TW201416361A

TW201416361A - 布魯頓氏（ｂｒｕｔｏｎ’ｓ）酪胺酸激酶抑制劑

Info

Publication number: TW201416361A
Application number: TW102132819A
Authority: TW
Inventors: Christine E Brotherton-Pleiss; Ramona Hilgenkamp; Rama K Kondru; Francisco Javier Lopez-Tapia; Yan Lou
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 2012-09-13
Filing date: 2013-09-11
Publication date: 2014-05-01
Also published as: BR112015005361A2; AR092536A1; CN104619696A; RU2015111133A; US20150210704A1; JP2015531781A; HK1210461A1; US9499548B2; KR20150054994A; WO2014040965A1; EP2895473A1; CA2881761A1; MX2015002901A

Abstract

本申請案揭示通式I之化合物：□其中所有變數均如本文中所定義，其抑制Btk。本文揭示之化合物適用於調節Btk活性，及治療與過度Btk活性有關之疾病。該等化合物亦適用於治療與異常B細胞增殖有關之發炎及自體免疫疾病，諸如類風濕性關節炎。亦揭示含有式I化合物及至少一種載劑、稀釋劑或賦形劑之組合物。

Description

布魯頓氏(BRUTON'S)酪胺酸激酶抑制劑

本發明係關於新穎化合物之用途，該等化合物抑制Btk且適用於治療由異常B細胞活化引起之自體免疫及發炎疾病。

蛋白激酶構成人類最大酵素家族之一且藉由將磷酸基添加至蛋白質中來調節許多不同信號傳導過程(T.Hunter,Cell 1987 50：823-829)。特定言之，酪胺酸激酶使蛋白質在酪胺酸殘基之酚系部分上發生磷酸化。酪胺酸激酶家族包括控制細胞生長、遷移及分化之成員。異常激酶活性與多種人類疾病有關，包括癌症、自體免疫疾病及發炎疾病。因為蛋白激酶為細胞信號傳導之關鍵調節因子之一，所以其為小分子激酶抑制劑調節細胞功能提供標靶且因此形成良好藥物設計標靶。除治療激酶介導之疾病過程以外，激酶活性之選擇性及有效抑制劑亦適用於研究細胞信號傳導過程及鑑別具有治療重要性之其他細胞標靶。

有足夠證據表明，B細胞在自體免疫及/或發炎疾病之發病機理中起關鍵作用。消耗B細胞之基於蛋白質之治療劑(諸如美羅華(Rituxan))可有效針對自體抗體引發之發炎疾病，諸如類風濕性關節炎(Rastetter等人，Annu Rev Med 2004 55：477)。因此，在B細胞活化中起作用之蛋白激酶之抑制劑應為適用於B細胞介導之疾病病理(諸如產生自體抗體)的治療劑。

經由B細胞受體(BCR)傳導信號可控制一系列B細胞反應，包括增殖及分化成產生成熟抗體之細胞。BCR為B細胞活性之關鍵調節點，且異常信號傳導會引起B細胞增殖失調及形成致病性自體抗體，導致多種自體免疫及/或發炎疾病。布魯頓氏酪胺酸激酶(Bruton's Tyrosine Kinase，Btk)為非BCR相關之激酶，其最接近膜且緊接於BCR下游。已證實缺乏Btk會阻斷BCR信號傳導，且因此抑制Btk可為阻斷B細胞介導之疾病過程的適用治療方法。

Btk為酪胺酸激酶之Tec家族成員，且已顯示其為早期B細胞發育及成熟B細胞活化及存活之關鍵調節因子(Khan等人，Immunity 1995 3：283；Ellmeier等人，J.Exp.Med.2000 192：1611)。人類Btk突變引起病狀X性聯無γ球蛋白血症(XLA)(Rosen等人，New Eng.J.Med.1995 333：431及Lindvall等人，Immunol.Rev.2005 203：200中評述)。該等患者免疫功能不全且顯示B細胞成熟異常、免疫球蛋白及周邊B細胞含量降低、與T細胞無關之免疫反應減少以及繼BCR刺激後之鈣移動減弱。

Btk缺乏型小鼠模型亦已提供Btk於自體免疫及發炎疾病中之作用的證據。在全身性紅斑性狼瘡症(SLE)之臨床前鼠類模型中，Btk缺乏型小鼠顯示疾病進展得到顯著改善。此外，Btk缺乏型小鼠對膠原蛋白誘導之關節炎具有抗性(Jansson及Holmdahl Clin.Exp.Immunol.1993 94：459)。選擇性Btk抑制劑已在小鼠關節炎模型中顯示劑量依賴性功效(Z.Pan等人，Chem.Med Chem.2007 2：58-61)。

Btk亦由疾病過程中可能涉及之除B細胞以外的細胞表現。舉例而言，Btk由肥大細胞表現且Btk缺乏型骨髓源肥大細胞顯示抗原誘導之脫粒受損(Iwaki等人，J.Biol.Chem.2005 280：40261)。此顯示Btk可用於治療病理性肥大細胞反應，諸如過敏及哮喘。來自XLA患者之單核細胞(其中缺乏Btk活性)亦顯示刺激後之TNF α產生減少(Horwood等人，J Exp Med 197：1603,2003)。因此，小分子Btk抑制劑可調節TNF α介導之發炎。又，已報導Btk在細胞凋亡中起作用(Islam及Smith Immunol.Rev.2000 178：49，)且因此Btk抑制劑適用於治療某些B細胞淋巴瘤及白血病(Feldhahn等人，J.Exp.Med.2005 201：1837)。

本申請案提供式I之Btk抑制劑化合物、其使用方法，如下文所述：本申請案提供式I化合物，

其中：為單鍵或雙鍵；X為CH、CH₂或N；R為H、-R¹、-R¹-R²-R³、-R¹-R³或-R²-R³；R¹為芳基、雜芳基、雙環雜芳基、環烷基或雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、氰基、側氧基或低碳數鹵烷基取代；R²為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR^2'、-NHC(=O)O、-C(R^2')₂、-O、-S、-C(=NH)NR^2'或-S(=O)₂；各R^2'獨立地為H或低碳數烷基； R³為H或R⁴；R⁴為低碳數烷基、低碳數鹵烷基、低碳數烷氧基、胺基、低碳數烷基胺基、環烷基胺基、低碳數二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基、螺雜環烷基或雙環螺雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、鹵基、低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、低碳數烷醯基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、磺醯基、低碳數烷基磺醯基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基、鹵基低碳數烷氧基、雜環烷基或鹵基低碳數烷基取代，其中兩個低碳數烷基可共同形成環；Y⁴為Y^4a、Y^4b、Y^4c或Y^4d；Y^4a為H或鹵素；Y^4b為低碳數烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；Y^4c為低碳數環烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數烷基、低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；及Y^4d為胺基，其視情況經一或多個低碳數烷基、烷氧基低碳數烷基或羥基低碳數烷基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。

本申請案提供一種治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。

本申請案提供一種醫藥組合物，其包含式I化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。

定義

如本文所用之短語「一」實體係指一或多個該實體；例如，一種化合物係指一或多種化合物或至少一種化合物。因此，術語「一」、「一或多」與「至少一」可在本文中互換使用。

片語「如上文所定義」係指如【發明內容】或最寬泛的【申請專利範圍】中所提供之各基團的最寬泛定義。在下文提供之所有其他實施例中，各實施例中可存在且未經明確定義之取代基保留【發明內容】中所提供之最寬泛定義。

如本說明書中所用，不管是在申請專利範圍之連接詞(transitional phrase)中還是在其主體中，術語「包含」應解釋為具有開放性含義。亦即，該術語應解釋為與「至少具有」或「至少包括」等詞同義。當用於關於方法之上下文中時，術語「包含」意謂該方法包括至少所敍述之步驟，但可能包括其他步驟。當於化合物或組合物之情形下使用時，術語「包含」意謂該化合物或組合物至少包括所述特徵或組分，但亦可包括其他特徵或組分。

除非另外明確說明，否則如本文所用之詞「或」係以「及/或」之「包括性」意義而非「非此即彼」之「排他性」意義使用。

本文中術語「獨立」係用於表示變數應用於任一種狀況中，不管同一化合物中具有相同或不同定義之變數之存在或不存在。因此，在R"出現2次且定義為「獨立碳或氮」之化合物中，兩個R"均可為碳，兩個R"均可為氮或一個R"可為碳且另一個為氮。

當任何變數在描繪及說明本發明所採用或所主張之化合物之任何部分或化學式中出現一次以上時，其每次出現時的定義與其另一次出現時的定義無關。又，只有當該等組合產生穩定化合物時可允許取代基及/或可變部分之組合。

鍵末端之符號「*」或穿過一鍵繪製之「」各指官能基或其他化學部分與該官能基或其他化學部分所屬分子之其餘部分的連接點。因此，舉例而言：MeC(=O)OR⁴其中R⁴=或MeC(=O)O。

繪製至環系統中之鍵(與在各別頂點處連接相對)表明該鍵可與合適的環原子中之任一者連接。

如本文所用之術語「視情況選用」或「視情況」意謂隨後描述的事件或情況可(但並非必需)發生且該描述包括該事件或情況發生之情形及該事件及事件或情況未發生之情形。舉例而言，「視情況經取代」意謂視情況經取代之部分可併有氫原子或取代基。

片語「視情況選用之鍵」意謂該鍵可存在或可不存在，且該描述包括單鍵、雙鍵或三鍵。若某一取代基被指定為「一鍵」或「不存在」，則與該取代基連接之原子被直接連接。

本文中使用之術語「約」意謂近似、在範圍內、粗略地或左右。當術語「約」與數值範圍聯合使用時，可通過上下拓展已設定數量值的界限來修訂該範圍。通常，本文中使用的術語「約」在20%偏差上下修訂所述數值。

某些式I化合物可展現互變異構現象(tautomerism)。互變異構化合物可以兩種或兩種以上的可互相轉化的種類存在。質子移變互變異構體係由於在兩個原子之間共價鍵結之氫原子的遷移產生。互變異構體通常呈現為平衡狀態且試圖分離個別互變異構體通常產生混合物，其化學性質及物理性質符合化合物之混合物。平衡位置取決於分子內的化學特徵。舉例而言，在許多脂族醛與脂族酮(諸如乙醛)中，主要形式為酮基形式；而在酚中，主要形式為烯醇形式。常見質子轉移互變異構體包括酮/烯醇(-C(=O)-CH--C(-OH)=CH-)、醯胺/亞胺酸(- C(=O)-NH--C(-OH)=N-)及脒(-C(=NR)-NH--C(-NHR)=N-)互變異構體。後兩者在雜芳基及雜環中尤其常見且本發明涵蓋該等化合物之所有互變異構形式。

除非另作定義，否則本文所使用之科技名詞具有一般熟習本發明所屬技術者通常所瞭解之含義。本文提及熟習此項技術者已知之各種方法及物質。闡述藥理學之一般原理的標準參考資料包括Goodman及Gilman之The Pharmacological Basis of Therapeutics，第10版，McGraw Hill Companies Inc.,New York(2001)。熟習此項技術者已知之任何適合材料及/或方法可用於實施本發明。然而，描述較佳物質及方法。除非另有說明，否則以下描述及實例中所參考之物質、試劑及其類似物可由市售來源獲得。

可隨附本文所述之定義以形成化學相關組合，諸如「雜烷基芳基」、「鹵烷基雜芳基」、「芳基烷基雜環基」、「烷基羰基」、「烷氧基烷基」及其類似組合。當術語「烷基」用作跟隨另一術語之詞尾時，如在「苯基烷基」或「羥基烷基」中，此意欲指如上文所定義之烷基經1至2個選自其他經特定命名之基團之取代基取代。因此，舉例而言，「苯基烷基」係指具有1至2個苯基取代基之烷基，且因此包括苯甲基、苯乙基及聯苯。「烷基胺基烷基」為具有一至兩個烷基胺基取代基之烷基。「羥基烷基」包括2-羥基乙基、2-羥基丙基、1-(羥基甲基)-2-甲基丙基、2-羥基丁基、2,3-二羥基丁基、2-(羥基甲基)、3-羥基丙基等。因此，如本文所用之術語「羥基烷基」用於定義下文所定義之雜烷基中之一部分。術語-(芳)烷基係指未經取代之烷基或芳烷基。術語(雜)芳基係指芳基或雜芳基。

如本文所用之術語「螺環烷基」意謂螺環環烷基，諸如螺[3.3]庚烷。如本文所用之術語螺雜環烷基意謂螺環雜環烷基，諸如2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷。

如本文所用之術語「醯基」表示式-C(=O)R之基團，其中R為氫或如本文所定義之低碳數烷基。如本文所用之術語「烷基羰基」表示式C(=O)R之基團，其中R為如本文所定義之烷基。術語C_1-6醯基係指含有1至6個碳原子之基團-C(=O)R。如本文所用之術語「芳基羰基」意謂式C(=O)R之基團，其中R為芳基；如本文所用之術語「苯甲醯基」為R為苯基之「芳基羰基」。

如本文所用之術語「酯」表示式-C(=O)OR之基團，其中R為如本文所定義之低碳數烷基。

如本文所用之術語「烷基」表示含有1至10個碳原子無支鏈或有支鏈、飽和、單價烴殘基。術語「低碳數烷基」表示含有1至6個碳原子之直鏈或支鏈烴殘基。如本文所用之「C₁-₁₀烷基」係指包含1至10個碳之烷基。烷基之實例包括(但不限於)低碳數烷基，其包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基或戊基、異戊基、新戊基、己基、庚基及辛基。

當術語「烷基」用作跟隨另一術語之詞尾時，如在「苯基烷基」或「羥基烷基」中，此意欲指如上文所定義之烷基經1至2個選自其他經特定命名之基團之取代基取代。因此，舉例而言，「苯基烷基」表示基團R'R"-，其中R'為苯基，且R"為如本文所定義之伸烷基，條件為苯基烷基部分之連接點將在伸烷基上。芳基烷基之實例包括(但不限於)苯甲基、苯乙基、3-苯基丙基。類似地解釋術語「芳基烷基」或「芳烷基」，但R'為芳基除外。類似地解釋術語「(雜)芳基烷基」或「(雜)芳烷基」，但R'視情況為芳基或雜芳基除外。

術語「鹵烷基」或「鹵基-低碳數烷基」或「低碳數鹵烷基」係指含有1至6個碳原子之直鏈或分支鏈烴殘基，其中一或多個碳原子經一或多個鹵素原子取代。

除非另有說明，否則如本文所用之術語「伸烷基」表示具有1至 10個碳原子之二價飽和直鏈烴基(例如(CH₂)_n)或具有2至10個碳原子之分支鏈飽和二價烴基(例如-CHMe-或-CH₂CH(i-Pr)CH₂-)。除了在亞甲基之情形下，伸烷基之開放價不與同一原子連接。伸烷基之實例包括(但不限於)亞甲基、伸乙基、伸丙基、2-甲基-伸丙基、1,1-二甲基-伸乙基、伸丁基、2-乙基伸丁基。

如本文所用之術語「烷氧基」意謂-O-烷基，其中烷基如上文所定義，諸如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、第三丁氧基、戊氧基、己氧基，包括其異構體。如本文所用之「低碳數烷氧基」表示具有如前文所定義之「低碳數烷基」之烷氧基。如本文所用之「C₁-₁₀烷氧基」係指其中烷基為C_1-10之-O-烷基。

術語「PCy₃」係指經三個環狀部分三取代之膦。

術語「鹵基烷氧基」或「鹵基低碳數烷氧基」或「低碳數鹵基烷氧基」係指一或多個碳原子經一或多個鹵素原子取代之低碳數烷氧基。

如本文所用之術語「羥基烷基」表示如本文所定義之烷基中不同碳原子上之1至3個氫原子經羥基置換。

如本文所用之術語「烷基磺醯基」及「芳基磺醯基」係指式-S(=O)₂R之基團，其中R分別為烷基或芳基，且烷基及芳基如本文所定義。如本文所用之術語「雜烷基磺醯基」表示式-S(=O)₂R之基團，其中R為如本文所定義之「雜烷基」。

如本文所用之術語「烷基磺醯胺基」及「芳基磺醯胺基」係指式-NR'S(=O)₂R之基團，其中R分別為烷基或芳基，R'為氫或C_1-3烷基且烷基及芳基如本文所定義。

如本文所用之術語「環烷基」係指含有3至8個碳原子之飽和碳環，亦即環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基。如本文所用之「C_3-7環烷基」係指在碳環中包含3至7個碳之環烷基。

如本文所用之術語羧基-烷基係指一個氫原子經羧基置換的烷基部分，條件為雜烷基之連接點經過碳原子。術語「羧基」係指-CO₂H部分。

如本文所用之術語「雜芳基」或「雜芳族」意謂具有5至12個環原子且具有至少一個芳族或部分不飽和環(每個環含有4至8個原子)、合併有一或多個N、O或S雜原子、其餘環原子為碳之單環或雙環基團，條件為雜芳基之連接點將在芳族或部分不飽和環上。如熟習此項技術者所熟知，雜芳基環之芳族特徵少於其全碳對應部分。因此，對於本發明，雜芳基僅需要具有一定程度之芳族特徵。雜芳基部分之實例包括具有5至6個環原子及1至3個雜原子之單環芳族雜環，包括(但不限於)吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噁嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、4,5-二氫-噁唑基、5,6-二氫-4H-[1,3]噁唑基、異噁唑、噻唑、異噻唑、三唑啉、噻二唑及噁二唑啉，其可視情況經一或多個，較佳為1或2個選自以下之取代基取代：羥基、氰基、烷基、烷氧基、硫基、低碳數鹵基烷氧基、烷基硫基、鹵基、低碳數鹵基烷基、烷基亞磺醯基、烷基磺醯基、鹵素、胺基、烷基胺基、二烷基胺基、胺基烷基、烷基胺基烷基及二烷基胺基烷基、硝基、烷氧羰基及胺甲醯基、烷基胺甲醯基、二烷基胺甲醯基、芳基胺甲醯基、烷基羰基胺基及芳基羰基胺基。雙環部分之實例包括(但不限於)喹啉基、異喹啉基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑、苯并異噁唑、苯并噻唑、啶基、5,6,7,8-四氫-[1,6]啶基及苯并異噻唑。雙環部分可視情況在任一環上經取代，然而連接點在含有雜原子之環上。

除非另有說明，否則如本文所用之術語「雜環基」、「雜環烷基」或「雜環」表示由一或多個環，較佳為1至2個環(包括螺環環系統)組成，每個環有3至8個原子，合併有一或多個環雜原子(選自N、O或S(O)_0-2)的單價飽和環狀基團，其可視情況經一或多個，較佳為1或 2個選自以下之取代基獨立地取代：羥基、側氧基、氰基、低碳數烷基、低碳數烷氧基、低碳數鹵烷氧基、烷基硫基、鹵基、低碳數鹵烷基、羥基烷基、硝基、烷氧羰基、胺基、烷基胺基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、烷基胺基磺醯基、芳基胺基磺醯基、烷基磺醯基胺基、芳基磺醯基胺基、烷基胺基羰基、芳基胺基羰基、烷基羰基胺基、芳基羰基胺基及其離子形式。雜環基之實例包括(但不限於)嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、氮雜環丁烷基、吡咯啶基、六氫氮雜卓基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、噁唑啶基、噻唑啶基、異噁唑啶基、四氫哌喃基、硫代嗎啉基、啶基及咪唑啉基，及其離子形式。實例亦可為雙環，諸如3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛烷、2,5-二氮雜-雙環[2.2.2]辛烷或八氫-吡嗪并[2,1-c][1,4]噁嗪。

Btk抑制劑

本申請案提供式I化合物，

其中：為單鍵或雙鍵；X為CH、CH₂或N；R為H、-R¹、-R¹-R²-R³、-R¹-R³或-R²-R³；R¹為芳基、雜芳基、雙環雜芳基、環烷基或雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、氰基、側氧基或低碳數鹵烷基取代；R²為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR^2'、-NHC(=O)O、-C(R^2')₂、-O、-S、-C(=NH)NR^2'或-S(=O)₂；各R^2'獨立地為H或低碳數烷基；R³為H或R⁴；R⁴為低碳數烷基、低碳數鹵烷基、低碳數烷氧基、胺基、低碳數烷基胺基、環烷基胺基、低碳數二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基、螺雜環烷基或雙環螺雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、鹵基、低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、低碳數烷醯基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、磺醯基、低碳數烷基磺醯基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基、鹵基低碳數烷氧基、雜環烷基或鹵基低碳數烷基取代，其中兩個低碳數烷基可共同形成環；Y⁴為Y^4a、Y^4b、Y^4c或Y^4d；Y^4a為H或鹵素；Y^4b為低碳數烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；Y^4c為低碳數環烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數烷基、低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；及Y^4d為胺基，其視情況經一或多個低碳數烷基、烷氧基低碳數烷基或羥基低碳數烷基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。

此外應理解，如本文中揭示之每一個與特定殘基R、R¹、R²、R³、R⁴、X、R^2、及Y⁴有關的實施例可與如本文中揭示之任何其他與另一殘基R、R¹、R²、R³、R⁴、X、R^2、及Y⁴有關的實施例組合。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；及X為N。

本申請案提供式I化合物，其中為單鍵；及X為CH₂。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-S(=O)₂；R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(CH₃)₂；R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基或視情況經一或多個低碳數烷基取代之雜環烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；R為-R¹-R²-R³；R¹為苯基或吡啶基；R²為-C(=O)；R³為R⁴；及R⁴為嗎啉或哌嗪，其視情況經一或多個低碳數烷基取代。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；及Y⁴為第三丁基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為CH；及Y⁴為

其中，Y⁵及Y⁶獨立地為H、低碳數烷基或低碳數鹵烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；及Y⁴為

其中，Y⁵為H、鹵素、低碳數烷基或低碳數鹵烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；及Y⁴為

其中，Y⁵及Y⁶獨立地為H或低碳數烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；Y⁴為第三丁基；R為-R¹-R³；R¹為吡啶基或吡唑并吡嗪；R³為R⁴；及R⁴為視情況經取代之低碳數烷基、雜環烷基或烷基雜環烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；Y⁴為第三丁基；R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(CH₃)₂；R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基或視情況經一或多個低碳數烷基取代之雜環烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；Y⁴為第三丁基；R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(=O)；R³為R⁴；及R⁴為視情況經取代之雜環烷基或雙環螺雜環烷基。

本申請案提供式I化合物，其中為雙鍵；X為N；Y⁴為第三丁基；R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(=O)；R³為R⁴；及R⁴為視情況經取代之嗎啉或哌嗪。

本申請案提供式I化合物，其係選自由以下組成之群：2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；2-{3-[5-(5-氮雜環丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-2-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈；6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(嗎啉-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈； 6-第三丁基-2-[2-羥基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧雜環丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-2-羥基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；及2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈。

本申請案提供治療發炎性或自體免疫病狀之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療類風濕性關節炎之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療哮喘之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I化合物。

本申請案提供醫藥組合物，其包含式I化合物。

本申請案提供醫藥組合物，其包含式I化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。

本申請案提供式I化合物之用途，其係用於製造用以治療發炎性病症之藥劑。

本申請案提供式I化合物之用途，其係用於製造用以治療自體免疫病症之藥劑。

本申請案提供式I化合物之用途，其係用於製造用以治療類風濕性關節炎之藥劑。

本申請案提供式I化合物之用途，其係用於製造用以治療哮喘之藥劑。

本申請案提供如上文所描述之化合物之用途，其係用於治療發炎性或自體免疫病症。

本申請案提供如上文所描述之化合物之用途，其係用於治療類風濕性關節炎。

本申請案提供如上文所描述之化合物之用途，其係用於治療哮喘。

本申請案提供如上文所描述之化合物，其係用於治療發炎性或自體免疫病症。

本申請案提供如上文所描述之化合物，其係用於治療類風濕性關節炎。

本申請案提供如上文所描述之化合物，其係用於治療哮喘。

本申請案提供本文中所描述之化合物、方法或組合物。

本申請案提供治療發炎性或自體免疫病症之方法，其包括投與有需要之患者治療有效量之式I'之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供治療關節炎之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I'之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供治療哮喘之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I'之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供抑制B細胞增殖之方法，其包含投與有需要之患者治療有效量之式I'之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供抑制Btk活性之方法，其包含投與具有任一種式I'之Btk抑制劑化合物，其中Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中呈現50微莫耳或50微莫耳以下之IC₅₀。

在上述方法之一個變體中，Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中呈現100奈莫耳或100奈莫耳以下之IC₅₀。

在上述方法之另一變體中，化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現10奈莫耳或10奈莫耳以下之IC₅₀。

本申請案提供治療發炎性病狀之方法，其包含共同投與有需要之患者治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。

本申請案提供治療關節炎之方法，其包含共同投與有需要之患者治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。

本申請案提供治療淋巴瘤或BCR-ABL1⁺白血病細胞之方法，其藉由向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物來達成。

本申請案提供醫藥組合物，其包含式I之Btk抑制劑化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。

本申請案提供式I'化合物之用途，其用於製造用以治療自體免疫病症之藥劑。

本申請案提供本文中所描述之化合物、方法或組合物。

化合物及製備方法

下表中提供涵蓋於本發明且屬於本發明之範疇內之代表性化合物的實例。提供該等實例及隨後之製備方法使得熟習此項技術者能夠更清楚地理解及實踐本發明。其不應視為限制本發明之範疇，而僅為本發明之說明及代表。

通常，本申請案中所用之命名法係基於4.0版AUTONOM^TM，即用於產生IUPAC系統命名之Beilstein Institute電腦化系統。若所描述之結構與該結構所給出之名稱之間存在差異，則以所描述之結構為準。此外，若結構或結構之一部分之立體化學未以例如粗體或短劃線表示，則該結構或該結構之部分應理解為包括其所有的立體異構體。

表I描繪通式I之噠嗪酮化合物的實例：

一般合成流程

本申請案提供製備式II化合物之方法，其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯，其包含以下步驟：

在雙聯頻哪醇硼酸酯、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式I化合物加熱至約40℃至150℃。

本申請案提供上述方法，其中膦為PCy3、烷基單膦化合物、芳基單膦化合物、烷基二磷化合物或芳基二膦化合物。

本申請案提供上述方法，其中鹼為無機鹼，包括碳酸鉀、碳酸銫、磷酸鉀及乙酸鉀，或胺鹼，包括二環己基胺及三乙胺。

本申請案提供上述方法，其中鈀催化劑為乙酸鈀(II)或雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)、參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)或其類似物。

本申請案提供製備式IV化合物之方法，其包含以下步驟：

a)在式III化合物、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式II化合物(其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯或兩者之混合物)加熱至約40℃至150℃；及b)在約室溫與約40℃之間的溫度下在溶劑(諸如甲醇)中用鹼(諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀或碳酸鉀或碳酸銫)處理步驟a)之產物。

本申請案提供製備式IV化合物之方法，其包含以下步驟：

a)在雙聯頻哪醇硼酸酯、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式I化合物加熱至約40℃至150℃；b)在式VII化合物、鈀催化劑、鹼及膦存在下將未分離之步驟a)產物與式III化合物一起加熱至約40℃至150℃；及c)在約室溫與約40℃之間的溫度下在溶劑(諸如甲醇)中用鹼(諸如氫氧化鈉或氫氧化鉀或碳酸鉀或碳酸銫)處理步驟b)之產物。

本申請案提供製備式IV化合物之方法，其包含以下步驟：

a)在式V化合物、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式II化合物(其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯或兩者之混合物)加熱至約40℃至150℃；及b)在約室溫之溫度下在溶劑(諸如甲醇或甲醇與水之混合物)中用還原劑(諸如硼氫化鈉或其類似物)處理步驟a)之產物。

本申請案提供製備式VII化合物之方法，其包含以下步驟：

a)在式VI化合物、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式II化合物(其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯或兩者之混合物)加熱至約40℃至150℃；及b)在約室溫之溫度下在溶劑(諸如甲醇或甲醇與水之混合物)中，用還原劑(諸如硼氫化鈉或其類似物)處理步驟a)之產物。

本申請案提供製備式VIII化合物之方法，其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯，其包含以下步驟：

在雙聯頻哪醇硼酸酯、鈀催化劑、鹼及膦存在下加熱式V化合物。

本申請案提供製備式IV化合物之方法，其包含以下步驟：

a)在式I化合物、鈀催化劑、鹼及膦存在下將式VIII化合物(其中Y₁為酸或頻哪醇酸酯或兩者之混合物)加熱至約40℃至150℃；及b)在約室溫之溫度下在溶劑(諸如甲醇或甲醇與水之混合物)中用還原劑(諸如硼氫化鈉或其類似物)處理步驟a)之產物。

醫藥組合物及投藥

本發明之化合物可以多種口服劑型及載劑調配。口服投藥可為錠劑、塗覆錠劑、糖衣藥丸、硬明膠膠囊與軟明膠膠囊、溶液、乳液、糖漿或懸浮液之形式。本發明之化合物當藉由其他給藥途徑投藥時亦為有效的，其他給藥途徑包括連續(靜脈滴注)局部非經腸、肌內、靜脈內、皮下、經皮(其可包括穿透增強劑)、經頰、經鼻、吸入及栓劑投藥。較佳投藥方式通常為使用便利的每日口服給藥方式，該方式可根據病痛程度及患者對活性成分的反應來調節。

本發明之化合物以及其醫藥學上可使用之鹽，可與一或多種習知賦形劑、載劑或稀釋劑一同配製成醫藥組合物及單位劑型之形式。醫藥組合物及單位劑型可包含習知比例之習知成分，其中有或無其他活性化合物或成分，且單位劑型可含有與待使用之預期每日劑量範圍相對應的任何合適有效量之活性成分。醫藥組合物可以以下形式使用：固體，諸如錠劑或填充膠囊；半固體；散劑；持續釋放調配物；或液體，諸如供口服用之溶液、懸浮液、乳液、酏劑或填充膠囊；或呈供經直腸或經陰道投藥之栓劑形式；或呈供非經腸使用之無菌可注射溶液形式。典型製劑含有約5%至約95%的活性化合物(w/w)。術語「製劑」或「劑型」意欲包括活性化合物之固體調配物及液體調配物且熟習此項技術者應瞭解活性成分可以不同的製劑存在，此取決於目標器官或組織及所需劑量及藥物動力學參數。

如本文中所使用之術語「賦形劑」係指適用於製備醫藥組合物、一般情況下安全、無毒性且在生物學上及其他方面皆無不合需要的化合物，且該化合物包括可為獸醫學用途以及人類醫藥用途所接受的賦形劑。本發明之化合物可單獨投與，但通常將其與一或多種根據所需投藥途徑及標準醫藥實務所選擇之適當醫藥賦形劑、稀釋劑或載劑混合投與。

「醫藥學上可接受」意謂適用於製備通常安全、無毒性且既非生物學上不合需要亦非其他方面不合需要之醫藥組合物且包括對於獸醫學以及人類醫藥用途而言可接受者。

活性成分之「醫藥學上可接受之鹽」形式亦可初始給予活性成分非鹽形式所沒有之所需藥物動力學特性且甚至可積極影響活性成分在體內關於其治療活性之藥效學。片語化合物之「醫藥學上可接受之鹽」意謂醫藥學上可接受且具有親本化合物之所需藥理學活性的鹽。該等鹽包括：(1)與無機酸所形成之酸加成鹽，無機酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及類似酸；或與有機酸所形成之酸加成鹽，有機酸諸如乙酸、丙酸、己酸、環戊烷丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、丁二酸、羥基丁二酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、1,2-乙烷-二磺酸、2-羥基乙烷磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基二環[2.2.2]-辛-2-烯-1-甲酸、葡庚糖酸、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、第三丁基乙酸、十二烷基硫酸、葡糖酸、麩胺酸、羥萘甲酸、水楊酸、硬脂酸、黏康酸及類似酸；或(2)當存在於親本化合物中的酸質子由金屬離子(例如鹼金屬離子、鹼土離子或鋁離子)置換所形成的鹽；或與有機鹼(諸如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、緩血酸胺、N-甲基葡萄胺及類似鹼)配位時所形成的鹽。

固體形式製劑包括散劑、錠劑、丸劑、膠囊、扁膠劑、栓劑及可分散性顆粒。固體載劑可為一種或多種亦可充當稀釋劑、調味劑、增溶劑、潤滑劑、懸浮劑、黏合劑、防腐劑、錠劑崩解劑或囊封材料的物質。在散劑中，載劑通常為與細粉狀活性組分混合之細粉狀固體。在錠劑中，活性組分通常與具有必要黏合力之載劑以合適比例混合且壓製成所需形狀及尺寸。合適載劑包括(但不限於)碳酸鎂、硬脂酸鎂、滑石粉、糖、乳糖、果膠、糊精、澱粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、低熔點蠟、可可脂及類似載劑。除活性組分之外，固體形式製劑亦可含有著色劑、調味劑、穩定劑、緩衝劑、人造及天然甜味劑、分散劑、增稠劑、增溶劑及類似製劑。

液體調配物亦適用於口服，包括乳液、糖漿、酒劑、水溶液及水性懸浮液。該等調配物包括旨在臨用前可轉化為液體形式製劑的固體形式製劑。乳液可製備於溶液中，例如丙二醇水溶液中，或可含有諸如卵磷脂、去水山梨糖醇單油酸酯或阿拉伯膠之乳化劑。水溶液可藉由將活性組分溶解於水中且添加適當的著色劑、調味劑、穩定劑及增稠劑而製備。水性懸浮液可藉由以諸如天然或合成膠、樹脂、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及其他熟知懸浮劑之黏性材料將細粉狀活性組分分散於水中來製備。

本發明之化合物可經調配用於非經腸投藥(例如藉由注射，例如快速注射或連續輸注)，且可以單位劑量形式存在於安瓶、預充填注射器、小容量輸注或與所添加之防腐劑一起存在於多劑量容器中。組合物可採用以下形式：諸如油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液，例如聚乙二醇水溶液。油性或非水性載劑、稀釋劑、溶劑或媒劑之實例包括丙二醇、聚乙二醇、植物油(例如橄欖油)及可注射有機酯(例如油酸乙酯)，且可含有諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑或懸浮劑、穩定劑及/或分散劑之調配劑。或者，活性成分可呈藉由無菌分離無菌固體或藉由自溶液凍乾而獲得之散劑形式，以供在使用前以合適之媒劑(例如無菌無熱原質水)復原。

本發明之化合物可調配為油膏、乳膏或洗液，或調配為經皮貼片，以便局部投藥至表皮。軟膏及乳膏可(例如)以添加有合適之增稠劑及/或膠凝劑的水性或油性基質調配。洗劑可以水性或油性基質調配且通常亦將含有一或多種乳化劑、穩定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。適於口中之局部投藥的調配物包括：口含劑，其包含於調味基質(通常為蔗糖與阿拉伯膠或黃蓍膠)中之活性劑；片劑，其包含於惰性基質(諸如明膠與甘油或蔗糖與阿拉伯膠)中之活性成分；及洗口藥，其包含於適當液體載劑中之活性成分。

本發明之化合物可調配為栓劑以便投藥。首先使諸如脂肪酸甘油酯混合物或可可脂之低熔點蠟熔融且(例如)藉由攪拌使活性組分均勻分散。接著將熔融之均勻混合物傾入適宜尺寸之模中，使其冷卻且凝固。

本發明之化合物可經調配用於陰道投藥。除活性成分以外亦含有此項技術中已知之該等載劑的子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、發泡體或噴霧劑為適當的。

本發明之化合物可經調配用於經鼻投藥。藉由習知方式(例如用滴管、吸管或噴霧器)將溶液或懸浮液直接施用於鼻腔。調配物可以單劑量或多劑量形式提供。在滴管或吸管之後一狀況下，此可藉由向患者投與適當預定體積之溶液或懸浮液來實現。在噴霧器之狀況下，此可(例如)藉助於計量霧化噴射泵來實現。

本發明之化合物可調配為投藥至尤其呼吸道的氣霧劑，且該氣霧劑投藥包括鼻內投藥。化合物通常將具有(例如)約5微米或5微米以下之小粒徑。該粒徑可藉由此項技術中已知之方式，例如藉由微粉化獲得。活性成分係於具有合適推進劑之加壓包裝中提供，該推進劑為諸如氯氟碳化物(CFC)(例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷或二氯四氟乙烷)或二氧化碳或其他合適氣體。氣溶膠亦宜含有諸如卵磷脂之界面活性劑。藥物劑量可由計量閥控制。或者，活性成分可以乾粉形式提供，例如化合物於合適粉末基質中之粉末混合物形式，該粉末基質為諸如乳糖、澱粉、澱粉衍生物(諸如羥丙基甲基纖維素)及聚乙烯吡咯啶酮(PVP)。粉末載劑將在鼻腔中形成凝膠。粉末組合物可以單位劑量形式存在於例如明膠或發泡包裝之膠囊或藥筒中，其中粉末可藉由吸入器投藥。

需要時，可製備具有適於活性成分之持續或控制釋放投藥之腸溶衣的調配物。舉例而言，本發明之化合物可於經皮或皮下藥物傳遞裝置中調配。當必需持續釋放化合物時且當患者對治療方案之順應性至關重要時，此等傳遞系統為有利的。在經皮遞送系統中之化合物通常附著於皮膚黏著性固體支撐物。亦可將相關化合物與穿透增強劑(例如氮酮(1-十二烷基氮雜-環庚-2-酮))合併。藉由手術或注射以皮下方式將持續釋放傳遞系統插入皮下層。皮下植入物將化合物包封於脂質可溶性薄膜，例如聚矽氧橡膠，或可生物降解的聚合物，例如聚乙酸。

合適調配物以及醫藥載劑、稀釋劑及賦形劑描述於Remington： The Science and Practice of Pharmacy 1995,E.W.Martin編，Mack Publishing Company，第19版，Easton,Pennsylvania中。熟練的調配科學工作者可在說明書之教示下修改配方以提供多種用於特定給藥途徑的調配物，而不會造成本發明之組合物不穩定或使其治療活性受損。

為了使本發明化合物更易溶於水或其他媒劑中而對該等化合物所作之改變例如可易於藉由較小改變(鹽調配物、酯化等)完成，其完全處於此項技術之一般技能範疇內。改變特定化合物之投藥途徑及給藥方案以控制本發明化合物的藥物動力學從而在患者中產生最大有益作用亦完全處於此項技術之一般技能範疇內。

如本文中所使用之術語「治療有效量」意謂減輕個體之疾病症狀所需的量。在各特定狀況中可按個別需要調節劑量。視諸如待治療疾病之嚴重程度、患者年齡及通常健康狀況、治療患者之其他藥物、投藥途徑及形式以及相關執業醫師之偏好及經歷之其他多種因素而定，該劑量可在寬限度範圍內變化。對於口服，在單一療法及/或組合療法中，每日劑量在每日每公斤體重約0.01與約1,000 mg之間應為適當的。每日劑量較佳在每日每公斤體重約0.1與約500毫克之間，更佳在每日每公斤體重0.1與約100毫克之間，且最佳在每日每公斤體重1.0與約10毫克之間。因此，對於投藥至70 kg個人，劑量範圍可為每日約7 mg至0.7 g。每日劑量可以單次劑量或分次劑量投藥，通常每日在1與5次劑量之間。通常，以小於化合物之最佳劑量的較小劑量開始治療。隨後，以微小增量增加劑量直至個體患者達到最佳效果。一般熟習本文所述疾病治療技術者能夠不經不當實驗而依賴個人學識、經驗及本申請案之揭示內容來確定本發明化合物對於既定疾病及患者的治療有效量。

醫藥製劑較佳呈單位劑型。在該形式中，製劑細分成含有適量活性組分之單位劑量。單位劑型可為包裝製劑，該包裝含有離散量之製劑，諸如包裝錠劑、膠囊及小瓶或安瓿裝散劑。又，單位劑型可為膠囊、錠劑、扁膠劑或口含劑本身，或其可為適當數目個呈包裝形式之任一種此等單位劑型。

適應症及治療方法

通式I化合物抑制布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)。藉由上游激酶活化Btk可使磷脂酶-Cγ活化，其又刺激促炎介體釋放。合併有1-側氧基-1H-酞嗪-2-基側鏈之通式I化合物相較於具有其他側鏈之類似物展現意外增強的抑制活性。苯環上之羥基甲基取代與在該位置處具有替代性取代之類似物相比提供意外增強的效能。式I化合物適用於治療關節炎及其他消炎及自體免疫疾病。式I化合物因此適用於治療關節炎。式I化合物適用於抑制細胞中之Btk及用於調節B細胞發育。本發明進一步包含醫藥組合物，其含有式I化合物與醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。

本文中所描述之化合物為激酶抑制劑，詳言之，其為Btk抑制劑。該等抑制劑可用於治療一或多種對激酶抑制起反應之疾病，包括對哺乳動物中Btk抑制及/或抑制B細胞增殖起反應之疾病。不期望受任何特定理論約束，咸信本發明化合物與Btk之相互作用可抑制Btk活性，因此產生此等化合物之醫藥效用。因此，本發明包括治療患有對抑制Btk活性及/或抑制B細胞增殖起反應之疾病的哺乳動物(例如人類) 之方法，其包含向患有該種疾病之哺乳動物投與有效量之至少一種本文提供的化學實體。有效濃度可例如藉由分析化合物之血液濃度用實驗方式確定或理論上藉由計算生物可用性來確定。除Btk之外可能受影響的其他激酶包括(但不限於)其他酪胺酸激酶及絲胺酸/蘇胺酸激酶。

激酶在控制基本細胞過程(諸如增殖、分化及死亡(細胞凋亡))之信號傳導路徑中起顯著作用。異常激酶活性已與多種疾病有關，包括多種癌症、自體免疫及/或發炎性疾病，及急性發炎反應。激酶在關鍵細胞信號傳導路徑中之多方面作用為鑑別靶向激酶及信號傳導路徑之新穎藥物提供一個重要的機會。

一個實施例包括治療患有自體免疫及/或發炎性疾病，或具有對抑制Btk活性及/或B細胞增殖起反應之急性發炎反應之患者的方法。

可使用本發明化合物及組合物來影響之自體免疫及/或發炎性疾病包括(但不限於)：牛皮癬、過敏、克羅恩氏病(Crohn's disease)、大腸急躁症、休格連氏病(Sjogren's disease)、組織移植排斥反應及移植器官之過急性排斥反應、哮喘、全身性紅斑性狼瘡症(及相關絲球體腎炎)、皮肌炎、多發性硬化症、硬皮病、血管炎(ANCA相關及其他血管炎)、自體免疫溶血性及血小板減少性狀態、古巴士德氏症候群(Goodpasture's syndrome)(及相關絲球體腎炎及肺出血)、動脈粥樣硬化、類風濕性關節炎、慢性特發性血小板減少性紫癜(ITP)、艾迪森氏病(Addison's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、糖尿病、敗血性休克及重症肌無力。

本文包括治療方法，其中至少一種本文提供之化學實體與消炎劑組合投與。消炎劑包括(但不限於)NSAID、非特異性及COX-2特異性環氧酶酵素抑制劑、金化合物、皮質類固醇、甲胺喋呤(methotrexate)、腫瘤壞死因子受體(TNF)受體拮抗劑、免疫抑制劑及甲胺喋呤。

NSAID之實例包括(但不限於)布洛芬(ibuprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、萘普生(naproxen)及萘普生鈉、雙氯芬酸、雙氯芬酸鈉與米索普魯斯托爾(misoprostol)之組合、舒林酸(sulindac)、奧沙普嗪(oxaprozin)、二氟尼柳(diflunisal)、吡羅昔康(piroxicam)、引哚美辛(indomethacin)、依託度酸(etodolac)、非諾洛芬鈣(fenoprofen calcium)、酮洛芬(ketoprofen)、萘丁美酮鈉(sodium nabumetone)、柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine)、托美汀鈉(tolmetin sodium)及羥氯喹。NSAID之實例亦包括COX-2特異性抑制劑，諸如塞內昔布(celecoxib)、伐地昔布(valdecoxib)、盧米羅可(lumiracoxib)及/或依託昔布(etoricoxib)。

在一些實施例中，消炎劑為水楊酸酯。水楊酸酯包括(但不限於)乙醯基水楊酸或阿司匹靈(aspirin)、水楊酸鈉及膽鹼及水楊酸鎂。

消炎劑亦可為皮質類固醇。舉例而言，皮質類固醇可為皮質酮、地塞米松(dexamethasone)、甲潑尼龍(methylprednisolone)、潑尼龍(prednisolone)、潑尼龍磷酸鈉或潑尼松(prednisone)。

在其他實施例中，消炎劑為金化合物，諸如硫代蘋果酸金鈉或金諾芬(auranofin)。

本發明亦包括如下實施例，其中消炎劑為代謝抑制劑，諸如二氫葉酸還原酶抑制劑，諸如甲胺喋呤或二氫乳清酸去氫酶抑制劑，諸如來氟米特(leflunomide)。

本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種消炎化合物為抗C5單株抗體(諸如艾庫組單抗(eculizumab)或培克珠單抗(pexelizumab))、TNF拮抗劑(諸如依那西普(entanercept))或英利昔單抗(infliximab)(其為抗TNFα單株抗體)。

本發明之其他實施例係關於組合，其中至少一種活性劑為免疫抑制化合物，諸如選自以下之免疫抑制化合物：甲胺喋呤、來氟米特、環孢靈(cyclosporine)、他克莫司(tacrolimus)、硫唑嘌呤(azathioprine)及黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)。

表現Btk之B細胞及B細胞前驅物已與B細胞惡性疾病之病理學有關，該等惡性疾病包括(但不限於)B細胞淋巴瘤、淋巴瘤(包括霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)及非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma))、毛狀細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、慢性及急性骨髓性白血病以及慢性及急性淋巴球性白血病。

已證實BTK為B系淋巴樣細胞中之Fas/APO-1(CD-95)死亡誘導信號傳導複合物(DISC)的抑制劑。白血病/淋巴瘤細胞之最終結果可存在於DISC活化之卡斯蛋白酶(caspase)之反促凋亡作用與涉及BTK及/或其受質之上游抗細胞凋亡調節機制之間的平衡中(Vassilev等人，J.Biol.Chem.1998,274,1646-1656)。

亦已發現BTK抑制劑適用作化學增敏劑，且因此適用於與其他化學治療劑(尤其誘導細胞凋亡之藥物)組合。可與化學增敏BTK抑制劑組合使用之其他化學治療藥物的實例包括I型拓撲異構酶抑制劑(喜樹鹼或拓朴替康(topotecan))、II型拓撲異構酶抑制劑(例如道諾黴素(daunomycin)及依託泊苷(etoposide))、烷化劑(例如環磷醯胺、美法侖(melphalan)及BCNU)、微管蛋白定向劑(例如紫杉醇(taxol)及長春鹼(vinblastine))，及生物製劑(例如抗體，諸如抗CD20抗體、IDEC 8、免疫毒素及細胞激素)。

Btk活性亦與由染色體9及22之一部分易位引起之表現bcr-abl融合基因的一些白血病相關。通常在慢性骨髓性白血病中觀測到此異常現象。Btk經bcr-abl激酶構成性磷酸化，該激酶起始下游存活信號，從而阻止bcr-abl細胞之凋亡(N.Feldhahn等人，J.Exp.Med.2005 201(11)：1837-1852)。

治療方法

本申請案提供治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療類風濕性關節炎之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療哮喘之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I化合物。

本申請案提供治療發炎及/或自體免疫病狀之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供治療關節炎之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供治療哮喘之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供抑制B細胞增殖之方法，其包含向有需要之患者投與治療有效量之式I之Btk抑制劑化合物。

本申請案提供抑制Btk活性之方法，其包含投與式I之任一種Btk抑制劑化合物，其中Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現50微莫耳濃度或50微莫耳濃度以下之IC₅₀。

在上述方法之一個變體中，Btk抑制劑化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現100奈莫耳濃度或100奈莫耳濃度以下之IC₅₀。

在上述方法之另一變體中，化合物在Btk活性之活體外生物化學分析法中展現10奈莫耳濃度或10奈莫耳濃度以下之IC₅₀。

本申請案提供治療發炎病狀之方法，其包含向有需要之患者共投與治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。

本申請案提供治療關節炎之方法，其包含向有需要之患者共投與治療有效量之消炎化合物與式I之Btk抑制劑化合物的組合。

實例縮寫

常用縮寫包括：乙醯基(Ac)、偶氮-雙-異丁醯基腈(AIBN)、大氣壓(Atm)、9-硼雙環[3.3.1]壬烷(9-BBN或BBN)、2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯萘(BINAP)、第三丁氧基羰基(Boc)、焦碳酸二-第三丁酯或boc酐(BOC₂O)、苯甲基(Bn)、丁基(Bu)、化學文摘登記號(Chemical Abstracts Registration Number；CASRN)、苯甲氧基羰基(CBZ或Z)、羰基二咪唑(CDI)、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)、三氟化二乙基胺基硫(DAST)、二苯亞甲基丙酮(dba)、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]壬-5-烯(DBN)、1,8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯(DBU)、N,N'-二環己基碳化二亞胺(DCC)、1,2-二氯乙烷(DCE)、二氯甲烷(DCM)、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)、偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)、偶氮二甲酸二-異丙酯(DIAD)、氫化二異丁基鋁(DIBAL或DIBAL-H)、二-異丙基乙胺(DIPEA)、N,N-二甲基乙醯胺(DMA)、4-N,N-二甲基胺基吡啶(DMAP)、N,N-二甲基甲醯胺(DMF)、二甲亞碸(DMSO)、1,1'-雙-(二苯膦基)乙烷(dppe)、1,1'-雙-(二苯膦基)二茂鐵(dppf)、1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDCI)、2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)、乙基(Et)、乙酸乙酯(EtOAc)、乙醇(EtOH)、2-乙氧基-2H-喹啉-1-甲酸乙酯(EEDQ)、乙醚(Et₂O)、異丙氧基乙烷(EtOiPr)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲(HATU)、乙酸(HOAc)、1-N-羥基苯并三唑(HOBt)、高壓液相層析 (HPLC)、異丙醇(IPA)、異丙基氯化鎂(iPrMgCl)、六甲基二矽氮烷(HMDS)、液相層析質譜分析法(LCMS)、六甲基二矽氮烷鋰(LiHMDS)、間氯過氧苯甲酸(m-CPBA)、甲醇(MeOH)、熔點(mp)、MeSO₂-(甲磺醯基或Ms)、甲基(Me)、乙腈(MeCN)、間氯過苯甲酸(MCPBA)、質譜(ms)、甲基第三丁基醚(MTBE)、甲基四氫呋喃(MeTHF)、N-溴丁二醯亞胺(NBS)、正丁基鋰(nBuLi)、N-羧基酐(NCA)、N-氯丁二醯亞胺(NCS)、N-甲基嗎啉(NMM)、N-甲基吡咯啶酮(NMP)、氯鉻酸吡錠(PCC)、二氯-((雙-二苯膦基)二茂鐵基)鈀(II)(Pd(dppf)Cl₂)、乙酸鈀(II)(Pd(OAc)₂)、參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(Pd₂(dba)₃)、重鉻酸吡錠(PDC)、苯基(Ph)、丙基(Pr)、異丙基(i-Pr)、磅/平方英尺(psi)、吡啶(pyr)、1,2,3,4,5-五苯基-1'-(二-第三丁基膦基)二茂鐵(Q-Phos)、室溫(環境溫度、rt或RT)、第二丁基鋰(sBuLi)、第三丁基二甲基矽烷基或t-BuMe₂Si(TBDMS)、氟化四-正丁基銨(TBAF)、三乙胺(TEA或Et₃N)、2,2,6,6-四甲基哌啶1-烴氧基(TEMPO)、三甲基矽烷基乙氧基甲基(SEM)、三氟甲磺酸酯基或CF₃SO₂-(Tf)、三氟乙酸(TFA)、1,1'-雙-2,2,6,6-四甲基庚烷-2,6-二酮(TMHD)、四氟硼酸O-苯并三唑-1-基-N,N,N',N'-四甲(TBTU)、薄層層析(TLC)、四氫呋喃(THF)、三甲基矽烷基或Me₃Si(TMS)、單水合對甲苯磺酸(TsOH或pTsOH)、4-Me-C₆H₄SO₂-或甲苯磺醯基(Ts)及N-胺基甲酸酯-N-羧基酐(UNCA)。包括字首正(n)、異(i-)、第二(sec-)、第三(tert-)及新(neo)在內的習知命名當與烷基部分一起使用時具有其常用的含義(J.Rigaudy及D.P.Klesney,Nomenclature in Organic Chemistry,IUPAC 1979 Pergamon Press,Oxford.)。

一般條件

可利用熟習此項技術者已知的一般合成技術及程序自市售起始物質開始製備本發明之化合物。以下概述為適用於製備該等化合物之反應流程。其他例示性說明可見於特定實例中。

製備實例

6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮

在1 L圓底燒瓶中，4-第三丁基苯甲醯氯(97.2 g，90 ml，494 mmol，當量：1.00)與CH₂Cl₂(375 ml)合併得到無色溶液。冷卻至0℃。自滴液漏斗逐滴添加2-甲基丙-2-胺(79.5 g，114 ml，1.09 mol，當量：2.2)，保持溫度低於10℃。用更多的CH₂Cl₂向下沖洗加料漏斗的側面。經3小時將反應物溫至25℃。緩慢添加4 N NaOH直至固體基本溶解(約300 mL)。分離各層。用4X CH₂Cl₂萃取水層。有機層(總共2.5 L)經Na₂SO₄乾燥且濃縮至約250 mL。形成大量沈澱物。燒瓶在冰浴中冷卻。過濾所得白色固體且用3X CH₂Cl₂及1X EtOAc洗滌得到呈針狀之白色固體(72 g)，經泵抽真空乾燥。再次將合併之濾液及洗滌物濃縮至100 mL。形成更多的晶體。冷卻。過濾且用CH₂Cl₂洗滌得到第二批白色固體(31.6 g)。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.33(s,9 H)1.47(s,9 H)5.91(br.s.,1 H)7.43(d,J=8.31 Hz,2 H)7.66(d,J=8.31 Hz,2 H)

此反應係以2×26 g分批進行且合併處理。對於每一批，使用配備有機械攪拌器、經管道連至起泡器之加料漏斗及氮氣入口的2 L三頸燒瓶。系統在乾燥箱中加熱且在N₂流下冷卻。N,4-二-第三丁基苯甲醯胺(26.2 g，112 mmol，當量：1.00)與THF(1.01 1)合併得到無色溶液。反應混合物冷卻至-78℃。在N₂流下緩慢逐滴添加含第二丁基鋰之環己烷(176 ml，1.4 M，247 mmol，當量：2.2)。得到黃色溶液。將反應混合物經1小時溫至-15℃。得到黃色懸浮液。反應混合物冷卻回至-78℃。逐滴添加無水DMF(16.4 g，17.4 ml，225 mmol，當量：2)。將反應物溫至0℃。LCMS表明反應完成。

在0℃下緩慢添加150 mL飽和NH₄Cl。反應混合物在環境溫度下靜置且接著轉移至4 L錐形瓶中且用水及EtOAc沖洗。將兩批反應物合併且接著轉移至同一個4 L錐形瓶中。

2批反應混合物之總體積為3 L略多一點。反應混合物分多份於2 L圓底燒瓶中、於旋轉蒸發器上、在50℃下小心地濃縮以避免暴沸。體積減小至約200-300 mL。

存在大量固體沈澱物。LCMS表明液體部分中不存在產物。藉由在大型燒結玻璃漏斗中過濾來收集白色固體。厚塊懸浮於漏斗中之水中且用杵棒碎裂成細粉且過濾。固體用水洗滌5次且接著在真空烘箱中在50℃下乾燥2天，得到59.6 g呈灰白色固體狀之2,5-二-第三丁基-3-羥基異吲哚啉-1-酮。進行¹H NMR且按原樣用於下一步驟中。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 7.27(s,9 H)7.53(s,9 H)8.26(d,J=11.71 Hz,1 H)11.90(d,J=11.71 Hz,1 H)13.40-13.46(m,1 H)13.47(s,1 H)13.51-13.58(m,1 H)。

在配備有加料漏斗、空氣冷卻器及氮氣入口之2 L三頸燒瓶中，將2,5-二-第三丁基-3-羥基異吲哚啉-1-酮(59.6 g，228 mmol，當量：1.00)與乙酸(868 ml)合併得到淺黃色溶液。反應物加熱至90℃。逐滴添加單水合肼(14.8 g，14.4 ml，296 mmol，當量：1.3)。反應混合物在90℃下攪拌1小時，接著反應混合物用300 mL H₂O稀釋且緩慢冷卻至25℃。LCMS證實反應完成且完全轉化成所需產物。將反應物濃縮至降低之體積(約50-100 mL)。靜置後溶液中產生無色固體。藉由過濾收集固體，用水、1X乙醚及2X乙醚/己烷洗滌若干次且真空乾燥，得到呈白色固體狀之6-第三丁基-2H-酞嗪酮(37 g，82%產率)。¹H NMR(400 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.44(s,9 H)7.66-7.73(m,1 H)7.84- 7.91(m,1 H)8.18(d,J=0.51 Hz,1 H)8.33-8.42(m,1 H)。

2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苯甲醛

在配備有N₂入口及起泡器出口及機械攪拌器的500 mL三頸燒瓶中，將6-第三丁基酞嗪-1(2H)-酮(6.46 g，31.9 mmol，當量：1.00)、2-氯-6-氟苯甲醛(7.6 g，47.9 mmol，當量：1.5)及碳酸鉀(8.83 g，63.9 mmol，當量：2)(細粉)與DMA(70 ml)合併得到黃色懸浮液。添加氯化四乙基銨(688 mg，4.15 mmol，當量：0.13)且將反應混合物在劇烈攪拌下在68℃(浴溫)下溫熱。在反應混合物變為溶液後，將其在此溫度下攪拌1小時。反應物繼續在75℃(浴溫)下溫熱隔夜。再添加2-氯-6-氟苯甲醛(5 g，31.9 mmol，當量：1.00)且反應混合物在75℃(浴溫)下溫熱3天。將反應混合物傾入300 mL H₂O中且用CH₂Cl₂(5×300 mL)萃取。有機層經Na₂SO₄乾燥且真空濃縮。剩餘大量DMA。將反應混合物傾入500 mL H₂O中且用乙醚(5×300 mL)萃取。醚層用鹽水洗滌，經MgSO₄乾燥，過濾且真空濃縮。當體積為約150 mL時，存在大量白色結晶物質。藉由過濾分離產物得到純產物(5.4 g)。真空濃縮濾液且使用Analogix純化系統藉由SF25-160 g管柱(用5%-25%(3：1 CH₂Cl₂/EtOAc)/己烷溶離)純化殘餘物，得到額外的4.75 g所需產物。2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苯甲醛之總產量為10.1 g(93%)。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 7.27(s,9 H)13.30(d,J=7.55 Hz,1 H)13.34-13.51(m,2 H)13.56(d,J=1.51 Hz,1 H)13.71(dd,J=8.50,1.70 Hz,1 H)14.12(s,1 H)14.21(d,J=8.31 Hz,1 H)16.20(s,1 H)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 340.8；[M+Na]⁺ 362.9。

6-第三丁基-2-(3-氯-2-羥基甲基-苯基)-2H-酞嗪-1-酮

在0℃下且在氮氣流下隨劇烈攪拌經20分鐘向2-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲醛(61 g，179 mmol，當量：1.00)於CH₂Cl₂(350 ml)及甲醇(350 ml)中之溶液中分多份添加1 g硼氫化鈉(7.45 g，197 mmol，當量：1.1)。將反應混合物溫至環境溫度且在此溫度下攪拌1小時。逐滴添加水(100 mL)，接著添加CH₂Cl₂及更多的水且分離各層。水相用CH₂Cl₂萃取3次。合併之有機層用飽和NH₄Cl洗滌且經硫酸鈉乾燥。在過濾後，濃縮黃色液體得到黃色-綠色固體。此固體用乙醚/乙酸乙酯(6：1)濕磨且用相同溶劑洗滌若干次，得到淡黃色-綠色固體。此固體在含有1%甲醇之二氯甲烷中漿化。藉由過濾收集所得白色固體，相繼用二氯甲烷及二氯甲烷/乙醚洗滌，得到呈白色固體狀之6-第三丁基-2-(3-氯-2-羥基甲基-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(28.3 g)。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.45(s,9 H)4.58(br.s.,2 H)7.31(dd,J=7.93,1.51 Hz,1 H)7.43(t,J=7.93 Hz,1 H)7.57(dd,J==8.12,1.32 Hz,1 H)7.77(d,J=1.89 Hz,1 H)7.93(dd,J=8.69,1.89 Hz,1 H)8.33(s,1 H)8.44(d,J=8.69 Hz,1 H)；LC/MS觀測值[M+H]⁺ 343.0。

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苯甲酯

向6-第三丁基-2-(3-氯-2-(羥甲基)苯基)酞嗪-1(2H)-酮(28.3 g，82.6 mmol，當量：1.00)於二氯甲烷(250 ml)中之溶液中添加三乙胺(10.9 g，10.1 ml，107 mmol，當量：1.3)、乙酸酐(11.0 g，15.1 ml，107 mmol，當量：1.3)及DMAP(252 mg，2.06 mmol，當量：0.025)且溶液在環境溫度下攪拌隔夜。將反應混合物傾入300 mL H₂O中且用CH₂Cl₂(3×250 mL)萃取。

有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮得到半固體。將半固體溶解於300 mL乙酸異丙酯中且濃縮得到微黃色固體。此固體在冷卻下用150 mL乙酸異丙酯濕磨，接著過濾且用30 mL冷的乙酸異丙酯洗滌一次且接著用50 mL 2：1己烷洗滌：乙酸異丙酯洗滌，得到呈白色蓬鬆固體狀之乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-氯-苯甲酯(23.9 g)。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.44(s,9 H)1.91(s,3 H)5.18(s,2 H)7.31-7.38(m,1 H)7.45(t,J=7.93 Hz,1 H)7.51-7.59(m,1 H)7.73(d,J=1.89 Hz,1 H)7.89(dd,J=8.69,1.89 Hz,1 H)8.25(s,1 H)8.40(d,J=8.69 Hz,1 H)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 385.0。

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯

向1 L圓底燒瓶中添加乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲酯(16.4 g，42.6 mmol，當量：1.00)及雙聯頻哪醇硼酸酯(20.6 g，81.0 mmol，當量：1.9)。將物質溶解於甲基四氫呋喃(300 ml)中且攪拌5分鐘。將混合物抽真空且用氬氣回填三次，隨後快速添加乙酸鉀(10.5 g，107 mmol，當量：2.5)以避免潮濕。添加乙酸鈀 (II)(239 mg，1.07 mmol，當量：0.025)。添加X-PHOS(1.02 g，2.13 mmol，當量：0.05)。將混合物抽真空且用氬氣回填三次。將橙黃色混合物加熱至68℃(浴溫)保持1小時。在1小時後僅形成微量所需產物。將反應溫度調節至70℃。藉由LCMS嚴密監視反應進程。反應物在此溫度下再攪拌9小時，隨後可藉由LCMS發現僅少量起始物質、微量des-Cl副產物及大部分產物且反應物仍然為淡琥珀色。反應物在70℃下再攪拌1小時以促使反應完成。顏色變為棕色。將反應物冷卻至環境溫度。將反應混合物傾入400 mL H₂O中且用EtOAc(3×250 mL)萃取。合併之有機萃取物用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)，過濾且真空濃縮。殘餘物使用Analogix純化系統藉由SF25-600 g管柱(用100%己烷溶離15分鐘，接著用0-25% EtOAc/己烷溶離)純化。濃縮產物峰之中間溶離份，藉由層析分離得到18 g呈黃色發泡體狀之乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(純度>95%)。¹H NMR(300 MHz，氯仿-d)δ ppm 1.34(s,12 H)1.44(s,9 H)1.87(s,3 H)5.30(br.s.,2 H)7.39-7.57(m,2 H)7.72(d,J=1.51 Hz,1 H)7.87(dd,J=8.50,1.70 Hz,1 H)7.97(dd,J=6.42,2.64 Hz,1 H)8.24(s,1 H)8.40(d,J=8.31 Hz,1 H)。主要LC峰之LC/MS觀測值[M+H]⁺ 477。應注意，此物質係製備若干次且所需產物之純度在約50%至約95%範圍內。

6-氟-2H-酞嗪-1-酮

N,N-二乙基-4-氟-2-甲醯基-苯甲醯胺(2.94 g，13.2 mmol)、單水合肼(Sigma-Aldrich；725 mg，14.5 mmol)及EtOH(15 mL)之混合物在大容量微波管中在50℃下加熱45分鐘。添加冰AcOH(2 mL)且混合物在Biotage Initiator微波中在150℃下加熱2小時。添加NaHCO₃飽和水溶液(75 mL)及EtOAc(70 mL)。有機層相繼用5% NaHCO₃水溶液及50%鹽水溶液洗滌。水層用EtOAc(2×60 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發得到呈淺黃色粉末狀之6-氟-2H-酞嗪-1-酮(2.14 g，99%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 165。

2-甲基-2-(1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-丙腈

將雙(三甲基矽烷基)胺化鉀(0.91 M於THF中，Alfa-Aesar；46.6 mL，42.4 mmol)添加至6-氟-2H-酞嗪-1-酮(1.16 g，7.1 mmol)於THF(20 mL)中之溶液中。混合物在油浴中在70℃下加熱隔夜。添加水(125 mL)及EtOAc(100 mL)。分離各層且水層用EtOAc(2×70 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發得到黃色固體(1.52 g)。藉由用熱CH₂Cl₂/己烷濕磨，接著過濾來純化此物質，得到呈淺黃色粉末狀之2-甲基-2-(1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-丙腈(1.12 g，74%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 214。

2-[2-(3-溴-2-甲醯基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈

將2-甲基-2-(1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-丙腈(1.12 g，5.23 mmol)、2,6-二溴苯甲醛(2.21 g，8.37 mmol)、NaHCO₃(879 mg，10.5 mmol)、碘化銅(I)(996 mg，5.23 mmol)及DMSO(35.3 mL)之混合物在約110℃下加熱2小時。將混合物冷卻至室溫。添加CH₂Cl₂(40 mL)及水(40 mL)。混合物經矽藻土過濾且矽藻土用CH₂Cl₂及少量MeOH充分洗滌。分離濾液中之層且有機層用50%鹽水溶液洗滌。水層用CH₂Cl₂(2×40 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且真空濃縮。使用Analogix純化系統藉由SF25-60 g二氧化矽管柱(用0-5% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到呈淺黃色固體狀之2-[2-(3-溴-2-甲醯基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(1.89 mg，82%)，純度為約90%。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 396/398。

實例1

2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮

藉由抽真空將乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(中間物5；177 mg，371 μmol)、4-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-6-氯-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US 20120040949,I-13製法之步驟2中所描述製備；90 mg，247 μmol)、2-二環己基膦-2',4',6'-三異丙基聯苯(18 mg，37 μmol)、磷酸三鉀(144 mg，0.68 mmol)、水(332 μL)及正丁醇(1.4 mL)之混合物脫氣且用氬氣回填。

添加雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(10 mg，17 μmol)且混合物如前所述進行脫氣。混合物在110℃下加熱2.5小時。添加水(35 mL)及 EtOAc(35 mL)且混合物在分液漏斗中搖動。收集有機層且用鹽水(35 mL)洗滌。水層用EtOAc(2×30 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾，蒸發且使用Analogix純化系統藉由24g管柱(用1%-20% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化，得到呈黏性淺黃色油狀之乙酸2-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-6-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲酯與2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮之混合物(112 mg)。添加二噁烷(572 μL)及2 N NaOH水溶液(980 μL，1.96 mmol)且混合物在氬氣下在50℃下加熱2小時。添加水(25 mL)及EtOAc(50 mL)且混合物在分液漏斗中搖動。收集有機層且用鹽水(50 mL)洗滌。水層用EtOAc(2×40 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾，蒸發且使用Analogix純化系統藉由12g管柱(用1%-15% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化，得到呈淺黃色固體狀之2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮(81 mg，52%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 636.0。

實例2

6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫- [3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮

吹掃微波小瓶中乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；214 mg，約0.34 mmol)、6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基胺基)噠嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例56之中間物中所描述製備；100 mg，0.3 mmol)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(Aldrich；8.6 mg，15 μmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；14.3 mg，30 μmol)及磷酸三鉀(159 mg，0.75 mmol)之混合物且添加脫氣之正丁醇(2.4 mL)與水(600 μL)之混合物。混合物在砂浴中在115℃下加熱隔夜。混合物經矽藻土過濾，濃縮且藉由層析(用0-25% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化得到黃色油狀物(150 mg)。添加MeOH(2.3 mL)及碳酸鉀(96 mg，0.7 mmol)且混合物在45℃下加熱1小時。添加CH₂Cl₂以改良溶解度且混合物再次在45℃下加熱。將混合物冷卻至室溫且逐滴添加水。所得混合物在室溫下攪拌隔夜且接著用CH₂Cl₂萃取。濃縮有機萃取物且殘餘物用乙酸異丙酯濕磨。濾出固體，用乙醚洗滌且在真空烘箱中乾燥若干小時，得到呈灰白色晶體狀之6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(100 mg，55%)。NMR證實存在少量乙酸異丙酯。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 606.1。

實例3

2-{3-[5-(5-氮雜環丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮

用氮氣吹掃微波小瓶中乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；206 mg，約0.32 mmol)、4-(5-(氮雜環丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-6-氯-2-甲基噠嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例58中之中間物所描述製備；89 mg，0.29 mmol)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(Aldrich；8.3 mg，14 μmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；13.7 mg，29 μmol)及磷酸三鉀(184 mg，0.87 mmol)之混合物且添加脫氣之正丁醇(2.3 mL)及水(576 μL)之混合物。混合物在砂浴中在115℃下加熱隔夜。蒸發混合物且藉由層析(用0-25% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化得到黃色油狀物(150 mg)。添加MeOH(2.4 mL)及碳酸鉀(83 mg，0.6 mmol)且混合物在室溫下攪拌1小時。逐滴添加水且所得混合物在室溫下攪拌1小時。濾出固體且在真空烘箱中乾燥隔夜，得到呈灰白色結晶固體狀之2-{3-[5-(5-氮雜環丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮(72 mg，43%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 581.4。

實例4

6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-2-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮

吹掃微波小瓶中乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如上文所描述製備；約75%純度；172 mg，約0.27 mmol)、(S)-6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基吡咯啶-2-基)吡啶-2-基胺基)噠嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例18步驟3中所描述製備；77 mg，0.24 mmol)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(Aldrich；6.9 mg，12 μmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；14.3 mg，30 μmol)及磷酸三鉀(153 mg，0.72 mmol)之混合物且添加脫氣之正丁醇(2.4 mL)及水(600 μL)之混合物。混合物在砂浴中在115℃下加熱2.5小時。混合物經矽藻土過濾，濃縮且藉由層析(用0-25% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化，得到100 mg產物混合物。相繼添加MeOH(1.58 mL)及CH₂Cl₂以溶解固體。添加碳酸鉀(65.4 mg，0.47 mmol)且混合物在44℃下加熱1.5小時。逐滴添加水且混合物在室溫下攪拌2小時。過濾混合物且固體用水及Et₂O洗滌且真空乾燥一個週末，得到呈灰白色結晶固體狀之6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-2-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(85 mg，91%)。[M+H]⁺ 592.5.

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲酯

6-氯-2-甲基-4-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例32步驟4中所描述製備；150 mg，469 μmol)、雙聯頻哪醇硼酸酯(155 mg，610 μmol)、乙酸鉀(138 mg，1.41 mmol)及二噁烷(7 mL)在氬氣下脫氣。添加XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；33.5 mg，70.4 μmol)及乙酸鈀(II)(5.3 mg，23.5 μmol)且反應混合物在100℃(外部溫度)下在氬氣下攪拌30分鐘。自加熱浴中取出燒瓶且添加乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲酯(實例4；199 mg，516 μmol)、碳酸鉀(194 mg，1.41 mmol)、三環己基膦(13.2 mg，46.9 μmol)以及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(13.5 mg，23.5 μmol)及水(1.5 ml)。反應混合物用氬氣沖洗且在劇烈攪拌下在80℃下加熱7小時。將反應混合物冷卻至室溫且傾入水及EtOAc中。分離EtOAc層且水層用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且蒸發。使用Analogix系統藉由12 G管柱(用CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH 89：9：2->66：27：7溶離)純化殘餘物，得到乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲酯(78 mg，26%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 634。

實例5

6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮

將乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲酯(78 mg，0.124 mmol)、K₂CO₃(34.2 mg，0.247 mmol)及MeOH(10 mL)之混合物在40℃下攪拌75分鐘且接著冷卻至室溫。添加水及CH₂Cl₂且水層用CH₂Cl₂萃取。乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。殘餘物用Et₂O濕磨且所得固體真空乾燥隔夜，得到呈黃色固體狀之6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(57 mg，79%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 592。

2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲醛

6-氯-2-甲基-4-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例33步驟1中所描述製備；150 mg，469 μmol)、雙聯頻哪醇硼酸酯(155 mg，610 μmol)、乙酸鉀(138 mg，1.41 mmol)及二噁烷(7 mL)在氬氣下脫氣。添加XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；33.5 mg，70.4 μmol)及乙酸鈀(II)(5.3 mg，23.5 μmol)且反應混合物在100℃(外部溫度)下在氬氣下攪拌30分鐘。自加熱浴中取出燒瓶且添加2-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-氯苯甲醛(實例2；160 mg，469 μmol)、碳酸鉀(194 mg，1.41 mmol)、三環己基膦(13.2 mg，46.9 μmol)以及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(13.5 mg，23.5 μmol)及水(1.5 ml)。反應混合物用氬氣沖洗且在劇烈攪拌下在80℃下加熱1小時。將反應混合物冷卻至室溫且傾入水及EtOAc中。分離EtOAc層且水層用EtOAc萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且蒸發。使用Analogix系統藉由Supelco 24 G管柱(用CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH 77：18：5溶離)純化殘餘物，得到乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲酯(16 mg， 6%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 633.9。

實例6

6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮製備6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯甲酯(16 mg，27 μmol)、硼氫化鈉(1.64 mg，43.4 μmol)及甲醇(1 mL)之混合物在氮氣下攪拌30分鐘。添加NH₄Cl飽和水溶液且攪拌混合物5分鐘且接著用CH₂Cl₂萃取兩次。乾燥合併之有機層，過濾且蒸發。藉由管柱層析(用CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH 89：9：2->66：27：7溶離)純化殘餘物且產物在真空烘箱中在50℃下乾燥隔夜，得到呈淺黃色固體狀之6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(11.8 mg，74%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 592。

2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈

溶液A係如下製備：將6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基胺基)噠嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-67製法之步驟2中所描述製備；125 mg，0.374 mmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；27 mg，56 μmol)、乙酸鉀(110 mg，1.1 mmol)、雙聯頻哪醇硼酸酯(124 mg，0.49 mmol)及二噁烷(4.4 mL)之混合物在減壓下真空脫氣且置放於氬氣氛圍下。在室溫下添加乙酸鈀(II)(9.25 mg，41.2 μmol)且重複真空脫氣循環。在氬氣下在100℃(外部溫度)下攪拌反應混合物16分鐘。將反應混合物冷卻至環境溫度且使用氬氣壓力經矽藻土填料過濾(用額外的2.5 mL二噁烷洗滌矽藻土)，得到溶液A。

溶液B係如下製備：將2-(2-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1-側氧基-1,2-二氫酞嗪-6-基)-2-甲基丙腈(實例8；158 mg，399 μmol)、三環己基膦(34.2 mg，122 μmol)、K₂CO₃(276 mg，2 mmol)、n-BuOH(486 μL)、水(1.52 mL)及二噁烷(2.03 mL)之混合物脫氣。在室溫下添加雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(34.4 mg，59.8 μmol)。再次將混合物真空脫氣且接著在設定為110℃之加熱浴中加熱。

將溶液A添加至溶液B中且所得混合物在110℃下攪拌35分鐘。停止加熱且將反應混合物攪拌隔夜。反應混合物經矽藻土過濾且矽藻土用EtOAc洗滌。將EtOAc(30 mL)及水(30 mL)添加至濾液中且在分液漏斗中搖動濾液。收集EtOAc相。水層用EtOAc(2×20 mL)反萃取且乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix系統藉由SF15-24g管柱(用3%-18% MeOH/CH₂Cl₂溶離)層析純化殘餘物，得到呈灰色粉末狀之2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(178 mg，73%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 615。

實例7 2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈

將2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(實例17；178 mg，0.29 mmol)之混合物溶解於MeOH(4 mL)及CH₂Cl₂(2.3 mL)中且冷卻至0℃。逐滴添加NaBH₄(55 mg，1.5 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液且攪拌混合物10分鐘。接著添加額外的含NaBH₄(55 mg，1.5 mmol)之水(0.5 mL)且再攪拌混合物10分鐘。添加水(60 mL)及CH₂Cl₂(60 mL)且在分液漏斗中搖動物質。收集有機層且用50%稀鹽水溶液洗滌且水相用CH₂Cl₂(2×40 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix純化系統藉由SF15-12G二氧化矽管柱(3%-14% MeOH/CH₂Cl₂)純化殘餘物，得到淺黃色固體(138 mg)。此物質自CH₂Cl₂/己烷再結晶，得到呈白色晶體狀之2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈(109 mg，61%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 617。

實例8

6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮

將經脫氣之n-BuOH(4 mL)及水(1 mL)之混合物添加至微波小瓶中乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；364 mg，約0.57 mmol)、6-氯-2-甲基-4-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人， US20120040949，實例59之製備之中間物中所描述製備；150 mg，0.51 mmol)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(Aldrich；14.6 mg，25 μmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；24.3 mg，51 μmol)及磷酸三鉀(324 mg，1.5 mmol)之混合物中。將小瓶封蓋且混合物在砂浴中在115℃下加熱2.5小時。混合物經矽藻土過濾，蒸發且藉由層析(用0-25% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化，得到175 mg產物混合物。添加MeOH(2.9 mL)及碳酸鉀(119 mg，0.86 mmol)且混合物在40℃下攪拌1小時。逐滴添加水且所得混合物在室溫下攪拌1小時。逐滴添加水且混合物在室溫下攪拌1小時。濾出所得固體且在真空烘箱中乾燥隔夜，得到呈白色結晶固體狀之6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(147 mg，51%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 567.0。

實例9

6-第三丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮

使氬氣鼓泡通過6-氯-4-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶- 6-基胺基)-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例69之中間物中所描述製備；133 mg，0.38 mmol)、乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基酞嗪-2(1H)-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼-2-基)苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；242 mg，381 μmol)及磷酸三鉀(202 mg，953 μmol)、水(1.25 mL)及nBuOH(5 mL)之混合物5分鐘。添加XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；18.2 mg，38 μmol)及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(Strem Chemicals；11.0 mg，19.1 μmol)。密封試管且反應混合物在115℃下加熱6小時。將反應混合物傾入水(100 mL)中且混合物用EtOAc(3×75 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(MgSO₄)，過濾且蒸發。殘餘物藉由層析(相繼用0-6% MeOH/CH₂Cl₂及NH₄OH/MeOH/CH₂Cl₂ 4：14：82溶離)純化且接著用EtOAc/Et₂O濕磨，得到呈灰白色固體狀之6-第三丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(32 mg，13%)。¹H NMR證實存在<3%雜質、乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯甲酯。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 620.1。

實例10

6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(嗎啉-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮

將含n-BuOH(2.29 mL)及水(0.57 mL)之脫氣混合物添加至微波小瓶內之乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；204 mg，約0.32 mmol)、6-氯-2-甲基-4-[5-(嗎啉-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-2製法中所描述製備；100 mg，0.29 mmol)、雙(二苯亞基丙酮)鈀(8.2 mg，14.3 μmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；13.6 mg，28.6 μmol)及磷酸三鉀(152 mg，0.72 mmol)之混合物中。混合物在砂浴中在115℃下加熱隔夜。混合物經矽藻土過濾，蒸發且藉由層析(用0-20% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化，得到固體。添加甲醇且過濾混合物且在真空烘箱中乾燥一個週末，得到呈白色粉末狀之6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(嗎啉-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮(46 mg，26%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 622.4。

2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-甲醯基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈

溶液A係如下製備：將4-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-6-氯-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-13製法之步驟2中所描述製備；150 mg，0.41 mmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；29.5 mg，62 μmol)、乙酸鉀(121 mg，1.2 mmol)、雙聯頻哪醇硼酸酯(Matrix Scientific；136 mg，0.54 mmol)及二噁烷(5.3 mL)之混合物在減壓下真空脫氣且置放於氬氣氛圍下。在室溫下添加乙酸鈀(II)(10.2 mg，45 μmol)且重複真空脫氣循環。在氬氣下在100℃(油浴溫度)下攪拌反應混合物16分鐘。使用氬氣壓力，經矽藻土填料過濾反應混合物(再用2.5 mL二噁烷洗滌矽藻土)，得到溶液A。

溶液B係如下製備：將2-(2-(3-溴-2-甲醯基苯基)-1-側氧基-1,2-二氫酞嗪-6-基)-2-甲基丙腈(實例8；156 mg，394 μmol)、三環己基膦(33.8 mg，120 μmol)、K₂CO₃(276 mg，2 mmol)、n-BuOH(480 μL)、水(1.5 mL)及二噁烷(2 mL)之混合物脫氣。在室溫下添加雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(34 mg，59 μmol)。再次將混合物真空脫氣且接著在設定為110℃之油浴中加熱。

將溶液A添加至溶液B中且所得混合物在110℃下攪拌60分鐘。將反應混合物冷卻至室溫且經矽藻土過濾。矽藻土用EtOAc洗滌。將EtOAc(30 mL)及水(30 mL)添加至濾液中且收集EtOAc相。水層用EtOAc(2×20 mL)反萃取且乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix系統藉由SF15-12g管柱層析(用3%-18% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到呈淺棕色粉末狀之2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-甲醯基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(201 mg，79%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 645.0。

實例11

2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈

向2-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-6-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-苯甲醛(201 mg，0.31 mmol)於MeOH(4.5 mL)及CH₂Cl₂(2.3 mL)中之混合物中逐滴添加NaBH₄(59 mg，1.6 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液且在0℃下攪拌所得混合物10分鐘。添加NaBH₄(59 mg，1.6 mmol)於水(0.5 mL)中之溶液且再攪拌混合物10分鐘。添加水 (60 mL)及CH₂Cl₂(60 mL)且分離各層。有機層用50%鹽水溶液(60 mL)洗滌且合併之水溶液用CH₂Cl₂(2×40 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix純化系統藉由SF15-12G管柱(用2-14% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，接著自CH₂Cl₂/己烷再結晶，得到呈白色晶體狀之2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈(145 mg，72%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 647.1。

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯甲酯

用氬氣沖洗4-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-6-氯-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-13製法之步驟2中所描述製備；1.50 g，4.12 mmol)、乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(ELN003987-149；83%純度；2.95 g，5.14 mmol)、雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(Strem Chemicals；119 mg，0.21 mmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；197 mg，0.41 mmol)以及磷酸三鉀(2.19 g、10.3 mmol)、nBuOH(33 mL)及水(8.25 mL)之混合物且接著在100℃下加熱隔夜。混合物經矽藻土過濾且濃縮。殘餘物使用Analogix純化系統(用CH₂Cl₂至CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH(82：14：4)溶離)純化。純化系統之泵在純化期間開始出現故障。使用不同Analogix純化系統(使用CH₂Cl₂/MeOH/NH₄OH(82：14：4->55：36：9)作為溶離劑)自管柱溶離產物。產物在Et₂O/EtOAc(2：1)中漿化/溶解且將混合物靜置48小時。過濾固體，得到呈淺黃色固體狀之乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯甲酯(525 mg，19%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 696.0。

實例12

6-第三丁基-2-[2-羥基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮

乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯甲酯(實例24；295 mg，0.42 mmol)、K₂CO₃(117 mg，0.85 mmol)及MeOH(30 mL)之混合物在40℃下攪拌75分鐘且接著冷卻至室溫。添加水及CH₂Cl₂且水層用CH₂Cl₂萃取。乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用12 g Silicycle管柱(用1%-15% MeOH/CH₂Cl₂溶離)藉由層析純化殘餘物。蒸發產物均勻的樣品且殘餘物在50℃下真空乾燥，得到呈淺黃色發泡體狀之6-第三丁基-2-[2-羥基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮(119 mg，43%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 654.2。

實例13

6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧雜環丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮

使氬氣鼓泡通過6-氯-2-甲基-4-(1'-氧雜環丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-2H-噠嗪-3-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949，實例80步驟1中所描述製備；213 mg，567 μmol)、乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；約75%純度；648 mg，約1.0 mmol)以及磷酸三鉀(301 mg，1.42 mmol)、水(1.25 mL)及nBuOH(5 mL)之混合物5分鐘。添加XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；27 mg，57 μmol)及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(Strem Chemicals；16.3 mg，28 μmol)。密封試管且反應混合物在115℃下加熱4小時。將反應混合物傾入水(100 mL)中且混合物用CH₂Cl₂(5×75 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且蒸發。藉由層析(用0-4% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到乙醇及乙酸酯產物之混合物(374 mg)。添加THF(12 mL)及1 N NaOH(2 mL)且混合物在60℃下加熱隔夜。將混合物傾入水中且用EtOAc萃取三次且用CH₂Cl₂萃取一次。有機萃取物用鹽水洗滌，乾燥(Na₂SO₄)，過濾且蒸發。藉由層析(用1%-5% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到玻璃狀物。添加EtOAc(4 mL)及Et₂O(30 mL)且濾出白色沈澱物且用乙醚洗滌，得到呈白色粉末狀之6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧雜環丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮(246 mg，67%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 648.1。

6-氯-4-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮

2-[6-(6-氯-2-甲基-3-側氧基-2,3-二氫-噠嗪-4-基胺基)-吡啶-3-基氧基]-2-甲基-丙醛(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-13製法之步驟1中所描述製備；665 mg，2.06 mmol)、3,3-二氟氮雜環丁烷鹽酸鹽(347 mg，2.68 mmol)及1,2-二氯乙烷(70 mL)之混合物在室溫下攪拌1小時。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(655 mg，3.09 mmol)且在室溫下攪拌混合物18小時。添加NaHCO₃飽和水溶液且混合物用CH₂Cl₂(5×20 mL)萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。藉由層析(30%-50% EtOAc/己烷)純化殘餘物，得到呈白色粉末狀之6-氯-4-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(566 mg，69%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 400.0。

實例14

6-第三丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-2-羥基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮

藉由抽真空將6-氯-4-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-2-甲基-2H-噠嗪-3-酮(實例27；120 mg，0.3 mmol)、乙酸2-(6-第三丁基-1-側氧基-1H-酞嗪-2-基)-6-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-苯甲酯(其可如實例5中所描述製備；310 mg，0.39 mmol)、磷酸三鉀(140 mg，0.66 mmol)、nBuOH(4 mL)及水(1 mL)之混合物脫氣且用氬氣回填。添加XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，可自Strem Chemicals獲得；21.5 mg，45 μmol)及雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(可自Strem Chemicals獲得；12.1 mg，21 μmol)。混合物再次脫氣且接著在115℃下加熱3小時。添加水(35 mL)及EtOAc(35 mL)。EtOAc層用鹽水(35 mL)洗滌且鹽水層用EtOAc(2×30 mL)反萃取。乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。藉由層析(50%-70% EtOAc/己烷)純化殘餘物，得到呈白色固體狀之6-第三丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-2-羥基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮(130 mg，65%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 672.0。

2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈

藉由抽真空將6-氯-2-甲基-4-(5-(1-甲基哌啶-4-基)吡啶-2-基胺基)噠嗪-3(2H)-酮(其可如Berthel,S.J.等人，US20120040949,I-67製法之步驟2中所描述製備；140 mg，0.42 mmol)、XPhos(2-(二環己基膦基)-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯，Strem Chemicals；30 mg，63 μmol)、乙酸鉀(123 mg，1.26 mmol)、雙聯頻哪醇硼酸酯(Matrix Scientific；138 mg，0.55 mmol)及二噁烷(7 mL)之混合物脫氣，接著用氬氣回填。添加乙酸鈀(II)(10.4 mg，46 μmol)且混合物再次脫氣。混合物在氬氣下在100℃下加熱16分鐘。使用氬氣壓力經矽藻土填料過濾反應混合物(用額外的2.5 mL二噁烷洗滌矽藻土)，得到溶液A。

溶液B係如下製備：將2-[2-(3-溴-2-甲醯基-苯基)-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基]-2-甲基-丙腈(其可如Berthel,S.J.等人，US20100222325，實例153中所描述製備；166 mg，0.42 mmol)、三環己基膦(36 mg，128 μmol)、K₂CO₃(290 mg，2.1 mmol)、n-BuOH(534 μL)、水(2.1 mL)及二噁烷(2.22 mL)之混合物脫氣。在室溫下添加雙(二苯亞甲基丙酮)鈀(0)(36.1 mg，63 μmol)。再次將混合物真空除氣且接著在設定為110℃之加熱浴中加熱。

將溶液A添加至溶液B中且所得混合物在110℃下攪拌60分鐘。停止加熱且將反應混合物攪拌隔夜。反應混合物經矽藻土過濾且矽藻土用EtOAc洗滌。將EtOAc(30 mL)及水(30 mL)添加至濾液中且收集EtOAc相。水層用EtOAc(2×20 mL)反萃取且乾燥(Na₂SO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix系統藉由SF25-24g管柱層析(用2%-13% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到呈淺棕色半固體狀之2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(158 mg，61%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 616.0。

實例15

2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈

將NaBH₄(49 mg，1.3 mmol)於水(0.75 mL)中之溶液添加至經冷卻(約0℃)之2-(2-{2-甲醯基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(158 mg，0.26 mmol)、CH₂Cl₂(2 mL)及MeOH(2 mL)之混合物中。攪拌混合物10分鐘。添加NaBH₄(49 mg，1.3 mmol)於水(0.75 mL)中之溶液且攪拌混合物10分鐘。添加NaBH₄(66 mg，1.7 mmol)於水(0.75 mL)中之溶液且攪拌混合物5分鐘。移除上部水層且添加MeOH(1 mL)。以10分鐘間隔再添加兩份含NaBH₄(66 mg，1.7 mL)之水(0.75 mL)且攪拌反應混合物10分鐘。添加水(60 mL)及CH₂Cl₂(50 mL)。在分液漏斗中搖動混合物且分離出有機層。有機層用50%鹽水溶液(50 mL)洗滌且合併之水相用CH₂Cl₂(2×40 mL)反萃取。乾燥(MgSO₄)合併之有機層，過濾且蒸發。使用Analogix純化系統藉由SF15-12G管柱(用1%-16% MeOH/CH₂Cl₂溶離)純化殘餘物，得到灰白色固體(101 mg)。此物質自CH₂Cl₂/己烷再結晶，得到呈灰白色粉末狀之2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈(81 mg，92%)。LC/MS觀測值[M+H]⁺ 618.2。

生物學實例 布魯頓氏酪胺酸激酶(Btk)抑制分析法

該分析法為經由過濾捕捉放射性³³P磷酸化產物。Btk、生物素標記SH₂肽受質(Src同源物)與ATP之相互作用使得肽受質磷酸化。生物素標記產物為所結合之抗生蛋白鏈菌素瓊脂糖凝膠珠粒。藉由閃爍計數器偵測所結合之全部放射性標記產物。

分析盤為96孔聚丙烯(Greiner)及96孔1.2 μm親水性PVDF過濾盤(Millipore)。此處所報導之濃度為最終分析濃度：DMSO中之10-100 μM化合物(Burdick and Jackson)、5-10 nM Btk酶(His標記，全長)、30 μM肽受質(生物素-Aca-AAAEEIYGEI-NH₂)、100 μM ATP(Sigma)、8 mM咪唑(Sigma，pH 7.2)、8 mM甘油-2-磷酸酯(Sigma)、200 μM EGTA(Roche Diagnostics)、1 mM MnCl₂(Sigma)、20 mM MgCl₂(Sigma)、0.1 mg/ml BSA(Sigma)、2 mM DTT(Sigma)、1 μCi ³³P ATP(Amersham)、20%抗生蛋白鏈菌素瓊脂糖凝膠珠粒(Amersham)、50 mM EDTA(Gibco)、2 M NaCl(Gibco)、2 M NaCl+1%磷酸(Gibco)、Microscint-20(Perkin Elmer)。

利用由標準96孔盤分析模板產生的資料，自每種化合物10個資料點計算IC₅₀測定值。各盤測試一種對照化合物及7種未知抑制劑，且各盤進行兩次。通常，化合物以半對數稀釋，始於100 μM及終止於3 nM。對照化合物為星孢菌素(staurosporine)。在肽受質不存在下對背景進行計數。在肽受質存在下測定總活性。使用以下方案測定Btk抑制。

1)樣本製備：測試化合物以半對數增量在分析緩衝液(咪唑、甘油-2-磷酸酯、EGTA、MnCl₂、MgCl₂、BSA)中稀釋。

2)珠粒製備

a.)藉由在500 g下離心來沖洗珠粒

b.)用PBS及EDTA復原珠粒以產生20%珠粒漿料

3)在無受質(分析緩衝液、DTT、ATP、³³P ATP)情況下預培育反應混合物且在30℃下與受質(分析緩衝液、DTT、ATP、³³P ATP、肽受質)混合15分鐘。

4)為起始分析法，將10 μL含Btk之酵素緩衝液(咪唑、甘油-2-磷酸酯、BSA)及10 μL測試化合物在室溫下預培育10分鐘。

5)向Btk及化合物中添加30 μL不含或含有受質之反應混合物。

6)在30℃下培育50 μL全部分析混合物30分鐘。

7)將40 μL分析物轉移至過濾盤中之150 μL珠粒漿料中以停止反應。

8)在30分鐘後藉由以下步驟洗滌過濾盤

a. 3×250 μL NaCl

b. 3×250 μL NaCl(含有1%磷酸)

c. 1×250 μL H₂O

9)盤在65℃下乾燥1小時或在室溫下乾燥隔夜

10)添加50 μL microscint-20且用閃爍計數器對³³P cpm進行計數。

自以cpm為單位之原始資料計算活性百分比

活性百分比=(樣品-bkg)/(總活性-bkg)×100

使用單位點劑量反應S形模型由活性百分比計算IC₅₀

y=A+((B-A)/(1+((x/C)^D)))

x=化合物濃度，y=活性%，A=最小值，B=最大值，C=IC₅₀，D=1(希爾斜率(hill slope))

藉由CD69表現所量測之對全血中B細胞活化的抑制

測試Btk抑制劑抑制人類血液中B細胞受體介導之B細胞活化之能力的程序如下：自健康志願者獲得人類全血(HWB)，存在以下限制條件：24小時未服用藥物，非吸菸者。藉由靜脈穿刺將血液收集至以肝素鈉抗凝血之Vacutainer試管中。測試化合物於PBS(20x)中稀釋至所需起始藥物濃度之十倍，接著在含10% DMSO之PBS中進行三倍連續稀釋以產生九點劑量反應曲線。向2 ml 96孔V型底盤(Analytical Sales and Services，#59623-23)中添加5.5 μl各化合物稀釋物；向對照孔及無刺激物孔中添加5.5 μl含10% DMSO之PBS。向各孔中添加HWB(100 μl)且在混合後，在37℃、5% CO₂、100%濕度下培育盤30分鐘。在混合下向各孔(除無刺激物孔以外)中添加山羊F(ab')2抗人類IgM(Southern Biotech，#2022-14)(10 μl 500 μg/ml溶液，50 μg/ml最終濃度)且再培育盤20小時。

在20小時培育結束時，樣品與經螢光探針標記之抗體(15 μl PE小鼠抗人類CD20，BD Pharmingen，#555623，及/或20 μl APC小鼠抗人類CD69，BD Pharmingen，#555533)一起在37℃、5% CO₂、100%濕度下培育30分鐘。包括經誘導之對照物、未染色物及單一染色物以便補償調節及初始電壓設定。接著用1 ml 1X Pharmingen溶解緩衝液(BD Pharmingen #555899)溶解樣品且盤在1800 rpm下離心5分鐘。經由抽吸移除上清液且剩餘離心塊再用另一份1 ml 1X Pharmingen溶解緩衝液溶解，且盤如前所述進行離心。吸出上清液且剩餘離心塊在FAC緩衝液(PBS+1% FBS)中洗滌。在最終離心後，移除上清液且離心塊再懸浮於180 μl FAC緩衝液中。將樣品轉移至適於在BD LSR II流式細胞儀之HTS 96孔系統上操作的96孔盤中。

使用適合於所用螢光團之激發及發射波長，獲得資料且使用Cell Quest軟體獲得陽性細胞值百分比。最初藉由FACS分析軟體(Flow Jo)分析結果。測試化合物之IC₅₀定義為使CD69陽性細胞(其在抗IgM刺激後亦為CD20陽性)之百分比降低50%之濃度(8個對照孔之平均值，在8個孔之平均值減去無刺激物背景後)。使用第3版XLfit軟體，方程式201計算IC₅₀值。

此分析法之代表性化合物資料列舉於下表II中。

抑制B細胞活化-Ramos細胞中之B細胞FLIPR分析法

藉由測定測試化合物對抗IgM刺激之B細胞反應之影響來證明本發明化合物對B細胞活化之抑制作用。

B細胞FLIPR分析法為基於細胞之功能法，其測定潛在抑制劑對抗IgM抗體刺激所引起之胞內鈣增加的作用。在生長培養基(描述於下文中)中培養Ramos細胞(人類伯基特淋巴瘤細胞株(human Burkitt's lymphoma cell line)，ATCC第CRL-1596號)。在分析前一天，將Ramos細胞再懸浮於新鮮生長培養基(與上文所述相同)中且在組織培養瓶中設定為每毫升0.5×10⁶個之濃度。在分析當天，對細胞進行計數且在組織培養瓶中在補充有1 μM FLUO-3AM(TefLabs目錄號0116，於無水DMSO及10%普洛尼克酸(Pluronic acid)中製備)之生長培養基中設定為1×10⁶個/mL之濃度且在37℃(4% CO₂)下培育1小時。為移除細胞外染料，藉由離心(5分鐘，1000 rpm)收集細胞，以1×10⁶個細胞/毫升再懸浮於FLIPR緩衝液(描述於下文中)中且接著以1×10⁵個細胞/孔分配於塗有聚-D-離胺酸之96孔黑色/透明盤(BD目錄號356692)中。以100 μM至0.03 μM範圍內的多種濃度(7種濃度，下文詳述)添加測試化合物，且與細胞一起在室溫下培育30分鐘。藉由添加10 μg/mL抗IgM(Southern Biotech，目錄號2020-01)刺激Ramos細胞Ca²⁺信號傳導，且用FLIPR(Molecular Devices，使用具有氬氣雷射之CCD相機在480 nM激發下捕捉96孔盤之影像)量測。

培養基/緩衝液：

生長培養基：具有L-麩醯胺酸(Invitrogen，目錄號61870-010)、10%胎牛血清(FBS，Summit Biotechnology目錄號FP-100-05)、1 mM丙酮酸鈉(Invitrogen目錄號11360-070)之RPMI 1640培養基。

FLIPR緩衝液：HBSS(Invitrogen，目錄號141175-079)、2 mM CaCl₂(Sigma目錄號C-4901)、HEPES(Invitrogen，目錄號15630-080)、2.5 mM丙磺舒(Probenecid)(Sigma，目錄號P-8761)、0.1% BSA(Sigma，目錄號A-7906)、11 mM葡萄糖(Sigma，目錄號G-7528)化合物稀釋細節：為了獲得100 μM之最高最終分析濃度，向576 μL FLIPR緩衝液中直接添加24 μL 10 mM化合物儲備溶液(在DMSO中製備)。測試化合物在FLIPR緩衝液中稀釋(使用Biomek 2000機器人移液器)，產生以下稀釋方案：媒劑，1.00×10^-4 M、1.00×10^-5、3.16×10^-6、1.00×10^-6、3.16×10^-7、1.00×10^-7、3.16×10^-8。

分析法及分析：

使用最大-最小統計量(max-min statistic)報導胞內鈣增加(使用Molecular Devices FLIPR控制及統計輸出軟體，自藉由添加刺激抗體所產生之峰值減去靜止基線)。使用非線性曲線擬合(GraphPad Prism軟體)測定IC₅₀。

小鼠膠原蛋白誘導之關節炎(mCIA)

在第0天，對小鼠在尾巴基部或背部若干點注射第II型膠原蛋白於完全弗氏佐劑(Complete Freund's adjuvant，CFA)中之乳液(皮內注射(i.d.))。在膠原蛋白免疫後，動物將在約21至35天顯現關節炎。藉由在第21天全身投與含膠原蛋白之弗氏不完全佐劑(Incomplete Freund's adjuvant，IFA；皮內注射)使關節炎同步發作(增強免疫)。在第20天後每天檢查動物之輕度關節炎之任何發作(分數為1或2；參見下文分數描述)，其為增強免疫之信號。增強免疫後，對小鼠進行評分且給與候選治療劑持續規定時間(通常2-3週)，且給藥頻率為每天一次(QD)或每天兩次(BID)。

大鼠膠原蛋白誘發之關節炎(rCIA)

在第0天，在大鼠背部若干位置皮內注射(i.d.)牛II型膠原蛋白於不完全弗氏佐劑(IFA)中之乳液。在約第7天，在尾巴基部或背部之替代部位增強注射膠原蛋白乳液(皮內注射)。通常在初始膠原蛋白注射後12-14天觀測到關節炎。自第14天起往後，可如下文所述(關節炎評估)評估動物之關節炎發展情況。動物在二次攻擊時開始以預防方式投與候選治療劑且持續規定時間(通常2-3週)，且給藥頻率為每日一次(QD)或每日兩次(BID)。

關節炎評估：

在兩種模型中，使用評分系統定量腳爪及胺體關節之發炎發展狀況，該評分系統涉及遵照下文所述之準則評定4隻腳爪：

評分：1=腳爪或一個腳趾腫脹及/或發紅。

2=兩個或兩個以上關節腫脹。

3=腳爪整體腫脹，累及兩個以上關節。

4=整個腳爪及腳趾嚴重關節炎。

在第0天進行基線量測評估，且在第一次病徵或腫脹時再次開始，每週至多3次直至實驗結束。藉由加上個別腳爪之4個得分而獲得各小鼠之關節炎指數，每隻動物最大得分為16。

大鼠活體內哮喘模型

雄性棕色挪威(Brown-Norway)大鼠以含100 μg OA(卵白蛋白)之0.2 ml明礬腹膜內敏化，每週一次，持續3週(第0天、第7天及第14 天)。在第21天(最後一次敏化後一週)，大鼠每日一次在OA氣霧劑攻擊(1% OA持續45分鐘)之前0.5小時經皮下投與媒劑或化合物調配物且在攻擊後4小時或24小時結束。在處死時，自所有動物收集血清及血漿，分別用於血清學及PK。插入氣管套管且肺以PBS灌洗3次。分析BAL流體之總白血球數及白血球分類計數。藉由Coulter計數器測定細胞等分試樣(20-100 μl)之總白血球數。對於白血球分類計數，在Cytospin中離心50-200 μl樣品且載片以Diff-Quik染色。在光學顯微鏡下使用標準形態準則對單核細胞、嗜伊紅血球、嗜中性白血球及淋巴細胞進行計數且其比例以百分比表示。代表性Btk抑制劑顯示OA敏化及攻擊之大鼠的BAL中之總白血球計數相較於對照水準降低。

為清楚及理解之目的，已藉助於說明及實例相當詳細地描述前述發明。對熟習此項技術者而言將顯而易見，可在隨附申請專利範圍之範疇內進行變化及修改。因此，應理解上述說明意欲為說明性的而非限制性的。因此本發明之範疇不應根據上述說明來確定，而應根據以下隨附申請專利範圍以及該申請專利範圍授權之等效物的全部範疇來確定。

本申請案中引用之所有專利、專利申請案及公開案均以全文引用的方式併入以用於所有目的，該引用的程度就如同各個別專利、專利申請案或公開案個別地經如此指示一般。

Claims

一種式I化合物，其中：為單鍵或雙鍵；X為CH、CH₂或N；R為H、-R¹、-R¹-R²-R³、-R¹-R³或-R²-R³；R¹為芳基、雜芳基、雙環雜芳基、環烷基或雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、氰基、側氧基或低碳數鹵烷基取代；R²為-C(=O)、-C(=O)O、-C(=O)NR^2'、-NHC(=O)O、-C(R^2')₂、-O、-S、-C(=NH)NR^2'或-S(=O)₂；各R^2'獨立地為H或低碳數烷基；R³為H或R⁴；R⁴為低碳數烷基、低碳數鹵烷基、低碳數烷氧基、胺基、低碳數烷基胺基、環烷基胺基、低碳數二烷基胺基、芳基、芳基烷基、烷基芳基、雜芳基、烷基雜芳基、雜芳基烷基、環烷基、烷基環烷基、環烷基烷基、雜環烷基、烷基雜環烷基、雜環烷基烷基、雙環環烷基、雙環雜環烷基、螺環烷基、螺雜環烷基或雙環螺雜環烷基，其中各者視情況經一或多個低碳數烷基、鹵基、低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基、羥基、羥基低碳數烷基、低碳數烷氧基、低碳數烷醯基、鹵基、硝基、胺基、醯胺基、醯基、氰基、側氧基、磺醯基、低碳數烷基磺醯基、胍基、羥基胺基、羧基、胺甲醯基、胺基甲酸酯基、鹵基低碳數烷氧基、雜環烷基或鹵基低碳數烷基取代，其中兩個低碳數烷基可共同形成環；Y⁴為Y^4a、Y^4b、Y^4c或Y^4d；Y^4a為H或鹵素；Y^4b為低碳數烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；Y^4c為低碳數環烷基，其視情況經一或多個選自由低碳數烷基、低碳數鹵烷基、鹵素、羥基、胺基、氰基及低碳數烷氧基組成之群的取代基取代；及Y^4d為胺基，其視情況經一或多個低碳數烷基、烷氧基低碳數烷基或羥基低碳數烷基取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
如請求項1之化合物，其中為雙鍵且X為N。
如請求項1之化合物，其中為單鍵且X為CH₂。
如請求項1至3中任一項之化合物，其中R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-S(=O)₂，R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基。
如請求項1至3中任一項之化合物，其中R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(CH₃)₂；R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基或視情況經一或多個低碳數烷基取代之雜環烷基。
如請求項1至3中任一項之化合物，其中R為-R¹-R²-R³；R¹為苯基或吡啶基；R²為-C(=O)；R³為R⁴；及R⁴為嗎啉或哌嗪，其視情況經一或多個低碳數烷基取代。
如請求項2之化合物，其中Y⁴為第三丁基。
如請求項3之化合物，其中為雙鍵，X為CH，及Y⁴為其中，Y⁵及Y⁶獨立地為H、低碳數烷基或低碳數鹵烷基。
如請求項2之化合物，其中Y⁴為其中，Y⁵為H、鹵素、低碳數烷基或低碳數鹵烷基。
如請求項2之化合物，其中Y⁴為其中，Y⁵及Y⁶獨立地為H或低碳數烷基。
如請求項7之化合物，其中R為-R¹-R³；R¹為吡啶基或吡唑并吡嗪；R³為R⁴；及R⁴為視情況經取代之低碳數烷基、雜環烷基或烷基雜環烷基。
如請求項7之化合物，其中R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(CH₃)₂；R³為R⁴；及R⁴為低碳數烷基胺基、低碳數二烷基胺基或視情況經一或多個低碳數烷基取代之雜環烷基。
如請求項7之化合物，其中R為-R¹-R²-R³；R¹為吡啶基；R²為-C(=O)；R³為R⁴；及R⁴為視情況經取代之雜環烷基或雙環螺雜環烷基。
如請求項13之化合物，其中R⁴為視情況經取代之嗎啉或哌嗪。
如請求項1至3及7至14中任一項之化合物，其係選自由以下組成之群：2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮； 6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；2-{3-[5-(5-氮雜環丁烷-1-基甲基-1-甲基-1H-吡唑-3-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-6-第三丁基-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-2-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((S)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-((R)-1-甲基-吡咯啶-3-基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮；2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基)-2-甲基-丙腈；6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(5-甲基-4,5,6,7-四氫-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-{3-[5-(1'-乙基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-2-羥基甲基-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-(2-羥基甲基-3-{1-甲基-5-[5-(嗎啉-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-苯基)-2H-酞嗪-1-酮； 2-[2-(3-{5-[5-(2-氮雜環丁烷-1-基-1,1-二甲基-乙氧基)-吡啶-2-基胺基]-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基}-2-羥基甲基-苯基)-1-側氧基-1,2-二氫-酞嗪-6-基]-2-甲基-丙腈；6-第三丁基-2-[2-羥基甲基-3-(5-{5-[2-(3-羥基-丙基胺基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-氧雜環丁烷-3-基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-2H-酞嗪-1-酮；6-第三丁基-2-[3-(5-{5-[2-(3,3-二氟-氮雜環丁烷-1-基)-1,1-二甲基-乙氧基]-吡啶-2-基胺基}-1-甲基-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基)-2-羥基甲基-苯基]-2H-酞嗪-1-酮；及2-(2-{2-羥基甲基-3-[1-甲基-5-(1'-甲基-1',2',3',4',5',6'-六氫-[3,4']聯吡啶-6-基胺基)-6-側氧基-1,6-二氫-噠嗪-3-基]-苯基}-1-側氧基-1,2,3,4-四氫-異喹啉-6-基)-2-甲基-丙腈。
一種醫藥組合物，其包含如請求項1至15中任一項之化合物與至少一種醫藥學上可接受之載劑、賦形劑或稀釋劑之混合物。
一種如請求項1至15中任一項之化合物之用途，其係用於製造用以治療發炎性病症或自體免疫病症之藥劑。
如請求項17之用途，其中該病症為類風濕性關節炎或哮喘。
如請求項1至3及7至14中任一項之化合物，其係用於治療發炎性或自體免疫病症。
如請求項19之化合物，其中該病症為類風濕性關節炎或哮喘。