TW201625313A - 新穎麩胺酸衍生物及其用途 - Google Patents

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Yasushi Yoneta
Keiko Sekine
Setsuko Niitsuma
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Nippon Kayaku Kk
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Abstract

本發明中發現：藉由在製作γ-麩胺醯基化藥劑之前驅藥化中，介隔適當之芳香族醯胺化連接子，而即便於接近生理環境之條件下亦穩定，被GGT所識別，而非常迅速地釋放藥理活性型藥劑，從而達成本發明。即，鍵結有γ-麩胺醯基芳香族醯胺之藥劑於GGT高度表現之組織中迅速地釋放藥理活性型藥劑，而可成為治療效果較高之藥劑。

Description

新穎麩胺酸衍生物及其用途
本發明係一種於標的部位酶選擇性地活化之新穎化合物、其用途，該化合物係新穎麩胺酸衍生物。更詳細而言，係關於一種新穎麩胺酸衍生物及其用途，該新穎麩胺酸衍生物係利用γ-麩胺醯基轉移酶(GGT，E.C.2.3.2.2)而活化之前驅藥。
前驅藥係於活體內代謝後變為活性型藥劑者。作為使藥劑成為前驅藥之目的，可列舉：穩定性之改善、溶解性之改善、吸收性之改善、副作用之減輕、作用時間之改善(作用之持續化)、特定部位之作用表現等。迄今為止，作為前驅藥而開發有若干種藥劑，作為針對各種疾病之治療用醫藥品而於臨床上使用。
癌症之化學療法中所使用之抗癌劑在多數情況下不僅對癌細胞，而且對正常細胞亦顯示細胞增殖抑制作用，該情況所引起之副作用成為問題。因此，若可使抗癌劑選擇性地作用於癌細胞，則可提供副作用減輕之抗癌劑。因此，若可使抗癌劑成為前驅藥並於腫瘤組織等標的部位選擇性地活化，則可期待副作用減輕，同時大幅度提昇治療效果。
作為於標的部位選擇性地轉化為活性化合物之方法，考慮利用在標的組織高度表現之酶的方法。作為利用標的部位之酶特異性反應的藥劑之前驅藥化之方法，已知有使自裂解型連接子介於酶識別部位與藥劑之間的方法(非專利文獻1)。其係藉由酶特異性反應而使酶識 別部位裂解，於由此產生之連接子-藥劑複合體中，藉由連接部自裂解，而能夠釋放出藥劑。
已知γ-麩胺醯基轉移酶(GGT)係管控麩胱甘肽(γ-Glu-Cys-Gly)及麩胱甘肽複合物(conjugate)之代謝分解之初發階段之酶，普遍存在於高等動植物至微生物之幾乎所有生物中(非專利文獻2、非專利文獻3及非專利文獻4)。GGT係使麩胱甘肽之γ-麩胺醯基鍵水解之酶，生成Glu(Glucosidase，葡萄糖苷酶)及Cys-Gly(Cysteinyl-Glycine，半胱胺醯-甘胺酸)，另一方面，以各種胺基酸或二縮胺酸、胺類作為受體而供給γ-麩胺醯基轉移生成物。
已知GGT於各種癌細胞中高度表現，亦有指出GGT係作為癌症化學療法之藥物靶之報告(非專利文獻5)。
於專利文獻1中，揭示有使抗癌劑進行γ-麩胺醯基化之化合物。作為利用自裂解連接子之前驅藥，列舉有可利用胰蛋白酶進行切斷之前驅藥(非專利文獻1)。然而，關於被GGT所識別並可由此切斷之前驅藥並無說明。又，於非專利文獻6中，列舉有使抗癌劑進行麩胺醯基化之化合物，顯示出依存於酶之細胞毒性。然而，於非常高之酶濃度下使藥理活性型化合物解離者，並非可於活體內環境下作為前驅藥而發揮功能者。又，於非專利文獻7中，作為於麩胺酸γ位鍵結有藥劑之化合物，列舉有經由適當之連接子之前驅藥型化合物。
[先前技術文獻] [專利文獻]
[專利文獻1]US7,989,188
[非專利文獻]
[非專利文獻1]J.Med.Chem.，24，479-480，(1981)
[非專利文獻2]Adv. Enzymol.Relat.Areas Mol. Biol.，72，239-278(1998)
[非專利文獻3]Methods Enzymol.，113，400-419(1985)
[非專利文獻4]Methods Enzymol.，113，419-437(1985)
[非專利文獻5]Biochemical Pharmacology 71，231-238(2006)
[非專利文獻6]Environmental and Molecular Mutagenesis 32，377-386(1998)
[非專利文獻7]Chem.Commun.，49，1389-1391(2013)
被GGT所識別之前驅藥可使活性型化合物於GGT高表現組織中選擇性地釋放，因此可期待成為減輕副作用並提昇治療效果之醫藥品。然而，無法獲得充分地發揮作為醫藥品所要求之穩定性或效果者，可期待能夠用作醫藥品之GGT識別前驅藥。
為了解決上述問題，本發明者等人反覆進行潛心研究，結果發現使適當之γ-麩胺醯基芳香族醯胺鍵結之藥劑極其穩定，然而使被GGT所識別並迅速顯示生理活性作用之藥劑釋放。具體而言，下述通式(1)
[式中，R1及R2分別獨立地表示選自由氫原子、可具有取代基之 烷基及可具有取代基之烷氧基羰基所組成之群中之基，R3表示氫原子或可具有取代基之烷基，A1及A2為選自由C-R6、C-R7及氮原子所組成之群中之基，該R6表示選自由氫原子、鹵素原子、硝基、羥基、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基所組成之群中之1種以上之基，該R7係以下述通式(2)
[式中，R4及R5分別獨立地表示氫原子或可具有取代基之烷基，L表示選自由氧原子、氧羰基及鍵所組成之群中之鍵結基，X表示具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基，(i)於上述X為具有選自由脂肪族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧羰基，(ii)於上述X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧原子，(iii)於上述X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為鍵或氧羰基]表示，此處，上述A1及上述A2係任一者為上述C-R7，另一者為上述C-R6或氮原子，B1、B2及B3分別獨立為上述C-R6或氮原子]所表示之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽作為GGT識別前驅藥而較為有 用，從而完成本發明。
即，本案將以下之[1]至[10]所示之發明作為其主旨。
[1]一種麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其以下述通式(1)表示，
[式中，R1及R2分別獨立地表示選自由氫原子、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基羰基所組成之群中之基，R3表示氫原子或可具有取代基之烷基，A1及A2為選自由C-R6、C-R7及氮原子所組成之群中之基，該R6表示選自由氫原子、鹵素原子、硝基、羥基、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基所組成之群中之1種以上之基，該R7以下述通式(2)表示，
[式中，R4及R5分別獨立地表示氫原子或可具有取代基之烷基，L表示選自由氧原子、氧羰基及鍵所組成之群中之鍵結基，X表示具有 選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基，(i)於上述X為具有選自由脂肪族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧羰基，(ii)於上述X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧原子，(iii)於上述X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為鍵或氧羰基]，此處，上述A1及上述A2係任一者為上述C-R7，另一者為上述C-R6或氮原子，B1、B2及B3分別獨立為上述C-R6或氮原子]。
[2]如上述[1]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中R7以下述通式(3)表示，
[式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基]。
[3]如上述[1]或[2]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為喜樹鹼及其衍生物。
[4]如上述[1]或[2]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其 中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由多柔比星、道諾黴素、表柔比星、吡柔比星及氨柔比星所組成之群中之生理活性物質。
[5]如上述[1]或[2]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由吉西他濱、乙炔基胞嘧啶核苷、阿糖胞苷及CNDAC(2'-氰基-2'-脫氧-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶)所組成之群中之生理活性物質。
[6]如上述[1]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中R7以下述通式(4)表示，
[式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基]。
[7]如上述[1]或[6]之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由7-乙基-10-羥基喜樹鹼、拓撲替康及其衍生物所組成之群中之1種。
[8]如上述[1]至[7]中任一項之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中通式(1)中，R1、R2及R3為氫原子。
[9]一種醫藥，其係含有如上述[1]至[8]中任一項之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽作為有效成分。
[10]如上述[9]之醫藥，其係抗癌劑。
本發明之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽具有被GGT所識別並使具有芳香族性羥基之生理活性物質迅速地釋放之物性。已知GGT於多種惡性腫瘤中高度表現。因此，藉由將本發明之麩胺酸衍生物用於具有抗腫瘤效果之化合物，可使於標的組織選擇性地發揮抗腫瘤活性之化合物釋放，可提供減輕副作用並提昇治療效果之抗腫瘤性藥劑。
圖1係針對於OS-RC-2細胞(人腎癌細胞)之實施例1之細胞增殖抑制試驗之結果。
圖2係針對於SK-OV-3細胞(人卵巢癌細胞)之實施例1之細胞增殖抑制試驗之結果。
圖3係於GGT抑制劑存在下針對於OS-RC-2細胞之實施例1之細胞增殖抑制試驗之結果。
圖4係針對於OS-RC-2細胞之實施例6之化合物之細胞增殖抑制試驗之結果。
圖5係針對於SK-OV-3細胞之實施例6之化合物之細胞增殖抑制試驗之結果。
圖6係於GGT抑制劑存在下針對於OS-RC-2細胞之實施例6之化合物之細胞增殖抑制試驗之結果。
本發明係關於一種使γ-麩胺醯基芳香族醯胺鍵結於具有芳香族性羥基之生理活性物質中而成之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽。又，關於一種該化合物作為醫藥品之用途。以下，對本發明之詳細情況進行說明。
本發明之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽係下述通式(1)
[式中，R1及R2分別獨立地表示選自由氫原子、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基羰基所組成之群中之基，R3表示氫原子或可具有取代基之烷基，A1及A2為選自由C-R6、C-R7及氮原子所組成之群中之基，該R6表示選自由氫原子、鹵素原子、硝基、羥基、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基所組成之群中之1種以上之基，該R7係以下述通式(2)
[式中，R4及R5分別獨立地表示氫原子或可具有取代基之烷基，L表示選自由氧原子、氧羰基及鍵所組成之群中之鍵結基，X表示具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基， (i)於上述X為具有選自由脂肪族性羥基及胺基所組成之群中之1 種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧羰基，(ii)於上述X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧原子，(iii)於上述X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為鍵或氧羰基]表示，此處，上述A1及上述A2係任一者為上述C-R7，另一者為上述C-R6或氮原子，B1、B2及B3分別獨立為上述C-R6或氮原子]所表示之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽。
通式(1)中之R1及R2分別獨立為氫原子、可具有取代基之烷基或可具有取代基之烷氧基羰基。
上述可具有取代基之烷基中之該烷基係指碳數1~30之直鏈狀、分支狀或環狀烷基。作為直鏈狀烷基，例如可列舉：甲基、乙基、正丙基、正丁基、正己基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基等。作為分支狀烷基，例如可列舉：異丙基、第三丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基、2,2-二甲基丙基等。作為環狀烷基，例如可列舉：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、金剛烷基等。
上述可具有取代基之烷氧基羰基中之該烷氧基羰基係指碳數1~10之烷氧基羰基。例如除甲氧基羰基、乙氧基羰基等以外，亦可列舉：具有適當之芳香族取代基之苄氧基羰基、9-茀基甲氧基羰基等一級烷氧基羰基、異丙氧基羰基、第二丁氧基羰基等二級烷氧基羰基、或第三丁氧基羰基等三級烷氧基羰基。
作為上述烷基及烷氧基羰基中之可具有之取代基，例如可列舉：巰基、羥基、鹵素原子、硝基、氰基、碳數2~10之烯基、碳數2~10之炔基、碳環或雜環芳基、碳數1~8之烷硫基、芳硫基、碳數1~8之烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基、碳數1~8之烷基磺醯基、芳基磺醯基、碳數1~8之烷氧基、芳氧基、脂肪族或芳香族胺基、對脂肪 族胺基進行取代而成之碳數1~8之烷基、甲醯基、醯基、羧基、或矽烷基等。芳香環上之取代位置可為鄰位，亦可為間位，亦可為對位。
上述通式(1)中之R1及R2中之可具有取代基之烷基或可具有取代基之烷氧基羰基較佳為胺基之保護基。即，若為有機合成反應中之胺基之保護基，則可無特別限定地使用。尤佳為上述烷氧基羰基，可列舉：苄氧基羰基(Cbz基)、第三丁氧基羰基(Boc基)、9-茀基甲氧基羰基(Fmoc基)、烯丙氧基羰基(Aloc基)等。
作為上述R1及R2，較佳為氫原子及/或可具有取代基之烷氧基羰基。較佳為R1及R2兩者均為氫原子之情形，或為氫原子與可具有取代基之烷氧基羰基的組合之情形。
作為通式(1)中之R3，可列舉氫原子或可具有取代基之烷基。
上述可具有取代基之烷基中之該烷基係指碳數1~30之直鏈狀、分支狀或環狀烷基。作為直鏈狀烷基，例如可列舉：甲基、乙基、正丙基、正丁基、正己基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基等。作為分支狀烷基，例如可列舉：異丙基、第三丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基、2,2-二甲基丙基等。作為環狀烷基，例如可列舉：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、金剛烷基等。又，可列舉：具有適當之芳香族取代基之苄基、9-茀基甲基等。作為該R3之烷基中之取代基，與上述含義相同。
作為該R3之可具有取代基之烷基，較佳為使用羧酸之保護基。若為有機合成反應中之羧酸之保護基，則可無特別限定地使用。尤佳為甲基、乙基、第三丁基、烯丙基、苄基、9-茀基甲基。
通式(1)中，A1及A2為選自由經R6取代之碳原子即C-R6、經R7取代之碳原子即C-R7及氮原子所組成之群中之基。又，B1、B2及B3分別獨立為經R6取代之碳原子即C-R6或氮原子。
作為上述R6，為選自由氫原子、鹵素原子、羥基、硝基、可具有 取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基所組成之群中之1種以上之取代基。
上述鹵素原子係氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
上述可具有取代基之烷基中之該烷基係指碳數1~30之直鏈狀、分支狀或環狀烷基。作為直鏈狀烷基，例如可列舉：甲基、乙基、正丙基、正丁基、正己基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基等。作為分支狀烷基，例如可列舉：異丙基、第三丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基、2,2-二甲基丙基等。作為環狀烷基，例如可列舉：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、金剛烷基等。
上述可具有取代基之烷氧基中之該烷氧基係指碳數1~10之烷氧基。例如可列舉：甲氧基、乙氧基、苄氧基等一級烷氧基、異丙氧基、第二丁氧基等二級烷氧基、或第三丁氧基等三級烷氧基。
作為上述烷基及烷氧基中之可具有之取代基，例如可列舉：巰基、羥基、鹵素原子、硝基、氰基、碳數2~10之烯基、碳數2~10之炔基、碳環或雜環芳基、碳數1~8之烷硫基、芳硫基、碳數1~8之烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基、碳數1~8之烷基磺醯基、芳基磺醯基、碳數1~8之烷氧基、芳氧基、脂肪族或芳香族胺基、對脂肪族胺基進行取代而成之碳數1~8之烷基、甲醯基、醯基、羧基、或矽烷基等。芳香環上之取代位置可為鄰位，亦可為間位，亦可為對位。
上述A1、A2、B1、B2及B3亦可為氮原子。即，由該A1~B3所構成之6員環芳香族基亦可為含氮雜環。作為該含氮雜環，包含該A1~B3中含有1~3個氮原子之雜環基。例如為吡啶環、嗒環、嘧啶環、吡環或三環。上述含氮雜環可具有取代基。作為該取代基，為由上述R6所規定之取代基。
作為上述R4及R5，分別獨立，可列舉氫原子或可具有取代基之烷基。
可具有取代基之烷基中之該烷基係指碳數1~30之直鏈狀、分支狀或環狀烷基。作為直鏈狀烷基，例如可列舉：甲基、乙基、正丙基、正丁基、正己基、正十二烷基、正十四烷基、正十六烷基等。作為分支狀烷基，例如可列舉：異丙基、第三丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基、2,2-二甲基丙基等。作為環狀烷基，例如可列舉：環丙基、環丁基、環戊基、環己基、金剛烷基等。作為可具有之取代基，與上述R1及R2中之取代基同義。
上述R7為上述通式(2)所表示之基。該通式(2)中，L表示選自由氧原子、氧羰基及鍵所組成之群中之鍵結基，X表示具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基，(i)於上述X為具有選自由脂肪族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧羰基，(ii)於上述X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧原子，(iii)於上述X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為鍵。
此處，於該X基為具有脂肪族性羥基或芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，係該等羥基與氧羰基進行碳酸酯鍵結之形式之鍵結殘基。另一方面，於該X基為具有胺基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，係該胺基與氧羰基進行胺基甲酸酯鍵結之形式之鍵結殘基。
又，於該X基為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，係鍵結基L經由氧原子與來自該生理活性物質之羰基進行酯鍵結之形式之鍵結殘基。
進而，於該X基為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，該X基係上述生理活性物質之芳香族羥基經由氧原子進行醚鍵結之鍵結殘基。
又，作為本發明之一態樣，上述R7係以下述通式(3)
[式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基]表示。
作為本發明之另一態樣，上述R7係以下述通式(4)
[式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基]表示。
作為上述X中之生理活性物質，係藉由投予至活體內而顯示出藥理功能之化學物質，只要為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的化合物，則可無特別限制地使用。
於通式(2)中，該X為具有脂肪族性羥基及/或胺基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，該L係使用氧羰基作為鍵結基，成為經碳酸酯鍵結及/或胺基甲酸酯鍵結之化合物。於該X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，該L成為氧原子，成為與來自生理活性物質之羰基進行酯鍵結之化合物。於該X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，該L係使用鍵或氧羰基，成為經醚鍵結或碳酸酯鍵結之化合物。
該脂肪族性羥基亦可為一級羥基、二級羥基或三級羥基中之任一取代基。又，該胺基亦可為一級胺基、二級胺基或三級胺基中之任一取代基。
作為上述X中之生理活性物質，亦可為脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基與胺基共存之生理活性物質。於為脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基與胺基共存之化合物之情形時，可認為該X基通常為利用胺基之鍵結殘基，考慮到反應條件或立體要素，亦可為利用該脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基與該胺基中之任一活性官能基的鍵結殘基，亦可為利用該脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基之鍵結殘基與利用該胺基之鍵結殘基之混合物。
又，作為上述X中之生理活性物質，亦可為脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基及/或胺基與羧基共存之生理活性物質。於使用脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基及/或胺基與羧基共存之生理活性物質之情形時，可根據反應條件而適當選擇鍵結樣式。
該生理活性物質中之生理活性並無特別限定，較佳為疾病治療之藥理活性，較佳為使用疾病治療用藥理活性化合物。GGT於惡性腫瘤中高度表現，因此作為該生理活性物質，較佳為抗腫瘤活性物質，較佳為使用抗癌劑。即，通式(2)之X所表示之生理活性物質較佳為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之 1種以上之官能基的抗癌劑。
作為適合作為通式(2)之X所表示之生理活性物質的抗癌劑，可列舉：西羅莫司系抗癌劑、蒽環黴素系抗癌劑、胞苷系抗癌劑、酪胺酸激酶抑制劑、DNA拓撲異構酶抑制劑、激素療法劑、光動力療法劑(photodynamic therapy)、微管聚合抑制劑、Hsp90抑制劑及其他具有細胞分裂抑制作用之抗癌劑。
作為上述西羅莫司系抗癌劑，例如可列舉依維莫司、坦西莫司、他克莫司、雷帕黴素等。
作為上述胞苷系抗癌劑，例如可列舉：乙炔基胞嘧啶核苷、CNDAC(2'-氰基-2'-脫氧-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶)、吉西他濱、阿糖胞苷等。
作為上述酪胺酸激酶抑制劑，為具有羥基及/或胺基之酪胺酸激酶抑制劑，例如可列舉克里唑替尼、達沙替尼等。
作為上述DNA拓撲異構酶抑制劑，例如可列舉：喜樹鹼、7-乙基-10-羥基喜樹鹼、伊立替康、拓撲替康、9-胺基喜樹鹼、9-硝基喜樹鹼等作為DNA拓撲異構酶I型抑制劑之喜樹鹼系抗癌劑。又，作為DNA拓撲異構酶II型抑制劑，可列舉依託泊苷、替尼泊苷等。又，可列舉：多柔比星、道諾黴素、表柔比星、吡柔比星、依達比星、米托蒽醌、氨柔比星等蒽環黴素系抗癌劑等。
作為上述激素療法劑，可列舉雷洛昔芬、戈舍瑞林、亮丙瑞林等。
作為上述光化學療法劑，可列舉2-丁基胺基-2-去甲氧基竹紅菌素等。
作為上述微管聚合抑制劑，例如可列舉：紫杉醇、歐洲紫杉醇等紫杉烷系抗癌劑、康布瑞汀(Combretastatin)及其衍生物、鬼臼毒素、埃立布林、奧里斯他汀。
作為上述Hsp90抑制劑，可列舉Ganetespib、馬克黴素、根赤殼黴素等。
又，通式(2)之X中，所謂適合作為具有羧基之生理活性物質之抗癌劑，例如可列舉：甲胺蝶呤、培美曲塞、DMXAA(5,6-二甲基酮-4-乙酸)、貝瑟羅汀、他米巴羅汀等。
又，通式(2)之X中，作為具有胺基或羧基之生理活性物質，亦可為生理活性肽類。該具有胺基或羧基之生理活性肽類可設為使用末端胺基或羧基進行鍵結之樣式。
作為該生理活性肽類，例如可列舉：貝他定(Bestatin)及貝他定甲基酯等酯衍生物、奧谷法奈(Glufanide)、人饑餓素(Ghrelin)、特脫莫肽(Tertomotide)、PR1、奧曲肽(Octreotide)、蘭瑞肽(Lanreotide)、帕瑞肽(Pasireotide)等。
通式(2)之X較佳為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基。於該情形時，通式(2)中之鍵結基L係使用氧羰基。即，於該情形時，該R7為上述通式(3)所表示之取代基。
作為具有選自由該脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質，較佳為喜樹鹼、7-乙基-10-羥基喜樹鹼、伊立替康、拓撲替康、9-胺基喜樹鹼、9-硝基喜樹鹼等喜樹鹼衍生物。該等具備內酯環之三級羥基或芳香族性羥基、胺基，藉由該等取代基而形成作為上述鍵結基之氧羰基及碳酸酯鍵及/或胺基甲酸酯鍵。
又，作為具有選自由該脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質，亦較佳為多柔比星、道諾黴素、表柔比星、吡柔比星、依達比星、米托蒽醌、氨柔比星等蒽環黴素系抗癌劑。更佳為多柔比星、道諾黴素、表柔比星、吡 柔比星、氨柔比星。該等具備羥基及/或胺基，藉由該等取代基而形成作為上述鍵結基之氧羰基及碳酸酯鍵及/或胺基甲酸酯鍵。
進而，作為具有選自由該脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質，較佳為吉西他濱、乙炔基胞嘧啶核苷、阿糖胞苷、CNDAC(2'-氰基-2'-脫氧-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶)等胞苷系抗癌劑。該等具有羥基及/或胞苷鹼之胺基，藉由該等取代基而形成作為上述鍵結基之氧羰基及碳酸酯鍵結及/或胺基甲酸酯鍵結。
又，作為另一態樣，較佳為通式(2)之X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基。於該情形時，通式(2)中之鍵結基L係使用鍵。即，於該情形時，該R7為上述通式(4)所表示之取代基。
作為具有芳香族性羥基之生理活性物質，較佳為使用7-乙基-10-羥基喜樹鹼或拓撲替康，該X較佳為藉由7-乙基-10-羥基喜樹鹼或拓撲替康之10位羥基而進行醚鍵結之鍵結殘基。
本發明之特徵在於上述A1及A2之任一者為C-R7。即，作為本發明之一態樣，係A1位C-R7之下述通式(5)所表示之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽。
通式(3)中，R1、R2、R3、R4、R5、A2、B1、B2、B3、L及X與上 述含義相同。
又，作為本發明之另一態樣，係A2為C-R7之下述通式(6)所表示之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽。
通式(4)中，R1、R2、R3、R4、R5、A1、B1、B2、B3、L及X與上述含義相同。
於本發明之通式(1)所表示之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽中，為了進行GGT識別，γ-麩胺酸鍵結部分結構必需為釋放胺基酸結構。即，為了該麩胺酸衍生物作為由GGT識別並活化之前驅藥發揮功能，上述R1、R2及R3必需均為氫原子。因此，於該麩胺酸衍生物用作用於發揮藥理活性之醫藥之情形時，較佳為上述R1、R2及R3均為氫原子。然而，於上述R1、R2及R3中之任一者為胺基或羧基之保護基，投予至活體內後該保護基解離，該R1、R2及R3全部成為氫原子之結構之情形時，亦作為醫藥用途之該麩胺酸衍生物之態樣而包含。
再者，上述R1、R2及R3為可具有取代基之烷基或烷氧基羰基之化合物係作為該醫藥用途化合物之製造上之中間體而較為有用之化合物，包含於本發明之內容中。
通式(1)所表示之麩胺酸衍生物亦可作為藥理學上所容許之鹽而 存在。作為該鹽，可列舉鹼加成鹽、酸加成鹽、胺基酸鹽等。作為鹼加成鹽，例如可列舉：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽等金屬鹽、銨鹽、三乙胺鹽、哌啶鹽、啉鹽等有機胺鹽。作為酸加成鹽，例如可列舉：鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽等無機酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、草酸鹽等有機酸鹽。作為胺基酸鹽，可列舉甘胺酸鹽等。但是，本發明之化合物之鹽並不限定於該等。
通式(1)所表示之麩胺酸衍生物及其鹽有時根據取代基之種類而具有1個或2個以上之不對稱碳，有時存在光學異構物或非對映異構物等立體異構物。純粹之形態之立體異構物、立體異構物之任意之混合物、外消旋體等均包含於本發明之範圍內。
通式(1)所表示之麩胺酸衍生物及其鹽亦有時作為水合物或溶劑合物而存在，該等物質均包含於本發明之範圍內。形成溶劑合物之溶劑之種類並無特別限定，例如可列舉乙醇、丙酮、異丙醇等溶劑。水合物或溶劑合物之鍵數並無特別限定，只要為能夠單離之穩定型水合物或溶劑合物即可。
於本說明書之實施例中，對通式(1)所表示之本發明之化合物中所包含的代表性化合物之製造方法進行了具體地說明，因此業者藉由參照本說明書之揭示，並且視需要適當選擇初始原料、試劑或反應條件等，能夠容易地製造通式(1)中所包含之任意化合物。
關於本發明之通式(1)所表示之麩胺酸衍生物，於A2為C-R7，X為具有脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基及/或胺基之生理活性物質之鍵結殘基，L為氧羰基之情形時，例如能夠按照以下之方式製造。
[流程(I)][化13]
流程(I)中，R1~R3、X、A1、B1~B3與上述含義相同。此處，R1及/或R2為胺基之保護基，R3為羧酸之保護基。LG表示鹵素原子、對硝基苯氧基或羥基丁二醯亞胺基等脫離基。以下，對各步驟進行說明。
[步驟A]：係利用芳香族胺使保護胺基及α-羧基之麩胺酸衍生物醯胺化而合成γ-麩胺酸醯胺衍生物(A-1)之步驟。本步驟係醯胺化縮合反應，可使用通常之縮合劑使其反應。能夠以如下方式實施：例如使用1-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)作為縮合劑，於二氯甲烷等溶劑中並於0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使其反應。作為縮合劑，例如可使用碳二醯亞胺系縮合劑、咪唑系脫水縮合劑、三系縮合劑、鏻系脫水縮合劑、脲鎓系縮合劑、二苯基磷酸疊氮(DPPA)、BOP試劑、4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基嗎啉 鹽酸鹽(DMT-MM)等。視需要，可使1-羥基苯并三唑等活化劑共存。
[步驟B]：係自通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物合成通式(A-2)所表示之羰基衍生物之步驟。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於吡啶存在下並於四氫呋喃等溶劑中，在-30℃至150℃、較佳為-10℃至30℃之溫度下使氯甲酸對硝基苯酯反應。
[步驟C]：係自通式(A-2)所表示之羰基衍生物合成通式(A-3)所表示之生理活性物質鍵結衍生物之步驟。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於二異丙基乙胺存在下並於N,N-二甲基甲醯胺等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使具有脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基及/或胺基之生理活性物質反應。
[步驟D]：係自通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物以一階段合成通式(A-3)所表示之生理活性物質鍵結衍生物之步驟路徑。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於N,N-二甲基胺基吡啶存在下並於二氯甲烷等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使通式(I-1)所表示之羰基化生理活性物質衍生物反應。
通式(I-1)所表示之羰基化生理活性物質衍生物能夠按照如下方式製造：例如於N,N-二甲基胺基吡啶存在下並於二氯甲烷等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下，使具有脂肪族性羥基及/或芳香族性羥基及/或胺基之生理活性物質X與三碳醯氯反應。或者，例如能夠按照如下方式製造：於吡啶存在下並於二氯甲烷等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使氯甲酸對硝基苯酯反應。
[步驟E]：係進行通式(A-3)所表示之生理活性物質鍵結衍生物中之γ-麩胺酸鍵結部分之胺基及羧基之脫保護反應之步驟。
於R1及R2之任一者為第三丁氧基羰基(Boc基)，另一者為氫原子，R3為第三丁基之情形時，可於酸性條件下實施該步驟E之脫保 護。作為酸，可使用鹽酸、硫酸等無機酸、乙酸、三氟乙酸等羧酸等。除此以外，只要為已知可使第三丁氧基羰基或第三丁基酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則可無特別限制地使用。
又，於該R1及R2之任一者為9-茀基甲氧基羰基(Fmoc基)，另一者為氫原子，該R3為茀基甲基之情形時，可於鹼性條件下實施該步驟E。作為鹼，可使用銨或哌啶、啉等有機鹼等。除此以外，只要為已知可使茀基甲氧基羰基或茀基甲基酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則於任一脫保護反應條件下均可使用。
又，於該R1及R2之任一者為烯丙氧基羰基(Aloc基)，另一者為氫原子，該R3為烯丙基之情形時，可於鈀觸媒存在下實施該步驟E。作為鈀觸媒，可使用四(三苯基膦)鈀(0)。除此以外，只要為已知可使烯丙氧基羰基或烯丙酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則可於任一脫保護反應條件下使用。
於X為具有胺基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，通式(A-3)所表示之衍生物例如能夠按照以下之方式製造。
流程(II)中，R1~R3、X、A1、B1~B3與上述含義相同，R1及/或 R2為胺基之保護基，R3為羧酸之保護基。以下，對各步驟進行說明。
[步驟F]：係自通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物而合成通式(A-3)所表示之生理活性物質鍵結衍生物之步驟。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於N,N-二甲基胺基吡啶存在下並於二氯甲烷等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使具有胺基之生理活性物質X之異氰酸酯衍生物反應。
具有胺基之生理活性物質X之異氰酸酯衍生物例如能夠按照如下方式製造：於碳酸氫鉀水溶液及二氯甲烷等混合溶劑中並於0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使具有胺基之生理活性物質X與三碳醯氯反應。
於X為具有羧基之生理活性物質，L為氧原子之情形時，通式(A-3)所表示之生理活性物質鍵結衍生物例如能夠按照以下之方式製造。
流程(III)中，R1~R3、X、A1、B1~B3與上述含義相同，R1及/或R2為胺基之保護基，R3為羧酸之保護基。以下，對各步驟進行說明。
[步驟G]：係藉由縮合反應而使通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物與具有羧基之生理活性物質酯化之步驟。本步驟可使用通常之縮合劑，例如藉由如下方式實施：使用1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二醯亞胺鹽酸鹽作為縮合劑，於N,N-二甲基甲醯胺等溶劑中並於0 ℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下反應。除此以外，作為縮合劑，亦可使用碳二醯亞胺系縮合劑、咪唑系脫水縮合劑、三系縮合劑、鏻系脫水縮合劑、脲鎓系縮合劑、二苯基磷酸疊氮(DPPA)、BOP試劑、4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基嗎啉鹽酸鹽(DMT-MM)等。視需要，亦可使1-羥基苯并三唑、N,N-二甲基-4-胺基吡啶等活化劑共存。
又，A2為C-R7，X為具有芳香族性羥基之生理活性物質，L為鍵之本發明之通式(1)所表示之麩胺酸衍生物例如能夠按照以下之方式製造。
流程(IV)中，R1~R3、X、A1、B1~B3與上述含義相同。此處，R1及/或R2為胺基之保護基，R3為羧酸之保護基。LG表示鹵素原子、甲磺醯氧基等脫離基。以下，對各步驟進行說明。
[步驟A]：係自通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物合成通式(A-5)所表示之衍生物之步驟。通式(A-5)中之LG為脫離基，例如可列舉甲磺醯氧基、對甲苯磺醯氧基等。本步驟例如能夠按照以下之方式 實施：於該脫離基為甲磺醯氧基之情形時，於N,N-二異丙基乙胺存在下並於二氯甲烷等溶劑中，在-30℃至150℃、較佳為-10℃至30℃之溫度下使甲磺醯氯反應。
[步驟B]：係自通式(A-5)所表示之衍生物合成通式(A-6)所表示之生理活性物質鍵結衍生物之步驟。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於碳酸銫存在下並於N,N-二甲基甲醯胺等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使具有芳香族性羥基之生理活性物質反應。
[步驟C]：係自通式(A-1)所表示之γ-麩胺酸醯胺衍生物而以一階段合成通式(A-6)所表示之生理活性物質鍵結衍生物之步驟路徑。本步驟例如能夠按照如下方式實施：於三苯基膦、偶氮二羧酸二異丙基存在下並於N,N-二甲基甲醯胺等溶劑中，在0℃至150℃、較佳為0℃至30℃之溫度下使具有芳香族性羥基之化合物反應。
[步驟D]：係進行通式(A-6)所表示之生理活性物質鍵結衍生物中之γ-麩胺酸鍵結部分之胺基及羧基之脫保護反應之步驟。
於R1及R2之任一者為第三丁氧基羰基(Boc基)，另一者為氫原子，R3為第三丁基之情形時，可於酸性條件下實施該步驟E之脫保護。作為酸，可使用鹽酸、硫酸等無機酸、乙酸、三氟乙酸等羧酸等。除此以外，只要為已知可使第三丁氧基羰基或第三丁基酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則可無特別限制地使用。
又，於該R1及R2之任一者為9-茀基甲氧基羰基(Fmoc基)，另一者為氫原子，該R3為茀基甲基之情形時，可於鹼性條件下實施該步驟E。作為鹼，可使用銨或哌啶、啉等有機鹼等。除此以外，只要為已知可使茀基甲氧基羰基或茀基甲基酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則可於任一脫保護反應條件下使 用。
又，於該R1及R2之任一者為烯丙氧基羰基(Aloc基)，另一者為氫原子，該R3為烯丙基之情形時，可於鈀觸媒存在下實施該步驟E。作為鈀觸媒，可使用四(三苯基膦)鈀(0)等。除此以外，只要為已知可使烯丙氧基羰基或烯丙酯脫保護之觸媒並為不會對除保護基以外之部分造成影響之觸媒，則可於任一脫保護反應條件下使用。
本發明之麩胺酸衍生物或其製藥上所容許之鹽係可使生理活性物質釋放者，作為該生理活性物質之前驅藥而發揮功能。因此，能夠用作含有該麩胺酸衍生物或其製藥上所容許之鹽作為有效成分之醫藥。
含有本發明之該麩胺酸衍生物或其製藥上所容許之鹽作為有效成分之醫藥亦可單獨使用該麩胺酸或其鹽，通常較佳為與醫藥品所容許之添加劑合併而製備醫藥組合物並用作醫藥品製劑。作為該添加劑，可列舉賦形劑、崩解劑、結合劑、潤滑劑、流動化劑、塗佈劑、懸濁化劑、乳化劑、穩定化劑、保存劑、矯味劑、著香劑、稀釋劑、溶解輔助劑等製藥上可容許之添加劑，與該等混合而製備醫藥品製劑。作為該製劑，係按照粉劑、顆粒劑、錠劑、片劑、膠囊劑、注射劑、栓劑、軟膏劑等製劑形態以經口或非經口(全身投予、局部投予等)之方式安全地投予。製劑中之本發明之麩胺酸衍生物或製藥上所容許之鹽之含量根據製劑而分別不同，通常較佳為0.1~100重量%。
於用作含有該麩胺酸衍生物或其製藥上所容許之鹽作為有效成分之醫藥之情形時，投予量根據投予路徑、患者之年齡以及應該預防或治療之實際症狀等而不同，並無特別限定。本發明之麩胺酸衍生物或其製藥上所容許之鹽係由對於惡性腫瘤高度表現之GGT所識別，具有使生理活性物質釋放之物性，因此較佳為用作抗癌劑。於用作抗癌劑之情形時，例如於對成人經口投予之情形時，作為有效成分，可設 為1天0.01mg~2000mg，較佳為設為0.1mg~1000mg，亦可1天1次或分成數次而投予。又，於經靜脈投予等非經口投予之情形時，作為平均單位體表面積之有效成分，可設為0.01mg~2000mg/m2，較佳為設為0.1mg~1000mg/m2，較佳為1天1次或分數次而投予。
[實施例]
其次，根據實施例而更具體地說明本發明，但本發明並不受該等例之任何限定。
用於實施例1~3、比較例1、2之化合物之檢測及鑑定以及純度測定之LC/MS(Liquid Chromatograph/Mass Spectrometer，液相層析質譜)測定條件如下所述。
機種：島津LCMS-2010A
管柱：Inertsil ODS-3、2.1mm×100mm、
流動相A：乙腈/甲酸(99.9/0.1)
流動相B：水/甲酸(99.9/0.1)
流速：0.3mL/分
用於實施例4~6之化合物之檢測及鑑定以及純度測定之LC/MS測定條件如下所述。
機種：島津LCMS-2020
管柱：Inertsil ODS-3、2.1mm×100mm、
流動相A：乙腈/甲酸(99.9/0.1)
流動相B：水/甲酸(99.9/0.1)
流速：0.3mL/分
實施例1
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星之合成
實施例1-1
(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯之合成
於(S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊酸(0.182g)及4-胺基苄基醇(0.049g)之乾燥二氯甲烷(5mL)溶液中添加N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)(0.103g)並於室溫下攪拌18小時。添加1當量濃度鹽酸並對所產生之結晶進行過濾，作為粗生成物而獲得(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.173g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：1.81-1.90(1H，m)，2.01-2.12(1H，m)，2.40-2.46(2H，m)，4.17-4.43(9H，m)，7.22-7.33(6H， m)，7.37-7.44(4H，m)，7.55(2H，d)，7.68-7.76(4H，m)，7.86-7.96(5H，m)，9.89(1H，brs).
LC/MS保持時間：7.3分鐘；m/z(ESI，POS)：653[M+H]+
實施例1-2
(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯之合成
於(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.145g)及吡啶(0.0448mL)之乾燥四氫呋喃(100mL)溶液中，在0℃下滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(0.089g)之乾燥四氫呋喃(10mL)溶液並於室溫下攪拌18小時。添加水後，利用乙酸乙酯進行萃取。利用無水硫酸鎂對有機層進行乾燥，於減壓下餾去溶劑，作為粗生成物而獲得(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.130g)。
LC/MS保持時間：8.1分鐘；m/z(ESI，POS)：840[M+Na]+
實施例1-3
((((4-((S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星之合成
將粗製之(S)-(9H-茀-9-基)甲基-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.05g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(3mL)中，添加鹽酸多柔比星(0.03g)後，添加二異丙基乙胺(0.13mL)。於室溫下攪拌15小時後，添加水並利用乙酸乙酯進行萃取。利用無水硫酸鎂對有機層進行乾燥，於減壓下餾去溶劑，作為粗生成物而獲得((((4-((S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星(0.09g)。
LC/MS保持時間：7.8分鐘；m/z(ESI，POS)：1245[M+Na]+
實施例1-4
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星之合成
將粗製之((((4-((S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星(0.085g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1.1725mL)中，於冰浴冷卻下滴加哌啶之N,N-二甲基甲醯胺溶液(10%、0.275mL)並攪拌30分鐘。添加水(4mL)，利用分取HPLC(High Performance Liquid Chromatography，高效液相層析法)將混合溶液純化而獲得(((4-(4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)多柔比星(實施例1、0.025g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：1.11(3H，d)，1.37-1.51(2H，m)，1.76-1.92(4H，m)，2.07-2.22(2H，m)，2.62-2.69(1H，m)，2.98-3.12(3H，m)，3.19-3.28(1H，m)，3.67-3.76(1H，m)，3.98(3H，s)，4.10-4.17(1H，m)，4.56(2H，s)，4.69-4.73(1H，m)，4.87-4.98(5H，m)，5.22(1H，s)，5.46(1H，s)，6.84(1H，d)，7.23(2H，d)，7.53(2H，d)，7.63(1H，d)，7.88-7.95(2H，m)，10.42(1H，brs).
LC/MS保持時間：4.0分鐘；m/z(ESI，POS)：822[M+H]+
實施例2
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基喜樹鹼之合成
[流程2][化18]
實施例2-1
第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯之合成
於(S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊酸(1.00g)及4-胺基苄基醇(0.487g)之乾燥二氯甲烷(15mL)溶液中添加N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)(1.019g)並於室溫下攪拌18小時。添加1當量濃度鹽酸，利用二氯甲烷進行萃取。利用水將有機層洗淨後，利用無水硫酸鈉進行乾燥。於減壓下餾去溶劑，利用二乙醚將殘渣洗淨而獲得第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.890g)。
NMR[400MHz，CDCl3，TMS]ppm：1.46(9H，s)，1.47(9H，s)，1.82-1.89(1H，m)，2.27-2.30(2H，m)，2.44(2H，t)，4.21-4.24(1H，m)，4.66(2H，s)，5.35-5.37(1H，m)，7.33(2H，d)，7.62(2H，d)，8.87(1H，brs).
LC/MS保持時間：5.5分鐘；m/z(ESI，POS)：431[M+Na]+
實施例2-2
第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯之合成
於第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基) 胺基)-5-側氧戊酸酯(0.10g)及吡啶(0.0494mL)之乾燥四氫呋喃(10mL)溶液中，在0℃下滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(0.0987g)之乾燥四氫呋喃(10mL)溶液並於室溫下攪拌2小時。添加檸檬酸水溶液後，利用乙酸乙酯進行萃取。利用水將有機層洗淨後，利用無水硫酸鈉進行乾燥。於減壓下餾去溶劑，利用矽膠管柱層析法將殘渣純化而獲得第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.038g)。
NMR[400MHz，CDCl3，TMS]ppm：1.46(9H，s)，1.48(9H，s)，1.79-1.90(1H，m)，2.26-2.28(1H，m)，2.45(2H，t)，4.20-4.28(1H，m)，5.26(2H，s)，5.38-5.40(1H，m)，7.37(2H，d)，7.41(2H，d)，7.69(2H，d)，8.27(2H，d)，9.15(1H，brs).
LC/MS保持時間：7.1分鐘；m/z(ESI，POS)：596[M+Na]+
實施例2-3
(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基喜樹鹼之合成
將第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.125g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(8mL)中，添加7-乙基-10-羥基喜樹鹼(0.0855g)後，添加二異丙基乙胺(0.37mL)。於室溫下攪拌18小時後，添加水並利用乙酸乙酯進行萃取。利用無水硫酸鈉對有機層進行乾燥後，於減壓下餾去溶劑，作為粗生成物而獲得(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基喜樹鹼(0.227g)。
LC/MS保持時間：6.6分鐘；m/z(ESI，POS)：827[M+H]+
實施例2-4
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基 喜樹鹼之合成
將粗製之((((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基喜樹鹼(0.02g)溶解於4當量濃度鹽酸二烷溶液(2.0mL)中並攪拌30分鐘。餾去溶劑並添加水(4mL)，利用分取HPLC將混合溶液純化而獲得(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)-10-氧基-7-乙基喜樹鹼(實施例2、0.0015g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：0.88(3H，t)，1.29(3H，t)，1.84-2.11(6H，m)，3.16-3.29(3H，m)，5.28(2H，s)，5.36(2H，s)，5.45(2H，s)，6.55(1H，s)，7.34(1H，s)，7.44(2H，d)，7.65(2H，d)，7.78-7.80(1H，m)，8.18-8.25(2H，m)，10.21(1H，brs).
LC/MS保持時間：3.9分鐘；m/z(ESI，POS)：671[M+H]+
實施例3
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼之合成
實施例3-1
(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼之合成
於喜樹鹼(0.050g)及三碳醯氯(0.0158g)之乾燥二氯甲烷(6mL)懸濁液中緩緩滴加二甲基胺基吡啶(0.0561g)之二氯甲烷(2mL)溶液。攪拌30分鐘後，添加第三丁基(S)-2-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.059g)並於室溫下攪拌18小時。添加1當量濃度鹽酸(50mL)並利用二氯甲烷進行2次萃取。利用飽和食鹽水將有機層洗淨後，使用無水硫酸鎂進行乾燥。於減壓下餾去溶劑，作為粗生成物而獲得(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼(0.108g)。
LC/MS保持時間：6.8分鐘；m/z(ESI，POS)：805[M+Na]+
實施例3-2
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼之合成
將粗製之(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼(0.028g)於0℃下溶解於4當量濃度鹽酸乙酸乙酯溶液(3.0mL)中並攪拌3小時。餾去溶劑並利用分取HPLC將所獲得之殘渣純化而獲得(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)喜樹鹼(實施例3、0.0017g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：0.90(3H，t)，1.90-1.97(3H，m)，2.13-2.21(3H，m)，3.16-3.28(1H，m)，5.09(2H，q)，5.33(2H，s)，5.52(2H，s)，7.02(1H，s)，7.27(2H，d)，7.53(2H，d)，7.74(1H，t)，7.89(1H，t)，8.15-8.21(2H，m)，8.73(1H，s)，10.29(1H，brs).
LC/MS保持時間：3.9分鐘；m/z(ESI，POS)：627[M+H]+
實施例4
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)表柔比星之合成
實施例4-1
烯丙基(S)-2-(烯丙氧基羰基胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯之合成
於烯丙基(S)-2-((烯丙氧基羰基)胺基)-5-((4-(羥基甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.400g)及吡啶(0.214mL)之乾燥四氫呋喃(20mL)溶液中，在0℃下滴加4-硝基苯基氯甲酸酯(0.428g)之乾燥四氫呋喃(1mL)溶液並於室溫下攪拌18小時。添加1當量濃度鹽酸(10mL)後，利用乙酸乙酯進行萃取，使用水將有機層洗淨後，利用無水硫酸鈉進行乾燥。於減壓下餾去溶劑，利用矽膠管柱層析法將殘渣純化而獲得烯丙基(S)-2-((烯丙氧基羰基)胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.633g)。
NMR[400MHz，CDCl3，TMS]ppm：1.96-2.08(1H，m)，2.34-2.44(1H，m)，2.48-2.53(2H，m)，4.42-4.50(1H，m)，4.62(2H，d)， 4.70(2H，d)，5.24-5.39(6H，m)，5.63(1H，brd)，5.86-5.97(2H，m)，7.39(2H，d)，7.43(2H，d)，7.65(2H，d)，8.30(2H，d)，8.41(1H，brs).
LC/MS保持時間：6.6分鐘；m/z(ESI，POS)：564[M+Na]+
實施例4-2
(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)表柔比星之合成
將烯丙基(S)-2-(烯丙氧基羰基胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.130g)及表柔比星鹽酸鹽(0.127g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中並添加二異丙基乙胺(0.0928mL)。於室溫下攪拌6小時後，將反應液滴加至二異丙醚(200mL)中。將所產生之固體溶解於氯仿中，於減壓下餾去溶劑。利用矽膠管柱層析法(氯仿/甲醇=20/1)將殘渣純化而獲得(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)表柔比星(0.222g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：1.18(3H，d)，1.53-1.64(1H，m)，1.79-1.91(2H，m)，2.02-2.24(3H，m)，2.38-2.46(2H，m)，2.90-3.02(3H，m)，3.49-3.59(1H，m)，3.84-3.93(1H，m)，3.98(3H，s)，4.06-4.13(1H，m)，4.45-4.49(2H，m)，4.53-4.61(4H，m)，4.83-4.88(3H，m)，4.93-4.98(2H，m)，5.16-5.23(3H，m)，5.26-5.34(2H，m)，5.49(1H，s)，5.83-5.96(2H，m)，7.02(1H，d)，7.23(2H，d)，7.53(2H，d)，7.65(1H，t)，7.75(1H，d)，7.91(2H，d)，9.93(1H，s)，13.27(1H，brs)，14.03(1H，brs).
LC/MS保持時間：6.2分鐘；m/z(ESI，POS)：968[M+Na]+
實施例4-3
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)表柔比星之合成
將(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基) 氧基)羰基)表柔比星(0.200g)溶解於二氯甲烷(4.5mL)及N,N-二甲基甲醯胺(1.0mL)中，添加四三苯基膦鈀(0.012g)及苯基矽烷(0.026mL)並於氬氣環境下攪拌30分鐘。將反應液滴加至含10%甲醇之二異丙醚(450mL)中。利用矽膠管柱層析法(氯仿/甲醇/水=13/6/1)將所產生之固體純化而獲得(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)表柔比星(實施例4、0.080g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：
1.18(3H，d)，1.52-1.67(1H，m)，1.80-1.97(3H，m)，2.13-2.23(2H，m)，2.90-3.05(3H，m)，3.15-3.23(2H，m)，3.49-3.61(1H，m)，3.84-3.93(1H，m)，3.99(3H，s)，4.56(2H，s)，4.87(2H，s)，4.92-5.01(2H，m)，5.21(1H，s)，5.51(1H，s)，7.03(1H，d)，7.23(2H，d)，7.54(2H，d)，7.66(1H，t)，7.91(2H，d)，10.36(1H，s)，14.04(1H，brs).
LC/MS保持時間：4.4分鐘；m/z(ESI，POS)：822[M+H]+
實施例5
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷之合成
實施例5-1
(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷之合成
將烯丙基(S)-2-(烯丙氧基羰基胺基)-5-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-側氧戊酸酯(0.030g)溶解於四氫呋喃(1.85mL)中，添加阿糖胞苷(0.014g)後，添加1當量濃度氫氧化鈉水溶液(0.15mL)。於室溫下攪拌3小時後，添加乙酸乙酯而獲得有機層。利用無水硫酸鈉對所獲得之有機層進行乾燥後，於減壓下餾去溶劑，使用矽膠管柱層析法(氯仿/甲醇=20/1至5/1)將殘渣純化而獲得(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷(0.016g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：1.79-1.93(1H，m)，2.02-2.34(1H，m)，3.49-3.63(2H，m)，4.05-4.16(1H，m)，4.47(2H，d)，4.60(2H，d)，4.92-5.09(3H，m)，5.16-5.34(4H，m)，5.68(1H，d)，5.83(1H，d)，5.84-5.97(2H，m)，6.17(1H，d)，7.24(2H，d)，7.56(2H，d)，7.63(1H，d)，7.76(1H，d)，10.00(1H，brs).
LC/MS保持時間：3.6分鐘；m/z(ESI，POS)：646[M+H]+
實施例5-2
(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷之合成
將(((4-((S)-5-烯丙基-4-(烯丙氧基羰基胺基)-5-側氧戊醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷(0.016g)溶解於二氯甲烷(2.0mL)及N,N-二甲基甲醯胺(0.40mL)中，於氬氣環境下添加四三苯基膦鈀(0)(0.0028g)及苯基矽烷(0.0030mL)，於室溫下攪拌45分鐘後直接靜置18小時。餾去溶劑並利用分取HPLC將殘渣純化而獲得(((4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄基)氧基)羰基)阿糖胞苷(實施例5、0.0015g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：2.02-2.14(2H，m)，3.53-3.65(2H，m)，3.73-3.81(1H，m)，3.90-3.99(1H，m)，4.06-4.12(1H，m)，4.94-5.11(4H，m)，5.71-5.5.75(1H，m)，5.82-5.85(1H，m)，6.16(1H，d)，7.25(2H，d)，7.57(2H，d)，7.95(1H，s)，8.05-8.30(2H，m)，10.08(1H，brs).
LC/MS保持時間：0.8分鐘；m/z(ESI，POS)：522[M+H]+
實施例6：10-(4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼-2-三氟乙酸鹽之合成
實施例6-1：5-((4-羥基甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯之合成
於1-第三丁基-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯(1.00g)及4-胺基苄基醇(0.487g)之乾燥二氯甲烷(15mL)溶液中添加N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)(1.019g)並於室溫下攪拌18小時。添加1當量濃度鹽酸，利用二氯甲烷進行萃取。利用水將有機層洗淨後，利用無水硫酸鈉進行乾燥。於減壓下餾去溶劑，利用二乙醚將殘渣洗淨 而獲得5-((4-羥基甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯(0.890g)。
NMR[400MHz，CDCl3，TMS]ppm：1.46(9H，s)，1.47(9H，s)，1.82-1.89(1H，m)，2.27-2.30(2H，m)，2.44(2H，t)，4.21-4.24(1H，m)，4.66(2H，s)，5.35-5.37(1H，m)，7.33(2H，d)，7.62(2H，d)，8.87(1H，brs).
LC/MS保持時間：5.6分鐘；m/z(ESI，POS)：431[M+Na]+
實施例6-2：5-((4-氯甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯之合成
於氬氣環境下並於冰浴冷卻攪拌下，在5-((4-羥基甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯(88mg，0.22mmol)之乾燥二氯甲烷(4.3mL)溶液中依序添加二異丙基乙胺(0.073mL、0.43mmol)、及甲磺醯氯(0.025mL、0.32mmol)，於冰浴冷卻下攪拌2小時5分鐘。於反應液中添加乙酸乙酯(40mL)而進行稀釋，利用0.3莫耳碳酸氫鈉水溶液(3mL)-水(10mL)、水(10mL)及食鹽水(10mL)進行洗淨後，使用無水硫酸鈉進行乾燥。濾去硫酸鈉並於減壓下餾去溶劑而獲得5-((4-氯甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯(83.7mg)。不對其進行純化而直接用於繼而之縮合反應中。
實施例6-3：10-(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼之合成
於氬氣環境下並於室溫攪拌下，在7-乙基-10-羥基-喜樹鹼(EHC 29mg、0.074mmol)之乾燥二甲基甲醯胺(1.5mL)懸濁液中添加碳酸銫(24mg、0.074mmol)，將所獲得之淡黃色懸濁液於室溫下攪拌9分鐘而製成橙色均勻溶液。其次，於室溫攪拌下添加粗製之5-((4-氯甲基)苄基胺基)-1-(第三丁基)-N-(第三丁氧基羰基)-L-麩胺酸酯(36mg， 0.084mmol)之乾燥二甲基甲醯胺(1.5mL)溶液，將所獲得之橙色溶液於室溫下攪拌2小時40分鐘，其次，於冰浴冷卻下攪拌1.5小時。於冰浴冷卻攪拌下於反應液中添加乙酸乙酯(20mL)而進行稀釋，添加氯化銨水溶液(6mL)而停止反應。對有機層進行分取，利用水(8mL、2次)及食鹽水(6mL)洗淨後，利用無水硫酸鈉進行乾燥。濾去硫酸鈉並於減壓下餾去溶劑而獲得淡黃色固體(61mg)。利用分取薄層層析法(矽膠，乙酸乙酯)將其純化而獲得10-(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼(19mg)。
NMR[400MHz，CDCl3，TMS]ppm：1.033(3H，t，J=7.3Hz)，1.353(3H，t，J=7.7Hz)，1.459(9H，s)，1.473(9H，s)，1.80-1.95(3H，m)，2.289(1H、m)，2.453(2H、t、J=6.5Hz)，3.108(2H，q，J=7.7Hz)，3.828(1H，s)，4.229(1H，m)，5.205(2H，s)，5.220(2H，s)，5.298(1H，d，J=16.2Hz)，5.389(1H，d，J=8.1Hz)，5.745(1H，d，J=16.2Hz，7.368(1H，d，J=2.6Hz)，7.463(2H，d，J=8.6Hz)，7.510(1H，dd，J=9.2Hz，2.6Hz)，7.600(1H，s)，7.693(2H，d，J=8.2Hz)，8.125(1H，d，J=9.2Hz)，9.062(1H，s).
LC/MS保持時間：6.9分鐘；m/z(ESI、NEG)：781[M-H]-
實施例6-4：10-(4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼2三氟乙酸鹽之合成
於氬氣環境下並於冰浴冷卻攪拌下，在10-(((4-((S)-5-(第三丁氧基)-4-((第三丁氧基羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼(33.7mg、0.043mmol)之1,2-二氯乙烷(3mL)溶液中添加三氟乙酸(1mL)，將所獲得之黃色溶液於冰浴冷卻下攪拌5分鐘，其次，於室溫(21℃)下攪拌2小時。對反應液進行減壓乾固，於殘渣中添加1,2-二 氯乙烷(8mL)而再次進行減壓乾固，獲得黃色固體(41mg)。於其中添加二甲基甲醯胺(1mL)、乙腈(MeCN、7mL)及水(4mL)而進行溶解，利用分取液體層析法對所獲得之溶液(12mL)進行分離純化(4mL、3次)。
合併不含雜質之組分並於減壓下餾去溶劑而獲得10-(4-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)苄氧基)-7-乙基喜樹鹼2三氟乙酸鹽(實施例6、21.8mg)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：0.874(3H，t，J=7.3Hz)，1.272(3H，t，J=7.6Hz)，1.864(2H，m)，2.082(2H，m)，2.566(overlapped)，3.185(2H，q，J=7.3Hz)，3.980(overlapped)，5.299，5.309，5.429(each 2H，s)，6.50(1H，b)，7.269(1H，s)，7.47-7.65(6H，m)，8.09(1H，d，J=9.0Hz)，8.262(2H，d，J=4.1Hz)，10.105(1H，s)，13.9(1H，b).
LC/MS保持時間：4.1分鐘；m/z(ESI，POS)：628[M+2H]+
比較例1
(S)-(4-胺基-4-羧基丁醯胺)多柔比星之合成
比較例1-1
將(S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊酸(0.100g)、多柔比星鹽酸鹽(0.095g)、羥基苯并三唑(3mg)及三乙胺(0.024mL)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中，添加鹽酸1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二醯亞胺(0.100g)並於室溫下攪拌22小時。添加水(40mL)並對所產生之析出物進行過濾。利用矽膠管柱層析法將析出物純化而獲得(4-((S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)多柔比星(0.090g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：1.13(3H，d)，1.42-1.54(1H，m)，1.64-1.94(3H，m)，2.06-2.25(4H，m)，2.90-3.04(2H， m)，3.90-4.38(10H，m)，4.59(2H，d)，4.77(1H，d)，4.88-4.99(2H，m)，5.20-5.26(1H，m)，5.50(1H，s)，7.20-7.89(19H，m)，13.28(1H，s)，14.07(1H，s).
LC/MS保持時間：7.6分鐘；m/z(ESI，POS)：1096[M+Na]+
比較例1-2
將(4-((S)-5-((9H-茀-9-基)甲氧基)-4-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-5-側氧戊醯胺)多柔比星(0.020g)溶解於二氯甲烷(0.1365mL)中，於0℃下添加哌啶之二氯甲烷溶液(10%v/v，0.635mL)並攪拌3.5小時。添加二氯甲烷(1mL)後，於0℃下添加哌啶之二氯甲烷溶液(10%v/v，0.0158mL)並繼續攪拌2小時。對析出物進行過濾並利用乙酸乙酯進行洗淨。利用分取HPLC將所獲得之析出物純化而獲得(S)-(4-胺基-4-羧基丁醯胺)多柔比星(比較例1、0.0021g)。
NMR[400MHz，D2O，TMS]ppm：1.17(3H，d)，1.61-1.74(1H，m)，1.76-1.93(2H，m)，1.94-2.04(2H，m)，2.11-2.20(1H，m)，2.24-2.50(3H，m)，2.66-2.78(1H，m)3.59(2H，m)，3.75(3H，s)，3.99-4.16(2H，m)，5.25(1H，m)，7.02-7.15(2H，m)，7.35-7.42(1H，m).
LC/MS保持時間：3.8分鐘；m/z(ESI，POS)：673[M+H]+
比較例2
9-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)喜樹鹼之合成
比較例2-1
將(S)-5-(苄氧基)-4-(苄氧基羰基)胺基-5-側氧戊酸(0.173g)添加於9-胺基喜樹鹼(0.090g)之N,N-二甲基甲醯胺(5mL)溶液中後，添加羥基苯并三唑(0.005g)及1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二醯亞胺(0.297g)並於室溫下攪拌2小時後，靜置2天。添加水(10mL)並利用乙酸乙酯進行萃取。利用無水硫酸鈉對有機層進行乾燥後，於減壓下餾去溶劑。利用矽膠管柱層析法(己烷/乙酸乙酯=1/5至0/1)將殘渣純化而獲得9-((4-((S)-5-(苄氧基)-4-(苄氧基羰基)胺基-5-側氧)戊醯胺)喜樹鹼(0.024g)。
NMR[400MHz，DMSO-d6，TMS]ppm：0.89(3H，t)，1.81-2.02(4H，m)，2.13-2.29(1H，m)，2.58-2.70(2H，m)，4.22-4.30(1H，m)，5.08(2H，d)，5.17(2H，s)，5.28(2H，s)，5.44(2H，s)，6.56(1H，s)，7.23-7.40(11H，m)，7.76-7.87(2H，m)，7.92(1H，d)，8.03(1H，d)，8.75(1H，s)，10.20(1H，s).
LC/MS保持時間：5.8分鐘；m/z(ESI，POS)：717[M+H]+
比較例2-2
將9-((4-((S)-5-(苄氧基)-4-(苄氧基羰基)胺基-5-側氧)戊醯胺)喜樹鹼(0.020g)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中添加10%鈀碳(0.005g)，於氫環境下並於室溫下攪拌2小時。對反應液進行矽藻土過濾並使用N,N-二甲基甲醯胺(1mL)與水(8mL)之混合溶液進行洗淨。利用分取HPLC將濾液純化而獲得9-((S)-4-胺基-4-羧基丁醯胺)喜樹鹼(0.012g)。
NMR[400MHz，D2O，TMS]ppm：0.86(3H，t)，1.85(2H，q)，2.26(2H，q)，2.71-2.82(2H，m)，3.97(1H，m)，5.24-5.35(2H，m)，7.21(1H，s)，7.39-7.44(1H，m)，7.49(2H，d)，8.30(1H，s).
LC/MS保持時間：1.2分鐘；m/z(ESI，POS)：493[M+H]+
試驗例1：γ-麩胺醯基轉移酶(GGT)酶識別試驗
將實施例1之多柔比星前驅藥(0.49mg)溶解於磷酸緩衝生理食鹽水(PBS)(0.298mL)中而製備2mM多柔比星前驅藥PBS溶液。
於該多柔比星前驅藥PBS溶液0.150mL中，添加將GGT(0.22mg、8U/mg)(Sigma-Aldrich公司)溶解於PBS(0.880mL)中之2U/mL之GGT溶液0.150mL，於37℃下進行反應。
藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率及多柔比星之產率。將結果彙總於表1中。
比較試驗例1：GGT酶識別試驗
將比較例1中所獲得之多柔比星前驅藥(0.17mg)溶解於PBS(0.1265mL)中而製備2mM多柔比星前驅藥PBS溶液。
於該多柔比星前驅藥PBS溶液0.100mL中添加將GGT(0.38mg、8U/mg)(Sigma-Aldrich公司)溶解於PBS(1.520mL)而成之2U/mL之GGT溶液0.100mL，於37℃下進行反應。
6小時後，對反應液進行HPLC分析，結果殘存前驅藥93%。因此，顯示比較例1之多柔比星前驅藥並未被GGT所識別，無法使作為生理活性物質之多柔比星釋放。
根據試驗例1之結果，顯示實施例1之多柔比星前驅藥可於GGT存在下使具有藥理活性之多柔比星迅速地釋放。另一方面，比較試驗例1之結果係使γ-麩胺酸直接鍵結於多柔比星上之比較例1之多柔比星前 驅藥幾乎不會引起由GGT所引起之多柔比星之解離反應。因此，明確於由GGT之識別所引起之迅速之解離反應中，必需使適當之連接子片段介於γ-麩胺酸鍵結部位與藥劑之間，本發明之芳香族醯胺型連接子片段能夠發揮優異之GGT識別能力。
試驗例2：磷酸緩衝生理食鹽水(PBS)溶液穩定性試驗
將實施例1之多柔比星前驅藥(0.49mg)溶解於磷酸緩衝生理食鹽水(PBS)(0.298mL)中而製備多柔比星前驅藥PBS溶液。
將該多柔比星前驅藥PBS溶液0.148mL溶解於PBS溶液0.148mL中，於37℃下進行反應。6.5小時後，對反應液進行HPLC分析，結果未確認到前驅藥之減少。
因此，顯示本發明之實施例1之多柔比星前驅藥並未使多柔比星於PBS溶液中釋放，化學性穩定。
試驗例3：細胞增殖抑制活性試驗
使用GGT活性較高之OS-RC-2細胞(Riken BioResource Center)及GGT活性較低之SK-OV-3細胞(American Type Culture Collection)對實施例1之多柔比星前驅藥之細胞增殖抑制活性進行評價。
將GGT活性較高之OS-RC-2細胞及GGT活性較低之SK-OV-3細胞分別以4,000cells/well播種於96孔盤上，於37℃、5%CO2下培養1天後，以最終濃度0.039~10μM添加實施例1之多柔比星前驅藥。培養6小時後，對孔內進行洗淨，進而培養3天後，利用甲醇將細胞固定，使用亞甲基藍色素進行染色。染色後使用0.3%鹽酸水對色素進行萃取，測定660nm之吸光度。針對於所獲得之吸光度，根據相對於自未添加化合物之細胞測得之吸光度的減少率而評價細胞增殖抑制活性。
藉由相同之操作並使用未前驅藥化之多柔比星，根據其吸光度而評價細胞增殖抑制活性。將結果示於圖1(GGT活性較高之OS-RC-2細胞)及圖2(GGT活性較低之SK-OV-3細胞)。
試驗例4：前驅藥之GGT依存性之確認試驗
使用GGT活性較高之OS-RC-2細胞對實施例1之多柔比星前驅藥之細胞增殖抑制活性之GGT活性依存性進行評價。
利用與試驗例3相同之方法播種OS-RC-2細胞並培養1天後，以最終濃度10μM添加作為GGT抑制劑之GGsTop(和光純藥工業股份有限公司)並培養1小時後，以最終濃度0.039~10μM添加實施例1之多柔比星前驅藥。培養6小時後，對孔內進行洗淨，進而培養3天後，利用與試驗例3相同之方法評價細胞增殖抑制活性。
藉由相同之操作並使用未前驅藥化之多柔比星，根據其吸光度而評價細胞增殖抑制活性。將結果示於圖3中。
試驗例3之結果，於GGT活性較高之OS-RC-2細胞中添加10μM之多柔比星之情形時，細胞增殖抑制活性為77%。相對於此，於以10μM添加實施例1之多柔比星前驅藥之情形時，顯示76%之細胞增殖抑制活性。
另一方面，於GGT活性較低之SK-OV-3細胞中添加10μM之多柔比星之情形時，細胞增殖抑制活性為77%。相對於此，於以10μM添加實施例1之多柔比星前驅藥之情形時，顯示13%之細胞增殖抑制活性。
若對GGT活性較高之細胞與GGT活性較低之細胞中之細胞增殖抑制活性的結果進行比較，則明確本發明之實施例1之多柔比星前驅藥藉由GGT而使多柔比星釋放，顯示細胞增殖抑制活性，並且於不存在GGT之情形時，細胞增殖抑制活性較低，幾乎不顯示殺細胞性。因此，顯示本發明之多柔比星前驅藥具有發揮依存於GGT活性之細胞增殖抑制活性之物性。
又，試驗例4之結果，於GGT活性較高之OS-RC-2細胞中，GGT抑制劑不會對多柔比星之細胞增殖抑制活性造成影響，完全抑制多柔 比星前驅藥之活性。因此，顯示本發明之多柔比星前驅藥具有發揮依存於GGT活性之細胞增殖抑制活性之物性。
試驗例5：GGT酶識別試驗
藉由與試驗例1相同之方式，使用實施例4之表柔比星前驅藥之2mM PBS溶液及2U/mL之GGT溶液於37℃下進行反應。
藉由對反應液進行經時性地HPLC分析，而確認前驅藥因酶反應而分解，6小時後之前驅藥殘存率為5%。
因此，顯示實施例4之表柔比星前驅藥可於GGT存在下使具有藥理活性之表柔比星迅速地釋放。
試驗例6：GGT酶識別試驗
藉由與試驗例1相同之方式，使用實施例5中所獲得之阿糖胞苷前驅藥之1mMPBS溶液及2U/mL之GGT溶液於37℃下進行反應。
藉由對反應液進行經時性地HPLC分析，而確認前驅藥因酶反應而分解，6.5小時後之前驅藥殘存率為34%。
因此，顯示實施例5之阿糖胞苷前驅藥可於GGT存在下使具有藥理活性之阿糖胞苷迅速地釋放。
比較試驗例2：GGT酶識別試驗
藉由與比較試驗例1相同之方式製備比較例2中所獲得之9-胺基喜樹鹼前驅藥之2mM之PBS溶液，並且使用2U/mL之GGT溶液於37℃下進行反應。
6小時後，對反應液進行HPLC分析，結果殘存前驅藥99%。因此，顯示比較例2之9-胺基喜樹鹼前驅藥未被GGT所識別，無法使作為生理活性物質之9-胺基喜樹鹼釋放。
比較例2之9-胺基喜樹鹼前驅藥之結果係幾乎未引起由GGT所產生的9-胺基喜樹鹼之解離反應，因此明確於由GGT之識別所引起之迅速之解離反應中，必需使適當之連接子片段介於γ-麩胺酸鍵結部位與 藥劑之間，本發明之芳香族醯胺型連接子片段能夠發揮優異之GGT識別能力。
試驗例7：PBS之穩定性試驗
於實施例2之EHC前驅藥之60mg/mL DMSO溶液(0.005mL)中添加PBS(0.220mL)而製備EHC前驅藥溶液。於該EHC前驅藥溶液(0.100mL)中添加PBS(0.100mL)並於37℃下進行反應。藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率，結果3.5小時後前驅藥之殘存率為52%。
於實施例3之喜樹鹼前驅藥6.3mg/mL DMSO溶液(0.073mL)中添加PBS(0.294mL)而製備喜樹鹼前驅藥溶液。於該喜樹鹼前驅藥溶液(0.117mL)中添加PBS(0.117mL)並於37℃下進行反應。藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率，結果3小時後前驅藥之殘存率為74%。
於實施例6之EHC前驅藥0.864mg/mL DMSO溶液(0.050mL)中添加PBS(0.450mL)並於37℃下進行反應。藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率，結果24小時後殘存前驅藥90%。
試驗例8：小鼠血漿中之穩定性試驗
於實施例6之EHC前驅藥0.856mg/mL DMSO溶液(0.020mL)中添加小鼠血漿(0.180mL)並於37℃下進行反應。
藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率，結果24小時後殘存前驅藥94%。
因此，顯示本發明之實施例6之EHC前驅藥即便於小鼠血漿中亦可化學穩定。
試驗例9：GGT酶識別試驗
將實施例6之EHC前驅藥溶解於DMSO中而製備0.34mg/mL溶液。於該EHC前驅藥溶液(0.300mL)中添加PBS(0.300mL)而製備EHC 前驅藥溶液(2)。
將γ-麩胺醯基轉移酶(GGT Sigma-Aldrich公司)溶解於PBS中而製備0.227mg/mL溶液。
於該EHC前驅藥溶液(2)(0.250mL)中添加GGT溶液(0.250mL)並於37℃下進行反應。
藉由對反應液進行HPLC分析而求出前驅藥之殘存率及EHC之產率。
試驗例9之結果，實施例6之EHC前驅藥藉由反應1小時而生成化學計量之EHC。該結果顯示實施例6之化合物被GGT所識別，並使經由醚鍵之γ-麩胺醯基芳香族醯胺連接子迅速地裂解，能夠生成作為生理活性物質之EHC。
根據試驗例7、8之結果，顯示實施例6之EHC前驅藥於PBS溶液及小鼠血漿存在下之溶液中具有穩定之物性。進而，顯示實施例6之EHC前驅藥可於GGT存在下使具有藥理活性之EHC迅速地釋放。
試驗例10：細胞增殖抑制活性試驗
使用已知GGT活性較高之OS-RC-2細胞(Riken BioResource Center)及已知GGT活性較低之SK-OV-3細胞(American Type Culture Collection)對實施例6之EHC前驅藥之細胞增殖抑制活性進行評價。
將GGT高活性之OS-RC-2細胞及GGT低活性之SK-OV-3細胞分別以4,000cells/well播種於96孔盤上，於37℃、5%CO2下培養1天後，以最終濃度0.0001~1μM添加實施例6之EHC前驅藥。培養6小時後對孔內進行洗淨，進而培養3天。培養後，利用甲醇將細胞固定，使用亞甲基藍色素進行染色。利用0.3%鹽酸水對染色後色素進行萃取並測定660nm之吸光度。針對於多獲得之吸光度，根據相對於自未添加化合物之細胞測得之吸光度的減少率而評價細胞增殖抑制活性。
藉由相同之操作並直接使用作為實施例6之有效成分的EHC，根 據其吸光度而評價細胞增殖抑制活性。
將結果示於圖4(GGT高活性之OS-RC-2細胞)及圖5(GGT低活性之SK-OV-3細胞)中。
試驗例11：前驅藥之GGT依存性之確認試驗
使用已知GGT活性較高之OS-RC-2細胞對實施例6之EHC前驅藥之細胞增殖抑制活性的GGT活性依存性進行評價。
利用與試驗例10相同之方法播種OS-RC-2細胞並培養1天後，以最終濃度10μM添加作為GGT抑制劑之GGsTop(和光純藥工業股份有限公司)並培養1小時。其後，以最終濃度0.0001~1μM添加實施例6之EHC前驅藥。培養6小時後，對孔內進行洗淨，進而培養3天後，利用與試驗例10相同之方法評價細胞增殖抑制活性。
藉由相同之操作並直接使用作為實施例6之有效成分的EHC，根據其吸光度而評價細胞增殖抑制活性。
將結果示於圖6中。
試驗例10之結果，於已知GGT活性較高之OS-RC-2細胞中添加0.01μM之EHC之情形時，細胞增殖抑制活性為26%。又，於以0.01μM添加實施例6之EHC前驅藥之情形時，顯示25%之細胞增殖抑制活性。
另一方面，於已知GGT活性較低之SK-OV-3細胞中添加0.01μM之EHC之情形時，細胞增殖抑制活性為27.7%。另一方面，於以0.01μM添加實施例6之EHC前驅藥之情形時，顯示1.3%之細胞增殖抑制活性。
若對GGT活性較高之細胞與GGT活性較低之細胞中的細胞增殖抑制活性之結果進行比較，則明確本發明之實施例6之EHC前驅藥藉由GGT而使EHC釋放，顯示細胞增殖抑制活性，並且於不存在GGT之情形時，細胞增殖抑制活性較低，幾乎不顯示殺細胞性。因此，顯示本 發明之EHC前驅藥能夠發揮依存於GGT活性之細胞增殖抑制活性。
又，試驗例11之結果，於GGT活性較高之OS-RC-2細胞中，GGT抑制劑不會對EHC之細胞增殖抑制活性造成影響，抑制EHC前驅藥之活性。因此，顯示本發明之EHC前驅藥具有發揮依存於GGT活性之細胞增殖抑制活性之物性。
試驗例12：組織中藥劑濃度之測定
將於小鼠皮下繼代培養之小鼠腎細胞癌OS-RC-2腫瘤製成約2mm見方之塊，使用套管針移植至小鼠皮下。於腫瘤移植後第17天將本發明之實施例6之EHC前驅藥懸濁於DMSO/5%葡萄糖水溶液=1：9溶液中，作為EHC換算而以20mg/kg進行尾靜脈內投予。又，作為對照藥，將作為EHC之前驅藥之鹽酸伊立替康(CPT-11)溶解於5%葡萄糖水溶液中，作為EHC換算而以20mg/kg進行尾靜脈內投予。
於投予後5分鐘、1、3、6小時，在醚麻醉下採取血漿、肝臓、骨髄及腫瘤之各組織。藉由LC-MS/MS法而於以下之測定機器及條件下對作為各組織中之活性體的EHC、實施例6未變化體及CPT-11未變化體之藥物濃度進行定量分析。
機種：ABSciex API4000
島津LC-20AD
管柱：Waters XBridge、C18、2.1mm×50mm
流動相A：甲酸/水(1/1000)
流動相B：甲酸/乙腈(1/1000)
離子化法：電灑釋放化(正離子)
檢測法：多重反應檢測
根據各時刻之組織中EHC、實施例6之前驅藥及CPT-11濃度而算出投予開始後6小時為止之各成分之AUC0-6hr。作為各組織中之實施例6及CPT-11之前驅藥活化率，求出活性體相對於未變化體之AUC0-6hr 比率(AUCEHC/AUC實施例6及AUCEHC/AUCCPT-11)(表2)。
試驗例13：抗腫瘤效果試驗
對於以與試驗例12相同之方式移植小鼠腎細胞癌OS-RC-2之小鼠，於腫瘤移植後第17天，每隔4天1次合計3次尾靜脈內投予本發明之實施例6之EHC前驅藥20、40及80mg/kg。投予後，使用測量器每隔2~3天測量腫瘤之長徑(Lmm)及短徑(Wmm)，藉由而(L×W2)/2對腫瘤體積進行計算，求出自投予開始日之腫瘤體積變化率/無處置群之體積變化率並示於表3中。
試驗例12之結果，於GGT低表現之血漿、肝臓、骨髄中，與CPT-11相比，實施例6之EHC前驅藥為相同程度~9.4倍左右之活化率。另一方面，於表現GGT之腫瘤中，與CPT-11投予群相比，實施例6之AUCEHC/AUC實施例6比為61.8倍，顯示明顯較高之值。因此，顯示本發明之實施例6之EHC前驅藥於組織中依存於GGT而活化，具有於表 現GGT之組織中能夠選擇性地釋放出EHC之物性。
又，試驗例13之結果顯示實施例6之EHC前驅藥顯示用量依存性抗腫瘤效果，於80mg/kg投予群中顯示顯著之腫瘤縮小效果，具有發揮優異之抗腫瘤作用之物性。

Claims (10)

  1. 一種麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其以下述通式(1)表示， [式中，R1及R2分別獨立地表示選自由氫原子、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基羰基所組成之群中之基，R3表示氫原子或可具有取代基之烷基，A1及A2為選自由C-R6、C-R7及氮原子所組成之群中之基，該R6表示選自由氫原子、鹵素原子、硝基、羥基、可具有取代基之烷基及可具有取代基之烷氧基所組成之群中之1種以上之基，該R7以下述通式(2)表示， [式中，R4及R5分別獨立地表示氫原子或可具有取代基之烷基，L表示選自由氧原子、氧羰基及鍵所組成之群中之鍵結基， X表示具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基、胺基及羧基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基，(i)於上述X為具有選自由脂肪族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧羰基，(ii)於上述X為具有羧基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為氧原子，(iii)於上述X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基之情形時，上述L為鍵或氧羰基]，此處，上述A1及上述A2係任一者為上述C-R7，另一者為上述C-R6或氮原子，B1、B2及B3分別獨立為上述C-R6或氮原子]。
  2. 如請求項1之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中R7以下述通式(3)表示， [式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有選自由脂肪族性羥基、芳香族性羥基及胺基所組成之群中之1種以上之官能基的生理活性物質之鍵結殘基]。
  3. 如請求項1或2之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為喜樹鹼及其衍生物。
  4. 如請求項1或2之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X 所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由多柔比星、道諾黴素、表柔比星、吡柔比星及氨柔比星所組成之群中之生理活性物質。
  5. 如請求項1或2之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由吉西他濱、乙炔基胞嘧啶核苷、阿糖胞苷及CNDAC(2'-氰基-2'-脫氧-1-β-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶)所組成之群中之生理活性物質。
  6. 如請求項1之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中R7以下述通式(4)表示， [式中，R4及R5與上述含義相同，X為具有芳香族性羥基之生理活性物質之鍵結殘基]。
  7. 如請求項1或6之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中X所表示之上述生理活性物質之鍵結殘基中之該生理活性物質為選自由7-乙基-10-羥基喜樹鹼、拓撲替康及其衍生物所組成之群中之1種。
  8. 如請求項1、2、6中任一項之麩胺酸衍生物或其藥理學上所容許之鹽，其中通式(1)中，R1、R2及R3為氫原子。
  9. 一種醫藥，其含有如請求項1至8中任一項之麩胺酸衍生物或其 藥理學上所容許之鹽作為有效成分。
  10. 如請求項9之醫藥，其係抗癌劑。
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