TW201833321A - 白樺茸的液態培養基及其製備方法 - Google Patents

Abstract

本發明係有關於一種白樺茸之液態培養基，其至少包括：一第一成分，其重量百分比濃度為4%~16%並且包括至少一種含碳化合物；一第二成分，其重量百分比濃度為0.5%~2.6%並且包括至少一種含氮化合物；一中草藥組合物萃取液，其重量百分比濃度為0.6%~3%；以及一樺樹萃取液，其重量百分比濃度為78.5%~95%。

Description

白樺茸的液態培養基及其製備方法

本發明係提供一種白樺茸的培養基及其製備方法，尤指一種可縮短白樺茸產物採收時間之培養基及其製備方法

白樺茸(Inonotus obliquus)是一種民間藥用真菌，主要分佈於俄羅斯及東歐地區。研究顯示白樺茸具有預防乳腺癌、肝癌、子宮癌、胃癌、糖尿病及高血壓的效果，近年來，其營養和藥用價值逐漸引起人民的關注，成為醫藥工業和保健品工業的熱門開發領域。

目前野生的白樺茸價格昂貴，且來源日益枯竭，很難滿足市場的需求。使用人工栽培如固態發酵培養技術，由於現階段栽培困難，產量較低。現有白樺茸之固態培養基，多以木屑和麥麩搭配其他營養物質製備培養基，樺木中雖含有豐富的營養物質，可增加白樺茸菌體中三萜類等有生物活性之物質生成，但是，並無法有效提高白樺茸菌絲體產物的產量。

此外，傳統固態培養基在製作時需要耗費人力及時間成本進行大量翻動，以確保培養基各部份之物質、濕度及溫度均勻分布進而達到最適的培養環境。惟自固態培養基之外觀不易辨別物質均勻分布的程度， 僅能藉由採樣測試等方式進行確認，從而產生額外的成本。再者，若翻動過程不夠完全致使物質、水氣或熱氣的分佈不夠均勻，可能造成白樺茸生長狀況不佳、培養速度較慢或白樺茸無法吸收養分，進而可能使白樺茸產物之產量減少或凋亡的情形發生，降低培養的成功率及生產效率；而若是液態培養基，可使用攪拌的方式輕易達成均勻的培養環境，且液體的養分供應形式，較利於白樺茸菌絲體吸收，亦能藉此達到加快生長速度的效果。

本發明係鑑於前述習知技術之課題者，其目的在於提供一種新穎的白樺茸的液態培養基以及其製備方法，可使用攪拌的方式輕易達成均勻的培養環境，且液體的養分供應形式，較利於白樺茸菌絲體吸收，同時亦能有效率的促進白樺茸吸收營養、提高生長速度，進而縮短採收菌絲體產物的時間，並有效提升產量。

本發明之主要目的係提供一種白樺茸之液態培養基，其至少包括：一第一成分，其重量百分比濃度為4%~16%並且包括至少一種含碳化合物；一第二成分，其重量百分比濃度為0.5%~2.6%並且包括至少一種含氮化合物；一中草藥組合物萃取液，其重量百分比濃度為0.6%~3%；以及一樺樹萃取液，其重量百分比濃度為78.5%~95%。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該中草藥組合物萃取液係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：枸杞、黃耆、黃芩、茯苓、川芎、陳皮及甘草。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該中草藥組合物萃取液 係依下列組成比例與方法調配所製備：每1公升的水添加100公克枸杞、35公克黃耆、20公克黃芩、20公克茯苓、5公克川芎、5公克陳皮及2公克甘草後加熱攪拌至少1小時，最後經過濾收集液體部分。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該樺樹萃取液係依下列組成比例與方法調配所製備：取一樺樹木屑與水相混合後加熱攪拌持續至少1小時，該樺樹木屑之重量百分比濃度為5.5~20.3%，最後經過濾收集液體部分。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該第一成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：蔗糖、果糖及葡萄糖。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該第二成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：綠豆粉、黃豆粉、酵母菌萃取物、蛋白腖、各種胺基酸、尿素、醋酸胺、氯化銨、硝酸銨、硝酸鉀及硝酸鈉。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該液態培養基之酸鹼值介於6至7。

根據本發明之一較佳實施態樣，其中該樺木科植物該樺樹木屑係選自白樺(Betula platyphylla)或紅樺(Betula albo-sinensis)。

本發明另提供了一種白樺茸之液態培養基的製備方法，其步驟包括：(A)製備一樺樹萃取液，其係取一樺樹木屑與水相混合後加熱攪拌持續至少1小時，該樺樹木屑之重量百分比濃度為5.5~20.3%，最後經過濾收集液體部分；(B)製備一中草藥組合物萃取液，其係依下列組成比例與方法調配所製備：每1公升的水添加100公克枸杞、35公克黃耆、20公克黃芩、20公克茯苓、5公克川芎、5公克陳皮及2公克甘草後加熱攪拌至少1小時， 最後經過濾收集液體部分；(C)調製初始液態培養基，將該樺樹萃取液、該中草藥組合物萃取液、作為碳源之一第一成分以及作為氮源之一第二成分進行混合，其中該第一成分之重量百分比濃度為4%~16%，該第二成分之重量百分比濃度為0.5%~2.6%，該中草藥組合物萃取液之重量百分比濃度為0.6%~3%，該樺樹萃取液之重量百分比濃度為78.5%~95%；以及(D)將該初始液態培養基經高壓滅菌處理。

本發明係揭露一種白樺茸之液態培養基配方及其製備方法，並以白樺茸之菌絲體產物的生長速度做為指標，將培養基之成分及其含量作適當的調配，並加入現有之中草藥成分，證實該液態培養基具有促進白樺茸生長之功效。請參考下列之說明，其中之目的係為說明本發明之最佳實施例，而非用以限制本發明之範圍。藉由特定的具體實施例說明本發明之實施方式，熟習此技藝之人士可由本說明書所揭示之內容輕易地了解本發明之其他優點與功效。本發明亦可藉由其他不同的具體實施例加以施行或應用，本說明書中的各項細節亦可基於不同觀點與應用，在不悖離本發明之精神下進行各種修飾與變更。

菌絲體的培養與取得

於本實施例中，菌絲體的培養係選用白樺茸(Inonotus obliquus)菌絲體進行發酵。一般而言，醱酵方法有兩類：固態與液體深層醱酵。前者係將菌絲體接種於含有碳源或氮源之固態培養基(例如堆肥和木屑)進行培養而得到之生菌絲體或乾燥菌絲體。後者，則是使用固定組成之液態培養基，在適當的環境下進行微生物的培養，以製造生質(Biomass)與其他的代謝產物(Metabolite)。本實施例係選擇後者方式培養白樺茸菌絲。

實施例1-白樺茸液態培養基之製備方法

步驟一：製備一樺樹萃取液，其係取一樺樹木屑與水相混合後加熱攪拌持續至少1小時，該樺樹木屑之重量百分比濃度為5.5~20.3%，最後經過濾去除樺樹木屑渣而收集到樺樹萃取液；步驟二：製備一中草藥組合物萃取液，其係依下列組成比例與方法調配所製備：每1公升的水添加100公克枸杞、35公克黃耆、20公克黃芩、20公克茯苓、5公克川芎、5公克陳皮及2公克甘草後加熱攪拌至少1小時，最後經過濾去除殘渣而收集到中草藥組合物萃取液；步驟三：調製初始液態培養基，將該樺樹萃取液、該中草藥組合物萃取液、作為碳源之一第一成分以及作為氮源之一第二成分進行混合並且調整該液態培養基之酸鹼值介於6至7，其中該第一成分之重量百分比濃度為4%~16%，該第二成分之重量百分比濃度為0.5%~2.6%，該中草藥組合物萃取液之重量百分比濃度為0.6%~3%，該樺樹萃取液之重量百分比濃度為78.5%~95%；以及步驟四：將該初始液態培養基經高壓滅菌處理，處理溫度設定為121℃，壓力為1.2公斤/每平方公分(kg/cm²)，滅菌時間15分鐘。前述該第一成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：蔗糖、果糖及葡萄糖；以及該第二成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：綠豆粉、黃豆粉、酵母菌萃取物、蛋白腖、各種胺基酸、 尿素、醋酸胺、氯化銨、硝酸銨、硝酸鉀及硝酸鈉。

實施例2-白樺茸液態培養基

本實施例之白樺茸液態培養基的製備方法如實施例1所述，其中各組成之濃度依照以下所列進行製備，該樺樹萃取液之重量百分濃度為84%，該樺樹萃取液之製作方法為取水與白樺樹(Betula platyphylla)樹皮部分之木屑混合，其中該木屑佔水與木屑之總重量百分比為20%，加熱攪拌持續1小時後，去除木屑渣後得到該樺樹液。該中草藥組合物萃取液之重量百分濃度為2.8%，其主要製作方法為秤重枸杞100公克、黃耆35公克、黃芩20公克、茯苓20公克、川芎5公克、陳皮5公克及甘草2公克，加入1公升的水中，加熱攪拌1.5小時後經過濾而完成製備。作為碳源的第一成分之重量百分濃度為12.7%，其中分別為10.4%之葡萄糖及2.3%之蔗糖所共同組成。作為氮源的第二成分之重量百分濃度為0.5%，其係選用綠豆粉。

實驗例-本發明實施例之白樺茸液態培養基、習知固態培養基以及習知液體培養基對於白樺茸生產量的影響

為證實利用本發明所揭示之白樺茸液體培養基確實具有提高生長速度之功效，分別以前述實施例2之白樺茸液態培養基、習知固態培養基以及習知液態培養基分別培養白樺茸後進行比較，習知液態及固態培養基是以中華民國專利公開號201347661所揭露之擔子菌類液態及固態培養基配方及調製方式所製備者。本實驗例的實驗方法為則以截面積為153.9平方公分之培養瓶裝置進行培養，各培養基組別進行5盤白樺茸培養，並在培養第6~30天測量該產物之重量，計算方式為總重量扣除第1天量得之培養瓶含培養基之重量並且進行比較，實驗結果請參照以下表1。

使用一般培養基培養白樺茸菌絲體，其所需的總生長天數通常超過35日。然而根據上述實驗例，將該白樺茸培養於本發明之白樺茸液態培養基時，其第二十四天之產物重量則達到239.16公克，比起使用習知固態及液態培養基培養的重量195.27公克及199.42公克高出約20%，且以本發明之白樺茸液體培養基培養到第三十天之重量更達到276.58公克，而習知固體及液體培養基培養的重量則為232.22公克及241.34公克，仍分別高出約19.1%以及14.6%。

綜上所述，本發明之液態培養基經證明為最適合用於培養白樺茸之配方，在促進白樺茸菌絲體生長並縮短採收時間的方面具有顯著的效果。

Claims (12)

1. 一種白樺茸的液態培養基，其至少包括：一第一成分，其重量百分比濃度為4%~16%並且包括至少一種含碳化合物；一第二成分，其重量百分比濃度為0.5%~2.6%並且包括至少一種含氮化合物；以及一中草藥組合物萃取液，其重量百分比濃度為0.6%~3%；以及一樺樹萃取液，其重量百分比濃度為78.5%~95%。
2. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，其中該中草藥組合物萃取液係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：枸杞、黃耆、黃芩、茯苓、川芎、陳皮及甘草。
3. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，其中該中草藥組合物萃取液係依下列組成比例與方法調配所製備：每1公升的水添加100公克枸杞、35公克黃耆、20公克黃芩、20公克茯苓、5公克川芎、5公克陳皮及2公克甘草後加熱攪拌至少1小時，最後經過濾收集液體部分。
4. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，該樺樹萃取液係依下列組成比例與方法調配所製備：取一樺樹木屑與水相混合後加熱攪拌持續至少1小時，該樺樹木屑之重量百分比濃度為5.5~20.3%，最後經過濾收集液體部分。
5. 如申請專利範圍第4項所述之液態培養基，其中該樺樹木屑係取自於樺木科(Betulaceae)植物之樹皮所製備。
6. 如申請專利範圍第5項所述之液態培養基，其中該樺木科植物該樺樹木屑 係選自白樺(Betula platyphylla)或紅樺(Betula albo-sinensis)。
7. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，其中該第一成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：蔗糖、果糖及葡萄糖。
8. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，其中該第二成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：綠豆粉、黃豆粉、酵母菌萃取物、蛋白腖、各種胺基酸、尿素、醋酸胺、氯化銨、硝酸銨、硝酸鉀及硝酸鈉。
9. 如申請專利範圍第1項所述之液態培養基，其中該液態培養基之酸鹼值介於6至7。
10. 一種促進白樺茸生長的方法，其包括使用如申請專利範圍第1項所述之液態培養基作為營養源。
11. 一種白樺茸之液態培養基的製備方法，其步驟包括：(A)製備一樺樹萃取液，其係取一樺樹木屑與水相混合後加熱攪拌持續至少1小時，該樺樹木屑之重量百分比濃度為5.5~20.3%，最後經過濾收集液體部分；(B)製備一中草藥組合物萃取液，其係依下列組成比例與方法調配所製備：每1公升的水添加100公克枸杞、35公克黃耆、20公克黃芩、20公克茯苓、5公克川芎、5公克陳皮及2公克甘草後加熱攪拌至少1小時，最後經過濾收集液體部分；(C)調製初始液態培養基，將該樺樹萃取液、該中草藥組合物萃取液、作為碳源之一第一成分以及作為氮源之一第二成分進行混合，其中該第一成分之重量百分比濃度為4%~16%，該第二成分之重量百分比 濃度為0.5%~2.6%，該中草藥組合物萃取液之重量百分比濃度為0.6%~3%，該樺樹萃取液之重量百分比濃度為78.5%~95%；以及(D)將該初始液態培養基經高壓滅菌處理。
12. 如申請專利範圍第11項所述之製備方法，其中該第一成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：蔗糖、果糖及葡萄糖；以及該第二成分係選自一種由以下成份所組成之群組或其組合物：綠豆粉、黃豆粉、酵母菌萃取物、蛋白腖、各種胺基酸、尿素、醋酸胺、氯化銨、硝酸銨、硝酸鉀及硝酸鈉。