Figure 109116556-A0202-12-0336-401
在一些實施方式中，該脂肪酸具有式A2或A3。在具體的實施方式中，該軛合物包含式A2的脂肪酸部分(其中p係8至20)或式A3的脂肪酸部分(其中Ak係C8-20 伸烷基)。
5.12.抗體-藥物軛合物
本揭露之CD19結合分子可以例如經由連接子與藥物部分軛合。儘管一種或多種ABM可能基於非免疫球蛋白支架，例如包含一種或多種基於非免疫球蛋白的ABM的MBM(如包含Affilin-144160的TCR ABM)，但為了方便起見此類軛合物在本文中被稱為抗體-藥物軛合物(或「ADC」)。
在某些方面，該藥物部分發揮細胞毒性或細胞抑制活性。在一個實施方式中，該藥物部分選自美登木素生物鹼、驅動蛋白樣蛋白KIF11抑制劑、V-ATP酶(液泡型H+-ATP酶)抑制劑、促凋亡劑、Bcl2(B細胞淋巴瘤2)抑制劑、MCL1(髓細胞白血病1)抑制劑、HSP90(熱休克蛋白90)抑制劑、IAP(細胞凋亡抑制劑)抑制劑、mTOR(雷帕黴素機制性靶標)抑制劑、微管穩定劑、微管去穩定劑、奧瑞斯他汀、朵拉司他汀、MetAP(甲硫胺酸胺基肽酶)、CRM1(染色體維持1)抑制劑、DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制劑、蛋白酶體抑制劑、線粒體中磷醯基轉移反應的抑制劑、蛋白質合成抑制劑、激酶抑制劑、CDK2(細胞週期蛋白依賴性激酶2)抑制劑、CDK9(細胞週期蛋白依賴性激酶9)抑制劑、驅動蛋白抑制劑、HDAC(組蛋白脫乙醯酶)抑制劑、DNA損傷劑、DNA烷基化劑、DNA嵌入劑、DNA小溝結合物、RNA聚合酶抑制劑、拓撲異構酶抑制劑、或DHFR(二氫葉酸還原酶)抑制劑。在一些實施方式中，該藥物部分係放射性金屬離子，例如(如α-發射體，如213Bi)或用於將放射性金屬離子(包括但不限於131In、131LU、131Y、131Ho、131Sm)與多肽軛合的大環螯合劑。在一個實施方式中，該大環螯合劑係1,4,7,10-四氮雜環十二烷-N,N',N",N'''-四乙酸(DOTA)。
在一個實施方式中，該連接子選自可切割連接子、不可切割連接子、親水連接子、原帶電荷(procharged)連接子、或基於二羧酸的連接子。
在一些實施方式中，該ADC係根據結構式(I)的化合物：
[D-L-XY]n -Ab
或其鹽，其中每個「D」彼此獨立地代表細胞毒性劑和/或細胞抑制劑(「藥物」)；每個「L」彼此獨立地代表連接子；「Ab」代表本文所述之CD19結合分子；每個「XY」代表在連接子上的官能基Rx和在抗體上的「互補性」官能基Ry 之間形成的連接，並且n代表與ADC連接的藥物的數量，或ADC的藥物與抗體的比率(DAR)。
可以包含ADC的多種抗體(Ab)的一些實施方式包括上述CD19結合分子的多種實施方式。
在結構式(I)的ADC和/或鹽的一些實施方式中，每個D係相同的和/或每個L係相同的。
可以包含本揭露之ADC的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑(D)和連接子(L)的一些實施方式，以及與ADC連接的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的數量，在下面更詳細地描述。
5.12.1.細胞毒性劑和/或細胞抑制劑
該細胞毒性劑和/或細胞抑制劑可以是已知抑制細胞生長和/或細胞複製和/或殺死細胞的任何藥劑，特別是癌和/或腫瘤細胞。許多具有細胞毒性和/或細胞抑制特性的藥劑在文獻中是已知的。多種類型的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的非限制性實例包括，例如但不限於，放射性核素、烷基化劑、拓撲異構酶I抑制劑、拓撲異構酶II抑制劑、DNA嵌入劑(例如，溝結合劑，如小溝結合物)、RNA/DNA抗代謝物、細胞週期調節劑、激酶抑制劑、蛋白質合成抑制劑、組蛋白脫乙醯酶抑制劑、線粒體抑制劑、和抗有絲分裂劑。
以下提供該等多種類型中的某些內的藥劑的具體非限制性實例。
烷基化劑：asaley((L-白胺酸，N-[N-乙醯基-4-[雙-(2-氯乙基)胺基]-DL-苯丙胺醯基]-，乙酯；NSC 167780；CAS註冊號3577897))；AZQ((1,4-環己二烯-1,4-二胺基甲酸，2,5-雙(1-氮丙啶基)-3,6-二側氧基-，二乙酯；NSC 182986；CAS註冊號57998682))；BCNU((N,N'-雙(2-氯乙基)-N-亞硝基脲；NSC 409962；CAS註冊號154938))；白消安(1,4-丁二醇二甲磺酸鹽；NSC 750；CAS註冊號55981)；(羧基鄰苯二甲酸)鉑(NSC 27164；CAS註冊號65296813)；CBDCA((順式-(1,1-環丁烷二羧根基)二胺鉑(II))；NSC 241240；CAS註冊號41575944))；CCNU((N-(2-氯乙基)-N'-環己基-N-亞硝基脲；NSC 79037；CAS註冊號13010474))；CHIP(異丙鉑；NSC 256927)；苯丁酸氮芥(NSC 3088；CAS註冊號305033)；氯脲黴素((2-[[[(2-氯乙基)亞硝基胺基]羰基]胺基]-2-去氧-D-哌喃葡萄糖；NSC 178248；CAS註冊號54749905))；順式鉑(順鉑；NSC 119875；CAS註冊號15663271)；克羅米松(clomesone)(NSC 338947；CAS註冊號88343720)；氰基
Figure 109116556-A0202-12-0339-326
啉代阿黴素(NCS 357704；CAS註冊號88254073)；環代松(cyclodisone)(NSC 348948；CAS註冊號99591738)；二去水衛矛醇(dianhydrogalactitol)(5,6-二環氧衛矛醇；NSC 132313；CAS註冊號23261203)；氟代多巴((5-[(2-氯乙基)-(2-氟乙基)胺基]-6-甲基-尿嘧啶；NSC 73754；CAS註冊號834913)；庚磺胺(NSC 329680；CAS註冊號96892578)；海恩酮(NSC 142982；CAS註冊號23255938)；美法侖(NSC 8806；CAS註冊號3223072)；甲基CCNU((1-(2-氯乙基)-3-(反式-4-甲基環己烷)-1-亞硝基脲；NSC 95441；13909096)；絲裂黴素C(NSC 26980；CAS註冊號50077)；米托唑醯胺(NSC 353451；CAS註冊號85622953)；氮芥((雙(2-氯乙基)甲胺鹽酸鹽；NSC 762；CAS註冊號55867)；PCNU((1-(2-氯乙基)-3-(2,6-二側氧基-3-哌啶基)-1-亞硝基脲；NSC 95466；CAS註冊號13909029))；哌
Figure 109116556-A0202-12-0339-327
烷基化劑((1-(2-氯乙基)-4-(3- 氯丙基)-哌
Figure 109116556-A0202-12-0340-328
二鹽酸鹽；NSC 344007))；哌
Figure 109116556-A0202-12-0340-329
二酮(NSC 135758；CAS註冊號41109802)；哌泊溴烷(pipobroman)((N,N-雙(3-溴丙醯)哌
Figure 109116556-A0202-12-0340-330
；NSC 25154；CAS註冊號54911))；甲基絲裂黴素(N-甲基絲裂黴素C；NSC 56410；CAS註冊號801525)；螺旋乙內醯脲芥(NSC 172112；CAS註冊號：56605164)；替羅昔隆(異氰尿酸三縮水甘油酯；NSC 296934；CAS註冊號2451629)、四氯環己鉑(NSC 363812；CAS註冊號62816982)；硫替派(thio-tepa)(N,N',N"-三-1,2-乙二亞甲基硫代磷醯胺；NSC 6396；CAS註冊號52244)；三伸乙基三聚氰胺(NSC 9706；CAS註冊號51183)；尿嘧啶氮芥(去甲基多潘；NSC 34462；CAS註冊號66751)；Yoshi-864((雙(3-甲氧基甲氧丙基)胺鹽酸鹽；NSC 102627；CAS註冊號3458228)。
拓撲異構酶I抑制劑：喜樹鹼(NSC 94600；CAS註冊號7689-03-4)；多種喜樹鹼衍生物和類似物(例如，NSC 100880、NSC 603071、NSC 107124、NSC 643833、NSC 629971、NSC 295500、NSC 249910、NSC 606985、NSC 74028、NSC 176323、NSC 295501、NSC 606172、NSC 606173、NSC 610458、NSC 618939、NSC 610457、NSC 610459、NSC 606499、NSC 610456、NSC 364830、和NSC 606497)；morpholinisoxorubicin(NSC 354646；CAS註冊號89196043)；SN-38(NSC 673596；CAS註冊號86639-52-3)。
拓撲異構酶II抑制劑：阿黴素(NSC 123127；CAS註冊號25316409)；胺萘非特(benzisoquinolinedione；NSC 308847；CAS註冊號69408817)；m-AMSA((4'-(9-吖啶胺基)-3'-甲氧基甲烷磺醯苯胺；NSC 249992；CAS註冊號51264143))；蒽吡唑類衍生物((NSC 355644)；依託泊苷(VP-16；NSC 141540；CAS註冊號33419420)；吡唑并吖啶((吡唑并[3,4,5-k1]吖啶-2(6H)-丙胺，9-甲氧基-N,N-二甲氧基-5-硝基-，單甲烷磺酸鹽；NSC 366140；CAS註冊號99009219)；鹽酸比生群(bisantrene hydrochloride)(NSC 337766；CAS 註冊號71439684)；柔紅黴素(NSC 821151；CAS註冊號23541506)；去氧阿黴素(NSC 267469；CAS註冊號63950061)；米托蒽醌(NSC 301739；CAS註冊號70476823)；美諾立爾(NSC 269148；CAS註冊號71628961)；N,N-二卞基正定黴素(NSC 268242；CAS註冊號70878512)；惡烷噻唑(oxanthrazole)(NSC 349174；CAS註冊號105118125)；正定苯醯肼(rubidazone)(NSC 164011；CAS註冊號36508711)；替尼泊苷(VM-26；NSC 122819；CAS註冊號29767202)。
DNA嵌入劑：安麯黴素(CAS註冊號4803274)；抗黴素A(CAS註冊號89675376)；托馬黴素(tomaymycin)(CAS註冊號35050556)；DC-81(CAS註冊號81307246)；西伯利亞黴素(sibiromycin)(CAS註冊號12684332)；吡咯并苯并二氮雜衍生物(CAS註冊號945490095)；SGD-1882((S)-2-(4-胺基苯基)-7-甲氧基-8-(3-4(S)-7-甲氧基-2-(4-甲氧基苯基)--5-側氧基-5,11a-二氫-1H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮雜-8-基)氧基)丙氧-基)-1H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮呯-5(11aH)-酮)；SG2000(SJG-136；(11aS,11a'S)-8,8'-(丙烷-1,3-二基雙(氧基))雙(7-甲氧基-2-亞甲基-2,3--二氫-1H-苯并[e]吡咯并[1,2-a][1,4]二氮呯-5(11aH)-酮)；NSC 694501；CAS註冊號232931576)。
RNA/DNA抗代謝物：L-阿拉諾新(NSC 153353；CAS註冊號59163416)；5-氮雜胞苷(NSC 102816；CAS註冊號320672)；5-氟尿嘧啶(NSC 19893；CAS註冊號51218)；阿西維辛(NSC 163501；CAS註冊號42228922)；胺基蝶呤衍生物N-[2-氯-5-[[(2,4-二胺基-5-甲基-6-喹唑啉)甲基]胺基]苯甲醯基-]L-天冬胺酸(NSC 132483)；胺基蝶呤衍生物N-[4-[[(2,4-二胺基-5-乙基-6-喹唑啉)甲基]胺基]苯甲醯基]L-天冬胺酸(NSC 184692)；胺基蝶呤衍生物N-[2-氯-4-[[(2,4-二胺基-6-喋啶基)甲基]胺基]苯甲醯基]L-天冬胺酸一水合物(NSC 134033)；葉酸拮抗劑(antifo)((Nα -(4-胺基-4-去氧喋醯基)-N7 -半鄰苯二甲醯基-L-鳥胺酸；NSC 623017))；貝克可溶性安替弗(Baker's soluble antifol) (NSC 139105；CAS註冊號41191042)；二氯烯丙基甲花醌((2-(3,3-二氯烯丙基)-3-羥基-1,4-萘醌；NSC 126771；CAS註冊號36417160)；布奎那(brequinar)(NSC 368390；CAS註冊號96201886)；喃氟啶尿嘧啶(ftorafur)((先質藥物；5-氟-1-(四氫-2-呋喃基)-尿嘧啶；NSC 148958；CAS註冊號37076689)；5,6-二氫-5-氮雜胞苷(NSC 264880；CAS註冊號62402317)；胺甲喋呤(NSC 740；CAS註冊號59052)；胺甲喋呤衍生物(N-[[4-[[(2,4-二胺基-6-喋啶基)甲基]甲胺基]-1-萘基]羰基]L-麩胺酸；NSC 174121)；PALA((N-(膦醯基乙醯基)-L-天冬胺酸酯；NSC 224131；CAS註冊號603425565)；吡唑呋喃菌素(pyrazofurin)(NSC 143095；CAS註冊號30868305)；三甲曲沙(trimetrexate)(NSC 352122；CAS註冊號82952645)。
DNA抗代謝物：3-HP(NSC 95678；CAS註冊號3814797)；2'-去氧-5-氟尿嘧啶(NSC 27640；CAS註冊號50919)；5-HP(NSC 107392；CAS註冊號19494894)；α-TGDR(α-2'-去氧-6-硫鳥嘌呤；NSC 71851 CAS註冊號2133815)；甘胺阿非迪黴素(aphidicolin glycinate)(NSC 303812；CAS註冊號92802822)；ara C(阿糖胞苷；NSC 63878；CAS註冊號69749)；5-氮雜-2'-去氧胞苷(NSC 127716；CAS註冊號2353335)；β-TGDR(β-2'-去氧-6-硫鳥嘌呤；NSC 71261；CAS註冊號789617)；環胞苷(NSC 145668；CAS註冊號10212256)；胍唑(NSC 1895；CAS註冊號1455772)；羥基脲(NSC 32065；CAS註冊號127071)；肌苷二醛(inosine glycodialdehyde)(NSC 118994；CAS註冊號23590990)；麥克菌素(macbecin)II(NSC 330500；CAS註冊號73341738)；吡唑啉咪唑(pyrazoloimidazole)(NSC 51143；CAS註冊號6714290)；硫鳥嘌呤(NSC 752；CAS註冊號154427)；硫嘌呤(NSC 755；CAS註冊號50442)。
細胞週期調節劑：水飛薊賓(CAS註冊號22888-70-6)；表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG；CAS註冊號989515)；原花青素衍生物(例如， 原花青素A1[CAS註冊號103883030]、原花青素B1[CAS註冊號20315257]、原花青素B4[CAS註冊號29106512]、檳榔鞣質(arecatannin)B1[CAS註冊號79763283])；異黃酮類(例如，染料木素[4',5,7-三羥基異黃酮；CAS註冊號446720]、大豆苷元[4',7-二羥基異黃酮，CAS註冊號486668])；吲哚-3-甲醇(CAS註冊號700061)；槲皮素(NSC 9219；CAS註冊號117395)；雌莫司汀(NSC89201；CAS註冊號2998574)；諾考達唑(CAS註冊號31430189)；鬼臼毒素(CAS註冊號518285)；酒石酸長春瑞濱(NSC 608210；CAS註冊號125317397)；念珠藻素(NSC 667642；CAS註冊號124689652)。
激酶抑制劑：阿法替尼(CAS註冊號850140726)；阿昔替尼(CAS註冊號319460850)；ARRY-438162(比米替尼(binimetinib))(CAS註冊號606143899)；博舒替尼(CAS註冊號380843754)；卡博替尼(CAS註冊號1140909483)；色瑞替尼(CAS註冊號1032900256)；克唑替尼(CAS註冊號877399525)；達拉菲尼(CAS註冊號1195765457)；達沙替尼(NSC 732517；CAS註冊號302962498)；埃羅替尼(NSC 718781；CAS註冊號183319699)；依維莫司(NSC 733504；CAS登記號159351696)；福坦替尼(NSC 745942；CAS註冊號901119355)；吉非替尼(NSC 715055；CAS註冊號184475352)；依魯替尼(CAS註冊號936563961)；伊馬替尼(NSC 716051；CAS註冊號220127571)；拉帕替尼(CAS註冊號388082788)；樂伐替尼(CAS註冊號857890392)；木利替尼(CAS 366017096)；尼祿替尼(CAS註冊號923288953)；尼達尼布(CAS註冊號656247175)；帕博西尼(CAS註冊號571190302)；帕唑帕尼(NSC 737754；CAS註冊號635702646)；哌加他尼(CAS註冊號222716861)；帕納替尼(CAS註冊號1114544318)；雷帕黴素(NSC 226080；CAS註冊號53123889)；瑞戈非尼(CAS註冊號755037037)；AP 23573(地磷莫司)(CAS註冊號572924540)；INCB018424(盧梭替尼)(CAS註冊號1092939177)； ARRY-142886(司美替尼)(NSC 741078；CAS註冊號606143-52-6)；西羅莫司(NSC 226080；CAS註冊號53123889)；索拉非尼(NSC 724772；CAS註冊號475207591)；舒尼替尼(NSC 736511；CAS登記號341031547)；托法替尼(CAS註冊號477600752)；替西羅莫司(NSC 683864；CAS註冊號163635043)；曲美替尼(CAS註冊號871700173)；凡德他尼(CAS註冊號443913733)；維莫非尼(CAS註冊號918504651)；SU6656(CAS註冊號330161870)；CEP-701(來沙替尼(lesaurtinib))(CAS註冊號111358884)；XL019(CAS註冊號945755566)；PD-325901(CAS登記號391210109)；PD-98059(CAS登記號167869218)；具有ATP競爭性的TORC1/TORC2抑制劑，包括PI-103(CAS註冊號371935749)、PP242(CAS註冊號1092351671)、PP30(CAS註冊號1092788094)、Torin 1(CAS註冊號1222998368)、LY294002(CAS註冊號154447366)、XL-147(CAS註冊號934526893)、CAL-120(CAS註冊號870281348)、ETP-45658(CAS註冊號1198357797)、PX 866(CAS註冊號502632668)、GDC-0941(CAS註冊號957054307)、BGT226(CAS註冊號1245537681)、BEZ235(CAS註冊號915019657)、XL-765(CAS註冊號934493762)。
蛋白質合成抑制劑：吖啶黃素(acriflavine)(CAS註冊號65589700)；阿米卡星(NSC 177001；CAS註冊號39831555)；阿貝卡星(CAS註冊號51025855)；阿司米星(CAS註冊號55779061)；阿奇黴素(NSC 643732；CAS註冊號83905015)；康黴素(CAS註冊號4696768)；金黴素(NSC 13252；CAS註冊號64722)；克拉黴素(NSC 643733；CAS註冊號81103119)；克林達黴素(CAS註冊號18323449)；氯莫環素(CAS註冊號1181540)；放線菌酮(cycloheximide)(CAS註冊號66819)；放線菌素D(dactinomycin)(NSC 3053；CAS註冊號50760)；達福普丁(CAS註冊號112362502)；地美環素(CAS註冊 號127333)；地貝卡星(CAS註冊號34493986)；二氫鏈黴素(dihydrostreptomycin)(CAS註冊號128461)；地紅黴素(CAS註冊號62013041)；強力黴素(doxycycline)(CAS註冊號17086281)；吐根鹼(NSC 33669；CAS註冊號483181)；紅黴素(NSC 55929；CAS註冊號114078)；氟紅黴素(CAS註冊號83664208)；弗氏菌絲素(framycetin)(新黴素B；CAS註冊號119040)；建它黴素(NSC 82261；CAS註冊號1403663)；甘胺環素類，如替加環素(CAS註冊號220620097)；潮黴素B(CAS註冊號31282049)；異帕米星(CAS註冊號67814760)；交沙黴素(NSC 122223；CAS註冊號16846245)；康黴素(CAS註冊號8063078)；酮內酯類，如泰利黴素(CAS註冊號191114484)、喹紅黴素(CAS註冊號205110481)、和索利黴素(CAS註冊號760981837)；潔黴素(CAS註冊號154212)；賴甲環素(CAS註冊號992212)；甲氯環素(NSC 78502；CAS註冊號2013583)；美他環素(鹽酸美他環素(rondomycin)；NSC 356463；CAS註冊號914001)；麥迪黴素(CAS註冊號35457808)；米諾環素(NSC 141993；CAS註冊號10118908)；美歐卡黴素(CAS註冊號55881077)；新黴素(CAS註冊號119040)；奈替米星(CAS註冊號56391561)；竹桃黴素(CAS註冊號3922905)；惡唑烷酮類，如伊皮唑胺(CAS註冊號165800044)、利奈唑胺(CAS註冊號165800033)、潑斯唑來(CAS註冊號252260029)、雷得唑來(CAS註冊號869884786)、ranbezolid(CAS註冊號392659380)、sutezolid(CAS註冊號168828588)、特地唑胺(CAS註冊號856867555)；氧四環素(NSC 9169；CAS註冊號2058460)；巴龍黴素(CAS註冊號7542372)；青哌環素(CAS註冊號4599604)；肽基轉移酶抑制劑，例如，氯黴素(NSC 3069；CAS註冊號56757)和衍生物，如疊氮氯黴素(CAS註冊號13838089)、氟苯尼考(CAS註冊號73231342)、和甲碸黴素(CAS註冊號15318453)，以及截短側耳素(pleuromutilins)如瑞他帕林(CAS註冊號224452668)、泰妙菌素(CAS註冊號55297955)、沃尼妙林(CAS註冊號 101312929)；吡利黴素(CAS註冊號79548735)；嘌呤黴素(NSC 3055；CAS註冊號53792)；奎奴普丁(CAS註冊號120138503)；核糖黴素(CAS註冊號53797356)；羅他黴素(CAS註冊號74014510)；羅利黴素(CAS註冊號751973)；羅紅黴素(CAS註冊號80214831)；西索米星(CAS註冊號32385118)；奇黴素(spectinomycin)(CAS註冊號1695778)；螺旋黴素(CAS註冊號8025818)；鏈陽菌素，如普那黴素(CAS註冊號270076603)、奎奴普丁/達福普丁(CAS註冊號126602899)、和維及黴素(CAS註冊號11006761)；鏈黴素(CAS註冊號57921)；四環素(NSC 108579；CAS註冊號60548)；妥布黴素(CAS註冊號32986564)；醋竹桃黴素(CAS註冊號2751099)；泰樂菌素(CAS註冊號1401690)；威大黴素(CAS註冊號49863481)。
組蛋白脫乙醯酶抑制劑：abexinostat(CAS註冊號783355602)；貝利司他(NSC 726630；CAS註冊號414864009)；西達本胺(CAS註冊號743420022)；恩替諾特(CAS註冊號209783802)；givinostat(CAS註冊號732302997)；mocetinostat(CAS註冊號726169739)；帕比司他(CAS註冊號404950807)；奎西諾司他(quisinostat)(CAS註冊號875320299)；resminostat(CAS註冊號864814880)；羅米地辛(CAS註冊號128517077)；蘿蔔硫素(CAS註冊號4478937)；thioureidobutyronitrile(KevetrinTM ；CAS註冊號6659890)；丙戊酸(NSC 93819；CAS註冊號99661)；伏立諾他(NSC 701852；CAS註冊號149647789)；ACY-1215(rocilinostat；CAS註冊號1316214524)；CUDC-101(CAS註冊號1012054599)；CHR-2845(特諾司他(tefinostat)；CAS註冊號914382608)；CHR-3996(CAS註冊號1235859138)；4SC-202(CAS註冊號910462430)；CG200745(CAS註冊號936221339)；SB939(pracinostat；CAS註冊號929016966)。
線粒體抑制劑：水鬼蕉鹼(pancratistatin)(NSC 349156；CAS註冊號96281311)；玫瑰紅-123(CAS註冊號63669709)；依地福新(NSC 324368；CAS註冊號70641519)；d-α-生育酚琥珀酸酯(NSC 173849；CAS註冊號4345033)；化合物11β(CAS註冊號865070377)；阿司匹林(NSC 406186；CAS註冊號50782)；玫瑰樹鹼(CAS註冊號519233)；小檗鹼(CAS註冊號633658)；淺藍菌素(CAS註冊號17397896)；GX015-070(Obatoclax®；1H-吲哚，2-(2-((3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基)亞甲基)-3-甲氧基-2H-吡咯-5-基)-；NSC 729280；CAS註冊號803712676)；南蛇藤醇(雷公藤紅素；CAS註冊號34157830)；二甲雙胍(NSC 91485；CAS註冊號1115704)；亮綠(NSC5011；CAS註冊號633034)；ME-344(CAS註冊號1374524556)。
抗有絲分裂劑；別秋水仙鹼(NSC 406042)；奧瑞斯他汀，如MMAE(單甲基奧瑞斯他汀E；CAS註冊號474645-27-7)和MMAF(單甲基奧瑞斯他汀F；CAS註冊號745017-94-1；軟海綿素B(NSC 609395)；秋水仙鹼(NSC 757；CAS註冊號64868)；秋水仙鹼衍生物(N-苯甲醯基-脫乙醯基苯甲醯胺；NSC 33410；CAS註冊號63989753)；尾海兔素10(NSC 376128；CAS註冊號110417-88-4)；美登素(NSC 153858；CAS註冊號35846-53-8)；根瘤菌素(rhozoxin)(NSC 332598；CAS註冊號90996546)；紫杉醇(NSC 125973；CAS註冊號33069624)；紫杉醇衍生物((2'-N-[3-(二甲胺基)丙基]戊二酸紫杉醇；NSC 608832)；硫代秋水仙鹼(3-去甲基硫代秋水仙鹼；NSC 361792)；三苯甲基半胱胺酸(NSC 49842；CAS註冊號2799077)；硫酸長春鹼(NSC 49842；CAS註冊號143679)；硫酸長春新鹼(NSC 67574；CAS註冊號2068782)。
包括或可以被修飾以包括與CD19結合分子的附接位點的任何該等藥劑可以包括在本文揭露的ADC中。
在一些實施方式中，該細胞毒性劑和/或細胞抑制劑係抗有絲分裂劑。
在一些實施方式中，該細胞毒性劑和/或細胞抑制劑係奧瑞斯他汀，例如，單甲基奧瑞斯他汀E(「MMAE：)或單甲基奧瑞斯他汀F(「MMAF」)。
5.12.2.ADC連接子
在本揭露之ADC中，該細胞毒性劑和/或細胞抑制劑藉由ADC連接子的方式與CD19結合分子連接。將細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與ADC的CD19結合分子連接的ADC連接子可以是短的、長的、疏水的、親水的、柔性的或剛性的，或者可以由各自獨立地具有上述提及特性中的一種或多種的片段組成，使得該連接子可以包括具有不同特性的片段。連接子可以是多價的，使得它們將多於一種藥劑共價連接至CD19結合分子上的單個位點，或者連接子可以是單價的，使得它們將單一藥劑共價連接至CD19結合分子上的單個位點。
如技術人員將理解的，該ADC連接子藉由在一個位置與細胞毒性劑和/或細胞抑制劑形成共價連接並在另一個位置與CD19結合分子形成共價連接將細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與CD19結合分子連接。藉由ADC連接子上的官能基與藥劑和CD19結合分子上的官能基之間的反應形成共價連接。如本文所用，該表現「ADC連接子」旨在包括(i)ADC連接子的非軛合形式，其包括能夠將ADC連接子共價連接至細胞毒性和/或細胞抑制劑的官能基和能夠將ADC連接子共價連接至CD19結合分子的官能基；(ii)ADC連接子的部分軛合形式，其包括能夠將ADC連接子共價連接至CD19結合分子並且共價連接至細胞毒性和/或細胞抑制劑的官能基，或反之亦然；和(iii)ADC連接子的完全軛合形式，其共價連接至細胞毒性和/或細胞抑制劑和CD19結合分子兩者。在本揭露之ADC連接子和ADC，以及用於將連接子-藥劑與CD19結合分子軛合的合成子的一些 實施方式中，包含ADC連接子上的官能基的部分和在ADC連接子與CD19結合分子之間形成的共價連接具體地分別表示為Rx 和XY。
該ADC連接子可以(但不必)對細胞外的條件具有化學穩定性，並且可以設計成在細胞內裂解、死亡和/或以其他方式特異性降解。可替代地，可以使用不被設計為在細胞內特異性切割或降解的ADC連接子。選擇穩定或不穩定的ADC連接子可以取決於細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的毒性。對於對正常細胞有毒的藥劑，可以使用穩定的連接子。可以使用選擇性或靶向的且對正常細胞具有較低毒性的藥劑，ADC連接子對細胞外環境的化學穩定性不太重要。多種用於在ADC的上下文中將藥物與CD19結合分子連接的ADC連接子係已知的。該等ADC連接子中以及其他ADC連接子的任一個可以用於將細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與本揭露之ADC的CD19結合分子連接。
可以用於將許多細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與單個CD19結合分子連接的示例性多價ADC連接子描述於例如WO 2009/073445；WO 2010/068795；WO 2010/138719；WO 2011/120053；WO 2011/171020；WO 2013/096901；WO 2014/008375；WO 2014/093379；WO 2014/093394；WO 2014/093640中。例如，Mersana等人開發的Fleximer連接子技術具有使具有良好的物理化學特性的高DAR ADC成為可能的潛力。如下所示，Mersana技術基於經由一系列酯鍵將藥物分子摻入增溶的聚乙縮醛主鏈中。該方法可提供高負載的ADC(DAR高達20)，同時保持良好的物理化學特性。
樹突型連接子的另外的實例可以在以下文獻中找到：US 2006/116422；US 2005/271615；de Groot等人，2003,Angew.Chem.Int.Ed.[應用化學-國際版]42：4490-4494；Amir等人，2003,Angew.Chem.Int.Ed.[應用化學-國際版]42：4494-4499；Shamis等人，2004,J.Am.Chem.Soc.[美國化學學會雜誌]126：1726-1731；Sun等人，2002,Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters[生物 有機化學與藥物化學通訊]12：2213-2215；Sun等人，2003,Bioorganic & Medicinal Chemistry[生物有機化學和藥物化學快報]11：1761-1768；King等人，2002,Tetrahedron Letters[四面體快報]43：1987-1990。
可以使用的示例性單價ADC連接子描述於，例如，Nolting,2013,Antibody-Drug Conjugates[抗體-藥物軛合物],Methods in Molecular Biology[分子生物學中之方法]1045：71-100；Kitson等人，2013,CROs─MOs--Chemica─ggi--Chemistry Today[CROs─MOs--Chemica─ggi--今日化學]31(4)：30-38；Ducry等人，2010,Bioconjugate Chem.[生物軛合化學]21：5-13；Zhao等人，2011,J.Med.Chem.[藥物化學雜誌]54：3606-3623；美國專利案號7,223,837；美國專利案號8,568,728；美國專利案號8,535,678；和WO 2004010957。
藉由舉例但不限制的方式，可以包括在ADC中的一些可切割和不可切割的連接子描述如下。
5.12.2.1.可切割的ADC連接子
在某些實施方式中，該選擇的ADC連接子在體內係可切割的。可切割的ADC連接子可以包括化學或酶促不穩定的或者可以降解的連接。可切割的ADC連接子通常依賴於細胞內的過程來釋放藥物，例如細胞質的減少、暴露於溶酶體中的酸性條件、或藉由細胞內特定蛋白酶或其他酶的切割。可切割的ADC連接子通常摻入一個或多個化學鍵，該化學鍵係可化學切割的或可酶切的，而ADC連接子的其餘部分係不可切割的。在某些實施方式中，ADC連接子包含化學不穩定基團，例如腙和/或二硫化物基團。包含化學不穩定基團的連接子利用血漿和一些細胞質區室之間的差異特性。促進含有腙的ADC連接子的藥物釋放的細胞內條件係內體和溶酶體的酸性環境，而含有二硫化物的ADC連接子在含有高硫醇濃度的細胞溶質中還原，例如麩胱甘肽。在某些實施方式中， 藉由使用化學不穩定基團附近的取代基引入空間位阻，可以增加包含化學不穩定基團的ADC連接子的血漿穩定性。
酸性不穩定基團，例如腙，在血液中性pH環境(pH 7.3-7.5)的全身循環過程中保持完整，並且一旦ADC內化為細胞的輕度酸性內體的區室(pH 5.0-6.5)和溶酶體的隔室(pH 4.5-5.0)則進行水解並釋放藥物。這種pH依賴性釋放機制與藥物的非特異性釋放有關。為了增加ADC連接子的腙基團的穩定性，可以藉由化學修飾(例如取代)改變ADC連接子，允許調節以在溶酶體中實現更有效的釋放，同時使循環損失最小化。
含腙的ADC連接子可以含有另外的切割位點，例如另外的酸不穩定切割位點和/或酶促不穩定切割位點。包括示例性含腙的ADC連接子的ADC包括以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0351-403
Figure 109116556-A0202-12-0351-404
Figure 109116556-A0202-12-0351-405
其中D和Ab分別代表細胞毒性劑和/或細胞抑制劑(藥物)和Ab，並且n代表與CD19結合分子連接的藥物-ADC連接子的數量。在某些ADC連接子如連接子(Ig)中，該ADC連接子包含兩個可切割的基團-二硫化物和腙部分。對於此類ADC連接子，未經修飾的游離藥物的有效釋放需要酸性pH或二硫化物還原和酸性pH。例如(Ih)和(Ii)的連接子已經顯示出對單個腙切割位點有效。
當ADC內化到酸性細胞區室中時，在體循環期間保持完整並經歷水解並釋放藥物的另外的ADC連接子包括碳酸鹽。此類ADC連接子可以用於細胞毒性劑和/或細胞抑制劑可以藉由氧共價附接的情況。
可以包括在ADC連接子中的其他酸不穩定基團包括含有順式-烏頭醯基的ADC連接子。順式-烏頭醯基化學物質使用與醯胺鍵並置的羧酸以加速醯胺在酸性條件下的水解。
可切割的ADC連接子也可以包括二硫化物基團。二硫化物在生理pH下是熱力學穩定的並且被設計成在細胞內內化時釋放藥物，其中與細胞外環境相比細胞質提供顯著更多的還原環境。二硫鍵的斷裂通常需要細胞質硫醇輔因子的存在，例如(還原的)麩胱甘肽(GSH)，使得含二硫化物的ADC連接子在循環中相當穩定，選擇性地釋放細胞溶質中的藥物。細胞內酶蛋白二硫化物異構酶或能夠切割二硫鍵的類似酶也可以促進細胞內二硫鍵的優先切割。據報導，相比於在大約5種腫瘤細胞的循環中的GSH或半胱胺酸(最豐富的低分子量硫醇)的顯著更低濃度，GSH以範圍為0.5-10mM的濃度存在於細胞中，其中不規律的血流導致缺氧狀態，導致還原酶的活性增強，並且因此導致甚至更高的麩胱甘肽濃度。在某些實施方式中，含有二硫化物的ADC連接子的體內穩定性可以藉由ADC連接子的化學修飾來增強，例如，使用與二硫鍵相鄰的空間位阻。
包括含有二硫化物的示例性ADC連接子的ADC包括以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0353-406
Figure 109116556-A0202-12-0353-407
Figure 109116556-A0202-12-0353-408
其中D和Ab分別代表藥物和CD19結合分子，n代表與CD19結合分子連接的藥物-ADC連接子的數目，並且R在每次出現時獨立地選自例如氫或烷基。在某些實施方式中，增加與二硫鍵相鄰的空間位阻增加了ADC連接子的穩定性。當一個或多個R基團選自低級烷基如甲基時，例如(Ij)和(Il)的結構顯示出增加的體內穩定性。
可以使用的另一種類型的可切割ADC連接子係ADC連接子，其被酶特異性切割。此類ADC連接子通常是基於肽的或包括充當酶的底物的肽區域。與化學不穩定的ADC連接子相比，基於肽的ADC連接子在血漿和細胞外環境中往往更穩定。肽鍵通常具有良好的血清穩定性，因為溶酶體蛋白水解酶由於內源性抑制劑而在血液中具有非常低的活性，並且具有與溶酶體相比不利的高血液pH值。從CD19結合分子釋放藥物特別是由於溶酶體蛋白酶(例如組織蛋白酶和纖溶酶)的作用而發生。該等蛋白酶可以在某些腫瘤細胞中以升高的水平存在。
在示例性實施方式中，該可切割的肽選自四肽，如Gly-Phe-Leu-Gly(SEQ ID NO：755)、Ala-Leu-Ala-Leu(SEQ ID NO：756)；或二肽，如Val-Cit、Val-Ala、Met-(D)Lys、Asn-(D)Lys、Val-(D)Asp、Phe-Lys、Ile-Val、Asp-Val、His-Val、NorVal-(D)Asp、Ala-(D)Asp 5、Met-Lys、Asn-Lys、Ile-Pro、Me3Lys-Pro、苯基Gly-(D)Lys、Met-(D)Lys、Asn-(D)Lys、Pro-(D)Lys、Met-(D)Lys、Asn-(D)Lys、AM Met-(D)Lys、Asn-(D)Lys、AW Met-(D)Lys、和Asn-(D)Lys。在某些實施方式中，由於較長肽的疏水性，可以在較長的多肽上選擇二肽。
已經描述了多種基於二肽的可切割ADC連接子，其用於將如多柔比星、絲裂黴素、喜樹鹼、吡咯并苯并二氮呯、他利黴素和奧瑞斯他汀/奧瑞斯他汀家族成員的藥物與CD19結合分子連接(參見，Dubowchik等人，1998,J.Org.Chem.[生物軛合化學]67：1866-1872；Dubowchik等人，1998,Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有機化學與醫藥化學通訊]8(21)：3341-3346；Walker等人，2002,Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有機化學與醫藥化學通訊]12：217-219；Walker等人，2004,Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有機化學與醫藥化學通訊]14：4323-4327；Sutherland等人，2013,Blood[血液]122：1455-1463；和Francisco等人，2003,Blood[血液]102：1458-1465)。所有該等二肽ADC連接子或該等二肽ADC連接子的修飾形式都可以用於本揭露之ADC中。可以使用的其他二肽ADC連接子包括在ADC中發現的那些，例如西雅圖遺傳學公司(Seattle Genetics)的本妥昔單抗SGN-35(AdcetrisTM )、西雅圖遺傳學公司SGN-75(抗CD-70、Val-Cit-單甲基奧瑞斯他汀F(MMAE))、西雅圖遺傳學公司SGN-CD33A(抗CD-33、Val-Ala-(SGD-1882))、塞德斯醫療公司(Celldex Therapeutics)格侖妥木單抗(CDX-011)(抗NMB、Val-Cit-單甲基奧瑞斯他汀E(MMAE))、和細胞分裂素PSMA-ADC(PSMA-ADC-1301)(抗PSMA，Val-Cit-MMAE)。
可以酶切的ADC連接子可以包括自殺式間隔子，以在空間上將藥物與酶切位點分開。藥物與肽ADC連接子的直接附接可以導致藥物的胺基酸加合物的蛋白水解釋放，從而損害其活性。使用自殺式間隔子允許在醯胺鍵水解時消除完全活性的未經化學修飾的藥物。
一種自殺式間隔子係雙功能的對胺基苄醇基團，其藉由胺基基團與肽連接，形成醯胺鍵，而含胺的藥物可以藉由胺基甲酸酯官能基附接至ADC連接子的苄羥基基團(PABC)。所得的前驅藥在蛋白酶介導的切割後被活化，導致1,6-消除反應，釋放未修飾的藥物、二氧化碳和ADC連接子基團的殘餘物。以下方案描述了對胺基苄基醚的片段化和藥物的釋放：
Figure 109116556-A0202-12-0355-409
其中X-D代表未修飾的藥物。
還描述了這種自殺式基團的雜環變體。參見例如，美國專利案號7,989,434。
在一些實施方式中，該可酶切的ADC連接子係基於β-葡糖醛酸的ADC連接子。藉由溶酶體酶β-葡糖醛酸糖苷酶切割β-葡糖苷酸糖苷鍵可以實現藥 物的簡單釋放。該酶大量存在於溶酶體內，並且在一些腫瘤類型中過表現，而細胞外的酶活性低。基於β-葡萄糖醛酸的ADC連接子可以用於避免由於β-葡糖苷酸的親水性而導致ADC發生聚集的趨勢。在一些實施方式中，基於β-葡萄糖醛酸的ADC連接子可以用作與疏水性藥物連接的ADC的ADC連接子。以下方案描述了從含有基於β-葡萄糖醛酸的ADC連接子的ADC釋放藥物：
Figure 109116556-A0202-12-0356-410
已經描述了多種基於β-葡萄糖醛酸的可切割的ADC連接子，其用於將如奧瑞斯他汀、喜樹鹼和多柔比星類似物、CBI小溝結合物、和psymberin等藥物連接至CD19結合分子(參見Nolting，第5章「Linker Technology in Antibody-Drug Conjugates,[抗體-藥物軛合物中的連接子技術]」於：Methods in Molecular Biology[分子生物學方法]中，第1045卷，第71-100頁，Laurent Ducry(編 輯)，斯普林格科學與商業醫學公司(Springer Science & Business Medica,LLC,2013；Jeffrey等人，2006,Bioconjug.Chem.[生物軛合化學]17：831-840；Jeffrey等人，2007,Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有機化學與醫藥化學通訊]17：2278-2280；和Jiang等人，2005,J.Am.Chem.Soc.[美國化學學會雜誌]127：11254-11255)。所有該等基於β-葡萄糖醛酸的ADC連接子均可以用於本揭露之ADC中。
另外，含有苯酚基團的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑可以藉由苯酚氧與ADC連接子共價鍵合。WO 2007/089149中描述的一種此類ADC連接子依賴於如下方法，其中二胺基-乙烷「SpaceLink」與傳統的基於「PABO」自殺式基團一起使用以遞送苯酚。下文示意性地描述了ADC連接子的切割，其中D代表具有苯酚羥基基團的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑。
Figure 109116556-A0202-12-0357-411
可切割的ADC連接子可以包括不可切割的部分或區段，和/或可切割的區段或部分可以包括在另外的不可切割的ADC連接子中以使其可切割。僅舉例來說，聚乙二醇(PEG)和相關聚合物可以包括聚合物主鏈中的可切割的基團。例如，聚乙二醇或聚合物ADC連接子可以包括一個或多個可切割的基團，例如二硫化物、腙或二肽。
其他可以包括在ADC連接子中的可以降解連接包括藉由PEG羧酸或活化的PEG羧酸與生物活性劑上的醇基反應形成的酯鍵，其中此類酯基通常在生理條件下水解以釋放生物活性劑。可水解降解的連接包括但不限於碳酸酯連接；由胺和醛反應得到的亞胺鍵；藉由醇與磷酸基團反應形成的磷酸酯鍵；作為醛和醇的反應產物的縮醛鍵；作為甲酸酯和醇的反應產物的原酸酯鍵；以及由亞磷醯胺基團形成的寡核苷酸鍵，包括但不限於位於聚合物末端和寡核苷酸的5'羥基基團。
在某些實施方式中，該ADC連接子包含可酶切肽部分，例如，包含結構式(IVa)或(IVb)的ADC連接子：
Figure 109116556-A0202-12-0358-412
Figure 109116556-A0202-12-0358-413
或其鹽，其中：肽代表可被溶酶體酶切割的肽(圖示為C→N且未顯示羧基和胺基「末端」)；T代表包含一個或多個乙二醇單元或伸烷基鏈或其組合的聚 合物；Ra 選自氫、烷基、磺酸鹽和甲基磺酸鹽；P係從0至5的範圍內的整數；q係0或1；x係0或1；y係0或1；
Figure 109116556-A0202-12-0359-331
代表ADC連接子與細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的附接點；以及*代表與ADC連接子的其餘部分的附接點。
在某些實施方式中，該肽選自三肽或二肽。在具體的實施方式中，該二肽選自：Val-Cit；Cit-Val；Ala-Ala；Ala-Cit；Cit-Ala；Asn-Cit；Cit-Asn；Cit-Cit；Val-Glu；Glu-Val；Ser-Cit；Cit-Ser；Lys-Cit；Cit-Lys；Asp-Cit；Cit-Asp；Ala-Val；Val-Ala；Phe-Lys；Val-Lys；Ala-Lys；Phe-Cit；Leu-Cit；Ile-Cit；Phe-Arg；和Trp-Cit。在某些實施方式中，該二肽選自：Cit-Val；和Ala-Val。
可以包括在ADC中的根據結構式(IVa)的ADC連接子的具體示例性實施方式包括下面所示的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團)：
Figure 109116556-A0202-12-0359-414
Figure 109116556-A0202-12-0359-415
Figure 109116556-A0202-12-0359-416
Figure 109116556-A0202-12-0359-417
Figure 109116556-A0202-12-0360-418
Figure 109116556-A0202-12-0360-419
Figure 109116556-A0202-12-0360-420
可以包括在ADC中的根據結構式(IVb)的ADC連接子的具體示例性實施方式包括下面所示的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團)：
Figure 109116556-A0202-12-0360-421
Figure 109116556-A0202-12-0361-422
Figure 109116556-A0202-12-0361-423
Figure 109116556-A0202-12-0361-424
Figure 109116556-A0202-12-0361-425
Figure 109116556-A0202-12-0361-426
Figure 109116556-A0202-12-0362-427
Figure 109116556-A0202-12-0362-428
Figure 109116556-A0202-12-0362-429
Figure 109116556-A0202-12-0362-430
Figure 109116556-A0202-12-0362-431
Figure 109116556-A0202-12-0363-432
Figure 109116556-A0202-12-0363-433
Figure 109116556-A0202-12-0363-434
Figure 109116556-A0202-12-0363-435
Figure 109116556-A0202-12-0364-436
Figure 109116556-A0202-12-0364-437
Figure 109116556-A0202-12-0364-438
Figure 109116556-A0202-12-0364-439
在某些實施方式中，該ADC連接子包含可酶切肽部分，例如，包含結構式(IVc)或(IVd)的ADC連接子：
Figure 109116556-A0202-12-0365-440
Figure 109116556-A0202-12-0365-441
或其鹽，其中：肽代表可被溶酶體酶切割的肽(圖示為C→N且未顯示羧基和胺基「末端」)；T代表包含一個或多個乙二醇單元或伸烷基鏈或其組合的聚合物；Ra 選自氫、烷基、磺酸鹽和甲基磺酸鹽；P係從0至5的範圍內的整數；q係0或1；x係0或1；y係0或1；‧ x
Figure 109116556-A0202-12-0365-332
代表ADC連接子與細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的附接點；以及*代表與ADC連接子的其餘部分的附接點。
可以包括在ADC中的根據結構式(IVc)的ADC連接子的具體示例性實施方式包括下面所示的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團)：
Figure 109116556-A0202-12-0365-442
Figure 109116556-A0202-12-0366-443
可以包括在ADC中的根據結構式(IVd)的ADC連接子的具體示例性實施方式包括下面所示的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團)：
Figure 109116556-A0202-12-0366-444
Figure 109116556-A0202-12-0367-445
Figure 109116556-A0202-12-0368-446
在某些實施方式中，包含結構式(IVa)、(IVb)、(IVc)、或(IVd)的ADC連接子進一步包含藉由暴露於酸性介質而可切割的碳酸酯部分。在具體的實施方式中，該ADC連接子藉由氧附接至細胞毒性劑和/或細胞抑制劑。
5.12.2.2.不可切割的連接子
雖然可切割的ADC連接子可以提供某些優勢，但是包含ADC的ADC連接子不需要係可切割的。對於不可切割的ADC連接子，藥物的釋放不依賴於血漿和一些細胞質區室之間的差異特性。假定藥物的釋放在ADC經由抗原介導的胞吞作用內化並遞送至溶酶體區室後發生，其中該CD19結合分子藉由細胞內蛋白水解降解而降解至胺基酸水平。該過程釋放藥物衍生物，該藥物衍生物由藥物、ADC連接子和與ADC連接子共價附接的胺基酸殘基形成。來自具有不可切割的ADC連接子的軛合物的胺基酸藥物代謝物更親水並且通常膜可滲透性更低，這導致更少的旁鄰效應(bystander effects)和更少的非特異性毒性(與具有可切割的ADC連接子的軛合物相比)。通常，具有不可切割ADC連接子的ADC在循環中具有比具有可切割ADC連接子的ADC更高的穩定性。不可切割的ADC連接子可以是伸烷基鏈，或者本質上可以是聚合的，例如像基於聚伸烷基二醇聚合物、醯胺聚合物，或可以包括伸烷基鏈、聚伸烷基二醇和/或醯胺聚合物的區段。
已經描述了用於將藥物與CD19結合分子連接的多種不可切割的ADC連接子。參見，Jeffrey等人，2006,Bioconjug.Chem.[生物軛合化學]17；831-840；Jeffrey等人，2007,Bioorg.Med.Chem.Lett.[生物有機化學與醫藥化學 通訊]17：2278-2280；和Jiang等人，2005,J.Am.Chem.Soc.[美國化學學會雜誌]127：11254-11255。所有該等ADC連接子可以包括在本揭露之ADC中。
在某些實施方式中，該ADC連接子在體內係不可切割的，例如根據結構式(VIa)、(VIb)、(VIc)或(VId)的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團：
Figure 109116556-A0202-12-0369-447
或其鹽，其中：Ra 選自氫、烷基、磺酸鹽和甲基磺酸鹽；Rx 係包含能夠將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的官能基的部分；以及
Figure 109116556-A0202-12-0369-333
代表ADC連接子與細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的附接點)。
可以包括在ADC中的根據結構式(VIa)-(VId)的ADC連接子的具體示例性實施方式包括下面所示的ADC連接子(如圖所示，該ADC連接子包括適合於將ADC連接子與CD19結合分子共價連接的基團，並且
Figure 109116556-A0202-12-0369-334
代表與細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的附接點)：
Figure 109116556-A0202-12-0369-448
Figure 109116556-A0202-12-0369-449
Figure 109116556-A0202-12-0370-450
5.12.2.3.用於將連接子附接到CD19結合分子的基團
可以使用多種基團將ADC連接子-藥物合成子附接至CD19結合分子以產生ADC。附接基團本質上可以是親電子的，並且包括：馬來醯亞胺基團、活化的二硫化物、活性酯(例如NHS酯和HOBt酯)、鹵代甲酸酯、醯基鹵、烷基和苄基鹵化物(例如鹵代乙醯胺)。如下所討論的，還存在與「自穩定性」馬來醯亞胺和「橋接二硫化物」相關的新興技術，其可以根據本揭露使用。使用的具體基團將部分取決於與CD19結合分子的附接位點。
在下面的示意圖中描繪了在CD19結合分子軛合條件下自發水解以給出具有改善的穩定性的ADC物質的「自穩定性」馬來醯亞胺基團的一個實例。參見US20130309256 A1；還參見Lyon等人，Nature Biotech published online[網上出版的自然生物科技],doi：10.1038/nbt.2968。
Figure 109116556-A0202-12-0371-451
Figure 109116556-A0202-12-0372-452
Polytherics公司揭露了一種橋接一對巰基基團之方法，該基團衍生自天然鉸鏈二硫鍵的還原。參見，Badescu等人，2014,Bioconjugate Chem.[生物軛合化學]25：1124-1136。該反應描述於下面的示意圖中。該方法的一個優點係能夠藉由完全還原IgG(以給出4對巰基)然後與4當量的烷基化劑反應來合成富集的DAR4 ADC。含有「橋連二硫化物」的ADC具有增加的穩定性。
Figure 109116556-A0202-12-0372-453
Figure 109116556-A0202-12-0373-454
類似地，如下所述，已經開發了能夠橋接一對巰基基團的馬來醯亞胺衍生物(下面的1)。參見WO 2013/085925。
Figure 109116556-A0202-12-0373-455
5.12.2.4.ADC連接子選擇考慮
如熟悉該項技術者所知，為特定ADC選擇的ADC連接子可以受多種因素影響，包括但不限於與CD19結合分子的附接位點(例如，lys、cys或其他胺基酸殘基)、藥物藥效團的結構限制和藥物的親脂性。為ADC選擇的具體ADC連接子應尋求平衡針對特定CD19結合分子/藥物組合的該等不同因子。關於受ADC中ADC連接子選擇影響的因素的綜述，參見Nolting，第5章「Linker Technology in Antibody-Drug Conjugates,[抗體-藥物軛合物中的連接子技]」於： Antibody-Drug Conjugates：Methods in Molecular Biology[抗體-藥物偶聯物：分子生物學方法]中，第1045卷，第71-100頁，Laurent Ducry(編輯)，斯普林格科學與商業醫學公司(Springer Science & Business Medica,LLC),2013。
例如，已觀察到ADC影響對存在於抗原陽性腫瘤細胞附近的旁鄰抗原陰性細胞的殺傷。ADC對旁鄰細胞的殺傷機制表明，在ADC的細胞內加工過程中形成的代謝產物可以發揮作用。藉由抗原陽性細胞中的ADC代謝產生的中性細胞毒性代謝物似乎在旁鄰細胞殺傷中起作用，同時可以防止帶電荷的代謝物穿過膜擴散進入介質，因此不會影響旁鄰殺傷。在某些實施方式中，選擇ADC連接子以減弱由ADC的細胞代謝物引起的旁鄰殺傷效應。在某些實施方式中，選擇ADC連接子以增加旁鄰殺傷效應。
ADC連接子的特性還可以在使用和/或存儲條件下影響ADC的聚集。通常，文獻中報導的ADC含有不超過3-4個藥物分子/抗體分子(參見例如，Chari,2008,Acc Chem Res[化學研究報告]41：98-107)。由於ADC的聚集，嘗試獲得更高的藥物-抗體比(「DAR」)通常是失敗的，特別是如果藥物和ADC連接子皆為疏水的(King等人，2002,J Med Chem[藥物化學雜誌]45：4336-4343；Hollander等人，2008,Bioconjugate Chem[生物軛合化學]19：358-361；Burke等人，2009 Bioconjugate Chem[生物軛合化學]20：1242-1250)。在許多情況下，高於3-4的DAR作為增加效力的手段可以是有益的。在細胞毒性劑和/或細胞抑制劑本質上係疏水性的的情況下，可能希望選擇相對親水的ADC連接子作為減少ADC聚集的手段，尤其是在希望大於3-4的DARS的情況下。因此，在某些實施方式中，ADC連接子摻入化學部分，該化學部分在儲存和/或使用期間減少ADC的聚集。ADC連接子可以摻入極性或親水基團，例如帶電荷基團或在生理pH下變為帶電荷的基團，以減少ADC的聚集。例如，ADC連接子可以摻入帶電荷的基團，例如在生理pH下使例如羧酸鹽或質子化物(例如胺)去質子化的鹽或基團。
已報導可以產生高達20的DAR、可以用於將多種細胞毒性劑和/或細胞抑制劑與CD19結合分子連接的示例性多價ADC連接子描述於WO 2009/073445；WO 2010/068795；WO 2010/138719；WO 2011/120053；WO 2011/171020；WO 2013/096901；WO 2014/008375；WO 2014/093379；WO 2014/093394；WO 2014/093640中。
在具體的實施方式中，如藉由尺寸排阻層析法(SEC)測定，ADC在儲存或使用期間的聚集小於約10%。在具體的實施方式中，如藉由尺寸排阻層析法(SEC)測定的，ADC在儲存或使用期間的聚集小於10%，例如小於約5%、小於約4%、小於約3%、小於約2%、小於約1%、小於約0.5%、小於約0.1%、或甚至更低。
5.12.3.製造ADC之方法
可以使用熟知的化學物質合成ADC。所選擇的化學物質將尤其取決於一種或多種細胞毒性劑和/或細胞抑制劑、ADC連接子和用於將ADC連接子附接到CD19結合分子的基團的特性。通常，根據式(I)的ADC可以根據以下方案製備：
D-L-R x +Ab-R y →[D-L-XY] n -Ab (I)
其中D、L、Ab、XY和n係如前所定義的，並且R x 和R y 代表能夠彼此形成共價連接的互補基團，如上所討論的。
基團R x 和R y 的特性將取決於用於將合成子D-L-R x 與CD19結合分子連接的化學物質。通常，所用的化學物質不應改變CD19結合分子的完整性，例如其結合其靶標的能力。在一些情況下，軛合抗體的結合特性將與未軛合的CD19結合分子的結合特性非常相似。用於將分子與生物分子(特別是免疫球蛋白，其組分通常是本揭露之CD19結合分子的結構單元)軛合的多種化學物質和技術係熟知的。參見例如，Amon等人，「Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy[癌症療法中用於藥物免疫靶向的單株抗體]」於：Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy[單株抗體和癌症療法]中，Reisfeld等人編輯，艾倫利斯出版公司(Alan R.Liss,Inc.),1985；Hellstrom等人，「Antibodies For Drug Delivery[用於藥物遞送的抗體]」於：Controlled Drug Delivery[藥物控制遞送]中，Robinson等人編輯，馬塞爾．德克爾公司(Marcel Dekker,Inc.)，第2版1987；Thorpe,「Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy：A Review,[癌症療法中細胞毒性劑的抗體載體：綜述]」於：Monoclonal Antibodies '84：Biological And Clinical Applications[單株抗體'84：生物和臨床應用]中，Pinchera等人編輯，1985；「Analysis,Results,and Future Prospective of the Therapeutic Use of Radiolabeled Antibody In Cancer Therapy,[放射標記的抗體在癌症療法中的治療用途的分析、結果和未來前景]」於：Monoclonal Antibodies For Cancer Detection And Therapy[用於癌症檢測和治療的單株抗體]中，Baldwin等人編輯，學術出版社公司(Academic Press),1985；Thorpe等人，1982,Immunol.Rev.[免疫學綜述]62：119-58；PCT公開WO 89/12624。該等化學物質中的任何一種都可以用於將合成子與CD19結合分子連接。
用於將合成子連接到可接近的離胺酸殘基上的許多官能基Rx 和化學物質係已知的，並且包括例如但不限於NHS-酯和異硫氰酸酯。
用於將合成子連接到半胱胺酸殘基的可接近的游離巰基上的許多官能基Rx 和化學物質係已知的，並且包括例如但不限於鹵代乙醯基和馬來醯亞胺。
然而，軛合化學物質不限於可用的側鏈基團。藉由將適當的小分子與胺連接，可以將例如胺的側鏈轉化為其他有用的基團，例如羥基。該策略可以用於藉由將多功能小分子與CD19結合分子的可以接近的胺基酸殘基的側鏈 軛合來增加抗體上可以用的連接位點的數量。然後將適合於將合成子共價連接到該等「轉化的」官能基的官能基Rx 包括在合成子中。
還可以將CD19結合分子工程化以包括用於軛合的胺基酸殘基。用於工程化BBM以包括可用於在ADC的上下文中軛合藥物的非遺傳編碼的胺基酸殘基之方法描述於Axup等人，2012,Proc Natl Acad Sci USA.[美國國家科學院院刊]109(40)：16101-16106中，用於將合成子連接到非編碼胺基酸的化學物質和官能基也是如此。
通常，合成子與CD19結合分子的胺基酸殘基的側鏈連接，包括-例如可接近的離胺酸殘基的一級胺基基團或可接近的半胱胺酸殘基的巰基基團。藉由還原鏈間二硫鍵可以獲得游離的巰基基團。
對於其中Ry 係巰基基團的連接(例如，當Rx 係馬來醯亞胺時)，該CD19結合分子通常首先完全或部分被還原以破壞半胱胺酸殘基之間的鏈間二硫橋。
不參與二硫橋的半胱胺酸殘基可以藉由修飾一個或多個密碼子而工程化成CD19結合分子。還原該等未配對的半胱胺酸產生適於軛合的巰基基團。在一些實施方式中，CD19結合分子經工程化以引入一個或多個半胱胺酸殘基作為與藥物部分軛合的位點(參見，Junutula等人，2008,Nat Biotechnol[自然生物技術],26：925-932)。
可以在恒定區中選擇半胱胺酸取代的位點以提供穩定且均一的軛合物。CD19結合分子可以具有，例如，兩個或更多個半胱胺酸取代，並且該等取代可以與如本文所述之其他修飾和軛合方法組合使用。用於在抗體的特定位置處插入半胱胺酸之方法係已知的，參見例如Lyons等人，1990,Protein Eng.[蛋白質工程],3：703-708、WO 2011/005481、WO 2014/124316、WO 2015/138615。在某些實施方式中，CD19結合分子包含用在選自重鏈的以下位置的恒定區上的 半胱胺酸對一個或多個胺基酸的取代：位置117、119、121、124、139、152、153、155、157、164、169、171、174、189、205、207、246、258、269、274、286、288、290、292、293、320、322、326、333、334、335、337、344、355、360、375、382、390、392、398、400和422，其中該位置係根據EU系統編號的。在一些實施方式中，CD19結合分子包含用在選自輕鏈的以下位置的恒定區上的半胱胺酸對一個或多個胺基酸的取代：位置107、108、109、114、129、142、143、145、152、154、156、159、161、165、168、169、170、182、183、197、199、和203，其中該位置係根據EU系統編號的，並且其中輕鏈係人κ輕鏈。在某些實施方式中，CD19結合分子包含用在恒定區上的半胱胺酸對兩個或更多個胺基酸的取代的組合，其中該組合包含在重鏈的位置375處、重鏈的位置152處、重鏈的位置360處、或輕鏈的位置107處的取代，並且其中該位置係根據EU系統編號的。在某些實施方式中，CD19結合分子包含用在恒定區上的半胱胺酸對一個胺基酸的取代，其中該取代在重鏈的位置375處、重鏈的位置152處、重鏈的位置360處、輕鏈的位置107處、輕鏈的位置165處、或輕鏈的位置159處，並且其中該位置係根據EU系統編號的，並且其中輕鏈係κ鏈。
在具體的實施方式中，CD19結合分子包含用在恒定區上的半胱胺酸對兩個胺基酸的取代的組合，其中該CD19結合分子在重鏈的位置152和375處包含半胱胺酸，其中該位置係根據EU系統編號的。
在其他具體的實施方式中，CD19結合分子包含在重鏈的位置360處用半胱胺酸對一個胺基酸的取代，其中該位置係根據EU系統編號的。
在其他具體的實施方式中，CD19結合分子包含在輕鏈的位置107處用半胱胺酸對一個胺基酸的取代，其中該位置係根據EU系統編號的，並且其中輕鏈係κ鏈。
用於摻入工程化半胱胺酸的其他位置可以包括，例如但不限於：人IgG1 重鏈上的位置S112C、S113C、A114C、S115C、A176C、5180C、S252C、V286C、V292C、S357C、A359C、S398C、S428C(卡巴特編號)和人Ig κ輕鏈上的位置V110C、S114C、S121C、S127C、S168C、V205C(卡巴特編號)(參見例如，美國專利案號7,521,541、美國專利案號7,855,275和美國專利案號8,455,622)。
可以另外地或可替代地修飾可以用於本文揭露的ADC中的CD19結合分子以引入一種或多種其他反應性胺基酸(除半胱胺酸外)，包括Pcl、吡咯離胺酸、肽標籤(如S6、A1和ybbR標籤)、和非天然胺基酸，代替天然序列的至少一個胺基酸，因此在該CD19結合分子上提供反應位點用於與藥物部分軛合。例如，CD19結合分子可以被修飾以摻入Pcl或吡咯離胺酸(W.Ou等人，2011,PNAS[美國國家科學院院刊],108(26)：10437-10442；WO 2014124258)或非天然胺基酸(Axup等人，2012,PNAS[美國國家科學院院刊],109：16101-16106；審查參見C.C.Liu和P.G.Schultz,2010,Annu Rev Biochem[生物化學年鑒]79：413-444；Kim等人，2013,Curr Opin Chem Biol.[化學生物學研究現狀]17：412-419)作為與藥物軛合的位點。類似地，可以將用於酶促軛合方法的肽標籤引入CD19結合分子中(參見，Strop等人2013,ChemBiol.[化學生物學]20(2)：161-7；Rabuka,2010,Curr Opin Chem Biol.[化學生物學研究現狀]14(6)：790-6；Rabuka等人，2012,Nat Protoc.[自然實驗手冊]7(6)：1052-67)。另一個實例係使用4'-磷酸泛醯巰基乙胺基轉移酶(PPTase)用於輔酶A類似物的軛合(WO 2013184514)。根據已知方法，此類經修飾或工程化的MBM可以與有效負載或連接子-有效負載組合軛合。
如熟悉該項技術者所理解的，與CD19結合分子連接的藥劑(例如，細胞毒性劑和/或細胞抑制劑)的數量可以變化，使得ADC的集合在本質上可以是異質的，其中一些CD19結合分子含有一種連接的藥劑，一些含有兩種連 接的藥劑，一些含有三種連接的藥劑等(並且有些不含連接的藥劑)。異質性程度尤其取決於用於連接細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的化學物質。例如，其中該CD19結合分子被還原以產生用於附接的巰基基團的情況下，通常產生每分子具有0、2、4、6或8種連接的藥劑的CD19結合分子的異質混合物。此外，藉由限制附接化合物的莫耳比，通常產生每分子具有0、1、2、3、4、5、6、7或8種連接的藥劑的CD19結合分子。因此，應理解，根據上下文，該藥物CD19結合分子比(DTR)可以是CD19結合分子的集合的平均值。例如，「DTR4」可以指未進行純化分離特定DTR峰的ADC製劑，並且可以包含具有不同數量的附接的細胞抑制劑和/或細胞毒性劑/CD19結合分子的ADC分子的異質混合物(例如，0、2、4、6、8種試劑/CD19結合分子)，但平均藥物與CD19結合分子比為4。類似地，在一些實施方式中，「DTR2」係指異質ADC製劑，其中平均藥物與CD19結合分子比為2。
當希望富集的製劑時，可以經由純化異質混合物，例如經由柱層析法，例如疏水相互作用層析法，獲得具有確定數量的連接的細胞毒性劑和/或細胞抑制劑的CD19結合分子。
純度可以藉由多種已知方法評估。作為具體實例，可以經由HPLC或其他層析法分析ADC製劑，並藉由分析所得峰的曲線下面積來評估純度。
5.13.軛合至可檢測劑的CD19結合分子
本揭露之CD19結合分子可以軛合至診斷劑或可以檢測劑。此類分子可以用於監測或預後疾病或障礙的發作、發展、進展和/或嚴重性作為臨床測試程序，諸如確定特定療法的功效的一部分。這種診斷和檢測可以藉由將CD19結合分子與可以檢測物質偶聯來實現，該可以檢測物質包括但不限於多種酶，如但不限於辣根過氧化物酶、鹼性磷酸酶、β-半乳糖苷酶或乙醯膽鹼酯酶；輔基，諸如但不限於鏈黴親和素/生物素和抗生物素蛋白/生物素；螢光材料，諸如但不 限於傘形酮、螢光素、異硫氰酸螢光素、玫瑰紅(rhodamine)、二氯三
Figure 109116556-A0202-12-0381-335
基胺螢光素、丹磺醯氯或藻紅蛋白；發光材料，諸如但不限於魯米諾(luminol)；生物發光材料，諸如但不限於螢光素酶、螢光素和水母素；放射性物質，諸如，但不限於，碘(131 I、125 I、123 I、和121 I)、碳(14 C)、硫(35 S)、氚(3 H)、銦(115 In、113 In、112 In、和111 In)、鍀(99 Tc)、鉈(201 Ti)、鎵(68 Ga、67 Ga)、鈀(103 Pd)、鉬(99 Mo)、氙(133 Xe)、氟(18 F)、153 Sm、177 Lu、159 Gd、149 Pm、140 La、175 Yb、166 Ho、90 Y、47Sc、186 Re、188 Re、142 Pr、105 Rh、97 Ru、68 Ge、57 Co、65 Zn、85 Sr、32 P、153 Gd、169 Yb、51 Cr、54 Mn、75 Se、113 Sn和117 Tin；以及使用多種正電子發射斷層攝影術的正電子發射金屬和非放射性順磁金屬離子。
5.14.附接至固體支持物的CD19結合分子
該CD19結合分子也可以附接在固體支持物上，這對於一種或多種靶抗原的免疫測定或純化特別有用。此類固體支持物包括但不限於玻璃、纖維素、聚丙烯醯胺、尼龍、聚苯乙烯、聚氯乙烯或聚丙烯。
5.15.藥物組成物
本揭露之CD19結合分子(以及它們的軛合物；除非上下文另有說明，否則本揭露中對CD19結合分子的引用也指包含CD19結合分子的軛合物，如ADC)可以配製為包含該CD19結合分子的藥物組成物，例如含有一種或多種藥學上可以接受的賦形劑或載體。為了製備包含本揭露之CD19結合分子的藥物或無菌組成物，可以將CD19結合分子製劑與一種或多種藥學上可以接受的賦形劑或載體組合。
例如，CD19結合分子的配製物可以藉由將CD19結合分子與生理上可以接受的載體、賦形劑、或穩定劑以例如凍乾粉劑、漿液、水溶液、洗劑或懸浮液的形式混合來製備(參見例如，Hardman等人，2001,Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics[Goodman和Gilman的治療的 藥理學基礎],McGraw-Hill(麥格勞-希爾集團)，紐約，紐約州；Gennaro,2000,Remington：The Science and Practice of Pharmacy[雷明頓：藥學科學與實踐]，利平科特‧威廉斯和威爾金斯出版公司(Lippincott,Williams,and Wilkins)，紐約，紐約州；Avis等人(編輯),1993,Pharmaceutical Dosage Forms：General Medications[藥物劑型：一般藥物]，馬塞爾．德克爾公司，紐約；Lieberman等人(編輯),1990,Pharmaceutical Dosage Forms：Tablets[藥物劑型：片劑]，馬塞爾．德克爾公司，紐約；Lieberman等人(編輯),1990,Pharmaceutical Dosage Forms：Disperse Systems[藥物劑型：分散系統]，馬塞爾．德克爾公司，紐約；Weiner和Kotkoskie,2000,Excipient Toxicity and Safety[賦形劑毒性和安全性]，馬塞爾．德克爾公司，紐約市，紐約)。
為CD19結合分子選擇投與方案取決於幾種因素，包括CD19結合分子的血清或組織周轉速率、症狀水平、CD19結合分子的免疫原性和靶細胞可及性。在某些實施方式中，投與方案使遞送至受試者的CD19結合分子的量最大化，與可接受水平的副作用一致。因此，遞送的CD19結合分子的量部分取決於具體CD19結合分子和正在治療的病症的嚴重性。選擇適當劑量的抗體和小分子的指南係可獲得的(參見例如，Wawrzynczak,1996,Antibody Therapy[抗體療法],Bios Scientific Pub.Ltd(Bios科學出版社有限公司)，牛津郡，英國；Kresina(編輯),1991,Monoclonal Antibodies,Cytokines and Arthritis[單株抗體、細胞介素和關節炎]，馬塞爾．德克爾公司，紐約市，紐約；Bach(編輯),1993,Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases[自體免疫性疾病中的單株抗體和肽療法]，馬塞爾．德克爾公司，紐約市，紐約；Baert等人，2003,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]348：601-608；Milgrom等人，1999,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]341：1966-1973；Slamon等人，2001,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]344：783-792；Beniaminovitz等人，2000,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌] 342：613-619；Ghosh等人，2003,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]348：24-32；Lipsky等人，2000,New Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]343：1594-1602)。
由臨床醫生，例如，使用本領域中已知或懷疑影響治療或預計影響治療的參數或因素確定適當的劑量。通常，劑量始於略小於最佳劑量的量並此後將其以小增量增加，直至相對於任何不利副作用，實現所希望的或最佳的效果。重要的診斷量值包括症狀(例如炎症)的那些量值或產生的炎性細胞介素的水平。
可以改變本揭露藥物組成物中CD19結合分子的實際劑量水平，以便獲得一定量的CD19結合分子，該CD19結合分子的量有效地實現對於特定的受試者、組成物和投與方式的所希望的治療響應，而對該受試者沒有毒性。所選擇的劑量水平將取決於多種藥物動力學因素，包括特定CD19結合分子的活性，投與途徑，投與時間，所使用的特定CD19結合分子的排泄速率，治療持續時間，與所使用的特定CD19結合分子組合的其他藥劑(例如活性藥劑，如治療藥物或化合物和/或作為載體的惰性材料)，所治療受試者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康狀況和先前病史，以及醫學領域中已知的類似因素。
包含CD19結合分子的組成物可以藉由連續輸注，或以一天、一投與的間隔或每週1-7次按劑量提供。可以藉由靜脈內、皮下、局部、口服、經鼻、經直腸、肌肉內、腦內或藉由吸入來提供劑量。特定劑量方案係關於避免明顯不希望的副作用的最大劑量或給藥頻率的方案。
特定受試者的有效量可能根據如下因素而變化，如所治療的病症、受試者的整體健康狀況、投與之方法途徑和劑量以及副作用的嚴重性(參見例如，Maynard等人，(1996)A Handbook of SOPs for Good Clinical Practice[良好臨床實踐的SOP手冊],Interpharm Press[Interpharm出版社],Boca Raton[博卡拉 頓],Fla.[佛羅里達州]；Dent(2001)Good Laboratory and Good Clinical Practice[良好實驗和良好臨床實踐],Urch Publ.[厄奇出版社]，英國倫敦)。
投與途徑可以是藉由例如局部或皮膚應用，藉由靜脈內、腹膜內、腦內、肌內、眼內、動脈內、腦脊內、病灶內進行的注射或輸注，或藉由緩釋系統或植入物(參見例如，Sidman等人，1983,Biopolymers[生物聚合物]22：547-556；Langer等人，1981,J.Biomed.Mater.Res.[外科研究雜誌]15：167-277；Langer,1982,Chem.Tech.[化學技術]12：98-105；Epstein等人，1985 Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]82：3688-3692；Hwang等人，1980 Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美國國家科學院院刊]77：4030-4034；美國專利案號6,350,466和6,316,024)。必要時，組成物也可以包含增溶劑和用於減輕注射部位疼痛的局部麻醉藥如利多卡因。此外，也可以採用經肺施用，例如藉由使用吸入器或霧化器以及具有霧化劑的配製物。參見例如，美國專利案號6,019,968、5,985,320、5,985,309、5,934,272、5,874,064、5,855,913、5,290,540和4,880,078；以及PCT公開案號WO 92/19244、WO 97/32572、WO 97/44013、WO 98/31346、和WO 99/66903。
本揭露之組成物還可以使用多種已知方法中的一種或多種經由一種或多種投與途徑投與。如技術人員將理解的，投與途經和/或方式將隨所希望的結果而變化。選擇的CD19結合分子的投與途徑包括靜脈內、肌肉內、皮內、腹膜內、皮下、脊柱或其他一般投與途徑，例如藉由注射或輸注。一般投與可以代表除了腸道和局部投與之外的投與方式，通常藉由注射，並且包括但不限於靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊柱內、硬腦膜外以及胸骨內注射和輸注。可替代地，本揭露之組成物可以經由非一般途徑投與，例如局部、表皮或黏膜投與途徑，例如，鼻內、口服、陰道、直腸、舌下或局部投與。在 一個實施方式中，該CD19結合分子藉由輸注投與。在另一個實施方式中，該CD19結合分子皮下投與。
如果CD19結合分子以控釋或緩釋系統投與，則可以使用泵以實現控釋或緩釋(參見Langer，同上；Sefton,1987,CRC Crit.Ref Biomed.Eng.[CRC在生物醫學工程中的參考評論]14：20；Buchwald等人，1980,Surgery[外科手術]88：507；Saudek等人，1989,N.Engl.J.Med.[新英格蘭醫學雜誌]321：574)。聚合物材料可以用於實現本揭露治療劑的控釋或緩釋(參見例如，Medical Applications of Controlled Release[控釋藥物的醫學應用],Langer和Wise(編輯),CRC Pres.[CRC出版社],Boca Raton,Fla.[佛羅里達州波卡拉頓](1974)；Controlled Drug Bioavailability,Drug Product Design and Performance[受控的藥物生物利用率，藥物產物設計以及性能],Smolen和Ball(編輯)，威利出版公司(Wiley)，紐約(1984)；Ranger和Peppas,1983,J.,Macromol.Sci.Rev.Macromol.Chem.[高分子科學雜誌-高分子化學評論]23：61；還參見Levy等人，1985,Science[科學]228：190；During等人，1989,Ann.Neurol.[神經病學記事]25：351；Howard等人，1989,J.Neurosurg.[神經外科雜誌]71：105)；美國專利案號5,679,377；美國專利案號5,916,597；美國專利案號5,912,015；美國專利案號5,989,463；美國專利案號5,128,326；PCT公開案號WO 99/15154；以及PCT公開案號WO 99/20253)。用於緩釋配製物中的聚合物的實例包括但不限於聚(甲基丙烯酸2-羥乙酯)、聚(丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸)、聚(乙烯-共-乙酸乙烯)、聚(甲基丙烯酸)、聚乙交酯(PLG)、聚酸酐、聚(N-乙烯基吡咯啶酮)、聚(乙烯醇)、聚丙烯醯胺、聚(乙二醇)、聚丙交酯(PLA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PLGA)以及聚原酸酯。在一個實施方式中，用於緩釋配製物的聚合物係惰性的，不含可浸出的雜質，在儲存時穩定，無菌並且可生物降解。可以將控釋或緩釋系統置於預防或治療靶標附近，因此僅需要全身劑量的一部分(參見例如，Goodson, 於Medical Applications of Controlled Release[控釋的醫學應用]，同上，第2卷，第115-138頁(1984))。
控釋系統在Langer的綜述中討論(1990,Science[科學]249：1527-1533)。可以使用本領域的普通技術人員已知的任何技術來生產包含一種或多種本揭露之CD19結合分子的緩釋配製物。參見例如，美國專利案號4,526,938；PCT公開WO 91/05548；PCT公開WO 96/20698；Ning等人，1996,Radiotherapy & Oncology[放射療法和腫瘤學]39：179-189；Song等人，1995,PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology[PDA藥學科學與技術]50：372-397；Cleek等人，1997,Pro.Int'l.Symp.Control.Rel.Bioact.Mater.[控釋生物活性材料國際研討會學報]24：853-854；和Lam等人，1997,Proc.Int'l.Symp.Control Rel.Bioact.Mater.[控釋生物活性材料國際研討會學報]24：759-760。
如果局部投與CD19結合分子，則它們可以以軟膏劑、乳膏劑、透皮貼劑、洗劑、凝膠、洗髮劑、噴霧劑、氣溶膠、溶液、乳油劑或熟悉該項技術者熟知的其他形式配製。參見例如，Remington's Pharmaceutical Sciences and Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms[雷明頓製藥科學和藥物劑型簡介]，第19版，Mack Pub.Co.(馬克出版公司)，伊斯頓，賓夕法尼亞州(1995)。對於不可噴霧的局部劑型，通常使用黏性至半固體或固體形式，其包含載劑或一種或多種與局部施用相容並且具有動態黏度的賦形劑，在一些情況下，其具有大於水的動態黏度。合適的配製物包括但不限於溶液、懸浮液、乳油劑、乳膏劑、軟膏劑、粉劑、搽劑、油膏劑等，如果希望，可以是滅菌的或與輔助劑(例如，防腐劑、穩定劑、潤濕劑、緩衝液、或鹽)混合，用於影響多種特性，例如滲透壓。其他合適的局部劑型包括可噴霧的氣溶膠製劑，其中活性成分，在一些情況下，與固體或液體惰性載體組合，與加壓揮發物(例如，氣態推進劑，如氟 利昂)混合包裝，或包裝於一個擠壓瓶中。如果希望，還可以將保濕劑或濕潤劑添加到藥物組成物和劑型中。此類另外的成分的實例係熟知的。
如果鼻內投與包含CD19結合分子的組成物，則可以將CD19結合分子配製成氣溶膠形式、噴霧、薄霧或滴劑形式。特別地，用於根據本揭露使用的預防劑和治療劑可以使用一種合適的推進劑(如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合適的氣體)以從加壓式包裝或噴霧器的氣溶膠噴霧展現的形式方便地進行遞送。在增壓式氣溶膠的情況下，劑量單位可以藉由提供閥以遞送計量的量來確定。在吸入器或吹入器中使用的膠囊和藥筒(由例如，明膠構成)可以被配製成含有CD19結合分子與適合的粉末基質(如乳糖或澱粉)的粉末混合物。
本揭露之CD19結合分子可以以組合療法方案投與，如下文中的5.17節中所述。
在某些實施方式中，可以配製CD19結合分子以確保在體內適當的分佈。例如，血腦屏障(BBB)排除許多高度親水性化合物。為確保本揭露之治療性化合物穿過BBB(如果希望)，可以將它們以例如脂質體配製。對於製備脂質體之方法，參見例如，美國專利案號4,522,811、5,374,548；和5,399,331。脂質體可以包括被選擇性運輸至特定細胞或器官中，由此增強靶向藥物遞送的一個或多個部分(參見例如，Ranade,1989,J.Clin.Pharmacol.[臨床藥理學雜誌]29：685)。示例性的靶向部分包括葉酸或生物素(參見例如，Low等人的美國專利案號5,416,016)；甘露糖苷(Umezawa等人，1988,Biochem.Biophys.Res.Commun.[生物化學與生物物理研究通訊]153：1038)；抗體(Bloeman等人，1995,FEBS Lett.[歐洲生化學會聯合會快報]357：140；Owais等人，1995,Antimicrob.Agents Chemother.[抗微生物劑化學療法]39：180)；表面活性劑蛋白質A受體(Briscoe等人，1995,Am.J.Physiol.[美國生理學雜誌]1233：134)；p 120 (Schreier等人，1994,J.Biol.Chem.[生物化學雜誌]269：9090)；還參見Keinanen和Laukkanen,1994,FEBS Lett.[歐洲生化學會聯合會快報]346：123；Killion和Fidler,1994,Immunomethods[免疫方法]4：273。
當用於組合療法時，例如，如下文中的5.17節中所述，可以將CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑以相同藥物組成物向受試者投與。可替代地，組合療法的CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑可以以單獨的藥物組成物並行投與至受試者。
本文所述之治療方法可以進一步包括進行「伴隨診斷」測試，由此測試來自作為CD19結合分子療法候選者的受試者的樣本的CD19表現。伴隨診斷測試可以在CD19結合分子療法啟動之前和/或在CD19結合分子治療方案期間進行，以監測受試者對CD19結合分子療法的持續適用性。伴隨診斷中使用的藥劑可以是CD19結合分子本身或另一種診斷劑，例如針對CD19的標記的單特異性抗體或用於檢測CD19 RNA的核酸探針。可以在伴隨診斷測定中測試的樣本可以是其中可以存在CD19結合分子靶向的細胞的任何樣本，例如腫瘤(例如，實性瘤)活組織切片、淋巴、糞便、尿液、血液或任何其他可能含有循環腫瘤細胞的體液。
5.16.治療適應症
本揭露之CD19結合分子可以用於治療與CD19表現相關的任何疾病。短語「與CD19表現相關的疾病」包括但不限於與CD19表現相關的疾病或與表現CD19的細胞相關的病症，包括例如，增殖性疾病(如癌症或惡性腫瘤)或癌前病症(如骨髓增生異常、骨髓發育不良症候群或白血病前期)；或與表現CD19的細胞相關的非癌症相關適應症。在一個方面，與CD19表現相關的癌症係血液學癌症。在一個方面，血液學癌症症係白血病或淋巴瘤。在一個方面，與CD19表現相關的癌症包括癌症和惡性腫瘤，包括但不限於：例如一種或多種 急性白血病，包括但不限於例如B細胞急性淋巴性白血病(BALL)、T細胞急性淋巴性白血病(TALL)、急性淋巴性白血病(ALL)；一種或多種慢性白血病，包括但不限於例如慢性髓細胞性白血病(CML)、慢性淋巴球性白血病(CLL)。與CD19表現相關的其他癌症或血液學病症包括但不限於例如B細胞幼淋巴球性白血病、母細胞性漿細胞樣樹突細胞腫瘤、柏基特氏淋巴瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞白血病、小細胞或大細胞濾泡性淋巴瘤、惡性淋巴組織增生病症、MALT淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、邊緣區淋巴瘤、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常和骨髓發育不良症候群、非何杰金氏淋巴瘤、漿母細胞性淋巴瘤、漿細胞樣樹突細胞腫瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、和「白血病前期」(這係由髓系血細胞的無效產生(或發育不良)聯合的血液學病症的多樣化集合)等。此外，與CD19表現相關的疾病包括但不限於例如，與CD19表現相關的非典型和/或非經典癌症、惡性腫瘤、癌前病症或增生性疾病。與CD19表現相關的非癌症相關適應症包括但不限於例如，自體免疫性疾病(例如，狼瘡)、炎性障礙(過敏和氣喘)和移植。
例如，CD19結合分子可以用於治療經歷過與CD19表現升高相關的疾病的治療的受試者，其中經歷過針對升高水平的CD19治療的受試者表現出與升高水平的CD19相關的疾病。
在一個方面，本揭露提供抑制表現CD19的腫瘤細胞生長之方法，該方法包括使腫瘤細胞與CD19結合分子接觸，從而抑制腫瘤細胞的生長。
在一個方面，本揭露提供了治療和/或預防免疫受損個體中出現的疾病之方法，該方法包括投與CD19結合分子。特別地，本文揭露了治療與CD19表現相關的疾病、障礙和病症之方法，包括投與CD19結合分子。
在某些方面，本文揭露了治療處於患有與CD19表現相關的疾病、障礙和病症風險的患者之方法，該方法包括投與CD19結合分子。
因此，本揭露提供了用於治療或預防與CD19表現相關的疾病、障礙和病症之方法，該方法包括向有需要的受試者投與治療有效量的CD19結合分子。
本揭露還提供了用於預防、治療和/或控制與表現CD19的細胞相關的疾病(例如，表現CD19的血液癌症或非典型癌症)之方法，該方法包括向有需要的受試者投與CD19結合分子。在一個方面，受試者係人。與表現CD19的細胞相關的障礙的非限制性實例包括病毒或真菌感染，以及與黏膜免疫相關的障礙。
5.16.1.癌症以及癌症相關疾病和障礙
在一個方面，本揭露提供了一種治療受試者的癌症之方法。該方法包括向受試者投與CD19結合分子，從而治療受試者的癌症。可藉由CD19靶向藥劑治療的癌症的實例係與CD19表現相關的癌症。
在一個方面，本揭露提供了用於治療癌症之方法，其中部分腫瘤對CD19係陰性的，並且部分腫瘤對CD19係陽性的。
在一個方面，本揭露提供藉由使用本揭露之CD19結合分子治療癌症之方法，其中CD19在正常細胞和癌細胞上表現，但在正常細胞上以較低水平表現。在一個實施方式中，該方法進一步包括選擇以一定親和力結合的CD19結合分子：該親和力允許CD19結合分子結合並殺傷表現CD19的癌細胞，但殺傷小於30%、25%、20%、15%、10%、5%或更少的表現CD19的正常細胞，例如如藉由本文所述之測定所確定的。例如，可以使用殺傷測定，如基於Cr51 CTL的流動式細胞測量術。在一個實施方式中，該CD19結合分子具有抗原結合結構域，該抗原結合結構域對於CD19具有10 -4 M至10 -8 M，例如10 -5 M至10 -7 M，例如10 -6 M或10 -7 M的結合親和力K D 。
在一個方面，本文揭露了治療增殖性疾病(例如癌症或惡性腫瘤或癌前病症(例如骨髓增生異常、骨髓發育不良症候群或白血病前期))之方法，該方法名包括投與CD19結合分子。在一個方面，該癌症係血液學癌症。血液學癌症病症係影響血液、骨髓和淋巴系統的癌症類型，如白血病和惡性淋巴組織增生病症。在一個方面，該血液學癌症係白血病。與CD19相關的疾病或障礙的實例係多發性骨髓瘤(也稱為MM)(參見Claudio等人，Blood.[血液]2002,100(6)：2175-86；和Novak等人，Blood.[血液]2004,103(2)：689-94)。多發性骨髓瘤，也稱為漿細胞骨髓瘤或卡勒氏病(Kahler’s disease)，係以骨髓中異常或惡性血漿B細胞積聚為特徵的癌症。通常，癌細胞侵入鄰近的骨骼，破壞骨骼結構並導致骨痛和骨折。大多數骨髓瘤病例的特徵還在於副蛋白(也稱為M蛋白或骨髓瘤蛋白)的產生，該副蛋白係惡性漿細胞的選殖增殖過量而產生的異常免疫球蛋白。根據國際骨髓瘤工作組(International Myeloma Working Group,IMWG)的診斷標準，血清副蛋白水平超過30g/L即診斷為多發性骨髓瘤(參見Kyle等人，(2009),Leukemia.[白血病]23：3-9)。多發性骨髓瘤的其他症狀或體征包括腎功能減退或腎功能衰竭、骨病變、貧血、高鈣血症和神經症狀。
可以藉由本文所述之組成物和方法治療的其他漿細胞增殖性障礙包括但不限於無症狀性骨髓瘤(冒煙型多發性骨髓瘤或惰性骨髓瘤)、意義未明的單株丙種球蛋白血症(MGUS)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、漿細胞瘤(例如，漿細胞惡性增殖、孤立性骨髓瘤、孤立性漿細胞瘤、髓外漿細胞瘤和多發性漿細胞瘤)、全身性澱粉樣蛋白輕鏈澱粉樣變性、和POEMS綜合症(也稱為克羅-富克斯綜合症、高月病和PEP綜合症)。
與CD19相關的疾病或障礙的另一個實例係何杰金氏淋巴瘤和非何杰金氏淋巴瘤(參見Chiu等人，Blood.[血液]2007,109(2)：729-39；He等人，J Immunol. [免疫學雜誌]2004,172(5)：3268-79)。
何杰金氏淋巴瘤(HL)也稱為霍奇金病，係起源於白血球或淋巴細胞的淋巴系統癌症。構成淋巴瘤的異常細胞稱為裡德-斯德伯格(Reed-Sternberg)細胞。在何杰金氏淋巴瘤中，癌症從一個淋巴結組擴散到另一個淋巴結組。根據裡德-斯德伯格細胞形態和裡德-斯德伯格細胞周圍的細胞組成(藉由淋巴結活檢確定)，何杰金氏淋巴瘤可以細分為四種病理亞型：結節性硬化HL、混合細胞亞型、淋巴細胞富集或淋巴細胞優勢、淋巴細胞耗減。一些何杰金氏淋巴瘤也可以是結節性淋巴細胞優勢型何杰金氏淋巴瘤，或者可以是未指明的。何杰金氏淋巴瘤的症狀和體征包括頸部、腋窩或腹股溝的淋巴結無痛性腫脹、發燒、盜汗、體重減輕、疲勞、瘙癢或腹痛。
非何杰金氏淋巴瘤(NHL)包括多種血癌，其包括除何杰金氏淋巴瘤之外的任何類型的淋巴瘤。非何杰金氏淋巴瘤的亞型主要藉由細胞形態學、染色體畸變和表面標記物來分類。NHL亞型(或NHL相關癌症)包括B細胞淋巴瘤，如但不限於柏基特氏淋巴瘤、B細胞慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、B細胞幼淋巴球性白血病(B-PLL)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)(例如，血管內大B細胞淋巴瘤和原發性縱隔B細胞淋巴瘤)、濾泡性淋巴瘤(例如，濾泡中心淋巴瘤、濾泡性小分裂細胞)、毛細胞白血病、高級B細胞淋巴瘤(柏基特樣)、淋巴漿細胞性淋巴瘤(瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症)、外膜細胞淋巴瘤、邊緣區B細胞淋巴瘤(例如，淋巴結外邊緣區B細胞淋巴瘤或黏膜相關淋巴組織(MALT)淋巴瘤、淋巴結邊緣區B細胞淋巴瘤、和脾邊緣區B細胞淋巴瘤)、漿細胞瘤/骨髓瘤、先質B淋巴細胞性白血病/淋巴瘤(PB-LBL/L)、原發性中樞神經系統(CNS)淋巴瘤、原發性眼內淋巴瘤、小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)；和T細胞淋巴瘤，如但不限於間變性大細胞淋巴瘤(ALCL)、成人T細胞淋巴瘤/白血病(例如，悶燒、慢性、急性和淋巴瘤)、血管中心性淋巴瘤、血管免疫母細胞性T細胞淋巴瘤、皮膚T細胞淋 巴瘤(例如，蕈樣肉芽腫、Sézary綜合症等)、淋巴結外自然殺傷/T細胞淋巴瘤(鼻型)、腸病型腸T細胞淋巴瘤、大顆粒淋巴細胞性白血病、先質T淋巴細胞淋巴瘤/白血病(T-LBL/L)、T細胞慢性淋巴細胞性白血病/幼淋巴球性白血病(T-CLL/PLL)、和未指明的外周T細胞淋巴瘤。何杰金氏淋巴瘤的症狀和體征包括頸部、腋窩或腹股溝的淋巴結無痛性腫脹、發燒、盜汗、體重減輕、疲勞、瘙癢、腹痛、咳嗽或胸痛。
CD19表現也與瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症(WM)(也稱為淋巴漿細胞性淋巴瘤(LPL))相關聯。(參見Elsawa等人，Blood.[血液]2006,107(7)：2882-8)。瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症先前被認為與多發性骨髓瘤相關聯，但最近被歸類為非何杰金氏淋巴瘤的亞型。WM的特徵在於不受控制的B細胞淋巴細胞增殖，導致貧血並產生過量的副蛋白或免疫球蛋白M(IgM)，該副蛋白使血液變稠並導致高黏滯綜合症。WM的其他症狀或體征包括發燒、盜汗、疲勞、貧血、體重減輕、淋巴結病變或脾腫大、視力模糊、頭暈、鼻出血、牙齦出血、不常見的瘀傷、腎功能損傷或衰竭、澱粉樣變性或周圍神經病變。
與CD19表現相關的疾病或障礙的另一個實例係腦癌。具體地，CD19的表現與星形細胞瘤或膠質母細胞瘤有關(參見Deshayes等人，Oncogene.[癌基因]2004,23(17)：3005-12,Pelekanou等人.,PLoS One. [公共科學圖書館：綜合]2013,8(12)：e83250)。星形細胞瘤係由星形膠質細胞產生的腫瘤，星形膠質細胞係腦中的一種神經膠質細胞類型。膠質母細胞瘤(也稱為多形性膠質母細胞瘤或GBM)係星形細胞瘤的最惡性形式，並且被認為係腦癌的最晚期(IV期)。膠質母細胞瘤有兩種變體：巨細胞膠質母細胞瘤和神經膠質肉瘤。其他星形細胞瘤包括幼年毛細胞星形細胞瘤(JPA)、纖維性星形細胞瘤、多形性黃色星形細胞瘤(PXA)、胚胎發育不良性神經上皮瘤(DNET)和退行性星形細胞瘤(AA)。
與膠質母細胞瘤或星形細胞瘤相關的症狀或體征包括腦部壓力增加、頭痛、癲癇發作、記憶喪失、行為改變、身體一側運動或感覺喪失、語言功能障礙、認知缺損、視力缺損、噁心、嘔吐以及手臂或腿部虛弱。
手術移除腫瘤(或切除)係盡可能多地除去神經膠質瘤而不損傷或對正常周圍腦損傷最小的標準治療。通常在手術後使用放療和/或化療來抑制和減緩來自任何其餘癌細胞或衛星病灶的復發疾病。放射治療包括全腦放療(常規體外束輻射)、靶向三維適形放射治療和靶向放射性核素。通常用於治療膠質母細胞瘤的化療劑包括替莫唑胺(temozolomide)、吉非替尼或厄洛替尼和順鉑。血管生成抑制劑(如貝伐單抗(Bevacizumab)(Avastin®))通常也與化療和/或放療組合使用。
支持性治療經常也用於緩解神經症狀和改善神經功能，並且與本文所述之任何癌症療法組合投與。主要支持性藥劑包括抗驚厥藥和皮質類固醇。因此，本揭露之組成物和方法可以與任何標準或支持性治療組合使用，以治療膠質母細胞瘤或星形細胞瘤。
本揭露提供用於治療癌症的組成物和方法。在一個方面，該癌症係血液癌症，包括但不限於白血病或淋巴瘤。在一個方面，本文揭露了治療癌症和惡性腫瘤之方法，該癌症和惡性腫瘤包括但不限於，例如，急性白血病，其包括但不限於，例如B細胞急性淋巴細胞性白血病(「BALL」)、T細胞急性淋巴細胞性白血病(「TALL」)、急性淋巴細胞性白血病(ALL)；一種或多種慢性白血病，其包括但不限於例如慢性髓細胞性白血病(CML)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)；另外的血液癌或血液病症，包括但不限於例如B細胞幼淋巴細胞性白血病、母細胞性漿細胞樣樹突狀細胞瘤、柏基特氏淋巴瘤、彌漫性大B細胞淋巴瘤、濾泡性淋巴瘤、毛細胞白血病、小細胞或大細胞濾泡性淋巴瘤、惡性淋巴組織增生症、MALT淋巴瘤、外膜細胞淋巴瘤、邊緣區淋巴瘤、多 發性骨髓瘤、骨髓增生異常和骨髓發育不良症候群、非何杰金氏淋巴瘤、漿母細胞淋巴瘤、漿細胞樣樹突狀細胞瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、和「白血病前期」(這係由髓系血細胞的無效產生(或發育不良)聯合的血液病症的多樣化集合)等。此外，與CD19表現相關的疾病包括但不限於例如表現CD19的非典型和/或非經典癌症、惡性腫瘤、癌前病症或增殖性疾病。
在一些實施方式中，CD19結合分子可以用於治療疾病，包括但不限於漿細胞增殖性障礙(例如，無症狀性骨髓瘤(冒煙型多發性骨髓瘤或惰性骨髓瘤))、意義未明的單株丙種球蛋白血症(MGUS)、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、漿細胞瘤(例如，漿細胞惡性增殖、孤立性骨髓瘤、孤立性漿細胞瘤、髓外漿細胞瘤和多發性漿細胞瘤)、全身性澱粉樣蛋白輕鏈澱粉樣變性、和POEMS綜合症(也稱為克羅-富克斯綜合症、高月病和PEP綜合症)。
在一些實施方式中，CD19結合分子可以用於治療疾病，包括但不限於癌症，例如本文所述之癌症，例如前列腺癌(例如，去勢抵抗性或治療抵抗性前列腺癌或轉移性前列腺癌)、胰臟癌、肺癌。
本揭露還提供了用於抑制表現CD19的細胞群的增殖或減少表現CD19的細胞群之方法，該方法包括使包含表現BMCA的細胞群與CD19結合分子接觸。在具體方面，本揭露提供了用於抑制表現CD19的癌細胞群的增殖或減少表現CD19的癌細胞群之方法，該方法包括使表現CD19的癌細胞群與CD19結合分子接觸。在一個方面，本揭露提供了用於抑制表現CD19的癌細胞群的增殖或減少表現CD19的癌細胞群之方法，該方法包括使表現BMCA的癌細胞群與CD19結合分子接觸。在某些方面，在患有骨髓性白血病或與表現CD19的細胞相關的另一種癌症的受試者中、或者在骨髓性白血病或與表現CD19的細胞相關的另一種癌症的動物模型中，相對於陰性對照，該方法將細胞和/或癌細胞的數量、數 目、量或百分比減少至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少65%、至少75%、至少85%、至少95%、或至少99%。在一個方面，受試者係人。
本揭露提供了用於預防與表現CD19的細胞相關的癌症復發之方法，該方法包括向有需要的受試者投與CD19結合分子。
5.16.2.非癌症相關疾病和障礙
與CD19表現相關的非癌症相關疾病和障礙(例如免疫病症)也可以藉由本文揭露的組成物和方法治療。此類免疫病症的特徵可能在於免疫細胞的不適當活化，並且典型地分為四種類型：過敏反應、細胞毒性(細胞溶解)反應、免疫複合物反應、或細胞介導的免疫(CMI)反應(也稱為遲發型超敏反應(DTH)反應)。(參見例如，Fundamental Immunology[基礎免疫學],William E.Paul編輯，烏鴉出版社，紐約，第3版1993。)
此類免疫性疾病的具體實例包括但不限於類風濕性關節炎、多發性硬化、內分泌眼病、葡萄膜視網膜炎、全身性紅斑狼瘡、重症肌無力、格雷夫斯病(Grave's disease)、腎小球腎炎、自體免疫性肝病、自體免疫性炎症性腸病、過敏反應、變態反應、乾燥綜合症、幼年發病型(I型)糖尿病、原發性膽汁性肝硬化、華格納氏肉芽病病(Wegener's granulomatosis)、纖維肌痛、炎性腸病、多發性肌炎、皮肌炎、多發性內分泌衰竭、施密特綜合症(Schmidt's syndrome)、自體免疫性眼色素層炎、愛迪生氏病(Addison's disease)、腎上腺炎、甲狀腺炎、橋本氏甲狀腺炎、自體免疫性甲狀腺疾病、惡性貧血、胃萎縮、慢性肝炎、狼瘡樣肝炎、動脈粥樣硬化、早老性癡呆、脫髓鞘疾病、亞急性皮膚型紅斑狼瘡、甲狀旁腺功能減退症、德雷斯勒綜合症(Dressler's syndrome)、自體免疫性血小板減少症、特發性血小板減少性紫癜、溶血性貧血、尋常型天皰瘡、天皰瘡、皰疹樣皮炎、脫髮、類天皰瘡、硬皮病、進行性系統性硬化症、CREST綜合症(鈣質沈著症、雷諾氏現象(Raynaud's phenomenon)、食管運動功能障礙、指端硬化、和毛細管擴張)、成人發病型糖尿病(II型糖尿病)、男性和女性自體免疫性不育症、強直性脊椎炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩氏病(Crohn's disease)、混合性結蒂組織病、結節性多動脈炎(polyarteritis nedosa)、系統性壞死性血管炎、幼年發病型類風濕性關節炎、特應性皮炎、特應性鼻炎、肺出血腎炎綜合症(Goodpasture's syndrome)、恰加斯氏病(Chagas' disease)、類肉瘤病、風濕熱、氣喘、復發性流產、抗磷脂綜合症、農民肺、多形性紅斑、心臟切開術後綜合症、庫欣綜合症(Cushing's syndrome)、自體免疫性慢性活動性肝炎、養鳥人肺(bird-fancier's lung)、過敏性腦脊髓炎、中毒性表皮壞死松解症、阿爾波特綜合症(Alport's syndrome)、肺泡炎、過敏性肺泡炎、纖維性肺泡炎、間質性肺病、結節性紅斑、壞疽性膿皮病、輸血反應、麻風病、瘧疾、利什曼病、錐蟲病、多發性大動脈炎(Takayasu's aiteritis)、風濕性多肌痛、顳動脈炎、血吸蟲病、巨細胞動脈炎、蛔蟲病、麯黴病、Sampter綜合症、濕疹、淋巴瘤樣肉芽腫病、白塞氏病(Behcet's disease)、卡普蘭綜合症(Caplan's syndrome)、川崎病(Kawasaki's disease)、登革熱、腦脊髓炎、心內膜炎、心肌內膜纖維變性、眼內炎、持久性隆起性紅斑(erythema elevatum et diutinum)、牛皮癬、胎兒成紅血球增多病、嗜酸性筋膜炎、舒爾曼綜合症(Shulman's syndrome)、費爾蒂綜合症(Felty's syndrome)、絲蟲病、睫狀體炎、慢性睫狀體炎、異時性睫狀體炎、Fuch睫狀體炎、IgA腎病、過敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura)、移植物抗宿主病、移植排斥、人免疫缺陷病毒感染、埃可病毒感染(echovirus infection)、心肌病、阿茲海默氏症(Alzheimer's disease)、細小病毒感染、風疹病毒感染、接種後綜合症、先天性風疹感染、Eaton-Lambert綜合症、復發性多軟骨炎、冷球蛋白血症、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血症、EB病毒感染、流行性腮腺炎、Evans綜合症、和自體免疫性性腺衰竭。
因此，本文所述之方法涵蓋治療以下的障礙：B淋巴細胞(例如，全身性紅斑狼瘡、肺出血腎炎綜合症、類風濕性關節炎、和I型糖尿病)、Th1 -淋巴細胞(例如，類風濕性關節炎、多發性硬化、牛皮癬、乾燥綜合症、橋本氏甲狀腺炎、格雷夫斯病、原發性膽汁性肝硬化、華格納氏肉芽病病、結核病、或移植物抗宿主病)、或Th2 -淋巴細胞(例如，特應性皮炎、全身性紅斑狼瘡、特應性氣喘、鼻結膜炎、過敏性鼻炎、或慢性移植物抗宿主病)。通常，關於樹突細胞的障礙包括Th1 -淋巴細胞或Th2 -淋巴細胞的障礙。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療自體免疫性疾病，例如至少部分由B細胞介導的自體免疫性疾病。自體免疫性疾病的實例包括急性壞死性出血性腦白質炎；愛迪生氏病；丙種球蛋白缺乏症；過敏性氣喘；過敏性鼻炎；斑禿；澱粉樣變性；強直性脊椎炎；抗GBM/抗TBM腎炎；抗磷脂綜合症；自體免疫性再生障礙性貧血；自體免疫性家族性植物神經失調綜合症(Autoimmune dysautonomia)；自體免疫性肝炎；自體免疫性高脂血症；自體免疫性免疫缺陷；自體免疫性內耳病；自體免疫性心肌炎；自體免疫性血小板減少性紫癜；軸突和神經元神經病；巴羅病(Balo disease)；白塞氏病；大皰性類天皰瘡；心肌病；Castleman病；口炎性腹瀉(非熱帶性)；恰加斯氏病；慢性疲勞綜合症；慢性炎性脫髓鞘性多發性神經病；變應性肉芽腫綜合症(Churg-Strauss syndrome)；瘢痕性類天皰瘡/良性黏膜類天皰瘡；克羅恩氏病；柯根氏綜合症(Cogans syndrome)；冷凝集素病；先天性心臟傳導阻滯；柯薩基病毒性心肌炎(Coxsackie myocarditis)；CREST病；原發性混合型冷球蛋白血症；脫髓鞘性神經病(Demyelinating neuropathies)；皮膚肌炎；德維克氏病、盤狀狼瘡；德雷斯勒綜合症；子宮內膜異位；嗜酸性細胞性筋膜炎(Eosinophilic fasciitis)；結節性紅斑；實驗性變應性腦脊髓炎；Evans綜合症；纖維肌痛；纖維性肺泡炎；巨細胞動脈炎(顳動脈炎)；肺出血腎炎綜合症；格雷夫斯病； 格林-巴厘綜合症；橋本氏病(Hashimoto's disease)；溶血性貧血；過敏性紫癜；妊娠皰疹；低丙球蛋白血症；特發性血小板減少性紫癜；IgA腎病；免疫調節性脂蛋白；包涵體肌炎；胰島素依賴型糖尿病病(1型)；間質性膀胱炎；幼年型關節炎；幼年型糖尿病；川崎病；Lambert-Eaton綜合症；白血球碎裂性血管炎；扁平苔癬；硬化性苔癬；木樣結膜炎；線性IgA疾病(LAD)；狼瘡(SLE)、萊姆病(Lyme disease)；美尼爾氏病(Meniere's disease)、顯微鏡下多血管炎；混合性結蒂組織病；蠶蝕性角膜潰瘍(Mooren's ulcer)；穆-哈二氏病(Mucha-Habermann disease)；多發性硬化；重症肌無力；肌炎；發作性睡病；中性粒細胞減少症；眼瘢痕性類天皰疫；骨關節炎；復發性風濕症；副腫瘤性小腦變性；陣發性睡眠性血紅蛋白尿症；帕-羅二氏綜合症(Parsonnage-Turner syndrome)；睫狀體扁平部炎(周邊眼色素層炎)；天皰瘡；周圍神經病；靜脈周圍性腦脊髓炎；惡性貧血；POEMS綜合症；結節性多動脈炎；I、II和III型自體免疫性多腺性綜合症；風濕性多肌痛；多肌炎；心肌梗死後綜合症；心包切開術後綜合症；黃體酮皮炎；原發膽汁性月硬化(primary biliary cirrhosis)、原發性膽汁性肝硬化；牛皮癬；牛皮癬關節炎；特發性肺纖維化；壞疽性膿皮病；純紅血球再生障礙；雷諾氏現象；反射交感性營養不良；萊特爾氏綜合症(Reiter's syndrome)；復發性多軟骨炎；多動腿綜合症(Restless legs syndrome)；風濕熱；類風濕性關節炎；類肉瘤病；施密特綜合症(Schmidt syndrome)；鞏膜炎；硬皮病；乾燥綜合症；精子和睾丸自體免疫病；僵人綜合症(Stiff person syndrome)、亞急性細菌性心內膜炎；交感性眼炎；多發性大動脈炎、顳動脈炎/巨細胞動脈炎；血小板減少性紫癜；自體免疫性甲狀腺疾病；Tolosa-Hunt綜合症；橫貫性脊髓炎和壞死性脊髓病；潰瘍性結腸炎；未分化結締組織病；眼色素層炎；血管炎；水皰性皮膚病；白斑病；和華格納氏肉芽病病。特別感興趣的更常見的自體免疫性疾病包括(a)結締組織疾病，如全身性紅斑狼瘡、類風 濕性關節炎、系統性硬皮病(硬皮病)、乾燥綜合症，(b)神經肌肉疾病，如多發性硬化、重症肌無力、格林-巴厘綜合症，(c)內分泌疾病，如橋本氏甲狀腺炎、格雷夫斯病、胰島素依賴型(1型)糖尿病，和(d)胃腸疾病，如炎症性腸病(包括克羅恩氏病和潰瘍性結腸炎)，和(e)其他疾病，如血管炎綜合症、血液自體免疫性疾病、和自體免疫性皮膚病。
自體免疫性疾病的特徵可能在於存在自身抗體。自身抗體可以特異性結合至宿主靶或抗原，例如類風濕性因子(例如，在類風濕性關節炎中)；拓撲異構酶(例如，在硬皮病中)；髓鞘鹼性蛋白(例如，在多發性硬化中)；基底膜iv型膠原蛋白(例如，在肺出血腎炎綜合症中)；神經節苷脂(例如，在格林-巴厘綜合症中)；血小板(例如，慢性特發性血小板減少症)；平滑肌肌動蛋白(例如，在自體免疫性肝炎中)；大皰性類天皰瘡抗原1和2；也稱為半橋粒抗原(例如，在大皰性類天皰瘡中)；轉麩醯胺酸酶(例如，在腹腔疾病中)；橋粒芯糖蛋白3(例如，在尋常型天皰瘡中)；p62或sp100或線粒體(m2)抗原(例如，在原發性膽汁性肝硬化中)；中性粒細胞胞質c-ANCA(例如，在華格納氏肉芽病病中)；中性粒細胞核周p-ANCA(例如，結節性多動脈炎、顯微鏡下多血管炎、變應性肉芽腫綜合症、系統性血管炎(非特異性))；雙股DNA(例如，在全身性紅斑狼瘡中)；外來體複合物(例如，在硬化性肌炎中)；Ro或La抗原(例如，在全身性紅斑狼瘡和新生兒心臟傳導阻滯、或原發性乾燥綜合症中)；史密斯抗原(例如，在全身性紅斑狼瘡中)；磷脂抗原(例如，在抗磷脂綜合症中)；SSA或SSB抗原(例如，在乾燥綜合症中)；著絲粒(例如，在CREST綜合症中；線粒體(例如，在原發性膽汁性肝硬化中)；菸鹼型乙醯膽鹼促效劑(例如，在重症肌無力中)；電壓閘控鈣通道(例如，在Lambert-Eaton綜合症中)；甲狀腺過氧化物酶(例如，在橋本氏甲狀腺炎中)；TSH受體(例如，在格雷夫斯病中)；Hu抗原(例如，在副腫瘤性小腦綜合症 (paraueoplastic cerebellar syndrome)中)；電壓閘控鉀通道(例如，在邊緣性腦炎和N-甲基-D-天冬胺酸受體中(例如，在腦炎中)。多於一種類型的自身抗體可能與免疫障礙相關或反之亦然，並且這份清單並不詳盡。例如，已在類風濕性關節炎中鑒定的自身抗原包括關節相關蛋白，如II型膠原、人軟骨細胞糖蛋白39、和蛋白多糖；以及熱休克蛋白、瓜胺酸化絲聚蛋白、免疫球蛋白、葡萄糖-6-磷酸異構酶、p205、和BiP。
可以用本揭露之CD19結合分子治療的自體免疫疾病包括全身性紅斑狼瘡(SLE)、乾燥綜合症、硬皮病、類風濕性關節炎(RA)、幼年特發性關節炎、移植物抗宿主病、皮肌炎、I型糖尿病、橋本氏甲狀腺炎、格雷夫斯病、愛迪生氏病、乳糜瀉、與黏膜免疫相關的病症、腸易激綜合症(例如，克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎)、惡性貧血、尋常型天皰瘡、白斑病、自體免疫性溶血性貧血、特發性血小板減少性紫癜、巨細胞動脈炎、重症肌無力、多發性硬化症(MS)(例如，復發緩解型多發性硬化症(RRMS))、腎小球腎炎、肺出血腎炎綜合症、大皰性類天皰瘡、潰瘍性結腸炎、格巴二氏綜合症、慢性炎性脫髓鞘性多發性神經病、抗磷脂綜合症、發作性睡病、類肉瘤病、和華格納氏肉芽病病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療全身性紅斑狼瘡(SLE)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療乾燥綜合症。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療硬皮病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療類風濕性關節炎(RA)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療幼年特發性關節炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療移植物抗宿主病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療皮肌炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療I型糖尿病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療橋本氏甲狀腺炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療格雷夫斯病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療愛迪生氏病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療乳糜瀉。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療克羅恩氏病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療惡性貧血。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療尋常型天皰瘡。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療白斑病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療自體免疫性溶血性貧血。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療特發性血小板減少性紫癜。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療巨細胞動脈炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療重症肌無力。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療多發性硬化症(MS)。在一些實施方式中，該MS係復發緩解型多發性硬化症(RRMS)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療腎小球腎炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療肺出血腎炎綜合症。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療大皰性類天皰瘡。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療潰瘍性結腸炎。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療格巴二氏綜合症。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療慢性炎性脫髓鞘性多發性神經病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療抗磷脂綜合症。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療發作性睡病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療類肉瘤病。
在一些實施方式中，該CD19結合分子用於治療華格納氏肉芽病病。
與CD19表現相關的其他非癌症相關疾病和障礙的實例包括但不限於：病毒，例如HIV、感染和真菌，例如新隱球菌、感染。
5.17.組合療法
本揭露之CD19結合分子可以與其他已知的藥劑和療法組合使用。例如，該CD19結合分子可以用於治療方案，該治療方案與手術、化療、抗體、輻射、肽疫苗、類固醇、細胞毒素、蛋白酶體抑制劑、免疫調節藥物(例如IMiD)、BH3模擬物、細胞介素療法、幹細胞移植或其任何組合進行組合。
為了方便起見，與CD19結合分子組合使用的藥劑在本文中被稱為「另外的」藥劑。
如本文所用的，「組合」投與意指在受試者患病期間將兩種(或更多種)不同的治療遞送至受試者，例如在受試者被診斷患有障礙後並且在該障礙被治癒或清除前或者在由於其他原因終止治療前遞送兩種或多種治療。在一些實施方式中，第一治療的遞送在第二治療的遞送開始時仍在進行，所以就施用而言存在重疊。這在本文中有時被稱為「同時遞送」或「並行遞送」。例如，可以將每種療法在相同的時間或以任何順序依序在不同的時間點投與至受 試者；然而，如果不在相同的時間投與，則它們應當在時間上充分接近地投與，從而以提供所希望的治療效果。
CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑可以以相同或分開的組成物同時或依序投與。對於依序投與，可以首先投與CD19結合分子並且可以其次投與另外的藥劑，或者可以顛倒投與順序。
該CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑可以以任何適當的形式和藉由任何合適的途徑投與至受試者。在一些實施方式中，該投與途徑係相同的。在其他實施方式中，該投與途徑係不同的。
在其他實施方式中，一種治療的遞送在另一種治療的遞送開始前結束。
在每一種情況的一些實施方式中，治療因組合施用而更有效。例如，與不存在第一治療的條件下投與第二治療所觀察到的結果相比，第二治療更有效，例如使用更少的第二治療觀察到等效的作用，或者第二治療將症狀減少更大的程度，或者觀察到對第一治療而言類似的情況。在一些實施方式中，與一種治療不存在的情況下遞送另一種治療所觀察到的結果相比，遞送使得症狀或與該障礙相關的有他參數減少更多。兩種治療的作用可以部分累加、完全累加或大於累加。該遞送可以使得當遞送第二治療時，遞送的第一治療的作用仍然是可以檢測的。
該CD19結合分子和/或另外的藥劑可以在活性障礙期間，或在緩解或活性較低的疾病期間投與。CD19結合分子可以在用一種或多種另外的藥劑治療之前投與，與用一種或多種另外的藥劑治療並行投與，在用一種或多種另外的藥劑治療後投與，或在障礙緩解期間投與。
當組合投與時，可以將CD19結合分子和/或一種或多種另外的藥劑以比單獨使用(例如，作為單一療法)的每種藥劑的量或劑量更高、更低或相同的量或劑量投與。
本揭露之組合療法的一種或多種另外的藥劑可以並行投與至受試者。該術語「並行」不限於在完全相同的時間投與療法(例如，預防劑或治療劑)，而是意指將包含CD19結合分子的藥物組成物以一種順序並在一定時間間隔內向受試者投與，使得本揭露之分子可以與一種或多種另外的療法一起發揮作用，以提供增加的益處(與如果以其他方式投與它們時相比)。例如，可以將每種療法在相同的時間或以任何順序依序在不同的時間點投與至受試者；然而，如果不在相同的時間施用，則應當在時間上充分接近地施用該療法，以提供所希望的治療或預防作用。可以將每種療法以任何適當的形式並且藉由任何合適的途徑分別施用至受試者。
該CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑可以藉由相同或不同投與途徑投與至受試者。
可以循環投與該CD19結合分子和一種或多種另外的藥劑。循環療法關於投與第一療法(例如，第一預防劑或治療劑)一段時間，然後投與第二療法(例如，第二預防劑或治療劑)一段時間，視需要，然後投與第三療法(例如，預防劑或治療劑)一段時間等，並重複這種依序投與，即循環，以減少對該療法之一的抗性的發展，以避免或減少該療法之一的副作用，和/或以改善該療法的功效。
在某些情況下，該一種或多種另外的藥劑係其他抗癌劑、抗過敏劑、抗噁心劑(或抗嘔劑)、鎮痛藥、細胞保護劑及其組合。
在一個實施方式中，CD19結合分子可以與抗癌劑(例如，化學治療劑)組合使用。示例性化療劑包括蒽環類(例如，多柔比星(例如，脂質 體多柔比星))、長春花生物鹼(例如，長春花鹼、長春新鹼、長春地辛、長春瑞濱)、烷基化劑(例如，環磷醯胺、達卡巴
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、美法侖、異環磷醯胺、替莫唑胺)、免疫細胞抗體(例如，阿侖珠單抗、吉妥單抗、利妥昔單抗、托西莫單抗、奧比妥珠單抗、奧法木單抗、達雷妥木單抗、依洛妥珠單抗)、抗代謝物(包括例如葉酸拮抗劑、嘧啶類似物、嘌呤類似物和腺苷脫胺酶抑制劑(例如，氟達拉濱))、mTOR抑制劑、TNFR糖皮質激素誘導的TNFR相關蛋白(GITR)促效劑、蛋白酶體抑制劑(例如，阿克拉黴素A、膠黴毒素或硼替佐米)、免疫調製劑如沙利度胺或沙利度胺衍生物(例如，來那度胺)。
考慮用於組合療法的一般化療藥劑包括阿那曲唑(Arimidex®)、比卡魯胺(Casodex®)、硫酸博萊黴素(Blenoxane®)、白消安(Myleran®)、白消安注射液(Busulfex®)、卡培他濱(Xeloda®)、N4-戊氧基羰基-5-去氧-5-氟胞苷、卡鉑(Paraplatin®)、卡莫司汀(BiCNU®)、苯丁酸氮芥(Leukeran®)、順鉑(Platinol®)、克拉屈濱(Leustatin®)、環磷醯胺(Cytoxan®或Neosar®)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷(Cytosar-U®)、阿糖胞苷脂質體注射液(DepoCyt®)、達卡巴
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(DTIC-Dome®)、更生黴素(放線菌素D、Cosmegan)、鹽酸柔紅黴素(Cerubidine®)、檸檬酸柔紅黴素脂質體注射液(DaunoXome®)、地塞米松、多西他賽(Taxotere®)、鹽酸多柔比星(Adriamycin®、Rubex®)、依託泊苷(Vepesid®)、磷酸氟達拉濱(Fludara®)、5-氟尿嘧啶(Adrucil®、Efudex®)、氟他胺(Eulexin®)、tezacitibine、吉西他濱(二氟去氧胞苷(difluorodeoxycitidine))、羥基脲(Hydrea®)、伊達比星(Idamycin®)、異環磷醯胺(IFEX®)、伊立替康(Camptosar®)、L-天冬醯胺酶(ELSPAR®)、甲醯四氫葉酸鈣、美法侖(Alkeran®)、6-巰基嘌呤(Purinethol®)、胺甲喋呤(Folex®)、米托蒽醌(mitoxantrone)(Novantrone®)、吉妥單抗(mylotarg)、紫杉醇(Taxol®)、phoenix(Yttrium90/MX-DTPA)、噴司他丁、polifeprosan 20 共卡莫司汀植入物(Gliadel®)、檸檬酸它莫西芬(Nolvadex®)、替尼泊苷(Vumon®)、6-硫鳥嘌呤、噻替派(thiotepa)、替拉紮明(tirapazamine)(Tirazone®)、注射用托泊替康鹽酸鹽(Hycamptin®)、長春花鹼(Velban®)、長春新鹼(Oncovin®)、和長春瑞濱(Navelbine®)。
用於與本揭露之CD19結合分子組合的特別感興趣的抗癌劑包括：蒽環黴素；烷基化劑；抗代謝物；抑制鈣依賴性磷酸酶鈣調磷酸酶或p70S6激酶FK506)或抑制p70S6激酶的藥物；mTOR抑制劑；免疫調節劑；蒽環黴素；長春花生物鹼；蛋白酶體抑制劑；GITR促效劑(例如，GWN323)；蛋白酪胺酸磷酸酶抑制劑；CDK4激酶抑制劑；BTK抑制劑；MKN激酶抑制劑；DGK激酶抑制劑；溶瘤病毒；BH3模擬物；和細胞介素療法。
示例性的烷化劑包括但不限於氮芥、乙烯亞胺衍生物、烷基磺酸鹽、亞硝基脲和三氮烯)：烏拉莫司汀(Aminouracil Mustard®、Chlorethaminacil®、Demethyldopan®、Desmethyldopan®、Haemanthamine®、Nordopan®、Uracil nitrogen mustard®、Uracillost®、Uracilmostaza®、Uramustin®、Uramustine®)、氮芥(chlormethine)(Mustargen®)、環磷醯胺(Cytoxan®、Neosar®、Clafen®、Endoxan®、Procytox®、RevimmuneTM)、異環磷醯胺(Mitoxana®)、美法侖(Alkeran®)、苯丁酸氮芥(Leukeran®)、哌泊溴烷(Amedel®、Vercyte®)、三乙烯蜜胺(Hemel®、Hexalen®、Hexastat®)、三乙烯硫代磷醯胺、替莫唑胺(Temodar®)、噻替派(Thioplex®)、白消安(Busilvex®、Myleran®)、卡莫司汀(BiCNU®)、洛莫司汀(CeeNU®)、鏈脲佐菌素(Zanosar®)和達卡巴
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(DTIC-Dome®)。另外的示例性烷基化劑包括但不限於奧沙利鉑(Eloxatin®)；替莫唑胺(Temodar®和Temodal®)；放線菌素D(也稱為放線菌素-D，Cosmegen®)；美法侖(也稱為L-PAM、L-溶肉瘤素、和苯丙胺酸氮芥，Alkeran®)；六甲蜜胺(也稱為六甲基三聚氰胺(HMM)， Hexalen®)；卡莫司汀(BiCNU®)；苯達莫司汀(Treanda®)；白消安(Busulfex®和Myleran®)；卡鉑(Paraplatin®)；洛莫司汀(也稱為CCNU，CeeNU®)；順鉑(也稱為CDDP，Platinol®和Platinol®-AQ)；苯丁酸氮芥(Leukeran®)；環磷醯胺(Cytoxan®和Neosar®)；達卡巴
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(也稱為DTIC、DIC和咪唑甲醯胺，DTIC-Dome®)；六甲蜜胺(也稱為六甲基三聚氰胺(HMM)，Hexalen®)；異環磷醯胺(Ifex®)；潑尼氮芥(Prednumustine)；甲苄肼(Matulane®)；氮芥(Mechlorethamine)(也稱為氮芥(nitrogen mustard)、氮芥(mustine)和鹽酸氮芥，Mustargen®)；鏈脲黴素(Zanosar®)；噻替哌(也稱為硫代磷醯胺(thiophosphoamide)、TESPA和TSPA，Thioplex®)；環磷醯胺(Endoxan®、Cytoxan®、Neosar®、Procytox®、Revimmune®)；和鹽酸鹽酸苯達莫司汀(Treanda®)。
示例性mTOR抑制劑包含例如坦羅莫司；地磷莫司(正式稱為地弗羅莫司(deferolimus)，(1R,2R,4S)-4-[(2R)-2[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-二羥基-19,30-二甲氧基-15,17,21,23,29,35-六甲基-2,3,10,14,20-五氧雜-11,36-二氮雜-4-氮雜三環[30.3.1.04,9]三十六碳-16,24,26,28-四烯-12-基]丙基]-2-甲氧基環己基二甲基次膦酸酯，也稱為AP23573和MK8669，並且描述於PCT公開案號WO 03/064383中)；依維莫司(Afinitor®或RAD001)；雷帕黴素(AY22989，Sirolimus®)；塞馬莫德(simapimod)(CAS 164301-51-3)；西羅莫司(emsirolimus)，(5-{2,4-雙[(3S)-3-甲基
Figure 109116556-A0202-12-0408-340
啉-4-基]吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-基}-2-甲氧基苯基)甲醇(AZD8055)；2-胺基-8-[反式-4-(2-羥基乙氧基)環己基]-6-(6-甲氧基-3-吡啶基)-4-甲基-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(PF04691502，CAS 1013101-36-4)；和N2-[1,4-二側氧基-4-[[4-(4-側氧基-8-苯基-4H-1-苯并哌喃-2-基)
Figure 109116556-A0202-12-0408-341
啉鎓-4-基]甲氧基]丁基]-L-精胺醯甘胺醯-L-α-天冬胺醯L-絲胺酸-(SEQ ID NO：757)，內鹽(SF1126，CAS 936487-67-1)、XL765。
示例性免疫調節劑包括，例如，阿夫土珠(afutuzumab)(可從Roche®獲得)；乙二醇化非格司亭(Neulasta®)；來那度胺(CC-5013，Revlimid®)；IMID(如沙利度胺(Thalomid®)、來那度胺、泊馬度胺、和阿普斯特)、actimid(CC4047)；和IRX-2(人細胞介素的混合物，包括白細胞介素1、白細胞介素2、和干擾素γ，CAS 951209-71-5，可從IRX Therapeutics公司獲得)。
示例性蒽環類藥物包括，例如，阿黴素(Adriamycin®和Rubex®)；博萊黴素(lenoxane®)；柔紅黴素(鹽酸柔紅黴素、正定黴素、和鹽酸紅比黴素，Cerubidine®)；柔紅黴素脂質體(檸檬酸柔紅黴素脂質體，DaunoXome®)；米托蒽醌(DHAD，Novantrone®)；表柔比星(EllenceTM )；伊達比星(Idamycin®，Idamycin PFS®)；絲裂黴素C(Mutamycin®)；格爾德黴素；除莠黴素；近灰黴素(ravidomycin)；和去乙醯近灰黴素(desacetylravidomycin)。
示例性長春花生物鹼包括，例如，酒石酸長春瑞濱(Navelbine®)、長春新鹼(Oncovin®)、和長春地辛(Eldisine®)；長春鹼(也稱為硫酸長春鹼、長春花鹼和VLB，Alkaban-AQ®和Velban®)；和長春瑞濱(Navelbine®)。
示例性蛋白酶體抑制劑包括硼替佐米(Velcade®)；卡非佐米(PX-171-007，(S)-4-甲基-N-((S)-1-(((S)-4-甲基-1-((R)-2-甲基環氧乙烷-2-基)-1-側氧基戊烷-2-基)胺基)-1-側氧基-3-苯基丙-2-基)-2-((S)-2-(2-
Figure 109116556-A0202-12-0409-342
啉代乙醯胺基)-4-苯基丁醯胺基)-戊醯胺)；marizomib(NPI-0052)；檸檬酸伊沙佐米(MLN-9708)；delanzomib(CEP-18770)；和O-甲基-N-[(2-甲基-5-噻唑基)羰基]-L-絲胺醯基-O-甲基-N-[(1S)-2-[(2R)-2-甲基-2-環氧乙烷基]-2-側氧基-1-(苯基甲基)乙基]-L-絲胺醯胺(ONX-0912)。
示例性BH3模擬物包括維尼托克萊克斯(venetoclax)(ABT-737，4-{4-[(4’-氯-2-二苯基基)甲基]-1-哌
Figure 109116556-A0202-12-0410-343
基}-N-[(4-{[(2R)-4-(二甲基胺基)-1-(苯基氫硫基)-2-丁基]胺基}-3-硝基苯基)磺醯基]苯甲醯胺和那維托克萊克斯(navitoclax)(以前稱為ABT-263)。
示例性細胞介素療法包括白介素2(IL-2)和干擾素-α(IFN-α)。
在某些方面，不同的化學治療劑的「混合物」作為一種或多種另外的藥劑投與。
在一些實施方式中，CD19結合分子可以與沙利度胺類化合物的成員組合使用。沙利度胺類別化合物的成員包括，但不限於，來那度胺(CC-5013)、泊馬度胺(CC-4047或ACTIMID)、沙利度胺及其鹽和衍生物。在一些實施方式中，該CD19結合分子與沙利度胺類化合物的一、二、三、或更多個成員組合使用。沙利度胺類似物和沙利度胺類似物的免疫調節劑特性描述於Bodera和Stankiewicz,Recent Pat Endocr Metab Immune Drug Discov.[內分泌最新專利代謝免疫藥物發現]2011年9月；5(3)：192-6。沙利度胺類似物和E3泛素的結構複合物描述於Gandhi等人，Br J Haematol.[英國血液病雜誌]2014年3月；164(6)：811-21中。藉由利度胺類似物調節E3泛素連接酶描述於Fischer等人，Nature.[自然]2014年8月7日；512(7512)：49-53中。
在一些實施方式中，該沙利度胺類化合物的成員包含具有式(I)的化合物：
Figure 109116556-A0202-12-0410-456
 或其藥學上可接受的鹽、酯、水合物、溶劑化物、或互變異構物，其中：
X係O或S；
R1 係C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、碳環基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中每個視需要被一個或多個R4 取代；
R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫或C1 -C6 烷基；或R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團或硫代羰基基團；
每個R3 獨立地是C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、鹵素、氰基、-C(O)RA 、-C(O)ORB 、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、-S(O)x RE 、-S(O)x N(RC )(RD )、或-N(RC )S(O)x RE ，其中每個烷基、烯基、炔基、和雜烷基獨立地且視需要被一個或多個R6 取代；
每個R4 獨立地是C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、鹵素、氰基、側氧基、-C(O)RA 、-C(O)ORB 、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、-S(O)x RE 、-S(O)x N(RC )(RD )、-N(RC )S(O)x RE 、碳環基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中每個烷基、烯基、炔基、雜烷基、碳環基、雜環基、芳基、和雜芳基獨立地且視需要被一個或多個R7 取代；
RA 、RB 、RC 、RD 、和RE 中的每個獨立地是氫或C1 -C6 烷基；
每個R6 獨立地是C1 -C6 烷基、側氧基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、芳基、或雜芳基，其中每個芳基和雜芳基獨立地且視需要被一個或多個R8 取代；
每個R7 獨立地是鹵素、側氧基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、或-N(RC )C(O)RA ；
每個R8 獨立地是C1 -C6 烷基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、或-N(RC )C(O)RA ；
N係0、1、2、3或4；以及
x係0、1、或2。
在一些實施方式中，X係O。
在一些實施方式中，R1 係雜環基。在一些實施方式中，R1 係6元雜環基、或5元雜環基。在一些實施方式中，R1 係含氮雜環基。在一些實施方式中，R1 係哌啶基(例如，哌啶-2,6-二酮基)。
在一些實施方式中，R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫。在一些實施方式中，R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團。
在一些實施方式中，R3 係C1 -C6 雜烷基、-N(RC )(RD )或-N(RC )C(O)RA 。在一些實施方式中，R3 係C1 -C6 雜烷基(例如，CH2 NHC(O)CH2 -苯基-三級丁基)、-N(RC )(RD )(例如，NH2 )、或-N(RC )C(O)RA (例如，NHC(O)CH3 )。
在實施方式中，X係O。在實施方式中，R1 係雜環基(例如，哌啶-2,6-二酮基)。在實施方式中，R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫。在實施方式中，n係1。在實施方式中，R3 係-N(RC )(RD )(例如，-NH2 )。在實施方式中，該化合物包含來那度胺，例如，3-(4-胺基-1-側氧基異吲哚啉-2-基)哌啶-2,6-二酮，或其藥學上可接受的鹽。在實施方式中，該化合物係來那度胺，例如，根據下式：
Figure 109116556-A0202-12-0412-457
在實施方式中，X係O。在實施方式中，R1 係雜環基(例如，哌啶基-2,6-二酮基)。在一些實施方式中，R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團。在實施方式中，n係1。在實施方式中，R3 係-N(RC )(RD )(例如，-NH2 )。在實施方式中，該化合物包含泊馬度胺，例如，4-胺基-2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)異吲哚啉-1,3-二酮，或其藥學上可接受的鹽。在實施方式中，該化合物係泊馬度胺，例如，根據下式：
Figure 109116556-A0202-12-0413-458
在實施方式中，X係O。在實施方式中，R1 係雜環基(例如，哌啶基-2,6-二酮基)。在實施方式中，R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團。在實施方式中，n係0。在實施方式中，該化合物包含沙利度胺，例如，2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)異吲哚啉-1,3-二酮，或其藥學上可接受的鹽。在實施方式中，該產物係沙利度胺，例如，根據下式：
Figure 109116556-A0202-12-0413-459
在實施方式中，X係O。在實施方式中，R1 係雜環基(例如，哌啶-2,6-二酮基)。在實施方式中，R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫。在實施方式中，n係1。在實施方式中，R3 係C1 -C6 雜烷基(例如，CH2 NHC(O)CH2 -苯基-三級丁基)。在實施方式中，該化合物包含2-(4-(三級丁基)苯基)-N-((2-(2,6-二側氧基哌啶-3-基)-1-側氧基異吲哚啉-5-基)甲基)乙醯胺，或其藥學上可接受的鹽。在實施方式中，該化合物具有如下式所示的結構：
Figure 109116556-A0202-12-0413-460
在一些實施方式中，該化合物係具有式(I-a)的化合物：
Figure 109116556-A0202-12-0413-461
或其藥學上可接受的鹽、酯、水合物、或互變異構物，其中：
環A係碳環基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中每個視需要被一個或多個R4 取代；
M不存在、係C1 -C6 烷基、係C2 -C6 烯基、係C2 -C6 炔基、或係C1 -C6 雜烷基，其中每個烷基、烯基、炔基、和雜烷基視需要被一個或多個R4 取代；
R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫或C1 -C6 烷基；或R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團或硫代羰基基團；
R3a 係氫、C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、鹵素、氰基、-C(O)RA 、-C(O)ORB 、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、-S(O)x RE 、-S(O)x N(RC )(RD )、或-N(RC )S(O)x RE ，其中每個烷基、烯基、炔基、和雜烷基視需要被一個或多個R6 取代；
每個R3 獨立地是C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、鹵素、氰基、-C(O)RA 、-C(O)ORB 、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、-S(O)x RE 、-S(O)x N(RC )(RD )、或-N(RC )S(O)x RE ，其中每個烷基、烯基、炔基、和雜烷基獨立地且視需要被一個或多個R6 取代；
每個R4 獨立地是C1 -C6 烷基、C2 -C6 烯基、C2 -C6 炔基、C1 -C6 雜烷基、鹵代、氰基、側氧基、-C(O)RA 、-C(O)ORB 、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、S(O)x RE 、-S(O)x N(RC )(RD )、-N(RC )S(O)x RE 、碳環基、雜環基、芳基、或雜芳基，其中每個烷基、烯基、炔基、碳環基、雜環基、芳基、或雜芳基獨立地且視需要被一個或多個R7 取代；
RA 、RB 、RC 、RD 、和RE 中的每個獨立地是氫或C1 -C6 烷基；
每個R6 獨立地是C1 -C6 烷基、側氧基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、-N(RC )C(O)RA 、芳基、或雜芳基，其中每個芳基或雜芳基獨立地且視需要被一個或多個R8 取代；
每個R7 獨立地是鹵素、側氧基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、或-N(RC )C(O)RA ；
每個R8 獨立地是C1 -C6 烷基、氰基、-ORB 、-N(RC )(RD )、-C(O)N(RC )(RD )、或-N(RC )C(O)RA ；
N係0、1、2、或3；
O係0、1、2、3、4、或5；以及
x係0、1、或2。
在一些實施方式中，X係O。
在一些實施方式中，M不存在。
在一些實施方式中，環A係雜環基。在一些實施方式中，環A係雜環基，例如，6元雜環基、或5元雜環基。在一些實施方式中，環A係含氮雜環基。在一些實施方式中，環A係哌啶基(例如，哌啶-2,6-二酮基)。
在一些實施方式中，M不存在且環A係雜環基(例如，哌啶基， 例如，哌啶-2,6-二酮基)。
在一些實施方式中，R2a 和R2b 中的每個獨立地是氫。在一些實施方式中，R2a 和R2b 連同與它們所附接的碳原子形成羰基基團。
在一些實施方式中，R3a 係氫、-N(RC )(RD )或-N(RC )C(O)RA 。在一些實施方式中，R3a 係氫。在一些實施方式中，R3a 係-N(RC )(RD )(例如，-NH2 )。在一些實施方式中，R3a 係-N(RC )C(O)RA (例如，NHC(O)CH3 )。
在一些實施方式中，R3 係C1 -C6 雜烷基(例如，CH2 NHC(O)CH2 -苯基-三級丁基)。在一些實施方式中，n係0或1。在一些實施方式中，n係0。在一些實施方式中，n係1。
該化合物可以包含一種或多種手性中心或作為一種或多種立體異構物存在。在一些實施方式中，該化合物包含單一手性中心且是立體異構物 (例如，R立體異構物和S立體異構物)的混合物。在一些實施方式中，該混合物包含一定比率的R立體異構物與S立體異構物，例如，R立體異構物與S立體異構物的比率為約1：1(即，外消旋混合物)。在一些實施方式中，該混合物包含R立體異構物與S立體異構物，其比例為約51：49、約52：48、約53：47、約54：46、約55：45、約60：40、約65：35、約70：30、約75：25、約80：20、約85：15、約90：10、約95：5、或約99：1。在一些實施方式中，該混合物包含S立體異構物與R立體異構物，其比率為約51：49、約52：48、約53：47、約54：46、約55：45、約60：40、約65：35、約70：30、約75：25、約80：20、約85：15、約90：10、約95：5、或約99：1。在一些實施方式中，該化合物係具有式(I)或式(I-a)的單一立體異構物，例如，單一R立體異構物或單一S立體異構物。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與激酶抑制劑組合投與。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係PI3-激酶抑制劑，例如，CLR457、BGT226、或BYL719。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係CDK4抑制劑，例如本文所述之CDK4抑制劑，例如CDK4/6抑制劑，例如像6-乙醯基-8-環戊基-5-甲基-2-(5-哌
Figure 109116556-A0202-12-0416-344
-1-基-吡啶-2-基胺基)-8H -吡啶并[2,3-d ]嘧啶-7-酮，鹽酸鹽(也稱為帕柏西利或PD0332991)。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係BTK抑制劑，例如本文描述的BTK抑制劑，例如像依魯替尼。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係mTOR抑制劑，例如本文描述的mTOR抑制劑，例如像雷帕黴素、雷帕黴素類似物、OSI-027。該mTOR抑制劑可以是例如mTORC1抑制劑和/或mTORC2抑制劑，例如本文描述的mTORC1抑制劑和/或mTORC2抑制劑。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係MNK抑制劑，例如本文描述的MNK抑制劑，例如像4-胺基-5-(4-氟苯胺基)-吡唑并[3,4-d ]嘧啶。該MNK抑制劑可以是例如MNK1a、MNK1b、MNK2a和/或MNK2b抑制劑。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係本文所述之雙PI3K/mTOR抑制劑，例如像PF-04695102。在一個實施方式中，該激酶抑制劑係 DGK抑制劑，例如本文所述之DGK抑制劑，例如像DGKinh1(D5919)或DGKinh2(D5794)。
在一個實施方式中，激酶抑制劑係選自以下的BTK抑制劑：依魯替尼(PCI-32765)；GDC-0834；RN-486；CGI-560；CGI-1764；HM-71224；CC-292；ONO-4059；CNX-774；和LFM-A13。在實施方式中，該BTK抑制劑不會降低或抑制白細胞介素-2誘導型激酶(ITK)的激酶活性，並且選自GDC-0834、RN-486；CGI-560；CGI-1764；HM-71224；CC-292；ONO-4059；CNX-774；和LFM-A13。
在一個實施方式中，該激酶抑制劑係BTK抑制劑，例如依魯替尼(PCI-32765)。在一些實施方式中，將CD19結合分子與BTK抑制劑(例如，依魯替尼)組合投與至受試者。在實施方式中，將CD19結合分子與依魯替尼(也稱為PCI-32765)組合投與至受試者(例如，投與至患有CLL、外膜細胞淋巴瘤(MCL)、或小淋巴細胞性淋巴瘤(SLL)的受試者)。例如，受試者可以在染色體17的短臂中具有缺失(例如白血病細胞中的del(17p))。在其他實例中，受試者不具有del(17p)。在一些實施方式中，受試者患有復發CLL或SLL，例如受試者此前已投與癌症療法(例如此前已投與一次、兩次、三次、或四次先前癌症療法)。在一些實施方式中，受試者患有難治性CLL或SLL。在其他實施方式中，受試者患有濾泡性淋巴瘤，例如復發或難治性濾泡性淋巴瘤。在一些實施方式中，將依魯替尼以約300-600mg/天(例如約300-350、350-400、400-450、450-500、500-550、或550-600mg/天，例如約420mg/天或約560mg/天)的劑量例如口服投與。在一些實施方式中，依魯替尼以每天約250mg、300mg、350mg、400mg、420mg、440mg、460mg、480mg、500mg、520mg、540mg、560mg、580mg、600mg(例如，250mg、420mg或560mg)的劑量投與一段時間，例如每天投與達21天週期，或每天投與達28天週期。在一個實施方式中，施用1、 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更多個週期的依魯替尼。在一些實施方式中，將依魯替尼與利妥昔單抗組合投與。參見例如，Burger等人，2013.Ibrutinib In Combination With Rituximab(iR)Is Well Tolerated and Induces a High Rate Of Durable Remissions In Patients With High-Risk Chronic Lymphocytic Leukemia(CLL)：New,Updated Results Of a Phase II Trial In 40 Patients[與利妥昔單抗(iR)組合的依魯替尼耐受良好並且在高風險慢性淋巴細胞性白血病(CLL)患者中誘導高比率的持久緩解：40名患者的II期試驗的新的更新結果]，文摘675,55th ASH Annual Meeting and Exposition,New Orleans,LA 7-10 Dec[12月7-10日路易士安娜州新奧爾良第55屆ASH年會和博覽會上的演講]。不受理論的束縛，據認為添加依魯替尼增強了T細胞增殖響應，並且可以使T細胞從T-輔助性-2(Th2)轉變為T-輔助性-1(Th1)表型。Th1和Th2係輔助性T細胞的表型，其中Th1相比Th2指導不同的免疫響應途徑。Th1表型與促炎響應相關，例如用於殺傷細胞(如細胞內病原體/病毒或癌細胞)，或使自體免疫響應永久化。Th2表型與嗜酸性粒細胞積累和抗炎症響應相關。
在一些實施方式中，將CD19結合分子與表皮生長因子受體(EGFR)的抑制劑組合投與。
在一些實施方式中，EGFR抑制劑係(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物。
在一些實施方式中，該EGFR抑制劑，例如，(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物，以例如每天150-250mg的劑量投與。在一些實施方式中，該EGFR抑制劑，例如，(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑 -2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物，以約150、200、或250mg，或約150-200或200-250mg的劑量投與。
在一些實施方式中，該EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物，係共價的、不可逆的酪胺酸激酶抑制劑。在某些實施方式中，該EGFR抑制劑，(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物，抑制活化性EGFR突變(L858R，ex19del)。在其他實施方式中，該EGFR抑制劑，(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物，不抑制、或不實質上抑制野生型(wt)EGFR。化合物A40在EGFR突變NSCLC患者中顯示出功效。在一些實施方式中，該EGFR抑制劑(R,E)-N-(7-氯-1-(1-(4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯)氮雜環庚烷-3-基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-2-甲基異菸醯胺(化合物A40)、或在PCT公開案號WO 2013/184757中揭露的化合物還抑制TEC家族激酶中的一種或多種激酶。Tec家族激酶包括，例如，ITK、BMX、TEC、RLK、和BTK，並且在T-細胞受體傳播和趨化因子受體傳訊中是最重要的(Schwartzberg等人(2005)Nat.Rev.Immunol.[免疫學綜述]第284-95頁)。例如，化合物A40可以抑制ITK，其中生化IC50為1.3nM。ITK係Th2細胞存活的關鍵酶，其抑制作用導致Th2和Th1細胞之間平衡的轉變。
在一些實施方式中，EGFR抑制劑選自厄洛替尼、吉非替尼、塞妥昔單抗、帕尼妥木單抗、奈西妥木單抗、PF-00299804、尼莫妥珠單抗、或RO5083945之一。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與腺苷A2A受體(A2AR)拮抗劑組合投與。示例性A2AR拮抗劑包括，例如，PBF509(帕羅生物製藥公司/諾華公司(Palobiofarma/Novartis))、CPI444/V81444(卡沃斯公司/基因泰克公司(Corvus/Genentech))、AZD4635/HTL-1071(阿斯利康公司/海普泰公司(AstraZeneca/Heptares))、維帕迪南(Redox/Juno公司)、GBV-2034(Globavir公司)、AB928(阿克斯生物科學公司(Arcus Biosciences))、茶鹼、伊曲茶鹼(協和發酵工業株式會社(Kyowa Hakko Kogyo))、托紮迪南/SYN-115(Acorda公司)、KW-6356(協和發酵工業株式會社)、ST-4206(理地安生物科學公司(Leadiant Biosciences))、普瑞迪南/SCH 420814(默克公司/謝林公司(Merck/Schering))、和NIR178(諾華公司)。
在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係PBF509。PBF509和其他A2AR拮抗劑揭露於US 8,796,284和WO 2017/025918中。在某些實施方式中，該A2AR拮抗劑係5-溴-2,6-二-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0420-462
在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係CPI444/V81444。CPI-444和其他A2AR拮抗劑揭露於WO 2009/156737中。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係(S )-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係(R )-7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺，或其外消旋物。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係7-(5-甲基呋喃-2-基)-3-((6-(((四氫呋喃-3-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)甲 基)-3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0421-2930
在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係AZD4635/HTL-1071。A2AR拮抗劑揭露於WO 2011/095625中。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係6-(2-氯-6-甲基吡啶-4-基)-5-(4-氟苯基)-1,2,4-三
Figure 109116556-A0202-12-0421-421
-3-胺。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0421-464
在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係ST-4206(理地安生物科學公司)。在某些實施方式中，該A2AR拮抗劑係描述於US 9,133,197中的A2AR拮抗劑。在某些實施方式中，A2AR拮抗劑具有以下結構：
Figure 109116556-A0202-12-0421-463
在某些實施方式中，該A2AR拮抗劑係描述於US 8114845、US 9029393、US 20170015758、或US 20160129108中的A2AR拮抗劑。
在某些實施方式中，A2AR拮抗劑係伊曲茶鹼(CAS註冊號：155270-99-8)。伊曲茶鹼也稱為KW-6002或8-[(E)-2-(3,4-二甲氧基苯基)乙烯基]-1,3-二乙基-7-甲基-3,7-二氫-1H-嘌呤-2,6-二酮。例如，在LeWitt等人，(2008)Annals of Neurology [神經病學年鑒]63(3)：295-302)中揭露了伊曲茶鹼。
在某些實施方式中，A2aR拮抗劑係托紮迪南(Biotie公司)。托紮迪南也稱為SYN115或4-羥基-N-(4-甲氧基-7-
Figure 109116556-A0202-12-0422-419
啉-4-基-1,3-苯并噻唑-2-基)-4-甲基哌啶-1-甲醯胺。托紮迪南阻斷在A2a受體上的內源性腺苷的作用，導致多巴胺對D2受體的作用增強，並抑制mGluR5受體上的麩胺酸的作用。在一些實施方式中，A2aR拮抗劑係普瑞迪南(CAS登記號：377727-87-2)。普瑞迪南也稱為SCH 420814或2-(2-呋喃基)-7-[2-[4-[4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-1-哌
Figure 109116556-A0202-12-0422-420
基]乙基]7H-吡唑并[4,3-e][1,2,4]三唑并[1,5-c]嘧啶-5-胺。普瑞迪南被開發為一種藥物，可作為腺苷A2A受體的有效和選擇性拮抗劑。
在某些實施方式中，A2aR拮抗劑係維帕迪南。維帕迪南也稱為BIIB014、V2006、或3-[(4-胺基-3-甲基苯基)甲基]-7-(呋喃-2-基)三唑并[4,5-d]嘧啶-5-胺。
其他示例性A2aR拮抗劑包括例如，ATL-444、MSX-3、SCH-58261、SCH-412,348、SCH-442,416、VER-6623、VER-6947、VER-7835、CGS-15943、或ZM-241,385。
在一些實施方式中，A2aR拮抗劑係A2aR途徑拮抗劑(例如，CD-73抑制劑，例如抗CD73抗體)係MEDI9447。MEDI9447係對CD73具有特異性的單株抗體。藉由CD73靶向腺苷的細胞外產生可以降低腺苷的免疫抑制作用。MEDI9447報導為具有一系列活性，例如，抑制CD73外核苷酸酶活性、減輕AMP介導的淋巴細胞抑制、以及抑制同基因腫瘤生長。MEDI9447可以驅動腫瘤微環境中骨髓和淋巴浸潤白血球群體兩者的變化。該等變化包括例如CD8效應 細胞和活化的巨噬細胞的增加，以及骨髓源性抑制細胞(MDSC)和調節性T淋巴細胞的比例的降低。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與CD20抑制劑組合投與。
在一個實施方式中，該CD20抑制劑係抗CD20抗體或其片段。在實施方式中，該抗體係單特異性抗體，並且在另一個實施方式中，抗體係雙特異性抗體。在實施方式中，該CD20抑制劑係嵌合小鼠/人單株抗體，例如利妥昔單抗。在實施方式中，該CD20抑制劑係人單株抗體，如奧法木單抗。在實施方式中，該CD20抑制劑係人源化抗體，如奧瑞珠單抗(ocrelizumab)、維妥珠單抗(veltuzumab)、奧比妥珠單抗(obinutuzumab)、奧卡妥珠單抗(ocaratuzumab)或PRO131921(基因泰克公司)。在實施方式中，該CD20抑制劑係融合蛋白，該融合蛋白包含抗CD20抗體的一部分，如TRU-015(特魯比昂藥品公司(Trubion Pharmaceuticals))。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與CD22抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該CD22抑制劑係小分子或抗CD22抗體分子。在一些實施方式中，該抗體係單特異性抗體，視需要軛合至第二藥劑(例如化學治療劑)。例如，在實施方式中，該抗體係抗CD22單株抗體-MMAE軛合物(例如，DCDT2980S)。在實施方式中，該抗體係抗CD22抗體的scFv，例如抗體RFB4的scFv。該scFv可以與假單胞菌外毒素-A的全部或片段融合(例如，BL22)。在實施方式中，該抗體係人源化抗CD22單株抗體(例如，依帕珠單抗(epratuzumab))。在實施方式中，該抗體或其片段包括抗CD22抗體的Fv部分，該Fv部分視需要與假單胞菌外毒素-A的全部或片段(例如，38KDa片段)共價融合(例如，帕舒托-莫塞妥莫單抗(moxetumomab pasudotox))。在實施方式中，該抗CD22抗體係抗CD19/CD22雙特異性抗體，視需要軛合至毒素。例如，在一個實施方式中，該抗CD22抗體包含視需要與白喉毒素(DT)的全部或一部 分(例如，白喉毒素(DT)的前389個胺基酸，DT 390)連接的抗CD19/CD22雙特異性部分(例如，識別人CD19和CD22的兩種scFv配位基)，例如配位基定向毒素，如DT2219ARL)。在另一個實施方式中，該雙特異性部分(例如，抗CD19/抗CD22)與毒素如去糖基化的蓖麻毒蛋白A鏈(例如，Combotox)連接。
在一些實施方式中，該CD22抑制劑係多特異性抗體分子，例如雙特異性抗體分子，例如結合CD20和CD3的雙特異性抗體分子。結合CD20和CD3的示例性雙特異性抗體分子揭露於WO 2016086189和WO 2016182751中。在一些實施方式中，該結合CD20和CD3的雙特異性抗體分子係如揭露於WO 2016086189的圖74以及SEQ ID NO：323、324和325中的XENP13676。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與FCRL2或FCRL5抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該FCRL2或FCRL5抑制劑係抗FCRL2抗體分子，例如雙特異性抗體分子，例如結合FCRL2和CD3的雙特異性抗體。在一些實施方式中，該FCRL2或FCRL5抑制劑係抗FCRL5抗體分子，例如雙特異性抗體分子，例如結合FCRL5和CD3的雙特異性抗體。
示例性抗FCRL5抗體分子揭露於US20150098900、US20160368985、WO 2017096120中(例如，揭露於WO 2017096120中的抗體ET200-001、ET200-002、ET200-003、ET200-006、ET200-007、ET200-008、ET200-009、ET200-010、ET200-011、ET200-012、ET200-013、ET200-014、ET200-015、ET200-016、ET200-017、ET200-018、ET200-019、ET200-020、ET200-021、ET200-022、ET200-023、ET200-024、ET200-025、ET200-026、ET200-027、ET200-028、ET200-029、ET200-030、ET200-031、ET200-032、ET200-033、ET200-034、ET200-035、ET200-037、ET200-038、ET200-039、ET200-040、ET200-041、ET200-042、ET200-043、ET200-044、ET200-045、ET200-069、ET200-078、ET200-079、ET200-081、ET200-097、ET200-098、 ET200-099、ET200-100、ET200-101、ET200-102、ET200-103、ET200-104、ET200-105、ET200-106、ET200-107、ET200-108、ET200-109、ET200-110、ET200-111、ET200-112、ET200-113、ET200-114、ET200-115、ET200-116、ET200-117、ET200-118、ET200-119、ET200-120、ET200-121、ET200-122、ET200-123、ET200-125、ET200-005和ET200-124)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與IL15/IL-15Ra複合物組合投與。在一些實施方式中，IL-15/IL-15Ra複合物選自NIZ985(諾華公司)、ATL-803(亞拉斯托公司(Altor))或CYP0150(Cytune公司)。
在一些實施方式中，該IL-15/IL-15Ra複合物包含人IL-15，其與人IL-15Ra的可溶形式複合。該複合物可以包含共價或非共價連接至IL-15Ra的可以溶性形式的IL-15。在具體的實施方式中，人IL-15非共價地與可溶形式的IL-15Ra結合。在具體的實施方式中，該組成物的人IL-15包含WO 2014/066527中所述之胺基酸序列，並且該人IL-15Ra的可溶形式包含WO 2014/066527中所述之胺基酸序列。本文所述之分子可以藉由載體、宿主細胞、和在WO 2007/084342中描述之方法製得。
在一些實施方式中，該IL-15/IL-15Ra複合物係ALT-803，IL-15/IL-15Ra Fc融合蛋白(IL-15N72D：IL-15RaSu/Fc可溶性複合物)。ALT-803揭露於WO 2008/143794中。
在一些實施方式中，該IL-15/IL-15Ra複合物包含與IL-15Ra的sushi結構域融合的IL-15(CYP0150，Cytune公司)。IL-15Ra的sushi結構域係指在IL-15Ra的訊息肽之後的第一半胱胺酸殘基處開始並且在該訊息肽之後的第四個半胱胺酸殘基處結束的結構域。與IL-15Ra的sushi結構域融合的IL-15的複合物揭露在WO 2007/04606和WO 2012/175222中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與PD-1抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該PD-1抑制劑選自PDR001(諾華公司)、納武單抗(百時美施貴寶公司)、蘭洛利珠單抗(默克公司(Merck & Co))、匹地利珠單抗(CureTech公司)、MEDI0680(英商梅迪繆思有限公司(Medimmune))、REGN2810(再生元公司(Regeneron))、TSR-042(Tesaro公司)、PF-06801591(輝瑞製藥公司(Pfizer))、BGB-A317(百濟神州公司(Beigene))、BGB-108(百濟神州公司)、INCSHR1210(因賽特公司(Incyte))、或AMP-224(Amplimmune公司)。在一個實施方式中，PD-1抑制劑係抗PD-1抗體分子。在一個實施方式中，該PD-1抑制劑係如描述於US 2015/0210769中的抗PD-1抗體分子。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係納武單抗(百時美施貴寶公司(Bristol-Myers Squibb))，也稱為MDX-1106、MDX-1106-04、ONO-4538、BMS-936558、或OPDIVO®。納武單抗(殖株5C4)和其他抗PD-1抗體揭露在US 8,008,449和WO 2006/121168中。在一個實施方式中，該抗PD-1抗體分子包含以下中的一個或多個：納武單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係派姆單抗(默克公司(Merck & Co))，也稱為蘭羅利珠單抗(Lambrolizumab)、MK-3475、MK03475、SCH-900475、或KEYTRUDA®。派姆單抗和其他抗PD-1抗體揭露於Hamid,O.等人(2013)New England Journal of Medicine [新英格蘭醫學雜誌]369(2)：134-44、US 8,354,509和WO 2009/114335中。在一個實施方式中，該抗PD-1抗體分子包含以下中的一個或多個：蘭洛利珠單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係匹地利珠單抗(治療科技公司(CureTech))，也稱為CT-011。匹地利珠單抗和其他抗PD-1抗體揭露於Rosenblatt,J.等人，(2011)J Immunotherapy [免疫療法雜誌]34(5)：409-18；US 7,695,715；US 7,332,582；和US 8,686,119中。在一個實施方式中，該抗PD-1抗體分子包含以下中的一個或多個：匹地利珠單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，該抗PD-1抗體分子係MEDI0680(英商梅迪繆思有限公司)，也稱為AMP-514。MEDI0680和其他抗PD-1抗體揭露於US 9,205,148和WO 2012/145493中。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：MEDI0680的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係REGN2810(再生元公司)。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：REGN2810的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係PF-06801591(輝瑞公司)。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：PF-06801591的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係BGB-A317或BGB-108(百濟神州公司)。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：BGB-A317、或BGB-108的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係INCSHR1210(因賽特公司)，也稱為INCSHR01210或SHR-1210。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：INCSHR1210的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子係TSR-042(泰薩羅公司)，也稱為ANB011。在一個實施方式中，抗PD-1抗體分子包含以下中的一種或多種：TSR-042的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知的抗PD-1抗體包括描述於例如以下中的那些：WO 2015/112800、WO 2016/092419、WO 2015/085847、WO 2014/179664、WO 2014/194302、WO 2014/209804、WO 2015/200119、US 8,735,553、US 7,488,802、US 8,927,697、US 8,993,731、和US 9,102,727。
在一個實施方式中，抗PD-1抗體係與本文所述之抗PD-1抗體之一競爭與PD-1上的相同表位結合和/或結合PD-1上的相同表位的抗體。
在一個實施方式中，該PD-1抑制劑係例如如美國8,907,053中所述抑制PD-1傳訊途徑的肽。在一個實施方式中，該PD-1抑制劑係免疫黏附素(例如包含融合到恒定區(例如免疫球蛋白序列的Fc區)的PD-L1或PD-L2的細胞外或PD-1結合部分的免疫黏附素)。在一個實施方式中，該PD-1抑制劑係AMP-224(B7-DCIg(安普利公司(Amplimmun))，例如揭露於WO 2010/027827和WO 2011/066342中)。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與PD-L1抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該PD-L1抑制劑選自FAZ053(諾華公司)；阿特利珠單抗(基因泰克公司/羅氏公司)；阿維魯單抗(默克雪蘭諾公司(Merck Serono) 和輝瑞製藥公司)；度伐魯單抗(英商梅迪繆思有限公司/阿斯利康公司)；或BMS-936559(百時美施貴寶)。
在一個實施方式中，該PD-L1抑制劑係抗PD-L1抗體分子。在一個實施方式中，該PD-L1抑制劑係如揭露於US 2016/0108123中的抗PD-L1抗體分子。
在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子係阿特利珠單抗(基因泰克公司/羅氏公司)，也稱為MPDL3280A、RG7446、RO5541267、YW243.55.S70、或TECENTRIQTM 。阿特利珠單抗和其他抗PD-L1抗體揭露於US 8,217,149中。在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子包含以下中的一個或多個：阿特利珠單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子係阿維魯單抗(默克雪蘭諾公司和輝瑞公司)，也稱為MSB0010718C。阿維魯單抗和其他抗PD-L1抗體揭露於WO 2013/079174中。在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子包含以下中的一個或多個：阿維魯單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子係度伐魯單抗(英商梅迪繆思有限公司/阿斯利康公司)，也稱為MEDI4736。度伐魯單抗和其他抗PD-L1抗體揭露於US 8,779,108中。在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子包含以下中的一個或多個：度伐魯單抗的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分子係BMS-936559(百時美施貴寶公司)，也稱為MDX-1105或12A4。BMS-936559和其他抗PD-L1抗體揭露於US 7,943,743和WO 2015/081158中。在一個實施方式中，該抗PD-L1抗體分 子包含以下中的一個或多個：BMS-936559的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知的抗PD-L1抗體包括描述於例如以下中的那些：WO 2015/181342、WO 2014/100079、WO 2016/000619、WO 2014/022758、WO 2014/055897、WO 2015/061668、WO 2013/079174、WO 2012/145493、WO 2015/112805、WO 2015/109124、WO 2015/195163、US 8,168,179、US 8,552,154、US 8,460,927、和US 9,175,082。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與LAG-3抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該LAG-3抑制劑選自LAG525(諾華公司)、BMS-986016(百時美施貴寶公司)、或TSR-033(Tesaro公司)。
在一個實施方式中，該LAG-3抑制劑係抗LAG-3抗體分子。在一個實施方式中，該LAG-3抑制劑係如揭露於US 2015/0259420中的抗LAG-3抗體分子。
在一個實施方式中，該抗LAG-3抗體分子係BMS-986016(百時美施貴寶公司)，也稱為BMS986016。BMS-986016和其他抗LAG-3抗體揭露於WO 2015/116539和US 9,505,839中。在一個實施方式中，該抗LAG-3抗體分子包含以下的一種或多種：BMS-986016的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，抗LAG-3抗體分子係TSR-033(泰薩羅公司)。在一個實施方式中，抗LAG-3抗體分子包含以下的一種或多種：TSR-033的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
在一個實施方式中，該抗LAG-3抗體分子係IMP731或GSK2831781(GSK公司和普瑞馬生物醫藥公司)。IMP731和其他抗LAG-3抗體 揭露於WO 2008/132601和US 9,244,059中。在一個實施方式中，該抗LAG-3抗體分子包含以下的一種或多種：IMP731的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。在一個實施方式中，抗LAG-3抗體分子包含以下中的一種或多種：GSK2831781的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知的抗LAG-3抗體包括例如WO 2008/132601、WO 2010/019570、WO 2014/140180、WO 2015/116539、WO 2015/200119、WO 2016/028672、US 9,244,059、US 9,505,839中描述的那些。
在一個實施方式中，該抗LAG-3抑制劑係可溶性LAG-3蛋白質，例如，IMP321(普瑞馬生物醫藥公司)，例如，如揭露於WO 2009/044273中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與TIM-3抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該TIM-3抑制劑係MBG453(諾華公司)或TSR-022(泰薩羅公司(Tesaro))。
在一個實施方式中，該TIM-3抑制劑係抗TIM-3抗體分子。在一個實施方式中，該TIM-3抑制劑係如揭露於US 2015/0218274中的抗TIM-3抗體分子。
在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體分子係TSR-022(安奈普泰斯生物有限公司(AnaptysBio)/泰薩羅公司)。在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體分子包含以下中的一種或多種：TSR-022的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體分子包含以下的一種或多種：APE5137或APE5121的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。APE5137、APE5121、和其他抗TIM-3抗體揭露於WO 2016/161270中。
在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體分子係抗體殖株F38-2E2。在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體分子包含以下中的一種或多種：F38-2E2的CDR序列(或總體上全部CDR序列)、重鏈或輕鏈可變區序列、或重鏈或輕鏈序列。
其他已知的抗TIM-3抗體包括例如，在WO 2016/111947、WO 2016/071448、WO 2016/144803、US 8,552,156、US 8,841,418、和US 9,163,087中描述的那些。
在一個實施方式中，該抗TIM-3抗體係與本文所述之抗TIM-3抗體之一競爭與TIM-3上的相同表位結合和/或結合至TIM-3上的相同表位的抗體。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與轉化生長因子β(TGF-β)抑制劑組合投與。在一些實施方式中，TGF-β抑制劑係夫蘇木單抗(CAS註冊號：948564-73-6)。夫蘇木單抗也稱為GC1008。夫蘇木單抗係結合和抑制TGF-β同種型1、2和3的人單株抗體。例如，在WO 2006/086469、US 8,383,780、和US 8,591,901中揭露了夫蘇木單抗。
在一些實施方式中，TGF-β抑制劑係XOMA 089。XOMA 089也稱為XPA.42.089。XOMA 089係完全人單株抗體，其結合並中和TGF-β 1和2配位基，並揭露於PCT公開案號WO 2012/167143中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與抗CD73抗體分子組合投與。在一個實施方式中，抗CD73抗體分子係完全抗體分子或其抗原結合片段。在某些實施方式中，該抗CD73抗體分子結合CD73蛋白質並減少例如，抑制或拮抗CD73(例如，人CD73)的活性。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2016/075099中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係MEDI 9447，例如，如揭露於WO 2016/075099中。MEDI 9447的可替代的名稱包括殖株10.3或73combo3。MEDI 9447係IgG1抗體，其抑制例如，拮抗CD73的活性。 MEDI 9447和其他抗CD73抗體分子還揭露於WO2016/075176和US2016/0129108中。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含MEDI 9477的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2016/081748中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係11F11，例如，如揭露於WO 2016/081748中。11F11係IgG2抗體，其抑制例如，拮抗CD73的活性。衍生自11F11的抗體，例如，CD73.4和CD73.10；11F11的殖株，例如，11F11-1和11F11-2；和其他抗CD73抗體分子揭露於WO2016/081748和US 9,605,080中。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含11F11-1或11F11-2的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於例如US 9,605,080中的抗CD73抗體。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係CD73.4，例如，如揭露於US 9,605,080中。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含CD73.4的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係CD73.10，例如，如揭露於US 9,605,080中。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含CD73.10的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO2009/0203538中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係067-213，例如，如揭露於WO 2009/0203538中。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含067-213的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於US 9,090,697中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係TY/23，例如，如揭露於US 9,090,697中。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含TY/23的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2016/055609中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在WO 2016/055609中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2016/146818中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在WO 2016/146818中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2004/079013中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在WO2004/079013中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2012/125850中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在WO 2012/125850中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2015/004400中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在 WO 2015/004400中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於WO 2007/146968中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在WO 2007146968中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於US 2007/0042392中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在US 2007/0042392中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係揭露於US 2009/0138977中的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在US 2009/0138977中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係在Flocke等人，Eur J Cell Biol.[歐洲細胞生物學雜誌]1992年6月；58(1)：62-70中揭露的抗CD73抗體。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在Flocke等人，Eur J Cell Biol.[歐洲細胞生物學雜誌]1992年6月；58(1)：62-70中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子係在Stagg等人，PNAS.[美國國家科學院院刊]2010年1月107(4)：1547-1552中揭露的抗CD73抗體。在一些實施方式中，該抗CD73抗體分子係TY/23或TY11.8，如揭露於Stagg等人中。在一個實施方式中，該抗CD73抗體分子包含在Stagg等人中揭露的抗CD73抗體的重鏈可變結構域、輕鏈可變結構域、或兩者。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與白介素-17(IL-17)抑制劑組合投與。
在一些實施方式中，該IL-17抑制劑係蘇金單抗(CAS登記號：875356-43-7(重鏈)和875356-44-8(輕鏈))。蘇金單抗還被稱為AIN457和COSENTYX®。蘇金單抗係特異性結合至IL-17A的重組人單株IgG1/κ抗體。其表現於重組中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系中。蘇金單抗描述於，例如，WO 2006/013107、US 7,807,155、US 8,119,131、US 8,617,552、和EP 1776142中。
在一些實施方式中，該IL-17抑制劑係CJM112。CJM112還被稱為XAB4。CJM112係靶向IL-17A的(例如，IgG1/κ同種型的)完全人單株抗體。CJM112揭露於，例如，WO 2014/122613中。
CJM112可以與人、食蟹猴、小鼠和大鼠IL-17A結合並在體外和體內中和該等細胞介素的生物活性。IL-17A作為IL-17家族的成員，係一種主要的促炎細胞介素，已被證明在許多免疫介導的病症，如牛皮癬和癌症中發揮重要作用(Witowski等人(2004)Cell Mol.Life Sci.[細胞分子生命科學]第567-79頁；Miossec和Kolls(2012)Nat.Rev.Drug Discov.[自然綜述：藥物發現]第763-76頁)。
在一些實施方式中，該IL-17抑制劑係艾塞吉珠單抗(CAS註冊號：1143503-69-8)。艾塞吉珠單抗還被稱為LY2439821。艾塞吉珠單抗係靶向IL-17A的人源化IgG4單株抗體。艾塞吉珠單抗描述於，例如，WO 2007/070750、US 7,838,638、和US 8,110,191中。
在一些實施方式中，該IL-17抑制劑係布洛魯單抗(CAS註冊號：1174395-19-7)。布洛魯單抗還被稱為AMG 827或AM-14。布洛魯單抗結合至白介素-17受體A(IL-17RA)並阻止IL-17活化受體。布洛魯單抗揭露於，例如， WO 2008/054603、US 7,767,206、US 7,786,284、US 7,833,527、US 7,939,070、US 8,435,518、US 8,545,842、US 8,790,648、和US 9,073,999中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與白介素-1β(IL-1β)抑制劑組合投與。
在一些實施方式中，該IL-1β抑制劑係卡那單抗。卡那單抗也稱為ACZ885或ILARIS®。卡那單抗係人單株IgG1/κ抗體，其中和人IL-1β的生物活性。卡那吉努單抗揭露於，例如，WO 2002/16436、US 7,446,175、和EP 1313769中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與CD32B抑制劑組合投與。在一些實施方式中，該CD32B抑制劑係抗CD32B抗體分子。示例性抗CD32B抗體分子揭露於US 8187593、US 8778339、US 8802089、US 20060073142、US 20170198040、和US 20130251706中。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與表18中列出的化合物之一組合投與。
Figure 109116556-A0202-12-0437-2931
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Figure 109116556-A0202-12-0444-473
Figure 109116556-A0202-12-0445-474
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Figure 109116556-A0202-12-0447-476
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Figure 109116556-A0202-12-0449-478
Figure 109116556-A0202-12-0450-479
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在一些實施方式中，CD19結合分子與NIZ985、GITR促效劑中的一種或多種組合投與，該GITR促效劑如GWN323、PTK787、MBG453、mAb12425、CLR457、BGT226、BYL719、AMN107、ABL001、IDH305/LQS305、LJM716、MCS110、WNT974/LGK974、BLZ945、NIR178、QBM076、MBG453、CGS-20267、LHS534、LKG960、LDM099/SHP099、TNO155、LCL161、MAP855/LQN716、RAD001、LEJ511、LDK378、LOU064、LSZ102、LEQ506、RAF265/CHIR265、卡那吉努單抗、格沃吉珠單抗、阿那靳雷、利那西普、CGS-20267、PSC833、GGP-57148B、CGM097、HDM201、LBH589、PKC412、LHC165、MAK683、INC280、INC424、LJE704、LAG525、和NIS793。
在一些實施方式中，該CD19結合分子與標準治療組合投與。
多發性骨髓瘤和相關疾病的標準治療包括化療、幹細胞移植(自體或同種異體)、放療和其他藥物療法。經常使用的抗骨髓瘤藥物包括烷基化劑(例如，苯達莫司汀、環磷醯胺和美法侖)、蛋白酶體抑制劑(例如，硼替佐米)、皮質類固醇(例如，地塞米松和潑尼松)和免疫調節劑(例如，沙利 度胺和來那度胺或Revlimid®)、或其任何組合。雙膦酸鹽藥物也經常與標準抗MM治療組合投與以預防骨質流失。年齡超過65-70歲的患者不太可能進行幹細胞移植。在某些情況下，雙自體幹細胞移植係年齡不超過60歲且對第一次移植響應不佳的患者的選擇。本揭露之組成物和方法可以與多發性骨髓瘤的任何目前處方治療組合投與。
何杰金氏淋巴瘤通常用放療、化療、或造血幹細胞移植來治療。非何杰金氏淋巴瘤最常見的療法係R-CHOP，它由四種不同的化療藥物(環磷醯胺、多柔比星、長春新鹼和潑尼松龍)和利妥昔單抗(Rituxan®)組成。通常用於治療NHL的其他療法包括其他化學治療劑、放療、幹細胞移植(自體或同種異體骨髓移植)或生物療法，如免疫療法。生物治療劑的其他實例包括但不限於利妥昔單抗(Rituxan®)、托西莫單抗(Bexxar®)、依帕珠單抗(LymphoCide®)和阿侖單抗(alemtuzumab)(MabCampath®)。本揭露之組成物和方法可以與何杰金氏淋巴瘤或非何杰金氏淋巴瘤的任何目前處方治療組合投與。
WM的標準治療包括化療，特別是利妥昔單抗(Rituxan®)。其他化學治療藥物(如苯丁酸氮芥(Leukeran®)、環磷醯胺(Neosar®)、氟達拉濱(Fludara®)、克拉屈濱(Leustatin®)、長春新鹼和/或沙利度胺)可以組合使用。皮質類固醇(如潑尼松)也可以與化療組合投與。血漿去除術或血漿交換通常在患者的整個治療過程中使用，以藉由從血液中除去副蛋白來緩解一些症狀。在某些情況下，幹細胞移植係一些患者的選擇。
本揭露之CD19結合分子可以與減少或改善與投與此類結合分子(包括結合至CD19和CD3兩者的MBM)相關的副作用的藥劑組合投與。與投與結合至CD19和CD3兩者的MBM相關的副作用可以包括但不限於細胞介素釋放綜合症(「CRS」)和噬血細胞性淋巴組織細胞增多症(HLH)(也稱為巨噬 細胞激活綜合症(MAS))。CRS的症狀可以包括高燒、噁心、短暫性低血壓、缺氧等。CRS可以包括臨床體質上體征和症狀，如發燒、疲勞、厭食、肌痛、眩暈、噁心、嘔吐和頭痛。CRS可以包括臨床皮膚體征和症狀，如皮疹。CRS可以包括臨床胃腸道體征和症狀，如噁心、嘔吐和腹瀉。CRS可以包括臨床呼吸道體征和症狀，如呼吸急促和低氧血症。CRS可以包括臨床心血管體征和症狀，如心動過速、脈壓加寬、低血壓、心輸出量增加(早期)和潛在的心輸出量減少(晚期)。CRS可以包括臨床凝血體征和症狀，如升高的d-二聚體、伴有或不伴有出血的低纖維蛋白原血症。CRS可以包括臨床腎體征和症狀，如氮血症。CRS可以包括臨床肝體征和症狀，如轉胺酶升高(transaminitis)和高膽紅素血症。CRS可以包括臨床神經的體征和症狀，如頭痛、精神狀態改變、精神錯亂、發狂、喚詞困難或明顯失語、幻覺、震顫、辨距不良、步態改變、和癲癇發作。
因此，本文所述之方法可以包括向受試者投與結合至CD19和CD3兩者的MBM，並且進一步投與一種或多種藥劑以控制由用該MBM治療引起的可以溶性因子水平升高。在一個實施方式中，該受試者體內升高的可溶性因子係IFN-γ、TNFα、IL-2和IL-6中的一種或多種。在一個實施方式中，該受試者體內升高的因子係IL-1、GM-CSF、IL-10、IL-8、IL-5和分形趨化分子(fraktalkine)中的一種或多種。因此，施用以治療此副作用的藥劑可以是中和該等可以溶性因子中的一種或多種的藥劑。在一個實施方式中，中和該等可溶性形式中的一種或多種的該藥劑係抗體或其抗原結合片段。此類藥劑的實例包括但不限於類固醇(例如，皮質類固醇)、TNFα抑制劑、IL-1R抑制劑和IL-6抑制劑。TNFα抑制劑的實例係抗TNFα抗體分子如英夫利昔單抗、阿達木單抗、塞妥珠單抗、和戈利木單抗。TNFα抑制劑的另一個實例係融合蛋白，如依那西普(entanercept)。TNFα的小分子抑制劑包括但不限於黃嘌呤衍生物(例如，己酮可可鹼)和安非他酮。IL-6抑制劑的實例係抗IL-6抗體分子，如托珠單抗(toc)、 薩瑞魯單抗(sarilumab)、艾西莫單抗(elsilimomab)、CNTO 328、ALD518/BMS-945429、CNTO 136、CPSI-2364、CDP6038、VX30、ARGX-109、FE301和FM101。在一個實施方式中，該抗IL-6抗體分子係托珠單抗。基於IL-1R的抑制劑的實例係阿那白滯素。
在一些實施方式中，向受試者投與皮質類固醇，例如像甲基潑尼松龍、氫化可的松等。在一些實施方式中，在投與CD19結合分子(例如，結合CD19和CD3的MBM)之前，向該受試者投與與苯那君和泰諾組合的皮質類固醇(例如甲基強的松龍、氫化可的松)。
在一些實施方式中，向受試者投與血管加壓劑，例如像去甲腎上腺素、多巴胺、苯腎上腺素、腎上腺素、血管加壓素、或其任何組合。
在實施方式中，可以向受試者投與解熱劑。在實施方式中，可以向受試者投與鎮痛劑。
6.實例
以下實例關於結合至人CD19並與食蟹猴(cyno)CD19交叉反應的新CD19結合物，NEG218和NEG258的鑒定，它們摻入接合CD3(並且在TSP的情況下，CD2)的雙特異性(BSP)和三特異性(TSP)結合分子，以及BSP和TSP的抗腫瘤和免疫刺激活性的廣泛表徵。
在功能測定中，與相應的BSP相比，該TSP，特別是CD3hi TSP1，表現出增強的腫瘤細胞殺傷和T細胞活化和增殖，儘管CD3hi TSP1和CD3med TSP1兩者均表現出對荷瘤小鼠中已建立的腫瘤的有效抗腫瘤響應，但由CD3hi TSP1活化的T細胞在富集具有更年輕和更功能性表型的T細胞方面特別有效。另外，CD3hi TSP1在活化CD28陰性CD8-T細胞(耗盡/終末分化的細胞毒性T細胞)方面特別有效。此外，CD3hi TSP1處理的T細胞在反復攻擊時更好地保持殺死靶細胞的能力。
總之，本文提供的證據表明，使用CD2共刺激，特別是經由CD58部分，產生CD19結合分子，該CD19結合分子能夠以能夠實現最佳T細胞活化和防止衰竭的方式接合T細胞，潛在地導致更有效和持久的抗腫瘤響應。
該TSP，特別是CD3hi TSP1，針對多種因素的組合進行了優化，該等因素包括與食蟹猴CD19交叉反應的新CD19結合結構域、CD2結合部分的內含物、T細胞結合部分的性質和親和力(CD58相對於抗CD2抗體，CD3結合部分的相對「高」或「中等」親和力)，以及分子中結合部分的構型(例如，在N-末端處的CD19)，所有該等因素都各自賦予了有利的特性，預期該等特性將產生優越的CD19治療。
以下實例1A和2至15分別對應於美國臨時申請號62/850,901和62/854,695(「優先權申請」)的實例1-15。以下實例2至11中討論的圖4-13對應於優先權申請的圖4-13。圖4-13中所示的數據係用優先權申請的實例1中所述之和以下實例1A中所述之雙特異性和三特異性構建體產生的。在本揭露中，優先權申請的圖4-13中所示的原始命名法已經被簡化命名法代替。原始命名法與簡化命名法之間的對應關係示出於表B中。
Figure 109116556-A0202-12-0457-2932
Figure 109116556-A0202-12-0458-484
6.1.實例1：呈杵臼結構形式的抗CD3-抗CD19 IgG1雙特異性和三特異性結合分子的產生
6.1.1.實例1A：初始BBM和TBM構建體
具有CD3 ABM和CD19 ABM的BBM(示意性地示出於圖3A中)，以及具有CD3 ABM、CD19 ABM、和CD2 ABM的TBM(示意性地示出於圖3B中)以杵臼結構(KIH)形式產生。該實例的每個BBM和TBM包含第一半抗體(示意性地示出為圖3A-3B中所示的每個構建體的左半部分)和第二半抗體(示意性地示出為圖3A-3B中所示的每個構建體的右半部分)。
6.1.1.1.材料和方法
6.1.1.1.1.編碼BBM和TBM的質體
合成所有構建體的質體，並針對哺乳動物細胞中的表現進行密碼子優化。
對於每種雙特異性構建體，合成了三種質體。編碼抗CD19重鏈的第一質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)抗CD19 VH結構域和(ii)恒定的hIgG1結構域，其含有用於臼的T366S、L368A、和Y407V突變，以促進異源二聚化和緘默突變。編碼輕鏈的第二質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)抗CD19 VL結構域和(ii)恒定的人κ序列。由第一和第二質體編碼的蛋白質形成第一半抗體。編碼第二半抗體的第三質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)抗CD3單鏈可變片段(具有抗CD3抗體的被指定為CD3hi的VH和VL結構域(如以下段落中所定義))，(ii)連接子，和(iii)恒定的hIgG1結構域，其含有用於杵的T366W突變，以促進異源二聚化和緘默突變。
對於每種三特異性構建體，合成了三種質體。編碼抗CD19重鏈的第一質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)融合至恒定的hIgG1 CH1結構域的抗CD19 VH結構域，(ii)連接子，(iii)具有抗CD3抗體的VH和VL結構域的抗CD3 scFv，該抗CD3抗體對CD3具有高、中、或低親和力(相對而言)，並且在本文中被稱為CD3hi、CD3med或CD3lo(來自對CD3分別具有 16nM、30nM、或48nm親和力的抗CD3抗體，如藉由Biacore測量)，(iv)第二連接子，和(v)hIgG1 Fc結構域，其含有用於臼的T366S、L368A、和Y407V突變，以促進異源二聚化和緘默突變。應當理解，關於構建體名稱中所提及的Biacore親和力值和相關術語，該等僅用於鑒定目的，並不旨在表示絕對親和力值。編碼輕鏈的第二質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)抗CD19 VL結構域和(ii)恒定的人κ序列。由第一和第二質體編碼的蛋白質形成第一半抗體。編碼第二半抗體的第三質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)CD58(CD58-6)的IgV結構域和(ii)恒定的hIgG1結構域，其含有用於杵的T366W突變，以促進異二聚化和緘默突變。
產生了對應於CD3hi TSP1(其最初被稱為CD19_NEG258_CD3_16nM-CD58或CD19_NEG258_CD3_16nM-CD58三特異性並具有基於NEG258的CD19結合臂)和CD3hi TSP2(其最初被稱為CD19_NEG218_CD3_16nM-CD58或CD19_NEG218_CD3_16nM-CD58三特異性並具有基於NEG218的CD19結合臂)三特異性構建體的對照構建體，其中用抗雞卵溶菌酶的Vhh置換了CD2 ABM(此類對照構建體最初分別被稱為CD19_NEG258_CD3_16nM-溶菌酶三特異性和CD19_NEG218_CD3_16nM-溶菌酶三特異性，並且分別具有簡化名稱CD3hi TSP1L和CD3hi TSP2L)。
構建體組分的胺基酸序列示出於表19A-1(沒有Fc序列)和表19A-2(具有Fc序列)中。
Figure 109116556-A0202-12-0460-2933
Figure 109116556-A0202-12-0461-486
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Figure 109116556-A0202-12-0463-488
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下表19A-2示出了表19A-1中所示構建體的全長胺基酸序列(使用簡化的構建體名稱)，包括Fc序列。
Figure 109116556-A0202-12-0467-493
Figure 109116556-A0202-12-0468-494
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Figure 109116556-A0202-12-0477-503
6.1.1.1.2.表現與純化
藉由共轉染HEK293細胞中的相應鏈，暫態表現了BBM和TBM。簡而言之，使用PEI作為轉染試劑用重鏈和輕鏈質體轉染細胞，其中最終DNA：PEI比率為1：3。每升培養物使用1mg質體轉染具有200萬個細胞/mL血清介質的培養物。在表現5天後，經由離心和過濾藉由使介質澄清來收獲BBM和TBM。使用1ml樹脂/100mL上清液，經由抗CH1親和力批量結合(CaptureSelect IgG-CH1親和力基質，美國麻塞諸塞州沃爾瑟姆市的賽默飛世爾科技公司(Thermo-Fisher Scientific,Waltham,MA,USA))或蛋白A(rProteinA Sepharose，快速流動，瑞 典烏普薩拉的GE醫療公司(GE Healthcare,Uppsala,Sweden))批量結合進行純化。在溫和混合的情況下，使蛋白質結合至少2小時，並將上清液裝載到重力過濾柱上。用20-50個CV的PBS洗滌樹脂。將BBM和TBM用20個CV的50mM檸檬酸鹽，90mM NaCl pH 3.2 50mM蔗糖洗脫。將洗脫的BBM和TBM級分用1M檸檬酸鈉50mM蔗糖調節至pH 5.5。當存在聚集體時，使用Hi Load 16/60 Superdex 200級柱(瑞典烏普薩拉的GE醫療生命科學公司集團(GE Healthcare Life sciences,Uppsala,Sweden))進行製備型尺寸排阻層析法作為最終的精修步驟。為了確認所表現的BBM和TBM的蛋白質的同一性與初級胺基酸序列的預測質量相匹配，藉由高效液相層析結合質譜分析蛋白質。
6.1.1.1.3.CD3親和力測量
使用Biacore T200系統在25℃下測定CD3hi、CD3med、和CD3lo mAb對CD3的親和力。簡而言之，將抗hFc IgG1固定在CM5晶片上。在捕獲CD3-Fc(在HBS-EP+緩衝液中為1μg/ml，流速為50μl/min，注射時間為30秒)後，藉由隨後在HBS-EP+緩衝液中注射不同抗體的1：2稀釋系列獲取動力學數據。
使用Biacore T200評價軟體1.0版評價數據。對原始數據進行雙重參考，即，用參考流動池的響應校正測量流動池的響應，並且在第二步驟中減去空白注射液的響應。最後，藉由應用1：1結合模型擬合傳感圖，以計算動力學速率常數和離解平衡常數。將R max 設置在本地。每次運行都單獨地處理數據。
6.1.2.實例1B：另外的BBM和TBM構建體
產生了具有CD3 ABM和CD19 ABM(CD3hi BSP1，示意性地示出於圖3C中)的單臂BBM和對應於CD3hi TSP1但具有溶菌酶結合臂代替CD19結合臂(CD3hi TSP1C)的TBM。CD3hi BSP1和CD3hi TSP1C構建體的胺基酸序列示出於表19B中。
Figure 109116556-A0202-12-0479-504
Figure 109116556-A0202-12-0480-505
另外，CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1、和CD3hi TSP1C構建體均以第二種形式產生，其第二半抗體序列與表19A-2(在CD3med TSP1和CD3hi TSP1的情況下)或表19B(在CD3hi BSP1和CD3hi TSP1C的情況下)中所列出構建體的第二半抗體序列在Fc序列中相差一個胺基酸。具體地，表19A-2和表19B中的第二半抗體序列具有精胺酸殘基，其中第二種形式具有組胺酸殘基。精胺酸殘基包含在構建體中，以便於經由蛋白A結合進行純化。表19A-2和表19B中所列出的構建體的形式在本文中被稱為「R變體」，並且下表19C中所列出的構建體的形式在本文中被稱為「H變體」。據信，構建體的R變體的功能活性與其H變體的功能活性沒有顯著差異。編碼CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1和CD3hi TSP1C的H變體的核苷酸序列示出於表19D中。
Figure 109116556-A0202-12-0481-2934
Figure 109116556-A0202-12-0482-507
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6.2.實例2：BBM引發針對CD19+靶細胞的重定向T細胞毒性活性(RTCC)的能力。
6.2.1.材料和方法
用實例1A的BBM進行RTCC測定，以測量BBM引發RTCC對抗CD19+ Nalm6-luc和Karpas422-luc細胞的能力。Nalm-6係人B細胞先質白血病細胞系，並且Karpas422係人B細胞非何杰金氏淋巴瘤細胞系。簡而言之，在含有10%胎牛血清(FBS)的RPMI1640培養基中培養被工程化以表現螢火蟲螢光素酶報告基因的Nalm6和Karpas422細胞。將10,000個具有系列稀釋的BBM或gH同種型抗體對照(αgH-CD3hi)的靶細胞接種在384孔平底微量滴定板上。從冷凍保存的外周血單核細胞(PBMC)中分離原代人T細胞，並使用抗CD3和抗CD28磁珠(賽默飛世爾公司，目錄號11131D)擴增，並且隨後冷凍保存。將擴增的T細胞解凍並等分到板上，以實現效應細胞(即T細胞)與靶細胞(即癌細胞)比 率(E：T比率)為3：1。將板在具有5% CO2的37℃培養箱中孵育過夜。在共孵育後，將亮Glo(普洛麥格公司(Promega)，目錄號E2620)添加到所有孔中，並且隨後在Envision(珀金埃爾默公司(Perkin Elmer))上測量發光信號。具有亮Glo的靶細胞作為最大信號。使用以下公式計算靶細胞的RTCC百分比：[100-(樣本/最大信號)*100%]。
6.2.2.結果
結果示出於圖4A-4B中。基於NEG258和NEG218兩者的BBM介導了針對Nalm6-Luc和Karpas422-luc細胞的RTCC活性，而gH同種型抗體(對照)沒有如預期的活性。
6.3.實例3：BBM引發T細胞增殖的能力。
6.3.1.材料和方法
實例1A中所述之含有NEG258和NEG218的可變區的BBM，在與表現CD19的靶細胞共培養時，評價其誘導T細胞增殖的能力。簡而言之，在測定當天將穩定表現螢火蟲螢光素酶的Karpas422和Nalm-6靶細胞進行照射，並且以每孔60,000個細胞的密度接種在Costar 96孔板(康寧公司(Corning)，目錄號3904)中，該Costar 96孔板在T細胞介質(TCM)[RPMI-1640(賽默飛世爾科技公司，目錄號11875-085)、10% FBS(Seradigm公司，目錄號1500-500)、1% L-麩醯胺酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號25830-081)、1%非必需胺基酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號11140-050)、1%青黴素/鏈黴素(賽默飛世爾科技公司，目錄號15070063)、1% HEPES(賽默飛世爾科技公司，目錄號15630080)、丙酮酸鈉(賽默飛世爾科技公司，目錄號11360-070)、0.1% β-巰基乙醇(賽默飛世爾科技公司，目錄號21985-023)]中。解凍先前從白血球單採術供體(Hemacare公司)中分離並冷凍保存的外周血單核細胞(PBMC)，並按照製造商的方案，使用人泛T細胞分離套組(kit)[美天旎生物技術有限公司(Miltenyi Biotec)，目錄號130-096-535]藉由陰性選擇分離泛T細胞。按照製造商的方案，將分離的T細胞用5μM細胞示蹤紫(CTV)(賽默飛世爾科技公司，目錄號C34557)標記，並將60,000個CTV標記的T細胞與60,000個靶細胞共培養以實現1：1的E：T比率。將範圍為16pM-10,000pM的基於NEG258和NEG218的BBM和對照結合分子(αgH-CD3hi)的稀釋系列添加到細胞中，並將板在5% CO2、37℃的培養箱中孵育96小時。在孵育後，收穫細胞，按照製造商的說明用人TruStain FcX(Fc Block)[博奇公司，目錄號422302]處理，並且然後藉由在4C孵育30分鐘，用可固定活力染料eFlour 780(賽默飛世爾科技公司，目錄號65-0865-14)染色。然後使用FACS緩衝液將細胞洗滌兩次，並藉由在4℃孵育30分鐘用PerCP-Cy5.5軛合的抗人CD3 mAb(博奇公司，目錄號317336)染色。然後將樣本在BD LSR Fortessa上運行，並使用FlowJo分析以測定基於細胞示蹤紫染料的CD3染色和稀釋的%增殖的CD3+ T細胞。
6.3.2.結果
基於NEG258和NEG218兩者的BBM在與兩種不同的表現CD19的靶細胞系共培養時誘導T細胞的增殖(圖5A-5B)。T細胞增殖效應係劑量依賴性的，並且基於NEG258的BBM顯示出比基於NEG218的BBM更強的活性。對照抗體沒有誘導任何T細胞增殖，表明CD19靶特異性接合係T細胞增殖所需的。
6.4.實例4：TBM引發CD2依賴性T細胞活化的能力。
6.4.1.材料與方法
使用穩定表現由NFAT啟動子驅動的螢光素酶報告基因的Jurkat細胞系(JNL，一種永生化的人T細胞系)來測量T細胞活化。藉由流動式細胞測量術證實了JNL細胞中CD2表現的水平(圖6A)。為了藉由CRISPR(聚集的規則間隔的短回文重複序列)產生CD2敲除(KO)細胞，用CD2 Cas9核糖核蛋白複合物電穿孔JNL細胞。隨後分選CD2 - 細胞以富集為均勻的CD2 - 群體(圖 6B)。然後用CD2+ 和CD2- JNL細胞進行JNL報告基因測定，以測量雙特異性或三特異性構建體依賴性T細胞活化。簡單地說，將10,000個具有實例1A的系列稀釋的BBM或TBM(即，R變體)的Nalm6或Karpas422細胞接種在384孔平底微量滴定板上。然後將JNL細胞添加到板中，以實現3：1的效應細胞與靶細胞比率。將板在具有5% CO2 的37℃培養箱中孵育過夜。在共孵育後，將亮Glo(普洛麥格公司，目錄號E2620)添加到所有孔中，並且隨後在Envision(珀金埃爾默公司)上測量發光信號。
6.4.2.結果
當與CD2 WT JNL細胞一起孵育時，BBM和TBM兩者都誘導發光的劑量依賴性增加，並且TBM的響應水平更高(圖6C-6F)。當CD2-KO JNL細胞用作效應物時，與對應的BBM相比，用TBM觀察到T細胞活化減少，從而表明TBM的優勢依賴於T細胞上的CD2表現。
6.5.實例5：基於NEG258和NEG218的TBM與食蟹猴B細胞的結合
6.5.1.材料和方法
使用MACS陽性選擇(美天旎公司編號130-092-012)耗盡食蟹猴(cyno)PBMC(iQ生物科學公司(iQ Biosciences)編號IQB-MnPB102)的CD3+細胞。將剩餘的細胞群重懸於FACS緩衝液中。將每孔100,000個細胞接種在V形底96孔板中，並以1ug/mL與實例1A的TBM(即，R變體)在冰上孵育1小時。在用FACS緩衝液洗滌兩次後，將細胞與Alexa-647標記的抗人Fc二抗(傑克遜免疫公司(Jackson Immuno)編號109-605-098)和食蟹猴交叉反應性FITC小鼠抗人CD20抗體(BD Pharmingen公司編號556632)在冰上孵育1小時。在用FACS緩衝液洗滌兩次後，將細胞重懸於100μL緩衝液中，並在貝克曼庫爾特細胞分析儀上(Beckman Coulter Cytoflex)收集數據。使用CytExper v2.3分析細胞，並藉由CD20陽性群體進行閘控。
6.5.2.結果
由於食蟹猴與人類的近緣進化關係，因此它們係分析抗體療法的治療效果和潛在毒性的最適當的臨床前模型，並且因此抗體在臨床開發中結合其人類靶標的食蟹猴同源物係有用的。如圖7A-7B所示，NEG258-和NEG-218 TBM兩者都結合至食蟹猴B細胞，從而表明CD19結合臂識別食蟹猴CD19。
6.6.實例6：PBMC中的食蟹猴B細胞耗盡後，TBM誘導T細胞活化的能力
6.6.1.材料與方法
進行離體食蟹猴B細胞耗盡測定，以測量實例1的基於NEG258的TBM在PBMC(外周血單核細胞)中裂解CD20陽性B細胞的能力。簡單地說，使用聚蔗糖梯度離心從食蟹猴(cyno)全血(BioIVT)中分離出PBMC。將分離的PBMC和實例1A的系列稀釋TBM(即，R變體)接種在96孔平底微量滴定板上。將板在具有5% CO2的37℃培養箱中孵育過夜。在孵育24h後，收穫樣本並同時對CD3和CD20進行染色，以鑒定PBMC群體中的B細胞和T細胞。為了對細胞群進行定量分析，在藉由流式細胞儀採集之前加入75,600個計數珠。對於每個樣本，採集20,000個珠，以便確定B細胞的絕對數量。藉由計算B細胞數量與珠數量之間的比率來確定B細胞耗盡的百分比。為了檢測T細胞活化，將細胞用抗CD3、抗CD69和抗CD25(博奇公司和BD生物科學公司(BD Biosciences))染色。
6.6.2.結果
基於NEG258的TBM耗盡了食蟹猴B細胞(圖8A)並誘導了CD3+ T細胞的活化，這藉由CD69和CD25表現的上調來證明(圖8C-8H)。正如預期，在沒有添加TBM的情況下，既不發生B細胞耗盡，也不發生T細胞活化。該等結果顯示了基於NEG258的TBM誘導食蟹猴T細胞活化的能力以及活化的特異性。
6.7.實例7：由CD19 TBM重定向的T細胞的細胞毒性
分析了實例1A的基於NEG258和NEG218的TBM(即，R變體)(具有含抗CD3抗體的VH和VL結構域的CD3 ABM，該抗CD3抗體對CD3具有16nM親和力，如藉由Biacore測量)在腫瘤靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。
6.7.1.材料和方法
在一項研究中，跨多個供體效應細胞比較了TBM。簡而言之，將表現huCD19的Nalm6或Karpas422靶細胞工程化以過表現螢火蟲螢光素酶。收穫細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質(英傑公司(Invitrogen)編號11875-093)中。將每孔2,500個靶細胞接種在平底384孔板中。經由MACS陰性選擇(美天旎生物技術有限公司編號130-096-535)從來自冷凍保存的PBMC(Cellular Technologies Limited公司編號CTL-UP1)的兩個供體中分離人泛T效應細胞，然後添加到板中以獲得3：1或5：1的最終E：T比率。將共培養的細胞與所有構建體和對照的系列稀釋液一起孵育。為了歸一化，平均最大發光係指與效應細胞(但沒有任何測試構建體)共孵育的靶細胞。在37℃、5% CO2下孵育24、48、72或96小時後，將OneGlo螢光素酶底物(普洛麥格公司編號E6120)添加到板中。在10分鐘孵育後，在Envision讀板儀上測量發光。使用以下方程計算特異性裂解百分比：特異性裂解(%)=(1-(樣本發光/平均最大發光))* 100
6.7.2.結果
如圖9A-9P所示，TBM以多個時間點、E：T比率和效應子T細胞供體顯示出對Nalm6靶細胞(圖9A-9H)和Karpas422細胞(圖9I-P)兩者的細胞毒性活性。基於NEG258的TBM似乎比基於NEG218的TBM更有效。
6.8.實例8：由具有不同CD3親和力的TBM重定向的T細胞的細胞毒性
分析了實例1A具有CD3 ABM(包含抗CD3抗體的VH和VL結構域，該抗CD3抗體對CD3具有16nM、30nM和48nM親和力，如藉由Biacore測量) 的基於NEG258的TBM(即，R變體)在腫瘤靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。
6.8.1.材料和方法
在一項研究中，跨多個供體效應細胞比較了TBM。簡而言之，將表現huCD19的Nalm6和Karpas422靶細胞工程化以過表現螢火蟲螢光素酶。收穫細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質(英傑公司編號11875-093)中。將每孔2,500個靶細胞接種在平底384孔板中。經由MACS陰性選擇(美天旎生物技術有限公司編號130-096-535)從來自冷凍保存的PBMC(Cellular Technologies Limited公司編號CTL-UP1)的兩個供體中分離人泛T效應細胞，然後添加到板中以獲得3：1或5：1的最終E：T比率。將共培養的細胞與TBM或對照的系列稀釋液一起孵育。為了歸一化，平均最大發光係指與效應細胞(但沒有任何測試構建體)共孵育的靶細胞。在37℃、5% CO2下孵育24、48、72或96小時後，將OneGlo螢光素酶底物(普洛麥格公司編號E6120)添加到板中。在10分鐘孵育後，在Envision讀板儀上測量發光。使用以下方程計算特異性裂解百分比：特異性裂解(%)=(1-(樣本發光/平均最大發光))* 100
6.8.2.結果
如圖10A-10P所示，TBM以多個時間點、E：T比率和效應子T細胞供體顯示出對Nalm6靶細胞(圖10A-10H)和Karpas422(圖10I-10P)兩者的細胞毒性活性。
6.9.實例9：基於NEG258的TBM與不結合至CD2的BBM和TBM的RTCC活性
比較了實例1A含有CD2結合臂或對照溶菌酶結合臂的基於NEG258的TBM(即，R變體)在Nalm6或Karpas422靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。這項研究還包括了博納吐單抗作為對照。博納吐單抗係一種 雙特異性T細胞接合物，或BiTE，其結合至CD19和CD3兩者，但缺乏Fc結構域(參見例如，美國專利案號10,191,034)。
6.9.1.材料和方法
跨多個供體效應細胞比較了純化的TBM。簡而言之，將表現huCD19的Nalm6和Karpas422靶細胞工程化以過表現螢火蟲螢光素酶。收穫細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質(英傑公司編號11875-093)中。將每孔5,000個靶細胞接種在平底384孔板中。經由陰性選擇(Stemcell Technologies公司編號17951)從來自冷凍保存的PBMC的兩個供體中分離人泛T效應細胞，該PBMC藉由Ficoll密度梯度離心從白血球單採術樣本(Hemacare公司編號PB001F-1)中分離。然後將純化的T細胞添加到板中，以獲得3：1、1：1、1：3或1：5的最終E：T比率。將共培養的細胞與所有構建體和對照的系列稀釋液一起孵育。為了歸一化，平均最大發光係指與效應細胞(但沒有任何測試構建體)共孵育的靶細胞。在37℃、5% CO2下孵育48、72或96小時後，將OneGlo螢光素酶底物(普洛麥格公司編號E6120)添加到板中。在10分鐘孵育後，在Envision讀板儀上測量發光。使用以下方程計算特異性裂解百分比：特異性裂解(%)=(1-(樣本發光/平均最大發光))* 100 6.9.2.結果
如圖11A-11L所示，兩種類型的TBM均顯示對Nalm6靶細胞(圖11A-11H)和Karpas422細胞(圖11I-11L)兩者的細胞毒性活性。與具有溶菌酶結合臂的對照TBM以及與博納吐單抗相比，含有CD2結合臂的TBM表現出優越的細胞毒性活性，特別是在較低的E：T比率下。
6.10.實例10：細胞介素釋放測定
分析了實例1A的基於NEG258和NEG218的TBM(即，R變體)在腫瘤靶細胞存在下誘導T細胞介導的細胞介素從頭分泌的能力。
6.10.1.材料和方法
簡而言之，收穫表現huCD19的Nalm6靶細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質中。將每孔20,000個靶細胞接種在平底96孔板中。經由MACS陰性選擇從冷凍保存的PBMC中分離人泛T效應細胞，然後添加到板中以獲得5：1的最終E：T比率。將共培養的細胞與所有構建體和對照的系列稀釋液一起孵育。在37℃、5% CO2下孵育24小時後，藉由以300 x g離心5分鐘收穫上清液，用於隨後的分析。
根據製造商的說明，使用V-PLEX Proinflammatory Panel 1套組(MesoScale Discovery公司編號K15049D)進行多重ELISA。
6.10.2.結果
如圖12A-12C所示，基於NEG258和NEG218的TBM兩者在測量的所有劑量水平上都誘導T細胞顯著的細胞介素分泌。該等圖表明，它們可以在較低劑量下有效。
6.11.實例11：基於NEG258和NEG218的TBM與人和食蟹猴CD19的結合
6.11.1.材料和方法
將小鼠細胞系300.19工程化以過表現人CD19或食蟹猴CD19。將細胞在含有10% FBS和2-巰基乙醇的RPMI介質(英傑公司編號11875-093)中培養。收穫細胞並將其重懸於FACS緩衝液(含有1% FBS的PBS)中。將每孔50,000個細胞接種在V形底96孔板中。將每個細胞系與實例1A的TBM(即，R變體)的系列稀釋液在冰上孵育1小時。將細胞以400xg離心4分鐘，並用FACS緩衝液洗滌。重複兩次，並且然後將細胞與Alexa-647標記的抗人Fc二抗(傑克遜免疫公司編號109-605-098)在冰上孵育30分鐘。將細胞洗滌兩次，然後將其重懸於100μL的FACS緩衝液中。在貝克曼庫爾特細胞分析儀上收集FACS數據，並使用CytExpert v2.3進行分析。
6.11.2.結果
如圖13A-13B所示，基於NEG258和NEG218的TBM結合至被工程化以過表現人和食蟹猴CD19兩者的細胞系。NEG258似乎同等地結合至人和食蟹猴CD19兩者，而NEG218似乎對食蟹猴CD19具有比人CD19更大的親和力。在這兩者中，NEG258似乎對人CD19和食蟹猴CD19兩者都具有更大的親和力。
6.12.實例12：工程CD58以提高穩定性
6.12.1.背景技術
人CD58含有具有29個胺基酸的訊息肽和兩個Ig樣結構域。被稱為結構域1的最N-末端Ig樣結構域係V型的，類似於抗體的可變區，並且被稱為結構域2的第二個結構域係C型的，類似於抗體的恒定區。CD58結構域結構的示意圖示出於圖14中。
如實例1-11所示，CD58的與CD2相互作用的結構域1可以用於代替多特異性結合分子中的抗CD2抗體結合片段。如實例32所示，在缺乏靶細胞的情況下，使用CD58結合臂而不是抗CD2結合臂降低了非特異性免疫活化。然而，CD58表現出比免疫球蛋白更低的穩定性。
為了提高人CD58結構域1的穩定性，將蛋白質工程化以包含一對半胱胺酸，其在表現時形成二硫橋以穩定分子。
將四對不同的胺基酸工程化以被半胱胺酸置換：(1)V45和M105，(2)V45和M114，(3)V54和G88以及(4)W56和L90。
6.12.2.材料和方法
6.12.2.1.重組表現
為了評估結合和生物物理特徵，從HEK293細胞連同CD2細胞外結構域中暫態產生並純化CD58二硫化物變體。所有質體都針對哺乳動物表現進行了密碼子優化。用C-末端Avi標籤和N-末端8xhis標籤(SEQ ID NO：769)隨後 是用於在純化後切割his標籤的EVNLYFQS序列(SEQ ID NO：770)產生人和食蟹猴CD2構建體。在表現過程中經由共轉染編碼BirA酶的質體對CD2構建體進行位點選擇性生物素化。用C-末端8xhis標籤(SEQ ID NO：769)表現了CD58。用標準方法在HEK293F細胞中進行暫態表現和純化。該序列示出於表20中。
Figure 109116556-A0202-12-0510-2935
Figure 109116556-A0202-12-0511-528
對於表現，使用PEI作為轉染試劑進行轉染。對於小規模(<5L)轉染，使細胞在加濕的培養箱(85%)中、在8% CO2下、在定軌振盪器(100rpm)上的搖瓶中生長。以1 DNA：3 PEI的比率進行轉染。將1mg/L質體培養物用於以200萬個細胞/mL在Expi293介質中進行轉染。在表現5天後，離心培養物並過濾。使用1ml樹脂/100mL上清液，經由Nickel-NTA批量結合進行純化。在溫和混合的情況下，使蛋白質結合至少2小時，並將混合物裝載到重力過濾柱上。用30個CV的PBS洗滌樹脂。用咪唑洗脫蛋白質。將洗脫的蛋白質濃縮，並且經由製備型尺寸排阻層析法(Hi Load 16/60 Superdex 75級柱，瑞典烏普薩拉的GE醫療公司)進行最終純化。為了確認所表現的蛋白質的同一性與初級胺基酸序列的預測質量相匹配，藉由高效液相層析結合質譜分析蛋白質。
6.12.2.2.穩定性
使用標準技術，使用差示掃描量熱法(DSC)和差示掃描螢光分析法(DSF)兩者評估二硫化物穩定的變體的改善的熱穩定性。對於DSF，在96孔PCR板中，將1-3ug每種構建體以25ul總體積添加到1x Sypro Orange(賽默飛世爾公司)中。使用配備有C1000熱循環儀的Bio-Rad CFX96 RT-PCR系統，以0.5℃/分鐘將溫度從25℃升至95℃，並監測螢光。將製造商提供的軟體用於確定Tm。
對於DSC，將所有樣本都透析到HEPES緩衝鹽水(HBS)中，並稀釋至0.5mg/mL的最終濃度。藉由以1℃/分鐘將溫度從25℃升至100℃，過濾時間為2秒鐘，並設置中等增益，使用MicroCal VP-Capillary DSC系統(瑪律文公司(Malvern)測定Tm和Tonset。
6.12.2.3.結合親和力
為了確保藉由添加穩定的二硫化物變體保持結合親和力不被破壞，對所得重組CD58蛋白進行等溫量熱法(ITC)以確定它們的表觀KD和與重組人CD2的結合化學計量學(n)。
簡而言之，將重組人CD2和重組人CD58變體透析到HEPES緩衝鹽水(HBS)中。將CD2稀釋至最終濃度為100μM，CD58變體稀釋至10μM。經由多次注射將CD2滴定到10μM CD58變體中，並使用MicroCal VP-ITC等溫滴定量熱計(瑪律文公司)測定△H(千卡/莫耳)。將CD2滴定到HBS中用作參考，並根據所得數據確定KD和n。
6.12.3.結果
構建體的DSF和DSC測量的結果示出於下表21中。
Figure 109116556-A0202-12-0512-529
親和力研究的結果示出於下表22中。添加穩定的二硫化物對親和力或結合化學計量沒有不利的影響。
Figure 109116556-A0202-12-0512-2936
Figure 109116556-A0202-12-0513-531
6.13.實例13：呈杵臼結構形式的抗CD3-抗CD19-CD58 IgG1 TBM的產生
6.13.1.材料和方法
合成構建體，並針對哺乳動物細胞中的表現進行密碼子優化。對於每種三特異性構建體，合成了三種質體。編碼抗CD19重鏈的第一質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)(i)融合至恒定的hIgG1 CH1結構域的VH結構域，(ii)連接子，(iii)抗CD3 scFv，(iv)第二連接子，和(v)hIgG1 Fc結構域，其含有用於臼的突變，以促進異二聚化和緘默突變。編碼輕鏈的第二質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)抗CD19 VL結構域和(ii)恒定的人κ序列。編碼第二半抗體的第三質體被合成為融合體，其包含(在N-末端至C-末端方向上)融合至恒定的hIgG1結構域的CD58二硫化物穩定的變體，該恒定的hIgG1結構域含有用於杵的突變，以促進異二聚化和緘默突變。該序列示出於表23中。
Figure 109116556-A0202-12-0513-2937
Figure 109116556-A0202-12-0514-533
Figure 109116556-A0202-12-0515-534
Figure 109116556-A0202-12-0516-535
Figure 109116556-A0202-12-0517-536
Figure 109116556-A0202-12-0518-537
Figure 109116556-A0202-12-0519-538
Figure 109116556-A0202-12-0520-539
Figure 109116556-A0202-12-0521-540
Figure 109116556-A0202-12-0522-541
Figure 109116556-A0202-12-0523-542
藉由共轉染HEK293細胞中的相應鏈，暫態表現了三特異性結合分子。
簡而言之，使用PEI作為轉染試劑進行轉染。對於小規模(<5L)轉染，使細胞在加濕的培養箱(85%)中、在5% CO2下、在定軌振盪器(115rpm)上的搖瓶中生長。以1 DNA：3 PEI的最終比率將質體與PEI組合。將1mg/L的質體培養物用於按200萬個細胞/mL血清介質進行轉染。在表現5天後，經由離心和過濾藉由使介質澄清來收穫TBM。使用1ml樹脂/100mL上清液，經由抗CH1親和力批量結合(CaptureSelect IgG-CH1親和力基質，美國麻塞諸塞州沃爾瑟姆市的賽默飛世爾科技公司)或蛋白A(rProteinA Sepharose，快速流動，瑞典烏普薩拉的GE醫療公司)批量結合進行純化。在溫和混合的情況下，使蛋白質結合至少2小時，並將上清液裝載到重力過濾柱上。用20-50個CV的PBS洗滌樹脂。 將TBM用20個CV的50mM檸檬酸鹽，90mM NaCl pH 3.250mM蔗糖洗脫。將洗脫的TBM用1M檸檬酸鈉50mM蔗糖調節至pH 5.5。當存在聚集體時，使用Hi Load 16/60 Superdex 200級柱(瑞典烏普薩拉的GE醫療生命科學公司集團)進行製備型尺寸排阻層析法作為最終的精修步驟。為了確認所表現的TBM的蛋白質的同一性與初級胺基酸序列的預測質量相匹配，藉由高效液相層析結合質譜分析蛋白質。
6.13.2.結果
如下表24所示，穩定二硫化物變體的加入對純化後聚集物含量增加的總表現量沒有不利影響。
Figure 109116556-A0202-12-0524-543
6.14.實例14：用含有CD58變體的TBM重定向的T細胞的細胞毒性
分析實例13含有變體CD58結構域的TBM在腫瘤靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。
6.14.1.材料和方法
簡而言之，將表現huCD19的Nalm6靶細胞工程化以過表現螢火蟲螢光素酶。收穫細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質(英傑公司編號11875-093)中。將每孔10,000個靶細胞接種在平底96孔板中。經由MACS陰性選擇(美天旎生物技術有限公司編號130-096-535)從來自冷凍保存的PBMC(Cellular Technologies Limited公司編號CTL-UP1)的兩個供體中分離人泛T效應細胞，然後添加到板中以獲得5：1的最終E：T比率。將共培養的細胞與所有構建體和對照的系列稀釋液一起孵育。為了歸一化，平均最大發光係指與效應細胞(但沒有任何測試構建體)共孵育的靶細胞。在37℃、5% CO2下孵育24或48小時後，將OneGlo螢光素酶底物(普洛麥格公司編號E6120)添加到板中。在10分鐘孵育後，在Envision讀板儀上測量發光。使用以下方程計算特異性裂解百分比：特異性裂解(%)=(1-(樣本發光/平均最大發光))* 100
6.14.2.結果
如圖15所示，含有變體CD58結構域的TBM顯示出與具有野生型CD58的TBM相當的細胞毒性活性。
6.15.實例15：用含有CD58變體的TBM進行的T細胞活化
作為原發性T細胞活化的替代方案，使用Jurkat-NFAT報告細胞系來評價實例13含有變體CD58結構域的TBM的功能活性。
6.15.1.材料和方法
用NFAT螢光素酶報告基因構建體轉染Jurkat T細胞系(E6-1)，並且基於在PMA和離子黴素刺激後NFAT報告基因的強誘導，選擇具有NFAT-LUC報告基因的穩定的、選殖細胞系Jurkat細胞(JNL)用於進一步表徵。
Jurkat報告細胞系用於測定NFAT的非特異性活化。
測試純化的TBM在沒有靶細胞的情況下誘導NFAT活化的潛力。
使具有NFAT-LUC報告基因的Jurkat細胞(JNL)在具有0.5μg/ml的嘌呤黴素的含有2mM麩醯胺酸和10%胎牛血清的RPMI-1640培養基中生長。將每孔100,000個JNL細胞接種在平底96孔板中，並與TBM和對照的系列稀釋液一起孵育。在37℃、5% CO2下孵育6小時後，將OneGlo螢光素酶底物(普洛麥格公司編號E6120)添加到板中。在10分鐘孵育後，在Envision讀板儀上測量發光。
6.15.2.結果
如圖16所示，含有變體CD58結構域的TBM顯示出與含有野生型CD58的TBM相當或更低的腫瘤非依賴性(即，非靶細胞特異性)活性水平。
6.16.實例16：CD19和CD58在多種細胞系上的表現
6.16.1.材料和方法
使用APC標記的抗CD19(博奇公司，目錄號302212)和APC標記的抗CD58(博奇公司，目錄號330918)以及各自的同種型對照抗體，藉由流動式細胞測量術在OCI-LY-19(人B細胞非何杰金氏淋巴瘤細胞系)、Karpas-422(人B細胞非何杰金氏淋巴瘤細胞系)、Toledo(人B細胞非何杰金氏淋巴瘤細胞系)、和Nalm-6(B細胞先質白血病細胞系)細胞系上測定CD19和CD58的細胞表面表現。將樣本在BD LSR Fortessa上運行，並使用FlowJo進行分析。
6.16.2.結果
該細胞系具有不同水平的CD19和CD58表現(圖17A-H)。細胞系中CD19表現的等級為OCI-LY-19>Karpas 422>Toledo=Nalm-6。CD58表現的等級為OCI-LY-19>Nalm-6>Karpas=Toledo。
6.17.實例17：基於NEG258的TBM與不結合至CD2的單臂BBM和不結合至CD19的TBM的RTCC和細胞介素分泌活性
比較CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3 hi BSP1、和CD3hi TSP1C(H變體)在Karpas422靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。
6.17.1.材料和方法
根據實例9中所述之材料和方法，用表現huCD19的Karpas422靶細胞進行RTCC測定，但其中最終E：T比率為1：1並孵育96小時。
6.17.2.結果
如圖18A-18B所示，CD3hi TSP1、CD3med TSP1、和CD3hi BSP1顯示對Karpas422靶細胞的細胞毒性活性，其中CD3hi TSP1具有最高的細胞毒性活性。
6.18.實例18：細胞介素釋放測定
分析CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3 hi BSP1、和CD3hi TSP1C(H變體)在Karpas422細胞存在下誘導T細胞介導的細胞介素從頭分泌的能力。
6.18.1.材料和方法
如實例10中那樣進行細胞介素釋放測定，但Karpas422細胞的最終E：T比率為1：1，並且孵育48小時。
6.18.2.結果
如圖19A-19F所示，CD3hi TSP1、CD3med TSP1、和CD3hi BSP1誘導T細胞分泌細胞介素，其中CD3hi TSP1誘導最高水平的細胞介素分泌，隨後是CD3med TSP1，其類似於CD3hi BSP1。
6.19.實例19：結合至T細胞的TBM和BBM
使用流動式細胞測量術評價CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1、和CD3hi TSP1C(H變體)與T細胞的結合。
6.19.1.材料和方法
解凍先前從2名白血球單採術供體(Hemacare公司)中分離並冷凍保存的外周血單核細胞(PBMC)，並按照製造商的方案，使用人泛T細胞分離套組(美天旎生物技術有限公司，目錄號130-096-535)藉由陰性選擇分離泛T細胞。將T細胞重懸於FACS緩衝液中，並將100,000個細胞添加到96孔圓形底板的每個孔中。將範圍從33μg/ml-0.005μg/ml的CD3med TSP1、CD3hi TSP1、CD3hi BSP1、和CD3hi TSP1C的稀釋系列添加到細胞中，並在冰上孵育1小時。將細胞洗滌兩次，重懸於100μl抗人IgG二抗中，並在冰上孵育另一小時。在孵育後，將細胞洗滌兩次，重懸於100μl可固定活力染料中，並在冰上孵育30分鐘。再次洗滌兩次後，將細胞重懸於120μl FACS緩衝液中。然後在BD LSR Fortessa上運行細胞，並使用FlowJo分析數據以確定抗人IgG二抗的MFI，並針對抗體濃度作圖。
6.19.2.結果
所有抗體都顯示出不同程度的與T細胞的結合(圖20)。CD3hi TSP1係最強的結合物，隨後是CD3med TSP1，其中BSP1係最弱的結合物。不受理論的約束，據信TBM結合的改善可能歸因於CD2和CD3臂的共接合，從而增加對T細胞的結合親合力。
6.20.實例20：TBM和BBM介導的T細胞增殖
評價CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1、和CD3hi TSP1C(H變體)、以及博納吐單抗在與表現CD19的OCI-LY-19、Karpas422、和Toledo靶細胞共培養時誘導T細胞增殖的能力。
6.20.1.材料和方法
簡而言之，將穩定表現螢火蟲螢光素酶的OCI-LY-19、Karpas422、和Toledo靶細胞接種在96孔板中，該96孔板在T細胞介質(TCM)(RPMI-1640，賽默飛世爾科技公司，目錄號11875-085)、10% FBS(Seradigm 公司，目錄號1500-500)、1% L-麩醯胺酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號25830-081)、1%非必需胺基酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號11140-050)、1%青黴素/鏈黴素(賽默飛世爾科技公司，目錄號15070063)、1% HEPES(賽默飛世爾科技公司，目錄號15630080)、丙酮酸鈉(賽默飛世爾科技公司，目錄號11360-070)、0.1% β-巰基乙醇(賽默飛世爾科技公司，目錄號21985-023)]中。解凍先前從2名白血球單採術供體中分離並冷凍保存的PBMC，並分離泛T細胞(如前所述)。按照製造商的方案，將分離的T細胞用5μM細胞示蹤紫(CTV)(賽默飛世爾科技公司，目錄號C34557)標記，並按1：3的E：T比率與靶細胞共培養。將範圍為2.5nM-0.0006nM的CD3med TSP1、CD3hi TSP1、CD3hi BSP1、CD3hi TSP1C、和博納吐單抗的稀釋系列添加到細胞中，並將板在5% CO2、37℃的培養箱中孵育96小時。在孵育後，收穫細胞，用人TruStain FcX(Fc Block)(博奇公司，目錄號422302)處理，並且用可固定活力染料eFlour 780(賽默飛世爾科技公司，目錄號65-0865-14)染色，隨後用PerCP-Cy5.5軛合的抗人CD3 mAb(博奇公司，目錄號317336)染色。所有染色步驟均根據製造商的方案進行。使用BD LSR Fortessa和FlowJo軟體進行流分析，以測定基於細胞示蹤紫染料的CD3染色和稀釋的%增殖的CD3+ T細胞。
6.20.2.結果
所有CD19靶向抗體在與不同的表現CD19的靶細胞系共培養時誘導T細胞的增殖(圖21A-21C)。T細胞增殖效應係劑量依賴性的，並且CD3hi TSP1顯示出比CD3med TSP1和CD3hi BSP1更強的活性。對照抗體沒有誘導任何T細胞增殖，表明CD19靶特異性接合係T細胞增殖所需的。在OCI-LY-19和Toledo細胞的存在下，博納吐單抗介導了最有效的T細胞增殖。在Karpas420的存在下，CD3hi TSP1更有效地誘導T細胞增殖，如增殖的T細胞的最大百分比所示。
6.21.實例21：具有不同CD3親和力的基於NEG258的TBM與BBM和博納吐單抗的RTCC活性
比較含有具有不同親和力的CD3結合臂的基於NEG258的TBM(CD3hi TSP1和CD3med TSP1(H變體))和BBM(CD3hi BSP1(H變體))在Karpas422靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。這項研究還包括了博納吐單抗作為對照。
6.21.1.材料和方法
根據實例9中所述之材料和方法，用表現huCD19的Karpas422靶細胞進行RTCC測定，但其中最終E：T比率為1：1並孵育96小時。
6.21.2.結果
如圖22A-22B所示，兩種類型的TBM都顯示出對Karpas422細胞的細胞毒性活性。與BBM相比，TBM表現出優越的細胞毒性活性。與博納吐單抗相比，CD3hi TSP1顯示出相似或更好的細胞毒性活性。
6.22.實例22：具有不同CD3親和力的基於NEG258的TBM與不結合至CD19的BBM和TBM對多種B細胞淋巴瘤細胞系的RTCC活性
比較CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1、和CD3hi TSP1C(H變體)在Oci-Ly19、Toledo、Nalm6、Nalm6 KO和K562靶細胞中誘導T細胞介導的細胞凋亡的潛力。Oci-Ly19、Toledo、Nalm6細胞表現hCD19抗原。使用缺乏hCD19表現的Nalm6 KO和K562靶細胞來評估靶非依賴性殺傷。這項研究還包括了博納吐單抗作為對照。
6.22.1.材料和方法
使用CRISPR-CAS9技術從Nalm6親代細胞系產生Nalm6 KO，並證實其缺乏hCD19表現。將Oci-Ly19、Toledo、Nalm6、Nalm6 KO和K562靶細 胞工程化以過表現螢火蟲螢光素酶。根據實例9中所述之材料和方法，用不同細胞系進行RTCC測定，但其中最終E：T比率為1：1並孵育48小時。
6.22.2.結果
CD3hi TSP1和CD3med TSP1顯示出對Oci-Ly19、Toledo和Nalm6的細胞毒性活性，但對抗原陰性的Nalm6 KO和K562顯示出最小的活性(圖23A-23J)。與BBM相比，TBM表現出優越的細胞毒性活性。CD3hi TSP1顯示出與博納吐單抗相當的細胞毒性活性。
6.23.實例23：具有不同CD3親和力的基於NEG258的TBM與不結合至CD19的BBM和TBM對多種B細胞淋巴瘤細胞系的細胞介素釋放測定
比較CD3hi TSP1、CD3med TSP1、CD3hi BSP1和CD3hi TSP1C(H變體)在Oci-Ly19、Toledo、Nalm6、Nalm6 KO和K562靶細胞中誘導T細胞介導的細胞介素從頭分泌的潛力。Oci-Ly19、Toledo、Nalm6細胞表現hCD19抗原。使用缺乏hCD19表現的Nalm6 KO和K562靶細胞來評估靶非依賴性細胞介素釋放。這項研究還包括了博納吐單抗作為對照。
6.23.1.材料和方法
收穫靶細胞，並將其重懸於含有10% FBS的RPMI介質(英傑公司編號11875-093)中。將每孔5,000個靶細胞接種在平底384孔板中。經由陰性選擇(Stemcell Technologies公司編號17951)從來自冷凍保存的PBMC的兩個供體中分離人泛T效應細胞，該PBMC藉由Ficoll密度梯度離心從白血球單採術樣本(Hemacare公司編號PB001F-1)中分離。然後將純化的T細胞添加到板中，以獲得1：1的最終E：T比率。在37℃、5% CO2下孵育48小時後，收穫上清液，用於隨後的分析。根據製造商的說明，使用人細胞介素定製3-plex 384 4-點套組(MesoScale Discovery公司編號N31IB-1)進行多重ELISA。
6.23.2.結果
如圖24A-24J所示，當與Oci-Ly19、Toledo和Nalm6細胞一起孵育時，兩種基於NEG258的TBM都以劑量依賴性方式誘導T細胞顯著的細胞介素分泌。當與抗原陰性的Nalm6 KO和K562一起孵育時，檢測到最少的細胞介素分泌。
6.24.實例24：用Karpas 422和OCI-LY-19細胞系再考驗RTCC測定
使用劑量滴定再考驗RTCC測定來確定靶細胞再考驗對CD3hi TSP1(H變體)、CD3med TSP1(H變體)、CD3hi BSP1(H變體)、和博納吐單抗處理的T細胞的殺傷活性的影響。
6.24.1.材料和方法
將穩定表現螢火蟲螢光素酶的OCI-LY-19和Karpas422靶細胞接種在T細胞介質(TCM)中的Costar 6孔板中。解凍先前從2名白血球單採術供體中分離並冷凍保存的PBMC，並分離泛T細胞(如前所述)。以1：1的E：T比率，連同CD3med TSP1、CD3hi TSP1、CD3hi BSP1、和博納吐單抗的EC90濃度(對於OCI-LY-19為0.1nM，並且對於Karpas 422為0.5nM)，建立T細胞和OCI-LY-19或Karpas 422細胞的共培養物。對於OCI-LY-19將板孵育4天，並且對於Karpas 422細胞將板孵育5天。在孵育結束時，使用發光信號確定靶細胞的殺傷。還測定了每種抗體處理條件下的絕對T細胞計數。對於下一輪的再考驗，確保在各種抗體條件下殺死靶細胞係等效的。將T細胞計數在不同抗體條件下進行歸一化，並使用EC90濃度在1：1的E：T下進行另一輪單一濃度再考驗，其中將兩種靶細胞孵育4天。另外，使用來自不同抗體處理條件的T細胞，以1：1的E：T和2nM-0.000001nM的濃度範圍建立劑量滴定RTCC，其中每種細胞系使用4天孵育。使用發光信號產生劑量響應曲線來確定靶細胞的殺傷。在考驗結束時，對Karpas 422細胞再次重複上述過程，並且對OCI-LY-19細胞再重複兩次。測定設置示出於圖25A中。
6.24.2.結果
如可以從圖25B-25H看出，與CD3med TSP1和CD3hi TSP1相比，CD3hi TSP1在用靶細胞反復考驗後能夠更好地保持殺傷能力。CD3med TSP1次之，其中CD3hi BSP1係所有抗體中活性最低的。當在分別對Karpas422和OCI-LY-19細胞進行的前2或3輪再考驗中與博納吐單抗相比時，CD3hi TSP1表現出相似的活性。在對OCI-LY-19的最後一次再考驗中，CD3hi TSP1比博納吐單抗介導更強的RTCC(在EC50和最大裂解兩方面中)，而對於Karpas422，博納吐單抗比CD3hi TSP1介導更高的最大裂解，儘管EC50相似。
6.25.實例25：用Karpas 422和OCI-LY-19細胞系再考驗T細胞表型
使用單一濃度再考驗測定來確定靶細胞再考驗對CD3hi TSP1、CD3med TSP1、和CD3hi BSP1(H變體)處理的T細胞表型的影響。
6.25.1.材料和方法
將穩定表現螢火蟲螢光素酶的OCI-LY-19和Karpas422靶細胞接種在T細胞介質(TCM)中的Costar 6孔板中。解凍先前從2名白血球單採術供體中分離並冷凍保存的PBMC，並分離泛T細胞(如前所述)。以1：1的E：T比率建立T細胞和OCI-LY-19或Karpas 422細胞的共培養物，並加入1nM的CD3hi BSP1、CD3med TSP1、或CD3hi TSP1。對於OC-LY-19將板孵育4天，並且對於Karpas 422細胞將板孵育5天。在孵育結束時，測定靶細胞的殺傷和每種抗體處理條件下的絕對T細胞計數。將T細胞計數在不同抗體條件下進行歸一化，並以與前一次考驗相同的方式設置兩輪額外的再考驗，其中將兩種靶細胞孵育4天，總共進行三次考驗。在第三次考驗後，在第2天從Karpas 422共培養物並且在第4天從OCI-LY-19共培養物中收穫來自不同抗體處理條件的T細胞，並分成2個部分。在用抗人CD3(博奇公司，目錄號317324)、CD4(博奇公司，目錄號344608)、CD8(BD生物科學公司，目錄號563795)、CD27(博奇公司，目錄號356412)和CD62L mAb(博奇公司，目錄號304814)的合劑染色之前，用藍色可固定活 力染料(賽默飛世爾科技公司，目錄號L23105)染色一個部分。將第二部分在TCM中重懸至1e6/ml，並在37℃下用細胞刺激合劑(Cell Stimulation Cocktail)(Tonbo生物科學公司，目錄號TNB4975)刺激4小時。此後，將細胞洗滌並依次用藍色可固定活力染料(賽默飛世爾科技公司，目錄號L23105)，抗人CD3(博奇公司，目錄號317324)、CD4(博奇公司，目錄號344608)、CD8(BD生物科學公司，目錄號563795)的合劑染色，隨後使用FoxP3轉錄因子染色裝置(賽默飛世爾科技公司，目錄號00-5523-00)滲透，並且用抗人IFNγ mAb(博奇公司，目錄號400134)和IL-2 mAb(博奇公司，目錄號400551)或各自的同種型對照進行最終染色。所有染色均根據製造商的方案進行。使用BD LSR Fortessa和FlowJo軟體進行流動分析。
6.25.2.結果
如圖26A-26H(Karpas 422模型)和圖26I-26P(OCI-LY-19模型)所示，CD3hi TSP1比CD3med TSP1和CD3hi BSP1更好地促進了T細胞年輕表型的富集。與測試的其他CD19結合物相比，CD3hi TSP1還能夠誘導T細胞更好地產生細胞介素。
6.26.實例26：CD3hi TSP1與CD3hi BSP1在CD19+靶細胞存在下引發T細胞增殖和細胞介素產生的能力。
在與表現CD19的Nalm6靶細胞共培養時，評價CD3hi TSP1和CD3hi BSP1(R變體)誘導T細胞增殖、細胞介素產生和T細胞表面標記物表現變化的能力。
6.26.1.材料和方法
在測定建立的當天，以50 Gy照射穩定表現螢火蟲螢光素酶的Nalm-6靶細胞。解凍先前從血沈棕黃層供體(伯恩醫院(Bern Hospital))中分離並冷凍保存的外周血單核細胞(PBMC)，並按照製造商的方案，使用人泛T 細胞分離套組(美天旎生物技術有限公司，目錄號130-096-535)藉由陰性選擇分離總T細胞。以50 Gy照射陽性部分(稱為耗盡的PBMC-T細胞)，以便用作共培養的飼養層。從富含總T細胞的陰性部分，使用EasySepTM 人CD8+ T細胞富集套組(Stem Cell公司，目錄號19053)藉由額外的陰性選擇步驟分離CD8+ T細胞。然後用抗CD28抗體(博奇公司，目錄號302922)對未接觸的CD8+ 細胞進行染色，並根據CD28表現用FACSAria(BD)進行分選：CD8+ CD28+ 和CD8+ CD28- 。分選細胞的純度>95%。
在分選後，按照製造商的方案，用2.5μM羧基螢光素琥珀醯亞胺酯(CFSE，賽默科技公司，目錄號C34554)標記T細胞。
將CFSE標記的T細胞的每個T細胞亞群(CD8+ CD28+ 或CD8+ CD28- )與Nalm6靶細胞共培養，接種50,000個T細胞和50,000個靶細胞，以實現1：1的效應物：靶(E：T)比率。稀釋細胞並共接種以獲得額外的1：3或1：6的最終E：T比率。
在需要存在經照射的PBMC-T細胞耗盡的共培養條件下，接種10,000個PBMC以獲得效應T細胞：PBMC的5：1比率。
將T細胞-腫瘤細胞共培養物接種在Costar 96孔板(康寧公司，目錄號3585)中，該Costar 96孔板在T細胞介質[RPMI-1640(賽默飛世爾科技公司，目錄號21875-034)；10% FBS胎牛血清(GE醫療公司，目錄號SH30070.03)；1%非必需胺基酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號11140-050)；1%青黴素/鏈黴素(賽默飛世爾科技公司，目錄號15140122)；1% HEPES(龍沙公司(Lonza)，目錄號17737E)；丙酮酸鈉(賽默飛世爾科技公司，目錄號11360-070)；50μM β-巰基乙醇(賽默飛世爾科技公司，目錄號31350)]中。
將稀釋在T細胞介質中的CD3hi TSP1和CD3hi BSP1以不同濃度(1nM、0.1nM和0.01nM)添加到細胞中，並在5% CO2、37℃的培養箱中孵 育72小時。為了能夠檢測細胞內細胞介素的產生，在與PMA(50ng/ml；西格瑪公司(SIGMA)，目錄號P1585)共培養的最後1.5小時孵育板。在孵育的最後1.5小時還添加離子黴素(500μg/ml；Calbiochem公司，目錄號407950)；佈雷菲德菌素(10μg/ml；Cell Signaling公司，目錄號9972)。
在72小時結束時，收穫細胞，並且然後藉由在室溫下孵育10分鐘，用一種活力染料Zombie Aqua(博奇公司，目錄號423102)染色。然後使用FACS緩衝液洗滌細胞兩次，並用抗表面標記物的抗體染色：抗CD2(博奇公司，目錄號300214)、抗CD28(博奇公司，目錄號302922)、抗CCR7(博奇公司，目錄號353226)、和抗CD45RO(博奇公司，目錄號304216)。藉由以下檢測細胞內IFN-g和顆粒酶B(GzB)：根據製造商的說明用BD cytotix cytoperm套組(BD公司，目錄號555028)處理T細胞，並用抗IFNg(博奇公司，目錄號502509)和抗顆粒酶B抗體(BD公司，目錄號560213)將其染色。將樣本用FACS緩衝液洗滌，並在BD LSR Fortessa(BD公司)上採集。用FLOWJO軟體(10.6.0版；Tree Star公司)進行分析。
6.26.2.結果
CD3hi TSP1和CD3hi BSP1兩者在與表現CD19的靶細胞系Nalm6共培養時均誘導CD28 + 和CD28 - T兩種細胞的增殖(圖27A-27D)。然而，與CD3hi BSP1相比，CD3hi TSP1在誘導兩種T細胞亞群增殖方面更有效。在測試的兩種濃度下以及在所使用的不同E：T比率下均觀察到了這種影響。在存在或不存在經照射的PBMC的情況下，均觀察到對T細胞增殖的影響。
在存在1nM的CD3hi BSP1的情況下，在產生IFN-g或顆粒酶B(GzB)的T細胞的百分比方面沒有觀察到重大差異；然而，在存在CD3hi TSP1的情況下，兩種細胞介素的中值螢光強度(MFI)都有明顯的變化，從而表明IFNg和GzB兩者的表現都增加，特別是在存在照射的PBMC的情況下共培養時的 CD28- T細胞中(圖28A-28D)。CD3hi TSP1對產生細胞介素的T細胞的作用在0.1nM下甚至更加明顯：在存在和不存在經照射的PBMC的兩種情況下，CD28-和CD28+ T細胞亞群中的GzB+ T細胞和IFNg+ T細胞兩者都明顯增加，如MFI(圖28E-28H)。此外，CD28- T細胞IFNg+ GzB+ 的比例(%)在CD3hiTSP1存在下也更顯著(圖28I-28L)。
CD45RO和CCR7表現譜的組合限定了不同T細胞群的分佈：幼稚(CD45RO- CCR7+ )、中樞記憶(CM)(CD45RO+ CCR7+ )、效應記憶(EM)(CD45RO+ CCR7- )和終末分化(TEMRA)(CD45RO- CCR7- )。T細胞表面表型的變化示出於圖29中。在分選後以及共培養72小時後觀察到，CD3hi分子對CD28+ 細胞沒有顯著影響，該CD28+ 細胞保持了不同T細胞群的均勻分佈。相反，CD3hi TSP1對CD28- 細胞具有影響：而在分選後CD28- 細胞顯示幾乎完全為TEMRA表型，在用CD3hiTSP1處理72小時後，CD28- 細胞重新獲取了中樞記憶/效應記憶表型，其中伴隨著具有更終末分化(TEMRA)特徵的細胞比例的降低。
6.27.實例27：CD3hiTSP1與CD3hi BSP1分子引發針對CD19+靶細胞的重定向T細胞毒性活性(RTCC)的能力。
用CD19+ Nalm6細胞建立RTCC測定，將其工程化以表現螢光素酶基因，並對CD8 T細胞群進行分選，以測量CD3hi TSP1和CD3hi BSP1(R變體)引發CD8 T細胞亞群細胞毒性活性的能力。
6.27.1.材料和方法
解凍先前從血沈棕黃層供體(伯恩醫院)中分離並冷凍保存的外周血單核細胞(PBMC)，並按照製造商的方案，使用人泛T細胞分離套組(美天旎生物技術有限公司，目錄號130-096-535)藉由陰性選擇分離總T細胞。以50 Gy照射陽性部分(稱為耗盡的PBMC-T細胞)，以便用作共培養中的飼養層。
從富含總T細胞的陰性部分，然後使用EasySepTM 人CD8+ T細胞富集套組(Stem Cell公司，目錄號19053)藉由額外的陰性選擇步驟分離CD8+ T細胞。然後用抗CD28抗體(博奇公司，目錄號302922)對未接觸的CD8+ 細胞進行染色，並根據CD28表現用FACSAria(BD)進行分選：CD8+ CD28+ 和CD8+ CD28- 。分選細胞的純度>95%。
然後將每個T細胞亞群(CD8+ CD28+ 或CD8+ CD28- )在384孔平底微量滴定板(賽默飛世爾科技公司，目錄號142761)中與等量的Nalm6靶細胞共培養，以實現1：1的效應物：靶(E：T)比率(3,000個T細胞和3,000個靶細胞)。在T細胞介質[RPMI-1640(賽默飛世爾科技公司，目錄號21875-034)、10% FBS胎牛血清(GE醫療公司，目錄號SH30070.03)、1%非必需胺基酸(賽默飛世爾科技公司，目錄號11140-050)、1%青黴素/鏈黴素(賽默飛世爾科技公司，目錄號15140122)、1% HEPES(龍沙公司，目錄號17737E)、丙酮酸鈉(賽默飛世爾科技公司，目錄號11360-070)、50μM β-巰基乙醇(賽默飛世爾科技公司，目錄號31350)]中建立共培養。稀釋細胞並共接種以獲得額外的1：3或1：6的最終E：T比率。在需要存在經照射的PBMC-T細胞耗盡的共培養條件下，接種600個PBMC以獲得效應T細胞：PBMC的5：1比率。
將CD3hi TSP1、CD3hi BSP1和CD3hi TSP1C抗體對照以不同濃度(1nM、0.1nM和0.01nM)添加到細胞中。
將板在具有5% CO2的37℃培養箱中孵育72小時。在共孵育後，將One-Glo(普洛麥格公司，目錄號E6110)添加到所有孔中，並且隨後在ELISA讀取器4.18 1(Biotek公司，Synergy H1)上測量發光信號。具有One-Glo的靶細胞作為最大信號。使用以下公式計算靶細胞的RTCC百分比：[100-(樣本/最大信號)*100%]。
6.27.2.結果
結果示出於圖30A-30D中。當與對照抗體CD3hi TSP1C相比時，CD3hi TSP1和CD3hi BSP1兩者均介導了針對CD19+ Nalm6-luc靶細胞的RTCC活性。當使用0.1nM或1nM的CD3hi TSP1時，與其他處理相比，在具有CD8+ CD28- T細胞的環境中(在經照射的飼養層存在下)，觀察到CD3hi TSP1介導的RTCC增加。
6.28.實例28：CD3hi TSP1和CD3med TSP1在NSG小鼠的OCI-LY-19彌漫性大B細胞淋巴瘤腫瘤模型的過繼轉移適應中的抗腫瘤活性
在NSG小鼠的OCI-LY-19彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)腫瘤模型中研究CD3hi TSP1和CD3med TSP1(H變體)的抗腫瘤活性。
6.28.1.材料和方法
在第0天，收穫OCI-LY-19細胞，並按500x10 6 個細胞/mL的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(Hanks Balanced Salt Solution，HBSS)中。在約6投與齡的雌性NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1 Wjl/SzJ小鼠(NSG小鼠)(傑克遜實驗室(Jackson Laboratories)，緬因州)的右側腹上以200μL皮下注射5x10 6 個OCI-LY-19細胞。在腫瘤接種後7天，每隻小鼠經由在側尾靜脈中IV注射以100μL接受15X10 6 個外周血單核細胞(PBMC)的過繼轉移(AdT)。先前從人白血球單採術樣本(leukopak)中分離PBMC，冷凍並儲存在氣相液氮罐中的Cryostor10介質中直至使用。就在AdT之前，將PBMC解凍並按100 X 10 6 個細胞/ml的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)中。當經由機械卡尺測量的腫瘤負荷(TB)達到平均約200mm 3 體積時，用單次IV投與CD3hi TSP1或CD3med TSP1處理小鼠(n=8/組)，其劑量水平為0.003mg/kg、0.01mg/kg、0.03mg/kg、0.1mg/kg或0.3mg/kg。將每種抗體的抗腫瘤活性與接受腫瘤植入和AdT但未接受處理(腫瘤+AdT)的未處理對照組進行比較(表25)。包括僅植入腫瘤的組以計量用未處理對照中觀察到的同種異體響應。根據個體小鼠體重，按10mL/kg投與所有處 理。藉由腫瘤負荷的變化與未處理的對照中的變化的百分比(%△T/△C)或%消退來確定抗腫瘤活性。
每週記錄兩次腫瘤負荷和體重。使用生物發光成像系統(IVIS200，珀金埃爾默公司)藉由生物發光信號強度(以p/s表示)測量腫瘤負荷。使用以下公式藉由%△T/△C確定抗腫瘤活性：100 X△TB治療，時間 /△TB對照組，時間 (如果△TB
Figure 109116556-A0202-12-0540-427
0)；或%消退：(-1 X(100 X(TB最終- TB初始 /TB初始 )(如果△TV<0)。TB初始 係治療開始當天的腫瘤負荷。%△T/△C值<42%被認為具有抗腫瘤活性。使用以下公式測定體重變化百分比：100 X((BW時間 -BW初始 )/BW初始 )。用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行使用具有鄧尼特多重比較測試的單向方差分析(One-way ANOVA)的統計分析。
在OCI-LY-19植入後第25天，來自未處理的對照組的所有動物由於腫瘤負荷而被執行安樂死。
6.28.2.結果
該研究具有最小同種異體響應(圖31A-31B)。
以0.1mg/kg和0.3mg/kg用CD3hi TSP1進行抗體治療導致顯著的腫瘤消退，分別為72.41%和84.50%。以0.03mg/kg用CD3hi TSP1進行抗體治療導致腫瘤消退為13.74%。以0.003mg/kg用CD3hi TSP1進行抗體治療表現出顯著的抗腫瘤活性，為1.38%△T/△C。以0.003mg/kg劑量水平用CD3hi TSP1進行抗體治療在該模型中無活性(表25；圖31A)。
不存在用CD3hi TSP1治療的抗體相關的體重減輕。藉由用CD3hi TSP1治療觀察到的體重變化很可能是由於移植物抗宿主病(GvHD)的發作。體重減輕係疾病負荷和GvHD發作兩者的端點參數。在PBMC注射後35-42天(腫瘤植入後28-35天)，動物開始表現出由GvHD導致的體重減輕。具有高腫瘤負荷的動物還表現出與疾病負荷相關的體重減輕。在研究的過程中，體重相對於腫 瘤植入當天的初始測量值有所增加(表25，圖32A)。然而，在研究結束時，相對於峰值增加觀察到的體重減輕指示GvHD和疾病負荷引起的體重減輕。
以0.1mg/kg(5.60%消退)和0.3mg/kg(36.33%消退)，用CD3med TSP1進行抗體治療導致顯著的抗腫瘤響應。用CD3med TSP1進行治療導致顯著的抗腫瘤響應，其中對於0.03mg/kg劑量水平，%△T/△C值為7.39%。以0.003和0.01mg/kg用CD3med TSP1進行抗體治療在該模型中無活性(表26；圖31B)。
不存在用CD3med TSP1治療的抗體相關的體重減輕。在該研究結束時，針對該構建體，未觀察到由於GvHD發作引起的體重減輕(表26，圖32B)。
Figure 109116556-A0202-12-0541-2938
Figure 109116556-A0202-12-0542-545
6.29.實例29：在huCD34+ NSG小鼠的DLBCL皮下腫瘤模型的適應中，OCI-LY-19中多次給藥CD3 TSP1、CD3hi BSP1和CD3med TSP1後的抗腫瘤活性
在huCD34+ NSG小鼠的OCI-LY-19 DLBCL皮下腫瘤模型中研究CD3 TSP1、CD3hi BSP1、和CD3med TSP1(H變體)的抗腫瘤活性。
6.29.1.材料和方法
該研究中使用的NGS小鼠的人源化過程示意性地示出於圖33中。簡而言之，約6投與齡的雌性NSG小鼠(傑克遜實驗室，緬因州)接受了預處理方案，以減少骨髓小生境。這係藉由化學消融或X射線照射來完成的，以允許在每隻NSG小鼠中重建人免疫系統。在預處理後24小時內，經由在側尾靜脈 中IV注射以100μL引入從單臍帶(龍沙公司，StemCell)分離的50,000個huCD34+幹細胞(huCD34+SC)。每隻小鼠接受來自單一供體的huCD34+SC。將huCD34+ SC冷凍並儲存在-200℃液氮罐中，直到使用。在接種前，立即從液氮罐中取出huCD34+ SC小瓶，在37℃的珠浴中解凍，並以500,000個細胞/mL的最終濃度重懸於PBS中。在人源化後持續16投與，每週監測小鼠的體重和身體狀況。在第16投與，小鼠經由尾部放血，並且藉由螢光激活細胞分選(FACS)確定人免疫重建(人植入)。hCD45/總CD45
Figure 109116556-A0202-12-0543-426
25%的小鼠被認為係穩定植入的，並且符合研究招募的條件。
在植入評估後，小鼠皮下植入腫瘤細胞。在第0天，收穫OCI-LY-19細胞並以10x107 個細胞/mL的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)中，並且然後用基質膠以1：1稀釋，以得到5 x 107 個細胞/mL的最終濃度。經由皮下(SQ)注射在右側腹上對小鼠進行植入，其中每隻小鼠5 x 106 個細胞，體積為100μL。植入後15天，(經由卡尺測量的平均腫瘤體積約250-300mm3 )，以兩個參數將小鼠隨機化：供體和腫瘤體積。這確保了供體在各組中的平均分佈和相當的腫瘤體積。共有3個處理組，n=8，和未處理的對照組，n=5。經由IV投與每週用CD3hi TSP1(0.3mg/kg)、CD3med TSP1(1.0mg/kg)、或CD3hi BSP1(0.3mg/kg)治療小鼠持續2-4投與。將每種抗體的抗腫瘤活性與接受腫瘤植入物(腫瘤+ CD34+)的未處理的huCD34+ SC對照組進行比較(表27)。根據個體小鼠體重，按10mL/kg投與所有處理。抗腫瘤活性係藉由處理組與未處理組的腫瘤體積變化百分比(%△T/△C)或%消退來確定的，並且藉由監測%存活動物隨時間的變化來評價響應的持久性。安樂死其TV、BW或BCS(身體狀況評分)藉由超過實驗室動物使用協議(AUP)規定的限制達到終點標準的動物。
每週記錄兩次腫瘤負荷(TV)和體重。藉由卡尺測量腫瘤負荷，捕捉長度和寬度，並使用公式(w2 xL)/3.14計算腫瘤體積。藉由量表測量體重。將 這兩個參數都輸入到內部系統(INDIGO)中。使用以下公式藉由%△T/△C確定抗腫瘤活性：100 X△TB治療，時間 /△TB對照組，時間 (如果△TB
Figure 109116556-A0202-12-0544-425
0)；或%消退：(-1 X(100 X(TB最終- TB初始 /TB初始 )(如果△TV<0)。TB初始 係治療開始當天的腫瘤負荷。%△T/△C值<42%被認為具有抗腫瘤活性。使用以下公式測定體重變化百分比：100 X((BW時間 -BW初始 )/BW初始 )。用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行使用具有鄧尼特多重比較測試的單向方差分析(One-way ANOVA)的統計分析(植入後24天)。
此外，使用KAPLAN-Meyer生存圖評價到達終點的時間，並使用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行分析，並且比較到達終點的中位時間(TTE)的差異。將在腫瘤體積超過1200mm3 時實現腫瘤終點的小鼠和因腫瘤體積之外的與疾病進展相關的原因(如潰瘍、轉移、體重減輕或身體狀況不佳)而被安樂死的小鼠評分為死亡(「1」)。審查因腫瘤進展之外的原因(如不良藥物事件)而被安樂死的動物(「0」)。進行對數秩(Mantel-Cox)生存分析，並使用Holm-Sidak方法進行所有成對多重比較程序，其中總顯著性水平P<0.05(SigmaPlot 13.0)。在Prism(GraphPad v7.03)中進行TTE的圖形分析。還評價個體響應標準，並將其評分為完全響應(CR)，在最後一次測量時沒有可檢測的腫瘤；部分響應(PR)，在任何時間點腫瘤體積均小於基線測量值，隨後再生長；或無響應(NR)，腫瘤在整個研究中持續增加超過基線測量值。該研究的最後一天係在第39天。
在OCI-LY-19植入後第24天，來自未處理的對照組的所有動物由於腫瘤負荷而被執行安樂死。在第24天評價統計分析。
6.29.2.結果
與腫瘤+ CD34 + 對照組相比，用所有三種抗體治療顯示出腫瘤活性的顯著差異。0.3mg/kg的CD3hi TSP1導致47.4%的顯著腫瘤消退，而CD3hi BSP1未實現消退(16.3%△T/△C)。用1.0mg/kg的CD3med TSP1治療導致腫瘤消退64.5%(表27，圖34A)。
僅在第一次給藥後觀察到與CD3hi TSP1、CD3med TSP1、和CD3hi BSP1治療相關的體重減輕。體重減輕的嚴重性也受到供體的影響，其中不同的供體顯示出可變的峰值體重減輕。不受理論的約束，將第一次給藥後觀察到的體重變化假設為靶介導的驅動，並因固有B細胞的耗盡而加劇。體重減輕係疾病負荷和治療誘導的響應兩者的端點參數。具有高腫瘤負荷的動物表現出與疾病負荷相關的體重減輕。在研究的過程中，觀察到體重相對於腫瘤植入當天的初始測量值有所增加，但響應於疾病負荷進展而降低(表27，圖34B)。
Figure 109116556-A0202-12-0545-546
6.30.實例30：在huCD34+ NSG小鼠的DLBCL皮下腫瘤模型中比較CD3hi TSP1和CD3med TSP1的單劑量、劑量範圍發現研究的抗腫瘤活性
在huCD34+ NSG小鼠的OCI-LY-19 DLBCL皮下腫瘤模型中研究CD3 TSP1、CD3hi BSP1、和CD3med TSP1(H變體)的抗腫瘤活性。
6.30.1.材料和方法
雌性人源化CD34+ NOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ小鼠(HuNSG小鼠)購自傑克遜實驗室(加利福尼亞州薩克拉門托)。使用臍帶血將小鼠人源化。
在裝運之前確定hCD45+細胞的植入水平，並在研究開始之前在內部進行確認。在外周血中具有超過25% hCD45+細胞的HuNSG小鼠被認為係移植的和人源化的。將源自具有不同移植水平的不同供體的HuNSG隨機分配到研究中的每個治療組。
在植入評估後，小鼠皮下植入腫瘤細胞。在第0天，收穫OCI-LY-19細胞並以10x10 7 個細胞/mL的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)中，並且然後用基質膠以1：1稀釋，以得到5x10 7 個細胞/mL的最終濃度。經由皮下(SQ)注射在右側腹上對小鼠進行植入，其中每隻小鼠5x10 6 個細胞，體積為100μL。植入後9天，(經由卡尺測量的平均腫瘤體積約250-300mm 3 )以兩個參數將小鼠隨機化：供體和腫瘤體積。這確保了供體在各組中的平均分佈和相當的腫瘤體積。共有11個組，其中n=8個處理組和n=5個未處理的對照組。在以下劑量範圍1.0mg/kg、0.3mg/gk、0.1mg/kg和0.01mg/kg內，經由IV投與給小鼠投與單劑量的CD3hi TSP1或CD3med TSP1。將每種抗體的抗腫瘤活性與接受腫瘤植入物(腫瘤+ CD34+)的未處理的huCD34 + SC對照組進行比較(表28)。根據個體小鼠體重，按10mL/kg投與所有處理。抗腫瘤活性係藉由處理組與未處理組的腫瘤體積變化百分比(%△T/△C)或%消退來確定的，並且藉由監測%存活動物隨時間的變化來評價響應的持久性。安樂死其TV、BW或BCS(身體狀況評分)藉由超過實驗室動物使用協議(AUP)規定的限制達到終點標準的動物。
每週記錄兩次腫瘤負荷(TV)和體重。藉由卡尺測量腫瘤負荷，捕捉長度和寬度，並使用公式(w2 xL)/3.14計算腫瘤體積。藉由量表測量體重。將這兩個參數都輸入到內部系統(INDIGO)中。使用以下公式藉由%△T/△C確定抗腫瘤活性：100 X△TB治療，時間 /△TB對照組，時間 (如果△TB
Figure 109116556-A0202-12-0547-424
0)；或%消退：(-1 X(100 X(TB最終- TB初始 /TB初始 )(如果△TV<0)。TB初始 係治療開始當天的腫瘤負荷。(%△T/△C值<42%被認為具有抗腫瘤活性)。使用以下公式測定體重變化百分比：100 X((BW時間 -BW初始 )/BW初始 )。用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行使用具有鄧尼特多重比較測試的單向方差分析(One-way ANOVA)的統計分析。此外，使用KAPLAN-Meyer生存圖評價響應的持久性，並使用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行分析。
在OCI-LY-19植入後第24天，來自未處理的對照組的所有動物由於腫瘤負荷而被執行安樂死。在第24天評價統計分析。
6.30.2.結果
與腫瘤+ CD34 + 對照組相比，觀察到用1.0mg/kg、0.3mg/kg和0.1mg/kg劑量的CD3hi TSP的腫瘤活性具有統計學顯著差異。1.0mg/kg的CD3hi TSP1導致35.3%的顯著腫瘤消退，而0.3mg/kg和0.1mg/kg的CD3hi TSP1顯示出強大的顯著的抗腫瘤活性，其△T/△C值分別為0.05%和19.5%。低於0.1mg/kg投與的劑量水平未實現抗腫瘤響應，其中0.03mg/kg劑量的CD3hi TSP1的△T/△C值為65.8%，並且0.01mg/kg劑量的△T/△C值為100%(表28，圖35A)。
用CD3med TSP1進行抗體治療導致顯著的抗腫瘤活性。以1.0mg/kg給藥的CD3med TSP1實現了顯著的腫瘤響應，其△T/△C為0.05%。0.3mg/kg劑量水平的CD3med TSP1確實顯示出抗腫瘤活性(△T/△C：26.9<42)，但與對照組相比不顯著。低於0.3mg/kg的劑量未顯示出顯著的腫瘤活性，其0.1mg/kg、 0.03mg/kg和0.01mg/kg劑量的△T/△C值分別為79.8%、90.3%、和100%(表28，圖35C)。
在投與CD3hi TSP1和CD3med TSP1後，在多個劑量水平上觀察到治療相關的體重減輕。體重減輕的嚴重性係供體和劑量水平效應兩者的組合，其中不同的供體顯示出可變的峰值體重減輕。不受理論的約束，將給藥後觀察到的體重變化假設為靶介導的驅動，並因固有B細胞的耗盡而加劇。體重減輕係疾病負荷和治療誘導的響應兩者的端點參數。具有高腫瘤負荷的動物表現出與疾病負荷相關的體重減輕。在研究的過程中，觀察到體重相對於腫瘤植入當天的初始測量值有所增加(表28，圖35B和35D)，但響應於疾病負荷進展而降低。
Figure 109116556-A0202-12-0548-2939
Figure 109116556-A0202-12-0549-548
6.31.實例31：CD3hi BSP1、CD3hi TSP1、和CD3med TSP1在NSG小鼠的Daudi-Luc Burkitt淋巴瘤皮下腫瘤模型的過繼轉移適應中的抗腫瘤活性
在NSG小鼠的Daudi-Luc Burkitt淋巴瘤皮下腫瘤模型的過繼轉移適應中研究CD3hi BSP1、CD3hi TSP1、和CD3med TSP1(H變體)的抗腫瘤活性。
6.31.1.材料和方法
在第0天，收穫Daudi-Luc細胞，並按50 x 10 6 個細胞/mL的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)和基質膠的1：1混合物中。在約6投與齡的雌性 NSG小鼠(傑克遜實驗室，緬因州)的右側腹上以100μL皮下(SQ)注射5 x 106 個Daudi-Luc細胞。在腫瘤接種後3天，每隻小鼠經由在側尾靜脈中靜脈內(IV)注射以100μL接受15x106 個外周血單核細胞(PBMC)的過繼轉移(AdT)。先前從人白血球單採術樣本中分離PBMC，冷凍並儲存在氣相液氮罐中的Cryostor10介質中直至使用。就在AdT之前，將PBMC解凍並按150x106 個細胞/ml的濃度懸浮於漢克斯平衡鹽溶液(HBSS)中。當經由卡尺(植入後第10天)測量的腫瘤體積(TV)達到平均約250立方毫米(mm3 )時，用單次IV投與CD3hi BSP1、CD3hi TSP1、或CD3med TSP1處理小鼠(n=8/組)，其劑量水平為1.0mg/kg、0.3mg/kg、或0.1mg/kg。將每種抗體的抗腫瘤活性與接受腫瘤植入和AdT但未接受處理(腫瘤+ AdT)的未處理對照組進行比較(表29)。包括僅植入腫瘤的組以計量用未處理對照中觀察到的同種異體響應。根據個體小鼠體重，按10mL/kg投與所有處理。藉由腫瘤體積的變化與未處理的對照中的變化的百分比(%△T/△C)或%消退來確定抗腫瘤活性。
每週兩次記錄腫瘤體積和體重。藉由卡尺測量腫瘤體積。使用以下公式藉由%△T/△C確定抗腫瘤活性：100 X△TV治療，時間 /△TV對照組，時間 (如果△TV
Figure 109116556-A0202-12-0550-423
0)；或%消退：(-1 X(100 X(TV最終- TV初始 /TV初始 )(如果△TV<0)。TV初始 係治療開始當天的腫瘤體積。%△T/△C值<42%被認為具有抗腫瘤活性。使用以下公式測定體重變化百分比：100 X((BW時間 -BW初始 )/BW初始 )。用Graphpad Prism軟體(版本7.03)進行使用具有鄧尼特多重比較測試的單向方差分析(One-way ANOVA)的統計分析。
在Daudi-Luc植入後第36天，來自腫瘤+ AdT對照組的動物中的25%由於腫瘤體積而被執行安樂死。
6.31.2.結果
該研究具有最小同種異體響應(圖36A-36C)。
以1.0mg/kg和0.3mg/kg用CD3hi BSP1進行抗體治療導致顯著的腫瘤消退，分別為85.21%和73.26%。以0.1mg/kg用CD3hi BSP1進行抗體治療表現出顯著的抗腫瘤活性(20.89%△T/△C值)。用CD3med TSP1進行抗體治療在所有三個劑量水平下均導致顯著的抗腫瘤響應：1.0mg/kg(90.86%消退)、0.3mg/kg(85.13%消退)、和0.1mg/kg(13.51%消退)。用CD3hi TSP1進行抗體治療在所有三個劑量水平下均導致顯著的腫瘤消退：1.0mg/kg(90.08%消退)、0.3mg/kg(91.86%消退)、和0.1mg/kg(87.52%消退)。
不存在用所測試的三種構建體中的任一種治療的抗體相關的體重減輕。不受理論的約束，在從基線的大約第35天時觀察到的體重變化最可能是由於移植物抗宿主病(GvHD)的發作。體重減輕係GvHD發作的端點參數。在PBMC注射後32-39天(腫瘤植入後35-42天)，動物開始表現出由GvHD導致的體重減輕。在研究的過程中，體重相對於腫瘤植入當天的初始測量值有所增加(表29，圖37A-37C)。然而，在研究結束時，相對於峰值增加觀察到的體重減輕指示GvHD引起的體重減輕。
Figure 109116556-A0202-12-0551-2940
Figure 109116556-A0202-12-0552-550
6.32.實例32：抗CD19 TBM不同CD2結合臂的比較
如圖38A至38C所示，產生了用不同CD2結合臂結合至CD19、CD3和CD2的三特異性結合分子(TBM)。
在所有三種構建體中，該「左」半抗體在N-至C-末端方向上包含CD19 FAB、短柔性連接子、抗CD3 scFv、和Fc結構域，並且該「右」半抗體在N-至C-末端方向上包含CD2結合結構域、短柔性連接子、和Fc結構域。該CD2 結合部分係在圖38A的構建體中的全長CD58部分、在圖38B的構建體中包含CD58的IgV樣結構域的截短的CD58部分，以及在圖38C的構建體中對應於抗CD2抗體Medi 507的scFv。兩種半抗體藉由「杵臼結構」工程異二聚化(Ridgway等人，1999,Protein Eng.[蛋白質工程]9(7)：617-21)。Fc序列係一種人lgG1 Fc序列，其含有使抗體依賴性細胞毒性緘默並促進異二聚體Fc多特異性結合分子純化的修飾。
在用Nalm6靶細胞和人泛T效應細胞進行的重定向的T細胞毒性測定中，對TBM進行分析。觀察到僅具有截短的CD58 IgV結構域的TBM(圖38B)具有與具有全長CD58分子的TBM相似的細胞毒性活性(圖38A)。與包含CD58部分的三特異性構建體相比，在該測定中觀察到包含Medi 507 scFv的TBM(圖38C)具有更好的細胞毒性活性(數據未示出)。
在沒有靶細胞作為非特異性T細胞活化的量度的情況下，還分析了TBM在Jurkat細胞中誘導活化的T細胞的核因子(NFAT)的潛力。與具有全長CD58分子的構建體相比，觀察到僅具有截短的CD58 IgV結構域的TBM(圖38B)誘導更少的NFAT活化(圖38A)。與含有CD58作為CD2結合部分的三特異性結合分子相比，具有對應於抗CD2抗體Medi 507的scFv的構建體(圖38C)顯示出強得多的NFAT誘導，表明了更高的非特異性活化潛力(數據未示出)。因此，與使用抗CD2抗體相比，包含CD58作為CD2結合臂降低了非特異性T細胞活化的可能性。
該等結果表明，與經由抗CD2抗體結合至CD19、CD3和CD2的TBM相比，經由CD58結合至CD19、CD3和CD2的TBM將具有更好的安全性特徵，包括降低細胞介素釋放綜合症(「CRS」)的風險。
6.33.實例33：不同抗CD19 TBM構型的比較
結合至CD19、CD3和CD2的TBM係用CD19、CD3和CD2結合結構域的五種不同質性產生的，如圖39A至39E所示。
含有兩種半抗體的所有五種TBM藉由「杵臼結構」工程異二聚化(Ridgway等人，1999,Protein Eng.[蛋白質工程]9(7)：617-21)。Fc序列係一種人lgG1 Fc序列，其含有使抗體依賴性細胞毒性緘默並促進異二聚體Fc多特異性結合分子純化的修飾。
圖39A中所示的TBM對應於來自實例32的具有CD58 IgV結構域的TBM(也在圖38B中示出)。
圖39B中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有CD58 IgV結構域、抗CD3 scFab和Fc結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端。
圖39C中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有CD58 IgV結構域、抗CD3 scFv和Fc結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端。
圖39D中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、CD58 IgV結構域和Fc結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端。
圖39E中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD58 IgV結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有抗CD19 Fab N-末端。
在用Nalm6靶細胞和人泛T效應細胞進行的重定向的T細胞毒性測定中，對TBM進行分析。圖39E中所示的TBM展示出與圖39A中所示的TBM相似的細胞毒性活性。其他替代形式顯示出較低活性(數據未示出)。
在沒有靶細胞作為非特異性T細胞活化的量度的情況下，還分析了TBM在Jurkat細胞中誘導活化的T細胞的核因子(NFAT)的潛力。與其他構建體相比，圖39E中所示的TBM展示出更強的NFAT誘導。圖39A中所示的TBM顯示出最低的NFAT誘導(數據未示出)。
該等結果表明，圖39A的TBM形式比其他TBM形式具有更大的抗腫瘤活性和更低的非特異性活性，發明人相信與其他TBM構型相比，這將導致更大的治療指數和降低的CRS風險。
6.34.實例34：抗CD19 TBM不同CD19結合臂構型的比較
結合至CD19、CD3和CD2的TBM係用CD19結合結構域的三種不同質性產生的，如圖40A-40C所示。
含有兩種半抗體的所有三種TBM藉由「杵臼結構」工程異二聚化(Ridgway等人，1999,Protein Eng.[蛋白質工程]9(7)：617-21)。Fc序列係一種人lgG1 Fc序列，其含有使抗體依賴性細胞毒性緘默並促進異二聚體Fc多特異性結合分子純化的修飾。
圖40A中所示的TBM對應於來自實例32的具有CD58 IgV結構域的TBM(也在圖38B和圖39A中示出)。
圖40B中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD19 scFv結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有CD58 IgV結構域N-末端。
圖40C中所示的TBM的該「左」半抗體在N-末端至C-末端方向上具有抗CD3 scFv、Fc結構域和CD19 Fab結構域，並且該TBM的該「右」半抗體對於Fc結構域具有CD58 IgV結構域N-末端。
在用Nalm6靶細胞和人泛T效應細胞進行的重定向的T細胞毒性測定中，對TBM進行分析。與在N-末端處具有CD19結合臂的形式相比，觀察到 在C-末端上具有CD19結合臂的TBM(如圖40B和圖40C所示)具有較少的細胞毒性活性(圖40A)(數據未示出)。
在沒有靶細胞作為非特異性T細胞活化的量度的情況下，還分析了TBM在Jurkat細胞中誘導活化的T細胞的核因子(NFAT)的潛力。與在N-末端處具有CD19結合臂的形式相比，觀察到在C-末端上具有CD19結合臂的TBM(如圖40B和圖40C所示)具有較高的NFAT誘導(圖40A)(數據未示出)。
該等結果表明，如圖40A所示，與在C-末端處具有CD19結合部分的TBM相比，在N-末端處具有CD19結合部分的TBM具有更大的抗腫瘤活性和更低的非特異性活性。發明人相信，與其中CD19結合部分在C-末端處的TBM相比，在N-末端處具有CD19結合部分的TBM因此將具有更大的治療指數和降低的CRS風險。
7.具體實施方式、參考文獻的引用
雖然已經說明和描述了多種具體的實施方式，但應當理解，在不脫離一種或多種本揭露之精神和範圍的情況下，可以進行多種改變。本揭露藉由以下列出的編號的實施方式來例證。
1.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、和SEQ ID NO：3的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、和SEQ ID NO：16的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
2.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
3.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、和SEQ ID NO：9的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、和SEQ ID NO：22的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
4.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、和SEQ ID NO：12的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、和SEQ ID NO：25的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
5.如實施方式1至4中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：13的胺基酸序列的VH。
6.如實施方式1至5中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：26的胺基酸序列的VL。
7.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、和SEQ ID NO：29的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、和SEQ ID NO：42的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
8.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、和SEQ ID NO：32的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、和SEQ ID NO：45的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
9.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：34、和SEQ ID NO：35的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、和SEQ ID NO：48的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
10.一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、和SEQ ID NO：38的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、和SEQ ID NO：51的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
11.如實施方式7至10中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：39的胺基酸序列的VH。
12.如實施方式7至11中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：52的胺基酸序列的VL。
13.如實施方式1至12中任一項所述之CD19結合分子，其包含抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、或單結構域抗體(SDAB)。
14.如實施方式13所述之CD19結合分子，其包含抗體或其抗原結合結構域。
15.如實施方式13所述之CD19結合分子，其包含scFv。
16.如實施方式1至12中任一項所述之CD19結合分子，其係包含以下的多特異性結合分子(MBM)：
(a)特異性結合至CD19的抗原結合模組1(ABM1)；以及
(b)特異性結合至不同靶分子的抗原結合模組2(ABM2)，視需要其中該靶 分子係人T細胞受體(TCR)複合物的組分。
17.如實施方式16所述之CD19結合分子，其中ABM1係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
18.如實施方式17所述之CD19結合分子，其中ABM1係scFv。
19.如實施方式17所述之CD19結合分子，其中ABM1係Fab。
20.如實施方式17所述之CD19結合分子，其中該Fab係Fab異二聚體。
21.如實施方式17所述之CD19結合分子，其中ABM1係抗CD19抗體或其抗原結合結構域。
22.如實施方式16至21中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2係基於非免疫球蛋白支架的ABM。
23.如實施方式22所述之CD19結合分子，其中ABM2係Kunitz結構域、Adnexin、親合體、DARPin、Avimer、Anticalin、脂質運載蛋白、Centyrin、Versabody、Knottin、Adnectin、Pronectin、Affitin/Nanofitin、Affilin、Atrimer/四連接素、二環肽、cys-knot、Fn3支架、Obody、Tn3、Affimer、BD、Adhiron、Duocalin、Alphabody、Armadillo重複蛋白質、Repebody、或Fynomer。
24.如實施方式16至21中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2係基於免疫球蛋白支架的ABM。
25.如實施方式24所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
26.如實施方式25所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗體或其抗原結合結構域。
27.如實施方式25所述之CD19結合分子，其中ABM2係scFv。
28.如實施方式25所述之CD19結合分子，其中ABM2係Fab。
29.如實施方式25所述之CD19結合分子，其中ABM2係Fab異二聚體。
30.如實施方式16至29中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分。
31.如實施方式30所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係CD3。
32.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-1的CDR序列。
33.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-2的CDR序列。
34.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-3的CDR序列。
35.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-4的CDR序列。
36.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-5的CDR序列。
37.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-6的CDR序列。
38.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-7的CDR序列。
39.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-8的CDR序列。
40.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-9的CDR序列。
41.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-10的CDR序列。
42.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-11的CDR序列。
43.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-12的CDR序列。
44.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-13的CDR序列。
45.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-14的CDR序列。
46.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-15的CDR序列。
47.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-16的CDR序列。
48.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-17的CDR序列。
49.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-18的CDR序列。
50.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-19的CDR序列。
51.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-20的CDR序列。
52.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-21的CDR序列。
53.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-22的CDR序列。
54.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-23的CDR序列。
55.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-24的CDR序列。
56.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-25的CDR序列。
57.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-26的CDR序列。
58.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-27的CDR序列。
59.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-28的CDR序列。
60.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-29的CDR序列。
61.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-30的CDR序列。
62.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-31的CDR序列。
63.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-32的CDR序列。
64.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-33的CDR序列。
65.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-34的CDR序列。
66.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-35的CDR序列。
67.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-36的CDR序列。
68.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-37的CDR序列。
69.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-38的CDR序列。
70.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-39的CDR序列。
71.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-40的CDR序列。
72.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-41的CDR序列。
73.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-42的CDR序列。
74.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-43的CDR序列。
75.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-44的CDR序列。
76.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-45的CDR序列。
77.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-46的CDR序列。
78.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-47的CDR序列。
79.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-48的CDR序列。
80.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-49的CDR序列。
81.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-50的CDR序列。
82.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-51的CDR序列。
83.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-52的CDR序列。
84.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-53的CDR序列。
85.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-54的CDR序列。
86.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-55的CDR序列。
87.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-56的CDR序列。
88.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-57的CDR序列。
89.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-58的CDR序列。
90.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-59的CDR序列。
91.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-60的CDR序列。
92.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-61的CDR序列。
93.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-62的CDR序列。
94.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-63的CDR序列。
95.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-64的CDR序列。
96.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-65的CDR序列。
97.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-66的CDR序列。
98.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-67的CDR序列。
99.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-68的CDR序列。
100.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-69的CDR序列。
101.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-70的CDR序列。
102.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-71的CDR序列。
103.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-72的CDR序列。
104.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-73的CDR序列。
105.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-74的CDR序列。
106.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-75的CDR序列。
107.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-76的CDR序列。
108.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-77的CDR序列。
109.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-78的CDR序列。
110.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-79的CDR序列。
111.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-80的CDR序列。
112.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-81的CDR序列。
113.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-82的CDR序列。
114.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-83的CDR序列。
115.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-84的CDR序列。
116.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-85的CDR序列。
117.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-86的CDR序列。
118.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-87的CDR序列。
119.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-88的CDR序列。
120.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-89的CDR序列。
121.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-90的CDR序列。
122.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-91的CDR序列。
123.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-92的CDR序列。
124.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-93的CDR序列。
125.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-94的CDR序列。
126.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-95的CDR序列。
127.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-96的CDR序列。
128.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-97的CDR序列。
129.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-98的CDR序列。
130.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-99的CDR序列。
131.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-100的CDR序列。
132.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-101的CDR序列。
133.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-102的CDR序列。
134.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-103的CDR序列。
135.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-104的CDR序列。
136.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-105的CDR序列。
137.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-106的CDR序列。
138.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-107的CDR序列。
139.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-108的CDR序列。
140.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-109的CDR序列。
141.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-110的CDR序列。
142.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-111的CDR序列。
143.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-112的CDR序列。
144.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-113的CDR序列。
145.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-114的CDR序列。
146.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-115的CDR序列。
147.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-116的CDR序列。
148.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-117的CDR序列。
149.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-118的CDR序列。
150.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-119的CDR序列。
151.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-120的CDR序列。
152.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-121的CDR序列。
153.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-122的CDR序列。
154.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-123的CDR序列。
155.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-124的CDR序列。
156.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-125的CDR序列。
157.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-126的CDR序列。
158.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-127的CDR序列。
159.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-128的CDR序列。
160.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-129的CDR序列。
161.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-130的CDR序列。
162.如實施方式32至161中任一項所述之CD19結合分子，其中該CDR由卡巴特編號所定義，如在表12B中所列出。
163.如實施方式32至161中任一項所述之CD19結合分子，其中該CDR由喬西亞編號所定義，如在表12C中所列出。
164.如實施方式32至161中任一項所述之MBM，其中該CDR由卡巴特編號和喬西亞編號的組合所定義，如在表12D中所列出。
165.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-1的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
166.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-2的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
167.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-3的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
168.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-4的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
169.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-5的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
170.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-6的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
171.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-7的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
172.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-8的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
173.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-9的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
174.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-10的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
175.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-11的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
176.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-12的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
177.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-13的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
178.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-14的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
179.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-15的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
180.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-16的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
181.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-17的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
182.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-18的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
183.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-19的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
184.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-20的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
185.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-21的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
186.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-22的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
187.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-23的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
188.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-24的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
189.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-25的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
190.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-26的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
191.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-27的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
192.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-28的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
193.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-129的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
194.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-130的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
195.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-12的scFv的胺基酸序列。
196.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-21的scFv的胺基酸序列。
197.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-22的scFv的胺基酸序列。
198.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-23的scFv的胺基酸序列。
199.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-24的scFv的胺基酸序列。
200.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-25的scFv的胺基酸序列。
201.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-26的scFv的胺基酸序列。
202.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-27的scFv的胺基酸序列。
203.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-28的scFv的胺基酸序列。
204.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-129的scFv的胺基酸序列。
205.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-130的scFv的胺基酸序列。
206.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AA、表AB、或表AC中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列、和CDR-L3序列。
207.如實施方式206所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AA中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列、和CDR-L3序列。
208.如實施方式207所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X1 的胺基酸係T。
209.如實施方式207所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X1 的胺基酸係A。
210.如實施方式207至209中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X2 的胺基酸係S。
211.如實施方式207至209中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X2 的胺基酸係R。
212.如實施方式207至211中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X3 的胺基酸係N。
213.如實施方式207至211中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X3 的胺基酸係Y。
214.如實施方式207至211中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X3 的胺基酸係Q。
215.如實施方式207至214中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X4 的胺基酸係H。
216.如實施方式207至214中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X4 的胺基酸係S。
217.如實施方式207至216中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X5 的胺基酸係M。
218.如實施方式207至216中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X5 的胺基酸係L。
219.如實施方式207至218中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X6 的胺基酸係K。
220.如實施方式207至218中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X6 的胺基酸係R。
221.如實施方式207至220中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X7 的胺基酸係S。
222.如實施方式207至220中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X7 的胺基酸係K。
223.如實施方式207至222中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X55 的胺基酸係F。
224.如實施方式207至222中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X55 的胺基酸係Y。
225.如實施方式207至222中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X55 的胺基酸係S。
226.如實施方式207至225中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X8 的胺基酸係W。
227.如實施方式207至225中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X8 的胺基酸係Y。
228.如實施方式207至225中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X8 的胺基酸係S。
229.如實施方式207至225中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X8 的胺基酸係T。
230.如實施方式207至229中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X9 的胺基酸係W。
231.如實施方式207至229中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X9 的胺基酸係Y。
232.如實施方式207至229中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X9 的胺基酸係S。
233.如實施方式207至229中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X9 的胺基酸係T。
234.如實施方式207至233中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X10 的胺基酸係H。
235.如實施方式207至233中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X10 的胺基酸係Y。
236.如實施方式207至235中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X11 的胺基酸係S。
237.如實施方式207至235中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X11 的胺基酸係G。
238.如實施方式207至237中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X12 的胺基酸係I。
239.如實施方式207至237中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X12 的胺基酸係L。
240.如實施方式207至239中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X13 的胺基酸係V。
241.如實施方式207至239中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X13 的胺基酸係G。
242.如實施方式207至241中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X14 的胺基酸係R。
243.如實施方式207至241中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X14 的胺基酸係N。
244.如實施方式207至243中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X15 的胺基酸係D。
245.如實施方式207至243中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X15 的胺基酸係E。
246.如實施方式207至243中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X15 的胺基酸係L。
247.如實施方式207至246中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X16 的胺基酸係G。
248.如實施方式207至246中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X16 的胺基酸係N。
249.如實施方式207至246中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X16 的胺基酸係E。
250.如實施方式207至249中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X17 的胺基酸係R。
251.如實施方式207至249中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X17 的胺基酸係S。
252.如實施方式207至251中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X18 的胺基酸係V。
253.如實施方式207至251中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X18 的胺基酸係T。
254.如實施方式207至253中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X19 的胺基酸係N。
255.如實施方式207至253中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X19 的胺基酸係T。
256.如實施方式207至255中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X20 的胺基酸係R。
257.如實施方式207至255中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X20 的胺基酸係L。
258.如實施方式207至257中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X21 的胺基酸係F。
259.如實施方式207至257中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X21 的胺基酸係E。
260.如實施方式207至259中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X22 的胺基酸係S。
261.如實施方式207至259中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X22 的胺基酸係Y。
262.如實施方式207至261中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X23 的胺基酸係S。
263.如實施方式207至261中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X23 的胺基酸係Y。
264.如實施方式207至263中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X24 的胺基酸係S。
265.如實施方式207至263中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X24 的胺基酸係A。
266.如實施方式207至265中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X25 的胺基酸係H。
267.如實施方式207至265中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X25 的胺基酸係T。
268.如實施方式207至267中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X26 的胺基酸係F。
269.如實施方式207至267中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X26 的胺基酸係Y。
270.如實施方式207至269中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X27 的胺基酸係W。
271.如實施方式207至269中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AA中指定為X27 的胺基酸係Y。
272.如實施方式207至271中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C1-1。
273.如實施方式207至271中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C1-2。
274.如實施方式207至271中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C1-3。
275.如實施方式207至271中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C1-4。
276.如實施方式207至275中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C1-5。
277.如實施方式207至275中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C1-6。
278.如實施方式207至275中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C1-7。
279.如實施方式207至278中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C1-8。
280.如實施方式207至278中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C1-9。
281.如實施方式207至278中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C1-10。
282.如實施方式207至278中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C1-11。
283.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-12。
284.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-13。
285.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-14。
286.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-15。
287.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-16。
288.如實施方式207至282中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C1-17。
289.如實施方式207至288中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C1-18。
290.如實施方式207至288中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C1-19。
291.如實施方式207至290中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C1-20。
292.如實施方式207至290中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C1-21。
293.如實施方式207至290中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C1-22。
294.如實施方式207至290中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C1-23。
295.如實施方式206所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AB中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列、和CDR-L3序列。
296.如實施方式295所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X28 的胺基酸係V。
297.如實施方式295所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X28 的胺基酸係I。
298.如實施方式295至297中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X29 的胺基酸係F。
299.如實施方式295至297中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X29 的胺基酸係Y。
300.如實施方式295至299中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X30 的胺基酸係N。
301.如實施方式295至299中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X30 的胺基酸係S。
302.如實施方式295至301中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X31 的胺基酸係A。
303.如實施方式295至301中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X31 的胺基酸係S。
304.如實施方式295至303中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X32 的胺基酸係T。
305.如實施方式295至303中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X32 的胺基酸係K。
306.如實施方式295至305中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X33 的胺基酸係T。
307.如實施方式295至305中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X33 的胺基酸係A。
308.如實施方式295至307中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X34 的胺基酸係S。
309.如實施方式295至307中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X34 的胺基酸係R。
310.如實施方式295至309中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X35 的胺基酸係N。
311.如實施方式295至309中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X35 的胺基酸係G。
312.如實施方式295至311中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X36 的胺基酸係S。
313.如實施方式295至311中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X36 的胺基酸係A。
314.如實施方式295至313中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X37 的胺基酸係A。
315.如實施方式295至313中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X37 的胺基酸係T。
316.如實施方式295至313中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X37 的胺基酸係S。
317.如實施方式295至316中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X38 的胺基酸係N。
318.如實施方式295至316中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X38 的胺基酸係D。
319.如實施方式295至318中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X39 的胺基酸係N。
320.如實施方式295至318中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X39 的胺基酸係K。
321.如實施方式295至320中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X40 的胺基酸係D。
322.如實施方式295至320中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X40 的胺基酸係N。
323.如實施方式295至322中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X41 的胺基酸係H。
324.如實施方式295至322中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X41 的胺基酸係N。
325.如實施方式295至324中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X42 的胺基酸係Q。
326.如實施方式295至324中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X42 的胺基酸係E。
327.如實施方式295至326中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X43 的胺基酸係R。
328.如實施方式295至326中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X43 的胺基酸係S。
329.如實施方式295至326中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AB中指定為X43 的胺基酸係G。
330.如實施方式295至329中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C2-1。
331.如實施方式295至329中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C2-2。
332.如實施方式295至329中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C2-3。
333.如實施方式295至329中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C2-4。
334.如實施方式295至333中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C2-5。
335.如實施方式295至333中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C2-6。
336.如實施方式295至333中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C2-7。
337.如實施方式295至336中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C2-8。
338.如實施方式295至336中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C2-9。
339.如實施方式295至338中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C2-10。
340.如實施方式295至338中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C2-11。
341.如實施方式295至338中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C2-12。
342.如實施方式295至341中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C2-13。
343.如實施方式295至341中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C2-14。
344.如實施方式295至341中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C2-15。
345.如實施方式295至344中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C2-16。
346.如實施方式295至344中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C2-17。
347.如實施方式206所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AC中所列出的CDR-H1序列、CDR-H2序列、CDR-H3序列、CDR-L1序列、CDR-L2序列、和CDR-L3序列。
348.如實施方式347所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X44 的胺基酸係G。
349.如實施方式347所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X44 的胺基酸係A。
350.如實施方式347至349中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X45 的胺基酸係H。
351.如實施方式347至349中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X45 的胺基酸係N。
352.如實施方式347至351中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X46 的胺基酸係D。
353.如實施方式347至351中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X46 的胺基酸係G。
354.如實施方式347至353中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X47 的胺基酸係A。
355.如實施方式347至353中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X47 的胺基酸係G。
356.如實施方式347至355中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X48 的胺基酸係N。
357.如實施方式347至355中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X48 的胺基酸係K。
358.如實施方式347至357中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X49 的胺基酸係V。
359.如實施方式347至357中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X49 的胺基酸係A。
360.如實施方式347至359中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X50 的胺基酸係N。
361.如實施方式347至359中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X50 的胺基酸係V。
362.如實施方式347至361中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X51 的胺基酸係A。
363.如實施方式347至361中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X51 的胺基酸係V。
364.如實施方式347至363中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X52 的胺基酸係Y。
365.如實施方式347至363中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X52 的胺基酸係F。
366.如實施方式347至365中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X53 的胺基酸係I。
367.如實施方式347至365中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X53 的胺基酸係V。
368.如實施方式347至367中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X54 的胺基酸係I。
369.如實施方式347至367中任一項所述之CD19結合分子，其中在表AC中指定為X54 的胺基酸係H。
370.如實施方式347至369中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C3-1。
371.如實施方式347至369中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C3-2。
372.如實施方式347至369中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C3-3。
373.如實施方式347至369中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H1序列C3-4。
374.如實施方式347至373中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C3-5。
375.如實施方式347至373中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C3-6。
376.如實施方式347至373中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H2序列C3-7。
377.如實施方式347至376中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C3-8。
378.如實施方式347至376中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-H3序列C3-9。
379.如實施方式347至378中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C3-10。
380.如實施方式347至378中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C3-11。
381.如實施方式347至378中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L1序列C3-12。
382.如實施方式347至381中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C3-13。
383.如實施方式347至381中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L2序列C3-14。
384.如實施方式347至383中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C3-15。
385.如實施方式347至383中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CDR-L3序列C3-16。
386.如實施方式31所述之CD19結合分子，其中ABM2分別包含表AD-1、表AE-1、表AF-1、表AG-1、表AH-1、或表AI-1中所列出的CDR-H1 CDR-H2、和CDR-H3序列，以及表AD-2、表AE-2、表AF-2、表AG-2、表AH-2、或表AI-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
387.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AD-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AD-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
388.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AE-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AE-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
389.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AF-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AF-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
390.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AG-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AG-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
391.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AH-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AH-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
392.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含表AI-1中所列出的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3序列以及表AI-2中所列出的相應的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
393.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV292的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
394.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV123的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
395.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含Sp10b的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
396.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV453的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
397.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV229的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
398.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV110的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
399.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV832的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
400.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV589的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
401.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV580的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
402.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV567的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
403.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV221的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
404.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_bkm1的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
405.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11a_bkm2的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
406.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_hz0的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
407.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_HZ1的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
408.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_sansPTM_hz1的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
409.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_sansPTM_rat的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
410.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
411.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_SS的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
412.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_WS的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
413.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
414.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_TT的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
415.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_TW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
416.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_WT的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
417.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A VH3_VLK_3的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
418.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
419.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
420.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
421.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW1_VL_VH_S56G的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
422.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP9AFW4_VL_VH_S56G的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
423.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW1_VL_VH的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
424.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW4_VLVH的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
425.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9arabtor_VHVL的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
426.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9arabtor_VLVH的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
427.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
428.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
429.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
430.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
431.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_s的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
432.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
433.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
434.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
435.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
436.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
437.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
438.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
439.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
440.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
441.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
442.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
443.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
444.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
445.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
446.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
447.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
448.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
449.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
450.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
451.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
452.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
453.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
454.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
455.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
456.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
457.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
458.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
459.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
460.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
461.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
462.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
463.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
464.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
465.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_SWPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
466.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_SWPTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
467.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
468.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
469.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
470.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
471.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
472.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
473.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
474.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
475.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
476.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
477.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_SW_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
478.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
479.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
480.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
481.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
482.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
483.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
484.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
485.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
486.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
487.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
488.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
489.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
490.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
491.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_PTM的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
492.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
493.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
494.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
495.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
496.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_PTM_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
497.如實施方式387至392中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_SW的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3序列。
498.如實施方式386所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表AJ-1中列出的重鏈可變序列和在表AJ-2中列出的相應的輕鏈可變序列。
499.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV292的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
500.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV123的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
501.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含Sp10b的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
502.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV453的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
503.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV229的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
504.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV110的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
505.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV832的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
506.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV589的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
507.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV580的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
508.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV567的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
509.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含NOV221的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
510.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_bkm1的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
511.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11a_bkm2的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
512.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_hz0的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
513.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_HZ1的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
514.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_sansPTM_hz1的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
515.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_sansPTM_rat的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
516.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
517.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_SS的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
518.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_WS的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
519.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
520.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_TT的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
521.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_TW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
522.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHVL_WT的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
523.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A VH3_VLK_3的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
524.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
525.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
526.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
527.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW1_VL_VH_S56G的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
528.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP9AFW4_VL_VH_S56G的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
529.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW1_VL_VH的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
530.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9aFW4_VLVH的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
531.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9arabtor_VHVL的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
532.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp9arabtor_VLVH的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
533.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
534.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
535.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
536.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
537.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_YY_s的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
538.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
539.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
540.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
541.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
542.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
543.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SS_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
544.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
545.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
546.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
547.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
548.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_WS_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
549.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
550.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
551.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
552.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
553.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_SW_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
554.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
555.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
556.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
557.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
558.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TW_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
559.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
560.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
561.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
562.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
563.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VHVL_TT_SANSPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
564.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK3_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
565.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
566.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
567.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
568.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
569.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
570.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_Y_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
571.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_S_SWPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
572.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_SWPTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
573.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11AVH3_VLK_3_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
574.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
575.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
576.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
577.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
578.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
579.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
580.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
581.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_S_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
582.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
583.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_sp11a_VH1_VK2_SW_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
584.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
585.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
586.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
587.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
588.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
589.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
590.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
591.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_S_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
592.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
593.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH3_VLK1_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
594.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VHS_VK2_Y的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
595.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
596.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
597.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_PTM的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
598.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
599.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
600.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_Y_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
601.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_S_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
602.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_PTM_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
603.如實施方式498所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3_SP11A_VH5_VK2_SW的重鏈可變序列和輕鏈可變序列。
604.如實施方式30所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-α、TCR-β、或TCR-α/β二聚體。
605.如實施方式604所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-α。
606.如實施方式604所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-β。
607.如實施方式604所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-α/β二聚體。
608.如實施方式604所述之CD19結合分子，其中ABM2包含BMA031的CDR序列。
609.如實施方式608所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由卡巴特編號所定義。
610.如實施方式608所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由喬西亞編號所定義。
611.如實施方式608所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由卡巴特編號和喬西亞編號的組合所定義。
612.如實施方式608所述之CD19結合分子，其中ABM2包含BMA031的重鏈和輕鏈可變序列。
613.如實施方式30所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-γ、TCR-δ、或TCR-γ/δ二聚體。
614.如實施方式613所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-γ。
615.如實施方式613所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-δ。
616.如實施方式613所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-γ/δ二聚體。
617.如實施方式613所述之CD19結合分子，其中ABM2包含δTCS1的CDR序列。
618.如實施方式617所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由卡巴特編號所定義。
619.如實施方式617所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由喬西亞編號所定義。
620.如實施方式617所述之CD19結合分子，其中該CDR序列由卡巴特編號和喬西亞編號的組合所定義。
621.如實施方式617所述之CD19結合分子，其中ABM2包含δTCS1的重鏈和輕鏈可變序列。
622.如實施方式16至621中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM1能夠在與ABM2結合至其靶分子的相同時間結合CD19。
623.如實施方式16至622中任一項所述之CD19結合分子，其係雙特異性結合分子(BBM)。
624.如實施方式623所述之CD19結合分子，其係二價的。
625.如實施方式624所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖1B-1F中描繪的構型中的任何一種。
626.如實施方式625所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1B中所描述的構型。
627.如實施方式625所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1C中所描述的構型。
628.如實施方式625所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1D中所描述的構型。
629.如實施方式625所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1E中所描述的構型。
630.如實施方式625所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1F中所描述的構型。
631.如實施方式625至630中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.1節中被稱為B1的構型。
632.如實施方式625至630中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.1節中被稱為B2的構型。
633.如實施方式623所述之CD19結合分子，其係三價的。
634.如實施方式633所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖1G-1Z中描繪的構型中的任何一種。
635.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1G中所描述的構型。
636.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1H中所描述的構型。
637.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1I中所描述的構型。
638.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1J中所描述的構型。
639.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1K中所描述的構型。
640.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1L中所描述的構型。
641.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1M中所描述的構型。
642.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1N中所描述的構型。
643.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1O中所描述的構型。
644.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1P中所描述的構型。
645.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1Q中所描述的構型。
646.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1R中所描述的構型。
647.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1S中所描述的構型。
648.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1T中所描述的構型。
649.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1U中所描述的構型。
650.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1V中所描述的構型。
651.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1W中所描述的構型。
652.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1X中所描述的構型。
653.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1Y中所描述的構型。
654.如實施方式634所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1Z中所描述的構型。
655.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T1的構型。
656.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T2的構型。
657.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T3的構型。
658.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T4的構型。
659.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T5的構型。
660.如實施方式633至654中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T6的構型。
661.如實施方式623所述之CD19結合分子，其係四價的。
662.如實施方式661所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖1AA-1AH中描繪的構型中的任何一種。
663.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AA中所描述的構型。
664.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AB中所描述的構型。
665.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AC中所描述的構型。
666.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AD中所描述的構型。
667.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AE中所描述的構型。
668.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AF中所描述的構型。
669.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AG中所描述的構型。
670.如實施方式662所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖1AH中所描述的構型。
671.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv1的構型。
672.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv2的構型。
673.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv3的構型。
674.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv4的構型。
675.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv5的構型。
676.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv6的構型。
677.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv7的構型。
678.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv8的構型。
679.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv9的構型。
680.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv10的構型。
681.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv11的構型。
682.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv12的構型。
683.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv13的構型。
684.如實施方式661至670中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv14的構型。
685.如實施方式16至622中任一項所述之CD19結合分子，其係三特異性結合分子(TBM)，包含特異性結合至除了CD19之外的靶分子的抗原結合模組3(ABM3)。
686.如實施方式685所述之CD19結合分子，其中ABM2特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分，並且ABM3特異性結合至(i)人CD2或(ii)腫瘤相關抗原(TAA)。
687.如實施方式685或實施方式686所述之CD19結合分子，其係三價的。
688.如實施方式687所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖2A-2P中描繪的構型中的任何一種。
689.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2A中所描述的構型。
690.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2B中所描述的構型。
691.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2C中所描述的構型。
692.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2D中所描述的構型。
693.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2E中所描述的構型。
694.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2F中所描述的構型。
695.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2G中所描述的構型。
696.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2H中所描述的構型。
697.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2I中所描述的構型。
698.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2J中所描述的構型。
699.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2K中所描述的構型。
700.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2L中所描述的構型。
701.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2M中所描述的構型。
702.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2N中所描述的構型。
703.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2O中所描述的構型。
704.如實施方式688所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2P中所描述的構型。
705.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T1的構型。
706.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T2的構型。
707.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T3的構型。
708.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T4的構型。
709.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T5的構型。
710.如實施方式688至704中任一項所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T6的構型。
711.如實施方式685或實施方式686所述之CD19結合分子，其係四價的。
712.如實施方式711所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖2Q-2S中描繪的構型中的任何一種。
713.如實施方式712所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2Q中所描述的構型。
714.如實施方式712所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2R中所描述的構型。
715.如實施方式712所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2S中所描述的構型。
716.如實施方式711至715中任一項所述之CD19結合分子，其具有在表9中被稱為Tv1至Tv24的構型中的任一種。
717.如實施方式685或實施方式686所述之CD19結合分子，其係五價的。
718.如實施方式717所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2T中所描述的構型。
719.如實施方式717或實施方式718所述之CD19結合分子，其具有在表10中被稱為Pv1至Pv100的構型中的任一種。
720.如實施方式685或實施方式686所述之CD19結合分子，其係六價的。
721.如實施方式720所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有在圖2U-2V中描繪的構型中的任何一種。
722.如實施方式721所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2U中所描述的構型。
723.如實施方式721所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2V中所描述的構型。
724.如實施方式720至723中任一項所述之CD19結合分子，其具有在表11中被稱為Hv1至Hv330的構型中的任一種。
725.如實施方式685至724中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM1能夠在與ABM3結合至其靶分子的相同時間結合CD19。
726.如實施方式685至725中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3特異性結合至人CD2。
727.如實施方式726所述之CD19結合分子，其中ABM3係基於非免疫球蛋白支架的ABM。
728.如實施方式727所述之CD19結合分子，其中ABM3係Kunitz結構域、Adnexin、親合體、DARPin、Avimer、Anticalin、脂質運載蛋白、Centyrin、Versabody、Knottin、Adnectin、Pronectin、Affitin/Nanofitin、Affilin、Atrimer/四連接素、二環肽、cys-knot、Fn3支架、Obody、Tn3、Affimer、BD、Adhiron、Duocalin、Alphabody、Armadillo重複蛋白質、Repebody、或Fynomer。
729.如實施方式727所述之CD19結合分子，其中ABM3包含CD2配位基的受體結合結構域。
730.如實施方式726所述之CD19結合分子，其中ABM3係CD58部分。
731.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-1的胺基酸序列。
732.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-2的胺基酸序列。
733.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-3的胺基酸序列。
734.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-4的胺基酸序列。
735.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-5的胺基酸序列。
736.如實施方式735所述之CD19結合分子，其中指定為B的胺基酸係苯基丙胺酸。
737.如實施方式735所述之CD19結合分子，其中指定為B的胺基酸係絲胺酸。
738.如實施方式735至737中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為J的胺基酸係纈胺酸。
739.如實施方式735至737中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為J的胺基酸係離胺酸。
740.如實施方式735至739中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為O的胺基酸係纈胺酸。
741.如實施方式735至739中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為O的胺基酸係麩醯胺酸。
742.如實施方式735至741中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為U的胺基酸係纈胺酸。
743.如實施方式735至741中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為U的胺基酸係離胺酸。
744.如實施方式735至743中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為X的胺基酸係蘇胺酸。
745.如實施方式735至743中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為X的胺基酸係絲胺酸。
746.如實施方式735至745中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為Z的胺基酸係白胺酸。
747.如實施方式735至745中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為Z的胺基酸係甘胺酸。
748.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-6的胺基酸序列。
749.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-7的胺基酸序列。
750.如實施方式749所述之CD19結合分子，其中指定為J的胺基酸係纈胺酸。
751.如實施方式749所述之CD19結合分子，其中指定為J的胺基酸係離胺酸。
752.如實施方式749至751中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為O的胺基酸係纈胺酸。
753.如實施方式749至751中任一項所述之CD19結合分子，其中指定為O的胺基酸係麩醯胺酸。
754.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-8的胺基酸序列。
755.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-9的胺基酸序列。
756.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-10的胺基酸序列。
757.如實施方式730所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-11的胺基酸序列。
758.如實施方式726所述之CD19結合分子，其中ABM3係CD48部分。
759.如實施方式758所述之CD19結合分子，其中該CD48部分與Uniprot標識符P09326的胺基酸序列的胺基酸27-220具有至少70%的序列同一性。
760.如實施方式758所述之CD19結合分子，其中該CD48部分與Uniprot標識符P09326的胺基酸序列的胺基酸27-220具有至少80%的序列同一性。
761.如實施方式758所述之CD19結合分子，其中該CD48部分與Uniprot標識符P09326的胺基酸序列的胺基酸27-220具有至少90%的序列同一性。
762.如實施方式758所述之CD19結合分子，其中該CD48部分與Uniprot標識符P09326的胺基酸序列的胺基酸27-220具有至少95%的序列同一性。
763.如實施方式758所述之CD19結合分子，其中該CD48部分與Uniprot標識符P09326的胺基酸序列的胺基酸27-220具有至少99%的序列同一性。
764.如實施方式726所述之CD19結合分子，其中ABM3係基於免疫球蛋白支架的ABM。
765.如實施方式764所述之CD19結合分子，其中ABM3係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
766.如實施方式764所述之CD19結合分子，其中ABM3係抗CD2抗體或其抗原結合結構域。
767.如實施方式765所述之CD19結合分子，其中ABM3係scFv。
768.如實施方式765所述之CD19結合分子，其中ABM3係Fab。
769.如實施方式768所述之CD19結合分子，其中ABM3係Fab異二聚體。
770.如實施方式764至769中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含CD2-1的CDR序列。
771.如實施方式770所述之CD19結合分子，其中ABM3包含CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列。
772.如實施方式770所述之CD19結合分子，其中ABM3包含hu1CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列。
773.如實施方式770所述之CD19結合分子，其中ABM3包含hu2CD2-1的重鏈和輕鏈可變序列。
774.如實施方式770所述之CD19結合分子，其中ABM3包含Medi 507的CDR序列。
775.如實施方式774所述之CD19結合分子，其中ABM3包含Medi 507的重鏈和輕鏈可變序列。
776.如實施方式685至725中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3特異性結合至人TAA。
777.如實施方式776所述之CD19結合分子，其中ABM3係基於非免疫球蛋白支架的ABM。
778.如實施方式777所述之CD19結合分子，其中如果TAA係受體，則ABM3包含該受體的配位基的受體結合結構域，並且如果TAA係配位基，則ABM3包含該配位基的受體的配位基結合結構域。
779.如實施方式777所述之CD19結合分子，其中ABM3係Kunitz結構域、Adnexin、親合體、DARPin、Avimer、Anticalin、脂質運載蛋白、Centyrin、Versabody、Knottin、Adnectin、Pronectin、Affitin/Nanofitin、Affilin、Atrimer/四連接素、二環肽、cys-knot、Fn3支架、Obody、Tn3、Affimer、BD、Adhiron、Duocalin、Alphabody、Armadillo重複蛋白質、Repebody、或Fynomer。
780.如實施方式776所述之CD19結合分子，其中ABM3係基於免疫球蛋白支架的ABM。
781.如實施方式780所述之CD19結合分子，其中ABM3係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
782.如實施方式781所述之CD19結合分子，其中ABM3係抗體或其抗原結合結構域。
783.如實施方式781所述之CD19結合分子，其中ABM3係scFv。
784.如實施方式781所述之CD19結合分子，其中ABM3係Fab。
785.如實施方式784所述之CD19結合分子，其中ABM3係Fab異二聚體。
786.如實施方式776至785中任一項所述之CD19結合分子，其中該TAA係在作為B細胞來源漿細胞的癌性B細胞上表現的TAA。
787.如實施方式776至786中任一項所述之CD19結合分子，其中該TAA係在非漿細胞的癌性B細胞上表現的TAA。
788.如實施方式776至787中任一項所述之CD19結合分子，其中該TAA選自BCMA、CD20、CD22、CD123、CD33、CLL1、CD138、CS1、CD38、CD133、FLT3、CD52、TNFRSF13C、TNFRSF13B、CXCR4、PD-L1、LY9、CD200、FCGR2B、CD21、CD23、CD24、CD40L、CD72、CD79a、和CD79b。
789.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係BCMA。
790.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD20。
791.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD22。
792.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD123。
793.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD33。
794.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CLL1。
795.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD138。
796.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CS1。
797.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD38。
798.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD133。
799.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係FLT3。
800.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD52。
801.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係TNFRSF13C。
802.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係TNFRSF13B。
803.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CXCR4。
804.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係PD-L1。
805.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係LY9。
806.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD200。
807.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係FCGR2B。
808.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD21。
809.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中該TAA係CD23。
810.如實施方式788所述之CD19結合分子，其中ABM3包含在表16或表17中所列出的結合序列。
811.如實施方式810所述之CD19結合分子，其具有如在表17A中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈可變區。
812.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-1的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
813.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-2的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
814.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-3的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
815.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-4的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
816.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-5的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
817.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-6的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
818.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-7的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
819.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-8的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
820.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-9的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
821.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-10的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
822.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-11的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
823.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-12的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
824.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-13的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
825.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-14的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
826.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-15的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
827.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-16的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
828.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-17的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
829.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-18的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
830.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-19的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
831.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-20的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
832.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-21的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
833.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-22的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
834.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-23的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
835.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-24的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
836.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-25的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
837.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-26的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
838.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-27的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
839.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-28的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
840.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-29的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
841.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-30的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
842.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-31的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
843.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-32的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
844.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-33的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
845.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-34的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
846.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-35的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
847.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-36的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
848.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-37的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
849.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-38的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
850.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-39的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
851.如實施方式811所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-40的重鏈和輕鏈可變序列，如在表17A中所列出。
852.如實施方式810所述之CD19結合分子，其具有如在表17B和17E中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由卡巴特定義)。
853.如實施方式810所述之CD19結合分子，其具有如在表17C和17F中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由喬西亞定義)。
854.如實施方式810所述之CD19結合分子，其具有如在表17D和17G中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由卡巴特和喬西亞序列的組合定義)。
855.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-1的CDR序列。
856.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-2的CDR序列。
857.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-3的CDR序列。
858.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-4的CDR序列。
859.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-5的CDR序列。
860.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-6的CDR序列。
861.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-7的CDR序列。
862.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-8的CDR序列。
863.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-9的CDR序列。
864.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-10的CDR序列。
865.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-11的CDR序列。
866.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-12的CDR序列。
867.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-13的CDR序列。
868.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-14的CDR序列。
869.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-15的CDR序列。
870.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-16的CDR序列。
871.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-17的CDR序列。
872.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-18的CDR序列。
873.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-19的CDR序列。
874.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-20的CDR序列。
875.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-21的CDR序列。
876.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-22的CDR序列。
877.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-23的CDR序列。
878.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-24的CDR序列。
879.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-25的CDR序列。
880.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-26的CDR序列。
881.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-27的CDR序列。
882.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-28的CDR序列。
883.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-29的CDR序列。
884.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-30的CDR序列。
885.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-31的CDR序列。
886.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-32的CDR序列。
887.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-33的CDR序列。
888.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-34的CDR序列。
889.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-35的CDR序列。
890.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-36的CDR序列。
891.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-37的CDR序列。
892.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-38的CDR序列。
893.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-39的CDR序列。
894.如實施方式852至854中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含BCMA-40的CDR序列。
895.如實施方式16至894中任一項所述之CD19結合分子，其包含一起形成Fc異二聚體的第一變體Fc區和第二變體Fc區。
896.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代S364K/E357Q：L368D/K370S。
897.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代L368D/K370S：S364K。
898.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代L368E/K370S：S364K。
899.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代T411T/E360E/Q362E：D401K。
900.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代L368D 370S：S364/E357L。
901.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代370S：S364K/E357Q。
902.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含在WO 2014/110601的圖4中列出的任何一種空間變體的胺基酸取代(轉載於表4中)。
903.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含在WO 2014/110601的圖5中列出的任何一種變體的胺基酸取代(轉載於表4中)。
904.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中該第一和第二變體Fc區包含在WO 2014/110601的圖6中列出的任何一種變體的胺基酸取代(轉載於表4中)。
905.如實施方式895至904中任一項所述之CD19結合分子，其中至少一個Fc區包含消融變體修飾。
906.如實施方式905所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾選自表3。
907.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含G236R。
908.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S239G。
909.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S239K。
910.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S239Q。
911.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S239R。
912.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含V266D。
913.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S267K。
914.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S267R。
915.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含H268K。
916.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E269R。
917.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含299R。
918.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含299K。
919.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含K322A。
920.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A327G。
921.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A327L。
922.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A327N。
923.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A327Q。
924.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含L328E。
925.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含L328R。
926.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含P329A。
927.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含P329H。
928.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含P329K。
929.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A330L。
930.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含A330S/P331S。
931.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含I332K。
932.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含I332R。
933.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含V266D/A327Q。
934.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含V266D/P329K。
935.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含G236R/L328R。
936.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E233P/L234V/L235A/G236del/S239K。
937.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E233P/L234V/L235A/G236del/S267K。
938.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E233P/L234V/L235A/G236del/S239K/A327G。
939.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E233P/L234V/L235A/G236del/S267K/A327G。
940.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含E233P/L234V/L235A/G236del。
941.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含S239K/S267K。
942.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含267K/P329K。
943.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含D265A/N297A/P329A。
944.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含D265N/N297D/P329G。
945.如實施方式906所述之CD19結合分子，其中該消融變體修飾包含D265E/N297Q/P329S。
946.如實施方式905至945中任一項所述之CD19結合分子，其中兩個變體Fc區均包含該消融變體修飾。
947.如實施方式895至946中任一項所述之CD19結合分子，其中至少一個Fc區進一步包含pI變體取代。
948.如實施方式947所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代選自表4。
949.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_ISO(-)中存在的取代。
950.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(-)_等電_A中存在的取代。
951.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(-)_等電_B中存在的取代。
952.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含Pl_ISO(+RR)中存在的取代。
953.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_ISO(+)中存在的取代。
954.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_A中存在的取代。
955.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_B中存在的取代。
956.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_E269Q/E272Q中存在的取代。
957.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_E269Q/E283Q中存在的取代。
958.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_E2720/E283Q中存在的取代。
959.如實施方式948所述之CD19結合分子，其中該pI變體取代包含pl_(+)_等電_E269Q中存在的取代。
960.如實施方式895至959中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含選自434A、434S、428L、308F、259I、428L/434S、259I/308F、436I/428L、4361或V/434S、436V/428L、252Y、252Y/254T/256E、259I/308F/428L、236A、239D、239E、332E、332D、239D/332E、267D、267E、328F、267E/328F、236A/332E、239D/332E/330Y、239D、332E/330L、236R、328R、236R/328R、236N/267E、243L、298A和299T中的一個或多個胺基酸取代。
961.如實施方式895至959中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代434A、434S或434V。
962.如實施方式961所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代428L。
963.如實施方式961至962中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代308F。
964.如實施方式961至963中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代259I。
965.如實施方式961至964中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代436I。
966.如實施方式961至965中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代252Y。
967.如實施方式961至966中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代254T。
968.如實施方式961至967中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代256E。
969.如實施方式961至968中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代239D或239E。
970.如實施方式961至969中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代332E或332D。
971.如實施方式961至970中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代267D或267E。
972.如實施方式961至971中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代330L。
973.如實施方式961至972中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代236R或236N。
974.如實施方式961至973中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代328R。
975.如實施方式961至974中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代243L。
976.如實施方式961至975中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代298A。
977.如實施方式961至976中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一和/或第二Fc區進一步包含胺基酸取代299T。
978.如實施方式895所述之CD19結合分子，其中：
(a)該第一和第二變體Fc區包含胺基酸取代S364K/E357Q：L368D/K370S；
(b)該第一和/或第二變體Fc區包含該消融變體修飾E233P/L234V/L235A/G236del/S267K，並且
(c)該第一和/或第二變體Fc區包含該pI變體取代N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D(pl_(-)_等電_A)。
979.如實施方式978所述之CD19結合分子，其中該第一變體Fc區包含該消融變體修飾E233P/L234V/L235A/G236del/S267K。
980.如實施方式978至979中任一項所述之CD19結合分子，其中該第二變體Fc區包含該消融變體修飾E233P/L234V/L235A/G236del/S267K。
981.如實施方式978至980中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一變體Fc區包含該pI變體取代N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D(pl_(-)_等電_A)。
982.如實施方式978至981中任一項所述之CD19結合分子，其中該第二變體Fc區包含該pI變體取代N208D/Q295E/N384D/Q418E/N421D(pl_(-)_等電_A)。
983.如實施方式895至982中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1106至少90%同一的胺基酸序列。
984.如實施方式895至982中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1106至少95%同一的胺基酸序列。
985.如實施方式895至982中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含用實施方式896至982中任一項所列舉的取代修飾的SEQ ID NO：1106的胺基酸序列。
986.如實施方式895至982中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5或6處具有取代的SEQ ID NO：1106的胺基酸序列，視需要其中該取代中的一個或多個係如實施方式896至982中任一項所列舉的取代。
987.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1107至少90%同一的胺基酸序列。
988.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1107至少95%同一的胺基酸序列。
989.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含用實施方式896至982中任一項所列舉的取代修飾的SEQ ID NO：1107的胺基酸序列。
990.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5或6處具有取代的SEQ ID NO：1107的胺基酸序列，視需要其中該取代中的一個或多個係如實施方式896至982中任一項所列舉的取代。
991.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1108至少90%同一的胺基酸序列。
992.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1108至少95%同一的胺基酸序列。
993.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含用實施方式896至982中任一項所列舉的取代修飾的SEQ ID NO：1108的胺基酸序列。
994.如實施方式895至986中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5或6處具有取代的SEQ ID NO：1108的胺基酸序列，視需要其中該取代中的一個或多個係如實施方式896至982中任一項所列舉的取代。
995.如實施方式895至994中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1109至少90%同一的胺基酸序列。
996.如實施方式895至994中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含與SEQ ID NO：1109至少95%同一的胺基酸序列。
997.如實施方式895至994中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含用實施方式896至982中任一項所列舉的取代修飾的SEQ ID NO：1109的胺基酸序列。
998.如實施方式895至994中任一項所述之CD19結合分子，其中該第一或第二變體Fc區包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332的1、2、3、4、5或6處具有取代的SEQ ID NO：1109的胺基酸序列，視需要其中該取代中的一個或多個係如實施方式896至982中任一項所列舉的取代。
999.如實施方式16至894中任一項所述之CD19結合分子，其包含Fc結構域。
1000.如實施方式999所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係Fc異二聚體。
1001.如實施方式1000所述之CD19結合分子，其中該Fc異二聚體包含在表4中列出的任何Fc修飾。
1002.如實施方式1000所述之CD19結合分子，其中該Fc異二聚體包含杵臼結構(「KIH」)修飾。
1003.如實施方式1000至1002中任一項所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 1到Fc 150的Fc修飾中的至少一種。
1004.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 1到Fc 5的Fc修飾中的至少一種。
1005.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 6到Fc 10的Fc修飾中的至少一種。
1006.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 11到Fc 15的Fc修飾中的至少一種。
1007.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 16到Fc 20的Fc修飾中的至少一種。
1008.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 21到Fc 25的Fc修飾中的至少一種。
1009.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 26到Fc 30的Fc修飾中的至少一種。
1010.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 31到Fc 35的Fc修飾中的至少一種。
1011.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 36到Fc 40的Fc修飾中的至少一種。
1012.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 41到Fc 45的Fc修飾中的至少一種。
1013.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 46到Fc 50的Fc修飾中的至少一種。
1014.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 51到Fc 55的Fc修飾中的至少一種。
1015.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 56到Fc 60的Fc修飾中的至少一種。
1016.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 61到Fc 65的Fc修飾中的至少一種。
1017.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 66到Fc 70的Fc修飾中的至少一種。
1018.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 71到Fc 75的Fc修飾中的至少一種。
1019.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 76到Fc 80的Fc修飾中的至少一種。
1020.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 81到Fc 85的Fc修飾中的至少一種。
1021.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 86到Fc 90的Fc修飾中的至少一種。
1022.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 91到Fc 95的Fc修飾中的至少一種。
1023.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 96到Fc 100的Fc修飾中的至少一種。
1024.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 101到Fc 105的Fc修飾中的至少一種。
1025.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 106到Fc 110的Fc修飾中的至少一種。
1026.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 111到Fc 115的Fc修飾中的至少一種。
1027.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 116到Fc 120的Fc修飾中的至少一種。
1028.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 121到Fc 125的Fc修飾中的至少一種。
1029.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 126到Fc 130的Fc修飾中的至少一種。
1030.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 131到Fc 135的Fc修飾中的至少一種。
1031.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 136到Fc 140的Fc修飾中的至少一種。
1032.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 141到Fc 145的Fc修飾中的至少一種。
1033.如實施方式1003所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 146到Fc 150的Fc修飾中的至少一種。
1034.如實施方式999至1033中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域具有改變的效應子功能。
1035.如實施方式1034所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域具有與一種或多種Fc受體的改變的結合。
1036.如實施方式1035所述之CD19結合分子，其中該一種或多種Fc受體包含FcRN。
1037.如實施方式1035或實施方式1036所述之CD19結合分子，其中該一種或多種Fc受體包含白血球受體。
1038.如實施方式999至1037中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc具有經修飾的二硫鍵架構。
1039.如實施方式999至1038中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc具有改變的糖基化模式。
1040.如實施方式999至1039中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc包含鉸鏈區。
1041.如實施方式1040所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含在5.4.2節中所述之鉸鏈區中的任一個。
1042.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H1的鉸鏈區的胺基酸序列。
1043.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H2的鉸鏈區的胺基酸序列。
1044.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H3的鉸鏈區的胺基酸序列。
1045.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H4的鉸鏈區的胺基酸序列。
1046.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H5的鉸鏈區的胺基酸序列。
1047.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H6的鉸鏈區的胺基酸序列。
1048.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H7的鉸鏈區的胺基酸序列。
1049.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H8的鉸鏈區的胺基酸序列。
1050.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H9的鉸鏈區的胺基酸序列。
1051.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H10的鉸鏈區的胺基酸序列。
1052.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H11的鉸鏈區的胺基酸序列。
1053.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H12的鉸鏈區的胺基酸序列。
1054.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H13的鉸鏈區的胺基酸序列。
1055.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H14的鉸鏈區的胺基酸序列。
1056.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H15的鉸鏈區的胺基酸序列。
1057.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H16的鉸鏈區的胺基酸序列。
1058.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H17的鉸鏈區的胺基酸序列。
1059.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H18的鉸鏈區的胺基酸序列。
1060.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H19的鉸鏈區的胺基酸序列。
1061.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H20的鉸鏈區的胺基酸序列。
1062.如實施方式1041所述之CD19結合分子，其中該鉸鏈區包含指定為H21的鉸鏈區的胺基酸序列。
1063.如實施方式16至1062中任一項所述之CD19結合分子，其包含至少一個scFv結構域。
1064.如實施方式1063所述之CD19結合分子，其中至少一個scFv包含連接該VH和VL結構域的連接子。
1065.如實施方式1064所述之CD19結合分子，其中該連接子的長度為5至25個胺基酸。
1066.如實施方式1065所述之CD19結合分子，其中該連接子的長度為12至20個胺基酸。
1067.如實施方式1064至1066中任一項所述之CD19結合分子，其中該連接子係帶電荷的連接子和/或柔性連接子。
1068.如實施方式1064至1067中任一項所述之CD19結合分子，其中該連接子選自連接子L1到L54中的任一個。
1069.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L1的連接子的胺基酸序列。
1070.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L2的連接子的胺基酸序列。
1071.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L3的連接子的胺基酸序列。
1072.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L4的連接子的胺基酸序列。
1073.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L5的連接子的胺基酸序列。
1074.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L6的連接子的胺基酸序列。
1075.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L7的連接子的胺基酸序列。
1076.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L8的連接子的胺基酸序列。
1077.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L9的連接子的胺基酸序列。
1078.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L10的連接子的胺基酸序列。
1079.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L11的連接子的胺基酸序列。
1080.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L12的連接子的胺基酸序列。
1081.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L13的連接子的胺基酸序列。
1082.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L14的連接子的胺基酸序列。
1083.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L15的連接子的胺基酸序列。
1084.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L16的連接子的胺基酸序列。
1085.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L17的連接子的胺基酸序列。
1086.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L18的連接子的胺基酸序列。
1087.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L19的連接子的胺基酸序列。
1088.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L20的連接子的胺基酸序列。
1089.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L21的連接子的胺基酸序列。
1090.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L22的連接子的胺基酸序列。
1091.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L23的連接子的胺基酸序列。
1092.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L24的連接子的胺基酸序列。
1093.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L25的連接子的胺基酸序列。
1094.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L26的連接子的胺基酸序列。
1095.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L27的連接子的胺基酸序列。
1096.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L28的連接子的胺基酸序列。
1097.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L29的連接子的胺基酸序列。
1098.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L30的連接子的胺基酸序列。
1099.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L31的連接子的胺基酸序列。
1100.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L32的連接子的胺基酸序列。
1101.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L33的連接子的胺基酸序列。
1102.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L34的連接子的胺基酸序列。
1103.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L35的連接子的胺基酸序列。
1104.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L36的連接子的胺基酸序列。
1105.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L37的連接子的胺基酸序列。
1106.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L38的連接子的胺基酸序列。
1107.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L39的連接子的胺基酸序列。
1108.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L40的連接子的胺基酸序列。
1109.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L41的連接子的胺基酸序列。
1110.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L42的連接子的胺基酸序列。
1111.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L43的連接子的胺基酸序列。
1112.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L44的連接子的胺基酸序列。
1113.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L45的連接子的胺基酸序列。
1114.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L46的連接子的胺基酸序列。
1115.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L47的連接子的胺基酸序列。
1116.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L48的連接子的胺基酸序列。
1117.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L49的連接子的胺基酸序列。
1118.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L50的連接子的胺基酸序列。
1119.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L51的連接子的胺基酸序列。
1120.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L52的連接子的胺基酸序列。
1121.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L53的連接子的胺基酸序列。
1122.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L54的連接子的胺基酸序列。
1123.如實施方式16至1122中任一項所述之CD19結合分子，其包含至少一個Fab結構域。
1124.如實施方式1123所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含在表2中列出的Fab異源二聚化修飾中的任一種。
1125.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F1的Fab異源二聚化修飾。
1126.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F2的Fab異源二聚化修飾。
1127.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F3的Fab異源二聚化修飾。
1128.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F4的Fab異源二聚化修飾。
1129.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F5的Fab異源二聚化修飾。
1130.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F6的Fab異源二聚化修飾。
1131.如實施方式1124所述之CD19結合分子，其中至少一個Fab結構域包含指定為F7的Fab異源二聚化修飾。
1132.如實施方式16至1131中任一項所述之CD19結合分子，其包含至少兩個ABM：ABM和ABM鏈，或經由連接子相互連接的兩條ABM鏈。
1133.如實施方式1132所述之CD19結合分子，其中該連接子的長度為5至25個胺基酸。
1134.如實施方式1133所述之CD19結合分子，其中該連接子的長度為12至20個胺基酸。
1135.如實施方式1132至1134中任一項所述之CD19結合分子，其中該連接子係帶電荷的連接子和/或柔性連接子。
1136.如實施方式1132至1135中任一項所述之CD19結合分子，其中該連接子選自連接子L1到L54中的任一個。
1137.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L1的連接子的胺基酸序列。
1138.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L2的連接子的胺基酸序列。
1139.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L3的連接子的胺基酸序列。
1140.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L4的連接子的胺基酸序列。
1141.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L5的連接子的胺基酸序列。
1142.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L6的連接子的胺基酸序列。
1143.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L7的連接子的胺基酸序列。
1144.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L8的連接子的胺基酸序列。
1145.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L9的連接子的胺基酸序列。
1146.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L10的連接子的胺基酸序列。
1147.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L11的連接子的胺基酸序列。
1148.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L12的連接子的胺基酸序列。
1149.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L13的連接子的胺基酸序列。
1150.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L14的連接子的胺基酸序列。
1151.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L15的連接子的胺基酸序列。
1152.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L16的連接子的胺基酸序列。
1153.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L17的連接子的胺基酸序列。
1154.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L18的連接子的胺基酸序列。
1155.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L19的連接子的胺基酸序列。
1156.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L20的連接子的胺基酸序列。
1157.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L21的連接子的胺基酸序列。
1158.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L22的連接子的胺基酸序列。
1159.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L23的連接子的胺基酸序列。
1160.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L24的連接子的胺基酸序列。
1161.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L25的連接子的胺基酸序列。
1162.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L26的連接子的胺基酸序列。
1163.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L27的連接子的胺基酸序列。
1164.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L28的連接子的胺基酸序列。
1165.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L29的連接子的胺基酸序列。
1166.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L30的連接子的胺基酸序列。
1167.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L31的連接子的胺基酸序列。
1168.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L32的連接子的胺基酸序列。
1169.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L33的連接子的胺基酸序列。
1170.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L34的連接子的胺基酸序列。
1171.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L35的連接子的胺基酸序列。
1172.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L36的連接子的胺基酸序列。
1173.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L37的連接子的胺基酸序列。
1174.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L38的連接子的胺基酸序列。
1175.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L39的連接子的胺基酸序列。
1176.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L40的連接子的胺基酸序列。
1177.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L41的連接子的胺基酸序列。
1178.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L42的連接子的胺基酸序列。
1179.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L43的連接子的胺基酸序列。
1180.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L44的連接子的胺基酸序列。
1181.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L45的連接子的胺基酸序列。
1182.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L46的連接子的胺基酸序列。
1183.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L47的連接子的胺基酸序列。
1184.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L48的連接子的胺基酸序列。
1185.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L49的連接子的胺基酸序列。
1186.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L50的連接子的胺基酸序列。
1187.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L51的連接子的胺基酸序列。
1188.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L52的連接子的胺基酸序列。
1189.如實施方式1068所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L53的連接子的胺基酸序列。
1190.如實施方式1136所述之CD19結合分子，其中該連接子區包含指定為L54的連接子的胺基酸序列。
1191.一種軛合物，其包含(a)如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子，以及(b)藥劑。
1192.如實施方式1191所述之軛合物，其中該藥劑係治療劑、診斷劑、掩蔽部分、可裂解部分、穩定劑、或其任何組合。
1193.如實施方式1191所述之軛合物，其中該藥劑係在5.11節中所述之任何藥劑。
1194.如實施方式1191所述之軛合物，其中該藥劑係在5.12節中所述之任何藥劑。
1195.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至放射性核素。
1196.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至烷基化劑。
1197.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至拓撲異構酶抑制劑，該拓撲異構酶抑制劑視需要係拓撲異構酶I抑制劑或拓撲異構酶II抑制劑。
1198.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DNA損傷劑。
1199.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DNA嵌入劑，視需要係凹槽結合劑，如小凹槽結合劑。
1200.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至RNA/DNA抗代謝物。
1201.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至激酶抑制劑。
1202.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白質合成抑制劑。
1203.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至組蛋白脫乙醯酶(HDAC)抑制劑。
1204.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至線粒體抑制劑，該線粒體抑制劑視需要係線粒體中磷醯基轉移反應的抑制劑。
1205.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至抗有絲分裂劑。
1206.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至美登木素生物鹼。
1207.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至驅動蛋白抑制劑。
1208.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至驅動蛋白樣蛋白質KIF11抑制劑。
1209.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至V-ATP酶(液泡型H+-ATP酶)抑制劑。
1210.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至促凋亡劑。
1211.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至Bcl2(B細胞淋巴瘤2)抑制劑。
1212.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至MCL1(骨髓細胞白血病1)抑制劑。
1213.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至HSP90(熱休克蛋白90)抑制劑。
1214.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至IAP(細胞凋亡抑制劑)抑制劑。
1215.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至mTOR(雷帕黴素的機制靶標)抑制劑。
1216.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至微管穩定劑。
1217.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至微管去穩定劑。
1218.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至奧瑞斯他汀。
1219.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至朵拉司他汀。
1220.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至MetAP(甲硫胺酸胺基肽酶)。
1221.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CRM1(染色體維持蛋白1)抑制劑。
1222.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制劑。
1223.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白酶體抑制劑。
1224.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白質合成抑制劑。
1225.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CDK2(細胞週期蛋白依賴性激酶2)抑制劑。
1226.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CDK9(細胞週期蛋白依賴性激酶9)抑制劑。
1227.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至RNA聚合酶抑制劑。
1228.如實施方式1191至1194中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DHFR(二氫葉酸還原酶)抑制劑。
1229.如實施方式1191至1228中任一項所述之軛合物，其中將該藥劑用連接子附接至該TBM，該連接子視需要係可切割的連接子或不可切割的連接子，例如在5.12.2節中所述之連接子。
1230.如實施方式1191至1229中任一項所述之軛合物，其包含抗CD19結合分子。
1231.一種藥物組成物，其包含(a)如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子或如實施方式1191至1230中任一項所述之軛合物，和(b)賦形劑。
1232.一種治療患有CD19相關疾病或障礙的受試者之方法，其包括向該受試者投與有效量的如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子、如實施方式1191至1230中任一項所述之軛合物、或如實施方式1231所述之藥物組成物。
1233.如實施方式1232所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係癌症。
1234.如實施方式1232所述之方法，其中該疾病或障礙係漿細胞腫瘤。
1235.如實施方式1232所述之方法，其中該疾病或障礙係表現細胞表面CD19的B細胞惡性腫瘤。
1236.如實施方式1232所述之方法，其中該疾病或障礙係非何杰金氏淋巴瘤。
1237.如實施方式1232所述之方法，其中該疾病或障礙係彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)。
1238.如實施方式1232所述之方法，其中該疾病或障礙係柏基特氏淋巴瘤。
1239.如實施方式1232所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係自體免疫或炎性障礙。
1240.如實施方式1232至1239中任一項所述之方法，其進一步包括向該受試者投與至少一種其他藥劑。
1241.一種或多種核酸，該一種或多種核酸編碼如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子。
1242.如實施方式1241所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸係DNA。
1243.如實施方式1242所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸呈一種或多種載體的形式，視需要為表現載體。
1244.如實施方式1241所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸係mRNA。
1245.一種細胞，該細胞被工程化以表現如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子。
1246.一種細胞，該細胞在一種或多種啟動子的控制下經一種或多種表現載體轉染，該表現載體包含一種或多種編碼如實施方式1至1190中任一項所述之CD19結合分子的核酸序列。
1247.如實施方式1245或實施方式1246所述之細胞，其中該CD19結合分子的表現處於誘導型啟動子的控制之下。
1248.如實施方式1245至1247中任一項所述之細胞，其中該CD19結合分子以可分泌的形式產生。
1249.一種產生CD19結合分子之方法，其包括：
(a)在該CD19結合分子表現的條件下將如實施方式1245至1248中任一項所述之細胞進行培養；以及
(b)從細胞培養物中回收該CD19結合分子。
8.相關申請的交叉引用
本申請要求2019年5月21日提交的美國臨時申請號62/850,901以及2019年5月30日提交的美國臨時申請號62/854,695的優先權益，各申請的內容藉由引用以其全文併入本文。
9.序列表
本申請含有已經以ASCⅡ格式電子遞交的序列表並且該序列表特此藉由引用以其全文併入。該ASCII副本創建於2020年5月4日，名稱為NOV-007SL.txt並且大小為743,315位元組。
10.藉由引用併入
本申請中引用的所有出版物、專利、專利申請和其他文獻出於所有目的藉由引用以其全文併入本文中，其程度如同每個單獨的出版物、專利、 專利申請或其他文獻出於所有目的被單獨指出以藉由引用併入。在本文併入的一個或多個參考文獻和本揭露之教導之間存在任何不一致的情況下，預期的是本說明書的教導。
<110> 諾華公司
<120> CD19結合分子及其用途
<140>
<141>
<150> 62/854,695
<151> 2019-05-30
<150> 62/850,901
<151> 2019-05-21
<160> 1109
<170> PatentIn版本3.5
<210> 1
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<213> 人工序列
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 11
Figure 109116556-A0202-12-0671-942
<210> 12
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 12
Figure 109116556-A0202-12-0671-943
<210> 13
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 13
Figure 109116556-A0202-12-0671-944
Figure 109116556-A0202-12-0672-945
<210> 14
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 14
Figure 109116556-A0202-12-0672-946
<210> 15
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 15
Figure 109116556-A0202-12-0672-947
<210> 16
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 16
Figure 109116556-A0202-12-0672-948
<210> 17
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 17
Figure 109116556-A0202-12-0673-949
<210> 18
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 18
Figure 109116556-A0202-12-0673-950
<210> 19
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 19
Figure 109116556-A0202-12-0673-951
<210> 20
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 20
Figure 109116556-A0202-12-0673-952
<210> 21
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 21
Figure 109116556-A0202-12-0673-953
<210> 22
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 22
Figure 109116556-A0202-12-0674-954
<210> 23
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 23
Figure 109116556-A0202-12-0674-955
<210> 24
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 24
Figure 109116556-A0202-12-0674-956
<210> 25
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 25
Figure 109116556-A0202-12-0674-957
<210> 26
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 26
Figure 109116556-A0202-12-0674-958
Figure 109116556-A0202-12-0675-959
<210> 27
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 27
Figure 109116556-A0202-12-0675-960
<210> 28
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 28
Figure 109116556-A0202-12-0675-961
<210> 29
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 29
Figure 109116556-A0202-12-0675-962
<210> 30
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 30
Figure 109116556-A0202-12-0676-963
<210> 31
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 31
Figure 109116556-A0202-12-0676-964
<210> 32
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 32
Figure 109116556-A0202-12-0676-965
<210> 33
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 33
Figure 109116556-A0202-12-0676-966
<210> 34
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 34
Figure 109116556-A0202-12-0676-967
<210> 35
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 35
Figure 109116556-A0202-12-0677-968
<210> 36
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 36
Figure 109116556-A0202-12-0677-969
<210> 37
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 37
Figure 109116556-A0202-12-0677-970
<210> 38
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 38
Figure 109116556-A0202-12-0677-971
<210> 39
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 39
Figure 109116556-A0202-12-0677-972
Figure 109116556-A0202-12-0678-973
<210> 40
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 40
Figure 109116556-A0202-12-0678-974
<210> 41
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 41
Figure 109116556-A0202-12-0678-975
<210> 42
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 42
Figure 109116556-A0202-12-0678-976
<210> 43
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 43
Figure 109116556-A0202-12-0679-977
<210> 44
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 44
Figure 109116556-A0202-12-0679-978
<210> 45
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 45
Figure 109116556-A0202-12-0679-979
<210> 46
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 46
Figure 109116556-A0202-12-0679-980
<210> 47
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 47
Figure 109116556-A0202-12-0679-981
<210> 48
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 48
Figure 109116556-A0202-12-0680-982
<210> 49
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 49
Figure 109116556-A0202-12-0680-983
<210> 50
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 50
Figure 109116556-A0202-12-0680-984
<210> 51
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 51
Figure 109116556-A0202-12-0680-985
<210> 52
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 52
Figure 109116556-A0202-12-0680-986
Figure 109116556-A0202-12-0681-987
<210> 53
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 53
Figure 109116556-A0202-12-0681-988
<210> 54
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 6xHis標籤
<400> 54
Figure 109116556-A0202-12-0681-990
<210> 55
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 55
Figure 109116556-A0202-12-0681-989
<210> 56
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 56
Figure 109116556-A0202-12-0681-991
<210> 57
<211> 19
<212> PRT
<213> 智人
<400> 57
Figure 109116556-A0202-12-0682-992
<210> 58
<211> 6
<212> PRT
<213> 智人
<400> 58
Figure 109116556-A0202-12-0682-995
<210> 59
<211> 58
<212> PRT
<213> 智人
<400> 59
Figure 109116556-A0202-12-0682-996
<210> 60
<211> 15
<212> PRT
<213> 智人
<400> 60
Figure 109116556-A0202-12-0682-993
<210> 61
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 61
Figure 109116556-A0202-12-0682-994
<210> 62
<211> 62
<212> PRT
<213> 智人
<400> 62
Figure 109116556-A0202-12-0683-997
<210> 63
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 63
Figure 109116556-A0202-12-0683-998
<210> 64
<211> 12
<212> PRT
<213> 智人
<400> 64
Figure 109116556-A0202-12-0683-2942
<210> 65
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 65
Figure 109116556-A0202-12-0683-2943
<210> 66
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 66
Figure 109116556-A0202-12-0683-2945
<210> 67
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 67
Figure 109116556-A0202-12-0684-999
<210> 68
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 68
Figure 109116556-A0202-12-0684-1000
<210> 69
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 69
Figure 109116556-A0202-12-0684-1001
<210> 70
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 70
Figure 109116556-A0202-12-0684-1002
<210> 71
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 71
Figure 109116556-A0202-12-0684-1003
<210> 72
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 72
Figure 109116556-A0202-12-0685-1004
<210> 73
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 73
Figure 109116556-A0202-12-0685-1005
<210> 74
<211> 31
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 74
Figure 109116556-A0202-12-0685-1006
<210> 75
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 75
Figure 109116556-A0202-12-0685-1007
<210> 76
<211> 26
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 76
Figure 109116556-A0202-12-0686-1008
<210> 77
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 77
Figure 109116556-A0202-12-0686-1009
<210> 78
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<223> 有關取代和優選實施例的詳細描述，參見所提交的說明書
<400> 78
Figure 109116556-A0202-12-0686-1012
<210> 79
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 79
Figure 109116556-A0202-12-0686-1010
<210> 80
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 80
Figure 109116556-A0202-12-0686-1011
<210> 81
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 81
Figure 109116556-A0202-12-0687-1013
<210> 82
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 82
Figure 109116556-A0202-12-0687-1014
<210> 83
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 83
Figure 109116556-A0202-12-0687-1016
<210> 84
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 84
Figure 109116556-A0202-12-0687-1015
<210> 85
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 85
Figure 109116556-A0202-12-0688-1017
<210> 86
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 86
Figure 109116556-A0202-12-0688-1018
<210> 87
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 87
Figure 109116556-A0202-12-0688-1019
<210> 88
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 88
Figure 109116556-A0202-12-0688-1021
<210> 89
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 89
Figure 109116556-A0202-12-0688-1020
<210> 90
<211> 26
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 90
Figure 109116556-A0202-12-0688-1022
Figure 109116556-A0202-12-0689-1023
<210> 91
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 91
Figure 109116556-A0202-12-0689-1024
<210> 92
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 92
Figure 109116556-A0202-12-0689-1025
<210> 93
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 93
Figure 109116556-A0202-12-0689-1026
<210> 94
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 94
Figure 109116556-A0202-12-0689-1027
<210> 95
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 95
Figure 109116556-A0202-12-0690-1028
<210> 96
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 96
Figure 109116556-A0202-12-0690-1029
<210> 97
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 97
Figure 109116556-A0202-12-0690-1030
<210> 98
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 98
Figure 109116556-A0202-12-0690-1031
<210> 99
<211> 50
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(50)
<223> 該序列可以涵蓋1-10個“Gly Gly Gly Gly Ser” 重複單元
<400> 99
Figure 109116556-A0202-12-0690-1032
Figure 109116556-A0202-12-0691-1033
<210> 100
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 100
Figure 109116556-A0202-12-0691-2946
<210> 101
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 101
Figure 109116556-A0202-12-0691-1035
<210> 102
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 102
Figure 109116556-A0202-12-0691-1036
<210> 103
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 103
Figure 109116556-A0202-12-0691-1037
Figure 109116556-A0202-12-0692-1038
<210> 104
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 104
Figure 109116556-A0202-12-0692-1039
<210> 105
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 105
Figure 109116556-A0202-12-0692-1040
<210> 106
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 106
Figure 109116556-A0202-12-0692-1043
<210> 107
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 107
Figure 109116556-A0202-12-0692-1041
<210> 108
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 108
Figure 109116556-A0202-12-0692-1042
<210> 109
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 109
Figure 109116556-A0202-12-0693-1044
<210> 110
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 110
Figure 109116556-A0202-12-0693-1045
<210> 111
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 111
Figure 109116556-A0202-12-0693-1046
<210> 112
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 112
Figure 109116556-A0202-12-0693-1047
<210> 113
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 113
Figure 109116556-A0202-12-0694-1048
<210> 114
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 114
Figure 109116556-A0202-12-0694-1049
<210> 115
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 115
Figure 109116556-A0202-12-0694-1052
<210> 116
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 116
Figure 109116556-A0202-12-0694-1050
<210> 117
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 117
Figure 109116556-A0202-12-0694-1051
<210> 118
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 118
Figure 109116556-A0202-12-0695-1053
<210> 119
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 119
Figure 109116556-A0202-12-0695-2947
<210> 120
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 120
Figure 109116556-A0202-12-0695-1057
<210> 121
<211> 27
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 121
Figure 109116556-A0202-12-0695-1055
<210> 122
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 122
Figure 109116556-A0202-12-0695-1056
<210> 123
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 123
Figure 109116556-A0202-12-0696-1058
<210> 124
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 124
Figure 109116556-A0202-12-0696-1061
<210> 125
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 125
Figure 109116556-A0202-12-0696-1059
<210> 126
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 126
Figure 109116556-A0202-12-0696-1060
<210> 127
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 127
Figure 109116556-A0202-12-0697-1063
<210> 128
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 128
Figure 109116556-A0202-12-0697-1062
<210> 129
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 129
Figure 109116556-A0202-12-0697-1064
<210> 130
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 130
Figure 109116556-A0202-12-0697-1065
<210> 131
<211> 24
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 131
Figure 109116556-A0202-12-0697-1066
<210> 132
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 132
Figure 109116556-A0202-12-0698-1067
<210> 133
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 133
Figure 109116556-A0202-12-0698-1068
<210> 134
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 134
Figure 109116556-A0202-12-0698-1069
<210> 135
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 135
Figure 109116556-A0202-12-0698-1070
<210> 136
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 136
Figure 109116556-A0202-12-0699-1336
<210> 137
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 137
Figure 109116556-A0202-12-0699-1337
Figure 109116556-A0202-12-0700-1338
<210> 138
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 138
Figure 109116556-A0202-12-0700-1339
<210> 139
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 139
Figure 109116556-A0202-12-0700-1340
Figure 109116556-A0202-12-0701-1341
<210> 140
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 140
Figure 109116556-A0202-12-0701-1342
<210> 141
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 141
Figure 109116556-A0202-12-0701-1343
Figure 109116556-A0202-12-0702-1344
<210> 142
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 142
Figure 109116556-A0202-12-0702-1345
<210> 143
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 143
Figure 109116556-A0202-12-0702-1346
Figure 109116556-A0202-12-0703-1347
<210> 144
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 144
Figure 109116556-A0202-12-0703-1348
<210> 145
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 145
Figure 109116556-A0202-12-0704-1349
<210> 146
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 146
Figure 109116556-A0202-12-0704-1350
Figure 109116556-A0202-12-0705-1351
<210> 147
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 147
Figure 109116556-A0202-12-0705-1352
<210> 148
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 148
Figure 109116556-A0202-12-0705-1353
Figure 109116556-A0202-12-0706-1354
<210> 149
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 149
Figure 109116556-A0202-12-0706-1355
<210> 150
<211> 105
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 150
Figure 109116556-A0202-12-0706-1356
Figure 109116556-A0202-12-0707-1357
<210> 151
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 151
Figure 109116556-A0202-12-0707-1358
<210> 152
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 152
Figure 109116556-A0202-12-0708-1359
<210> 153
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 153
Figure 109116556-A0202-12-0708-1360
Figure 109116556-A0202-12-0709-1361
<210> 154
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 154
Figure 109116556-A0202-12-0709-1362
<210> 155
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 155
Figure 109116556-A0202-12-0709-1363
Figure 109116556-A0202-12-0710-1364
<210> 156
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 156
Figure 109116556-A0202-12-0710-1365
<210> 157
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 157
Figure 109116556-A0202-12-0710-1366
Figure 109116556-A0202-12-0711-1367
<210> 158
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 158
Figure 109116556-A0202-12-0711-1368
Figure 109116556-A0202-12-0712-1369
<210> 159
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 159
Figure 109116556-A0202-12-0712-1370
<210> 160
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 160
Figure 109116556-A0202-12-0713-1371
<210> 161
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 161
Figure 109116556-A0202-12-0713-1372
Figure 109116556-A0202-12-0714-1373
<210> 162
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 162
Figure 109116556-A0202-12-0714-1374
<210> 163
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 163
Figure 109116556-A0202-12-0714-1375
Figure 109116556-A0202-12-0715-1376
<210> 164
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 164
Figure 109116556-A0202-12-0715-1377
<210> 165
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 165
Figure 109116556-A0202-12-0715-1378
Figure 109116556-A0202-12-0716-1379
<210> 166
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 166
Figure 109116556-A0202-12-0716-1380
<210> 167
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 167
Figure 109116556-A0202-12-0717-1381
<210> 168
<211> 101
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 168
Figure 109116556-A0202-12-0717-1382
<210> 169
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 169
Figure 109116556-A0202-12-0718-1383
<210> 170
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 170
Figure 109116556-A0202-12-0718-1384
Figure 109116556-A0202-12-0719-1385
<210> 171
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 171
Figure 109116556-A0202-12-0719-1386
<210> 172
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 172
Figure 109116556-A0202-12-0719-1387
Figure 109116556-A0202-12-0720-1388
<210> 173
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 173
Figure 109116556-A0202-12-0720-1389
<210> 174
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 174
Figure 109116556-A0202-12-0720-1390
Figure 109116556-A0202-12-0721-1391
<210> 175
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 175
Figure 109116556-A0202-12-0722-1392
<210> 176
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 176
Figure 109116556-A0202-12-0723-1393
<210> 177
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 177
Figure 109116556-A0202-12-0723-1394
Figure 109116556-A0202-12-0724-1395
<210> 178
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 178
Figure 109116556-A0202-12-0724-1396
Figure 109116556-A0202-12-0725-1397
<210> 179
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 179
Figure 109116556-A0202-12-0725-1398
Figure 109116556-A0202-12-0726-1399
<210> 180
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 180
Figure 109116556-A0202-12-0726-1400
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 181
Figure 109116556-A0202-12-0726-1401
Figure 109116556-A0202-12-0727-1402
<210> 182
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 182
Figure 109116556-A0202-12-0727-1403
Figure 109116556-A0202-12-0728-1404
<210> 183
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 183
Figure 109116556-A0202-12-0728-1405
Figure 109116556-A0202-12-0729-1406
<210> 184
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 184
Figure 109116556-A0202-12-0729-1407
Figure 109116556-A0202-12-0730-1408
<210> 185
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 185
Figure 109116556-A0202-12-0730-1409
Figure 109116556-A0202-12-0731-1410
<210> 186
<211> 257
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 186
Figure 109116556-A0202-12-0731-1411
Figure 109116556-A0202-12-0732-1412
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<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 187
Figure 109116556-A0202-12-0732-1413
<210> 188
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 188
Figure 109116556-A0202-12-0732-1414
Figure 109116556-A0202-12-0733-1415
<210> 189
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 189
Figure 109116556-A0202-12-0733-1416
Figure 109116556-A0202-12-0734-1417
<210> 190
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 190
Figure 109116556-A0202-12-0734-1418
<210> 191
<211> 254
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 191
Figure 109116556-A0202-12-0735-1419
<210> 192
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 192
Figure 109116556-A0202-12-0736-1420
<210> 193
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 193
Figure 109116556-A0202-12-0736-1421
<210> 194
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 194
Figure 109116556-A0202-12-0736-1422
<210> 195
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 195
Figure 109116556-A0202-12-0736-1423
<210> 196
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 196
Figure 109116556-A0202-12-0736-1424
<210> 197
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 197
Figure 109116556-A0202-12-0737-1425
<210> 198
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 198
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 199
Figure 109116556-A0202-12-0737-1427
<210> 200
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 200
Figure 109116556-A0202-12-0737-1428
<210> 201
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 201
Figure 109116556-A0202-12-0737-1429
<210> 202
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 202
Figure 109116556-A0202-12-0738-1430
<210> 203
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 203
Figure 109116556-A0202-12-0738-1431
<210> 204
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 204
Figure 109116556-A0202-12-0738-1432
<210> 205
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 205
Figure 109116556-A0202-12-0738-1433
<210> 206
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 206
Figure 109116556-A0202-12-0738-1434
<210> 207
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 207
Figure 109116556-A0202-12-0739-1435
<210> 208
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 208
Figure 109116556-A0202-12-0739-1436
<210> 209
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 209
Figure 109116556-A0202-12-0739-1437
<210> 210
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 210
Figure 109116556-A0202-12-0739-1438
<210> 211
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 211
Figure 109116556-A0202-12-0739-1439
<210> 212
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 212
Figure 109116556-A0202-12-0740-1440
<210> 213
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 213
Figure 109116556-A0202-12-0740-1442
<210> 214
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 214
Figure 109116556-A0202-12-0740-1441
<210> 215
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 215
Figure 109116556-A0202-12-0740-1443
<210> 216
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 216
Figure 109116556-A0202-12-0740-1444
Figure 109116556-A0202-12-0741-1445
<210> 217
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 217
Figure 109116556-A0202-12-0741-1446
<210> 218
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 218
Figure 109116556-A0202-12-0741-1447
<210> 219
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 219
Figure 109116556-A0202-12-0741-1448
<210> 220
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 220
Figure 109116556-A0202-12-0741-1449
<210> 221
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 221
Figure 109116556-A0202-12-0742-1450
<210> 222
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 222
Figure 109116556-A0202-12-0742-1454
<210> 223
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 223
Figure 109116556-A0202-12-0742-1451
<210> 224
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 224
Figure 109116556-A0202-12-0742-1452
<210> 225
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 225
Figure 109116556-A0202-12-0742-1453
Figure 109116556-A0202-12-0743-1455
<210> 226
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 226
Figure 109116556-A0202-12-0743-1456
<210> 227
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 227
Figure 109116556-A0202-12-0743-1457
<210> 228
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 228
Figure 109116556-A0202-12-0743-1458
<210> 229
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 229
Figure 109116556-A0202-12-0743-1459
<210> 230
<211> 19
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 230
Figure 109116556-A0202-12-0744-1460
<210> 231
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 231
Figure 109116556-A0202-12-0744-1461
<210> 232
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 232
Figure 109116556-A0202-12-0744-1462
<210> 233
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 233
Figure 109116556-A0202-12-0744-1463
<210> 234
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 234
Figure 109116556-A0202-12-0745-1465
<210> 235
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 235
Figure 109116556-A0202-12-0745-1464
<210> 236
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 236
Figure 109116556-A0202-12-0745-1466
<210> 237
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 237
Figure 109116556-A0202-12-0745-1467
<210> 238
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 238
Figure 109116556-A0202-12-0745-1468
<210> 239
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 239
Figure 109116556-A0202-12-0746-1469
<210> 240
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 240
Figure 109116556-A0202-12-0746-1470
<210> 241
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 241
Figure 109116556-A0202-12-0746-1471
<210> 242
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 242
Figure 109116556-A0202-12-0746-1473
<210> 243
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 243
Figure 109116556-A0202-12-0746-1472
<210> 244
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 244
Figure 109116556-A0202-12-0747-1474
<210> 245
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 245
Figure 109116556-A0202-12-0747-1475
<210> 246
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 246
Figure 109116556-A0202-12-0747-1476
<210> 247
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 247
Figure 109116556-A0202-12-0747-1477
<210> 248
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 248
Figure 109116556-A0202-12-0747-1478
<210> 249
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 249
Figure 109116556-A0202-12-0748-1479
<210> 250
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 250
Figure 109116556-A0202-12-0748-1480
<210> 251
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 251
Figure 109116556-A0202-12-0748-1482
<210> 252
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 252
Figure 109116556-A0202-12-0748-1481
<210> 253
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 253
Figure 109116556-A0202-12-0748-1483
<210> 254
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 254
Figure 109116556-A0202-12-0749-1484
<210> 255
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 255
Figure 109116556-A0202-12-0749-1485
<210> 256
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 256
Figure 109116556-A0202-12-0749-1486
<210> 257
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 257
Figure 109116556-A0202-12-0749-1487
<210> 258
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 258
Figure 109116556-A0202-12-0749-1488
<210> 259
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 259
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<210> 260
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 260
Figure 109116556-A0202-12-0750-1490
<210> 261
<211> 7
<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 261
Figure 109116556-A0202-12-0750-1491
<210> 262
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 262
Figure 109116556-A0202-12-0750-1492
<210> 263
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 263
Figure 109116556-A0202-12-0750-1493
<210> 264
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 264
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<210> 265
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 265
Figure 109116556-A0202-12-0751-1494
<210> 266
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 266
Figure 109116556-A0202-12-0751-1496
<210> 267
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 267
Figure 109116556-A0202-12-0751-1497
<210> 268
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 268
Figure 109116556-A0202-12-0751-1498
<210> 269
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 269
Figure 109116556-A0202-12-0751-1499
Figure 109116556-A0202-12-0752-1500
<210> 270
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 270
Figure 109116556-A0202-12-0752-1501
<210> 271
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 271
Figure 109116556-A0202-12-0752-1502
<210> 272
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 272
Figure 109116556-A0202-12-0752-1503
<210> 273
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 273
Figure 109116556-A0202-12-0752-1504
<210> 274
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 274
Figure 109116556-A0202-12-0752-1505
<210> 275
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 275
Figure 109116556-A0202-12-0753-1506
<210> 276
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 276
Figure 109116556-A0202-12-0753-1507
<210> 277
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 277
Figure 109116556-A0202-12-0753-1508
<210> 278
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 278
Figure 109116556-A0202-12-0753-1509
<210> 279
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 279
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<210> 280
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 280
Figure 109116556-A0202-12-0754-1511
<210> 281
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 281
Figure 109116556-A0202-12-0754-1512
<210> 282
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 282
Figure 109116556-A0202-12-0754-1513
<210> 283
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 283
Figure 109116556-A0202-12-0754-1514
<210> 284
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 284
Figure 109116556-A0202-12-0754-1515
<210> 285
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 285
Figure 109116556-A0202-12-0755-1516
<210> 286
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 286
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<210> 287
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 287
Figure 109116556-A0202-12-0755-1518
<210> 288
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 288
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<210> 289
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 289
Figure 109116556-A0202-12-0755-1520
<210> 290
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 290
Figure 109116556-A0202-12-0756-1521
<210> 291
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 291
Figure 109116556-A0202-12-0756-1522
<210> 292
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 292
Figure 109116556-A0202-12-0756-1523
<210> 293
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 293
Figure 109116556-A0202-12-0756-1524
<210> 294
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 294
Figure 109116556-A0202-12-0756-1525
<210> 295
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 295
Figure 109116556-A0202-12-0757-1526
<210> 296
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 296
Figure 109116556-A0202-12-0757-1527
<210> 297
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 297
Figure 109116556-A0202-12-0757-1529
<210> 298
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 298
Figure 109116556-A0202-12-0757-1528
<210> 299
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 299
Figure 109116556-A0202-12-0757-1530
<210> 300
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 300
Figure 109116556-A0202-12-0758-1533
<210> 301
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 301
Figure 109116556-A0202-12-0758-1531
<210> 302
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 302
Figure 109116556-A0202-12-0758-1532
<210> 303
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 303
Figure 109116556-A0202-12-0758-1534
<210> 304
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 304
Figure 109116556-A0202-12-0758-1535
<210> 305
<211> 152
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 305
Figure 109116556-A0202-12-0759-1536
<210> 306
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 306
Figure 109116556-A0202-12-0759-1537
<210> 307
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 307
Figure 109116556-A0202-12-0760-1538
<210> 308
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 308
Figure 109116556-A0202-12-0760-1539
<210> 309
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 309
Figure 109116556-A0202-12-0760-1540
<210> 310
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 310
Figure 109116556-A0202-12-0760-1541
Figure 109116556-A0202-12-0761-1542
<210> 311
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 311
Figure 109116556-A0202-12-0761-1543
<210> 312
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 312
Figure 109116556-A0202-12-0761-1544
<210> 313
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 313
Figure 109116556-A0202-12-0761-1545
Figure 109116556-A0202-12-0762-1546
<210> 314
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 314
Figure 109116556-A0202-12-0762-1547
<210> 315
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 315
Figure 109116556-A0202-12-0762-1548
<210> 316
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 316
Figure 109116556-A0202-12-0762-1549
<210> 317
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 317
Figure 109116556-A0202-12-0762-2948
<210> 318
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 318
Figure 109116556-A0202-12-0763-1551
<210> 319
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 319
Figure 109116556-A0202-12-0763-1552
<210> 320
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 320
Figure 109116556-A0202-12-0764-1553
<210> 321
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 321
Figure 109116556-A0202-12-0764-1554
Figure 109116556-A0202-12-0765-1555
<210> 322
<211> 250
<212> PRT
<213> 智人
<400> 322
Figure 109116556-A0202-12-0765-1556
Figure 109116556-A0202-12-0766-1557
<210> 323
<211> 237
<212> PRT
<213> 智人
<400> 323
Figure 109116556-A0202-12-0766-1558
<210> 324
<211> 248
<212> PRT
<213> 智人
<400> 324
Figure 109116556-A0202-12-0767-1559
<210> 325
<211> 187
<212> PRT
<213> 智人
<400> 325
Figure 109116556-A0202-12-0768-1560
<210> 326
<211> 187
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> Phe或Ser
<220>
<221> MOD_RES
<222> (9)..(9)
<223> Val或Lys
<220>
<221> MOD_RES
<222> (21)..(21)
<223> Val或Gln
<220>
<221> MOD_RES
<222> (58)..(58)
<223> Val或Lys
<220>
<221> MOD_RES
<222> (85)..(85)
<223> Thr或Ser
<220>
<221> MOD_RES
<222> (93)..(93)
<223> Leu或Gly
<400> 326
Figure 109116556-A0202-12-0769-1561
<210> 327
<211> 94
<212> PRT
<213> 智人
<400> 327
Figure 109116556-A0202-12-0770-1562
<210> 328
<211> 94
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Val或Lys
<220>
<221> MOD_RES
<222> (20)..(20)
<223> Val或Gln
<400> 328
Figure 109116556-A0202-12-0770-2949
Figure 109116556-A0202-12-0771-1564
<210> 329
<211> 94
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 329
Figure 109116556-A0202-12-0771-1565
<210> 330
<211> 94
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 330
Figure 109116556-A0202-12-0771-1566
Figure 109116556-A0202-12-0772-1567
<210> 331
<211> 94
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 331
Figure 109116556-A0202-12-0772-1568
<210> 332
<211> 94
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 332
Figure 109116556-A0202-12-0772-1569
<210> 333
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 333
Figure 109116556-A0202-12-0773-1570
<210> 334
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 334
Figure 109116556-A0202-12-0773-1571
Figure 109116556-A0202-12-0774-1572
<210> 335
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 335
Figure 109116556-A0202-12-0774-1573
Figure 109116556-A0202-12-0775-1574
<210> 336
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 336
Figure 109116556-A0202-12-0775-1575
<210> 337
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 337
Figure 109116556-A0202-12-0775-1576
Figure 109116556-A0202-12-0776-1577
<210> 338
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 338
Figure 109116556-A0202-12-0776-1578
Figure 109116556-A0202-12-0777-1579
<210> 339
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 339
Figure 109116556-A0202-12-0777-1580
<210> 340
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 340
Figure 109116556-A0202-12-0778-1581
<210> 341
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 341
Figure 109116556-A0202-12-0778-1582
Figure 109116556-A0202-12-0779-1583
<210> 342
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 342
Figure 109116556-A0202-12-0779-1584
Figure 109116556-A0202-12-0780-1585
<210> 343
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 343
Figure 109116556-A0202-12-0780-1586
<210> 344
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 344
Figure 109116556-A0202-12-0780-1587
Figure 109116556-A0202-12-0781-1588
<210> 345
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 345
Figure 109116556-A0202-12-0781-1589
Figure 109116556-A0202-12-0782-1590
<210> 346
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 346
Figure 109116556-A0202-12-0782-1591
<210> 347
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 347
Figure 109116556-A0202-12-0782-1592
Figure 109116556-A0202-12-0783-1593
<210> 348
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 348
Figure 109116556-A0202-12-0783-1594
Figure 109116556-A0202-12-0784-1595
<210> 349
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 349
Figure 109116556-A0202-12-0784-1596
<210> 350
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 350
Figure 109116556-A0202-12-0785-1597
<210> 351
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 351
Figure 109116556-A0202-12-0786-1598
<210> 352
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 352
Figure 109116556-A0202-12-0786-1599
Figure 109116556-A0202-12-0787-1600
<210> 353
<211> 247
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 353
Figure 109116556-A0202-12-0787-1601
Figure 109116556-A0202-12-0788-1602
<210> 354
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 354
Figure 109116556-A0202-12-0788-1603
<210> 355
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 355
Figure 109116556-A0202-12-0788-1604
Figure 109116556-A0202-12-0789-1605
<210> 356
<211> 238
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 356
Figure 109116556-A0202-12-0789-1606
Figure 109116556-A0202-12-0790-1607
<210> 357
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 357
Figure 109116556-A0202-12-0790-1608
<210> 358
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 358
Figure 109116556-A0202-12-0790-1609
Figure 109116556-A0202-12-0791-1610
<210> 359
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 359
Figure 109116556-A0202-12-0791-1611
Figure 109116556-A0202-12-0792-1612
<210> 360
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 360
Figure 109116556-A0202-12-0792-1613
<210> 361
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 361
Figure 109116556-A0202-12-0793-1614
<210> 362
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 362
Figure 109116556-A0202-12-0793-1615
Figure 109116556-A0202-12-0794-1616
<210> 363
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 363
Figure 109116556-A0202-12-0794-1617
Figure 109116556-A0202-12-0795-1618
<210> 364
<211> 105
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 364
Figure 109116556-A0202-12-0795-1619
<210> 365
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 365
Figure 109116556-A0202-12-0795-1620
Figure 109116556-A0202-12-0796-1621
<210> 366
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 366
Figure 109116556-A0202-12-0796-1622
Figure 109116556-A0202-12-0797-1623
<210> 367
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 367
Figure 109116556-A0202-12-0797-1624
<210> 368
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 368
Figure 109116556-A0202-12-0797-1625
Figure 109116556-A0202-12-0798-1626
<210> 369
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 369
Figure 109116556-A0202-12-0798-1627
Figure 109116556-A0202-12-0799-1628
<210> 370
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 370
Figure 109116556-A0202-12-0799-1629
<210> 371
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 371
Figure 109116556-A0202-12-0800-1630
<210> 372
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 372
Figure 109116556-A0202-12-0801-1631
<210> 373
<211> 240
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 373
Figure 109116556-A0202-12-0801-1632
Figure 109116556-A0202-12-0802-1633
<210> 374
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 374
Figure 109116556-A0202-12-0802-1634
<210> 375
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 375
Figure 109116556-A0202-12-0803-1635
<210> 376
<211> 121
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 376
Figure 109116556-A0202-12-0804-1636
<210> 377
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 377
Figure 109116556-A0202-12-0804-1637
Figure 109116556-A0202-12-0805-1638
<210> 378
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 378
Figure 109116556-A0202-12-0805-1639
Figure 109116556-A0202-12-0806-1640
<210> 379
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 379
Figure 109116556-A0202-12-0806-1641
<210> 380
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 380
Figure 109116556-A0202-12-0806-1642
Figure 109116556-A0202-12-0807-1643
<210> 381
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 381
Figure 109116556-A0202-12-0807-1644
Figure 109116556-A0202-12-0808-1645
<210> 382
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 382
Figure 109116556-A0202-12-0808-1646
<210> 383
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 383
Figure 109116556-A0202-12-0809-1647
<210> 384
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 384
Figure 109116556-A0202-12-0809-1648
Figure 109116556-A0202-12-0810-1649
<210> 385
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 385
Figure 109116556-A0202-12-0810-1650
Figure 109116556-A0202-12-0811-1651
<210> 386
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 386
Figure 109116556-A0202-12-0811-1652
<210> 387
<211> 240
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 387
Figure 109116556-A0202-12-0811-1653
Figure 109116556-A0202-12-0812-1654
<210> 388
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 388
Figure 109116556-A0202-12-0812-1655
Figure 109116556-A0202-12-0813-1656
<210> 389
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 389
Figure 109116556-A0202-12-0813-1657
<210> 390
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 390
Figure 109116556-A0202-12-0813-1658
Figure 109116556-A0202-12-0814-1659
<210> 391
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 391
Figure 109116556-A0202-12-0814-1660
Figure 109116556-A0202-12-0815-1661
<210> 392
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 392
Figure 109116556-A0202-12-0815-1662
<210> 393
<211> 245
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 393
Figure 109116556-A0202-12-0816-1663
<210> 394
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 394
Figure 109116556-A0202-12-0817-1664
<210> 395
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 395
Figure 109116556-A0202-12-0817-1665
Figure 109116556-A0202-12-0818-1666
<210> 396
<211> 253
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 396
Figure 109116556-A0202-12-0818-1667
Figure 109116556-A0202-12-0819-1668
<210> 397
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 397
Figure 109116556-A0202-12-0819-1669
<210> 398
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 398
Figure 109116556-A0202-12-0819-1670
Figure 109116556-A0202-12-0820-1671
<210> 399
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 399
Figure 109116556-A0202-12-0820-1672
Figure 109116556-A0202-12-0821-1673
<210> 400
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 400
Figure 109116556-A0202-12-0821-1674
<210> 401
<211> 113
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 401
Figure 109116556-A0202-12-0822-1675
<210> 402
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 402
Figure 109116556-A0202-12-0822-1676
Figure 109116556-A0202-12-0823-1677
<210> 403
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 403
Figure 109116556-A0202-12-0823-1678
Figure 109116556-A0202-12-0824-1679
<210> 404
<211> 108
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 404
Figure 109116556-A0202-12-0824-1680
<210> 405
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 405
Figure 109116556-A0202-12-0824-1681
Figure 109116556-A0202-12-0825-1682
<210> 406
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 406
Figure 109116556-A0202-12-0825-1683
Figure 109116556-A0202-12-0826-1684
<210> 407
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 407
Figure 109116556-A0202-12-0826-1685
<210> 408
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 408
Figure 109116556-A0202-12-0827-1686
<210> 409
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 409
Figure 109116556-A0202-12-0828-1687
<210> 410
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 410
Figure 109116556-A0202-12-0828-1688
Figure 109116556-A0202-12-0829-1689
<210> 411
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 411
Figure 109116556-A0202-12-0829-1690
Figure 109116556-A0202-12-0830-1691
<210> 412
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 412
Figure 109116556-A0202-12-0830-1692
<210> 413
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 413
Figure 109116556-A0202-12-0830-1693
Figure 109116556-A0202-12-0831-1694
<210> 414
<211> 239
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 414
Figure 109116556-A0202-12-0831-1695
Figure 109116556-A0202-12-0832-1696
<210> 415
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 415
Figure 109116556-A0202-12-0832-1697
<210> 416
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 416
Figure 109116556-A0202-12-0832-1698
Figure 109116556-A0202-12-0833-1699
<210> 417
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 417
Figure 109116556-A0202-12-0833-1700
Figure 109116556-A0202-12-0834-1701
<210> 418
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 418
Figure 109116556-A0202-12-0834-1702
<210> 419
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 419
Figure 109116556-A0202-12-0835-1703
<210> 420
<211> 241
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 420
Figure 109116556-A0202-12-0835-1704
Figure 109116556-A0202-12-0836-1705
<210> 421
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 421
Figure 109116556-A0202-12-0836-1706
Figure 109116556-A0202-12-0837-1707
<210> 422
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 422
Figure 109116556-A0202-12-0837-1708
<210> 423
<211> 242
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 423
Figure 109116556-A0202-12-0837-1709
Figure 109116556-A0202-12-0838-1710
<210> 424
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 424
Figure 109116556-A0202-12-0838-1711
Figure 109116556-A0202-12-0839-1854
<210> 425
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 425
Figure 109116556-A0202-12-0839-1855
<210> 426
<211> 248
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 426
Figure 109116556-A0202-12-0839-1856
Figure 109116556-A0202-12-0840-1857
<210> 427
<211> 120
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 427
Figure 109116556-A0202-12-0841-1858
<210> 428
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 428
Figure 109116556-A0202-12-0841-1859
<210> 429
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 429
Figure 109116556-A0202-12-0842-1860
Figure 109116556-A0202-12-0843-1861
<210> 430
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 430
Figure 109116556-A0202-12-0843-1862
<210> 431
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 431
Figure 109116556-A0202-12-0843-1863
Figure 109116556-A0202-12-0844-1864
<210> 432
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 432
Figure 109116556-A0202-12-0844-1865
Figure 109116556-A0202-12-0845-1866
<210> 433
<211> 126
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 433
Figure 109116556-A0202-12-0845-1867
<210> 434
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 434
Figure 109116556-A0202-12-0845-1868
Figure 109116556-A0202-12-0846-1869
<210> 435
<211> 251
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 435
Figure 109116556-A0202-12-0846-1870
Figure 109116556-A0202-12-0847-1871
<210> 436
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 436
Figure 109116556-A0202-12-0847-1872
<210> 437
<211> 109
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 437
Figure 109116556-A0202-12-0848-1873
<210> 438
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 438
Figure 109116556-A0202-12-0848-1874
Figure 109116556-A0202-12-0849-1875
<210> 439
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 439
Figure 109116556-A0202-12-0849-1876
Figure 109116556-A0202-12-0850-1877
<210> 440
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 440
Figure 109116556-A0202-12-0850-1878
<210> 441
<211> 244
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 441
Figure 109116556-A0202-12-0850-1879
Figure 109116556-A0202-12-0851-1880
<210> 442
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 442
Figure 109116556-A0202-12-0851-1881
Figure 109116556-A0202-12-0852-1882
<210> 443
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 443
Figure 109116556-A0202-12-0852-1883
<210> 444
<211> 249
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 444
Figure 109116556-A0202-12-0853-1884
<210> 445
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 445
Figure 109116556-A0202-12-0854-1885
<210> 446
<211> 111
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 446
Figure 109116556-A0202-12-0854-1886
<210> 447
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 447
Figure 109116556-A0202-12-0855-1887
Figure 109116556-A0202-12-0856-1888
<210> 448
<211> 117
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 448
Figure 109116556-A0202-12-0856-1889
<210> 449
<211> 243
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 449
Figure 109116556-A0202-12-0856-1890
Figure 109116556-A0202-12-0857-1891
<210> 450
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 450
Figure 109116556-A0202-12-0857-1892
<210> 451
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
肽
<400> 451
Figure 109116556-A0202-12-0858-1893
<210> 452
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 452
Figure 109116556-A0202-12-0858-1894
<210> 453
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 453
Figure 109116556-A0202-12-0858-1895
<210> 454
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 454
Figure 109116556-A0202-12-0858-1896
<210> 455
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 455
Figure 109116556-A0202-12-0858-1897
<210> 456
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 456
Figure 109116556-A0202-12-0859-1898
<210> 457
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 457
Figure 109116556-A0202-12-0859-1899
<210> 458
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 458
Figure 109116556-A0202-12-0859-1900
<210> 459
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 459
Figure 109116556-A0202-12-0859-1901
<210> 460
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 460
Figure 109116556-A0202-12-0859-1902
<210> 461
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 461
Figure 109116556-A0202-12-0860-1903
<210> 462
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 462
Figure 109116556-A0202-12-0860-1904
<210> 463
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 463
Figure 109116556-A0202-12-0860-1905
<210> 464
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 464
Figure 109116556-A0202-12-0860-1906
<210> 465
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 465
Figure 109116556-A0202-12-0860-1907
<210> 466
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 466
Figure 109116556-A0202-12-0861-1908
<210> 467
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 467
Figure 109116556-A0202-12-0861-1909
<210> 468
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 468
Figure 109116556-A0202-12-0861-1910
<210> 469
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 469
Figure 109116556-A0202-12-0861-1911
<210> 470
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 470
Figure 109116556-A0202-12-0861-1912
<210> 471
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 471
Figure 109116556-A0202-12-0861-1913
Figure 109116556-A0202-12-0862-1914
<210> 472
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 472
Figure 109116556-A0202-12-0862-1915
<210> 473
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 473
Figure 109116556-A0202-12-0862-1917
<210> 474
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 474
Figure 109116556-A0202-12-0862-1916
<210> 475
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 475
Figure 109116556-A0202-12-0862-1918
<210> 476
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 476
Figure 109116556-A0202-12-0862-1919
<210> 477
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 477
Figure 109116556-A0202-12-0863-1920
<210> 478
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 478
Figure 109116556-A0202-12-0863-1921
<210> 479
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 479
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<210> 480
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 480
Figure 109116556-A0202-12-0863-1923
<210> 481
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 481
Figure 109116556-A0202-12-0863-1924
<210> 482
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 482
Figure 109116556-A0202-12-0864-1925
<210> 483
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 483
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<210> 484
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 484
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<210> 485
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 485
Figure 109116556-A0202-12-0864-1928
<210> 486
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 486
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<210> 487
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 487
Figure 109116556-A0202-12-0865-1930
<210> 488
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 488
Figure 109116556-A0202-12-0865-1931
<210> 489
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 489
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 490
Figure 109116556-A0202-12-0865-1932
<210> 491
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 491
Figure 109116556-A0202-12-0865-2950
<210> 492
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 492
Figure 109116556-A0202-12-0866-1935
<210> 493
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 493
Figure 109116556-A0202-12-0866-1936
<210> 494
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 494
Figure 109116556-A0202-12-0866-1938
<210> 495
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 495
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<210> 496
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 496
Figure 109116556-A0202-12-0866-1939
<210> 497
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 497
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 498
Figure 109116556-A0202-12-0867-1941
<210> 499
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 499
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 500
Figure 109116556-A0202-12-0867-1942
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 501
Figure 109116556-A0202-12-0867-1944
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 502
Figure 109116556-A0202-12-0868-1945
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 503
Figure 109116556-A0202-12-0868-1946
<210> 504
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 504
Figure 109116556-A0202-12-0868-1947
<210> 505
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 505
Figure 109116556-A0202-12-0868-1948
<210> 506
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 506
Figure 109116556-A0202-12-0868-1949
<210> 507
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 507
Figure 109116556-A0202-12-0869-1950
<210> 508
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 508
Figure 109116556-A0202-12-0869-1951
<210> 509
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 509
Figure 109116556-A0202-12-0869-1953
<210> 510
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 510
Figure 109116556-A0202-12-0869-1952
<210> 511
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 511
Figure 109116556-A0202-12-0869-1954
<210> 512
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 512
Figure 109116556-A0202-12-0870-1955
<210> 513
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 513
Figure 109116556-A0202-12-0870-1956
<210> 514
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 514
Figure 109116556-A0202-12-0870-1957
<210> 515
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 515
Figure 109116556-A0202-12-0870-1958
<210> 516
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 516
Figure 109116556-A0202-12-0870-1959
<210> 517
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 517
Figure 109116556-A0202-12-0871-1961
<210> 518
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 518
Figure 109116556-A0202-12-0871-1960
<210> 519
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 519
Figure 109116556-A0202-12-0871-1964
<210> 520
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 520
Figure 109116556-A0202-12-0871-1962
<210> 521
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 521
Figure 109116556-A0202-12-0871-1963
<210> 522
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
肽
<400> 522
Figure 109116556-A0202-12-0872-1965
<210> 523
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 523
Figure 109116556-A0202-12-0872-1966
<210> 524
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 524
Figure 109116556-A0202-12-0872-1967
<210> 525
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 525
Figure 109116556-A0202-12-0872-1968
<210> 526
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 526
Figure 109116556-A0202-12-0872-1969
<210> 527
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 527
Figure 109116556-A0202-12-0873-1973
<210> 528
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 528
Figure 109116556-A0202-12-0873-1972
<210> 529
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 529
Figure 109116556-A0202-12-0873-1971
<210> 530
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 530
Figure 109116556-A0202-12-0873-1970
<210> 531
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 531
Figure 109116556-A0202-12-0873-1974
<210> 532
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 532
Figure 109116556-A0202-12-0874-1975
<210> 533
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 533
Figure 109116556-A0202-12-0874-1976
<210> 534
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 534
Figure 109116556-A0202-12-0874-1977
<210> 535
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 535
Figure 109116556-A0202-12-0874-1978
<210> 536
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 536
Figure 109116556-A0202-12-0874-1979
<210> 537
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 537
Figure 109116556-A0202-12-0875-1980
<210> 538
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 538
Figure 109116556-A0202-12-0875-1981
<210> 539
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 539
Figure 109116556-A0202-12-0875-1982
<210> 540
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 540
Figure 109116556-A0202-12-0875-1983
<210> 541
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 541
Figure 109116556-A0202-12-0875-1984
<210> 542
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 542
Figure 109116556-A0202-12-0875-1985
Figure 109116556-A0202-12-0876-1986
<210> 543
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 543
Figure 109116556-A0202-12-0876-1987
<210> 544
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 544
Figure 109116556-A0202-12-0876-1988
<210> 545
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 545
Figure 109116556-A0202-12-0876-1989
<210> 546
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 546
Figure 109116556-A0202-12-0876-1990
<210> 547
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 547
Figure 109116556-A0202-12-0876-1991
<210> 548
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 548
Figure 109116556-A0202-12-0877-1992
<210> 549
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 549
Figure 109116556-A0202-12-0877-1993
<210> 550
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 550
Figure 109116556-A0202-12-0877-1994
<210> 551
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 551
Figure 109116556-A0202-12-0877-1995
<210> 552
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 552
Figure 109116556-A0202-12-0877-1996
<210> 553
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 553
Figure 109116556-A0202-12-0878-1997
<210> 554
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 554
Figure 109116556-A0202-12-0878-1998
<210> 555
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 555
Figure 109116556-A0202-12-0878-1999
<210> 556
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 556
Figure 109116556-A0202-12-0878-2000
<210> 557
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 557
Figure 109116556-A0202-12-0878-2001
<210> 558
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 558
Figure 109116556-A0202-12-0879-2002
<210> 559
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 559
Figure 109116556-A0202-12-0879-2003
<210> 560
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 560
Figure 109116556-A0202-12-0879-2004
<210> 561
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 561
Figure 109116556-A0202-12-0879-2005
<210> 562
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 562
Figure 109116556-A0202-12-0879-2006
<210> 563
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 563
Figure 109116556-A0202-12-0880-2007
<210> 564
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 564
Figure 109116556-A0202-12-0880-2008
<210> 565
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 565
Figure 109116556-A0202-12-0880-2010
<210> 566
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 566
Figure 109116556-A0202-12-0880-2009
<210> 567
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 567
Figure 109116556-A0202-12-0880-2011
<210> 568
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 568
Figure 109116556-A0202-12-0881-2012
<210> 569
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 569
Figure 109116556-A0202-12-0881-2013
<210> 570
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 570
Figure 109116556-A0202-12-0881-2014
<210> 571
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 571
Figure 109116556-A0202-12-0881-2015
<210> 572
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 572
Figure 109116556-A0202-12-0881-2016
<210> 573
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 573
Figure 109116556-A0202-12-0882-2017
<210> 574
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 574
Figure 109116556-A0202-12-0882-2018
<210> 575
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 575
Figure 109116556-A0202-12-0882-2019
<210> 576
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 576
Figure 109116556-A0202-12-0882-2020
<210> 577
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 577
Figure 109116556-A0202-12-0882-2021
<210> 578
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 578
Figure 109116556-A0202-12-0883-2023
<210> 579
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 579
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<210> 580
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 580
Figure 109116556-A0202-12-0883-2952
<210> 581
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 581
Figure 109116556-A0202-12-0883-2025
<210> 582
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 582
Figure 109116556-A0202-12-0883-2026
<210> 583
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 583
Figure 109116556-A0202-12-0884-2956
<210> 584
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 584
Figure 109116556-A0202-12-0884-2957
<210> 585
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 585
Figure 109116556-A0202-12-0884-2955
<210> 586
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 586
Figure 109116556-A0202-12-0884-2954
<210> 587
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 587
Figure 109116556-A0202-12-0884-2953
<210> 588
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 588
Figure 109116556-A0202-12-0885-2032
<210> 589
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 589
Figure 109116556-A0202-12-0885-2033
<210> 590
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 590
Figure 109116556-A0202-12-0885-2034
<210> 591
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 591
Figure 109116556-A0202-12-0885-2036
<210> 592
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 592
Figure 109116556-A0202-12-0885-2035
<210> 593
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 593
Figure 109116556-A0202-12-0886-2958
<210> 594
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 594
Figure 109116556-A0202-12-0886-2959
<210> 595
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 595
Figure 109116556-A0202-12-0886-2960
<210> 596
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 596
Figure 109116556-A0202-12-0886-2961
<210> 597
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 597
Figure 109116556-A0202-12-0886-2962
<210> 598
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 598
Figure 109116556-A0202-12-0887-2046
<210> 599
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 599
Figure 109116556-A0202-12-0887-2042
<210> 600
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 600
Figure 109116556-A0202-12-0887-2043
<210> 601
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 601
Figure 109116556-A0202-12-0887-2045
<210> 602
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 602
Figure 109116556-A0202-12-0887-2044
<210> 603
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 603
Figure 109116556-A0202-12-0888-2051
<210> 604
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 604
Figure 109116556-A0202-12-0888-2047
<210> 605
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 605
Figure 109116556-A0202-12-0888-2048
<210> 606
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 606
Figure 109116556-A0202-12-0888-2049
<210> 607
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 607
Figure 109116556-A0202-12-0888-2050
<210> 608
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 608
Figure 109116556-A0202-12-0889-2056
<210> 609
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 609
Figure 109116556-A0202-12-0889-2052
<210> 610
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 610
Figure 109116556-A0202-12-0889-2053
<210> 611
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 611
Figure 109116556-A0202-12-0889-2054
<210> 612
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 612
Figure 109116556-A0202-12-0889-2055
<210> 613
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 613
Figure 109116556-A0202-12-0889-2963
Figure 109116556-A0202-12-0890-2061
<210> 614
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 614
Figure 109116556-A0202-12-0890-2057
<210> 615
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 615
Figure 109116556-A0202-12-0890-2058
<210> 616
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 616
Figure 109116556-A0202-12-0890-2060
<210> 617
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 617
Figure 109116556-A0202-12-0890-2059
<210> 618
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 618
Figure 109116556-A0202-12-0890-2062
<210> 619
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 619
Figure 109116556-A0202-12-0891-2063
<210> 620
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 620
Figure 109116556-A0202-12-0891-2064
<210> 621
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 621
Figure 109116556-A0202-12-0891-2066
<210> 622
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 622
Figure 109116556-A0202-12-0891-2065
<210> 623
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 623
Figure 109116556-A0202-12-0891-2067
<210> 624
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 624
Figure 109116556-A0202-12-0892-2068
<210> 625
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 625
Figure 109116556-A0202-12-0892-2069
<210> 626
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 626
Figure 109116556-A0202-12-0892-2070
<210> 627
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 627
Figure 109116556-A0202-12-0892-2071
<210> 628
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 628
Figure 109116556-A0202-12-0892-2072
<210> 629
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 629
Figure 109116556-A0202-12-0893-2073
<210> 630
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 630
Figure 109116556-A0202-12-0893-2074
<210> 631
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 631
Figure 109116556-A0202-12-0893-2076
<210> 632
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 632
Figure 109116556-A0202-12-0893-2075
<210> 633
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 633
Figure 109116556-A0202-12-0893-2077
<210> 634
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 634
Figure 109116556-A0202-12-0894-2078
<210> 635
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 635
Figure 109116556-A0202-12-0894-2079
<210> 636
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 636
Figure 109116556-A0202-12-0894-2081
<210> 637
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 637
Figure 109116556-A0202-12-0894-2080
<210> 638
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 638
Figure 109116556-A0202-12-0894-2082
<210> 639
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 639
Figure 109116556-A0202-12-0895-2083
<210> 640
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 640
Figure 109116556-A0202-12-0895-2084
<210> 641
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 641
Figure 109116556-A0202-12-0895-2964
<210> 642
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 642
Figure 109116556-A0202-12-0895-2086
<210> 643
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 643
Figure 109116556-A0202-12-0895-2087
Figure 109116556-A0202-12-0896-2088
<210> 644
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 644
Figure 109116556-A0202-12-0896-2089
<210> 645
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 645
Figure 109116556-A0202-12-0896-2091
<210> 646
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 646
Figure 109116556-A0202-12-0896-2090
<210> 647
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 647
Figure 109116556-A0202-12-0896-2092
<210> 648
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 648
Figure 109116556-A0202-12-0897-2093
<210> 649
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 649
Figure 109116556-A0202-12-0897-2094
<210> 650
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 650
Figure 109116556-A0202-12-0897-2095
<210> 651
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 651
Figure 109116556-A0202-12-0897-2096
<210> 652
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 652
Figure 109116556-A0202-12-0898-2097
<210> 653
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 653
Figure 109116556-A0202-12-0898-2098
<210> 654
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 654
Figure 109116556-A0202-12-0898-2099
<210> 655
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 655
Figure 109116556-A0202-12-0898-2100
Figure 109116556-A0202-12-0899-2101
<210> 656
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 656
Figure 109116556-A0202-12-0899-2102
<210> 657
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 657
Figure 109116556-A0202-12-0899-2103
<210> 658
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 658
Figure 109116556-A0202-12-0899-2104
<210> 659
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 659
Figure 109116556-A0202-12-0899-2105
<210> 660
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 660
Figure 109116556-A0202-12-0899-2106
Figure 109116556-A0202-12-0900-2107
<210> 661
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 661
Figure 109116556-A0202-12-0900-2108
<210> 662
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 662
Figure 109116556-A0202-12-0900-2109
<210> 663
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 663
Figure 109116556-A0202-12-0900-2110
<210> 664
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 664
Figure 109116556-A0202-12-0900-2111
<210> 665
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 665
Figure 109116556-A0202-12-0901-2112
<210> 666
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 666
Figure 109116556-A0202-12-0901-2113
<210> 667
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 667
Figure 109116556-A0202-12-0901-2114
<210> 668
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 668
Figure 109116556-A0202-12-0901-2115
<210> 669
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 669
Figure 109116556-A0202-12-0901-2116
<210> 670
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 670
Figure 109116556-A0202-12-0902-2117
<210> 671
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 671
Figure 109116556-A0202-12-0902-2118
<210> 672
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 672
Figure 109116556-A0202-12-0902-2119
<210> 673
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 673
Figure 109116556-A0202-12-0902-2120
<210> 674
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 674
Figure 109116556-A0202-12-0902-2121
<210> 675
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 675
Figure 109116556-A0202-12-0903-2122
<210> 676
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 676
Figure 109116556-A0202-12-0903-2123
<210> 677
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 677
Figure 109116556-A0202-12-0903-2125
<210> 678
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 678
Figure 109116556-A0202-12-0903-2124
<210> 679
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 679
Figure 109116556-A0202-12-0903-2126
<210> 680
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 680
Figure 109116556-A0202-12-0904-2127
<210> 681
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 681
Figure 109116556-A0202-12-0904-2128
<210> 682
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 682
Figure 109116556-A0202-12-0904-2129
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<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
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<400> 683
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<213> 人工序列
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 686
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<212> PRT
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<400> 687
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
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<220>
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<220>
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 693
Figure 109116556-A0202-12-0906-2139
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<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 694
Figure 109116556-A0202-12-0906-2140
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<211> 7
<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成
肽
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<212> PRT
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<220>
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<220>
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
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<220>
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<213> 人工序列
<220>
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Figure 109116556-A0202-12-0908-2148
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
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<220>
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<212> PRT
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 707
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<210> 708
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 708
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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Figure 109116556-A0202-12-0909-2157
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
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<220>
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<210> 719
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<210> 724
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 724
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 725
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<210> 728
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<220>
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 737
Figure 109116556-A0202-12-0915-2185
<210> 738
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 738
Figure 109116556-A0202-12-0915-2186
<210> 739
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 739
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 740
Figure 109116556-A0202-12-0915-2188
<210> 741
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 741
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<210> 742
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 742
Figure 109116556-A0202-12-0916-2190
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 743
Figure 109116556-A0202-12-0916-2192
<210> 744
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 744
Figure 109116556-A0202-12-0916-2191
<210> 745
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 745
Figure 109116556-A0202-12-0916-2193
<210> 746
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 746
Figure 109116556-A0202-12-0917-2194
<210> 747
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 747
Figure 109116556-A0202-12-0917-2195
<210> 748
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 748
Figure 109116556-A0202-12-0917-2196
<210> 749
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 749
Figure 109116556-A0202-12-0917-2197
<210> 750
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 750
Figure 109116556-A0202-12-0917-2198
<210> 751
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 751
Figure 109116556-A0202-12-0918-2199
<210> 752
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 752
Figure 109116556-A0202-12-0918-2200
<210> 753
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 753
Figure 109116556-A0202-12-0918-2201
<210> 754
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 754
Figure 109116556-A0202-12-0918-2202
<210> 755
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 755
Figure 109116556-A0202-12-0919-2204
<210> 756
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 756
Figure 109116556-A0202-12-0919-2203
<210> 757
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 757
Figure 109116556-A0202-12-0919-2205
<210> 758
<211> 492
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 758
Figure 109116556-A0202-12-0919-2206
Figure 109116556-A0202-12-0920-2207
Figure 109116556-A0202-12-0921-2208
<210> 759
<211> 215
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 759
Figure 109116556-A0202-12-0921-2209
Figure 109116556-A0202-12-0922-2210
<210> 760
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 760
Figure 109116556-A0202-12-0922-2211
<210> 761
<211> 492
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 761
Figure 109116556-A0202-12-0923-2212
Figure 109116556-A0202-12-0924-2213
<210> 762
<211> 492
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 762
Figure 109116556-A0202-12-0924-2214
Figure 109116556-A0202-12-0925-2215
Figure 109116556-A0202-12-0926-2216
<210> 763
<211> 491
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 763
Figure 109116556-A0202-12-0926-2217
Figure 109116556-A0202-12-0927-2218
Figure 109116556-A0202-12-0928-2219
<210> 764
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 764
Figure 109116556-A0202-12-0928-2220
Figure 109116556-A0202-12-0929-2222
<210> 765
<211> 138
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 765
Figure 109116556-A0202-12-0929-2221
Figure 109116556-A0202-12-0930-2223
<210> 766
<211> 223
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 766
Figure 109116556-A0202-12-0930-2224
Figure 109116556-A0202-12-0931-2225
<210> 767
<211> 259
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 767
Figure 109116556-A0202-12-0931-2226
Figure 109116556-A0202-12-0932-2227
<210> 768
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 768
Figure 109116556-A0202-12-0932-2228
Figure 109116556-A0202-12-0933-2230
<210> 769
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 8xHis標籤
<400> 769
Figure 109116556-A0202-12-0933-2231
<210> 770
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 770
Figure 109116556-A0202-12-0933-2232
<210> 771
<211> 206
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 771
Figure 109116556-A0202-12-0933-2229
Figure 109116556-A0202-12-0934-2233
<210> 772
<211> 206
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 772
Figure 109116556-A0202-12-0934-2234
Figure 109116556-A0202-12-0935-2236
<210> 773
<211> 199
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 773
Figure 109116556-A0202-12-0935-2235
Figure 109116556-A0202-12-0936-2237
<210> 774
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 774
Figure 109116556-A0202-12-0936-2238
<210> 775
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 775
Figure 109116556-A0202-12-0936-2239
Figure 109116556-A0202-12-0937-2240
<210> 776
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 776
Figure 109116556-A0202-12-0937-2241
<210> 777
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 777
Figure 109116556-A0202-12-0937-2242
Figure 109116556-A0202-12-0938-2243
<210> 778
<211> 492
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 778
Figure 109116556-A0202-12-0938-2244
Figure 109116556-A0202-12-0939-2245
Figure 109116556-A0202-12-0940-2246
<210> 779
<211> 191
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 779
Figure 109116556-A0202-12-0940-2247
<210> 780
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 780
Figure 109116556-A0202-12-0941-2248
<210> 781
<211> 96
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 781
Figure 109116556-A0202-12-0942-2249
<210> 782
<211> 96
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 782
Figure 109116556-A0202-12-0942-2250
<210> 783
<211> 96
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 783
Figure 109116556-A0202-12-0943-2252
<210> 784
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Thr或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Ser或Arg
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Asn、Tyr或Gln
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> His或Ser
<400> 784
Figure 109116556-A0202-12-0943-2251
<210> 785
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Thr或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Ser或Arg
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Asn、Tyr或Gln
<400> 785
Figure 109116556-A0202-12-0944-2254
<210> 786
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn、Tyr或Gln
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Ser
<222> (5)..(5)
<400> 786
Figure 109116556-A0202-12-0944-2255
<210> 787
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Thr或Ala
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Arg
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn、Tyr或Gln
<222> (7)..(7)
<400> 787
Figure 109116556-A0202-12-0944-2253
<210> 788
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Met或Leu
<222> (1)..(1)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Lys或Arg
<400> 788
Figure 109116556-A0202-12-0945-2256
<210> 789
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Lys或Arg
<222> (6)..(6)
<400> 789
Figure 109116556-A0202-12-0945-2257
<210> 790
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Lys或Arg
<222> (7)..(7)
<400> 790
Figure 109116556-A0202-12-0945-2258
<210> 791
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Phe、Tyr或Ser
<222> (1)..(1)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (2)..(2)
<223> Trp、Tyr、Ser或Thr
<220>
<221> MOD_RES
<223> Trp、Tyr、Ser或Thr
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (9)..(9)
<223> His或Tyr
<400> 791
Figure 109116556-A0202-12-0946-2259
<210> 792
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Lys
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Phe、Tyr或Ser
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Trp、Tyr、Ser或Thr
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Trp、Tyr、Ser或Thr
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Tyr
<222> (11)..(11)
<400> 792
Figure 109116556-A0202-12-0947-2260
<210> 793
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 793
Figure 109116556-A0202-12-0947-2261
<210> 794
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 794
Figure 109116556-A0202-12-0947-2262
<210> 795
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Gly
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Ile或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Val或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Arg或Asn
<222> (8)..(8)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> Asp、Glu或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (11)..(11)
<223> Gly、Asn或Glu
<400> 795
Figure 109116556-A0202-12-0948-2263
<210> 796
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ile或Leu
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Gly
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Arg或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Asp、Glu或Leu
<400> 796
Figure 109116556-A0202-12-0948-2264
<210> 797
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ile或Leu
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Gly
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Arg或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Asp、Glu或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (9)..(9)
<223> Gly、Asn或Glu
<400> 797
Figure 109116556-A0202-12-0949-2265
<210> 798
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Gly
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Ile或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Val或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Arg或Asn
<222> (8)..(8)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> Asp、Glu或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<222> (11)..(11)
<223> Gly、Asn或Glu
<400> 798
Figure 109116556-A0202-12-0949-2266
<210> 799
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ile或Leu
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Gly
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Arg或Asn
<400> 799
Figure 109116556-A0202-12-0950-2267
<210> 800
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Ile或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Gly
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Arg或Asn
<400> 800
Figure 109116556-A0202-12-0950-2268
<210> 801
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> Arg或Ser
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Thr
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Asn或Thr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Arg或Leu
<220>
<221> MOD_RES
<223> Phe或Glu
<222> (6)..(6)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Tyr
<222> (7)..(7)
<400> 801
Figure 109116556-A0202-12-0951-2269
<210> 802
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> Arg或Ser
<220>
<221> MOD_RES
<222> (2)..(2)
<223> Val或Thr
<400> 802
Figure 109116556-A0202-12-0951-2270
<210> 803
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Ser或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Ser或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Thr
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Phe或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Trp或Tyr
<400> 803
Figure 109116556-A0202-12-0952-2271
<210> 804
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> Ser或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Ala
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Thr
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Phe或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<223> Trp或Tyr
<222> (6)..(6)
<400> 804
Figure 109116556-A0202-12-0952-2272
<210> 805
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Ser或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Ser或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> His或Thr
<400> 805
Figure 109116556-A0202-12-0953-2273
<210> 806
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Tyr
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Ser或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> His或Thr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Phe或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Trp或Tyr
<400> 806
Figure 109116556-A0202-12-0953-2274
<210> 807
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (9)..(9)
<223> Val或Ile
<400> 807
Figure 109116556-A0202-12-0953-2275
<210> 808
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 808
Figure 109116556-A0202-12-0954-2276
<210> 809
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成
肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Val或Ile
<400> 809
Figure 109116556-A0202-12-0954-2277
<210> 810
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 810
Figure 109116556-A0202-12-0954-2278
<210> 811
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> Phe或Tyr
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Ser
<222> (11)..(11)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (12)..(12)
<223> Ala或Ser
<220>
<221> MOD_RES
<223> Thr或Lys
<222> (15)..(15)
<400> 811
Figure 109116556-A0202-12-0955-2279
<210> 812
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 812
Figure 109116556-A0202-12-0955-2280
<210> 813
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 813
Figure 109116556-A0202-12-0955-2281
<210> 814
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Asn或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ser或Ala
<222> (9)..(9)
<400> 814
Figure 109116556-A0202-12-0955-2282
<210> 815
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (1)..(1)
<223> Thr或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (2)..(2)
<223> Ser或Arg
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Gly
<222> (9)..(9)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (11)..(11)
<223> Ser或Ala
<400> 815
Figure 109116556-A0202-12-0956-2283
<210> 816
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ala、Thr或Ser
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Asp
<222> (7)..(7)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Asn或Lys
<400> 816
Figure 109116556-A0202-12-0956-2284
<210> 817
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Asn或Asp
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Lys
<222> (6)..(6)
<400> 817
Figure 109116556-A0202-12-0957-2285
<210> 818
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Asn或Asp
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Lys
<222> (5)..(5)
<400> 818
Figure 109116556-A0202-12-0957-2286
<210> 819
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asp或Asn
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> His或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Gln或Glu
<400> 819
Figure 109116556-A0202-12-0957-2287
<210> 820
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Asp或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Asn
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Gln或Glu
<400> 820
Figure 109116556-A0202-12-0958-2288
<210> 821
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (3)..(3)
<223> Asp或Asn
<400> 821
Figure 109116556-A0202-12-0958-2289
<210> 822
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Arg、Ser或Gly
<400> 822
Figure 109116556-A0202-12-0958-2290
<210> 823
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Arg、Ser或Gly
<222> (4)..(4)
<400> 823
Figure 109116556-A0202-12-0959-2291
<210> 824
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 824
Figure 109116556-A0202-12-0959-2292
<210> 825
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 825
Figure 109116556-A0202-12-0959-2293
<210> 826
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 826
Figure 109116556-A0202-12-0959-2294
<210> 827
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Gly或Ala
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> His或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Asp或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ala或Gly
<222> (8)..(8)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (14)..(14)
<223> Asn或Lys
<400> 827
Figure 109116556-A0202-12-0960-2295
<210> 828
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Gly或Ala
<222> (3)..(3)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> His或Asn
<220>
<221> MOD_RES
<222> (5)..(5)
<223> Asp或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ala或Gly
<222> (6)..(6)
<400> 828
Figure 109116556-A0202-12-0960-2296
<210> 829
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Gly或Ala
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<223> His或Asn
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (6)..(6)
<223> Asp或Gly
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ala或Gly
<222> (7)..(7)
<400> 829
Figure 109116556-A0202-12-0961-2297
<210> 830
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Val或Ala
<222> (1)..(1)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Val
<222> (4)..(4)
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ala或Val
<222> (11)..(11)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (12)..(12)
<223> Tyr或Phe
<400> 830
Figure 109116556-A0202-12-0961-2298
<210> 831
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Asn或Val
<222> (2)..(2)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (9)..(9)
<223> Ala或Val
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> Tyr或Phe
<400> 831
Figure 109116556-A0202-12-0962-2299
<210> 832
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ile或Val
<222> (7)..(7)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (10)..(10)
<223> Ile或His
<400> 832
Figure 109116556-A0202-12-0962-2300
<210> 833
<211> 12
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<223> Ile或Val
<222> (5)..(5)
<220>
<221> MOD_RES
<222> (8)..(8)
<223> Ile或His
<400> 833
Figure 109116556-A0202-12-0963-2301
<210> 834
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<220>
<221> MOD_RES
<222> (4)..(4)
<223> Ile或Val
<220>
<221> MOD_RES
<222> (7)..(7)
<223> Ile或His
<400> 834
Figure 109116556-A0202-12-0963-2302
<210> 835
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 835
Figure 109116556-A0202-12-0963-2303
<210> 836
<211> 3
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 836
Figure 109116556-A0202-12-0963-2304
<210> 837
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 837
Figure 109116556-A0202-12-0963-2305
Figure 109116556-A0202-12-0964-2306
<210> 838
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 838
Figure 109116556-A0202-12-0964-2307
<210> 839
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 839
Figure 109116556-A0202-12-0964-2308
<210> 840
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 840
Figure 109116556-A0202-12-0964-2310
<210> 841
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 841
Figure 109116556-A0202-12-0964-2309
<210> 842
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 842
Figure 109116556-A0202-12-0964-2311
<210> 843
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 843
Figure 109116556-A0202-12-0965-2312
<210> 844
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 844
Figure 109116556-A0202-12-0965-2965
<210> 845
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 845
Figure 109116556-A0202-12-0965-2314
<210> 846
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 846
Figure 109116556-A0202-12-0965-2315
<210> 847
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 847
Figure 109116556-A0202-12-0966-2316
<210> 848
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 848
Figure 109116556-A0202-12-0966-2317
<210> 849
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 849
Figure 109116556-A0202-12-0966-2318
<210> 850
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 850
Figure 109116556-A0202-12-0966-2319
<210> 851
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 851
Figure 109116556-A0202-12-0966-2320
Figure 109116556-A0202-12-0967-2321
<210> 852
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 852
Figure 109116556-A0202-12-0967-2322
<210> 853
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 853
Figure 109116556-A0202-12-0967-2323
<210> 854
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 854
Figure 109116556-A0202-12-0967-2324
<210> 855
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 855
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<210> 856
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 856
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<210> 857
<211> 15
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<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 857
Figure 109116556-A0202-12-0968-2327
<210> 858
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 858
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Figure 109116556-A0202-12-0970-2341
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Figure 109116556-A0202-12-0970-2968
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<220>
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<220>
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<220>
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Figure 109116556-A0202-12-0981-2393
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<212> PRT
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<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 925
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<212> PRT
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<220>
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 931
Figure 109116556-A0202-12-0982-2402
<210> 932
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 932
Figure 109116556-A0202-12-0983-2403
<210> 933
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 933
Figure 109116556-A0202-12-0983-2404
<210> 934
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 934
Figure 109116556-A0202-12-0983-2405
<210> 935
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 935
Figure 109116556-A0202-12-0983-2406
<210> 936
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 936
Figure 109116556-A0202-12-0983-2407
<210> 937
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 937
Figure 109116556-A0202-12-0984-2971
<210> 938
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 938
Figure 109116556-A0202-12-0984-2408
<210> 939
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 939
Figure 109116556-A0202-12-0984-2409
<210> 940
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 940
Figure 109116556-A0202-12-0984-2411
<210> 941
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 941
Figure 109116556-A0202-12-0984-2412
Figure 109116556-A0202-12-0985-2413
<210> 942
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 942
Figure 109116556-A0202-12-0985-2414
<210> 943
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 943
Figure 109116556-A0202-12-0985-2415
<210> 944
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 944
Figure 109116556-A0202-12-0985-2416
<210> 945
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 945
Figure 109116556-A0202-12-0985-2417
<210> 946
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 946
Figure 109116556-A0202-12-0985-2418
Figure 109116556-A0202-12-0986-2420
<210> 947
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 947
Figure 109116556-A0202-12-0986-2419
<210> 948
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 948
Figure 109116556-A0202-12-0986-2421
<210> 949
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 949
Figure 109116556-A0202-12-0986-2422
<210> 950
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 950
Figure 109116556-A0202-12-0986-2423
<210> 951
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 951
Figure 109116556-A0202-12-0986-2424
<210> 952
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 952
Figure 109116556-A0202-12-0987-2425
<210> 953
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 953
Figure 109116556-A0202-12-0987-2426
<210> 954
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 954
Figure 109116556-A0202-12-0987-2427
<210> 955
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 955
Figure 109116556-A0202-12-0987-2428
<210> 956
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 956
Figure 109116556-A0202-12-0987-2429
<210> 957
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 957
Figure 109116556-A0202-12-0988-2430
<210> 958
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 958
Figure 109116556-A0202-12-0988-2431
<210> 959
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 959
Figure 109116556-A0202-12-0988-2432
<210> 960
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 960
Figure 109116556-A0202-12-0988-2433
<210> 961
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 961
Figure 109116556-A0202-12-0988-2434
<210> 962
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 962
Figure 109116556-A0202-12-0989-2435
<210> 963
<211> 11
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 963
Figure 109116556-A0202-12-0989-2436
<210> 964
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 964
Figure 109116556-A0202-12-0989-2437
<210> 965
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 965
Figure 109116556-A0202-12-0989-2438
<210> 966
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 966
Figure 109116556-A0202-12-0989-2439
<210> 967
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 967
Figure 109116556-A0202-12-0990-2444
<210> 968
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 968
Figure 109116556-A0202-12-0990-2443
<210> 969
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 969
Figure 109116556-A0202-12-0990-2442
<210> 970
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 970
Figure 109116556-A0202-12-0990-2441
<210> 971
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 971
Figure 109116556-A0202-12-0990-2440
<210> 972
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 972
Figure 109116556-A0202-12-0991-2445
<210> 973
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 973
Figure 109116556-A0202-12-0991-2446
<210> 974
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 974
Figure 109116556-A0202-12-0991-2447
Figure 109116556-A0202-12-0992-2448
<210> 975
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 975
Figure 109116556-A0202-12-0992-2449
<210> 976
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 976
Figure 109116556-A0202-12-0993-2450
<210> 977
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 977
Figure 109116556-A0202-12-0993-2451
Figure 109116556-A0202-12-0994-2452
<210> 978
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 978
Figure 109116556-A0202-12-0994-2453
<210> 979
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 979
Figure 109116556-A0202-12-0994-2454
Figure 109116556-A0202-12-0995-2455
<210> 980
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 980
Figure 109116556-A0202-12-0995-2456
<210> 981
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 981
Figure 109116556-A0202-12-0996-2457
<210> 982
<211> 115
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 982
Figure 109116556-A0202-12-0996-2458
Figure 109116556-A0202-12-0997-2459
<210> 983
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 983
Figure 109116556-A0202-12-0997-2460
<210> 984
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 984
Figure 109116556-A0202-12-0997-2461
Figure 109116556-A0202-12-0998-2462
<210> 985
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 985
Figure 109116556-A0202-12-0998-2463
<210> 986
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 986
Figure 109116556-A0202-12-0999-2464
<210> 987
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 987
Figure 109116556-A0202-12-0999-2465
Figure 109116556-A0202-12-1000-2466
<210> 988
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 988
Figure 109116556-A0202-12-1000-2467
<210> 989
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 989
Figure 109116556-A0202-12-1000-2468
Figure 109116556-A0202-12-1001-2469
<210> 990
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 990
Figure 109116556-A0202-12-1001-2470
<210> 991
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 991
Figure 109116556-A0202-12-1001-2471
Figure 109116556-A0202-12-1002-2472
<210> 992
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 992
Figure 109116556-A0202-12-1002-2473
<210> 993
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 993
Figure 109116556-A0202-12-1003-2474
<210> 994
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 994
Figure 109116556-A0202-12-1003-2475
Figure 109116556-A0202-12-1004-2476
<210> 995
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 995
Figure 109116556-A0202-12-1004-2477
<210> 996
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 996
Figure 109116556-A0202-12-1004-2478
Figure 109116556-A0202-12-1005-2479
<210> 997
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 997
Figure 109116556-A0202-12-1005-2480
<210> 998
<211> 122
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 998
Figure 109116556-A0202-12-1006-2481
<210> 999
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 999
Figure 109116556-A0202-12-1006-2482
Figure 109116556-A0202-12-1007-2483
<210> 1000
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1000
Figure 109116556-A0202-12-1007-2484
<210> 1001
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1001
Figure 109116556-A0202-12-1007-2485
Figure 109116556-A0202-12-1008-2486
<210> 1002
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1002
Figure 109116556-A0202-12-1008-2487
<210> 1003
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1003
Figure 109116556-A0202-12-1009-2488
<210> 1004
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1004
Figure 109116556-A0202-12-1009-2489
Figure 109116556-A0202-12-1010-2490
<210> 1005
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1005
Figure 109116556-A0202-12-1010-2491
<210> 1006
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1006
Figure 109116556-A0202-12-1010-2492
Figure 109116556-A0202-12-1011-2493
<210> 1007
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1007
Figure 109116556-A0202-12-1011-2494
<210> 1008
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1008
Figure 109116556-A0202-12-1012-2495
<210> 1009
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1009
Figure 109116556-A0202-12-1012-2496
Figure 109116556-A0202-12-1013-2497
<210> 1010
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1010
Figure 109116556-A0202-12-1013-2498
<210> 1011
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1011
Figure 109116556-A0202-12-1013-2499
Figure 109116556-A0202-12-1014-2500
<210> 1012
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1012
Figure 109116556-A0202-12-1014-2501
<210> 1013
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1013
Figure 109116556-A0202-12-1014-2502
Figure 109116556-A0202-12-1015-2503
<210> 1014
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1014
Figure 109116556-A0202-12-1015-2504
<210> 1015
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1015
Figure 109116556-A0202-12-1016-2505
<210> 1016
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1016
Figure 109116556-A0202-12-1016-2506
Figure 109116556-A0202-12-1017-2507
<210> 1017
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1017
Figure 109116556-A0202-12-1017-2508
<210> 1018
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1018
Figure 109116556-A0202-12-1017-2509
Figure 109116556-A0202-12-1018-2510
<210> 1019
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1019
Figure 109116556-A0202-12-1018-2511
<210> 1020
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1020
Figure 109116556-A0202-12-1019-2512
<210> 1021
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1021
Figure 109116556-A0202-12-1019-2513
Figure 109116556-A0202-12-1020-2514
<210> 1022
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1022
Figure 109116556-A0202-12-1020-2515
<210> 1023
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1023
Figure 109116556-A0202-12-1020-2516
Figure 109116556-A0202-12-1021-2517
<210> 1024
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1024
Figure 109116556-A0202-12-1021-2518
<210> 1025
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1025
Figure 109116556-A0202-12-1022-2519
<210> 1026
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1026
Figure 109116556-A0202-12-1022-2520
Figure 109116556-A0202-12-1023-2521
<210> 1027
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1027
Figure 109116556-A0202-12-1023-2522
<210> 1028
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1028
Figure 109116556-A0202-12-1023-2523
Figure 109116556-A0202-12-1024-2524
<210> 1029
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1029
Figure 109116556-A0202-12-1024-2525
<210> 1030
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1030
Figure 109116556-A0202-12-1025-2526
<210> 1031
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1031
Figure 109116556-A0202-12-1025-2527
Figure 109116556-A0202-12-1026-2528
<210> 1032
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1032
Figure 109116556-A0202-12-1026-2529
<210> 1033
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1033
Figure 109116556-A0202-12-1026-2530
Figure 109116556-A0202-12-1027-2531
<210> 1034
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1034
Figure 109116556-A0202-12-1027-2532
<210> 1035
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1035
Figure 109116556-A0202-12-1027-2533
Figure 109116556-A0202-12-1028-2534
<210> 1036
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1036
Figure 109116556-A0202-12-1028-2535
<210> 1037
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1037
Figure 109116556-A0202-12-1029-2536
<210> 1038
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1038
Figure 109116556-A0202-12-1029-2537
Figure 109116556-A0202-12-1030-2538
<210> 1039
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1039
Figure 109116556-A0202-12-1030-2539
<210> 1040
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1040
Figure 109116556-A0202-12-1030-2540
Figure 109116556-A0202-12-1031-2541
<210> 1041
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1041
Figure 109116556-A0202-12-1031-2542
<210> 1042
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1042
Figure 109116556-A0202-12-1032-2543
<210> 1043
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1043
Figure 109116556-A0202-12-1032-2544
Figure 109116556-A0202-12-1033-2545
<210> 1044
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1044
Figure 109116556-A0202-12-1033-2546
<210> 1045
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1045
Figure 109116556-A0202-12-1033-2547
Figure 109116556-A0202-12-1034-2548
<210> 1046
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1046
Figure 109116556-A0202-12-1034-2549
<210> 1047
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1047
Figure 109116556-A0202-12-1035-2550
<210> 1048
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1048
Figure 109116556-A0202-12-1035-2551
Figure 109116556-A0202-12-1036-2552
<210> 1049
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1049
Figure 109116556-A0202-12-1036-2553
<210> 1050
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1050
Figure 109116556-A0202-12-1036-2554
Figure 109116556-A0202-12-1037-2555
<210> 1051
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1051
Figure 109116556-A0202-12-1037-2556
<210> 1052
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1052
Figure 109116556-A0202-12-1038-2557
<210> 1053
<211> 118
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1053
Figure 109116556-A0202-12-1038-2558
Figure 109116556-A0202-12-1039-2559
<210> 1054
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1054
Figure 109116556-A0202-12-1039-2560
<210> 1055
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1055
Figure 109116556-A0202-12-1039-2561
Figure 109116556-A0202-12-1040-2562
<210> 1056
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1056
Figure 109116556-A0202-12-1040-2563
<210> 1057
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1057
Figure 109116556-A0202-12-1040-2564
Figure 109116556-A0202-12-1041-2565
<210> 1058
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1058
Figure 109116556-A0202-12-1041-2566
<210> 1059
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1059
Figure 109116556-A0202-12-1041-2567
Figure 109116556-A0202-12-1042-2568
<210> 1060
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1060
Figure 109116556-A0202-12-1042-2569
<210> 1061
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1061
Figure 109116556-A0202-12-1042-2570
Figure 109116556-A0202-12-1043-2571
<210> 1062
<211> 107
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1062
Figure 109116556-A0202-12-1043-2572
<210> 1063
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1063
Figure 109116556-A0202-12-1044-2574
<210> 1064
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1064
Figure 109116556-A0202-12-1044-2573
<210> 1065
<211> 98
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1065
Figure 109116556-A0202-12-1045-2575
<210> 1066
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1066
Figure 109116556-A0202-12-1045-2576
Figure 109116556-A0202-12-1046-2577
<210> 1067
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1067
Figure 109116556-A0202-12-1046-2578
<210> 1068
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1068
Figure 109116556-A0202-12-1046-2579
Figure 109116556-A0202-12-1047-2580
<210> 1069
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1069
Figure 109116556-A0202-12-1047-2581
<210> 1070
<211> 106
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1070
Figure 109116556-A0202-12-1047-2582
Figure 109116556-A0202-12-1048-2583
<210> 1071
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1071
Figure 109116556-A0202-12-1048-2584
<210> 1072
<211> 112
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1072
Figure 109116556-A0202-12-1048-2585
Figure 109116556-A0202-12-1049-2586
<210> 1073
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 1073
Figure 109116556-A0202-12-1049-2587
<210> 1074
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 1074
Figure 109116556-A0202-12-1049-2588
<210> 1075
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 1075
Figure 109116556-A0202-12-1049-2589
<210> 1076
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 肽
<400> 1076
Figure 109116556-A0202-12-1049-2590
Figure 109116556-A0202-12-1050-2591
<210> 1077
<211> 719
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1077
Figure 109116556-A0202-12-1050-2592
Figure 109116556-A0202-12-1051-2593
Figure 109116556-A0202-12-1052-2594
<210> 1078
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1078
Figure 109116556-A0202-12-1052-2595
Figure 109116556-A0202-12-1053-2596
Figure 109116556-A0202-12-1054-2597
<210> 1079
<211> 719
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1079
Figure 109116556-A0202-12-1054-2598
Figure 109116556-A0202-12-1055-2599
Figure 109116556-A0202-12-1056-2600
<210> 1080
<211> 719
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1080
Figure 109116556-A0202-12-1056-2601
Figure 109116556-A0202-12-1057-2602
Figure 109116556-A0202-12-1058-2603
Figure 109116556-A0202-12-1059-2604
<210> 1081
<211> 718
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1081
Figure 109116556-A0202-12-1059-2605
Figure 109116556-A0202-12-1060-2606
Figure 109116556-A0202-12-1061-2607
Figure 109116556-A0202-12-1062-2608
<210> 1082
<211> 365
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1082
Figure 109116556-A0202-12-1062-2609
Figure 109116556-A0202-12-1063-2610
<210> 1083
<211> 450
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1083
Figure 109116556-A0202-12-1063-2611
Figure 109116556-A0202-12-1064-2612
Figure 109116556-A0202-12-1065-2613
<210> 1084
<211> 486
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1084
Figure 109116556-A0202-12-1065-2614
Figure 109116556-A0202-12-1066-2615
Figure 109116556-A0202-12-1067-2616
<210> 1085
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1085
Figure 109116556-A0202-12-1067-2617
Figure 109116556-A0202-12-1068-2618
<210> 1086
<211> 326
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1086
Figure 109116556-A0202-12-1069-2619
Figure 109116556-A0202-12-1070-2620
<210> 1087
<211> 365
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1087
Figure 109116556-A0202-12-1070-2621
Figure 109116556-A0202-12-1071-2622
<210> 1088
<211> 486
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1088
Figure 109116556-A0202-12-1071-2623
Figure 109116556-A0202-12-1072-2624
Figure 109116556-A0202-12-1073-2625
<210> 1089
<211> 2205
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1089
Figure 109116556-A0202-12-1073-2626
Figure 109116556-A0202-12-1074-2627
<210> 1090
<211> 705
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1090
Figure 109116556-A0202-12-1074-2628
Figure 109116556-A0202-12-1075-2629
<210> 1091
<211> 1026
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1091
Figure 109116556-A0202-12-1075-2630
<210> 1092
<211> 2205
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1092
Figure 109116556-A0202-12-1076-2631
Figure 109116556-A0202-12-1077-2632
<210> 1093
<211> 645
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1093
Figure 109116556-A0202-12-1077-2633
<210> 1094
<211> 719
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1094
Figure 109116556-A0202-12-1077-2634
Figure 109116556-A0202-12-1078-2635
Figure 109116556-A0202-12-1079-2636
Figure 109116556-A0202-12-1080-2637
<210> 1095
<211> 418
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1095
Figure 109116556-A0202-12-1080-2638
Figure 109116556-A0202-12-1081-2639
<210> 1096
<211> 323
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1096
Figure 109116556-A0202-12-1082-2640
Figure 109116556-A0202-12-1083-2641
<210> 1097
<211> 323
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1097
Figure 109116556-A0202-12-1083-2642
Figure 109116556-A0202-12-1084-2644
<210> 1098
<211> 323
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1098
Figure 109116556-A0202-12-1084-2643
Figure 109116556-A0202-12-1085-2645
<210> 1099
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1099
Figure 109116556-A0202-12-1086-2646
<210> 1100
<211> 727
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1100
Figure 109116556-A0202-12-1087-2647
Figure 109116556-A0202-12-1088-2648
Figure 109116556-A0202-12-1089-2649
<210> 1101
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1101
Figure 109116556-A0202-12-1089-2650
Figure 109116556-A0202-12-1090-2651
<210> 1102
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1102
Figure 109116556-A0202-12-1090-2652
Figure 109116556-A0202-12-1091-2653
<210> 1103
<211> 729
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1103
Figure 109116556-A0202-12-1091-2654
Figure 109116556-A0202-12-1092-2655
<210> 1104
<211> 2229
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1104
Figure 109116556-A0202-12-1092-2656
Figure 109116556-A0202-12-1093-2657
<210> 1105
<211> 699
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多核苷酸
<400> 1105
Figure 109116556-A0202-12-1093-2658
<210> 1106
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1106
Figure 109116556-A0202-12-1093-2659
Figure 109116556-A0202-12-1094-2660
<210> 1107
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1107
Figure 109116556-A0202-12-1094-2661
Figure 109116556-A0202-12-1095-2662
<210> 1108
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1108
Figure 109116556-A0202-12-1095-2663
Figure 109116556-A0202-12-1096-2664
<210> 1109
<211> 225
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 人工序列的描述：合成 多肽
<400> 1109
Figure 109116556-A0202-12-1096-2665
Figure 109116556-A0202-12-1097-2924

Claims (203)

  1. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2、和SEQ ID NO：3的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：15、和SEQ ID NO：16的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  2. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  3. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：8、和SEQ ID NO：9的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：21、和SEQ ID NO：22的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  4. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：10、SEQ ID NO：11、和SEQ ID NO：12的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：24、和SEQ ID NO：25的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  5. 如請求項1至4中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：13的胺基酸序列的VH。
  6. 如請求項1至5中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：26的胺基酸序列的VL。
  7. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：28、和SEQ ID NO：29的胺基酸序列的CDR-H1、 CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：40、SEQ ID NO：41、和SEQ ID NO：42的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  8. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、和SEQ ID NO：32的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、和SEQ ID NO：45的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  9. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：33、SEQ ID NO：34、和SEQ ID NO：35的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：46、SEQ ID NO：47、和SEQ ID NO：48的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  10. 一種CD19結合分子，其特異性結合至人CD19並且包含具有SEQ ID NO：36、SEQ ID NO：37、和SEQ ID NO：38的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：49、SEQ ID NO：50、和SEQ ID NO：51的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  11. 如請求項7至10中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：39的胺基酸序列的VH。
  12. 如請求項7至11中任一項所述之CD19結合分子，其包含具有SEQ ID NO：52的胺基酸序列的VL。
  13. 如請求項1至12中任一項所述之CD19結合分子，其係包含以下的多特異性結合分子(MBM)：
    (a)特異性結合至CD19的抗原結合模組1(ABM1)；以及
    (b)特異性結合至不同靶分子的抗原結合模組2(ABM2)，視需要其中該靶分子係人T細胞受體(TCR)複合物的組分。
  14. 如請求項13所述之CD19結合分子，其中ABM2特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分。
  15. 如請求項13所述之CD19結合分子，其係雙特異性結合分子(BBM)。
  16. 如請求項15所述之CD19結合分子，其中ABM2特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分。
  17. 如請求項15或請求項16所述之CD19結合分子，其係二價的。
  18. 如請求項15或請求項16所述之CD19結合分子，其係三價的。
  19. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T1的構型。
  20. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T2的構型。
  21. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T3的構型。
  22. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T4的構型。
  23. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T5的構型。
  24. 如請求項18所述之CD19結合分子，其具有在5.5.2節中被稱為T6的構型。
  25. 如請求項15或請求項16所述之CD19結合分子，其係四價的。
  26. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv1的構型。
  27. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv2的構型。
  28. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv3的構型。
  29. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv4的構型。
  30. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv5的構型。
  31. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv6的構型。
  32. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv7的構型。
  33. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv8的構型。
  34. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv9的構型。
  35. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv10的構型。
  36. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv11的構型。
  37. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv12的構型。
  38. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv13的構型。
  39. 如請求項25所述之CD19結合分子，其具有在5.5.3節中被稱為Tv14的構型。
  40. 如請求項13所述之CD19結合分子，其係包含以下的三特異性結合分子(TBM)：特異性結合至除了CD19之外的靶分子的抗原結合模組3(ABM3)。
  41. 如請求項40所述之CD19結合分子，其中ABM2特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分，並且ABM3特異性結合至(i)人CD2或(ii)腫瘤相關抗原(TAA)。
  42. 如請求項40或請求項41所述之CD19結合分子，其係三價的。
  43. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T1的構型。
  44. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T2的構型。
  45. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T3的構型。
  46. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T4的構型。
  47. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T5的構型。
  48. 如請求項42所述之CD19結合分子，其具有在5.6.1節中被稱為T6的構型。
  49. 如請求項40或請求項41所述之CD19結合分子，其係四價的。
  50. 如請求項49所述之CD19結合分子，其具有在表9中被稱為Tv1至Tv24的構型中的任一種。
  51. 如請求項40或請求項41所述之CD19結合分子，其係五價的。
  52. 如請求項51所述之CD19結合分子，其具有在表10中被稱為Pv1至Pv100的構型中的任一種。
  53. 如請求項40或請求項41所述之CD19結合分子，其係六價的。
  54. 如請求項53所述之CD19結合分子，其具有在表11中被稱為Hv1至Hv330的構型中的任一種。
  55. 如請求項13至54中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM1能夠在與ABM2結合至其靶分子的相同時間結合CD19。
  56. 如請求項55所述之CD19結合分子，其中如果存在ABM3，ABM1能夠在與ABM3結合至其靶分子的相同時間結合CD19。
  57. 如請求項13至56中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM1係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
  58. 如請求項57所述之CD19結合分子，其中ABM1係scFv。
  59. 如請求項57所述之CD19結合分子，其中ABM1係Fab。
  60. 如請求項57所述之CD19結合分子，其中該Fab係Fab異二聚體。
  61. 如請求項57所述之CD19結合分子，其中ABM1係抗CD19抗體或其抗原結合結構域。
  62. 如請求項13至61中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗體、抗體片段、scFv、dsFv、Fv、Fab、scFab、(Fab’)2、單結構域抗體(SDAB)、VH或VL結構域、或駱駝科動物VHH結構域。
  63. 如請求項62所述之CD19結合分子，其中ABM2係scFv。
  64. 如請求項62所述之CD19結合分子，其中ABM2係Fab。
  65. 如請求項13至64中任一項所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係CD3。
  66. 如請求項65所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗CD3抗體或其抗原結合結構域。
  67. 如請求項66所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-1至CD3-130中任一項所述之CDR序列。
  68. 如請求項13至64中任一項所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係TCR-α、TCR-β、或TCR-α/β二聚體。
  69. 如請求項68所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗體或其抗原結合結構域。
  70. 如請求項68所述之CD19結合分子，其中ABM2係Fab。
  71. 如請求項40至54和請求項40至54的從屬範圍內的請求項55至71中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3特異性結合至人CD2。
  72. 如請求項71所述之CD19結合分子，其中ABM3係CD58部分。
  73. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-1的胺基酸序列。
  74. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-2的胺基酸序列。
  75. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-3的胺基酸序列。
  76. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-4的胺基酸序列。
  77. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-5的胺基酸序列。
  78. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-6的胺基酸序列。
  79. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-7的胺基酸序列。
  80. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-8的胺基酸序列。
  81. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-9的胺基酸序列。
  82. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-10的胺基酸序列。
  83. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-11的胺基酸序列。
  84. 如請求項72所述之CD19結合分子，其中該CD58部分包含如在表15中所列出的CD58-12的胺基酸序列。
  85. 如請求項71所述之CD19結合分子，其中ABM3係抗CD2抗體或其抗原結合結構域。
  86. 如請求項40至54和請求項40至54的從屬範圍內的請求項55至71中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3特異性結合至人TAA。
  87. 如請求項86所述之CD19結合分子，其中該TAA係在作為B細胞來源漿細胞的癌性B細胞上表現的TAA。
  88. 如請求項86或請求項87所述之CD19結合分子，其中該TAA係在非漿細胞的癌性B細胞上表現的TAA。
  89. 如請求項86至88中任一項所述之CD19結合分子，其中該TAA選自BCMA、CD20、CD22、CD123、CD33、CLL1、CD138、CS1、CD38、CD133、 FLT3、CD52、TNFRSF13C、TNFRSF13B、CXCR4、PD-L1、LY9、CD200、FCGR2B、CD21、CD23、CD24、CD40L、CD72、CD79a、和CD79b。
  90. 如請求項89所述之CD19結合分子，其中ABM3包含在表16或表17中所列出的結合序列。
  91. 如請求項90所述之CD19結合分子，其具有如在表17A中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈可變區。
  92. 如請求項90所述之CD19結合分子，其具有如在表17B和17E中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由卡巴特定義)。
  93. 如請求項90所述之CD19結合分子，其具有如在表17C和17F中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由喬西亞定義)。
  94. 如請求項90所述之CD19結合分子，其具有如在表17D和17G中所列出的BCMA-1至BCMA-40中任一個的重鏈和/或輕鏈CDR序列(如由卡巴特和喬西亞序列的組合定義)。
  95. 一種軛合物，其包含(a)如請求項1至93中任一項所述之CD19結合分子，以及(b)藥劑。
  96. 如請求項95所述之軛合物，其中該藥劑係治療劑、診斷劑、掩蔽部分、可裂解部分、穩定劑、或其任何組合。
  97. 如請求項96所述之軛合物，其中該藥劑係在5.11節中所述之任何藥劑。
  98. 如請求項96所述之軛合物，其中該藥劑係在5.12節中所述之任何藥劑。
  99. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至放射性核素。
  100. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至烷基化劑。
  101. 如請求項95中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至拓撲異構酶抑制劑，該拓撲異構酶抑制劑視需要係拓撲異構酶I抑制劑或拓撲異構酶II抑制劑。
  102. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DNA損傷劑。
  103. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DNA嵌入劑，視需要係凹槽結合劑，如小凹槽結合劑。
  104. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至RNA/DNA抗代謝物。
  105. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至激酶抑制劑。
  106. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白質合成抑制劑。
  107. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至組蛋白脫乙醯酶(HDAC)抑制劑。
  108. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至線粒體抑制劑，該線粒體抑制劑視需要係線粒體中磷醯基轉移反應的抑制劑。
  109. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至抗有絲分裂劑。
  110. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至美登木素生物鹼。
  111. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至驅動蛋白抑制劑。
  112. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至驅動蛋白樣蛋白質KIF11抑制劑。
  113. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至V-ATP酶(液泡型H+ -ATP酶)抑制劑。
  114. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至促凋亡劑。
  115. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至Bcl2(B細胞淋巴瘤2)抑制劑。
  116. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至MCL1(骨髓細胞白血病1)抑制劑。
  117. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至HSP90(熱休克蛋白90)抑制劑。
  118. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至IAP(細胞凋亡抑制劑)抑制劑。
  119. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至mTOR(雷帕黴素的機制靶標)抑制劑。
  120. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至微管穩定劑。
  121. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至微管去穩定劑。
  122. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至奧瑞斯他汀。
  123. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至朵拉司他汀。
  124. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至MetAP(甲硫胺酸胺基肽酶)。
  125. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CRM1(染色體維持蛋白1)抑制劑。
  126. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DPPIV(二肽基肽酶IV)抑制劑。
  127. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白酶體抑制劑。
  128. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至蛋白質合成抑制劑。
  129. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CDK2(細胞週期蛋白依賴性激酶2)抑制劑。
  130. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至CDK9(細胞週期蛋白依賴性激酶9)抑制劑。
  131. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至RNA聚合酶抑制劑。
  132. 如請求項95至98中任一項所述之軛合物，其中該CD19結合分子軛合至DHFR(二氫葉酸還原酶)抑制劑。
  133. 如請求項95至132中任一項所述之軛合物，其中用連接子將該藥劑附接至TBM，該連接子視需要係可裂解的連接子或不可裂解的連接子。
  134. 如請求項95至133中任一項所述之軛合物，其包含抗CD19結合分子。
  135. 一種藥物組成物，其包含(a)如請求項1至94中任一項所述之CD19結合分子或如請求項95至134中任一項所述之軛合物，和(b)賦形劑。
  136. 一種治療患有CD19相關疾病或障礙的受試者之方法，其包括向該受試者投與有效量的如請求項1至94中任一項所述之CD19結合分子、如請求項95至134中任一項所述之軛合物、或如請求項135所述之藥物組成物。
  137. 如請求項136所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係癌症。
  138. 如請求項137所述之方法，其中該疾病或障礙係漿細胞腫瘤。
  139. 如請求項137所述之方法，其中該疾病或障礙係表現細胞表面CD19的B細胞惡性腫瘤。
  140. 如請求項136所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係自體免疫或炎性障礙。
  141. 如請求項136至140中任一項所述之方法，其進一步包括向該受試者投與至少一種另外的藥劑。
  142. 一種或多種核酸，該一種或多種核酸編碼如請求項1至94中任一項所述之CD19結合分子。
  143. 如請求項142所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸係DNA。
  144. 如請求項143所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸呈一種或多種載體的形式，視需要為表現載體。
  145. 如請求項142所述之一種或多種核酸，該一種或多種核酸係mRNA。
  146. 一種細胞，該細胞被工程化以表現如請求項1至94中任一項所述之CD19結合分子。
  147. 一種細胞，該細胞在一種或多種啟動子的控制下經一種或多種表現載體轉染，該表現載體包含一種或多種編碼如請求項1至94中任一項所述之CD19結合分子的核酸序列。
  148. 如請求項146或請求項147所述之細胞，其中該CD19結合分子的表現受誘導型啟動子的控制。
  149. 如請求項146至148中任一項所述之細胞，其中該CD19結合分子以可分泌形式產生。
  150. 一種產生CD19結合分子之方法，其包括：
    (a)在該CD19結合分子表現的條件下將如請求項146至149中任一項所述之細胞進行培養；以及
    (b)從細胞培養物中回收該CD19結合分子。
  151. 一種CD19結合分子，其係包含以下的三特異性結合分子(TBM)：
    (a)特異性結合至CD19並且包含具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3的抗原結合模組1(ABM1)；
    (b)特異性結合至人T細胞受體(TCR)複合物的組分的抗原結合模組2(ABM2)；以及
    (c)特異性結合至人CD2的抗原結合模組3(ABM3)。
  152. 如請求項151所述之CD19結合分子，其係三價的。
  153. 如請求項151或請求項152所述之CD19結合分子，其中ABM1係Fab。
  154. 如請求項151至153中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fab包含具有SEQ ID NO：13的胺基酸序列的VH和具有SEQ ID NO：26的胺基酸序列的VL。
  155. 如請求項151至154中任一項所述之CD19結合分子，其中該TCR複合物的組分係CD3。
  156. 如請求項155所述之CD19結合分子，其中ABM2係抗CD3抗體或其抗原結合結構域。
  157. 如請求項156所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-21的CDR序列。
  158. 如請求項156或請求項157所述之CD19結合分子，其中ABM2包含CD3-21的重鏈和輕鏈可變序列，如在表12A中所列出。
  159. 如請求項156至158中任一項所述之CD19結合分子，其中該抗CD3抗體或其抗原結合結構域呈scFv的形式。
  160. 如請求項159所述之CD19結合分子，其中ABM2包含在表12A中指定為CD3-21的scFv的胺基酸序列。
  161. 如請求項151至160中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3係CD58部分。
  162. 如請求項151至161中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM3包含如在表15中所列出的CD58-6的胺基酸序列。
  163. 如請求項57、61、67、78中任一項以及請求項151至162中任一項所述之CD19結合分子，其包含Fc結構域。
  164. 如請求項57、61、67、78中任一項以及請求項151至162中任一項所述之CD19結合分子，其包含一起形成Fc異二聚體的第一變體Fc區和第二變體Fc區。
  165. 一種CD19結合分子，其係包含以下的三特異性結合分子(TBM)：
    (a)抗原結合模組1(ABM1)，其特異性結合至CD19並且是包含以下的Fab：(i)具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3；或(ii)具有SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、和SEQ ID NO：32的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、和SEQ ID NO：45的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3；
    (b)抗原結合模組2(ABM2)，其特異性結合至CD3並且包含在表12A中指定為CD3-21的scFv的胺基酸序列；
    (c)抗原結合模組3(ABM3)，其特異性結合至人CD2並且包含如在表15中所列出的CD58-6的胺基酸序列；以及
    (d)Fc結構域。
  166. 一種CD19結合分子，其係包含以下的三特異性結合分子(TBM)：
    (a)抗原結合模組1(ABM1)，其特異性結合至CD19並且是包含以下的Fab：(i)具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3；或(ii)具有SEQ ID NO：30、SEQ ID NO：31、和SEQ ID NO：32的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和 CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：43、SEQ ID NO：44、和SEQ ID NO：45的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3；
    (b)抗原結合模組2(ABM2)，其特異性結合至CD3並且包含在表12A中指定為CD3-129的scFv的胺基酸序列；
    (c)抗原結合模組3(ABM3)，其特異性結合至人CD2並且包含如在表15中所列出的CD58-6的胺基酸序列；以及
    (d)Fc結構域。
  167. 如請求項165或請求項166所述之CD19結合分子，其中ABM1包含具有SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：5、和SEQ ID NO：6的胺基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、和CDR-H3，以及具有SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：18、和SEQ ID NO：19的胺基酸序列的CDR-L1、CDR-L2、和CDR-L3。
  168. 如請求項165至167中任一項所述之CD19結合分子，其中ABM1包含具有SEQ ID NO：13的胺基酸序列的VH和具有SEQ ID NO：26的胺基酸序列的VL。
  169. 如151至168中任一項所述之CD19結合分子，其中該CD19結合分子具有圖2I中所描述並且在5.6.1節中被稱為T2的構型。
  170. 如請求項151至163和165至169中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係Fc異二聚體。
  171. 如請求項164或請求項170所述之CD19結合分子，其中該Fc異二聚體包含杵臼結構(「KIH」)修飾。
  172. 如請求項164、請求項170或請求項171所述之CD19結合分子，其包含指定為Fc 121至Fc 125的Fc修飾中的至少一種。
  173. 如請求項163至172中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域具有改變的效應子功能。
  174. 如請求項173所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域具有與一種或多種Fc受體的改變的結合。
  175. 如請求項163至174中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係包含D265A突變的緘默的IgG1。
  176. 如請求項163至174中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係包含D265A和P329A突變的緘默的IgG1。
  177. 如請求項154至164或168至176中任一項所述之CD19結合分子，其中：
    該抗原結合模組1(ABM1)特異性結合至CD19，該VH融合至恒定的人IgG1結構域CH1並且該VL融合至恒定的人κ序列。
  178. 如請求項163至177中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係人IgG1 Fc結構域，其包含：
    (a)第一CH3結構域，其包含修飾T366W；以及
    (b)第二CH3結構域，其與該第一CH3結構域異二聚化並包含修飾T366S、L368A和Y407V。
  179. 如請求項163至178中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域係人IgG1 Fc結構域，其包含：
    (a)第一CH3結構域，其包含修飾S354C以及
    (b)第二CH3結構域，其包含修飾Y349C。
  180. 如請求項163至179中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域包含在位置233、234、235、236、237、239、265、266、267、268、269、297、299、322、327、328、329、330、331和332(EU編號)的1、2、3、4、5或6個位置處具有突變的SEQ ID NO：1109的人IgG1序列。
  181. 如請求項163至180中任一項所述之CD19結合分子，其中該Fc結構域包含藉由用丙胺酸殘基取代位置265處的天冬胺酸殘基、用丙胺酸殘基取代位置297處的天冬醯胺殘基，並且用丙胺酸殘基取代位置329處的脯胺酸殘基(D265A/N297A/P329A)修飾的人IgG1 Fc結構域。
  182. 如請求項154至164或168至181中任一項該之CD19結合分子，其中a)該VH融合至恒定的人IgG1 CH1結構域並且藉由連接子連接至b)特異性結合至CD3的抗原結合模組2(ABM2)，該抗原結合模組2(ABM2)包含scFv。
  183. 如請求項168至181中任一項所述之CD19結合分子，其中a)該VH融合至恒定的人IgG1 CH1結構域並且藉由連接子連接至b)特異性結合至CD3的抗原結合模組2(ABM2)，該抗原結合模組2(ABM2)包含scFv並且藉由連接子連接至d)Fc結構域。
  184. 如請求項151至183中任一項所述之CD19結合分子，其中該結合分子包含第一半抗體，該第一半抗體包含a)特異性結合至CD19的抗原結合模組1(ABM1)，b)特異性結合至CD3並包含scFv的抗原結合模組2(ABM2)，和d)Fc區；和第二半抗體，該第二半抗體包含特異性結合至人CD2並包含CD58 IgV結構域的抗原結合模組3(ABM3)和d)Fc區，其中該第一半抗體中的Fc區和該第二半抗體中的Fc區形成Fc異二聚體。
  185. 如請求項184所述之CD19結合分子，其中該結合分子包含第一半抗體，該第一半抗體包含含有SEQ ID NO：758的胺基酸序列的重鏈；和含有SEQ ID NO：759的胺基酸序列的輕鏈；以及第二半抗體，該第二半抗體包含SEQ ID NO：760的胺基酸序列。
  186. 如請求項184所述之CD19結合分子，其中該結合分子包含第一半抗體，該第一半抗體包含含有SEQ ID NO：1077的胺基酸序列的重鏈；和含 有SEQ ID NO：759的胺基酸序列的輕鏈；以及第二半抗體，該第二半抗體包含SEQ ID NO：1078或SEQ ID NO：1086的胺基酸序列。
  187. 一種CD19結合分子，其包含：
    (a)第一半抗體重鏈，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：758的胺基酸序列和Fc序列；
    (b)第一半抗體輕鏈，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：759的胺基酸序列；
    (c)第二半抗體，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：760的胺基酸序列和Fc序列。
  188. 一種CD19結合分子，其包含：
    (a)第一多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1077的胺基酸序列；
    (b)第二多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：759的胺基酸序列；以及
    (c)第三多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1078或SEQ ID NO：1086的胺基酸序列。
  189. 一種CD19結合分子，其包含：
    (a)第一多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1079的胺基酸序列；
    (b)第二多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：759的胺基酸序列；以及
    (c)第三多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1078或SEQ ID NO：1086的胺基酸序列。
  190. 一種CD19結合分子，其包含：
    (a)第一多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1077的胺基酸序列；
    (b)第二多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：759的胺基酸序列；以及
    (c)第三多肽，其胺基酸序列包含SEQ ID NO：1086的胺基酸序列。
  191. 一種CD19結合分子，其包含表19-A1、19A-2、19-B、或19C，較佳的是表19C中所示的構建體的序列。
  192. 一種組合，其包含如請求項151至191中任一項所述之CD19結合分子和至少一種另外的治療劑。
  193. 一種藥物組成物，其包含(a)如請求項151至191中任一項所述之CD19結合分子或如請求項192所述之組合，以及(b)藥學上可接受的賦形劑。
  194. 如請求項151至191中任一項所述之CD19結合分子或如請求項192所述之組合或如請求項193所述之組成物，用作藥物。
  195. 如請求項151至191中任一項所述之CD19結合分子或如請求項192所述之組合或如請求項193所述之組成物，用於治療CD19相關疾病或障礙。
  196. 如請求項151至191中任一項所述之抗體或其抗原結合片段或如請求項192所述之組合或如請求項193所述之組成物用於製造藥物的用途，該藥物用於治療CD19相關疾病或障礙。
  197. 一種治療患有CD19相關疾病或障礙的受試者之方法，其包括向該受試者投與有效量的如請求項151至191中任一項所述之CD19結合分子或如請求項192所述之組合或如請求項193所述之組成物。
  198. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係癌症。
  199. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該疾病或障礙係漿細胞腫瘤。
  200. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該疾病或障礙係表現細胞表面CD19的B細胞惡性腫瘤。
  201. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係非何杰金氏淋巴瘤。
  202. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)。
  203. 用於請求項195、或用於請求項196的CD19結合分子、組合或組成物，或如請求項197所述之方法，其中該CD19相關疾病或障礙係柏基特氏淋巴瘤。
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