式(I)化合物及其鹽在本文稱為「本發明化合物」。 「BD2」係指蛋白質BRD2、BRD3、BRD4或BRDT之BET家族中之任一者的結合域2。 「烷基」係指具有規定數目碳原子之飽和烴鏈。舉例而言，如本文所用之術語「C
1 - 6
烷基」係指具有1至6個碳原子，例如1至3個碳原子的直鏈或分支鏈烷基。舉例而言，術語「C
0 - 3
烷基」係指來自0 (即不存在)至3個碳原子，例如0至2個碳原子的直鏈或分支鏈烷基。代表性分支鏈烷基具有一個、兩個或三個分支鏈。烷基可形成鏈之部分，例如-C
0 - 4
烷基-雜環基係指具有連接至雜環基的0 (即不存在)至4個碳原子的直鏈或分支鏈烷基鏈。「烷基」包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、正丁基、異丁基、異丙基、第三丁基、戊基及己基。 「環烷基」係指環中具有3、4、5、6或7個成員原子的飽和烴單環或雙環或飽和螺連接之雙環烴環。環烷基之實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基及螺[3.3]庚基。 「對映異構過量」(ee)為以百分比表示的一種對映異構體超過其他對映異構體的過量。在外消旋改質中，因為兩種對映異構體以等量存在，所以對映異構過量為零(0% ee)。然而，若一種對映異構體增濃使得其構成95%產物，則對映異構過量將為90% ee(增濃對映異構體之量95%減去其他對映異構體之量5%)。 「對映異構增濃」係指產物的對映異構過量(ee)大於零。舉例而言，「對映異構增濃」係指產物的對映異構過量大於50% ee、大於75% ee及大於90% ee。 如本文所用之「對映異構性純」係指對映異構過量為99%或更高之產物。 「半衰期」係指一定量物質中的一半活體外或活體內轉化成另一化學上不同之物種所需的時間。 「鹵基」係指鹵素基團，例如氟、氯、溴或碘。 「雜芳基」係指具有5或6個成員原子，包括1、2或3個獨立地選自氮、硫及氧之雜原子的單環或雙環基團，其中該基團的至少一部分為芳族的。與分子其餘部分之連接點可以藉由任何適合碳或氮原子連接。「雜芳基」的實例包括(但不限於)呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、異噻唑基、吡啶基、噠嗪基、吡嗪基、嘧啶基以及三嗪基。 「雜原子」係指氮、硫或氧原子。 「雜環基」係指含有4、5、6、7、8、9或10個環成員原子，包括一個雜原子且視情況含有選自氮、氧或硫之另一雜原子的非芳族雜環單環或雙環系統。「雜環基」的實例包括(但不限於)氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基、硫雜環丁烷基、吡咯啶基、吡咯啉基、吡唑啶基、吡唑啉基、咪唑啶基、咪唑啉基、噁唑啉基、噻唑啉基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、1,3-二氧戊環基、哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基、四氫哌喃基、二氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、1,3-二噁烷基、1,4-二噁烷基、1,3-氧硫雜環戊烷基、1,3-氧硫雜環己烷基、1,3-二噻烷基、1,4-氧硫雜環戊烷基、1,4-氧硫雜環己烷基、1,4-二噻烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、六氫-1H-1,4-二氮呯基、氮雜雙環[3.2.1]辛基、氮雜雙環[3.3.1]壬基、氮雜雙環[4.3.0]壬基、氧雜雙環[2.2.1]庚基、1,1-二氧離子基四氫-2H-硫代哌喃基、1,5,9三唑環十二烷基、3-氧雜雙環[3.1.0]己基、3-氮雜雙環[3.1.0]己基、(1r,5s)-3-氧雜雙環[3.1.0]己基以及(1r,5s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己基。「4至7員雜環基」係指含有4、5、6或7個環成員原子，包括一個雜原子且視情況含有選自氮、氧或硫之另一雜原子的非芳族雜環單環或雙環系統。 「成員原子」係指形成鏈或環之原子。若鏈及環內存在超過一個成員原子，則各成員原子共價鍵結至鏈或環中的相鄰成員原子。構成鏈或環上之取代基的原子不為鏈或環中的成員原子。 關於基團之「經取代」指示連接至基團內之成員原子的氫原子經置換。應理解術語「經取代」包括隱含限制條件，此類取代根據經取代之原子及取代基的允許化合價且取代產生穩定化合物(即不會自發地進行諸如重排、環化或消除之轉換的化合物)。在某些實施例中，單個原子可經超過一個取代基取代，只要此類取代根據原子的允許化合價。適合取代基在本文中針對各經取代或視情況經取代之基團定義。 「醫藥學上可接受」係指在合理醫學判斷內適用於與人類及動物的組織接觸但無過度毒性、刺激或其它問題或併發症，與合理益處/風險比相稱的彼等化合物、材料、組合物及劑型。 「醫藥學上可接受之賦形劑」係指賦予醫藥組合物形狀或稠度所涉及的醫藥學上可接受之材料、組合物或媒劑。各賦形劑在共混時必須與醫藥組合物之其他成分相容，使得避免投與患者時將實質上降低式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的功效的相互作用以及將產生不為醫藥學上可接受的醫藥組合物之相互作用。另外，各賦形劑當然必須為醫藥學上可接受的，例如足夠高純度。 「外消旋」係指式(I)化合物的外消旋混合物。 在本說明書全文及隨後的申請專利範圍中，除非本文另有規定，否則措詞「包含(comprise)」及變型(諸如「包含(comprises/comprising)」)應理解為暗示納入所述整體或步驟或整體之群但不排除任何其他整體或步驟或整體或步驟之群。 本發明化合物可以固體或液體形式存在。在固態時，本發明化合物可以結晶或非結晶形式或其混合物形式存在。對於結晶形式之本發明化合物，熟習此項技術者應瞭解可形成醫藥學上可接受之溶劑合物，其中在結晶期間溶劑分子併入至晶格中。溶劑合物可涉及非水溶劑，諸如乙醇、異丙醇、N,N-二甲亞碸(DMSO)、乙酸、乙醇胺以及乙酸乙酯，或其可涉及水作為併入至晶格中的溶劑。水為併入晶格中之溶劑的溶劑合物通常稱為「水合物」。水合物包括化學計量之水合物以及含有可變量之水的組合物。本發明包括所有此類溶劑合物。 應進一步瞭解以結晶形式(包括其多種溶劑合物)存在的某些本發明化合物可呈現多態現象(即在不同結晶結構中出現的能力)。此等不同結晶形式通常稱為「多晶型物」。本發明包括此類多晶型物。多晶型物具有相同化學組成，但在填料、幾何配置及結晶固體狀態之其他描述性特性方面不同。多晶型物因此可具有不同物理特性，諸如形狀、密度、硬度、變形性、穩定性以及溶解特性。多晶型物通常呈現不同熔點、IR譜圖及X射線粉末繞射圖，其可用於進行鑑別。應瞭解可以例如藉由改變或調整製備化合物所用之反應條件或試劑產生不同多晶型物。舉例而言，溫度、壓力或溶劑的改變可產生多晶型物。另外，在某些條件下，一種多晶型物可自發地轉化成另一多晶型物。式(I)化合物之多晶型形式可使用多種習知分析技術表徵及區分，包括(但不限於) X射線粉末繞射(XRPD)圖、紅外(IR)光譜、拉曼光譜(Raman spectra)、差示掃描熱量測定(DSC)、熱解重量分析(TGA)及固態核磁共振(SSNMR)。 根據式(I)之化合物含有一或多個不對稱中心(亦稱為對掌性中心)且因此可以個別對映異構體、非對映異構體或其他立體異構形式或其混合物之形式存在。對掌性中心(諸如對掌性碳原子)亦可存在於諸如烷基之取代基中。當式(I)或本文所述之任何化學結構中存在的對掌性中心的立體化學性未規定時，該結構打算涵蓋任何立體異構體及其全部混合物。因此，含有一或多個對掌性中心之根據式(I)之化合物可用作外消旋修飾，包括外消旋混合物及外消旋物、對映異構增濃混合物或對映異構純個別立體異構體。因此，本發明涵蓋式(I)化合物之全部異構體，經分離諸如以實質上不含其他異構體之個別異構體(即純)或為混合物形式(即外消旋物及外消旋混合物)。經分離以實質上不含另一異構體(亦即純)之個別異構體可經分離以使得存在小於10%，特定言之小於約1%，例如小於約0.1%之另一異構體。 具有單個立構中心之外消旋化合物標示為不具有立體化學性(單鍵)或具有標註(+ / -)或rac。具有兩個或更多個立體中心且相對立體化學性已知之外消旋化合物如結構中所繪示標示為順或反。具有未知絕對立體化學性但已知相對立體化學性之經解析單個對映異構體用(R*或S*)稱為具有所描繪的適當相對立體化學性。 若展現非對映異構體且僅提及相對立體化學性，則使用加粗或散列實線鍵符號(
/
)。若已知絕對立體化學性且化合物為單個對映異構體，則適當時使用加粗或散列楔形符號(
/
)。 含有一或多個不對稱中心的式(I)之化合物的個別立體異構體可藉由熟習此項技術者已知之方法解析。舉例而言，此類解析可(1)藉由形成非對映異構鹽、複合物或其他衍生物；(2)藉由與立體異構體特異性試劑選擇性反應(例如藉由酶促氧化或還原)；或(3)藉由在對掌性環境中(例如在對掌性支撐物(諸如具有結合之對掌性配位體之二氧化矽)上或在對掌性溶劑存在下)進行氣體-液體或液相層析進行。應瞭解，當藉由上述分離程序中之一者將所要立體異構體轉化為另一化學實體時，需要另一步驟來釋放所要形式。或者，特定立體異構體可藉由使用光活性試劑、受質、催化劑或溶劑不對稱合成或藉由不對稱轉型將一種對映異構體轉化為另一對映異構體來合成。 應瞭解，可觀測式(I)化合物互變異構體。與互變異構體之生物活性相關的任何備註應被視為包括兩種互變異構體。 應理解本文提及式(I)化合物及其鹽涵蓋游離鹼或其鹽形式(例如其醫藥學上可接受之鹽)的式(I)化合物。因此，在一個實施例中，本發明針對游離鹼形式之式(I)化合物。在另一實施例中，本發明針對式(I)化合物及其鹽。在另一實施例中，本發明針對式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽。 因為其在藥品中的可能用途，式(I)化合物之鹽適宜為醫藥學上可接受的。適合醫藥學上可接受之鹽可包括酸加成鹽或鹼加成鹽。適合醫藥學上可接受之鹽的評述參看Berge等人,
J . Pharm . Sci .,
66:1-19, (
1977
)。通常，醫藥學上可接受之鹽可藉由按需要使用所需酸或鹼容易地製備。所得鹽可自溶液沈澱且藉由過濾收集，或可藉由蒸發溶劑來回收。 醫藥學上可接受之酸加成鹽可藉由式(I)化合物與適合無機或有機酸(諸如氫溴酸、氫氯酸、硫酸、硝酸、磷酸、丁二酸、順丁烯二酸、乙酸、丙酸、反丁烯二酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸、水楊酸、天冬胺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、萘磺酸(諸如2-萘磺酸)或己酸)，視情況在諸如有機溶劑之適合溶劑中反應，獲得通常例如藉由結晶及過濾或藉由蒸發隨後濕磨分離的鹽來形成。式(I)化合物的醫藥學上可接受之酸加成鹽可包含或為例如氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、丁二酸鹽、順丁烯二酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、反丁烯二酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、麩胺酸鹽、天冬胺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、萘磺酸鹽(例如2-萘磺酸鹽)或己酸鹽。 其他非醫藥學上可接受之鹽(例如甲酸鹽或三氟乙酸鹽)可用於例如分離式(I)化合物，且包括在本發明的範疇內。 本發明在其範疇內包括式(I)化合物之鹽之所有可能的化學計量及非化學計量形式。 自前述內容應瞭解本發明之範疇內包括式(I)化合物及其鹽之溶劑合物、異構體及多晶型形式。 本發明亦包括經同位素標記之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其與上文式(I)中所列之彼等相同，但一或多個原子置換為原子質量或質量數與自然界中通常存在的原子質量或質量數不同的原子。可併入至本發明化合物及其醫藥學上可接受之鹽中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯及碘的同位素，諸如
2
H、
3
H、
11
C、
13
C、
14
C、
15
N、
17
O、
18
O、
31
P、
32
P、
35
S、
18
F、
36
Cl、
123
I以及
125
I。
本發明之說明
在第一態樣中，提供式(I)化合物：
或其鹽 其中： R
1
為-C
1 - 3
烷基或環丙基； R
2
為-C
0 - 3
烷基-環烷基，其中該環烷基視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R
5
基團取代； R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基或-(CH
2
)
p
O-雜環基，其中各雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R
9
基團取代；或 R
2
為H、-CH
3
、視情況經高達五個氟取代之C
2 - 6
烷基、-C
2 - 6
烷基OR
13
、-C
2 - 6
烷基NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
SO
2
C
1 - 3
烷基、-(CH
2
)
m
SO
2
NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
C(O)NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
CN、-(CH
2
)
m
CO
2
R
13
、-(CH
2
)
m
NHCO
2
C
1 - 4
烷基-(CH
2
)
m
NHC(O)C
1 - 4
烷基或-(CH
2
)
n
雜芳基，其中雜芳基視情況經一個或兩個可相同或不同之R
14
基團取代； R
3
為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R
7
基團取代之苯基； R
4
為-C
1 - 3
烷基、-CH
2
OR
6
或-CH
2
F； 各R
5
獨立地為鹵基、-C
0 - 6
烷基-R
8
、-O-C
2 - 6
烷基-R
8
、-CN或-SO
2
C
1 - 3
烷基； R
6
為-H或C
1 - 3
烷基； 各R
7
獨立地為-鹵基、-C
1 - 4
烷基、-C
0 - 3
烷基-OR
10
、-C
0 - 3
烷基-NR
15
R
16
、-C
0 - 3
烷基-CONR
15
R
16
、CN或-SO
2
R
17
； R
8
為-H、-OR
10a
、-NR
18
R
19
或雜芳基； 各R
9
獨立地為鹵基、C
1 - 4
烷基、環丙基、環丁基、-CH
2
CF
3
、-CH
2
CHF
2
、-CH
2
CH
2
F、-OCH
2
CH
2
OR
13
、-C
0 - 3
烷基OR
13
、-C
0 - 3
烷基NR
11
R
12
、-NHCH
2
CH
2
OR
13
、-NHCO
2
R
13
、側氧基、-C(O)R
13
、-C(O)OR
13
或-C(O)NR
11
R
12
； R
10a
為-H、-C
1 - 3
烷基、-C
2 - 3
烷基NR
11
R
12
或-C
2 - 3
烷基OH； R
10
為-H、-C
1 - 3
烷基、-C
2 - 3
烷基NR
15
R
16
或-C
2 - 3
烷基OH； R
11
及R
12
各自獨立地選自-H及-C
1 - 3
烷基；或R
11
及R
12
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C
1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R
13
為-H或C
1 - 4
烷基； 各R
14
獨立地為鹵基、C
1 - 4
烷基、環丙基、環丁基或-OR
13
； R
15
及R
16
各自獨立地選自-H及-C
1 - 3
烷基；或R
15
及R
16
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C
1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R
17
為-C
1 - 3
烷基或-NR
15
R
16
； R
18
及R
19
各自獨立地選自-H、-C(O)OC(CH
3
)
3
、-C
1 - 6
烷基、環烷基、雜環基、-C
2 - 3
烷基NR
13
COC
1 - 3
烷基、C
2 - 3
烷基NR
15
R
16
及-C
2 - 3
烷基-O-C
1 - 3
烷基，其中該-C
1 - 6
烷基及環烷基可視情況經一個、兩個或三個氟取代；或R
18
及R
19
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C
1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； m為選自2、3及4之整數； p為選自2、3及4之整數； n為選自0、1、2、3及4之整數。 在一個實施例中，R
1
為甲基、乙基、丙基、異丙基或環丙基。在另一實施例中，R
1
為甲基。 在一個實施例中，R
2
為-C
0 - 3
烷基-C
3 - 7
環烷基，其中C
3 - 7
環烷基視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R
5
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 3
烷基-C
3 - 7
環烷基，其中C
3 - 7
環烷基為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R
5
基團取代的環丙基、環丁基或環己基。在另一實施例中，R
2
為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R
5
基團取代的環丙基、環丁基或環己基。在另一實施例中，R
2
係選自：
。 *表示連接點 在一個實施例中，R
5
為-C
0 - 6
烷基-R
8
。在另一實施例中，R
5
為甲基、-CH
2
OH、-OH或-CH
2
CH
2
嗎啉基。 在一個實施例中，R
8
為OH、甲基或嗎啉基。 在一個實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基或-(CH
2
)
p
O-雜環基，其中各雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R
9
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R
9
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其為-雜環基、-CH
2
CH
2
-雜環基或-CH
2
CH
2
CH
2
-雜環基。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基係選自氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫-2H-哌喃基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、(1r,5s)-3-氧雜雙環[3.1.0]己基以及(1r,5s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己基，其視情況經一個或兩個可相同或不同之R
9
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基係選自氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫-2H-哌喃基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、(1r,5s)-3-氧雜雙環[3.1.0]己基以及(1r,5s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己基，其視情況經一個或兩個選自甲基-C(O)CH
3
及氟之R
9
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其中視情況經一個或兩個R
9
基團取代之雜環基係選自：
。 *表示連接點 在另一實施例中，R
2
為-C
0 - 4
烷基-雜環基，其中視情況經一個或兩個R
9
基團取代之雜環基為：
*表示連接點 在一個實施例中，p為2或3。 在一個實施例中，R
2
為-H、-CH
3
、視情況經高達五個氟取代之C
2 - 6
烷基、-C
2 - 6
烷基OR
13
、-C
2 - 6
烷基NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
SO
2
C
1 - 3
烷基、-(CH
2
)
m
SO
2
NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
C(O)NR
11
R
12
、-(CH
2
)
m
CN、-(CH
2
)
m
CO
2
R
13
、-(CH
2
)
m
NHCO
2
C(CH
3
)
3
或-(CH
2
)
n
雜芳基，其中雜芳基視情況經一個或兩個可相同或不同之R
14
基團取代。在另一實施例中，R
2
為-H、-CH
3
、C
2 - 6
烷基、-C
2 - 6
烷基OR
13
、-C
2 - 6
烷基NR
11
R
12
或-(CH
2
)
n
雜芳基。在另一實施例中，R
2
為-H、甲基、乙基、丙基、-CH
2
CH
2
OH、-CH
2
CH
2
CH
2
OH、-CH
2
CH(CH
3
)OH、-CH
2
CH
2
OCH
3
、-CH
2
CH
2
CH
2
OCH
3
、-CH
2
CH
2
N(CH
3
)
2
、-CH
2
CH
2
CH
2
N(CH
3
)
2
、-CH
2
CHF
2
或-CH
2
CH
2
吡啶基。 在另一實施例中，R
2
為-(CH
2
)
n
雜芳基，其中雜芳基係選自由以下組成之群：呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、異噻唑基、吡啶基、噠嗪基、吡嗪基、嘧啶基以及三嗪基，該等基團視情況經一個或兩個可相同或不同之R
14
基團取代。在另一實施例中，提供式(I)化合物，其中R
2
為-(CH
2
)
n
雜芳基，其中該雜芳基為視情況經C
1 - 4
烷基取代之吡唑基。 在一個實施例中，n為0、2或3。在一個實施例中，n為0。在另一實施例中，n為2。 在一個實施例中，R
3
為視情況經-OCH
3
或-OCH
2
CH
2
OH取代之苯基。在另一實施例中，R
3
為苯基。 在一個實施例中，R
4
為甲基、-CH
2
F或-CH
2
OH。 在一個實施例中，式(I)化合物為式(IA)化合物
或其鹽，其中R
1
、R
2
、R
3
及R
4
根據式(I)定義。 應理解本發明涵蓋上文所述之取代基的全部組合。 本發明化合物包括實例1至204之化合物及其鹽。本發明化合物包括實例1至108之化合物及其鹽。在一個實施例中，式(I)化合物係選自： (2
R
*,3
R
*)-N
5
-環丁基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-環丁基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N
5
,N
7
, 2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-環丁基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-丙基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(2-(哌啶-4-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌嗪-1-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-乙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
,N
7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1S*,2S*)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-環丙基-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-環丙基-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
,N
7
-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,2
R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
5
,N
7
-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-乙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(羥基甲基)-N
5
-(2-甲氧基乙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-甲氧基乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-羥基乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1
R
,5
S
,6
s
)-6-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
s
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-(二甲基胺基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(3-(二甲基胺基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-環丙基-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(氧雜環丁烷-3-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 2-(2-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(3-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-(N-嗎啉基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(3-甲氧基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2,2-二氟乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 2-(3-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-(嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,2
R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
R
)-2-(3-((2
R
,3
S
)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-((
R
)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-((
S
)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 3-氟-3-(3-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
5
-(3-(3-氟哌啶-3-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
S
*,2
R
*)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1
S
*,2
S
*)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1
S
,2
S
)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
S
)-3-氟-3-(3-((2
R
*,3
S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-(3-((
R
)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
R
)-3-氟-3-(2-((2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-((
R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
-(3-((
R
)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
R
)-3-氟-3-(2-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-((
R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
R
)-2-(3-((2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸
第三丁
酯； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(3-((
R
)-嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (
R
)-2-(2-((2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸
第三丁
酯； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(2-((
R
)-嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-(4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 4,4-二氟-3-(2-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
R
,3
S
)-N
5
-(2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 3,3-二氟-4-(2-((2
R
,3
S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
S
*,3
S
*)-2-(氟甲基)-N
5
-((1
R
,4
S
)-4-羥基環己基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
R
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-2-(氟甲基)-N
5
-((1
R
,3
S
)-3-羥基環丁基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
-((1
R
,2
R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1
R
,5
S
,6
S
)-6-((2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸
第三丁
酯； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-羥基乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
*,3
S
*)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
S
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
S
)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
s
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
*,3
S
*)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1
R
,5
S
,6
s
)-6-((2
R
*,3
S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸
第三丁
酯； (
R
)-3-氟-3-(2-((2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2
S
,3
S
)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-((
R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
R
)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
R
)-N
5
,N
7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
R
)-N
5
-乙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
R
)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
R
)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
R
)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
R
,3
R
)-N
5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2
S
,3
R
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺；以及 (2
R
,3
R
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺或其鹽。 在另一實施例中，化合物係選自 (2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反) 3,3-二氟-4-(2-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸
第三丁
酯； (2R,3S)-N
5
-(2-((S*)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-N
5
-(3-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-N
5
-(2-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反)-
N 5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-
N 7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺；以及 (反)-2-(氟甲基)-
N 7
-甲基-N
5
-(1
S
,2
S
)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺 或其鹽。 在一個實施例中提供式(I)或(Ia)化合物，其中R
1
為甲基，R
2
為3-氧雜雙環[3.1.0]己基，R
3
為苯基且R
4
為-CH
2
F。 在一個實施例中，式(I)化合物為
或其鹽。 在一個實施例中，式(I)化合物為
。 在本發明的第二態樣中，提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。 在本發明的第三態樣中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法中，詳言之指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的治療中。 在本發明的第四態樣中，提供一種治療有需要之個體中指明溴結構域抑制劑的疾病或病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 在本發明的第五態樣中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的藥劑。
用途說明
式(I)化合物及其鹽為溴結構域抑制劑，且因此認為在治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況時具有可能效用。 咸信溴結構域抑制劑適用於治療與全身性或組織發炎、針對感染或低氧之發炎反應、細胞活化及增殖、脂質代謝、纖維化相關的多種疾病或病況及適用於預防及治療病毒感染。 溴結構域抑制劑可適用於治療多種急性或慢性自體免疫及/或發炎病況，諸如類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、骨關節炎、急性痛風、牛皮癬、全身性紅斑性狼瘡症、多發性硬化症、發炎性腸病(克羅恩氏病(Crohn's disease)及潰瘍性結腸炎)、哮喘、慢性阻塞性氣管疾病、肺炎、心肌炎、心包炎、肌炎、濕疹、皮炎(包括異位性皮炎)、禿頭症、白斑病、大皰性皮膚病、腎炎、脈管炎、高膽固醇血症、動脈粥樣硬化、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、休格連氏症候群(Sjögren's syndrome)、涎腺炎、視網膜中央靜脈阻塞、視網膜分支靜脈阻塞、歐文-加斯症候群(Irvine-Gass syndrome)(白內障後及手術後)、色素性視網膜炎、睫狀體扁平部炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜病變、視網膜前膜、囊性黃斑水腫、網膜側毛細管擴張、牽拉性黃斑病變、玻璃體黃斑牽拉症候群、視網膜剝離、視神經視網膜炎、特發性黃斑水腫、視網膜炎、乾眼(乾眼症)、春季角膜結膜炎、異位性角膜結膜炎、葡萄膜炎(諸如前葡萄膜炎、全葡萄膜炎、後葡萄膜炎、葡萄膜炎相關黃斑水腫)、鞏膜炎、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性黃斑水腫、年齡相關之黃斑萎縮、肝炎、胰臟炎、原發性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、阿狄森氏病(Addison's disease)、垂體炎、甲狀腺炎、I型糖尿病、II型糖尿病、巨大細胞動脈炎、腎炎(包括狼瘡性腎炎)、器官受累之脈管炎(諸如絲球體腎炎)、脈管炎(包括巨大細胞動脈炎)、韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)、結節性多動脈炎、白塞氏病(Behcet's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、高安氏動脈炎(Takayasu's Arteritis)、壞疽性膿皮病、器官受累之脈管炎、移植器官之急性排斥反應以及全身性硬化症。 在一個實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為經由調節APO-A1介導之脂質代謝病症，諸如高膽固醇血症、動脈粥樣硬化或阿茲海默氏病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為呼吸道病症，諸如哮喘或慢性阻塞性氣管疾病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為全身性發炎性病症，諸如類風濕性關節炎、骨關節炎、急性痛風、牛皮癬、全身性紅斑狼瘡症、多發性硬化症或發炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結腸炎)。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為多發性硬化症。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為I型糖尿病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為類風濕性關節炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療抑鬱症。 溴結構域抑制劑可適用於治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況，諸如敗血症、急性敗血症、敗血症症候群、敗血性休克、內毒素血症、全身性發炎反應症候群(SIRS)、多器官功能障礙症候群、毒性休克症候群、急性肺損傷、ARDS(成人呼吸窘迫症候群)、急性腎衰竭、爆發性肝炎、燒傷、急性胰臟炎、手術後症候群、類肉瘤病、赫氏反應(Herxheimer reaction)、腦炎、脊髓炎、腦膜炎、瘧疾及與病毒感染(諸如流感、帶狀疱疹、帶狀疱疹、單純性疱疹及冠狀病毒)有關之SIRS。在一個實施例中，涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況為急性敗血症。 溴結構域抑制劑可適用於治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況，諸如心肌梗塞、腦血管缺血(中風)、急性冠狀動脈症候群、腎再灌注損傷、器官移植、冠狀動脈旁路移植、心肺旁路程序、肺、腎、肝、胃腸或周肢栓塞。 溴結構域抑制劑可適用於治療心血管疾病，諸如冠狀動脈疾病(例如心絞痛或心肌梗塞)、肺動脈高血壓、腦血管缺血(中風)、高血壓性心臟病、風濕性心臟病、心肌病、心房顫動、先天性心臟病、心內膜炎、主動脈動脈瘤或外周動脈疾病。 溴結構域抑制劑可適用於治療纖維化病況，諸如特發性肺纖維化、肺纖維化、囊腫性纖維化、進行性大規模纖維化、腎纖維化、肝纖維化、肝硬化、非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、手術後狹窄、瘢痕疙瘩形成、硬皮病(包括硬斑病及全身性硬化症)、心臟纖維化、心房纖維化、心內膜心肌纖維化、陳舊性心肌梗塞、關節纖維化、杜普伊特倫攣縮(Dupuytren's contracture)、縱隔病、骨髓纖維化、佩洛尼氏病(Peyronie's disease)腎源性全身性纖維化、腹膜後纖維化以及黏連性關節囊炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療病毒感染，諸如單純疱疹感染及再活化、唇疱疹、帶狀疱疹感染及再活化、水痘、帶狀皰行疹、人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、人類免疫缺陷病毒(HIV)、子宮頸瘤形成、腺病毒感染(包括急性呼吸道疾病)、痘病毒感染(諸如牛痘或天花)，或非洲豬瘟病毒。在一個實施例中，病毒感染為皮膚或子宮頸上皮的HPV感染。在另一實施例中，病毒感染為潛在HIV感染。 溴結構域抑制劑可適用於治療多種骨骼病症，諸如骨質疏鬆症、骨質減少、骨關節炎及僵直性脊椎炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療癌症，包括血液學癌症(諸如白血病、淋巴瘤及多發性骨髓瘤)、上皮細胞癌(包括肺、乳房或結腸癌)、中線癌瘤或間葉細胞、肝、腎或神經腫瘤。 溴結構域抑制劑可適用於治療一或多種選自以下之癌症：腦癌(神經膠質瘤)、神經膠母細胞瘤、潘納揚-佐納納症候群(Bannayan-Zonana syndrome)、考登病(Cowden disease)、萊爾米特-杜克洛病(Lhermitte-Duclos disease)、乳癌、發炎性乳癌、結腸直腸癌、威姆氏腫瘤(Wilm's tumor)、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、神經管母細胞瘤、結腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、鱗狀細胞癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、肉瘤癌、骨肉瘤、骨骼巨細胞瘤、甲狀腺癌、淋巴母細胞性T細胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、毛細胞白血病、急性淋巴母細胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性嗜中性白細胞白血病、急性淋巴母細胞性T細胞白血病、漿細胞瘤、免疫母細胞性大細胞白血病、套細胞白血病、多發性骨髓瘤、巨核母細胞性白血病、急性巨核細胞性白血病、前髓細胞性白血病、混合譜系白血病、紅白血病、惡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkins lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母細胞性T細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、濾泡性淋巴瘤、神經母細胞瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮內膜癌、腎癌、間皮瘤、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、鼻咽癌、頰癌、口腔癌、GIST (胃腸基質腫瘤)、NUT-中線癌瘤及睪丸癌。 在一個實施例中，癌症為白血病，例如選自急性單核細胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病及混合譜系白血病(MLL)之白血病。在另一實施例中，癌症為NUT-中線癌瘤。在另一實施例中，癌症為多發性骨髓瘤。在另一實施例中，癌症為肺癌，諸如小細胞肺癌(SCLC)。在另一實施例中，癌症為神經母細胞瘤。在另一實施例中，癌症為伯基特氏淋巴瘤。在另一實施例中，癌症為子宮頸癌。在另一實施例中，癌症為食道癌。在另一實施例中，癌症為卵巢癌。在另一實施例中，癌症為乳癌。在另一實施例中，癌症為結腸直腸癌。在另一實施例中，癌症為前列腺癌。在另一實施例中，癌症為耐去勢性前列腺癌。 溴結構域抑制劑可適用於治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病，諸如敗血症、燒傷、胰臟炎、嚴重外傷、出血以及局部缺血。在此實施例中，溴結構域抑制劑將在診斷時投與，以降低SIRS發病率、休克發作、多器官功能障礙症候群(包括急性肺損傷、ARDS、急性腎、肝、心臟及胃腸損傷)之發作以及死亡率。在另一實施例中，在與敗血症、出血、大規模組織破壞、SIRS或MODS (多器官功能障礙症候群)之高風險相關之手術或其他程序之前投與溴結構域抑制劑。在特定實施例中，指明溴結構域抑制劑之疾病或病況為敗血症、敗血症症候群、敗血性休克及內毒素血症。在另一實施例中，溴結構域抑制劑經指示用於治療急性或慢性胰臟炎。在另一實施例中，溴結構域指示用於治療燒傷。 本發明因此提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法中。式(I)化合物或其醫藥學鹽可用於治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況。 本發明因此提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療急性或慢性自體免疫及/或發炎病況。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療類風濕性關節炎。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療心血管疾病。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療纖維化病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療病毒感染。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療骨骼病症。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療癌症。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病。 亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的藥劑。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療急性或慢性自體免疫及/或發炎病況的藥劑。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療類風濕性關節炎之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療心血管疾病的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療纖維化病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療病毒感染之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療癌症之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病的藥劑。 亦提供一種治療有需要之個體中指明溴結構域抑制劑的疾病或病況之方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中提供一種治療有需要個體之急性或慢性自體免疫及/或發炎病況之方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中提供治療有需要個體之類風濕性關節炎的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要之個體中涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要之個體中與局部缺血再灌注損傷有關之病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要個體之心血管疾病的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之纖維化病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要個體之病毒感染的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之癌症的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之與全身性發炎反應症候群有關之疾病的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 適當地，有需要之個體為哺乳動物，尤其人類。 本發明進一步提供一種抑制含有溴結構域之蛋白質的方法，其包含使含有溴結構域之蛋白質與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。 如本文所用，提及「治療」特定疾病或病況包括防止或預防此類疾病或病況。
醫藥組合物 / 投藥途徑 / 劑量 組合物
儘管有可能為了用於療法中，式(I)化合物以及其醫藥學上可接受之鹽可以化學原料形式投與，但通常將活性成分以醫藥組合物形式提供。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽在投與患者之前通常(但非必需)將調配成醫藥組合物。因此，在另一態樣中，提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。式(I)之化合物及醫藥學上可接受之鹽如上文所述。賦形劑在與組合物之其他成分相容且對其接受者無害之意義上必須為「可接受的」。根據本發明之另一態樣，亦提供一種製備醫藥組合物之方法，其包括將式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑混合。醫藥組合物可用於治療本文所述之病況中之任一者。 在另一態樣中，本發明針對用於治療或預防指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 由於式(I)化合物欲用於醫藥組合物中，故容易理解，其各自較佳以實質上純形式提供，例如至少85%純，尤其至少98%純(以重量計之重量百分比)。 醫藥組合物可以每單位劑量含有預定量之活性成分的單位劑型提供。較佳單位劑量組合物為含有日劑量或次劑量或其適當分率之活性成分的彼等組合物。因此此類單位劑量可一天投與超過一次。較佳單位劑型組合物為含有如上文所述之日劑量或次劑量(一天投與超過一次)或其適當分率之活性成分的彼等組合物。 醫藥組合物可適用於藉由任何適當途徑投與，例如藉由經口(包括經頰或舌下)、經直腸、吸入、鼻內、局部(包括經頰、舌下或經皮)、經眼(包括局部、眼內、結膜下、鞏膜上、眼球筋膜下)、經陰道或非經腸(包括皮下、肌肉內、靜脈內或皮內)途徑。此類組合物可藉由藥學技術中已知之任何方法製備，例如藉由使活性成分與載劑或賦形劑結合。 本發明之醫藥組合物可以散裝形式製備及包裝，其中可萃取安全且有效之量的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，接著諸如與粉末或糖漿一起給予患者。或者，本發明之醫藥組合物可製備及包裝成單位劑型，其中各物理離散單位含有式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。當製備成單位劑型時，本發明之醫藥組合物通常可含有例如0.25 mg至1 g，或0.5 mg至500 mg，或1 mg至100 mg式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 本發明之醫藥組合物通常含有一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑或賦形劑通常將調配成適於藉由所需投與途徑投與患者之劑型。舉例而言，劑型包括適於以下之彼等劑型：(1)經口投予，錠劑、膠囊、囊片、丸劑、糖衣錠、粉末、糖漿、酏劑、懸浮液、溶液、乳液、藥囊以及扁膠劑；(2)非經腸投與，諸如無菌溶液、懸浮液、及用於復水之粉末；(3)經皮投與，諸如經皮貼片；(4)直腸投與，諸如栓劑；(5)吸入，諸如氣霧劑、溶液及乾燥粉末；以及(6)局部投與，諸如乳霜、軟膏、乳液、溶液、糊狀物、噴霧、發泡體及凝膠。 適合醫藥學上可接受之賦形劑將視所選特定劑型而變化。另外，可針對可用於組合物中之特定功能來選擇適合醫藥學上可接受之賦形劑。舉例而言，可針對促進製造均勻劑型之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對促進製造穩定劑型之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對在投與個體之後促進式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽自一個器官或身體部分攜帶或輸送至另一器官或身體部分的能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對提高個體順應性之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。 適合醫藥學上可接受之賦形劑包括以下類型之賦形劑：載劑、稀釋劑、填充劑、黏合劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、成粒劑、塗佈劑、濕潤劑、溶劑、共溶劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、遮味劑、著色劑、防結塊劑、保濕劑、螯合劑、塑化劑、黏度提高劑、抗氧化劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑及緩衝劑。熟習此項技術者應瞭解視調配物中存在多少賦形劑及調配物中存在何種其他賦形劑而定，特定醫藥學上可接受之賦形劑可起超過一種功能且可起替代功能。 熟練技術人員具有的所屬領域之知識及技能使其能夠選擇適用於本發明之量的適合醫藥學上可接受之賦形劑。另外，熟習此項技術者可獲得描述醫藥學上可接受之賦形劑且可適用於選擇適合醫藥學上可接受之賦形劑的許多來源。實例包括
Remington ' s Pharmaceutical Sciences ( Mack Publishing Company )
、
The Handbook of Pharmaceutical Additives ( Gower Publishing Limited )
及
The Handbook of Pharmaceutical Excipients ( the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press )
。 本發明之醫藥組合物使用熟習此項技術者已知之技術及方法製備。所屬領域中常用的一些方法描述於
Remington ' s Pharmaceutical Sciences ( Mack Publishing Company )
中。 因此，在另一態樣中，本發明針對製備包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物之方法，其包含混合該等成分。可例如藉由在環境溫度及常壓下混合來製備包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。 在一個實施例中，醫藥組合物適於非經腸投與，尤其靜脈內投與。 在一個實施例中，醫藥組合物經調試以經口投與。 在一個實施例中，醫藥組合物經調試以局部投與。 適於非經腸投與之醫藥組合物包括水性及非水性無菌注射溶液(其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使組合物與預期接受者血液等張之溶質)及水性及非水性無菌懸浮液(其可包括懸浮劑及增稠劑)。組合物可於單位劑量或多劑量容器(例如密封安瓿及小瓶)中提供，且可在冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，其僅需要在臨使用前添加無菌液體載劑(例如注射用水)。可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備即用型注射溶液及懸浮液。 經調試以經口投與之醫藥組合物可呈現為離散單元，諸如膠囊或錠劑；粉末或顆粒；水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；可食用發泡體或乳油甜點；或水包油液體乳液或油包水液體乳液。 舉例而言，關於以錠劑或膠囊形式經口投與，活性藥物組分可與口服、無毒醫藥學上可接受之惰性載劑，諸如乙醇、丙三醇、水及其類似物組合。適於併入錠劑或膠囊中之粉末可藉由將化合物減小為適合之精細尺寸(例如藉由微米尺寸化)且與類似製備之醫藥載劑(諸如可食用碳水化合物，例如澱粉或甘露糖醇)混合來製備。亦可存在調味劑、防腐劑、分散劑及著色劑。 膠囊可藉由製備上述粉末混合物且填充成形之明膠鞘製造。可在填充操作之前向粉末混合物中中添加滑動劑及潤滑劑(諸如膠態二氧化矽、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇)。亦可添加崩解劑或增溶劑(諸如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉)以改良攝取膠囊時之藥物可用性。 此外，當需要或必要時，適合黏合劑、滑動劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、崩解劑及著色劑亦可併入混合物中。適合黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖(諸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然及合成膠(諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及其類似物。用於此等劑型之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類似物。錠劑例如藉由製備粉末混合物，粒化或摻雜，添加潤滑劑及崩解劑及壓製成錠劑而調配。粉末混合物藉由混合化合物(適當搗碎)與上述稀釋劑或鹼，且視情況與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、褐藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯啶酮)、溶液阻滯劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如四級鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)製備。粉末混合物可藉由用黏合劑(諸如糊漿、澱粉漿料、阿卡迪亞膠漿(acadia mucilage)或纖維素或聚合材料之溶液)潤濕且使其通過篩網粒化。作為粒化之替代方案，粉末混合物可穿過壓錠機且結果為不完美地形成之毛坯破碎成顆粒。顆粒可藉助於添加硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油經潤滑以防止黏著至成錠模。潤滑之混合物隨後壓縮為錠劑。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可與自由流動之惰性載劑組合且不經粒化或摻雜步驟直接壓縮成錠劑。可提供由蟲膠之密封塗層組成之透明或不透明保護塗層、糖或聚合材料之塗層及蠟之拋光塗層。可將染料添加至此等包衣中以區分不同單位劑量。 口服流體，諸如溶液、糖漿及酏劑可以單位劑型製備以使得給定量含有預定量之化合物。糖漿可藉由將化合物溶解於適當調味之水溶液中製備，而酏劑係經由使用無毒醇性媒劑製備。懸浮液可藉由將化合物分散於無毒媒劑中調配。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇及聚氧乙烯山梨糖醇醚)、防腐劑、風味添加劑(諸如薄荷油)或天然甜味劑或糖精或其他人工甜味劑及其類似物。 用於經口投與之組合物可經設計以提供改良釋放概況以使得可維持或者控制治療活性劑之釋放。 適當時，用於經口投與之劑量單位組合物可經微膠囊化。組合物可例如藉由將粒狀材料包覆或包埋於聚合物、蠟或其類似物中製備以延長或維持釋放。 對於適於及/或調適於經口投與之組合物，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可呈現例如藉由微米尺寸化獲得的粒徑減小形式。尺寸減小(例如微米尺寸化)之化合物或鹽之較佳粒徑由約0.5至約10微米之D
50
值(例如使用雷射繞射量測)定義。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可以脂質體傳遞系統形式投與，諸如小單層囊泡、大單層囊泡及多層囊泡。脂質體可由多種磷脂，諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼形成。 適於局部投與之醫藥組合物可調配成軟膏、乳膏、懸浮液、乳液、洗劑、粉末、溶液、糊劑、凝膠、發泡體、噴霧劑、氣溶膠或油。此類醫藥組合物可包括習知添加劑，其包括(但不限於)防腐劑、輔助藥物滲透之溶劑、共溶劑、潤膚劑、推進劑、黏度調節劑(膠凝劑)、界面活性劑及載劑。在一個實施例中，提供一種適用於局部投與之醫藥組合物，其包含以組合物之重量計介於0.01-10%之間或介於0.01-1%之間式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 為治療眼睛或其他外部組織(例如口腔及皮膚)，組合物較佳以局部軟膏、乳膏、凝膠、噴霧或泡沫形式施用。當調配為軟膏時，活性成分可與石蠟或水混溶性軟膏基質一起使用。或者，活性成分可藉由水包油乳膏基劑或油包水基劑調配成乳膏。 適用於局部投與至眼睛之醫藥調配物包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮於適合載劑、尤其水性溶劑中。投與眼睛之組合物將具有經眼相容pH及重量莫耳滲透濃度。一或多種經眼可接受pH調節劑及/或緩衝劑可包括於本發明之組合物中，包括酸，諸如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸及鹽酸；鹼，諸如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸檬酸鈉、乙酸鈉及乳酸鈉；及緩衝液，諸如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉及氯化銨。此類酸、鹼及緩衝液可以將組合物之pH維持於經眼可接受範圍內所需的量包括。一或多種經眼可接受鹽可以足以使組合物之重量莫耳滲透濃度進入經眼可接受範圍內之量包括於組合物中。此類鹽包括具有鈉、鉀或銨陽離子及氯化物、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或亞硫酸氫根陰離子之彼等。 經眼傳遞裝置可經設計而以多個界定釋放速率及持續劑量動力學及滲透率控制釋放一或多種治療劑。控制釋放可藉由併入生物可降解/生物可蝕性聚合物(例如聚(乙烯乙烯基)乙酸酯(EVA)、超水解PVA)、羥烷基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚己內酯、聚(乙醇酸)、聚(乳酸)、聚酸酐之不同選項及特性之聚合基質、聚合物分子量、聚合物結晶性、共聚物比率、處理條件、表面修整、幾何形狀、賦形劑添加及將增強藥物擴散、沖蝕、溶解及滲透之聚合塗層之設計獲得。 經眼傳遞之醫藥組合物亦包括原位可膠凝水性組合物。此類組合物包含以當與眼睛或淚液流體接觸時有效促進膠凝之濃度之膠凝劑。適合之膠凝劑包括(但不限於)熱固性聚合物。如本文所用之術語「原位可膠凝」不僅包括當與眼睛或淚液流體接觸時形成凝膠之低黏度液體，且亦包括當投與至眼睛時展現實質上增加之黏度或凝膠硬度之更黏滯液體，諸如半流體及搖變凝膠。參看例如Ludwig
( 2005 ) Adv . Drug Deliv . Rev . 3 ; 57 : 1595 - 639
，出於其用於經眼藥物傳遞之聚合物實例之教示內容之目的而以引用的方式併入本文中。 用於經鼻或吸入投與之劑型可便利地調配為氣溶膠、溶液、懸浮液凝膠或乾粉。 對於適於及/或調適於吸入投與之組合物，較佳地，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽呈現例如藉由微米尺寸化獲得的粒徑減小形式。尺寸減小(例如微米尺寸化)之化合物或鹽之較佳粒徑由約0.5至約10微米之D
50
值(例如使用雷射繞射量測)定義。 例如用於吸入投與之氣霧劑調配物可包含活性物質於醫藥學上可接受之水性或非水性溶劑中的溶液或精細懸浮液。氣霧劑調配物可以單次或多次劑量之量的無菌形式存在於密封容器中，其可呈濾芯或再填充形式以供與霧化裝置或吸入器一起使用。或者，密封容器可為整體施配裝置，諸如單次劑量經鼻吸入器或裝配有定量閥之氣霧劑施配器(定劑量吸入器)，其打算在容器內容物排空之後棄置。 其中劑型包含氣霧劑施配器，其較佳含有適合負壓推進劑(諸如壓縮空氣、二氧化碳)或有機推進劑(諸如氫氟碳(HFC))。適合HFC推進劑包括1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷及1,1,1,2-四氟乙烷。氣霧劑劑型亦可採取霧化泵形式。加壓氣霧劑可含有活性化合物的溶液或懸浮液。此可能需要併入額外賦形劑(例如共溶劑)及/或界面活性劑來提高分散特徵及懸浮液調配物的均質性。溶液調配物亦可需要添加共溶劑，諸如乙醇。 對於適合及/或調適於吸入投與之醫藥組合物，醫藥組合物可為可吸入型乾燥粉末組合物。此類組合物可包含粉末基質(諸如乳糖、葡萄糖、海藻糖、甘露糖醇或澱粉)、式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽(較佳粒徑減小形式，例如微米尺寸化形式)，及視情況存在之效能改良劑，諸如L-白胺酸或另一胺基酸及/或硬脂酸之金屬鹽，諸如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣。較佳地，乾燥粉末可吸入型組合物包含乳糖(例如單水合乳糖)與式(I)化合物或其鹽之乾燥粉末摻合物。此類組合物可使用適合裝置(DISKUS®裝置，由GlaxoSmithKline出售，其例如描述於GB 2242134 A中)投與患者。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可調配成用於自流體施配器(例如具有使用者向流體施配器之泵機制施加力時施配定劑量流體調配物的施配噴嘴或施配孔口之流體施配器)傳遞之流體調配物。此類流體施配器一般具有多個定劑量流體調配物之儲集器，劑量可在依序泵致動時施配。施配噴嘴或孔口可配置成插入至使用者鼻孔中用於向鼻腔中噴霧施配流體調配物。上述類型之流體施配器描述及繪示於國際專利申請案WO-A-2005/044354中。 治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽將取決於許多因素，包括(例如)患者之年齡及體重、需要治療之確切病況及其嚴重程度、調配物性質及投與途徑，且最終將由主治醫師或獸醫酌情處理。在醫藥組合物中，經口或非經腸投與之各劑量單元較佳含有0.01 mg至3000 mg，更佳0.5 mg至1000 mg以游離鹼計算的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。用於經鼻或吸入投與之各劑量單元較佳含有0.001 mg至50 mg，更佳0.01 mg至5 mg以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 醫藥學上可接受之式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可以例如0.01 mg至3000 mg/天、0.5 mg至1000 mg/天或100 mg至2500 mg/天以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的經口或非經腸劑量，或0.001 mg至50 mg/天或0.01 mg至5 mg/天以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的經鼻或吸入劑量的日劑量(用於成人患者)投與。此量可以每天之單一劑量或更通常以每天之多個(諸如兩個、三個、四個、五個或六個)亞劑量給予以使得總日劑量相同。其鹽之有效量可測定為式(I)化合物本身之有效量之一定比例。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可單獨使用或與其他治療劑組合使用。本發明之組合療法因此包含投與至少一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及使用至少一種其他醫藥活性劑。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽及其他治療活性劑可在單個醫藥組合物中一起投與或分別投與，且當分別投與時，此可同時或以任何順序依序進行。將對式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽及其他治療活性劑的量及相對投與時序進行選擇以實現所要組合治療作用。因此，在另一態樣中，提供包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及一或多種其他治療活性劑的組合。 因此，在一個態樣中，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及根據本發明的包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物可與一或多種其他治療劑組合使用或包括一或多種其他治療劑，該等治療劑選自抗生素、抗病毒劑、糖皮質類固醇、蕈毒鹼拮抗劑、β-2促效劑及維生素D3類似物。在另一實施例中，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可與適於治療癌症的另一治療劑組合使用。此類另一治療劑的實例描述於V.T. Devita及S. Hellman (編)之Cancer Principles and Practice of Oncology, 第6版 (2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers中。基於藥物及所涉及的癌症之特殊特徵，一般技術者將能夠辨別有用之試劑的組合。與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合使用的其他治療劑包括(但不限於)抗微管劑(諸如雙萜類及長春花生物鹼)；鉑配合錯合物；烷基化劑(諸如氮芥、氧氮磷環、烷基磺酸酯、亞硝基脲以及三氮烯)；抗生素試劑(諸如安血定製劑、放線菌素以及博來黴素(bleomycin))；拓樸異構酶II抑制劑(諸如表鬼臼毒素)；抗代謝物(諸如嘌呤及嘧啶類似物及抗葉酸化合物)；拓樸異構酶I抑制劑(諸如喜樹鹼；激素及激素類似物)；信號轉導路徑抑制劑(諸如酪胺酸受體抑制劑)；非受體酪胺酸激酶血管生成抑制劑；免疫治療劑(諸如PD-1抑制劑，包括尼沃單抗(nivolumab)及派立珠單抗(pembrolizumab)，及CTLA-4抑制劑，包括伊派利單抗(ipilimumab))；促凋亡劑；表觀遺傳或轉錄調節劑(諸如組蛋白脫乙醯基酶抑制劑)以及細胞週期信號傳導抑制劑。 應瞭解當式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與通常藉由吸入、靜脈內、經口或鼻內途徑投與的其他治療劑組合投與時，所得醫藥組合物可藉由相同途徑投與。或者，組合物之個別組分可藉由不同途徑投與。 本發明之一個實施例涵蓋包含一種或兩種其他治療劑的組合。 所屬領域的技術人員應明確，適當時，其他治療劑可以鹽形式，例如鹼金屬或胺鹽或酸加成鹽；或前藥；或酯，例如低碳烷基酯；或溶劑合物，例如水合物形式使用，以使治療劑之活性及/或穩定性及/或物理特徵(諸如溶解度)最佳化。亦顯而易知，適當時，治療劑可以光學純形式使用。 上文提及之組合可適宜地呈現以便以醫藥組合物形式使用，且因此包含如上文所定義之組合以及醫藥學上可接受之賦形劑之醫藥組合物表示本發明之另一態樣。
合成途徑
本發明化合物可藉由多種方法，包括標準化學方法製得。除非另外指明，否則任何先前定義之變量將繼續具有先前定義之含義。說明性通用合成方法在以下流程中陳述，且容易適於製備其他本發明化合物。特定本發明化合物在實例部分中製備。 式(I)化合物可如下文之任何流程中所述製備。
流程 1 ： 對於上文流程1中所示之步驟而言，以下反應條件可用於獲取式(I)化合物，其中R
4
為甲基： 步驟1：為烷基化且可使用式R
3
-CH=CH-CH
2
Hal之苯烯丙基鹵化物(諸如苯烯丙基氯化物)，在適合鹼(諸如碳酸鉀)及適合催化劑(諸如碘化鉀)存在下，在適合溶劑(諸如丙酮)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟2：為克萊森重排(Claisen rearrangement)，其可在適合高沸點溶劑(諸如N,N-二甲基苯胺)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟3：為醯胺形成且可使用適當一級胺R
1
NH
2
(諸如甲胺)，在適合溶劑(諸如THF與水之混合物)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為環化且可在適合酸(諸如三氟乙酸)中，以適合溫度(諸如回流溫度)進行。在此等條件中，產物通常以順及反異構體之混合物(諸如順及反異構體之1:1混合物)獲得。 步驟5：為溴化，其可使用適合溴化劑(諸如NBS)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟6：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如八羰基二鈷)，在適合式R
2
NH
2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)，在適合三級胺(諸如DMAP)存在下，在適合溶劑(諸如2-甲基四氫呋喃)中，在適合溫度(諸如介於100℃與120℃之間)下，在微波照射下進行。 步驟7：為異構體之視情況分離，其可使用適當層析系統(固相或液相)進行。此步驟可作為式(I)化合物合成之最後步驟進行，但亦可在步驟4或步驟5之後進行。在此情形中，順及反異構體將分別進行溴化及/或胺基羰基化。或者，此步驟可以對掌性方式進行。 同樣應理解，來自步驟4至6之產物可藉由熟習此項技術者已知的方法分離，諸如藉由在對掌性管柱上藉由層析法純化成單個對映異構體。在此情形中，隨後中間物及實例均使用與外消旋物相同之程序以單一對映異構體形式獲得。
流程 2 ： 對於上文方案2中所示之步驟而言，可利用以下反應條件獲取式(1)化合物： 步驟1：為烷基化且可使用式R
3
-CH=CH-CH
2
Hal之苯烯丙基鹵化物(諸如苯烯丙基氯化物)，在適合鹼(諸如碳酸鉀)及適合催化劑(諸如碘化鉀)存在下，在適合溶劑(諸如丙酮)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟2：為克萊森重排，其可在適合高沸點溶劑(諸如N,N-二甲基苯胺)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟3：為醯胺形成且可使用適當一級胺R
1
NH
2
(諸如甲胺)，在適合溶劑(諸如THF與水之混合物)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為環氧化且可使用適當氧化劑(諸如m-CPBA)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。在此等條件中，產物通常以非對映異構體之混合物，諸如非對映異構體之1:1混合物形式獲得。或者，此步驟可以對掌性方式進行。 步驟5：為經環氧化物開環環化隨後苯甲基位置之差向異構化，產生更熱力學穩定之反式異構體以等於或高於順式異構體之比例存在的異構體混合物。反式/順式異構體之此比率可大於95/5。此反應可使用適當鹼(諸如氫氧化鉀)，在適合溶劑(諸如DMSO與水之混合物)中，在適合溫度(諸如0℃)下進行。 步驟6：為羰基化反應。此可使用適當一氧化碳來源(諸如一氧化碳氣體)，在適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))、適合配位體(諸如氧雜蒽膦(Xantphos))、適當三級胺(諸如三乙胺)存在下，在適當溶劑(諸如DMF與醇RxOH(其中Rx為C
1 - 6
烷基)之混合物(以諸如2:1之適合比率))中，在諸如70℃之適當溫度下進行。 步驟7：為皂化，其可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在適當溶劑(諸如醇(諸如乙醇)與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟8：為羥基經氟原子取代。此可使用適當氟化劑(諸如脫氧加氟物)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如介於0℃與40℃之間)下進行。 步驟9：為1)由鹵素(諸如碘)取代羥基，其可使用適當鹵素來源(諸如碘)，在三取代之膦(諸如三苯膦)及弱鹼(諸如咪唑)存在下，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行；2)磺酸酯(諸如甲基磺酸酯)之形成。此可使用適當磺醯化劑來源(諸如甲烷磺醯氯)，在三級胺(諸如三乙胺)存在下，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟10：為還原。此可使用適當還原劑(諸如硼氫化鋰(其中X為RSO
2
O-，其中X為C
1 - 6
烷基))，在適合溶劑(諸如THF)中，在適合溫度(諸如介於0℃與室溫之間)下進行。其亦可使用適當氫來源(諸如氫氣)，在適當催化劑(諸如鈀/炭)及足夠鹼(諸如三烷基胺(諸如三乙胺))存在下，在適當溶劑(諸如醇(諸如甲醇))中，在適當溫度(諸如室溫)下進行(其中X為鹵素，諸如碘)。 步驟11：為醯胺形成，其可使用適當活化劑(諸如HATU)，在足夠鹼(諸如三烷基胺(例如三乙胺或二異丙基乙胺)或吡啶)存在下，且使用適當一級胺R
2
NH
2
，在適當溶劑(諸如二氯甲烷或DMF)中，在足夠溫度(諸如室溫)下進行。 步驟12：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如八羰基二鈷)，在適合式R
2
NH
2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)，在適合三級胺(諸如DMAP)存在下，在適合溶劑(諸如2-甲基四氫呋喃)中，在適合溫度(諸如介於100℃與120℃之間)下，在微波照射下進行。 步驟13：為羥基經氟原子取代。此可使用適當氟化劑(諸如全氟-1-丁烷磺醯氟及三氫氟化三乙胺)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，使用適合鹼(諸如DIPEA)且在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟14：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如CO(g))，在適合式R
2
NH
2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃)，在適合胺(諸如2,6,二甲基吡啶)存在下，在適合溶劑(諸如1,4,二噁烷)中，在適合溫度(諸如介於80℃與100℃之間)下，在介於1巴與2巴之間的壓力下進行。 應理解自步驟11或12獲得之化合物在必要時可經進一步改質。詳言之，可能需要自R
2
中存在的胺移除保護基，諸如胺基甲酸第三丁酯保護基。此可藉由使用適當強酸(諸如三氟乙酸)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下實現。可能亦需要脫除R
7
取代基之保護基(諸如苯甲氧基衍生物)來產生相應酚類。此可例如藉由使用氫來源(諸如氫氣)，在足夠催化劑(諸如鈀/碳)存在下，在適當溶劑(諸如醇，例如甲醇)中，在適當溫度(諸如室溫)下實現。 應瞭解，自步驟5開始獲得之全部衍生物均為外消旋的且可藉由熟習此項技術者已知的技術(諸如藉由在對掌性管柱上層析純化)分離成其兩種對映異構體。
流程 3 ： 對於上文方案3中所示之步驟而言，可利用以下反應條件獲取式(I)化合物： 步驟1：為烷基化且可使用適當烷基化劑(諸如炔丙基溴)，使用適當鹼(諸如碳酸鉀)，在足夠溶劑(諸如DMF)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟2：為環化且可使用適當催化劑(諸如六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二-第三丁基膦]金(I))，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟3：為皂化且可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在足夠溶劑(諸如THF、甲醇與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為醯胺形成。此可藉由醯化劑(諸如醯基氯化物)與適當胺R
1
NH
2
反應進行。醯基氯化物可由相應酸，使用適當氯來源(諸如乙二醯氯)，在催化量之DMF存在下，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下製備。酸氯化物及胺R
1
NH
2
可在適當三級胺(諸如DIPEA)存在下，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下反應。 步驟5：為羰基化。此可使用適當一氧化碳來源(諸如一氧化碳氣體)，在適當醇RxOH(其中Rx為C
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烷基)、適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))、適當配位體(諸如氧雜蒽膦)、適當三級胺(諸如三乙胺)存在下，在足夠溶劑(諸如DMF)中，及在足夠溫度(諸如70℃)下進行。 步驟6：為溴化。此可使用適當溴來源(諸如二溴)，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在足夠溫度(諸如室溫與回流溫度之間)下進行。 步驟7：為芳基-芳基偶合。此可使用適當
酸或酯R
3
PhB(ORy)
2
(Ry為H或烷基)(諸如(3-(苯甲氧基)苯基)
酸)，在足夠催化劑(諸如乙酸鈀(II))、足夠配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)及適當鹼(諸如碳酸鉀)存在下，在足夠溶劑(諸如THF)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟8：為氫化，其可使用足夠氫來源(諸如二氫氣體)，在適當壓力(諸如70巴)下，在足夠催化劑(諸如鈀/炭)存在下，在適當溫度(諸如70℃)下，在足夠溶劑(諸如MeOH)中進行。 步驟9：為差向異構化步驟且可在適當鹼(諸如DBU)存在下，在適當溶劑(諸如CH
3
CN)中且在足夠溫度(諸如100℃)下進行。 步驟10：為皂化，其可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在適當溶劑(諸如醇(諸如乙醇)與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟11：為醯胺形成，其可使用適當活化劑(諸如HATU)，在足夠鹼(諸如三烷基胺(例如三乙胺或二異丙基乙胺)或吡啶)存在下，且使用適當一級胺R
2
NH
2
，在適當溶劑(諸如二氯甲烷或DMF)中，在足夠溫度(諸如室溫)下進行。
實例 通用 方法 總體實驗細節
全部溫度均以℃為單位。 如本文所用，此等製程、流程及實例中使用之符號及定則符合當代科學文獻中使用之彼等，例如
Journal of the American Chemical Society
。除非另外指出，否則所有起始物質均獲自商業供應商且未經進一步純化即使用。特定言之，以下縮寫可用於實例及整個說明書中：
縮寫
AcOH 乙酸 BBr
3
三溴化硼 BOC/Boc 第三丁氧羰基 Boc
2
O 二碳酸二第三丁酯 BuLi 丁基鋰 Cs
2
CO
3
碳酸銫 CHCl
3
氯仿 Cobalt carbonyl 八羰基二鈷 CV 管柱體積 DMSO- d
6
氘化二甲亞碸 DCM 二氯甲烷 DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯 DIBAL-H 氫化二異丁基鋁 DIPEA 二異丙基乙胺 DMAP 4-二甲胺基吡啶 DMF 二甲基甲醯胺 DMSO 二甲亞碸 DMSO-d
6
氘化二甲亞碸 DPPA 疊氮磷酸二苯酯 dppb 1,4-雙(二苯膦基)丁烷 EDC 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺 Et
3
N 三乙胺 Et
2
O 乙醚 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 h 小時 HATU 六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲
HCl 鹽酸 HCO
2
H 甲酸 IPA 異丙醇 Isolera Biotage急驟純化系統 KCN 氰化鉀 K
2
CO
3
碳酸鉀 KI 碘化鉀 KOH 氫氧化鉀 LCMS 液相層析-質譜法 LiBH
4
硼氫化鋰 LiOH 氫氧化鋰 M 莫耳(濃度) mCPBA 間氯過氧苯甲酸 MDAP 質量定向自動製備 MeCN 乙腈 MeI 碘甲烷 MeOH 甲醇 2-MeTHF 2-甲基四氫呋喃 MgSO
4
硫酸鎂 min 分鐘 MsCl 甲磺醯氯 MTBE 甲基第三丁基醚 N 標準(濃度) N
2
氮氣 Na
2
CO
3
碳酸鈉 NaI 碘化鈉 NaH 氫化鈉 NaOH 氫氧化鈉 Na(OAc)
3
BH 三乙醯氧基硼氫化鈉 Na
2
SO
4
硫酸鈉 NBS N-溴丁二醯亞胺 NEt
3
三乙胺 NMP N-甲基-2-吡咯啶酮 NUT 睾丸核蛋白 Pd/C 鈀/碳 PPh
3
三苯膦 Ph
3
PO 三苯基氧膦 RBF 圓底燒瓶 Rt 滯留時間 rt 室溫 sat 飽和 SCX Isolute強陽離子交換吸附劑SPE SiO
2
二氧化矽 SNAP Biotage (二氧化矽)急驟層析濾芯 SP4 Biotage急驟純化系統 SPE 固相萃取 TBME 第三丁基甲基醚 Tf
2
O 三氟甲烷磺酸酐 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 TMSCl/TMS-Cl 氯化三甲基矽烷 TLC 薄層層析法 Ts 甲苯磺醯基 UPLC 超高效液相層析法 XantPhos 1,1'-(9,9-二甲基-9H-二苯并哌喃-4,5-二基)雙[1,1-二苯基膦] 以下化合物之名稱已使用化合物命名程式「ACD Name Pro 6.02」或使用ChemDraw Ultra 12.0之命名功能獲得。
LCMS 方法 甲酸法 LC 條件
在Acquity UPLC CSH C18管柱(50 mm × 2.1 mm，i.d. 1.7 µm裝填直徑)上在40℃下進行UPLC分析。 所用溶劑為： A=甲酸於水中之0.1 v/v%溶液 B=甲酸於乙腈中之0.1 v/v%溶液 採用之梯度為：
UV偵測為210 nm至350 nm波長之總計信號。
MS 條件
MS ： Waters ZQ 電離模式： 交替掃描正及負電噴霧 掃描範圍： 100至1000 AMU 掃描時間： 0.27秒 掃描間延遲： 0.10秒
高 pH 法 LC 條件
在Acquity UPLC CSH C18管柱(50 mm × 2.1 mm，i.d. 1.7 µm裝填直徑)上在40℃下進行UPLC分析。 所用溶劑為： A = 10 mM水中之碳酸氫銨，用氨溶液調整至pH 10 B =乙腈 採用之梯度為：
UV偵測為210 nm至350 nm波長之總計信號。
MS 條件
MS ： Waters ZQ 電離模式： 交替掃描正及負電噴霧 掃描範圍： 100至1000 AMU 掃描時間： 0.27秒 掃描間延遲： 0.10秒
TFA 方法 LC 條件
在Acquity UPLC CSH C18管柱(50 mm × 2.1 mm，i.d. 1.7 µm裝填直徑)上在40℃下進行UPLC分析。 所用溶劑為： A = 三氟乙酸於水中之0.1 v/v%溶液 B = 三氟乙酸於乙腈中之0.1 v/v%溶液 採用之梯度為：
UV偵測為210 nm至350 nm波長之總計信號。
MS 條件
MS ： Waters ZQ 電離模式： 交替掃描正及負電噴霧 掃描範圍： 100至1000 AMU 掃描時間： 0.27秒 掃描間延遲： 0.10秒
通用 MDAP 純化方法
下文所列為已用於或可用於化合物純化的質量定向自動製備層析(MDAP)法的實例。
MDAP ( 高 pH ) 。
在Xselect CSH C18管柱(150 mm × 30 mm i.d. 5 μm裝填直徑)上，在環境溫度下，用10 mM水中之碳酸氫銨(使用氨溶液調整至pH 10)(溶劑A)及乙腈(溶劑B)，使用經15或25分鐘介於0與100%溶劑B之間的溶離梯度溶離進行HPLC分析。 UV偵測為210 nm至350 nm波長之平均信號。質譜記錄在使用交替掃描正及負電噴霧之Waters ZQ質譜儀上。電離資料捨入成最接近的整數。
MDAP ( 甲酸 ) 。
在Xselect CSH C18管柱(150 mm × 30 mm i.d. 5 µm裝填直徑)上，在環境溫度下，用0.1%水中之甲酸(溶劑A)及0.1%乙腈中之甲酸(溶劑B)，使用經15或25分鐘介於0與100%溶劑B之間的溶離梯度溶離，進行HPLC分析。 UV偵測為210 nm至350 nm波長之平均信號。質譜記錄在使用交替掃描正及負電噴霧之Waters ZQ質譜儀上。電離資料捨入成最接近的整數。
MDAP ( TFA ) 。
在Xselect CSH C18管柱(150 mm × 30 mm i.d. 5 µm裝填直徑)上，在環境溫度下，用0.1 v/v%水中之三氟乙酸溶液(溶劑A)及0.1 v/v%乙腈中之三氟乙酸溶液(溶劑B)，使用經15或25分鐘介於0與100%溶劑B之間的溶離梯度溶離，進行HPLC分析。 UV偵測為210 nm至350 nm波長之平均信號。質譜記錄在使用交替掃描正及負電噴霧之Waters ZQ質譜儀上。電離資料捨入成最接近的整數。
NMR
在400 MHz或600 MHz NMR機上在302 K下操作光譜。 色譜法之GLOBAL梯度如下(溶劑B極性組分，CV=管柱體積)：10% GLOBAL：3% B持續2 CV，經10 CV 3至13% B，接著13% B持續5 CV；20% GLOBAL：5% B持續2 CV，經10 CV 5至20% B，接著20% B持續5 CV；30% GLOBAL：8% B持續2 CV，經10 CV 8至38% B，接著38% B持續5 CV；40% GLOBAL：10% B持續2 CV，經10 CV 10至50% B，接著50% B持續5 CV；50% GLOBAL：13% B持續2 CV，經10 CV 13至63% B，接著63% B持續5 CV。100% GLOBAL：25% B持續2 CV，經10 CV 25至100% B，接著100% B持續10 CV。
中間物 1 ： 2-( 肉桂基氧基 ) 苯甲酸甲酯 2-羥基苯甲酸甲酯(可購自例如Aldrich，3.8 mL，30 mmol)於丙酮 (100 mL)中之溶液用K
2
CO
3
(8.29 g，60.0 mmol)、KI (0.1 g，0.6 mmol)及(E)-(3-氯丙-1-烯-1-基)苯(可購自例如Aldrich，3.47 mL，36.0 mmol)處理，且所得混合物在回流下攪拌11小時，接著冷卻至室溫。濾出不溶物，用EtOAc沖洗且在真空中濃縮經合併之有機物。將殘餘物分配於Et
2
O與水之間，且分離各層。水相用Et
2
O萃取兩次且經合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色固體狀之2-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(7.12 g，88%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.29 min, [M+H]
+
= 269
中間物 2 ： 2- 羥基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲酸甲酯 使2-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(0.8 g，3 mmol)於N,N-二甲基苯胺(7 mL)中之溶液回流2小時，接著冷卻至室溫且分配於Et
2
O與24-26 w/w% HCl水溶液之間。分離各層，且用Et
2
O萃取水相。合併之有機物用2 N NaOH水溶液洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(100 g管柱，10% GLOBAL梯度，含EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得呈無色油狀之2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(440 mg，55%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.46 min, [M+H]
+
= 269
中間物 3 ： 2- 羥基 -N- 甲基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(5.0 g，19 mmol)於THF (25 mL)中之溶液用甲胺(水中48 w/w%，1 mL)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著在真空中濃縮。將殘餘物分配於DCM與水之間且分離各層。用DCM萃取水相兩次。合併之有機物使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得呈黃色固體狀之2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(4.4 g，88%)，其未經純化即用於下一步驟中。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.20 min, [M+H]
+
= 268
中間物 4 ： N,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(4.4 g，16 mmol)於三氟乙酸(60 mL)中之溶液在80℃下攪拌5小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。使殘餘物與DCM一起共蒸發。藉由矽膠急驟層析法(100 g管柱，50% GLOBAL梯度，含AcOEt之己烷)純化殘餘物(6 g)獲得立體異構體之1:1混合物形式的N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(3 g，68%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.10及1.12 min, [M+H]
+
= 268
中間物 5 ： 5- 溴 -N,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 在室溫下，N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(0.103 g，0.385 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液用NBS (0.082 g，0.46 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得黃色溶液。在30分鐘後添加NBS (0.082 g，0.46 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物16小時，接著用DCM稀釋且用10 w/w%處理硫代硫酸鈉水溶液(20 mL)。劇烈攪拌兩相混合物10分鐘，接著分離各層。水相用DCM萃取兩次且合併之有機物使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得呈淺橙色發泡體狀之5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(130 mg，97%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.25及1.27 min, [M+H]
+
= 346及348 (1 Br)
中間物 6:5- 溴 -2-( 肉桂基氧基 ) 苯甲酸甲酯 向燒瓶中裝入5-溴-2-羥基苯甲酸甲酯(可購自例如Aldrich，52.3 g，226 mmol)、碳酸鉀(50.1 g，362 mmol)、碘化鉀(1.879 g，11.32 mmol)且接著用丙酮(500 mL)填充。所得懸浮液用(E)-(3-氯丙-1-烯-1-基)苯(26.2 mL，272 mmol)處理，隨後在回流下攪拌6小時。在此階段，添加碳酸鉀(20.0 g，145 mmol)及(E)-(3-氯丙-1-烯-1-基)苯(12.0 mL，124 mmol)且混合物回流8小時，接著冷卻至室溫。濾出固體殘餘物且用丙酮洗滌。在真空中濃縮合併之有機物。 將濾出之固體殘餘物分配於水與EtOAc之間且分離各層。獲得之EtOAc用於溶解來自母液(丙酮)之殘餘物。此有機相用水，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得固體殘餘物，其在室內真空下在40℃下乾燥16小時，獲得呈黃色固體狀之5-溴-2-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(80 g，102%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.42 min, [M+H]
+
= 346及348 (1 Br)
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ 7.95 (d,
J
= 2.7 Hz, 1H), 7.56 (dd,
J
= 2.4, 8.8 Hz, 1H), 7.39-7.46 (m, 2H), 7.25-7.38 (m, 3H), 6.94 (d,
J
= 9.0 Hz, 1H), 6.81 (d,
J
= 16.1 Hz, 1H), 6.41 (td,
J
= 5.5, 16.1 Hz, 1H), 4.80 (d,
J
= 5.5 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H)。
中間物 7 ： 5- 溴 -2- 羥基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲酸甲酯 2個燒瓶各自裝入5-溴-2-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(39.5 g，114 mmol)，接著用N,N-二甲基苯胺(250 mL)填充。所得溶液在回流下攪拌3小時，接著冷卻至室溫且合併。所得混合物添加至Et
2
O (1000 mL)與24-26 w/w% HCl水溶液(900 mL)之冰冷的混合物中。添加完成之後，添加EtOAc (500 mL)且分離各層。水相用EtOAc萃取兩次。合併之有機物用2 N HCl水溶液、水接著鹽水連續洗滌，接著經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈黃色油狀物之5-溴-2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(72 g，90%)，其未經純化即用於下一步驟中。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.57 min, [M+H]
+
= 346及348 (1 Br)
中間物 8 ： 5- 溴 -2- 羥基 -N- 甲基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，5-溴-2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(72.0 g，207 mmol)於THF (250 mL)中之溶液用甲胺(水中40 w/w%，90 mL，1.0 mol)處理且所得混合物在此溫度下攪拌16小時，接著在真空中濃縮。將殘餘物分配於DCM與水之間且分離各層。水相用DCM萃取兩次且合併之有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(780 g管柱，梯度(含EtOAc之己烷)：5% (2CV)、5至35% (經10 CV), 35% (5 CV))純化殘餘物獲得呈褐色發泡體狀之5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(44.6 g，62%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.26 min, [M+H]
+
= 345及347 (1 Br)
中間物 9 ： 5- 溴 -2- 羥基 -N- 甲基 -3-( 環氧乙烷 -2- 基 ( 苯基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(36.6 g，106 mmol)於DCM (300 mL)中之溶液用mCPBA (＜ 77 w/w%，52.1 g，211 mmol)處理且所得混合物在此溫度下攪拌48小時。混合物接著分配於DCM與飽和NaHCO
3
水溶液(200 mL)與五水合硫代硫酸鈉(52.5 g，211 mmol)於水(100 mL)中之混合物之間。劇烈攪拌兩相混合物20分鐘，接著分離各層。用DCM萃取水相兩次且合併之有機物用飽和NaHCO
3
水溶液，接著用水洗滌三次，接著經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色發泡體狀之5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(非對映異構體之1:1混合物，37.4 g，98%)，其未經純化即用於下一步驟中。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.02及1.04 min，[M+H]
+
= 362及364 (1 Br)
中間物 10 ： ( 反 )-5- 溴 -2-( 羥基甲基 )-N- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 使用冰浴將5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(37.4 g，103 mmol)於DMSO (150 mL)及水(40 mL)中之溶液冷卻至0℃，接著用氫氧化鉀(11.6 g，207 mmol)於水(40 mL)中之冰冷卻之溶液處理。在此溫度下攪拌所得黑色溶液7小時，接著留在冰箱(-20℃)中持續16小時。接著將混合物升溫至0℃且進一步攪拌2小時，隨後用乙酸(13.6 mL，237 mmol)處理。接著用水及EtOAc稀釋混合物且分離各層。用EtOAc萃取水相三次且合併之有機物用水，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。用Et
2
O濕磨所獲得的殘餘物且濾出所形成的沈澱物，用Et
2
O沖洗且在40℃下在室內真空下乾燥2小時，獲得呈白色固體狀之(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(25 g，67%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.04 min, [M+H]
+
= 362及364 (1 Br)
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ 7.96 (q,
J
= 4.6 Hz, 1H), 7.73 (dd,
J
= 0.7, 2.2 Hz, 1H), 7.15-7.42 (m, 6H), 5.50 (br. s., 1H), 4.82 (ddd,
J
= 3.5, 4.9, 7.1 Hz, 1H), 4.61 (d,
J
= 7.1 Hz, 1H), 3.63-3.82 (m, 2H), 2.86 (d,
J
= 4.6 Hz, 3H)。
中間物 11 ： ( 反 )-2-( 羥基甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸甲酯 將(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(22.5 g，62.1 mmol)溶解於DMF (200 mL)及MeOH (100 mL)中，接著添加氧雜蒽膦(3.6 g，6.2 mmol)。溶液經氮氣脫氣且添加Pd(OAc)
2
(1.4 g，6.2 mmol)及Et
3
N (26.0 mL，186 mmol)。混合物用一氧化碳淨化，接著安裝充滿一氧化碳的氣球且在70℃下加熱混合物16小時。將混合物冷卻至室溫，用水(600 mL)稀釋，接著用EtOAc (2 × 300 mL)萃取。合併之有機物用水(2 × 200 mL)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠層析(340 g管柱，梯度：0-25%EtOAc中的EtOH)純化殘餘物獲得呈淺黃色固體狀之(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(10.4 g，49%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 342
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ 8.34 (d,
J
= 1.2 Hz, 1H), 7.91 (q,
J
= 4.6 Hz, 1H), 7.54-7.58 (m, 1H), 7.24-7.41 (m, 5H), 5.26 (t,
J
= 6.1 Hz, 1H), 4.93 (ddd,
J
= 3.4, 4.6, 7.6 Hz, 1H), 4.65 (d,
J
= 7.6 Hz, 1H), 3.80-3.88 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.68-3.76 (m, 1H), 2.89 (d,
J
= 4.6 Hz, 3H)。
中間物 12 ： (2S
,3S
)-2-( 羥基甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸甲酯 將52 g (反)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯分批溶解於EtOH中，且在Chiralpak IC 30 mm × 25 cm管柱(用50% EtOH/庚烷溶離(200 mg/1.5 mL注射))上純化。收集第一溶離異構體且堆積在一起獲得呈淺黃色固體狀之(2S,3S)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(21.28 g，82%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 342
中間物 13 ： (2S
,3S
)-2-( 羥基甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，向(2S,3S)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(682 mg，2.00 mmol)於水(5 mL)、THF (5 mL)及MeOH (5 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰(191 mg，7.99 mmol)。在此溫度下攪拌所得懸浮液3小時，接著真空移除大部分溶劑。將固體殘餘物溶解於最少量之水中，且用25 w/w% HCl水溶液(5 mL)處理溶液，形成濃稠白色懸浮液。固體經Celite
®
過濾，用水洗滌若干次且在室內真空下乾燥獲得(2S,3S)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(700 mg，107%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.75 min, [M+H]
+
= 328
中間物 14 ： (2S
,3S
)-2-( 碘甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸甲酯 在氮氣下，碘(178 mg，0.703 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用三苯膦(200 mg，0.762 mmol)及1H-咪唑 (51.9 mg，0.762 mmol)處理。所得懸浮液在室溫下攪拌10分鐘，接著用(2S,3S)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(200 mg，0.586 mmol)處理。所得懸浮液在室溫下攪拌14小時，接著用水(2 × 10 mL)洗滌，使用相分離器乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0至100% EtOAc之己烷)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(碘甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(210 mg，79%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.23 min, [M+H]
+
= 452
中間物 15 ： (2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸甲酯 (2S,3S)-2-(碘甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(220 mg，0.488 mmol)於MeOH (50 mL)中之溶液用Et
3
N (0.136 mL，0.975 mmol)處理且所得混合物在1 mL/min下在充滿模式之H-Cube中經Pd/C催化劑車(catcart)氫化。接著在真空中濃縮溶離劑。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：0至100%己烷中的EtOAc)純化殘餘物獲得(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(89 mg，56%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.15 min, [M+H]
+
= 326
中間物 16 ： (2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，用2N NaOH水溶液(10 mL，20 mmol)處理(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(1.4 g，4.3 mmol)於EtOH (20 mL)中之溶液，且在此溫度下攪拌所得混合物16小時。接著蒸發溶劑至一半體積，且混合物用2N HCl水溶液(11 mL，22 mmol)處理，接著用DCM (2 × 30 mL)萃取。合併之有機物使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(1.3 g，97%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.69 min, [M+H]
+
= 312
中間物 17 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸甲酯 在氮氣下使用冰浴冷卻(2S,3S)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(3.10 g，9.08 mmol)於DCM (50 mL)中之溶液，接著用脫氧加氟物(8.40 mL，22.7 mmol)逐滴處理。所得混合物在0℃下攪拌2小時，在40℃攪拌18小時，接著冷卻至室溫。混合物用DCM (50 mL)稀釋，接著小心地添加至飽和NaHCO
3
水溶液(200 mL)中。在室溫下攪拌兩相混合物30分鐘且分離各層。水相用DCM (50 mL)萃取且合併之有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠層析法(50 g管柱，梯度：含0至100% EtOAc之己烷)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(2.2 g，71%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.07 min, [M+H]
+
= 344
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ 8.32 (d,
J
= 2.0 Hz, 1H), 7.93 (q,
J
= 4.6 Hz, 1H), 7.57-7.61 (m, 1H), 7.27-7.42 (m, 5H), 5.13-5.27 (m, 1H), 4.97 (dd,
J
= 2.4, 11.0 Hz, 1H), 4.80-4.89 (m, 1H), 4.66-4.76 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 2.88 (d,
J
= 4.6 Hz, 3H)
中間物 18 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(2.2 g，6.4 mmol)於EtOH (20 mL)及THF (20 mL)中之溶液用2N NaOH水溶液(10 mL，20 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物18小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於水(50 mL)中，且接著用2 N HCl水溶液將溶液酸化至pH 2。所得混合物用DCM (2 × 50 mL)萃取且合併之有機物使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(2.1 g，100%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.91 min, [M+H]
+
= 330
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ 8.85 (q,
J
=14.6 Hz, 1H), 7.82-7.85 (m, 1H), 7.31-7.48 (m, 4H), 7.17-7.24 (m, 2H), 5.01-5.12 (m, 1H), 4.87-4.93 (m, 0.5H), 4.73-4.81 (m, 1H), 4.65 (dd,
J
= 5.0, 10.9 Hz, 0.5H), 4.58 (d,
J
= 8.1 Hz, 1H), 3.09 (d,
J
= 4.6 Hz, 3H), 未見OH。
中間物 19 ： (E
)-3-(3- 甲氧基苯基 ) 丙烯酸甲酯 在室溫下，2-(三苯基亞磷烷基)乙酸甲酯(36.8 g，110 mmol)於甲苯(300 mL)中之懸浮液用3-甲氧基苯甲醛(可購自例如Aldrich，12.2 mL，100 mmol)處理，且所得混合物在100℃下攪拌3.5小時，接著冷卻至室溫且保持60小時。濾出所形成之晶體(Ph
3
PO)且真空移除大部分溶劑。將殘餘物懸浮於Et
2
O中且攪拌30分鐘。濾出不溶物(Ph
3
PO)且真空濃縮有機物。藉由矽膠急驟層析法(330 g管柱，20% GLOBAL梯度(己烷中之AcOEt))純化所獲得之殘餘物，獲得呈無色油狀之(E)-3-(3-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(17.3 g，90%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.08 min, [M+H]
+
= 193
中間物 20 ： (E
)-3-(3- 甲氧基苯基 ) 丙 -2- 烯 -1- 醇 在-78℃下，在氮氣下，(E)-3-(3-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(12.6 g，65.6 mmol)於甲苯(250 mL)中之溶液用DIBAL-H (甲苯中25 w/w%，97 mL，144 mmol)處理15分鐘。在-78℃下攪拌溶液1小時，接著在-50℃下攪拌1小時。溶液接著用EtOAc (20 mL)處理且10分鐘後將所得混合物升溫至室溫。混合物接著添加至羅謝爾鹽水溶液(400 mL中150 g)且劇烈攪拌兩相混合物2小時，接著分離各層。水相用EtOAc萃取兩次，且合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得無色油狀物(殘餘物A，11 g)。 同時，進行第二實驗：在-78℃下，在氮氣下，用DIBAL-H (甲苯中25 w/w%，37.0 mL，55.0 mmol)處理(E)-3-(3-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯(4.8 g，25 mmol)於甲苯(100 mL)中之溶液5分鐘。在-78℃下攪拌溶液20分鐘，接著在-50℃下攪拌30分鐘。溶液接著用EtOAc (10 mL)處理且15分鐘後將所得混合物升溫至室溫。混合物接著添加至羅謝爾鹽水溶液(150 mL中50 g)且劇烈攪拌兩相混合物2小時，接著分離各層。水相用EtOAc萃取兩次，且合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得無色油狀物(殘餘物B，3.96 g)。 合併殘餘物A及B且藉由矽膠急驟層析(100 g管柱，50% GLOBAL梯度，己烷中之EtOAc)純化獲得呈無色油狀之(E)-3-(3-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-醇(13.85 g，93%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+
= 165
中間物 21 ： (E
)-1-(3- 氯丙 -1- 烯 -1- 基 )-3- 甲氧基苯 在0℃下，(E)-3-(3-甲氧基苯基)丙-2-烯-1-醇(7.63 g，46.5 mmol)於EtOH (30 mL)中之溶液用乙醯氯(4.96 mL，69.7 mmol)處理，且將所得混合物升溫至室溫且攪拌20小時。在室溫下進一步添加乙醯氯(4.96 mL，69.7 mmol)且攪拌所得混合物24小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於DCM中且有機相用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色油狀之(E)-1-(3-氯丙-1-烯-1-基)-3-甲氧基苯(8.29 g，98%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.23 min, [M+H]
+
= 183
中間物 22 ： (E
)-5- 溴 -2-((3-(3- 甲氧基苯基 ) 烯丙基 ) 氧基 ) 苯甲酸甲酯 向燒瓶中裝入5-溴-2-羥基苯甲酸甲酯(18.6 g，80.0 mmol)、K
2
CO
3
(16.7 g，121 mmol)及KI (0.667 g，4.02 mmol)，接著用丙酮 (150 mL)填充且所得懸浮液用(E)-1-(3-氯丙-1-烯-1-基)-3-甲氧基苯(14.7 g，80.0 mmol)於丙酮(50 mL及20 mL沖洗)處理。所得混合物回流9小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮獲得殘餘物A。 同時，進行第二實驗：向燒瓶中裝入5-溴-2-羥基苯甲酸甲酯(10.5 g，45.4 mmol)、K
2
CO
3
(9.41 g，68.1 mmol)及KI (0.377 g，2.27 mmol)，接著填充丙酮(120 mL)且所得懸浮液用含(E)-1-(3-氯丙-1-烯-1-基)-3-甲氧基苯(8.29 g，45.4 mmol)之丙酮(50 mL及20 mL沖洗)處理。所得混合物回流9小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮獲得殘餘物B。 將殘餘物A及B混合在一起且分配於EtOAc與水之間且分離各層。水相用EtOAc萃取兩次，且用鹽水洗滌經合併之有機相，經MgSO
4
乾燥，且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(750 g管柱，20% GLOBAL梯度(己烷中之EtOAc))純化所獲得之殘餘物，獲得呈淺黃色油狀之(E)-5-溴-2-((3-(3-甲氧基苯基)烯丙基)氧基)苯甲酸甲酯(30 g，63%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.43 min, [M+H]
+
= 377及379 (1 Br)
中間物 23 ： 5- 溴 -2- 羥基 -3-(1-(3- 甲氧基苯基 ) 烯丙基 ) 苯甲酸甲酯 5-溴-2-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(32 g，92 mmol)於N,N-二甲基苯胺(200 mL)中之溶液回流2.5小時，接著冷卻至室溫且經2分鐘添加至HCL水溶液(25 w/w%，400 mL)及EtOAc (500 mL)的冰冷之混合物上。分離各層，且用EtOAc萃取水相3次。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(330 g管柱，20% GLOBAL梯度，己烷中之EtOAc)純化殘餘物獲得呈淺黃色油狀之5-溴-2-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯基)烯丙基)苯甲酸甲酯(26.3 g，88%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.57 min, [M+H]
+
= 377及379 (1 Br)
中間物 24 ： 5- 溴 -2- 羥基 -3-(1-(3- 甲氧基苯基 ) 烯丙基 )-N- 甲基苯甲醯胺 在室溫下，5-溴-2-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯基)烯丙基)苯甲酸甲酯(26.3 g，69.7 mmol)於THF (120 mL)中之溶液用甲胺(水中40 w/w%，30.2 mL，349 mol)處理且所得混合物在此溫度下攪拌16小時，接著在真空中濃縮。使殘餘物分配於水與EtOAc之間且分離各層。有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色油狀之5-溴-2-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯基)烯丙基)-N-甲基苯甲醯胺(26.2 g，100%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.27 min, [M+H]
+
= 376及378 (1 Br)
中間物 25 ： 5- 溴 -2- 羥基 -3-((3- 甲氧基苯基 )( 環氧乙烷 -2- 基 ) 甲基 )-N- 甲基苯甲醯胺 在室溫下，5-溴-2-羥基-3-(1-(3-甲氧基苯基)烯丙基)-N-甲基苯甲醯胺(26.2 g，69.7 mmol)於DCM (400 mL)中之溶液用mCPBA (＜ 77 w/w%，30 g，122 mmol)處理且攪拌所得溶液16小時。進一步添加mCPBA (＜ 77 w/w%，30 g，122 mmol)且再攪拌所得混合物16小時。再添加mCPBA (＜ 77 w/w%，15 g，61 mmol)且攪拌混合物60小時。最終添加mCPBA (＜ 77%，10 g，40 mmol)且在室溫下攪拌混合物24小時。混合物接著用五水合硫代硫酸鈉(51.9 g，209 mmol)及NaHCO
3
(17.6 g，209 mmol)於水(200 mL)中之溶液處理，且攪拌兩相混合物15分鐘，接著分離各層。水相用飽和NaHCO
3
水溶液(200 mL)稀釋，接著用DCM萃取兩次。合併之有機物用飽和NaHCO
3
水溶液，接著水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈橙色發泡體狀之5-溴-2-羥基-3-((3-甲氧基苯基)(環氧乙烷-2-基)甲基)-N-甲基苯甲醯胺(15.6 g，57%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.03及1.05 min, [M+H]
+
= 392及394 (1 Br)
中間物 26 ： ( 反 )-5- 溴 -2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N- 甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 5-溴-2-羥基-3-((3-甲氧基苯基)(環氧乙烷-2-基)甲基)-N-甲基苯甲醯胺(7.23 g，18.4 mmol)於DMSO (40 mL)及水(10 mL)中之溶液使用冰浴冷卻，接著藉由逐滴添加含KOH (2.07 g，36.9 mmol)之水(10 mL)處理。在此溫度下攪拌所得深紅色混合物7小時，接著用乙酸(2.22 mL，38.7 mmol)處理。用EtOAc萃取所形成的沈澱物及混合物3次。合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，100% GLOBAL梯度(己烷中之AcOEt))純化殘餘物，獲得呈白色發泡體狀之(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(2.9 g，40%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.05 min, [M+H]
+
= 392及394 (1 Br)
中間物 27 ： ( 反 )-2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(0.67 g，1.7 mmol)於DMF (10 mL)及EtOH (10 mL)中之溶液用NEt
3
(0.476 mL，3.42 mmol)、Pd(OAc)
2
(0.038 g，0.17 mmol)及氧雜蒽膦(0.099 g，0.17 mmol)處理。混合物用一氧化碳淨化，接著在70℃下，在CO氛圍(使用氣球)下攪拌2小時，接著冷卻至室溫且用EtOAc (50 mL)稀釋。有機相用水(2 × 30 mL)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物，獲得呈淺黃色油狀之(反)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(370 mg，56%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.00 min, [M+H]
+
= 386
中間物 28 ： ( 反 )-2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，(反)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(360 mg，0.934 mmol)於EtOH (5 mL)中之溶液用2N NaOH水溶液(2.33 mL，4.66 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液2小時，接著濃縮至約一半其初始體積且用水(10 mL)稀釋。此溶液用Et
2
O (10 mL)洗滌，接著使用2 N HCl水溶液酸化至pH 2。藉由過濾收集所形成之沈澱物且在室內真空下在40℃下乾燥16小時，獲得呈無色固體狀之(反)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(320 mg，96%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.57 min, [M+H]
+
= 358
中間物 29 ： 5- 溴 -2-( 丙 -2- 炔 -1- 基氧基 ) 苯甲酸甲酯 在室溫下，5-溴-2-羥基苯甲酸甲酯(25.0 g，108 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液用碳酸鉀(23.9 g，173 mmol)，接著3-溴丙-1-炔(甲苯中80 w/w%，14.0 mL，130 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得褐色混合物16小時。混合物接著用水(100 mL)稀釋，且水相用Et
2
O萃取三次。合併之有機物用水洗滌兩次，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得黃色油狀物，其快速結晶。此殘餘物用Et
2
O濕磨，獲得呈白色固體狀之5-溴-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲酸甲酯(13.8 g，47%)。真空濃縮母液。用Et
2
O/戊烷第二濕磨所獲得之殘餘物獲得呈極淺黃色固體狀之5-溴-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲酸甲酯(9.81 g，34%)。真空濃縮母液。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，20% GLOBAL梯度(己烷中之AcOEt))純化所獲得之殘餘物，獲得呈黃色固體狀之5-溴-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲酸甲酯(3.91 g，13%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.12 min, [M+H]
+
=269及271 (1 Br)
中間物 30 ： 5- 溴 -2- 甲基苯并呋喃 -7- 甲酸甲酯 在室溫下，5-溴-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲酸甲酯(17.6 g，65.4 mmol)於DCM (150 mL)中之溶液用六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二-第三丁基膦]-金(I) (0.759 g，0.981 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物23小時。添加六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二-第三丁基膦]-金(I) (0.100 g，0.129 mmol)且在室溫下攪拌混合物60小時，接著真空濃縮獲得殘餘物A。 在室溫下，5-溴-2-(丙-2-炔-1-基氧基)苯甲酸甲酯(9.80 g，36.4 mmol)於DCM (100 mL)中之溶液用六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二第三丁基膦]-金(I) (0.422 g，0.546 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物23小時。添加六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二第三丁基膦]-金(I) (0.100 g，0.129 mmol)且在室溫下攪拌混合物60小時，接著真空濃縮獲得殘餘物B。 合併殘餘物A及B且藉由矽膠急驟層析(330 g管柱，20% GLOBAL梯度，己烷中之AcOEt)純化獲得呈白色固體狀之5-溴-2-甲基苯并呋喃-7-甲酸甲酯(17.0 g，62%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.26 min, [M+H]
+
=269及271 (1 Br)
中間物 31 ： 5- 溴 -2- 甲基苯并呋喃 -7- 甲酸 向燒瓶中裝入5-溴-2-甲基苯并呋喃-7-甲酸甲酯(17.0 g，63.2 mmol)，接著添加THF (120 mL)，隨後MeOH (20 mL)。接著在室溫下用氫氧化鈉(水中之2N，45 mL，90 mmol)處理溶液，且在此溫度下攪拌所得黃色混合物2小時，接著真空移除大部分溶劑。將殘餘物溶解於水(100 mL)中且溶液用HCl (水中之2N，45 mL，90 mmol)處理。5分鐘後，濾出所形成之白色固體，用水沖洗且在室內真空下，在40℃下乾燥16小時，獲得呈白色固體狀之5-溴-2-甲基苯并呋喃-7-甲酸(16.92 g，105%)。用AcOEt萃取水相。有機相用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈白色固體狀之5-溴-2-甲基苯并呋喃-7-甲酸(0.443 g，3%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.61 min, [M+H]
+
=255及257 (1 Br)
中間物 32 ： 5- 溴 -N,2- 二甲基苯并呋喃 -7- 甲醯胺 在0℃下，5-溴-2-甲基苯并呋喃-7-甲酸(16.1 g，63.2 mmol)於DCM (200 mL)於中之懸浮液用DMF (0.400 mL，5.17 mmol)處理，接著用乙二醯氯(11.1 mL，126 mmol)逐滴處理且在此溫度下攪拌混合物2小時。再添加DMF (0.400 mL，5.17 mmol)，隨後乙二醯氯(1.0 mL，11 mmol)。在室溫下再2小時之後，真空濃縮混合物。殘餘物與甲苯一起共蒸發，接著在溶解於DCM (200 mL)中之前在真空下乾燥。所得溶液冷卻至0℃，接著用DIPEA (16.6 mL，95.0 mmol)，接著甲胺(THF中之2N，63.2 mL，126 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物30分鐘，接著用DCM溶解且用水洗滌。分離各層且用DCM萃取水相。合併之有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈褐色固體狀之5-溴-N,2-二甲基苯并呋喃-7-甲醯胺(17.35 g，102%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.03 min, [M+H]
+
=268及270 (1 Br)
中間物 33 ： 2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 ) 苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，5-溴-N,2-二甲基苯并呋喃-7-甲醯胺(7.00 g，26.1 mmol)於DMF (50 mL)及EtOH (50 mL)中之溶液用Et
3
N (10.9 mL，78 mmol)處理，且所得混合物經氮氣脫氣，接著用氧雜蒽膦(1.5 g，2.6 mmol)及Pd(OAc)
2
(0.59 g，2.6 mmol)處理。所得混合物用一氧化碳淨化，接著安裝充滿一氧化碳的氣球且在70℃下加熱混合物16小時，接著冷卻至室溫。混合物接著用水(150 mL)稀釋，且用EtOAc (2×200 mL)萃取。合併之有機物用水(2 × 200 mL)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(100 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得呈無色固體狀之2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(5.6 g，82%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.96 min, [M+H]
+
= 262
中間物 34 ： 3- 溴 -2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 ) 苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下向2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(7.40 g，28.3 mmol)於DCM (50 mL)中之溶液中添加溴(1.50 mL，28.3 mmol)，且在此溫度下在氮氣下攪拌所得混合物16小時。添加溴(0.20 mL，3.8 mmol)且在回流下加熱混合物24小時，接著冷卻至室溫且添加到10 w/w%硫代硫酸鈉水溶液(200 mL)中。劇烈攪拌兩相混合物20分鐘，接著用DCM (100 mL)稀釋且分離各層。有機相用水洗滌，經硫酸鈉乾燥且真空濃縮獲得呈灰白色固體狀之3-溴-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(9.3 g，97%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.11 min, [M+H]
+
=340及342 (1 Br)
中間物 35 ： 3-(3-( 苯甲氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 ) 苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，3-溴-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(140 mg，0.412 mmol)於THF (2 mL)中之溶液用含(3-(苯甲氧基)苯基)
酸(113 mg，0.494 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦 (14.8 mg，0.040 mmol)、Pd(OAc)
2
(9.24 mg，0.0410 mmol)及K
2
CO
3
(171 mg，1.23 mmol)之水(1 mL)處理且在此溫度下，在氮氣下攪拌所得混合物2小時，接著用EtOAc (5 mL)稀釋且用水(5 mL)洗滌。有機相經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得呈深褐色膠狀之3-(3-(苯甲氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(90 mg，49%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.44 min, [M+H]
+
= 444
中間物 36 ： 3-(3- 羥基苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 ) 苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 將3-(3-(苯甲氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(90 mg，0.20 mmol)溶解於EtOH (30 mL)中且在70巴及50℃下在H-Cube中經Pd/C濾芯氫化，使用循環機器從而使得溶離劑添加回饋料燒瓶中。4小時後，用MeOH洗滌機器且真空濃縮合併之溶離劑獲得淺黃色固體。將此殘餘物分配於DCM與0.5N HCl水溶液之間且分離各層。使用相分離器乾燥有機相且真空濃縮獲得呈淺粉紅固體狀之3-(3-羥基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(0.35 g，88%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.07 min, [M+H]
+
= 354
中間物 37 ： 3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 ) 苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，3-(3-羥基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(0.35 g，0.99 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液用1,3-二氧環戊-2-酮(0.174 g，1.98 mmol)及K
2
CO
3
(0.274 g，1.98 mmol)處理。在80℃下攪拌所得混合物2小時，接著冷卻至室溫，用水(20 mL)稀釋且用EtOAc (20 mL)萃取。分離各層且有機相用水(20 mL)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得淺黃色膠狀物。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得呈淺黃色膠狀之3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(0.32 g，81%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.05 min, [M+H]
+
= 398
中間物 38 ： ( 順 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在加熱下將3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(200 mg，0.503 mmol)溶解於MeOH (100 mL)中，接著冷卻溶液且在70巴及70℃下在1 mL/min下溶離在H-Cube中氫化6小時。在真空中蒸發溶離劑獲得呈無色固體狀之(2R*,3R*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(181 mg，90%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.98 min, [M+H]
+
= 400
中間物 39 ： ( 反 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，(2R*,3R*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(45 mg，0.11 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用DBU (0.051 mL，0.34 mmol)處理，且在90℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色膠狀之(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(19 mg，42%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.00 min, [M+H]
+
= 400
中間物 39 ( 替代程序 ) ： ( 反 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，3-(3-羥基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(90 mg，0.25 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液用K
2
CO
3
(70.0 mg，0.506 mmol)及1,3-二氧環戊-2-酮(66.9 mg，0.760 mmol)處理，且所得混合物在80℃下攪拌4小時，接著冷卻至室溫，使其靜置60小時。混合物接著用水(10 mL)稀釋，且水相用EtOAc (2 × 10 mL)萃取。合併之有機物用鹽水(10 mL)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物，獲得(2
R
*,3
S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(13 mg，13%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.02 min, [M+H]
+
= 400
中間物 40 ： ( 順 )-3-(3- 羥基苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 將3-(3-(苯甲氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸乙酯(90 mg，0.20 mmol)於EtOH (30 mL)中之溶液在70巴及50℃下在H-Cube中經Pd/C濾芯氫化，使用循環機器從而使得溶離劑添加回饋料燒瓶中。4小時後，用MeOH洗滌機器且真空濃縮合併之溶離劑獲得呈淺黃色固體狀之(2R*,3R*)-3-(3-羥基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(75 mg，104%)，其未經純化即用於下一步驟中。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+
= 356
中間物 41 ： ( 反 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，(2
R
*,3
S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(120 mg，0.150 mmol)於EtOH (1.5 mL)中之溶液用NaOH (水中之2N，0.075 mL，0.15 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液3小時，其後添加EtOH (1 mL)。在室溫下攪拌混合物2小時，接著用NaOH (水中之2N，0.075 mL，0.150 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著添加EtOH (1 mL)。接著在室溫下攪拌反應混合物16小時，接著用NaOH (水中之2N，0.150 mL，0.300 mmol)處理。在室溫下攪拌反應混合物3小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於水(3 mL)中且水相用2N HCl水溶液酸化至pH 3，且濾出所形成的沈澱物。用EtOAc (3 × 20 mL)萃取濾液且合併之有機物經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。自萃取獲得之殘餘物與沈澱物合併獲得呈白色固體狀之(反)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(67 mg，60%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.81 min, [M+H]
+
= 372
中間物 42 ：甲烷磺酸 (( 反 )-5-( 環丙基胺甲醯基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -2- 基 ) 甲酯 在室溫下，(2
S
*,3
S
*)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(80 mg，0.20 mmol)及Et
3
N (0.042 mL，0.30 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用MsCl (0.024 mL，0.30 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著用水(5 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色膠狀之甲烷磺酸((反)-5-(環丙基胺甲醯基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-2-基)甲酯(90 mg，94%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+
= 475
中間物 43 ： (2S
,3S
)-2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 藉由對掌性層析純化3.9 g(反)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯，傳遞兩種對映異構體： - 分析方法：將約0.5 mg材料溶解於含50% EtOH之庚烷(1 mL)中。注射：在管柱上注入20 μL溶液，用含40% EtOH (+0.2%異丙胺)之庚烷溶離，流動速率 = 1.0 mL/min，波長215 nm。管柱4.6 mmid × 25 cm Chiralpak IC。 - 製備方法：將約250 mg材料溶解於EtOH (2 mL，在加熱下)中。注射(總計18次)；將2 mL溶液注入管柱上，用含40% EtOH (+0.2%異丙烷)之庚烷(+0.2%異丙胺)溶離，流動速率= 30 mL/min，波長215 nm。管柱30 mm × 25 cm Chiralpak IC (5 μm)。 此純化獲得(2
S
,3
S
)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(1.47 g，75%)作為快速跑動對映異構體，及(2
R
,3
R
)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(1.38 g，71%)作為慢速跑動對映異構體。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.00 min, [M+H]
+
= 386
中間物 44 ： (2S
,3S
)-2-( 碘甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 在室溫下，碘(1.26 g，4.96 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液用1H-咪唑 (0.519 g，7.63 mmol)及三苯膦 (1.30 g，4.96 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物30分鐘。接著向溶液添加(2S,3S)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(1.47 g，3.81 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物16小時，接著用水(30 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，梯度：含0-60% EtOAc之環己烷)純化殘餘物，獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(碘甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(1.5 g，79%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.28 min, [M+H]
+
= 496
中間物 45 ： (2R
,3S
)-3-(3- 甲氧基苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸乙酯 (2S,3S)-2-(碘甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(1.4 g，2.8 mmol)於EtOAc (50 mL)及MeOH (50 mL)中之溶液用Et
3
N (0.394 mL，2.83 mmol)處理且所得溶液在大氣壓下在1 mL/min溶離下在H-cube中氫化。真空濃縮溶離劑且藉由矽膠急驟層析(25 g管柱，梯度：環己烷中之0-100% EtOAc)純化所獲得之殘餘物，獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(0.95 g，91%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.21 min, [M+H]
+
= 370
中間物 46 ： (2R
,3S
)-3-(3- 甲氧基苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在室溫下，(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(0.90 g，2.4 mmol)於EtOH (10 mL)中之溶液用2N NaOH水溶液(5.0 mL，10 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物16小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於水(10 mL)中，且水相用2N HCl水溶液(pH 2)酸化，接著用DCM (20 mL)萃取。使用疏水性玻璃料乾燥有機相且真空濃縮獲得呈無色發泡體狀之(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(750 mg，90%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.69 min, [M+H]
+
= 342
中間物 47 ： (1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸 在室溫下，向(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(1.00 g，6.27 mmol，可購自例如Pharmablock)於水(10 mL)、THF (10 mL)及MeOH (10 mL)中之溶液中添加氫氧化鋰(751 mg，31.4 mmol)。在此溫度下攪拌所得懸浮液3小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於最少量之水中，且用鹽酸(5 mL，水中之25 w/w%)處理。用MeOH/DCM萃取水相4次，且經合併之有機相經疏水性玻璃料乾燥，真空濃縮，獲得(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸 (750 mg，93%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 12.13 (s, 1 H) 3.80 (d, J = 8.6 Hz, 2 H) 3.62 (d, J = 8.6 Hz, 2 H) 2.00 - 2.15 (m, 2 H) 1.32 (t, J = 3.1 Hz, 1 H)
中間物 48 ： (1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基胺基甲酸苯甲酯 在室溫下，(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸(340 mg，2.65 mmol)於甲苯(12 mL)中之溶液用NEt
3
(1.11 mL，7.96 mmol)、疊氮磷酸二苯酯(0.686 mL，3.18 mmol)及苯甲醇(0.552 mL，5.31 mmol)處理，且在回流下加熱所得混合物2小時，接著冷卻至室溫。溶液用EtOAc (10 mL)稀釋且用水(10 mL)及飽和NaHCO
3
水溶液(10 mL)洗滌。乾燥及蒸發有機相且藉由25 g二氧化矽管柱(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)上之層析純化殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈白色固體狀之(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基胺基甲酸苯甲酯(460 mg，74%)。 LCMS (甲酸): 滯留時間0.83 min, [M+H]
+
= 234.3。
中間物 49 ： (1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 胺，鹽酸鹽 將(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基胺基甲酸苯甲酯(460 mg，1.97 mmol)溶解於EtOH (20 mL)中且使用H-cube (設置：室溫，1巴，1 mL/min流動速率)及10% Pd/C CatCart 30作為催化劑來氫化反應物。反應物經H-Cube循環1.5小時，隨後用HCl (7M水溶液，1.33 mL，9.86 mmol)酸化混合物且真空蒸發獲得油性固體。真空乾燥固體2天，獲得呈灰白色固體狀之所要產物(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺，鹽酸鹽(262 mg，93%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.48 (br. s., 3 H) 3.80 (d, J = 8.8 Hz, 2 H) 3.59 (d, J = 8.6 Hz, 2 H) 2.24 (t, J = 2.3 Hz, 1 H) 2.07 (t, J = 2.6 Hz, 2 H)。
中間物 50 ： (+/-)-2-(4- 苯甲基嗎啉 -2- 基 ) 乙酸乙酯 將2-(苯甲基胺基)乙醇(6.57 mL，46.3 mmol，可購自例如Sigma-Aldrich)及NEt
3
(6.45 mL，46.3 mmol)於水(40 mL)中之混合物加熱至105℃。逐滴添加(E)-4-溴丁-3-烯酸乙酯(8.50 mL，49.4 mmol，可購自例如Fluorochem)且在105℃下加熱反應混合物2小時。將反應混合物冷卻至室溫且添加氫氧化鈉(2N水溶液，10 mL，20 mmol)。將反應混合物分配於乙酸乙酯與水之間。分離各層且用乙酸乙酯(2 × 30 mL)進一步萃取水相。合併之有機層乾燥(Na
2
SO
4
)且真空濃縮獲得約11 g褐色油狀物。此藉由SiO
2
層析(Biotage SNAP 340 g濾芯，用5-50%乙酸乙酯/環己烷溶離)純化。合併適當溶離份且真空濃縮獲得呈淺黃色油狀之所要產物(4.17 g，29%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.43 min, [M+H]
+
= 264.2。
中間物 51 ： (+/-)-2-( 嗎啉 -2- 基 ) 乙酸乙酯 向2-(4-苯甲基嗎啉-2-基)乙酸乙酯(3.15 g，12.0 mmol)於EtOH (70 mL)中之溶液添加甲酸銨(3.77 g，59.8 mmol)及10% Pd/C (3.82 g，35.9 mmol)。在室溫下，在N
2
下，攪拌反應混合物16小時。 分別向2-(4-苯甲基嗎啉-2-基)乙酸乙酯(375 mg，1.42 mmol)於EtOH (10 mL)中之溶液中添加甲酸銨(449 mg，7.12 mmol)及10% Pd/C (555 mg，5.21 mmol)。在室溫下，在N
2
下，攪拌反應混合物16小時。 合併兩種反應混合物且經Celite
®
過濾。真空濃縮濾液獲得呈灰白色膠狀固體狀之2-(嗎啉-2-基)乙酸乙酯(2.45 g)，其用於隨後反應中。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.05 (q, J = 7.1 Hz, 2 H) 3.67 - 3.82 (m, 2 H) 3.46 (td, J = 11.3, 2.8 Hz, 1 H) 2.87 (br. d, J = 12.2 Hz, 1 H) 2.75 (br. d, J = 12.5 Hz, 1 H) 2.60 - 2.70 (m, 1 H) 2.40 - 2.48 (m, 2 H) 2.34 (dd, J= 15.7, 8.6 Hz, 1 H) 1.17 (t, J = 7.1 Hz, 3 H)
中間物 52 ： (+/-)-2-(2- 乙氧基 -2- 側氧基乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 向2-(嗎啉-2-基)乙酸乙酯(2.45 g，14.1 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液中添加Et
3
N (3.94 mL，28.3 mmol)、Boc酸酐(4.93 mL，21.2 mmol)及DMAP (0.086 g，0.71 mmol)，且在N
2
下，在室溫下攪拌反應混合物16小時。將反應混合物分配於DCM與1N HCl水溶液之間。分離各層，有機相用飽和NaHCO
3
水溶液洗滌，乾燥(Na
2
SO
4
)，接著真空濃縮獲得呈橙色油狀之(+/-)-2-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(3.03 g，85%)。
1
H NMR (400 MHz, MeOH-d
4
) δ ppm 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 2 H) 3.95 (dt, J = 13.0, 1.9 Hz, 1 H) 3.71 - 3.87 (m, 3 H) 3.49 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1 H) 2.86 - 3.00 (m, 1 H) 2.60 - 2.77 (m, 1 H) 2.49 (dd, J = 6.6, 1.5 Hz, 2 H) 1.47 (s, 9 H) 1.25 (t, J = 7.1 Hz, 3 H)
中間物 53 ： (+/-)-2-(2- 羥基乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將2-(2-乙氧基-2-側氧基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.8 g，10 mmol)溶解於THF (50 mL)中且添加LiBH
4
(0.893 g，41.0 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物65小時。在冰浴中冷卻反應混合物且用飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅，接著攪拌1小時且用EtOAc (2 × 100 mL)萃取。合併之有機物經硫酸鈉乾燥且真空蒸發獲得呈無色膠狀之2-(2-羥基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.2 g，93%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.74 - 4.02 (m, 5 H) 3.44 - 3.65 (m, 2 H) 2.84 - 3.01 (m, 1 H) 2.56 - 2.76 (m, 1 H) 1.63 - 1.83 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H)
中間物 54 ： (+/-)-2-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 在0℃下，向2-(2-羥基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.2 g，9.5 mmol)及Et
3
N (1.458 mL，10.46 mmol)於DCM (50 mL)中之溶液中添加MsCl (0.815 mL，10.5 mmol)。在0℃下攪拌所得混合物1小時，接著用水(50 mL)洗滌。使用疏水性玻璃料乾燥有機層且真空蒸發獲得呈淺黃色膠狀之2-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(3.0 g，102%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.30 - 4.44 (m, 2 H) 3.78 - 4.00 (m, 3 H) 3.45 - 3.57 (m, 2 H) 3.01 (s, 3 H) 2.85 - 2.98 (m, 1 H) 2.56 - 2.72 (m, 1 H) 1.78 - 1.98 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H)
中間物 55 ： (+/-)-2-(2- 氰基乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 將2-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(3.0 g，9.7 mmol)溶解於DMSO (30 mL)中，接著添加KI (1.61 g，9.70 mmol)及KCN (0.947 g，14.5 mmol)且在80℃下加熱混合物1小時，接著冷卻至室溫。所得褐色懸浮液用水(100 mL)稀釋且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。合併之有機物用水(2 × 100 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發，且所得油狀物在50 g二氧化矽管柱(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)上純化。合併含有產物之溶離份(藉由茚三酮具體化)且真空蒸發獲得呈無色油狀之2-(2-氰基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.42 g，61%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.80 - 4.00 (m, 3 H) 3.39 - 3.58 (m, 2 H) 2.83 - 3.01 (m, 1 H) 2.56 - 2.71 (m, 1 H) 2.50 (t, J = 7.2 Hz, 2 H) 1.69 - 1.87 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H)
中間物 56 ： (+/-)-2-(3- 胺基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將2-(2-氰基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.40 g，5.83 mmol)溶解於THF (20 mL)及硼烷中。添加THF (THF中之1M，23.30 mL，23.30 mmol)，接著在70℃下加熱混合物2小時。溶液接著在冰浴中冷卻且藉由小心添加MeOH (20 mL)(發泡)淬滅，接著真空蒸發。將殘餘物溶解於MeOH (20 mL)中，添加乙酸(2 mL)且攪拌溶液2小時，接著真空蒸發且藉由25 g二氧化矽管柱層析(用0-15% 2N甲醇氨溶液/DCM)純化殘餘物獲得兩種主要茚三酮活性組分。收集更多極性組分獲得呈無色油狀之2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(180 mg，13%)。較早跑動組分懷疑為硼烷複合物。將其收集且真空蒸發獲得無色油狀物(0.20 g)。將材料溶解於甲醇(10 mL)及2N NaOH水溶液(10 mL)中，接著在回流下攪拌混合物6小時，接著冷卻至室溫且真空蒸發，且將殘餘物分配於水(10 mL)與DCM (10 mL)之間。乾燥有機層且真空蒸發獲得無色油狀物，將其藉由在10 g snap超濾芯上層析(用0-20% 2N甲醇氨溶液/DCM溶離)純化獲得另一所要產物(100 mg)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.70 - 3.97 (m, 3 H) 3.44 - 3.55 (m, 1 H) 3.26 - 3.40 (m, 1 H) 2.92 (br. t, J = 10.8, 10.8 Hz, 1 H) 2.67 - 2.77 (m, 2 H) 2.49 - 2.66 (m, 1 H) 1.39 - 1.68 (m, 13 H)。
中間物 57 ： (S
)-2-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙 -1- 烯 -1- 基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯， E /Z 異構體之 77:23 混合物 將(R)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.50 g，2.3 mmol，可購自例如Activate Scientific)溶解於DCM (10 mL)中且添加戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)(1.17 g，2.76 mmol)，接著在室溫下攪拌溶液2小時。混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)洗滌且乾燥及蒸發有機層獲得無色固體-NMR顯示存在所要醛。將粗中間物溶解於甲苯(20 mL)中且添加2-(三苯基亞磷烷基)乙酸乙酯(1.04 g，2.99 mmol)，接著在90℃下加熱混合物16小時，隨後冷卻至室溫。過濾所得懸浮液且用水洗滌濾液，接著乾燥且真空蒸發有機層。藉由25 g二氧化矽管柱上之層析法(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)純化殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色膠狀且為Z及E異構體之混合物的(S)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.45 g，69%)，其用於下一步驟中。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 6.83 (dd, J = 15.8, 4.3 Hz, 1 H) 6.06 - 6.18 (m, 1.3 H) 5.87 (dd, J = 11.7, 1.5 Hz, 0.3 H) 4.15 - 4.30 (m, 2.6 H) 3.78 - 4.12 (m, 5.2 H) 3.51 - 3.65 (m, 1.3 H) 2.97 (br. t, J = 10.6, 10.6 Hz, 1.3 H) 2.56 - 2.77 (m, 1.3 H) 1.48 (s, 11.7 H) 1.22 - 1.36 (m, 3.9 H)
中間物 58 ： (S
)-2-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 將(S)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.450 g，1.58 mmol)溶解於EtOH (50 mL)中且在充滿模式之H-Cube中使用Pd/C催化劑車以1 mL/min流動速率氫化。真空蒸發溶離劑獲得呈無色膠狀之(S)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.40 g，88%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.14 (q, J = 7.3 Hz, 2 H) 3.74 - 3.98 (m, 3 H) 3.48 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1 H) 3.36 (dddd, J = 10.4, 7.8, 4.8, 2.7 Hz, 1 H) 2.92 (br. t, J = 11.1, 11.1 Hz, 1 H) 2.60 (br. t, J = 9.5, 9.5 Hz, 1 H) 2.35 - 2.53 (m, 2 H) 1.70 - 1.86 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H) 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3 H)
中間物 59 ： (S
)-2-(3- 羥基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 在0℃下，將LiBH
4
(0.121 g，5.57 mmol)添加至(S)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.40 g，1.39 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中，接著攪拌混合物16小時，使其升溫至室溫。藉由極小心添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)淬滅反應混合物且用EtOAc (2 × 20 mL)萃取。乾燥且真空蒸發合併之有機物獲得(S)-2-(3-羥基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.30 g，88%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.73 - 3.99 (m, 3 H) 3.58 - 3.69 (m, 2 H) 3.49 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1 H) 3.30 - 3.40 (m, 1 H) 2.91 (br. t, J = 10.8, 10.8 Hz, 1 H) 2.49 - 2.68 (m, 1 H) 2.16 - 2.40 (m, 1 H) 1.62 - 1.76 (m, 2 H) 1.48 - 1.60 (m, 2 H) 1.45 (s, 9 H)
中間物 60 ： (S
)-2-(3-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 將(S)-2-(3-羥基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.30 g，1.22 mmol)溶解於DCM (10 mL)中且添加Et
3
N (0.256 mL，1.83 mmol)及Ms-Cl (0.124 mL，1.59 mmol)。攪拌溶液2小時，接著用水洗滌且乾燥及真空蒸發有機層獲得(S)-2-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.39 g，99%)，其立即用於下一步驟中。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.20 - 4.33 (m, 2 H) 3.76 - 3.97 (m, 3 H) 3.44 - 3.57 (m, 1 H) 3.30 - 3.41 (m, 1 H) 3.01 (s, 3 H) 2.84 - 2.97 (m, 1 H) 2.53 - 2.67 (m, 1 H) 1.78 - 2.01 (m, 2 H) 1.53 - 1.61 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H)
中間物 61 ： (S
)-2-(3- 疊氮基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(S)-2-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.39 g，1.2 mmol)溶解於DMF (5 mL)中且添加疊氮化鈉(0.235 g，3.62 mmol)，接著在80℃下加熱混合物2小時。將混合物冷卻至室溫且用水(20 mL)稀釋且用EtOAc (20 mL)萃取，有機層用水(2 × 10 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈無色膠狀之(S)-2-(3-疊氮基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(300 mg，92%)。粗產物未經純化即繼續進行下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.74 - 3.99 (m, 3 H) 3.49 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1 H) 3.24 - 3.40 (m, 3 H) 2.85 - 3.00 (m, 1 H) 2.49 - 2.68 (m, 1 H) 1.61 - 1.85 (m, 2 H) 1.45 - 1.58 (m, 11 H)
中間物 62 ： (S
)-2-(3- 胺基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(S)-2-(3-疊氮基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(300 mg，1.11 mmol)溶解於EtOH (30 mL)中且在充滿模式之H-Cube中以1 mL/min流動速率經Pd/C催化劑車氫化。真空蒸發溶離劑獲得(S)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(190 mg，70%)，其用於隨後化學方法中。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.73 - 3.99 (m, 3 H) 3.44 - 3.57 (m, 1 H) 3.27 - 3.40 (m, 1 H) 2.84 - 3.00 (m, 1 H) 2.73 (t, J = 6.7 Hz, 2 H) 2.51 - 2.65 (m, 1 H) 1.38 - 1.67 (m, 13 H)
中間物 63 ： (R,E)- 2-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙 -1- 烯 -1- 基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(S)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(5.0 g，23 mmol，可購自例如AOK Chem)溶解於DCM (10 mL)中且添加戴斯-馬丁高碘烷(11.7 g，27.6 mmol)，接著在室溫下攪拌溶液2小時。用飽和碳酸氫鈉水溶液(20 mL)洗滌混合物且乾燥及蒸發有機層獲得無色固體。NMR顯示存在所要醛。將粗中間物溶解於甲苯(20 mL)中且添加2-(三苯基亞磷烷基)乙酸乙酯(10.4 g，29.9 mmol)，接著在90℃下加熱混合物16小時，接著冷卻至室溫。過濾所得懸浮液且用水洗滌濾液，接著乾燥且真空蒸發有機層。藉由在25 g二氧化矽管柱上層析(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)純化殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色膠狀之(R,E)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.9 g，29%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 6.84 (dd,
J
= 15.9, 4.2 Hz, 1 H) 6.02 - 6.24 (m, 1 H) 4.15 - 4.34 (m, 2 H) 4.02 - 4.12 (m, 1 H) 3.80 - 3.99 (m, 2 H) 3.49 - 3.67 (m, 1 H) 2.98 (t,
J
= 10.6 Hz, 1 H) 2.70 (br. s., 1 H) 1.49 (s, 9 H) 1.26 - 1.36 (m, 4 H)
中間物 64 ： (R)- 2-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(R,E)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.8 g，6.3 mmol)溶解於EtOH (60 mL)中且在充滿模式之H-Cube中以1 mL/min流動速率經Pd/C催化劑車氫化。真空蒸發溶離劑獲得呈無色膠狀之(R)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.7 g，94%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.14 (q,
J
= 7.1 Hz, 2H), 3.73 - 3.95 (m, 3H), 3.43 - 3.53 (m, 1H), 3.26 - 3.40 (m, 1H), 2.86 - 2.97 (m, 1H), 2.56 - 2.65 (m, 1H), 2.44 (spt,
J
= 7.5 Hz, 2H), 1.72 - 1.82 (m, 2H), 1.44 - 1.48 (m, 9H), 1.26 (t,
J
=7.1 Hz, 3H)。
中間物 65 ： (R)- 2-(3- 羥基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 在0℃下，將LiBH
4
(0.121 g，5.57 mmol)添加至(S)-2-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.400 g，1.39 mmol)於THF (10 mL)中之溶液中，接著攪拌混合物16小時，使其升溫至室溫。藉由極小心添加飽和氯化銨水溶液(20 mL)淬滅反應混合物且用EtOAc (2 × 20 mL)萃取。乾燥且真空蒸發合併之有機物獲得(S)-2-(3-羥基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.30 g，88%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
-
d
) δ ppm 5.32 (s, 1 H) 3.88 (br. s., 3 H) 3.75 - 3.80 (m, 1 H) 3.67 (br. d,
J
= 2.2 Hz, 1 H) 3.53 (td,
J
= 11.0, 3.0 Hz, 1 H) 3.34 - 3.43 (m, 1 H) 2.88 - 2.99 (m, 1 H) 2.57 - 2.68 (m, 1 H) 1.71 (q,
J
= 6.6 Hz, 2 H) 1.53 - 1.62 (m, 2 H) 1.48 (s, 9 H)
中間物 66 ： (R)- 2-(3-( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(R)-2-(3-羥基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.34 g，5.46 mmol)溶解於DCM (10 mL)中且添加Et
3
N (1.14 mL，8.19 mmol)及MsCl (0.553 mL，7.10 mmol)。在室溫下攪拌溶液2小時，接著用水洗滌且乾燥及真空蒸發有機層獲得淺黃色油狀物。將其藉由50 g二氧化矽管柱上之層析(用0-100% EtOAc/環己烷溶離)純化且真空蒸發含有產物之溶離份獲得(R)-2-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.22 g，69%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
-
d
) δ ppm 4.21 - 4.35 (m, 2 H) 3.76 - 3.95 (m, 3 H) 3.45 - 3.55 (m, 1 H) 3.32 - 3.41 (m, 1 H) 3.02 (s, 3 H) 2.84 - 2.97 (m, 1 H) 2.55 - 2.66 (m, 1 H) 1.91 - 2.02 (m, 1 H) 1.78 - 1.90 (m, 1 H) 1.52 - 1.65 (m, 2 H) 1.48 (s, 9 H)
中間物 67 ： (R)- 2-(3- 疊氮基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(R)-2-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(1.2 g，3.7 mmol)溶解於DMF (5 mL)中且添加疊氮化鈉(0.724 g，11.1 mmol)，接著在80℃下加熱混合物2小時，隨後冷卻至室溫。混合物用水(20 mL)稀釋且用EtOAc (20 mL)萃取。有機層用水(2 × 10 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈無色膠狀之(R)-2-(3-疊氮基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.96 g，96%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.12 (q,
J
= 7.3 Hz, 1 H) 3.74 - 3.97 (m, 3 H) 3.49 (td,
J
= 11.7, 2.8 Hz, 1 H) 3.20 - 3.41 (m, 2 H) 2.89 - 2.95 (m, 1 H) 2.59 (br. s., 1 H) 1.60 - 1.85 (m, 2 H) 1.49 - 1.56 (m, 2 H) 1.47 (s, 9 H)
中間物 68 ： (R)- 2-(3- 胺基丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(R)-2-(3-疊氮基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.96 g，3.5 mmol)溶解於EtOH (30 mL)中且在充滿模式之H-Cube中以1 mL/min流動速率經Pd/C催化劑車氫化。真空蒸發溶離劑獲得(R)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(0.81 g，93%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.70 - 4.00 (m, 3H), 3.41 - 3.56 (m, 1H), 3.23 - 3.40 (m, 2H), 2.79 - 3.12 (m, 2H), 2.47 - 2.69 (m, 1H), 1.80 - 1.98 (m, 1H), 1.25 - 1.72 (m, 12H)。
中間物 69 ： 3- 氟哌啶 -1,3- 二甲酸 1- 第三丁酯 3- 乙酯 在-78℃下，在氮氣下，將含哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-乙酯(5.0 g，19 mmol，可購自例如Sigma Aldrich)之THF (20 mL)逐滴添加至雙(三甲基矽烷基)胺基鋰(THF中之1N，38.9 mL，38.9 mmol)於THF (20 mL)中之溶液中，接著將溶液經1小時升溫至-20℃，接著再冷卻至-78℃。逐滴添加N-氟-N-(苯基磺醯基)苯磺醯胺(12.2 g，38.9 mmol)於THF (30 mL)中之溶液，接著攪拌混合物2小時，使其逐漸升溫至室溫。反應混合物用飽和氯化銨水溶液(100 mL)淬滅，且用EtOAc (100 mL)萃取。有機層用1N NaOH水溶液(100 mL)及鹽水洗滌，接著乾燥及蒸發獲得黃色油狀物。將粗產物溶解於DCM中且裝載至50 g二氧化矽管柱上，接著用0-50% EtOAc/環己烷溶離獲得呈無色油狀之3-氟哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-乙酯(3.5 g，65%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.27 (q,
J
= 7.3 Hz, 2 H) 3.17 - 3.44 (m, 1 H) 2.70 - 2.92 (m, 1 H) 1.98 - 2.21 (m, 2 H) 1.78 - 1.96 (m, 2 H) 1.60 - 1.72 (m, 2 H) 1.45 - 1.51 (m, 9 H) 1.33 (s, 3 H)
中間物 70 ： 3- 氟 -3-( 羥基甲基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將3-氟哌啶-1,3-二甲酸1-第三丁酯3-乙酯 (3.50 g，12.7 mmol)溶解於THF (50 mL)中且添加LiBH
4
(0.831 g，38.1 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物4小時。最初極小心地逐滴添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)，接著攪拌混合物20分鐘，隨後用EtOAc (2 × 100 mL)萃取。合併之有機物經硫酸鈉乾燥且真空蒸發獲得呈無色油狀之3-氟-3-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.2 g，74%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.54 - 3.74 (m, 3 H) 1.92 (br. s., 2 H) 1.72 - 1.82 (m, 2 H) 1.58 - 1.62 (m, 1 H) 1.51 - 1.57 (m, 2 H) 1.48 (s, 9 H)
中間物 71 ： (E)- 3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙 -1- 烯 -1- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將3-氟-3-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.2 g，9.4 mmol)溶解於DCM (60 mL)中且添加戴斯-馬丁高碘烷(4.80 g，11.3 mmol)，且在室溫下攪拌混合物18小時，接著用水洗滌且有機層經硫酸鈉乾燥且傾析至清潔乾燥燒瓶中。添加2-(三苯基亞磷烷基)乙酸乙酯(4.93 g，14.1 mmol)且攪拌混合物16小時，接著用水洗滌且乾燥及真空蒸發有機層。在50 g二氧化矽管柱(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)上純化殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色油狀之(E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.2 g，77%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 6.89 (dd, J = 19.4, 15.8 Hz, 1H) 6.15 (d, J = 15.9 Hz, 1H) 4.22 (q, J = 7.1 Hz, 2H) 3.76 - 4.13 (m, 2H) 3.01 - 3.29 (m, 1H) 2.90 - 3.01 (m, 1H) 1.63 - 2.01 (m, 4H) 1.54 - 1.62 (m, 1H) 1.45 - 1.52 (m, 10H) 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H)
中間物 72 ： 3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.00 g，6.64 mmol)溶解於EtOH (50 mL)中且在大氣壓下經5% Pd/C氫化16小時。接著在氮氣下經矽藻土過濾混合物且真空蒸發濾液獲得呈無色油狀之3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.0 g，99%)。NMR顯示大量剩餘起始物質，因此將粗產物溶解於EtOH (50 mL)中且在充滿模式之H-Cube中經Pd/C濾芯氫化。真空蒸發溶離劑獲得無色油狀物。NMR顯示一些剩餘起始物質且溶液再次於H-Cube中氫化，接著真空蒸發溶離劑獲得3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.0 g，99%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.14 (q, J = 6.9 Hz, 2H) 3.70 - 3.99 (m, 2H) 2.91 - 3.24 (m, 2H) 2.47 (t, J = 7.9 Hz, 2H) 1.71 - 2.04 (m, 4H) 1.42 - 1.66 (m, 11H) 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 3H)。
中間物 73 ： 3- 氟 -3-(3- 羥基丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，在氮氣下，將LiBH
4
(0.431 g，19.78 mmol)添加至3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.0 g，6.6 mmol)於THF (30 mL)中之溶液中且攪拌混合物16小時，接著藉由極小心最初逐滴添加飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅。劇烈攪拌混合物30分鐘，接著用EtOAc (2 × 50 mL)萃取且乾燥及真空蒸發合併之有機物獲得無色油狀物。將其溶解於DCM中且裝載至50 g二氧化矽管柱上，接著用0-100% EtOAc/環己烷溶離且接著真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色油狀之3-氟-3-(3-羥基丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.6 g，93%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
-d) δ ppm 3.59 - 3.93 (m, 4 H) 2.93 - 3.17 (m, 2H) 1.86 - 2.01 (m, 1H) 1.48 - 1.85 (m, 9H) 1.43 - 1.48 (m, 9H)
中間物 74 ： 3- 氟 -3-(3-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將3-氟-3-(3-羥基丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.6 g，6.1 mmol)溶解於DCM (50 mL)中且添加Et
3
N (1.28 mL，9.18 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物2小時。溶劑用水(20 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈黃色油狀之產物(2.5 g，120%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.20 - 4.32 (m, 2H) 3.70 - 3.97 (m, 2H) 3.07 - 3.19 (m, 1H) 2.97 - 3.06 (m, 4H) 1.86 - 2.00 (m, 3H) 1.58 - 1.85 (m, 4H) 1.49 - 1.57 (m, 1H) 1.46 (s, 9H)。
中間物 75 ： 3-(3- 疊氮基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將3-氟-3-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.5 g，7.4 mmol)溶解於DMF (30 mL)中且添加疊氮化鈉(0.958 g，14.7 mmol)，且在80℃下加熱混合物2小時，接著冷卻至室溫。所得懸浮液用水(100 mL)稀釋且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。合併之有機物用水(2 × 50 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈淺黃色油狀之3-(3-疊氮基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.8 g，133%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.75 (dt,
J
= 13.1, 4.1 Hz, 2H) 3.32 (t,
J
= 6.5 Hz, 2H) 2.97 - 3.06 (m, 2H) 1.86 - 2.00 (m, 1H) 1.58 - 1.85 (m, 6H) 1.43 - 1.57 (m, 10H).
中間物 76 ： 3-(3- 胺基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將3-(3-疊氮基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.8 g，5.9 mmol)溶解於EtOH (60 mL)中且在充滿模式之H-Cube中經Pd/C催化劑車氫化。真空蒸發溶離劑獲得淺黃色油狀物。將粗物質溶解於DCM中且裝載至25 g二氧化矽管柱上，接著用0-20% 2N甲醇氨溶液/DCM溶離獲得呈無色油狀之3-(3-胺基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.2 g，79%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.72 - 4.03 (m, 2H) 2.90 - 3.13 (m, 2H) 2.72 (t,
J
= 6.5 Hz, 2H) 1.87 - 1.98 (m, 1H) 1.72 - 1.87 (m, 1H) 1.33 - 1.69 (m, 17H)。
中間物 77 ： (R
,E
)-3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙 -1- 烯 -1- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(S)-3-氟-3-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(10 g，43 mmol，文獻：
Org . Process Res . Dev .
2015, 19, 7, 865-871中所述製備)溶解於DCM (60 mL)中且添加戴斯-馬丁高碘烷(23.6 g，55.7 mmol)，且在室溫下攪拌混合物18小時，接著用水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥且傾析至清潔乾燥燒瓶中。添加2-(三苯基亞磷烷基)乙酸乙酯(19.4 g，55.7 mmol)且在室溫下攪拌混合物16小時，接著用水洗滌。接著乾燥且真空濃縮有機層。在50 g二氧化矽管柱(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)上純化所獲得之殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色油狀之(R,E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(10.5 g，81%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 6.89 (dd,
J
= 19.6, 15.7 Hz, 1 H) 6.15 (d,
J
= 15.7 Hz, 1 H) 4.13 - 4.28 (m, 2 H) 3.80 - 4.10 (m, 2 H) 2.86 - 3.25 (m, 2 H) 1.52 - 2.04 (m, 4 H) 1.46 (s, 9 H) 1.30 (t,
J
= 7.1 Hz, 3 H)
中間物 78 ： (R
)-3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(R,E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(10 g，33 mmol)溶解於EtOH (100 mL)中且在氮氣下添加至5% Pd-C (2 g，18.79 mmol)。接著在大氣壓下氫化混合物6小時，獲得氫氣之預期攝入。在氮氣下經Celite
®
過濾混合物且真空蒸發濾液獲得呈淺黃色油狀之(R)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(9.5 g，94%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.05 - 4.22 (m, 2 H) 3.66 - 4.01 (m, 2 H) 2.88 - 3.23 (m, 2 H) 2.47 (t,
J
= 8.1 Hz, 2 H) 1.84 - 2.12 (m, 3 H) 1.71 - 1.84 (m, 1 H) 1.47 - 1.71 (m, 2 H) 1.45 (s, 9 H) 1.21 - 1.32 (m, 3 H)
中間物 79 ： (R)- 3-(1-( 第三丁氧羰基 )-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 丙酸 將(R)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(9.60 g，31.6 mmol)溶解於EtOH (50 mL)中且添加NaOH (水中2N，47.5 mL，95.0 mmol)，接著在室溫下攪拌溶液4小時。真空蒸發溶劑且將殘餘物分配於水(100 mL)與乙醚(100 mL)之間。水層用2 M HCl水溶液酸化至pH約2，接著用EtOAc (2 × 100 mL)萃取。有機層用水(100 mL)洗滌，接著乾燥及真空蒸發獲得呈無色固體狀之(R)-3-(1-(第三丁氧羰基)-3-氟哌啶-3-基)丙酸(8.6 g，99%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.76 (dt,
J
= 13.4, 4.2 Hz, 1 H) 3.06 (d,
J
= 8.6 Hz, 1 H) 2.55 (t,
J
= 7.8 Hz, 2 H) 1.98 - 2.08 (m, 2 H) 1.88 - 1.97 (m, 2 H) 1.68 - 1.81 (m, 2 H) 1.51 - 1.60 (m, 2 H) 1.45 - 1.50 (m, 9 H)
中間物 80 ： (R)- 3-(2-((( 苯甲基氧基 ) 羰基 ) 胺基 ) 乙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將疊氮磷酸二苯酯(8.08 mL，37.5 mmol)添加至(R)-3-(1-(第三丁氧羰基)-3-氟哌啶-3-基)丙酸(8.6 g，31 mmol)及Et
3
N (13 mL，94 mmol)於甲苯(50 mL)中之混合物，接著在室溫下攪拌溶液30分鐘。添加苯甲醇(6.50 mL，62.5 mmol)且在回流下加熱混合物3小時，接著冷卻至室溫。反應混合物用EtOAc (100 mL)稀釋且用水(100 mL)洗滌，乾燥及真空蒸發有機層且藉由340 g二氧化矽管柱上之層析(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)純化殘餘物。合併且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色膠狀之(R)-3-(2-(((苯甲基氧基)羰基)胺基)乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(8.9 g，75%)。
1
H NMR (400 MHz, 393 K, DMSO-
d 6
) δ ppm 7.25 - 7.43 (m, 5H) 6.69 (br. s., 1H) 5.05 (s, 2H) 3.74 - 3.82 (m, 1H) 3.70 (dt,
J
= 13.1, 4.2 Hz, 1 H) 3.16 - 3.24 (m, 2H) 3.01 - 3.15 (m, 1H) 2.90 - 3.00 (m, 1H) 1.75 - 1.90 (m, 3H) 1.56 - 1.74 (m, 2H) 1.40 - 1.54 (m, 10H)。
中間物 81 ： (R)- 3-(2- 胺基乙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(R)-3-(2-(((苯甲基氧基)羰基)胺基)乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(8.9 g，23 mmol)溶解於EtOH (100 mL)中且在真空下添加至5% Pd/C (2 g)，接著在大氣壓下氫化60小時。在氮氣下經矽藻土過濾混合物且真空蒸發濾液獲得呈無色油狀之(R)-3-(2-胺基乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.0 g，104%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 3.80 (ddd,
J
= 13.7, 9.8, 1.5 Hz, 1 H) 3.69 - 3.75 (m, 1 H) 3.01 - 3.13 (m, 1 H) 2.90 - 2.99 (m, 1 H) 2.74 (t,
J
= 7.5 Hz, 2 H) 1.80 - 1.87 (m, 1 H) 1.66 - 1.76 (m, 3 H) 1.56 - 1.64 (m, 1 H) 1.46 - 1.53 (m, 1 H) 1.43 (s, 9 H)
中間物 82 ： (±)-3,3- 二氟 -4-(2- 羥基乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，向(±)-2-(1-(第三丁氧羰基)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙酸(1.99 g，7.13 mmol，可購自Activate Scientific)於THF (50 mL)中的經攪拌溶液逐份添加(5 mL等分試樣) 硼烷四氫呋喃複合物(THF中之1.0 M，29.0 mL，29.0 mmol)。在室溫下，在氮氣下，攪拌混合物15.5小時，隨後小心地添加MeOH (50 mL)。再攪拌20分鐘之後，真空蒸發混合物且將殘餘物分配於乙酸乙酯(50 mL)與水(50 mL)之間。添加飽和鹽水溶液(10 mL)幫助相分離且分離各相。水相進一步用乙酸乙酯(3 × 40 mL)萃取，且經合併之有機萃取物藉由穿過裝配有疏水性玻璃料之濾芯乾燥，在氮氣流下蒸發溶劑且在真空中乾燥殘餘物獲得淺黃色黏稠油狀物；(±)-3,3-二氟-4-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.942 g，103%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.50 (t, J = 5.5Hz, 1 H) 4.06 (br s, 1H) 3.89 (br d, 1 H) 3.38 - 3.54 (m, 2 H) 3.18 (br s, 1 H) 2.87 (br s, 1 H) 2.02 - 2.19 (m, 1 H) 1.79 - 1.87 (m, 2 H) 1.40 (s, 9 H) 1.19 - 1.34 (m, 2 H)。
中間物 83 ： (±)-3,3- 二氟 -4-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(±)-3,3-二氟-4-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.88 g，7.10 mmol)溶解於DCM (60 mL)中且添加三乙胺(1.48 mL，10.6 mmol)及甲烷磺醯氯(0.719 mL，9.23 mmol)。在室溫下攪拌溶液2.75小時，接著用水(100 mL)洗滌且用DCM (2 × 100 mL)萃取水相。經合併之有機相藉由穿過裝配有疏水性玻璃料之濾芯來乾燥且真空蒸發溶劑獲得澄清有狀物，其結晶獲得白色固體；(±)-3,3-二氟-4-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(2.467 g，101%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.23 - 4.33 (m, 2 H) 4.09 (br s, 1 H) 3.91 (br d, 1 H) 3.21 (br s, 1 H) 3.19 (s, 3 H) 2.89 (br s, 1 H) 2.02 - 2.23 (m, 2 H) 1.85 (br dt, 1 H) 1.56 - 1.66 (m, 1 H) 1.40 (s, 9 H) 1.24 - 1.38 (m, 2 H)。
中間物 84 ： ( ± )-4-(2- 疊氮基乙基 )-3,3- 二氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(±)-3,3-二氟-4-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.33 g，3.88 mmol)溶解於DMF (10 mL)中且添加疊氮化鈉(301 mg，4.64 mmol)。在80℃下，在氮氣下，攪拌混合物4小時。冷卻後，混合物用1M碳酸鈉水溶液(50 mL)稀釋且用EtOAc (3 × 30 mL)萃取[注意，分離中觀測到3個相，乙酸乙酯萃取物最不緻密；在第2及第3次萃取時，下部相中發生固體的一些鹽析且添加水(約10 mL)來幫助這一過程]。合併之有機物用水(2 × 40 mL)洗滌[注意，第2次水洗滌引起各層乳化且添加飽和鹽水溶液(約10 mL)來幫助相分離]，接著乾燥及真空蒸發獲得淺黃色油狀物；(±)-4-(2-疊氮基乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.23 g，109%)，含有約0.33當量DMF。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.08 (br s, 1 H) 3.89 (br d, 1 H) 3.36 - 3.53 (m, 2 H) 3.19 (br s, 1 H) 2.88 (br s, 1 H) 2.01 - 2.17 (m, 1 H) 1.79 - 1.94 (m, 1 H) 1.42 - 1.51 (m, 1 H) 1.40 (s, 9 H) 1.22 - 1.33 (m, 1 H)。
中間物 85 ： ( ± )-4-(2- 胺基乙基 )-3,3- 二氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 (±)-4-(2-疊氮基乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.22 g，4.20 mmol)於乙酸乙酯(50 mL)中之溶液經10% Pd/C催化劑筒使用充滿氫氣模式之Thales 『H-Cube』流動設備在20℃下氫化。在真空中自所收集之溶液蒸發溶劑獲得無色油狀物，其藉由NMR分析測得為起始疊氮化物與產物胺的6:5混合物。將殘餘物再溶解於EtOH (50 mL)中且經10% Pd/C催化劑筒使用充滿氫氣模式之Thales 『H-Cube』流動設備再次氫化，但此次在40℃下進行。在真空中自所收集之溶液蒸發溶劑獲得無色油狀物(982.1 mg，88%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.06 (br s, 1 H) 3.88 (br d, 1 H) 3.16 (br s, 1 H) 2.86 (br s, 1 H) 2.50 - 2.68 (m, 2 H) 2.00 - 2.14 (m, 1 H) 1.66 - 1.82 (m, 2 H) 1.40 (s, 9 H) 1.17 - 1.29 (m, 2 H)。
中間物 86 ： ( ± )-4,4- 二氟 -3-(2- 羥基乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，向(±)-2-(1-(第三丁氧羰基)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙酸(197.0 mg，0.705 mmol，可購自Activate Scientific)於THF (5 mL)中之經攪拌溶液添加硼烷四氫呋喃複合物(THF中之1.0 M, 2.8 mL，2.8 mmol)。在室溫下，在氮氣下，攪拌混合物2.5小時，隨後小心地添加MeOH (5 mL)。再攪拌10分鐘之後，真空蒸發混合物且將殘餘物分配於乙酸乙酯(5 mL)與水(5 mL)之間。水相用乙酸乙酯(3 × 4 mL)進一步萃取，經合併之有機萃取物藉由穿過裝配有疏水性玻璃料之濾芯乾燥且在氮氣流下蒸發溶劑獲得無色膠狀物；(±)-4,4-二氟-3-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(162 mg，87%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.56 (t, J = 5.0Hz, 1 H) 3.69 (br s, 2 H) 3.42 - 3.53 (m, 2 H) 3.20 (br s, 1 H) 2.97 (br s, 1 H) 1.94 - 2.09 (m, 2 H) 1.69 - 1.92 (m, 2 H) 1.41 (s, 9 H) 1.24 - 1.32 (m, 1 H).
中間物 87 ： ( ± )-4,4- 二氟 -3-(2-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(±)-4,4-二氟-3-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(883 mg，3.33 mmol)溶解於DCM (30 mL)中且添加三乙胺(0.70 mL，5.0 mmol)及甲烷磺醯氯(0.337 mL，4.33 mmol)。在室溫下攪拌溶液2.75小時，接著用水(50 mL)洗滌且用DCM (2 × 50 mL)萃取水相。經合併之有機相藉由穿過裝配有疏水性玻璃料之濾芯乾燥且真空蒸發溶劑獲得白色固體；(±)-4,4-二氟-3-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.141 g，100%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 4.30 (dt, J = 6.5 Hz, 2 H) 3.81 (br s, 1 H) 3.71 (br d, 1 H) 3.20 (s, 3 H) 3.15 - 3.22 (m, 1 H) 2.99 (br s, 1 H) 1.81 - 2.14 (m, 4 H) 1.56 - 1.64 (m, 1 H) 1.42 (s, 9 H)。
中間物 88 ： ( ± )-3-(2- 疊氮基乙基 )-4,4- 二氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(±)-4,4-二氟-3-(2-((甲基磺醯基)氧基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1.14 g，3.31 mmol)溶解於DMF (20 mL)中且添加疊氮化鈉(263 mg，4.05 mmol)。在80℃下，在氮氣下，攪拌混合物4小時。冷卻後，混合物用1 M碳酸鈉水溶液(50 mL)稀釋且用EtOAc (3 × 30 mL)萃取[注意，分離時觀測到3個相，乙酸乙酯萃取物最不緻密]。合併之有機物用水(2 × 40 mL)洗滌，接著乾燥且真空蒸發獲得淺黃色油狀物；含有約0.2當量DMF之(±)-3-(2-疊氮基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(0.980 g，102%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 3.75 (br s, 1 H) 3.68 (br d, 1 H) 3.39 - 3.55 (m, 2 H) 3.20 (br t, 1 H) 2.99 (br s, 1 H) 1.77 - 2.09 (m, 4 H) 1.42 (s, 9 H) 1.36 - 1.49 (m, 1 H)。
中間物 89 ： ( ± )-3-(2- 胺基乙基 )-4,4- 二氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 (±)-3-(2-疊氮基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(978 mg，3.37 mmol)於乙酸乙酯(50 mL)中之溶液經10% Pd/C催化劑筒使用充滿氫氣模式之Thales 『H-Cube』流動設備在20℃下氫化。在真空中自所收集之溶液蒸發溶劑獲得無色油狀物，其藉由NMR分析測得為起始疊氮化物與產物胺的5:4混合物。將殘餘物再溶解於EtOH (50 mL)中且經10% Pd/C催化劑筒使用充滿氫氣模式之Thales 『H-Cube』流動設備再次氫化，但此次在40℃下進行。在真空中自所收集之溶液蒸發溶劑獲得無色油狀物，(±)-3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(796.3 mg，89%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 3.65 (br s, 2 H) 3.23 (br s, 1 H) 2.95 (br s, 1 H) 2.63 - 2.69 (m, 1 H) 2.52 - 2.59 (m, 1 H) 1.93 - 2.08 (m, 2 H) 1.76 - 1.91 (m, 1 H) 1.56 - 1.65 (m, 1 H) 1.47 (br s 1H) 1.41 (s, 9 H) 1.15 - 1.27 (m, 1 H)。
中間物 90 ： (R
,E
)-3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙 -1- 烯 -1- 基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(S)-3-氟-3-(羥基甲基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(10 g，43 mmol，文獻：
Org . Process Res . Dev . 2015
, 19, 7, 865-871中所述製備)溶解於DCM (60 mL)中且添加戴斯-馬丁高碘烷(23.6 g，55.7 mmol)，且在室溫下攪拌混合物18小時，接著用水洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥且傾析至清潔乾燥燒瓶中。添加2-(三苯基亞磷烷基)乙酸乙酯(19.4 g，55.7 mmol)且在室溫下攪拌混合物18小時，接著用水洗滌且乾燥及真空蒸發有機層。在50 g二氧化矽管柱(用0-50% EtOAc/環己烷溶離)上純化殘餘物且真空蒸發含有產物之溶離份獲得呈無色油狀之(R,E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(10.5 g，81%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 6.89 (dd,
J
= 19.6, 15.7 Hz, 1 H) 6.15 (d,
J
= 15.7 Hz, 1 H) 4.13 - 4.28 (m, 2 H) 3.80 - 4.10 (m, 2 H) 2.86 - 3.25 (m, 2 H) 1.52 - 2.04 (m, 4 H) 1.46 (s, 9 H) 1.30 (t,
J
=7.1 Hz, 3 H)
中間物 91 ： (R
)-3-(3- 乙氧基 -3- 側氧基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(R,E)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙-1-烯-1-基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(10 g，33 mmol)溶解於EtOH (100 mL)中且在氮氣下添加至5% Pd-C (2.0 g，19 mmol)，接著在大氣壓下氫化混合物6小時，獲得氫氣之預期攝入。在氮氣下經Celite過濾混合物且真空蒸發濾液獲得呈淺黃色油狀之(R)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(9.5 g，94%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.05 - 4.22 (m, 2 H) 3.66 - 4.01 (m, 2 H) 2.88 - 3.23 (m, 2 H) 2.47 (t,
J
= 8.1 Hz, 2 H) 1.84 - 2.12 (m, 3 H) 1.71 - 1.84 (m, 1 H) 1.47 - 1.71 (m, 2 H) 1.45 (s, 9 H) 1.21 - 1.32 (m, 3 H)
中間物 92 ： (R
)-3- 氟 -3-(3- 羥基丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 向(R)-3-(3-乙氧基-3-側氧基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(9.5 g，31 mmol)於THF (100 mL)中之溶液中添加LiBH
4
(2.05 g，94.0 mmol)，且在室溫下，在氮氣下攪拌混合物48小時，接著在冰浴中冷卻且藉由極小心最初逐滴添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)來淬滅(添加時劇烈發泡!)。攪拌混合物20分鐘，用EtOAc (100 mL)稀釋且分離合併之有機物，經硫酸鈉乾燥且真空蒸發獲得淺黃色油狀物。將粗物質溶解於DCM中且裝載至100 g二氧化矽管柱上，接著用0-100% EtOAc/環己烷溶離且真空蒸發含有產物之溶離份獲得(R)-3-氟-3-(3-羥基丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.0 g，73%)，其立即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.61 - 3.93 (m, 4 H) 2.94 - 3.14 (m, 2 H) 1.87 - 1.99 (m, 1 H) 1.48 - 1.86 (m, 7 H) 1.45 (s, 9 H)
中間物 93 ： (R
)-3- 氟 -3-(3-(( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(R)-3-氟-3-(3-羥基丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(6.0 g，23 mmol)溶解於DCM (100 mL)中，添加Et
3
N (4.80 mL，34.4 mmol)且在冰浴中冷卻混合物，接著逐滴添加Ms-Cl (2.33 mL，29.8 mmol)(放熱!)且攪拌混合物2小時，使其升溫至室溫。用水(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌溶液。乾燥及真空蒸發有機層獲得呈無色油狀之(R)-3-氟-3-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(7.2 g，92%)，其用於下一步驟中。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 4.20 - 4.32 (m, 2 H) 3.70 - 3.96 (m, 2 H) 3.68 (s, 1 H) 3.04 - 3.15 (m, 1 H) 3.00 - 3.03 (m, 3 H) 1.88 - 1.99 (m, 3 H) 1.49 - 1.83 (m, 5 H) 1.43 - 1.48 (m, 9 H)
中間物 94 ： (R
)-3-(3- 疊氮基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將疊氮化鈉(2.68 g，41.2 mmol)添加至(R)-3-氟-3-(3-((甲基磺醯基)氧基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(7.00 g，20.6 mmol)於DMF (50 mL)中之溶液中且在70℃下加熱混合物2小時，接著冷卻至室溫，用水(200 mL)稀釋且用EtOAc (2 × 100 mL)萃取。合併之有機物用水(2 × 100 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈無色油狀之(R)-3-(3-疊氮基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯。將粗產物溶解於DCM (10 mL)中且裝載至100 g二氧化矽管柱上，接著用0-50% EtOAc/環己烷溶離且真空蒸發含有產物之溶離份(藉由茚三酮具體)獲得呈無色油狀之(R)-3-(3-疊氮基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.2 g，88%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.69 - 3.99 (m, 2H) 3.33 (t,
J
= 6.5 Hz, 2H) 2.96 - 3.17 (m, 2H) 1.86 - 1.98 (m, 1H) 1.58 - 1.83 (m, 6H) 1.49 - 1.58 (m, 1H) 1.47 (s, 9H)。
中間物 95 ： (S
)-3-(3- 胺基丙基 )-3- 氟哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(R)-3-(3-疊氮基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(5.00 g，17.4 mmol)溶解於THF (50 mL)中且添加三苯膦(5.50 g，20.9 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物60小時。添加水(50 mL)且劇烈攪拌混合物2小時，接著用EtOAc (100 mL)及鹽水(50 mL)稀釋且分離有機層，乾燥且真空蒸發獲得淺黃色油狀物。將粗產物溶解於DCM (20 mL)中且裝載至100 g二氧化矽管柱上，接著用0-20% 2N甲醇氨溶液/DCM溶離且真空蒸發含有產物之溶離份(藉由茚三酮具體化)獲得呈無色油狀之(S)-3-(3-胺基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(4.0 g，88%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.72 - 4.02 (m, 2 H) 2.89 - 3.12 (m, 2 H) 2.72 (t,
J
= 6.6 Hz, 2 H) 1.86 - 1.98 (m, 1 H) 1.72 - 1.85 (m, 1 H) 1.48 - 1.70 (m, 6 H) 1.46 (s, 9 H)
中間物 96 ： (S
)-2-((( 甲基磺醯基 ) 氧基 ) 甲基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 在0℃下，在DCM (30 mL)中攪拌(S)-2-(羥基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(可購自例如Activate Scientific) (3.00 g，13.8 mmol)及三乙胺(3.85 mL，27.6 mmol)。經5分鐘逐份添加甲磺醯基-Cl (1.614 mL，20.71 mmol)且在室溫下攪拌反應物4小時。反應物接著用DCM進一步稀釋且用1 N HCl水溶液、飽和NaHCO
3
水溶液及水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈黃色油狀之(S)-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(4.242 g，104%)，且以粗產物形式用於下一步驟中。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 4.13 - 4.35 (m, 2 H) 3.76 - 3.95 (m, 2 H) 3.71 (br. d,
J
= 13.2 Hz, 1 H) 3.62 (br. ddt,
J
= 10.6, 5.9, 3.1, 3.1 Hz, 1 H) 3.43 (td,
J
= 11.6, 2.7 Hz, 1 H) 3.14 - 3.31 (m, 3 H) 2.62 - 2.99 (m, 2 H) 1.31 - 1.52 (m, 9 H)。
中間物 97 ： (R
)-2-( 氰基甲基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 在100℃下，在DMSO (30 mL)中攪拌(S)-2-(((甲基磺醯基)氧基)甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(4.2 g，14 mmol)、KCN (0.972 g，14.9 mmol)及KI (3.54 g，21.3 mmol)持續4小時。接著將反應物冷卻至室溫，用水稀釋且用EtOAc萃取。有機層用水及鹽水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得黃色油狀物。此油狀物使用SP4急驟層析(使用SNAP 50 g Si管柱且用0-50% EtOAc:環己烷溶離)純化獲得呈白色固體狀之(R)-2-(氰基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.393 g，74%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 3.85 (br. dd,
J
= 11.5, 2.2 Hz, 2 H) 3.70 (br. d,
J
= 13.2 Hz, 1 H) 3.52 - 3.63 (m, 1 H) 3.44 (td,
J
= 11.6, 2.9 Hz, 1 H) 2.79 - 2.93 (m, 2 H) 2.67 - 2.79 (m, 1 H) 2.57 - 2.67 (m, 1 H) 1.41 (s, 9 H)。
中間物 98 ： (R
)-2-(2- 胺基乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(R)-2-(氰基甲基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(2.39 g，10.6 mmol)溶解於THF (20 mL)中且在室溫下攪拌，經10分鐘添加硼烷四氫呋喃複合物(THF中之1M，15.84 mL，15.84 mmol)且在室溫下攪拌反應物2小時。藉由小心添加MeOH淬滅反應物，直至全部發泡停止。真空濃縮反應物且將殘餘物溶解於MeOH中且所得溶液用1M NaOH (50 mL)處理且在室溫下攪拌2小時，獲得沈澱物。真空濃縮反應物以移除MeOH且用水稀釋，且用EtOAc萃取。合併之有機物用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色油狀之粗產物。此使用SP4急驟層析(使用SNAP 50 g Si管柱且用含0-8% 2N NH
3
之MeOH:DCM溶離)進一步純化獲得呈無色油狀之(R)-2-(2-胺基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(965 mg，40%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm: 3.56 - 3.90 (m, 3 H) 3.23 - 3.46 (m, 2 H) 2.01 - 3.11 (obs m, 6 H) 1.28 - 1.62 (m, 11 H)。
中間物 99 ： ( 反 )-2-(2-( 第三丁氧基 )-2- 側氧基乙基 ) 環丙烷甲酸甲酯 在-78℃下，在氮氣下，用正丁基鋰(己烷中之1.6 N，27.5 mL，44.0 mmol)處理二異丙胺(6.27 mL，44.0 mmol)於THF (40 mL)中之溶液。5分鐘後，混合物使用冰浴升溫且在0℃下攪拌30分鐘，隨後再次冷卻至-78℃且用含乙酸第三丁酯(5.90 mL，44.0 mmol)之THF (15 mL)處理。在此溫度下攪拌黃色混合物30分鐘，接著用含(E)-4-溴丁-2-烯酸甲酯(4.70 mL，40 mmol)之THF (15 mL)處理。在此溫度下攪拌黃色混合物2.5小時，接著用飽和NH
4
Cl水溶液(50 mL)處理且升溫至室溫。將混合物分配於AcOEt與水之間且分離各層。水相用EtOAc萃取兩次且合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，40% GLOBAL梯度(含AcOEt之己烷))純化殘餘物獲得呈無色油狀之(反)-2-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)環丙烷甲酸甲酯(6.95 g，81%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.69 (s, 3H), 2.24 (d,
J
= 7.1 Hz, 2H), 1.62-1.73 (m, 1H), 1.42-1.53 (m, 1H), 1.47 (s, 9H) 1.22-1.32 (m, 1H), 0.75-0.87 (m, 1H)
中間物 100 ： 2-(( 反 )-2-( 甲氧基羰基 ) 環丙基 ) 乙酸 在0℃下，(反)-2-(2-(第三丁氧基)-2-側氧基乙基)環丙烷甲酸甲酯(6.95 g，32.4 mmol)於DCM (30 mL)中之溶液用TFA (30 mL)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮且殘餘物與甲苯一起共蒸發四次獲得呈無色油狀之2-((反)-2-(甲氧基羰基)環丙基)乙酸(5.28 g，103%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.68-3.73 (m, 1H), 2.40 (d,
J
= 6.85 Hz, 1H), 1.69-1.79 (m, 1H), 1.53-1.58 (m, 1H), 1.27-1.35 (m, 1H), 0.86 (ddd,
J
= 4.6, 6.2, 8.4 Hz, 1H)
中間物 101 ： (1S
*,2R
*)-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙烷甲酸甲酯 在0℃下，2-((反)-2-(甲氧基羰基)環丙基)乙酸(5.22 g，33.0 mmol)於THF (35 mL)中之溶液用硼烷四氫呋喃複合物(THF中之1N，72.6 mL，72.6 mmol)緩慢處理且在此溫度下攪拌所得溶液2小時，接著用MeOH (26.7 mL，660 mmol)極緩慢淬滅且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，40% GLOBAL梯度(己烷中之AcOEt))純化殘餘物，獲得呈無色油狀之(反)-2-(2-羥基乙基)環丙烷甲酸甲酯(3.36 g，71%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.75 (t,
J
= 6.4 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 1.54-1.66 (m, 2H), 1.40-1.52 (m, 3H), 1.17-1.26 (m, 1H), 0.71-0.83 (m, 1H)
中間物 102 ： ( 反 )-2-(2-(( 第三丁基 二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙基 ) 環丙烷甲酸甲酯 在室溫下，(反)-2-(2-羥基乙基)環丙烷甲酸甲酯(3.36 g，23.3 mmol)於DCM (60 mL)中之溶液用咪唑(2.38 g，35.0 mmol)，接著TBDMS-Cl (4.22 g，28.0 mmol)及最終DMAP (0.285 g，2.33 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物16小時。混合物用DCM及水稀釋且分離各層。水相用DCM萃取且合併之有機物使用相分離器乾燥，接著真空濃縮獲得呈無色油狀之(反)-2-(2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)乙基)環丙烷甲酸甲酯(6.5 g，108%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。
中間物 103 ： ( 反 )-2-(2-(( 第三丁基 二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 乙基 ) 環丙烷甲酸 在室溫下，(反)-2-(2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)乙基)環丙烷甲酸甲酯(6.02 g，23.3 mmol)於MeOH (50 mL)中之溶液用氫氧化鈉(水中之2N，23.30 mL，46.60 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物16小時，接著真空移除大部分MeOH且用水稀釋殘餘物。混合物接著用HCl (水中之2N，23.30 mL，46.6 mmol)處理且形成之沈澱物用AcOEt萃取3次。合併之有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈黃色固體狀之(反)-2-(2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)乙基)環丙烷甲酸(5 g，88%)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.68 (s, 3H), 1.39-1.61 (m, 4H), 1.14-1.22 (m, 1H), 0.89-0.93 (m, 1H), 0.91 (s, 9H), 0.71-0.78 (m, 1H), 0.07 (s, 6H)
中間物 104 ： (( 反 )-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙基 ) 胺基甲酸苯甲酯 在室溫下，(反)-2-(2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)乙基)環丙烷甲酸(5.00 g，20.5 mmol)於甲苯(80 mL)中之溶液用三乙胺(8.55 mL，61.4 mmol)、疊氮磷酸二苯酯(5.29 mL，24.5 mmol)，接著苯甲醇(4.25 mL，40.9 mmol)連續處理且所得混合物回流6小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮獲得黃色固體。 將殘餘物溶解於AcOEt中且有機相用水及鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(100 g管柱，50% GLOBAL梯度(含EtOAc之己烷))純化殘餘物獲得呈極淺黃色油狀之((反)-2-(2-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)乙基)環丙基)胺基甲酸苯甲酯(1.34 g，19%)，接著呈淺黃色油狀之((反)-2-(2-羥基乙基)環丙基)胺基甲酸苯甲酯(1.69 g，35%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+
= 236
中間物 105 ： 2-(( 反 )-2- 胺基環丙基 ) 乙醇 ((1S*,2R*)-2-(2-羥基乙基)環丙基)胺基甲酸苯甲酯(1.34 g，5.70 mmol)於MeOH (30 mL)中之溶液用鈀/碳(50%濕，10 w/w%，300 mg)處理，且在氫氣(1 atm)下攪拌所得混合物3小時。使用Celite
®
墊(2.5 g)濾出催化劑且用MeOH沖洗。真空濃縮合併之有機物獲得呈極淺灰色固體狀之2-((1R*,2S*)-2-胺基環丙基)乙醇(576 mg，100%產率)。
1
H NMR (400 MHz, CDCl
3
) δ ppm 3.61-3.76 (m, 2H), 2.29-2.56 (m, 3H), 2.05-2.17 (m, 1H), 1.36-1.56 (m, 2H), 0.70-0.86 (m, 1H), 0.54 (m, 1H), 0.31-0.39 (m, 1H)。
中間物 106 ： 2-((1S
,2S
)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 ) 異吲哚 -1,3- 二酮 將(+/-)-((反)-2-胺基環丙基)甲醇(10 g，115 mmol，可購自例如Enamine)溶解於甲苯(156 mL)中，添加鄰苯二甲酸酐(22 g，149 mmol)且在110℃下，在氮氣下，加熱反應物。攪拌反應物5小時。接著使溶液冷卻至室溫且分配於EtOAc (50 mL)與水(50 mL)之間，且分離各層。水相用EtOAc (2 × 50 mL)萃取，且合併之有機物用鹽水(60 mL)洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得34.0 g黑色油狀物。此藉由SiO
2
層析(Biotage SNAP 750 g，用0-100%乙酸乙酯/環己烷溶離)純化。濃縮所要溶離份，獲得26 g無色油狀物。此藉由SiO
2
層析(Biotage SNAP 750 g，用10-60% DCM/乙醚溶離)進一步純化。濃縮所要溶離份，獲得19.5 g無色有狀物。將其懸浮於乙醚(600 mL)中且在真空下過濾。濃縮濾液獲得呈無色油狀之(+/-)-2-((反)-2-(羥基甲基)環丙基)異吲哚啉-1,3-二酮(16.4 g，42%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.07 min, [M+H]
+
= 218.2 藉由對掌性HPLC純化(+/-)-2-((反)-2-(羥基甲基)環丙基)異吲哚啉-1,3-二酮(16.4 g)。將外消旋物溶解於EtOH(100 mL)中。注射：將2.5 mL溶液注入至管柱(50% EtOH/庚烷，流動速率= 30 mL/min，偵測波長= 215 nm，4. Ref 550, 100, 管柱30 mm × 25 cm Chiralpak AD-H (5 µm) 批號ADH12143-01)上。總注射次數=40。12-14.5分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰1。19.5-26分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰2。真空濃縮堆積在一起之溶離份，接著轉移至稱量燒瓶。自DCM及庚烷回收最終化合物以獲得固體。 收集對應於峰1之溶離份獲得2-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)異吲哚啉-1,3-二酮，中間物106 (5.74 g) 收集對應於峰2之溶離份獲得對映異構產物(7.24 g)
中間物 107 ： ((1S
,2S
)-2- 胺基環丙基 ) 甲醇，鹽酸鹽 將水合肼(0.466 mL，9.65 mmol, 65 wt.%)緩慢添加至2-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)異吲哚啉-1,3-二酮(2.0 g，9.21 mmol)於EtOH (46 mL)中之懸浮液中。在氮氣下，將反應混合物加熱至50℃持續16小時。真空過濾所得白色沈澱物。濾液用HCl (二噁烷中4M，57.5 mL，230 mmol)酸化且真空蒸發獲得粗產物。將殘餘物懸浮於MeOH中且藉由磺酸上之SPE(SCX) 20 g(依序使用溶劑：甲醇，隨後含2N氨之MeOH)純化。合併適當溶離份且用HCl (二噁烷中之4N，6 mL，24 mmol)酸化，隨後真空蒸發獲得白色漿液。關注未成功完成鹽形成，將殘餘物溶解於EtOH (30 mL)中且用2 N HCl水溶液(10 mL)處理且再次真空蒸發獲得白色漿液(1540 mg)。 經3天真空乾燥樣品獲得白色糊狀物((1S,2S)-2-胺基環丙基)甲醇鹽酸鹽(1035 mg，73%)。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 8.40 (br. s., 3 H) 4.07 - 6.59 (obs., 1 H) 3.36 (dd, J=11.2, 5.9 Hz, 1 H) 3.27 (dd, J=10.8, 5.9 Hz, 1 H) 2.37 (dsxt, J=7.9, 4.2, 4.2, 4.2, 4.2, 4.2 Hz, 1 H) 1.34 - 1.46 (m, 1 H) 0.88 (ddd, J=9.7, 5.6, 4.0 Hz, 1 H) 0.65 (dt, J=7.6, 6.0 Hz, 1 H)
中間物 108 ： 4,4- 二氟 -3-(2-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 (1:1 非對映異構混合物 ) 在室溫下，在攪拌下，將(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.161 mmol)、HATU (73.3 mg，0.193 mmol)及DIPEA (0.084 mL，0.482 mmol)溶解於DMF (3 mL)中持續5分鐘。將3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(59.4 mg，0.225 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，接著將其在室溫下攪拌2小時。進一步添加3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(20 mg，0.076 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用含0-10% 2M NH
3
之MeOH:DCM梯度溶離)獲得呈黃色油狀之4,4-二氟-3-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(1:1非對映異構混合物) (79 mg，0.142 mmol，88%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.28 min, [MH]
+
= 558
中間物 110 ： (+/-)-5- 溴 -2-( 碘甲基 )-N
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 將(+/-)-5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(500 mg，1.444 mmol)溶解於DCM (20ml)中且添加碳酸氫鈉(243 mg，2.89 mmol)及碘(513 mg，2.022 mmol)，接著在室溫下攪拌混合物隔夜。混合物用飽和硫代硫酸鈉溶液(水溶液)淬滅且用DCM萃取。乾燥且真空蒸發有機物獲得呈淺黃色發泡體狀之(+/-)-5-溴-2-(碘甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(0.67 g，1.419 mmol，98%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.35 min, [M+H]
+
= 474
中間物 111 ： ( 反 )-5- 溴 -2-( 氟甲基 )-N
- 三氘甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 將(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-三氘甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(3 g，8.21 mmol)懸浮於DCM (50 mL)中且在冰浴中在N
2
下冷卻，接著經30分鐘逐滴添加Deoxo-Fluor (7.57 mL，20.53 mmol)且接著在N
2
下使混合物升溫至40℃隔夜。將溶液添加至快速攪拌之飽和NaHCO
3
(水溶液)且攪拌30分鐘，接著分離有機層，乾燥且真空蒸發。藉由矽膠管柱層析(用0-100% EtOAc/環己烷梯度溶離)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-三氘甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(2.25 g，6.13 mmol，75%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.19 min, [MH]+ = 369
中間物 112 ： ( 反 )-5- 溴 -2-( 羥基甲基 )-N
- 三氘甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 (反)-5-溴-2-羥基-N-三氘化甲基-3-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(15.1 g，41.3 mmol)於DMSO (150 mL)及水(40 mL)中之溶液冷卻至0℃且用氫氧化鉀(4.64 g，83 mmol)於水(40 mL)中之冰冷之溶液處理。在此溫度下攪拌所得黑色溶液7小時，接著將混合物留在冰箱中持續16小時。使所得溶液升溫且在0℃下攪拌1小時，接著用乙酸(5.44 mL，95 mmol)處理。用EtOAc萃取水相且合併之有機物用水，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。用Et
2
O濕磨殘餘物獲得白色固體，將其濾出且真空乾燥獲得(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-三氘甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(11.18 g，30.6 mmol，74%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.03 min, [MH]+ = 367
中間物 113 ： (+/-)-(5- 溴 -2- 羥基 -N
- 三氘甲基 -3-( 環氧乙烷 -2- 基 ( 苯基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，(+/-)-5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(14.65 g，41.9 mmol)於DCM (200 mL)中之溶液用mCPBA (18.80 g，84 mmol) (50 w/w%)處理且在室溫下攪拌所得混合物48小時。接著將混合物分配於DCM與飽和NaHCO
3
(水溶液)(100 mL)及五水合硫代硫酸鈉(15.62 g，62.9 mmol)於水(100 mL)中之混合物之間。攪拌混合物20分鐘，接著分離各層。水相用DCM萃取且合併之有機物用飽和NaHCO
3
(水溶液)、水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈白色/淺黃色固體狀之粗(+/-)-5-溴-2-羥基-N-三氘化甲基-3-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(15.4 g，42.2 mmol，101%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.01 min, [MH]+ = 367
中間物 114 ： (+/-)-5- 溴 -2- 羥基 -N
- 三氘化 - 甲基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，(+/-)-5-溴-2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(28 g，81 mmol)於水(100 mL)中之溶液用C-三氘化甲胺(416 mL)處理。在室溫下攪拌所得混合物16小時，接著真空濃縮。將殘餘物分配於水與EtOAc之間。水相用EtOAc萃取，且合併之有機物用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥，且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用5-35% AcOEt:己烷梯度溶離)純化殘餘物獲得呈橙色發泡體狀之(+/-)-5-溴-2-羥基-N-三氘化-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(14.65 g，41.9 mmol，52%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.26 min, [MH]+ = 351
中間物 115 ： ( 反 )-5- 溴 -2-( 氟甲基 )-N
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 在0℃下，在N
2
下，經1小時將Deoxo-Fluor (100 mL，271 mmol)逐滴添加至(反)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(49 g，135 mmol)於DCM (400 mL)中之懸浮液，接著在0℃下攪拌混合物30分鐘，經1小時升溫至室溫，接著在N
2
下加熱至35℃隔夜。將混合物分小份倒入快速攪拌之飽和NaHCO
3
(水溶液) (2 L)中，接著攪拌混合物30分鐘，隨後分離各相。有機物用飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌，接著乾燥且真空蒸發獲得淺黃色固體。將其用乙醚濕磨且藉由過濾收集固體且用乙醚洗滌獲得呈無色固體狀之(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(26.5 g，72.8 mmol，54%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.19 min, [MH]+ = 366
中間物 116 ： (+/-)-(4,4- 二氟 -3-(2-(( 反 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯 在室溫下，在攪拌下，將(+/-)-(反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.161 mmol)、HATU (73.3 mg，0.193 mmol)及DIPEA (0.084 mL，0.482 mmol)溶解於DMF (3 mL)中持續5分鐘。將3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(59.4 mg，0.225 mmol)溶解於DMF (1.00 mL)中且添加至反應混合物，接著將其在室溫下進一步攪拌2小時，且添加3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(20 mg，0.076 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。用水稀釋反應混合物且用DCM萃取。有機物用10% LiCl (水溶液)洗滌且添加鹽水。有機層經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用0-7% MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得呈黃色油狀之(+/-)-4,4-二氟-3-(2-((反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(79 mg，0.142 mmol，88%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.28 min, [MH]+ = 558
中間物 117 ： ( 反 )-N 5
-((1R
,5S
,6s
)-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(1R,5S,6s)-6-((反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(240 mg，0.462 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且用TFA (0.107 mL，1.386 mmol)處理，且在室溫下攪拌16小時。濃縮且乾燥反應物獲得呈黃色膠狀之(反)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(168 mg，0.429 mmol，93%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 0.63 min, [MH]
+
= 392
中間物 118 ： (2S
,3S
)-N 5
-((1R
,5S
,6s
)-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DCM (10 mL)中攪拌(1R,5S,6s)-6-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(133 mg，0.261 mmol)及TFA (0.201 mL，2.61 mmol)持續2小時。將反應物濃縮成褐色膠狀物，將其經SCX SPE (1 g)用MeOH，隨後NH
3
溶液(MeOH中2M)溶離。濃縮氨水部分獲得呈黃色膠狀之(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(85 mg，0.208 mmol，80%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 0.55 min, [MH]
+
= 410
中間物 119 ： (1R
,5S
,6s
)-6-(( 反 )-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸第三丁
酯 將(1R,5S,6s)-6-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(212 mg，1.071 mmol) (獲自例如Astatech)、(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(130 mg，0.357 mmol)、乙酸鈀(II)(40.1 mg，0.178 mmol)、氧雜蒽膦(103 mg，0.178 mmol)、DMAP (65.4 mg，0.535 mmol)以及羰基鈷(61.0 mg，0.178 mmol)置於微波小瓶中且添加蓋子。添加1,4-二噁烷(4 mL)且在biotage微波中在90℃下照射反應物1小時。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機相用鹽水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮成黑色油狀物。此油狀物使用矽膠管柱層析(用0-40% (含25% EtOH之EtOAc):Etoac梯度溶離)純化獲得呈褐色油狀之(1R,5S,6s)-6-((反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(133 mg，0.261 mmol，73.1%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt = 1.11 min, [MH]
+
= 510
中間物 120 ： (2R
,3R
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲酸 在50℃下，在水(30 mL)及THF (30 mL)中攪拌(2R,3R)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸甲酯(2.2 g，6.41 mmol)及氫氧化鋰(0.307 g，12.81 mmol)持續16小時。濃縮反應物移除THF，接著用水稀釋，隨後用2N HCl (水溶液)酸化至pH 3。藉由過濾移除所形成之沈澱物且乾燥獲得呈白色固體狀之(2R,3R)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸 (2.010 g，6.10 mmol，95%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt 0.89 min, [M+H]
+
= 330
中間物 121 ： (2S
,3S
)-5- 溴 -2-( 氟甲基 )-N
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(320 mg，0.879 mmol) (320 mg)。將外消旋物溶解於EtOH (5 mL)中。注射：將0.5 mL溶液注入至管柱(20% EtOH/庚烷，流動速率= 20 mL/min，偵測波長= 215 nm，4. Ref 550, 100, 管柱2 cm × 25 cm Chiralcel OJ (10 µm)，批號OJ00CJ-FD022)上。總注射次數=12。5.75-6.5分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰1。6.5-7.5分鐘之溶離份堆積在一起且標記為混合物，7.5-9.5分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰2。真空濃縮堆積在一起之混合溶離份且使用上述方法再加工。真空濃縮堆積在一起之純溶離份，接著轉移至稱量燒瓶。 收集對應於峰1之溶離份獲得(2S,3S)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(145 mg)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.17 min, [MH]+ = 364, 366。
中間物 122 ： N 5 -((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3- 溴 -N 7
,2- 二甲基苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入3-溴-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)苯并呋喃-5-甲酸(713 mg，2.28 mmol)及(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺(226 mg，2.28 mmol)，接著填充DCM (17 mL)。在室溫下，用DIPEA (1.20 mL，6.85 mmol)處理所得混合物且在此溫度下攪拌所得溶液5分鐘。添加T3P (1.63 mL，2.74 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。接著添加(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺(45.3 mg，0.457 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。接著添加T3P (0.680 mL，1.14 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。接著添加DIPEA (0.399 mL，2.28 mmol)，隨後T3P (0.680 mL，1.14 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。混合物接著用飽和NaHCO
3
(水溶液)處理且分離各層。水相用DCM萃取且合併之有機物用鹽水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈奶油色固體狀之N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(583 mg，65%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.84 min, [M+H]
+
= 395 (1 Br)。
中間物 123 ： N 5 -((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3- 羥基苯基 )-N 7
,2- 二甲基苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(653 mg，1.66 mmol)、(3-羥基苯基)
酸(275 mg，1.99 mmol)、乙酸鈀(II)(37.3 mg，0.166 mmol)、CatacXium A (59.5 mg，0.166 mmol)及K
2
CO
3
(136 mg，0.984 mmol)，接著填充1,4-二噁烷(9 mL)及水(3 mL)且在70℃下在N
2
下攪拌反應混合物1小時。添加(3-羥基苯基)
酸(275 mg，1.99 mmol)、乙酸鈀(II)(37.3 mg，0.166 mmol)、CatacXium A (59.5 mg，0.166 mmol)及K
2
CO
3
(229 mg，1.66 mmol)且在70℃下在N
2
下攪拌反應混合物16小時，接著冷卻至室溫。反應混合物經10 g矽藻土管柱用MeOH及EtOAc溶離且真空濃縮溶離份。用水稀釋殘餘物且用EtOAc萃取水相。有機物用鹽水洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於DCM及MeOH中，添加Florisil
®
且真空濃縮混合物。將所得自由流動固體裝入至50 g二氧化矽管柱上且用0-80% [含25% EtOH之EtOAc]:環己烷溶離。真空濃縮相關溶離份獲得N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-羥基苯基)-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(270 mg，40%)，白色固體。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.84 min, [M+H]
+
= 407。
中間物 124 ： N 5 -((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 )-N 7
,2- 二甲基苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-羥基苯基)-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(200 mg，0.492 mmol)及K
2
CO
3
(136mg, 0.984 mmol)且添加DMF (5 ml)。在室溫下，所得混合物用1-氯-2-甲氧基乙烷(0.054 mL，0.59 mmol)處理，接著在70℃下攪拌2小時，進一步添加1-氯-2-甲氧基乙烷(0.135 mL，1.48 mmol)且在70℃下攪拌反應混合物16小時。進一步添加1-氯-2-甲氧基乙烷(0.135 mL，1.48 mmol)及K
2
CO
3
(136 mg，0.984 mmol)且在70℃下攪拌反應混合物3小時，接著在90℃下攪拌3小時。將反應物冷卻至室溫且用水稀釋，用DCM萃取水相，有機物用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈橙色油狀之N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺 (224 mg，98%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.96 min, [MH]
+
= 465
中間物 125 ： ( 順 )-N 5
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 )-N 7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在H
2
(1 atm)氛圍下，攪拌N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(224 mg，0.482 mmol)及Pd-C 424 (可購自例如Johnson Matthey, 100 mg)於EtOH (10 mL)中之混合物4天。反應物經矽藻土過濾以移除催化劑，接著真空濃縮獲得呈無色膠狀之(順)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(198 mg，88%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 0.92 min, [M+H]
+
= 467。
中間物 126 ： (+/-)3,3- 二氟 -4-(3-(( 反 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5 甲醯胺基 ) 丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 將(+/-)(反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.26 mmol)、4-(3-胺基丙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(71.5 mg，0.257 mmol)、DIPEA (0.134 mL，0.771 mmol)及HATU (147 mg，0.385 mmol)溶解於DMF (5 mL)中且在室溫下攪拌所得混合物15分鐘，接著保持隔夜(16小時)。混合物接著用EtOAc稀釋且有機相用水(20 mL)，接著飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌，穿過疏水性玻璃料且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之己烷)純化殘餘物獲得(+/-)3,3-二氟-4-(3-((反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(91 mg，95%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.27 min, [M+H]
+
= 572。
中間物 127 ： (+/-)( 反 )-N 5
-(3-(3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 丙基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(+/-)3,3-二氟-4-(3-((反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(91 mg，0.159 mmol)於DCM (4 mL)中之溶液用TFA (0.5 mL，6.49 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著將其真空濃縮且在氮氣流下進一步乾燥2小時獲得呈白色固體狀之(+/-)三氟乙酸(反)-N
5
-(3-(3,3-二氟哌啶-4-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(75 mg，76%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.03 min, [M+H]
+
= 472
中間物 128 ： (2S
,3S
)-N 5
-(4,4- 二 乙氧基 丁基 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(200 mg，0.607 mmol)、HATU (277 mg，0.729 mmol)及DIPEA (0.318 mL，1.822 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且在室溫下混合5分鐘。添加4,4-二乙氧基丁-1-胺(0.109 mL，0.607 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物1.5小時。另外，添加4,4-二乙氧基丁-1-胺(0.109 mL，0.607 mmol)且攪拌反應物5分鐘，接著靜置隔夜。接著將其稀釋於EtOAc中，且有機相用2 w/w%檸檬酸(水溶液)、鹽水，接著飽和鈉NaHCO
3
(水溶液)洗滌且真空濃縮。將獲得之殘餘物溶解於DCM (5 mL)中。濾出不溶物，溶解於MeOH (5 mL)中且蒸發隔夜獲得產物之第一溶離份。將DCM濾液裝載至25 g二氧化矽濾芯上。藉由矽膠急驟層析法(含20-100% EtOAc之環己烷)純化獲得產物之第二溶離份。合併兩種溶離份獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-N
5
-(4,4-二乙氧基丁基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺 (158 mg，55%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.08 min, [M-H]
-
= 471
中間物 129 ： (2S
,3S
)-N5
-(3-((2r
,5)-5-(1,3- 二側氧基異吲哚啉 -2- 基 )-1,3- 二噁烷 -2- 基 ) 丙基 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在40℃下攪拌(2S,3S)-N
5
-(4,4-二乙氧基丁基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(158 mg，0.318 mmol)、2-(1,3-二羥基丙烷-2-基)異吲哚啉-1,3-二酮(70.3 mg，0.318 mmol)及單水合對甲苯磺酸(60.4 mg，0.318 mmol)於甲苯(6 mL)中之懸浮液1.5小時，接著在70℃下，在N
2
下進一步攪拌4小時，隨後使其冷卻至室溫且保持靜置隔夜。接著真空移除溶劑。將所獲得之殘餘物分配於EtOAc與1M Na
2
CO
3
(水溶液)之間且分離各層。水相用EtOAc萃取且合併之有機物使用疏水性玻璃料乾燥。真空蒸發濾液。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，梯度含70-100% EtOAc之環己烷)純化殘餘物獲得呈黃色固體狀之(2S,3S)-N
5
-(3-(5-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(48 mg，25%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.12 min, [M+H]
+
= 602
中間物 130 ： (2S
,3S
)-N 5
-(3,3- 二 乙氧基丙基 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(250 mg，0.759 mmol)及HATU (346 mg，0.911 mmol)，接著用DMF (4 mL)填充，且所得混合物在室溫下用DIPEA (0.398 mL，2.28 mmol)處理，接著在此溫度下攪拌5分鐘。接著添加3,3-二乙氧基丙-1-胺(0.147 mL，0.911 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物1小時，隨後用水(50 mL)稀釋。水相用EtOAc萃取。合併之有機物用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌且經疏水性玻璃料過濾。真空蒸發溶劑。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含20至100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得呈黃色膠狀之(2S,3S)-N
5
-(3,3-二乙氧基丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(306 mg，88%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.05 min, [M+H]
+
= 458
中間物 131 ： (2S
,3S
)-N 5
-(2-((2r
,5S
)-5-(1,3- 二側氧基異吲哚啉 -2- 基 )-1,3- 二噁烷 -2- 基 ) 乙基 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在70℃下，在N
2
下，攪拌(2S,3S)-N
5
-(3,3-二乙氧基丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(306 mg，0.668 mmol)、2-(1,3-二羥基丙烷-2-基)異吲哚啉-1,3-二酮(162 mg，0.734 mmol)及單水合對甲苯磺酸(140 mg，0.734 mmol)於甲苯(10 mL)中之懸浮液隔夜，接著使其冷卻至室溫且真空濃縮獲得褐色固體。將此殘餘物分配於EtOAc與2N Na
2
CO
3
(水溶液)之間且分離各層。水相用EtOAc萃取且經合併之有機相使用疏水性玻璃料乾燥。真空濃縮濾液獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-N
5
-(2-((2r,5S)-5-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-1,3-二噁烷-2-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(144.9 mg，37%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.09 min, [M+H]
+
= 588
中間物 132 ： 3- 溴 -4-( 肉桂基氧基 ) 苯甲酸甲酯 向燒瓶中裝入3-溴-4-羥基苯甲酸甲酯(40.7 g，176 mmol)、碳酸鉀(48.7 g，352 mmol)及碘化鉀(2.047 g，12.33 mmol)，接著用丙酮(400 mL)填充，且所得懸浮液用(E)-(3-氯丙-1-烯-1-基)苯(27.2 mL，282 mmol)處理，隨後在回流下攪拌8小時。將混合物冷卻至室溫且濾出固體且分配於EtOAc與水之間。分離各層且用EtOAc進一步萃取水層。真空濃縮丙酮濾液且將殘餘物溶解於來自萃取的經合併之EtOAc溶離份中。用水洗滌EtOAc層且經合併之相流過過濾器以收集固體，將其用EtOAc洗滌且在40℃下真空乾燥2小時，獲得3-溴-4-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(7.7 g，22.18 mmol, 13%產率)。分離各層，有機相用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色固體狀之3-溴-4-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(47.4 g，137 mmol，77%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.46 min, [MH]
+
=在校正m/z下不電離
中間物 133 ： 3- 溴 -4- 羥基 -5-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲酸甲酯 在220℃下攪拌3-溴-4-(肉桂基氧基)苯甲酸甲酯(15 g，43.2 mmol)於N,N-二甲基苯胺(100 mL)中之溶液1小時，接著冷卻至室溫。將混合物與300 mL EtOAc一起倒至冰冷之25 w/w% HCl (水溶液)上。分離各層，且用EtOAc萃取水相兩次。合併之有機物用飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌兩次，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺褐色油狀之3-溴-4-羥基-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(15 g，43.2 mmol，100%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.85 min, [MH]
+
= 347
中間物 134 ： 3- 溴 -4-( 甲氧基甲氧基 )-5-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲酸甲酯 在室溫下，3-溴-4-羥基-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(15.0 g，43.2 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液用K
2
CO
3
(11.9 g，86.0 mmol)，接著用MOM-Cl (3.94 mL，51.8 mmol)逐滴處理。10分鐘後，將混合物分配於水與Et
2
O之間且分離各層。水相用Et
2
O萃取兩次，且合併之有機物用水，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(330 g管柱，含0至10% EtOAc之己烷)純化殘餘物獲得呈淺橙色油狀之3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(13 g，77%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.44 min, [MH]
-
= 391 (1 Br)。
中間物 135 ： 3- 溴 -4-( 甲氧基甲氧基 )-5-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲酸 在室溫下，3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯(6.00 g，15.3 mmol)於MeOH (40 mL)及THF (20 mL)中之溶液用NaOH (水中之2N，19.17 mL，38.3 mmol)處理且在80℃下攪拌所得混合物1.5小時，接著冷卻至室溫。真空移除大部分揮發物，且殘餘物用水稀釋。水相用Et
2
O萃取且用2N HCl (水溶液)酸化。懸浮液用EtOAc萃取兩次，且用鹽水洗滌經合併之有機物，經MgSO
4
乾燥，且真空濃縮。殘餘物用Et
2
O濕磨，獲得呈白色固體狀之3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸(2.9 g，50%)。用於濕磨之Et
2
O相接著真空濃縮獲得呈淺褐色固體狀之另一份3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸(2.4 g，41%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.78 min, [M-H]
-
= 377 (1 Br)。
中間物 136 ： N -((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3- 溴 -4-( 甲氧基甲氧基 )-5-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲酸(2.30 g，6.10 mmol)於DMF (25 mL)中之溶液用HATU (2.78 g，7.32 mmol)，接著DIPEA (2.66 mL，15.2 mmol)，隨後(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(0.992 g，7.32 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得黃色混合物10分鐘，接著用水稀釋。水相用EtOAc萃取三次。合併之有機物用飽和LiCl(水溶液)，接著鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(100 g管柱，含40% AcOEt之己烷)純化殘餘物獲得呈白色發泡體狀之N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(2.45 g，88%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 1.20 min, [M+H]
+
= 458 (1 Br)。
中間物 137 ： (+/-)-N
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3- 溴 -4- 羥基 -5-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-(甲氧基甲氧基)-5-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(2.45 g，5.35 mmol)於DCM (15 mL)中之溶液用HCl (二噁烷中之4N，5.35 mL，21.4 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物1小時。混合物用Et
2
O稀釋且攪拌4分鐘，接著濾出所形成的白色沈澱物，用Et
2
O沖洗，且在真空下乾燥獲得呈白色固體狀之(+/-)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-羥基-5-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(2.2 g，99%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.08 min, [M+H]
+
= 416 (1 Br)。
中間物 138 ： (+/-)-N
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3- 溴 -4- 羥基 -5-( 環氧乙烷 -2- 基 ( 苯基 ) 甲基 ) 苯甲醯胺 在室溫下，(+/-)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-羥基-5-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺(4.20 g，10.1 mmol)於DCM (50 mL)中之溶液用m-CPBA (＜77 w/w%，5.68 g，25.3 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物3天。接著添加m-CPBA (＜77 w/w%，5.68 g，25.3 mmol)且在室溫下攪拌混合物兩天。接著將混合物倒至五水合硫代硫酸鈉(15.1 g，60.8 mmol)於水(100 mL)中之溶液與飽和NaHCO
3
(水溶液)之混合物上。在室溫下攪拌兩相混合物20分鐘，接著分離各層。水相用DCM萃取兩次且合併之有機物用飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌3次， 接著使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈極淺黃色發泡體狀之(+/-)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-羥基-5-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(4.5 g，103%)(外消旋非對映異構體之5/4混合物)。 LCMS (方法甲酸): Rt 0.88及0.93 min, [M+H]
+
= 432 (1 Br)
中間物 139 ： ( 反 )-N
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-7- 溴 -2-( 羥基甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺 在0℃下，N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-溴-4-羥基-5-(環氧乙烷-2-基(苯基)甲基)苯甲醯胺(4.2 g，9.76 mmol)於水(5 mL)及DMSO (25 mL)中之溶液用含KOH (1.095 g，19.52 mmol)之水(5 mL)逐滴處理。在此溫度下攪拌所得混合物8小時，接著用乙酸(1.285 mL，22.45 mmol)處理。添加30 mL水且劇烈攪拌所出現之沈澱物5分鐘，接著濾出且用水沖洗。將所獲得之殘餘物溶解於EtOAc (100 mL)中且有機相用鹽水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色發泡體狀之(反)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-7-溴-2-(羥基甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺(3.87 g，92%)。LCMS (2 min甲酸): Rt 0.93 min, [M+H]
+
= 432 (1 Br)
中間物 140 ： ( 反 )-N
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-7- 溴 -2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺 在0℃下，將(反)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-7-溴-2-(羥基甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺(2.6 g，6.0 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液用脫氧加氟物(6.68 mL，18.1 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得溶液1小時，接著在回流下攪拌隔夜。接著將反應混合物冷卻至室溫且添加至飽和碳酸氫鈉(水溶液)(100 mL)。攪拌所得兩相混合物30分鐘，接著分離各層。使用疏水性玻璃料乾燥有機相且真空濃縮獲得淺黃色膠狀物。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化殘餘物，獲得呈無色膠狀之(反)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-7-溴-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺(0.72 g，28%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.09 min, [M+H]
+
= 434 (1 Br)
中間物 141 ： ( 反 )-5-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基胺甲醯基 )-2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲酸甲酯 在圓底燒瓶中組合(反)-N-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-7-溴-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺(720 mg，1.67 mmol)、乙酸鈀(II) (37.4 mg，0.167 mmol)及氧雜蒽膦(96 mg，0.17 mmol)，將其用蘇巴密封件(suba seal)密封且用氮氣淨化。添加DMF (5 mL)、NEt
3
(0.696 mL，5.00 mmol)及MeOH (1.00 mL，24.7 mmol)。容器用來自氣球之一氧化碳淨化，接著在70℃下在CO氛圍(使用氣球)下攪拌隔夜。接著將混合物冷卻至室溫且用水(20 mL)稀釋。水相用EtOAc萃取，且有機相用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(50 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化殘餘物獲得呈淡褐色固體狀之(反)-5-(((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸甲酯(0.46 g，67%)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 0.96 min, [M+H]
+
= 412
中間物 142 ： ( 反 )-5-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基胺甲醯基 )-2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲酸甲酯 藉由對掌性層析純化(反)-5-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸甲酯(0.450 g，1.09 mmol)。將約80 mg外消旋物溶解於1.5 mL EtOH及3 mL DCM中，加熱混合物直至其變成溶液。注射：總共4.5 mL溶液注入至管柱上(總注射次數：6)。溶離劑：含40% EtOH (+0.2%異丙胺)之庚烷(+0.2%異丙胺)，流動速率 = 30 mL/min；波長，215 nm。管柱30 mm × 25 cm Chiralpak IC (5 µm)。在此方法期間，獲得一些混合溶離份。將其真空濃縮且所獲得之殘餘物進行相同處理。獲得作為最快溶離異構體之(2S*,3S*)-5-(((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸甲酯(201 mg，89%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.97 min, [M+H]
+
= 412。
中間物 143 ： ( 反 )-5-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基胺甲醯基 )-2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲酸 在室溫下，將NaOH (水中之2N，0.5 mL，1 mmol)添加至(反)-5-(((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸甲酯(200 mg，0.486 mmol)於MeOH (10 mL)中之溶液且在此溫度下攪拌混合物隔夜，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於水中且水相用2 N HCl水溶液酸化至pH 2，獲得緻密懸浮液。將其用DCM萃取且合併之有機物使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色固體狀之(反)-5-(((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸(195 mg，101%)。 LCMS (2 min高pH): Rt 0.60 min, [M+H]
+
= 398
中間物 144 ： ( 反 )-N 5
-((1R
,5S
,6r
)-3,3- 二氟雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(30 mg，0.096 mmol)、(1R,5S,6r)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(21.25 mg，0.125 mmol)、HATU (55.0 mg，0.145 mmol)及DIPEA (0.050 mL，0.289 mmol)溶解於DMF (4 mL)中。攪拌反應混合物1小時。將反應混合物分配於EtOAc與水之間。有機層用水、NaHCO
3
飽和水溶液洗滌，穿過疏水性玻璃料且真空蒸發。使用MDAP (甲酸)純化樣品獲得呈白色固體狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(18.2 mg，0.041 mmol, 42%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 1.11 min, [M+H]
+
= 427
中間物 145 ： ( 反 )-N 7
,2- 二甲基 -N 5
-(1- 甲基 -1H
- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.321 mmol)、HATU (147 mg，0.385 mmol)及DIPEA (0.168 mL，0.964 mmol)持續5分鐘，添加1-甲基-1H-吡唑-4-胺(46.8 mg，0.482 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。反應物用10%檸檬酸水溶液稀釋且用EtOAc萃取。有機相用10% LiCl水溶液洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得黃色膠狀物。此膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-60% (含25% EtOH之EtOAc):環己烷梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(反)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(65 mg，0.166 mmol，52%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt 0.95 min, [M+H]
+
= 391
中間物 146 ： 第三丁基 ( 環戊 -3- 烯 -1- 基氧基 ) 二甲基矽烷 將環戊-3-烯-1-醇(5 g，59.4 mmol，可購自例如Astatech)溶解於DCM (100 mL)中且添加TBDMS-Cl (8.96 g，59.4 mmol)及咪唑 (4.86 g，71.3 mmol)，接著在室溫下攪拌所得懸浮液過週末。混合物用水(2 × 100 mL)洗滌，乾燥且真空蒸發獲得呈淺黃色液體狀之第三丁基(環戊-3-烯-1-基氧基)二甲基矽烷(12.05g, 60.7 mmol，102%產率)。
1
H NMR (400 MHz, 氯仿-d) δ ppm 5.68 (s, 2 H) 4.50 - 4.62 (m, 1 H) 2.59 (dd, J=14.9, 6.8 Hz, 2 H) 2.23 - 2.37 (m, 2 H) 0.91 (s, 9 H) 0.09 (s, 6 H)。
中間物 147 ： (1R
,5S
,6r
)-3-(( 第三丁基 二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 甲酸乙酯 將二氮雜乙酸乙酯(6.90 mL，66.5 mmol，可購自例如Sigma Aldrich)溶解於DCM (150 mL)中且在室溫下經約5小時逐滴添加至乙酸銠(II)二聚物(1 g，2.263 mmol，可購自例如Sigma Aldrich)及第三丁基(環戊-3-烯-1-基氧基)二甲基矽烷(12 g，60.5 mmol)於DCM (150 mL)中之混合物中。攪拌所得綠色溶液隔夜，接著真空蒸發獲得綠色液體。將其裝載至340 g二氧化矽管柱上且用0-40% EtOAc/環己烷溶離。真空蒸發適當溶離份獲得呈無色液體狀之(1R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(5.5 g，19.33 mmol，32.0%產率)- NMR看起來與所要產物相符，為約3:1比率之矽烷醚位置處之異構體混合物，且其以粗產物形式進行下一步驟。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.96 min, [MH]
+
= 不存在。
中間物 148 ： ((1R
,5S
,6r
)-3-(( 第三丁基 二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 ) 胺基甲酸苯甲酯 步驟 1 ：
在室溫下，將氫氧化鈉(20 mL，40.0 mmol)添加至(1R*,5S*,6r*)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯(5.0 g，17.58 mmol)於乙醇(50 mL)中之溶液中，且攪拌混合物3小時。TLC表明全部起始物質已耗盡且真空蒸發混合物至約30 mL體積，接著用水(30 mL)稀釋且用乙醚(50 mL)洗滌。乾燥且真空蒸發來自處理之乙醚洗滌液獲得回收之起始物質(3.85 g) (1R*,5S*,6r*)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸乙酯。將其溶解於乙醇(30 mL)中且添加2M NaOH水溶液(20 mL)，接著在70℃下加熱混合物3小時，接著真空蒸發。將殘餘物溶解於水(50mL)中且用乙醚(50 mL)洗滌，接著水層用2 M HCl (20 mL)酸化且用EtOAc (2× 50mL)萃取。乾燥且真空蒸發合併之有機物獲得呈淺黃色固體狀之(1R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸(1.9 g，7.41 mmol，42.2%產率)。產物未經純化即用於下一步驟。
步驟 2 ：
將(1R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-甲酸(1.8 g，7.02 mmol)溶解於甲苯(20 mL)與Et
3
N (1.957 mL，14.04 mmol)之混合物中，接著添加DPPA (1.815 mL，8.42 mmol)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。添加苯甲醇(1.095 mL，10.53 mmol)且在100℃下加熱混合物4小時，接著冷卻至室溫。添加乙酸乙酯(100 mL)且溶液用水(2 × 100 mL)洗滌，接著經硫酸鈉乾燥，過濾且真空蒸發濾液獲得淺黃色油狀物。將其溶解於DCM (10 mL)中且裝載至50 g二氧化矽管柱上，接著用0-30% EtOAc/環己烷溶離且收集含有產物之溶離份(藉由高錳酸鹽浸漬劑偵測)且真空蒸發獲得呈淺黃色油狀之((1R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺基甲酸苯甲酯(1.90 g，5.26 mmol，74.9%產率)，NMR與所要產物相符，為約2:1比率之異構體混合物。化合物未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.56 min, [MH]
+
= 362.6。
中間物 149 ： (1R,3s,5S,6r)-3-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 胺 ( 非對映異構體之 9:1 混合物 ) 將((1R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺基甲酸苯甲酯(0.52g, 1.438 mmol)溶解於EtOH (30mL)中且在大氣壓及1 ml/min流動速率下在H-Cube中氫化。真空蒸發溶離劑且使用矽膠管柱層析(用0-10% 2M甲醇氨溶液:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得：(1R,3s,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-胺(非對映異構體之9:1混合物) (12 mg，37%)
1
H NMR (400 MHz, 氯仿-
d
) δ ppm 3.79 (t,
J
=7.6 Hz, 1 H) 2.01 (dd,
J
=12.8, 7.2 Hz, 2 H) 1.95 (s, 1 H) 1.62 - 1.69 (m, 2 H) 1.53 (br. s., 2 H) 1.17 (dd,
J
=3.2, 1.7 Hz, 2 H) 0.82 - 0.87 (m, 9 H) -0.03 - 0.02 (m, 6 H)
中間物 150 ： (2S,3S)-N5-((1R,3R,5S,6r)-3-(( 第三丁基二甲基矽烷基 ) 氧基 ) 雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 ( 非對映異構體之 9:1 混合物 ) 在燒瓶中混合(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(101 mg，0.308 mmol)、HATU (138 mg，0.363 mmol)、DMF (5 mL)及DIPEA (0.157 mL，0.901 mmol)且攪拌15分鐘。接著添加(1R,3s,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-胺(50 mg，0.220 mmol)且在室溫下攪拌反應物3小時。反應物用水稀釋且用EtOAc (3萃取，有機物用10% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮成褐色油狀物。使用矽膠管柱層析(用含0至60% (含25% EtOH之乙酸乙酯)之環己烷梯度溶離)純化油狀物獲得(2S,3S)-N5-((1R,3R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(72.4 mg，0.134 mmol，61.1%產率) (非對映異構體之9:1混合物) LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.47 min, [MH]
+
= 539
實例 實例 1 及 2 ： (2R
*,3R
*)-N5
- 環丁基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2R*,3S*)-N5
- 環丁基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(90 mg，0.26 mmol)、八羰基二鈷(44.4 mg，0.130 mmol)、環丁胺(37.0 mg，0.520 mmol)、DMAP (63.5 mg，0.520 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(9.3 mg，0.026 mmol)及Pd(OAc)
2
(5.8 mg，0.026 mmol)，接著用2-甲基四氫呋喃(3 mL)填充。在微波照射下，在100℃下攪拌所得混合物1小時，接著在120℃下攪拌30分鐘，接著冷卻至室溫。同時，進行第二反應：向微波小瓶裝入5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(40 mg，0.12 mmol)、八羰基二鈷(9.9 mg，0.029 mmol)、環丁胺(8.2 mg，0.12 mmol)、DMAP (28.2 mg，0.231 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦 (4.1 mg，0.012 mmol)及Pd(OAc)
2
(2.6 mg，0.012 mmol)，接著用2-甲基四氫呋喃(3 mL)填充。在微波照射下在80℃下攪拌所得混合物20分鐘，接著在120℃下攪拌2小時，接著冷卻至室溫。接著合併兩個反應混合物且用EtOAc (20 mL)稀釋，且有機相用1 N HCl水溶液(20 mL)，接著水(20 mL)洗滌，接著經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得兩個溶離份，其個別地藉由MDAP (方法高pH)進一步純化獲得呈淺黃色結晶固體狀之(2R*,3R*)-N
5
-環丁基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(7 mg，5%) (實例1)，及呈淺黃色膠狀之(2R*,3S*)-N
5
-環丁基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(3 mg，2%)(實例2)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.07 min, [M+H]
+
= 365 (實例1) LCMS (方法高pH): 滯留時間1.09 min, [M+H]
+
= 365 (實例2)
實例 3 ： N5
-(2- 羥基丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(250 mg，0.722 mmol)、八羰基二鈷(123 mg，0.361 mmol)、3-胺基丙-1-醇(108 mg，1.44 mmol)、DMAP (176 mg，1.44 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦 (26 mg，0.072 mmol)及Pd(OAc)
2
(16 mg，0.072 mmol)，接著填充2-甲基四氫呋喃(3 mL)且在100℃在微波照射下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且用1 N HCl水溶液(20 mL)稀釋。水相用EtOAc (20 mL)萃取且有機相用水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得褐色膠狀物。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-10% MeOH之DCM)純化所獲得之殘餘物獲得順及反異構體之1:1混合物形式的N
5
-(3-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(135 mg，51%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 369
實例 4 ： N5
- 環丙基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(250 mg，0.722 mmol)、八羰基二鈷(123 mg，0.361 mmol)、環丙胺(82 mg，1.4 mmol)、DMAP (176 mg，1.44 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(26 mg，0.072 mmol)及Pd(OAc)
2
(16 mg，0.072 mmol)，接著填充2-甲基四氫呋喃(3 mL)且在100℃下，在微波照射下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且用1 N HCl水溶液(20 mL)稀釋。水相用EtOAc (20 mL)萃取且有機相用水洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得褐色膠狀物。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物獲得呈紫色固體狀之N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(順及反異構體之1:1混合物，100 mg，39%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]
+
= 351
實例 5 ： N5
,N7
,2- 三甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (141 mg，1.15 mmol)、Pd(OAc)
2
(13 mg，0.058 mmol)、八羰基二鈷(99 mg，0.289 mmol)、5-溴-N,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(200 mg，0.578 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(21 mg，0.058 mmol)及甲胺(THF中之2N，0.58 mL，1.1 mmol)，接著填充DMF (5 mL)且在100℃下在微波照射下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且用1 N HCl水溶液(20 mL)稀釋。水相用EtOAc (20 mL)萃取兩次且經合併之有機相用飽和NH
4
Cl水溶液洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得黃色固體。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色油狀之N
5
,N
7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(順及反異構體之1:1混合物，78.5 mg，42%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.90 min, [M+H]
+
= 325
實例 6 及 7 ： (2R
,3S
)-N5
-(2- 羥基丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2S
,3S
)-N5
-(2- 羥基丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(實例3，130 mg)進行對掌性HPLC純化。 - 分析方法：將約130 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中；將50 μL稀釋至1 mL EtOH中且注入管柱上。溶離：含10% EtOH之庚烷，f=1.0 mL/min，波長250 nm。管柱Chiralpak IA 250 × 4.6 mm (5 μm)。 - 製備方法：將約130 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中。注射：將0.75 mL溶液注入管柱上。溶離：含10% EtOH之庚烷，f=42.5 mL/min，波長，280 nm。管柱Chiralpak IA 250×30 mm (5 μm)。 此獲得(2
R
,3
S
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(8 mg，6%，實例6)及(2
S
,3
S
)-N
5
-(2-羥基丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(5 mg，4%，實例7)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.88 min, [M+H]
+
= 369 (實例6) LCMS (方法高pH): 滯留時間0.88 min, [M+H]
+
= 369 (實例7)。
實例 8 及 9 ： (2R
,3S
)-N5
- 環丙基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2S
,3S
)-N5
- 環丙基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性層析純化實例4 (100 mg)： - 分析方法：將約100 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中；將50 μL稀釋至1 mL EtOH中且注入管柱上。溶離：含10% EtOH之庚烷，f=1.0 mL/min，波長250 nm。管柱Chiralpak IA 250 × 4.6 mm (5 μm)。 - 製備方法：將約100 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中。注射：將0.75 mL溶液注入管柱上。溶離：含10% EtOH之庚烷，f=42.5 mL/min，波長，280 nm。管柱Chiralpak IA 250 × 30 mm (5 μm)。 此獲得(2R,3S)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(9 mg，9%，實例8)作為第一溶離異構體及經(2S,3R)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺污染之(2S,3S)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(19 mg，19%)。順及反對映異構體之此混合物藉由MDAP (方法高pH)進一步純化獲得(2S,3S)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(3 mg，3%，實例9)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]
+
= 351 (實例8) LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]
+
= 351 (實例9)
實例 8 ： 替代程序 ：
向(2R*,3S*)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(190 mg，0.610 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液中依序添加DIPEA (0.128 mL，0.732 mmol)、六氟磷酸2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異
(V) (278 mg，0.732 mmol)及環丙胺(0.052 mL，0.73 mmol)。15分鐘之後真空濃縮混合物。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-50% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物，獲得經HATU污染之(2R*,3S*)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(400 mg)。此材料接著藉由對掌性層析純化： - 分析方法：將約0.5 mg材料溶解於50% EtOH/庚烷(1 mL)中，向管柱上注入20 μL。溶離：含10% EtOH之庚烷，f=1.0 mL/min，波長215 nm。管柱4.6 mmid × 25cm Chiralpak IA。 - 製備方法：將約400 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中。注射(總共2次)：將2 mL溶液注入管柱上。溶離：含10% EtOH之庚烷，f = 30 mL/min，波長，215 nm。管柱30 mm × 25 cm Chiralpak IA (5 μm)。此獲得(2R,3S)-N
5
-環丙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(91 mg，23%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]+ = 351。
實例 10 ： (2S
*,3S
*)-N5
- 環丙基 -2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (202 mg，1.66 mmol)、Pd(OAc)
2
(18 mg，0.083 mmol)、八羰基二鈷(142 mg，0.414 mmol)、(2S*,3S*)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(300 mg，0.828 mmol)、環丙胺(0.070 mL，0.99 mmol)以及氧雜蒽膦(57 mg，0.099 mmol)，接著用THF (3 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2S*,3S*)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(24 mg，8%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.78 min, [M+H]
+
= 367
實例 11 ： (2S
*,3S
*)-N5
- 環丁基 -2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (67.5 mg，0.552 mmol)、Pd(OAc)
2
(6.2 mg，0.028 mmol)、八羰基二鈷(47.2 mg，0.138 mmol)、(2S,3S)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.276 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(9.9 mg，0.028 mmol)以及環丁胺(39.3 mg，0.552 mmol)，接著用(3 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫，經Celite
®
(2.5 g墊)過濾且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2S*,3S*)-N
5
-環丁基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(10 mg，10%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.88 min, [M+H]
+
= 381
實例 12 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
- 丙基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (67.5 mg，0.552 mmol)、Pd(OAc)
2
(6.2 mg，0.028 mmol)、八羰基二鈷(47.2 mg，0.138 mmol)、(2S*,3S*)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.276 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(9.9 mg，0.028 mmol)以及正丙胺(0.046 mL，0.55 mmol)，接著用THF (2 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫，經矽藻土(2.5 g墊)過濾且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-丙基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(10 mg，10%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+
= 369
實例 13 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-(2-( 哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (54.0 mg，0.442 mmol)、Pd(OAc)
2
(5.0 mg，0.022 mmol)、八羰基二鈷(37.8 mg，0.110 mmol)、(2S*,3S*)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(80 mg，0.22 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(7.9 mg，0.022 mmol)以及4-(2-胺基乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(101 mg，0.442 mmol)，接著用THF (2 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且用處理TFA (1.7 mL，過量)。在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，接著經Celite
®
(2.5 g墊)過濾且真空濃縮。殘餘物與2N MeOH中之NH
3
溶液(10 mL)一起共蒸發，接著藉由MDAP (方法高pH)純化獲得(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(2-(哌啶-4-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(40 mg，41%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.53 min, [M+H]
+
= 438
實例 14 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(3-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (33.7 mg，0.276 mmol)、Pd(OAc)
2
(3.1 mg，0.014 mmol)、八羰基二鈷(24 mg，0.069 mmol)、(2S*,3S*)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(50 mg，0.14 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(5.0 mg，0.014 mmol)以及3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙-1-胺(43.4 mg，0.276 mmol)，接著用THF (1 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(8 mg，12%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.75 min, [M+H]
+
= 467
實例 15 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-(3-( 哌嗪 -1- 基 ) 丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入DMAP (84 mg，0.69 mmol)、Pd(OAc)
2
(7.8 mg，0.035 mmol)、八羰基二鈷(59.0 mg，0.173 mmol)、(2S*,3S*)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(125 mg，0.345 mmol)、二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦(12 mg，0.035 mmol)及4-(3-胺基丙基)哌嗪-1-甲酸第三丁酯(168 mg，0.690 mmol)，接著用THF (2 mL)填充。在微波照射下，在110℃下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫且用TFA (1.4 mL，過量)處理。在此溫度下攪拌所得混合物10分鐘，接著經Celite
®
(2.5 g墊)過濾且真空濃縮。使殘餘物與2N MeOH中之NH
3
溶液(10 mL)一起共蒸發，接著藉由MDAP (方法高pH)純化獲得(2S,3S)-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌嗪-1-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(15 mg，10%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.39 min, [M+H]
+
= 453
實例 16 ： (2S
,3S
)-N5
- 環丙基 -2-( 羥基甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3R)-2-(羥基甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.306 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用DIPEA (0.064 mL，0.37 mmol)、HATU (139 mg，0.367 mmol)及環丙胺(0.043 mL，0.61 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得經HATU污染之預期產物。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)進一步純化此殘餘物獲得(2R,3R)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(14 mg，13%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.77 min, [M+H]
+
= 367
實例 17 ： (2R
*,3S
*)-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -N5
-(3-( 哌啶 -4- 基 ) 丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3R*)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(180 mg，0.578 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用DIPEA (0.121 mL，0.694 mmol)、六氟磷酸2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3- 四甲基異
(V) (264 mg，0.694 mmol)及4-(3-胺基丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(168 mg，0.694 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著用TFA (0.89 mL，12 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物20分鐘，接著真空濃縮。使殘餘物與2N MeOH中之NH
3
溶液(10 mL)一起共蒸發，接著裝載至10 g SCX管柱上，用MeOH，接著2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得(2S*,3R*)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(250 mg，99%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.66 min, [M+H]
+
= 436。
實例 18 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -N5
-(3-( 哌啶 -4- 基 ) 丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性層析純化(2R*,3S*)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(實例17，300 mg)： - 分析方法：將約0.5 mg材料溶解於含50% EtOH之庚烷(1 mL)中且將20 μL注入管柱上。溶離：含75% EtOH (0.2%異丙胺)之庚烷，f = 1.0 mL/min，波長215 nm。管柱4.6 mmid × 25cm Chiralpak IC。 - 製備方法：將約300 mg材料溶解於EtOH (3 mL)中。注射(總共2次)：將1.5 mL溶液注入管柱上。溶離：含75% EtOH (0.2%異丙胺)之庚烷，f=30 mL/min，波長215 nm。管柱30 mm × 25 cm Chiralpak IC。 真空濃縮含有快速跑動對映異構體之溶離份獲得(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(104 mg，69%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.66 min, [M+H]
+
= 436
實例 19 ： (2R
,3S
)-N5
- 乙基 -N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3R)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)於DMF (0.5 mL)中之溶液用DIPEA (0.034 mL，0.19 mmol)、HATU (67.2 mg，0.177 mmol)及乙胺(THF中之2N，0.080 mL，0.16 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著用2 N HCl水溶液(5 mL)處理。水相用EtOAc (20 mL)萃取且有機相用水(4 × 10 mL)洗滌，接著用飽和LiCl水溶液，隨後鹽水洗滌。有機相接著使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得(2S,3R)-N
5
-乙基-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(50 mg，92%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.97 min, [M+H]
+
= 339
實例 20 ： (2R
,3S
)-N5
,N7
,2- 三甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.161 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用DIPEA (0.034 mL，0.19 mmol)、HATU (67.2 mg，0.177 mmol)及甲胺(THF中之2N，0.2 mL，0.4 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著用2N HCl水溶液(5 mL)處理。水相用EtOAc (20 mL)萃取且有機相用水(4 × 10 mL)，接著用飽和LiCl水溶液，隨後鹽水洗滌。有機相接著使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得(2R,3S)-N
5
,N
7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(40 mg，77%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.90 min, [M+H]
+
= 325
實例 21 ： (2R
,3S
)-N5
-((1S*,2S*)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3R)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(40 mg，0.13 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用DIPEA (0.027 mL，0.15 mmol)、HATU (53.7 mg，0.141 mmol)及((1S*,2S*)-2-胺基環丙基)甲醇(11.2 mg，0.128 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物15分鐘，接著用2N HCl水溶液(5 mL)處理。水相用EtOAc (20 mL)萃取且有機相用水(4 × 10 mL)，接著用飽和LiCl水溶液，隨後鹽水洗滌。有機相接著使用相分離器乾燥且真空濃縮獲得(2S,3R)-N
5
-((1S*,2S*)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(37 mg，76%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.87 min, [M+H]
+
= 381
實例 22 ： (2S
*,3S
*)-N5
- 環丙基 -2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(65 mg，0.20 mmol)於DMF (2 mL)中之溶液用NEt
3
(0.083 mL，0.59 mmol)、HATU (150 mg，0.395 mmol)及環丙胺(0.014 mL，0.20 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著藉由MDAP (方法高pH)直接純化獲得(2S*,3S*)-N
5
-環丙基-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，44)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.94 min, [M+H]
+
= 369
實例 23 ： (2S
,3S
)-N5
- 環丙基 -2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下用Et
3
N (0.085 mL，0.61 mmol)及HATU (150 mg，0.395 mmol)處理(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.304 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液。在此溫度下攪拌混合物30分鐘，接著添加環丙胺(0.028 mL，0.40 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (高pH方法)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-N
5
-環丙基-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，27%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.94 min, [M+H]
+
= 369
實例 24 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
,N7
- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(55 mg，0.17 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液用Et
3
N (0.047 mL，0.33 mmol)及HATU (83 mg，0.22 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得溶液30分鐘，接著添加甲胺(THF中之2N，0.109 mL，0.217 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
,N
7
-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(16 mg，28%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+
= 343
實例 25 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-((1S,2S)-2- 甲基環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 (2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.304 mmol)於DMF (3 mL)中之溶液用Et
3
N (0.085 mL，0.61 mmol)及HATU (150 mg，0.395 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得溶液30分鐘，接著添加(1S,2S)-2-甲基環丙胺(28.1 mg，0.395 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-((1S,2S)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(39 mg，34%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.00 min, [M+H]
+
= 383
實例 26 ： (2S
,3S
)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(1.9 g，5.8 mmol)、(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(1.02 g，7.50 mmol)、HATU (2.85 g，7.50 mmol)及Et
3
N (2.010 mL，14.42 mmol)溶解於DCM (20 mL)中且在室溫下攪拌所得混合物16小時。有機相接著用0.5N HCl水溶液(20 mL)、1N NaOH水溶液(20 mL)及鹽水(20 mL)依序洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得淺黃色膠狀物。藉由矽膠急驟層析法(管柱100 g，梯度：0至80% (25% EtOH/EtOAc)於環己烷)純化此殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(1.90 g，80%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.88 min, [M+H]
+
= 411
1
H NMR (400MHz, DMSO-d
6
) δ ppm 8.44 (d,
J
= 4.0 Hz, 1H), 8.22 (d,
J
= 2.0 Hz, 1H), 7.89 (q,
J
= 4.5 Hz, 1H), 7.59 - 7.57 (m, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.30 - 7.26 (m, 2H), 5.17 - 5.04 (m, 1H), 4.97 - 4.80 (m, 1H), 4.85 - 4.67 (m, 1H), 4.68 (d,
J
= 7.5 Hz, 1H), 3.82 (d,
J
= 8.5 Hz, 2H), 3.61 (dd,
J
= 3.0, 8.5 Hz, 2H), 2.87 (d,
J
= 4.5 Hz, 3H), 2.58 - 2.53 (m, 1H), 1.89 - 1.80 (m, 2H)。
實例 26 替代製備
實例26亦藉由替代合成程序製備。此程序中之特定中間物經下文所述之方法製備。
5- 溴 -2- 羥基 -N- 甲基 -3-(1- 苯基烯丙基 ) 苯甲醯胺 將5-溴-2-(肉桂基氧基)苯甲酸酯(1wt)溶解於無水N-甲基-2-吡咯啶酮(NMP) (3.5 vol)中。在1.45 mL/min (2.76 min滯留時間)下泵送饋料通過250℃及4巴背壓之4 mL不鏽鋼加熱管式反應器。向5-溴-2-羥基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲酸甲酯之粗溶液中添加甲胺水溶液(40 wt/wt%，3當量)。攪拌溶液一小時。使用8M HCl(0.9體積，2.5當量)將pH調整至pH 5，添加TBME (9體積)且用水(2 × 9體積)洗滌。水相用TBME (6.5體積)反萃取，合併之有機層用水(4體積)，接著鹽水(4體積)洗滌，經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得褐色油狀物。藉由矽膠管柱層析(用30%梯度(含EtOAc之己烷)溶離)純化油狀物獲得呈褐色發黏油狀之5-溴-2-羥基-N-甲基-3-(1-苯基烯丙基)苯甲醯胺 (58.3%產率)。
(+/-)(2S,3S)-5- 溴 -2-( 氟甲基 )-N- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -7- 甲醯胺 將(+/-)(2S,3S)-5-溴-2-(羥基甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(54.7 g，151 mmol)懸浮於DCM (400ml)中且在N
2
下攪拌，在冰浴中冷卻。接著添加DIPEA (92 mL，529 mmol)，隨後三氫氟酸三乙胺(30.1 mL，181 mmol)及全氟-1-丁烷磺醯氯(32.5 mL，181 mmol)，且攪拌混合物18小時，使其升溫至室溫。混合物藉由添加(小心地)碳酸氫鈉溶液(500ml)淬滅且劇烈攪拌30分鐘，接著分離有機層且用1M HCl (500 ml)洗滌。經硫酸鈉乾燥溶劑且真空蒸發獲得淺黃色固體。使用矽膠管柱層析(用5-60% EtOAc/環己烷梯度溶離)純化粗產物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(42.2 g，116 mmol，77%產率)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.21 min, [MH]
+
= 364 1H NMR (600 MHz, DMSO-
d
6) δ ppm 2.85 (d,
J
=5.0 Hz, 3 H) 4.68 (d,
J
=7.5 Hz, 1 H) 4.68 - 4.79 (m, 1 H) 4.80 - 4.92 (m, 1 H) 5.03 - 5.16 (m, 1 H) 7.22 -7.25 (m, 1 H) 7.26 - 7.29 (m, 2 H) 7.29 - 7.34 (m, 1 H) 7.36 - 7.40 (m, 2 H) 7.73 (dd,
J
=2.5, 0.5 Hz, 1 H) 7.88 (q,
J
=5.0 Hz, 1 H)
(+/-)(2S,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(+/-)(2S,3S)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(44.9 g，123 mmol)、(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(21.73 g，160 mmol)、PdOAc2 (1.384 g，6.16 mmol)、氧雜蒽膦(3.57 g，6.16 mmol)、2,6-二甲基吡啶(35.9 mL，308 mmol)及1,4-二噁烷(500 mL)添加至裝配有頂置式攪拌器及氣體攝入之1升夾套容器中，接著密封容器且用氮氣吹掃3次，接著用一氧化碳填充且在劇烈攪拌下將混合物加熱至90℃隔夜。將所得褐色懸浮液分配與1升玻璃瓶中，容器用2 × 100 ml甲醇洗滌，且將洗滌液添加至反應混合物，獲得澄清深褐色溶液。將溶液蒸發至約一半其初始體積，接著用DCM (2升)稀釋且用1M HCl (2 × 1升)及飽和鹽水與水(各500 ml)之混合物洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空蒸發獲得褐色固體。將粗產物懸浮於乙醚(500 ml)中且攪拌30分鐘，接著過濾且在真空烘箱中乾燥固體隔夜獲得呈淺褐色固體狀之(2S,3S)-N5-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(47.9 g，117 mmol，95%產率)，將其與70 g其他批次之相同材料組合獲得總共120 g。將固體溶解於DCM及甲醇中。添加Si硫醇樹脂(Silicycle目錄號R51030B)且在室溫下攪拌混合物30分鐘，接著過濾且用10% MeOH/DCM洗滌固體。真空蒸發濾液獲得褐色固體。將EtOAc添加至蒸發燒瓶中，使其在布氏漏斗(Buchi)上大氣壓下旋轉30分鐘，接著移除燒瓶且使懸浮液靜置1小時。藉由過濾收集產物且用EtOAc (500 ml)及乙醚(500 ml)洗滌，接著在真空烘箱中乾燥獲得呈淺米色之(+/-) (2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(98.9 g，241 mmol)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.91 min, [M+H]
+
= 411
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 8.45 (d,
J
=4.2 Hz, 1 H) 8.23 (d,
J
=1.5 Hz, 1 H) 7.89 (d,
J
=4.6 Hz, 1 H) 7.58 (d,
J
=1.2 Hz, 1 H) 7.25 - 7.45 (m, 5 H) 5.04 - 5.19 (m, 1 H) 4.91 - 4.99 (m, 1 H) 4.77 - 4.87 (m, 1 H) 4.62 - 4.74 (m, 1 H) 3.83 (d,
J
=8.6 Hz, 2 H) 3.61 (dd,
J
=8.3, 2.7 Hz, 2 H) 2.88 (d,
J
=4.6 Hz, 3 H) 2.55 (dt,
J
=4.2, 2.4 Hz, 1 H) 1.80 - 1.90 (m, 2 H)
(2S,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(+/-) (2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(24 g)。在加熱下將外消旋物(150 mg)溶解於EtOH (2 mL) + DCM (1 ml)中。注射：將3.5 mL溶液注入至管柱上(75% EtOH[+0.2%異丙胺]/庚烷[+0.2%異丙胺]，流動速率= 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱30 mm × 25 cm Chiralcel IC (5 μm), 批號IC10028-01)。 亦在加熱下將外消旋物(400-500 mg)溶解於EtOH (2 mL) + DCM (3ml)中。注射：將5 mL溶液注入至管柱上(75% EtOH[+0.2%異丙胺]/庚烷[+0.2%異丙胺]，流動速率 = 60 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550, 100, 管柱5 cm × 20 cm Chiralcel IC (20 µm), (自裝填)。來自11-14 min之溶離份堆積在一起且濃縮獲得(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(10.88 g)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.89 min, [MH]+ = 411。
1
H NMR (400 MHz, DMSO-
d 6
) δ ppm 8.44 (d,
J
=4.2 Hz, 1 H) 8.22 (d,
J
=1.7 Hz, 1 H) 7.88 (d,
J
=4.6 Hz, 1 H) 7.57 (s, 1 H) 7.24 - 7.43 (m, 5 H) 5.02 - 5.18 (m, 1 H) 4.90 - 5.00 (m, 1 H) 4.77 - 4.87 (m, 1 H) 4.63 - 4.74 (m, 1 H) 3.82 (d,
J
=8.3 Hz, 2 H) 3.61 (dd,
J
=8.3, 2.7 Hz, 2 H) 2.87 (d,
J
=4.6 Hz, 3 H) 2.55 (dt,
J
=4.2, 2.4 Hz, 1 H) 1.80 - 1.89 (m, 2 H)
實例 27 及 28 ： (2R
,3S
)-N5
-((1S,2S)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2R,3S)-N5
-((1R,2R)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性層析純化(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg)： - 分析方法：將約35 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中；將50 μL稀釋至1 mL EtOH中且注射至管柱上。溶離：含25% EtOH (+ 0.2 w/w%異丙胺)之庚烷(+ 0.2 w/w%異丙胺)，f = 1.0 mL/min，波長280 nm。管柱Chiralpak AD-H (250 × 4.6 mm)。 - 製備方法：將約35 mg材料溶解於EtOH (4 mL)中。注射：將0.75 mL溶液注入管柱上。溶離：含25% EtOH (+ 0.2 w/w%異丙胺)之庚烷(+0.2 w/w%異丙胺)，f = 40 mL/min，波長280 nm。管柱Chiralpak AD-H (250×30mm, 5 μm)。 此獲得(2R,3S)-N
5
-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(5 mg，29%)及(2R,3S)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(5 mg，29%)。
實例 29 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，將(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用HATU (92 mg，0.24 mmol)及Et
3
N (0.045 mL，0.32 mmol)處理。攪拌所得混合物1小時，接著用氫氧化銨(0.2 mL，5.14 mmol)處理。進一步攪拌所得溶液2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(13 mg，26%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+
= 311
實例 30 ： (2S
*,3S
*)-N5
- 環丙基 -2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
- 甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(46 mg，0.13 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (63.6 mg，0.167 mmol)及NEt
3
(0.036 mL，0.26 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後用環丙胺(0.012 mL，0.17 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之(2S*,3S*)-N
5
-環丙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，49%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.83 min, [M+H]
+
= 397
實例 31 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
- 甲基 -N5
-((1S,2S)-2- 甲基環丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(110 mg，0.308 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (152 mg，0.400 mmol)及NEt
3
(0.086 mL，0.62 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後用(1S,2S)-2-甲基環丙胺(49.7 mg，0.462 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-N
5
-((1S,2S)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(84 mg，66%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.91 min, [M+H]
+
= 411
實例 32 ： (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N5
,N7
- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(110 mg，0.308 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (152 mg，0.400 mmol)及NEt
3
(0.086 mL，0.62 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後用甲胺(THF中之2N，0.308 mL，0.616 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
5
,N
7
-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(14 mg，12%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.76 min, [M+H]
+
= 371
實例 33 ： (2S
*,3S
*)-N5
- 乙基 -2-( 羥基甲基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
- 甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(40 mg，0.11 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (42.6 mg，0.112 mmol)及Et
3
N (0.016 mL，0.11 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後用乙胺(THF中之2M，0.12 mL，0.24 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水(10 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色膠狀之(2S*3S*)-N
5
-乙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(20 mg，47%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+
= 385
實例 34 (2S
*,3S
*)-2-( 羥基甲基 )-N5
-(2- 甲氧基乙基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
- 甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.14 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (63.8 mg，0.168 mmol)及Et
3
N (0.039 mL，0.28 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後用2-甲氧基乙胺(15.8 mg，0.210 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水(10 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% EtOH之EtOAc)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色膠狀之(2S*,3S*)-2-(羥基甲基)-N
5
-(2-甲氧基乙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(48 mg，83%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.80 min, [M+H]
+
= 415
實例 35 ： (2R
,3S
)-N5
-(2- 甲氧基乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用HATU (92 mg，0.24 mmol)及Et
3
N (0.045 mL，0.32 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，隨後用2-甲氧基乙胺(12.1 mg，0.161 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
5
-(2-甲氧基乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(51 mg，86%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.97 min, [M+H]
+
= 369
實例 36 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -N5
-( 四氫 -2H- 哌喃 -4- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用HATU (92 mg，0.24 mmol)及Et
3
N (0.090 mL，0.64 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，隨後用四氫-2H-哌喃-4-胺鹽酸鹽(44.2 mg，0.321 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-N
5
-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，47%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.98 min, [M+H]
+
= 395
實例 37 ： (2R
,3S
)-N5
-(2- 羥基乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(30 mg，0.096 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用HATU (55.0 mg，0.145 mmol)及Et
3
N (0.054 mL，0.38 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，隨後用2-胺基乙醇(11.8 mg，0.193 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
5
-(2-羥基乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，73%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.87 min, [M+H]
+
= 355
實例 38 ： (1R
,5S
,6S
)-6-((2R,3S)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸第三丁酯 在室溫下，HATU (216 mg，0.569 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.211 mL，1.56 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(118 mg，0.379 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，隨後用(1R,5S,6s)-6-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(98 mg，0.49 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(1R,5S,6s)-6-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(175 mg，94%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.19 min, [M+H]
+
= 492
實例 39 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R,5S,6s)-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(1R,5S,6s)-6-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(150 mg，0.305 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用TFA (5 mL)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (5 mL)中且裝載至5 g SCX2濾芯上，其用MeOH (20 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液(20 mL)溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(100 mg，84%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 392
實例 40 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R,5S,6s)-3- 乙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg，0.089 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液用Et
3
N (0.012 mL，0.089 mmol)及乙醯氯(6.4 µL，0.089 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，隨後藉由MDAP (方法高pH)純化獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，65%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.91 min, [M+H]
+
= 434
實例 41 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (82 mg，0.28 mmol)及Et
3
N (0.081 mL，0.58 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(25 mg，0.18 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.14 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(34 mg，60%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.93 min, [M+H]
+
= 393
實例 42 ： (2R
,3S
)-N5
-(2-( 二甲基胺基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (82 mg，0.28 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.081 mL，0.58 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.14 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用N
1
,N
1
-二甲基乙-1,2-二胺(25.5 mg，0.289 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2R,3S)-N
5
-(2-(二甲基胺基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，45%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.93min, [M+H]
+
= 382
實例 43 ： (2R
,3S
)-N5
-(3-( 二甲基胺基 ) 丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (82 mg，0.22 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.081 mL，0.58 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.14 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用N
1
,N
1
-二甲基丙-1,3-二胺(29.5 mg，0.289 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得(2R,3S)-N
5
-(3-(二甲基胺基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，44%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]
+
= 396
實例 44 ： (2R
*,3S
*)-N5
- 環丙基 -3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在0℃下，甲烷磺酸((2S*,3S*)-5-(環丙基胺甲醯基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-2-基)甲酯(90 mg，0.19 mmol)於THF (5 mL)中之溶液用LiBH
4
(24.8 mg，1.14 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著升溫至室溫且攪拌24小時。混合物未經攪拌在室溫下保持10天，接著用EtOAc (20 mL)稀釋且用飽和NH
4
Cl水溶液(20 mL)處理。攪拌兩相混合物30分鐘，接著分離各層。有機相經MgSO
4
乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之(2R*,3S*)-N
5
-環丙基-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(45 mg，62%)。LCMS (方法高pH): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+
= 381
實例 45 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -N5
-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (82 mg，0.22 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.081 mL，0.58 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.145 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用氧雜環丁烷-3-胺(21.1 mg，0.289 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物，獲得(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(氧雜環丁烷-3-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，57%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.93 min, [M+H]
+
= 367
實例 46 ： 2-(2-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 在室溫下，HATU (92 mg，0.24 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.090 mL，0.64 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用2-(2-胺基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(44.4 mg，0.193 mmol，其可根據Dowle, Michael Dennis等人, PCT國際申請案2003097618獲得)處理。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著用水(10 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(25 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之己烷)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之2-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(50 mg，60%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.20 min, [M+H]
+
= 524
實例 47 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -N5
-(2-( 嗎啉 -2- 基 ) 乙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 . 在室溫下，2-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(45 mg，0.086 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液用TFA (1 mL)處理，且使所得溶液靜置1小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中且裝載至2 g SCX濾芯上，其用MeOH (10 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，69%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.20 min, [M+H]
+
= 424
實例 48-52 ： 通用程序： 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(30 mg，0.096 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液用HATU (55.0 mg，0.145 mmol)及NEt
3
(19.5 mg，0.193 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液20分鐘，接著用一級胺(0.145 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著藉由MDAP (方法高pH)直接純化獲得在所有情況下呈灰白色固體狀之相應實例。 以下胺分別用於實例48至52： -3-胺基丙-1-醇(10.9 mg) -3-(N-嗎啉基)丙-1-胺(20.8 mg) - 3-甲氧基丙-1-胺(12.9 mg) - 四氫呋喃-3-胺(12.6 mg), - 2,2-二氟乙胺(11.7 mg)
實例 53 ： 2-(3-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(30 mg，0.096 mmol)於DMF (1 mL)中之溶液用NEt
3
(19.5 mg，0.193 mmol)及HATU (55.0 mg，0.145 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液20分鐘，隨後用2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(30 mg，0.12 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著藉由MDAP (方法高pH)純化獲得呈無色固體狀之2-(3-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(35 mg，68%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.21 min, [M+H]
+
= 538
實例 54 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -N5
-(3-( 嗎啉 -2- 基 ) 丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，2-(3-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(30 mg，0.056 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (2.0 mL，26 mmol)處理，且在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且裝載於2 g SCX濾芯上。此用MeOH (10 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得呈淺黃色固體狀之(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-(嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(24 mg，98%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.65 min, [M+H]
+
= 438
實例 55 ： (2R,3S)-N5
- 乙基 -3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(125 mg，0.366 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (209 mg，0.549 mmol)及NEt
3
(0.102 mL，0.732 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物20分鐘，接著用乙胺(THF中之2N，0.366 mL，0.732 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用水(2 × 10 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色發泡體狀之(2R,3S)-N
5
-乙基-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(110 mg，82%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.00 min, [M+H]
+
= 369
實例 56 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R
,2R
)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(40 mg，0.12 mmol)、((1R,2R)-2-胺基環丙基)甲醇鹽酸鹽(18 mg，0.15 mmol)、HATU (66.8 mg，0.176 mmol)及Et
3
N (0.016 mL，0.12 mmol)，接著用DMF (1 mL)填充。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著藉由MDAP (高pH方法)直接純化獲得呈無色膠狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(28 mg，58%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 411
實例 57 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (75 mg，0.20 mmol)及Et
3
N (73.5 µL, 0.527 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(25 mg，0.18 mmol)及(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.13 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(37 mg，66%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.93 min, [M+H]
+
= 423
實例 58 ： (R
)-2-(3-((2R
,3S
)-3-(3- 甲氧基苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁酯 在室溫下，HATU (75 mg，0.20 mmol)及Et
3
N (73.5 µL, 0.527 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(R)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(41.9 mg，0.171 mmol)及(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(45 mg，0.13 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色膠狀之(R)-2-(3-((2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(45 mg，60%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.19 min, [M+H]
+
= 568
實例 59 ： (2R
,3S
)-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-(3-((R
)- 嗎啉 -2- 基 ) 丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-2-(3-((2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(40 mg，0.071 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液用TFA (1 mL)處理且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且裝載至5 g SCX濾芯上，將其用MeOH (10 mL)洗滌，接著用2N含NH
3
之MeOH溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得呈無色膠狀之(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-((R)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，91%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.63 min, [M+H]
+
= 468
實例 60 ： (2R
,3S
)-3-(3- 甲氧基苯基 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-(3-((S)- 嗎啉 -2- 基 ) 丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，HATU (50.1 mg，0.132 mmol)及Et
3
N (49.0 µL, 0.352 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(S)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(27.9 mg，0.114 mmol)及(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(30 mg，0.088 mmol)處理，且在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著真空濃縮。藉由MDAP純化殘餘物獲得無色固體，將其溶解於DCM (2 mL)中且用TFA (1 mL)處理。在室溫下攪拌所得溶液2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中，接著裝載至5 g SCX濾芯上，將其用MeOH (10 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得呈無色膠狀之(2R,3S)-3-(3-甲氧基苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(3-((S)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg，85%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.63 min, [M+H]
+
= 468
實例 61 ： 3- 氟 -3-(3-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.26 mmol)及3-(3-胺基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(66.9 mg，0.257 mmol)於DCM (10 mL)中之溶液用HATU (147 mg，0.385 mmol)及Et
3
N (0.036 mL，0.26 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色膠狀之3-氟-3-(3-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(105 mg，74%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.27 min, [M+H-Boc]
+
= 454
實例 62 ： (2R
,3S
)-N5
-(3-(3- 氟哌啶 -3- 基 ) 丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，3-氟-3-(3-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(100 mg，0.181 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (1 mL)處理且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中，且裝載至5 g SCX濾芯上，將其用MeOH (20 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-(3-(3-氟哌啶-3-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(75 mg，92%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+
= 454
實例 63 ： (2R
,3S
)-N5
-((1S*,2R*)-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，2-((1R*,2S*)-2-胺基環丙基)乙醇(71.5 mg，0.707 mmol)及(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(110 mg，0.353 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用Et
3
N (0.098 mL，0.707 mmol)及HATU (202 mg，0.530 mmol)處理，且所得混合物在此溫度下靜置16小時，隨後用水(2 × 5 mL)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈淺黃色油狀之(2R,3S)-N
5
-((1S*,2R*)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(160 mg，115%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.94 min, [M+H]
+
= 395
實例 64 ： (2R
,3S
)-N7
,2- 二甲基 -N5
-((1S*,2S*)-2-(2-(N- 嗎啉基 ) 乙基 ) 環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 添加(2R,3S)-N
5
-((1S*,2R*)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(100 mg，0.254 mmol)於室溫DCM (5 mL)及戴斯-馬丁高碘烷(161 mg，0.380 mmol)中之溶液，接著在室溫下攪拌混合物4小時。混合物用水(5 mL)洗滌且使用疏水性玻璃料乾燥。溶液接著用嗎啉(0.044 mL，0.51 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(215 mg，1.01 mmol)處理，且在室溫下攪拌混合物16小時。溶液用飽和NaHCO
3
水溶液洗滌，接著使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1S*,2S*)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(95 mg，81%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.68 min, [M+H]
+
= 464
實例 65 及 66 ： (2R,3S)-N7
,2- 二甲基 -N5
-((1S,2S)-2-(2-(N- 嗎啉基 ) 乙基 ) 環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 及 (2R,3S)-N7
,2- 二甲基 -N5
-((1R,2R)-2-(2-(N- 嗎啉基 ) 乙基 ) 環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由如下對掌性層析純化實例64(60 mg)： - 分析方法：將約0.5 mg材料溶解於50% EtOH/庚烷(1 mL)中且將20 μL所得溶液注入管柱上。溶離劑：25% EtOH(+0.2%異丙胺)/庚烷，流動速率 = 1.0 mL/min，波長215 nm。管柱4.6 mmid × 25 cm Chiralpak AD-H。 - 製備方法：將約60 mg材料溶解於EtOH (1.5 mL)中。注射(總共3次)：將0.5 mL溶液注入管柱上。溶離劑：30% EtOH (+0.2% 異丙胺)/庚烷(+0.2% 異丙胺)，流動速率 = 30 mL/min，波長215 nm。管柱30 mm × 25 cm Chiralpak AD-H (5 μm)。 此純化獲得(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1S,2S)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，83%)作為快速跑動對映異構體及(2R,3S)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1R,2R)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，83%)作為慢速跑動對映異構體。
實例 67 ： (2R
*,3S
*)-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-((1S,2S)-2- 甲基環丙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯(13 mg，0.033 mmol)於MeOH (2 mL)中之溶液用2N NaOH水溶液(0.5 mL，1 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於水(2 mL)中且用2 N HCl水溶液酸化至pH 2。水相用EtOAc (2 × 5 mL)萃取且合併之有機物經MgSO
4
乾燥且真空濃縮獲得無色膠狀物。將此膠狀物溶解於DCM (2 mL)中且所得溶液用HATU (12 mg，0.033 mmol)、Et
3
N (4.5 µL，0.033 mmol)及(1S,2S)-2-甲基環丙胺鹽酸鹽(3.5 mg，0.033 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-((1S,2S)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(4.4 mg，32%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.91 min, [M+H]
+
= 425
實例 68 ： (S
)-3- 氟 -3-(3-((2R*,3S*)-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 丙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯 向燒瓶裝入(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(13 mg，0.035 mmol)、(S)-3-(3-胺基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(12 mg，0.046 mmol)、HATU (17 mg，0.046 mmol)，接著用DCM (2 mL)填充，且所得混合物在室溫下用Et
3
N (4.9 µL, 0.035 mmol)處理，接著在此溫度下攪拌2小時，隨後用DCM稀釋，用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色膠狀之(S)-3-氟-3-(3-((2R*,3S)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(22 mg，102%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.10 min, [M+H]
+
= 614
實例 69 ： (2R
*,3S
*)-N5
-(3-((R
)-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 丙基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(S)-3-氟-3-(3-((2R*3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(20 mg，0.033 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液用TFA (200 µL，2.60 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將所獲得之殘餘物溶解於MeOH (2 mL)中，且裝載至5 g SCX濾芯上，將其用MeOH (20 mL)洗滌，接著用2N MeOH中之NH
3
溶液溶離。真空濃縮氨水溶離份獲得呈無色膠狀之(2R*3S*)-N
5
-(3-((R)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(15 mg，90%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+
= 514
實例 70 ： (R
)-3- 氟 -3-(2-((2S,3S)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(R)-3-(2-胺基乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(50 mg，0.20 mmol)、HATU (57.7 mg，0.152 mmol)及Et
3
N (0.021 mL，0.15 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時。混合物接著用DCM稀釋，且用水、0.5N NaOH水溶液及0.5N HCl水溶液依序洗滌，接著使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得呈無色膠狀之(R)-3-氟-3-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(56 mg，66%)，其未經進一步純化即用於下一步驟。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.17 min, [M+H]
+
= 558
實例 71 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
-(2-((R)-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-3-氟-3-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(56 mg，0.10 mmol)於DCM (1 mL)中之溶液用TFA (1.0 mL，13 mmol)處理，且在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-((R)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg，76%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.61 min, [M+H]
+
= 458
實例 72 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
-(3-((R)-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(60 mg，0.18 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(S)-3-(3-胺基丙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(60 mg，0.23 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及Et
3
N (0.025 mL，0.18 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時。溶液用DCM稀釋且用水、0.5N NaOH水溶液及0.5N HCl水溶液依序洗滌，接著使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得無色膠狀物。將此殘餘物溶解於DCM (5 mL)中且用TFA (1 mL)處理所得溶液。在室溫下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈無色發泡體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-(3-((R)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(68 mg，79%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.94 min, [M+H]
+
= 472
實例 73 ： (R)-3- 氟 -3-(2-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯 向燒瓶中裝入(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.26 mmol)、HATU (117 mg，0.308 mmol)及DIPEA (0.090 mL，0.51 mmol)，接著用DMF (2 mL)填充且在室溫下攪拌所得溶液5分鐘，隨後用(R)-3-(2-胺基乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(63.3 mg，0.257 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著分配於水與EtOAc之間。分離各層，有機相用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-70% (25% EtOH:EtOAc)之DCM)純化所獲得之殘餘物獲得呈白色固體狀之(R)-3-氟-3-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(95 mg，69%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.21 min, [M+H]
+
= 540
實例 74 ： (2R
,3S
)-N5
-(2-((R)-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-3-氟-3-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(95 mg，0.18 mmol)於DCM (2 mL)中之溶液用TFA (0.014 mL，0.18 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得溶液18小時，隨後真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化所獲得之殘餘物獲得呈白色固體狀之(2R,3S)-N
5
-(2-((R)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(51 mg，66%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.63 min, [M+H]
+
= 440
實例 75 ： (R
)-2-(3-((2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 丙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.46 mmol)溶解於DMF (3 mL)中且在室溫下攪拌所得溶液10分鐘。將(R)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(40.8 mg，0.167 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌2小時。將(R)-2-(3-胺基丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(20 mg，0.082 mmol)溶解於DMF (0.327 mL)中，接著添加至反應混合物。在室溫下攪拌所得溶液30分鐘，接著用水(10 mL)稀釋。用DCM (3×20 mL)萃取水相。合併之有機物用10 w/w% LiCl溶液洗滌兩次，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化所獲得之殘餘物獲得呈黃色油狀之(R)-2-(3-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(68 mg，81%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.15 min, [M+H-Boc]
+
= 456
實例 76 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(3-((R)- 嗎啉 -2- 基 ) 丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-2-(3-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(68 mg，0.12 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (0.5 mL，6.49 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液(10 mL)處理。攪拌兩相混合物30分鐘，接著用水(5 mL)稀釋且用DCM (3 × 20 mL)萃取。合併之有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌兩次，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中且經500 mg NH
2
isolute管柱用MeOH溶離(管柱用MeOH (約10 mL)預洗滌)。合併相關溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(3-((R)-嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg，45%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.86 min, [M+H]
+
= 456
實例 77 ： (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向燒瓶中裝入(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(67 mg，0.090 mmol)、HATU (41.2 mg，0.108 mmol)及DIPEA (0.047 mL，0.27 mmol)，接著用DMF (4 mL)填充，且在室溫下攪拌所得混合物5分鐘，隨後用含(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(12 mg，0.090 mmol)之DMF (1 mL)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著用水(10 mL)稀釋。水相用DCM (3 × 30 mL)萃取，且合併之有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌兩次，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-25% (2N含NH
3
之MeOH)之DCM)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(50 mg，61%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+
= 453
實例 78 ： (R)-2-(2-((2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 嗎啉 -4- 甲酸第三丁
酯 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(55 mg，0.17 mmol)、HATU (76 mg，0.20 mmol)及DIPEA (0.088 mL，0.50 mmol)溶解於DMF (4 mL)中且在室溫下攪拌所得混合物10分鐘，隨後用含(R)-2-(2-胺基乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(42.3 mg，0.184 mmol)之DMF (1 mL)處理。在此溫度下攪拌所得溶液1小時，接著用水(10 mL)稀釋。水相用EtOAc (3 × 30 mL)萃取且合併之有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌兩次，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0-100% EtOAc之環己烷)純化殘餘物獲得呈無色油狀之(R)-2-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(21 mg，23%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.12 min, [M+H]
+
= 542
實例 79 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(2-((R)- 嗎啉 -2- 基 ) 乙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-2-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁酯(21 mg，0.039 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (0.5 mL)處理，且在此溫度下攪拌所得溶液1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液(10 mL)處理。在室溫下攪拌兩相混合物20分鐘，接著用水稀釋且用DCM (3 × 20 mL)萃取。合併之有機物用10% LiCl水溶液洗滌兩次，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中且經500 mg NH
2
isolute管柱用MeOH溶離(管柱用MeOH (約10 mL)預洗滌)。合併相關溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(2-((R)-嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6 mg，35%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.84 min, [M+H]
+
= 442
實例 80 ： (2R
,3S
)-N5
-(2-(4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，用TFA (0.5 mL，6.49 mmol)處理4,4-二氟-3-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(79 mg，0.14 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液處理。在室溫下攪拌所得混合物30分鐘，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中且經NH
2
isolute管柱(500 mg)溶離。合併相關溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之(2R,3S)-N
5
-(2-(4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(31 mg，48%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+ =
458。
實例 81 ： 4,4- 二氟 -3-(2-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯 在室溫下，在攪拌下，將(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)、HATU (73.3 mg，0.193 mmol)及DIPEA (0.084 mL，0.48 mmol)溶解於DMF (3 mL)中持續5分鐘。將3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(59.4 mg，0.225 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，接著將其在室溫下攪拌2小時。添加3-(2-胺基乙基)-4,4-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(20 mg，0.076 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌。有機層經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25% (含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之4,4-二氟-3-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(79 mg，88%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.28 min, [M+H]
+ =
558
實例 82 ： (2R
,3S
)-N5
-(2-(3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，3,3-二氟-4-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(75 mg，0.13 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (0.5 mL，6.49 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液處理。攪拌所得混合物30分鐘，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且經500 mg NH
2
isolute管柱溶離。合併相關溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之(2R,3S)-N
5
-(2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，52%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.99 min, [M+H]
+ =
458
實例 83 ： 3,3- 二氟 -4-(2-((2R
,3S
)-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁
酯 在室溫下，在攪拌下，將(2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.16 mmol)、HATU (73.3 mg，0.193 mmol)及DIPEA (0.084 mL，0.48 mmol)溶解於DMF (3 mL)中持續5分鐘。將4-(2-胺基乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(59.4 mg，0.225 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌2小時。添加4-(2-胺基乙基)-3,3-二氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(30 mg，0.11 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，接著經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP管柱)(用含0-25% (含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之3,3-二氟-4-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(75 mg，84%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.27 min, [M+H]
+ =
558
實例 84 ： (2S
*,3S
*)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R
,4S
)-4- 羥基環己基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (2 mL)中攪拌(2S*,3S*)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)持續5分鐘，添加反胺基環己醇(21.0 mg，0.182 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物30分鐘。接著用水稀釋反應物且用EtOAc萃取。有機相用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得白色固體。使用矽膠管柱層析(SNAP10 Si管柱)(用0-100% (25% EtOH:EtOAc):DCM梯度溶離)純化此固體獲得呈白色固體狀之(2S*,3S*)-2-(氟甲基)-N
5
-((1r,4S)-4-羥基環己基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(51 mg，79%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.86 min, [M+H]
+ =
427
實例 85 ： (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6R
)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下，將(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(67 mg，0.090 mmol)、HATU (41.2 mg，0.108 mmol)及DIPEA (0.047 mL，0.27 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(12 mg，0.090 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌1小時。反應混合物接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25% 2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(50 mg，61%)。藉由對掌性層析法(使用4.6 mmid × 25cm Chiralcel OD-H管柱且用庚烷:EtOH 70:30溶離)純化(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(47 mg，0.10 mmol)，獲得呈白色固體狀之(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(8.5 mg，18%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+ =
453
實例 86 ： (2S
*,3S
*)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R
,3S
)-3- 羥基環丁基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (2 mL)中攪拌(2S*,3S*)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)持續5分鐘，隨後用(1r,3r)-3-胺基環丁醇鹽酸鹽(22.5 mg，0.182 mmol)處理。在室溫下攪拌所得混合物30分鐘，接著用水稀釋且用EtOAc萃取。有機相用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮獲得白色固體。使用矽膠管柱層析(SNAP10 Si管柱)(用0-100% (25% EtOH:EtOAc):DCM梯度溶離)純化此固體獲得呈白色固體狀之(2S*,3S*)-2-(氟甲基)-N
5
-((1r,3S)-3-羥基環丁基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(52 mg，86%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+ =
399
實例 87 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R
,2R
)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下，將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。添加((1R,2R)-2-胺基環丙基)甲醇鹽酸鹽(22.5 mg，0.182 mmol)且在室溫下攪拌混合物1.5小時，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-100% EtOAc之環己烷，隨後含0-25%(含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得呈灰白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(33 mg，55%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+ =
399
實例 88 ： (2S
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6S
)-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(1R,5S,6S)-6-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(140 mg，0.275 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (0.5 mL)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液處理。在室溫下攪拌混合物20分鐘，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且經500 mg NH
2
isolute管柱用MeOH溶離。合併相關溶離份且真空濃縮。藉由MDAP (高pH方法)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(53 mg，47%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.84 min, [M+H]
+ =
410
實例 89 ： (1R
,5S
,6S
)-6-((2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸第三丁酯 在室溫下，在攪拌下，將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.304 mmol)、HATU (139 mg，0.364 mmol)及DIPEA (0.159 mL，0.911 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將(1R,5S,6s)-6-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(72.2 mg，0.364 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌1小時，隨後用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(25 g SNAP Si管柱)(用含0-25% (含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物，獲得呈黃色油狀之(1R,5S,6s)-6-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(140 mg，90%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.13 min, [M+H]
+ =
510
實例 90 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-( 四氫呋喃 -3- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下，將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將四氫呋喃-3-胺(17.2 mg，0.197 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌1小時，隨後用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25%(含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得粗物質。藉由MDAP (方法高pH)純化粗產物，獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，50%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.90 min, [M+H]
+ =
399
實例 91 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
-(2- 羥基乙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(43 mg，0.13 mmol)、HATU (59.6 mg，0.157 mmol)及DIPEA (0.068 mL，0.39 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。添加2-胺基乙醇(9.46 µL, 0.157 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時，隨後用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25%(含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得粗物質。藉由MDAP (方法高pH)純化粗產物，獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-羥基乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(23 mg，47%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.81 min, [M+H]
+ =
373
實例 92 ： (2S
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6S
)-3- 乙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg，0.085 mmol)溶解於乙酸酐(1.00 mL，10.6 mmol)中且在氮氣下，在室溫下攪拌反應混合物1.5小時，接著真空濃縮。將殘餘物在甲苯(4 mL)中共蒸發，接著使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25% (含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(2S*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(19 mg，49%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.85 min, [M+H]
+ =
452
實例 93 ： (2R
,3S
)-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-(2-( 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下將(2R,3S)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.13 mmol)、HATU (61.4 mg，0.162 mmol)及DIPEA (0.071 mL，0.40 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將2-(吡啶-3-基)乙胺(19.7 mg，0.162 mmol)溶解於DMF (1mL)中且添加至反應混合物中，其接著在室溫下攪拌2小時，隨後用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25% (含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化殘餘物，獲得呈灰白色膠狀之(2R,3S)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(33 mg，51%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.83 min, [M+H]
+ =
476
實例 94 ： (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6S
)-3- 乙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6S)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，0.071 mmol)溶解於乙酸酐(1.00 mL，10.6 mmol)中且在室溫下，在氮氣下攪拌反應混合物1小時，接著真空濃縮。使殘餘物與甲苯一起共蒸發，接著使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25%(含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6 mg，17%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.78 min, [M+H]
+ =
494
實例 95 ： (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6S
)-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(1R,5S,6S)-6-((2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(60 mg，0.109 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用TFA (0.50 mL，6.5 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物1小時，接著用飽和NaHCO
3
水溶液處理。攪拌混合物20分鐘，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(2R*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，65%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.75 min, [M+H]
+ =
452
實例 96 ： (1R
,5S
,6S
)-6-((2R
*,3S
*)-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-2- 甲基 -7-( 甲基胺甲醯基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 )-3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -3- 甲酸第三丁酯 在室溫下，在攪拌下，將(2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.13 mmol)、HATU (61.4 mg，0.162 mmol)及DIPEA (0.071 mL，0.40 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將(1R,5S,6s)-6-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(32.0 mg，0.162 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌2小時，接著用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl水溶液洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(10 g SNAP Si管柱)(用含0-25%(含2N NH
3
之20:80 MeOH:DCM)之DCM梯度溶離)純化所獲得之殘餘物獲得呈橙色/黃色油狀之(1R,5S,6s)-6-((2R*,3S*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁酯(60 mg，81%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間1.02 min, [M+H]
+ =
552
實例 97 ： (R
)-3- 氟 -3-(2-((2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-7-( 甲基胺甲醯基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5- 甲醯胺基 ) 乙基 ) 哌啶 -1- 甲酸第三丁酯 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用(R)-3-(2-胺基乙基)-3-氟哌啶-1-甲酸第三丁酯(50 mg，0.20 mmol)、HATU (57.7 mg，0.152 mmol)及Et
3
N (0.021 mL，0.15 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著用水、0.5N NaOH水溶液及0.5N HCl 水溶液依序洗滌，接著乾燥且真空濃縮獲得呈無色膠狀之(R)-3-氟-3-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(56 mg，66%)，其未經進一步純化即用於下一步驟 LCMS (方法甲酸): 滯留時間1.18 min, [M+H]
+ =
558
實例 98 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N5
-(2-((R)-3- 氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(R)-3-氟-3-(2-((2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(56 mg，0.10 mmol)於DCM (1 mL)中之溶液用TFA (1.0 mL，13 mmol)處理，且在此溫度下攪拌混合物2小時，接著真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-((R)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(35 mg，76%) LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.61 min, [M+H]
+ =
458
實例 99-108 ：
以下實例為對掌性純化外消旋混合物之後獲得的兩種對映異構體之最低活性，或自下文所示具有立體化學性之對掌性中間物合成：
X=Br、COORy、Ry=C
1-2
烷基
*方法甲酸
實例 109 ： ( 反 )-N5
-(2-(4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 ( 非對映異構混合物 ) 將4,4-二氟-3-(2-((反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(非對映異構混合物)(79 mg，0.14 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且添加TFA (0.50 mL，6.5 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，添加飽和NaHCO
3
(水溶液)(10 mL)且攪拌混合物30分鐘。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且用500 mg NH
2
isolute管柱(用另一份MeOH溶離)溶離。合併溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之產物(反)-N
5
-(2-(4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(非對映異構混合物) (31 mg，0.068 mmol，47.8%產率)。 LCMS (高pH方法): 滯留時間1.01 min, [M+H]
+
= 458
實例 111 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1r,4S)-4- 羥基環己基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺二甲醯胺 在室溫下，在DMF (2 mL)中攪拌(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)持續5分鐘，添加反胺基環己醇(21.0 mg，0.182 mmol)且在室溫下攪拌反應物30分鐘。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取，有機相用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得白色固體，使用矽膠管柱層析(用0-100% (25% EtOH:EtOAc):DCM梯度溶離)純化此固體獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1r,4S)-4-羥基環己基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(51 mg，0.120 mmol，79%產率)。 LCMS (甲酸方法): 滯留時間0.86 min, [M+H]
+
= 427
實例 112 ： (2R,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(+/-)(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(60 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (2 mL)中。注射：將1 mL溶液注入至管柱(30% EtOH/庚烷，流動速率 = 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱30 mm × 25 cm Chiralcel OD-H (5 µm), 批號ODH11158-01)。總注射次數=4。12-14分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰2。 收集對應於峰2之溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(產量25 mg) LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.83 min, [MH]+ = 453.
實例 113 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1r,3S)-3- 羥基環丁基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (2 mL)中攪拌(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)持續5分鐘，添加(1r,3r)-3-胺基環丁醇鹽酸鹽(22.5 mg，0.182 mmol)且在室溫下攪拌反應物30分鐘。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取，有機相用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得白色固體。使用矽膠管柱層析(用0-100% (25% EtOH:EtOAc):DCM梯度溶離)純化此固體獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1r,3S)-3-羥基環丁基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(52 mg，0.131 mmol，86%產率)。 LCMS (甲酸方法): 滯留時間0.82 min, [M+H]
+
= 399
實例 114 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-( 四氫呋喃 -3- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 ( 非對映異構體之混合物 ) 在室溫下，在攪拌下將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)、HATU (69.3 mg，0.182 mmol)及DIPEA (0.080 mL，0.45 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。四氫呋喃-3-將胺(17.2 mg，0.197 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌1小時。反應混合物用水稀釋，用DCM萃取且添加鹽水。有機物用10 w/w% LiCl (水)溶液洗滌且添加鹽水。有機層經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用含0-20% 2M NH
3
之MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得粗標題化合物。其使用MDAP (高pH方法)進一步純化獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(非對映異構體之混合物) (30 mg，0.075 mmol，50%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.90 min, [MH]+ = 399。
實例 115 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-(2- 羥基乙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下，將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(43 mg，0.13 mmol)、HATU (59.6 mg，0.157 mmol)及DIPEA (0.068 mL，0.39 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。添加2-胺基乙醇(9.46 µl，0.157 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl (水溶液)及鹽水洗滌。有機層經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用含0-10% 2M NH
3
之MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得粗標題化合物。使用MDAP (高pH方法)進一步純化粗產物獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-(2-羥基乙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(23 mg，0.062 mmol, 47.3%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.81 min, [MH]+ = 373。
實例 116 ： ( 反 )-N5
-((1R,5S,6s)-3- 乙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(反)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，0.071 mmol)(實例95)溶解於乙酸酐(1 mL，10.60 mmol)中且在室溫下，在N
2
下攪拌反應混合物1小時。真空濃縮反應混合物。將殘餘物溶解於甲苯(5 mL)中且真空濃縮。將殘餘物溶解於DCM中且使用矽膠管柱層析(用0-5% MeOH:DCM梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(反)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6.0 mg，0.012 mmol，17%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.78 min, [MH]+ = 494
實例 117 ： ( 反 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-(2-( 吡啶 -3- 基 ) 乙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下，將(反)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.13 mmol)、HATU (61.4 mg，0.162 mmol)及DIPEA (0.071 mL，0.40 mmol)溶解於DMF (4 mL)中持續5分鐘。將2-(吡啶-3-基)乙胺(19.7 mg，0.162 mmol)溶解於DMF (1 mL)中且添加至反應混合物，其接著在室溫下攪拌2小時。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌且添加鹽水。有機層經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用0-5% MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得呈灰白色膠狀之(反)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺( 33 mg，0.069 mmol，51%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.83 min, [MH]+ = 476
實例 118 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下將(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(150 mg，0.455 mmol)、HATU (208 mg，0.547 mmol)及DIPEA (0.239 mL，1.37 mmol)溶解於DMF (5 mL)中持續5分鐘。添加1-甲基-1H-吡唑-4-胺(53.1 mg，0.547 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物3小時。添加另一HATU (87 mg，0.23 mmol)及1-甲基-1H-吡唑-4-胺(22.1 mg，0.228 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物30分鐘。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl溶液(水)洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用0-7% (2M含NH
3
之MeOH):DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得呈灰白色固體狀之(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(131 mg，0.321 mmol，70%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.92 min, [MH]+ = 409
實例 119 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(126 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (10 mL)中。注射：將0.5 mL溶液注入管柱上；等度方法50:50庚烷:乙醇，流動速率=20 mL/min，偵測波長=280 nm。Ref 400 nm，100 nm，管柱250 mm × 20 cm Regis Whekl-O1[R,R] (5 μm)。總注射次數=20。16-19.5分鐘之溶離分堆積在一起且濃縮獲得(2R,3S)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(產量39 mg)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.92 min, [MH]+ = 409
實例 120 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-(1H- 吡唑 -4- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在攪拌下將(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(150 mg，0.455 mmol)、HATU (208 mg，0.547 mmol)、DIPEA (0.239 mL，1.37 mmol)溶解於DMF (5 mL)中持續5分鐘。添加1H-吡唑-4-胺(45.4 mg，0.547 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用含0-7% 2M NH
3
之MeOH:DCM梯度溶離)純化殘餘物獲得呈灰白色膠狀之(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(1H-吡唑-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(65 mg，0.16 mmol，36%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.87 min, [MH]+ = 395
實例 121 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-(1H- 吡唑 -4- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(62 mg)。將外消旋物溶解於EtOH(2 mL)中。注射：將1 mL溶液注入管柱上；等度方法15%乙醇:庚烷，流動速率=20 mL/min，偵測波長=215 nm。Ref 550 nm，100 nm，管柱2 cm × 25 cm Chiralcel OJ (10 µm)。總注射次數=2。10-14分鐘之溶離分堆積在一起且濃縮獲得(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(1H-吡唑-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(產量25 mg)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.87 min, [MH]+ = 395
實例 122 ： ( 反 )-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 三氘甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在微波小瓶中合併(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-三氘甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.272 mmol)、氧雜蒽膦(16 mg，0.027 mmol)、乙酸鈀(II) (6.1 mg，0.027 mmol)、DMAP (100 mg，0.817 mmol)、羰基鈷(100 mg，0.272 mmol)及(1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(55.4 mg，0.408 mmol)，將其密封且用氮氣吹掃，接著添加1,4-二噁烷(3 mL)且在100℃下，在微波反應器中照射混合物1小時。小瓶內容物用0.5 M HCl (水溶液)稀釋且用EtOAc萃取。合併之有機物用0.5 M HCl (水溶液)洗滌，接著乾燥且真空蒸發獲得褐色殘餘物。藉由矽膠管柱層析(用0-25% EtOH/EtOAc梯度溶離)純化此殘餘物獲得呈淺黃色發泡體狀之(反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-三氘甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(70.2 mg，0.170 mmol，62%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.88 min, [MH]+ = 414
實例 123 ： ( 反 )-N5
-(2-(1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將2-(1H-吡唑-4-基)乙胺鹽酸鹽(122 mg，0.824 mmol)、(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.275 mmol)、乙酸鈀(II)(30.8 mg，0.137 mmol)、氧雜蒽膦(79 mg，0.14 mmol)、DMAP (50.3 mg，0.412 mmol)及羰基鈷(46.9 mg，0.137 mmol)置於可微波小瓶中且蓋上蓋子。添加1,4-二噁烷(4 mL)且在biotage微波中在90℃下照射反應物60分鐘。用水稀釋反應物，且用EtOAc萃取。使用疏水性玻璃料乾燥有機層且濃縮獲得紫色油狀物。此油狀物使用MDAP(甲酸方法)純化獲得呈白色固體狀之(反)-N
5
-(2-(1H-吡唑-4-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(4.0 mg，9.5 µmol，3 %產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.83 min, [MH]+ = 423
實例 124 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲胺鹽酸鹽(122 mg，0.824 mmol)、(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.275 mmol)、乙酸鈀(II) (30.8 mg，0.137 mmol)、氧雜蒽膦(79 mg，0.14 mmol)、DMAP (50.3 mg，0.412 mmol)及羰基鈷(46.9 mg，0.137 mmol)置於可微波小瓶中且加蓋上蓋子。添加1,4-二噁烷(4 mL)且在biotage微波中在90℃下照射反應物1小時。將反應物分配於水與EtOAc之間。有機層用鹽水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得橙色膠狀物。使用矽膠管柱層析(用0-100% (含25% EtOH之EtOAc):環己烷梯度溶離)純化此膠狀物獲得呈黃色固體狀之(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(46 mg，0.11 mmol，40%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.86 min, [MH]+ = 423
實例 125 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙胺(34.4 mg，0.275 mmol)、(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.275 mmol)、乙酸鈀(II) (30.8 mg，0.137 mmol)、氧雜蒽膦(79 mg，0.14 mmol)、DMAP (50.3 mg，0.412 mmol)及羰基鈷(46.9 mg，0.137 mmol)置於可微波小瓶中且蓋上蓋子。添加1,4-二噁烷(4 mL)且在biotage微波中在90℃下照射反應物60分鐘。反應物用水及10 w./w%檸檬酸(水溶液)稀釋，且用EtOAc萃取，有機相用飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮成褐色膠狀物。使用矽膠管柱層析(使用0-100% (25% EtOH:EtOAc):環己烷梯度溶離)純化此膠狀物獲得呈褐色固體狀之(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，0.073 mmol，27%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.88 min, [MH]+ = 437
實例 126 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R,2R)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(200 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (4 mL)中。注射：將1 mL溶液注入管柱上；等度方法30%乙醇:庚烷，流動速率=30 mL/min，偵測波長=215 nm。Ref 550 nm，100 nm，管柱30 mm × 25cm Chiralcel AD-H (5 μm)。總注射次數=4。15-18分鐘之溶離份堆積在一起且濃縮獲得呈黃色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(99 mg，0.25 mmol，50%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.82 min, [MH]+ = 399
實例 127 及 128 ： (2R,3S)-N5
-(2-((R*)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2R,3S)-N5
-(2-((S*)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(2R,3S)-N
5
-(2-((+/-)(R)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(21 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (1 mL)中。注射：將1 mL溶液注入管柱上；等度方法25%乙醇(+0.2%異丙胺):庚烷(+0.2%異丙胺)；流動速率= 30 mL/min，偵測波長= 215 nm。Ref 550 nm，100 nm，管柱30 mm × 25 cm Chiralcel OJ-H (5 μm)。7-10分鐘之溶離份堆積在一起且濃縮獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((R*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6.0 mg， 29%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.01 min, [MH]+ = 458 14-22分鐘之溶離份堆積在一起且濃縮獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((S*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(7 mg，33%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 1.01 min, [MH]+ = 458
實例 129 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(200 mg，0.607 mmol)、HATU (254 mg，0.668 mmol)及DIPEA (0.318 mL，1.82 mmol)持續5分鐘，添加NH
4
Cl (97 mg，1.8 mmol)且在室溫下攪拌反應物5分鐘。反應物用10 w/w%檸檬酸(水溶液)稀釋且用EtOAc萃取。有機相用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得黃色固體。使用矽膠管柱層析(用0-12% EtOH:EtOAc梯度溶離)純化此固體獲得呈白色固體狀之(反)2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(125 mg，0.381 mmol，63%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.81 min, [MH]+ = 329
實例 130 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(90 mg)。將外消旋物溶解於EtOH(4 mL)中。注射：將2 mL溶液注入管柱上；等度方法30%乙醇:庚烷，流動速率=30 mL/min，偵測波長=215 nm。Ref 550 nm，100 nm，管柱30 mm × 25 cm Chiralpak AD-H (5 μm)。總注射次數=2。12.5-14.5 min之溶離份堆積在一起且濃縮獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(27 mg，0.082 mmol，30%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.80 min, [MH]+ = 329
實例 131 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R,2R)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(220 mg，0.668 mmol)及HATU (305 mg，0.802 mmol)溶解於DMF (2 mL)中，添加DIPEA (0.350 mL，2.00 mmol)且反應混合物保持於室溫下5分鐘。添加((1R,2R)-2-胺基環丙基)甲醇(58.2 mg，0.668 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。將反應混合物稀釋於EtOAc (30 mL)中且用2 w/w%檸檬酸水溶液(30 mL)洗滌兩次，接著有機層用鹽水(15 mL)再次洗滌，接著用飽和NaHCO
3
(水溶液) (30 mL)洗滌，且穿過疏水性玻璃料。濃縮濾液且使用矽膠管柱層析(用70-100% EtOAc:環己烷梯度溶離)純化獲得呈黃色膠狀之(反)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(149 mg，0.374 mmol，56%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.81 min, [MH]+ = 399 藉由對掌性HPLC純化(反)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(149 mg)。將外消旋物溶解於EtOH(4 mL)中。注射：將0.5 mL溶液注入至管柱(10% EtOH/庚烷，流動速率 = 20 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱30 mm × 25 cm Chiralcel OJ-C (5 µm), 批號ODH11158-01)。總注射次數=8。來自10-10.5 min之溶離份堆積在一起且濃縮獲得(2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(產率25 mg)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.82 min, [MH]+ = 399。
實例 132 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-(( 反 )-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(200 mg，0.607 mmol)溶解於DMF (5 mL)中。添加DIPEA (0.318 mL，1.82 mmol)、HATU (346 mg，0.911 mmol)及反2-(2-胺基環丙基)乙-1-醇(132 mg，0.911 mmol)且在室溫下攪拌反應物隔夜。將反應物真空濃縮。將殘餘物溶解於EtOAc中且用飽和NaHCO
3
(水溶液)及鹽水洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥，經疏水性玻璃料過濾且真空濃縮。使用矽膠管柱層析(用5-100% EtOAc:環己烷梯度溶離)純化殘餘物獲得(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((反)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(200 mg，0.485 mmol，80%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.91 min, [MH]+ = 413
實例 133 ： ( 反 )-N5
-(2-(4H-1,2,4- 三唑 -4- 基 ) 乙基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(0.033 g，0.10 mmol)及HATU (38 mg)於DMF (0.5 mL)中之溶液中添加DIPEA (63 μL)。溶液用胺(0.120 mmol)處理。接著振盪反應物，接著在室溫下靜置23小時。直接藉由MDAP (高pH方法)純化反應物獲得(反) N
5
-(2-(4H-1,2,4-三唑-4-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(18 mg，32%) LCMS (方法甲酸): RT = 0.83 min, [MH]
+
= 423 類似地製備以下實例：
實例 144 ： ( 反 )(2R,3S)-N5
-(2-(3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 ( 非對映異構體之混合物 ) 將(反)3,3-二氟-4-(2-((2R,3S)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(非對映異構體之混合物) (75 mg，0.13 mmol)溶解於DCM (5 mL)中且TFA (0.50 mL，6.5 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時。添加飽和NaHCO
3
(水溶液) (10 mL)且攪拌混合物30分鐘。反應混合物用水稀釋且用DCM萃取。有機物用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，經疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。將殘餘物溶解於MeOH (3 mL)中且經500 mg NH
2
isolute管柱溶離。管柱用MeOH (約10 mL)預洗滌。合併相關溶離份且真空濃縮獲得呈灰白色膠狀之(反)-N
5
-(2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(非對映異構體之混合物) (32 mg，0.070 mmol，52%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt = 0.99 min, [MH]
+
= 458
實例 145 ( 反 ) 2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-(2-( 吡啶 -2- 基 ) 乙基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將2-(2-胺基乙基)-吡啶(50.3 mg，0.412 mmol)、(反) 5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(100 mg，0.275 mmol)、乙酸鈀(II) (30.8 mg，0.137 mmol)、氧雜蒽膦(79 mg，0.14 mmol)、DMAP (50.3 mg，0.412 mmol)及羰基鈷(46.9 mg，0.137 mmol)置於可微波小瓶中且蓋上蓋子。添加1,4-二噁烷(4 mL)且在biotage微波中在90℃下照射反應物60分鐘。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取，有機相用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得黑色膠狀物。此膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-25% EtOH:EtOAc梯度溶離)純化獲得黃色固體。此藉由MDAP (高pH方法)進一步純化獲得呈黃色固體狀之(反) 2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(2-(吡啶-2-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(34 mg，0.078 mmol，29%產率)。 LCMS (方法高pH): Rt = 0.64 mins, [MH]
+
= 434
實例 146 及實例 147
：
(2R,3S)-N5
-(2-((R*)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2R,3S)-N5
-(2-((S*)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 乙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(2R,3S)-N
5
-(2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(非對映異構體之混合物) (23 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (3 mL)中。注射：將1 mL溶液注入至管柱(20% EtOH/庚烷，流動速率 = 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱30 mm × 25cm Chiralpak IC (5 μm), 批號IC10028-01。 總注射次數=1。64-69分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰1。72-80分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰2。 收集對應於峰1之溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((R*)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(9 mg)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.99 min, [MH]+ = 458。 收集對應於峰2之溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((S*)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(10 mg)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.99 min, [MH]+ = 458。
實例 148 ： ( 反 ) N7
,2- 二甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反) 2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.321 mmol)、HATU (147 mg，0.385 mmol)及DIPEA (0.168 mL，0.964 mmol)持續5分鐘。添加1-甲基-1H-吡唑-4-胺(46.8 mg，0.482 mmol) (可購自例如Fluorochem)且在室溫下攪拌反應物1小時。反應物用10 w/w%檸檬酸(水溶液)稀釋且用EtOAc萃取。有機相用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得黃色膠狀物。此膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-60% (25%含EtOH之EtOAc):環己烷梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(反) N
7
,2-二甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(65 mg，0.17 mmol，52%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.95 min, [MH]+ = 391
實例 149 ( 反 )-N7
,2- 二甲基 -N5
-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.321 mmol)、HATU (147 mg，0.385 mmol)及DIPEA (0.168 mL，0.964 mmol)持續5分鐘。添加2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙胺(40.2 mg，0.321 mmol)(可購自例如Fluorochem)且在室溫下攪拌反應物1小時。反應物用10 w/w%檸檬酸(水溶液)稀釋且用EtOAc萃取。有機相用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得黃色膠狀物。此膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-60% (25%含EtOH之EtOAc):環己烷梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(反)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(114 mg，0.272 mmol，85%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.93 min, [MH]+ = 419.3
實例 150 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N5
-(( 反 )-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反) 2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.304 mmol)、HATU (139 mg，0.364 mmol)及DIPEA (0.159 mL，0.911 mmol)持續5分鐘。添加2-((反)-2-胺基環丙基)乙醇(39.9 mg，0.395 mmol)且在室溫下攪拌反應物2小時。反應物用EtOAc稀釋且用10 w/w%檸檬酸(水溶液)及10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得褐色油狀物。使用矽膠管柱層析(用0-12% EtOH:EtOAc梯度溶離)純化此油狀物獲得呈無色膠狀之(反)-2-(氟甲基)-N
5
-((反)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(70 mg，0.17 mmol，56%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.91 min, [MH]+ = 413
實例 151 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R,2S)-2-(2- 羥基乙基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DMF (4 mL)中攪拌(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(100 mg，0.304 mmol)、HATU (139 mg，0.364 mmol)及DIPEA (0.159 mL，0.911 mmol)持續5分鐘。添加4-(2-胺基乙基)四氫-2H-硫哌喃1,1-二氧化物(70.0 mg，0.395 mmol) (可購自例如Enamine)且在室溫下攪拌反應物1小時。反應物用EtOAc稀釋且用10 w/w%檸檬酸(水溶液)及10 w/w% LiCl (水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮成黃色膠狀物。此膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-12% EtOH:EtOAc梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(反)-N
5
-(2-(1,1-二氧離子基四氫-2H-硫哌喃-4-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(97 mg，0.20 mmol，65%產率)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.89 min, [MH]+ = 489
實例 152 ： (2R,3S)-N7
,2- 二甲基 -N5
-(2-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(96 mg，0.23 mmol)。 分析方法：將約0.5 mg溶解於50% EtOH/庚烷(1 mL)中且將20 μL注入至管柱上，用30% EtOH/庚烷溶離；流動速率 = 1.0 ml/min，波長215 nm，4. 管柱4.6 mmid × 25 cm Chiralcel OJ-H。 製備方法：將約96 mg溶解於2 mL EtOH中。將2 mL溶液注入至管柱上且用30% EtOH/庚烷溶離；流動速率 = 30 mL/min，波長，215 nm，4. 管柱30 mm × 25 cm Chiralcel OJ-H (5 μm)。將9.5與14分鐘之間溶離之溶離份彙集在一起且濃縮獲得呈白色固體狀之(2S,3R)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(48 mg，0.12 mmol，50%產率)。 LCMS (方法高pH): Rt 0.93 min, [MH]
+
= 419
實例 153 ： (2R
,3S
)-N 5
-((1R
,5S
,6r
)-3,3- 二氟雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(18 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (1.5 mL)中。注射：將1.5 mL溶液注入至管柱(25% EtOH/庚烷，流動速率 = 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱3 cm × 25 cm Chiralpak AD-H (5 μm), 批號ADH13231)。總注射次數=1。14-17分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰1。真空濃縮堆積在一起之純溶離份，接著轉移至稱量燒瓶。 收集對應於峰1之溶離份獲得(2
R
,3
S
)-
N 5
-((1
R
,5
S
,6
r
)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-
N 7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7- (6 mg) LCMS (2 min甲酸): Rt = 1.10 min, [MH]+ = 427。
實例 154 ： (2S
,3R
)-N7
,2- 二甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(54 mg)。將外消旋物溶解於EtOH(7 mL)中。注射：將0.5 mL溶液注入管柱上(50% EtOH/庚烷，流動速率 = 20 mL/min，偵測波長 = 280 nm，4. Ref 400，100，管柱2 cm × 25 cm Regis Whekl-O1 [R,R] (5 μm)。15-19 min之溶離份堆積在一起且濃縮獲得：(2S,3R)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(21 mg)。 LCMS (2 min甲酸): Rt = 0.95 min, [MH]+ = 391。
實例 155 ： (2R
,3S
)-N 5
-(2-((S*
)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 實例 156 ： (2R
,3S
)-N 5
-(2-((R*
)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 實例 157 ： (2S
,3R
)-N 5
-(2-((S*
)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 實例 158 ： (2S
,3R
)-N 5
-(2-((R*
)-4,4- 二氟哌啶 -3- 基 ) 乙基 )-N 7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-N
5
-(2-((+/-)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg)。將外消旋物溶解於EtOH(1 mL)中。注射：將1 mL溶液注入至管柱上(50% EtOH/庚烷 + 0.2% 異丙胺，流動速率= 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱3 cm × 25 cm Chiralpak IC 批號IC10028-01 (5 μm)。總注射次數=2。14-16分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰1。20-22分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰2。24-25.5分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰3。25.5-27分鐘之溶離份堆積在一起且標記為混合物。27-29分鐘之溶離份堆積在一起且標記為峰4。真空濃縮堆積在一起的混合溶離份且使用上述方法再加工。 收集對應於峰1之溶離份且藉由MDAP (高pH)純化獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((S*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6 mg) LCMS (2 min高pH): Rt = 0.98 min, [MH]+ = 458。 收集對應於峰2之溶離份獲得(2R,3S)-N
5
-(2-((R*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(6 mg) LCMS (2 min高pH): Rt = 0.98 min, [MH]+ = 458。 收集對應於峰1之溶離份獲得(2S,3R)-N
5
-(2-((S*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(7 mg) LCMS (2 min高pH): Rt = 0.98 min, [MH]+ = 458。 收集對應於峰2之溶離份獲得(2S,3R)-N
5
-(2-((R*)-4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(7 mg) LCMS (2 min高pH): Rt = 0.98 min, [MH]+ = 458。
實例 159 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1S,2S)-2-( 羥基甲基 ) 環丙基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)於DMF (5 mL)中之溶液用((1S,2S)-2-胺基環丙基)甲醇鹽酸鹽(45.0 mg，0.36 mmol)、HATU (139 mg，0.364 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)處理且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著真空濃縮。將殘餘物溶解於EtOAc (10 mL)中且有機相用水，接著鹽水洗滌。有機相經硫酸鈉乾燥，經疏水性玻璃料過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度含5-100 % (3:1 EtOAc:EtOH)之環己烷)純化殘餘物獲得(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(70 mg，72%)。藉由MDAP (甲酸方法)純化樣品獲得呈奶油色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1S,2S)-2-(羥基甲基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(49 mg，45%)。 LCMS (方法高pH): Rt = 0.83 min, [MH]
+
= 399
實例 160 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-((1R,5S,6s)-3- 丙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(132 mg，0.323 mmol)於DCM (5 mL)中之溶液用DIPEA (0.113 mL，0.646 mmol)，接著丙醯氯(0.056 mL，0.65 mmol)處理。在此溫度下攪拌所得溶液1小時，接著用水處理。分離各層，且用DCM萃取水相兩次。合併之有機物經疏水性玻璃料過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法(10 g管柱，梯度：含0至70% [含25 v/v% EtOH之乙酸乙酯]之環己烷)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-((1R,5S,6s)-3-丙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(91 mg，61%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 466
實例 161 ： ( 反 )-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向微波小瓶裝入(反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(198 mg，0.424 mmol)、DBU (0.128 mL，0.849 mmol)，接著用DMF (2 mL)填充，且在100℃下，在微波照射下攪拌所得混合物1小時，接著冷卻至室溫。反應物用另一份DBU (0.128 mL，0.849 mmol)處理，在微波照射下在120℃下攪拌1小時，接著冷卻至室溫。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機層用10 w/w% LiCl(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (甲酸方法)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，16%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.93 min, [M+H]
+
= 467
實例 162 及 163 ： (2R,3S)-N5
-(3-((S*)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺及 (2R,3S)-N5
-(3-((R*)-3,3- 二氟哌啶 -4- 基 ) 丙基 )-N7
,2- 二甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性層析純化(+/-)(2R,3S)-N
5
-(3-(3,3-二氟哌啶-4-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(75 mg，0.16 mmol)。 - 製備方法：此分兩個階段進行：使用chiralpak IC分離兩對異構體，接著在第二輪層析中使用chiralpak IE及IF純化個別混合物。
方法 1
(異構體對之分辨率)使用Chiralpak IC (250 × 4.6 mm，5 μm)，流動速率1 mL/min。使用UV二極體陣列在250 nm (頻寬40 nm，參考400 nm，頻寬100 nm)下進行偵測。溶離劑由移動相A：庚烷(含有0.2 v/v%異丙胺)及移動相B：EtOH (含有0.2 v/v%異丙胺)組成。等度方法使用30分鐘之操作時間的50:50移動相A:移動相B。最快操作異構體對接著使用
方法 2
進一步分離：所用對掌性管柱為Chiralpak IE (250 × 4.6 mm，5 μm)，流動速率1 mL/min。使用UV二極體陣列在250 nm (頻寬40 nm，參考400 nm，頻寬100 nm)下進行偵測。溶離劑由移動相A：庚烷(含有0.2 v/v%異丙胺)及移動相B：EtOH (含有0.2 v/v%異丙胺)組成。等度方法使用50分鐘之操作時間的50:50移動相A:移動相B。(2R,3S)-N
5
-(3-((S*)-3,3-二氟哌啶-4-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺為自此第二純化獲得之最慢操作對映異構體，呈白色固體狀(13 mg，69%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.70 min, [M+H]
+
= 472 (2R,3S)-N
5
-(3-((S*)-3,3-二氟哌啶-4-基)丙基)-N
7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺為自此第二純化獲得之最快操作對映異構體，呈白色固體狀(11 mg，59%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.70 min, [M+H]
+
= 472
實例 164 ： (2R,3R)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-((1R,5S,6s)-3- 丙醯基 -3- 氮雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下攪拌(2R,3R)-N
5
-((1R,5S,6s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(95 mg，0.23 mmol)及丙酸酐(500 µL, 0.232 mmol)持續1小時。反應物用水稀釋且用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，且使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮獲得無色油狀物。此油狀物使用矽膠管柱層析(用0-12% EtOH:EtOAc梯度溶離)純化獲得呈白色固體狀之(2R,3R)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-((1R,5S,6s)-3-丙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(75 mg，0.161 mmol，69.4%產率)。
實例 165 ： (2R,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性層析純化(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(嘧啶-5-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(37 mg，0.082 mmol)。 - 分析方法：將約0.5 mg材料溶解於含50% EtOH之庚烷(1 mL)中且將20 μl注入管柱上，用含30% EtOH (+0.2%異丙胺)之庚烷溶離，流動速率f = 1.0 mL/min；偵測方法：波長215 nm。管柱4.6 mmid × 25 cm Chiralcel OD-H。 - 製備方法：將約37 mg材料溶解於1 mL EtOH中。將此溶液注入管柱上，用含30% EtOH (+0.2%異丙胺)之庚烷(+0.2%異丙胺)溶離，流動速率f = 30 mL/min，波長215 nm。所用管柱為30 mm × 25 cm Chiralcel OD-H (5 μm)。同一純化方法對最慢異構體(2R,3R)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(嘧啶-5-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺進行兩次以提高對映異構過量，獲得10 mg (54%)白色固體。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.80 min, [M+H]
+
= 453
實例 166 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)及HATU (111 mg，0.292 mmol)溶解於DMSO (0.85 mL)中，且所得溶液用DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)處理，且在室溫下攪拌反應混合物5分鐘。添加1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘，接著添加1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時。添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘，接著添加1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物2小時，接著靜置隔夜。再次添加HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘，接著添加1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且攪拌反應混合物3小時，接著靜置過週末。分離反應混合物且變成固體，並且全部反應物看起來變成溶液，因此向反應混合物添加另一份DMSO (1 mL)，且其在室溫下攪拌3小時。添加1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時，接著靜置隔夜。添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)、DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)及1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)、DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)及1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。反應混合物接著藉由MDAP (方法高pH)純化獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-1,2,4-三唑-3-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(24.8 mg 25%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.79 min, [M+H]
+
= 410
實例 167 ： (2S,3S)-N5
-(3-((2r,5S)-5- 胺基 -1,3- 二噁烷 -2- 基 ) 丙基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向(2S,3S)-N
5
-(3-((2r,5S)-5-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(48 mg，0.080 mmol)於EtOH (2 mL)中之懸浮液中添加水合肼(3.9 µL，0.080 mmol)，且在50℃下攪拌所得懸浮液23小時。添加另一份EtOH (1 mL)且在50℃下再攪拌反應物24小時。添加水合肼(3.9 μL，0.080 mmol)且在50℃下攪拌反應物過週末。向反應混合物添加另一份水合肼(39 μL，0.80 mmol)且使溫度降低至40℃。攪拌反應混合物8小時，接著使其冷卻至室溫且靜置隔夜。在N
2
流下蒸發揮發物。藉由MDAP (高pH)純化殘餘物獲得呈米色固體狀之(2S,3S)-N
5
-(3-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(21.8 mg，58%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.63 min, [M+H]
+
= 472
實例 168 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(1- 甲基 -1H-1,2,3- 三唑 -4- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)及HATU (111 mg，0.292 mmol)於DMSO (0.85 mL)中之溶液用DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)處理，且在此溫度下攪拌反應混合物5分鐘，接著用1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺(23.8 mg，0.243 mmol)處理。將所得混合物在室溫下攪拌1小時。接著添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物5分鐘，隨後用1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-胺(23.8 mg，0.243 mmol)處理。接著在室溫下攪拌反應混合物1小時，接著靜置過週末。其接著藉由MDAP (方法高pH)純化獲得呈黃色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(1-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(69.5 mg，70%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.89 min, [M+H]
+
= 410
實例 169 ： (2S,3S)-N5
-(2-((2r,5S)-5- 胺基 -1,3- 二噁烷 -2- 基 ) 乙基 )-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 向(2S,3S)-N
5
-(2-(5-(1,3-二側氧基異吲哚啉-2-基)-1,3-二噁烷-2-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(145 mg，0.247 mmol)於EtOH (10 mL)中之懸浮液添加水合肼(0.120 mL，2.47 mmol)且在50℃下攪拌所得溶液20小時，接著使其冷卻至室溫。濃縮反應物獲得黏稠黃色固體，將其藉由MDAP (方法甲酸)純化獲得呈無色膠狀之(2S,3S)-N
5
-(2-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)乙基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32.4 mg，29%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.61 min, [M+H]
+
= 458
實例 170 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -N5
-( 噠嗪 -4- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)及HATU (111 mg，0.292 mmol)於DMSO (0.85 mL)中之溶液用DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)處理，且在此溫度下攪拌反應混合物5分鐘。接著添加噠嗪-4-胺(23.1 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著向反應物添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且在室溫下攪拌所得混合物5分鐘。接著添加噠嗪-4-胺(23.1 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。接著藉由MDAP (方法高pH)純化混合物獲得呈橙色膠狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(噠嗪-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(65.2 mg，66%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.83 min, [M+H]
+
= 407
實例 171 ： (2R,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 甲氧基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 (反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N7,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(30 mg，0.064 mmol)進行對掌性分離： - 分析方法：將約0.5 mg物質溶解於含50% EtOH之庚烷(1 mL)中且將20 μL注入管柱上。溶離劑：含30% EtOH之庚烷，流動速率 = 1.0 mL/min，波長215 nm；管柱4.6 mmid × 25 cm Chiralcel OD-H。 - 製備方法：將約30 mg物質溶解於1 mL EtOH中且將其注入至管柱上。溶離劑：含30% EtOH之庚烷，流動速率 = 30 mL/min，波長215 nm；管柱30 mm × 25 cm Chiralcel OD-H (5 μm)。 (2R,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺為最快溶離異構體且獲得呈白色固體狀之15 mg (100%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.93 min, [M+H]
+
= 467
實例 172 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(4- 甲基 -4H-1,2,4- 三唑 -3- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)及HATU (111 mg，0.292 mmol)於DMSO (0.85 mL)中之溶液用DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)處理且在室溫下攪拌反應混合物5分鐘，隨後添加4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物1小時。添加另一份HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物5分鐘，接著添加4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-胺(23.8 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物1小時。接著用水稀釋反應混合物且用DCM洗滌水相。有機物使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法高pH)純化殘餘物獲得呈淺橙色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(4-甲基-4H-1,2,4-三唑-3-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(5.8 mg，6%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.81 min, [M+H]
+
= 410
實例 173 ： (2S,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
- 乙基 -2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-5-(((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸(21 mg，0.053 mmol)於DCM (10 mL)中之懸浮液用NEt
3
(0.015 mL，0.11 mmol)及HATU (26 mg，0.069 mmol)，隨後乙胺(0.053 mL，0.11 mmol)處理，且在此溫度下攪拌所得混合物2小時，接著用水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法甲酸)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(2S*,3S*)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
-乙基-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(14 mg，62%)。 LCMS (方法高pH): 滯留時間0.97 min, [M+H]
+
= 425
實例 174 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N7
- 甲基 -N5
-(2- 甲基 -2H- 四唑 -5- 基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)於DCM (1 mL)中之溶液用亞硫醯二氯(28.9 mg，0.243 mmol)處理且在50℃下攪拌所得混合物4小時。接著添加另一份亞硫醯二氯(28.9 mg，0.243 mmol)且在70℃下攪拌反應物2小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。殘餘物與甲苯一起共蒸發。接著將殘餘物溶解於DMF (1 mL)中且溶液在室溫下用2-甲基-2H-四唑-5-胺(24.1 mg，0.243 mmol)及DIPEA (0.042 mL，0.24 mmol)處理，接著在此溫度下攪拌隔夜。添加另一份2-甲基-2H-四唑-5-胺(48.1 mg，0.486 mmol)及DIPEA (0.084 mL，0.486 mmol)且在50℃下攪拌所得混合物2小時，接著冷卻至室溫且真空濃縮。藉由MDAP (方法甲酸)純化殘餘物獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-(2-甲基-2H-四唑-5-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(80 mg，80%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.75 min, [M+H]
+
= 411
實例 175 ： (2S,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
- 環丙基 -2-( 氟甲基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，含(2S,3S)-5-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基胺甲醯基)-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲酸(50 mg，0.13 mmol)之DMF (1 mL)用DIPEA (0.066 mL，0.38 mmol)，接著HATU (71.8 mg，0.189 mmol)處理，且在此溫度下攪拌反應物5分鐘，接著用環丙胺(9.76 µL, 0.138 mmol)處理。在室溫下攪拌混合物1小時，接著真空濃縮。將殘餘物分配於乙酸乙酯與飽和NaHCO
3
(水溶液)之間且分離各層。有機相用2N HCl (水溶液)，接著鹽水洗滌，用Na
2
SO
4
乾燥且真空濃縮。藉由MDAP (方法甲酸)純化所獲得之殘餘物獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-N
5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
-環丙基-2-(氟甲基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(34.7 mg，60%)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.96 min, [M+H]
+
= 437
實例 176 ： (2R,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3- 氧雜雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-3-(3-(2- 羥基乙氧基 ) 苯基 )-N7
,2- 二甲基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 藉由對掌性HPLC純化(反)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(25 mg)。在加熱下，將外消旋物溶解於EtOH (1 mL)中。注射：將1 mL溶液注入至管柱上(50% EtOH [+0.2%異丙胺]/庚烷[+0.2%異丙胺]，流動速率 = 30 mL/min，偵測波長 = 215 nm，4. Ref 550，100，管柱30 mm × 25 cm Chiralcpak AD-H (5 μm)，批號ADH13231)。23-31分鐘之溶離分堆積在一起獲得(2R,3S)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N
7
,2-二甲基-N
5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(7.0 mg，0.015 mmol，28%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.83 min, [MH]+ = 476。
實例 177 ： ( 反 )-N 5
-((1R
,5S
,6r
)-3,3- 二氟雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-2-( 氟甲基 )-N
7- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(反)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(50 mg，0.15 mmol)溶解於DCM (10 mL)中且添加Et
3
N (0.042 mL，0.30 mmol)及HATU (69.3 mg，0.182 mmol)，隨後添加(1R,5S,6r)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-胺鹽酸鹽(30 mg，0.18 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時，接著用水洗滌，乾燥且真空蒸發，且所得淺黃色膠狀物使用矽膠管柱層析(用0-100% EtOAc:環己烷梯度溶離)純化獲得呈無色發泡體狀之(反)-N
5
-((1R,5S,6r)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(43 mg，0.097 mmol，64%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt = 1.05 min, [MH]
+
= 445
實例 178 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -N 5
-(( 反 )-2-(2-(N- 嗎啉基 ) 乙基 ) 環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在室溫下，在DCM (5 mL)中攪拌2-(氟甲基)-N
5
-((1R,2S)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(70 mg，0.17 mmol)及戴斯-馬丁高碘烷(144 mg，0.339 mmol)持續16小時。反應物用飽和NaHCO
3
(水溶液)洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮成黃色固體。固體用DCM (5 mL)稀釋且用嗎啉(0.030 mL，0.34 mmol)及三乙醯氧基硼氫化鈉(180 mg，0.849 mmol)處理，且在室溫下攪拌1小時。反應物在室溫下靜置9天。反應物用水處理且用EtOAc萃取，有機層用鹽水洗滌，使用疏水性玻璃料乾燥且濃縮成褐色油狀物。使用MDAP (甲酸)純化此油狀物獲得呈黃色油狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-((1R,2R)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(5 mg，6%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt 0.63 min, [MH]
+
= 482
實例 179 ： ( 反 )-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -N5
-(1S
,2S
)-2- 甲基環丙基 )-3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 在50 mL RBF中組合(反)-5-溴-2-(氟甲基)-N-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-7-甲醯胺(0.200 g，0.549 mmol)、(1S,2S)-2-甲基環丙-1-胺鹽酸鹽(0.089 g，0.82 mmol)、氧雜蒽膦(0.016 g，0.027 mmol)、乙酸鈀(II) (6.16 mg，0.0270 mmol)及碳酸鈉(0.175 g，1.65 mmol)且用氮氣吹掃燒瓶，接著添加甲苯(8 mL)，溶劑用氮氣，接著用一氧化碳噴射10分鐘。安裝含有一氧化碳之氣球且在80℃下加熱混合物過週末，獲得黑色懸浮液。此用DCM (20 mL)稀釋且用水洗滌。有機層用水(10 mL)洗滌且經疏水性玻璃料乾燥，接著真空蒸發。使用矽膠管柱層析(用0-100% EtOAc/環己烷梯度溶離)純化殘餘物獲得呈無色固體狀之(反)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-N
5
-((1S,2S)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(0.132 g，0.345 mmol，63%產率)。 LCMS (方法甲酸): Rt 1.01 min, [MH]
+
= 383
實例 180 ： (2S
,3S
)-2-( 氟甲基 )-N 7
- 甲基 -3- 苯基 -N 5
-( 嘧啶 -5- 基 )-2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺二甲醯胺 將(2S,3S)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸(80 mg，0.24 mmol)及HATU (111 mg，0.292 mmol)溶解於DMSO (0.9 mL)中，添加DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物5分鐘。添加嘧啶-5-胺(23.1 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應物30分鐘。反應混合物靜置隔夜。添加HATU (111 mg，0.292 mmol)及DIPEA (0.127 mL，0.729 mmol)且攪拌反應混合物5分鐘，接著添加嘧啶-5-胺(23.1 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物1小時。添加嘧啶-5-胺(23.1 mg，0.243 mmol)且在室溫下攪拌1小時。將反應物稀釋至3 mL DMSO且藉由MDAP (高pH)純化獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-N
5
-(嘧啶-5-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(32 mg，0.079 mmol，32%產率)。 LCMS (方法甲酸): 滯留時間0.90 min, [M+H]
+
= 407
實例 181 - 202 ：
以下實例為對掌性純化外消旋混合物之後獲得的兩種對映異構體之最低活性，或自下文所示具有立體化學性之對掌性中間物合成：
X=Br、COORy，Ry=C
1-2
烷基
實例 203 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R,3R,5S,6r)-3- 羥基雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 實例 204 ： (2S,3S)-2-( 氟甲基 )-N5
-((1R,3S,5S,6r)-3- 羥基雙環 [3.1.0] 己烷 -6- 基 )-N7
- 甲基 -3- 苯基 -2,3- 二氫苯并呋喃 -5,7- 二甲醯胺 將(2S,3S)-N
5
-((1R,3R,5S,6r)-3-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(72.4 mg，0.134 mmol) (非對映異構體之9:1混合物)溶解於DCM (3 mL)中且添加4M含HCl之二噁烷(0.084 mL，0.37 mmol)。在室溫下攪拌反應物30分鐘。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取，合併之有機物經疏水性玻璃料過濾且真空濃縮成黃色固體。使用矽膠管柱層析(用10至100% (含25% EtOH之乙酸乙酯):環己烷梯度溶離)，接著藉由MDAP (高pH方法)純化固體獲得呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,3R,5S,6r)-3-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(31.6 mg，55%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.86 min, [MH]
+
= 425 及呈白色固體狀之(2S,3S)-2-(氟甲基)-N
5
-((1R,3S,5S,6r)-3-羥基雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N
7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺(4.3 mg，8%產率)。 LCMS (2 min高pH): Rt = 0.90 min, [MH]
+
= 425
生物資料
式(I)化合物可在以下分析法中之一或多者中測試：
時間分辨螢光共振能量轉移 (TR-FRET) 分析
利用時間分辨螢光共振能量轉移(TR-FRET)競爭分析評定溴結構域結合。為了能夠進行此方法，用遠紅螢光染料Alexa Fluor® 647 (參考化合物X)標記高親和力pan-BET相互作用小分子。參考化合物X用作溴結構域結合之報導體且為TR-FRET對之接受體螢光團組分。與抗6*His抗體結合之銪螯合物用作TR-FRET對中之供體螢光團。抗6*His抗體選擇性結合於添加至此研究中所用之BET串聯溴結構域蛋白質構築體中之每一者的胺基末端的六組胺酸純化抗原決定基。當供體及接受體螢光團緊密接近(介於20-80Å之間)時產生TR-FRET信號，其在此分析法中可藉由參考化合物X與溴結構域蛋白結合實現。 參考化合物X：4-((Z)-3-(6-((5-(2-((4S)-6-(4-氯苯基)-8-甲氧基-1-甲基-4H-苯并[f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮呯-4-基)乙醯胺基)戊基)胺基)-6-側氧基己基)-2-((2E,4E)-5-(3,3-二甲基-5-磺基-1-(4-磺基丁基)-3H-吲哚-1-鎓-2-基)戊-2,4-二烯-1-亞基)-3-甲基-5-磺基吲哚啉-1-基)丁烷-1-磺酸酯)
向N-(5-胺基戊基)-2-((4S)-6-(4-氯苯基)-8-甲氧基-1-甲基-4H-苯并[f][1,2,4]三唑并[4,3-a][1,4]二氮呯-4-基)乙醯胺(製備參看參考化合物J，WO2011/054848A1，1.7 mg，3.53 µmol)於DMF (40 μl)中之溶液中添加AlexaFluor647-ONSu (2.16 mg，1.97 µmol)於DMF (100 μl)中之溶液。混合物用DIPEA (1 μl，5.73 µmol)鹼化且在渦流混合器上攪動隔夜。 蒸發反應混合物至乾燥。將固體溶解於乙腈/水/乙酸(5/4/1，＜1 ml)中，過濾且施加至Phenomenex Jupiter C18製備型管柱上且用以下梯度(A = 含0.1%三氟乙酸之水，B= 0.1% TFA/90% 乙腈/10%水)溶離：流動速率 = 10 ml/min.，AU = 20/10 (214 nm)： 5-35%，t=0min：B = 5%；t=10min：B = 5%；t=100min：B = 35%；t=115min：B = 100% (Sep. grad: 0.33%/min) 主要組分在範圍26-28% B溶離，但似乎由兩個峰組成。藉由分析型HPLC (Spherisorb ODS2，經60分鐘，1至35%)分析應含有「兩種」組分之中間溶離份(F1.26)：單一組分在28% B下溶離。 組合溶離份F1.25/26&27且蒸發至乾燥。用DMF轉移，蒸發至乾燥，用無水乙醚濕磨且在＜0.2 mbar下乾燥藍色固體隔夜：1.54 mg。 分析型HPLC (Sphersisorb ODS2，經60分鐘，1至35% B)：MSM10520-1：[M+H]
+
(觀測值)：661.8/-，與M-29對應。此等於M-29之[(M+2H)/2]
+
質量計算值1320.984。其為用Alexa Fluor 647染料獲得之標準產生值，且表示在質譜儀之條件下兩個亞甲基之理論損失。
分析原理
：為了產生TR-FRET信號，供體螢光團藉由λ337 nm處之雷射激發，其隨後導致在λ618 nm處發射。若接受體螢光團緊密接近，則可能出現能量傳遞，其導致在λ665 nm處發射Alexa Fluor® 647。在競爭化合物存在下，參考化合物X可藉由與溴結構域結合置換。若發生置換，則接受體螢光團不再接近供體螢光團，此防止螢光能量傳遞及隨後防止在λ665 nm處之Alexa Fluor® 647發射的損失。 使用跨越溴結構域1 (BD1)及溴結構域2 (BD2)之蛋白質截斷評定式(I)化合物與參考化合物X競爭結合BET家族(BRD2、BRD3、BRD4以及BRDT)。為了監測與BD1或BD2之差異結合，在乙醯基離胺酸結合凹穴中進行關鍵酪胺酸到丙胺酸的單個殘基突變。為了驗證此方法，針對BET家族成員中之每一者產生雙殘基突變體串聯結構域蛋白。利用螢光偏振方法，測定參考化合物X之單及雙突變體中之每一者的結合親和力。參考化合物X之雙突變體串聯蛋白質的親和力與非突變野生型串聯BET蛋白相比極大地降低(Kd中＞1000倍降低)。參考化合物X的單突變溴結構域串聯蛋白質之親和力與相應非突變BET蛋白質同等強效。此等資料表明酪胺酸至丙胺酸之單個突變將突變溴結構域與參考化合物X之間的相互作用的Kd降低＞1000倍。在TR-FRET競爭分析中，參考化合物X以與非突變溴結構域之Kd相等的濃度使用，此確保在突變溴結構域處偵測不到結合。
蛋白質製造
： 使重組人類溴結構域[(BRD2 (1-473) (Y113A)及(Y386A)、BRD3 (1-435) (Y73A)及(Y348A) BRD4 (1-477) (Y97A)及(Y390A)、及BRDT (1-397) (Y66A)及(Y309A)]表現於大腸桿菌細胞(對於BRD2/3/4，在pET15b載體中，且對於BRDT，在pET28a載體中)，其中N端具有6-His標籤。使經His標記之溴結構域糰粒再懸浮於50 mM HEPES (pH7.5)、300 mM NaCl、10 mM 咪唑及1 µl/ml蛋白酶抑制劑混合物中，且使用音波處理自大腸桿菌細胞提取且使用鎳瓊脂糖高效管柱純化，洗滌蛋白質，接著用20倍管柱體積之含有緩衝液50 mM HEPES (pH7.5)、150 mM NaCl、500 mM咪唑之0-500 mM咪唑之線性梯度溶離。藉由Superdex 200製備型尺寸排阻管柱完成最終純化。將經純化蛋白質儲存在-80℃下20 mM HEPES pH 7.5及100 mM NaCl中。藉由肽質量指紋譜確認蛋白質身分且藉由質量光譜測定法確認預測之分子量。
溴結構域 BRD2 、 3 、 4 以及 T 、 BD1 + BD2 突變體 TR - FRET 競爭分析法 之方案：
將全部分析組分溶解於由50 mM HEPES pH7.4、50 mM NaCl、5%丙三醇、1 mM DTT以及1 mM CHAPS組成之分析緩衝液中。將參考化合物X在含有20 nM單突變體串聯溴結構域蛋白質之分析緩衝液中稀釋至等於2*此溴結構域之Kd之濃度。將含有溴結構域及參考化合物X之溶液添加至Greiner 384孔黑色低量微量滴定盤中之測試化合物或DMSO媒劑的劑量反應稀釋液(此分析法中最多使用0.5% DMSO)且隨後在室溫下培育30分鐘。向全部孔中添加相等體積之3 nM 抗6*His銪螯合物，隨後在室溫下進一步培育30分鐘。藉由在λ337 nm處激發供體螢光團且隨後在50 µs延遲之後，分別量測供體及接受體螢光團在λ615 nm及λ665 nm處之發射，使用Perkin Elmer多模式盤讀取器偵測TR-FRET。為了控制此等分析，每一微量滴定盤上包括未抑制(DMSO媒劑)及抑制(WO 2011/054846A1之實例11的10*IC
50
濃度) TR-FRET分析法中之每一者的16個複本。 隨後施用以下形式之cA四參數曲線擬合： y = a + (( b - a)/( 1 + ( 10 ^ x/10 ^ c ) ^ d ) 其中『a』為最小值，『b』為希爾斜率(Hill slope)，『c』為pIC
50
，且『d』為最大值。 除了實例17、28、63、70、73及77以及108之外，全部實例各自基本上如上文所述在BRD4 BD1及BRD4 BD2 TR-FRET分析法中測試。熟習此項技術者將公認針對功能活性之活體外結合分析法及基於細胞之分析法受制於實驗可變性。因此，應理解下文給出之pIC
50
值僅為例示性的。pIC
50
值表示為log
10
單位。 發現全部測試化合物在至少一個上文所述的分析法中具有pIC
50
≥ 4.0。 發現實例6、7、34、85、100-107、132、133、164、172、174、181-190以及192-201在BRD4 BD2分析法中具有pIC
50
≥ 4.0及＜ 6.0。 發現全部其他測試化合物在BRD4 BD2分析法中具有pIC
50
≥ 6.0。 實例26在上文所述的BRD4 BD2 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為7.8 (n = 16)，且在上文所述的BRD4 BD1 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為4.7 (n = 16)。 實例38在上文所述的BRD4 BD2 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為8 (n = 2)，且在上文所述的BRD4 BD1 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為4.7 (n = 2)。 實例54在上文所述的BRD4 BD2 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為7.8 (n = 7)，且在上文所述的BRD4 BD1 TR-FRET分析法中的平均pIC
50
為4.6 (n = 9)。
BRD4 BD2 優於 BRD4 BD1 之選擇性的計算
BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性如下計算： 選擇性 = BRD4 BD2 pIC
50
- BRD4 BD1 pIC
50
除了實例101-107、132、174、183、185、187、188、192以及194-198之外，發現全部測試化合物在上文所述的TR-FRET分析法中之至少一者中≥1對數單位的BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性，且因此BRD4 BD2優於BRD4 BD1的至少10倍選擇性。 發現實例1、2、4、5、8-16、18-27、29-33、35-41、43-62、64-69、72、74、76、79-84、86-99、109-131、134-158、160-163、165-171、173、175-180以及202在上文所述的TR-FRET分析法中之至少一者中≥2對數單位的BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性，且因此BRD4 BD2優於BRD4 BD1至少100倍選擇性。 發現實例26在上文所述的TR-FRET分析法中之至少一者中3.1對數單位的BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性，且因此BRD4 BD2優於BRD4 BD1至少1000倍選擇性。 發現實例38在上文所述的TR-FRET分析法中之至少一者中3.3對數單位的BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性，且因此BRD4 BD2優於BRD4 BD1至少100倍選擇性。 發現實例54在上文所述的TR-FRET分析法中之至少一者中3.2對數單位的BRD4 BD2優於BRD4 BD1之選擇性，且因此BRD4 BD2優於BRD4 BD1至少1000倍選擇性。
或其鹽 其中： R1
為-C1 - 3
烷基或環丙基； R2
為-C0 - 3
烷基-環烷基，其中該環烷基視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R5
基團取代； R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基或-(CH2
)p
O-雜環基，其中各雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R9
基團取代；或 R2
為H、-CH3
、視情況經高達五個氟取代之C2 - 6
烷基、-C2 - 6
烷基OR13
、-C2 - 6
烷基NR11
R12
、-(CH2
)m
SO2
C1 - 3
烷基、-(CH2
)m
SO2
NR11
R12
、-(CH2
)m
C(O)NR11
R12
、-(CH2
)m
CN、-(CH2
)m
CO2
R13
、-(CH2
)m
NHCO2
C1 - 4
烷基-(CH2
)m
NHC(O)C1 - 4
烷基或-(CH2
)n
雜芳基，其中雜芳基視情況經一個或兩個可相同或不同之R14
基團取代； R3
為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R7
基團取代之苯基； R4
為-C1 - 3
烷基、-CH2
OR6
或-CH2
F； 各R5
獨立地為鹵基、-C0 - 6
烷基-R8
、-O-C2 - 6
烷基-R8
、-CN或-SO2
C1 - 3
烷基； R6
為-H或C1 - 3
烷基； 各R7
獨立地為-鹵基、-C1 - 4
烷基、-C0 - 3
烷基-OR10
、-C0 - 3
烷基-NR15
R16
、-C0 - 3
烷基-CONR15
R16
、CN或-SO2
R17
； R8
為-H、-OR10a
、-NR18
R19
或雜芳基； 各R9
獨立地為鹵基、C1 - 4
烷基、環丙基、環丁基、-CH2
CF3
、-CH2
CHF2
、-CH2
CH2
F、-OCH2
CH2
OR13
、-C0 - 3
烷基OR13
、-C0 - 3
烷基NR11
R12
、-NHCH2
CH2
OR13
、-NHCO2
R13
、側氧基(oxo)、-C(O)R13
、-C(O)OR13
或-C(O)NR11
R12
； R10a
為-H、-C1 - 3
烷基、-C2 - 3
烷基NR11
R12
或-C2 - 3
烷基OH； R10
為-H、-C1 - 3
烷基、-C2 - 3
烷基NR15
R16
或-C2 - 3
烷基OH； R11
及R12
各自獨立地選自-H及-C1 - 3
烷基；或R11
及R12
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R13
為-H或C1 - 4
烷基； 各R14
獨立地為鹵基、C1 - 4
烷基、環丙基、環丁基或-OR13
； R15
及R16
各自獨立地選自-H及-C1 - 3
烷基；或R15
及R16
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R17
為-C1 - 3
烷基或-NR15
R16
； R18
及R19
各自獨立地選自-H、-C(O)OC(CH3
)3
、-C1 - 6
烷基、環烷基、雜環基、-C2 - 3
烷基NR13
COC1 - 3
烷基、C2 - 3
烷基NR15
R16
及-C2 - 3
烷基-O-C1 - 3
烷基，其中該-C1 - 6
烷基及環烷基可視情況經一個、兩個或三個氟取代；或R18
及R19
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； m為選自2、3及4之整數； p為選自2、3及4之整數； n為選自0、1、2、3及4之整數。 本發明化合物已展示為溴結構域抑制劑，詳言之BD2選擇性的且可適用於治療多種疾病或病況，例如急性或慢性自體免疫及/或發炎病況，例如類風濕性關節炎及癌症。因此，本發明進一步針對包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。本發明進一步針對使用式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽或包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物治療與其相關之疾病或病況的方法。本發明進一步針對製備本發明化合物之方法。
)。若已知絕對立體化學性且化合物為單個對映異構體，則適當時使用加粗或散列楔形符號(
/
)。 含有一或多個不對稱中心的式(I)之化合物的個別立體異構體可藉由熟習此項技術者已知之方法解析。舉例而言，此類解析可(1)藉由形成非對映異構鹽、複合物或其他衍生物；(2)藉由與立體異構體特異性試劑選擇性反應(例如藉由酶促氧化或還原)；或(3)藉由在對掌性環境中(例如在對掌性支撐物(諸如具有結合之對掌性配位體之二氧化矽)上或在對掌性溶劑存在下)進行氣體-液體或液相層析進行。應瞭解，當藉由上述分離程序中之一者將所要立體異構體轉化為另一化學實體時，需要另一步驟來釋放所要形式。或者，特定立體異構體可藉由使用光活性試劑、受質、催化劑或溶劑不對稱合成或藉由不對稱轉型將一種對映異構體轉化為另一對映異構體來合成。 應瞭解，可觀測式(I)化合物互變異構體。與互變異構體之生物活性相關的任何備註應被視為包括兩種互變異構體。 應理解本文提及式(I)化合物及其鹽涵蓋游離鹼或其鹽形式(例如其醫藥學上可接受之鹽)的式(I)化合物。因此，在一個實施例中，本發明針對游離鹼形式之式(I)化合物。在另一實施例中，本發明針對式(I)化合物及其鹽。在另一實施例中，本發明針對式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽。 因為其在藥品中的可能用途，式(I)化合物之鹽適宜為醫藥學上可接受的。適合醫藥學上可接受之鹽可包括酸加成鹽或鹼加成鹽。適合醫藥學上可接受之鹽的評述參看Berge等人,J . Pharm . Sci .,
66:1-19, (1977
)。通常，醫藥學上可接受之鹽可藉由按需要使用所需酸或鹼容易地製備。所得鹽可自溶液沈澱且藉由過濾收集，或可藉由蒸發溶劑來回收。 醫藥學上可接受之酸加成鹽可藉由式(I)化合物與適合無機或有機酸(諸如氫溴酸、氫氯酸、硫酸、硝酸、磷酸、丁二酸、順丁烯二酸、乙酸、丙酸、反丁烯二酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸、水楊酸、天冬胺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、萘磺酸(諸如2-萘磺酸)或己酸)，視情況在諸如有機溶劑之適合溶劑中反應，獲得通常例如藉由結晶及過濾或藉由蒸發隨後濕磨分離的鹽來形成。式(I)化合物的醫藥學上可接受之酸加成鹽可包含或為例如氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、丁二酸鹽、順丁烯二酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、反丁烯二酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、乳酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、麩胺酸鹽、天冬胺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、萘磺酸鹽(例如2-萘磺酸鹽)或己酸鹽。 其他非醫藥學上可接受之鹽(例如甲酸鹽或三氟乙酸鹽)可用於例如分離式(I)化合物，且包括在本發明的範疇內。 本發明在其範疇內包括式(I)化合物之鹽之所有可能的化學計量及非化學計量形式。 自前述內容應瞭解本發明之範疇內包括式(I)化合物及其鹽之溶劑合物、異構體及多晶型形式。 本發明亦包括經同位素標記之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其與上文式(I)中所列之彼等相同，但一或多個原子置換為原子質量或質量數與自然界中通常存在的原子質量或質量數不同的原子。可併入至本發明化合物及其醫藥學上可接受之鹽中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯及碘的同位素，諸如2
H、3
H、11
C、13
C、14
C、15
N、17
O、18
O、31
P、32
P、35
S、18
F、36
Cl、123
I以及125
I。本發明之說明
在第一態樣中，提供式(I)化合物：
或其鹽 其中： R1
為-C1 - 3
烷基或環丙基； R2
為-C0 - 3
烷基-環烷基，其中該環烷基視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R5
基團取代； R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基或-(CH2
)p
O-雜環基，其中各雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R9
基團取代；或 R2
為H、-CH3
、視情況經高達五個氟取代之C2 - 6
烷基、-C2 - 6
烷基OR13
、-C2 - 6
烷基NR11
R12
、-(CH2
)m
SO2
C1 - 3
烷基、-(CH2
)m
SO2
NR11
R12
、-(CH2
)m
C(O)NR11
R12
、-(CH2
)m
CN、-(CH2
)m
CO2
R13
、-(CH2
)m
NHCO2
C1 - 4
烷基-(CH2
)m
NHC(O)C1 - 4
烷基或-(CH2
)n
雜芳基，其中雜芳基視情況經一個或兩個可相同或不同之R14
基團取代； R3
為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R7
基團取代之苯基； R4
為-C1 - 3
烷基、-CH2
OR6
或-CH2
F； 各R5
獨立地為鹵基、-C0 - 6
烷基-R8
、-O-C2 - 6
烷基-R8
、-CN或-SO2
C1 - 3
烷基； R6
為-H或C1 - 3
烷基； 各R7
獨立地為-鹵基、-C1 - 4
烷基、-C0 - 3
烷基-OR10
、-C0 - 3
烷基-NR15
R16
、-C0 - 3
烷基-CONR15
R16
、CN或-SO2
R17
； R8
為-H、-OR10a
、-NR18
R19
或雜芳基； 各R9
獨立地為鹵基、C1 - 4
烷基、環丙基、環丁基、-CH2
CF3
、-CH2
CHF2
、-CH2
CH2
F、-OCH2
CH2
OR13
、-C0 - 3
烷基OR13
、-C0 - 3
烷基NR11
R12
、-NHCH2
CH2
OR13
、-NHCO2
R13
、側氧基、-C(O)R13
、-C(O)OR13
或-C(O)NR11
R12
； R10a
為-H、-C1 - 3
烷基、-C2 - 3
烷基NR11
R12
或-C2 - 3
烷基OH； R10
為-H、-C1 - 3
烷基、-C2 - 3
烷基NR15
R16
或-C2 - 3
烷基OH； R11
及R12
各自獨立地選自-H及-C1 - 3
烷基；或R11
及R12
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R13
為-H或C1 - 4
烷基； 各R14
獨立地為鹵基、C1 - 4
烷基、環丙基、環丁基或-OR13
； R15
及R16
各自獨立地選自-H及-C1 - 3
烷基；或R15
及R16
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； R17
為-C1 - 3
烷基或-NR15
R16
； R18
及R19
各自獨立地選自-H、-C(O)OC(CH3
)3
、-C1 - 6
烷基、環烷基、雜環基、-C2 - 3
烷基NR13
COC1 - 3
烷基、C2 - 3
烷基NR15
R16
及-C2 - 3
烷基-O-C1 - 3
烷基，其中該-C1 - 6
烷基及環烷基可視情況經一個、兩個或三個氟取代；或R18
及R19
可與其所連接之氮接合在一起形成4至7員雜環基，其視情況經一個或兩個獨立地選自-C1 - 3
烷基、-OH及F之取代基取代； m為選自2、3及4之整數； p為選自2、3及4之整數； n為選自0、1、2、3及4之整數。 在一個實施例中，R1
為甲基、乙基、丙基、異丙基或環丙基。在另一實施例中，R1
為甲基。 在一個實施例中，R2
為-C0 - 3
烷基-C3 - 7
環烷基，其中C3 - 7
環烷基視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R5
基團取代。在另一實施例中，R2
為-C0 - 3
烷基-C3 - 7
環烷基，其中C3 - 7
環烷基為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R5
基團取代的環丙基、環丁基或環己基。在另一實施例中，R2
為視情況經一個、兩個或三個可相同或不同之R5
基團取代的環丙基、環丁基或環己基。在另一實施例中，R2
係選自：
。 *表示連接點 在一個實施例中，R5
為-C0 - 6
烷基-R8
。在另一實施例中，R5
為甲基、-CH2
OH、-OH或-CH2
CH2
嗎啉基。 在一個實施例中，R8
為OH、甲基或嗎啉基。 在一個實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基或-(CH2
)p
O-雜環基，其中各雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R9
基團取代。在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基視情況經一個或兩個可相同或不同之R9
基團取代。在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其為-雜環基、-CH2
CH2
-雜環基或-CH2
CH2
CH2
-雜環基。在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基係選自氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫-2H-哌喃基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、(1r,5s)-3-氧雜雙環[3.1.0]己基以及(1r,5s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己基，其視情況經一個或兩個可相同或不同之R9
基團取代。在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其中雜環基係選自氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫-2H-哌喃基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、(1r,5s)-3-氧雜雙環[3.1.0]己基以及(1r,5s)-3-氮雜雙環[3.1.0]己基，其視情況經一個或兩個選自甲基-C(O)CH3
及氟之R9
基團取代。在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其中視情況經一個或兩個R9
基團取代之雜環基係選自：
。 *表示連接點 在另一實施例中，R2
為-C0 - 4
烷基-雜環基，其中視情況經一個或兩個R9
基團取代之雜環基為：
*表示連接點 在一個實施例中，p為2或3。 在一個實施例中，R2
為-H、-CH3
、視情況經高達五個氟取代之C2 - 6
烷基、-C2 - 6
烷基OR13
、-C2 - 6
烷基NR11
R12
、-(CH2
)m
SO2
C1 - 3
烷基、-(CH2
)m
SO2
NR11
R12
、-(CH2
)m
C(O)NR11
R12
、-(CH2
)m
CN、-(CH2
)m
CO2
R13
、-(CH2
)m
NHCO2
C(CH3
)3
或-(CH2
)n
雜芳基，其中雜芳基視情況經一個或兩個可相同或不同之R14
基團取代。在另一實施例中，R2
為-H、-CH3
、C2 - 6
烷基、-C2 - 6
烷基OR13
、-C2 - 6
烷基NR11
R12
或-(CH2
)n
雜芳基。在另一實施例中，R2
為-H、甲基、乙基、丙基、-CH2
CH2
OH、-CH2
CH2
CH2
OH、-CH2
CH(CH3
)OH、-CH2
CH2
OCH3
、-CH2
CH2
CH2
OCH3
、-CH2
CH2
N(CH3
)2
、-CH2
CH2
CH2
N(CH3
)2
、-CH2
CHF2
或-CH2
CH2
吡啶基。 在另一實施例中，R2
為-(CH2
)n
雜芳基，其中雜芳基係選自由以下組成之群：呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、異噻唑基、吡啶基、噠嗪基、吡嗪基、嘧啶基以及三嗪基，該等基團視情況經一個或兩個可相同或不同之R14
基團取代。在另一實施例中，提供式(I)化合物，其中R2
為-(CH2
)n
雜芳基，其中該雜芳基為視情況經C1 - 4
烷基取代之吡唑基。 在一個實施例中，n為0、2或3。在一個實施例中，n為0。在另一實施例中，n為2。 在一個實施例中，R3
為視情況經-OCH3
或-OCH2
CH2
OH取代之苯基。在另一實施例中，R3
為苯基。 在一個實施例中，R4
為甲基、-CH2
F或-CH2
OH。 在一個實施例中，式(I)化合物為式(IA)化合物
或其鹽，其中R1
、R2
、R3
及R4
根據式(I)定義。 應理解本發明涵蓋上文所述之取代基的全部組合。 本發明化合物包括實例1至204之化合物及其鹽。本發明化合物包括實例1至108之化合物及其鹽。在一個實施例中，式(I)化合物係選自： (2R
*,3R
*)-N5
-環丁基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N5
-環丁基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N5
-(2-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N5
-環丙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； N5
,N7
, 2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-(2-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-環丙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-環丙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-環丁基-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-N5
-丙基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-N5
-(2-(哌啶-4-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-N5
-(3-(4-甲基哌嗪-1-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-N5
-(3-(哌嗪-1-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N7
,2-二甲基-3-苯基-N5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-3-苯基-N5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-乙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
,N7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1S*,2S*)-2-(羥基甲基)環丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-環丙基-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-環丙基-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
,N7
-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-N5
-((1S
,2S
)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1S
,2S
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,2R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-環丙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
-甲基-N5
-((1S
,2S
)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N5
,N7
-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-乙基-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(羥基甲基)-N5
-(2-甲氧基乙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
-甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2-甲氧基乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-3-苯基-N5
-(四氫-2H-哌喃-4-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2-羥基乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1R
,5S
,6s
)-6-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6s
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2-(二甲基胺基)乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(3-(二甲基胺基)丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N5
-環丙基-3-(3-甲氧基苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-(氧雜環丁烷-3-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 2-(2-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-(2-(嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(3-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-(3-(N-嗎啉基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(3-甲氧基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-3-苯基-N5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2,2-二氟乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 2-(3-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-(3-(嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(羥基甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲酸乙酯； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,2R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (R
)-2-(3-((2R
,3S
)-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
,2-二甲基-N5
-(3-((R
)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-3-(3-甲氧基苯基)-N7
,2-二甲基-N5
-(3-((S
)-嗎啉-2-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 3-氟-3-(3-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N5
-(3-(3-氟哌啶-3-基)丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1S
*,2R
*)-2-(2-羥基乙基)環丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-((1S
*,2S
*)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-((1S
,2S
)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N7
,2-二甲基-N5
-((1S
,2S
)-2-(2-(N-嗎啉基)乙基)環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-N5
-((1S
,2S
)-2-甲基環丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (S
)-3-氟-3-(3-((2R
*,3S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2R
*,3S
*)-N5
-(3-((R
)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (R
)-3-氟-3-(2-((2S
,3S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
-(2-((R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
-(3-((R
)-3-氟哌啶-3-基)丙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (R
)-3-氟-3-(2-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N5
-(2-((R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (R
)-2-(3-((2S
,3S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)丙基)嗎啉-4-甲酸第三丁
酯； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-N5
-(3-((R
)-嗎啉-2-基)丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (R
)-2-(2-((2S
,3S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)嗎啉-4-甲酸第三丁
酯； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-N5
-(2-((R
)-嗎啉-2-基)乙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-(2-(4,4-二氟哌啶-3-基)乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 4,4-二氟-3-(2-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2R
,3S
)-N5
-(2-(3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； 3,3-二氟-4-(2-((2R
,3S
)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2S
*,3S
*)-2-(氟甲基)-N5
-((1R
,4S
)-4-羥基環己基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6R
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-2-(氟甲基)-N5
-((1R
,3S
)-3-羥基環丁基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
-((1R
,2R
)-2-(羥基甲基)環丙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-N5
-((1R
,5S
,6s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1R
,5S
,6S
)-6-((2S
,3S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁
酯； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-N5
-(四氫呋喃-3-基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
-(2-羥基乙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6S
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3S
)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-N5
-(2-(吡啶-3-基)乙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6s
)-3-乙醯基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
*,3S
*)-N5
-((1R
,5S
,6s
)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (1R
,5S
,6s
)-6-((2R
*,3S
*)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-2-甲基-7-(甲基胺甲醯基)-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3-甲酸第三丁
酯； (R
)-3-氟-3-(2-((2S
,3S
)-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2S
,3S
)-2-(氟甲基)-N5
-(2-((R
)-3-氟哌啶-3-基)乙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3R
)-N7
,2-二甲基-3-苯基-N5
-(3-(哌啶-4-基)丙基)-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3R
)-N5
,N7
,2-三甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3R
)-N5
-乙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3R
)-N5
-環丙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3R
)-N5
-環丙基-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3R
)-N5
-環丙基-2-(羥基甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2R
,3R
)-N5
-((1R
,5S
,6r
)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S
,3R
)-N5
-(2-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺；以及 (2R
,3R
)-N5
-(2-羥基丙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺或其鹽。 在另一實施例中，化合物係選自 (2R,3S)-N5
-((1R,5S,6r)-3-氧雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-3-(3-(2-羥基乙氧基)苯基)-N7
,2-二甲基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-N5
-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-2-(氟甲基)-N5
-((1R,2R)-2-(羥基甲基)環丙基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反) 3,3-二氟-4-(2-2-(氟甲基)-7-(甲基胺甲醯基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5-甲醯胺基)乙基)哌啶-1-甲酸第三丁
酯； (2R,3S)-N5
-(2-((S*)-3,3-二氟哌啶-4-基)乙基)-N7
,2-二甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-N5
-(3-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)丙基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (2S,3S)-N5
-(2-((2r,5S)-5-胺基-1,3-二噁烷-2-基)乙基)-2-(氟甲基)-N7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺； (反)-N 5
-((1R
,5S
,6r
)-3,3-二氟雙環[3.1.0]己烷-6-基)-2-(氟甲基)-N 7
-甲基-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺；以及 (反)-2-(氟甲基)-N 7
-甲基-N5
-(1S
,2S
)-2-甲基環丙基)-3-苯基-2,3-二氫苯并呋喃-5,7-二甲醯胺 或其鹽。 在一個實施例中提供式(I)或(Ia)化合物，其中R1
為甲基，R2
為3-氧雜雙環[3.1.0]己基，R3
為苯基且R4
為-CH2
F。 在一個實施例中，式(I)化合物為
或其鹽。 在一個實施例中，式(I)化合物為
。 在本發明的第二態樣中，提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。 在本發明的第三態樣中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法中，詳言之指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的治療中。 在本發明的第四態樣中，提供一種治療有需要之個體中指明溴結構域抑制劑的疾病或病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 在本發明的第五態樣中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的藥劑。用途說明
式(I)化合物及其鹽為溴結構域抑制劑，且因此認為在治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況時具有可能效用。 咸信溴結構域抑制劑適用於治療與全身性或組織發炎、針對感染或低氧之發炎反應、細胞活化及增殖、脂質代謝、纖維化相關的多種疾病或病況及適用於預防及治療病毒感染。 溴結構域抑制劑可適用於治療多種急性或慢性自體免疫及/或發炎病況，諸如類風濕性關節炎、牛皮癬性關節炎、僵直性脊椎炎、骨關節炎、急性痛風、牛皮癬、全身性紅斑性狼瘡症、多發性硬化症、發炎性腸病(克羅恩氏病(Crohn's disease)及潰瘍性結腸炎)、哮喘、慢性阻塞性氣管疾病、肺炎、心肌炎、心包炎、肌炎、濕疹、皮炎(包括異位性皮炎)、禿頭症、白斑病、大皰性皮膚病、腎炎、脈管炎、高膽固醇血症、動脈粥樣硬化、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、休格連氏症候群(Sjögren's syndrome)、涎腺炎、視網膜中央靜脈阻塞、視網膜分支靜脈阻塞、歐文-加斯症候群(Irvine-Gass syndrome)(白內障後及手術後)、色素性視網膜炎、睫狀體扁平部炎、鳥槍彈樣視網膜脈絡膜病變、視網膜前膜、囊性黃斑水腫、網膜側毛細管擴張、牽拉性黃斑病變、玻璃體黃斑牽拉症候群、視網膜剝離、視神經視網膜炎、特發性黃斑水腫、視網膜炎、乾眼(乾眼症)、春季角膜結膜炎、異位性角膜結膜炎、葡萄膜炎(諸如前葡萄膜炎、全葡萄膜炎、後葡萄膜炎、葡萄膜炎相關黃斑水腫)、鞏膜炎、糖尿病性視網膜病變、糖尿病性黃斑水腫、年齡相關之黃斑萎縮、肝炎、胰臟炎、原發性膽汁性肝硬化、硬化性膽管炎、阿狄森氏病(Addison's disease)、垂體炎、甲狀腺炎、I型糖尿病、II型糖尿病、巨大細胞動脈炎、腎炎(包括狼瘡性腎炎)、器官受累之脈管炎(諸如絲球體腎炎)、脈管炎(包括巨大細胞動脈炎)、韋格納氏肉芽腫病(Wegener's granulomatosis)、結節性多動脈炎、白塞氏病(Behcet's disease)、川崎病(Kawasaki disease)、高安氏動脈炎(Takayasu's Arteritis)、壞疽性膿皮病、器官受累之脈管炎、移植器官之急性排斥反應以及全身性硬化症。 在一個實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為經由調節APO-A1介導之脂質代謝病症，諸如高膽固醇血症、動脈粥樣硬化或阿茲海默氏病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為呼吸道病症，諸如哮喘或慢性阻塞性氣管疾病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為全身性發炎性病症，諸如類風濕性關節炎、骨關節炎、急性痛風、牛皮癬、全身性紅斑狼瘡症、多發性硬化症或發炎性腸病(克羅恩氏病或潰瘍性結腸炎)。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為多發性硬化症。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為I型糖尿病。 在另一實施例中，急性或慢性自體免疫及/或發炎病況為類風濕性關節炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療抑鬱症。 溴結構域抑制劑可適用於治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況，諸如敗血症、急性敗血症、敗血症症候群、敗血性休克、內毒素血症、全身性發炎反應症候群(SIRS)、多器官功能障礙症候群、毒性休克症候群、急性肺損傷、ARDS(成人呼吸窘迫症候群)、急性腎衰竭、爆發性肝炎、燒傷、急性胰臟炎、手術後症候群、類肉瘤病、赫氏反應(Herxheimer reaction)、腦炎、脊髓炎、腦膜炎、瘧疾及與病毒感染(諸如流感、帶狀疱疹、帶狀疱疹、單純性疱疹及冠狀病毒)有關之SIRS。在一個實施例中，涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況為急性敗血症。 溴結構域抑制劑可適用於治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況，諸如心肌梗塞、腦血管缺血(中風)、急性冠狀動脈症候群、腎再灌注損傷、器官移植、冠狀動脈旁路移植、心肺旁路程序、肺、腎、肝、胃腸或周肢栓塞。 溴結構域抑制劑可適用於治療心血管疾病，諸如冠狀動脈疾病(例如心絞痛或心肌梗塞)、肺動脈高血壓、腦血管缺血(中風)、高血壓性心臟病、風濕性心臟病、心肌病、心房顫動、先天性心臟病、心內膜炎、主動脈動脈瘤或外周動脈疾病。 溴結構域抑制劑可適用於治療纖維化病況，諸如特發性肺纖維化、肺纖維化、囊腫性纖維化、進行性大規模纖維化、腎纖維化、肝纖維化、肝硬化、非酒精性脂肪變性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、手術後狹窄、瘢痕疙瘩形成、硬皮病(包括硬斑病及全身性硬化症)、心臟纖維化、心房纖維化、心內膜心肌纖維化、陳舊性心肌梗塞、關節纖維化、杜普伊特倫攣縮(Dupuytren's contracture)、縱隔病、骨髓纖維化、佩洛尼氏病(Peyronie's disease)腎源性全身性纖維化、腹膜後纖維化以及黏連性關節囊炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療病毒感染，諸如單純疱疹感染及再活化、唇疱疹、帶狀疱疹感染及再活化、水痘、帶狀皰行疹、人類乳頭狀瘤病毒(HPV)、人類免疫缺陷病毒(HIV)、子宮頸瘤形成、腺病毒感染(包括急性呼吸道疾病)、痘病毒感染(諸如牛痘或天花)，或非洲豬瘟病毒。在一個實施例中，病毒感染為皮膚或子宮頸上皮的HPV感染。在另一實施例中，病毒感染為潛在HIV感染。 溴結構域抑制劑可適用於治療多種骨骼病症，諸如骨質疏鬆症、骨質減少、骨關節炎及僵直性脊椎炎。 溴結構域抑制劑可適用於治療癌症，包括血液學癌症(諸如白血病、淋巴瘤及多發性骨髓瘤)、上皮細胞癌(包括肺、乳房或結腸癌)、中線癌瘤或間葉細胞、肝、腎或神經腫瘤。 溴結構域抑制劑可適用於治療一或多種選自以下之癌症：腦癌(神經膠質瘤)、神經膠母細胞瘤、潘納揚-佐納納症候群(Bannayan-Zonana syndrome)、考登病(Cowden disease)、萊爾米特-杜克洛病(Lhermitte-Duclos disease)、乳癌、發炎性乳癌、結腸直腸癌、威姆氏腫瘤(Wilm's tumor)、尤文氏肉瘤(Ewing's sarcoma)、橫紋肌肉瘤、室管膜瘤、神經管母細胞瘤、結腸癌、頭頸癌、腎癌、肺癌、肝癌、黑素瘤、鱗狀細胞癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、肉瘤癌、骨肉瘤、骨骼巨細胞瘤、甲狀腺癌、淋巴母細胞性T細胞白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病、毛細胞白血病、急性淋巴母細胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性嗜中性白細胞白血病、急性淋巴母細胞性T細胞白血病、漿細胞瘤、免疫母細胞性大細胞白血病、套細胞白血病、多發性骨髓瘤、巨核母細胞性白血病、急性巨核細胞性白血病、前髓細胞性白血病、混合譜系白血病、紅白血病、惡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkins lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母細胞性T細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、濾泡性淋巴瘤、神經母細胞瘤、膀胱癌、尿道上皮癌、外陰癌、子宮頸癌、子宮內膜癌、腎癌、間皮瘤、食道癌、唾液腺癌、肝細胞癌、胃癌、鼻咽癌、頰癌、口腔癌、GIST (胃腸基質腫瘤)、NUT-中線癌瘤及睪丸癌。 在一個實施例中，癌症為白血病，例如選自急性單核細胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、慢性淋巴細胞性白血病及混合譜系白血病(MLL)之白血病。在另一實施例中，癌症為NUT-中線癌瘤。在另一實施例中，癌症為多發性骨髓瘤。在另一實施例中，癌症為肺癌，諸如小細胞肺癌(SCLC)。在另一實施例中，癌症為神經母細胞瘤。在另一實施例中，癌症為伯基特氏淋巴瘤。在另一實施例中，癌症為子宮頸癌。在另一實施例中，癌症為食道癌。在另一實施例中，癌症為卵巢癌。在另一實施例中，癌症為乳癌。在另一實施例中，癌症為結腸直腸癌。在另一實施例中，癌症為前列腺癌。在另一實施例中，癌症為耐去勢性前列腺癌。 溴結構域抑制劑可適用於治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病，諸如敗血症、燒傷、胰臟炎、嚴重外傷、出血以及局部缺血。在此實施例中，溴結構域抑制劑將在診斷時投與，以降低SIRS發病率、休克發作、多器官功能障礙症候群(包括急性肺損傷、ARDS、急性腎、肝、心臟及胃腸損傷)之發作以及死亡率。在另一實施例中，在與敗血症、出血、大規模組織破壞、SIRS或MODS (多器官功能障礙症候群)之高風險相關之手術或其他程序之前投與溴結構域抑制劑。在特定實施例中，指明溴結構域抑制劑之疾病或病況為敗血症、敗血症症候群、敗血性休克及內毒素血症。在另一實施例中，溴結構域抑制劑經指示用於治療急性或慢性胰臟炎。在另一實施例中，溴結構域指示用於治療燒傷。 本發明因此提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於療法中。式(I)化合物或其醫藥學鹽可用於治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況。 本發明因此提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療急性或慢性自體免疫及/或發炎病況。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療類風濕性關節炎。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療心血管疾病。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療纖維化病況。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療病毒感染。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療骨骼病症。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療癌症。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病。 亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的藥劑。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療急性或慢性自體免疫及/或發炎病況的藥劑。在一個實施例中提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療類風濕性關節炎之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療與局部缺血再灌注損傷有關之病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療心血管疾病的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療纖維化病況的藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療病毒感染之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療癌症之藥劑。在另一實施例中，提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其用於製造用以治療與全身性發炎反應症候群有關之疾病的藥劑。 亦提供一種治療有需要之個體中指明溴結構域抑制劑的疾病或病況之方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中提供一種治療有需要個體之急性或慢性自體免疫及/或發炎病況之方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中提供治療有需要個體之類風濕性關節炎的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要之個體中涉及對細菌、病毒、真菌、寄生物或其毒素感染之發炎反應的疾病或病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要之個體中與局部缺血再灌注損傷有關之病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要個體之心血管疾病的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之纖維化病況的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中提供一種治療有需要個體之病毒感染的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之癌症的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在另一實施例中，提供一種治療有需要個體之與全身性發炎反應症候群有關之疾病的方法，其包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 適當地，有需要之個體為哺乳動物，尤其人類。 本發明進一步提供一種抑制含有溴結構域之蛋白質的方法，其包含使含有溴結構域之蛋白質與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽接觸。 如本文所用，提及「治療」特定疾病或病況包括防止或預防此類疾病或病況。醫藥組合物 / 投藥途徑 / 劑量 組合物
儘管有可能為了用於療法中，式(I)化合物以及其醫藥學上可接受之鹽可以化學原料形式投與，但通常將活性成分以醫藥組合物形式提供。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽在投與患者之前通常(但非必需)將調配成醫藥組合物。因此，在另一態樣中，提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑。式(I)之化合物及醫藥學上可接受之鹽如上文所述。賦形劑在與組合物之其他成分相容且對其接受者無害之意義上必須為「可接受的」。根據本發明之另一態樣，亦提供一種製備醫藥組合物之方法，其包括將式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與一或多種醫藥學上可接受之賦形劑混合。醫藥組合物可用於治療本文所述之病況中之任一者。 在另一態樣中，本發明針對用於治療或預防指明溴結構域抑制劑之疾病或病況的醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 由於式(I)化合物欲用於醫藥組合物中，故容易理解，其各自較佳以實質上純形式提供，例如至少85%純，尤其至少98%純(以重量計之重量百分比)。 醫藥組合物可以每單位劑量含有預定量之活性成分的單位劑型提供。較佳單位劑量組合物為含有日劑量或次劑量或其適當分率之活性成分的彼等組合物。因此此類單位劑量可一天投與超過一次。較佳單位劑型組合物為含有如上文所述之日劑量或次劑量(一天投與超過一次)或其適當分率之活性成分的彼等組合物。 醫藥組合物可適用於藉由任何適當途徑投與，例如藉由經口(包括經頰或舌下)、經直腸、吸入、鼻內、局部(包括經頰、舌下或經皮)、經眼(包括局部、眼內、結膜下、鞏膜上、眼球筋膜下)、經陰道或非經腸(包括皮下、肌肉內、靜脈內或皮內)途徑。此類組合物可藉由藥學技術中已知之任何方法製備，例如藉由使活性成分與載劑或賦形劑結合。 本發明之醫藥組合物可以散裝形式製備及包裝，其中可萃取安全且有效之量的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，接著諸如與粉末或糖漿一起給予患者。或者，本發明之醫藥組合物可製備及包裝成單位劑型，其中各物理離散單位含有式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。當製備成單位劑型時，本發明之醫藥組合物通常可含有例如0.25 mg至1 g，或0.5 mg至500 mg，或1 mg至100 mg式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 本發明之醫藥組合物通常含有一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之賦形劑或賦形劑通常將調配成適於藉由所需投與途徑投與患者之劑型。舉例而言，劑型包括適於以下之彼等劑型：(1)經口投予，錠劑、膠囊、囊片、丸劑、糖衣錠、粉末、糖漿、酏劑、懸浮液、溶液、乳液、藥囊以及扁膠劑；(2)非經腸投與，諸如無菌溶液、懸浮液、及用於復水之粉末；(3)經皮投與，諸如經皮貼片；(4)直腸投與，諸如栓劑；(5)吸入，諸如氣霧劑、溶液及乾燥粉末；以及(6)局部投與，諸如乳霜、軟膏、乳液、溶液、糊狀物、噴霧、發泡體及凝膠。 適合醫藥學上可接受之賦形劑將視所選特定劑型而變化。另外，可針對可用於組合物中之特定功能來選擇適合醫藥學上可接受之賦形劑。舉例而言，可針對促進製造均勻劑型之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對促進製造穩定劑型之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對在投與個體之後促進式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽自一個器官或身體部分攜帶或輸送至另一器官或身體部分的能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。可針對提高個體順應性之能力選擇特定醫藥學上可接受之賦形劑。 適合醫藥學上可接受之賦形劑包括以下類型之賦形劑：載劑、稀釋劑、填充劑、黏合劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、成粒劑、塗佈劑、濕潤劑、溶劑、共溶劑、懸浮劑、乳化劑、甜味劑、調味劑、遮味劑、著色劑、防結塊劑、保濕劑、螯合劑、塑化劑、黏度提高劑、抗氧化劑、防腐劑、穩定劑、界面活性劑及緩衝劑。熟習此項技術者應瞭解視調配物中存在多少賦形劑及調配物中存在何種其他賦形劑而定，特定醫藥學上可接受之賦形劑可起超過一種功能且可起替代功能。 熟練技術人員具有的所屬領域之知識及技能使其能夠選擇適用於本發明之量的適合醫藥學上可接受之賦形劑。另外，熟習此項技術者可獲得描述醫藥學上可接受之賦形劑且可適用於選擇適合醫藥學上可接受之賦形劑的許多來源。實例包括Remington ' s Pharmaceutical Sciences ( Mack Publishing Company )
、The Handbook of Pharmaceutical Additives ( Gower Publishing Limited )
及The Handbook of Pharmaceutical Excipients ( the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press )
。 本發明之醫藥組合物使用熟習此項技術者已知之技術及方法製備。所屬領域中常用的一些方法描述於Remington ' s Pharmaceutical Sciences ( Mack Publishing Company )
中。 因此，在另一態樣中，本發明針對製備包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑的醫藥組合物之方法，其包含混合該等成分。可例如藉由在環境溫度及常壓下混合來製備包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物。 在一個實施例中，醫藥組合物適於非經腸投與，尤其靜脈內投與。 在一個實施例中，醫藥組合物經調試以經口投與。 在一個實施例中，醫藥組合物經調試以局部投與。 適於非經腸投與之醫藥組合物包括水性及非水性無菌注射溶液(其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及使組合物與預期接受者血液等張之溶質)及水性及非水性無菌懸浮液(其可包括懸浮劑及增稠劑)。組合物可於單位劑量或多劑量容器(例如密封安瓿及小瓶)中提供，且可在冷凍乾燥(凍乾)條件下儲存，其僅需要在臨使用前添加無菌液體載劑(例如注射用水)。可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備即用型注射溶液及懸浮液。 經調試以經口投與之醫藥組合物可呈現為離散單元，諸如膠囊或錠劑；粉末或顆粒；水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；可食用發泡體或乳油甜點；或水包油液體乳液或油包水液體乳液。 舉例而言，關於以錠劑或膠囊形式經口投與，活性藥物組分可與口服、無毒醫藥學上可接受之惰性載劑，諸如乙醇、丙三醇、水及其類似物組合。適於併入錠劑或膠囊中之粉末可藉由將化合物減小為適合之精細尺寸(例如藉由微米尺寸化)且與類似製備之醫藥載劑(諸如可食用碳水化合物，例如澱粉或甘露糖醇)混合來製備。亦可存在調味劑、防腐劑、分散劑及著色劑。 膠囊可藉由製備上述粉末混合物且填充成形之明膠鞘製造。可在填充操作之前向粉末混合物中中添加滑動劑及潤滑劑(諸如膠態二氧化矽、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇)。亦可添加崩解劑或增溶劑(諸如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉)以改良攝取膠囊時之藥物可用性。 此外，當需要或必要時，適合黏合劑、滑動劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、崩解劑及著色劑亦可併入混合物中。適合黏合劑包括澱粉、明膠、天然糖(諸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味劑、天然及合成膠(諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉)、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟及其類似物。用於此等劑型之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類似物。錠劑例如藉由製備粉末混合物，粒化或摻雜，添加潤滑劑及崩解劑及壓製成錠劑而調配。粉末混合物藉由混合化合物(適當搗碎)與上述稀釋劑或鹼，且視情況與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、褐藻酸鹽、明膠或聚乙烯吡咯啶酮)、溶液阻滯劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如四級鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸二鈣)製備。粉末混合物可藉由用黏合劑(諸如糊漿、澱粉漿料、阿卡迪亞膠漿(acadia mucilage)或纖維素或聚合材料之溶液)潤濕且使其通過篩網粒化。作為粒化之替代方案，粉末混合物可穿過壓錠機且結果為不完美地形成之毛坯破碎成顆粒。顆粒可藉助於添加硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石或礦物油經潤滑以防止黏著至成錠模。潤滑之混合物隨後壓縮為錠劑。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可與自由流動之惰性載劑組合且不經粒化或摻雜步驟直接壓縮成錠劑。可提供由蟲膠之密封塗層組成之透明或不透明保護塗層、糖或聚合材料之塗層及蠟之拋光塗層。可將染料添加至此等包衣中以區分不同單位劑量。 口服流體，諸如溶液、糖漿及酏劑可以單位劑型製備以使得給定量含有預定量之化合物。糖漿可藉由將化合物溶解於適當調味之水溶液中製備，而酏劑係經由使用無毒醇性媒劑製備。懸浮液可藉由將化合物分散於無毒媒劑中調配。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇及聚氧乙烯山梨糖醇醚)、防腐劑、風味添加劑(諸如薄荷油)或天然甜味劑或糖精或其他人工甜味劑及其類似物。 用於經口投與之組合物可經設計以提供改良釋放概況以使得可維持或者控制治療活性劑之釋放。 適當時，用於經口投與之劑量單位組合物可經微膠囊化。組合物可例如藉由將粒狀材料包覆或包埋於聚合物、蠟或其類似物中製備以延長或維持釋放。 對於適於及/或調適於經口投與之組合物，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可呈現例如藉由微米尺寸化獲得的粒徑減小形式。尺寸減小(例如微米尺寸化)之化合物或鹽之較佳粒徑由約0.5至約10微米之D50
值(例如使用雷射繞射量測)定義。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可以脂質體傳遞系統形式投與，諸如小單層囊泡、大單層囊泡及多層囊泡。脂質體可由多種磷脂，諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼形成。 適於局部投與之醫藥組合物可調配成軟膏、乳膏、懸浮液、乳液、洗劑、粉末、溶液、糊劑、凝膠、發泡體、噴霧劑、氣溶膠或油。此類醫藥組合物可包括習知添加劑，其包括(但不限於)防腐劑、輔助藥物滲透之溶劑、共溶劑、潤膚劑、推進劑、黏度調節劑(膠凝劑)、界面活性劑及載劑。在一個實施例中，提供一種適用於局部投與之醫藥組合物，其包含以組合物之重量計介於0.01-10%之間或介於0.01-1%之間式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 為治療眼睛或其他外部組織(例如口腔及皮膚)，組合物較佳以局部軟膏、乳膏、凝膠、噴霧或泡沫形式施用。當調配為軟膏時，活性成分可與石蠟或水混溶性軟膏基質一起使用。或者，活性成分可藉由水包油乳膏基劑或油包水基劑調配成乳膏。 適用於局部投與至眼睛之醫藥調配物包括滴眼劑，其中活性成分溶解或懸浮於適合載劑、尤其水性溶劑中。投與眼睛之組合物將具有經眼相容pH及重量莫耳滲透濃度。一或多種經眼可接受pH調節劑及/或緩衝劑可包括於本發明之組合物中，包括酸，諸如乙酸、硼酸、檸檬酸、乳酸、磷酸及鹽酸；鹼，諸如氫氧化鈉、磷酸鈉、硼酸鈉、檸檬酸鈉、乙酸鈉及乳酸鈉；及緩衝液，諸如檸檬酸鹽/右旋糖、碳酸氫鈉及氯化銨。此類酸、鹼及緩衝液可以將組合物之pH維持於經眼可接受範圍內所需的量包括。一或多種經眼可接受鹽可以足以使組合物之重量莫耳滲透濃度進入經眼可接受範圍內之量包括於組合物中。此類鹽包括具有鈉、鉀或銨陽離子及氯化物、檸檬酸根、抗壞血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氫根、硫酸根、硫代硫酸根或亞硫酸氫根陰離子之彼等。 經眼傳遞裝置可經設計而以多個界定釋放速率及持續劑量動力學及滲透率控制釋放一或多種治療劑。控制釋放可藉由併入生物可降解/生物可蝕性聚合物(例如聚(乙烯乙烯基)乙酸酯(EVA)、超水解PVA)、羥烷基纖維素(HPC)、甲基纖維素(MC)、羥丙基甲基纖維素(HPMC)、聚己內酯、聚(乙醇酸)、聚(乳酸)、聚酸酐之不同選項及特性之聚合基質、聚合物分子量、聚合物結晶性、共聚物比率、處理條件、表面修整、幾何形狀、賦形劑添加及將增強藥物擴散、沖蝕、溶解及滲透之聚合塗層之設計獲得。 經眼傳遞之醫藥組合物亦包括原位可膠凝水性組合物。此類組合物包含以當與眼睛或淚液流體接觸時有效促進膠凝之濃度之膠凝劑。適合之膠凝劑包括(但不限於)熱固性聚合物。如本文所用之術語「原位可膠凝」不僅包括當與眼睛或淚液流體接觸時形成凝膠之低黏度液體，且亦包括當投與至眼睛時展現實質上增加之黏度或凝膠硬度之更黏滯液體，諸如半流體及搖變凝膠。參看例如Ludwig( 2005 ) Adv . Drug Deliv . Rev . 3 ; 57 : 1595 - 639
，出於其用於經眼藥物傳遞之聚合物實例之教示內容之目的而以引用的方式併入本文中。 用於經鼻或吸入投與之劑型可便利地調配為氣溶膠、溶液、懸浮液凝膠或乾粉。 對於適於及/或調適於吸入投與之組合物，較佳地，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽呈現例如藉由微米尺寸化獲得的粒徑減小形式。尺寸減小(例如微米尺寸化)之化合物或鹽之較佳粒徑由約0.5至約10微米之D50
值(例如使用雷射繞射量測)定義。 例如用於吸入投與之氣霧劑調配物可包含活性物質於醫藥學上可接受之水性或非水性溶劑中的溶液或精細懸浮液。氣霧劑調配物可以單次或多次劑量之量的無菌形式存在於密封容器中，其可呈濾芯或再填充形式以供與霧化裝置或吸入器一起使用。或者，密封容器可為整體施配裝置，諸如單次劑量經鼻吸入器或裝配有定量閥之氣霧劑施配器(定劑量吸入器)，其打算在容器內容物排空之後棄置。 其中劑型包含氣霧劑施配器，其較佳含有適合負壓推進劑(諸如壓縮空氣、二氧化碳)或有機推進劑(諸如氫氟碳(HFC))。適合HFC推進劑包括1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷及1,1,1,2-四氟乙烷。氣霧劑劑型亦可採取霧化泵形式。加壓氣霧劑可含有活性化合物的溶液或懸浮液。此可能需要併入額外賦形劑(例如共溶劑)及/或界面活性劑來提高分散特徵及懸浮液調配物的均質性。溶液調配物亦可需要添加共溶劑，諸如乙醇。 對於適合及/或調適於吸入投與之醫藥組合物，醫藥組合物可為可吸入型乾燥粉末組合物。此類組合物可包含粉末基質(諸如乳糖、葡萄糖、海藻糖、甘露糖醇或澱粉)、式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽(較佳粒徑減小形式，例如微米尺寸化形式)，及視情況存在之效能改良劑，諸如L-白胺酸或另一胺基酸及/或硬脂酸之金屬鹽，諸如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣。較佳地，乾燥粉末可吸入型組合物包含乳糖(例如單水合乳糖)與式(I)化合物或其鹽之乾燥粉末摻合物。此類組合物可使用適合裝置(DISKUS®裝置，由GlaxoSmithKline出售，其例如描述於GB 2242134 A中)投與患者。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可調配成用於自流體施配器(例如具有使用者向流體施配器之泵機制施加力時施配定劑量流體調配物的施配噴嘴或施配孔口之流體施配器)傳遞之流體調配物。此類流體施配器一般具有多個定劑量流體調配物之儲集器，劑量可在依序泵致動時施配。施配噴嘴或孔口可配置成插入至使用者鼻孔中用於向鼻腔中噴霧施配流體調配物。上述類型之流體施配器描述及繪示於國際專利申請案WO-A-2005/044354中。 治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽將取決於許多因素，包括(例如)患者之年齡及體重、需要治療之確切病況及其嚴重程度、調配物性質及投與途徑，且最終將由主治醫師或獸醫酌情處理。在醫藥組合物中，經口或非經腸投與之各劑量單元較佳含有0.01 mg至3000 mg，更佳0.5 mg至1000 mg以游離鹼計算的式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。用於經鼻或吸入投與之各劑量單元較佳含有0.001 mg至50 mg，更佳0.01 mg至5 mg以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 醫藥學上可接受之式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可以例如0.01 mg至3000 mg/天、0.5 mg至1000 mg/天或100 mg至2500 mg/天以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的經口或非經腸劑量，或0.001 mg至50 mg/天或0.01 mg至5 mg/天以游離鹼計之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的經鼻或吸入劑量的日劑量(用於成人患者)投與。此量可以每天之單一劑量或更通常以每天之多個(諸如兩個、三個、四個、五個或六個)亞劑量給予以使得總日劑量相同。其鹽之有效量可測定為式(I)化合物本身之有效量之一定比例。 式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽可單獨使用或與其他治療劑組合使用。本發明之組合療法因此包含投與至少一種式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及使用至少一種其他醫藥活性劑。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽及其他治療活性劑可在單個醫藥組合物中一起投與或分別投與，且當分別投與時，此可同時或以任何順序依序進行。將對式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽及其他治療活性劑的量及相對投與時序進行選擇以實現所要組合治療作用。因此，在另一態樣中，提供包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及一或多種其他治療活性劑的組合。 因此，在一個態樣中，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及根據本發明的包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的醫藥組合物可與一或多種其他治療劑組合使用或包括一或多種其他治療劑，該等治療劑選自抗生素、抗病毒劑、糖皮質類固醇、蕈毒鹼拮抗劑、β-2促效劑及維生素D3類似物。在另一實施例中，式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽可與適於治療癌症的另一治療劑組合使用。此類另一治療劑的實例描述於V.T. Devita及S. Hellman (編)之Cancer Principles and Practice of Oncology, 第6版 (2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers中。基於藥物及所涉及的癌症之特殊特徵，一般技術者將能夠辨別有用之試劑的組合。與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽組合使用的其他治療劑包括(但不限於)抗微管劑(諸如雙萜類及長春花生物鹼)；鉑配合錯合物；烷基化劑(諸如氮芥、氧氮磷環、烷基磺酸酯、亞硝基脲以及三氮烯)；抗生素試劑(諸如安血定製劑、放線菌素以及博來黴素(bleomycin))；拓樸異構酶II抑制劑(諸如表鬼臼毒素)；抗代謝物(諸如嘌呤及嘧啶類似物及抗葉酸化合物)；拓樸異構酶I抑制劑(諸如喜樹鹼；激素及激素類似物)；信號轉導路徑抑制劑(諸如酪胺酸受體抑制劑)；非受體酪胺酸激酶血管生成抑制劑；免疫治療劑(諸如PD-1抑制劑，包括尼沃單抗(nivolumab)及派立珠單抗(pembrolizumab)，及CTLA-4抑制劑，包括伊派利單抗(ipilimumab))；促凋亡劑；表觀遺傳或轉錄調節劑(諸如組蛋白脫乙醯基酶抑制劑)以及細胞週期信號傳導抑制劑。 應瞭解當式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與通常藉由吸入、靜脈內、經口或鼻內途徑投與的其他治療劑組合投與時，所得醫藥組合物可藉由相同途徑投與。或者，組合物之個別組分可藉由不同途徑投與。 本發明之一個實施例涵蓋包含一種或兩種其他治療劑的組合。 所屬領域的技術人員應明確，適當時，其他治療劑可以鹽形式，例如鹼金屬或胺鹽或酸加成鹽；或前藥；或酯，例如低碳烷基酯；或溶劑合物，例如水合物形式使用，以使治療劑之活性及/或穩定性及/或物理特徵(諸如溶解度)最佳化。亦顯而易知，適當時，治療劑可以光學純形式使用。 上文提及之組合可適宜地呈現以便以醫藥組合物形式使用，且因此包含如上文所定義之組合以及醫藥學上可接受之賦形劑之醫藥組合物表示本發明之另一態樣。合成途徑
本發明化合物可藉由多種方法，包括標準化學方法製得。除非另外指明，否則任何先前定義之變量將繼續具有先前定義之含義。說明性通用合成方法在以下流程中陳述，且容易適於製備其他本發明化合物。特定本發明化合物在實例部分中製備。 式(I)化合物可如下文之任何流程中所述製備。流程 1 ： 
對於上文流程1中所示之步驟而言，以下反應條件可用於獲取式(I)化合物，其中R4
為甲基： 步驟1：為烷基化且可使用式R3
-CH=CH-CH2
Hal之苯烯丙基鹵化物(諸如苯烯丙基氯化物)，在適合鹼(諸如碳酸鉀)及適合催化劑(諸如碘化鉀)存在下，在適合溶劑(諸如丙酮)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟2：為克萊森重排(Claisen rearrangement)，其可在適合高沸點溶劑(諸如N,N-二甲基苯胺)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟3：為醯胺形成且可使用適當一級胺R1
NH2
(諸如甲胺)，在適合溶劑(諸如THF與水之混合物)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為環化且可在適合酸(諸如三氟乙酸)中，以適合溫度(諸如回流溫度)進行。在此等條件中，產物通常以順及反異構體之混合物(諸如順及反異構體之1:1混合物)獲得。 步驟5：為溴化，其可使用適合溴化劑(諸如NBS)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟6：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如八羰基二鈷)，在適合式R2
NH2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)，在適合三級胺(諸如DMAP)存在下，在適合溶劑(諸如2-甲基四氫呋喃)中，在適合溫度(諸如介於100℃與120℃之間)下，在微波照射下進行。 步驟7：為異構體之視情況分離，其可使用適當層析系統(固相或液相)進行。此步驟可作為式(I)化合物合成之最後步驟進行，但亦可在步驟4或步驟5之後進行。在此情形中，順及反異構體將分別進行溴化及/或胺基羰基化。或者，此步驟可以對掌性方式進行。 同樣應理解，來自步驟4至6之產物可藉由熟習此項技術者已知的方法分離，諸如藉由在對掌性管柱上藉由層析法純化成單個對映異構體。在此情形中，隨後中間物及實例均使用與外消旋物相同之程序以單一對映異構體形式獲得。流程 2 ： 
對於上文方案2中所示之步驟而言，可利用以下反應條件獲取式(1)化合物： 步驟1：為烷基化且可使用式R3
-CH=CH-CH2
Hal之苯烯丙基鹵化物(諸如苯烯丙基氯化物)，在適合鹼(諸如碳酸鉀)及適合催化劑(諸如碘化鉀)存在下，在適合溶劑(諸如丙酮)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟2：為克萊森重排，其可在適合高沸點溶劑(諸如N,N-二甲基苯胺)中，在適合溫度(諸如回流溫度)下進行。 步驟3：為醯胺形成且可使用適當一級胺R1
NH2
(諸如甲胺)，在適合溶劑(諸如THF與水之混合物)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為環氧化且可使用適當氧化劑(諸如m-CPBA)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。在此等條件中，產物通常以非對映異構體之混合物，諸如非對映異構體之1:1混合物形式獲得。或者，此步驟可以對掌性方式進行。 步驟5：為經環氧化物開環環化隨後苯甲基位置之差向異構化，產生更熱力學穩定之反式異構體以等於或高於順式異構體之比例存在的異構體混合物。反式/順式異構體之此比率可大於95/5。此反應可使用適當鹼(諸如氫氧化鉀)，在適合溶劑(諸如DMSO與水之混合物)中，在適合溫度(諸如0℃)下進行。 步驟6：為羰基化反應。此可使用適當一氧化碳來源(諸如一氧化碳氣體)，在適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))、適合配位體(諸如氧雜蒽膦(Xantphos))、適當三級胺(諸如三乙胺)存在下，在適當溶劑(諸如DMF與醇RxOH(其中Rx為C1 - 6
烷基)之混合物(以諸如2:1之適合比率))中，在諸如70℃之適當溫度下進行。 步驟7：為皂化，其可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在適當溶劑(諸如醇(諸如乙醇)與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟8：為羥基經氟原子取代。此可使用適當氟化劑(諸如脫氧加氟物)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如介於0℃與40℃之間)下進行。 步驟9：為1)由鹵素(諸如碘)取代羥基，其可使用適當鹵素來源(諸如碘)，在三取代之膦(諸如三苯膦)及弱鹼(諸如咪唑)存在下，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行；2)磺酸酯(諸如甲基磺酸酯)之形成。此可使用適當磺醯化劑來源(諸如甲烷磺醯氯)，在三級胺(諸如三乙胺)存在下，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟10：為還原。此可使用適當還原劑(諸如硼氫化鋰(其中X為RSO2
O-，其中X為C1 - 6
烷基))，在適合溶劑(諸如THF)中，在適合溫度(諸如介於0℃與室溫之間)下進行。其亦可使用適當氫來源(諸如氫氣)，在適當催化劑(諸如鈀/炭)及足夠鹼(諸如三烷基胺(諸如三乙胺))存在下，在適當溶劑(諸如醇(諸如甲醇))中，在適當溫度(諸如室溫)下進行(其中X為鹵素，諸如碘)。 步驟11：為醯胺形成，其可使用適當活化劑(諸如HATU)，在足夠鹼(諸如三烷基胺(例如三乙胺或二異丙基乙胺)或吡啶)存在下，且使用適當一級胺R2
NH2
，在適當溶劑(諸如二氯甲烷或DMF)中，在足夠溫度(諸如室溫)下進行。 步驟12：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如八羰基二鈷)，在適合式R2
NH2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)，在適合三級胺(諸如DMAP)存在下，在適合溶劑(諸如2-甲基四氫呋喃)中，在適合溫度(諸如介於100℃與120℃之間)下，在微波照射下進行。 步驟13：為羥基經氟原子取代。此可使用適當氟化劑(諸如全氟-1-丁烷磺醯氟及三氫氟化三乙胺)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，使用適合鹼(諸如DIPEA)且在適合溫度(諸如室溫)下進行。 步驟14：為胺基羰基化且可使用適當一氧化碳來源(諸如CO(g))，在適合式R2
NH2
之一級胺存在下，使用適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))及適合配位體(諸如4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃)，在適合胺(諸如2,6,二甲基吡啶)存在下，在適合溶劑(諸如1,4,二噁烷)中，在適合溫度(諸如介於80℃與100℃之間)下，在介於1巴與2巴之間的壓力下進行。 應理解自步驟11或12獲得之化合物在必要時可經進一步改質。詳言之，可能需要自R2
中存在的胺移除保護基，諸如胺基甲酸第三丁酯保護基。此可藉由使用適當強酸(諸如三氟乙酸)，在適合溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適合溫度(諸如室溫)下實現。可能亦需要脫除R7
取代基之保護基(諸如苯甲氧基衍生物)來產生相應酚類。此可例如藉由使用氫來源(諸如氫氣)，在足夠催化劑(諸如鈀/碳)存在下，在適當溶劑(諸如醇，例如甲醇)中，在適當溫度(諸如室溫)下實現。 應瞭解，自步驟5開始獲得之全部衍生物均為外消旋的且可藉由熟習此項技術者已知的技術(諸如藉由在對掌性管柱上層析純化)分離成其兩種對映異構體。流程 3 ： 
對於上文方案3中所示之步驟而言，可利用以下反應條件獲取式(I)化合物： 步驟1：為烷基化且可使用適當烷基化劑(諸如炔丙基溴)，使用適當鹼(諸如碳酸鉀)，在足夠溶劑(諸如DMF)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟2：為環化且可使用適當催化劑(諸如六氟銻酸(乙腈)-[(2-聯苯基)-二-第三丁基膦]金(I))，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟3：為皂化且可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在足夠溶劑(諸如THF、甲醇與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟4：為醯胺形成。此可藉由醯化劑(諸如醯基氯化物)與適當胺R1
NH2
反應進行。醯基氯化物可由相應酸，使用適當氯來源(諸如乙二醯氯)，在催化量之DMF存在下，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下製備。酸氯化物及胺R1
NH2
可在適當三級胺(諸如DIPEA)存在下，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在適當溫度(諸如室溫)下反應。 步驟5：為羰基化。此可使用適當一氧化碳來源(諸如一氧化碳氣體)，在適當醇RxOH(其中Rx為C1 - 6
烷基)、適當催化劑(諸如乙酸鈀(II))、適當配位體(諸如氧雜蒽膦)、適當三級胺(諸如三乙胺)存在下，在足夠溶劑(諸如DMF)中，及在足夠溫度(諸如70℃)下進行。 步驟6：為溴化。此可使用適當溴來源(諸如二溴)，在足夠溶劑(諸如二氯甲烷)中，在足夠溫度(諸如室溫與回流溫度之間)下進行。 步驟7：為芳基-芳基偶合。此可使用適當酸或酯R3
PhB(ORy)2
(Ry為H或烷基)(諸如(3-(苯甲氧基)苯基)酸)，在足夠催化劑(諸如乙酸鈀(II))、足夠配位體(諸如二((3S,5S,7S)-金剛烷-1-基)(丁基)膦)及適當鹼(諸如碳酸鉀)存在下，在足夠溶劑(諸如THF)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟8：為氫化，其可使用足夠氫來源(諸如二氫氣體)，在適當壓力(諸如70巴)下，在足夠催化劑(諸如鈀/炭)存在下，在適當溫度(諸如70℃)下，在足夠溶劑(諸如MeOH)中進行。 步驟9：為差向異構化步驟且可在適當鹼(諸如DBU)存在下，在適當溶劑(諸如CH3
CN)中且在足夠溫度(諸如100℃)下進行。 步驟10：為皂化，其可使用適當氫氧化物鹽(諸如氫氧化鈉)，在適當溶劑(諸如醇(諸如乙醇)與水之混合物)中，在適當溫度(諸如室溫)下進行。 步驟11：為醯胺形成，其可使用適當活化劑(諸如HATU)，在足夠鹼(諸如三烷基胺(例如三乙胺或二異丙基乙胺)或吡啶)存在下，且使用適當一級胺R2
NH2
，在適當溶劑(諸如二氯甲烷或DMF)中，在足夠溫度(諸如室溫)下進行。實例 通用 方法 總體實驗細節
全部溫度均以℃為單位。 如本文所用，此等製程、流程及實例中使用之符號及定則符合當代科學文獻中使用之彼等，例如Journal of the American Chemical Society
。除非另外指出，否則所有起始物質均獲自商業供應商且未經進一步純化即使用。特定言之，以下縮寫可用於實例及整個說明書中：縮寫
AcOH 乙酸 BBr3
三溴化硼 BOC/Boc 第三丁氧羰基 Boc2
O 二碳酸二第三丁酯 BuLi 丁基鋰 Cs2
CO3
碳酸銫 CHCl3
氯仿 Cobalt carbonyl 八羰基二鈷 CV 管柱體積 DMSO- d6
氘化二甲亞碸 DCM 二氯甲烷 DIAD 偶氮二甲酸二異丙酯 DIBAL-H 氫化二異丁基鋁 DIPEA 二異丙基乙胺 DMAP 4-二甲胺基吡啶 DMF 二甲基甲醯胺 DMSO 二甲亞碸 DMSO-d6
氘化二甲亞碸 DPPA 疊氮磷酸二苯酯 dppb 1,4-雙(二苯膦基)丁烷 EDC 1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳化二亞胺 Et3
N 三乙胺 Et2
O 乙醚 EtOAc 乙酸乙酯 EtOH 乙醇 h 小時 HATU 六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲 HCl 鹽酸 HCO2
H 甲酸 IPA 異丙醇 Isolera Biotage急驟純化系統 KCN 氰化鉀 K2
CO3
碳酸鉀 KI 碘化鉀 KOH 氫氧化鉀 LCMS 液相層析-質譜法 LiBH4
硼氫化鋰 LiOH 氫氧化鋰 M 莫耳(濃度) mCPBA 間氯過氧苯甲酸 MDAP 質量定向自動製備 MeCN 乙腈 MeI 碘甲烷 MeOH 甲醇 2-MeTHF 2-甲基四氫呋喃 MgSO4
硫酸鎂 min 分鐘 MsCl 甲磺醯氯 MTBE 甲基第三丁基醚 N 標準(濃度) N2
氮氣 Na2
CO3
碳酸鈉 NaI 碘化鈉 NaH 氫化鈉 NaOH 氫氧化鈉 Na(OAc)3
BH 三乙醯氧基硼氫化鈉 Na2
SO4
硫酸鈉 NBS N-溴丁二醯亞胺 NEt3
三乙胺 NMP N-甲基-2-吡咯啶酮 NUT 睾丸核蛋白 Pd/C 鈀/碳 PPh3
三苯膦 Ph3
PO 三苯基氧膦 RBF 圓底燒瓶 Rt 滯留時間 rt 室溫 sat 飽和 SCX Isolute強陽離子交換吸附劑SPE SiO2
二氧化矽 SNAP Biotage (二氧化矽)急驟層析濾芯 SP4 Biotage急驟純化系統 SPE 固相萃取 TBME 第三丁基甲基醚 Tf2
O 三氟甲烷磺酸酐 TFA 三氟乙酸 THF 四氫呋喃 TMSCl/TMS-Cl 氯化三甲基矽烷 TLC 薄層層析法 Ts 甲苯磺醯基 UPLC 超高效液相層析法 XantPhos 1,1'-(9,9-二甲基-9H-二苯并哌喃-4,5-二基)雙[1,1-二苯基膦] 以下化合物之名稱已使用化合物命名程式「ACD Name Pro 6.02」或使用ChemDraw Ultra 12.0之命名功能獲得。LCMS 方法 甲酸法 LC 條件
在Acquity UPLC CSH C18管柱(50 mm × 2.1 mm，i.d. 1.7 µm裝填直徑)上在40℃下進行UPLC分析。 所用溶劑為： A=甲酸於水中之0.1 v/v%溶液 B=甲酸於乙腈中之0.1 v/v%溶液 採用之梯度為：