TW201410680A - 黃病毒科病毒之巨環狀抑制劑 - Google Patents

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Abstract

提供式I化合物：□及其藥學上可接受之鹽類和酯類。所提供之化合物、組成物和方法係用於治療病毒感染，特別是C型肝炎感染。

Description

黃病毒科病毒之巨環狀抑制劑
本案提供抑制病毒之新穎化合物、含有此類化合物之組成物和包括投予此類化合物之治療方法。
含有黃病毒科家族之RNA病毒包括至少三種可區別之屬，包括瘟疫病毒屬(Pestivirus)、黃病毒屬(flavivirus)及肝炎病毒屬(hepaciviruses)(Calisher等人，J.Gen.Virol.,1993,70,37-43)。雖然瘟疫病毒屬造成許多經濟上重要動物疾病如牛病毒性下痢病毒(Bovine Viral Diarrhea Virus；BVDV)、豬瘟病毒(Classical Swine Fever Virus；CSFV，hog cholera)和不全症病毒(Border disease virus；BDV)，但其在人類疾病上的重要性尚未完全確認(Moennig,V.等人，Adv.Vir.Res.1992,48,53-98)。當肝炎病毒屬造成人類C型肝炎病毒感染時，黃病毒屬應對重要的人類疾病如登革熱和黃熱病負責。由黃病毒科家族所引起之其他重要病毒感染包括西尼羅病毒(West Nile virus)(WNV)、日本腦炎病毒(JEV)、蜱媒 介性腦炎病毒、Junjin病毒、墨累穀腦炎(Murray valley encephalitis)、聖路易腦炎(St.Louis encephalitis)、鄂木斯克出血性熱病毒(Omsk hemorrhagic fever virus)和濟卡病毒(Zika virus)。
C型肝炎病毒(HCV)是全球慢性肝病的主要原因(Boyer,N等人，J Hepatol.32：98-112,2000)，所以目前的抗病毒研究的重大焦點係指向治療人類慢性HCV感染的改善方法的發展(Di Besceglie,A.M.和Bacon,B.R.,Scientific American,Oct.：80-85,(1999)；Gordon,C.P.等人，J.Med.Chem.2005,48,1-20；Maradpour,D.等人，Nat.Rev.Micro.2007,5(6),453-463)。Dymock等人在Antiviral Chemistry & Chemotherapy,11：2；79-95(2000)評論一些HCV治療。罹患慢性HCV感染之患者的病毒治癒難以達成，因為慢性感染患者每日產生驚人數量的病毒和HCV病毒的高自發突變性(Neumann等人，Science 1998,282,103-7；Fukimoto，等人，Hepatology,1996,24,1351-4；Domingo，等人，Gene 1985,40,1-8；Martell，等人，J.Virol.1992,66,3225-9。
目前，主要有下面兩種抗病毒化合物：利巴韋林(ribavirin)、核苷類似物、和干擾素-α(IFN)，其用於治療人類慢性HCV感染。單獨的利巴韋林是無法有效減少病毒RNA程度，具有明顯的毒性，和已知會誘發貧血。有報導IFN和利巴韋林的組合可有效地處理慢性C型肝炎(Scott,L.J.等人，Drugs 2002,62,507-556)，但獲得此治 療的不到一半的患者顯示出持久的好處。因此，有必要發展更有效的抗-HCV治療。
大環山格力服瑞(sanglifehrin)及衍生物是免疫調節的和以獨特的方式結合肽基-脯胺醯順/反異構酶(PPIase)親環蛋白(WO 97/02285；WO 98/07743；J.Am.Chem.Soc 2003,125,3849-3859；J.Org.Chem.2000,65,9255-9260；Angew.Chem.Int.Ed.1999,38,2443-2446)。親環蛋白是調節體內蛋白質折疊和抑制C型肝炎病毒的肽基-脯胺醯順/反異構酶(PPIase)(Lin等人，WO2006/138507)。然而，沒有任何的山格力服瑞或其衍生物已用於人類抗-病毒治療。因此，需要不斷地開發具有抗-黃病毒科病毒活性且特別是抗-HCV活性的巨環狀山格力服瑞。
於一具體實施態樣中，提供式I所示之化合物： 或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥，其中：A為鍵、-O-、-S(O)n-、-NH-、-N((C1-C4)烷基)-或(C1-C2)伸烷基； A1為(C1-C5)伸烷基、(C2-C5)伸烯基、(C2-C5)伸炔基、伸芳基、伸雜芳基、伸環烷基、伸雜環烷基、芳基(C1-C2)伸烷基、雜芳基(C1-C2)伸烷基、環烷基(C1-C2)伸烷基或雜環烷基(C1-C2)伸烷基，其中A1的sp3碳原子隨意地經-O-、-S(O)n-、-NH-或-N((C1-C4)烷基)-置換，和其中A1的sp3或sp2碳原子隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、芳基、雜環烷基、環烷基、芳基(C1-C4)烷基、環烷基(C1-C4)烷基、雜環烷基(C1-C4)烷基、芳基雜環烷基(C1-C4)烷基、-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9和-N(R9)2，其中此一隨意的取代反應是化學上可行的；A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基、伸環烷基、(C1-C3)伸烷基、(C2-C3)伸烯基或(C2-C3)伸炔基，其中A2的伸芳基、伸雜芳基、伸雜環烷基或伸環烷基部分隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-N(R9)2、鹵基、鹵基(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷氧基、氰基和(C1-C8)烷基，其中此一隨意的取代反應是化學上可行的；L1為-O-C(O)-、-O-CH2-、-NR11-C(O)-、-NR10-CH2-、-NH-C(R10)2-或-NH-S(O)2-，其中每一個R10獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烯基或環烷基；和R11為(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烯基或環烷基； X1為鍵、-O-、-NH-、-N((C1-C4)烷基)-或伸雜環烷基；R1和R2獨立地為H、(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基、(C2-C4)炔基、鹵基、氰基或-C(O)-(C1-C4)烷基；或R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-、-C(=S)-或-C(=N(C1-C4)烷基)-；R3為H或(C1-C4)烷基，其隨意地經下列取代：鹵基、氰基、羥基或(C1-C4)烷氧基；R4a和R4b獨立地為H、(C1-C8)烷基、芳基、芳基(C1-C4)烷基、雜環烷基、雜環烷基(C1-C4)烷基、環烷基或環烷基(C1-C4)烷基，其中每一個R4a和R4b隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：氰基、-COOH、鹵基、羥基、(C1-C8)烷氧基、胺基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、芳基和雜芳基，其中此一隨意的取代反應是化學上可行的；R5a和R5b獨立地為H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)烷氧基、芳基、雜環烷基、環烷基、芳基(C1-C4)烷基、環烷基(C1-C4)烷基或雜環烷基(C1-C4)烷基，其中每一個R5a和R5b隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：-N3、氰基、-COOH、鹵基、羥基、胺基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、(C1-C8)烷氧基、芳基和雜芳基，或R5a和R5b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R6a和R6b獨立地為H、羥基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)烷氧基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、芳基、雜環烷基、環烷基、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9和-N(R9)2，其中R6a和R6b的每一者隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、芳基、環烷基、雜環烷基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、-NHS(O)R9、-NHC(O)R9和(C1-C8)烷醯基，其中此一隨意的取代反應是化學上可行的；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環；每一個R8獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基、(C2-C4)炔基、芳基、雜芳基、雜環烷基或環烷基，其中R8隨意地經下列取代：-OR、-N(R9)2、-CON(R9)2或氰基；每一個R9獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基或(C2-C4)炔基； 每一個n獨立地為0、1或2；且m為1、2、3、4或5。
於另一具體實施態樣中，提供藥學組成物，其包括式I化合物或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥和一或多種藥學上可接受之載劑或賦形劑。於該具體實施態樣之一方面中，該藥學組成物進一步包括一或多種其他治療試劑。
於再另一具體實施態樣中，提供治療黃病毒科病毒感染之方法，其包括投予治療有效量的式I化合物或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥至需要彼之動物。於該具體實施態樣之一方面中，該治療導致患者之病毒載量的減少和病毒RNA的清除。
於再另一具體實施態樣中，提供治療冠狀病毒科病毒感染之方法，其包括投予治療有效量的式I化合物或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥至需要彼之動物。於該具體實施態樣之一方面中，該治療導致患者之病毒載量的減少和病毒RNA的清除。
發明詳述 定義
除非另有所指否則下面如文中所使用之術語和詞彙欲具有下面意義：
“烷醯基”為RC(O)-；“烷醯基氧基”為RC(O)O-；和“烷醯基胺基”為RC(O)NR’-；其中R為如文中所定義之烷 基，和R’為氫或烷基。
“烯基”意指具有至少一個不飽和位置(即，碳-碳，sp 2 雙鍵)之直鏈或分枝的烴基。於一些具體實施態樣中，烯基為C2-C20烯基、C2-C10烯基或C2-C6烯基。烯基的實施例包括但不限於：乙烯基(-CH=CH2)、烯丙基(-CH2CH=CH2)、環戊烯基(-C5H7)、和5-己烯基(-CH2CH2CH2CH2CH=CH2)。
“伸烯基”意指具有衍生自從母烯的相同或2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心之不飽和、分枝或直鏈或環狀烴基團。例如，伸烯基可具有2至20個碳原子、2至10個碳原子或2至6個碳原子。典型的伸烯基基團包括但不限於：1,2-伸乙烯基(-CH=CH-)。
“烷氧基”為RO-，其中R為如文中所定義之烷基。烷氧基的非限制性實施例包括甲氧基、乙氧基和丙氧基。
“烷基”意指直鏈或分枝鏈烴基。於一具體實施態樣中，烷基具有從1至20個碳原子(即，C1-C20烷基)。於一些具體實施態樣中，烷基為C1-C10烷基或C1-C6烷基。烷基的實施例包括但不限於：甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。
“伸烷基”意指具有衍生自從母烷的相同或2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心之飽和、分枝或直鏈基團或環狀烴基團。例如，伸烷基可具有1至20個碳原子、1至10個碳原子或1至6個碳原子。伸 烷基基團的實施例包括但不限於：伸甲基(-CH2-)、伸乙基(-CH2CH2-)、伸丙基(-CH2CH2CH2-)和伸丁基(-CH2CH2CH2CH2-)。
“炔基”意指包含具有至少一個不飽和位置的標準、二級或三級的碳原子(即，碳-碳、sp三鍵)之烴。例如，炔基可具有2至20個碳原子(即，C2-C20炔基)、2至12個碳原子(即，C2-C12炔基)、或2至6個原子(即，C2-C6炔基)。炔基的實施例包括但不限於：乙炔基(-C≡CH)和炔丙基(-CH2C≡CH)。
“烷基胺基”意指經一或多個烷基取代之胺基。“單(烷基)胺基”或“(烷基)胺基”為RNH-，而“二(烷基)胺基”或“(烷基)2胺基”為R2N-，其中每一個R基團為如文中所定義之烷基且係相同或不同。烷基胺基的實施例包括但不限於：甲基胺基、乙基胺基、丙基胺基、丁基胺基、二甲基胺基、二乙基胺基和甲基乙基胺基。
“伸炔基”意指具有衍生自從母炔的相同或2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心之不飽和、分枝或直鏈或環狀烴基團。例如，伸炔基可具有2至20個碳原子、2至10個碳原子、或2至6個碳原子。典型的伸炔基基團包括但不限於：伸乙炔基(-C≡C-)、伸炔丙基(-CH2C≡C-)、和4-伸戊炔基(-CH2CH2CH2C≡C-)。
“芳基”意指於每一個環內有至多7個原子之任何單環或雙環的碳環，其中至少1個環為5至14個碳原子的芳香族或芳香族環系統，其包括與5-或6-員環烷基稠合之 碳環芳香族基團。芳基的實施例包括但不限於：苯基、萘基、四氫萘基和二氫茚基。
“芳基烷基”意指經芳基基團取代之如文中所定義之烷基。
“伸芳基”意指具有衍生自從母芳基的2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心的如上所定義之芳基。典型的伸芳基基團包括但不限於：伸苯基基，例如， ，和伸萘基，例如，。
“伸芳基烷基”意指具有衍生自從芳基除去1個氫原子和從該基團的烷基除去其他氫之2個單價基團中心的如上所定義之芳基烷基。
“環烷基”意指含有至少1個飽和或部分不飽和環結構且經由環碳連接之烴基。環烷基包括單-、雙-、和多環之烴環，不論是稠合、橋接、或是螺。於各種具體實施態樣中，其意指飽和或部分不飽和C3-C12環部分，其實施例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基和環辛基。
“環烷基烷基”意指經環烷基取代的烷基部分。環烷基烷基的實施例包括環丙基甲基、環丁基甲基、環戊基乙基和環己基甲基。
“伸環烷基”意指具有衍生自從母環烷基的相同或2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心的如文中所定義之環烷基。伸環烷基的實施例包括但不限於：伸環丙基、伸環丁基、伸環戊基和伸環己基。
“二烷基胺基烷基”意指經二烷基胺基取代的烷基部分，其中二烷基胺基為如文中所定義者。
“酯”意指化合物的任何酯，其中分子的任何-COOH官能經-C(O)OR官能置換，或其中分子的任何-OH官能經-OC(O)R官能置換，其中該酯的該R部分為任何含有碳的基團，其形成安定酯部分，包括但不限於：烷基、烯基、炔基、環烷基、環烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜環基、雜環基烷基和其經取代的衍生物。
“鹵基”意指氯(-Cl)、溴(-Br)、氟(-F)或碘(-I)。
“鹵基烷氧基”意指經一或多個鹵基基團取代的如文中所定義之烷氧基。
“鹵基烷氧基烷基”意指經如文中所定義之鹵基烷氧基取代的烷基部分。
“鹵基烷基”意指烷基的一或多個氫原子經鹵素原子置換的烷基。鹵基烷基的實施例包括但不限於：-CF3、-CHF2、-CFH2和-CH2CF3。
“雜環烷基”意指具有2至14個環-碳原子之飽和或部分不飽和的單環、雙環或三環基團，且除了環-碳原子之外，尚有1至4個選自P、N、O和S之雜原子。於各種具體實施態樣中，雜環基係透過碳或透過雜原子而連接至另一部份，且隨意地在碳或雜原子上經取代。雜環基的實施例包括氮呾基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並呋呫基、苯並吡唑基、苯並三唑基、苯並噻吩基、苯並唑基、咔唑基、咔啉基、啉基、呋喃基、咪唑基、吲哚啉 基、吲哚基、吲基、吲唑基、異苯並呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、啶基(naphthpyridinyl)、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、氧呾基、哌喃基、吡基、吡唑基、嗒基、吡啶並吡啶基、嗒基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹啉基、四氫哌喃基、四氫硫代哌喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑並吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮呾基、1,4-二基、六氫氮呯基、哌基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯啶基、啉基、硫代啉基、二氫苯並咪唑基、二氫苯並呋喃基、二氫苯並噻吩基、二氫苯並唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮呾基、伸甲基二氧基苯甲醯基(methylenedioxybenzoyl)、四氫呋喃基、和四氫噻吩基及其N-氧化物。
“雜芳基”意指於每一個環中具有至多7個原子之單環、雙環或三環，其中至少1個環為芳香族且在該環中包含1至4個選自N、O和S之雜原子。雜芳基的非限制性實施例包括吡啶基、噻吩基、呋喃基、嘧啶基、咪唑基、哌喃基、吡唑基、噻唑基、噻二唑基、異噻唑基、唑基、異唑基、吡咯基、嗒基、吡基、喹啉基、異喹 啉基、苯並呋喃基、二苯並呋喃基、二苯並噻吩基、苯並噻吩基、吲哚基、苯並噻唑基、苯並唑基、苯並咪唑基、異吲哚基、苯並三唑基、嘌呤基、苯並噻吩基(thianaphthenyl)和吡基。雜芳基的連接可經由芳香族環而發生，或，若雜芳基為雙環或三環且1個環不為芳香族或不含雜原子則經由非芳香族環或不含雜原子之環而連接。“雜芳基”亦被理解包括任何含有氮之雜芳基的N-氧化物衍生物。
“雜芳基烷基”意指其中氫原子已被雜芳基置換之如文中所定義之烷基。
“伸雜芳基”意指具有衍生自從母雜芳基的相同或2個不同碳原子除去2個氫原子之2個單價基團中心之如上所定義之雜芳基。伸雜芳基的非限制性實施例為：
“羥基烷氧基”意指經羥基(-OH)取代之如文中所定義之烷氧基。羥基烷氧基的實施例為羥基乙氧基。
“羥基烷基”意指經至少1個羥基取代之烷基。羥基烷基的實施例包括但不限於：羥基甲基、羥基乙基、羥基丙基和羥基丁基。
“前藥”意指當被投予至生物系統時由於自發性化學反應、酶催化的化學反應、光解反應、和/或新陳代謝化學 反應而產生藥劑物質(即，活性成分)之任何化合物。因此，前藥為經共價修飾之治療活性化合物的類似物或潛在形式。前藥的非限制性實施例包括酯部分、四級銨部分、二醇部分、和諸如此類者。
術語“隨意地經取代”意指一部份，於其中全部取代基為氫或其中該部分之一或多個氫經非氫之取代基置換。
若適當，在此包括可允許之異構物，例如互變異構物、消旋物、鏡像異構物、非鏡像異構物、阻轉異構物、雙鍵的組態異構物(E-和/或Z-)、在環取代樣式上的順式-和反式-組態、和同位素變體。
“藥學上可接受”意指適合用於藥學製劑，對此用途而言一般視為安全，對此用途而言為國家或州政府的管理機關正式認可，或U.S.藥典或用於動物且更特別是人類之其他一般所認可之藥典所列示。
“藥學上可接受之載劑”意指稀釋劑、佐劑、賦形劑、或載劑、或藥學上可接受之其他成分，且利用其投予本發明之化合物。
“藥學上可接受之鹽”意指可增強所欲之藥理活性的鹽。藥學上可接受之鹽類的實施例包括與無機酸類或有機酸類所形成之酸加成鹽類、金屬鹽類和胺鹽類。與無機酸類所形成之酸加成鹽類的實施例包括與下述酸所形成之鹽類：鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸。與有機酸類所形成之酸加成鹽類的實施例包括與下述酸所形成之鹽類：例如，乙酸、丙酸、己酸、庚酸、環戊烷丙酸、乙醇酸、丙 酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、對-(4-羥基-苯甲醯基)-苯甲酸、桂皮酸、苯乙醇酸、甲磺酸、乙磺酸、1,2-乙烷二磺酸、2-羥基乙烷-磺酸、苯磺酸、對-氯苯磺酸、2-萘磺酸、對-甲苯磺酸、樟腦磺酸、4-甲基-雙環[2.2.2]辛-2-烯1-甲酸、葡萄庚酸、4,4’-伸甲基雙(3-羥基-2-萘甲酸)、3-苯基丙酸、三甲基-乙酸、第三丁基乙酸、月桂硫酸、葡萄糖酸、麩胺酸、羥基-萘甲酸類、柳酸、硬脂酸和黏康酸。金屬鹽類的實施例包括與下述金屬離子所形成之鹽類：鈉、鉀、鈣、鎂、鋁、鐵、和鋅離子。胺鹽類的實施例包括與氨和足以與羧酸類形成鹽類之有機含氮鹼所形成之鹽類。
“治療有效量”意指當將化合物投予至受試者以治療疾病時該化合物的含量足以有效治療該疾病。“治療有效量”可依據化合物、疾病和其嚴重性、待治療之受試者之年紀、重量等等而改變。
術語“治療”和其文法上相等物，當於文中用於治療疾病時，意指減慢或停止疾病的發展，或改善至少一種疾病症狀，更佳地，改善多於一種的疾病症狀。例如，C型肝炎病毒感染的治療包括減少HCV感染人類的HCV病毒載量，和/或減少HCV感染人類的黃疸的嚴重性。
化合物
本案提供式I所示之化合物： 或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥，其中L1、A1、A2、X1、R1、R2、R3、R4a、R4b、R5和R6a、R6b為如上所定義者。
於該具體實施態樣之一方面中，A1為伸乙烯基、伸丙烯基、伸丁烯基、伸乙基、伸丙基、伸丁基、氧基伸丙基、氧基伸丙烯基、伸吡唑基、伸苯基或伸嘧啶基。
於具體實施態樣之另一方面中，A2為-CH(R8)-伸喹啉基、-CH(R8)-伸異喹啉基、-CH(R8)-伸啶基、-CH(R8)-伸啉基、-CH(R8)-伸喹啉基、-CH(R8)-伸苯基、-CH(R8)-伸萘基或-CH(R8)-伸鹵基苯基。於具體實施態樣之各種方面中，A2係選自： 和，其中A5連接基之左鍵連接至X1。於某些具體實施態樣中，R8為甲基。
於一些具體實施態樣中，X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；和R3為H。於另一具體實施態樣中，X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；R3為H；R4a和R4b中之一者為H，而另一者為甲基；和R5a和R5b中之一者為H，而另一者為異丙基。
於一具體實施態樣中，X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；R3為H；R4a和R4b中之一者為H，而另一者為甲基；R5a和R5b中之一者為H，而另一者為異丙基；-CH(R8)-伸雜芳基，且R8為甲基。
於另一具體實施態樣中，X1為-O-或-NH-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；R3為H；R4a為H；R4b為甲基；R5為異丙基；和R8為甲基。
於一具體實施態樣中，R6a和R6b中之一者為H，而另一者為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基。於另一具體實施態樣中，R6a為H；和R6b為H、(C1-C8)烷基或經雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二 (C1-C4)烷基胺基取代之(C1-C8)烷基。
於一具體實施態樣中，L1為-O-C(O)-。於另一具體實施態樣中，L1為-O-CH2-。於再另一具體實施態樣中，L1為-N(CH3)-C(O)-。於更另一具體實施態樣中，L1為-NH-CH2-。於某些具體實施態樣中，L1為-NH-S(O)2-。
於具體實施態樣之另一方面中，X1為4-至7-員伸雜環烷基。於特別具體實施態樣中，該伸雜環烷基具有鍵結至-C(R1)(R2)-之N環原子，且非限制性實施例包括：
於另一具體實施態樣中，提供式II化合物： 或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥，其中：A1為 或A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基； X1為鍵、-CH2-、-O-、-NH-、-N(CH3)-、或 ；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、羥基(C1-C8)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷基；R5為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C8)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基、環烷基或雜環烷基；R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且 R8為H或(C1-C4)烷基。
於式II的某些具體實施態樣中，A1為 或，其中A1連接基的左鍵連接至A2；A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基，其中A2連接基的左鍵連接至X1；X1為鍵、-CH2-、-O-、-NH-、-N(CH3)-、或 ；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；R5為H或(C1-C4)烷基；R6a和R6b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基、或或R6a和R6b一起形成或；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且 R8為H或(C1-C4)烷基。
於式II的某些具體實施態樣中，R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於式II的某些具體實施態樣中，R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於一具體實施態樣中，R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
其中A1連接基的左鍵連接至A2。
上面化合物的A2連接基可經各種位置異構物置換。其非限制性實施例包括具有下式之化合物： 其中上式化合物具有針對化合物a-1至a-14之表中特定取代基的相同組合或樣式。
亦包括具有下式之化合物：
其中A1連接基的左鍵連接至A2。
上面化合物的A2連接基可經各種位置異構物置換。其非限制性實施例包括具有下式之化合物： 其中上式化合物具有針對化合物a2-1至a2-14之表中特定取代基的相同組合或樣式。
於具體實施態樣之另一方面中，R4a為甲基；R5為異 丙基；R8為甲基；和A2為 或。此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
於另一具體實施態樣中，提供式II-c化合物： 或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥，其中：R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或 多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9。
於文中所述之化合物的一具體實施態樣中，R6a和R6b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、(C1-C8)烷基、鹵基(C1-C8)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基、鹵基(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基、、 或。
於文中所述之化合物的一具體實施態樣中，R6a和R6b一起形成
於一些具體實施態樣中，R6a和R6b一起形成 或。
於一些具體實施態樣中，該化合物為 或其藥學上可接受之鹽。
於再另一具體實施態樣中，提供式III化合物： 或其藥學上可接受之鹽，其中L1為-O-CH2-、-N(CH3)-C(O)-、-NH-CH2-、-N(CH3)-CH2-、-NH-CH(CF3)-或-NH-S(O)2-；A1為 或A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基；X1為-O-、-N(CH3)-或-NH-；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；R5為H或(C1-C4)烷基；R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且R8為H或(C1-C4)烷基。
於式III的一些具體實施態樣中，L1為-O-CH2-、-N(CH3)-C(O)-、-NH-CH2-或-NH-S(O)2-； A1為 或A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基；X1為-O-、-N(CH3)-或-NH-；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；R5為H或(C1-C4)烷基；R6a和R6b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基 (C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基、,, 或或R6a和R6b一起形成或；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且R8為H或(C1-C4)烷基。
於一具體實施態樣中，L1為-NH-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於一具體實施態樣中，L1為-NH-S(O)2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於此具體實施態樣之各種方面中，A2係選自
於一具體實施態樣中，L1為-N(CH3)-C(O)-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於一具體實施態樣中，L1為-O-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
於該具體實施態樣之一方面中，L1為-NH-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；和R8為甲基。此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
於該具體實施態樣之一方面中，L1為-NH-S(O)2-；R4a為甲基；R5為異丙基；和R8為甲基。此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
於該具體實施態樣之一方面中，L1為-N(CH3)-C(O)-；R4a為甲基；R5為異丙基；和R8為甲基。此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
於該具體實施態樣之一方面中，L1為-O-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；和R8為甲基。此類化合物的非限制性實施例包括下面化合物及其藥學上可接受之鹽類：
熟習該項技術者將理解，應選擇文中通式之化合物的取代基和其他部分以提供夠安定之化合物以提供藥學上有用之化合物，其可被調配成可接受之安定藥學組成物。預期具有此安定性之化合物落在本發明的範圍內。熟習該項 技術者應理解的是，上述定義和取代基的任何組合應不會導致無法操作之物種(species)或化合物。
巨環狀化合物的製備
本發明化合物如式(I)和(II)者可依據下述之流程圖予以製備，但應察知的是，所述之方法或其他方法的修飾亦可被使用。如圖1所述，巨環狀化合物M係合成自5種重要成分A-E，熟習該項技術者係藉由使其依序與適當使用之保護基(PG1-PG8)混合。藉此分別意指連接1、連接2等等之散列線編號1-5為5種連接以組合成分A-E。特定連接發生的順序可改變且取決於保護基和所需之化學性質的選擇。典型地，連接3、4或5係作為最終巨環化步驟。
PGx=保護基，若需要
X1和X2為O、NH、N-烷基等等
Z和Z1一起=CO2H、COCl、SO3H、SO2Cl、CH2-OH、CH2-鹵基、C(O)-烷基、C(O)-H等等
Y=烯、鹵化物、O-烯基、或OTf。
說明性地，連接1至5可如下述予以進行：
連接1、2為醯胺鍵。使用熟習該項技術者所周知之標準肽偶合劑(EDC/HOBT、DCC、PyBOP、PyBROP、HATU、HBTU、COMO等等)在各自的酸(respective acid)和胺之間完成連接。該酸與具有該偶合劑之胺偶合對在有機溶劑如DMF、二氯甲烷、乙腈等等中及在鹼如DIPEA、三乙基胺等等的存在下在室溫或稍微高溫下混合。當選擇這些步驟中的任一者作為最終巨環化步驟，則巨內醯胺化反應條件是較佳的。適合的巨內醯胺化反應程序包括但不限於該等見於下面文獻者：Davies,J.S.J.Peptide Sci.2003,9,471-501。
連接4是典型的碳-碳鍵或雜原子-碳鍵，其中該雜原子為O、S或N。當連接4為碳-碳鍵，則典型地涉及金屬媒介之交叉偶合反應的標準碳-碳鍵形成程序是較佳的。較佳地，係使用在sp2鹵化物基團和終端烯之間的Heck類型偶合、sp2鹵化物基團和乙烯基或芳基酸酯之間的Suzuki偶合、或2個烯類之間的環合置換反應(RCM)形成碳-碳鍵。還有反應亦可在乙烯基錫烷和芳基或乙烯基鹵化物之間予以進行，如Journal of American Chemical Society 2000,122,3830 Nicolaou等人中所述。在上面每一個實施例中，芳基或乙烯基鹵化物基團亦可為芳基或乙烯基三氟甲磺酸酯。
例如，當A中的Y為烯時，較佳地，-CH=CH2，且B中的A1包含終端烯或Me-CH=CH-，則進行交叉置換反 應。兩種成分在溶劑如乙腈、甲苯中混合，且添加置換反應觸媒如Grubbs I、Grubbs II或Hoyveda-Grubbs I、Hoyveda-Grubbs II，接著加熱。若此連接是最終程序以閉合該巨環狀的環，RCM條件是較佳的(例如，更稀釋的條件以避免二聚合反應)。有關RCM條件和實施例參見Journal of American Chemical Society 2003,125,3849Sedrani等人和Journal of American Chemical Society 2000,122,3830Nicolaou等人。典型的RCM程序包括非環前驅物在溶劑如甲苯或1,2-二氯乙烷中及在RCM觸媒如Grubbs I、Grubbs II或Hoyveda-Grubbs I、Hoyveda-Grubbs II的存在下的加熱(習知方式或藉由微波)。
或者，當連接4為Heck偶合，乙烯基或芳基鹵化物、或三氟甲磺酸酯A和烯成分B在極性溶劑如乙腈、甲苯中及在鈀(II)觸媒如Pd(OAc)2、膦配位基如P(鄰甲苯)3、P(第三丁基)3等等和鹼如三乙基胺的存在下混合。反應混合物以習知方式或在微波反應器內受熱。
或者，當連接4為Suzuki偶合，乙烯基或芳基鹵化物、或三氟甲磺酸酯A和乙烯基或芳基酸酯B在溶劑如環戊基甲基醚、甲苯、DMF、DME等等中及在鈀觸媒(例如，鈀(II)Cl2(對-NMe2Ph)2、和K3PO4或四(三苯基膦)鈀(0)和鹼如碳酸鉀的存在下混合。反應混合物以習知方式或在微波反應器內受熱。在Suzuki反應的情況中亦可能顛倒兩種成分使得A為芳基或乙烯基酸酯而B包含乙烯基或芳基鹵化物或三氟甲磺酸酯。
或者，連接4可為碳-氧鍵，且於此情況中，在羥基和烷基鹵化物、或芳基(或雜芳基)鹵化物之間可使用典型的烷化反應或親核芳香族取代反應條件。羥基試劑與烷基或雜芳基鹵化物(較佳地，碘化物或溴化物)在惰性溶劑如CPME、DMF、THF等等中及鹼如碳酸銫、氫氧化銫、氫化鈉、MaHMDS等等的存在下混合和受熱。
或者，連接4可為碳-氮鍵，且在此情況中，在胺基團和烷基鹵化物或雜芳基鹵化物之間可使用典型的烷化反應、親核芳香族取代反應或Buchwald條件。例如，胺和烷基或雜芳基鹵化物在惰性溶劑如CPME中及在鹼如碳酸銫、氫化鈉等等的存在下混合和受熱。碳-氮連接的替代程序是在胺和羰基化合物之間進行還原性胺化反應。典型地，胺和醛或酮在惰性溶劑如THF、二中混合且在一段時間之後用乙醯氧基硼氫化鈉或者替代的還原劑處理。
連接5典型地為醯胺(X1為NH(或經取代的N))、或酯(X1為O)鍵。當形成醯胺鍵時，則可使用針對連接1-3所述之標準偶合程序。通常，此為閉合巨環之最終步驟，所以偶合程序的巨內醯胺化反應類型是更有效的。適合的巨內醯胺化反應程序包括但不限於該等見於下面文獻者：Davies,J.S.J.Peptide Sci。2003,9,471-501。
當形成酯鍵時，可使用偶合試劑(例如，EDC、DCC、PyBOP、HATU、COMO)，或者當此為形成巨環的最終步驟時，巨內酯化反應程序是較佳的(例如，Shina、Yamaguchi)。巨內酯化反應步驟的實例方法可見於 Journal of American Chemical Society 2002,124,4257 Paquette等人或Chemical Reviews 2006,106(3),911-939。典型地，酸和醇混合在極性溶劑如DMF、乙腈等等中及在偶合劑和鹼如DIPEA、DMAP的存在下混合。
連接5亦可為醚鍵，其中R1和R2兩者皆為氫或烷基類型基團。於此實施例中，利用上面針對連接4所述之碳-氧鍵形成程序以連接該2種成分。連接5亦可為胺鍵，其中R1和R2兩者皆為氫或烷基，且連接胺和羰基成分之程序亦被描述於上面連接4。
連接3為在成分C和成分B之間的C-N、C-O、或S(O)2-N鍵形成反應，且適合此連接的方法包括：
當在連接3所形成的鍵是L1為-OC(O)-(即，X1在C中為O，且Z/Z1在B中為-CO2H或-CO-鹵素)，此係使用標準酯形成程序利用上述之偶合試劑予以進行，或當此為形成巨環的最終步驟時，巨內酯化反應程序是較佳的，如上述。
或者，當連接3是L1為-N(烷基)C(O)-(即，X1在C中為N(烷基)，且Z/Z1在B中為CO2H或CO-鹵素)，此係使用標準酯形成程序利用上述之偶合試劑予以進行，或當此為形成巨環的最終步驟時，巨內醯胺化反應程序是較佳的，如上述。
或者，當連接3是L1為-NHS(O)2-(即，X1在C中為-NH，且Z/Z1在B中為-S(O)2OH或-S(O)2-鹵素)，此係使用標準醯胺形成程序利用上述之偶合試劑予以進行，或當 此為形成巨環的最終步驟時，巨內醯胺化反應程序是較佳的，如上述。
或者，當連接3是L1為-NH-CH2-(即，X1在C中為-NH-，且Z/Z1在B中為酮或醛)，此係使用如上述之標準還原性胺化反應程序予以進行。
或者，當連接3是L1為-O-CH2-(即，X1在C中為O，且Z/Z1在B中包含離去基如鹵化物或三氟甲磺酸酯)，此係使用如上述之標準親核烷化反應程序予以進行。
下面一般流程圖提供自普通前驅物A-E建構巨環狀化合物M的一般實施例和順序。
化合物A-E先使用Greene and Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons,Inc所述之條件予以去保護(PG2-PG8)以提供化合物1a-1f。
在許多情況中，最理想的保護基及其去保護方法為如下。關於化合物E，酸的典型保護基PG1(當R1和R2為C=O)為甲基或三氯乙基酯。甲基和三氯乙基酯類可藉由鹼如LiOH在極性溶劑如水性THF等等中予以移除。三氯乙基酯亦可藉由在極性溶劑如THF中用鋅和乙酸銨處理而予以移除。典型地，PG2和PG4為酸不安定基，例如，BOC，且在二中使用HCl或在二、二氯甲烷中使用TMSOTf予以去保護。典型地，PG3和PG5為酯基團，係藉由在水性THF或二中用鹼金屬氫氧化物處理而予以移除。典型地，PG6為酸不安定基，例如，針對胺為BOC，且如針對PG2所述而予以移除；或針對羥基之矽基醚係藉由在有機溶劑如二氯甲烷中用TBAF的HF.吡啶處理而予以移除。典型地，PG8為胺保護基，例如，BOC，且如針對PG2所述而予以移除，或針對羥基之矽基醚係如針對PG6所述而予以移除，或乙酸酯保護基係藉由在水性 THF或二中用鹼金屬氫氧化物處理而予以移除。
使用上面針對連接1所述之條件使化合物1f偶合至酸1a以產生化合物1g。使用Greene and Wuts中所述之條件使化合物1g中的PG4去保護，且使用上面針對連接2所述之條件而偶合至酸1c以提供1h。產生1h的替代順序為先使用上面針對連接2所述之條件使胺1b偶合至酸1c以形成1i；使用Greeneand Wuts中所述之條件使1i中的保護基PG3去保護，且最終使用上面針對連接1所述之條件與胺1f偶合以形成1h。
使用Greene and Wuts中所述之條件使化合物1h的PG6去保護，且接著使用上面針對連接3所述之條件而被偶合至B以形成1j。亦說明至1j的替代途徑。使用上面針對連接3所述之方法使成分B偶合至1d。接著使用 Greene and Wuts中所述之條件移除保護基PG5，且產物與自PG4去保護的1g所產生之二肽偶合以提供1j。接著使用Greene and Wuts中所述之條件移除化合物1j中的保護基PG1，且接著使用針對連接5所述之條件使酸偶合至1e以形成中間體1k。自中間體1h至1k的替代順序首先為PG1的去保護，且接著如針對連接5所述偶合至1e；和接著如Greene and Wuts中所述的PG6的去保護，接著使用針對連接3所述之條件偶合至B以形成1k。產物1k接著進行如上面針對連接4所述之RCM以形成化合物M。
使用上面針對連接4所述之條件使化合物A偶合至化合物B以產生2a。典型地，以此順序，化合物B將被保護，例如，酸將為例如酯，例如，磺酸將為磺酸鹽酯，酮或醛將為縮醛。化合物2a接著如Greene and Wuts中所述的去保護以產生酸2b。酸2b接著被偶合至1h的經去保護產物(藉由如Greene and Wuts中所述的PG6的去保護 而自1h製備)以產生前驅物2c。使用Greene and Wuts中所述之條件進行2c的PG8和PG1兩者的去保護，且接著使用上面針對連接5中的巨內醯胺化反應或巨內酯化反應所述之條件環化產物以提供化合物M。
化合物2a的PG8如Greene and Wuts中所述予以去保護以產生3a，其接著使用上面針對連接5所述之條件而被偶合至1h的PG1去保護產物(藉由如Greene and Wuts中所述的PG1的去保護而自1h製備)以產生前驅物3b。若需要，使用Greene and Wuts中所述之條件進行3b的PG6和Z/Z1兩者的去保護，且接著使用上面針對連接3中的巨內醯胺化反應或巨內酯化反應所述之條件環化產物以提供化合物M。
來自流程圖1-3的最終巨環M常常包含側鏈上之保護基的官能性，其要求進一步移除以產生最終化合物M。例如，當M包含C=C，由於RCM，化合物M在溶劑如乙醇、甲醇等等中及在鈀/碳觸媒的存在下在氫氣的氛圍下混合以提供經還原的化合物M1。使用Greene and Wuts中所述之條件移除在R4a、R4b、R5、A1、A2和/或X1上的保護基以產生化合物M2。另一轉換反應為點擊化學(click chemistry)以產生三唑M3。此轉換反應係藉由在溶劑(例如，DMF)中用炔或疊氮，如適當，在在CuI存在下處理M中的該炔或疊氮而予以進行以形成M3。
經去保護的化合物M2在去保護反應之後可進一步被轉換成另外的巨環M，例如：在鹼如碳酸銫的存在下於溶劑如DMF、乙腈中用烷基鹵化物處理含有OH的M2形成經烷化的產物M4。含有酮基的M2在溶劑(例如，DMF、甲醇等等)中用胺處理，接著加入乙醯氧基硼氫化鈉以形成胺產物M5。
在A1中具有終端烯(Me-CH=C-)、或乙烯基/芳基酸酯、或鹵化物之許多酸類、酯類、酮類、醛、磺酸或鹵化物成分B為市場可購得的或如文獻中所述，且這些物質可直接用於上面流程圖。此外，下面流程圖為熟習該項技術者用於產生另外的B之方法的實施例。
於實施例1中，經保護的酸用強去質子鹼如LDA在惰性溶劑如在-78℃的THF和HMPA中予以處理。接著添加二氯乙炔的預冷溶液(藉由在THF中用氫化鉀和MeOH(催化)處理三氯乙烯而製備)以產生氯乙炔產物。此產物接著被還原，例如，係藉由在乙酸和THF中用Cu處 理以產生炔，其接著進一步被還原至烯，例如，係藉由在氫氣的存在下用中毒的鈀還原劑(例如，Lindlar)處理炔的醇溶液。或者，炔在二氯甲烷中及在頻那醇硼烷的存在下用Cp2ZrHCl處理以形成酸乙烯酯。
於實施例2中，具有α取代之β-酮基酯被轉換成三氟甲磺酸乙烯酯，例如，係藉由在-78℃之THF中用鹼如LDA處理β-酮基酯的THF溶液，接著加入PhN(Tf)2。三氟甲磺酸酯產物接著在高溫用吡啶處理以形成炔。炔接著如上面實施例1所述予以處理以產生烯或酸乙烯酯產物。
於實施例3中，應用掌性醛醇反應。先使用針對連接1-3所述之標準醯胺鍵形成條件使醯基連接至掌性輔劑，例如，Evans,Oppolzer sultam(參見JACS 1990,112,p2767)。Oppolzer輔劑產物在無水溶劑如二氯甲烷中用精選的醛、TBDMSOTf和鹼如三乙基胺處理。Evans輔劑在有機溶劑如在-78℃之THF中及精選的醛在路易斯酸如TiCl4、SnCl4或BF3OEt2的存在下用鹼如LDA、KHMDS、DIPEA處理。來自醛醇反應所得之醇的保護如在Green and Wuts中所述予以進行，或者，進行與烷基鹵化物或Meerwein氏試劑的烷化反應，即，在惰性溶劑如二氯甲烷中用四氟硼酸三甲基離子處理。接著使用標準鹼金屬氫氧化物移除條件，例如，LiOH在THF中，或LiOH和過氧化氫在THF中，移除輔劑以提供自由酸類產物。
於實施例4中，Evans輔劑用烯丙基鹵化物予以烯丙基化，如描述於Synlett 2002,12,2039-2040。產物接著在乙醇中用RhCl3處理而予以異構化，且接著輔劑藉由鹼和過氧化物，例如，LiOH和H2O2在THF/水中，予以移除。或者，輔劑藉由LiOH和H2O2在THF/水中而直接予以移除以提供終端烯。
於實施例5中，在醛(包含終端烯)上應用Horner Wadsworth Emmons反應以產生α-β不飽和酯，其接著選擇性地被還原成酯。例如，膦酸酯在低溫用用鹼如氫化鈉的THF溶液處理，接著加入醛和回暖以產生不飽和酯。產物係藉由在甲醇中用鎂粉處理而予以還原。
於實施例6中，α-β不飽和酸被轉換成不飽和Evans輔劑(參見Organic Letters 2007,9,p1635)且用醛處理以產生相對應的烯產物。羥基接著使用Greene and Wuts中所述之方法予以保護，且然後輔劑藉由用鹼和過氧化物如LiOH和H2O2的THF/水溶液處理而予以移除。羥基亦可藉由如上面針對醛醇實施例3所述者予以烷化。
於實施例7中，酮經由硝基烯烴而被轉換，如描述於Angew.Chem.Int.Ed.2006,45(46),7736。硝基烯烴接著在惰性溶劑如THF及銅(I)鹽如CuI和氯化三甲基矽基的在存在下用溴化乙烯基鎂處理。添加乙烯基之後的硝基烷基產物接著藉由在惰性極性溶劑如DMSO中用亞硝酸鈉和乙酸處理而被轉化成酸。
為了產生酮類、醛類、羥基、或鹵化物化合物，流程 圖5中所述之酸/酯產物可使用熟習該項技術者所周知之標準方法予以轉換。例如，conversion of酸在溶劑如THF、二氯甲烷中使用偶合劑而被轉化成Weinreb醯胺，接著用親核劑如MeMgBr、CF3SiMe和諸如此類者處理而產生酮類；羥基藉由在溶劑如THF、二氯甲烷等等中用氫化鋰鋁處理酯類而予以產生。羥基在溶劑如THF中用三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)和鹼如二異丙基乙基胺處理而被活化成三氟甲磺酸酯類。羥基轉化成鹵化物如溴化物的轉化反應係藉由用PPh3和四溴化碳處理而予以進行。
數種類型的A(或如所示之A1)係可得自市場上或被描述於文獻中，其中X1為O或NH，而Y為鹵化物或烯。下面流程圖描述產生A1的其他一般方法。
於部分1(Y為鹵素，在A1中)；起始化合物6a典型地為市售芳香族，其包含鹵素Y和可被轉換成酮6b之基團Z。典型的Z基團為鹵化物、酸、醛，例如：當Z為酸，6a在鹼如DIPEA和Weinreb胺(Me-NH-OMe)存在下以形成the Weinreb醯胺用偶合劑如HATU、EDC處理。醯胺接著用親核劑如TMS-CF3處理以形成CF3取代的酮6b，或在溶劑如在-78℃之THF中用格任亞試劑如 MeMgBr處理以形成甲基酮6b。
當Z為鹵素，若需要，接著最初轉換呈更具反應性鹵素的轉換反應在惰性溶劑如乙腈用NaI和乙醯氯處理而予以進行。鹵素接著藉由Stille反應使用乙氧基乙烯基錫烷而被轉換成酮。鹵化物在惰性溶劑如甲苯用錫烷和鈀(II)觸媒如PdCl2(PPh3)2處理，接著用2M HCl處理產物以提供酮6b。於一些情況中，自鹵化物基團形成格任亞可藉由在-78℃之THF中處理nBuLi而予以進行，且接著添加N-甲氧基-N-甲基醯胺以提供酮6b(例如，N-甲氧基-N-甲基乙醯胺提供R8=甲基酮6b)。產生酮6b的最終方法是透過乙烯基。6a在鈀觸媒如dCl2(dppf)存在下用三氟硼酸乙烯酯處理，且接著乙烯基產物隨後在極性溶劑如甲醇中在低溫下被臭氧分解(ozonolysed)以提供醛。醛接著與親核劑如TSM-CF3或格任亞試劑如MeMgBr反應以提供二級醇產物。二級醇產物接著用Dess Mar錫過碘烷氧化以提供所欲之酮6b或可作為A1本身。
在酮6b上使用掌性還原方法產生掌性醇(X1為O)和胺(X1為NH)A1。掌性醇6c係使用文獻中可得之許多掌性還原方法中之一者自6b予以形成。典型地，二氯(p-異丙苯)釕(II)二聚物和(1R,2R)-(-)-N-對甲苯磺醯基-1,2-二苯基乙二胺在水中結合，且將甲酸鈉和6b添加至水可溶混的溶劑如四氫呋喃。反應接著在介於周圍溫度和迴流溫度之間的溫度攪拌以產生6c，其中X1為O。或者，掌性CBS還原反應可在惰性溶劑如THF中及在低溫下予以進行亦 以提供掌性醇6c。OH in 6c之OH的保護係使用Greene and Wuts所述之方法予以進行，典型地，使用TBS醚或乙醯基以提供A1(X1為O)。
或者，關於掌性A1(X1為NH)，酮6b先被轉化成掌性亞胺(R10為掌性基團)，且接著使用文獻所述之各種方法予以還原。例如，掌性亞磺醯胺(sulfinamide)與酮6b反應以提供掌性亞磺醯亞胺(sulfinimine)6d，其接著用適當的還原劑，典型地，NaBH4或三第二丁基硼氫化物(selectride)予以還原，或如針對上面掌性醇所述之Noyori類型還原反應，用二氯(p-異丙苯)釕(II)二聚物和(1R,2R)-(-)-N-對甲苯磺醯基-1,2-二苯基乙二胺予以還原。亞磺醯胺輔劑接著藉由在適當的有機溶劑如甲醇中用礦酸(較佳地，HCl)處理予以移除以提供6e，其中X1=NH。NH基團的保護反應可如Greene and Wuts中所述予以進行以產生A1(X1為NH)。
於流程圖6的部分2，化合物A1(其中Y為-CH=CH2)的合成，說明置換反應和交叉偶合反應的前驅物。例如：部分1中所產生之化合物6c或6e先使用如Greene and Wuts中所述之適當的保護基隨意地對X1進行保護，且接著乙烯基藉由適當的交叉偶合方法而被引至芳基或sp2鹵化物。例如，過渡金屬媒介之與乙烯基錫烷或四氟硼酸乙烯基酯偶合(係在適當的有機溶劑如乙腈、二氯甲烷等等使用適當的鈀觸媒如PdCl2(dppf)2或PdCl2(PPh3)2 用熱或微波加熱)提供烯A1。
可用於引入乙烯基之另一典型方法係自酮6b(其中Y為OH)開始。最初地，醇的三氟甲磺醯化反應係藉由在鹼如吡啶存在下用Tf2O處理而予以進行。酮基團接著用Noyori還原反應予以還原，或如上述透過磺醯胺以提供掌性醇或胺。掌性醇或胺接著如Green and Wuts中所述予以保護，且接著三氟甲磺酸酯與乙烯基交叉偶合試劑如在Stille偶合之乙烯基錫烷反應，或如上述之三氟硼酸乙烯基酯反應，以引入烯。使用6b酮產生烯的另外實施例是經由烯丙基的引入。因此，6b(其中Y為OH)在惰性溶劑中在適當的鹼如鹼金屬碳酸鹽(較佳地，碳酸鉀)的存在下用溴化烯丙基處理以形成6f。然後，化合物6f類似酮6b且因此能如上面部分1中所述被轉變成具有保護基PG8之化合物A1(其中X1為O或NH)。
藥學調合物
本發明化合物與慣用之載劑和賦形劑一起調配，其將配合普通做法予以選擇。片劑將包含賦形劑、助流劑、填充劑、黏著劑和諸如此類者。水性調合物係以無菌形式予以製備，和當欲藉由非口服投予之方式輸送時，其一般將為等張的。
雖然活性成分可能單獨投予，其可能較佳以藥學調合物方式呈現。供動物和人類兩者應用之本發明調合物包括至少一種活性成分、和一或多種可接受之載劑、和隨意地 其他治療成分。
適合口服之本發明調合物可以下述方式呈現：離散單元如膠囊(capsule)和囊(cachet)或片劑，其每一者包含預定量之活性成分；粉末或顆粒；在水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；或水包油液體乳液或油包水液體乳液。活性成分亦可以大丸藥、糖劑或糊方式投予。
活性成分的有效劑量至少取決於正治療之病況的本質、毒性、化合物是否為預防性地正被使用(較低劑量)或用於抵抗活性病毒感染、輸送方法、和藥學調合物，且將由臨床醫師使用慣用之劑量遞增研究而決定。有效劑量可被預期為從約0.0001至約100mg/kg體重/天；典型地，從約0.01至約10mg/kg體重/天；更典型地，從約.01至約5mg/kg體重/天；最典型地，從約.05至約0.5mg/kg體重/天。例如，體重約70kg之成人的每日候選劑量(candidate dose)範圍將從1mg至1000mg，較佳地，介於5mg和500mg之間，且可採取單一劑亮或多劑量形式。
組合治療
本發明化合物可與一或多種活性劑組。待組合之適合活性劑的非限制性實施例包括一或多重干擾素、利巴韋林或其類似物、HCV NS3蛋白酶抑制劑、NS5a抑制劑、α-葡萄醣苷酶1抑制劑、肝保護劑、甲基二羥戊酸去羧酶拮抗劑、腎素升壓素系統的拮抗劑、其他抗纖維變性劑、內 皮素拮抗劑、HCV NS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑、HCV NS5B聚合酶的非核苷抑制劑、HCV NS5A抑制劑、TLR-7激動劑、親環蛋白抑制劑、HCV IRES抑制劑、藥物動力增強劑和治療HCV的其它藥物；或其混合物。
更具體地，待組合之一或多種化合物係選自由下列所組成之群組：1)干擾素，係選自聚乙二醇化的rIFN-α 2b(PEG-Intron)、聚乙二醇化的rIFN-α 2a(Pegasys)、rIFN-α 2b(Intron A)、rIFN-α 2a(Roferon-A)、干擾素α(MOR-22、OPC-18、Alfaferone、Alfanative、Multiferon、subalin)、干擾素alfacon-1(Infergen)、干擾素α-n1(Wellferon)、干擾素α-n3(Alferon)、干擾素-β(Avonex、DL-8234)、干擾素-Ω(Ω DUROS、Biomed 510)、albinterferon α-2b(Albuferon)、IFN α XL、BLX-883(Locteron)、DA-3021、糖基化的干擾素α-2b(AVI-005)、PEG-Infergen、聚乙二醇化的干擾素λ(PEGylated IL-29)、和belerofon，2)利巴韋林和其類似物，例如，利巴韋林(Rebetol、Copegus)、和他立韋林(taribavirin)(塔利韋林(Viramidine))，3)HCV NS3蛋白酶抑制劑，例如，博賽潑維(boceprevir)(SCH-503034、SCH-7)、特拉匹韋(telaprevir)(VX-950)、VX-813、TMC-435(TMC435350)、ABT-450、雙-201335、雙-1230、MK- 7009、SCH-900518、VBY-376、VX-500、GS-9256、GS-9451、BMS-790052、BMS-605339、PHX-1766、AS-101、YH-5258、YH5530、YH5531、和ITMN-191(R-7227)，4)α-葡萄醣苷酶1抑制劑，例如，西戈斯韋(celgosivir)(MX-3253)、米格列醇(Miglitol)、和UT-231B，5)肝保護劑，例如，emericasan(IDN-6556)、ME-3738、GS-9450(LB-84451)、silibilin、和MitoQ,6)HCV NS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑，例如，R1626、R7128(R4048)、IDX184、IDX-102、PSI-7851、BCX-4678、伐洛他濱(valopicitabine)(NM-283)、GS-6620和MK-0608,7)HCV NS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑，例如，非利布韋(filibuvir)(PF-868554)、ABT-333、ABT-072、雙-207127、VCH-759、VCH-916、JTK-652、MK-3281、VBY-708、VCH-222、A848837、ANA-598、GL60667、GL59728、A-63890、A-48773、A-48547、BC-2329、VCH-796(奈司布韋(nesbuvir))、GSK625433、BILN-1941、XTL-2125、和GS-9190，8)HCV NS5A抑制劑，例如，AZD-2836(A-831)、AZD-7295(A-689)、和BMS-790052，9)TLR-7激動劑，例如，咪喹莫特(imiquimod)、852A、GS-9524、ANA-773、ANA-975、AZD-8848(DSP-3025)、PF-04878691、和SM-360320， 10)親環蛋白抑制劑，例如，DEBIO-025、SCY-635、和NIM811，11)HCV IRES抑制劑，例如，MCI-067，12)藥物動力增強劑，例如，BAS-100、SPI-452、PF-4194477、TMC-41629、GS-9350、GS-9585、和羅紅黴素(roxythromycin)，13)治療HCV的其它藥物，例如，thymosin alpha 1(Zadaxin)、硝唑尼特(nitazoxanide)(Alinea、NTZ)、BIVN-401(virostat)、PYN-17(altirex)、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、GS-9525、KRN-7000、civacir、GI-5005、XTL-6865、BIT225、PTX-111、ITX2865、TT-033i、ANA 971、NOc-205、tarvacin、EHC-18、VGX-410C、EMZ-702、AVI 4065、BMS-650032、BMS-791325、Bavituximab、MDX-1106(ONO-4538)、Oglufanide、FK-788、和VX-497(merimepodib)14)甲基二羥戊酸去羧酶拮抗劑，例如，statins、HMGCoA synthase抑制劑(例如，hymeglusin)、squalene synthesis抑制劑(例如，zaragozic acid)；15)血管收縮肽II受體拮抗劑，例如，losartan、irbesartan、olmesartan、candesartan、valsartan、telmisartan、eprosartan；16)血管收縮肽-轉化酶抑制劑，例如，captopril、zofenopril、enalapril、ramipril、quinapril、perindopril、lisinopril、benazepril、fosinopril； 17)其他抗纖維變性劑，例如，阿米洛利(amiloride)；和18)內皮素拮抗劑，例如，波生坦(bosentan)和安立生坦(ambrisentan)。
於再另一具體實施態樣中，本案提供包括本發明之組成物和第二種藥學組成物之組合性治療藥劑，該第二種藥學組成物包括至少一種選自下列所組成之群組中的其他治療劑：HIV蛋白酶抑制化合物、反轉錄酶的HIV非核苷抑制劑、反轉錄酶的HIV核苷抑制劑、反轉錄酶的HIV核甘酸抑制劑、HIV整合酶抑制劑、gp41抑制劑、CXCR4抑制劑、gp120抑制劑、CCR5抑制劑、干擾素、利巴韋林類似物、NS3蛋白酶抑制劑、NS5a抑制劑、α-葡萄醣苷酶1抑制劑、親環蛋白抑制劑、肝保護劑、HCV的非核苷抑制劑、和治療HCV的其它藥物、和其組合物。
更明確地，本發明一或多種化合物可與選自下列所組成之群組中的一或多種化合物組合：1)HIV蛋白酶抑制劑，例如，安普那韋(amprenavir)、阿扎那韋(atazanavir)、福沙那偉(fosamprenavir)、茚地那韋(indinavir)、洛匹那韋(lopinavir)、利托那韋(ritonavir)、洛匹那韋+利托那韋、奈非那韋(nelfinavir)、沙奎那韋(saquinavir)、tipranavir、brecanavir、darunavir、TMC-126、TMC-114、mozenavir(DMP-450)、JE-2147(AG1776)、AG1859、DG35、L-756423、RO0334649、KNI-272、DPC-681、DPC-684、和GW640385X、DG17、PPL-100， 2)反轉錄酶的HIV非核苷抑制劑，例如，capravirine、emivirine、delaviridine、依非韋倫(efavirenz)、奈韋拉平(nevirapine)、(+)calanolide A、etravirine、GW5634、DPC-083、DPC-961、DPC-963、Mb-150、和TMC-120、TMC-278(rilpivirine)、依非韋倫、BILR 355 BS、VRX 840773、UK-453,061、RDEA806，3)反轉錄酶的HIV核苷抑制劑，例如，齊多夫定(zidovudine)、恩曲他濱(emtricitabine)、去羥肌苷(didanosine)、司他夫定(stavudine)、zalcitabine、拉米夫定(lamivudine)、阿巴卡韋(abacavir)、amdoxovir、elvucitabine、alovudine、Mb-210、racivir(±-FTC)、D-d4FC、恩曲他濱、phosphazide、fozivudinetidoxil、fosa1vudinetidoxil、apricitibine(AVX754)、amdoxovir、KP-1461、阿巴卡韋+拉米夫定、阿巴卡韋+拉米夫定+齊多夫定、齊多夫定+拉米夫定，4)反轉錄酶的HIV核甘酸抑制劑，例如，替諾福韋(tenofovir)、富馬酸替諾福韋酯(tenofovir disoproxil fumarate)+恩曲他濱、富馬酸替諾福韋酯+恩曲他濱+依非韋倫、和阿德福韋(Adefovir)，5)HIV整合酶抑制劑，例如，薑黃素、薑黃素的衍生物、chicoric acid、chicoric acid的衍生物、3,5-二咖啡醯奎寧酸(dicaffeoylquinic acid)、3,5-二咖啡醯奎寧酸的衍生物、金精三甲酸(aurintricarboxylic acid)、金精三甲酸的衍生物、咖啡酸苯乙酯、咖啡酸苯乙酯的衍生物、tyrphostin、tyrphostin的衍生物、槲皮素、槲皮素的衍生物、S-1360、 zintevir(AR-177)、L-870812、和L-870810、MK-0518(raltegravir)、BMS-707035、MK-2048、BA-011、BMS-538158、GSK364735C，6)gp41抑制劑，例如，恩夫韋肽(enfuvirtide)、西夫韋肽(sifuvirtide)、FB006M、TRI-1144、SPC3、DES6、Locus gp41、CovX、和REP 9，7)CXCR4抑制劑，例如，AMD-070，8)進入抑制劑，例如，SP01A、TNX-355，9)gp120抑制劑，例如，BMS-488043和BlockAide/CR，10)G6PD和NADH-氧化酶抑制劑，例如，immunitin，10)CCR5抑制劑，例如，aplaviroc、vicriviroc、INCB9471、PRO-140、INCB15050、PF-232798、CCR5mAb004、和maraviroc，11)干擾素，例如，聚乙二醇化rIFN-α 2b、聚乙二醇化rIFN-α 2a、rIFN-α 2b、IFN α-2b XL、rIFN-α 2a、共有IFN α、infergen、rebif、locteron、AVI-005、PEG-infergen、聚乙二醇化IFN-β、口服干擾素α、feron、reaferon、intermax α、r-IFN-β、infergen+actimmune、具有DUROS之IFN-ω、和albuferon，12)利巴韋林類似物，例如，rebetol、copegus、VX-497、和塔利韋林(他立韋林)，13)NS5a抑制劑，例如，A-831、A-689和BMS-790052，14)NS5b聚合酶抑制劑，例如，NM-283、伐洛他濱、R1626、PSI-6130(R1656)、IDX184、PSI-7851、HCc-796、BILB 1941、MK-0608、NM-107、R7128、VCH-759、PF-868554、GSK625433、和XTL-2125，15)NS3蛋白酶抑制劑，例如，SCH-503034(SCH-7)、VX-950(特拉匹韋)、 ITMN-191、和BILN-2065，16)α-葡萄醣苷酶1抑制劑，例如，MX-3253(西戈斯韋)和UT-231B，17)肝保護劑，例如，IDN-6556、ME 3738、MitoQ、和LB-84451，18)HCV的非核苷抑制劑，例如，苯並咪唑衍生物、苯並-1,2,4-噻二衍生物、和苯基苯胺衍生物，19)治療HCV的其它藥物，例如，日達仙、硝唑尼特(alinea)、BIVN-401(virostat)、DEBIO-025、VGX-410C、EMZ-702、AVI 4065、bavituximab、oglufanide、PYN-17、KPE02003002、actilon(CPG-10101)、KRN-7000、civacir、GI-5005、ANA-975、XTL-6865、ANA 971、NOc-205、tarvacin、EHC-18、和NIM811，19)藥物動力增強劑，例如，BAS-100、SPI-452、PF-4194477、TMC-41629、GS-9350、GS-9585、和羅紅黴素，20)RNAse H抑制劑，例如，ODN-93和ODN-112，21)其他抗HIV藥劑，例如，VGc-1、PA-457(bevirimat)、ampligen、HRG214、cytolin、polymun、VGX-410、KD247、AMZ 0026、CYT 99007、A-221HIV、BAY 50-4798、MDX010(ip1imumab)、PBS119、ALG889、和PA-1050040。
於此具體實施態樣中的特定方面，額外的治療劑係選自利巴韋林、特拉匹韋、博賽潑維和PSI-7977。
文中所述之組合治療可能以同時或依序療法予以投予。當依序投予時，組合可能以二或更多種投予方式予以投予。
本發明化合物與一或多種其他活性劑的共投予一般意 指本發明化合物和一或多種其他活性劑同時投予或依序投予，使得本發明化合物和一或多種其他活性劑之治療有效量兩者皆存於患者體內。
所揭示之一或多種化合物藉由適合待治療之病況的任何途徑予以投予。適合的途徑包括口服、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道和腸胃外(包括皮下、肌內、靜脈內、皮內、鞘內和硬膜外))和諸如此類者。將會理解的是，較佳的途徑可能隨例如接受者的狀況而變化。本發明化合物的優點是其是口服性生物可利用的，且可以口服。
於一些具體實施態樣中，投予化合物達約12星期或更少。於另外的具體實施態樣中，投予化合物達約12星期或更少、約8星期或更少、約8星期或更少、約6星期或更少、或約4星期或更少。化合物可能投予方式如下：一天一次、一天2次、隔日一次、，每週兩次、每週三次、每週4次、或每週五次。
治療病毒感染的方法
本案提供治療黃病毒科病毒感染的方法，其包括將治療有效量的文中所述之化合物或其藥學上可接受之鹽投予至需要彼之人類受試者。
亦提供治療冠狀病毒科病毒感染的方法，其包括將治療有效量的文中所述之化合物或其藥學上可接受之鹽投予至需要彼之人類受試者。
於一具體實施態樣中，抑制或治療疾病的方法包括將組成物投予至動物，該組成物包括有效量的本發明之一或多種化合物和藥學上可接受之載劑。待投予之組成物可能進一步包含如上所述之第二種治療劑。
本案方法特別適合用於人類，但可能用於其他動物，特別是哺乳動物如例如非人類靈長類動物、伴侶動物、農場動物、實驗室動物、及野生和動物園動物。
本案方法特別用於治療直接或間接由黃病毒科病毒所引起之疾病，因為本發明化合物對這些病毒具有抑制活性。於一些具體實施態樣中，因此，本發明方法用於抑制或治療由C型肝炎病毒所引起之疾病。在一方面中，此一方法被施用至患有由下述病毒感染所引起之疾病的患者：如登革熱、黃熱病、C型肝炎、日本腦炎、凱氏森林病(Kyasanur forest disease)、墨累穀腦炎、聖路易腦炎、蜱媒介性腦炎或西尼羅病毒。
於一些具體實施態樣中，持續性病毒學反應係在約12星期、約8星期、約6星期、或約4星期、或約4個月、或約5個月、或約6個月、或約1年、或約2年時達成。
本案方法亦特別用於治療直接或間接由冠狀病毒科病毒所引起之疾病，因為本發明化合物對這些病毒具有抑制活性。於一些具體實施態樣中，因此，本發明方法用於抑制或治療由SARS冠狀病毒所引起之疾病。在一方面中，此一方法被施用至患有由下述病毒感染所引起之疾病 的患者：如嚴重急性呼吸道症候群(SARS)、癌症、發炎、肥胖、後天性免疫不全症侯群(AIDS)、或硬化。
實施例
下面實施例僅為說明性的，而不以任何方式限制此揭示。
縮寫和首字母縮略字的列示
關於實施例1至58和實施例93至107，除非另有所述，製備級HPLC係在Gilson HPLC系統上進行，使用Agilent Eclipse XDB/C18 7微米，250×21.2mm半製備級管柱和乙腈/水動相，流速20mL/min。
關於實施例59至92和實施例108至112，除非另有所述，製備級HPLC係在Shimadzu HPLC系統上進行，使 用21.2×250mm 10微米C18 Phenomenex Gemini半製備級管柱和乙腈/水動相，流速20mL/min。
實施例1：(E)-(2R,3R)-7-(3-{(R)-1-[((S)-六氫-嗒-3-羰基)-胺基]-乙基}-苯基)-3-甲氧基-2-甲基-庚-6-烯酸(S)-2-甲基-1-((S)-1-甲基-2-側氧基-乙基胺甲醯基)-丙基酯
化合物1a的合成：製備1-((1R,5S)-10,10-二甲基-3,3-二側氧基-3λ*6*-硫-4-氮-三環並[5.2.1.0*1,5*]癸-4-基)-丙-1-酮(3.95g,14.55mmol)的甲苯溶液(50mL)，接著蒸發至乾。重複此方法，且得到的白色固體溶於無水的二氯甲烷(16mL)。添加少量的氫化鈣，之後添加三氟甲磺酸第三丁基二甲基矽基酯(3.83mL,14.5mmol)和無水的三乙基胺(2.33mL,16.7mmol)。反應混合物在室溫和氮氛圍下攪拌達15小時(“h”)。蒸發得到的溶液以產生濃稠的糊狀物，其再次溶於無水的二氯甲烷(15mL)且逐滴地添加至在-78℃和氮氛圍下之4-戊醛(2.69g,32.0mmol)和四氯化鈦(1M的二氯甲烷溶液，32mL,32mmol)在無水的二氯甲烷(20mL)中的受攪拌溶液。反應在-78℃攪拌達30分鐘，之後用飽和氯化銨水溶液(100mL)稀釋。分離層，且水層用另外的二氯甲烷萃取(2×50mL)。結合的萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到棕色膠狀物。此棕色膠狀 物藉由矽膠層析術使用4：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(3.09g,60%)，其為無色膠狀物。
化合物1b的合成：製備1a(250mg,0.703mmol)在無水的二氯甲烷(7mL)中的溶液，及添加四氟硼酸三甲基離子(208mg,1.406mmol)。反應混合物在室溫攪拌達15小時。反應混合物用甲醇(1mL)處理，接著用2M鹽酸(20mL)及飽和鹽水(20mL)處理。混合物用乙酸乙酯萃取(3×15mL)，且萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到黃色膠狀物。該膠狀物藉由矽膠層析術使用4：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(223mg,86%)，其為無色膠狀物。
化合物1c的合成：將2M氫氧化鋰的水溶液(5mL)添加至1b(223mg,0.60mmol)在四氫呋喃(15mL)中的受攪拌溶液。該受攪拌的混合物受熱至60℃達15小時。反應混合物被部分蒸發，之後添加2M鹽酸(20mL)。溶液用乙酸乙酯萃取(3×15mL)。萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到黃色膠狀物(209mg)。該膠狀物藉由矽膠層析術使用3：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化 合物(68mg,66%)，其為黃色膠狀物。
化合物1d的合成：(S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙酸(3.28g,17.32mmol)在乙腈(160mL)中的溶液被冷卻至0℃，之後依序添加N,N-二異丙基乙基胺(12mL,69.3mmol)和2-(1H-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽(6.57g,17.32mmol)。反應混合物在0℃攪拌達20分鐘，且添加(S)-六氫嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯三氟乙酸鹽(製備描述於Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1999,38,2443,6.49g,17.3mmol)在乙腈(80mL)中的溶液。使反應回暖至室溫且攪拌之達15小時。反應混合物被蒸發接著再次溶於乙酸乙酯(150mL)。溶液用鹽水(150mL)清洗。該鹽水用乙酸乙酯(50mL)反萃取。有機層被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到黑色油狀物。該油狀物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(6.88g,92%)，其為無色膠狀物。
化合物1e的合成：將三氟甲磺酸三甲基矽基酯(941μL,5.2mmol)添加至在0℃和氮氛圍下之1d(1.5g,3.5mmol)的無水二氯甲烷溶液(30mL)中。反應混合物在0℃攪拌達1小時，之後添加N,N-二異丙基乙基胺(2.2mL,13.9mmol)，且接著在真空中濃縮以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯。得到的殘留物溶於無水的乙腈(20mL)和被冷卻至0℃，之後添加(S)-2-羥基-3-甲基-丁酸(413mg,3.5mmol)、羥基苯並三唑單水合物(796mg,5.2mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(1.02g,5.2mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(1.7mL,10.4mmol)。反應混合物在0℃攪拌達90分鐘，回暖至室溫和攪拌達72小時，且在真空中濃縮。於殘留物中添加乙酸乙酯，及用飽和氯化銨和鹽水清洗。有機層用硫酸鎂乾燥、過濾和在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用2：1之異己烷/丙酮予以純化以得到標題化合物(1.1g,73%共2步驟)，其為白色固體物。
化合物1f的合成：製備1e(830mg,1.92mmol)在二氯甲烷(20mL)中的受攪拌溶液，和添加1c(34mg,2.00mmol)、N,N'-二環己基碳二亞胺(594mg,2.88mmol)和N,N-二甲基胺基吡啶(23mg,0.192mmol)。反應在室溫攪拌達18小時。添加另外量的(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸(34mg,2.00mmol)、N,N'-二環己基碳二亞胺(594mg,2.88mmol)和N,N-二甲基胺基吡啶(23mg,0.192mmol)，和反應在室溫再攪拌達22小時。反應混合物用水清洗，且水層用二氯甲烷(2×15mL)和乙酸乙酯(2×15mL)反萃取。有機層被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到棕色膠狀物。該膠狀物藉由矽膠層析術依序使用1：1之異己烷/乙酸乙酯和乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(656mg,58%)，其為白色固體物。
化合物1g的合成：製備1f(656mg,1.12mmol)在四 氫呋喃(30mL)中的溶液，及添加鋅粉(732mg,11.2mmol)和乙酸銨水溶液(1M,8mL,8mmol)。反應在室溫攪拌達18小時。混合物透過矽藻土(hyflo-supercel)過濾，接著依序用氯化銨和2M鹽酸酸化至pH 1。混合物用乙酸乙酯萃取(3×25mL)。萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到固體物，其與甲苯(40mL)共沸以得到標題產物(343mg,67%)，其為無色固體物。
化合物1h的合成：(R)-溴-α-甲基苯甲基胺(1.023g,5.112mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液隨後用三乙基胺(720μL,5.112mmol)和二碳酸二-第三丁基酯(1.784g,8.179mmol)處理。在室溫攪拌整夜之後，揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/二乙基醚的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(1.552g,100%)，其為白色固體物。
化合物1i的合成：1h(10.26g,0.0342mol.)和三丁基(乙烯基)錫烷(32.5g,30mL,0.103mol.)在甲苯(175mL)中的溶液用氮沖洗達30分鐘，之後添加氯化雙(三苯基膦) 鈀II(2.38g,0.0034mol.)。該受攪拌的混合物受熱至60℃達16小時，之後冷卻至室溫。反應混合物透過矽藻土過濾接著被蒸發以得到有黑色的油狀物。該油狀物藉由矽膠層析術使用19：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(6.95g,82%)，其為黃色油狀物。
化合物1j的合成：製備1i(6.95g,28.1mmol.)在1,4-二(30mL)中的溶液，及添加鹽酸的1,4-二溶液(4M,60mL)中。反應混合物在室溫攪拌達2小時接著被蒸發至乾。得到的固體物再次溶於甲苯和被蒸發。固體物用二乙基醚研磨，其藉由傾析而予以移除。固體物接著在真空下乾燥以得到標題化合物(4.96g,96%)，其為灰白色固體物。
化合物1k的合成：製備1g(343mg,0.752mmol)、1j(138mg,0.752mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(0.52mL,3.00mmol)在乙腈(25mL)中的溶液，及添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(methanaminium)(0.40g,1.05mmol)。混合物被留置以 在室溫攪拌達18小時。反應混合物被蒸發接著再次溶於乙酸乙酯(25mL)和水(25mL)。分離層，且水層用另外的乙酸乙酯萃取(2×20mL)。結合的有機層用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到棕色膠狀物。該膠狀物藉由矽膠層析術使用1：3之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(217mg,49%)，其為無色固體物。
標題化合物的合成：製備1k(217mg,0.37mmol)在1,2-二氯乙烷(125mL)中的受攪拌溶液，及添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(23mg,0.037mmol.)。該受攪拌溶液迴流受熱達3小時。添加另外的Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(46mg,0.074mmol.)，且反應再受熱至85℃達2小時。受冷卻的反應混合物用矽膠處理。混合物被蒸發，接著藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化以得到灰白色固體物(177mg)。此灰白色固體物藉由矽膠層析術使用5g匣和乙酸乙酯再次予以純化以得到標題化合物(67mg,32%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -丙酮)0.93(d,J=7.1Hz,3H),0.95(d,J=7.3Hz,3H),1.15(d,J=6.9Hz,3H),1.34(d,J=6.7Hz,3H),1.43(d,J=7.1Hz,3H),1.47-1.69(m,3H),1.70-1.91(m,3H),1.92-2.17(m, 3H),2.32-2.48(m,1H),3.02-3.13(m,1H),3.35(s,3H),3.40-3.65(m,3H),4.27-4.43(m,2H),4.80(d,J=5.3Hz,1H),5.00-5.15(m,1H),5.32-5.44(m,1H),6.20-6.33(m,1H),6.42(d,J=15.8Hz,1H),7.10-7.32(m,3H),7.34(s,1H),7.87(d,J=8.0Hz,1H)。LCMS(m/z)557.3[M+H],Tr=2.59分鐘。
實施例2：化合物2
化合物2a的合成：製備1-((1R,5S)-10,10-二甲基-3,3-二側氧基-3λ*6*-硫-4-氮-三環並[5.2.1.0*1,5*]癸-4-基)-丙-1-酮(6.0g,22.1mmol)在無水的二氯甲烷(24mL)中的溶液，及添加三氟甲磺酸第三丁基二甲基矽基酯(5.0mL,22.1mmol)，接著添加無水的三乙基胺(3.54mL,25.4mmol)。反應混合物在室溫和氮氛圍下攪拌達15小時。此得到黑色溶液，其被蒸發以得到油狀物。該油狀物溶於無水的二氯甲烷(22mL)中，及溶液逐滴添加至在-78℃和氮氛圍下之巴豆醛(3.66mL,44.2mmol)和四氯化鈦(1M的二氯甲烷溶液，44.2mL,44.2mmol)在二氯甲烷(22mL)中的溶液。反應混合物在-78℃攪拌達1小時，之後添加氯化銨溶液(30mL)。使受攪拌的混合物回暖至室溫，之後分離層。水層用二氯甲烷萃取(2×25mL)。有機層被結 合、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到棕色油狀物。該油狀物藉由矽膠層析術使用4：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(6.7g,89%)，其為無色固體物。
化合物2b的合成：製備2a(4.15g,12.1mmol)在無水的二氯甲烷(80mL)中的溶液，及依序添加1,8-雙(二甲基胺基)萘(7.78g,36.3mmol)和四氟硼酸三甲基離子(3.6g,24.2mmol)。反應混合物在室溫攪拌達3小時。反應混合物用甲醇處理(3mL)和攪拌達5分鐘，之後添加鹽酸(2M,200mL)和乙酸乙酯(250mL)。混合物被過濾以移除不溶的固體物，且分離層。水層用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。有機層被結合和用鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到標題化合物(4.80g,100%)，其為淡棕色固體物。
化合物2c的合成：將氫氧化鋰的水溶液(2M,50mL,100mmol)添加至2b(4.80g,12.1mmol)在四氫呋喃(130mL)中的受攪拌溶液。反應混合物受熱至60℃達15小時。反應混合物被冷卻至室溫，之後部分蒸發和添加鹽酸(2M,150mL)。混合物用乙酸乙酯萃取(3×50mL)。萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到棕色油狀物(3.5g)。 該油狀物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/二乙基醚予以純化以得到標題化合物(1.132g,59%)，其為無色油狀物。
化合物2d的合成：以與化合物1f相同方式予以製備化合物2d，以2c(148mg,0.94mmol)置換(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸，以提供標題化合物(340mg,76%)，其為白色固體物。
化合物2e的合成：6-溴-3-氯-異喹啉(Frontier Scientific,Logan,Utah USA)(8.0g,33mmol)和三丁基-(1-乙氧基-乙烯基)-錫烷(14.88g,14mL,41.2mmol)在甲苯(100mL)中的溶液用氮排氣達30分鐘。添加二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(1.16g,1.65mmol,5mol%)，且反應混合物在60℃受熱達20小時。反應混合物被冷卻至室溫，過濾混合物，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用20：1至10：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(7.1g,92%)，其為淡黃色固體物。
化合物2f的合成：2e(7.1g,30mmol)在1,4-二(60mL)和2M鹽酸(30mL)中的溶液在室溫攪拌達30分鐘。多數溶劑被蒸發，且殘留物被分配在乙酸乙酯和水之間。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物用5%醚的異己烷溶液研磨，且得到的固體物被收集和乾燥以提供標題化合物(6.0g產量)，其為白色固體物。
化合物2g的合成：2f(1.72g,8.3mmol)在四氫呋喃(40mL)中的溶液在氮下攪拌。依序添加乙氧化鈦(IV)(3.8g,3.45mL,16.6mmol，技術級)和(R)-(+)-2-甲基-丙烷sulfinimide(1.11g,9.2mmol)，且反應混合物在60℃和氮下攪拌達18小時。添加額外的(R)-(+)-2-甲基-丙烷sulfinimide(190mg,0.2當量)，且反應混合物在65℃再攪拌2小時。反應混合物被冷卻至室溫，及添加乙酸乙酯和鹽水。懸浮液透過矽藻土過濾，且過濾墊用乙酸乙酯清洗。乙酸乙酯層被分離、用鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用7：3至3：7之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(2.2 g,86%)。
化合物2h的合成：(1S,2R)-(-)-順式-1-胺基-2-二氫茚醇(60mg,0.4mmol)、[Ru(對異丙基甲苯基)Cl2]2(122mg,0.2mmol)和粉末狀的4Å分子篩(2g)的混合物懸浮於無水的2-丙醇(9mL)和在氮下攪拌。懸浮液在90℃受熱達20分鐘。反應混合物被冷卻至40℃，及依序添加2g(1.23g,4mmol)在2-丙醇(28mL)中的溶液和第三丁氧化鉀(122mg,1.1mmol)在2-丙醇(10mL)中的溶液。反應混合物在40℃攪拌達2小時，且接著使其冷卻。混合物被直接倒至矽膠匣且用乙酸乙酯沖提，蒸發之後得到標題化合物，其為棕色膠狀物(1.19g,96%)。
化合物2i的合成：2h(1.66g,2.11mmol)、三丁基(乙烯基)錫(1.85mL,6.35mmol)和四(三苯基膦)鈀(488mg,0.42mmol)物在二(10.5mL)中的混合物被密封於微波瓶中。反應混合物在微波反應器內於160℃受熱和攪拌達40分鐘。第二個反應係在相同等級和條件下進行，且反 應被結合和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用25至100%之乙酸乙酯的異己烷梯度溶液予以純化以提供標題化合物，其為棕色膠狀物(1g)。
化合物2j的合成：2i被懸浮於4M HCl的二溶液(17mL,68mmol)中，及添加甲醇(34mL)。反應混合物被攪拌達90分鐘，且接著被蒸發以得到標題化合物，其為二-HCl鹽。殘留物通過SCX匣，依序用甲醇和氨的甲醇溶液沖提。鹼性的部分被收集和蒸發以得到標題化合物，其為米黃色固體物(530mg,63%共2步驟)。
化合物2k的合成：化合物2k以與化合物1k相同方式予以製備，係藉由先用(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基-己-4-烯醯基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(340mg,0.59mmol)置換2d，和依循化合物1g的合成，且接著在化合物1k的的合成時用2j二鹽酸鹽置換(R)-1-(3-乙烯基-苯基)-乙基胺鹽酸鹽(160mg,0.59mmol)，以得到標題化合 物(240mg,66%,2步驟)，其為黏稠淺棕色油狀物。
標題化合物的合成：2k(300mg,0.48mmol)在甲苯(161mL)中的溶液用氮排氣達10分鐘，之後添加Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(61mg,0.1mmol)。該受攪拌溶液受熱至125℃達2小時，之後添加另外量的Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(61mg,0.1mmol)，且持續加熱達4小時。反應被冷卻至周圍溫度和濃縮至乾。殘留物藉由矽膠層析術依序使用1/0和3/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化，接著藉由製備級TLC使用8/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化以產生標題化合物(4mg,1%)，其為灰白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)0.80-1.11(m,6H),1.20-1.38(m,3H),1.42-1.70(m,6H),1.67-1.88(m,2H),1.89-2.25(m,3H),2.60-2.75(m,2H),2.98-3.18(m,1H),3.48(s,3H),3.58-3.77(m,1H),4.36-4.67(m,2H),4.91(s,1H),5.18-5.43(m,1H),5.61-5.76(m,1H),6.40-6.65(m,1H),6.82-7.10(m,3H),7.36-7.50(m,1H),7.64(s,1H),7.85-8.01(m,1H),8.18(s,1H),9.16(s,1H)。LCMS(m/z)=580.3[M+H],Tr=1.50分鐘。
實施例3：化合物3
化合物3a的合成：化合物3a以與化合物1f相同方式予以製備，以3-丁烯酸置換(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸，以提供標題化合物(397mg,66%)，其為白色固體物。
化合物3b的合成：於3a(390mg,0.78mmol)在四氫呋喃(17mL)和水(9mL)的溶液中逐滴加入鋅(1.11g,17.1mmol)，接著加入乙酸銨(899mg,11.7mmol)。反應混合物在室溫攪拌達15小時。反應透過矽藻土過濾，濾液用濃鹽酸酸化至pH 2，和用乙酸乙酯萃取2次。有機層透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮，接著與甲苯共蒸發(x 2)。得到的殘留物溶於無水的乙腈(15mL)，及依序添加(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺(211mg,0.78mmol)和羥基苯並三唑單水合物(119mg,0.78mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(210mg,1.1mmol)。 反應混合物在室溫攪拌達16小時。矽膠添加至反應混合物中且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術依序使用1/1之異己烷/乙酸乙酯和乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(276mg,57%,2步驟)，其為白色固體物。
標題化合物的合成：於Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(85mg,0.14mmol)和2,6-二氯苯醌(8mg,0.05mmol)在無水的甲苯(150mL)的迴流溶液中添加3b(250mg,0.45mmol)在甲苯/二氯乙烷(1：1,9mL)中的溶液，歷經1小時。依循1h，在迴流時，添加另外量的Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(42mg,0.07mmol)，和持續加熱達3小時。反應被冷卻至室溫和蒸發至乾。殘留物藉由矽膠層析術依序使用乙酸乙酯和3/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化以產生棕色泡沫物。此泡沫物進一步藉由製備級TLC使用8/1之乙酸乙酯/丙酮(x 2)予以純化以產生標題化合物(2mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)0.73-1.20(m,9H),1.40-2.08(m,5H),2.15-2.61(m,4H),3.14-4.15(m,6H),4.78-5.63(m,3H),6.67-7.03(m,2H),7.38-7.58(m,2H),7.83-8.04(m,2H),9.17(s,1H)。LCMS(m/z)=522.2[M+H],Tr=1.33分鐘。
實施例4-化合物4
化合物4a的合成：於(S)-4-苯甲基-2-唑啶酮(3.85g,21.7mmol)在-78℃之四氫呋喃(10mL)中的溶液中添加2.5M丁基鋰的己烷溶液(10mL,25mmol)，和混合物被攪拌達5分鐘。接著加入戊酸酐(5.15mL,26.1mmol)，且溶液在-78℃攪拌達50分鐘，之後添加鹽水(10mL)。接著使混合物回暖至室溫，其中添加更多鹽水(20mL)。有機液用乙酸乙酯萃取(2×50mL)，且結合的萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到粗製的油狀物。此油狀物藉由矽膠層析術使用9：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(5.24g,92%)。
化合物4b的合成：4a(5.24g,20.0mmol)在四氫呋喃(50mL)中的溶液被冷卻至-78℃。逐滴添加1M六甲基二矽氮烷鈉的四氫呋喃溶液(32.1mL,32mmol)，且保持內部溫度低於-70℃，添加完成後，持續在-78℃攪拌達1小時。於此時間之後，逐滴添加溴化烯丙基(6.98mL,80.2 mmol)，且保持內部溫度介於-55℃至-40℃之間。添加完成後，持續在-55℃和-40℃之間攪拌達3小時，之後，添加飽和氯化銨(20mL)，且使混合物回暖至室溫。有機液用乙酸乙酯萃取(2×100mL)，用鹽水清洗，用硫酸鈉乾燥和蒸發以得到粗製黃色油狀物。此油狀物藉由矽膠層析術依序使用1：0、95：5和9：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(2.95g,49%)。
化合物4c的合成：4b(2.95g,9.79mmol)在四氫呋喃(72mL)和水(36mL)中的溶液被冷卻至0℃。依序添加30%的過氧化氫水溶液(4.72mL,48.9mmol)和氫氧化鋰(470mg,19.6mmol)在水(7.2mL)中的溶液。混合物在0℃攪拌，且在3.42小時之後，添加亞硫酸鈉(11.3g,90mmol)在水(36mL)中的溶液，且溶液在0℃攪拌達15分鐘。溶液用飽和碳酸氫鈉處理直到pH=9-10，接著水相用乙酸乙酯清洗(3×100mL)，之後用1M硫酸酸化至pH=1-2，和用二乙基醚萃取(3×100mL)。二乙基醚萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到標題化合物(649mg,47%)，其為無色油狀物。
化合物4d：於室溫之1e(790mg,1.82mmol)的二氯甲烷溶液(9mL)中添加4c(388mg,2.19mmol)、N,N'-二環己基碳二亞胺(564mg,2.74mmol)和4-二甲基胺基吡啶(223mg,1.82mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達3小時。此時之後，反應混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋，和用飽和氯化銨溶液清洗。水相用二氯甲烷再萃取(2×50mL)，且結合的有機液用鹽水(100mL)清洗，用硫酸鎂乾燥和蒸發以得到白色殘留物。此殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(916mg,90%)。
化合物4e的合成：製備4d(916mg,1.65mmol)在四氫呋喃(41mL)中的溶液，及依序添加粉末狀的鋅(2.37g,36.2mmol)和乙酸銨(1.90g,24.7mmol)在水(10.2mL)中的溶液。反應混合物在室溫攪拌達24小時。反應透過矽藻土過濾，用乙酸乙酯及飽和硫酸氫鉀水溶液清洗。混合物用鹽酸(1M,5mL)處理，和分離層。水層用乙酸乙酯萃 取(2×100mL)。有機層被結合，用鹽水清洗，用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到無色膠狀物。殘留物與甲苯共沸(3×100mL)以得到標題化合物(675mg,89%)，其為白色固體物。
化合物4f的合成：4e(368mg,0.87mmol)溶於乙腈(5mL)，且依序添加(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺二鹽酸鹽(180mg,0.77mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(535μL,3.07mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(409mg,1.08mmol)。反應混合物在室溫攪拌達72小時。於反應混合物中添加2M鹽酸(15mL)，且混合物在真空中濃縮。殘留物被分配在水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之間。水層被分離和用乙酸乙酯(100mL)再萃取。有機層被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到粗製的殘留物。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(440mg,95%)，其為灰白色固體物。
標題化合物的合成：4f(440mg,0.73mmol)在甲苯(242mL)中的溶液用氮排氣達15分鐘，接著添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(91mg,0.15mmol)，且反應混合物在100-110℃受熱達2.5小時。此時間之後，添加更多Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(91mg,0.15mmol)，且反應混合物在110℃受熱達1小時，和使其冷卻至室溫。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/乙酸乙酯至純淨乙酸乙酯的梯度溶液予以純化。不純的產物(160mg)進一步藉由矽膠層析術使用99：1至4：1之二氯甲烷/丙酮的梯度溶液予以純化。得到純淨的產物(4.4mg)和不純的部分，其進一步藉由製備級HPLC予以純化，其中純淨的產物(22.6mg)被收集。純化之後，標題化合物被收集(27mg總計，6%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)0.93-1.11(m,11H),1.24-1.47(m,6H),1.63-1.82(m,3H),1.84-2.01(m,3H),2.41-2.72(m,2H),2.82(td,J=13.1,3.1Hz,1H),3.59-3.70(m,1H),4.46(dd,J=9.8,3.3Hz,1H),4.70-4.79(m,2H),5.17(q,J=6.9Hz,1H),5.83-5.96(m,1H),6.70(d,J=16.5Hz,1H),6.85-6.99(m,1H),7.59(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.71(s,1H),7.96(s,1H),8.03(d,J=8.5Hz,1H),8.54(br d,J=8.9Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)578.3[M+H],Tr=1.67分鐘。
實施例5-化合物5
化合物5a的合成：於室溫之(S)-4-苯甲基-3-((R)-2-甲基-戊-4-烯醯基)-唑啶-2-酮(如JACS 1990,112(8)2998-3017所製備，2.5g,9.16mmol)的乙醇(13mL)和水(1.5mL)溶液中添加三氯化銠水合物(48mg,0.23mmol)。反應受熱至80℃達8小時、冷卻、且在真空中濃縮。於得到的殘留物中添加水和用二氯甲烷萃取。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮以產生標題化合物(2.2g,88%)，其為棕色油狀物。
化合物5b的合成：於0℃之5a(2.2g,8.1mmol)的四氫呋喃(60mL)和水(20mL)溶液中添加氫氧化鋰(16mL,2.0M水溶液，32.2mmol)和過氧化氫(6.6mL,30%水溶液，64.5mmol)。反應在0℃攪拌達16小時，且接著藉由小心添加硫代硫酸鈉水溶液而驟冷。反應混合物被濃縮以移除四氫呋喃且接著用二氯甲烷清洗2次。水層用2M鹽酸酸化至pH 1及用二乙基醚萃取2次。結合的有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用5/1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合 物(530mg,57%)，其為透明油狀物。
化合物5c的合成：化合物5c以與1f相同方式予以製備，以5b(250mg,2.2mmol)置換(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸，以提供標題化合物(750mg,77%)，其為白色泡沫物。
化合物5d的合成：於5c(750mg,1.42mmol)在四氫呋喃(35mL)和水(20mL)的溶液中依序添加粉末狀的鋅(2.03g,31.2mmol)和乙酸銨(1.64g,21.3mmol)。反應混合物在室溫攪拌達15小時。反應透過矽藻土過濾，濾液用濃鹽酸酸化至pH 2，和用乙酸乙酯萃取2次。有機層透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮，接著與甲苯蒸發(x 2)。得到的殘留物溶於無水的乙腈(15mL)，及依序添加(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺二鹽酸鹽(385mg,1.4mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(743μL,4.3mmol)和2- (1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(755mg,2.0mmol)。反應混合物在室溫攪拌達3小時。將矽膠添加至反應混合物且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(580mg,71%,2步驟)，其為透明黏稠油狀物。
標題化合物的合成：5d(250mg,0.43mmol)在甲苯(144mL)的溶液用氮排氣達30分鐘，之後回暖至70℃，及添加Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(54mg,0.09mmol)。該受攪拌溶液受熱至125℃達45分鐘。添加另外量的Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(50mg,0.08mmol)，且持續加熱達2小時。添加另一部份的Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(27mg,0.04mmol)，且持續加熱達3小時。反應被冷卻至室溫，及添加異氰基乙酸鉀(120mg)的甲醇溶液(2mL)。攪拌1小時之後，反應混合物被濃縮至約其原體積的一半、用矽膠處理且接著被蒸發至乾。殘留物藉由矽膠層析術依序使用1/0和5/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化以產生白色固體物。此固體物進一步藉由HPLC予以純化以產生標題化合物(2mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 4 -MeOH,2：1非鏡像異構混合物，引用主要 的非鏡像異構物峰)0.99(d,J=6.7Hz,3H),1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.47(d,J=6.9Hz,3H),1.56-1.64(m,6H),1.65-1.79(m,1H),1.83-2.00(m,3H),2.09-2.25(m,1H),2.73-2.87(m,1H),3.41-3.52(m,1H),3.63-3.71(m,1H),4.38-4.48(m,1H),5.12(d,J=8.5Hz,1H),5.18(q,J=6.7Hz,1H),5.82(q,J=7.1Hz,1H),6.47(dd,J=16.0,6.3Hz,1H),6.67(dd,J=16.0,1.0Hz,1H),7.60-7.67(m,2H),7.75(s,1H),8.06(d,J=8.7Hz,1H),9.14(s,1H)。LCMS(m/z)=536.2[M+H],Tr=1.30分鐘。
實施例6-化合物6
化合物6a的合成：(R)-溴-α-甲基苯甲基胺(2.0g,10mmol)在二氯甲烷(20mL)的溶液用二碳酸二-第三丁基酯(2.4g,11mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)處理，且反應混合物在室溫攪拌達1小時。溶液用2M鹽酸、水和鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用20：1至6：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(2.51g,84%)，其為白色固體物。
化合物6b的合成：6a(900mg,3mmol)、4-(2-甲氧基羰基乙基)苯基酸(624mg,3mmol)的1,2-二甲氧基乙烷(10mL)溶液和碳酸鉀(828mg,6mmol)的水(2mL)溶液的混合物在室溫攪拌。添加四(三苯基膦)鈀(0)(172mg,0.15mmol)，且反應混合物在微波反應器於100℃受熱達1小時。分離有機層。有機層透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用20：1至5：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(958mg,83%)，其為白色固體物。
化合物6c的合成：6b(958mg,2.5mmol)的四氫呋喃溶液(15mL)在5℃攪拌。添加氫氧化鋰水合物(300mg,5mmol)的水溶液(5mL)，且反應混合物在攪拌5℃達1小時且接著在室溫攪拌達1小時。大多數的溶劑被蒸發，和添加水，及添加2M鹽酸以調整溶液的pH至pH 2。混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機層透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(883mg,96%)，其為白色固體物。
化合物6d的合成：6c(1.6g,4.3mmol)、1e(1.86g,4.3mmol)的二氯甲烷溶液(60mL)在室溫和氮下攪拌。添加N-(3-二甲基胺基丙基)-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.25g,6.5mmol)和4-二甲基胺基吡啶(525mg,4.3mmol)，且反應混合物在室溫和氮下攪拌達24小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，且溶液用檸檬酸水溶液(pH 2-3)、水和鹽水清洗。有機層透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用6：4之異己烷/乙酸乙酯，接著藉由矽膠層析術使用6：4之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(2.0g,60%)，其為白色泡沫物。
化合物6e的合成：6d(1.96g,2.5mmol)的四氫呋喃溶液(50mL)在室溫和氮下攪拌。依序添加鋅粉(3.58g,55mmol)和乙酸銨(2.9g,37.5mmol)的水溶液(25mL)，且反應混合物在在室溫和氮下攪拌達24小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液墊用乙酸乙酯和2M鹽酸清洗。濾液用2M鹽酸酸化至pH 2，添加氯化鈉以飽和水層。混合物用乙酸乙酯萃取(x 3)。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗、用無水硫酸鎂乾燥，且溶劑被蒸發。殘留物與乙酸乙酯(x 3)、甲苯(x 4)共蒸發和乾燥以提供標題化合物 (1.56g,95%)，其為白色固體物。
標題化合物的合成：6e(850mg,1.3mmol)在4M HCl二溶液(12mL)中的混合物在室溫和氮下攪拌達1小時。溶劑被蒸發，且殘留物用二乙基醚研磨(x 3)。得到的固體物被收集、用二乙基醚清洗和乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{3-[3'-((R)-1-胺基-乙基)-聯苯基-4-基]-丙醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(1.3mmol)。(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{3-[3'-((R)-1-胺基-乙基)-聯苯基-4-基]-丙醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(1.3mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(671mg,0.9mL,5.2mmol)的二氯甲烷溶液(1300mL)在0℃和氮下攪拌。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(988mg,2.6mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達20小時。溶劑被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用7：3至1：1之異己烷/丙酮的梯度溶液予以純化，接著藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化。得到的固體物用醚研磨，且固體物被收集和乾燥以提供標題化合物(395mg,57%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.94(d,J=6.7Hz,3H),1.00(d,J=6.7Hz, 3H),1.31(d,J=7.1Hz,3H),1.54(d,J=6.9Hz,3H),1.85-2.20(m,5H),2.65-3.10(m,5H),3.53-3.59(m,1H),4.38-4.25(m,1H),4.64(d,J=12.5Hz,1H),4.72(d,J=9.6Hz,1H),5.05(q,J=6.9Hz,1H),5.24(q,J=7.1Hz,1H),4.82-4.90(m,2H),7.23-7.30(m,3H),7.37-7.55(m,5H)。LCMS(m/z)535.2[M+H],Tr=5.11分鐘。
實施例7：(E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-羥基-14-異丙基-2,11,17-三甲基-15-氧-3,9,12,28-四氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(26),21,23(27),24-四烯-4,10,13,16-四酮-化合物7
化合物7a的合成：(2R,3R)-1-((1R,5S)-10,10-二甲基-3,3-二側氧基-3λ*6*-硫-4-氮-三環並[5.2.1.0*1,5*]癸-4-基)-3-羥基-2-甲基-庚-6-烯-1-酮(12.0g,0.034mol)的無水二氯甲烷溶液(520mL)被冷卻至0℃，之後依序添加吡啶(5.5mL,0.068mol)、三氟甲磺酸第三丁基二甲基矽基酯(9mL,0.039mol)。反應在0℃攪拌達15分鐘，接著使其回暖至室溫達1.5小時。反應混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(400mL)驟冷。水層用二氯甲烷(200mL)反萃取。有機層被結合和依序用鹽水(200mL)、2M鹽酸(200mL)清洗。溶液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到標題產物 (15.29g,96%)，其為白色固體物。
化合物7b的合成：製備7a(15.29g,0.0325mol)的四氫呋喃溶液(300mL)，及添加氫氧化鋰水溶液(2M,120mL)。該受攪拌的混合物受熱至60℃達16小時。反應混合物被冷卻至室溫，接著用2M鹽酸(250mL)處理。分離層，且水層用乙酸乙酯萃取(2×200mL)。有機層被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到灰白色固體物。該固體物藉由矽膠層析術使用3：7之二乙基醚/異己烷予以純化以產生標題產物(7.18g,81%)，其為無色膠狀物。
化合物7c的合成：於室溫和氮氛圍下之1e(510mg,1.2mmol)的無水二氯甲烷溶液(4mL)中添加7b(385mg,1.41mmol)、二環己基碳二亞胺(364mg,1.8mmol)和4-N,N-二甲基胺基吡啶(142mg,1.2mmol)。白色懸浮液在室溫攪拌達20小時，之後添加矽膠，且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用2/1之異己烷/乙酸乙酯予以純化 以提供標題化合物(700mg,86%)，其為黏稠透明油狀物。
化合物7d的合成：於7c(700mg,1.02mmol)的四氫呋喃(22mL)和水(13mL)的溶液中依序添加粉末狀的鋅(1.46g,22.4mmol)、乙酸銨(1.2g,15.3mmol)。反應混合物在室溫攪拌達15小時。反應透過矽藻土過濾，且在真空中濃縮以移除四氫呋喃。得到的溶液用濃鹽酸酸化至pH 1-2，和用二氯甲烷萃取(2 x)。有機層透過疏水性玻璃料乾燥，且在真空中濃縮，接著與甲苯蒸發(2 x)。得到的透明黏稠油狀物溶於無水的乙腈(8mL)，及依序添加(R)-1-(3-乙烯基苯基)乙基胺鹽酸鹽(187mg,1.0mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(900μL,5.1mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(542mg,1.4mmol)。反應混合物在室溫攪拌達15小時。矽膠被添加至反應混合物且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用1/1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(450mg,64%)，其為灰白色固體物。
標題化合物的合成：7d(450mg,0.66mmol)的1,2-二氯乙烷溶液(219mL)用氮排氣達15分鐘，之後添加Hoveyda Grubbs 2nd代觸媒(41mg,0.07mmol)。該受攪拌溶液受熱至80℃達2小時。反應被冷卻、濃縮至約20mL、用矽膠處理和接著被蒸發至乾。殘留物藉由矽膠層析術依序使用1/1和1/3之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生(E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-14-異丙基-2,11,17-三甲基-15-氧-3,9,12,28-四氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(26),21,23(27),24-四烯-4,10,13,16-四酮(138mg)，其為棕色泡沫物。該泡沫物(80mg,0.12mmol)溶於無水四氫呋喃(6.5mL)且被移至聚丙烯瓶中。在周圍溫度，將氟化氫‧吡啶(102μL,1.2mmol)添加至反應混合物中，接著攪拌達1小時。添加額外量的氟化氫‧吡啶(600μL,7.1mmol)，接著攪拌達1小時。添加更多氟化氫‧吡啶(700μL,8.2mmol)，且在1小時之後，反應藉由將反應混合物緩慢添加至乙酸乙酯/飽和氯化銨水溶液的受攪拌溶液而予以驟冷。有機層被分離，且水層進一步用乙酸乙酯萃取(2 x)。結合的有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用8/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化以提供標題化合物 (33mg,16%,2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(500MHz,CD3CN)0.92(d,J=6.7Hz,3H),0.97(d,J=6.7Hz,3H),1.26(d,J=7.3Hz,3H),1.31(d,J=6.7Hz,3H),1.41(d,J=6.7Hz,3H),1.43-1.63(m,4H),1.78-1.89(m,2H),2.03-2.09(m,1H),2.40-2.49(m,2H),2.50-2.56(m,1H),2.65-2.72(m,1H),3.32(td,J=11.0,2.4Hz,1H),3.49-3.61(m,1H),4.07(d,J=12.2Hz,1H),4.31(d,J=12.8Hz,1H),4.74(d,J=5.5Hz,1H),4.97-5.04(m,1H),5.18-5.25(m,1H),6.27-6.34(m,1H),6.38(d,J=15.9Hz,1H),6.96-7.31(m,6H)。LCMS(m/z)=543.2[M+H],Tr=2.27分鐘。
實施例8：(E)-(2R,5S,11S,14S)-14-異丙基-2,11-二甲基-15-氧-3,9,12,28-四氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(27),21,23,25-四烯-4,10,13,16-四酮-化合物8
化合物8a的合成：於室溫之1e(791mg,1.83mmol)的二氯甲烷溶液(9mL)中在添加庚-6-烯酸(0.296mL,2.19mmol)、N,N'-二環己基碳二亞胺(564mg,2.74mmol)和4-N,N-二甲基胺基吡啶(223mg,1.82mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達2小時。此時間之後，反應混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋和用飽和氯化銨水溶液清洗。水相用二氯 甲烷再萃取(2×50mL)，且結合的有機液用鹽水(100mL)清洗和用硫酸鎂乾燥及蒸發以得到白色殘留物。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/乙酸乙酯至純淨乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以產生標題化合物(774mg,81%)。
化合物8b的合成：製備8a(650mg,1.20mmol)的四氫呋喃溶液(29mL)，及依序添加粉末狀的鋅(1.72g,26.3mmol)和乙酸銨(1.38g,18.0mmol)的水溶液(7.0mL)。反應混合物在室溫攪拌達72小時。反應透過矽藻土過濾及用乙酸乙酯和飽和硫酸氫鉀水溶液清洗。混合物用鹽酸(1M,3mL)處理，及分離層。水層用乙酸乙酯萃取(2×100mL)。有機層被結合，用鹽水清洗、過濾和蒸發以得到無色膠狀物。殘留物與甲苯共沸(3×100mL)以得到標題化合物(492mg，定量產量)，其為白色固體物。
化合物8c的合成：於8b(257mg,0.63mmol)的乙腈(2mL)溶液中依序添加(R)-1-(3-乙烯基-苯基)-乙基胺鹽酸 鹽(122mg,0.83mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(435μL,2.5mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(333mg,0.88mmol)。反應混合物在室溫攪拌達48小時。混合物被蒸發至乾，歷經48小時，殘留物被分配在水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之間。水層被分離，和用乙酸乙酯(100mL)再萃取。有機層被結合、用硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發以得到粗製的殘留物。殘留物藉由矽膠層析術使用7：3至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液至純淨的乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(194mg,57%)。
標題化合物的合成：8c(194mg,0.36mmol)的1,2-二氯乙烷溶液用氮排氣達15分鐘，接著添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(23mg,0.04mmol)，及反應混合物在80℃受熱達2.3小時。此時間之後，使反應混合物冷卻至室溫，且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用1：9之異己烷/乙酸乙酯至純淨乙酸乙酯的梯度溶液予以純化。得到不純的產物(74mg)，其進一步藉由製備級逆相HPLC予以純化，其中標題化合物被收集(28mg,15%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)。0.96(d,J=6.9Hz,3H),0.99(d,J=6.9Hz,3H),1.41-1.51(m,8H), 1.59-1.82(m,4H),1.85-1.96(m,2H),2.02-2.26(m,3H),2.32-2.57(m,2H),2.80(td,J=12.9,2.2Hz,1H),3.50(dd,J=11.0,2.5Hz,1H),4.39(br d,J=13.2Hz,1H),4.76(d,J=8.0Hz,1H),4.99(q,J=6.9Hz,1H),5.46(q,J=7.1Hz,1H),6.19(m,1H),6.40(d,J=15.8Hz,1H),7.11-7.17(m,1H),7.20-7.30(m,3H)。LCMS(m/z)513.2[M+H],Tr=2.58分鐘。
實施例9-化合物9
於化合物4(16.6mg,0.0287mmol)的乙酸乙酯(10mL)的溶液中添加10%鈀/碳(5mg)且在氫氛圍下攪拌達1.5小時。接著添加額外的10%鈀/碳(5mg)和持續在氫氛圍下攪拌達24小時。反應混合物透過矽藻土過濾以移除觸媒和蒸發，接著藉由製備級逆相HPLC予以純化以產生標題化合物(5.3mg,32%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)0.89-1.05(m,9H),1.29-1.46(m,2H),1.59(dd,J=7.1,1.6Hz,6H),1.65-1.99(m,7H),2.09-2.18(m,1H),2.43-2.58(m,1H),2.74-3.06(m,3H),3.57-3.68(m,1H),4.43(dd,J=13.4,2.7Hz,1H),4.59(br s,3H),4.66(d,J=7.4Hz,1H),5.15(q,J=6.9Hz,1H),5.66-5.78(m,1H),7.58(dd, J=8.5,1.6Hz,1H),7.69(s,1H),7.70(s,1H),8.03(d,J=8.5Hz,1H),8.40(br d,J=8.7Hz,1H),9.08(s,1H)。LCMS(m/z)580.3[M+H],Tr=1.53分鐘。
實施例10：(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-羥基-14-異丙基-2,11,17-三甲基-15-氧-3,9,12,28-四氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(26),23(27),24-三烯-4,10,13,16-四酮-化合物10
於室溫之(E)-(2R,5S,11S,14S,17R,18R)-18-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-14-異丙基-2,11,17-三甲基-15-氧-3,9,12,28-四氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(26),21,23(27),24-四烯-4,10,13,16-四酮(50mg,0.08mmol)的乙酸乙酯(10mL)溶液中添加10%鈀/碳(50mg)。系統用氫氣沖洗和激烈攪拌達16小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液墊用甲醇清洗。濾液在真空中濃縮。得到的殘留物溶於無水的四氫呋喃(5mL)中及移至聚丙烯瓶中。在室溫，將氟化氫‧吡啶(1.3mL,15.2mmol)添加至反應混合物中，接著攪拌達3小時。反應用乙酸乙酯稀釋，和藉由小心添加飽和氯化銨水溶液而予以驟冷。有機 層被分離、透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用5/1之乙酸乙酯/丙酮予以純化以提供標題化合物，其為白色固體物。此固體物進一步藉由用二乙基醚研磨而予以純化、過濾和在真空中乾燥該固體物(20mg,48%,2步驟)。1H NMR(300MHz,CD3CN)0.90-1.00(m,6H),1.24-1.30(m,6H),1.43(d,J=6.9Hz,3H),1.32-2.08(m,11H),2.45-2.81(m,4H),3.23-3.36(m,1H),3.47-3.59(m,1H),3.67(d,J=10.3Hz,1H),4.02(d,J=11.8Hz,1H),4.29(d,J=13.8Hz,1H),4.75(d,J=5.4Hz,1H),4.95-5.08(m,1H),5.16-5.29(m,1H),7.03-7.29(m,6H)。LCMS(m/z)=545.3[M+H],Tr=2.15分鐘。
實施例11-化合物11
化合物11a的合成：(E)-戊-3-烯-2-醇(1.024g,11.887mmol)的二氯甲烷冷(0℃)溶液(30mL)隨後用吡啶(1.222g,1.3mL,15.452mmol)和丙醯氯(1.430g,1.3mL,15.452mmol)處理。在0℃攪拌達1.5小時之後，反應用飽和碳酸氫鈉驟冷。水層用二氯甲烷萃取，接著有機液被結合、透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至9：1之異己烷/Et2O連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物 (787mg,46%)，其為無色油狀物。
化合物11b的合成：N,N-二異丙基胺(672.0mg,930μL,6.641mmol)的四氫呋喃冷(0℃)溶液(15mL)用正丁基鋰(2.5M的己烷溶液，2.4mL,6.088mmol)處理。在0℃攪拌達20分鐘之後，此溶液被冷卻至-78℃且隨後用氯三甲基矽烷(841.7mg,990μL,7.748mmol)和11a(787.0mg,5.534mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液處理。反應混合物緩慢回暖至室溫。16小時之後，反應用1M鹽酸(40mL)驟冷，且pH用2M鹽酸調整至2。水層用乙酸乙酯萃取(2×40mL)，有機液被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(375mg,48%)，其為無色油狀物。
化合物11c的合成：化合物11c以與化合物1f相同方式予以製備，使用11b和N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙 基碳二亞胺鹽酸鹽代替(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸和N,N'-二環己基碳二亞胺，60%產率。
化合物11d的合成：化合物11d以與化合物1k相同方式予以製備，係藉由先使用11c代替1f，和依循1g的製備，且接著在自1g合成1k時，使用(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺二鹽酸鹽代替(R)-1-(3-乙烯基-苯基)-乙基胺鹽酸鹽，81%產率。
標題化合物的合成：化合物11以與化合物1相同方式予以製備，使用11d代替1k和使用甲苯代替二氯乙烷，8%產率。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.97-1.07(m,7H),1.25(d,J=7.1Hz,3H),1.31(d,J=7.1Hz,3H),1.55-1.63(m,6H),1.65-1.78(m,1H),1.83-2.00(m,3H),2.14(明顯的六重峰，J=6.7Hz,1H),2.69-2.79(m,1H),2.80-2.90(m,1H),3.65(明顯的t,J=8.0Hz,1H),4.45(br d, J=13.6Hz,1H),4.78(dd,J=6.0,19.6Hz,2H),5.15(明顯的五重峰，J=6.2Hz,1H),5.83(dq,J=7.1,19.9Hz,1H),6.65(dd,J=6.7,17.2Hz,1H),6.79-6.93(m,1H),7.53-7.61(m,1H),7.71(d,J=5.1Hz,1H),7.96(d,J=4.7Hz,1H),8.03(d,J=8.0Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)564.1[M+H],596.1[M+Na],Tr=3.73分鐘。
實施例12-化合物12
化合物12a的合成：製備2,2-二甲基-4-戊烯酸(202mg,1.58mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液，及依序添加草醯氯(411μl,4.74mmol)和二甲基甲醯胺(5μl)。混合物激烈地冒泡且在室溫攪拌達1小時，之後蒸發以得到固體物(241mg)。該固體物溶於甲苯(10mL)，及依序添加1e(433mg,1.0mmol)和氰化銀(310mg,2.25mmol)。燒瓶用箔遮蓋以排除光，之後加熱至80℃達10分鐘。其置於室溫整夜。反應再次受熱至80℃達4.5小時，接著使其冷卻。其被過濾和蒸發以得到淡黃色膠狀物。該膠狀物藉由矽膠層析術依序使用1：3之乙酸乙酯/異己烷和1：1之乙酸乙酯/異己烷予以純化以產生標題化合物(200mg,37%)，其為無色油狀物。
化合物12b的合成：製備12a(100mg,0.184mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液，及依序添加鋅粉(360mg,5.52mmol.)和pH 6之磷酸鹽緩衝溶液(1M,2mL)。反應在室溫攪拌達18小時，及添加另外的鋅粉(120mg,1.84mmol)。反應再次在室溫攪拌達48小時。反應混合物被過濾以移除懸浮固體。該固體物用四氫呋喃(15mL)和pH 6之緩衝溶液(5mL)清洗，且將此添加至濾液。溶液被蒸發，且殘留物藉由C18層析術使用0：1至1：3至1：1之乙腈/水的梯度溶液予以純化。此產生標題產物(69mg,91%)，其為無色油狀物。
化合物12c的合成：12b(94mg,0.23mmol)的無水乙腈(5mL)溶液被製備和被冷卻至0℃，之後添加(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺二鹽酸鹽(54mg,0.23mmol.)、N,N-二異丙基乙基胺(160μl,0.92mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨 (122mg,0.32mmol)。反應被回暖至室溫和攪拌達16小時。反應混合物在矽膠蒸發和藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化以得到標題產物(119mg,87%)，其為無色固體物。
標題化合物的合成：製備12c(119mg,0.20mmol)的甲苯(65mL)溶液，及添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(12.5mg,0.02mmol)。反應混合物在氮氛圍下受熱至110℃達2小時。添加另外量的Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(6mg,0.01mmol)，及反應再次在110℃攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至室溫，接著過濾，之後吸附在矽膠上。物質藉由矽膠層析術使用1：0至9：1之乙酸乙酯/丙酮的梯度溶液予以純化。得到的膠狀物用二乙基醚研磨和在真空下乾燥以產生白色固體物(29mg)。此固體物進一步藉由製備級逆相HPLC予以純化以產生標題產物(17mg,15%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)1.08(d,J=6.9Hz,3H),1.09(d,J=6.7Hz,3H),1.18(s,3H),1.38(s,3H),1.59(d,J=3.3Hz,3H),1.61(d,J=3.1Hz,3H),1.83-2.00(m,3H),2.32-2.43(m,1H),2.75-2.82(m,2H),3.60-3.70(m,1H),4.40-4.50(m,1H),5.15(q, J=6.9Hz,1H),6.65(d,J=16.3Hz,1H),7.57(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.70(s,1H),8.00(s,1H),8.03(d,J=8.7Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)564.1[M+H],Tr=3.57分鐘。
實施例13-化合物13
化合物13a的合成：如WO 2001/024797中所製備之(S)-4-苯甲基-3-{(R)-2-[2-(2-甲基-[1,3]二氧-2-基)-乙基]-戊-4-烯醯基}-唑啶-2-酮(939.7mg,2.516mmol)的四氫呋喃/水冷(0℃)溶液(45mL,2：1)隨後用過氧化氫(30%水溶液，1.3mL,12.580mmol)和氫氧化鋰(211.1mg,5.032mmol)處理。在0℃2.5小時之後，反應用硫酸氫鈉(1.4g)驟冷。0.5小時之後，揮發物在真空中予以移除，且殘留物用水稀釋。水層用二氯甲烷萃取(2 x)，接著被酸化至pH~2和用二氯甲烷萃取(3 x)。這些最終有機液被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(538mg，定量)，其為無色油狀物。
化合物13b的合成：化合物13b以與化合物1f相同方式予以製備，使用13a和N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽代替(2R,3R)-3-甲氧基-2-甲基庚-6-烯酸和N,N'-二環己基碳二亞胺，58%產率。
化合物13c的合成：化合物13c以與化合物1k相同方式予以製備，藉由在合成1g時先使用13b代替1f，且接著依循針對自1g合成1k所述之程序，使用(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙基胺二鹽酸鹽代替(R)-1-(3-乙烯基-苯基)-乙基胺鹽酸鹽，73%產率。
標題化合物的合成：化合物13以與化合物1相同方 式予以製備，使用13c代替1k和使用甲苯代替二氯乙烷，32%產率。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.88-1.00(m,1H),1.06(2d,J=6.9Hz,6H),1.22-1.42(m,4H),1.52-1.63(m,7H),1.65-1.81(m,3H),1.84-1.99(m,3H),2.16(明顯的五重峰，J=6.9Hz,1H),2.38-2.50(m,1H),2.51-2.61(m,1H),2.62-2.74(m,1H),2.83(dt,J=2.7,13.8Hz,1H),3.59-3.72(m,1H),4.46(br dd,J=3.3,13.6Hz,1H),4.69-4.79(m,4H),5.16(q,J=7.1Hz,1H),5.89(q,J=6.9Hz,1H),6.71(d,J=16.3Hz,1H),6.84-6.98(m,1H),7.59(d,J=8.5Hz,1H),7.71(s,1H),7.96(s,1H),8.03(d,J=8.7Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)651.2[M+H],Tr=3.68分鐘。
實施例14-化合物14
13(183.7mg,0.282mmol)的丙酮(10mL)溶液用對甲苯磺酸(27mg,0.141mmol)處理。在室溫攪拌達2.5小時之後，反應用碳酸氫鈉的飽和溶液驟冷，且水層用乙酸乙酯萃取(2×20mL)。有機液被結合、用硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Isolute匣以1：0至2：3之異己烷/丙酮的連續 梯度溶液沖提予以純化，且接著用異己烷/丙酮研磨以提供標題化合物(49.3mg,28%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)1.04(d,J=6.9Hz,3H),1.05(d,J=6.9Hz,3H),1.53-1.62(m,7H),1.64-1.79(m,1H),1.84-2.03(m,5H),2.10-2.23(m,4H),2.39-2.53(m,1H),2.54-2.73(m,4H),2.82(dt,J=2.9,13.1Hz,1H),3.59-3.70(m,1H),4.46(br dd,J=4.0,12.7Hz,1H),5.17(q,J=6.9Hz,1H),5.91(,J=7.1Hz,1H),6.71(d,J=16.3Hz,1H),6.86-7.00(m,1H),7.59(d,J=8.7Hz,1H),7.71(s,1H),7.98(s,1H),8.03(d,J=8.7Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)606.1[M+H],Tr=3.26分鐘。
實施例15-化合物15
製備O-(2-啉基-4-基-乙基)-羥基胺(18mg,0.125mmol)和乙酸(1滴)的2mL異丙醇儲備溶液。於固體化合物14(16.4mg,0.027mmol)中添加1mL儲備溶液，且在室溫攪拌達18小時之後，化合物藉由逆相HPLC予以純化以提供肟的幾何異構物的的混合物(1：1,13.3mg, 67%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)1.00-1.10(m,6H),1.54-1.64(m,5H),1.65-1.78(m,1H),1.81-2.04(m,8H),2.09-2.22(m,1H),2.23-2.33(m,1H),2.34-2.90(m,12H),3.53-3.76(m,6H),4.18(dt,J=5.8,8.5Hz,2H),4.41-4.51(m,1H),4.68-4.82(m,2H),5.16(q,J=7.3Hz,1H),5.82-5.96(m,1H),6.71(d,J=15.8Hz,1H),6.84-7.00(m,1H),7.59(d,J=8.7Hz,1H),7.71(s,1H),7.98(d,J=2.9Hz,1H),8.04(d,J=8.7Hz,1H),8.53(br dd,J=3.1,9.4Hz,1H),9.10(s,1H)。LCMS(m/z)734.7[M+H],Tr=1.08分鐘。
實施例16-化合物16
三乙醯氧基硼氫化鈉(203.5mg,0.96mmol)在甲醇(1mL)和乙酸(100μl)中的溶液隨後用2M二甲基胺的甲醇溶液(480μl,0.96mmol)和化合物14(5.8mg,0.0096mmol)處理。在室溫攪拌達1個月之後，反應混合物直接裝載於逆相製備級HPLC，其用95：5至0：100之水/CH3CN的梯度溶液沖提。此提供標題化合物(1.1mg,18%)，其為白色固體物和為非鏡像異構物的1：1混合物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.87-0.97(m,1H),1.01- 1.09(m,6H),1.24(d,J=6.4Hz,3H),1.55-1.63(m,6H),1.64-1.80(m,2H),1.84-2.02(m,4H),2.10-2.24(m,1H),2.41-2.72(m,7H),2.73-2.90(m,3H),3.60-3.69(m,1H),4.41-4.51(m,1H),5.17(q,J=7.1Hz,1H),5.85-5.95(m,1H),6.71(d,J=16.0Hz,1H),6.85-6.99(m,1H),7.56-7.63(m,1H),7.71(s,1H),7.98(s,1H),8.04(d,J=8.5Hz,1H),9.06-9.13(m,1H)。LCMS(m/z)635.0[M+H],Tr=0.94分鐘。
實施例17：(E)-(2R,5S,11S,14S)-14-異丙基-2,11,15-三甲基-3,9,12,15,28-五氮-三環並[21.3.1.1*5,9*]二十八碳-1(27),21,23,25-四烯-4,10,13,16-四酮-化合物17
化合物17a的合成：(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.08g,2.5mmol)的二氯甲烷(35mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(682mg,0.55mL,3.1mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達45分鐘。添加N,N-二異丙基乙基胺(1.29g,1.73mL,10mmol)，且溶劑被蒸發以提供粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(2.5mmol)，其用於下一步驟。粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基 酯(2.5mmol)的乙腈(30mL)溶液在0℃和氮下攪拌。依序添加(S)-2-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-3-甲基-丁酸(635mg,2.75mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(1.29g,1.7mL,10mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(1.33g,3.5mmol)，及反應混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被蒸發，且殘留物溶於乙酸乙酯。溶液用水、2M鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥，過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/乙酸乙酯至純淨乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(950mg,70%)，其為白色固體物。
化合物17b的合成：17a(950mg,1.74mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(577mg,0.47mL,2.6mmol)，及反應混合物在0℃攪拌達1小時。添加額外的三氟甲磺酸三甲基矽基酯(0.2mL,1.1mmol)，及反應混合物在0℃攪拌達2小時。添加N,N-二異丙基乙基胺(903mg,1.2mL,7mmol)，及溶劑被蒸發，且殘留物被乾燥以提供粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-3-甲基-2-甲基胺基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.74mmol)，其用於下一 步驟。粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-3-甲基-2-甲基胺基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.74mmol)的乙腈(20mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加庚-6-烯酸(268mg,0.3mL,2.1mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(903mg,1.2mL,7mmol)。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(912mg,2.4mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被蒸發，及殘留物用乙酸乙酯稀釋。溶液用飽和碳酸氫鈉溶液、水、2M鹽酸、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥，過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(710mg,74%)，其為白色固體物。
化合物17c的合成：17b(710mg,1.3mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液在室溫和氮下攪拌。依序添加鋅粉(1.86g,28.6mmol)和乙酸銨(1.50g,19.5mmol)的水(20mL)溶液，且反應混合物在室溫攪拌達24小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液墊用乙酸乙酯和硫酸氫鉀溶液(pH~2)清洗。濾液用2M鹽酸酸化至pH 2，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗、用 無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物與甲苯共蒸發和乾燥以提供(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(庚-6-烯醯基-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(468mg,85%)，其為膠狀物。(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(庚-6-烯醯基-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]丙醯基}-六氫嗒-3-甲酸(468mg,1.1mmol)的乙腈(25mL)溶液在室溫和氮下攪拌。添加(R)-1-(3-乙烯基苯基)乙基胺鹽酸鹽(1j)(200mg,1.1mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(710mg,1.0mL,5.5mmol)，接著添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(585mg,1.54mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達72小時。溶劑被蒸發，及殘留物溶於乙酸乙酯。溶液用2M鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥，過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1之異己烷/乙酸乙酯至乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物，其為白色固體物(300mg,49%)。
標題化合物的合成：17c(276mg,0.5mmol)的1,2-二氯乙烷(150mL)溶液在室溫和氮下攪拌。添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(32mg,0.05mmol)，且反應混合物在 80℃和氮下受熱達3小時。反應混合物被冷卻至室溫，添加矽膠，及蒸發反應混合物。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯至7：3之乙酸乙酯/丙酮的梯度溶液予以純化。殘留物用醚研磨，及得到的固體物被收集，用醚清洗，和乾燥以提供標題化合物(112mg,43%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3CN)δ 0.82(d,J=6.7Hz,3H),0.90(d,J=6.5Hz,3H),1.34(d,J=7.1Hz,3H),1.39(d,J=6.3Hz,3H),1.40-1.90(m,10H),2.60-2.75(m,2H),2.86-2.92(m,4H),3.28-3.36(m,1H),3.93(d,J=12.0Hz,1H),4.33-4.38(m,1H),4.58(d,J=11.6Hz,1H),4.85-4.99(m,2H),6.16-6.51(m,3H),7.12-7.30(m,6H)。LCMS(m/z)526.3[M+H],Tr=2.16分鐘。
實施例18-化合物18
化合物18a的合成：於7-溴-2-氯-喹啉(Fluorochem,8.10g,33.4mmol)和碘化鈉(50.0g,334mmol)的乙腈受攪拌漿料(27mL)中緩慢添加乙醯氯(3.56mL,50.0mmol)。燒瓶用塞子塞住、密封及在80℃受熱達3小時，之後使其冷卻。混合物隨後用10% w/w碳酸鉀水溶液(80mL)、5% w/w亞硫酸鈉水溶液(80mL)和飽和硫代硫酸鈉水溶液 (80mL)處理，且混合物用二氯甲烷萃取(2x)。結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到粗製7-溴-2-碘-喹啉。於喹啉中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫烷(13.6mL,40.1mmol)、1,4-二(67mL)和二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(2.37g,3.34mmol)，且反應混合物在100℃受熱達5小時，之後使其冷卻。添加2M鹽酸水溶液(67mL)，且攪拌反應達1小時。混合物被過濾，及該固體物用乙酸乙酯清洗，且濾液被蒸發以移除有機液。殘留物用乙酸乙酯萃取(3x)，且結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。產物在攙添10% w/w碳酸鉀之矽膠上以0至6%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(5.5g,66%)，其為白色固體物。
化合物18b的合成：於18a(1.42g,5.68mmol)的四氫呋喃(28mL)溶液中依序添加乙氧化鈦(IV)(2.6g,2.35mL,11.4mmol)和(R)-(+)-2-甲基-丙烷sulfinimide(825mg,6.82mmol)。反應混合物在60℃和氮下攪拌達6小時且使其冷卻。依序添加鹽水和乙酸乙酯，及懸浮液透過矽藻土過濾，且過濾墊用乙酸乙酯清洗。乙酸乙酯層被分離、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以10-25%乙酸乙酯的異己烷溶液沖提予以純化以提供標題化合物(448mg,22%)。
化合物18c的合成：(1S,2R)-(-)-順式-1-胺基-2-二氫茚醇(19mg,0.13mmol),[Ru(對異丙基甲苯基)Cl2]2(39mg,0.064mmol)和粉末狀的4Å分子篩(0.7g)的混合物被懸浮於無水的2-丙醇(3mL)和在氮下攪拌。懸浮液在90℃受熱達30分鐘。反應混合物被冷卻至40℃，及依序添加18b(448mg,1.27mmol)的2-丙醇(9mL)溶液和第三丁氧化鉀(36mg,0.32mmol)的2-丙醇(3mL)溶液。反應混合物在40℃攪拌達2小時及接著使其冷卻。混合物直接倒至矽膠匣及用乙酸乙酯沖提。濃縮之後，殘留物進一步在矽膠上以乙酸乙酯的異己烷溶液(1：1至1：0)沖提予以純化以提供標題化合物(287mg,64%)。
化合物18d的合成：18c(207mg,0.583mmol)、(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-丁-3-烯酸甲基酯(170mg,0.670mmol)、氯化雙[(二環己基)(4-二甲基胺基苯基)膦]鈀(II)(24mg,0.029mmol)和磷酸三鉀 (371mg,1.75mmol)的混合物被懸浮於環戊基甲基醚(3mL)和水(1.5mL)中，且混合物在80℃和氮下攪拌和受熱達5小時。使反應混合物冷卻及用乙酸乙酯和水稀釋。水層被分離和用另外的乙酸乙酯清洗，且結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯的異己烷梯度溶液(1：1至3：1)予以純化以提供標題化合物，其為黃色油狀物(201mg,86%)。
化合物18e的合成：18d(193mg,.48mmol)被懸浮於4M HCl的二溶液中(5mL,20mmol)，和添加甲醇(10mL)。反應混合物被攪拌達2小時且接著被蒸發。殘留物用醚研磨以得到標題化合物，其為黃色固體物(166mg)。
化合物18f的合成：在氮下，(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(166mg,0.48mmol)、18e(190mg,0.48mmol)、O-(7-氮苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸鹽(256mg,0.67mmol) 和粉末狀的4Å分子篩被懸浮於乙腈(9.6mL)。於受攪拌的混合物中添加N,N-二異丙基乙基胺(186mg,250μL,1.44mmol)，及攪拌反應混合物達20小時。混合物透過相分離器過濾，且濾液被蒸發、溶於二氯甲烷及依序用飽和碳酸氫鈉溶液、水和飽和氯化銨溶液清洗，用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯的異己烷梯度溶液(1：1至1：0)予以純化以提供標題化合物，其為黃色膠狀物(77mg,28%共2步驟)。
化合物18g的合成：於18f(117mg,0.201mmol)的四氫呋喃(4mL)溶液中邊攪拌邊添加水(0.8mL)和氫氧化鋰單水合物(9.2mg,0.221mmol)。攪拌反應混合物達1小時，及接著添加另外的氫氧化鋰單水合物(36mg,0.857mmol)，及再次攪拌混合物達19.5小時。反應混合物被蒸發，及殘留物與甲苯共沸。殘留物藉由製備級HPLC使用20至100%乙腈的水梯度溶液予以純化以得到18g，其為白色固體物(60mg,53%)。
標題化合物的合成：2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(177mg,0.500mmol)、DMAP(92mg,0.750mmol)和粉末狀的4Å分子篩(1g)在1,2-二氯乙烷(33mL)中的漿料在氮下和在50℃攪拌。18g(57mg,0.100mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，且溶液經注射泵添加至漿料中，歷經5小時。添加完成之後，含有該酸的原先燒瓶用另外的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)清洗，且洗液被移至反應容器中，歷經30分鐘。反應混合物在50℃再攪拌達1小時及接著使其冷卻。殘留物藉由製備級HPLC使用5至100%乙腈的水梯度溶液予以純化以得到標題化合物，其為白色固體物(24.5mg,45%)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.00(d,J=6.7Hz,3H),1.07(d,J=6.7Hz,3H),1.43(s,3H),1.54(s,3H),1.59(d,J=7.6Hz,3H),1.64(d,J=7.4Hz,3H),1.96(m,1H),2.17(m,1H),2.28(m,1H),2.71(m,1H),3.61(m,1H),4.43(m,1H),5.10(m,1H),5.24(d,J=8.9Hz,1H),5.81(q,J=7.1Hz,1H),6.46(ABq,△δAB=0.18,J AB =16.3Hz,2H),7.45(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.79(s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H),9.41(br d,J=5.6Hz,1H)。LCMS(m/z)550.2[M+H],Tr 2.05分 鐘。
實施例19-化合物19
化合物19a的合成：1e(1.08g,2.50mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(1.46g,4.25mmol)、4-二甲基胺基吡啶(122mg,1.00mmol)和粉末狀的4Å分子篩懸浮於乾燥二氯甲烷(11mL)中，且混合物在氮下攪拌。添加三乙基胺(633mg,871μL,6.25mmol)和2,2-二甲基-丁-3-烯酸(390mg,3.43mmol)的乾燥二氯甲烷(1.5mL)溶液，及攪拌反應混合物達17小時。懸浮液通過相分離器匣，且蒸發濾液。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯的異己烷梯度溶液(1：4至2：3)予以純化以提供標題化合物，其為棕色膠狀物(735mg,56%)。
化合物19b的合成：19a(124mg,0.235mmol)、(R)- 1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙醇(65mg,0.258mmol)、乙酸鈀(8mg,0.035mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(22mg,0.071mmol)和三乙基胺(48mg,66μL,0.47mmol)被懸浮於乙腈(2.35mL)中。反應混合物於微波反應器內在120℃受熱和攪拌達2小時。殘留物被蒸發及被懸浮於乙酸乙酯和飽和氯化銨溶液。有機層被分離和依序用飽和氯化銨溶液和水清洗，且結合的水層用乙酸乙酯反萃取。結合的有機層用鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯的異己烷梯度溶液(1：1至3：1)予以純化以提供標題化合物，其為黃色膠狀物(38mg,23)。
化合物19c的合成：於19b(58mg,0.083mg)的四氫呋喃(5mL)溶液中添加鋅(218mg,3.33mmol)和pH 6磷酸鹽緩衝溶液(1mL)。反應混合物快速攪拌達18小時。添加鋅(218mg,3.33mol)，且反應受熱至40℃達1小時和使其冷卻。混合物透過相分離器過濾，用四氫呋喃及pH 6磷酸鹽緩衝溶液清洗。濾液用乙酸乙酯和水稀釋，且水相用另外的乙酸乙酯萃取。結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。水相被蒸發至約一半體積，和用乙酸乙酯萃取(5次)，且結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾 和剩下的產物結合，及被蒸發以得到黃色膠狀物(51mg)。
標題化合物的合成：2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(143mg,0.415mmol)、4-二甲基胺基吡啶(76mg,0.623mmol)和粉末狀的4Å分子篩(1g)在1,2-二氯乙烷(27mL)中的漿料在氮下和50℃下攪拌。19c(51mg,0.083mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(3mL)，且溶液經由注射泵添加至漿料中，歷經3.5小時。添加完成之後，含有該酸的原先燒瓶用另外的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)清洗，且將清洗液移至反應容器，歷經10分鐘。反應混合物在50℃再攪拌達1小時及接著使其冷卻。殘留物藉由製備級HPLC使用10至100%之乙腈的水梯度溶液予以純化。殘留物進一步藉由矽膠層析術使用50至60%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液(1：1至3：2)予以純化以得到標題化合物，其為無色膠狀物(1.7mg,4%共2步驟)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.94(d,J=7.0Hz,3H),0.99(d,J=6.7Hz,3H),1.41(s,3H),1.52(s,3H),1.65(d,J=7.1Hz,3H),1.68(m,2H),1.73(d,J=6.7Hz,3H),1.89-2.03(m,2H),2.15(m,1H),2.76(m,1H),3.82(m,1H),4.39(br d,J=13.4Hz,1H), 5.08(d,J=9.8Hz,1H),5.81(q,J=7.1Hz,1H),5.93(q,J=6.9Hz,1H),6.34(ABq,△δAB=0.11,J AB =16.6Hz,2H),7.41(d,J=8.5Hz,1H),7.67(s,1H),7.75(dd,J=8.7,1.3Hz,1H),7.82(d,J=8.7Hz,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)551.2[M+H],Tr 2.22分鐘。
實施例20-化合物20
化合物20a的合成：二氯(對異丙苯)釕(II)二聚物(3mg,0.005mmol)和(1R,2R)-(-)-N-對甲苯磺醯基-1,2-二苯基乙二胺(4.4mg,0.012mmol)被懸浮於經排氣的水(2mL)中，且混合物用氮排氣達15分鐘。混合物在70℃和氮下攪拌達90分鐘。得到的黃色溶液被冷卻至室溫。添加1-(3-氯-異喹啉-6-基)-乙酮(206mg,1mmol)、甲酸鈉(340mg,5mmol)和經排氣的四氫呋喃(1mL)，及反應混合物用氮排氣達5分鐘。反應混合物在40℃激烈攪拌達2.5小時。反應混合物被冷卻至室溫和用乙酸乙酯萃取。有機層被分離、用水和鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至2：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(193mg,92%)，其為白色固體物。
化合物20b的合成：1,4-二(5mL)用氮排氣，添加20a(208mg,1mmol)、三丁基(乙烯基)錫(951mg,0.9mL,3mmol)和二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(70mg,0.1mmol)，且反應混合物在微波反應器內於150℃受熱達1小時。添加額外的三丁基(乙烯基)錫(0.3mL,1mmol)和二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(70mg,0.1mmol)，且反應混合物在微波反應器內於150℃受熱達1小時。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過助濾器過濾，及過濾墊用乙酸乙酯清洗。濾液被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至2：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化，接著藉由矽膠層析術使用3：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(100mg,50%)，其為白色固體物。
化合物20c的合成：製備(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-烏頭酸(arboxylic acid)2,2,2-三氯-乙基酯(6.88g,15.9mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液，及添加三氟乙酸(50mL)。反應混合物在室溫攪拌達2小時。TLC顯示反應完成。溶液被蒸發以得到棕色油狀物。此油狀物與甲苯共沸(50mL)，且得到的油狀物在 真空下乾燥以得到(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯三氟乙酸鹽(7.8g)，其為棕色膠狀物。((S)-1-胺甲醯基-2-甲基丙基)-胺甲酸第三丁基酯的乙腈(300mL)的溶液被冷卻至0℃，之後添加N,N-二異丙基乙基胺(13.8mL,79.7mmol)和2-(1H-苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽(6.33g,16.7mmol)。反應在0℃攪拌達15分鐘，之後添加(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯三氟乙酸酯(約15.9mmol)的乙腈(85mL)溶液。反應在0℃再攪拌達20分鐘，接著被回暖至室溫和攪拌達15小時。反應混合物被蒸發，接著再次溶於乙酸乙酯(250mL)。溶液用水(150mL)清洗、接著用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到紅色油狀物。此油狀物藉由矽膠層析術依序使用7：3之異己烷/乙酸乙酯和1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(8.2g,92%)，其為淡橙色非晶形固體物。
化合物20d的合成：在23℃和氬氛圍下，於20c(530mg,1.00mmol)在四氫呋喃(3mL)和水(2mL)溶液中添加氫氧化鋰(26mg,1.1mmol)。19小時之後，反應混合物在減壓下濃縮，及粗製殘留物藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(12g Combiflash HP Gold管柱，0-20%甲醇/二氯甲烷梯度溶液)以提供標題化合物(339mg,92%)，其為無色 固體物。
的合成化合物20e：在23℃和氬氛圍下，於20d(339mg,0.920mmol)和(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙醇(183mg,0.920mmol)的二氯甲烷(4.6mL)溶液中添加N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(211mg,1.10mmol)和4-二甲基胺基吡啶(56.2mg,0.46mmol)。21小時之後，反應混合物直接藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(24g Combiflash HP Gold管柱，0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶液)以提供標題化合物(224mg,42%)，其為淺棕褐色固體物。
化合物20f的合成：在0℃和氬氛圍下，於20e(224mg,0.390mmol)的二氯甲烷(2.0mL)溶液中添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(128mg,0.58mmol)。2小時之後，反應混合物在減壓下濃縮以提供標題化合物(188mg,99%)，其為淺黃色油狀物，其無需進一步純化即可使用。
化合物20g的合成：在23℃和氬氛圍下，於20f(94mg,0.195mmol)的二甲基甲醯胺(1.00mL)溶液中添加氫氧化銫單水合物(98.5mg,0.585mmol)和活化的4Å分子篩(53mg)。10分鐘之後，添加5-溴戊-1-烯(29mg,0.195mmol)。4天之後，反應混合物用鹽水(20mL)稀釋，和用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。結合的有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥及在減壓下濃縮。粗製殘留物藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(12g Combiflash HP Gold管柱，0-20%甲醇/二氯甲烷梯度溶液)以提供標題化合物(5.7mg,5%)，其為淺黃色固體物。
標題化合物的合成：在23℃和氬氛圍下，於20g(5.7mg,11μmol)的甲苯(3.7mL)溶液中添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(1.0mg,1.7μmol)，及得到的混合物受熱至110℃。1.25小時之後，反應混合物被冷卻至23℃，及在減壓下濃縮。粗製殘留物藉由製備級HPLC予以純化 (Gemini 5u C18 110Å管柱，5-100% MeCN/H2O,0.1%三氟乙酸修飾劑)以提供標題化合物(3.7mg,56%)，其為白色固體三氟乙酸鹽。1H NMR(CD3OD,400MHz)：δ 9.21(s,1H),8.09(d,J=8.6Hz,1H),7.84(s,1H),7.79(s,1H),7.60(d,J=8.6Hz,1H),6.66(d,J=15.9Hz,1H),6.57-6.45(m,1H),5.99(q,J=6.7Hz,1H),5.30(q,J=7.0Hz,1H),4.31(br-d,J=12.0Hz,1H),3.69-3.61(m,2H),2.91(br-t,J=8.1Hz,2H),2.68(td,J=12.8,3.2Hz,1H),2.55-2.44(m,1H),2.42-2.31(m,1H),2.15-2.03(m,1H),1.99-1.78(m,4H),1.74-1.59(m,2H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.56(d,J=7.1Hz,3H),1.06(d,J=6.9Hz,3H),0.99(d,J=6.9Hz,3H)。HPLC t R(min),4.169，純度%：99%。(Phenomenex Kinetex 2.6u C18 100Å,100×4.60mm 2.6微米管柱，8.5分鐘，1.5ml/min,2-98% MeCN/H2O,0.1%三氟乙酸修飾劑梯度溶液)。LCMS(ESI)m/z 522.2[M+H]+,t R=1.68分鐘。(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100% MeCN/H2O,0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
實施例21-化合物21
化合物21a的合成：在0℃和氬氛圍下，於(S)-1-[(S)- 2-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-甲基丁醯胺基)-丙醯基]-六氫嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯(500mg,0.945mmol)的二氯甲烷(4.7mL)溶液中添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(314mg,0.1.41mmol)。1小時之後，反應混合物在減壓下濃縮。得到的殘留物用二氯甲烷(4.7mL)稀釋，及在23℃和氬氛圍下，依序添加N,N-二異丙基乙基胺(657μL,3.78mmol)和丙-2-烯-1-磺醯氯(140mg,0.992mmol)。17小時之後，反應混合物用二氯甲烷(50mL)稀釋，且得到的混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)清洗。有機層被分離、用無水硫酸鈉乾燥、及在減壓下濃縮。粗製殘留物藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(24g Combiflash HP Gold管柱，0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶液)以提供標題化合物(256.4mg,51%)，其為橙色油狀物。
化合物21b的合成：在23℃和氬氛圍下，於21a(256mg,0.478mmol)的四氫呋喃(8.0mL)溶液中依序添加鋅粉(625mg,9.57mmol)和乙酸銨(552mg,7.17mmol)的水(5.31mL)溶液。17小時之後，使反應混合物回暖至45℃。7小時之後，反應混合物被冷卻至室溫及透過矽藻土墊過濾，用水(10mL)清洗。濾液在減壓下濃縮以移除四氫呋喃，及殘留物被分配在水(25mL)和乙酸乙酯(25mL)之間。分開層，且水層用12N鹽酸水溶液酸化至 pH=2。水層用乙酸乙酯萃取(4×50mL)，及結合的有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥，及在減壓下濃縮。殘留的乙酸經由添加甲苯(5mL)而共沸移除，接著在減壓下濃縮(3×)以提供標題化合物(156mg,80%)，其為白色固體物。
化合物21c的合成：在23℃和氬氛圍下，於21b(156mg,0.390mmol)和(R)-1-(3-乙烯基-異喹啉-6-基)-乙醇(92.3mg,0.464mmol)的二氯甲烷(1.95mL)溶液中添加N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(105mg,0.546mmol)和4-二甲基胺基吡啶(23.8mg,195μmol)。21小時之後，反應混合物直接藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(24g Combiflash HP Gold管柱，0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶液)以提供標題化合物(155mg,70%)，其為無色油狀物。
標題化合物的合成：在23℃和氬氛圍下，於21c(150mg,256μmol)的甲苯(51mL)溶液中添加Hoveyda-Grubbs 2nd代觸媒(16mg,25μmol)，及得到的混合物受熱至110℃。2小時之後，反應混合物用乙基乙烯基醚(500μL)驟冷，且得到的混合物被冷卻至23℃。反應混合物在減壓下濃縮，及粗製殘留物藉由矽膠快閃管柱層析術予以純化(12g Combiflash HP Gold管柱，0-100%乙酸乙酯/己烷梯度溶液)以提供標題化合物(18.6mg,13%)，其為棕褐色固體物物。1H NMR(CD3OD,400MHz)：δ 9.37(s,1H),8.23(d,J=8.5Hz,1H),8.14(s,1H),7.97(s,1H),7.77(d,J=8.7Hz,1H),6.85(d,J=15.8Hz,1H),6.75-6.64(m,1H),6.22(q,J=6.7Hz,1H),5.62-5.52(m,1H),4.40(dd,J=13.3,3.3Hz,1H),4.21(dd,J=14.8,5.8Hz,1H),4.10(dd,J=13.4,7.5Hz,1H),4.06(d,J=4.5Hz,1H),3.72(dd,J=11.5,2.5Hz,1H),2.79(td,J=12.8,3.2Hz,1H),2.19(明顯的六重峰，J=7.0Hz,1H),2.04-1.88(m,2H),1.87-1.66(m,2H),1.72(d,J=6.7Hz,3H),1.46(d,J=7.2Hz,3H),1.05(d,J=6.7Hz,3H),0.92(d,J=6.8Hz,3H)。HPLC t R(min),2.882，純度%：98%。(Synergi 4u hydro-RP,50×4.60mm 4微米管柱，7分鐘，2ml/min,5-100% MeCN/H2O,0.05%三氟乙酸修飾劑梯度溶液)。LCMS(ESI)m/z 558.44[M+H]+,t R=1.88分鐘。(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100% MeCN/H2O,0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。R f =0.25(乙酸乙酯)UV。
實施例22-化合物22
化合物22a的合成：(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(865mg,2mmol)的DCM(20mL)溶液在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(667mg,3mmol)，及得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物在氬氣下溶於乾燥乙腈(25mL)。反應混合物在0℃攪拌，依序添加(S)-2-(第三丁氧基羰基(甲基)胺基)-3-甲基丁酸二環己基胺鹽(908mg,2.2mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(1.034g,8mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(1.065g,2.8mmol)。反應混合物在室溫攪拌達48小時。溶劑被蒸發，殘留物溶於乙酸乙酯(100mL)，且溶液用20%檸檬酸水溶液(100mL)、水(100mL)和鹽水(100mL)清洗2次，用硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。.殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的己烷梯度溶液)以提供標題化合物，其蒸發之後為白色固體物(617mg,56%)。
化合物22b的合成：在氬氣下，二異丙基胺(2.51g,24.8mmol)的四氫呋喃(150mL)溶液在冰水浴中冷卻。逐滴添加正丁基鋰的己烷溶液(2.5M,9.7mL,24mmol)，歷經2分鐘，且得到的溶液再攪拌達10分鐘。溶液接著在CO2：丙酮浴冷卻至-78℃，及逐滴添加2,2-二甲基-3-側氧基丁酸甲酯(3.2g,22mmol)，歷經30秒。溶液再攪拌達15分鐘，且N-苯基-雙(三氟甲sulfonimide)(8.4g,23.5mmol)的四氫呋喃(20mL)溶液經由插管添加，歷經5分鐘，用額外部分的四氫呋喃(10mL)清洗。得到的溶液攪拌達10分鐘及從冷浴中移出。再攪拌1小時之後，反應混合物在真空下濃縮及用二乙基醚(150mL)稀釋。有機相用1M氫氧化鈉水溶液清洗(1×100mL,1×30mL)、用無水硫酸鎂乾燥、過濾、及濃縮以提供標題化合物(6.2g,100%)，其為琥珀色液體物，其無需進一步純化即可使用。
化合物22c的合成：22b(6.2g,22mmol)的無水吡啶(11mL,140mmol)溶液受熱至70℃。18.5小時之後，溫度增加至90℃。攪拌總計達72小時之後，反應混合物被分配在二乙基醚(100mL)和3M HCl水溶液(100mL)的受 攪拌混合物之間。分離相，及有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)清洗、用硫酸鎂乾燥、過濾、及濃縮以提供標題化合物(2.7g,97%)，其為稍有棕色液體物，其無需進一步純化即可使用。
化合物22d的合成：在氬氣下，氫氯雙(環戊二烯基)鋯(290mg,1.1mmol)在冰水浴中冷卻。22c(1.4g,11.1mmol)和频那醇硼烷(2.4mL,16.5mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液藉由插管予以添加，用額外部分的二氯甲烷(2mL)清洗。得到的混合物自冷浴中移出及在室溫攪拌達72小時。反應接著用乙酸乙酯(50mL)稀釋、滴加水(5mL)予以驟冷、及進一步用水(50mL)稀釋。分離有機及水相，且水相用乙酸乙酯萃取(30mL)。結合的有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾、及濃縮以提供粗製的殘留物，其藉由矽膠層析術(5至15%乙酸乙酯的己烷溶液)予以純化以提供標題化合物(1.6g,57%)，其為無色油狀物，其在-15℃靜置結晶。
化合物22e的合成：在氬氣下，(R)-1-(3-氯-異喹啉-6-基)-乙醇(880mg,4.23mmol)、(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-丁-3-烯酸甲基酯 (1.24g,4.88mmol)、PdCl2(PCy2(p-NMe2Ph))2(173mg,0.21mmol)和K3PO4(2.64g,12.4mmol)溶於環戊基甲基醚(11.9mL)和水(5.1mL)。得到的雙相混合物在油浴中於90℃激烈攪拌達3.5小時，於該時反應被冷卻至周圍溫度及用乙酸乙酯(50mL)和水(40mL)稀釋。分離相，及水相用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。結合的有機相用無水硫酸鎂乾燥、過濾、及濃縮以提供粗製的殘留物，其藉由矽膠層析術(25至60%乙酸乙酯的己烷溶液)予以純化以提供標題化合物，其為黃色油狀物(1.07g,85%)。
化合物22f的合成：於22e(600mg,2mmol)的四氫呋喃(8mL)溶液中添加甲醇(4mL)、水(4mL)和氫氧化鋰(96mg,4mmol)。得到的混合物在室溫攪拌達10小時及用1M HCl(4.2mL,4.2mmol)驟冷。得到的溶液被濃縮成粗製殘留物，其與四氫呋喃(20mL)共蒸餾2次、乾燥乙腈(20mL)共蒸餾2次和乾燥甲苯(20mL)共蒸餾2次。得到的白色固體物在高真空下乾燥整夜，且其無需進一步純化即可使用(735mg，定量產量)。
化合物22g的合成：22a(230mg,0.42mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(128mg,0.575mmol)，且得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物在氬氣下溶於乾燥乙腈(20mL)。反應混合物在0℃攪拌，依序添加22f(128mg,0.38mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(198mg,1.53mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(218mg,0.58mmol)。反應混合物在50℃攪拌達5天。溶劑被蒸發，殘留物溶於乙酸乙酯(50mL)，且溶液用20%檸檬酸水溶液(50mL)、水(50mL)和鹽水(50mL)清洗2次，用硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的己烷梯度溶液)，蒸發之後提供標題化合物，其為白色固體物(88mg,32%)。
標題化合物的合成：於22g(45mg,0.06mmol)的四氫呋喃(2mL)溶液中添加甲醇(1mL)、水(1mL)和氫氧化鋰(2.9mg,0.12mmol)。混合物在周圍溫度攪拌達2小時及用1M HCl水溶液驟冷(0.14mL,0.14mmol)。得到的溶液被濃縮成粗製的殘留物，其與四氫呋喃(5mL)共蒸餾2次、乾燥乙腈(5mL)共蒸餾2次和乾燥甲苯(5mL)共蒸餾2次。得到的白色固體物在高真空下乾燥整夜，及其無需進一步純化即可使用(40mg，定量產量)。於烘箱乾燥氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(83mg,0.24mmol)、4-二甲基甲醯胺(88mg,0.72mmol)和乾燥1,2-二氯乙烷(100mL)。得到的溶液在70℃受熱，及經由注射器逐滴添加來自前面步驟之粗製產物的乾燥N,N-二甲基甲醯胺(5mL)溶液，歷經12小時。額外部分的乾燥N,N-二甲基甲醯胺(2×1ml)用於完成定量轉移。在70℃再攪拌8小時之後，反應混合物被移至分離漏斗和用水清洗(100mL，添加5mL鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(50mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(50mL)清洗，和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。得到的殘留物溶於乙酸乙酯(100mL)和用水清洗(100mL，添加5mL鹽水以支持分 離)。水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。結合的有機萃取液用水清洗(100mL，添加5mL鹽水以支持分離)。得到的水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(50mL)清洗和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的己烷梯度溶液)，蒸發之後提供標題化合物(6mg,18%)，其為無色油狀物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 9.05(s,1H),7.95(d,J=8.5Hz,1H),7.70(s,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.20(s,1H),6.76(d,J=16.2Hz,1H),6.28(d,J=16.2Hz,1H),5.93(m,1H),5.27-5.22(m,1H),5.14(m 1H),4.82(m 1H),4.29(m 1H),3.70(m,1H),3.38(m,1H),2.77(s,3H),2.63(m,1H),2.09(m,2H),1.93(m,2H),1.86(m,1H),1.79(m,2H),1.59(t,J=7.4Hz,6H),1.45(m,2H),0.85(d,J=6.6Hz,3H),0.76(d,J=6.4Hz,3H)。LC/MS(m/z)564(100%)[M+H]+；RT=3.14分鐘；純度>95%(Phenomenex Gemini 5微米C18,30×4.6mm,5至100%乙腈的水溶液，歷經6分鐘，2mL/min,0.05%甲酸修飾劑)。TLC Rf=0.43,5%甲醇的二氯甲烷溶液。
實施例23-化合物23
化合物23a的合成：在氬氣下，(S)-2-羥基-3-甲基丁 酸甲酯(578mg,4.37mmol)溶於四氫呋喃(3.7mL)和N,N-二甲基甲醯胺(2.5mL)。溶液在冰水浴中冷卻。逐滴添加1.0M雙(三甲基矽基)醯胺鈉的四氫呋喃溶液(3.7mL,3.7mmol)，歷經1.5分鐘。在額外的3.5分鐘之後，一次性添加5-溴戊-1-烯。反應攪拌達2分鐘和自冷浴中移出。2小時之後，反應用飽和氯化銨水溶液(10mL)驟冷和用乙酸乙酯(20mL)、水(10mL)及0.1N HCl(5mL)稀釋。分離相，及水相用乙酸乙酯(20mL)萃取。結合的有機相用硫酸鈉乾燥、過濾、及濃縮以提供粗製的殘留物，其藉由矽膠層析術予以純化(0至10%乙酸乙酯的己烷溶液)以提供標題化合物(290mg,33%)，其為無色液體物。
化合物23b的合成：於23a(155mg,0.774mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液中添加水(1mL)和氫氧化鋰單水合物(165mg,3.93mmol)。攪拌反應18小時，於該時添加甲醇(1mL)。反應再攪拌達24小時，且接著在真空下濃縮至50%，及用水(20mL)、乙酸乙酯(20mL)和3N HCl水溶液(15mL)稀釋。分離相，及水相用乙酸乙酯萃取(2×20mL)。結合的有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾及濃縮以提供(S)-3-甲基-2-戊-4-烯基氧基-丁酸(115mg,80%)，其無需進一步純化即可使用。在氬氣下，(S)-1-((S)-2-第三丁 氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(240mg,0.55mmol)溶於二氯甲烷(10mL)。溶液在冰水浴中冷卻，及添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(209mg,0.94mmol)。反應被攪拌達1小時，且藉由添加N,N-二異丙基乙基胺(296mg,2.3mmol)而予以驟冷。混合物在真空中濃縮及溶於甲醇。攪拌達10分鐘之後，溶液在真空中濃縮，及溶於甲苯和自甲苯濃縮共2次(10mL分次)。得到的粗製殘留物無需進一步純化即可使用。(S)-3-甲基-2-戊-4-烯基氧基-丁酸(0.62mmol)和(S)-1-[(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯(約0.55mmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)。添加，N,N-二異丙基乙基胺(192mg,1.5mmol)，及溶液在冰水浴中冷卻。一次性添加(1-氰基-2-乙氧基-2-側氧基亞乙基胺基氧基)二甲基胺基-N-啉基-碳正離子六氟磷酸鹽(320mg,0.75mmol)，及反應被攪拌達15分鐘。反應接著自冷浴中移出，及使其回暖至周圍溫度。攪拌整夜之後，反應用乙酸乙酯(30mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)稀釋。分離相，及有機相依序用0.2N HCl水溶液(30mL)和鹽水(5mL)的混合物及半飽和鹽水(30mL)和鹽水(30mL)清洗。有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾及濃縮以提供粗製的殘留物，其藉由矽膠層析術予以純化(30至60%乙酸乙酯的己烷溶液)以提供標題化合物(157mg,57%)，其為非晶形殘留物。
化合物23c的合成：於23b(157mg,0.31mmol)的四氫呋喃(5.3mL)溶液中添加水(2.6mL)、乙酸銨(365mg,4.7mmol)和鋅粉(460mg,7.0mmol)。得到的混合物在室溫激烈攪拌達24小時，及反應接著受熱至50℃。額外3.5小時之後，添加額外的鋅粉(240mg,3.7mmol)。反應在50℃攪拌達2小時，且接著冷卻至35℃和再攪拌達18.5小時。混合物透過矽藻土用乙酸乙酯(50mL)沖洗過濾，及用2N HCl水溶液(30mL)和鹽水(15mL)的混合物清洗。分離層，及水相用乙酸乙酯萃取(2×30mL)。結合的有機相用硫酸鈉乾燥、過濾及濃縮。得到的粗製殘留物溶於甲苯(10mL)和自甲苯(10mL)濃縮共2次，及粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-3-甲基-2-戊-4-烯基氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸無需進一步純化即可使用。(S)-1-[(S)-2-((S)-3-甲基-2-戊-4-烯基氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(74mg,0.37mmol)和4-二甲基胺基吡啶(45.5mg,0.37mmol)溶於二氯甲烷(5mL)。一次性添加N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(78mg,0.41mmol)。反應在室溫攪拌44小時及用乙酸乙酯(50mL)、水(25mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)和鹽水(25mL)稀 釋。分離相，及水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。結合的有機相用無水硫酸鈉乾燥、過濾及濃縮以提供粗製的殘留物，其藉由矽膠層析術予以純化(50至80至100%乙酸乙酯的己烷溶液)以提供標題化合物(118mg,69%共2步驟)，其為白色泡沫物。
標題化合物的合成：在氬氣下，23c(53mg,0.096mmol)溶於甲苯(30mL)。溶液邊噴入氬氣邊攪拌達10分鐘。接著Grubbs-Hoveyda第二代置換反應觸媒(9.0mg,0.014)係以用氬氣噴灑之甲苯(2.0mL)溶液添加。反應於預熱油浴中受熱至100℃及攪拌達35分鐘。反應在真空下濃縮至~6.5mL最終體積及直接裝載於矽膠管柱。以60至85至100%乙酸乙酯的己烷溶液沖提提供30mg不純物，其藉由逆相HPLC再次予以純化(C18,15至100%乙腈水溶液，0.1%三氟乙酸)以提供標題化合物(17.8mg,35%)，其為三氟乙酸鹽，其為非晶形固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 9.56(s,1H),8.53(s,1H),8.39(d,J=8.8Hz,1H),8.20(s,1H),7.87(d,J=8.6Hz,1H),7.60-7.45(m,1H),6.73(d,J=16.1Hz,1H),6.21(q,J=6.7Hz,1H),5.93-5.79(m,1H),4.49-4.36(m,1H),3.84-3.73(m, 1H),3.61(d,J=6.7Hz,1H),3.59-3.45(m,2H),2.86-2.70(m,2H),2.44-2.31(m,1H),2.18-1.89(m,4H),1.88-1.61(m,7H),1.59(d,J=7.1Hz,3H),1.04-0.95(m,6H)ppm。LCMS(m/z)523.3[M+H],RT 2.72分鐘。
實施例24-化合物24
化合物23的三氟乙酸鹽(7.9mg,0.012mmol)溶於乙酸乙酯(0.80mL)。一次性添加10%鈀/炭(5.6mg)，及反應容器用氫沖洗。反應混合物在1atm氫氣下攪拌達2.5小時及接著透過矽藻土墊以乙酸乙酯沖洗過濾。濾液被濃縮，及得到的粗製殘留物藉由逆相HPLC予以純化(C18,15至100%乙腈水溶液，0.1%三氟乙酸)以提供標題化合物(4.2mg,60%)，其為三氟乙酸鹽，其冷凍乾燥之後為非晶形固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 9.63(s,1H),8.42(d,J=8.8Hz,1H),8.26(s,1H),7.96(s,1H),7.91(d,J=8.8Hz,1H),6.16(q,J=6.5Hz,1H),5.79-5.68(m,1H),3.91-3.83(m,1H),3.46-3.40(m,1H),3.40(d,J=5.7Hz,1H),3.26-3.09(m,4H),2.06-1.89(m,6H),1.84(m,1H),1.73-1.59(m,7H),1.52(d,J=6.9Hz,3H),1.52(m,1H),0.93(s,3H),0.91(s,3H)ppm。LCMS(m/z)525.4[M+H],RT 2.51分 鐘。
實施例25. 化合物25.
化合物25a. 2,2-二甲基-丁-3-烯-1-醇
2,2-二甲基-丁-3-烯酸(570mg,5mmol)和三乙基胺(505mg,0.7mL,5mmol)的四氫呋喃溶液(15mL)在-5℃和氮下攪拌。添加氯甲酸甲酯(473mg,0.4mL,5mmol)的四氫呋喃(5mL)溶液，且反應混合物在-5℃攪拌達30分鐘。反應混合物被過濾，殘留物用四氫呋喃清洗，且濾液被蒸發。殘留物溶於四氫呋喃(5mL)，添加水(5mL)，且反應混合物在0℃攪拌。分數次添加硼氫化鈉(190mg,5mmol)，及反應混合物在0℃攪拌達15分鐘及接著在室溫攪拌達30分鐘。添加飽和氯化銨溶液(25mL)，且混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合，用鹽水清洗，用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之異己烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(569mg,95%)，其為油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.05(s,6H),1.33(t,J=6.5Hz, 1H),3.36(d,J=6.5Hz,2H),5.09(did,J=17.4,1.3Hz,1H),5.12(did,J=10.9,1.3Hz,1H),5.79(did,J=17.4,10.9Hz,1H)。
化合物25b：1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙酮
於7-溴-2-氯-喹啉(得自AstaTech,Inc.)(8.10g,33.4mmol)和碘化鈉(50.0g,334mmol)的乙腈(27mL)受攪拌漿料中緩慢添加乙醯氯(3.56mL,50.0mmol)。燒瓶用塞子塞住、密封及在80℃受熱達3小時，之後使其冷卻。混合物隨後用10% w/w碳酸鉀水溶液(80mL)、5% w/w亞硫酸鈉水溶液(80mL)和飽和硫代硫酸鈉水溶液(80mL)處理，且混合物用二氯甲烷萃取(2 x)。結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到粗製7-溴-2-碘-喹啉。於喹啉中添加三丁基(1-乙氧基乙烯基)錫(13.6mL,40.1mmol)、1,4-二(67mL)和二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(2.37g,3.34mmol)，和反應混合物在100℃受熱達5小時，之後使其冷卻。添加2M鹽酸水溶液(67mL)，且攪拌反應達1小時。混合物被過濾，及該固體物用乙酸乙酯清洗，且濾液被蒸發以移除有機液。殘留物用乙酸乙酯萃取(3 x)，且結合的有機萃取液用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸 發。產物在攙添10% w/w碳酸鉀之上矽膠以0至6%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(5.5g,66%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 2.86(s,3H),7.72-7.80(m,2H),8.21(ABq,△δ AB=0.11,J AB=8.5Hz,2H),8.42(s,1H)。LCMS(m/z)250.1/252.1[M+H],Tr=2.90分鐘。
化合物25c：(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙醇
二氯(對異丙基甲苯)釕(II)二聚物(61mg,0.100mmol)和(1R,2R)-(-)-N-對甲苯磺醯基-1,2-二苯基乙二胺(88mg,0.012mmol)被懸浮於經排氣的水(40mL)中，且混合物用氮排氣達5分鐘。混合物在70℃和氮下攪拌達90分鐘。得到的渾濁橙色混合物被冷卻至室溫。依序添加1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙酮(5.00g,20mmol)的經排氣四氫呋喃(40mL)溶液和甲酸鈉(6.8g,100mmol)，且反應混合物用氮排氣達5分鐘。反應混合物在40℃激烈攪拌達4小時，且使其冷卻。其接著用乙酸乙酯和水稀釋，且有機層被分離、用水和鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用0%至30%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液予以純化以提供標題化合物(4.96g,98%)，其為灰白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.59(d,J=6.7Hz,3H),4.85(d,J=4.5Hz,1H),5.04-5.07(m,1H),7.40(d, J=8.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.7,1.6Hz,1H),7.71(d,J=8.7Hz,1H),8.15(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=1.6Hz,1H)。LCMS(m/z)252.1/254.1[M+H],Tr=1.74分鐘。
化合物25d：乙酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基酯
於0℃之(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙醇25c(1.00g,3.97mmol)和三乙基胺(1.65mL,11.9mmol)的無水二氯甲烷的溶液中添加乙酸酐(0.75mL,7.93mmol)和4-(二甲基胺基)吡啶(24mg,0.197mmol)。攪拌反應混合物且使其回暖至室溫。1.5小時之後，添加水(100mL)，及分離層。水相用二氯甲烷再萃取(2×100mL)，且結合的有機液用鹽水(100mL)清洗、用硫酸鎂乾燥、過濾和在真空中濃縮以得到粗製的殘留物。此殘留物藉由矽膠層析術依序使用異己烷(66mL)、95：5之異己烷/乙酸乙酯(300mL)和9：1之異己烷/乙酸乙酯(1066mL)予以純化以產生25d(1.16g,99%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.65(d,J=6.7Hz,3H),2.16(s,3H),5.98(q,J=6.7Hz,1H),7.63(d,J=8.5Hz,1H),7.72(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.87(d,J=8.7Hz,1H),8.23(d,J=1.8Hz,1H),8.37(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)293.9/296.0[M+H],Tr=2.58分鐘。
化合物25e. 乙酸(R)-1-[7-((E)-4-羥基-3,3-二甲基-丁-1-烯基)-喹啉-2-基]-乙基酯
2,2-二甲基-丁-3-烯-1-醇(40mg,0.4mmol)和乙酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基酯25d,(118mg,0.4mmol)的1,4-二(5mL)溶液在室溫和氮下攪拌。依序添加乙酸鈀(II)(18mg,0.08mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(24mg,0.08mmol)，和N,N-二環己基甲基胺(125mg,0.14mL,0.64mmol)的1,4-二(1mL)溶液，且反應混合物100℃在受熱達90分鐘。添加額外的乙酸鈀(II)(9mg,0.04mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(12mg,0.04mmol)，且反應混合物在100℃受熱達3小時。反應混合物被冷卻至室溫。添加乙酸乙酯，且混合物用飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供25e(85mg,68%)，其為膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.20(s,6H),1.43(t,J=6.3Hz,1H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),2.18(s,3H),3.50(d,J=6.3Hz,2H),6.06(q,J=6.7Hz,1H),6.52(ABq,△δ AB=0.18,J AB =16.0Hz,2H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.03(br s,1H),8.11(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)314.1[M+H],Tr=2.21分鐘。
化合物25f. 乙酸(R)-1-[7-((E)-3,3-二甲基-4-側氧基-丁-1-烯基)-喹啉-2-基]-乙基酯
乙酸(R)-1-[7-((E)-4-羥基-3,3-二甲基-丁-1-烯基)-喹啉-2-基]-乙基酯25e(78mg,0.25mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加Dess-Martin過碘烷(106mg,0.25mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達60分鐘。添加額外的Dess-Martin過碘烷(22mg,0.05mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達15分鐘。反應混合物用二氯甲烷稀釋，及混合物用飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供25f(85mg,68%)，其為膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.37(s,6H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),2.18(s,3H),6.06(q,J=6.7Hz,1H),6.40(d,J=16.3Hz,1H),6.65(d,J=16.3Hz,1H),7.44(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.2Hz,1H),7.76(d,J=8.5Hz,1H),8.04(br s,1H),8.13(d,J=8.5Hz,1H),9.52(s,1H)。LCMS(m/z)312.1[M+H],Tr=2.65分鐘。
化合物25g. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基 乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(S)-1-((S)-2-((S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)-3-甲基丁醯胺基)丙醯基)哌-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯20c(133mg,0.25mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液在0℃和氮下攪拌。逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(111mg,0.09mL,0.5mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達1小時。添加冷的飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)，且混合物在0℃攪拌達15分鐘。添加二氯甲烷，且有機層被分離、用鹽水清洗、用無水硫酸鎂乾燥和蒸發以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(0.25mmol)，其無需進一步純化即可使用。(S)-1-[(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(0.25mmol)和乙酸(R)-1-[7-((E)-3,3-二甲基-4-側氧基-丁-1-烯基)-喹啉-2-基]-乙基酯25f(66mg,0.21mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液在室溫攪拌達10分鐘。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(55mg,0.26mmol)和乙酸(1滴)，且反應混合物在室溫攪拌達4小時。添加額外的三乙醯氧基硼氫化鈉(13mg,0.25mmol)，且反應混合物在 室溫攪拌達1小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，且溶液用飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供25g(84mg,46%)，其為膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.86(d,J=6.9Hz,3H),0.96(d,J=6.9Hz,3H),1.20(s,3H),1.29(d,J=7.0Hz,3H),1.31(s,3H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.70-2.15(m,6H),2.18(s,3H),2.52-2.63(m,2H),2.82-2.86(m,2H),3.66-3.73(m,1H),3.83(d,J=11.4Hz,1H),4.45-4.50(m,1H),4.74(d,J=12.0Hz,1H),4.95(d,J=12.0Hz,1H),5.28-5.38(m,1H),6.06(q,J=6.7Hz,1H),6.52(ABq,△δ AB=0.14,J AB =16.0Hz,2H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.66(d,J=8.5Hz,1H),7.74(d,J=8.5Hz,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),8.00(s,1H),8.11(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)726.1/728.1[M+H],Tr=2.08分鐘。
化合物25
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)- 丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯25g(80mg,0.11mmol)的四氫呋喃(3mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(18.5mg,0.44mmol)的水(1mL)溶液，且反應混合物在0℃攪拌達4小時。添加鹽酸(1M,0.45mL)，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,4 x)，且殘留物用二乙基醚研磨(2 x)和乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.11mmol)，其為白色固體物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)554.2[M+H],Tr=1.03分鐘。
粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.11mol)、N,N-二異丙基乙基胺(84mg,0.65mmol)和4-二甲基胺基吡啶(5mg,0.04mmol)在四氫呋喃(130mL)中的混合物在室溫和氮下攪拌。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(133mg,0.35mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達2.5小時。溶劑被蒸發，及殘留物被分配在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液之間。有機溶液被分離和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用乙酸乙酯予以純化。殘留物用二乙基醚研磨及得到的固體物被乾燥以提供該25(21mg,30%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.80(d,J=6.7Hz,3H),0.98(d,J=6.7Hz,3H),1.11(s,3H),1.25(s,3H),1.62(d,J=7.1Hz,3H),1.67-1.71(m,3H),1.74(d,J=6.7Hz,3H),1.88-2.05(m,2H),2.64(d,J=8.5Hz,1H),2.70-2.80(m,3H),3.80-3.85(m,1H),4.35-4.40(m,1H),5.89-5.99(m,2H),6.42(ABq,△δ AB=0.15,J AB =16.5Hz,2H),7.41(d,J=8.5Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),7.82(d,J=8.5Hz,1H),8.01(br s,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)536.2[M+H],Tr=1.47分鐘。
實施例26. 化合物26.
化合物26a. (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯1d(1.08g,2.5mmol)的二氯甲烷(35mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加三氟甲磺酸三甲基 矽基酯(682mg,0.55mL,3.1mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達45分鐘。添加N,N-二異丙基乙基胺(1.29g,1.73mL,10mmol)，且溶劑被蒸發以提供粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(2.5mmol)，其用於下一步驟。粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(2.5mmol)的乙腈(30mL)溶液在0℃和氮下攪拌。依序添加(S)-2-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-3-甲基-丁酸(635mg,2.75mmol，得自Sigma-Alrich Inc.)、N,N-二異丙基乙基胺(1.29g,1.7mL,10mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(1.33g,3.5mmol)，和反應混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被蒸發，及殘留物溶於乙酸乙酯。溶液用水、鹽酸(2M)、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(756mg,55%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.88(d,J=6.5Hz,3H),0.97(d,J=6.7Hz,3H),1.28(d,J=6.7Hz,3H),1.49-1.54(m,9H),1.65-2.30(m,5H),2.82(s,3H),2.82-2.94(m,1H),3.62-4.18(m,3H),4.30-4.45(m,1H),4.73(d,J=12.0Hz,1H),4.95(d,J=12.0Hz,1H),5.29-5.39(m,1H),6.62-6.77(m,1H)。LCMS(m/z)545.2/547.1[M+H],Tr=3.02分鐘。
化合物26b. (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-({(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基}-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
化合物26b以與化合物25d相同方式予以製備，使用(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯代替(S)-1-[(S)-2-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯，42%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.90(d,J=6.5Hz,3H),1.05(d,J=6.5Hz,3H),1.16(s,3H),1.19(s,3H),1.33(d,J=6.7Hz,3H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.70-2.15(m,5H),2.17(s,3H),2.40(s,3H),2.57-2.62(m,3H),2.82-2.89(m,1H),3.66-3.73(m,1H),3.83(d,J=11.4Hz,1H),4.43-4.48(m,1H),4.72(d,J=11.8Hz,1H),4.94(d,J=11.8Hz,1H),5.27-5.37(m,1H),6.06(d,J=6.7Hz,1H),6.50(ABq,△δ AB=0.04，J AB =16.5Hz,2H),6.77(d,J=8.0Hz,1H),7.41(d,J=8.3Hz,1H),7.6(d,J=8.5Hz,1H),7.73(d,J=8.5Hz,1H),7.95(br s,1H),8.11(d,J=8.3Hz,1H)。 LCMS(m/z)740.2/742.3[M+H],Tr=2.44分鐘。
化合物26
化合物26以與化合物25相同方式予以製備，使用(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-({(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基}-甲基-胺基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯代替(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯，11%產率，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.86(d,J=6.5Hz,3H),0.96(d,J=6.5Hz,3H),1.14(s,3H),1.23(s,3H),1.44(d,J=7.1Hz,3H),1.67-1.72(m,2H),1.75(d,J=6.9Hz,3H),1.81-2.25(m,3H),2.51(s,3H),2.79-2.91(m,4H),3.69-3.73(m,1H),4.25-4.30(m,1H),5.47(q,J=6.7Hz,1H),5.97(q,J=6.7Hz,1H),6.54(ABq,△δ AB=0.06,J AB =16.0Hz,2H),7.42(d,J=8.3Hz,1H),7.55(d,J=8.3Hz,1H),7.81(d,J=8.5Hz,1H),7.95(br s,1H),8.21(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)550.3[M+H],Tr=1.50分鐘。
實施例27及28，化合物27及28
化合物27a. 三氟-甲磺酸2-甲基-丁-3-烯基酯
2-甲基-丁-3-烯-1-醇(840mg,10mmol)和2,6-二甲吡啶(1.5g,1.6mL,14mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加三氟甲磺酸酐(3.38g,2.0mL,12mmol)，及反應混合物在在-78℃攪拌達1小時。添加水，且反應混合物被回暖至0℃。添加額外的水，且有機層被分離，用冷1M鹽酸、水和鹽水清洗，用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發以提供粗製產物(14mmol)，其為淡黃色油狀物，其靜置變黑。粗製產物立即用於下一步驟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.16(d,J=6.9Hz,3H),2.66-2.76(m,1H),4.33-4.55(m,2H),5.20(dd,J=10.5,0.9Hz,1H),5.21(dd,J=16.3,0.9Hz,1H),5.66-5.81(m,1H)。
化合物27b. (S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁酸甲基酯
(S)-2-羥基-3-甲基-丁酸甲基酯(1.32g,10mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液在-10℃和氮下攪拌。逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鈉(6mL,12mmol,2M的四氫呋喃溶液)，及反應混合物在-10℃攪拌達10分鐘。一次性添加三氟-甲磺酸2-甲基-丁-3-烯基酯(2.18g,10mmol)，及反應混合物在室溫攪拌達2小時。添加飽和氯化銨溶液，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗、用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用20：1至10：1之異己烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(429mg,21%共2步驟)，其為油狀物，其為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.96-0.99(m,6H),1.05(d,J=6.9Hz,1.5H),1.08(d,J=6.6Hz,1.5H),2.01-2.12(m,1H),2.45-2.56(m,1H),3.06-3.21(m,1H),3.44-3.60(m,2H),3.76(s,3H),5.00-5.11(m,2H),5.74-5.88(m,1H)。
化合物27c. (S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁酸
(S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁酸甲基酯 (429mg,2.1mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液在0℃和氮下攪拌。依序添加氫氧化鋰單水合物(265mg,6.3mmol)的水(5mL)溶液和甲醇(2mL)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達4小時。添加額外的氫氧化鋰單水合物(90mg,2.1mmol)和甲醇(3mL)，且反應混合物在室溫攪拌達3天。有機溶劑被蒸發，及溶液用2M鹽酸酸化至pH 2，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(200mg,54%)，其為無色油狀物及為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.97-1.11(m,9H),2.14-2.23(m,1H),2.48-2.59(m,1H),3.37-3.50(m,2H),3.70-3.72(m,1H),5.11-5.19(m,2H),5.70-5.88(m,1H),8.50-9.50(br s,1H)。LCMS(m/z)185.3[M-H],Tr=2.33分鐘。
化合物27d. (S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁酸
(S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁酸(200mg,1.07mmol)和乙酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基酯(314mg,1.07mmol)的乙腈(10mL)溶液在室溫和氮下攪拌。依序添加乙酸鈀(II)(48mg,0.2mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(61mg, 0.2mmol)和N,N-二環己基甲基胺(418mg,0.46mL,2.14mmol)，和反應混合物在微波反應器內在120℃受熱達40分鐘。添加額外的乙酸鈀(II)(48mg,0.2mmol)、三(-甲苯基)膦(61mg,0.2mmol)，且反應混合物在微波反應器內在130℃受熱達30分鐘。溶劑被蒸發，及殘留物被分配在乙酸乙酯和1M鹽酸之間。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製產物(1.07mmol)，其為兩種非鏡像異構物的1：1混合物，其無需進一步純化即可用於下一步驟。LCMS(m/z)400.2[M+H],Tr=2.75分鐘。
化合物27e. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(433mg,1.0mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(444mg,0.35mL,2.0mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達45分鐘。添加N,N-二異丙基乙基胺(516mg,0.7 mL,4.0mmol)，且溶劑被蒸發，及殘留物被乾燥以提供粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.0mmol)，其用於下一步驟。粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.0mmol)的乙腈(30mL)溶液在0℃和氮下攪拌。依序添加(S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁酸(1.0mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(516mg,0.7mL,4.0mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(530mg,1.4mmol),和反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達2小時。溶劑被蒸發，及殘留物溶於乙酸乙酯。溶液用冷1M鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至1：2之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(420mg,58%共2步驟)，其為白色固體物，其兩種非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)713.3/715.3[M+H],Tr=3.48分鐘。
化合物27及28
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(143mg,0.2mmol)的四氫呋喃(10mL)溶液在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(42mg,1.0mmol)的水(2mL)溶液，且反應混合物在0℃攪拌達3小時且接著在10℃攪拌達3小時。添加1M鹽酸(1mL,1.0mmol)，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，且殘留物用二乙基醚研磨(2 x)和乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.2mmol)，其為淡黃色固體物，其為兩種非鏡像異構物的混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)541.2[M+H],Tr=1.77分鐘。粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.2mmol)在四氫呋喃(200mL)中的懸浮液在室溫和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(129mg,0.18mL,1.0mmol)及4-二甲基胺基吡啶(8mg,0.06mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達5分鐘。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(107mg,0.28mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達2小時。添加額外的2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(30mg,0.08mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達2小時。溶劑被蒸發，及殘留物 被懸浮於乙酸乙酯。添加冷1M鹽酸，且有機層被分離，用水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：4至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供兩種非鏡像異構物的1：1混合物。混合物藉由逆相製備級HPLC以45：55之乙腈(包含0.1%甲酸)/水(包含0.1%甲酸)沖提予以純化。含有純淨之非鏡像異構物的部分被結合和蒸發。殘留物被分配在飽和碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯之間。有機層被分離、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供兩種非鏡像異構物。
實施例27化合物27(第一沖提)非鏡像異構物1：(12mg,12%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 0.70(d,J=6.5Hz,3H),0.93(d,J=6.5Hz,3H),0.97(d,J=6.9Hz,3H),1.54(d,J=6.9Hz,3H),1.55-1.62(m,2H),1.63(d,J=6.7Hz,3H),1.73-1.95(m,3H),2.72-2.78(m,1H),3.25-3.30(m,1H),3.45-3.52(m,1H),3.65-3.72(m,2H),4.18-4.22(m,1H),4.87(d,J=12.2Hz,1H),5.65-5.73(m,1H),5.96(q,J=6.7Hz,1H),6.34(dd,J=16.5,5.5Hz,1H),6.45(d,J=16.5Hz,1H),7.48(d,J=8.3Hz,1H),7.58(d,J=8.7Hz,1H),7.80(s,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=8.5Hz,1H),8.47(d,J=8.3Hz,1H)。LCMS(m/z)523.3[M+H],Tr=2.30分鐘。
實施例28，化合物28(第二沖提)非鏡像異構物2： (12mg,12%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 0.73(d,J=6.7Hz,3H),0.93(d,J=6.5Hz,3H),1.10(d,J=6.9Hz,3H),1.49(d,J=7.1Hz,3H),1.55-1.62(m,2H),1.65(d,J=6.9Hz,3H),1.75-1.95(m,3H),2.56-2.62(m,1H),2.72-2.82(m,1H),3.64-3.73(m,3H),4.18-4.32(m,1H),4.84(d,J=12.1Hz,1H),5.65-5.73(m,1H),5.98(q,J=6.7Hz,1H),6.34(dd,J=16.5,5.2Hz,1H),6.48(d,J=16.5Hz,1H),7.48(d,J=8.5Hz,1H),7.61(d,J=8.5Hz,1H),7.75(s,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=8.3Hz,1H),8.43(d,J=8.0Hz,1H)。LCMS(m/z)523.3[M+H],Tr=2.34分鐘。
實施例29.
化合物29a. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸
於(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯1e(502mg,1.16 mmol)在四氫呋喃(15mL)和水(3mL)的懸浮液中添加氫氧化鋰單水合物(69mg,1.65mmol)。反應混合物被攪拌達45分鐘，及接著添加鹽酸(2M,0.75mL)。反應混合物被攪拌達5分鐘及接著被蒸發。粗製殘留物無需進一步純化直接用於下一步驟。
化合物29b. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基醯胺
2-甲基-丙烷-2-(R)-亞磺酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(533mg,1.50mmol)溶於鹽酸的1,4-二溶液(4M,7.5mL)和甲醇(7.5mL)。反應混合物被攪拌達2小時及接著被蒸發。殘留物通過SCX匣依序以甲醇和1M氨的甲醇溶液沖提。鹼性部分被收集和蒸發。殘留物溶於二氯甲烷(30mL)，且將23mL此溶液添加至新鮮製備的(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(350mg,1.16mmol)中。反應容器被冷卻至0℃，及添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(616mg,1.62mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(450mg,606μL,3.48mmol)。使反應混合物回暖至周圍溫度和攪拌達15小時。混合物用二氯甲烷稀釋，及依 序用飽和碳酸氫鈉溶液、水和飽和氯化銨溶液清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物在矽膠上以1：0至19：1之乙酸乙酯/甲醇沖提予以純化以提供標題化合物(205mg,33%)，其為白色泡沫物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.85(d,J=6.9Hz,3H),1.01(d,J=6.9Hz,3H),1.41(d,J=6.9Hz,3H),1.58(d,J=6.7Hz,3H),1.60-1.81(m,2H),2.04-2.16(m,1H),2.20-2.29(m,1H),3.69-3.79(m,1H),3.26(br s,1H),3.43-3.54(m,1H),3.72(七重峰，J=6.4Hz,1H),3.86(d,J=11.8Hz,1H),3.98(d,J=3.1Hz,1H),4.47-4.56(m,1H),5.27(明顯的五重峰，J=6.9Hz,1H),5.46(dq,J=8.0,6.9Hz,1H),7.13(d,J=8.2Hz,1H),7.39(d,J=8.5Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.8Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),8.10(d,J=6.7Hz,1H),8.14(d,J=8.5Hz,1H),8.43(s,1H)。LCMS(m/z)536.0[M+H],Tr=2.21分鐘。
化合物29c. (R)-4-異丙基-3-((E)-2-甲基-丁-2-烯醯基)-唑啶-2-酮
甘菊花酸(2.005g,20.031mmol)的無水四氫呋喃(50mL)冰(-20℃)溶液依序用三乙基胺(6.1mL,44.068mmol)和逐滴的三甲基乙醯氯(2.7mL,22.034mmol)處理。在-20℃攪拌達30分鐘之後，添加氯化鋰(1.019g,24.037 mmol)和(R)-(+)-4-異丙基-2-唑啶酮(2.587g,20.031mmol)。使反應混合物緩慢回暖至室溫、攪拌達3天且接著用飽和氯化銨驟冷。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(3.307g,78%)，其為無色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.92(d,J=6.9Hz,3H),0.94(d,J=7.1Hz,3H),1.83(d,J=6.9Hz,3H),1.93(s,3H),2.38(d七重峰，J=6.9,4.2Hz,1H),4.19(dd,J=8.9,4.6Hz,1H),4.33(明顯的t,J=8.9Hz,1H),4.49-4.58(m,1H),6.23(q,J=7.1Hz,1H)。
化合物29d. (R)-4-異丙基-3-[(R)-2-甲基-2-(2-三甲基矽烷基-乙氧基甲基)-丁-3-烯醯基]-唑啶-2-酮
(R)-4-異丙基-3-((E)-2-甲基-丁-2-烯醯基)-唑啶-2-酮(458.9mg,2.172mmol)中的殘留水分藉由與無水甲苯共沸而予以移除。乾燥的(R)-4-異丙基-3-((E)-2-甲基-丁-2-烯醯基)-唑啶-2-酮的無水甲苯(10mL)冰(-78℃)溶液用雙(三甲基矽基)醯胺鈉的甲苯溶液(0.6M,5.4mL,3.258mmol)逐滴處理。黃色溶液在-78℃攪拌達35分鐘之後， 添加氯化2-(三甲基矽基)乙氧基甲基(1.1mL,6.516mmol)。在0℃攪拌達3.5小時之後，反應用飽和氯化銨驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合、透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至9：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(543.3mg,73%)，其為無色油狀物及為非鏡像異構物的5：1混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.01(s,9H),0.77-0.99(m,8H),1.49(s,3H),2.36(d七重峰，J=6.9,3.8Hz,1H),3.42-3.60(m,3H),4.15-4.31(m,3H),4.49-4.57(m,1H),5.00(d,J=17.6Hz,1H),5.10(d,J=10.7,1H),6.19(dd,J=17.8,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)364.1[M+Na],Tr=3.32分鐘。
化合物29e. (R)-3-((R)-2-羥基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基)-4-異丙基-唑啶-2-酮
於(R)-4-異丙基-3-[(R)-2-甲基-2-(2-三甲基矽烷基-乙氧基甲基)-丁-3-烯醯基]-唑啶-2-酮(2.93g,8.58mmol)在乙腈(86mL)和水(1.72mL)的混合物中的受攪拌溶液添加四氟硼酸鋰(1M的乙腈溶液，42.9mL,42.9mmol)。混合物在氮下迴流受熱達5小時且使其冷卻至周圍溫度。添加 更多的四氟硼酸鋰(1Min乙腈，8.6mL,8.6mmol)，且混合物再次迴流受熱達75分鐘及使其冷卻至周圍溫度。混合物用水/二乙基醚(2：3,100mL)稀釋，且有機層被分離和用水清洗。結合的水清洗液用二乙基醚反萃取，且結合的有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到標題化合物(1.89g,91%)，其為黃色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.89(d,J=6.9Hz,3H),0.95(d,J=6.9Hz,3H),1.35(s,3H),2.36-2.47(m,1H),2.56-2.70(br s,1H),3.47-3.54(m,1H),3.91(d,J=11.6Hz,1H),4.22-4.31(m,2H),4.47-4.53(m,1H),4.97(d,J=17.8Hz,1H),5.17(d,J=10.7Hz,1H),6.09(dd,J=17.8,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)242.2[M+H],Tr=1.82分鐘。
化合物29f. (R)-3-[(R)-2-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯醯基]-4-異丙基-唑啶-2-酮
於0℃和氮下之(R)-3-((R)-2-羥基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基)-4-異丙基-唑啶-2-酮(660mg,2.74mmol)和氯化第三丁基二甲基矽基(533mg,3.56mmol)的N,N-二甲基甲醯胺(10mL)受攪拌溶液中一次性添加咪唑(821mg,12.1mmol)。反應在0℃攪拌達15分鐘及接著使其回暖至周圍溫度和攪拌達5小時。混合物被濃縮及接著被分配在飽和 氯化銨溶液和醚之間。有機層被分離，和用水清洗(3 x)，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至19：1之異己烷/乙酸乙酯沖提予以純化以提供標題化合物(316mg,32%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.05(s,3H),0.06(s,3H),0.86-0.94(m,6H),0.89(s,9H),1.45(s,3H),2.27-2.40(m,1H),3.71(d,J=9.6Hz,1H),4.10-4.30(m,2H),4.43(d,J=9.6Hz,1H),4.49-4.55(m,1H),4.99(d,J=17.8Hz,1H),5.10(d,J=9.6Hz,1H),6.17(dd,J=17.8,10.9Hz,1H)。LCMS(m/z)356.2[M+H],Tr=4.02分鐘
化合物29g. (R)-2-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯酸
於0℃之(R)-3-[(R)-2-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯醯基]-4-異丙基-唑啶-2-酮(310mg,.872mmol)的四氫呋喃(4.4mL)和水(2.2mL)的受攪拌混合物中依序添加過氧化氫溶液(30%,494mg,449μL,4.36mmol)和氫氧化鋰單水合物(73mg,1.74mmol)。反應混合物在0℃攪拌達5分鐘，接著使其回暖至周圍溫度和攪拌達16小時。添加更多的四氫呋喃(1mL)，且混合物被冷卻至0℃，及添加氫氧化鋰單水合物(37mg,0.87 mmol)。反應混合物在0℃攪拌達40分鐘，接著使其回暖至周圍溫度和攪拌達7小時。反應接著用偏二亞硫酸鈉驟冷和攪拌達30分鐘。混合物用鹽酸(2M)酸化至pH<3，和用二氯甲烷萃取(3 x)。結合的有機萃取液用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以9：1之異己烷/乙酸乙酯沖提予以純化以提供標題化合物(144mg,68%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.12(s,6H),0.93(s,9H),1.31(s,3H),3.65(d,J=9.6Hz,1H),3.78(d,J=9.6Hz,1H),5.24(d,J=17.6Hz,1H),5.24(d,J=10.9Hz,1H),5.96(dd,J=17.4,10.9Hz,1H)。
化合物29h. (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((R)-2-甲基-2-第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基-丁-3-烯醯基胺基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基醯胺
於(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基醯胺(504mg,0.944mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(649mg,1.89mmol)、4-(二甲基胺基)吡啶(46mg,0.378mmol)、三乙基胺(238mg,328μL,2.36mmol)和粉末狀的4Å分子 篩(~1g)的二氯甲烷(10mL)受攪拌溶液添加(R)-2-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯酸(346mg,1.42mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液。反應在氮下攪拌達91小時，且接著添加更多的2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(325mg,0.90mmol)、4-(二甲基胺基)吡啶(23mg,0.189mmol)和(R)-2-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯酸(173mg,0.71mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液，且反應混合物再攪拌達23小時。反應混合物透過矽藻土過濾和被冷卻至0℃，及添加冰-冷水。有機層被分離，及依序用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液及飽和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥，過濾和蒸發，及藉由矽膠層析術以1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯沖提予以純化以提供標題化合物(244mg,34%)，其為米黃色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.05(s,3H),0.06(s,3H),0.88(s,9H),0.93(d,J=6.9Hz,3H),0.94(d,J=6.9Hz,3H),1.37(d,J=6.5Hz,3H),1.42(s,3H),1.61(d,J=6.7Hz,3H),1.54-1.71(m,2H),1.91-2.01(m,1H),2.23-2.35(m,2H),2.57-2.68(m,1H),3.39-3.50(m,1H),3.65(d,J=9.5Hz,1H),3.73(d,J=12.1Hz,1H),3.89(d,J=9.6Hz,1H),4.51-4.60(m,1H),5.02(d,J=3.6Hz,1H),5.21-5.43(m,4H),6.04(dd,J=17.4,10.9Hz,1H),6.86(d,J=8.0Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.61-7.71(m,2H),8.02(d,J=6.5Hz,1H),8.12(d,J=8.5Hz,1H),8.36(s,1H)。LCMS(m/z)760.3,762.3[M+H],Tr=4.16分鐘。
化合物29i
於固體乙酸鈀(II)(14mg,0.060mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(20mg,0.060mmol)中依序添加(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((R)-2-甲基-2-第三丁基-二甲基-矽烷基氧基甲基-丁-3-烯醯基胺基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基醯胺(49mg,0.060mmol)的無水1,4-二(18.4mL)溶液、N,N-二環己基甲基胺(25mg,27μL,0.128mmol)和無水的乙腈(0.2mL)。混合物在微波反應器內在120℃受熱達25分鐘。相同量的5批次被反應和及結合，及用乙酸乙酯稀釋，用飽和氯化銨溶液(2 x)、鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：1至1：3之異己烷/乙酸乙酯沖提予以純化以提供標題化合物(81mg,37%)，其為黃色膠狀物。LCMS(m/z)680.3[M+H],Tr=3.75分鐘
化合物29
化合物29i(40mg,0.059mmol)溶於乙腈(20mL)，及添加氫氟酸(48%水溶液，117mg,102μL,5.88mmol)。反應混合物被攪拌達4小時，及添加更多的氫氟酸(48%水溶液，117mg,102μL,5.88mmol)，且再持續攪拌達3.5小時。添加固體碳酸氫鈉，且混合物被攪拌達5分鐘，透過疏水性玻璃料過濾，且蒸發濾液。殘留物藉由逆相製備級HPLC使用1：4至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(10.0mg,30%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.48-1.78(m,2H),1.56(s,3H),1.60(d,J=6.9Hz,3H),1.66(d,J=7.4H,3H),1.91-2.00(m,1H),2.10-2.19(m,2H),2.63-2.75(m,1H),3.62(dd,J=11.4,2.7Hz,1H),3.65(d,J=10.9Hz,1H),3.95(d,J=10.9Hz,1H),4.38-4.47(m,1H),5.08(q,J=6.6Hz,1H),5.23(d,J=9.2Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),6.24(d,J=16.5Hz,1H),6.57(d,J=16.5Hz,1H),7.45(d,J=8.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.83(s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)566.3[M+H],Tr=1.79分鐘。
實施例30. 化合物30.
於化合物29i(40mg,0.059mmol)的乙酸乙酯(6mL)受攪拌溶液中添加10%鈀/碳(12.5mg,0.012mmol)。混合物在氫氛圍下反應達1小時，且接著濾掉觸媒。將新鮮10%鈀/碳(12.5mg,0.012mmol)添加至濾液中，及受攪拌的混合物在氫氛圍下反應達1小時。混合物透過矽藻土過濾及接著被蒸發。殘留物溶於乙酸乙酯(6mL)中，及添加新鮮10%鈀/碳(12.5mg,0.012mmol)，且受攪拌的混合物在氫氛圍下反應達2小時。混合物透過矽藻土過濾及被蒸發。殘留物溶於乙腈(20mL)中，及添加氟化氫(48%水溶液，117mg,102μL,2.82mmol)。反應混合物被攪拌達2小時，及添加更多的氟化氫(48%水溶液，117mg,102μL,2.82mmol)，且再攪拌達2小時。添加固體碳酸氫鈉，且混合物攪拌達5分鐘且接著透過疏水性玻璃料過濾。混合物被蒸發和溶於乙酸乙酯(6mL)，及添加10%鈀/碳(12.5mg,0.012mmol)。受攪拌的混合物在氫氛圍下反應達7小時，及接著透過矽藻土過濾和被蒸發。殘留物藉由2個連續逆相製備級HPLC使用1：4至3：7之乙腈/水的梯度溶液和接著1：4至1：1之經0.1%甲酸修飾之乙腈/水的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(3.1mg,9%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.04(d,J=6.7Hz,3H),1.09(d,J=6.9Hz,3H),1.41(s,3H),1.48-1.75(m,2H),1.58(d,J=6.7Hz,3H),1.60(d,J=7.1H,3H),1.80-1.99(m,3H),2.12-2.25(m,1H),2.26-2.36(m,1H),2.61-2.73(m,1H),2.74-2.90(m,1H),2.96-3.11(m,1H),3.52(d,J=10.9Hz,1H),3.60(dd,J=11.2,2.3Hz,1H),3.80(d,J=10.9Hz,1H),4.24-4.42(m,1H),4.81-4.94(m,1H),5.10(q,J=6.7Hz,1H),5.94(d,J=7.2Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.43(dd,J=8.3,1.6Hz,1H),7.80(d,J=8.5Hz,1H),7.85(s,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)568.2[M+H],Tr=1.94分鐘。
實施例31，化合物31.
化合物31a：(S)-3-甲基-2-[2,2,2-三氟-亞乙基胺基]-丁酸甲基酯
(S)-2-胺基-3-甲基-丁酸甲基酯鹽酸鹽(6.72g,40mmol)的水(50mL)溶液被分配在飽和碳酸氫鈉溶液及二氯甲烷之間。有機層被分離、用水和鹽水清洗、用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發以提供(S)-2-胺基-3-甲基-丁酸甲基酯 (40mmol)。(S)-2-胺基-3-甲基-丁酸甲基酯(40mmol)、2,2,2-三氟-1-甲氧基-乙醇(5.2g,3.8mL,40mmol)和4-甲苯磺酸水合物(100mg)的甲苯(125mL)溶液使用Dean-Stark裝置迴流受熱達3小時。反應混合物被冷卻至室溫，且溶劑被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(4.79g,56%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.94(d,J=7.1Hz,3H),0.97(d,J=7.1Hz,3H),2.32-2.44(m,1H),3.73-3.77(m,4H),7.67(q,J=3.3Hz,1H)。
化合物31b：(S)-2-((S)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸甲基酯
(S)-3-甲基-2-[2,2,2-三氟-亞乙基胺基]-丁酸甲基酯(4.2g,20mmol)和溴化3,3-二甲基烯丙基(2.98g,2.3mL,20mmol)的四氫呋喃(30mL)溶液在室溫和氮下攪拌。添加鋅細粒(2.6g,40mmol)和氯三甲基矽烷(10滴)，及反應混合物在室溫攪拌達10分鐘及接著迴流受熱達2小時。反應混合物被冷卻至室溫。添加飽和氯化銨溶液，且混合物用二乙基醚萃取。有機層被分離、用鹽水清洗、用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用50：1至40：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以 提供標題化合物(1.41g,25%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.91(d,J=6.7Hz,3H),0.97(d,J=6.7Hz,3H),116(s,6H),1.52-1.55(m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.76-2.85(m,1H),3.20(dd,J=9.8,7.1Hz,1H),3.72(s,3H),5.09(d,J=17.4Hz,1H),5.11(d,J=10.8Hz,1H),5.90(dd,J=17.4,10.8Hz,1H)。LCMS(m/z)282.1[M+H],Tr=3.51分鐘。
化合物31c：(S)-2-((S)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸
(S)-2-((S)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸甲基酯(1.12g,4.0mmol)的四氫呋喃溶液(40mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(504mg,12.0mmol)的水(8mL)溶液，且反應混合物在0℃攪拌達1小時，且接著在室溫攪拌達1小時。添加甲醇(5mL)，且反應混合物在室溫攪拌達22小時。添加額外的氫氧化鋰單水合物(336mg,8.0mmol)的水溶液(2mL)，且反應混合物在室溫攪拌達24小時。有機溶劑被蒸發，及溶液用2M鹽酸酸化至pH 2，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(770mg,72%)， 其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.00(d,J=6.7Hz,3H),1.01(d,J=6.9Hz,3H),1.20(s,6H),1.95-2.04(m,1H),2.87(q,J=7.8Hz,1H),3.37(d,J=5.8Hz,1H),5.12(d,J=17.2Hz,1H),5.16(d,J=10.7Hz,1H),5.90(dd,J=17.2,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)268.2[M+H],Tr=2.88分鐘。
化合物31d：(S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁酸
(S)-2-((S)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸(267mg,1.0mmol)和乙酸(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基酯(294mg,1.0mmol)的乙腈溶液(10mL)在室溫和氮下攪拌。依序添加乙酸鈀(II)(45mg,0.2mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(61mg,0.2mmol)和N,N-二環己基甲基胺(390mg,0.43mL,2.0mmol)，且反應混合物在微波反應器內在120℃受熱達30分鐘。溶劑被蒸發，及殘留物被分配在乙酸乙酯和1M鹽酸之間。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製產物(640mg,1.0mmol)，其為黃色臘狀固 體物，其無需進一步純化即可用於下一步驟。LCMS(m/z)481.1[M+H],Tr=3.26分鐘。
化合物31e：(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(433mg,1.0mmol)的二氯甲烷溶液(30mL)在0℃和氮下攪拌。添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(444mg,0.35mL,2.0mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達45分鐘。添加N,N-二異丙基乙基胺(516mg,0.7mL,4.0mmol)，溶劑被蒸發，及殘留物被乾燥以提供粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.0mmol)，其用於下一步驟。粗製(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.0mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(516mg,0.7mL,4.0mmol)和粗製(S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁酸(1.0mmol)的混合物在乙腈(30mL)中在0℃和氮下攪拌。添加 2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(530mg,1.4mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達2小時。溶劑被蒸發，及殘留物溶於乙酸乙酯，且溶液用冷1M鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(292mg,37%共2步驟)，其為白色泡沫物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.95(d,J=7.1Hz,3H),0.97(d,J=7.1Hz,3H),1.30(d,J=6.7Hz,3H),1.38(s,6H),1.62-1.68(m,3H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.90-1.96(m,2H),2.18(s,3H),2.18-2.21(m,1H),2.84-3.23(m,3H),3.68-3.72(m,1H),3.79(d,J=11.1Hz,1H),4.37-4.42(m,1H),4.72(d,J=11.8Hz,1H),4.96(d,J=11.8Hz,1H),5.31-5.40(m,1H),6.06(q,J=6.7Hz,1H),6.59(ABq,△δ AB=0.07,J AB =16.2Hz,2H),7.05(d,J=8.0Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.66(d,J=8.5Hz,1H),7.76(d,J=8.5Hz,1H),8.01(s,1H),8.12(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)794.2/796.2[M+H],Tr=3.48分鐘。
化合物31
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(200mg,0.25mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(53mg,1.25mmol)的水溶液(2mL)，且反應混合物在0℃攪拌達5小時。添加1M鹽酸(1.25mL,1.25mmol)，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，及殘留物用二乙基醚研磨(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.25mmol)，其為白色固體物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)622.3[M+H],Tr=1.97分鐘。粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-羥基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.25mmol)的四氫呋喃懸浮液(250mL)在0℃和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(161mg,0.22mL,1.25mmol)和4-二甲基胺基吡啶(20mg)，及反應混合物在0℃ 攪拌達5分鐘。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(133mg,0.35mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達3小時。添加額外的2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(95mg,0.25mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被蒸發，及殘留物被懸浮於乙酸乙酯。添加冷1M鹽酸，且有機層被分離，用水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至2：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(50mg,33%共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.74(d,J=6.7Hz,3H),1.00(d,J=6.7Hz,3H),1.29(s,3H),1.35(s,3H),1.55-1.70(m,3H),1.71(d,J=6.7Hz,3H),1.72(d,J=6.5Hz,3H),1.87-1.97(m,2H),2.66-2.74(m,1H),2.90(d,J=9.4Hz,1H),3.13(q,J=7.8Hz,1H),3.70-3.79(m,1H),4.28-4.37(m,2H),5.84(q,J=7.1Hz,1H),5.91(q,J=6.7Hz,1H),6.33(d,J=16.2Hz,1H),6.63(d,J=16.2Hz,1H),7.42(d,J=8.7Hz,1H),7.49(dd,J=8.3,1.6Hz,1H),7.83(d,J=8.5Hz,1H),8.20-8.23(m,2H)。LCMS(m/z)604.3[M+H],Tr=3.25分鐘。
實施例32，化合物32.
化合物32a：(R)-3-甲基-2-[2,2,2-三氟-亞乙基胺基]-丁酸甲基酯
化合物32a以與化合物31a相同方式予以製備，使用(R)-2-胺基-3-甲基-丁酸甲基酯鹽酸鹽代替(S)-2-胺基-3-甲基-丁酸甲基酯鹽酸鹽，64%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.94(d,J=7.1Hz,3H),0.97(d,J=7.1Hz,3H),2.32-2.44(m,1H),3.73-3.77(m,4H),7.67(q,J=3.3Hz,1H)。
化合物32b：(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸甲基酯
化合物32b以與化合物31b相同方式予以製備，使用(R)-3-甲基-2-[2,2,2-三氟-亞乙基胺基]-丁酸甲基酯代替(S)-3-甲基-2-[2,2,2-三氟-亞乙基胺基]-丁酸甲基酯，30%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.91(d,J=6.7Hz,3H), 0.97(d,J=6.7Hz,3H),1.16(s,6H),1.52-1.55(1m,1H),1.81-1.92(m,1H),2.76-2.85(m,1H),3.20(dd,J=9.8,7.1Hz,1H),3.72(s,3H),5.09(d,J=17.4Hz,1H),5.11(d,J=10.8Hz,1H),5.90(dd,J=17.4,10.8Hz,1H)。LCMS(m/z)282.1[M+H],Tr=3.51分鐘。
化合物32c：(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸
((R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸甲基酯(1.30g,4.6mmol)的四氫呋喃溶液(30mL)在0℃和氮下攪拌。添加第三丁氧化鉀(1.55g,13.8mmol)，且反應混合物在0℃攪拌，及回暖至室溫整夜。蒸發揮發物，添加2M鹽酸，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供含有(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸第三丁基酯、(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸第三丁基酯、(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸和(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸(4.6mmol)之混合物，其以粗製形式用於下一步驟。(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸第三丁基 酯、(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸第三丁基酯、(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸和(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸(4.6mmol)混合物的二氯甲烷溶液(10mL)在5℃和氮下攪拌。添加三氟乙酸(5mL)，且反應混合物在室溫攪拌達20小時。添加額外的三氟乙酸(5mL)，且反應混合物在室溫攪拌達48小時。溶劑被蒸發，及殘留物與甲苯共蒸發(3 x)。殘留物被分配在乙酸乙酯和水之間。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供(R)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸(152mg,12%)，其為無色油狀物//及標題化合物(321mg,26%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.99(d,J=6.7Hz,3H),1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.23(s,6H),2.09-2.19(m,1H),2.85(q,J=8.0Hz,1H),3.27(d,J=4.0Hz,1H),5.16(d,J=17.2Hz,1H),5.19(d,J=10.8Hz,1H),5.91(dd,J=17.3,10.8Hz,1H)。LCMS(m/z)268.1[M+H],Tr=2.95分鐘。
化合物32d：(S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁酸
化合物32d以與化合物31d相同方式予以製備，使用(S)-2-((R)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸代替(S)-2-((S)-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基)-3-甲基-丁酸且以粗製形式用於下一步驟。LCMS(m/z)481.1[M+H],Tr=3.15分鐘。
化合物32e：(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
化合物32e以與化合物31e相同方式予以製備，使用(S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁酸代替(S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁酸，58%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.90(d,J=7.1Hz,3H),0.92(d, J=7.1Hz,3H),1.31(d,J=6.7Hz,3H),1.38(s,6H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.69-1.79(m,3H),1.89-2.02(m,2H),2.18(s,3H),2.18-2.21(m,1H),2.83-3.12(m,3H),3.66-3.73(m,1H),3.83(d,J=11.4Hz,1H),4.42-4.48(m,1H),4.72(d,J=11.8Hz,1H),4.95(d,J=11.8Hz,1H),5.27-5.34(m,1H),6.06(q,J=6.7Hz,1H),6.56(ABq,△δ AB=0.13,J AB =16.3Hz,2H),7.16(d,J=7.6Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.62(d,J=8.5Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.02(s,1H),8.12(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)794.2/796.1[M+H],Tr=3.65分鐘。
化合物32
化合物32以與化合物31相同方式予以製備，使用(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(R)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯代替(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-1-三氟甲基-丁-3-烯基胺基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基 酯，35%，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3CN)δ 0.94(d,J=6.9Hz,3H),0.98(d,J=6.7Hz,3H),1.19(d,J=6.7Hz,3H),1.43(s,3H),1.47(s,3H),1.69(d,J=6.7Hz,3H),1.70-1.90(m,4H),2.18-2.22(m,2H),3.39-3.60(m,3H),3.81-3.96(m,2H),4.73-4.81(m,1H),6.03-6.16(m,2H),6.78(ABq,△δ AB=0.10,J AB =16.3Hz,2H),7.39(d,J=8.5Hz,1H),7.52(d,J=8.0Hz,1H),7.87(d,J=8.3Hz,1H),7.98-8.05(br s,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H),8.34(s,1H)。LCMS(m/z)604.3[M+H],Tr=2.78分鐘。
實施例33.-化合物33
化合物33a. (7-溴-喹啉-2-基甲基)-甲基-胺甲酸第三丁基酯
於7-溴-喹啉-2-甲醛(236mg,1.00mmol，如EP 239746所製備)的甲醇受攪拌漿料中(5mL)添加甲基胺的甲醇溶液(2M,2.5mL,5.00mmol)。反應混合物被攪拌達20小時及接著被蒸發。殘留物被懸浮於甲醇(5mL)，及分 數次添加硼氫化鈉(57mg,1.50mmol)。反應混合物被攪拌達1小時，且接著被分配在二氯甲烷及飽和氯化銨溶液之間。有機層被分離，和用飽和氯化銨溶液清洗，且水性萃取液用二氯甲烷萃取，而結合的有機液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物溶於二氯甲烷(8mL)，且於得到的受攪拌溶液中添加二碳酸二-第三丁基酯(327mg,1.50mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)。攪拌達3小時之後，反應混合物用二氯甲烷稀釋，和用飽和碳酸氫鈉溶液清洗(2 x)，且水層用二氯甲烷萃取。結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料和被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(206mg,59%)，其為橙色油狀物及為旋轉異構體的混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.42-1.61(m,9H),2.92(s,1.5H),3.00(s,1.5H),4.71(s,1H),4.75(s,1H),7.34-7.46(m,1H),7.64(d,J=8.5Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),8.13(d,J=5.8Hz,1H),8.26(s,1H)。LCMS(m/z)351.1,353.1[M+H],Tr=3.13分鐘。
化合物33b. (E)-4-{2-[(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(7-溴-喹啉-2-基甲基)-甲基-胺甲酸第三丁基酯(206mg,0.586mmol)、(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-丁-3-烯酸甲基酯22d(171mg,0.674mmol)、氯化雙[(二環己基)(4-二甲基胺基苯基)膦]鈀(II)(24mg,0.029mmol)和磷酸三鉀(373mg,1.76mmol)被懸浮於環戊基甲基醚(2mL)和水(1mL)中。反應混合物在80℃和氮下攪拌及受熱達2小時。添加更多的氯化雙[(二環己基)(4-二甲基胺基苯基)膦]鈀(II)(12mg,0.015mmol)，且反應混合物在90℃受熱達90分鐘。反應被冷卻及用乙酸乙酯稀釋和用水清洗(2 x)。水層用乙酸乙酯萃取，且結合的有機萃取液用飽和鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至7：3之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(178mg,76%)，其為黃色膠狀物及為旋轉異構體的混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.43-1.57(m,15H),2.91(s,1.5H),2.99(s,1.5H),3.74(s,3H),4.71(s,1H),4.74(s,1H),6.64(明顯的s,2H),7.27-7.39(m,1H),7.63(d,J=8.5Hz,1H),7.76(d,J=8.5Hz,1H),7.90(s,1H),8.10(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)399.1[M+H],Tr=3.02分鐘。
化合物33c. (E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-甲基-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(E)-4-{2-[(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(134mg,0.336mmol)被懸浮於鹽酸的1,4-二溶液中(4M,3.4mL,13.6mmol)，且反應混合物被攪拌達2.5小時及接著被蒸發。於殘留物中依序添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸29a(106mg,0.353mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(7mL)、N,N-二異丙基乙基胺(87mg,117μL,0.672mmol)、1-羥基苯並三唑水合物(63mg,0.470mmol)和N-(3-二甲基胺基丙基)-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(90mg,0.470mmol)，且反應混合物被攪拌達16小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，且依序用飽和碳酸氫鈉溶液、水、飽和氯化銨溶液、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至19：1之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(128mg,65%)，其為無色膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.80-1.06(m,6H),1.21-1.38(m,3H),1.47(s,6H),1.52-2.18(m,5H),2.63-2.78(m,1H),3.12(s,3H),3.73(s,3H),3.88-3.97(m,2H),4.08-4.26(m,2H),4.41-4.61(m,1H),4.75-4.99(m,2H),5.20-5.40(m,1H),6.63(明顯的d,J=2.0Hz,2H),7.22-7.34(m,1H), 7.59-7.69(m,1H),7.72-7.78(m,1H),7.90-7.97(d,J=8.0Hz,1H),8.08-8.20(m,1H)。LCMS(m/z)582.3[M+H],Tr=2.35分鐘。
化合物33
(E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-甲基-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(64mg,0.110mmol)和1M NaOH(0.88mL,0.88mmol)的1,4-二受攪拌混合物(5.5mL)迴流受熱達2.5小時，且接著使其冷卻。反應混合物用2M鹽酸中和至pH 7和被蒸發。殘留物依序與第三丁醇/乙腈/甲苯及乙腈/甲苯共沸以得到粗製酸。
於氮下和50℃之2-甲基-6-硝基苯甲酸(189mg,0.550mmol)、4-(二甲基胺基)吡啶(101mg,0.825mmol)和粉末狀的4Å分子篩(~2g)的1,2-二氯乙烷受攪拌漿料中(37mL)經由注射泵添加粗製酸的N,N-二甲基甲醯胺溶液(5mL)，歷經3小時。含有有機酸之燒瓶用另外的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)清洗，且將其添加至反應混合物，歷經10分鐘。反應混合物在50℃再攪拌達2.5小時，且接著使其冷卻。混合物透過矽藻土過濾，且濾液依序用冰冷飽和 氯化銨溶液、冰冷飽和碳酸氫鈉溶液及飽和鹽水清洗、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由製備級HPLC使用1：4至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(3.9mg,6.5%)，其為白色固體物。LCMS(m/z)550.3[M+H],Tr=2.35分鐘。
實施例34及35. 化合物34及35.
化合物34a. (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
化合物34a以與化合物27e相同方式予以製備，使用(S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁酸代替(S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-乙醯氧基乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁酸，72%產率，及分離為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)502.1/504.1[M+H],Tr=3.32分鐘。
化合物34b. (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-(2(R)-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-(2-甲基-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(642.0mg,1.282mmol)、2-甲基-丙烷-2-(R)-亞磺酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(455.4mg,1.282mmol)、N,N-二環己基甲基胺(0.83mL,3.846mmol)的1,4-二溶液(10mL)受熱至100℃達2小時。冷卻至室溫之後，揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(500.1mg,50%)，其為橙色膠狀物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)774.3/776.2[M+H],Tr=3.31分鐘。
化合物34c. (S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7- 基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸甲基酯
(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-(2(R)-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(500.1mg,0.645mmol)的四氫呋喃/水的冷(0℃)溶液(30mL,5：1)用氫氧化鋰單水合物(100.4mg,2.393mmol)處理。在0℃攪拌達45分鐘之後，反應用鹽酸溶液(2M,1.2mL)驟冷，且揮發物在真空中予以移除。殘留的三氯乙醇與甲苯、甲苯/甲醇(2 x)、甲苯共沸，接著在高真空中乾燥。白色固體物用二乙基醚研磨(2 x)以提供粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(LCMS(m/z)644.4[M+H],Tr=2.44分鐘)其無需進一步純化即可使用。粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(0.645mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(0.56mL,3.225mmol)和4- 二甲基胺基吡啶(7.9mg,0.064mmol)在乾燥四氫呋喃(210mL)中的冷(0℃)溶液用2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(294.3mg,0.774mmol)處理。使反應緩慢回暖至室溫。16小時之後，反應用無水的甲醇(5mL)驟冷。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至9：1之二氯甲烷/甲醇的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(482.0mg)，其為橙色膠狀物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)658.3[M+H],Tr=2.68分鐘。
化合物34d：(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸甲基酯(480mg,0.73mmol)的四氫呋喃溶液(15mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(92mg,2.2mmol)的水溶液(3mL)，且反應混合物在0℃攪拌達1小時。添加 1M鹽酸(2.2mL,2.2mmol)，且蒸發揮發物。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，且接著用二乙基醚研磨(2 x)和乾燥以提供標題化合物(0.73mmol)，其為淡黃色膠狀物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)644.4[M+H],Tr=2.44分鐘。
化合物34及35.
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-3-甲基-2-((E)-2-甲基-4-{2-[(R)-1-((R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺醯基胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-丁-3-烯基氧基)-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(500mg,0.5mmol)的二溶液(10mL)在室溫和氮下攪拌。添加4M鹽酸的1,4-二溶液(1mL)，且反應混合物在室溫攪拌達30分鐘。蒸發揮發物，及殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，且接著用二乙基醚研磨(2 x)。殘留物被乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽，其為深黃色膠狀物(0.5mmol)和為非鏡像異構物的1：1混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)540.2 [M+H],Tr=1.57分鐘。(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲基-丁-3-烯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.5mmol)的二氯甲烷懸浮液(500mL)在0℃和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(387mg,0.52mL,3.0mmol)和4-二甲基胺基吡啶(20mg,0.18mmol)，及反應混合物在0℃攪拌達5分鐘。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(380mg,1.0mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達2小時且接著在室溫攪拌達72小時。蒸發揮發物。添加乙酸乙酯，且混合物用冷1M鹽酸、水、飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術依序使用1：3之異己烷/乙酸乙酯至乙酸乙酯和乙酸乙酯至1：10之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液予以純化。殘留物藉由逆相製備級HPLC以35：65之乙腈(包含0.1%甲酸)/水(包含0.1%甲酸)沖提予以純化。含有純淨之非鏡像異構物的部分被結合和蒸發。殘留物被分配在飽和碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯之間。有機層被分離、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被乾燥以提供兩種非鏡像異構物。
化合物34(第一沖提)非鏡像異構物1：(3mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.97(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.25(d,J=6.9Hz,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.60-1.65(m,2H),1.66(d, J=7.1Hz,3H),1.94-2.07(m,2H),2.28-2.33(m,1H),2.60-2.76(m,2H),3.49(d,J=8.5Hz,1H),3.55-3.71(m,2H),3.92(dd,J=9.5,4.4Hz,1H),4.41-4.46(m,1H),5.10(q,J=6.5Hz,1H),5.82(q,J=7.1Hz,1H),6.51(dd,J=16.1,5.8Hz,1H),6.63(d,J=16.1Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.82(d,J=8.3Hz,1H),8.02(s,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)522.2[M+H],Tr=2.41分鐘。
化合物35(第二沖提)非鏡像異構物2：(3mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.93(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.5Hz,3H),1.07(d,J=6.9Hz,3H),1.51-1.55(m,1H),1.59(d,J=6.5Hz,3H),1.68(d,J=7.1Hz,3H),1.69-1.73(m,1H),1.94-1.99(m,2H),2.29-2.34(m,1H),2.65-2.75(m,2H),3.38-3.43(m,2H),3.57-3.62(m,1H),3.96(dd,J=9.0,3.2Hz,1H),4.40-4.46(m,1H),5.10(q,J=6.4Hz,1H),5.84-5.89(m,1H),6.38(dd,J=16.1,6.3Hz,1H),6.65(d,J=16.1Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.46(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.82(d,J=8.3Hz,1H),8.05(br s,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)522.2[M+H],Tr=2.38分鐘。
實施例36. 化合物36.
化合物36a. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
鋅粉(1.3g,20.3mmol)添加至(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(400mg,0.92mmol)的四氫呋喃溶液(20mL)。此懸浮液用乙酸銨(1.1g,13.9mmol)的水溶液(7mL)處理。在室溫攪拌達16小時之後，濾掉鋅殘留物，且揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在乙酸乙酯和飽和硫酸氫鉀溶液之間，水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，有機層被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留的乙酸與甲苯共沸(3×10mL)以得到粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(280mg,99%)，其一半(140mg,0.46mmol)與(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺鹽酸鹽(得自ASIBA Pharmatech,Inc.)(194mg,0.60mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(0.400mL,2.3mmol)在無水的乙腈 (10mL)中混合。此溶液接著用2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(227mg,0.60mmol)處理。在室溫攪拌達3小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留物溶於乙酸乙酯且隨後用飽和氯化銨溶液和碳酸氫鈉溶液清洗。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至1：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(136mg,55%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.83(d,J=6.9Hz,3H),0.98(d,J=6.9Hz,3H),1.38(d,J=6.9Hz,3H),1.60(d,J=6.9Hz,3H),1.65-1.75(m,3H),1.87-1.96(m,1H),2.02-2.12(m,2H),2.87-3.00(m,1H),3.55-3.62(m,1H),3.81(d,J=3.4Hz,1H),4.24-4.34(m,1H),5.18-5.28(m,1H),5.31-5.40(m,1H),7.57(d,J=8.7Hz,1H),7.69(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.85(d,J=8.7Hz,1H),8.26(d,J=1.6Hz,1H),8.33(d,J=8.7Hz,1H)。LCMS(m/z)534.1,536.1[M+H],Tr=2.27分鐘。
化合物36b. (R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸
化合物36b以與化合物29d相同方式予以製備，使用化合物(R)-4-異丙基-3-((R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基)-唑啶-2-酮(58a的鏡像異構物，如Tet.Lett.2000,41(33),6429-6433所述製備)代替(R)-3-[(R)-2-(第三丁基- 二甲基-矽烷基氧基甲基)-2-甲基-丁-3-烯醯基]-4-異丙基-唑啶-2-酮，99%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.36(s,3H),3.41(s,3H),3.43(d,J=8.9Hz,1H),3.61(d,J=8.9Hz,1H),5.20-5.30(m,2H),6.00(dd,J=17.6,10.7Hz,1H)。
化合物36
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(123mg,0.23mmol)、(R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸(40mg,0.27mmol)、乙酸鈀(II)(11mg,0.046mmol)，三-(鄰-甲苯基)膦(21mg,0.068mmol)的無水乙腈溶液(3mL)用三乙基胺(81μL,0.57mmol)處理。在100℃和微波輻射下攪拌達20分鐘之後，反應被冷卻至室溫，且揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在二氯甲烷及飽和硫酸氫鉀溶液之間。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物與甲苯共沸(3×10mL)以得到粗製(E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-1-側氧基-丙基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸，其溶於N,N-二甲基甲醯胺(5 mL)和經由注射泵添加至在50℃和氮下之2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(161mg,0.47mmol)和4-二甲基胺基吡啶(86mg,0.70mmol)的1,2-二氯乙烷受攪拌漿料中(35mL)，歷經6小時。反應被冷卻至室溫，及隨後用5%檸檬酸溶液及碳酸氫鈉溶液清洗。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由製備級逆相HPLC予以純化以提供標題化合物(8mg,15%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.56(s,3H),1.60(d,J=6.9Hz,3H),1.68(d,J=6.9Hz,3H),1.69-1.75(m,1H),1.91-1.99(m,1H),2.10-2.30(m,2H),3.36(s,2H),3.41(s,3H),3.49(d,J=8.9Hz,1H),3.58-3.68(m,1H),3.80(d,J=9.1Hz,1H),4.38-4.48(m,1H),5.03-5.13(m,1H),5.19(d,J=9.1Hz,1H),5.74-5.85(m,1H),6.41(ABq,△δAB=0.34,J AB=16.4Hz,2H),7.45(d,J=8.5Hz,1H),7.64(d,J=8.5Hz,1H),7.79(s,1H),7.84(d,J=8.5Hz,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.38分鐘。
實施例37. 化合物37.
化合物37a. (7-溴-喹啉-2-基甲基)-(2,4-二甲氧基-苯 甲基)-胺
7-溴-喹啉-2-甲醛(354mg,1.50mmol，如EP 239746所述製備)溶於1,2-二氯乙烷(15mL)，及添加2,4-二甲氧基苯甲基胺(251mg,225μL,1.50mmol)，且反應混合物被攪拌達5分鐘，之後添加三乙醯氧基硼氫化鈉(477mg,2.25mmol)。攪拌3.5小時之後，反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液驟冷，及添加乙酸乙酯。有機層被分離，和用碳酸氫鈉清洗，及結合的水層用乙酸乙酯萃取。有機萃取液用飽和鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到粗製標題化合物，其為黃色膠狀物(571mg)，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)387.0,389.0[M+H],Tr=1.57分鐘。
化合物37b. (7-溴-喹啉-2-基甲基)-胺甲酸第三丁基酯
(7-溴-喹啉-2-基甲基)-(2,4-二甲氧基-苯甲基)-胺(290mg,0.75mmol)溶於二氯甲烷(8mL)，及添加三乙基矽烷 (1.6mL)和三氟乙酸(8mL)。反應混合物迴流受熱和攪拌達20小時且接著使其冷卻。混合物被蒸發及藉由SCX匣依序以甲醇和氨的甲醇溶液沖提予以純化，且鹼性部分被收集及蒸發。殘留物溶於二氯甲烷(8mL)中，及添加二碳酸二-第三丁基酯(245mg,1.13mmol)，和攪拌反應混合物達17小時。用二氯甲烷稀釋和用飽和碳酸氫鈉溶液清洗(2 x)，水層用二氯甲烷反萃取，且結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料和被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(150mg,59%)，其為淡黃色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.52(s,9H),4.65(d,J=4.9Hz,2H),5.90(br s,1H),7.39(d,J=8.5Hz,2H),7.63(dd,J=8.5,1.9Hz,2H),7.72(d,J=8.5Hz,1H),8.11(d,J=8.5Hz,1H),8.28(s,1H)。LCMS(m/z)337.0,339.0[M+H],Tr=2.79分鐘。
化合物37c. (E)-4-[2-(第三丁氧基羰基胺基-甲基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(7-溴-喹啉-2-基甲基)-胺甲酸第三丁基酯(296mg,0.878mmol)、(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-丁-3-烯酸甲基酯(256mg,1.01mmol)、氯化 雙[(二環己基)(4-二甲基胺基苯基)膦]鈀(II)(36mg,0.044mmol)和磷酸三鉀(558mg,2.63mmol)被懸浮於環戊基甲基醚(3mL)和水(1.5mL)中。反應混合物在80℃和氮下攪拌和受熱達3小時。反應被冷卻，和用乙酸乙酯稀釋，及用水(2 x)和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至7：3之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(257mg,76%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.49(s,6H),1.52(s,9H),3.75(s,3H),4.63(d,J=4.9Hz,2H),5.96(br s,1H),6.64(s,2H),7.32(d,J=8.5Hz,1H),7.63(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.00(s,1H),8.08(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)385.1[M+H],Tr=2.64分鐘。
化合物37d. (E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(E)-4-[2-(第三丁氧基羰基胺基-甲基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(128mg,0.333mmol)被懸浮於4M鹽酸的1,4-二(3.3mL)中，且反應混合物被攪拌達 2.5小時及接著被蒸發。於殘留物中依序添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸29a(105mg,0.350mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(7mL)和N,N-二異丙基乙基胺(86mg,116μL,0.666mmol)。於該受攪拌溶液中添加1-羥基苯並三唑水合物(63mg,0.466mmol)和N-(3-二甲基胺基丙基)-N’-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(89mg,0.466mmol)，且攪拌反應混合物達16小時。反應混合物用乙酸乙酯稀釋，且依序用飽和碳酸氫鈉溶液、水、飽和氯化銨溶液、水和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至19：1之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(95mg,50%)，其為灰白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.84(d,J=6.9Hz,3H),1.00(d,J=6.9Hz,3H),1.42(d,J=6.9Hz,3H),1.48(s,6H),1.65-1.76(m,2H),1.88-1.98(m,1H),2.06-2.14(m,1H),2.19-2.29(m,1H),2.73-2.83(m,1H),3.45-3.56(m,1H),3.73(s,3H),3.95(d,J=3.1Hz,1H),3.99(d,J=11.6Hz,1H),4.42-4.52(m,1H),4.69-4.76(m,2H),5.41-5.51(m,1H),6.61-6.66(m,1H),6.74(d,J=16.3Hz,1H),7.24-7.31(m,1H),7.62-7.69(m,1H),7.71-7.78(m,1H),7.95-8.10(m,2H)。LCMS(m/z)568.3[M+H],Tr=2.10分鐘。
化合物37e. (E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-甲基]-喹啉- 7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸
(E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(95mg,0.167mmol)和NaOH(1M,1.34mL,1.34mmol)在1,4-二(8mL)中的受攪拌混合物迴流受熱達70分鐘及接著使其冷卻。反應混合物用鹽酸(2M)酸化至pH 4和被蒸發。殘留物藉由逆相製備級HPLC使用1：19至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(43mg,47%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.82(d,J=6.8Hz,3H),0.93-1.00(m,3H),1.38(d,J=8.2Hz,3H),1.49(s,6H),1.58-1.76(m,2H),1.81-1.94(m,1H),1.99-2.12(m,1H),2.16-2.25(m,1H),2.67-2.79(m,1H),3.41-3.51(m,1H),3.92-4.00(m,1H),4.01-4.08(d,J=11.6Hz,1H),4.40-4.54(m,1H),4.74(d,J=4.5Hz,2H),5.41-5.52(m,1H),6.63-6.76(m,2H),7.26-7.32(m,1H),7.33-7.39(m,1H),7.55-7.64(m,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.04-8.14(m,2H)。LCMS(m/z)554.2[M+H],Tr=1.77分鐘。
化合物37.
於氮下和50℃之2-甲基-6-硝基苯甲酸(134mg,0.388mmol)、4-(二甲基胺基)吡啶(71mg,0.583mmol)和粉末狀的4Å分子篩(~1g)在1,2-二氯乙烷(26mL)的受攪拌漿料中經由注射泵添加(E)-4-{2-[({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-甲基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸(43mg,0.078mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(3mL)，歷經4小時。含有有機酸之燒瓶用另外的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)清洗，且將其添加至反應混合物，歷經10分鐘。添加結束之後，反應混合物在50℃攪拌達3小時且接著使其冷卻。混合物透過矽藻土過濾，且濾液依序用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液及飽和鹽水清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由逆相製備級HPLC使用1：4至4：1之經0.1%甲酸修飾之乙腈/水的梯度溶液予以純化，且產物用醚研磨以提供標題化合物(6.4mg,15%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.02(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.9Hz,3H),1.46(s,3H),1.48(d,J=7.3Hz,3H),1.54(s,3H),1.55-1.79(m,2H),1.94-2.04(m,1H),2.16-2.30(m,1H),2.30-2.40(m,1H),2.71-2.83(m,1H),3.53-3.60(m,1H),4.42-4.51(m,1H),4.67,4.75(ABq, J AB =18.4Hz,2H),5.20(d,J=8.9Hz,2H),5.89(q,J=7,2,1H),6.44(d,J=16.2Hz,1H),6.69(d,J=16.2Hz,1H),7.40(d,J=8.5Hz,1H),7.56(d,J=8.5,1.3Hz,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),7.92(s,1H),8.23(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)536.2[M+H],Tr=2.47分鐘。
實施例38. 化合物38.
化合物38a (R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺酸[1-(7-溴-喹啉-2-基)-(E)-亞乙基]-醯胺
於1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙酮18a(1.42g,5.68mmol)的THF溶液(28mL)中依序添加乙氧化鈦(IV)(2.6g,2.35mL,11.4mmol，技術級)和(R)-(+)-2-甲基-丙烷sulfinimide(825mg,6.82mmol)。反應混合物在60℃和氮下攪拌達6小時且使其冷卻。依序添加鹽水和乙酸乙酯，且懸浮液透過矽藻土過濾，及過濾墊用乙酸乙酯清洗。乙酸乙酯層被分離、用硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉 由矽膠層析術使用9：1至3：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(448mg,22%)，其為橙色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.38(s,9H),2.99(s,3H),7.71(m,2H),8.16(d,J=8.6Hz,1H),8.24(d,J=8.6Hz,1H),8.37(s,1H)。LCMS(m/z)352.9/354.9[M+H],Tr 3.14分鐘。
化合物38b (R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
(1S,2R)-(-)-順式-1-胺基-2-二氫茚醇(19mg,0.13mmol)、[Ru(對異丙基甲苯基)Cl2]2(39mg,0.064mmol)和粉末狀的4Å分子篩(0.7g)的混合物被懸浮於無水的2-丙醇(3mL)和在氮下攪拌。懸浮液在90℃受熱達30分鐘。反應混合物被冷卻至40℃，及依序添加(R)-2-甲基-丙烷-2-亞磺酸[1-(7-溴-喹啉-2-基)-(E)-亞乙基]-醯胺(448mg,1.27mmol)的2-丙醇溶液(9mL)和第三丁氧化鉀(36mg,0.32mmol)的2-丙醇(3mL)溶液。反應混合物在40℃攪拌達2小時及接著使其冷卻。混合物直接倒至矽膠匣及用乙酸乙酯沖提。濃縮之後，殘留物進一步藉由矽膠層析術使 用1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(287mg,64%)，其為棕色膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.33(s,9H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),4.80(m,1H),5.42(br d,J=4.2Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.2Hz,1H),7.68(d,J=8.7Hz,1H),8.12(d,J=8.7Hz,1H),8.25(s,1H)。LCMS(m/z)354.9/356.8[M+H],Tr 2.49分鐘。
化合物38c. 2-甲基-丙烷-2-亞磺酸(R)-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-醯胺
2-甲基-丙烷-2-亞磺酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(100mg,0.28mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)的冰(-20℃)溶液用雙(三甲基矽基)醯胺鋰(0.28mL,0.28mmol,1M的己烷溶液)處理。在此溫度攪拌達1小時之後，添加碘甲烷(0.035mL,0.56mmol)，且溫度上升至室溫。在室溫攪拌達1小時之後，反應藉由添加水(10mL)予以驟冷。混合物用二乙基醚萃取(3×20mL)。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用10g Biotage匣以1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(149mg,62%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.25(s,9H), 1.74(d,J=6.9Hz,3H),2.53(s,3H),4.81(q,J=6.9Hz,1H),7.55-7.70(m,3H),8.11(d,J=8.5Hz,1H),8.27(s,1H)。LCMS(m/z)369.0,371.0[M+H],Tr=2.91分鐘。
化合物38d. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-醯胺
2-甲基-丙烷-2-亞磺酸(R)-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-醯胺(450mg,1.22mmol)的甲醇溶液(10mL)用鹽酸的1,4-二溶液(4M,5mL)處理。在室溫攪拌達2小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留的溶劑與甲苯共沸(3×10mL)以得到粗製[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-胺鹽酸鹽。
鋅粉(1.30g,20.32mmol)添加至(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(400mg,0.92mmol)的四氫呋喃溶液(20mL)中。此懸浮液用乙酸銨(1.10g,13.9mmol)的水溶液(7mL)處理。在室溫攪拌達16小時之後，濾掉鋅殘留物，且揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在乙酸乙酯和飽和硫酸氫鉀溶液之間，水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，有機層被 結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留的乙酸與甲苯共沸(3×10mL)以得到粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸，其與粗製[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-胺鹽酸鹽在無水的乙腈(15mL)和N,N-二異丙基乙基胺(0.801mL,4.60mmol)中混合。此溶液接著用2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(464mg,1.22mmol)處理。在室溫攪拌達2小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留物溶於乙酸乙酯且隨後用飽和氯化銨溶液和碳酸氫鈉溶液清洗。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至0：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(318mg,58%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.85(d,J=6.9Hz,3H),1.00(d,J=6.9Hz,3H),1.33(d,J=6.9Hz,3H),1.69(d,J=6.9Hz,3H),1.72-2.15(m,6H),2.98(s,3H),2.85-2.95(m,1H),3.80-3.90(m,1H),4.30-4.40(m,1H),5.25-5.35(m,1H),5.95-6.10(m,1H),7.45-7.78(m,1H),7.65-7.72(m,1H),7.80-7.90(m,1H),8.18-8-38(m,2H)。LCMS(m/z)548.1,550.1[M+H],Tr=2.60分鐘。
化合物38.
化合物38以與化合物36相同方式予以製備，使用(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-醯胺代替(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(123mg,0.23mmol)、(R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸，4%產率。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.00(d,J=6.7Hz,3H),1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.52-1.59(m,6H),1.73(d,J=7.4Hz,3H),1.76-1.88(m,2H),1.89-1.99(m,2H),2.09-2.21(m,1H),2.71-2.84(m,1H),3.29(s,3H),3.40(s,3H),3.44(d,J=8.7Hz,1H),3.79(d,J=8.9Hz,1H),4.13-4.22(m,1H),4.39-4.47(m,1H),5.05(d,J=9.1Hz,1H),5.83-5.97(m,2H),6.38(ABq,△δAB=0.24,J AB=16.5Hz,2H),7.45(d,J=8.5Hz,1H),7.64-7.73(m,2H),7.79(d,J=8.5Hz,1H),8.19(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)594.2[M+H],Tr=2.48分鐘。
實施例39及40，化合物39及40
化合物39a. [(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯
於0℃和氮氛圍下之(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺鹽酸鹽(得自ASIBA Pharmatech Inc.)(3.5g,12.2mmol)的無水二氯甲烷溶液添加三乙基胺(5.1mL,36.5mmol)、4-二甲基胺基吡啶(297mg,2.4mmol)和二碳酸二-第三丁基酯(4.0g,18.3mmol)。反應被回暖至室溫和攪拌達2小時。反應被冷卻至0℃及用鹽酸(1M)驟冷。有機層被分離、用鹽水清洗、透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。產物藉由矽膠層析術使用6：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(3g,70%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.49(s,9H),1.55(d,J=6.9Hz,3H),4.93-5.10(m,1H),6.01-6.20(m,1H),7.38(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.69(d,J=8.7Hz,1H),8.11(d,J=8.5Hz,1H),8.29(s,1H)。LCMS(m/z)353.0[M+H],Tr=3.02分鐘。
化合物39b. (E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
於室溫之[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(1g,2.86mmol)在環戊基甲基醚(14mL)和水(7mL)溶液中添加(E)-2,2-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-[1,3,2]二氧硼-2-基)-丁-3-烯酸甲基酯(840mg,3.43mmol)、磷酸三鉀(1.8g,8.57mmol)和氯化雙[(二環己基)(4-二甲基胺基苯基)膦]鈀(II)(116mg,0.14mmol)。反應受熱至80℃達2小時。反應被冷卻、用乙酸乙酯稀釋，且用鹽水清洗(2 x)。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。產物藉由矽膠層析術使用2：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(1.1g,96%)，其為黏稠油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.43-1.52(m,15H),1.56(d,J=6.7Hz,3H),3.75(s,3H),4.92-5.09(m,1H),6.16-6.32(m,1H),6.64(s,2H),7.30(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.02(s,1H),8.08(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)399.3[M+H],Tr=2.75分鐘。
化合物39c. (E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸
於(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(1.1g,2.76mmol)在四氫呋喃溶液(24mL)和水(5mL)溶液中添加氫氧化鋰單水合物(580mg,13.8mmol)。反應受熱至40℃達20小時。反應被冷卻至室溫及用鹽酸水溶液(2M)酸化至pH 5。混合物被蒸發至乾，及添加二氯甲烷及乙腈。此懸浮液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液在真空中濃縮以提供標題化合物(800mg,76%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.46(s,9H),1.51(s,6H),1.56(d,J=6.7Hz,3H),4.91-5.14(m,1H),6.35-6.52(m,1H),6.66,6.72(ABq,J=16.2Hz,2H),7.31(d,J=8.5Hz,1H),7.57(d,J=8.0Hz,1H),7.70(d,J=8.3Hz,1H),7.99-8.17(m,2H)。LCMS(m/z)385.3[M+H],Tr=2.21分鐘。
化合物39d：(S)-1-(2-第三丁氧基羰基胺基-3-甲氧基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
化合物39d(始自如Angew.Chem.Intl.Ed.English,1999,38,2443所述製備之雙-N-Boc TCE酯)以與中間體1d相同方式予以製備，使用N-α-Boc-O-甲基 絲胺酸(1g,4.56mmol)代替L-N-Boc-丙胺酸以提供標題化合物，其為透明黏稠油狀物(1.5g,71%)和為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)462.7[M+H],Tr=2.71分鐘。
化合物39e. (S)-1-[2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
於室溫及氮氛圍下之(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-甲氧基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(1.0g,2.16mmol)的無水二氯甲烷溶液(7mL)中添加三氟乙酸(1.7mL)。反應在室溫攪拌達1.5小時且在真空中濃縮。得到的殘留物與甲苯共蒸發(3 x)以產生黏稠淺棕色油狀物。其溶於無水的乙腈(22mL)中及被冷卻至0℃，之後添加(S)-2-羥基-3-甲基-丁酸(255mg,2.2mmol)、羥基苯並三唑單水合物(497mg,3.3mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(623mg,3.3mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(1.9mL,10.8mmol)。反應混合物被回暖至周圍溫度和攪拌達72小時。反應用乙酸乙酯稀釋和用鹽酸(1M)、 飽和碳酸氫鈉和鹽水清洗。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用3：2之異己烷/丙酮予以純化以得到標題化合物(750mg,75%共2步驟)，其為透明黏稠油狀物及為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)462.0[M+H],Tr=2.24分鐘。
化合物39f. (S)-1-[2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯
於室溫及氮氛圍下之(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸(300mg,0.78mmol)的無水二氯甲烷溶液(5mL)中依序添加N,N-二異丙基乙基胺(0.28mL,1.56mmol)、4-二甲基胺基吡啶(200mg,1.64mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(323mg,0.94mmol)及(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(433mg,0.94mmol)的無水二氯甲烷溶液(2.5mL)。反應攪拌達2小時，之後，其用乙酸乙酯稀釋和用水和鹽水清洗。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠 層析術使用1：2之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(211mg,33%)，其為透明黏稠油狀物及為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)828.3[M+H],Tr=3.48分鐘。
化合物39及40
於0℃之(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯(200mg,0.24mmol)的無水四氫呋喃溶液(3mL)中添加0.4M氫氧化鈉水溶液(0.7mL,0.29mmol)。反應在0℃攪拌達1小時，之後用鹽酸(2M)酸化至pH 5，且在真空中濃縮。得到的殘留物被分配在二氯甲烷和水之間，且有機層被分離、透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物溶於無水的1,4-二(1mL)中且在室溫添加4M鹽酸的二溶液(0.3mL,1.2mmol)。反應被攪拌達1.5小時，在真空中濃縮，及得到的固體物用二乙基醚研磨以提供淺黃色固體物。該固體物溶於無水的N,N-二甲基甲醯胺(3mL)和N,N-二異丙基乙基胺(0.21mL,1.2mmol)中，且在0℃及氮氛圍下將此溶液添加至 2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(137mg,0.4mmol)在無水二氯甲烷(80mL)的預攪拌溶液中。在添加之後，反應在室溫攪拌達2小時，之後在真空中濃縮。得到的殘留物溶於乙酸乙酯和用鹽酸(0.5M)、飽和碳酸氫鈉和鹽水清洗。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。殘留物藉由逆相製備級HPLC予以純化以提供兩種非鏡像異構物，其為白色固體物。
化合物39(第二沖提)非鏡像異構物1(7mg,5%)。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.09(d,J=6.7Hz,3H),1.48(s,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.59(s,3H),1.51-1.65(m,1H),1.69-2.11(m,4H),2.19-2.37(m,1H),2.72-2.86(m,1H),2.91(s,3H),3.40-3.58(m,3H),3.80-3.90(m,1H),4.33-4.45(m,1H),5.11-5.22(m,3H),5.57-5.63(m,1H),6.54,6.71(ABq,J=15.9Hz,2H),7.44(d,J=8.5Hz,1H),7.54(d,J=8.5Hz,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),7.96(s,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.58分鐘。
化合物40(第一沖提)非鏡像異構物2。(3mg,2%)；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.00(d,J=6.7Hz,3H),1.05(d,J=6.7Hz,3H),1.43(s,3H),1.54(s,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.53-1.75(m,1H),1.91-2.02(m,1H),2.12-2.24(m,1H),2.25-2.36(m,1H),2.64-2.76(m,1H),3.46(s,3H),3.59-3.70(m,1H),3.87(d,J=6.0Hz,2H),4.41-4.50(m,1H),5.12(q,J=6.7Hz,1H),5.18(d,J=11.6Hz,1H),5.27(d, J=8.5Hz,1H),6.09(t,J=6.3Hz,1H),6.41,6.61(ABq,J=16.3Hz,2H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),7.58(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),7.83(d,J=8.5Hz,1H),8.03(s,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.62分鐘。
化合物41，實施例41.
化合物41a. [(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-胺甲酸第三丁基酯
於-20℃及氮氛圍下之[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(500mg,1.4mmmol)的無水N,N-二甲基甲醯胺溶液(5mL)中逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鋰(1.0M THF溶液，1.7mL,1.71mmol)，歷經10分鐘。添加之後，反應在-20℃攪拌達45分鐘，及接著添加碘甲烷(0.18mL,2.85mmol)。反應被回暖至室溫和攪拌達1小時，之後用飽和氯化銨水溶液驟冷和用二乙基醚萃取(2 x)。結合的有機液用5%氯化鋰水溶液清洗、透過疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。產物藉由矽膠層析術使用 6：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(500mg,96%)，其為黏稠油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.50(s,9H),1.68(d,J=6.9Hz,3H),2.72(br s,3H),5.34-5.92(m,1H),7.41(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.8Hz,1H),7.68(d,J=8.7Hz,1H),8.08(d,J=8.7Hz,1H),8.29(d,J=1.6Hz,1H)。LCMS(m/z)367.0[M+H],Tr=3.61分鐘。
化合物41b. (E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯
化合物41b以與化合物39b相同方式予以製備，使用[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-胺甲酸第三丁基酯代替[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯，80%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.50(s,9H),1.56(s,6H),1.69(d,J=7.1Hz,3H),2.72(br s,3H),3.74(s,3H),5.28-6.01(m,1H),6.64(s,2H),7.33(d,J=8.3Hz,1H),7.61(dd,J=8.7,1.6Hz,1H),7.74(d,J=8.3Hz,1H),8.01-8.08(m,2H)。LCMS(m/z)413.2[M+H],Tr=3.42分鐘。
化合物41c. (E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸
化合物41c以與化合物39c相同方式予以製備，使用(E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯代替(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯，99%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.49(s,9H),1.52(s,6H),1.69(d,J=7.1Hz,3H),2.73(br s,3H),5.29-5.84(m,1H),6.66,6.70(ABq,J=16.3Hz,2H),7.34(d,J=8.9Hz,1H),7.59-7.66(m,1H),7.74(d,J=8.5Hz,1H),8.00-8.09(m,2H)。LCMS(m/z)399.1[M+H],Tr=2.75分鐘。
化合物41d. (S)-1-[(S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-(第三丁基-二苯基-矽烷基氧基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
於0℃及氮氛圍下之(S)-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-(2,2,2-三氯-乙基)酯(依據Angew.Chem. Int.Ed.English 1999,38,2443.所述之程序製備)(5.0g,10.8mmol)的無水二氯甲烷溶液(33mL)中添加三氟乙酸(33mL,432mmol)。溶液被回暖至室溫和攪拌達16小時。反應在真空下濃縮，及殘留物與甲苯共蒸發(3 x)。得到的棕色黏稠油狀物溶於無水的乙腈(5mL)和添加至已事先在0℃攪拌達20分鐘之(S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-(第三丁基-二苯基-矽烷基氧基)-丙酸(2.39g,5.4mmol，如PCT Int.Appl.2006,WO 2006004880 A2中所製備)、N,N-二異丙基乙基胺(3.76mL,21.6mmol)和O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸鹽(2.05g,5.4mmol)的無水的乙腈溶液(25mL)中。反應被回暖至室溫和攪拌達16小時，之後在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物(1.8g,49%)，其為透明黏稠油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.08(s,9H),1.46(s,9H),1.53-1.67(m,1H),1.80-2.01(m,2H),2.82-2.96(m,1H),3.19-3.32(m,1H),3.62(d,J=10.9Hz,1H),3.80-3.97(m,3H),4.23-4.34(m,1H),4.61(d,J=12.0Hz,1H),4.90(d,J=12.0Hz,1H),5.18-5.27(m,1H),5.51-5.63(m,1H),7.35-7.49(m,6H),7.58-7.70(m,4H)。LCMS(m/z)686.2[M+H],Tr=4.32分鐘。
化合物41e. (S)-1-[(S)-3-(第三丁基-二苯基-矽烷基氧基)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
化合物41e以與化合物39e相同方式予以製備，使用(S)-1-[(S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-(第三丁基-二苯基-矽烷基氧基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯代替(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-3-甲氧基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯，50%產率.1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.90(d,J=6.7Hz,3H),1.07-1.09(m,12H),1.42-1.71(m,2H),1.80-1.91(m,1H),1.93-2.02(m,1H),2.07-2.15(m,1H),2.72(d,J=5.9Hz,1H),2.86-3.02(m,1H),3.17-3.28(m,1H),3.60(d,J=10.5Hz,1H),3.90-3.99(m,3H),4,18-4.29(m,1H),4.62,4.91(ABq,J=11.9Hz,2H),5.42-5.50(m,1H),7.35-7.51(m,7H)7.58-7.71(m,4H)。LCMS(m/z)686.2[M+H],Tr=3.93分鐘。
化合物41f
化合物41f以與化合物39f相同方式予以製備，使用(E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸和(S)-1-[(S)-3-(第三丁基-二苯基-矽烷基氧基)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯代替(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯酸和(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯，32%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.98-1.05(m,6H),1.07(s,9H),1.50(s,9H),1.52-1.60(m,2H),1.57(s,3H),1.61(s,3H),1.68(d,J=6.9Hz,3H),1.72-1.93(m,2H),2.31-2.46(m,1H),2.63-3.01(m,5H),3.47(d,J=11.2Hz,1H),3.87(dd,J=10.3,2.7Hz,1H),4.04(dd,J=10.3,3.4Hz,1H),4.11-4.23(m,1H),4.60,4.88(ABq,J=12.0Hz,2H),5.21(d,J=3.6Hz,1H),5.38-5.44(m,1H),6.72,6.76(ABq,J=16.3Hz,2H),7.31-7.49(m,8H),7.56-7.62(m,2H),7.64-7.71(m,4H),7.99-8.06(m,2H)。LCMS(m/z)1066.5[M+H],Tr=4.94分鐘。
化合物41g
化合物41g以與化合物39相同方式予以製備，使用41f代替(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-二甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-3-甲氧基-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯，77%產率。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.95-1.04(m,6H),1.46(s,3H),1.53(s,3H),1.54-1.61(m,12H),1.65-2.01(m,4H),2.19-2.37(m,1H),2.61(s,3H),2.65-2.78(m,1H),3.57-3.76(m,2H),3.79(d,J=12.0Hz,1H),4.03-4.10(m,1H),4.52-4.63(m,1H),4.89(d,J=8.5Hz,1H),5.93(q,J=7.1Hz,1H),5.98-6.07(m,1H),6.28,6.47(ABq,J=16.4Hz,2H),6.56-6.63(m,1H),7.21-7.54(m,7H),7.61-7.75(m,7H),8.02(d,J=8.3Hz,1H)。LCMS(m/z)818.4[M+H],Tr=4.22分鐘。
化合物41
化合物41g(190mg,0.23mmol)的無水四氫呋喃溶液(1mL)在室溫及氮氛圍下添加氟化四丁基銨(1M的THF溶液，1.2mL,1.2mmol)。反應被攪拌達45分鐘，之後用乙酸乙酯稀釋和用飽和氯化銨水溶液清洗。有機層用疏水性玻璃料乾燥且在真空中濃縮。產物藉由矽膠層析術使用 1：1之異己烷/丙酮予以純化以得到標題化合物(35mg,27%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.98(d,J=6.7Hz,3H),1.01(d,J=6.5Hz,3H),1.42(s,3H),1.52(s,3H),1.72(d,J=7.4Hz,3H),1.72-1.97(m,4H),2.09-2.25(m,1H),2.71-2.86(m,1H),3.30(s,3H),3.96(d,J=6.3Hz,2H),4.18-4.30(m,1H),4.42-4.53(m,2H),5.08(d,J=8.7Hz,1H),5.88(q,J=7.4Hz,1H),6.06(t,J=6.0Hz,1H),6.40,6.49(ABq,J=16.5Hz,2H),7.44(d,J=8.7Hz,1H),7.64(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.78(d,J=8.5Hz,1H),7.89(s,1H),8.19(d,J=8.7Hz,1H)。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.14分鐘。
實施例42. 化合物42.
化合物42a. 4-側氧基-1-乙烯基-環己烷甲酸
市場上購得之4-側氧基-1-乙烯基-環己烷甲酸乙基酯(Small Molecules Inc.提供)(1.20g,6.11mmol)的1,4-二溶液(20mL)用氫氧化鋰單水合物(734mg,30.6mmol)的水溶液(10mL)處理。在50℃攪拌達2小時之後，揮發 物在真空中予以移除。殘留物被分配在水和二乙基醚之間。水層藉由添加飽和硫酸氫鉀溶液而酸化至pH 1和用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機層用無水硫酸鎂乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(1.00g,97%)，其為透明膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.92-2.08(m,2H),2.36-2.59(m,6H),5.34(d,J=17.5Hz,1H),5.35(d,J=10.5Hz,1H),5.97(dd,J=17.5,10.5Hz,1H),11.30(br s,1H)。
化合物42b. 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-側氧基-環己烷甲酸
[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-甲基-胺甲酸第三丁基酯(200mg,0.55mmol)、4-側氧基-1-乙烯基-環己烷甲酸(138mg,0.82mmol)、乙酸鈀(II)(25mg,0.11mmol)、三-(鄰-甲苯基)膦(50mg,0.16mmol)的無水1,4-二溶液(2mL)用三乙基胺(267μL,1.91mmol)處理。在100℃和在微波輻射下攪拌達30分鐘之後，反應被冷卻至室溫，且揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在乙酸乙酯和5%檸檬酸溶液之間，水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至1：1之異己烷/乙酸乙 酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(235mg,94%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.48(s,9H),1.68(d,J=7.1Hz,3H),2.07-2.22(m,2H),2.44-2.70(m,6H),2.75(br s,3H),5.61(br s,1H),6.68(ABq,△δAB=0.31,J AB=16.3Hz,2H),7.36(d,J=8.5Hz,1H),7.60(d,J=8.5Hz,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),8.05-8.12(m,2H)。LCMS(m/z)453.1[M+H],Tr=2.48分鐘。
化合物42c. 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-順式-羥基-環己烷甲酸
1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-側氧基-環己烷甲酸(235mg,0.52mmol)在無水四氫呋喃溶液(15mL)中的冰(-50℃)溶液用三-第二丁基硼氫化鈉(1.56mL,1.56mmol,1M的四氫呋喃溶液)處理。溫度上升至-30℃。攪拌達20分鐘之後，反應藉由添加飽和氯化銨溶液(10mL)予以驟冷。溫度上升至室溫，pH藉由添加檸檬酸而調整至pH 2，接著用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(185mg,78%)，其為白色固體物。 1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.48(s,9H),1.52-1.62(m,4H),1.67(d,J=6.9Hz,3H),1.95-2.05(m,2H),2.42-2.55(m,2H),2.73(br s,3H),3.73(br s,1H),5.57(br s,1H),6.58(ABq,△δAB=0.29,J AB=16.3Hz,2H),7.34(d,J=8.5Hz,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),7.72(d,J=8.5Hz,1H),8.01-8.10(m,2H)。LCMS(m/z)455.1[M+H],Tr=2.31分鐘。
化合物42d. 1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-順式-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-環己烷甲酸
1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-順式-羥基-環己烷甲酸(185mg,0.41mmol)和咪唑(138mg,2.03mmol)的無水N,N-二甲基甲醯胺溶液(5mL)用氯化第三丁基二甲基矽基(153mg,1.02mmol)處理。在攪拌達16小時之後，反應藉由添加碳酸鉀溶液(10mL)予以驟冷。在攪拌達3小時之後，pH藉由添加硫酸氫鉀溶液而調整至pH 3，接著用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至7：3之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(142mg,61%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.08(s,6H),0.91(s,9H),1.49(s,9H),1.53-1.64(m,4H),1.67(d,J=6.9Hz,3H),1.80-1.92(m,2H),2.38-2.51(m,2H),2.72(br s,3H),3.70(br s,1H),5.59(br s,1H),6.58(ABq,△δAB=0.30,J AB=16.3Hz,2H),7.33(d,J=8.5Hz,1H),7.58(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.71(d,J=8.5Hz,1H),8.00-8.06(m,2H)。LCMS(m/z)569.2[M+H],Tr=4.37分鐘。
化合物42e. (S)-1-((S)-2-{(S)-2-[1-((E)-2-{7-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-2-基}-乙烯基)-4-順式-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-環己烷羰基氧基]-3-甲基-丁醯胺基}-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
1-((E)-2-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-順式-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-環己烷甲酸(142mg,0.25mmol)、(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(108mg,0.25mmol)、三乙基胺(0.087mL,0.62mmol)和4-二甲基胺基吡啶(15mg,0.12mmol)的無水 二氯甲烷溶液(10mL)用2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(146mg,0.42mmol)處理。在攪拌達60小時之後，反應藉由添加碳酸氫鈉溶液(10mL)予以驟冷，水層用二氯甲烷萃取(2 x)，有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(105mg,43%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.10(s,6H),0.93(s,9H),1.01(d,J=6.9Hz,3H),1.02(d,J=6.9Hz,3H),1.27(d,J=6.9Hz,3H),1.40-1.50(m,9H),1.68(d,J=6.9Hz,3H),1.72-1.81(m,4H),1.82-1.94(m,4H),1.95-2.10(m,2H),2.25-2.32(m,2H),2.37-2.44(m,1H),2.46-2.57(m,2H),2.80(br s,3H),3.52-3.70(m,1H),3.74-3.85(m,2H),4.73-4.80(m,1H),5.01(d,J=4.7Hz,1H),5.30-5.45(m,2H),6.70(ABq,△δAB=0.28,J AB=16.3Hz,2H),7.37(d,J=8.5Hz,1H),7.73-7.85(m,2H),7.97(s,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H)。
化合物42.
(S)-1-((S)-2-{(S)-2-[1-((E)-2-{7-[(R)-1-(第三丁氧基 羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-2-基}-乙烯基)-4-順式-(第三丁基-二甲基-矽烷基氧基)-環己烷羰基氧基]-3-甲基-丁醯胺基}-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(105mg,0.11mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)用碳酸鉀(221mg,1.60mmol)的水溶液(5mL)處理。在室溫攪拌達3小時之後，pH藉由添加稀釋的鹽酸而調整至pH 3，接著用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物溶於二氯甲烷(10mL)中及用鹽酸的1,4-二溶液(4M,5mL)處理。在室溫攪拌達1小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留的溶劑與甲苯共沸(3×15mL)以得到粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(4-順式-羥基-1-{(E)-2-[7-((R)-1-甲基胺基-乙基)-喹啉-2-基]-乙烯基}-環己烷羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺溶液(4mL)和N,N-二異丙基乙基胺(0.093mL,0.53mmol)且在在室溫和氮下經由注射泵添加至2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(61mg,0.16mmol)的二氯甲烷(50mL)受攪拌溶液中，歷經1小時。反應藉由添加碳酸氫鈉溶液(10mL)予以驟冷，水層用二氯甲烷萃取(2 x)，有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由製備級逆相HPLC予以純化以提供標題化合物(13mg,19%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.02(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.27-1.48(m,3H),1.54(d,J=7.1Hz,3H),1.72(d,J=7.6Hz,3H),1.78-2.05(m,5H),2.11-2.25(m, 1H),2.28-2.40(m,1H),2.50-2.62(m,1H),2.71-2.84(m,1H),3.27(s,3H),3.52-3.80(m,3H),4.11-4.24(m,1H),4.38-4.51(m,1H),5.16(d,J=9.1Hz,1H),5.86-5.98(m,2H),6.36(ABq,△δAB=0.17,J AB=16.5Hz,2H),7.44(d,J=8.7Hz,1H),7.64-7.72(m,2H),7.78(d,J=8.5Hz,1H),8.18(d,J=8.7Hz,1H)。LCMS(m/z)620.5[M+H],Tr=2.09分鐘。
實施例43及44，化合物43及44
化合物43a. [1,4]二-2-甲酸甲基酯
[1,4]二-2-甲酸(Enamine Ltd.提供)(2.90g,22.0mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(15mL)在室溫攪拌。添加碳酸鉀(6.07g,44.0mmol)，且懸浮液在5℃攪拌。逐滴添加碘甲烷(6.25g,2.75mL,44.0mmol)，及反應混合物在室溫攪拌達24小時。添加水和鹽水，及混合物用二乙基醚萃取。水層用氯化鈉飽和，及混合物用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機萃取液被結合，用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至1：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(3.06g, 95%)，其為揮發性淡黃色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.68-3.78(m,4H),3.81(s,3H),3.97-4.05(m,2H),4.29(dd,J=8.5,3.1Hz,1H)。LCMS(m/z)169.2[M+Na],Tr=0.69分鐘。
化合物43b. 2-(1-羥基-乙基)-[1,4]二-2-甲酸甲基酯
N,N-二異丙基胺(1.67g,2.3mL,16.5mmol)的無水四氫呋喃溶液(10mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加正丁基鋰(6.6mL,16.5mmol,2.5M的己烷溶液)，及反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加[1,4]二-2-甲酸甲基酯(1.61g,11mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。一次性添加乙醛(1.45g,1.8mL,33mmol)。移除冷浴，及反應混合物在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被冷卻至5℃，及添加冰-冷1M鹽酸以將反應混合物酸化至pH 2。添加氯化鈉以使溶液飽和，及混合物用二乙基醚萃取(4 x)。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至0：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(1.49g,71%)，其為油狀物及為非鏡像異構物的3：1混合物。LCMS(m/z)213.2[M+H],Tr=0.62分鐘。
化合物43c. 2-[1-(甲苯-4-磺醯基氧基)-乙基]-[1,4]二-2-甲酸甲基酯
2-(1-羥基-乙基)-[1,4]二-2-甲酸甲基酯(1.49g,7.8mmol)的吡啶溶液(8mL)在室溫攪拌。添加4-甲苯磺醯氯(1.50g,7.8mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。大部分的吡啶被蒸發，添加1M鹽酸以使混合物酸化至pH 2，及混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至0：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(1.70g,63%)，其為黃色膠狀物及為非鏡像異構物的3：1混合物。LCMS(m/z)367.0[M+Na],Tr=2.44分鐘。
化合物43d. 2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸甲基酯
2-[1-(甲苯-4-磺醯基氧基)-乙基]-[1,4]二-2-甲酸甲基酯(1.68g,4.9mmol)的1,8-二氮雙環十一碳-7-烯溶液(3mL)於密封管內在130℃受熱達2小時。反應混合物被冷卻至室溫，及添加2M鹽酸和二乙基醚。混合物用二 乙基醚萃取，及有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(308mg,36%)，其為揮發性無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.47(d,J=11.6Hz,1H),3.62-3.78(m,2H),3.81-3.86(m,1H),3.84(s,3H),3.99-4.07(m,1H),4.33(d,J=11.6Hz,1H),5.34(dd,J=10.7,1.1Hz,1H),5.52(dd,J=17.4,1.1Hz,1H),5.79(dd,J=17.4,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)195.1[M+Na],Tr=1.23分鐘。
化合物43e. 2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-甲酸甲基酯
[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(316mg,0.9mmol),2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸甲基酯(154mg,0.9mmol)、乙酸鈀(II)(41mg,0.18mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(54mg,0.18mmol)和N,N-二環己基甲基胺(351mg,0.38mL,1.8mmol)的乙腈溶液(8mL)在微波反應器內在120℃受熱達30分鐘。過濾反應混合物，且溶劑被蒸發。殘留物溶於二氯甲烷；添加鹽水和冰-冷1M鹽酸以使混合物酸化至pH 2。有機層被分離和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉 由矽膠層析術使用7：3至6：4之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(157mg,40%)，其為黃色膠狀物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)443.1[M+H],Tr=2.34分鐘。
化合物43f. 2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-甲酸
2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-甲酸甲基酯(157mg,0.35mmol)的四氫呋喃溶液(6mL)在5℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(30mg,0.71mmol)的水溶液(1.5mL)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。大部分的有機溶劑被蒸發。溶液用2M鹽酸酸化至pH 2，且混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(149mg,100%)，其為淡黃色泡沫物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)429.1[M+H],Tr=1.87分鐘。
化合物43g. (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸 2,2,2-三氯-乙基酯
2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-甲酸(50mg,0.1mmol)、[(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(44mg,0.1mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(32mg,0.043mL,0.25mmol)、4-二甲基胺基吡啶(6mg,0.05mmol)和2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(58mg,0.17mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在室溫和氮下攪拌達18小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，及溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至1：3之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(47mg,55%)，其為白色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)842.2/844.0[M+H],Tr=3.25及3.31分鐘。
化合物43及44
(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(69mg,0.081mmol)的四氫呋喃溶液(4mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鈉的冰-冷水溶液(0.1M,0.82mL,0.082mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達20分鐘。添加冷1M鹽酸以使混合物酸化至pH 2，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，且殘留物用二乙基醚研磨(2 x)，而得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(0.081mmol)，其為黃色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)712.3[M+H],Tr=2.46分鐘。
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(0.081mmol)在4M鹽酸的1,4-二溶液(2mL)中的混合物在室溫攪拌達1小時。溶劑被蒸發，及殘留物與二乙基醚共 蒸發(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.081mmol)，其為灰白色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)612.1[M+H],Tr=1.38分鐘。
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-[1,4]二-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.081mmol)的二氯甲烷溶液懸浮液(75mL)在0℃和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(42mg,0.324mmol)的二氯甲烷溶液(6mL)，且得到的溶液在0℃攪拌。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(62mg,0.162mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達1小時。大部分的溶劑被蒸發，及溶液(~20mL)用冰-冷1M鹽酸和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：4至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供非鏡像異構物的1：1混合物。混合物藉由逆相製備級HPLC以3：7之乙腈/水沖提予以純化以提供兩種不同的非鏡像異構物。
化合物43(第一沖提)非鏡像異構物1：(4.0mg,8%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.12(d,J=6.7Hz,3H),1.56-1.60(m,7H), 1.68-1.73(m,1H),1.95-2.00(m,1H),2.20-2.35(m,2H),2.69-2.78(m,1H),3.55-3.85(m,5H),4.03-4.12(m,1H),4.43-4.48(m,1H),4.57(d,J=11.6Hz,1H),5.12(q,J=6.7Hz,1H),5.24(d,J=10.4Hz,1H),5.39(d,J=8.5Hz,1H),5.83(q,J=7.2Hz,1H),6.29(d,J=16.3Hz,1H),6.97(d,J=16.3Hz,1H),7.49(d,J=8.5Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.86-7.90(m,2H),8.28(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)594.2[M+H],Tr=2.14分鐘。
化合物44(第二沖提)非鏡像異構物2：(4.6mg,10%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.08(d,J=6.5Hz,3H),1.10(d,J=6.5Hz,3H),1.49-1.54(m,1H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.64(d,J=7.1Hz,3H),1.66-1.71(m,1H),1.90-1.96(m,1H),2.20-2.28(m,2H),2.63-2.71(m,1H),3.55-3.93(m,6H),4.40-4.47(m,2H),4.98(d,J=12.0Hz,1H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),5.20(d,J=8.9Hz,1H),5.79(q,J=7.1Hz,1H),6.10(d,J=16.3Hz,1H),6.88(d,J=16.3Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.85-7.88(m,2H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)594.2[M+H],Tr=2.17分鐘。
實施例45及46，化合物45及46
化合物45a. 啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯
啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯(由NeoMPS,Inc.提供)(5.78g,25.0mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(30mL)隨後用碳酸鉀(4.14g,30.0mmol)和碘甲烷(7.10g,3.1mL,50.0mmol)處理。在室溫攪拌達18小時之後，反應混合物用水稀釋，且水層用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合，用水(4 x)和鹽水清洗，接著透過疏水性玻璃料過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：3之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(4.83g,79%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.49(s,9H),3.06-3.15(m,2H),3.56-3.64(m,1H),3.75-3.79(m,1H),3.81(s,3H),4.00-4.14(m,3H)。LCMS(m/z)268.1[M+Na],Tr=1.94分鐘。
化合物45b. 2-(1-羥基-乙基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯
N,N-二異丙基胺(1.3mL,9.092mmol，用氫化鈣乾燥)的無水四氫呋喃冰(-78℃)溶液(10mL)用正丁基鋰的己烷溶液(3.4mL,8.524mmol,2.5M)處理。在-78℃攪拌達30分鐘之後，混合物用啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯(1.394g,5.683mmol)的無水四氫呋喃溶液(10mL)處理。在-78℃攪拌達20分鐘之後，混合物用乙醛(0.96mL,17.05mmol)處理。在室溫攪拌達1小時之後，反應在0℃用鹽酸(1M,40mL)予以驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合、透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至3：2之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(1.476g,90%)，其為黃色油狀物及為非鏡像異構物的2：1混合物。
化合物45c. 2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯
氫化鈉(262mg,6.542mmol,60%於礦物油中)的無水四氫呋喃冰(-78℃)懸浮液(10mL)用2-(1-羥基-乙基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯(1.262g,4.361mmol)的無水四氫呋喃溶液(10mL)處理。淺黃色懸浮液在-78℃攪拌達15分鐘及接著用N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟甲磺醯亞胺)(3.425g,8.722mmol)的無水四氫呋喃溶液(10mL)處理。在室溫攪拌達1.5小時之後，反應用氯化銨的飽和溶液驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(1.384g,75%)，其為淺黃色油狀物及為非鏡像異構物的2：1混合物。
化合物45d. 2-乙烯基-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯
2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯(1.384g,3.284mmol)的二氯甲烷溫(35℃)溶液(40mL)用1,8-二氮雙環並[5.4.0]十一碳-7-烯(2.5mL,16.422mmol)處理。在35℃攪拌達2小時之後， 反應被冷卻至0℃及用鹽酸(1M,50mL)驟冷。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物，其為橙色油狀物，其無需進一步純化即可用於下一步驟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.49(s,9H),3.13-3.29(m,2H),3.60-3.73(m,1H),3.79(s,3H),3.83-3.92(m,2H),4.24(d,J=13.1Hz,1H),5.37(d,J=10.9Hz,1H),5.55(d,J=17.4Hz,1H),5.84(dd,J=17.4,10.9Hz,1H)。
化合物45e. 2-乙烯基-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯
粗製2-乙烯基-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯2-甲基酯(3.284mmol)的四氫呋喃溶液/甲醇/水溶液(50mL,2：2：1)用氫氧化鋰單水合物(413.3mg,9.852mmol)處理。在室溫攪拌達2小時之後，揮發物在真空中予以移除，且殘留物被冷卻至0℃及用鹽酸(1M)驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。結合的有機液透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(761.4mg,90%共2步驟)，其為無色針狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.48(s,9H),3.31-3.42(m,1H),3.45-3.61(m,2H),3.87-3.94(m,2H),4.02(d,J=13.6Hz,1H),5.44(d,J=10.7Hz,1H),5.60(d,J=17.4Hz,1H),5.85(dd,J=17.4,10.7Hz, 1H)。
化合物45f. 2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(95mg,0.178mmol)、2-乙烯基-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯(45.7mg,0.178mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(11mg,0.036mmol)和三乙基胺(0.08mL,0.534mmol)的1,4-二溶液(5mL)藉由通入氮氣冒泡而排氣達5分鐘，接著回暖至50℃及用三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(16.3mg,0.018mmol)處理。在100℃攪拌達50分鐘之後，反應被冷卻至室溫，透過矽藻土墊過濾，其用乙酸乙酯沖洗。揮發物在真空中予以移除以提供粗製標題化合物，其為橙色泡沫物，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)711.3[M+H],Tr=2.14分鐘。
化合物45及46
粗製2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-啉-2,4-二甲酸4-第三丁基酯(0.178mmol)、4-二甲基胺基吡啶(21.7mg,0.178mmol)和三乙基胺(0.08mL,0.534mmol)的乾燥二氯甲烷溶液(150mL)用2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(122.6mg,0.356mmol)處理。在室溫攪拌達1.5小時之後，添加更多的2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(122.6mg,0.356mmol)。在室溫攪拌達16小時之後，添加更多的三乙基胺(0.2mL)和4-二甲基胺基吡啶(217mg,1.780mmol)。在室溫攪拌達4小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在二氯甲烷及碳酸氫鈉的飽和溶液之間。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Isolute匣以1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提，接著藉由逆相製備級HPLC以95：5至0：1之水/乙腈的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物，其為兩種不同的異構物。
化合物45(第二沖提)非鏡像異構物1(1.9mg,1.5%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.06(d,J=6.7Hz,6H),1.47-1.54(m,10H),1.55-1.77(m, 8H),1.90-2.00(m,1H),2.16-2.31(m,2H),2.62-2.74(m,1H),3.04-3.18(m,2H),3.54-3.62(m,1H),3.68-3.80(m,1H),3.83-3.93(m,1H),3.94-4.03(m,1H),4.38-4.47(m,1H),4.57-4.67(m,1H),5.03(d,J=12.0Hz,1H),5.10(q,J=6.7Hz,1H),5.19(d,J=8.7Hz,1H),5.80(q,J=7.3Hz,1H),6.18(d,J=16.3Hz,1H),6.93(d,J=16.3Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),7.90(s,1H),8.27(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)693.3[M+H],Tr=2.68分鐘。
化合物46(第一沖提)非鏡像異構物2(0.8mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.97-1.06(m,6H),1.40(d,J=6.7Hz,3H),1.43-1.58(m,13H),1.65-1.74(m,1H),1.97-2.07(m,1H),2.18-2.37(m,2H),3.42-3.49(m,1H),3.74-4.03(m,4H),5.16(q,J=7.1Hz,1H),5.27-5.33(m,1H),5.35(q,J=6.7Hz,1H),6.58(d,J=16.3Hz,1H),6.78(d,J=7.1Hz,1H),7.20(d,J=16.0Hz,1H),7.44(d,J=8.5Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),7.74-7.81(m,1H),7.99(s,1H),8.06(d,J=7.6Hz,1H),8.13(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)693.5[M+H],Tr=3.39分鐘。
實施例47. 化合物47
化合物47a. (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯醯基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
(E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸甲基酯(193mg,0.47mmol)的1,4-二溶液(10mL)用氫氧化鋰單水合物(112mg,4.7mmol)的水溶液(5mL)處理。在50℃攪拌達1小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留物被分配在水和二乙基醚之間。水層藉由添加鹽酸而被酸化至pH 2，接著用乙酸乙酯萃取(3 x)。有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物溶於二氯甲烷(10mL)和用4-二甲基胺基吡啶(57mg,0.47mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(275mg,0.80mmol)及三乙基胺(0.197mL,1.41mmol)處理。在攪拌達30分鐘之後，添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯- 乙基酯(203mg,0.47mmol)。在攪拌達16小時之後，反應藉由添加碳酸氫鈉溶液(10mL)予以驟冷，水層用二氯甲烷萃取(2 x)，有機液被結合，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Biotage匣以1：0至3：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(260mg,68%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.97-1.05(m,6H),1.29(d,J=6.9Hz,3H),1.44(br s,9H),1.55(s,3H),1.57(s,3H),1.68(d,J=6.9Hz,3H),1.71-2.00(m,4H),2.02-2.30(m,3H),2.80(br s,3H),3.56(br s,1H),3.78-3.83(m,1H),4.75-4.82(m,1H),4.93-5.01(m,2H),5.35-5.45(m,1H),6.65-6.82(m,2H),7.36(d,J=8.5Hz,1H),7.72-7.83(m,2H),7.98(s,1H),8.21(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)814.1[M+H],Tr=3.97分鐘。
化合物47
製備(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-((E)-4-{2-[(R)-1-(第三丁氧基羰基-甲基-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯醯基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(260mg,0.32mmol)的四氫呋喃溶液(30 mL)，及添加碳酸鉀(663mg,4.80mmol)的水溶液(15mL)。反應在室溫攪拌達1.5小時。反應混合物用鹽酸(1M)酸化至pH 3，接著用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。結合的萃取液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物在真空下乾燥達1小時，之後溶於二氯甲烷溶液(30mL)，及用鹽酸的1,4-二溶液(4M,15mL)處理。其在室溫攪拌達1小時，接著被蒸發。殘留的水與甲苯共沸(2×20mL)以產生白色固體物(251mg)。白色固體物溶於無水的N,N-二甲基甲醯胺(10mL)，及添加N,N-二異丙基乙基胺(279μL,1.6mmol)。此溶液接著經由注射泵添加至2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(183mg,0.48mmol)的無水二氯甲烷受攪拌溶液(150mL)中，歷經1小時。反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液(30mL)清洗，透過相分離器過濾和被蒸發。殘留物藉由逆相製備級HPLC予以純化以產生標題產物(54mg,30%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.97(s,3H),0.99(s,3H),1.44(s,3H),1.50-1.55(m,6H),1.56-2.03(m,4H),1.68(d,J=7.4Hz,3H),2.20-2.34(m,1H),2.64-2.79(m,1H),3.14(s,3H),3.90-4.01(m,1H),4.50-4.61(m,1H),4.85(d,J=8.5Hz,3H),5.88-6.15(m,1H),6.30(d,J=16.5Hz,1H),6.38(d,J=8.0Hz,1H),6.53(d,J=16.3Hz,1H),6.61-6.87(m,1H),7.28(d,J=8.5Hz,1H),7.52(d,J=8.3Hz,1H),7.68(d,J=8.5Hz,1H),7.87(s,1H),8.05(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)564.2[M+H],Tr=2.54分鐘。
實施例48，化合物48
化合物48a. 2,2-雙(羥基甲基)-3-側氧基丁酸乙酯
在0℃，乙醯乙酸乙酯(150g,1.2mol)在甲醛(210mL,2.8mol,40%水溶液)和二(550mL)的受攪拌溶液中逐滴添加三乙基胺(1.0M的四氫呋喃溶液，57mL,0.06mol)。溫度上升至35-40℃，及混合物被攪拌達1h。反應混合物用水(400mL)稀釋，及副產物用甲苯萃取(3×600mL)。水相在35℃蒸發至起始體積的1/4和用乙酸乙酯萃取(3×900mL)。萃取液用硫酸鈉乾燥和蒸發以得到粗製產物(75g)，其為黃色油狀物，其無需純化直接用於下一步驟。
化合物48b. 5-乙醯基-1,3-二-5-甲酸乙酯
2,2-雙(羥基甲基)-3-側氧基丁酸乙基酯(75g,0.39 mol)和40%甲醛(360mL)的濃鹽酸溶液(360mL)在50℃受熱達17小時。兩相溶液被冷卻至室溫和用乙酸乙酯萃取(2×200mL)。結合的有機相用水清洗，用硫酸鎂乾燥和蒸發以得到殘留物，其藉由快閃管柱層析術以15：1至9：1之石油醚/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(33g,14%,2步驟)，其為無色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.25(t,J=9.2Hz,3H),2.31(s,3H),4.25-4.19(m,4H),4.35(d,J=12.0Hz,2H),4.77(d,J=6.0Hz,1H),4.82(d,J=6.0Hz,1H)。
化合物48c. 5-(1-羥基乙基)-1,3-二-5-甲酸乙基酯
5-乙醯基-1,3-二-5-甲酸乙基酯(2)(22.3g,0.11mol)溶於乙醇(100mL)，且在0℃，分數次添加硼氫化鈉(2.08g,0.055mol)。混合物在相同溫度攪拌達1小時。用丙酮破壞過量的硼氫化鈉，及溶液用乙酸乙酯萃取(3×600mL)。結合的有機萃取液在真空中濃縮以得到標題化合物(18.9g,84%)，其為無色油狀物。
化合物48d. 5-(1-(甲苯磺醯基氧基)乙基)-1,3-二-5-甲酸乙基酯
於0℃之5-(1-羥基乙基)-1,3-二-5-甲酸乙基酯(16.8g,83mmol)在乾燥吡啶(40mL)的混合物中添加4-甲苯磺醯氯(19.1g,99mmol)。混合物在室溫攪拌達16小時。添加水(40mL)，及混合物用乙酸乙酯萃取(2×400mL)。有機層用鹽水清洗(3x)。在真空中濃縮之後，粗製產物藉由矽膠層析術以25：1至5：1之石油醚/乙酸乙酯沖提予以純化以提供標題化合物(22.7g,76%)，其為無色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.26(t,J=4.0Hz,3H),1.34(d,J=6.8Hz,3H),2.45(s,3H),3.80(d,J=11.6Hz,1H),3.87(d,J=11.6Hz,1H),4.02(d,J=11.6Hz,1H),4.08(d,J=12.0Hz,1H),4.20-4.17(m,2H),5.03-4.98(m,1H),7.34(d,J=8.0Hz,2H),7.79(d,J=8.8Hz,2H)。
化合物48e. 5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯
5-(1-(甲苯磺醯基氧基)乙基)-1,3-二-5-甲酸乙基酯(20.7g,58mmol)和DBU(25mL)的混合物在140℃受熱達3小時。冷卻至室溫之後，反應混合物被倒至醚(300mL)中，及有機層用鹽水清洗(3x)。醚層用硫酸鈉乾燥，且在真空中濃縮。殘留物藉由矽膠層析術以30：1至20：1之石油醚/醚沖提予以純化以得到粗製產物，其在減壓下蒸餾(45-49℃/0.3mbar)以提供標題化合物(3.6g,33%)，其為無色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 1.29(t,J=11.0Hz,3H),3.70(d,J=11.6Hz,2H),4.25(t,J=7.2Hz,2H),4.44(t,J=11.2Hz,2H),4.71(d,J=8.0Hz,1H),4.95(d,J=6.0Hz,1H),5.24(d,J=17.6Hz,1H),5.27(d,J=11.2Hz,1H),5.65(d,J=10.8Hz,1H)。
化合物48f. 5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸
5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯(397.7mg,2.136mmol)的四氫呋喃/甲醇/水溶液(15mL,2：2：1)用氫氧化鋰單水合物(269mg,6.408mmol)處理。在室溫攪拌達1.5小時之後，揮發物在真空中予以移除，且殘留物被冷卻至0℃及用鹽酸(1M)驟冷。水層用氯化鈉飽和，用二氯甲烷萃取(3 x)。結合的有機液透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(320.3mg,95%)，其為無色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.72(d,J=11.6Hz,2H),4.50(d,J=11.4Hz,2H),4.73(d,J=6.2Hz,1H),5.02(d,J=6.0Hz,1H),5.27-5.39(m,2H),5.69(dd,J=17.6,10.9Hz,1H)。
化合物48g. 5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(398.4mg,0.745mmol)、5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸(117.9mg,0.745mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(45.3mg,0.149mmol)和三乙基胺(0.32mL,2.235mmol)的1,4-二溶液(15mL)藉由通入氮氣冒泡而排氣達5分鐘，接著回暖至50℃，及用三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(68.2mg,0.074mmol)處理。在100℃攪拌達40分鐘之後，反應被冷卻至室溫，透過矽藻土墊過濾，其用乙酸乙酯沖洗。揮發物在真空中予以移除以提供粗製標題化合物，其為橙色泡沫物，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)612.2[M+H],Tr=1.70分鐘。
化合物48
粗製5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3- 甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸(0.745mmol)的乾燥二氯甲烷溶液(18mL)經由注射泵添加至2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(385.0mg,1.117mmol)、4-二甲基胺基吡啶(273.0mg,2.235mmol)的含有4Å分子篩之乾燥二氯甲烷溶液(230mL)中，歷經3小時。添加結束之後，反應在室溫攪拌達40分鐘，接著過濾，及揮發物在真空中部分地予以移除。有機液用pH 4檸檬酸鹽緩衝溶液、碳酸氫鈉的飽和溶液清洗和在相分離器上過濾。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用25g Isolute匣以1：0至1：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供異構物的~9：1混合物(133.8mg,30%)。1/3的物質藉由逆相製備級HPLC以95：5至0：1之水/乙腈的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(8.1mg)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.11(d,J=6.7Hz,3H),1.47-1.80(m,8H),2.12-2.31(m,2H),2.65-2.77(m,1H),3.59-3.66(m,1H),3.85(d,J=11.4Hz,1H),3.92(d,J=11.4Hz,1H),4.39-4.53(m,2H),4.63-4.71(m,1H),4.98(d,J=6.2Hz,1H),5.08(q,J=6.9Hz,1H),5.35(d,J=9.1Hz,1H),5.82(q,J=7.3Hz,1H),6.15(d,J=16.5Hz,1H),6.63(d,J=16.5Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.69(dd,J=8.5,1.8Hz,1H),7.75(s,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)594.1[M+H],Tr=2.60分鐘。
實施例49. 化合物49
化合物49a. 2-(1-羥基-乙基)-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯
N,N-二異丙基胺(909mg,1.25mL,9mmol)的四氫呋喃溶液(4mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加正丁基鋰(3.6mL,9mmol,2.5M的己烷溶液)，及反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(864mg,6mmol)的四氫呋喃溶液(8mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達20分鐘。一次性添加乙醛(792mg,1.0mL,18mmol)。移除冷浴，及反應混合物在室溫攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至0℃，及添加冰-冷鹽酸(2M)以使反應混合物酸化至pH 2。添加氯化鈉以使水相飽和，及混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至0：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(1.28g)，其為油狀物及為非鏡像異構物的2：1混合物。LCMS(m/z)189.3[M+H],Tr=1.23分鐘。
化合物49b. 2-乙烯基-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯
氫化鈉(200mg,5mmol,60%分散於油中)的四氫呋喃懸浮液(6mL)在-78℃和氮下攪拌。添加2-(1-羥基-乙基)-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(620mg,3.3mmol)的四氫呋喃溶液(3mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達15分鐘。添加N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟甲磺醯亞胺)(2.60g,6.6mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。反應混合物被回暖至室溫及接著在室溫攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至5℃，及小心添加飽和氯化銨溶液。反應混合物用二乙基醚萃取。有機液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(2.12g,3.3mmol)，其為油狀物及為非鏡像異構物的2：1混合物，其立即用於下一步驟。LCMS(m/z)321.0[M+H],Tr=2.88分鐘。
2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(2.12g,3.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在室溫和氮下攪拌。添加1,8-二氮雙環十一碳-7-烯(2.0g,2mL,13.2 mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。反應混合物被冷卻至0℃及用冰冷鹽酸(2M)酸化至pH 2。混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(466mg,75%，共2步驟)，其為油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.55-1.80(m,5H),2.21-2.29(m,1H),2.68-2.77(m,1H),3.79(s,3H),3.91-3.98(m,1H),5.26(dd,J=10.7,0.9Hz,1H),5.41(dd,J=17.4,1.1Hz,1H),5.87(dd,J=17.4,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)193.2[M+H],Tr=2.01分鐘。
化合物49c. (S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯
[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(320mg,0.9mmol)、2-乙烯基-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(330mg,0.9mmol)、三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(82mg,0.09 mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(54mg,0.18mmol)和N,N-二環己基甲基胺(526mg,0.58mL,2.7mmol)的乙腈溶液(4mL)在微波反應器內在120℃受熱達30分鐘。過濾反應混合物，且溶劑被蒸發。殘留物溶於乙酸乙酯，且溶液用冰-冷鹽酸(1M)清洗。水層用乙酸乙酯萃取，且有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(130mg,21%)，其為油狀物LCMS(m/z)441.1[M+H],Tr=2.75分鐘。
2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-甲酸甲基酯(130mg,0.3mmol)的四氫呋喃溶液(6mL)在5℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(25mg,0.6mmol)的水溶液(1.5mL)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。大部分的有機溶劑被蒸發。溶液用冰-冷鹽酸(2M)酸化至pH 2，且混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-甲酸(135mg,0.3mmol)，其為黃色膠狀物，其以粗製形式用於下一步驟。LCMS(m/z)427.1[M+H],Tr=2.17分鐘。
2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-甲酸(135mg,0.3mmol)、 N,N-二異丙基乙基胺(96mg,0.133mL,0.75mmol)、4-二甲基胺基吡啶(80mg,0.66mmol)和2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(193mg,0.56mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在0℃和氮下攪拌。添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(142mg,0.33mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)，且反應混合物在室溫攪拌達6小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，及溶液用冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、水、冰-冷鹽酸(1M)、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：3之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(44mg,17%)，其為白色固體物及為兩種非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)840.2,842.0[M+H],Tr=3.75分鐘。
化合物49
(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯乙基酯(42mg,0.05mmol)的四氫呋喃溶液(2mL)在0℃和氮下攪拌。添加冰-冷氫氧化鈉水溶液(0.1M,0.5mL, 0.05mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘。添加額外的氫氧化鈉溶液(0.1M,1.0mL,0.1mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達1小時。添加額外的氫氧化鈉溶液(0.1M,1.0mL,0.1mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達90分鐘。添加冷鹽酸(1M)以使混合物酸化至pH 2，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，及殘留物用二乙基醚研磨(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(0.05mmol)，其為黃色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)710.3[M+H],Tr=2.80分鐘。
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸(0.05mmol)在鹽酸(4M的1,4-二溶液，2mL)中的混合物在室溫攪拌達1小時。溶劑被蒸發，及殘留物與二乙基醚共蒸發(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.05mmol)，其為灰白色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)610.1[M+H],Tr=1.60分鐘。
粗製(S)-1-{(S)-2-[(S)-2-(2-{(E)-2-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-乙烯基}-四氫-哌喃-2-羰基氧基)-3-甲基-丁醯胺基]-丙醯基}-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.05mmol)的二氯甲烷溶液懸浮液(45mL)在0℃和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(26mg,0.2mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，且得到的溶液在0℃攪拌。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(38mg,0.1mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘及接著在室溫攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至0℃，及溶液用冰-冷鹽酸(1M)和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物用二乙基醚研磨，及乾燥殘留物。殘留物藉由矽膠層析術使用2：1之液異己烷/丙酮的梯度溶予以純化。殘留物用1：1之異己烷/二乙基醚研磨，及乾燥得到的固體物以提供標題化合物(6.0mg,21%)，其為白色固體物及為非鏡像異構物的1：1混合物。LCMS(m/z)592.2[M+H],Tr=2.51分鐘及(m/z)592.2[M+H],Tr=2.61分鐘。
實施例50及51，化合物50及51
化合物50a. 四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯
四氫-哌喃-3-甲酸(2.831g,21.752mmol)在二氯甲烷溶液(60mL)和N,N-二甲基甲醯胺(5滴)的冷(0℃)溶液用草醯氯(2.0mL,23.927mmol)處理。在室溫攪拌達2小時之後，添加苯甲基醇(2.5mL,23.927mmol)。在室溫攪拌達2小時和靜置整夜之後，揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(4.587g,96%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.58-1.88(m,3H),2.03-2.13(m,1H),2.62-2.72(m,1H),3.47(ddd,J=11.4,9.6,3.4Hz,1H),3.63(dd,J=11.4,9.1Hz,1H),3.85(明顯的dt,J=11.1,3.8Hz,1H),4.06(ddd,J=11.4,4.0,1.6Hz,1H),5.12,5.17(ABq,J AB=12.5Hz,2H),7.31-7.46(m,5H)。
化合物50b. 3-(1-羥基-乙基)-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯
N,N-二異丙基胺(4.7mL,33.316mmol，用氫化鈣乾燥)在無水四氫呋喃(60mL)中的冰(-78℃)溶液用正丁基鋰的己烷溶液(12.5mL,31.234mmol,2.5M)處理。在-78℃攪拌達25分鐘之後，混合物用四氫-哌喃-3-甲酸苯 甲基酯(4.587g,20.823mmol)的無水四氫呋喃溶液(20mL)處理。在-78℃攪拌達15分鐘之後，混合物用乙醛(3.5mL,62.469mmol)處理。在室溫攪拌達45分鐘之後，反應在0℃用鹽酸(2M,50mL)予以驟冷。水層用氯化鈉飽和，用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至3：2之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(2.212g,40%)，其為黃色油狀物及為非鏡像異構物的3：1混合物。LCMS(m/z)287.0[M+Na],Tr=2.00分鐘。
化合物50c. (1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯
氫化鈉(502.1mg,12.552mmol,60%於礦物油中)在無水四氫呋喃溶液(20mL)中的冰(-78℃)懸浮液用3-(1-羥基-乙基)-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯(2.212g,8.368mmol)的無水四氫呋喃溶液(20mL)處理。淺黃色懸浮液在-78℃攪拌達15分鐘及接著用N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟甲磺醯亞胺)(6.572g,16.736mmol)的無水四氫呋喃溶液(20mL)處理。在室溫攪拌達3小時之後，添加更多的氫化鈉(502.1mg,12.552mmol,60%於礦物油中)。在室溫攪拌 達2小時之後，添加更多的氫化鈉(502.1mg,12.552mmol,60%於礦物油中)。在室溫攪拌達30分鐘之後，反應在20℃用鹽酸(2M,50mL)予以驟冷。水層用二氯甲烷萃取(3 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供混合物形式之標題化合物，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)397.0[M+H],Tr=2.48分鐘。
化合物50d. 3-乙烯基-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯
3-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯(8.368mmol)的二氯甲烷溶液(100mL)用1,8-二氮雙環並[5.4.0]十一碳-7-烯(5.0mL,33.472mmol)處理。在室溫攪拌達2.5小時之後，揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(809.5mg,39%，共2步驟)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.58-1.80(m,3H),2.29-2.40(m,1H),3.42-3.54(m,2H),3.81(明顯的dt,J=10.5,4.2Hz,1H),4.27(dd,J=11.4,1.8Hz,1H),5.13-5.27(m,4H),5.77(dd,J=17.4,10.9Hz,1H),7.31-7.42(m,5H)。
化合物50e. 3-乙烯基-四氫-哌喃-3-甲酸
3-乙烯基-四氫-哌喃-3-甲酸苯甲基酯(809.5mg,3.286mmol)的四氫呋喃/甲醇/水(25mL,2：2：1)溶液用氫氧化鋰單水合物(413.6mg,9.859mmol)處理。在室溫攪拌達2小時之後，添加更多的氫氧化鋰單水合物(413.6mg 9.859mmol)。在室溫攪拌達2小時之後，揮發物在真空中予以移除，且殘留物被冷卻至0℃及用鹽酸(1M)驟冷。水層用氯化鈉飽和，用二氯甲烷萃取(3 x)。結合的有機液透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Isolute匣以1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供粗製標題化合物，其溶於二乙基醚。有機液用碳酸氫鈉的飽和溶液萃取。水層用鹽酸(2M)酸化至pH~2，用氯化鈉飽和，和用二氯甲烷(2 x)萃取以提供標題化合物(377.1mg,73%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.59-1.90(m,3H),2.27-2.38(m,1H),3.39-3.55(m,2H),3.87(明顯的dt,J=11.2,4.0Hz,1H),4.26(dd,J=11.4,2.0Hz,1H),5.22-5.32(m,2H),5.79(dd,J=17.8,10.7Hz,1H)。
化合物50f. 3-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-四氫-哌喃-3-甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(600mg,1.122mmol)、3-乙烯基-四氫-哌喃-3-甲酸(175.3mg,1.122mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(68.3mg,0.224mmol)和三乙基胺(0.47mL,3.366mmol)的1,4-二溶液(15mL)藉由通入氮氣冒泡而排氣達5分鐘，接著回暖至50℃，及用三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(102.7mg,0.112mmol)處理。在100℃攪拌達45分鐘之後，反應被冷卻至室溫，透過矽藻土墊過濾，其用乙酸乙酯沖洗。揮發物在真空中予以移除以提供粗製標題化合物，其為橙色泡沫物，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)610.2[M+H],Tr=1.97分鐘。
化合物50及51
粗製3-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3- 甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-四氫-哌喃-3-甲酸(1.122mmol)的乾燥二氯甲烷溶液(20mL)經由注射泵添加至2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(772.6mg,2.244mmol)、4-二甲基胺基吡啶(548.2mg,4.488mmol)的含有4Å分子篩之乾燥二氯甲烷溶液(350mL)中，歷經4小時。添加結束之後，反應在室溫攪拌達3天，接著過濾，及揮發物在真空中部分地予以移除。有機液用pH 4檸檬酸鹽緩衝溶液、碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，且在相分離器上過濾。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至2：3之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供兩個部分，其進一步藉由逆相製備級HPLC以95：5至0：1之水/乙腈沖提予以純化以提供2種分離的單一異構物1及2。
化合物50(第一沖提)非鏡像異構物1(50.1mg,7.5%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.0(d,J=6.4Hz,3H),1.09(d,J=6.7Hz,3H),1.47-1.72(m,9H),1.73-1.88(m,2H),1.91-2.02(m,1H),2.11-2.32(m,2H),2.35-2.45(m,1H),2.65-2.78(m,1H),3.46-3.67(m,3H),3.84-3.94(m,1H),4.39-4.54(m,2H),5.03-5.16(m,2H),5.34(d,J=9.1Hz,1H),5.81(q,J=7.3Hz,1H),6.23(d,J=16.5Hz,1H),6.62(d,J=16.5Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,1.3Hz,1H),7.75(s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)592.2 [M+H],Tr=2.31分鐘。
化合物51(第二沖提)非鏡像異構物2(28.8mg,4.3%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.09(d,J=6.7Hz,3H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.65(d,J=7.3Hz,3H),1.68-1.79(m,3H),1.88-2.00(m,2H),2.12-2.29(m,2H),2.55-2.76(m,2H),3.49-3.67(m,3H),3.84-3.93(m,1H),4.29(dd,J=11.2,1.6Hz,1H),4.39-4.48(m,1H),5.08(q,J=6.7Hz,1H),5.28(d,J=8.7Hz,1H),5.82(q,J=7.1Hz,1H),6.20(d,J=16.7Hz,1H),6.62(d,J=16.7Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.79(s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)592.1[M+H],Tr=2.27分鐘。
實施例52，化合物52
化合物52a. (S)-環丁基-羥基-乙酸
環丁基-L-甘胺酸(572.8mg,4.435mmol)在硫酸水溶液(0.5M,18mL)中的冷(0℃)溶液用亞硝酸鈉(1.836g, 26.610mmol)的水溶液(10mL)處理。在室溫攪拌達19小時之後，溶液用氯化鈉飽和及用四氫呋喃萃取(3 x)。有機液透過疏水性玻璃料過濾，且揮發物在真空中予以移除。該固體殘留物接著用乙酸乙酯萃取，有機液透過疏水性玻璃料過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(235.9mg,41%)，其為橙色膠狀物，其無需進一步純化即可使用。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.76-2.23(m,6H),2.66-2.82(m,1H),4.18(d,J=5.8Hz,1H)。
化合物52b. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丁基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
(S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯53a(1.065g,1.994mmol)在二氯甲烷(15mL)中的冷(0℃)溶液用鹽酸溶液(3mL,11.964mmol,4M的1,4-二溶液)處理。在室溫攪拌達2小時之後，添加鹽酸溶液(3mL,11.964mmol,4M的1,4-二溶液)。攪拌達2小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留的水與甲苯共沸以提供(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1- (7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺鹽酸鹽，其為白色固體物，其接著與(S)-環丁基-羥基-乙酸(235.9mg,1.812mmol)和乾燥二氯甲烷(20mL)混合。此懸浮液被冷卻至0℃及隨後用N,N-二異丙基乙基胺(0.95mL,5.436mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(961.7mg,2.174mmol)處理。反應緩慢回暖至室溫。攪拌達17小時之後，反應在0℃用鹽酸(2M)予以驟冷。水層用二氯甲烷萃取。有機液用碳酸氫鈉的飽和溶液清洗。鹼性水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至1：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(427.5mg,39%)，其為橙色泡沫物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ1.40(d,J=8.0Hz,3H),1.59(d,J=6.4Hz,3H),1.63-2.10(m,10H),2.21-2.32(m,1H),2.58-2.78(m,2H),3.41-3.54(m,1H),4.01(明顯的t,J=5.8Hz,1H),4.52(d,J=13.8Hz,1H),5.28(明顯的五重峰，J=6.9Hz,1H),5.41(明顯的五重峰，J=8.0Hz,1H),7.00(d,J=8.2Hz,1H),7.40(d,J=8.5Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.8Hz,1H),7.71(d,J=8.5Hz,1H),8.06(d,J=7.1Hz,1H),8.16(d,J=8.5Hz,1H),8.44(s,1H)。LCMS(m/z)547.0,549.0[M+H],Tr=2.39分鐘。
化合物52c. (E)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丁基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙 基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丁基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(427.5mg,0.782mmol)、2,2-二甲基-丁-3-烯酸(89.3mg,0.782mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(47.6mg,0.156mmol)和三乙基胺(0.33mL,2.346mmol)的1,4-二溶液(10mL)藉由通入氮氣冒泡而排氣達5分鐘，接著回暖至50℃，及用三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(71.6mg,0.078mmol)處理。在100℃攪拌達1.5小時之後，添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(71.6mg,0.078mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(47.6mg,0.156mmol)。在100℃攪拌達40分鐘之後，反應被冷卻至室溫，透過矽藻土墊過濾，其用乙酸乙酯沖洗。揮發物在真空中予以移除以提供粗製標題化合物，其為橙色泡沫物，其無需進一步純化即可使用。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.01分鐘。
化合物52
粗製(E)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丁基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸(0.782mmol)的乾燥二氯甲烷溶液(20mL)經由注射泵添加至2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(538.4mg,1.564mmol)、4-二甲基胺基吡啶(382.1mg,3.128mmol)的含有4Å分子篩之乾燥二氯甲烷溶液(280mL)，歷經4小時。添加結束之後，反應在室溫攪拌達30分鐘，接著過濾，及揮發物在真空中部分地予以移除。有機液用pH 4檸檬酸鹽緩衝溶液、碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，和在相分離器上過濾。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至1：1之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提及接著藉由逆相製備級HPLC以95：5至0：1之水/乙腈的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(48.6mg,11%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.43(s,3H),1.47-1.75(m,12H),1.89-2.12(m,6H),2.24-2.33(m,1H),2.69(明顯的dt,J=12.9,3.1Hz,1H),2.84(明顯的六重峰，J=8.0Hz,1H),3.60(dd,J=11.6,2.9Hz,1H),4.38-4.47(m,1H),5.10(q,J=6.7Hz,1H),5.53(d,J=8.0Hz,1H),5.81(q, J=7.1Hz,1H),6.38(d,J=16.3Hz,1H),6.57(d,J=16.3Hz,1H),7.44(d,J=8.5Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.81-7.87(m,2H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)562.1[M+H],Tr=2.68分鐘。
實施例53，化合物53
化合物53a. ((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯
(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(3.007g,6.948mmol)的四氫呋喃/水(60mL,5：1)冷(0℃)溶液用氫氧化鋰單水合物(874.4mg,20.844mmol)處理。在0℃攪拌達40分鐘之後，反應用鹽酸(1M,50mL)驟冷。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發 物在真空中予以移除。殘留的三氯乙醇與甲苯共沸(3 x)以提供(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸，其為白色固體物，其接著與(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺鹽酸鹽(1.998g,6.948mmol)混合，及懸浮於無水的乙腈(60mL)和四氫呋喃(10mL)中。懸浮液被冷卻至0℃，及隨後用N,N-二異丙基乙基胺(6mL,34.740mmol)和1-[雙(二甲基胺基)伸甲基]-1H-1,2,3-三唑並[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(3.699g,9.727mmol)處理。緩慢回暖至室溫及攪拌達16小時之後，反應在0℃用鹽酸(1M,70mL)驟冷。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合，用碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至1：4之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(3.702g,99%)，其為白色泡沫物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.38(d,J=6.9Hz,3H),1.43(s,9H),1.47-1.55(m,2H),1.58(d,J=6.9Hz,3H),1.60-1.78(m,2H),2.22-2.31(m,1H),2.65-2.78(m,1H),3.39-3.52(m,1H),4.55(d,J=13.4Hz,1H),5.18-5.34(m,2H),5.36-5.45(m,1H),7.37(d,J=8.5Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),8.04(d,J=6.5Hz,1H),8.14(d,J=8.5Hz,1H),8.36(s,1H)。LCMS(m/z)536.1,537.1[M+H],Tr=2.58分鐘。
化合物53b. (S)-1-[(S)-2-(2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)- 丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯(1.07g,2.00mmol)懸浮於二氯甲烷(20mL)中，且混合物邊攪拌邊冷卻至0℃。添加4M鹽酸的1,4-二溶液(11mL)，且反應混合物被攪拌達90分鐘及接著被蒸發。殘留的水與甲苯共沸，及殘留物懸浮於二氯甲烷(20mL)中，及添加環丙基-羥基-乙酸(255mg,2.20mmol)。混合物邊攪拌邊冷卻至0℃，及依序添加N,N-二異丙基乙基胺(775mg,1.05mL,6.00mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1.06g,2.40mmol)。使反應回暖至周圍溫度和攪拌達18小時。添加1M鹽酸，且有機層用飽和碳酸氫鈉溶液清洗，通過疏水性玻璃料和被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至9：1之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(328mg)，其為白色泡沫物。有機水性萃取液用二氯甲烷/甲醇再萃取(9：1,2 x)，且有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至17：3之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物 (378mg)，其為白色泡沫物。結合2個泡沫物(706mg,66%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.46-0.73(m,4H),1.04-1.18(m,1H),1.49-1.59(m,6H),1.53-1.78(m,2H),1.95-2.04(m,1H),2.25-2.34(m,1H),2.64-2.82(m,1H),3.44-3.55(m,2H),3.60-3.84(m,1H),4.50-4.60(m,1H),5.23-5.33(m,1H),5.48-5.55(m,1H),7.36-7.41(m,1H),7.62-7.73(m,2H),8.13-8.19(m,2H),8.47-8.51(m,1H)。LCMS(m/z)[M+H]532.0,534.0 Tr=2.07分鐘。LCMS(m/z)532.0,533.9[M+H],Tr=2.12分鐘。
化合物53
(S)-1-[(S)-2-(2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(592mg,1.11mmol)、5-乙烯基[1,3]二-5-甲酸(176mg,1.11mmol)、三乙基胺(343mg,472μL,3.39mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(67mg,0.22mmol)的1,4-二溶液(15mL)用氮排氣達5分鐘及接著在氮下邊攪拌邊回暖至50℃。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(101mg,0.11mmol)，且該混合物迴流受熱達20分鐘及接著使其冷卻至室溫。懸浮液透過矽藻土過濾，且蒸發濾液以得到粗製5- ((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-(2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸。
於粉末狀的4Å分子篩、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(764mg,2.22mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(542mg,4.44mmol)在二氯甲烷(375mL)中的受攪拌混合物中經由注射泵添加粗製5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-(2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸的二氯甲烷溶液(20mL)，歷經5小時。原先含有粗製酸之燒瓶用另外的二氯甲烷(5mL)清洗，且將其添加至反應混合物，歷經約5分鐘。反應混合物被攪拌達16小時，且接著透過矽藻土過濾和蒸發至~100mL，依序用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、飽和鹽水清洗，及接著透過疏水性玻璃料過濾。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至1：1之異己烷/丙酮的梯度溶液沖提及接著藉由逆相製備級HPLC使用1：9至3：2之經0.1%甲酸修飾之乙腈/水的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(39mg,6%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.52-0.76(m,4H),1.30-1.40(m,1H),1.49-1.76(m,2H),1.60(d,J=6.9Hz,3H),1.64(d,J=7.1Hz,3H),1.93-2.02(m,1H),2.21-2.30(m,1H),2.66-2.77(m,1H),3.59-3.66(m,1H),3.85,3.96(ABq,J AB=11.4Hz,2H),4.41-4.51(m,2H),4.63-4.70(m,1H),4.82(d,J=6.2Hz,1H),4.98(d,J=6.0Hz,1H),5.04-5.13(m, 2H),5.83-5.91(m,1H),6.17(d,J=16.7Hz,1H),6.66(d,J=16.7Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.68(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),7.83(s,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)592.2[M+H],Tr=2.04分鐘。
實施例54，化合物54
化合物54a. (2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁酸
L-別-蘇胺酸甲基酯(900mg,6.75mmol)的1M硫酸溶液(10mL)被製備和冷卻至0℃，之後逐滴添加亞硝酸鈉(693mg,10mmol)的水溶液(2.25mL)，歷經10分鐘。反應混合物在0℃攪拌達15小時。添加固體氯化銨以飽和溶液，其接著用二乙基醚萃取(3×25mL)。萃取液被結合和用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發以得到標題產物(193mg,21%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.29(d,J=6.5Hz,3H),3.48(s,3H),3.71-3.81(m,1H),4.35(d,J=4.7Hz,1H)。
化合物54b. (S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯(838mg,1.44mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)用鹽酸的1,4-二溶液(4M,1.44mL,5.76mmol)處理和在室溫攪拌達2小時。溶液被蒸發至乾。殘留物溶於二氯甲烷(20mL)，及依序添加(2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁酸(193mg,1.44mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(1.0mL,5.76mmol)和O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸鹽(819mg,2.16mmol)。溶液在室溫攪拌達20小時且接著被蒸發至乾。殘留物藉由矽膠層析術以1：9至1：1之丙酮/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以產生標題化合物(243mg,31%)，其為白色膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.14(d,J=6.2Hz,3H),1.33-1.50(m,6H),1.58(d,J=6.7Hz,3H),2.20-2.30(m,1H),2.66-2.79(m,1H),3.26-3.63(m,3H),3.37(s,3H),3.90(d,J=11.8Hz,1H),4.20(d,J=5.1Hz,1H),4.46-4.56(m,1H),5.20-5.31(m,1H),5.36-5.49(m,1H),7.41(d,J=8.5Hz,1H),7.61-7.70(m,2H),8.15(d, J=8.5Hz,1H),8.41(s,1H)。LCMS(m/z)550.0,552.0[M+H],Tr=2.05分鐘。
化合物54c. (E)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸
製備(S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(243mg,0.44mmol)和2,2-二甲基丁-3-烯酸(50mg,0.44mmol)的1,4-二溶液，及添加三乙基胺(183μL,1.32mmol)。反應混合物用氮沖洗達5分鐘，接著添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(40mg,0.044mmol)。反應混合物在100℃和氮氛圍下受熱達1.5小時。反應透過矽藻土(hyflo supercel)用乙酸乙酯清洗而過濾。濾液在真空中蒸發以產生粗製標題化合物，其為黃色膠狀物。LCMS(m/z)584.2[M+H],Tr=1.77分鐘。
化合物54
製備2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(389mg,1.13mmol)的無水二氯甲烷溶液(160mL)，及添加4Å分子篩和4-(二甲基胺基)吡啶(275mg,2.25mmol)。經由注射泵添加粗製(E)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((2S,3S)-2-羥基-3-甲氧基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2,2-二甲基-丁-3-烯酸(約0.44mmol)的二氯甲烷溶液(11mL)，歷經5.5小時。添加結束之後，反應混合物在室溫再攪拌達30分鐘。溶液被過濾和用飽和碳酸氫鈉水溶液(70mL)清洗。有機液透過相分離匣過濾和蒸發以得到黃色膠狀物(0.97g)，其藉由矽膠層析術以1：0至4：1之乙酸乙酯/丙酮的梯度溶液沖提予以純化以產生無色膠狀物(133mg)，其藉由逆相製備級HPLC以9：11之乙腈/水沖提予以純化以產生標題產物(15.5mg,6%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.23(d,J=6.3Hz,3H),1.44(s,3H),1.53(s,3H),1.58(d,J=6.9Hz,3H),1.61(d,J=7.4Hz,3H),1.34-1.84(m,2H),1.91-2.01(m,2H),2.25-2.36(m,1H),2.63-2.77(m,1H),3.43(s,3H),2.54-3.67(m,1H),2.73-3.83(m,1H),4.40-4.50(m,1H),4.07-5.16(m,1H),5.56(d,J=5.6Hz,1H),5.86(q,J=7.1Hz,1H),6.45,6.60(ABq,J AB=16.1Hz,2H),7.44(d,J=8.5Hz, 1H),7.59(m,1H),7.84(d,J=8.3Hz,1H),7.93(s,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)566.1[M+H],Tr=2.32分鐘。
實施例55，化合物55
化合物55a. (R)-2-羥基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸(600mg,4.2mmol)的二氯甲烷溶液(40mL)在0℃和氮下攪拌。添加三溴化硼(1M的二氯甲烷溶液，16.8mL,16.8mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達90分鐘。小心添加甲醇(20mL)，及反應混合物被回暖至室溫，歷經30分鐘，及接著在室溫攪拌達30分鐘。溶劑被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(540mg,90%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.35(s,3H),2.33(m,1H),3.62(m,1H),3.75(s,3H),3.75-3.80(m,1H),5.21(dd,J=17.4,0.5Hz,1H),5.24(dd,J=10.7,0.5Hz,1H),5.98(dd,J=17.4,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)145.1[M+H],Tr=1.16分鐘。
化合物55b. (R)-2-二氟甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸甲基酯
(R)-2-羥基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸甲基酯(288mg,2.0mmol)的乙腈溶液(8mL)在室溫和氮下攪拌。依序添加碘化銅(I)(80mg,0.4mmol)和二氟-氟磺醯基-乙酸(356mg,0.2mL,2.0mmol)，且反應混合物迴流受熱達30分鐘。反應混合物被冷卻至室溫，添加水，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(195mg,50%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.40(s,3H),3.75(s,3H),3.86(d,J=9.4Hz,1H),4.10(d,J=9.4Hz,1H),5.24(d,J=17.4Hz,1H),5.24(dd,J=10.9Hz,1H),5.95(dd,J=17.4,10.9Hz,1H),6.22(t,J=74.3Hz,1H)。
化合物55c. (R)-2-二氟甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸
(R)-2-二氟甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸甲基酯(159 mg,0.8mmol)的四氫呋喃溶液(6mL)在5℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(100mg,2.4mmol)的水溶液(1.5mL)，且反應混合物在5℃攪拌達1小時且接著在室溫攪拌達20小時。添加水，且混合物用鹽酸(2M)酸化至pH 2，及混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(133mg,92%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 1.24(s,3H),3.80(d,J=9.4Hz,1H),4.02(d,J=9.4Hz,1H),5.19(dd,J=10.6Hz,1H),5.20(d,J=17.6Hz,1H),5.91(dd,J=17.6,10.6Hz,1H),6.68(t,J=75.6Hz,1H),12.5-13.0(br s,1H)。LCMS(m/z)179.1[M-H],Tr=1.79分鐘。
化合物55
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(160mg,0.3mmol)、(R)-2-二氟甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸(54mg,0.3mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(18mg,0.06mmol)和三乙基胺(91mg,0.125mL,0.9mmol)的1,4-二溶液(6mL)在5℃和氮下攪拌。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(27 mg,0.03mmol)，且反應混合物迴流受熱達40分鐘。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製(E)-(R)-2-二氟甲氧基甲基-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2-甲基-丁-3-烯酸(0.3mmol)，其用於下一步驟。LCMS(m/z)634.2[M+H],Tr=2.04分鐘。
粉末狀的4Å分子篩(200mg)、4-二甲基胺基吡啶(146mg,1.2mmol)及2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(206mg,0.6mmol)的混合物的二氯甲烷溶液(200mL)在室溫和氮下攪拌。經由注射泵添加粗製(E)-(R)-2-二氟甲氧基甲基-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2-甲基-丁-3-烯酸(0.3mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)，歷經4小時，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液被蒸發至體積約50mL。溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：2至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液及接著藉由逆相製備級HPLC以1：4至1：0之乙腈/水的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(21mg,11%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.61(s,3H),1.66(d,J=7.1Hz,3H), 1.66-1.70(m,2H),1.93-1.98(m,1H),2.13-2.26(m,2H),2.64-2.73(m,1H),3.55-3.67(m,1H),3.94(d,J=9.6Hz,1H),4.26(d,J=9.6Hz,1H),4.40-4.45(m,1H),5.04(d,J=12.0Hz,1H),5.08(q,J=6.7Hz,1H),5.23(d,J=9.2Hz,1H),5.81(q,J=7.1Hz,1H),6.24(d,J=16.5Hz,1H),6.45(t,J=75.4Hz,1H),6.63(d,J=16.5Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.66(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),7.80(br s,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)616.2[M+H],Tr=2.58分鐘。
實施例56，化合物56
化合物56a. (R)-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸
在氮下，將雙(三氟甲基磺醯基)醯亞胺鋅(750mg,1.2mmol)和(1-(三氟甲基)-1,2-苯並碘氧呃-3(1H)-酮(758mg,2.4mmol)添加至(R)-2-羥基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸甲基酯(288mg,2.0mmol)在乾燥氘氯仿(4mL)中的受攪拌溶液中。反應混合物在密封燒瓶內在室溫和氮下攪拌達5天。得到的懸浮液用二氯甲烷稀釋及上層液被分離及蒸發。將 二氯甲烷(5mL)添加至殘留物中，及上層液溶液藉由矽膠層析術使用10：1至5：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供粗製(R)-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸甲基酯(98mg)，其為透明油狀物，其用於下一步驟。
粗製(R)-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸甲基酯(98mg)的四氫呋喃溶液(4mL)在5℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(63mg,1.5mmol)的水溶液(1mL)，且反應混合物在5℃攪拌達1小時且接著在室溫攪拌達3天。添加水，及混合物用鹽酸(2M)酸化至pH 2，且混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製標題化合物(95mg)，其為透明油狀物，其用於下一步驟。LCMS(m/z)197.1[M-H],Tr=2.16分鐘。
化合物56
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(212mg,0.4mmol)、粗製(R)-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸(95mg)、三(鄰-甲苯基)膦(24mg,0.08mmol)和三乙基胺(121mg,0.17mL,1.2mmol)的1,4-二溶液(10 mL)在5℃和氮下攪拌。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(36mg,0.04mmol)，且反應混合物迴流受熱達40分鐘。反應混合物被冷卻至室溫及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製(E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸，其用於下一步驟。LCMS(m/z)652.1[M+H],Tr=2.17分鐘。
粉末狀的4Å分子篩(200mg)、4-二甲基胺基吡啶(195mg,1.6mmol)及2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(275mg,0.8mmol)的混合物的二氯甲烷溶液(200mL)在室溫和氮下攪拌。經由注射泵添加粗製(E)-(R)-4-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-2-甲基-2-三氟甲氧基甲基-丁-3-烯酸的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經4小時，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液被蒸發至體積約50mL。溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：2至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化，接著藉由逆相製備級HPLC以1：4至1：0之乙腈/水的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(4.3mg,0.3%，歷經4步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.01(d,J=6.7Hz,3H),1.07(d,J=6.7Hz, 3H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.63(s,3H),1.66(d,J=7.1Hz,3H),1.66-1.70(m,2H),1.93-1.97(m,1H),2.14-2.27(m,2H),2.64-2.73(m,1H),3.58-3.67(m,1H),4.10(d,J=9.1Hz,1H),4.37-4.42(m,1H),4.45(d,J=9.1Hz,1H),5.03(d,J=12.0Hz,1H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),5.24(d,J=8.9Hz,1H),5.81(q,J=7.1Hz,1H),6.23(d,J=16.5Hz,1H),6.64(d,J=16.5Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.67(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),7.82(br s,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)634.1[M+H],Tr=2.85分鐘。
實施例57. 化合物57
化合物57a. 6-硝基甲基-[1,4]二氧-6-醇
於氮下之硫酸鎂(2.05g,17.0mmol)中添加硝基甲烷(4mL)，且激烈攪拌混合物。添加[1,4]二氧-6-酮(899mg,7.74mmol，如PCT Int.Appl.2010139717所述製備)的硝基甲烷溶液(2mL)，且混合物在室溫攪拌達5分鐘。添 加2,8,9-三異丙基-2,5,8,9-四氮-1-磷雙環[3,3,3]十一烷(231mg,250μL,0.77mmol)的硝基甲烷溶液(2mL)，且混合物在40℃受熱達19小時。受冷卻的反應混合物直接裝載於矽石上及藉由矽膠層析術使用1：1至1：3之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(798mg,58%).，其為黃色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.27(s,1H),3.77-3.93(m,4H),3.85(s,4H),4.58(s,2H)。
化合物57b. 6-硝基亞甲基-[1,4]二氧
6-硝基甲基-[1,4]二氧-6-醇(0.74g,4.18mmol)和三乙基胺(1.86g,2.56mL,18.4mmol)在二氯甲烷(20mL)中的受攪拌混合物在氮下被冷卻至-78℃，及逐滴添加甲磺醯氯(1.43g,970μL,12.5mmol)。反應混合物被攪拌達30分鐘及接著用飽和氯化銨溶液驟冷。將混合物從冷浴中移出且使其回暖至周圍溫度。有機層被分離，且水層用二氯甲烷萃取。結合的有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(512mg,77%)，其為黃色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.81-3.90(m,4H),4.36(d,J=0.5Hz,2H),5.04(d,J=2.5Hz,2H),7.02(t,J=2.5Hz,1H)。LCMS(m/z)182.1.0[M+Na],Tr=1.04分鐘。
化合物57c. 6-硝基甲基-6-乙烯基-[1,4]二氧
甲苯(13mL)和水(3.25mL)的混合物藉由通入氮氣冒泡而除氧達20分鐘。接著將其添加至6-硝基伸甲基-[1,4]二氧(512mg,3.22mmol)中。添加2,2’-雙(二苯基膦基)-1,1’-聯萘(218mg,0.35mmol)和乙烯基三氟硼酸鉀(1.73g,12.9mmol)，及混合物藉由通入氮氣冒泡而除氧達5分鐘。添加四氟硼酸雙(1,5-環辛二烯)銠(I)(131mg,0.32mmol)，且反應混合物在氮下攪拌和迴流受熱達4.5小時。混合物被冷卻和被分配在二乙基醚及水之間。水層被分離和用二乙基醚萃取，及結合的有機萃取液用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至13：7之異己烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(155mg,26%)，其為淡棕色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.77-3.93(m,8H),4.64(s,2H),5.22(d,J=17.9Hz,1H),5.30(d,J=11.2Hz,1H),5.79(dd,J=17.8,11.2Hz,1H)。LCMS(m/z)210.1[M+Na],Tr=1.51分鐘。
化合物57d. 6-乙烯基-[1,4]二氧-6-甲酸
於氮下之6-硝基甲基-6-乙烯基-[1,4]二氧(214mg,1.14mmol)的N,N-二甲基甲醯胺受攪拌溶液(5mL)中添加乙酸(684mg,652μL,11.4mmol)和亞硝酸鈉(237mg,3.43mmol)。混合物在40℃受熱達23小時且使其冷卻。混合物用鹽酸(2M)酸化至pH 1，且水層用二乙基醚萃取(3 x)。結合的有機萃取液用水清洗、用無水硫酸鎂乾燥、過濾、蒸發。殘留的N,N-二甲基甲醯胺與甲苯共沸以得到標題化合物(79mg,40%)，其為黃色膠狀物。原始的水層用氯化鈉飽和及用二乙基醚萃取(3 x)，且結合的有機萃取液用水清洗、用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發。殘留的N,N-二甲基甲醯胺與甲苯共沸以得到標題化合物(22mg,11%)，其為黃色膠狀物。最終結合兩種膠狀物(101mg,51%).1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 3.76-3.93(m,4H),3.88(d,J=12.5Hz,2H),4.35(d,J=12.7Hz,2H),5.26(d,J=17.8Hz,1H),5.27(d,J=10.9Hz,1H),5.79(dd,J=17.4,10.9Hz,1H)。LCMS(m/z)195.2[M+Na],Tr=0.96分鐘。
化合物57e. 6-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,4]二氧-6-甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(68mg,0.128mmol)、6-乙烯基-[1,4]二氧-6-甲酸(22mg,0.128mmol)、三乙基胺(39mg,54μL,0.384mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(8mg,0.026mmol)的混合物在1,4-二(2mL)中通入氮氣冒泡而除氧達5分鐘及接著在氮下邊攪拌邊回暖至50℃。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(12mg,0.013mmol)，且混合物迴流達40分鐘及接著使其冷卻。懸浮液被過濾，且濾液被蒸發以得到粗製標題化合物，其直接用於下一步驟。LCMS(m/z)626.2[M+H],Tr=1.67分鐘。
化合物57
於氮下之粉末狀的4Å分子篩(~1g)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(88mg,0.256mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(63mg,0.512mmol)的二氯甲烷受攪拌混合物(38mL)中經由 注射泵添加粗製6-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,4]二氧-6-甲酸(0.128mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經2.5小時。原始含有粗製酸之燒瓶用二氯甲烷(1mL)清洗且加至反應混合物中，歷經約10分鐘。反應混合物被攪拌達1小時，且接著透過矽藻土過濾，及依序用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、飽和鹽水清洗，和接著用無水硫酸鈉乾燥、過濾和蒸發。殘留物藉由逆相製備級HPLC使用包含0.1%甲酸之1：9至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化，用二乙基醚研磨之後，得到標題化合物(6.5mg,8%共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.04(d,J=6.7Hz,3H),1.08(d,J=6.7Hz,3H),1.53-1.73(m,2H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.66(d,J=7.4Hz,3H),1.90-2.00(m,1H),2.10-2.28(m,2H),2.63-2.75(m,1H),3.57-3.65(m,1H),3.76-3.91(m,5H),4.13(d,J=12.5Hz,1H),4.38(d,J=12.7Hz,1H),4.38-4.46(m,1H),4.53(d,J=12.7Hz,1H),5.07(q,J=6.7Hz,1H),5.35(d,J=9.2Hz,1H),5.76-5.86(m,1H),6.30(d,J=16.5Hz,1H),6.49(d,J=16.5Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.68-7.73(m,2H),7.85(d,J=8.9Hz,1H),8.19(br s,1H),8.25(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)608.2[M+H],Tr=2.12分鐘。
實施例58，化合物58
化合物58a. (S)-4-異丙基-3-((S)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基)-唑啶-2-酮
於氮下和-78℃之(S)-4-異丙基-3-((E)-2-甲基-丁-2-烯醯基)-唑啶-2-酮(依據實施例29c所述之方法但使用氧氮酮的相對鏡像異構物予以製備)(4.44g,21mmol)的無水甲苯溶液(40mL)中逐滴添加雙(三甲基矽基)醯胺鈉的甲苯溶液(0.6M,54mL,32mmol)。當添加結束時，反應混合物被留置在-78℃再攪拌達30分鐘。緩慢添加氯甲基甲基醚(3.38g,42mmol)。在-60℃攪拌達30分鐘，及接著使溫度上升至0℃並攪拌達1小時。添加飽和氯化銨溶液(230mL)，且混合物被留置以在室溫攪拌達10分鐘。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，且結合的有機層用鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用Biotage KP-Sil 100g匣以1：0至9：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以得到標題產物(2.55g,48%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.80-1.00(m,6H),1.50(s,3H),2.25-2.45(m,1H),3.35(s,3H),3.46(d,J=8.7Hz,1H),4.16-4.23(m,2H), 4.28(明顯的t,J=8.2Hz,1H),4.45-4.60(m,1H),5.01(d,J=17.6Hz,1H),5.12(d,J=10.7Hz,1H),6.19(dd,J=17.6,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)255.3[M+H],Tr=2.58分鐘。
化合物58b. (S)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸
在0℃之(S)-4-異丙基-3-((R)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基)-唑啶-2-酮(1.5g,5.87mmol)的四氫呋喃溶液(30mL)和水(15mL)的受攪拌溶液中添加過氧化氫(30%溶液，3mL,29.35mmol)和氫氧化鋰單水合物(0.59g,11.75mmol)。反應混合物在0℃攪拌達3小時，接著用飽和偏二亞硫酸鈉處理，及逐滴添加鹽酸(10M)調整溶液的pH至1。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，且結合的有機層用鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用Biotage KP-Sil 50g匣以1：0至3：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以得到標題產物(0.546g,65%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.36(s,3H),3.42(s,3H),3.45(d,J=8.9Hz,1H),3.62(d,J=8.9Hz,1H),5.20-5.30(m,2H),6.01(dd,J=17.6,10.7Hz,1H),9.80-11.80(br.s,1H)。
化合物58c. (E)-(S)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸
於有置入[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(706mg,2mmol)、(S)-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸(290mg,2mmol)、三-(鄰-甲苯基)膦(610mg,2mmol)和N,N-二環己基-甲基-胺(0.85mL,4mmol)的玻璃瓶中添加乙腈(2mL)和1,4-二(6mL)。玻璃瓶用氮沖洗。添加乙酸鈀(II)(450mg,2mmol)。玻璃瓶被密封及用微波在130℃輻射達1小時。混合物接著用硫酸氫鉀的飽和溶液處理。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)，且結合的有機層用鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用Biotage KP-Sil 100g匣以1：0至41：9之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化以得到標題產物(0.176g,21%)，其為琥珀色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.45(s,9H),1.54(s,3H),1.57(d,J=6.5Hz,3H),3.47(s,3H),3.62(d,J=8.7Hz,1H),3.77(d,J=8.7Hz,1H),4.90-5.10(m,1H),6.60-6.85(m,2H),7.34(d,J=8.4Hz,1H),7.61(d,J=8.4Hz,1H),7.75(d,J=8.4Hz,1H),8.06-8.17(m,2H)。LCMS(m/z)415.3[M+H],Tr=2.11分鐘。
化合物58d. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲氧基甲基-2-甲基- 丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
於(E)-(S)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯酸(176mg,0.34mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)中添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(205mg,0.47mmol)、4-二甲基胺基吡啶(116mg,0.95mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(123mg,0.95mmol)和2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(164mg,0.47mmol)。反應混合物在室溫攪拌達18小時，接著用碳酸氫鈉的飽和溶液處理、用二氯甲烷萃取(2 x)，且結合的有機層用鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用Biotage KP-Sil 50g匣以9：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以得到標題產物(0.22g,78%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.85-1.10(m,6H),1.20-1.70(m,23H),2.05-2.20(m,1H),2.30-2.45(m,1H),3.44(s,3H),3.60-3.95(m,4H),4.15-4.32(m,1H),4.68-4.70(m,1H),4.90-5.05(m,2H),5.20-5.45(m,1H),6.10-6.28(m,1H),6.60-6.85(m,2H),7.10-7.20(m,1H),7.28(d,J=8.4Hz,1H),7.66-7.74(m, 2H),8.00(d,J=4.0Hz,1H),8.05(d,J=8.4Hz,1H)。LCMS(m/z)828.5[M+H],Tr=3.48分鐘。
化合物58
於(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-(S)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2-甲氧基甲基-2-甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(0.22g,0.265mmol)的四氫呋喃溶液(3mL)中添加鋅粉(190mg,2.92mmol)和乙酸銨(153mg,1.99mmol)的水溶液(1.5mL)。得到的混合物攪拌達24小時。混合物透過矽藻土墊過濾，且濾液用飽和硫酸氫鉀清洗。水層用乙酸乙酯萃取。結合的有機層用鹽水清洗、用無水硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發及接著與甲苯共蒸發以得到琥珀色油狀物，其用鹽酸的1,4-二溶液(4M,4mL)處理。攪拌達1小時之後，揮發物被蒸發以得到粗製固體物，其溶於無水的二氯甲烷(20mL)和無水的N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中。添加N,N-二異丙基乙基胺(66mg,0.515mmol)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(59mg,0.155mmol)。混合物被攪拌達1.5小時，接著添加水，且有機層透過相分離器玻璃料過 濾。有機濾液被蒸發及接著與甲苯共蒸發以得到琥珀色油狀物。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用Biotage KP-Sil 10g匣以9：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提，接著藉由逆相製備級HPLC以13：7至13：12之水/乙腈的梯度溶液沖提予以純化，歷經30分鐘，以得到標題化合物。
化合物58(2.83mg,4.8%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.02(d,J=6.7Hz,3H),1.08(d,J=6.7Hz,3H),1.48(s,3H),1.50-1.80(m,7H),1.91-2.03(m,1H),2.11-2.22(m,1H),2.24-2.34(m,1H),2.65-2.78(m,1H),3.39(s,3H),3.43(d,J=8.5Hz,1H),3.54-3.67(m,1H),3.99(d,J=8.5Hz,1H),4.40-4.50(m,1H),5.02-5.20(m,2H),5.30(d,J=8.9Hz,1H),5.82(q,J=7.1Hz,1H),6.31(d,J=16.5Hz,1H),6.64(d,J=16.5Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.2,1.5Hz,1H),7.79(s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)580.2[M+H],Tr=2.45分鐘。
實施例59，化合物59
化合物59a：
於冷卻至0℃之L-纈胺酸-d8(CAS Number：35045-72-8；C/D/N Isotopes Inc.)(1g,8mmol)的1M硫酸溶液(16ml,1M水溶液)中添加亞硝酸鈉(1.1g,16mmol)的水溶液(8ml)。於添加期間，維持溫度低於5℃，及混合物在此溫度攪拌整夜。溶液接著用硫酸銨飽和、用二乙基醚萃取(3x25ml)、用硫酸鈉乾燥和在減壓下蒸發提供標題化合物(0.68g,67%)，其為無色油狀物，其靜置結晶。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ無信號。LCMS(m/z)125.0[M-H],Tr=0.65分鐘。
化合物59b：
1d(866mg,2mmol)的二氯甲烷溶液(30mL)在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(667mg,3mmol)，及得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物 (LCMS(m/z)332.2/334.3[M+H],Tr=2.06分鐘)溶於無水的二氯甲烷(20mL)中和被冷卻至0℃。於此中添加59a(252mg,2.2mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(0.86mL,5mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1062mg,2.4mmol)。使反應回暖至室溫和攪拌達8小時。混合物被蒸發至乾，及殘留物溶於乙酸乙酯(100mL)和用10%檸檬酸(100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗。有機層用MgSO4乾燥，添加一體積當量的己烷，且此溶液透過5cm矽膠層過濾，矽膠層用50mL的乙酸乙酯/己烷混合物(1/1)清洗。所欲之產物用乙酸乙酯(100mL)清洗出來、在減壓下濃縮及與二氯甲烷共蒸餾。在高真空下乾燥達一天之後，分離出59b(878mg,定量產量)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 5.50-5.42(m,1H),5.03(d,J=12.1Hz,1H),4.85(d,J=11.9Hz,1H),4.16-4.10(m,1H),3.88-3.85(m,1H),3.75-3.41(m,2H),2.16-2.07(m,1H),2.00-1.83(m,2H),1.81-1.69(m,1H),1.32(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)440.1/442.1[M+H],Tr=2.32分鐘。
化合物59c：
於烘箱乾燥氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(344mg,1mmol)、4-二甲基胺基吡啶(128mg,1.05mmol)、Boc-保護的喹啉甲酸(192mg,0.50mmol)和無水的二氯甲烷(20mL)。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(0.26mL,1.50mmol)，且此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。經由注射器逐滴添加59b(331mg,0.75mmol)的無水二氯甲烷溶液(10mL)。在室溫攪拌達12小時之後，反應混合物被移至分離漏斗和用水清洗(20mL,添加10mL鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水清洗(20mL)和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供59c(391mg,97%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.28(d,J=8.5Hz,1H),7.97(s,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),7.81(d,J=8.5Hz,1H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),6.90-6.71(m,2H),5.49-5.34(m,2H),5.50-4.98(m,2H),4.87-4.79(m,2H),4.17-4.10(m,1H),4.90-4.80(m,2H),2.15-2.06(m,1H),1.99-1.85(m,2H),1.82- 1.72(m,1H),1.72-1.62(m,1H),1.58(d,J=5.8Hz,3H),1.52(d,J=7.1Hz,3H),1.47(s,9H),1.32(dd,J=13.9,6.9Hz,6H)。LCMS(m/z)806.2/808.1[M+H],Tr=2.82分鐘。
化合物59
於59c(390mg,0.48mmol)的四氫呋喃溶液(20mL)中添加氫氧化鋰(13mg,0.53mmol)的水溶液(10mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.55mL的1M水溶液，0.55mmol)，且反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集、在減壓下濃縮和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(10mL,40mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，且將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(276mg,0.73mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(312mg,2.42mmol)和二氯甲烷(200mL)之經氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(100ml)和鹽水(100mL)清洗、用硫酸 鎂乾燥、過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供59(137mg,51%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ 8.27(d,J=8.5Hz,1H),7.86(d,J=8.4Hz,1H),7.80(s,1H),7.64(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),6.56(d,J=16.3Hz,1H),6.38(d,J=16.3Hz,1H),5.82(q,J=7.3Hz,1H),5.11(q,J=6.7Hz,1H),4.45(dd,J=13.0,3.5Hz,1H),3.62(dd,J=11.8,2.8Hz,1H),2.72(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.40-2.65(m,1H),2.02-1.94(m,1H),1.77-1.68(m,2H),1.65(d,J=7.3Hz,3H),1.60(d,J=6.7Hz,3H),1.55(s,3H),1.44(s,3H)。LCMS(m/z)558.4[M+H],Tr=2.41。
實施例60，化合物60
化合物60a：
於冷卻至0℃之(2S,3R)-2-胺基-3-甲氧基丁酸(CAS Number：4144-02-9；Ark Pharm,Inc.)(1g,7.5mmol)的1M硫酸(15ml,1M水溶液)中添加亞硝酸鈉(1.0g,15mmol)的水溶液(8ml)。於添加期間，維持溫度低於5℃，及混合物在此溫度攪拌整夜。溶液接著用硫酸銨飽和、用二乙基醚萃取(5x25ml)、用硫酸鈉乾燥和在減壓下蒸發提供60a(0.27g,67%)，其為無色油狀物，其靜置結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 4.14(d,J=3.6Hz,1H),3.81(qd,J=6.4,3.6Hz,1H),3.41(s,3H),1.25(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)132.9[M-H],Tr=0.39分鐘。
化合物60b：
1d(517mg,1.19mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(398mg,1.79mmol)，及得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物(LCMS(m/z)332.2/334.3[M+H],Tr=2.06分鐘)溶於無水的二氯甲烷(20mL)和被冷卻至0℃。於此中添加60a(192mg,1.43mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(0.51mL,2.98 mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(633mg,1.43mmol)。使反應回暖至室溫和攪拌達8小時。混合物被蒸發至乾，及殘留物溶於乙酸乙酯(100mL)和用10%檸檬酸(100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗。有機層用MgSO4乾燥，添加一體積當量的己烷，且此溶液透過5cm矽膠層過濾，矽膠層用50mL的乙酸乙酯/己烷混合物(1/1)清洗。所欲之產物用乙酸乙酯(100mL)清洗出來、在減壓下濃縮及與二氯甲烷共蒸餾。60b(537mg，定量產量)在高真空下乾燥達一天之後被分離出來。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 5.53(q,J=6.9Hz,1H),5.10(d,J=12.1Hz,1H),4.92(d,J=12.2Hz,1H),3.96(d,J=2.6Hz,1H),3.94(dd,J=7.1,4.7Hz,1H),3.86(qd,J=6.4,2.5Hz,1H),3.81-3.60(m,2H),3.42(s,3H),2.34-2.14(m,1H),2.09-1.90(m,2H),1.87-1.76(m,1H),1.41(d,J=6.9Hz,3H),1.32(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)448.1/450.0[M+H],Tr=2.11分鐘。
化合物60c：
於烘箱乾燥經氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(172mg,0.5mmol)、4-二甲基胺基吡啶(64mg,0.50mmol)、N-Boc保護的(R,E)-4-(2-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)喹啉-7-基)-2,2二甲基丁-3-烯酸(96mg,0.25mmol)和無水的二氯甲烷(10mL)。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(0.13mL,0.75mmol)，且此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。經由注射器逐滴添加60b(168mg,0.38mmol)的無水二氯甲烷溶液(10mL)。在室溫攪拌達12小時之後，反應混合物被移至分離漏斗和用水清洗(20mL，添加10mL鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水清洗(20mL)和用硫酸鎂乾燥、過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供60c(149mg,73%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.35(d,J=8.6Hz,1H),8.07-8.01(m,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),7.88(d,J=8.4Hz,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),6.98-6.77(m,2H),5.48(q,J=6.5,6.1Hz,1H),5.20(d,J=4.0Hz,1H),5.06(d,J=12.1Hz,1H),4.88(d,J=12.1Hz,1H),4.25-4.15(m,1H),3.99-3.85(m,2H),3.80-3.55(m,2H),3.46(s,3H),2.20-2.09(m,1H),2.07-1.94(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.80-1.71(m,1H),1.68-1.64(m,6H),1.59(d,J=7.1Hz,3H),1.54(s,9H),1.37(d,J=7.0Hz,3H),1.29(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)814.1/816.1[M+H],Tr=2.64分鐘。
化合物60
於60c(139mg,0.17mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)中添加氫氧化鋰(4.5mg,0.19mmol)的水溶液(5mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.20mL的1M水溶液，0.20mmol)，且反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集、在減壓下濃縮和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(5mL,20mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，且將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(98mg,0.26mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(110mg,0.86mmol)和二氯甲烷(100mL)之經氬氣沖洗之燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(50ml)和鹽水(50mL)清洗、用硫酸鎂乾燥、過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-60%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供60(32mg,33%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.24(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.4Hz,1H),7.81(s,1H),7.61(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.54(d,J=16.3Hz,1H),6.37(d,J=16.3Hz,1H),5.78(q,J=7.2Hz,1H),5.44(d,J=8.2Hz,1H),5.08(q,J=6.7Hz,1H),4.41(dd,J=13.5,3.4Hz,1H),3.77-3.63(m,1H),3.59(dd,J=11.8,2.9Hz,1H),3.41(s,3H),2.68(td,J=12.9,3.1Hz,1H),2.31-2.24(m,1H),1.99-1.91(m,1H),1.72-1.64(m,2H),1.61(d,J=7.2Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.53(s,3H),1.42(s,3H),1.26(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)566.3[M+H],Tr=2.42分鐘。
實施例61，化合物61
化合物61a
於1d(500.3mg,1.16mmol)中添加HCl溶液(1.2mL,4M的二溶液，1M)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由的二肽，其為非晶形淡黃色固體 物。
於L-(+)-乳酸(252.3mg,2.80mmol)的DMF溶液(10mL,0.3M)中依序添加TMSCl(0.35mL,2.77mmol)、i-Pr2NEt(1.0mL,5.74mmol)。3小時之後，添加HATU(1.08g,2.84mmol)。10分鐘之後，添加自由二肽的DMF溶液(11.5mL,1M)。60分鐘之後，反應在真空下濃縮至5mL、用EtOAc(10mL)稀釋和用水清洗(10mL)。水層用EtOAc萃取(2×10mL)，且結合的有機液用5% LiCl水溶液(5×20mL)和鹽水(20mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮。化合物經由管柱層析術予以純化(0-100% EtOAc/己烷)以提供61a(346.6g,74%)，其為白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.22(d,J=8.1Hz,1H),5.36(p,J=6.9Hz,1H),4.95(d,J=11.9Hz,1H),4.72(d,J=11.9Hz,1H),4.34(d,J=12.1Hz,1H),4.23(q,J=6.8Hz,1H),3.70(m,1H),3.16(m,1H),2.91(m,1H),2.18(m,1H),1.94(m,1H),1.72(m,2H),1.49(dd,J=7.1,3.4Hz,2H),1.43(t,J=7.0Hz,3H),1.34(d,J=6.9Hz,3H)。LCMS(m/z)477.85[M+H]。
化合物61b
於0℃和Ar下之N-Boc(R,E)-4-(2-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)喹啉-7-基)-2,2-二甲基丁-3-烯酸(150.9mg,0.390mmol)、61a(191.6mg,0.468mmol)及DMAP(115.3mg,0.936mmol)的DCM溶液(2.2mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.16mL,0.936mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(278.6mg,0.780mmol)。反應被回暖至室溫，及在60分鐘之後，用DCM(10mL)稀釋、用飽和NH4Cl(aq)(15mL)清洗。水層用DCM萃取(2×15mL)。結合的有機液用H2O(50mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮。化合物經由管柱層析術予以純化(0-75% EtOAc/己烷)以提供61b(214.8mg,71%)，其為黃色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.11(d,J=7.4Hz,1H),8.04(m,2H),7.72(d,J=8.8Hz,1H),7.65(d,J=8.4Hz,1H),6.70(dd,J=20.5,10.7Hz,4H),5.22(m,2H),4.94(dd,J=11.8,8.2Hz,3H),4.71(d,J=11.9Hz,2H),4.32(m,1H),3.68(m,2H),2.82(m,3H),2.16(m,1H),1.89(m,1H),1.68(m,2H),1.54(s,6H),1.51(d,J=7.5Hz,6H),1.47(s,9H),1.42(d,J=6.8Hz,3H),1.29(m,3H)..LCMS(m/z)770.17[M+H]。
化合物61
於0℃之61b(214.8mg,0.279mmol)的THF溶液(2.8mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(aq)(0.93mL,0.249mmol)。40分鐘之後，反應用1M HCl(aq)(0.29mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋、用水(3×5mL)和鹽水(10mL)清洗用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供黃色泡沫物(190.1mg)。粗製材料溶於二(1mL)，及添加HCl溶液(3mL,4M in二)。18小時之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物(175.3mg)。粗製物質的DMF溶液(5mL)用DCM(750mL,0.0003M)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.30mL,1.62mmol)、HATU(151.9mg,0.400mmol)。20分鐘之後，混合物用5% LiCl(aq)(2×500mL)和鹽水(500mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮成橙色殘留物。雜質用DCM/tBME研磨以提供61(68.0mg,47%)，其為黃色殘留物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.98(s,1H),8.25(s,1H),8.11(s,1H),7.74(d,J=7.0Hz,2H),7.45(s,2H),6.69(d,J=15.4Hz,2H),6.43(d,J=16.1Hz,1H),5.80(m,1H),5.41(m,1H),4.57(d,J=8.9Hz,2H),4.15(s,1H),3.77(m,1H),3.66(m,4H),3.55(m,2H),3.08(m,2H),2.58(m,1H),1.97(d,J=14.1Hz,1H), 1.56(m,6H),1.44(m,6H).。LCMS(m/z)522.23[M+H]。Rt=4.75分鐘。
實施例62，化合物62
化合物62a
於L-(-)-蘋果酸(10g,74.6mol)和對-甲苯磺酸單水合物(172.5mg,7.46mmol)中添加2,2-二甲氧基丙烷(75mL,1M)。18小時之後，添加水(50mL)和NaHCO3(72.3mg)，及混合物用DCM萃取(3×100mL)。結合的有機液用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮成黃色油狀物。物質經由以Et2O/己烷結晶而予以純化以提供62a(11.2g,88%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 4.72(dd,J=6.6,3.9Hz,1H),3.00(dd,J=17.3,3.9Hz,1H),2.86(dd,J=17.3,6.6Hz,1H),1.63(s,3H),1.57(s,3H)。
化合物62b
於0℃之62a(385.9g,2.21mmol)的DCM溶液(22mL,0.1M)中依序添加草醯氯(0.23mL,2.66mmol)和1滴DMF。反應被回暖至室溫和攪拌達60分鐘。反應接著在真空中濃縮以提供淡黃色針狀物。粗製物溶於甲苯(22mL,0.1M)，及添加Pd/BaSO4(111.9mg)。混合物用H2沖洗及迴流達3小時。反應接著冷卻至室溫、透過矽藻土過濾、用EtOAc沖洗、且在真空中濃縮以提供62b(160mg,47%)，其為黃色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.78(s,1H),4.79(dd,J=7.0,3.5Hz,1H),3.09(dd,J=18.3,3.5Hz,1H),2.92(dd,J=18.3,7.0Hz,1H),1.63(s,3H),1.58(s,3H)。
化合物62c
於-15℃之62b(1g,5.55mmol)的DCM溶液(11mL,0.5M)中添加DAST(0.88mL,6.66mmol)，及使反應緩慢回暖至室溫。14小時之後，反應用冷飽和NaHCO3(aq)(10mL)緩慢驟冷，分離相，及水層用DCM萃取(2×15mL)。結合的有機液用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供62c(956.2mg,92%)，其為黃色-橙色油狀物。1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 6.01(tdd,J=56.1,5.4,4.1Hz,1H),4.53(ddd,J=8.4,4.0,0.8Hz,1H),2.52-2.36(m,1H),2.32-2.15(m,1H),1.65-1.60(m,3H),1.56-1.53(m,3H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-117.10--119.71(m)。
化合物62d
於62c(956.2mg,5.31mmol)的THF溶液(5mL,1M)添加1M HCl(aq)(5mL,1M)。18小時之後，反應用NaCl飽和，及用Et2O(2×20mL)和THF(15mL)萃取。結合的有機液用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供62d(654.8mg,88%)，其為透明油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 6.06(tdd,J=56.4,5.5,4.2Hz,1H),4.48-4.39(m,1H),2.51-2.33(m,1H),2.33-2.12(m,1H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-117.40--120.28(m)。
化合物62e
於1d(2.75g,6.37mmol)的二溶液(2mL)添加HCl溶液(6.5mL,25.5mmol,4M的二溶液)。在攪拌 達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽，其為非晶形淡黃色固體物。
於62d(654.8mg,4.67mmol)的DMF溶液(16mL,0.3M)依序添加TMSCl(0.59mL,4.67mmol)、i-Pr2NEt(2.0mL,11.7mmol)。2小時之後，依序添加自由二肽的DMF溶液(6mL,1M)、i-Pr2NEt(4.0mL,23.4mmol)和HATU(2.66g,7.01mmol)。45分鐘之後，反應在真空下濃縮至5mL、用飽和NaHCO3(aq)(50mL)稀釋和用EtOAc萃取(3×50mL)。結合的有機液用5% LiCl(aq)(4×50mL)和鹽水(100mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮。化合物經由管柱層析術予以純化(50-100% EtOAc/己烷)以提供62e(1.24g,59%)，其為棕褐色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ6.06(m,1H),5.36(p,J=7.2Hz,1H),4.95(d,J=12.0Hz,1H),4.72(d,J=11.8Hz,1H),4.32(m,2H),3.85(m,1H),3.70(m,1H),2.94(m,1H),2.39(m,1H),2.16(m,2H),1.94(m,1H),1.74(m,2H),1.34(d,J=6.9Hz,3H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-117.56(dt,J=56.4,16.5Hz)。LCMS(m/z)456.03[M+H]。
化合物62f
於Ar下之N-Boc(R,E)-4-(2-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)喹啉-7-基)-2,2-二甲基丁-3-烯酸(98.7mg,0.220mmol)、62e(115.3mg,0.264mmol)及DMAP(66.1mg,0.528mmol)的DCM溶液(2.2mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.10mL,0.528mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(115.9mg,0.330mmol)。60分鐘之後，反應用DCM(10mL)稀釋、用飽和NH4Cl(aq)(10mL)清洗。水層用DCM(10mL)萃取。結合的有機液用H2O(15mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮。化合物經由管柱層析術予以純化(20-100% EtOAc/己烷)以提供62f(159.0mg,89%)，其為淡黃色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.02(d,J=15.5Hz,1H),7.78-7.60(m,3H),7.18(s,1H),6.71(m,2H),5.93(tt,J=55.9,4.4Hz,1H),5.37(dd,J=7.5,4.3Hz,1H),5.23(m,1H),4.91(d,J=11.9Hz,1H),4.69(d,J=11.9Hz,1H),4.25(d,J=9.7Hz,1H),3.76(d,J=11.0Hz,1H),3.64(m,1H),2.84(m 1H),2.48(m,1H),2.15(m,2H),1.88(dt,J=3.8,2.8Hz,2H),1.67(dq,J=12.4,6.4Hz,6H),1.55(d,J=7.0Hz,9H),1.44(s,12H).。19F NMR(376MHz,cdcl3)δ-115.88(ddt,J=55.4,33.0,17.6Hz)。LCMS(m/z) 822.19[M+H]。
化合物62
於0℃之62f(158.0mg,0.194mmol)的THF溶液(2.0mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(aq)(0.65mL,0.194mmol)。20分鐘之後，反應用1M HCl(aq)(0.2mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(20mL)稀釋、用水(3×5mL)和鹽水(5mL)清洗、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供黃色殘留物(153.9mg)。粗製物質溶於二(1mL)，及添加HCl溶液(1mL,4M的二溶液)。2小時之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物(202.5mg)。粗製物質的DMF溶液(2mL,0.1M)用DCM(650mL,0.0003M)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.17mL,0.982mmol)、HATU(89.9mg,0.232mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(2×300mL)、飽和NaHCO3(300mL)和鹽水(300mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮。粗製物質藉由製備級HPLC予以純化(Gemini,30-90% MeCN/H2O)以提供62(39.2mg,36%)，其為灰白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.02(s,1H),8.09(d,J=18.2Hz,2H),7.76(s,1H),7.45(s,1H),6.70(d,J=16.0Hz,2H),6.43(d,J=7.9Hz, 1H),6.30(d,J=15.8Hz,1H),5.99(d,J=55.2Hz,1H),5.74(s,1H),5.48(s,1H),5.23(s,1H),5.11(s,1H),4.92(s,1H),4.56(d,J=12.9Hz,1H),3.55(m,2H),2.58(t,J=11.7Hz,2H),2.40(m,4H),1.67(m,6H),1.58(m,5H),1.49(m,9H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-117.00(ddt,J=61.8,56.0,14.9Hz)。LCMS(m/z)690.33[M+H]。Tr=5.178分鐘。
實施例63，化合物63
化合物63a
於0℃之(S)-2-胺基-2-環戊基乙酸(1g,6.98mmol)的1M H2SO4溶液(14mL,0.5M)中緩慢添加2M NaNO2(aq)(11.5mL,10.5mmol)，及反應被回暖至室溫。48小時之後，反應被冷卻回到0℃，加入更多的2M NaNO2(10mL,9.11mmol)，及反應被回暖至室溫。3天之後，反應用EtOAc萃取(3×50mL)、用Na2SO4乾燥、且在真空中濃縮以提供63a(925mg,83%)，其為白色固體物。 1H NMR(400MHz,DMSO)：δ 3.79(d,J=5.9Hz,1H),2.18-2.04(m,1H),1.63-1.33(m,8H)。
化合物63b
於1d(4g,9.24mmol)的二溶液(5mL)中添加HCl溶液(34mL,0.25M,4M的二溶液)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽(3.69g)，其為非晶形淡黃色固體物。於0℃之63a(501.5mg,3.48mmol)、二肽(1.28g,3.48mmol)及i-Pr2NEt(0.61mL,3.48mmol)的DCM溶液(35mL,0.05M)中添加(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1.25g,4.17mmol)，及反應被回暖至室溫。24小時之後，反應在真空下濃縮。殘留物用EtOAc(200mL)稀釋、用10%檸檬酸(2×100mL)、飽和NaHCO3(2×100mL)和鹽水(200mL)清洗、用Na2SO4乾燥、且在真空中濃縮。藉由配有ELSD之管柱層析術的純化(0-100% EtOAc/己烷)提供63b(458.3mg,20%)，其為金橙色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 6.95(s,1H),5.35(p,J=6.8Hz,1H),4.94(d,J=12.0Hz,1H),4.69(d,J=12.0Hz,1H),4.30(d,J=10.2Hz,1H),4.07(d,J=4.7Hz,1H),3.69(d,J=7.0Hz,1H),2.92(m, 1H),2.20(m,1H),1.91(m,1H),1.72(m,3H),1.55(m,8H),1.32(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)458.20[M+H]。
化合物63c
於39a(636mg,1.81mmol)和48f(286mg,1.81mmol)的二溶液(14.5mL,0.125M)中添加乙酸鈀(II)(61.5mg,0.272mmol)、三(2-甲基苯基)膦(168mg,0.543mmol)、三乙基胺(0.71mL,5.43mmol)。混合物在微波反應器內受熱至100℃達60分鐘。反應透過矽藻土過濾、用乙酸乙酯沖洗、且在真空中濃縮。粗製物質被懸浮於Et2O(15mL)和用飽和NaHCO3(aq)萃取(9×30mL)。結合的水層用1M HCl(aq)酸化至~pH 4、用EtOAc萃取(3×500mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供標題化合物(457mg,59%)，其為黃色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.16(m,2H),7.78(s,1H),7.68(s,1H),7.42(s,1H),6.90(d,J=16.6Hz,1H),6.38(m,2H),5.01(d,J=5.7Hz,2H),4.85(d,J=6.1Hz,1H),4.58(m,2H),3.95(m,2H),1.58(s,3H),1.43(s,9H)。LCMS(m/z)429.00[M+H]。
化合物63d
於Ar下之N-Boc保護的1,3-二甲酸63c(149.7mg,0.35mmol)、化合物63b(189.3mg,0.42mmol)及DMAP(104.5mg,0.84mmol)的DCM溶液(3.5mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.15mL,0.84mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(181.6mg,0.525mmol)。18小時之後，反應用DCM(10mL)稀釋、用水清洗(3×10mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮成黃色泡沫物，其經由管柱層析術予以純化(0-100% EtOAc/己烷)以提供63d(192.0mg,51%)，其為灰白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.04(s,1H),7.96(s,1H),7.71(s,1H),7.54(s,1H),7.29(d,J=7.4Hz,2H),6.74(d,J=16.7Hz,1H),6.17(d,J=16.2Hz,2H),5.35(d,J=4.3Hz,1H),5.32(d,J=7.1Hz,1H),5.16(d,J=5.9Hz,1H),4.97(d,J=6.1Hz,1H),4.92(d,J=12.0Hz,1H),4.75(d,J=5.9Hz,1H),4.68(m,3H),4.31(d,J=12.6Hz,1H),3.73(m,5H),2.85(m,2H),2.13(m,1H),1.76(m,4H),1.58(m,12H),1.45(s,9H),1.27(d,J=6.9Hz,3H)。LCMS(m/z)868.15[M+H]。
化合物63
於0℃之63c(192.0mg,0.219mmol)的THF溶液(2.2mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(aq)(0.55mL,0.6.56mmol)。反應藉由LCMS時時監測，有添加0.3M NaOH(aq)。3小時之後，顯示反應結束，且反應用1M HCl(aq)(0.34mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供黃色泡沫物(171.4mg)。粗製物質溶於二(1mL)，及添加HCl溶液(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物(193.1mg)。粗製物質的DMF溶液(1mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.22mL,1.23mmol)、HATU(113.8mg,0.295mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(3×100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮成橙色殘留物。粗製物質藉由管柱層析術予以純化(25-100% EtOAc/己烷)以提供63(46.0mg,26%)，其為帶白色之殘留物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.04(d,J=5.7Hz,1H),8.16-8.03(m,4H),7.72(d,J=8.4Hz,2H),7.48(d,J=8.3Hz,2H),7.24(s,1H),6.76(d,J=16.4Hz,2H),6.48(d,J=8.5Hz,1H),6.14(d,J=16.5Hz,1H),5.90-5.79(m,1H),5.15(m,2H), 5.00(d,J=5.8Hz,1H),4.81(d,J=6.0Hz,1H),4.57(m,4H),3.91(dd,J=44.8,11.5Hz,3H),3.56(m,2H),2.57(m,2H),2.43(m,2H),162。(m,28H)。LCMS(m/z)620.48[M+H]。Rt=2.60分鐘。
化合物64，實施例64
化合物64a
於0℃之2-胺基-2-環丁基乙酸(1g,6.04mmol)的1M H2SO4(aq)溶液(12mL,0.5M)中緩慢添加2M NaNO2(aq)(15mL,30.19mmol)，及使反應緩慢回暖至室溫。3天之後，1H NMR顯示無起始物質，及反應用EtOAc萃取(3×50mL)。結合的有機液用Na2SO4乾燥且在真空中濃縮以提供64a(495.0g,44%)，其為黃色固體物。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ 3.78(d,J=8.5Hz,1H),2.62(m,1H),1.94(m,4H)。
化合物64b
於氬氣下之N-Boc保護的喹啉基1,3-二甲酸63c(105.3mg,0.245mmol)及三肽(使用64a自針對1e所述之方法予以製備)(129.9mg,0.294mmol)和DMAP(73.5mg,0.588mmol)的DCM溶液(3mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.10mL,0.588mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(127.0mg,0.268mmol)。18小時之後，反應用DCM稀釋(10mL)、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮成棕色泡沫物，其經由管柱層析術予以純化(0-100% EtOAc/己烷)以提供64b(201.3mg,85%)其為灰白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.06(s,1H),7.98(s,1H),7.73(s,1H),7.54(s,1H),7.31(s,1H),6.76(m,1H),6.18(m,1H),5.32(m,2H),5.17(dd,J=17.5,5.9Hz,1H),4.90(m,2H),4.74(m,4H),4.38(m,1H),3.79(m,5H),3.00(m,1H),2.86(d,J=10.3Hz,1H),2.14(m,2H),1.88(m,8H),1.62(m,4H),1.53(s,3H),1.46(s,9H)。LCMS(m/z)856.16[M+H]。
化合物64
於0℃之64b(201.3mg,0.235mmol)的THF溶液(2.5mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(aq)(0.58mL,0.177mmol)。每小時藉由LCMS偵測反應，有添加0.3M NaOH(aq)。90分鐘之後，顯示反應結束，及反應用1M HCl(aq)(0.26mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供白色泡沫物。粗製物質溶於二(1mL)，及添加HCl溶液(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物。粗製物質的DMF溶液(0.5mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.22mL,1.26mmol)、HATU(119.6mg,0.302mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(aq)(3×100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮。粗製物質藉由製備級HPLC予以純化(Synergi Polar-RP,40-55% MeCN/H2O)以提供64(3.5mg,2%)，其為帶白色之殘留物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.48(s,1H),8.60(s,1H),8.52(s,1H),7.96(s,2H),7.66(d,J=8.6Hz,1H),6.85(d,J=16.7Hz,1H),6.35(d,J=16.6Hz,1H),6.20(d,J=8.6Hz,1H),5.53(m,1H),5.30(m,1H),4.94(dd,J=7.2,3.2Hz,2H),4.87(d,J=5.9Hz,1H),4.48(m,J=9.8Hz,3H), 4.06(d,J=11.2Hz,1H),3.94(d,J=11.1Hz,1H),3.76(m,2H),2.68(m,1H),2.54(m,1H),1.92(m,13H),1.64(m,6H)。LCMS(m/z)606.46[M+H]。Tr=3.57分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，10分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1% TFA修飾劑)。
實施例65，化合物65
化合物65a
於0℃之L-異白胺酸(2g,15.2mmol)的1M H2SO4(aq)溶液(30mL,0.5M)中緩慢添加2M NaNO2(aq)(11.5mL,22.9mmol)，及使反應緩慢回暖至室溫。7天之後，反應用(NH4)2SO4飽和、用EtOAc萃取(3×50 mL)、用Na2SO4乾燥、且在真空中濃縮以提供65a(1.25g,57%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ 3.77(d,J=4.9Hz,1H),1.66(m,1H),1.40(m,1H),1.15(1H),0.84(dd,J=15.0,7.2Hz,6H)。
化合物65b
於1d(5.88g,13.6mmol)中添加HCl溶液(13.6mL,1M,4M的二溶液)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽，其為非晶形淡黃色固體物。於0℃之65a(492.4mg,3.78mmol)、二肽(1.39g,3.78mmol)及i-Pr2NEt(0.66mL,3.787mmol)的DCM溶液(40mL,0.1M)中添加(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1.38g,4.54mmol)，及反應緩慢回暖至室溫。18小時之後，反應在真空下濃縮。殘留物用EtOAc(200mL)稀釋，用10%檸檬酸(200mL)、飽和NaHCO3(200mL)和鹽水(200mL)清洗，用Na2SO4乾燥，且在真空中濃縮。藉由配有ELSD之管柱層析術的純化(0-100% EtOAc/己烷)提供65b(856.8mg,51%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.18(s,1H),5.39(m,1H),4.95(d,J=11.9Hz,1H),4.71(d,J=11.9Hz,1H),4.34(m,1H),4.00(d,J=3.4Hz,1H),3.70(m,1H),2.93(m,1H),2.18(m 1H),1.89(m,1H),1.73(t,J=9.7Hz,2H),1.42(m,1H),1.34(d,J=6.9Hz,3H),1.24(t,J=8.7,5.6Hz,3H),1.19(m,1H),1.00(d,J=6.9Hz,3H)。LCMS(m/z)46.00[M+H]。
化合物65c
於Ar下之N-Boc保護的喹啉基1,3-二甲酸63c(74.9mg,0.175mmol)、65b(96.2mg,0.175mmol)及DMAP(52.7mg,0.420mmol)的DCM溶液(1.8mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.07mL,0.420mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(93.1mg,0.263mmol)。18小時之後，反應用DCM稀釋(10mL)、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供65c，其為黃色泡沫物(185.8mg,99%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.22(s,1H),8.06(d,J=8.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.73(d,J=8.4Hz,1H),7.31(d,J=8.4Hz,1H),6.75(d,J=16.7Hz,1H),6.55(s,2H),6.18(d,J=16.2Hz,1H),5.34(m,2H),4.98(m,2H),4.73(m,4H),4.33(d,J=14.7Hz,1H),3.85(dd,J=27.7,11.0Hz,2H),2.18(dt,J=15.3,8.4Hz,1H),1.53(d,J=6.6Hz,3H),1.47(s,9H),1.33(d,J=6.8Hz,2H),1.29(d,J=6.8Hz,3H),0.98(d,J=6.8Hz,3H),0.92(t,J=7.6Hz,3H)。LCMS(m/z)856.51[M+H]。
化合物65
在0℃之65c(150mg,0.175mmol)的THF溶液(1.8mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(aq)(0.44mL,0.131mmol)。每30分鐘藉由LCMS監測反應，有添加0.3M NaOH(aq)。2小時之後，顯示反應結束，及反應用1M HCl(aq)(0.40mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋，用水(3×5mL)和鹽水(5mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮以提供黃色泡沫物(116.8mg)。粗製物質溶於二(1mL)，及添加HCl溶液(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成橙色固體物。粗製物質的DMF溶液(1mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.22mL,1.26mmol)、HATU(305.2mg,0.803mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(aq)(3×100mL)、飽和NaHCO3(aq)(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮成橙色殘留物。粗製物質藉由管柱層析術予以純化(20-100% MeCN/H2O)。殘留物溶於EtOAc(20mL)和用5% LiCl清洗(10×10mL)以提供65(24.2mg,13%)其為帶白色之殘留物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.09(s,1H),8.11(s,1H),7.75(s,1H),7.52(s,1H),7.3(s,1H),6.73(d,J=16.5 Hz,2H),6.33(d,J=8.6Hz,1H),6.14(d,J=16.2Hz,1H),5.85(s,1H),5.11(s,2H),5.02(d,J=5.9Hz,1H),4.80(d,J=6.2Hz,1H),4.65(d,J=11.3Hz,1H),4.56(d,J=11.6Hz,2H),3.95(d,J=11.5Hz,1H),3.83(d,J=11.3Hz,1H),3.56(m,1H),2.56(m,1H),1.96(m,1H),1.61(m,10H),1.26(t,J=7.1Hz,3H),1.01(d,J=5.8Hz,3H)。LCMS(m/z)608.47[M+H]。Tr=3.67分鐘。
實施例66，化合物66
化合物66a
於1d(4g,9.24mmol)的二溶液(5mL)中添加HCl溶液(34mL,0.25M,4M的二溶液)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽(3.69g)，其為非晶形淡黃色固體物。在0℃之α-羥基環丙基乙酸(得自ArkPharm,Inc.)(493.5mg,4.09mmol)、二肽(1000mg,2.72mmol)及i-Pr2NEt(0.48mL,2.72mmol)的DCM溶 液(45mL,0.05M)中添加(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(981.1mg,3.27mmol)，和反應緩慢回暖至室溫。24小時之後，反應在真空下濃縮。殘留物用EtOAc(100mL)稀釋，用10%檸檬酸(5×50mL)、飽和NaHCO3(aq)(2 x50mL)和鹽水(100mL)清洗，用Na2SO4乾燥，且在真空中濃縮。藉由配有ELSD之管柱層析術的純化(0-100% EtOAc/己烷)提供66a(425.8mg,36%)，其為白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.14(m,1H),5.37(m,1H),4.95(d,J=12.0Hz,1H),4.72(dd,J=12.0,2.8Hz,1H),4.33(m,1H),3.86(m,1H),3.70(m,1H),3.48(dd,J=12.0,8.2Hz,1H),2.93(m,1H),2.86(d,J=10.3Hz,1H),2.19(m,1H),1.94(m,1H),1.73(m,2H),1.35(m,3H),1.09(m,1H),0.67(m,1H),0.54(m,3H)。LCMS(m/z)430.12[M+H]。
化合物66b
在Ar下之所指出之N-Boc喹啉基甲酸酯74c(242.1mg,0.451mmol)、66a(238.4mg,0.451mmol)及DMAP(132.3mg,1.08mmol)的DCM溶液(4.6mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.19mL,1.08mmol)、2-甲基-6-硝基 苯甲酸酐(235.6mg,0.676mmol)。18小時之後，反應用DCM(10mL)稀釋、用水清洗(3×10mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮成黃色泡沫物，其經由管柱層析術予以純化(0-100% EtOAc/己烷)以提供66b(313.7mg,66%)，其為淡金色油狀物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.05(d,J=8.3Hz,1H),7.97(s,1H),7.70(d,J=8.3Hz,1H),7.62(d,J=8.2Hz,1H),7.27(s,1H),7.08(m,1H),6.76(d,J=16.6Hz,1H),6.43(d,J=16.3Hz,1H),6.19(m,1H),5.25(m,J=15.1Hz,1H),4.92(m,2H),4.81(dd,J=14.1,6.4Hz,1H),4.70(dd,J=12.7,10.3Hz,1H),4.29(m,1H),3.66(m,3H),2.49(m,1H),2.09(m,2H),1.80(m,2H),1.68(m,4H),1.52(d,J=6.2Hz,3H),1.47(s,9H),1.29(m,3H),1.12(s,1H),0.57(m,4H)。LCMS(m/z)968.24[M+H]。
化合物66
在0℃之66b(313.7mg,0.324mmol)的THF溶液(3.2mL,0.1M)中添加0.3M NaOH(0.81mL,0.243mmol)。每30分鐘藉由LCMS監測反應，有添加0.3M NaOH。60分鐘之後，顯示反應結束，及反應用1M HCl(0.36mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋、用水清洗 (3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供淡黃色泡沫物(283.7mg)。粗製物質溶於二(1mL)中，及添加HCl溶液(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成淡黃色固體物(275.5mg)。粗製物質的DMF溶液(1.5mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.30mL,1.69mmol)、HATU(157.2mg,0.405mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(aq)(3×100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮。粗製物質藉由製備級HPLC予以純化(Synergi Polar-RP,35% MeCN/H2O)和凍乾以提供66(3.4mg,1%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.54(s,1H),8.10(s,1H),7.73(d,J=7.3Hz,2H),7.43(s,1H),6.72(dd,J=19.3,8.7Hz,1H),6.48(dd,J=24.9,16.4Hz,1H),5.89(m,1H),5.17(t,J=6.2Hz,1H),4.72(m,1H),4.57(m,1H),3.70(m,2H),3.52(m,2H),2.54(m,6H),2.02(m,3H),1.62(m,10H),1.30(m,3H),0.88(m,1H),0.60(m,4H)。LCMS(m/z)604.60[M+H]。Tr=2.23分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1% TFA修飾劑)。
化合物67，實施例67
化合物67a
在0℃之(S)-2-胺基-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(得自AstaTech,Inc.)(1.01g,6.35mmol)的1M H2SO4(aq)溶液(12.5mL,0.5M)中緩慢添加2M NaNO2(aq)(9.5mL,19.0mmol)，及使反應緩慢回暖至室溫。24小時之後，1H NMR顯示無起始物質，及反應用EtOAc萃取(3×50mL)。結合的有機液用Na2SO4乾燥、且在真空中濃縮以提供67a(868.8g,85%)，其為灰白色固體物。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ 3.84(m,2H),3.76(d,J=5.1Hz,1H),3.24(m,2H),1.81(m,1H),1.39(m,4H)。
化合物67b
於1d(5g,11.6mmol)的二溶液(5mL)中添加HCl 溶液(45mL,0.25M,4M的二溶液)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽(4.71g)，其為非晶形淡黃色固體物。
在0℃之67a(300.9mg,1.87mmol)、二肽(447.9mg,1.25mmol)及i-Pr2NEt(0.27mL,1.56mmol)的DCM溶液(16mL,0.1M)中添加(苯並三唑-1-(苯甲基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(827.9mg,1.87mmol)，及反應緩慢回暖至室溫。18小時之後，反應在真空下濃縮。殘留物用EtOAc(100mL)稀釋、用10%檸檬酸(3×100mL)、飽和NaHCO3(aq)(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用Na2SO4乾燥，且在真空中濃縮。藉由配有ELSD之管柱層析術的純化(0-100% EtOAc/己烷)提供67b(171.3mg,23%)，其為灰白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 7.15(d,J=7.9Hz,1H),5.38(p,J=6.8Hz,1H),4.95(d,J=11.9Hz,1H),4.71(d,J=11.9Hz,1H),4.31(d,J=14.2Hz,1H),3.99(m,3H),3.94(d,J=3.8Hz,1H),3.70(m,1H),3.39(m,2H),2.94(m,1H),2.19(m,1H),1.98(m,2H),1.75(dd,J=19.3,10.0Hz,2H),1.64(ddd,J=24.9,12.7,4.6Hz,2H),1.55(t,J=8.4Hz,2H),1.39(m,1H),1.33(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)474.26[M+H]。
化合物67c
在Ar下之(R,E)-4-(2-(1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)喹啉-7-基)-2,2-二甲基丁-3-烯酸(136.9mg,0.361mmol)、67b(171.3mg,0.361mmol)及DMAP(106.1mg,866mmol)的DCM溶液(3.5mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.15mL,866mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(189.2mg,0.541mmol)。2.5小時之後，添加更多的2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(50.8)。另一小時之後，反應用DCM(10mL)稀釋、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供67c，其為灰白色泡沫物(324.4mg,90%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.22(d,J=5.9Hz,2H),8.05(d,J=8.3Hz,1H),8.02(s,1H),7.71(s,1H),7.66(d,J=8.8Hz,1H),7.28(s,1H),7.12(s,1H),6.70(d,J=14.1Hz,1H),6.52(d,J=6.4Hz,2H),6.22(s,1H),5.14(d,J=3.7Hz,1H),4.94(m,2H),4.70(d,J=12.1Hz,1H),3.96(s,2H),3.73(m,1H),3.37(t,J=12.1Hz,2H),2.29(m,1H),2.19(m,1H),1.89(m,1H),1.57(d,J=6.1Hz,6H),1.52(m,6H),1.48(m,15H),1.28(d,J=6.7Hz,3H)。LCMS(m/z)840.67[M+H]。
化合物67
在0℃之67c(273.5mg,0.325mmol)的THF溶液(3.4mL,0.1M)中添加0.3M NaOH水溶液(8.2mL,0.244mmol)。每小時藉由LCMS偵測反應，有添加0.3M NaOH水溶液。2小時之後，顯示反應結束，及反應用1M HCl水溶液(0.77mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋，用水(3×5mL)和鹽水(5mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮以提供黃色泡沫物(251.0mg)。粗製物質溶於二(1mL)中，及添加HCl(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物(266.8mg)。粗製物質的DMF溶液(1mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt(0.28mL,1.63mmol)、HATU(148.9g,0.325mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl水溶液(3×100mL)、飽和NaHCO3(aq)(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮成橙色殘留物。粗製物質藉由管柱層析術予以純化(25-100% EtOAc/己烷)以提供67(38.4mg,18%)其為淡黃色殘留物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.07(s,1H),8.13(d,J=7.1Hz,1H),8.05(s,1H),7.74(d,J=8.1Hz,1H),7.47(d,J=7.4Hz,1H),7.28(s,1H),6.65(d,J=16.0Hz,1H),6.43-6.26(m,1H),5.79(m,1H),5.36(m,1H),5.23(m,1H),5.11(m,1H), 4.99(d,J=7.6Hz,1H),4.54(dd,J=13.5,2.5Hz,1H),3.96(d,J=11.1Hz,2H),3.84(dd,J=33.2,14.1Hz,1H),3.64(d,J=11.9Hz,1H),3.51(t,J=11.5Hz,1H),3.33(m,3H),2.57(td,J=13.1,2.5Hz,1H),2.43(d,J=14.1Hz,1H),2.33(m,1H),2.21(m,1H),1.96(d,J=12.9Hz,1H),1.70(m,4H),1.63(s,6H),1.60(m,6H),1.53(s,3H),1.48(s,2H),1.44(s,3H)。LCMS(m/z)592.37[M+H]。Tr=2.45分鐘。
化合物68
化合物68a
在0℃之2-胺基-3-氟丁酸(得自Fluorochem,Ltd.)(509.4mg,4.13mmol)的1M H2SO4(aq)溶液(8.5mL,0.5M)中緩慢添加2M NaNO2(aq)(6.0mL,12.4mmol)，及使反應緩慢回暖至室溫。24小時之後，1H NMR顯示微量起始物質，及反應用EtOAc萃取(3×25mL)。結合的有機液用Na2SO4乾燥、且在真空中濃縮以提供68a(437.2g,87%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,DMSO)：δ 5.07-4.65(m,1H),4.07(ddd,J=33.7,23.1,3.1Hz,1H),1.28(ddd,J=24.7,18.4,6.4Hz,3H)。19F NMR(376MHz,DMSO)：δ-180.63(dqd,J=48.5,24.3,14.9Hz),-186.54(ddq,J=48.3,31.5,24.1Hz)。
化合物68b
於1d(5g,11.6mmol)的二溶液(5mL)中添加HCl溶液(45mL,0.25M,4M的二溶液)。在攪拌達18小時之後，反應在真空下濃縮以提供自由二肽(4.71g)，其為非晶形淡黃色固體物。在0℃之68a(225.3mg,1.84mmol)、二肽(671.2mg,1.84mmol)及i-Pr2NEt(0.32mL,1.84mmol)的DCM溶液(20mL,0.1M)中添加(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1.2130g,2.76mmol)，及反應緩慢回暖至室溫。18小時之後，反應在真空下濃縮。殘留物用EtOAc(100mL)稀釋，用10%檸檬酸(3×100mL)、飽和NaHCO3(aq)(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用Na2SO4乾燥，且在真空中濃縮。藉由配有ELSD之管柱層析術的純化(0-100% EtOAc/己烷)提供68b(318.9mg,32%)，其為白色泡沫物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 5.39(m,1H),5.07(m 1H),4.95(d,J=11.9Hz,1H), 4.70(dd,J=11.9,4.2Hz,1H),4.31(m,1H),4.10(ddd,J=13.9,10.0,5.5Hz,1H),3.70(d,J=6.4Hz,1H),2.91(m,1H),2.87(d,J=10.3Hz,1H),2.20(m,1H),1.91(m,1H),1.72(m,1H),1.36(m,8H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)：δ-181.98--182.68(m),-186.38--187.09(m),-187.09--187.99(m)。LCMS(m/z)437.82[M+H]。
化合物68c
在Ar下之所指出之N-Boc-喹啉基甲酸酯(211.3mg,0.538mmol)、68b(235.0mg,0.538mmol)及DMAP(156.9mg,1.29mmol)的DCM溶液(5.4mL,0.1M)中依序添加i-Pr2NEt(0.23mL,1.29mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(279.5mg,0.807mmol)。18小時之後，反應用DCM(15mL)稀釋、用水清洗(3×5mL)、用MgSO4乾燥、且在真空中濃縮以提供68c，其為淡黃色泡沫物(455.7mg,90%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.10(d,J=8.7Hz,1H),8.03(m,1H),7.68(d,J=21.0Hz,2H),7.27(s,1H),6.74(d,J=7.5Hz,2H),6.21(m,1H),5.27(d,J=15.8Hz,2H),5.12(m,1H),4.93(d,J=12.0Hz,1H),4.70(dd,J=11.9,2.9 Hz,1H),4.28(m,1H),3.69(m,1H),2.86(d,J=10.2Hz,1H),2.65(d,J=9.3Hz,1H),2.16(M,1H),1.89(M,1H),1.63(s,2H),1.61(d,J=3.7Hz,3H),1.54(d,J=10.1Hz,9H),1.47(s,10H),1.29(m,8H)。
化合物68
在0℃之68c(455.7mg,0.567mmol)的THF溶液(5.4mL,0.1M)中添加0.3M NaOH水溶液(1.3mL,0.426mmol)。每小時藉由LCMS偵測反應，有添加0.3M NaOH水溶液。3小時之後，顯示反應結束，及反應用1M HCl水溶液(0.75mL)驟冷至~pH 4。混合物接著用EtOAc(15mL)稀釋，用水(3×5mL)和鹽水(2×5mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮以提供淡黃色泡沫物(388.7mg)。粗製物質溶於二(1.5mL)中，及添加HCl溶液(3mL,4M的二溶液)。60分鐘之後，懸浮液在真空中濃縮成黃色固體物(464.1mg)。粗製物質的DMF溶液(1.5mL)用DCM(100mL)稀釋，及依序添加i-Pr2NEt((0.51mL,2.90mmol)、HATU(265.6mg,0.695mmol)。30分鐘之後，混合物用5% LiCl(aq)(3×100mL)、飽和NaHCO3(aq)(100mL)和鹽水(100mL)清洗，用MgSO4乾燥，且在真空中濃縮成 橙色殘留物。粗製物質藉由製備級HPLC予以純化(Synergi Polar-RP,50% MeCN/H2O)和凍乾以提供68(25.3mg,7%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.01(d,J=9.8Hz,1H),8.22(s,1H),8.10(s,1H),7.74(d,J=8.2Hz,1H),7.46(d,J=7.6Hz,1H),6.97(m,1H),6.70(m,2H),6.48(d,J=15.7Hz,1H),5.86(m,1H),5.37(m,1H),5.18(m,1H),4.55(d,J=11.9Hz,1H),3.83(m,1H),3.57(m,1H),3.27(m,1H),2.52(m,1H),1.95(m,1H),1.68(d,J=22.6Hz,6H),1.59(s,61H),1.55(s,2H),1.48(s,6H),1.43-1.21(m,3H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-184.47--185.27(m),-187.78--188.41(m).LCMS(m/z)554.42[M+H]。Tr=2.49。
實施例69，化合物69
化合物69a：
自18e(192mg,0.50mmol)開始，依序經N-Boc胺保護、用NaOH/THF/水水解酯、用1N HCl酸化及濃縮成粗製的殘留物而以定量產量得到中間體羧酸。得到的物質直接進行醯胺形成，其中2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(344mg,1mmol)、4-二甲基胺基吡啶(128mg,1.05mmol)及N-Boc保護的異喹啉基酸在無水的二氯甲烷(20mL)中攪拌。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(0.26mL,1.50mmol)，及此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。在針對實施例58所述之程序之後接著，在無水的二氯甲烷(10mL)中逐滴添加1e(331mg,0.75mmol)。在室溫攪拌達12小時之後，反應混合物被移至分離漏斗和用水清洗(20mL,添加10mL的鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(20mL)清洗和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供69a(391mg,97%)，其蒸發之後為白色固體物。 LCMS(m/z)798.1[M+H],Tr=2.82分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
化合物69
於69a(390mg,0.48mmol)的四氫呋喃溶液(20mL)中添加氫氧化鋰(13mg,0.53mmol)的水溶液(10mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.55mL的1M水溶液，0.55mmol)，和反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集、在減壓下濃縮和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(10mL,40mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，及將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(276mg,0.73mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(312mg,2.42mmol)和二氯甲烷(200mL)之氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(100ml)和鹽水(100mL)清洗，用硫酸鎂 乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供69(4mg,3%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ 9.12(s,1H),7.93(d,J=6.4Hz,1H),7.60,(s,1H),7.43(s,1H),7.27(m,1H),7.03(d,J=12Hz,1H),6.83(d,J=12,1H),5.65(d,J=3Hz,1H),4.96(m,2H),4.30(d,J=9.3Hz,1H),3.21(m,1H),2.91(bm,1H),2.32(m,1H),1.94-1.75(cm,3H),1.64(s,3H),1.62-1.48(m,4H),1.46-1.35(m,2H),1.01(d,J=6.7Hz,3H),0.91(d,J=6.7Hz,3H)。LCMS(m/z)550.4[M+H],Tr=1.81分鐘。
實施例70，化合物70
化合物70a：
於冷卻至0℃之3,3-二甲基丁酸(1g,7.5mmol)的1M硫酸溶液(15ml,1M水溶液)中添加亞硝酸鈉(1.0g,15mmol)的水溶液(8ml)。於添加期間，維持溫度低於5℃，及混合物在此溫度攪拌整夜。溶液接著用硫酸銨飽和、用 二乙基醚萃取(5x25ml)、用硫酸鈉乾燥和在減壓下蒸發提供標題化合物(0.27g,67%)，其為無色油狀物，其靜置結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 3.41(s,1H),1.25(s,9H)。LCMS(m/z)133.2[M+H],Tr=0.39分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
化合物70b：
1d(517mg,1.19mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(398mg,1.79mmol)，及得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物(LCMS(m/z)332.2/334.3[M+H],Tr=2.06分鐘)溶於無水的二氯甲烷(20mL)和被冷卻至0℃。於此中添加70a(192mg,1.43mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(0.51mL,2.98mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(633mg,1.43mmol)。使反應回暖至室溫和攪拌達8小時。混合物被蒸發至乾，及殘留物溶於乙酸乙酯(100mL) 中，和用10%檸檬酸(100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和鹽水(100mL)清洗。有機層用MgSO4乾燥，添加一體積當量的己烷，且此溶液透過5cm矽膠層過濾，矽膠層用50mL的乙酸乙酯/己烷混合物(1/1)清洗。所欲之產物用乙酸乙酯(100mL)清洗出來，在減壓下濃縮及與二氯甲烷共蒸餾。70b化合物(537mg，定量產量)在高真空下乾燥達一天之後被分離出來。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 5.52(q,J=6.9Hz,1H),5.11(d,J=12.1Hz,1H),4.91(d,J=12.2Hz,1H),3.94(d,J=2.6Hz,1H),3.84(dd,J=7.1,4.7Hz,1H),3.84(m,1H),3.80-3.58(m,2H),3.41(s,3H),2.33-2.13(m,1H),2.09-1.92(m,2H),1.86-1.75(m,1H),1.42(d,J=6.9Hz,3H),1.32(s,9H)。LCMS(m/z)446.0[M+H],Tr=2.11分鐘。
化合物70c
於烘箱乾燥經氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(172mg,0.5mmol)、4-二甲基胺基吡啶(64mg,0.50mmol)、所指出之N-Boc-喹啉基甲酸酯(96mg,0.25 mmol)和無水的二氯甲烷(10mL)。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(0.13mL,0.75mmol)，和此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。經由注射器逐滴添加70b(168mg,0.38mmol)的無水二氯甲烷溶液(10mL)。在室溫攪拌達12小時之後，反應混合物被移至分離漏斗和用水清洗(20mL，添加10mL的鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(20mL)清洗和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供70c(149mg,73%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.35(d,J=8.6Hz,1H),8.07-8.01(m,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),7.88(d,J=8.4Hz,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),6.98-6.77(m,2H),5.48(q,J=6.5,6.1Hz,1H),5.20(d,J=4.0Hz,1H),5.06(d,J=12.1Hz,1H),4.88(d,J=12.1Hz,1H),4.25-4.15(m,1H),3.99-3.85(m,2H),3.80-3.55(m,2H),3.46(s,3H),2.20-2.09(m,1H),2.07-1.94(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.80-1.71(m,1H),1.68-1.64(m,6H),1.59(d,J=7.1Hz,3H),1.54(s,9H),1.37(d,J=7.0Hz,3H),1.29(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)812.3[M+H],Tr=2.64分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2mL/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
化合物70
於70c(139mg,0.17mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)中添加氫氧化鋰(4.5mg,0.19mmol)的水溶液(5mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.20mL的1M水溶液，0.20mmol)，和反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集、在減壓下濃縮和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(5mL,20mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)及將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(98mg,0.26mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(110mg,0.86mmol)和二氯甲烷(100mL)之氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(50ml)和鹽水(50mL)清洗，用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由HPLC予以純化以提供化合物70(20mg,21%)，其凍乾之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 9.05(s,1H),8.05(bs,1H),7.69(s,1H),7.24(s,1H),7.61(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.62(d,J=12.3Hz,1H),6.33(d, J=12.3Hz,1H),6.14(m,1H),5.86(bs,1H),5.08(m,1H),4.53(s,1H),4.12(d,J=6.1Hz,1H),3.57-3.49(m,2H),2.02-1.92(bm,2H),1.68(m,1H),1.72-1.45(cm,8H),1.07(s,9H),0.91(m,3H)。LCMS(m/z)564.3[M+H],Tr=2.42分鐘。
化合物71，實施例71
依循實施例70所述之合成順序，自市場上購自Apollo Scientific,Inc.之1克4,4,4-三氟-DL-纈胺酸開始製備所指出之N-Boc-保護的喹啉基seco-acid，5%產率。
於此化合物(139mg,0.17mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)中添加氫氧化鋰(4.5mg,0.19mmol)的水溶液(5mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.20mL的1M水溶液，0.20mmol)，和反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集，在減壓下濃縮，和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(5mL,20mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，及將得到的溶液添加至 含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(98mg,0.26mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(110mg,0.86mmol)和二氯甲烷(100mL)之氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(50ml)和鹽水(50mL)清洗，用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由C18管柱HPLC以乙腈/水沖提液予以純化以提供71，其為三種異構物中最遲沖提出來的(7mg,8%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ 7.86(s,1H),7.72(s,1H),7.61(d,J=5.8Hz,1H),7.43(d,J=5.8Hz,1H),7.31(m,1H),6.50(d,J=12.2Hz,1H),6.34(d,J=12.2Hz,1H),5.60(m,2H),5.08(m,1H),4.38(m,1H),4.18(d,J=9.1Hz,1H),3.52(m,1H),2.91(m,1H),2.59(m,1H),1.94-1.48(cm,10H),1.42(s,3H),1.38(cm,5H)。LCMS(m/z)604.3[M+H],Tr=2.42分鐘。
化合物72，實施例72
於得自Sigma-Aldrich Inc.且冷卻至0℃之2-胺基-3-氟-3-甲基丁酸(1g,7.5mmol)的1M硫酸(15ml,1M水溶液)溶液中添加亞硝酸鈉(1.0g,15mmol)的水溶液(8ml)。於添加期間，維持溫度低於5℃，及混合物在此溫度攪拌 整夜。溶液接著用硫酸銨飽和，用二乙基醚萃取(5x25ml)，用硫酸鈉乾燥和在減壓下蒸發提供標題化合物(0.4g,37%)，其為無色油狀物，其靜置結晶。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 4.34(d,1H),1.35(d,6H)。LCMS(m/z)137.4[M+H],Tr=0.79分鐘。
化合物72b
1d(517mg,1.19mmol)的二氯甲烷溶液(20mL)在冰水浴中冷卻。在0℃和氬氣下，逐滴添加三氟甲磺酸三甲基矽基酯(398mg,1.79mmol)，及得到的溶液在室溫攪拌達30分鐘。反應混合物被蒸發至乾，及得到的粗製殘留物(LCMS(m/z)332.2/334.3[M+H],Tr=2.06分鐘)溶於無水的二氯甲烷(20mL)和被冷卻至0℃。於此中添加72a(192mg,1.43mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(0.51mL,2.98mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(633mg,1.43mmol)。使反應回暖至室溫和攪拌達8小時。混合物被蒸發至乾，及殘留物溶於乙酸乙酯(100mL)，和用10%檸檬酸(100mL)、飽和NaHCO3(100mL)和 鹽水(100mL)清洗。有機層用MgSO4乾燥，添加一體積當量的己烷，且此溶液透過5cm矽膠層過濾，矽膠層用50mL的乙酸乙酯/己烷混合物(1/1)清洗。所欲之產物用乙酸乙酯(100mL)清洗出來，在減壓下濃縮，及與二氯甲烷共蒸餾。72b(400mg,80%)在高真空下乾燥達一天之後被分離出來。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 5.53(q,J=6.9Hz,1H),5.10(d,J=12.1Hz,1H),4.92(d,J=12.2Hz,1H),3.96(d,J=2.6Hz,1H),3.94(dd,J=7.1,4.7Hz,1H),3.86(qd,J=6.4,2.5Hz,1H),3.81-3.60(m,2H),3.42(s,3H),2.34-2.14(m,1H),2.09-1.90(m,2H),1.87-1.76(m,1H),1.41(d,J=6.9Hz,3H),1.32(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)450.1[M+H],Tr=2.11分鐘。
化合物72c
依循實施例70所述之程序，於烘箱乾燥經氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(172mg,0.5mmol)、4-二甲基胺基吡啶(64mg,0.50mmol)、N-Boc保護的喹啉1,3-二甲酸63c(96mg,0.25mmol)和無水的 二氯甲烷(10mL)。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(0.13mL,0.75mmol)，和此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。經由注射器添加化合物72b(168mg,0.38mmol)的無水二氯甲烷溶液(10mL)。在室溫攪拌達2小時之後，反應混合物被移至分離漏斗，和用水清洗(20mL，添加10mL的鹽水以支持分離)。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(20mL)清洗和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供72c(149mg,73%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.35(d,J=8.6Hz,1H),8.07-8.01(m,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),7.88(d,J=8.4Hz,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),6.98-6.77(m,2H),5.48(q,J=6.5,6.1Hz,1H),5.20(d,J=4.0Hz,1H),5.06(d,J=12.1Hz,1H),4.88(d,J=12.1Hz,1H),4.25-4.15(m,1H),3.99-3.85(m,2H),3.80-3.55(m,2H),3.46(s,3H),2.20-2.09(m,1H),2.07-1.94(m,1H),1.92-1.80(m,1H),1.80-1.71(m,1H),1.68-1.64(m,6H),1.59(d,J=7.1Hz,3H),1.54(s,9H),1.37(d,J=7.0Hz,3H),1.29(d,J=6.4Hz,3H)。LCMS(m/z)860.1/862.5[M+H].,Tr=2.64分鐘。
化合物72
於72c(139mg,0.17mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)中添加氫氧化鋰(4.5mg,0.19mmol)的水溶液(5mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.20mL的1M水溶液，0.20mmol)，和反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集，在減壓下濃縮，和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(5mL,20mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，及將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(98mg,0.26mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(110mg,0.86mmol)和二氯甲烷(100mL)之氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(50ml)和鹽水(50mL)清洗，用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-60%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供標題化合物(32mg,33%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.26(s,1H),7.83(d,J=8.2Hz,1H),7.83(d,J=8.2Hz,1H),7.51(m,2H),6.71(d,J=12.3 Hz,1H),6.19(d,J=12.3Hz,1H),5.86(q,J=7.2Hz,1H),5.48(d,J=8.2Hz,1H),5.08(m,2H),4.41(m,1H),3.77-3.62(m,1H),3.59(m,1H),2.68(m,1H),2.31-2.24(m,1H),1.99-1.91(m,1H),1.72-1.54(cm,8H),1.42(s,3H),LCMS(m/z)612.1[M+H],Tr=2.22。
實施例73，化合物73
依循實施例43所述之合成順序，卻使用由Enamine,Ltd.，所供應之1.5g氧-3-甲酸甲酯(C.A.S.# 53662-85-4)，製備110mg量(1.2%產率)之上面所指出之雙-保護的seco-acid。此中間體接著完成實施例70中所述之標準多步驟合成順序以提供化合物73，其中在最終HPLC純化之後得到4mg的非鏡像異構物混合物。1H NMR(400MHz,CD3CN)：δ 8.81(m,1H),8.15(d,J=6.1Hz,1H),7.73(d,J=6.2Hz,1H),7.60(m,1H),7.35(m,1H),7.06(m,1H)6.48-6.33(m,2H),5.62(m,1H),5.08(m,1H),4.95(m,1H),4.30(m,2H),4.08(m,2H),3.90-3.69(cm,4H),3.56(m,2H),3.39(m,2H),2.68(cm,3H),2.31-2.24(m,2H),1.55-1.35(cm,7H),0.92-0.82(cm,7H)。LCMS(m/z)578.2[M+H],Tr=2.11。
實施例74、實施例75、實施例76及實施例77-化合物74、75、76及77
中間體74a
於溴化物39a(556mg,1.583mmol)、4-側氧基-1-乙烯基環己烷甲酸乙基酯(得自Small molecules,Inc.)(559mg,2.849mmol)、Pd(OAc)2(70mg,0.312mmol)和(o-Tol)3P(100mg,0.329mmol)之混合物的二溶液(5mL)中添加NEt3(0.72mL,5.166mmol)，和得到的混合物在微波反應器內在100℃受熱達30分鐘。混合物被濃縮，及用 水和乙酸乙酯(~50mL每次)處理。混合物透過矽藻土墊過濾之後，分離濾液中的兩個部分。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到479mg(65%)的產物74a。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 8.07(d,J=8.3Hz,1H),8.01(s,1H),7.75(d,J=8.5Hz,1H),7.58(d,J=8.3Hz,1H),7.31(d,J=8.5Hz,1H),6.74(d,J=16.1Hz,1H),6.47(d,J=16.3Hz,1H),6.16(s,1H),4.27(q,J=7.1Hz,2H),2.76-2.56(m,2H),2.57-2.38(m,4H),2.18-2.00(m,2H),1.47(s,9H),1.32(t,J=7.1Hz,3H)。LCMS(m/z)467.0[M+H],Tr=2.33分鐘。
化合物74b
74a(237mg,0.508mmol)的THF溶液(5mL)在-60℃浴中攪拌，邊添加1.0M K-selectride的THF溶液(0.61mL)。反應混合物緩慢回暖至0℃，歷經30分鐘之後，混合物用乙酸乙酯稀釋和用水清洗(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液被混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到192mg(81%)的74b，其為~4：1的混合物。LCMS(m/z)469.0[M+H],Tr=2.20分鐘。
化合物74c
74b(192mg,0.410mmol)和LiOH(87.7mg,2.090mmol)在THF(2mL)、MeOH(2mL)和水(2mL)中的混合物在50℃浴中攪拌達3小時。混合物被濃縮至~1/3體積，用水稀釋，用1N HCl(2.2mL)中和，及用乙酸乙酯萃取(x 2)。萃取液用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物咪唑(115mg,1.689mmol)及TBSCl(79mg,0.524mmol)的DMF溶液在35℃浴中攪拌達1.5小時，之後添加額外的咪唑(102mg,1.498mmol)，及添加TBSC1(77mg,0.511mmol)。得到的混合物在35℃攪拌達17小時、濃縮及用乙酸乙酯稀釋，之後用5% LiCl溶液(清洗x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物溶於THF(2mL)、MeOH(2mL)和水(2mL)中，及在室溫與K2CO3(226mg,1.635mmol)一起攪拌達30分鐘。溶液被濃縮至~1/2體積，用水稀釋，及用1N HCl(~3.5mL)酸化，之後用乙酸乙酯萃取(x 2)。萃取液用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到193mg(85%)的產物74c，其顯而易見的為~4：1的非鏡像異構物混合物。LCMS(m/z) 555.1[M+H],Tr=2.60分鐘。
化合物74d
酸74c(131mg,0.236mmol)、化合物1e(125mg,0.289mmol)、Shiina試劑(98mg,0.285mmol)及DMAP(72mg,0.589mmol)的混合物在室溫溶於CH2Cl2(3mL)。3分鐘之後，添加DIEA(0.1mL,0.574mmol)，且得到的混合物在室溫攪拌達16.5小時。混合物用乙酸乙酯稀釋，和用水清洗(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到90mg(39%)的74d，其為混合物。LCMS(m/z)968.2[M+H],Tr=3.04分鐘。
化合物74,75,76，及77
74d(90mg,0.093mmol)在THF(1mL)、MeOH(1mL)和水(1mL)中的混合物在0℃添加K2CO3(89mg,0.644mmol)。混合物在0℃攪拌達2.5小時，在冰箱攪拌64小時，在室溫攪拌達3小時及在30℃攪拌達1.5小時。混合物用飽和NaCl溶液稀釋和用EA萃取(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)、濃縮和在真空中乾燥。殘留物溶於4N HCl的二溶液(3mL)且在室溫攪拌達45分鐘，之後濃縮和在真空中乾燥達2小時以得到粗製羥基胺基酸。HATU(177mg,0.466mmol)的CH2Cl2懸浮液(100mL)在室溫攪拌，邊添加粗製羥基胺基酸的DMF溶液(7.5mL)，歷經5分 鐘。在室溫1.5小時之後，混合物被濃縮，及殘留物用乙酸乙酯稀釋，之後用5% LiCl溶液(x 2)、0.1N HCl(x 1)和水(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由下述而被分離：製備級HPLC使用21.2×250mm 10微米C18 Phenomenex Gemini半製備級管柱及乙腈/水(含有0.1% TFA修飾劑)作為動相以流速20mL/min和50分鐘梯度溶液(由0分鐘-5分鐘：20%乙腈；5分鐘-48分鐘：20%乙腈至80%乙腈；48分鐘-50分鐘：80%乙腈組成)以得到4個分離的產物部分。接著，每一部分分別地被濃縮以移除MeCN，用NaHCO3溶液中和，用水稀釋，和用乙酸乙酯萃取(x 2)。個別的萃取液被濃縮以得到4.6mg(8%)的74，1.1mg(2%)的75，10.5mg(19%)的76，及2.3mg(4%)的77。
化合物74：第一沖提的異構物。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.82(d,J=8.4Hz,1H),7.77(d,J=1.7Hz,1H),7.62(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.61(d,J=16.4Hz,1H),6.29(d,J=16.4Hz,1H),5.79(q,J=7.2Hz,1H),5.23(d,J=8.6Hz,1H),5.06(q,J=6.6Hz,1H),4.41(dd,J=13.2,4.3Hz,1H),3.88(s,1H),3.57(dd,J=11.7,2.8Hz,1H),2.68(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.25(d,J=11.2Hz,1H),2.21-2.06(m,3H),2.00-1.88(m,3H),1.84-1.63(m,5H),1.60(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.8Hz,3H),1.61-1.47(m,1H),1.28(s,1H),1.05(d, J=6.8Hz,3H),1.00(d,J=6.7Hz,3H)。
LCMS(m/z)606.3[M+H],Tr=2.03分鐘。
化合物75：第二沖提的異構物。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.81(d,J=8.5Hz,1H),7.76(d,J=1.7Hz,1H),7.60(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),6.53(d,J=16.3Hz,1H),6.25(d,J=16.3Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.28(d,J=8.6Hz,1H),5.06(q,J=6.7Hz,1H),4.41(d,J=13.8Hz,1H),3.60(m,2H),2.76-2.62(m,1H),2.57(d,J=14.1Hz,1H),2.33(dd,J=13.0,3.9Hz,1H),2.29-2.10(m,2H),1.94(m,3H),1.78-1.38(m,3H),1.61(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.28(s,4H),1.07(d,J=6.8Hz,3H),1.04d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)606.3[M+H],Tr=2.02分鐘。
化合物76：第三沖提的異構物。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 9.43(d,J=6.2Hz,1H),8.24(d,J=8.5Hz,1H),8.02-7.94(m,1H),7.84(d,J=8.4Hz,1H),7.57(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.86(d,J=16.3Hz,1H),6.33(d,J=16.3Hz,1H),5.85(q,J=7.2Hz,1H),5.19(d,J=9.0Hz,1H),5.15(m,1H),4.49-4.38(m,1H),3.83(s,1H),3.41(dd,J=11.8,2.8Hz,1H),2.79(td,J=12.8,3.2Hz,1H),2.39(dd,J=13.2,3.4Hz,1H),2.21(m,1H),2.18-2.06(m,3H),2.06-1.91(m,2H),1.76(m,2H),1.68(m,2H),1.44-1.61(m,1H),1.56(d,J=6.7Hz,3H),1.28(s,1H),1.22(d,J=7.2Hz,3H),1.04(d,J=6.9Hz,3H),1.02(d,J=6.7 Hz,3H)。LCMS(m/z)606.3[M+H],Tr=2.10分鐘。
化合物77：第四沖提的異構物。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 9.45(d,J=6.3Hz,1H),8.25(d,J=8.4Hz,1H),8.00(d,J=1.6Hz,1H),7.84(d,J=8.4Hz,1H),7.55(dd,J=8.4,1.6Hz,1H),7.44(d,J=8.5Hz,1H),6.78(d,J=16.3Hz,1H),6.36(d,J=16.3Hz,1H),5.88(q,J=7.2Hz,1H),5.45(d,J=12.0Hz,1H),5.24(d,J=8.9Hz,1H),5.17(q,J=6.6Hz,1H),4.51-4.39(m,1H),3.71-3.54(m,1H),3.51-3.38(m,1H),2.85-2.72(m,1H),2.63(d,J=13.5Hz,1H),2.43(m,2H),2.24(m,1H),1.98(m,3H),1.77-1.59(m,2H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.54(d,J=3.6Hz,1H),1.41(q,J=13.0Hz,1H),1.35-1.26(m,2H),1.26(d,J=7.2Hz,3H),1.07(d,J=6.8Hz,3H),1.06(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)606.3[M+H],Tr=2.11分鐘。
實施例78及實施例79-化合物78及79
化合物78a
50%乙醛酸乙酯的甲苯溶液(5.15mL,26mmol)在THF(50mL)中在-20--30℃浴中攪拌，邊添加0.5M溴化環丙基鎂的THF溶液(50mL)，歷經10分鐘。在-30℃浴中2小時之後，反應混合物用水(250mL)驟冷和用乙酸乙酯萃取(x 3)。萃取液用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到882mg(17%)的78a，純度為72%。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 4.27(q,J=7.2Hz,2H),3.77(d,J=6.6Hz,1H),1.56(s,1H),1.32(t,J=7.1Hz,3H),1.15-1.03(m,1H),0.59-0.46(m,3H),0.46-0.38(m,1H)。
化合物78b
在室溫，於所指出之酸(100mg,0.260mmol)、醇(75mg,0.375mmol,72%純度)及DMAP(79mg,0.647mmol)的CH2Cl2溶液(5mL)中添加Shiina試劑(180mg,0.523mmol)和DIEA(0.24mL,1.378mmol)。在室溫16.5小時之後，混合物被濃縮，及殘留物溶於乙酸乙酯，之後用稀釋的檸檬酸溶液(x 1)和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥 (MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到76mg(57%)的產物78b，其為非鏡像異構物混合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 8.05(d,J=8.4Hz,1H),7.99(s,1H),7.72(d,J=8.4Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.28(d,J=8.6Hz,1H),6.69(d,J=16.3Hz,1H),6.63(d,J=16.2Hz,1H),6.22(s,1H),5.09-4.87(m,1H),4.49(d,J=7.9Hz,1H),4.21(p,J=7.0Hz,2H),1.53(d,J=7.3Hz,3H),1.51(s,3H),1.49(s,3H),1.47(s,9H),1.30(m,1H),1.26(t,J=7.1Hz,3H),0.72-0.52(m,3H),0.51-0.41(m,1H)。LCMS(m/z)511.0[M+H],Tr=2.49分鐘。
化合物78c
在0℃，於乙基酯反應物78b(76mg,0.149mmol)在THF(2mL)、MeOH(2mL)和水(2mL)中的溶液添加K2CO3(104mg,0.752mmol)。在0℃攪拌達1.5小時和在室溫攪拌達10.5小時之後，混合物用1N HCl(1.6mL)酸 化，用水稀釋，和用乙酸乙酯萃取(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到49mg(68%)的中間體產物，具有~15%的雜質。LCMS(m/z)483.0[M+H]。二肽(48mg,0.111mmol)的4N HCl二溶液(2mL)在室溫攪拌達1小時。混合物被濃縮及殘留物與甲苯共蒸發之後，殘留物(先前得到的酸)(49mg)及HATU(80mg,0.210mmol)在CH2Cl2(3mL)和DMF(1mL)中的溶液在室溫攪拌，邊添加DIEA(0.1mL,0.574mmol)。在室溫30分鐘之後，混合物用EA稀釋，和用5% LiCl溶液(x 2)、檸檬酸溶液(x 1)、飽和NaHCO3,(x 1)及飽和NaCl溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到64mg(79%)的產物78c，其為非鏡像異構物混合物。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 8.05(d,J=8.4Hz,1H),8.00(s,1H),7.71(d,J=8.3Hz,1H),7.67-7.60(m,1H),7.28(d,J=8.5Hz,1H),7.03(dd,J=16.5,7.6Hz,1H),6.71(dd,J=16.2,3.8Hz,1H),6.64(d,J=16.2Hz,1H),6.21(s,1H),5.37-5.20(m,1H),4.97(s,1H),4.92(d,J=11.9Hz,1H),4.77(dd,J=7.8,3.2Hz,1H),4.69(dd,J=11.9,3.7Hz,1H),4.36-4.18(m,1H),3.81(t,J=8.9Hz,1H),3.65(m,1H),2.84(br,1H),2.14(m,1H),1.88(m,1H),1.77-1.59(m,2H),1.55(S,3H),1.53(S,3H), 1.51(d,J=8.2Hz,3H),1.46(s,9H),1.24(m,4H),0.65(m,1H),0.50(m,3H)。LCMS(m/z)796.0[M+H],Tr=2.50分鐘。
化合物78及化合物79
反應物(64mg,0.080mmol)在THF(1mL)和水(1mL)中的混合物在0℃攪拌，邊添加1N KOH(0.09mL)。在0℃攪拌1.25小時達之後，混合物用1N HCl(0.1mL)酸化，用水稀釋，和用乙酸乙酯萃取(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物溶於4N HCl的二溶液(2mL)且在室溫攪拌達1小時。混合物被濃縮及殘留物與甲苯共蒸發之後，殘留物及HATU(155mg,0.408mmol)在DMF(2.5mL)和CH2Cl2(25mL)中的溶液在0℃攪拌，邊添加DIEA(0.12mL,0.689mmol)。30分鐘之後，溶液被濃縮，用乙酸乙酯稀釋，之後用5% LiCl溶液(x 2)、檸檬酸溶液(x 1)及飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由製備級HPLC而被分離以得到2個部 分。每一個部分分別地被濃縮以移除MeCN，用NaHCO3溶液中和，用水稀釋，和用乙酸乙酯萃取(x 2)。萃取液被混合、乾燥(MgSO4)及濃縮以得到11.9mg(23%)的78及11.0mg(22%)的79。
化合物78：1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.63(d,J=7.2Hz,1H),8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.85(s,1H),7.82(d,J=8.4Hz,1H),7.57(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),6.56(d,J=16.2Hz,1H),6.35(d,J=16.2Hz,1H),5.87-5.72(m,1H),5.14-5.01(m,1H),4.89(d,J=8.9Hz,1H),4.43(dd,J=13.8,4.4Hz,1H),3.57(dd,J=11.8,2.9Hz,1H),2.69(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.34-2.21(m,1H),1.94(d,J=13.4Hz,1H),1.76-1.61(m,1H),1.59(d,J=7.2Hz,3H),1.56(d,J=6.7Hz,3H),1.51(s,3H),1.40(s,3H),1.30(m,2H),0.69-0.57(m,3H),0.56-0.42(m,1H)。
LCMS(m/z)548.3[M+H],Tr=2.25分鐘。
化合物79：1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 9.27(d,J=6.2Hz,1H),8.24(s,1H),8.21(d,J=8.5Hz,1H),8.02(d,J=6.7Hz,1H),7.80(d,J=8.3Hz,1H),7.46(dd,J=8.3,1.7Hz,1H),7.41(d,J=8.4Hz,1H),6.72(d,J=16.0Hz,1H),6.57(d,J=16.1Hz,1H),5.91-5.76(m,1H),5.13(m,1H),4.73(d,J=8.9Hz,1H),4.43(dd,J=8.8,4.0Hz,1H),3.55(dd,J=11.9,2.9Hz,1H),2.69(td,J=13.1,3.3Hz,1H),2.32(dd,J=13.4,3.4Hz,1H),1.93(d,J=13.2Hz,1H),1.68(qt,J=13.4,4.4Hz,1H),1.57(d,J=6.9,Hz,3H), 1.56(d,J=6.9,Hz,3H),1.54(s,3H),1.53-1.45(m,1H),1.42(s,3H),1.28(s,1H),0.78-0.59(m,3H),0.50(m,1H)。LCMS(m/z)548.3[M+H],Tr=2.33分鐘。
實施例80，化合物80
化合物80
在室溫，於74(7.13mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加異丁醯氯(1滴)。在室溫1小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用EA(x 1)萃取之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到6.4mg(80%)的產物80。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.83(d,J=7.5Hz,1H),8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.5Hz,1H),7.79(s,1H),7.64(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz, 1H),6.61(d,J=16.4Hz,1H),6.30(d,J=16.4Hz,1H),5.80(q,J=7.1Hz,1H),5.26(d,J=8.5Hz,1H),5.07(q,J=6.7Hz,1H),4.96(s,1H),4.41(dd,J=13.5,4.1Hz,1H),3.62-3.54(m,1H),2.68(td,J=13.2,3.4Hz,1H),2.60(p,J=7.0Hz,1H),2.33(d,J=13.4Hz,1H),2.25(d,J=12.0Hz,1H),2.21-2.09(m,2H),2.05-1.76(m,7H),1.76-1.63(m,1H),1.60(d,J=7.2Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.56-1.46(m,1H),1.20(d,J=7.0Hz,6H),1.06(d,J=6.8Hz,3H),1.02(d,J=6.7Hz,3H)。LCMS(m/z)676.3[M+H],Tr=1.35分鐘。
實施例81，化合物81
化合物81
在室溫，於75(6.6mg,0.011mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加異丁醯氯(1滴)。在室溫1小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1) 清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到5.1mg(69%)的產物。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.27(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.2Hz,1H),7.79(s,1H),7.64(d,J=8.3Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),6.58(d,J=16.3Hz,1H),6.29(d,J=16.4Hz,1H),5.81(p,J=7.4Hz,1H),5.28(d,J=8.4Hz,1H),5.08(q,J=6.8Hz,1H),4.77(m,1H),4.42(d,J=15.0Hz,1H),3.58(d,J=11.6,3.2Hz,1H),2.68(td,J=12.8,3.2Hz,1H),2.56(m,1H),2.52(七重峰，J=7.0Hz,1H),2.35(d,J=13.1Hz,1H),2.30-2.11(m,2H),2.10-1.88(m,3H),1.75(td,J=13.6,2.8Hz,1H),1.71-1.40(m,5H),1.61(d,J=7.5Hz,3H),1.59(d,J=6.9Hz,3H),1.14(d,J=7.0,Hz,6H),1.08(d,J=6.8Hz,3H),1.03(d,J=6.7Hz,3H)。LCMS(m/z)676.5[M+H],Tr=1.20分鐘。
實施例82，化合物82
化合物82
在室溫，於75(7.0mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加正丁醯氯(1滴)。在室溫1小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到5.7mg(73%)的產物82。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.82(d,J=8.5Hz,1H),7.77(s,1H),7.61(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.56(d,J=16.4Hz,1H),6.26(d,J=16.3Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.28(d,J=8.6Hz,1H),5.06(q,J=6.6Hz,1H),4.77(m,1H),4.47-4.34(m,1H),3.58(dd,J=12.8,2.8Hz,1H),2.68(td,J=12.8,3.2Hz,1H),2.58(d,J=13.9Hz,1H),2.41-2.31(m,1H),2.28(t,J=7.3Hz,2H),2.24-2.11(m,1H),2.10-1.88(m,3H),1.80-1.38(m,9H),1.61(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.8Hz,3H),1.07(d,J=6.8Hz,3H),1.03(d,J=6.7Hz,3H),0.94(t,J=7.4Hz,3H)。LCMS(m/z)676.4[M+H],Tr=1.19分鐘。
實施例83，化合物83
化合物83a
於[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯39a(1160mg,3.303mmol)、乙烯基酸(833mg,4.953mmol)、Pd(OAc)2(149mg,0.664mmol)和(o-Tol)3P(203mg,0.667mmol)之的混合物的二溶液(18mL)中添加NEt3(1.65mL,11.838mmol)，和得到的混合物在□W反應器內在100℃受熱達30分鐘。混合物透過矽藻土墊過濾，且濾液用乙酸乙酯稀釋，之後用水清洗(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到1033mg(71%)的產物83a。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 8.23(s,1H),8.14(br d,1H),7.76(d,J=8.5Hz,1H),7.61(d,J=8.3Hz,1H),7.39(br,1H),6.87(d,J=16.3Hz,1H),6.60(d,J=16.2Hz,1H),6.49(s,1H),5.04(s,1H),2.81-2.58(m,4H),2.49(m,2H),2.13(m,2H),1.55(br,3H),1.40(s, 9H).LCMS(m/z)439.0[M+H],Tr=0.87分鐘。
化合物83b
83a(150mg,0.342mmol)在MeOH(2mL)和水(2mL)中的溶液在室溫攪拌，邊添加甲氧基胺鹽酸鹽(70mg,0.838mmol)和1N KOH(0.7mL)。在室溫1小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，和用10%檸檬酸(x 1)和水(x1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分用水(x 1)清洗、混合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-EA作為沖提液予以純化以得到144mg(90%)的產物83b。LCMS(m/z)468.0[M+H],Tr=0.98分鐘。
化合物83c
在室溫，酸83b(144mg,0.308mmol)、1e(162mg,0.374mmol)、Shiina試劑(276mg,0.802mmol)及DMAP (107mg,0.876mmol)的混合物溶於CH2Cl2(5mL)。3分鐘之後，添加DIEA(0.15mL,0.861mmol)，且得到的混合物在室溫攪拌達16小時。混合物用乙酸乙酯稀釋，和用水清洗(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到161mg(59%)的產物83c，其為異構物混合物。LCMS(m/z)881.3[M+H],Tr=1.37分鐘。
化合物83
83c(161mg,0.182mmol)在THF(2mL)和水(2mL)中的混合物在0℃攪拌，邊添加1N KOH(0.19mL)。在0℃攪拌達1小時之後，混合物用1N HCl(0.20mL)酸化，用水稀釋，和用乙酸乙酯萃取(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物在CH2Cl2(2mL)和4N HCl的二溶液(2mL)中在室溫攪拌達1小時。混合物被濃縮及殘留物與甲苯共蒸發(x 2)之後，殘留物及HATU(150mg,0.394mmol)在DMF(2.5mL)和CH2Cl2(50mL)溶液在0℃攪拌， 邊添加DIEA(0.2mL,1.148mmol)。在0℃1.5小時之後，溶液被濃縮，用乙酸乙酯稀釋，之後用5% LiCl溶液清洗(x 2)。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯作為沖提液予以純化。部分純化的產物進一步藉由製備級HPLC予以純化以得到17.2mg(23%)的化合物83，其為一種異構物。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 9.40(d,J=5.9Hz,1H),8.87(d,J=7.5Hz,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H),7.81(d,J=8.5Hz,1H),7.78(s,1H),7.61(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.60(d,J=16.4Hz,1H),6.29(d,J=16.4Hz,1H),5.81(q,J=7.2Hz,1H),5.30(d,J=8.6Hz,1H),5.12-5.01(m,1H),4.40(dd,J=13.8,4.2Hz,1H),3.79(s,3H),3.56(dd,J=11.6,2.9Hz,1H),3.18(dt,J=15.0,4.3Hz,1H),2.68(td,J=13.0,3.2Hz,1H),2.61-2.50(m,1H),2.48-2.11(m,5H),2.06-1.86(m,2H),1.83-1.62(m,3H),1.60(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.8Hz,3H),1.51(dd,J=13.3,9.6Hz,1H),1.06(d,J=6.8Hz,3H),1.01(d,J=6.6Hz,3H).LCMS(m/z)633.5[M+H],Tr=1.05分鐘。
實施例84，化合物84
化合物84a
係依據Bercot,E.A.等人於Organic Letters,2008,10,p.5251-5254所報導之用於烯醇酯芳基化方法，使用哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁基4-乙基酯製備4-乙烯基哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁基4-乙基酯84a，12%產率。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 5.76(dd,J=17.5,10.7Hz,1H),5.19-5.02(m,2H),4.14(q,J=7.1Hz,2H),3.80-3.59(m,2H),3.02(ddd,J=13.8,10.2,3.3Hz,2H),2.10(dtt,J=13.6,3.2,1.6Hz,2H),1.56(ddd,J=13.7,10.1,4.1Hz,2H),1.41(s,9H),1.22(t,J=7.1Hz,3H)。LCMS[M+H]+=184.05(-Boc)。Tr=2.43分鐘
化合物84
依循實施例36所述之方法，哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁基4-乙基酯(282mg)被水解成其酸，及其接著Heck反應和隨後之Shiina反應以形成84(129mg)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 9.41(d,J=6.2Hz,1H),8.28-8.18(m,1H),8.00(s,1H),7.57(d,J=8.5Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.84(d,J=16.3Hz,1H),6.34(d,J=16.3Hz,1H),5.86(q,J=7.3Hz,1H),5.44(d,J=12.2Hz,1H),5.23(d,J=8.9Hz,1H),5.15(t,J=6.4Hz,1H),4.43(d,J=13.2Hz,1H),3.96-3.80(m,2H),2.79(d,J=12.7Hz,1H),2.47-2.15(m,4H),1.95(m,1H),1.80(m,2H),1.55(d,J=6.7Hz,4H),1.46(s,9H),1.32-1.16(m,10H),1.04(dd,J=8.3,6.7Hz,6H)。LCMS[M+H]+=691.30；Tr=2.02
實施例85，化合物85
化合物85a
依循實施例84所述之程序，4-乙烯基哌啶-1,4-二甲酸1-第三丁基4-乙基酯84a(450mg)的N-Boc基團經由用4N HCl的二溶液/DCM在室溫處理達1小時而予以移除以得到4-乙烯基哌啶-4-甲酸乙基酯。4-乙烯基哌啶-4-甲酸乙基酯與MsCl和TEA在DCM中在室溫反應達18小時以得到1-(甲基磺醯基)-4-乙烯基哌啶-4-甲酸乙基酯85a(409mg,98%產率)。LCMS[M+H]+=249.90(-Boc)；Tr=1.96分鐘。
化合物85
化合物85a(409mg)被水解成其酸，及以與實施例84所述之方式使物質進行Heck偶合和Shiina-媒介之內酯反應以形成85(34mg)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.22(d,J=8.5Hz,1H),7.85-7.74(m,2H),7.70-7.58(m,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),6.45(dd,J=132.8,16.3Hz,2H),5.79(q,J=7.1Hz,1H),5.28(d,J=8.5Hz,1H),5.05(q,J=6.5Hz,1H),4.39(d, J=13.2Hz,1H),4.06(s,3H),3.70(dd,J=18.6,5.4Hz,1H),3.64(s,2H),3.60-3.51(m,1H),3.04-2.84(m,2H),2.73-2.60(m,1H),2.53(d,J=13.7Hz,1H),2.34(d,J=13.7Hz,1H),2.30-2.09(m,2H),2.04-1.82(m,3H),1.64(dd,J=10.8,6.5Hz,1H),1.57(dd,J=10.6,7.0Hz,6H),1.49(dd,J=9.7,5.2Hz,1H),1.45-1.18(m,2H),1.02(dd,J=17.8,6.7Hz,6H)。LCMS[M+H]+=669.49；Tr=0.95分鐘。
實施例86及實施例87-化合物86及87
化合物86a
反應物第三丁基-L-蘇胺酸(由Sigma-Aldrich,Inc.所提供)(1g,5.7mmol)在水(7mL)/丙酮(14mL)/硫酸(7.2mL)中的溶液被冷卻至0℃。逐滴添加亞硝酸鈉(1.18g,17.1mmol)的水溶液(5mL)。混合物被攪拌及回暖至室溫整夜。旋轉蒸發丙酮之後，其用EtOAc萃取2次和用鹽 水清洗。有機層用透過(MgSO4)乾燥及濃縮。殘留物藉由矽膠管柱CombiFlash使用MeOH/DCM予以純化。得到674mg(67%產率)的(2S,3R)-3-第三丁氧基-2-羥基丁酸86a。
1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 4.18-4.02(m,1H),2.40(m,1H),1.32-1.25(m,12H)。
LCMS[M+H]+=無
化合物86b
(2S,3R)-3-第三丁氧基-2-羥基丁酸86a(337mg,1.9mmol)與得自從1d移除N-Boc之所指出之二肽(如描述於1e的合成)(1.2當量)和DIPEA(2mL)、BOP(924mg,2.09mmol)在DMF中在0℃反應達30分鐘，且接著在室溫反應達30分鐘。其用3% LiCl水溶液驟冷，用EtOAc萃取2次和用鹽水清洗。有機層用透過(MgSO4)乾燥及濃縮。殘留物藉由矽膠管柱CombiFlash使用MeOH/DCM予以純化。得到599mg(64%產率)所欲之三肽86b。LCMS[M+H]+=489.88(100%),Tr=1.05分鐘。
化合物86
313mg三肽86b被轉化成最終化合物86，使用與實施例84所述之相同合成順序，產生7mg 86。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.80(d,J=8.5Hz,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H),7.88(s,1H),7.80(m,1H),7.55(m,1H),7.42(d,J=8.5Hz,1H),6.57-6.35(dd,J=132.8,16.3Hz,2H),5.79(q,J=7.1Hz,1H),5.28(d,J=8.5Hz,1H),5.05(q,J=6.5Hz,1H),4.39(d,J=13.2Hz,1H),4.06(m,1H),3.60(dd,J=18.6,5.4Hz,1H),2.78(s,9H),2.70-2.63(m,1H),2.27(d,J=13.7Hz,1H),1.90(d,J=13.7Hz,1H),1.68-1.63(m,1H),1.57(dd,J=10.6,7.0Hz,6H),1.50(s,3H),1.40(s,3H),1.23(m,12H)。LCMS[M+H]+=608.25；Tr=1.17分鐘。
化合物87
17mg的87係為上述合成86期間所得之副產物。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.94(d,J=8.5Hz,1H),8.22(d,J=8.5Hz,1H),7.81-7.77(m,2H),7.58(m,1H),7.40(d,J=8.5Hz,1H),6.54-6.31(dd,J=132.8,16.3Hz,2H),5.76(q,J=7.1Hz,1H),5.33(d,J=8.5Hz,1H),5.05(q,J=6.5Hz,1H),4.40(d,J=13.2Hz,1H),4.06(m,1H),3.60(dd,J=18.6,5.4Hz,1H),2.70-2.63(m,1H),2.27(d,J=13.7Hz,1H),1.90(d,J=13.7Hz,1H),1.68-1.63(m,1H),1.57(dd,J=10.6,7.0Hz,6H),1.50(s,3H),1.40(s,3H),1.23(m,12H)。LCMS[M+H]+=552.31；Tr=0.90分鐘。
實施例88，化合物88
化合物88a：1,2-二氯-乙炔
於烘箱乾燥氬氣沖洗之燒瓶內置入無油的氫化鉀(來自1740mg的約30%的於礦物油中的分散液，約13mmol)、無水的四氫呋喃(10mL)和己烷(1mL)。燒瓶用氬氣再次沖洗，及依序添加三氯乙烯(900μL,1.32g,10 mmol)和乾燥甲醇(10μL,7.9mg,0.25mmol)。此混合物在室溫攪拌達2小時。此時間之後，添加己烷(10mL)，且得到的溶液立即用於隨後的步驟。
化合物88b：4-氯乙炔基-四氫-哌喃-4-甲酸甲基酯
於烘箱乾燥氬氣沖洗之燒瓶內添加四氫呋喃(50mL)，且溶液以冰浴冷卻。添加1.8M的二異丙基胺基鋰(7.2mL,13mmol)在四氫呋喃溶液/庚烷/乙基苯中的溶液。得到的溶液被冷卻至-78℃，及依序用四氫-2H-哌喃-4-甲酸甲基酯(Sigma-Aldrich)(1.20mL。1.30g,9mmol)和六甲基磷醯胺(1.56mL,1.61g,9mmol)逐滴處理。得到的溶液被回暖至0℃、攪拌達20分鐘、冷卻至-78℃及用1,2-二氯-乙炔(約10mmol)的預冷(0℃)溶液逐滴處理。反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘，及接著使其回暖至室溫。在室溫4小時之後，反應混合物被倒至碎冰中，及用二乙基醚萃取(200mL)(添加5mL鹽水以支持分離)。有機相被分離和用水清洗(200mL)。此水相用二乙基醚萃取(100mL)。結合的有機液部分用鹽水清洗(100mL)，用硫酸鎂乾燥，透過2公分的矽膠層過濾(矽膠層用50mL的乙酸乙酯清洗)，且接著在減壓下濃縮。粗製產物進行矽 膠層析術(0-15%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液)以提供標題化合物(1.22g,67%)，其為無色油狀物。Rf=0.48,30%乙酸乙酯的異己烷溶液，磷鉬酸的乙醇溶液。LCMS(m/z)203.2/205.3[M+H],Tr=3.12分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 3.79-3.65(m,4H),3.72(s,3H),1.97(m,2H),1.78(m,2H)。
化合物88c：4-乙炔基-四氫-哌喃-4-甲酸甲基酯
4-氯乙炔基-四氫-哌喃-4-甲酸甲基酯(1.01g,5mmol)和銅粉(1.6g,25mmol)被懸浮於四氫呋喃(100mL)中。添加乙酸(15mL)，且反應混合物受熱至60℃達3小時。此時間之後，將反應混合物倒至水(使用濾紙濾掉銅粉)中，及用二乙基醚萃取(3×50mL)。結合的有機萃取液用氯化銨飽和溶液(3×50mL)、碳酸氫鈉飽和溶液(2×50mL)和水(50mL)清洗。此水相用二乙基醚(50mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水清洗(50mL)和用硫酸鎂乾燥，透過2公分的矽膠層過濾(矽膠層用50mL的乙酸乙酯清洗)，及在減壓下濃縮。在高真空下乾燥達1天之後，分離出標題化合物(0.84g，定量產量)，其為無色油狀物。Rf=0.37,30% 乙酸乙酯的異己烷溶液，磷鉬酸的乙醇溶液。LCMS(m/z)169.0[M+H],Tr=2.43分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液).1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 3.80-3.67(m,4H),3.73(s,3H),2.34(s,1H),1.98(m,2H),1.80(m,2H)。
化合物88d
於4-乙烯基四氫-2H-哌喃-4-甲酸甲基酯(依循用Lindlar氏觸媒氫化88c而予以製備)(0.726g,4.27mmol)、三乙基胺(1.29g,12.81mmol)和[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯39a(1.5g,4.27mmol)之混合物的無水二溶液(30mL)中添加乙酸鈀(0.19g,0.85mmol)和三-鄰甲苯基膦(0.26g,0.85mmol)。反應混合物受熱至100℃達2小時，及用EtOAc(100mL)稀釋。粗製物用水清洗和用Na2SO4乾燥。濃縮之後，殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供88a(1.1g,59%)。LCMS(m/z)441.2[M+H]。Tr=2.21分鐘。
化合物88e
於88d(1.0g,2.27mmol)的THF(10mL)and MeOH(5ml)溶液中添加1N KOH的水溶液(11.4mL)。反應混合物在50℃攪拌達2小時，和藉由添加1N HCl的水溶液(11.4mL)而酸化。用EtOAc萃取(2×100mL)、用乾燥Na2SO4及濃縮之後，粗製酸無需進一步純化即可使用。上面之粗製酸(0.328g,0.77mmol)、1e(0.398,0.92mmol)、4-DMAP(0.225g,1.85mmol)、DIPEA(0.239g,1.85mmol)和Shiina試劑(0.632g,1.84mmol)溶於DCM(10mL)。反應混合物在室溫攪拌整夜。濃縮之後，粗製物用EtOAc稀釋(100mL)，用飽和NH4Cl清洗和用Na2SO4乾燥。濃縮之後，殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供88e(0.55g,85%)。LCMS(m/z)841.2[M+H]。Tr=2.56分鐘。
化合物88
於88e(0.70g,0.83mmol)的THF溶液(10mL)中添加1N KOH的水溶液(0.83mL)。反應混合物在室溫激烈攪拌達20分鐘，及藉由添加1N HCl的水溶液(0.83mL)而酸化。濃縮之後，粗製物溶於4N HCl/二(2ml)中且攪拌達1小時。濃縮之後，及與甲苯共蒸發(3x)，上面之粗製物溶於DCM(800mL)。添加N,N-二異丙基乙基胺(0.54g,4.2mmol)、DMAP(催化量)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(0.63g,1.66mmol)。反應混合物在室溫攪拌達1小時。濃縮之後，粗製物藉由製備級HPLC予以純化以得到88(0.22g,45%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.81(d,J=7.7Hz,1H),8.54-8.30(m,1H),8.11-7.78(m,2H),7.68(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.53(d,J=8.5Hz,1H),6.62(d,J=16.3Hz,1H),6.34(d,J=16.3Hz,1H),5.78(m,1H),5.21(dd,J=8.1,1.0Hz,1H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),4.38(d,J=13.2Hz,1H),3.92(ddq,J=19.0,12.0,4.0,3.4Hz,2H),3.71-3.40(m,3H),2.69(m,1H),2.38(m,1H),2.17(m,3H),2.08-1.74(m,4H),1.76-1.44(m,7H),1.00(dd,J=24.1,6.7Hz,6H).LCMS(m/z)592.3[M+H]。Tr=2.15分鐘。
實施例89，化合物89
化合物89a
於[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯39a,(0.50g,1.42mmol)、三乙基胺(0.43g 4.26mmol)和得自Small Molecules,Inc.之乙烯基環己酮乙氧基酯(0.279g,1.42mmol)之混合物的無水二溶液(15mL)中添加乙酸鈀(0.063g,0.28mmol)和三-鄰甲苯基膦(0.085g,0.28mmol)。反應混合物受熱至100℃達3小時，及用EtOAc稀釋(50mL)。粗製混合物用水清洗和用Na2SO4乾燥。濃縮之後，殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供89a(0.30g,45%)。LCMS(m/z)467.2[M+H]。Tr=2.39分鐘。
化合物89b
於冷卻至-78℃之89a(0.3g,0.64mmol)的無水THF溶液(5mL)中逐滴添加溴化甲基鎂(3.0M的醚溶液，0.43mL)。混合物在-78℃攪拌達1小時。反應混合物用EtOAc(30mL)稀釋及用飽和NH4Cl(2mL)驟冷。分離層之後，有機層用Na2SO4乾燥及濃縮。粗製殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到標題化合物89b(0.17g,56%)，其為1：1順式/反式混合物的混合物。LCMS(m/z)483.3[M+H]。Tr=2.36分鐘。
化合物89c
於89b(0.17g,0.353mmol)的THF(2mL)和甲醇(1mL)溶液中添加1N KOH的水溶液(1.76mL)。反應混合物在室溫攪拌達1小時。將1N HCl(1.76mL)添加至反應混合物。濃縮之後，粗製物在高真空下整夜。上面之粗製物及2,6-二甲吡啶(0.227g,2.12mmol)溶於DCM(5mL)。反應混合物被冷卻至0℃，將TBSOTf(0.280g,1.06mmol) 逐滴添加至反應混合物。在室溫攪拌達1小時及濃縮之後，粗製物藉由矽膠層析術使用1：0至1：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以得到89c(0.150g,58%)。LCMS(m/z)741.4[M+H]。Tr=3.56分鐘。
化合物89d
製備89c(0.15g,0.20mmol)的四氫呋喃(1mL)和甲醇(1ml)溶液，及添加1M碳酸鉀水溶液(0.8mL)。反應混合物在室溫攪拌達1小時。將二碳酸二-第三丁基酯(0.44g,0.20mmol)添加至反應溶液。接著反應混合物在室溫再攪拌達1小時，及藉由添加1N HCl水溶液而被酸化至pH=4。濃縮及與甲苯共蒸發(3x)之後，得到粗製酸。上面之粗製酸1e(0.104g,0.24mmol)、DMAP(0.06g,0.48mmol)、DIPEA(0.02g,0.48mmol)和shiina試劑(0.138g,0.40mmol)溶於DCM(10mL)。反應混合物在室溫攪拌達整夜。濃縮之後，粗製物用EtOAc(100mL)稀釋，用飽和NH4Cl清洗，和用Na2SO4乾燥。濃縮之後，殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化得到89d(0.07g,35%)。LCMS(m/z)983.5 [M+H]。Tr=2.98分鐘。
化合物89
於89d(0.06g,0.061mmol)的THF溶液(1mL)中添加1N KOH的水溶液(0.061mL)。反應混合物在室溫激烈攪拌達20分鐘及藉由添加1N HCl的水溶液(0.1mL)予以酸化。濃縮之後，粗製物溶於4N HCl/二(3ml)和在室溫攪拌達1小時。濃縮及與甲苯共蒸發(3x)之後，上面粗製物溶於DCM(20mL)。添加N,N-二異丙基乙基胺(0.039g,0.31mmol)、DMAP(催化量)和2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(0.028g,0.073mmol)。反應混合物在室溫攪拌達1小時。濃縮之後，粗製物藉由製備級-HPLC予以純化以得到89(0.006g,16%)，其為單一化合物。另一異構物不純淨。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.93(d,J=8.6Hz,1H),8.18(d,J=8.6Hz,1H),8.14-8.02(m,2H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),7.04(d,J=16.5Hz,1H),6.81(d,J=16.5Hz,1H),5.27(dd,J=27.9,7.0Hz,2H),4.00(s,1H),3.58(dd,J=9.0,3.7Hz,1H),3.06(d,J=39.1Hz,1H),2.32-1.77(m,11H), 1.81-1.50(m,5H),1.43(s,3H),1.32(d,J=6.9Hz,4H),0.95(d,J=6.9Hz,3H),0.80(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)620.3[M+H]。Tr=2.12分鐘。
實施例90及91，化合物90及化合物91
化合物90a
於(R)-1-(7-溴喹啉-2-基)乙基胺甲酸第三丁基酯39a(740mg,2.1mmol)的無水乙腈溶液(25mL)中添加乙酸鈀(II)(95mg,0.42mmol)、所指出之乙烯基二甲基哌喃甲酸乙酯(670mg,3.16mmol)、2-二-第三丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯基(202mg,0.42mmol)和三乙基胺(630mg,6.3mmol)，接著混合物在微波中於150℃受熱達2小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾 液墊用四氫呋喃(20mL)清洗。濾液被蒸發，接著添加水(50mL)，且有機液用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。結合的有機液用硫酸鈉乾燥，過濾和在減壓下濃縮以得到粗製的殘留物。此殘留物進行矽膠層析術(0-70%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液)以提供90a(170mg,17%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.04(d,J=8.4Hz,1H),7.96(s,1H),7.71(d,J=8.5Hz,1H),7.53(d,J=8.5Hz,1H),7.27(d,J=8.4Hz,1H),6.60(d,J=16.3Hz,1H),6.35(d,J=16.3Hz,1H),6.20-6.10(m,1H),5.01-4.89(m,1H),4.25-4.09(m,2H),3.91-3.69(m,2H),2.41-2.14(m,2H),1.80-1.61(m,2H),1.56(s,3H),1.45(s,9H),1.32-1.21(m,6H),1.15(s,3H)。LCMS(m/z)483.2[M+H],Tr=4.28分鐘。
化合物90b：
90a(160mg,0.33mmol)的四氫呋喃溶液/水/甲醇溶液(10mL,4：1：1)用氫氧化鋰(12mg,0.50mmol)處理。在60℃攪拌達6小時之後，反應在減壓下濃縮。殘留物溶於水(20mL)，添加1M鹽酸(0.5mL,0.5mmol)，且混合物馬上用二氯甲烷萃取(2x 50mL)。有機液被結合，用鹽 水清洗，用硫酸鈉乾燥及過濾。濾液被蒸發以提供90b(110mg,73%)，其為白色固體物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ 8.03(d,J=8.2Hz,1H),7.96(s,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),7.58(d,J=8.5Hz,1H),7.22(d,J=8.2Hz,1H),6.62(d,J=16.3Hz,1H),6.35(d,J=16.3Hz,1H),6.17-6.15(m,1H),5.21-4.94(m,1H),3.92-3.72(m,2H),2.43-2.15(m,2H),1.82-1.63(m,2H),1.61(s,3H),1.42(s,9H),1.24(s,3H),1.15(s,3H)。LCMS(m/z)455.2[M+H],Tr=3.35分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，6分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
化合物90c
於烘箱乾燥經氬氣沖洗之燒瓶內置入2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(125mg,0.36mmol)、4-二甲基胺基吡啶(62mg,0.51mmol)、90b(110mg,0.24mmol)和無水的二氯甲烷(10mL)。於得到的溶液中添加N,N-二異丙基乙基胺(66mg,0.51mmol)，和此反應混合物在室溫攪拌達10分鐘。 經由注射器逐滴添加1e(157mg,0.36mmol)的無水二氯甲烷溶液(5mL)。在室溫攪拌達12小時之後，反應混合物被移至分離漏斗中，和用水(20mL，添加10mL的鹽水以支持分離)清洗。水相用二氯甲烷(20mL)萃取。結合的有機萃取液用鹽水(20mL)清洗和用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯+甲醇(4/1)的異己烷梯度溶液)以提供90c(201mg,96%)，其蒸發之後為白色固體物。1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.28(d,J=8.4Hz,1H),7.98(s,1H),7.88(d,J=8.2Hz,1H),7.78(d,J=9.4Hz,1H),7.53(d,J=8.4Hz,1H),6.93-6.81(m,1H),6.67-6.51(m,1H),5.51-5.34(m,2H),5.03(d,J=12.1Hz,2H),4.86(d,J=12.1Hz,2H),4.13(q,J=7.1Hz,1H),3.91-3.83(m,3H),2.49-2.33(m,2H),2.30-2.20(m,1H),2.17-2.07(m,3H),2.02-1.85(m,2H),1.83-1.65(m,2H),1.53(d,J=7.1Hz,3H),1.47(s,9H),1.34(d,J=6.9Hz,3H),1.04(d,J=6.9Hz,6H),0.88(d,J=6.8Hz,6H)。LCMS(m/z)868.2/870.2[M+H],Tr=3.22分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，3.5分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
化合物90及91
於90c(195mg,0.22mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)中添加氫氧化鋰(6mg,0.53mmol)的水溶液(5mL)。在室溫攪拌達2小時之後，添加1M鹽酸(0.25mL的1M水溶液，0.25mmol)，和反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物被分配在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間。有機層被收集，在減壓下濃縮，和在高真空下乾燥達一天。殘留物用4M鹽酸的1,4-二溶液(5mL,20mmol)在室溫和氬氣下處理達4小時。反應混合物在減壓下濃縮。此殘留物溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，及將得到的溶液添加至含有2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(128mg,0.34mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(144mg,1.12mmol)和二氯甲烷(100mL)之氬氣沖洗的燒瓶內。反應混合物用氬氣再次沖洗及在室溫攪拌達2小時。得到的反應混合物用水(100ml)和鹽水(100mL)清洗，用硫酸鎂乾燥，過濾和在減壓下濃縮。殘留物藉由矽膠層析術予以純化(0-40%乙酸乙酯的異己烷梯度溶液)以先提供化合物90(27mg,19%)和接著提供化合物91(17mg,12%)，其在蒸發之後為白色固體物。
化合物90：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 9.08(d,J=8.6Hz,1H),8.48(s,1H),8.27(d,J=8.6Hz,1H),8.03(s,1H),7.97(dd,J=8.5,1.5Hz,1H),6.91-6.69(m,2H),5.92- 5.73(m,1H),5.36-5.22(m,1H),4.42-4.26(m,1H),4.01-3.83(m,2H),3.83-3.73(m,1H),3.71-3.62(m,1H),3.55-3.42(m,1H),2.53-2.41(m,1H),2.33-2.26(m,1H),2.13-2.05(m,1H),2.00-1.87(m,2H),1.81(d,J=7.2Hz,3H),1.79-1.61(m,4H),1.44-1.38(m,2H),1.33(s,3H),1.30-1.24(m,3H),1.22(s,3H),1.11-1.02(m,3H),0.99(d,J=6.8Hz,3H)。LCMS(m/z)620.4[M+H],Tr=3.45分鐘
化合物91：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ 8.27(d,J=8.5Hz,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),7.83(s,1H),7.64(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),6.63(d,J=16.2Hz,1H),6.24(d,J=16.3Hz,1H),5.82(q,J=7.2Hz,1H),5.24(d,J=8.3Hz,1H),5.16-5.05(m,1H),4.53-4.40(m,1H),3.91-3.82(m,2H),3.67-3.57(m,1H),2.72(td,J=12.9,3.3Hz,1H),2.54-2.44(m,1H),2.40(dd,J=13.8,1.9Hz,1H),2.34-2.16(m,2H),2.02-1.92(m,1H),1.90-1.79(m,1H),1.78-1.70(m,2H),1.68-1.52(m,2H),1.64(d,J=7.2Hz,3H),1.61(d,J=6.7Hz,3H),1.31(s,3H),1.20(s,3H),1.12(d,J=6.8Hz,3H),1.08(d,J=6.6Hz,3H)。LCMS(m/z)620.4[M+H],Tr=3.47分鐘(Gemini 5u C18 110Å,50×4.60mm 5微米管柱，6分鐘，2ml/min,5-100%乙腈/水，0.1%乙酸修飾劑梯度溶液)。
實施例92-化合物92
化合物92a
市場所供應的4-側氧基-1-乙烯基環己烷甲酸乙酯(由Small Molecules,Inc.所提供)(3.0g,15.29mmol)的MeOH溶液(80mL)在配有滴液漏斗之燒瓶內逐滴添加在0℃之NaBH4(697mg,18.35mmol)的MeOH溶液(80mL)。其在0℃攪拌達10分鐘，和在室溫攪拌達48小時。用飽和NH4Cl溶液驟冷之後，其用EtOAc萃取和用鹽水清洗1次。有機層透過(Na2SO4)乾燥及濃縮。順式及反式異構物藉由矽膠管柱CombiFlash使用EtOAC/己烷沖提液予以分離。在TLC上用EA/HEX=1/3沖洗，反式的Rf=0.5，順式的Rf=0.4。產量：反式異構物92a為425mg，順式異構物為864mg，順式/反式的混合物為468mg。(順式/反式)的總產量為1.76mg,59%。
關於反式異構物92a：
1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 5.84-5.71(m,1H),5.23-5.11(m,2H),4.11(q,J=7.5Hz,2H),3.79(tq,J=6.8, 3.6Hz,1H),1.90(ddd,J=11.7,8.2,4.2Hz,4H),1.71(ddt,J=11.9,7.8,3.7Hz,2H),1.61-1.50(m,2H),1.22(t,J=7.1Hz,3H)。
關於順式異構物：
1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 5.78(dd,J=17.5,10.6Hz,1H),5.13-5.00(m,2H),4.15(q,J=7.1Hz,2H),3.61(dt,J=13.2,6.4Hz,1H),2.38-2.22(m,2H),1.89(dt,J=10.7,5.2Hz,2H),1.47-1.29(m,4H),1.24(t,J=7.1Hz,3H)。
化合物92b
反應物92a(1R,4R)-4-羥基-1-乙烯基環己烷甲酸乙酯(425mg,2.13mmol)的DCM溶液(10mL)有添加CH3OBF4(1.66g,10.7mmol)和Proton Spronge(2.3g,10.7mmol)且在室溫攪拌達24小時。透過矽藻土墊過濾之後，濾液用飽和NaHCO3溶液清洗。有機層用透過乾燥(Na2SO4)及濃縮，及藉由矽膠管柱CombiFlash使用EtOAC/己烷沖提液予以純化。其提供223mg(49%產率)的(1r,4r)-4-甲氧基-1-乙烯基-環己烷甲酸乙酯92b。1H NMR(400MHz，氯仿-d)：δ 5.87-5.68(m,1H),5.20- 4.99(m,2H),4.23-3.95(m,2H),3.36-3.19(m,4H),1.87(pd,J=13.5,5.6Hz,4H),1.75-1.54(m,4H),1.29-1.14(m,3H)。
化合物92c
自223mg(1.05mmol)92b開始，以與實施例74相同方式進行形成(1R,4R)-1-((E)-2-(7-((R)-1-(第三丁氧基羰基胺基)乙基)萘-2-基)乙烯基)-4-甲氧基環己烷甲酸乙酯之Heck反應，卻使用4-側氧基-1-乙烯基環己烷甲酸乙酯，以得到424mg(89%產率)中間體化合物92c。LCMS[M+H]+=455.10
化合物92
自424mg(0.92mmol)92c開始，使用多步驟製備合成化合物92，其中用1e進行酯化反應、選擇性水解及接著N-Boc移除提供中間體，該中間體在使用實施例90所述之巨內酯化反應及最終純化方法，用HATU/DIPEA的 DCM/DMF溶液處理之後提供總產率為6.2%之巨環92(36mg)。
1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.21(d,J=8.5Hz,1H),7.80(d,J=8.4Hz,1H),7.75(d,J=1.7Hz,1H),7.59(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.41(d,J=8.5Hz,1H),6.40(dd,J=124.5,16.3Hz,2H),5.78(q,J=7.2Hz,1H),5.23(d,J=8.6Hz,1H),5.09-4.99(m,1H),4.45-4.34(m,1H),3.60-3.51(m,1H),3.44(s,1H),3.33(s,3H),2.66(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.29-2.09(m,3H),2.05-1.78(m,6H),1.74-1.62(m,2H),1.62-1.39(m,8H),1.26(m,3H),1.02(dd,J=19.3,6.7Hz,6H)。LCMS[M+H]+=620.63。
實施例93，化合物93
化合物93a. (S)-4-苯甲基-3-(2-環丙基-乙醯基)-唑啶-2-酮
環丙基乙酸(5.13g,51.250mmol)的冰(-40℃)無水四 氫呋喃溶液(150mL)隨後用三乙基胺(21.4mL,153.75mmol)和三甲基乙醯氯(6.9mL,56.375mmol)處理。在-40℃攪拌達1小時之後，混合物用(S)-4-苯甲基-唑啶-2-酮(9.99g,56.375mmol)和氯化鋰(2.39g,56.375mmol)處理。使混合物緩慢回暖至室溫及在室溫攪拌達22小時之後，反應被分配在二氯甲烷及半飽和氯化銨之間。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合、透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至9：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(11.63g,87%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.19-0.32(m,2H),0.56-0.69(m,2H),1.10-1.24(m,1H),2.76-2.87(m,2H),2.96(dd,J=16.9,6.9Hz,1H),3.34(dd,J=13.2,3.3Hz,1H),4.15-4.29(m,2H),4.66-4.77(m,1H),7.20-7.40(m,5H)。LCMS(m/z)282.1[M+Na],Tr=2.78分鐘。
化合物93b. (S)-4-苯甲基-3-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基)-唑啶-2-酮
雙(三甲基矽基)醯胺鈉的冰(-78℃)溶液(0.6M的甲苯溶液，65mL,38.918mmol)用無水的四氫呋喃(100mL) 稀釋和用(S)-4-苯甲基-3-(2-環丙基-乙醯基)-唑啶-2-酮(9.174g,35.380mmol)的無水四氫呋喃溶液(50mL)處理。在-78℃攪拌達45分鐘之後，混合物用2-苯磺醯基-3-苯基-氧氮(11.064g,42.456mmol)的無水四氫呋喃溶液(50mL)處理。在-78℃攪拌達55分鐘之後，反應用乙酸(10.1mL,176.9mmol)驟冷和回暖至室溫。混合物用碳酸氫鈉溶液(300mL)驟冷和倒至二氯甲烷/異己烷(3：1,400mL)中。水層用二氯甲烷萃取，及有機液被結合，用飽和硫代硫酸鈉、鹽酸(1M,300mL)、水清洗，和透過相分離器過濾。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術依序使用100g Isolute匣以1：0至7：3之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提和矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(7.922g,81%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.42-0.65(m,4H),1.25-1.38(m,1H),2.88(dd,J=13.4,9.6Hz,1H),3.35(dd,J=13.4,3.4Hz,1H),3.44(d,J=8.2Hz,1H),4.25-4.37(m,2H),4.67-4.72(m,1H),4.80(dd,J=8.0,6.0Hz,1H),7.21-7.41(m,5H)。LCMS(m/z)298.1[M+Na],Tr=2.27分鐘。
化合物93c. (S)-4-苯甲基-3-((S)-2-環丙基-2-三異丙基矽烷基氧基-乙醯基)-唑啶-2-酮
(S)-4-苯甲基-3-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基)-唑啶-2-酮(4.137g,15.026mmol)的冷(0℃)二氯甲烷溶液(60mL)隨後用2,6-二甲吡啶(3.5mL,30.052mmol)和三氟甲磺酸三異丙基矽基酯(6.1mL,22.539mmol)處理。在室溫攪拌達1小時之後，反應用pH 4緩衝溶液(酞酸鹽)驟冷。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至9：1之異己烷/二乙基醚的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(5.28g,81%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.40-0.49(m,2H),0.53-0.62(m,1H),0.63-0.71(m,1H),1.02-1.18(m,21H),1.20-1.34(m,1H),2.66(dd,J=13.1,10.5Hz,1H),3.49(dd,J=13.1,3.4Hz,1H),4.17-4.27(m,2H),4.63-4.73(m,1H),5.58(d,J=5.1Hz,1H),7.24-7.40(m,5H)。
化合物93d. (S)-環丙基-羥基-乙酸
(S)-4-苯甲基-3-((S)-2-環丙基-2-三異丙基矽烷基氧 基-乙醯基)-唑啶-2-酮(2.260g,5.235mmol)的冷(0℃)四氫呋喃溶液/水(60mL,5：1)隨後用過氧化氫(30%水溶液，2.7mL,26.173mmol)和氫氧化鋰單水合物(439.2mg,10.470mmol)處理。在0℃攪拌達4小時之後，反應用濃鹽酸(~8mL)和偏二亞硫酸鈉(9.9g)驟冷。水層用四氫呋喃/乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用25g Isolute匣以1：0至9：1之二氯甲烷/甲醇的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(298.3mg,49%)，其為無色針狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.45-0.71(m,4H),1.14-1.29(m,1H),3.87(d,J=6.9Hz,1H)。
化合物93e. ((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯
(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(3.007g,6.948mmol)的冷(0℃)四氫呋喃溶液/水(60mL,5：1)用氫氧化鋰單水合物(874.4mg,20.844mmol)處理。在0℃攪拌達40分鐘之後，反應 用鹽酸(1M,50mL)驟冷。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合、用無水硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留的三氯乙醇與甲苯共沸(3 x)以提供(S)-1-((S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸，其為白色固體物，其接著與(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺鹽酸鹽(1.998g,6.948mmol)混合和被懸浮於無水的乙腈(60mL)和四氫呋喃(10mL)中。懸浮液被冷卻至0℃及隨後用N,N-二異丙基乙基胺(6mL,34.740mmol)和1-[雙(二甲基胺基)伸甲基]-1H-1,2,3-三唑並[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽(3.699g,9.727mmol)處理。緩慢回暖至室溫及攪拌達16小時之後，反應在0℃用鹽酸(1M,70mL)驟冷。水層用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機液被結合，用碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，用無水硫酸鈉乾燥、過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至1：4之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(3.702g,99%)，其為白色泡沫物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.38(d,J=6.9Hz,3H),1.43(s,9H),1.47-1.55(m,2H),1.58(d,J=6.9Hz,3H),1.60-1.78(m,2H),2.22-2.31(m,1H),2.65-2.78(m,1H),3.39-3.52(m,1H),4.55(d,J=13.4Hz,1H),5.18-5.34(m,2H),5.36-5.45(m,1H),7.37(d,J=8.5Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),8.04(d,J=6.5Hz,1H),8.14(d,J=8.5Hz,1H),8.36(s,1H)。LCMS(m/z)536.1,537.1[M+H],Tr=2.58分鐘。
化合物93f. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
(S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯(802.2mg,1.501mmol)的冷(0℃)二氯甲烷溶液(20mL)用鹽酸溶液(1.9mL,7.505mmol,4M的1,4-二溶液)處理。在室溫攪拌達3小時之後，揮發物在真空中予以移除。殘留的水與甲苯共沸以提供(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺鹽酸鹽，其為白色固體物，其接著與(S)-環丙基1-羥基-乙酸(174.3mg,1.501mmol)和乾燥乙腈(20mL)混合。此懸浮液被冷卻至0℃及隨後用N,N-二異丙基乙基胺(0.79mL,4.503mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(796.6mg,1.801mmol)處理。反應緩慢回暖至室溫。攪拌達16小時之後，反應在0℃用鹽酸(1M,40mL)驟冷和用二氯甲烷稀釋。水層用二氯甲烷萃取。有機液用碳酸氫鈉的飽和溶液清洗。鹼性水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空 中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至95：5之二氯甲烷/甲醇的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(393.0mg,49%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 0.43-0.72(m,4H),1.03-1.15(m,1H),1.47(d,J=6.7Hz,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.64-1.78(m,2H),1.93-2.03(m,1H),2.23-2.33(m,1H),2.65-2.77(m,1H),3.44-3.58(m,2H),3.62-3.75(m,2H),3.80(d,J=11.8Hz,1H),4.49-4.59(m,1H),5.28(明顯的五重峰，J=6.7Hz,1H),5.49(明顯的五重峰，J=7.8Hz,1H),7.20(d,J=8.2Hz,1H),7.40(d,J=8.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.7,1.8Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),8.15(d,J=8.5Hz,1H),8.48(s,1H)。LCMS(m/z)534.0[M+H],Tr=2.07分鐘。
化合物93g. 6-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-[1,4]二氧-6-甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(244mg,0.459mmol)、6-乙烯基-[1,4]二氧-6-甲酸 57d(79mg,0.459mmol)、三乙基胺(140mg,192μL,1.38mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(28mg,0.092mmol)的1,4-二溶液(9mL)用氮排氣達5分鐘，且接著在氮下邊攪拌回暖至50℃。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(42mg,0.046mmol)，且該混合物受熱至80℃達45分鐘，及接著使其冷卻。懸浮液被過濾和蒸發以得到粗製標題化合物，其無需進一步純化即可用於下一階段。LCMS(m/z)624.2[M+H],Tr=1.58分鐘。
化合物93
在氮下之粉末狀的4Å分子篩(~1g)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(316mg,0.918mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(224mg,1.84mmol)在二氯甲烷(138mL)中的受攪拌混合物中經由注射泵添加93g的二氯甲烷溶液(10mL)，歷經3小時。起初含有粗製酸之燒瓶用二氯甲烷(1mL)清洗，且將此添加至反應混合物，歷經約20分鐘。添加結束之後，反應混合物被攪拌達1.5小時，透過矽藻土過濾，及依序用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、飽和鹽水清洗，和透過疏水性玻璃料過濾及被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至1：3之異己烷/丙酮的梯 度溶液予以純化，接著藉由逆相製備級HPLC使用1：9至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化以在用二乙基醚研磨之後得到標題化合物(21mg,8%共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 0.49-0.74(m,4H),1.27-1.41(m,1H),1.48-1.78(m,2H),1.60(d,J=6.9Hz,3H),1.65(d,J=7.3Hz,3H),1.91-2.01(m,1H),2.20-2.29(m,2H),2.65-2.76(m,1H),3.57-3.94(m,5H),4.17(d,J=12.7Hz,1H),4.36(d,J=12.7Hz,1H),4.39-4.48(m,1H),4.53(d,J=12.7Hz,1H),5.03-5.12(m,3H),5.84(q,J=7.1Hz,1H),6.33(d,J=16.5Hz,1H),6.52(d,J=16.5Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.70(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.78(br s,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)606.2[M+H],Tr=2.08分鐘。
實施例94. 化合物94
化合物94a. 3-甲基-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-甲基酯
在0℃之(S)-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-(2,2,2-三氯-乙基)酯(5.0g,10.8mmol)的含有3Å分子篩之四氫呋喃溶液/甲醇溶液(50mL,1：1)中添加氟化四正丁基銨(22mL,22mmol,1M的四氫呋喃溶液)。在室溫攪拌達24小時之後，混合物透過矽藻土墊過濾，且濾液被蒸發。殘留物被分配在二乙基醚及飽和碳酸氫鈉溶液之間。水層用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合，及溶液透過疏水性玻璃料過濾，且溶劑被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以20：1至3：2之異己烷/乙酸乙酯沖提予以純化以提供(S)-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-甲基酯(3.0g,82%)，其為無色油狀物和為旋轉異構體的混合物。LCMS(m/z)345.1[M+H],Tr=2.78分鐘。(S)-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-甲基酯(3.0g,8.72mmol)的四氫呋喃溶液(20mL)在-78℃用雙(三甲基矽基)醯胺鋰(13mL,13.0mmol,1M的四氫呋喃溶液)處理。在-78℃攪拌達1小時之後，混合物用碘甲烷(1.4mL,22.5mmol)處理。反應混合物在-78℃攪拌達1小時，接著在0℃攪拌達1小時，和在室溫攪拌達1小時。反應混合物再次冷卻至0℃及用水驟冷。水相用二氯甲烷萃取(2 x)，及有機溶液通過疏水性玻璃料，和溶劑被蒸 發。殘留物藉由矽膠層析術以4：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(1.62g,52%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.41-1.52(m,18H),1.53-1.67(m,4H),1.71-1.99(m,3H),3.17-3.51(m,1H),3.70-3.81(m,3H),3.90-4.21(m,1H)。LCMS(m/z)359.0[M+H],Tr=2.90分鐘。
化合物94b. 3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-3-甲基-四氫-嗒-1,2-二甲酸二-第三丁基酯
在0℃之3-甲基-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯3-甲基酯(1.62g,4.52mmol)的四氫呋喃/水/甲醇溶液(50mL,5：1：1)中添加氫氧化鋰水合物(2.2g,52.3mmol)。反應混合物在0℃攪拌達1小時，和接著在室溫攪拌達1小時。反應混合物在40℃受熱達19小時，接著冷卻至室溫，及溶劑被蒸發。殘留物被分配在乙酸乙酯和水之間，及混合物用鹽酸(1M)酸化至pH 5。有機相被分離，及水相用乙酸乙酯萃取。結合的有機萃取液用無水硫酸鎂乾燥、過濾，且溶劑被蒸發。殘留物溶於甲苯，且溶劑被蒸發以得到3-甲基-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯，其為黃色油狀物(1.47g,95%)。LCMS(m/z) 343.1[M-H],Tr=2.36分鐘。在0℃之3-甲基-四氫-嗒-1,2,3-三甲酸1,2-二-第三丁基酯(1.37g,4.0mmol)的二氯甲烷溶液(30mL)中依序添加(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺鹽酸鹽(1.30g,4.5mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(2.8mL,16.0mmol)、(二甲基胺基)-N,N-二甲基(3H-[1,2,3]三唑並[4,5-b]吡啶-3-基氧基)甲亞銨六氟磷酸鹽(1.81g,4.76mmol)。反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達2小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，和用水清洗。分離層，且水層用二氯甲烷萃取。結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料，及溶劑被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以20：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(929mg,40%)其為黃色泡沫物及為非鏡像異構物的混合物。LCMS(m/z)577.3,579.2[M+H],Tr=3.72分鐘。
化合物94c. ((S)-2-{3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-3-甲基-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯
在0℃之3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-3-甲基-四氫-嗒-1,2-二甲酸二-第三丁基酯(925mg,1.6 mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中添加三氟乙酸(3mL)。反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達36小時。反應混合物在減壓下濃縮，及殘留物與甲苯共蒸發(3 x)以得到3-甲基-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺雙-三氟乙酸鹽(1.6mmol)，其為淺棕色泡沫物。LCMS(m/z)377.3,379.2[M+H],Tr=1.18分鐘。在0℃之(S)-2-第三丁氧基羰基胺基-丙酸(303mg,1.6mmol)的無水乙腈溶液(12mL)中添加O-(苯並三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸鹽(915mg,2.41mmol)和N,N-二異丙基乙基胺(1.5mL,8.42mmol)。反應混合物在0℃攪拌達15分鐘，和接著用[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺雙-三氟乙酸鹽(1.6mmol)的無水乙腈溶液(8mL)處理。使反應混合物回暖至室溫及攪拌達16小時。溶劑被蒸發，及殘留物被分配在二氯甲烷及水之間。有機層被分離，且水層用二氯甲烷萃取。結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料，及溶劑被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以20：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(857mg,40%共2步驟)，其為棕色油狀物及為非鏡像異構物的混合物。LCMS(m/z)548.0,550.0[M+H],Tr=2.68分鐘。
化合物94d. 1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-3-甲基-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
在0℃之((S)-2-{3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-thy1胺甲醯基]-3-甲基-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基)-胺甲酸第三丁基酯(1.92g,3.5mmol)的二氯甲烷溶液(15mL)中添加三氟乙酸(3mL)。使反應混合物回暖至室溫及接著攪拌達4小時。反應混合物被濃縮，及殘留物與甲苯共蒸發(3 x)以得到1-((S)-2-胺基-丙醯基)-3-甲基-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺三氟乙酸鹽(3.5mmol)，其為棕色油狀物。LCMS(m/z)448.0,450.0[M+H],Tr=1.22分鐘。1-((S)-2-胺基-丙醯基)-3-甲基-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺三氟乙酸鹽(3.5mmol)溶於二氯甲烷(20mL)，且溶液被冷卻至0℃。添加(S)-2-羥基-3-甲基-丁酸(458mg,3.8mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(5mL,28.0mmol)和(苯並三唑-1-基氧基)三(二甲基胺基)鏻六氟磷酸鹽(1.86g,4.2mmol)。使反應混合物回暖至室溫及攪拌達16小時。溶劑被蒸發，及殘留物溶於乙酸乙酯。有機溶液用檸檬酸(10%)、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗，用無水硫酸鎂乾燥，且溶劑被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至20：1之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(745mg,39%共2步驟)，其為白色泡沫物及為非鏡像異構物 的1：4混合物。LCMS(m/z)548.0,550.0[M+H],Tr=2.21分鐘。
化合物94e
1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-3-甲基-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(164mg,0.3mmol)、4-側氧基-1-乙烯基-環己烷甲酸(50mg,0.3mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(18mg,0.06mmol)和三乙基胺(91mg,0.13mL,0.9mmol)在1,4-二10mL)中的受攪拌溶液用氮排氣達15分鐘。溶液受熱至50℃，及添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(28mg,0.03mmol)。反應混合物在80℃受熱達1小時。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製1-((E)-2-{2-[(R)-1-({1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-3-甲基-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-側氧基-環己烷甲酸(0.3mmol)，其為黃色膠狀物及為非鏡像異構物的混合物。LCMS(m/z)636.2[M+H],Tr=1.65分鐘。2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(206mg,0.6mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(146mg,1.2mmol)的含有4Å分子篩(200mg)之二氯甲烷溶液(200mL)在室 溫和氮下攪拌。逐滴添加粗製1-((E)-2-{2-[(R)-1-({1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-3-甲基-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-4-側氧基-環己烷甲酸(0.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經4小時，及反應混合物在室溫攪拌達18小時。反應混合物透過矽藻土過濾，及溶液被部分蒸發至~30mL體積。溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(77mg,41%)，其為白色固體物及為非鏡像異構物的混合物。LCMS(m/z)618.2[M+H],Tr=2.38分鐘。
化合物94
化合物94e(41mg,0.066mmol)的無水四氫呋喃溶液(4mL)在-78℃和氮下攪拌。添加硼氫化鋰溶液(2M的四氫呋喃溶液，0.15mL,0.23mmol)，且反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加鹽酸(2M)和乙酸乙酯，及反應混合物被回暖至室溫。有機層被分離，且水層用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水 性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。橙色殘留物藉由逆相製備級HPLC以3：7之乙腈(以0.1%甲酸修飾)/水(以0.1%甲酸修飾)沖提予以純化。含有產物之部分被結合及蒸發。殘留物溶於乙酸乙酯，及溶液用少量飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(12mg,29%)，其為白色固體物及為非鏡像異構物的9：1混合物。1H NMR(300MHz,CD3OD)(主要非鏡像異構物的峰)δ 1.04(d,J=6.5Hz,3H),1.10(d,J=6.7Hz,3H),1.20-1.40(m,3H),1.48(s,3H),1.58(d,J=7.1Hz,3H),1.59(d,J=7.3Hz,3H),1.65-1.80(m,3H),1.95-2.25(m,4H),2.34-2.38(m,1H),2.56-2.71(m,2H),3.35-3.40(m,1H),3.60-3.67(m,1H),4.42-4.50(m,1H),5.14(q,J=7.2Hz,1H),5.27(d,J=7.4Hz,1H),5.74(q,J=7.1Hz,1H),6.34(d,J=16.3Hz,1H),6.60(d,J=16.3Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.58(d,J=8.3Hz,1H),7.84(d,J=8.3Hz,1H),7.93(br s,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)620.2[M+H],Tr=2.17分鐘。
化合物95. 實施例95
化合物95a. 羥基-氧呾-3-基-乙酸乙基酯
中在-78℃和氮下之氧呾-3-基-乙酸乙基酯(得自Activate Scientific GmbH)(1.04g,7.21mmol)在無水四氫呋喃(72mL)的受攪拌溶液逐滴添加六甲基二矽氮化鈉(0.6M的甲苯溶液，14.4mL,8.66mmol)以得到黃橙色溶液。反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘，及接著添加2-(苯基磺醯基)-3-苯基-氧氮(2.83g,10.8mmol)的四氫呋喃溶液(7mL)，歷經2分鐘。反應混合物在-78℃攪拌達90分鐘，及接著經由注射器添加飽和氯化銨溶液(10mL)。使反應混合物回暖至周圍溫度，及5分鐘之後，添加另外的飽和氯化銨溶液(10mL)，且接著在周圍溫度攪拌達1小時。反應混合物用鹽酸(2M)中和至pH 7，及混合物用水稀釋和用乙酸乙酯萃取(4 x)。結合的有機萃取液用鹽水清洗，用無水硫酸鎂乾燥，過濾和部分蒸發至約~10mL。混合物用二氯甲烷稀釋，及濾掉該固體物，濾液被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至1：3之異己烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(688mg,60%)，其為白色膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.30(t,J=7.2Hz,3H),2.95(d,J=5.1Hz,1H),3.26-3.38(m,1H),4.26(q,J=7.1Hz,2H),4.42(dd,J=7.4,5.1Hz,1H),4.67-4.81(m,4H)。LCMS(m/z)161.2[M+H]Tr=0.72分鐘
化合物95b. 2,2-二甲基-丁-3-烯酸乙氧基羰基-氧呾-3-基-甲基酯
於羥基-氧呾-3-基-乙酸乙基酯(330mg,2.06mmol)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(1.42g,4.12mmol)和4-二甲基胺基吡啶(100mg,0.82mmol)在二氯甲烷(4mL)中的受攪拌溶液中添加2,2-二甲基-丁-3-烯酸(294mg,2.58mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)。反應混合物被攪拌達4小時及接著被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1之異己烷/二乙基醚予以純化以得到標題化合物(383mg,73%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.27(t,J=7.1Hz,3H),1.39(s,3H),1.41(s,3H),3.48-3.61(m,1H),4.20(q,J=7.1Hz,2H),4.62-4.68(m,2H),4.72-4.85(m,2H),5.12-5.24(m,3H),6.09(dd,J=17.5,10.6Hz,1H)。LCMS(m/z)257.1[M+H],Tr=2.31分鐘
化合物95c. 2,2-二甲基-丁-3-烯酸羧基-氧呾-3-基-甲基酯
於2,2-二甲基-丁-3-烯酸乙氧基羰基-氧呾-3-基-甲基酯(207mg,0.808mmol)的四氫呋喃受攪拌溶液(81mL)中依序添加碳酸鉀(123mg,0.888mmol)的水溶液(20.25mL) 甲醇(4.05mL)。反應混合物迴流受熱達7小時，及接著使其冷卻。添加鹽酸(2M,400μL)至(pH 7)，及蒸發溶劑。殘留物用二氯甲烷萃取(2 x)，及丟棄洗液。水層用鹽酸(2M)酸化至pH 5，用二氯甲烷萃取(2 x)，及結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料和被蒸發。於水層中添加鹽酸(約5滴)，且混合物用二氯甲烷萃取(2 x)，及結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料、蒸發及與先前物質結合以得到標題化合物(123mg,67%)，其為黃色/綠色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.39(s,3H),1.40(s,3H),3.54-3.67(m,1H),4.67-4.75(m,2H),4.81-4.92(m,2H),5.14(d,J=10.9Hz,1H),5.15-5.32(m,2H),6.08(dd,J=17.5,10.5Hz,1H),9.30(br s,1H)。LCMS(m/z)229.1[M+H]Tr=1.67分鐘。
化合物95d. (S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺
在0℃之(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(330mg,0.618mmol)的二氯甲烷溶受攪拌溶液(10mL)中添加三氟乙酸(3.3mL)，及反應混合物被攪拌達1小時及接著被蒸發。殘留 物溶於二氯甲烷和用飽和碳酸氫鹽溶液清洗(2 x)，水層萃取液用二氯甲烷清洗，且結合的有機萃取液通過疏水性玻璃料和被蒸發以得到黃色泡沫物(232mg)，其直接用於下一步驟。
化合物95e. 2,2-二甲基-丁-3-烯酸((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基胺甲醯基)-氧呾-3-基-甲基酯
(S)-1-((S)-2-胺基-丙醯基)-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(141mg,0.618mmol)和2,2-二甲基-丁-3-烯酸羧基-氧呾-3-基-甲基酯(315mg,0.725mmol)在無水的N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的受攪拌溶液在氮下被冷卻至0℃。添加2,2,6,6-四甲基哌啶(261mg,313μL,1.85mmol)，接著快速添加(1-氰基-2-乙氧基-2-側氧基亞乙基胺基氧基)二甲基胺基-N-味啉基-碳正離子六氟磷酸鹽(371mg,0.865mmol)。使反應混合物回暖至室溫和攪拌達15小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，和用飽和氯化銨溶液(2 x)、飽和碳酸氫鈉溶液(2 x)清洗，有機層透過相分離器過濾及蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以得 到標題化合物(167mg,42%)，其為黃色/棕色泡沫物及為非鏡像異構物的約1：1混合物。LCMS(m/z)644.2,646.1[M+H],Tr=2.63分鐘。
化合物95
2,2-二甲基-丁-3-烯酸((S)-2-{(S)-3-[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基胺甲醯基]-四氫-嗒-1-基}-1-甲基-2-側氧基-乙基胺甲醯基)-氧呾-3-基-甲基酯(167mg,0.259mmol)、三乙基胺(79mg,108μL,0.777mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(16mg,0.052mmol)的1,4-二溶液(86mL)用氮排氣達10分鐘，及接著在氮下邊攪拌邊回暖至50℃。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(24mg,0.026mmol)，且反應混合物受熱至80℃達90分鐘，及接著添加更多的三(鄰-甲苯基)膦(32mg,0.104mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(48mg,0.052mmol)。反應混合物受熱至80℃達2小時，及添加更多的三(鄰-甲苯基)膦(16mg,0.52mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(24mg,0.026mmol)。在80℃加熱達1.5小時之後，添加更多的三(鄰-甲苯基)膦(16mg,0.52mmol)和三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(24mg,0.026mmol)。在80℃加熱達30分鐘之後，混合物被冷卻及透過矽藻土過濾， 且濾液被蒸發。殘留物藉由逆相製備級HPLC使用1：9至7：3之乙腈/水的梯度溶液予以純化以得到標題化合物(15.6mg,11%)，其為黃色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.46(s,3H),1.50-1.73(m,1H),1.56(s,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.64(d,J=7.2Hz,3H),1.90-2.01(m,1H),2.23-2.32(m,1H),2.63-2.74(m,1H),3.47-3.62(m,2H),4.37-4.45(m,1H),4.64(t,J=6.5Hz,1H),4.72-4.82(m,4H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),5.75(q,J=7.4Hz,1H),5.82(d,J=6.9Hz,1H),6.38(d,J=16.3Hz,1H),6.60(d,J=16.3Hz,1H),7.45(d,J=8.5Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.81(br s,1H),7.85(d,J=8.5Hz,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)564.2[M+H],Tr=2.16分鐘。
實施例96. 化合物96
化合物45(63.0mg,0.091mmol)的二氯甲烷冷(0℃)溶液(10mL)用鹽酸(4M)的1,4-二溶液(0.12mL,0.455mmol)處理。在室溫攪拌達6天之後，添加二氯甲烷(10mL)和鹽酸鹽(4M)的1,4-二溶液(0.12mL,0.455mmol)。在室溫攪拌達4小時之後，揮發物在真空中予以移除，及殘留的水與甲苯共沸以提供白色固體物，其被懸 浮於二氯甲烷溶液(5mL)中，及混合物隨後用三乙基胺(0.02mL,0.136mmol)和乙醛(0.01mL,0.182mmol)處理。在室溫攪拌達30分鐘之後，反應混合物用三乙醯氧基硼氫化鈉(38.6mg,0.182mmol)處理。在室溫攪拌達1小時之後，反應混合物用數滴飽和碳酸氫鈉驟冷及透過相分離器過濾。揮發物在真空中予以移除，及殘留物藉由逆相製備級HPLC使用經0.1%甲酸修飾之5：95至3：7之乙腈/水的梯度溶液予以純化。揮發物蒸發之後，白色固體物被分配在乙酸乙酯和碳酸氫鈉的飽和溶液之間。有機液透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除以提供標題化合物(8.3mg,15%共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 1.02-1.18(m,9H),1.22-1.33(m,1H),1.51-1.73(m,7H),1.89-2.00(m,1H),2.11(d,J=11.6Hz,1H),2.16-2.36(m,3H),2.39-2.57(m,2H),2.61-2.73(m,1H),2.74-2.82(m,1H),3.54-3.67(m,2H),3.87-4.02(m,2H),4.38-4.47(m,1H),4.99(d,J=12.0Hz,1H),5.05-5.14(m,2H),5.79(q,J=7.4Hz,1H),6.13(d,J=16.3Hz,1H),6.92(d,J=16.3Hz,1H),7.46(d,J=8.5Hz,1H),7.60(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.86(d,J=8.5Hz,1H),7.91(s,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)621.3[M+H],Tr=1.20分鐘。
實施例97. 化合物97
化合物45(85.3mg,0.123mmol)的二氯甲烷冷(0℃)溶液(10mL)用鹽酸(4M)的1,4-二溶液(0.31mL,1.231mmol)處理。在室溫攪拌達2天之後，添加更多的鹽酸鹽(4M)的1,4-二溶液(0.3mL,1.2mmol)。在室溫攪拌達1.5小時之後，揮發物在真空中予以移除，及殘留的水與甲苯共沸以提供白色固體物，其被懸浮於二氯甲烷溶液(5mL)中，及混合物隨後用三乙基胺(0.04mL,0.246mmol)和甲磺醯氯(0.01mL,0.148mmol)處理。在室溫攪拌達30分鐘之後，反應混合物用三乙醯氧基硼氫化鈉(38.6mg,0.182mmol)處理。在室溫攪拌達1小時之後，反應混合物用飽和碳酸氫鈉溶液驟冷。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合及透過相分離器過濾。揮發物在真空中予以移除，及殘留物藉由逆相製備級HPLC使用5：95至1：0之乙腈/水的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(14.7mg,18%共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)δ 1.05-1.12(m,6H),1.52-1.73(m,8H),1.91-2.00(m,1H),2.17-2.30(m,2H),2.62-2.74(m,1H),2.93(s,3H),3.01(d,J=11.8Hz,1H),3.05-3.13(m,1H),3.51-3.68(m,2H),3.83-3.94(m,1H),4.07-4.15(m,1H),4.24-4.31(m,1H),4.39-4.47(m,1H),5.02(d,J=11.8Hz,1H), 5.10(q,J=6.7Hz,1H),5.19(d,J=8.7Hz,1H),5.81(q,J=7.3Hz,1H),6.19(d,J=16.3Hz,1H),6.99(d,J=16.3Hz,1H),7.48(d,J=8.5Hz,1H),7.62(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),7.93(s,1H),8.27(d,J=8.2Hz,1H)。LCMS(m/z)671.3[M+H],Tr=2.07分鐘。
實施例98. 化合物98
化合物98a. 2,2-雙-羥基甲基-3-側氧基-丁酸第三丁基酯
3-側氧基-丁酸第三丁基酯(15.8g,100mmol)和甲醛水溶液(37%水溶液，18mL,230mmol)的1,4-二溶液(50mL)在0℃和氮下攪拌。逐滴添加三乙基胺(505mg,0.7mL,5mmol)的四氫呋喃溶液(5mL)，及反應混合物在40℃攪拌達1小時及接著在室溫攪拌達20小時。大部分的溶劑被蒸發，添加水，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用7：3至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供2,2-雙-羥基甲基-3-側氧基-丁酸第三丁基酯(8.67g, 40%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 1.38(s,9H),2.07(s,3H),3.81-3.86(m,4H),4.77(t,J=5.1Hz,2H)。LCMS(m/z)217.0[M-H],Tr=1.45分鐘。
化合物98b. 5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯
2,2-雙-羥基甲基-3-側氧基-丁酸第三丁基酯(8.67g,40mmol)、丙酮(30mL,400mmol)、2,2-二甲氧基丙烷(41.6g,50mL,400mmol)和4-甲苯磺酸水合物(152mg,0.8mmol)的混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被部分蒸發至體積為~20mL。添加飽和碳酸氫鈉溶液，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機層透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用9：1至4：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(7.82g,75%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.39(s,3H),1.44(s,3H),1.48(s,9H),2.32(s,3H),6.36(ABq,△δ AB=0.05,J AB=11.8Hz,4H)。LCMS(m/z)281.2[M+Na],Tr=2.44分鐘。
化合物98c. 2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三 丁基酯
N,N-二異丙基胺(1.51g,2.1mL,15mmol)的無水四氫呋喃溶液(30mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加正丁基鋰(2.5M的己烷溶液，5.6mL,14mmol)，及反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯(2.58g,10mmol)的四氫呋喃溶液(5mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達15分鐘。添加N-苯基-(雙-三氟甲磺醯胺)(3.93g,11mmol)的四氫呋喃溶液(30mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達15分鐘。移除冷浴，及反應混合物在室溫攪拌達30分鐘。溶劑被蒸發及添加二乙基醚(50mL)。溶液被冷卻至5℃，及用冷氫氧化鈉溶液(1M,3×30mL)和鹽水清洗。有機溶液被分離，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，和蒸發溶劑以提供2,2-二甲基-5-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯(3.84g,10mmol)，其為黃色油狀物。2,2-二甲基-5-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙烯基)-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯(3.84g,10mmol)和三-正丁基胺(5.55g,7mL,30mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(20mL)在室溫和氮下攪拌。添加二氯化雙(三苯基膦)鈀(II)(350mg,0.5mmol)和甲酸(920mg,0.77mL,20mmol)，及反應混合物在60℃受熱達90分鐘。反應混合物被冷卻至室溫，及添加乙酸乙酯和水。有機萃取液用水(5 x)和鹽水清洗。有機溶液透過 疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用9：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化，接著藉由矽膠層析術使用19：1至9：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(1.09g,45%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.41(s,3H),1.45(s,3H),1.50(s,9H),3.82(d,J=11.8Hz,2H),4.25(d,J=11.8Hz,2H),5.25(d,J=17.2Hz,1H),5.26(d,J=10.7Hz,1H),5.73(dd,J=17.2,11.7Hz,1H)。
化合物98d. 2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸第三丁基酯
2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯(969mg,4mmol)和4-甲苯磺酸水合物(76mg,0.4mmol)的甲醇溶液(10mL)在室溫攪拌達30分鐘。溶劑被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(660mg,82%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)：δ 1.38(s,9H),3.54-3.68(m,4H),4.56(t,J=5.4Hz,2H),5.12(d,J=10.5Hz,1H),5.14(d,J=18.3Hz,1H),5.80(dd,J=18.3,10.5Hz,1H)。LCMS(m/z)225.2[M+Na],Tr=1.47分鐘。
化合物98e. 2-側氧基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三丁 基酯
2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸第三丁基酯(202mg,1mmol)和吡啶(0.5mL,6mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加三光氣(150mg,0.5mmol)的二氯甲烷溶液(2.5mL)，及反應混合物在-78℃攪拌達1小時。反應混合物被回暖至室溫及在室溫攪拌達15分鐘，和添加飽和氯化銨溶液。有機層被分離，用鹽酸(1M)、飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至3：2之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(204mg,89%)，其為透明膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 1.48(s,9H),4.38(d,J=10.7Hz,2H),4.71(d,J=10.7Hz,2H),5.39(d,J=17.4Hz,1H),5.47(d,J=10.7Hz,1H),5.77(dd,J=17.4,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)229.1[M+H],Tr=2.04分鐘。
化合物98f. 2-側氧基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸
2-側氧基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯(200mg,0.88mmol)的二氯甲烷溶液(4mL)在0℃攪拌。 添加三氟乙酸(2mL)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達3小時。溶劑被蒸發，及殘留物用二乙基醚/異己烷(1：1)研磨以提供標題化合物(135mg,90%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 4.51(d,J=10.5Hz,2H),4.67(d,J=10.5Hz,2H),5.38(d,J=17.6Hz,1H),5.43(d,J=10.7Hz,1H),5.83(dd,J=17.6,10.7Hz,1H),13.5-14.0(br s,1H)。LCMS(m/z)173.2[M+H],Tr=0.62分鐘。
化合物98
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(164mg,0.3mmol)、2-側氧基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸(57mg,0.33mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(18mg,0.06mmol)和三乙基胺(91mg,0.13mL,0.9mmol)的1,4-二受攪拌溶液(10mL)用氮排氣達15分鐘。溶液受熱至50℃，及添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(28mg,0.03mmol)。反應混合物在80℃受熱達45分鐘。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯 胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-2-側氧基-[1,3]二-5-甲酸(0.3mmol)，其為黃色膠狀物。LCMS(m/z)626.2[M+H],Tr=1.67分鐘。2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(206mg,0.6mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(146mg,1.2mmol)的含有4Å分子篩(200mg)之二氯甲烷溶液(200mL)在室溫和氮下攪拌。逐滴添加粗製5-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-2-側氧基-[1,3]二-5-甲酸(0.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經4小時，及反應混合物在室溫攪拌達16小時。反應混合物透過矽藻土過濾，及溶液被部分蒸發至體積為~50mL。溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：0至5：1之乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提予以純化，接著藉由逆相製備級HPLC以7：13之乙腈/水沖提予以純化。含有產物之部分被結合，及大部分的有機溶劑被蒸發。得到的水溶液用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合，透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(3.1mg,2%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3CN)：δ 0.96(d,J=6.7Hz,3H),1.04(d,J=6.7Hz,3H),1.41-1.49(m,2H),1.54(d,J=6.7Hz,3H),1.55(d,J=7.1Hz,3H),1.59-1.64(m,1H),1.88-1.93(m,1H),2.19-2.24(m,1H),2.56-2.64(m,1H),3.48-3.57(m,1H),4.19(d,J=12.0 Hz,1H),4.38-4.43(m,1H),4.59(d,J=10.9Hz,1H),4.71(d,J=10.9Hz,1H),4.85-4.91(m,2H),5.06-5.10(m,1H),5.23(d,J=7.8Hz,1H),5.73-5.79(m,1H),6.26(d,J=16.5Hz,1H),6.83(d,J=16.5Hz,1H),7.18(d,J=8.0Hz,1H),7.48(d,J=8.5Hz,1H),7.64(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.90(d,J=8.5Hz,1H),7.99(br s,1H),8.28(d,J=8.5Hz,1H),8.85(br d,J=5.0Hz,1H)。LCMS(m/z)608.2[M+H],Tr=2.01分鐘。
實施例99，化合物99
化合物99a. 5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯
化合物99a以與5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯相同方式予以製備，使用乙醯乙酸乙酯代替3-側氧基-丁酸第三丁基酯，31%產率，共2步驟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.29(t,J=7.1Hz,3H),1.40(s,3H),1.44(s,3H),2.33(s,3H),4.23(q,J=7.1Hz,2H),4.30(ABq,△δ AB=0.04,J AB=11.9Hz,4H)。
化合物99b. 2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯
化合物99b以與2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯相同方式予以製備，使用5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯代替5-乙醯基-2,2-二甲基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯，50%產率，共2步驟。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.31(t,J=7.1Hz,3H),1.41(s,3H),1.46(s,3H),4.10(ABq,△δ AB=0.44,J AB=11.9Hz,4H),4.26(q,J=7.1Hz,2H),5.24(d,J=17.4Hz,1H),5.28(d,J=10.9Hz,1H),5.24(dd,J=17.4,10.9Hz,1H)。LCMS(m/z)237.0[M+Na],Tr=2.14分鐘。
化合物99c. 2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸乙基酯
化合物99c以與2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸第三丁基酯相同方式予以製備使用2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯代替2,2-二甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸第三丁基酯，78%產率。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 1.17(t,J=7.0Hz,3H),3.59-3.71(m,4H),4.06(q, J=7.0Hz,2H),4.65(t,J=5.6Hz,2H),5.13(d,J=18.5Hz,1H),5.15(d,J=10.5Hz,1H),5.80(dd,J=18.5,10.5Hz,1H)。LCMS(m/z)197.1[M+Na],Tr=0.96分鐘。
化合物99d. 2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸
在-78℃和氮下之2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸乙基酯(338mg,1.9mmol)和2,6-二甲吡啶(813mg,0.88mL,7.6mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)中逐滴添加三氟甲磺酸酐(1.07g,0.66mL,3.8mmol)，及反應混合物被回暖至室溫及在室溫攪拌達30分鐘。溶液用冰-冷鹽酸(1M)和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製2,2-雙-三氟甲磺醯基氧基甲基-丁-3-烯酸乙基酯(1.9mmol)，其為橙色油狀物，其立即用於下一步驟。2,2-雙-三氟甲磺醯基氧基甲基-丁-3-烯酸乙基酯(1.9mmol)的四氫呋喃溶液(5mL)在0℃和氮下攪拌。添加氟化四正丁基銨(1M的四氫呋喃溶液，4.75mL,4.75mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達2小時。溶劑被蒸發。殘留物溶於二氯甲烷，及溶液用飽和碳酸氫鈉溶液、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用19：1至4：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化 以提供受溶劑污染之2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸乙基酯(1.9mmol)，其為透明油狀物。粗製2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸乙基酯(1.9mmol)的四氫呋喃溶液(10mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(240mg,5.7mmol)的水溶液(2.5mL)，且反應混合物在0℃攪拌達1小時和接著在室溫攪拌達24小時。反應混合物用鹽酸(2M)酸化至pH 2。添加水，且混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合，用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(400mg)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 4.54-4.83(m,4H),5.33(d,J=17.8Hz,1H),5.36(d,J=10.7Hz,1H),5.81(dd,J=17.8,10.7Hz,1H),13.0-13.5(br s,1H)。LCMS(m/z)149.2[M-H],Tr=1.45分鐘。
化合物99e. (S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯
[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-胺甲酸第三丁基酯(105mg,0.3mmol)、2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸(50mg,0.33mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(18mg,0.06mmol)和三乙基胺(91mg,0.13mL,0.9mmol)的1,4-二溶液(3mL)用氮排氣達15分鐘。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(28mg,0.03mmol)，且反應混合物受熱至60℃達1小時。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸(0.3mmol)，其為黃色膠狀物。LCMS(m/z)421.1[M+H],Tr=2.27分鐘。粗製(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯酸(0.3mmol)、N,N-二異丙基乙基胺(96mg,0.13mL,0.75mmol)、4-(二甲基胺基)-吡啶(73mg,0.6mmol)和2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(193mg,0.56mmol)的無水二氯甲烷溶液中(5mL)在0℃和氮下攪拌。添加(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(142mg,0.33mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達18小時。反應混合物用二氯甲烷稀釋，及溶液用冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、水、冰-冷鹽酸(1M)、水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用2：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供部分經純化的標題化合物(26mg,10%)，其 為黃色膠狀物。LCMS(m/z)834.3,836.2[M+H],Tr=3.39分鐘。
化合物99
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸2,2,2-三氯-乙基酯(100mg,0.11mmol)的四氫呋喃溶液(3mL)在0℃和氮下攪拌。添加冰-冷氫氧化鈉水溶液(0.1M,1.1mL,0.11mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達20分鐘。添加冷鹽酸(1M)以使混合物酸化至pH 2，且溶劑被蒸發。殘留物與四氫呋喃/甲苯共蒸發(1：1,3 x)，及殘留物用二乙基醚研磨(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.1mmol)，其為黃色固體物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)704.3[M+H],Tr=2.61分鐘。粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-第三丁氧基羰基胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲 基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸(0.1mmol)的混合物在鹽酸(4M的1,4-二溶液，2mL)中在室溫攪拌達30分鐘。溶劑被蒸發，及殘留物與二乙基醚共蒸發(2 x)，且得到的固體物被乾燥以提供(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.1mmol)，其為灰白色固體物，其以粗製形式用於下一反應。LCMS(m/z)604.3[M+H],Tr=1.53分鐘。粗製(S)-1-[(S)-2-((S)-2-{(E)-4-[2-((R)-1-胺基-乙基)-喹啉-7-基]-2,2-雙-氟甲基-丁-3-烯醯基氧基}-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸鹽酸鹽(0.1mmol)的二氯甲烷懸浮液(100mL)在0℃和氮下攪拌。添加N,N-二異丙基乙基胺(52mg,0.07mL,0.4mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，且得到的溶液在0℃攪拌。添加2-(1H-7-氮苯並三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基六氟磷酸鹽甲銨(76mg,0.2mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達18小時。溶劑被部分蒸發至體積為~30mL。溶液用冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液、冰-冷鹽酸(1M)和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術以1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液沖提予以純化，接著藉由矽膠層析術以3：2之異己烷/丙酮沖提予以純化。殘留物用二乙基醚研磨，及得到的固體物被乾燥以提供標題化合物(4mg,7%，歷經3步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300 MHz,CD3OD)δ 1.01(d,J=6.5Hz,3H),1.09(d,J=6.9Hz,3H),1.49-1.55(m,2H),1.61(d,J=6.9Hz,3H),1.64(d,J=7.1Hz,3H),1.93-1.98(m,1H),2.15-2.28(m,2H),2.68-2.76(m,1H),3.59-3.63(m,1H),4.41-4.46(m,1H),4.70-5.13(m,5H),5.35(d,J=8.9Hz,1H),5.84(q,J=7.1Hz,1H),6.27(d,J=16.5Hz,1H),6.81(d,J=16.5Hz,1H),7.49(d,J=7.9Hz,1H),7.70(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.82(br s,1H),7.88(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)586.2[M+H],Tr=2.48分鐘。
實施例100及101. 化合物100及101
化合物100a. 2-烯丙氧基-2-甲基-丙酸乙基酯
2-羥基-2-甲基-丙酸乙基酯(2.64g,2.7mL,20mmol)的N,N-二甲基甲醯胺溶液(20mL)在0℃和氮下攪拌。添加氫化鈉(60%分散於油中，880mg,22mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達5分鐘。添加溴化烯丙基(2.18g,1.6mL,18mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達18小時。反應混合物被冷卻至0℃，及小心添加 飽和氯化銨溶液以驟冷反應。添加二乙基醚，且有機層被分離，用水(3 x)和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用12：1至4：1之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(2.33g,67%)，其為透明油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.31(t,J=7.1Hz,3H),1.47(s,6H),3.95-3.98(m,2H),4.21(q,J=7.1Hz,2H),5.15-5.20(m,1H),5.27-5.39(m,1H),5.90-6.03(m,1H)。LCMS(m/z)195.2[M+Na],Tr=2.24分鐘。
化合物100b. (5,5-二甲基-[1,4]二-2-基)-甲醇
2-烯丙氧基-2-甲基-丙酸乙基酯(1.72g,10mmol)的無水四氫呋喃溶液(40mL)在室溫和氮下攪拌。分數次添加硼氫化鋰(44mg,20mmol)，及反應混合物在室溫攪拌達20小時。反應混合物被冷卻至0℃，及小心添加飽和氯化銨溶液，接著添加鹽酸(2M)以酸化反應混合物至pH 2。混合物用二乙基醚萃取，及有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供2-烯丙氧基-2-甲基-丙-1-醇(10mmol)，其以粗製形式用於下一步驟。LCMS(m/z)153.2[M+Na],Tr=1.16分鐘。2-烯丙氧基-2-甲基-丙-1-醇(10mmol)的二氯甲烷懸浮液(40mL)在0℃攪拌。添加間-氯過氧苯甲酸(70%純度，含 有20%水和10%間-氯苯甲酸，2.9g,12mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達30分鐘和接著在室溫攪拌達24小時。反應混合物被冷卻至0℃，及添加飽和碳酸氫鈉溶液和硫代硫酸鈉溶液，及混合物在0℃攪拌達15分鐘。有機層被分離，且水層用二氯甲烷萃取(4 x)。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供2-甲基-2-氧基甲氧基-丙-1-醇(10mmol)，其以粗製形式用於下一步驟。LCMS(m/z)169.2[M+Na],Tr=0.72分鐘。2-甲基-2-氧基甲氧基-丙-1-醇(10mmol)的二氯甲烷溶液(50mL)和消旋樟腦-10-磺酸(765mg,3.3mmol)在室溫攪拌達18小時。添加飽和碳酸氫鈉溶液，和分離有機層。水層用二氯甲烷萃取，及有機萃取液被結合，透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用2：3至1：4之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(826mg,57%，歷經3步驟)，其為黃色油狀物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)：δ 1.02(s,3H),1.20(s,3H),3.23(d,J=11.1Hz,1H),3.30-3.50(m,6H),4.68(t,J=5.4Hz,1H)。LCMS(m/z)169.2[M+Na],Tr=0.72分鐘。
化合物100c. 5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯
(5,5-二甲基-[1,4]二-2-基)-甲醇(657mg,4.5 mmol)的1M氫氧化鉀溶液(6.7mL,6.7mmol)在5℃攪拌。逐滴添加過錳酸鉀(1.42g,9mmol)的水溶液(10mL)，並維持內部溫度低於10℃。反應混合物在5℃攪拌達1小時和接著在室溫攪拌達18小時。反應混合物透過矽藻土過濾，且濾液墊用水和甲醇清洗，且濾液被蒸發。殘留物用鹽酸(2M)酸化至pH 2，及混合物用乙酸乙酯和氯仿萃取。有機萃取液被結合，和用少量鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供粗製5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸(694mg,4.5mmol)，其為蠟狀固體物。LCMS(m/z)159.1[M-H],Tr=0.88分鐘。5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸(750mg,4.7mmol)、草醯氯(600mg,0.4mL,4.7mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(2滴)的二氯甲烷溶液(15mL)在室溫和氮下攪拌達2小時。添加苯甲基醇(508mg,0.5mL,4.7mmol)的二氯甲烷溶液(2mL)，且反應混合物在室溫攪拌達20小時。添加額外的苯甲基醇(0.5mL,4.7mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達18小時。溶劑被蒸發，而殘留物藉由矽膠層析術使用9：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(870mg,74%)，其為油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 1.19(s,3H),1.32(s,3H),3.43(d,J=11.4Hz,1H),3.72(d,J=11.4Hz,1H),3.88-3.92(m,2H),4.21(dd,J=8.2,4.7Hz,1H),5.24(s,2H),7.34-7.39(m,5H)。LCMS(m/z)273.1[M+Na],Tr=2.41分鐘。
化合物100d. 2-(1-羥基-乙基)-5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯
N,N-二異丙基胺(530mg,0.73mL,5.25mmol)的無水四氫呋喃溶液(4mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加正丁基鋰(2.1mL,5.25mmol,2.5M的己烷溶液)，及反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯(870mg,3.5mmol)的四氫呋喃溶液(8mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達20分鐘。一次性添加乙醛(462mg,0.6mL,10.5mmol)。移除冷浴，及反應混合物在室溫攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至0℃，及添加冰-冷鹽酸(2M)以將反應混合物酸化至pH 2。將氯化鈉添加至飽和水相，及混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用6：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化，接著藉由矽膠層析術使用3：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以提供標題化合物(400mg,40%)，其為油狀物及為非鏡像異構物的2：1混合物。LCMS(m/z)295.1[M+H],Tr=2.11分鐘。
化合物100e. 5,5-二甲基-2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯
氫化鈉(80mg,2mmol,60%於礦物油中的懸浮液)的無水四氫呋喃懸浮液(3mL)在-78℃和氮下攪拌。添加2-(1-羥基-乙基)-5,5-二甲基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯(400mg,1.36mmol)的四氫呋喃溶液(3mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達15分鐘。添加N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟甲磺醯亞胺)(1.06g,2.7mmol)的四氫呋喃溶液(5mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。反應混合物被回暖至室溫及接著在室溫攪拌達5小時。反應混合物被冷卻至5℃，小心添加飽和氯化銨溶液，及混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用9：1至4：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供粗製5,5-二甲基-2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯(833mg,1.3mmol)，其為黃色油狀物，其靜置後顏色立即變深及為非鏡像異構物的2：1混合物，其立即用於下一步驟。LCMS(m/z)449.0[M+H],Tr=3.29分鐘。5,5-二甲基-2-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯(833mg,1.3mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在室溫和氮下攪拌。添加1,8-二氮雙環十一碳-7-烯(790mg,0.8mL,5.2mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達72小時。反應混合物被冷卻至0℃，及用 冰冷鹽酸(2M)酸化至pH 2。混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用9：1至3：1之異己烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(189mg,52%，共2步驟)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 1.13(s,3H),1.32(s,3H),3.53(d,J=11.8Hz,1H),3.66(d,J=11.8Hz,1H),3.72(d,J=12.1Hz,1H),4.24(d,J=12.1Hz,1H),5.19-5.35(m,3H),5.51(dd,J=17.4,0.9Hz,1H),5.80(dd,J=17.4,10.7Hz,1H),7.35-7.40(m,5H)。LCMS(m/z)277.1[M+H],Tr=2.81分鐘。
化合物100f. 5,5-二甲基-2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸
在0℃之5,5-二甲基-2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸苯甲基酯(189mg,0.684mmol)的四氫呋喃受攪拌溶液(7mL)中添加氫氧化鋰水合物(34mg,0.821mmol)的水溶液(1.6mL)。反應混合物在0℃攪拌達30分鐘，及被回暖至周圍溫度和攪拌達19小時。混合物用水稀釋和用乙酸乙酯清洗(2 x)。水層用鹽酸(2M)酸化至pH 5，和用乙酸乙酯萃取(2 x)。有機萃取液用無水硫酸鎂乾燥、過濾和蒸發以得到標題化合物(69mg,54%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 1.19(s,3H),1.32(s,3H),3.58(d,J=11.8Hz,1H),3.72(d,J=11.8Hz,1H),3.75(d,J=12.3Hz,1H),4.21(d,J=12.3Hz,1H),5.39(dd,J=10.7,0.9Hz,1H),5.60(dd,J=17.4,0.9Hz,1H),5.84(dd,J=17.4,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)185.2[M-H],Tr=1.32分鐘。
化合物100g. 2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-5,5-二甲基[1,4]二-2-甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(198mg,0.371mmol)、5,5-二甲基-2-乙烯基-[1,4]二-2-甲酸(69mg,0.371mmol)、三乙基胺(112mg,155μL,1.11mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(23mg,0.074mmol)的混合物的1,4-二溶液(7.5mL)用氮排氣達5分鐘和接著在氮下邊攪拌邊回暖至50℃。添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(34mg,0.037mmol)，且該混合物受熱至80℃達40分鐘和接著使其冷卻至室溫。懸浮液被過濾和蒸發以得到粗製標題化合物(0.371mmol)，其直接用於下一步驟。LCMS(m/z)640.3[M+H],Tr=1.94分鐘。
化合物100及101
在氮下之粉末狀的4Å分子篩(~1g)、2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(255mg,0.742mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(181mg,1.48mmol)在二氯甲烷(111mL)中的受攪拌混合物中經由注射泵添加2-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-5,5-二甲基[1,4]二-2-甲酸(0.371mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經2.5小時。起初含有粗製酸之燒瓶用二氯甲烷(1mL)清洗，及將此溶液添加至反應混合物，歷經30分鐘。添加結束之後，反應混合物被攪拌達30分鐘，透過矽藻土過濾，及依序用冰冷飽和氯化銨溶液(2 x)和冰冷飽和碳酸氫鈉溶液(2 x)清洗，通過疏水性玻璃料和被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：0至1：1之異己烷/丙酮的梯度溶液予以純化，接著藉由Agilent Eclipse XDB/C18 7微米，250×21.2mm管柱(flow rate 20mL/min)之逆相製備級HPLC使用9：11之乙腈/水予以純化，以得到第一沖提之較大極性的非鏡像異構物(2.9mg,1%共2步驟)，其為白色固體物，及第二沖提之較小極性的非鏡像異構物(6.6 mg,3%共2步驟)，其為白色固體物。
第一沖提非鏡像異構物。化合物100 1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 1.07(d,J=6.7Hz,3H),1.12(s,3H),1.13(d,J=6.9Hz,3H),1.43(s,3H),1.52-1.78(m,2H),1.57(d,J=7.5Hz,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.93-2.02(m,1H),2.18-2.39(m,2H),2.68-2.80(m,1H),3.55-3.64(m,2H),3.73(d,J=11.8Hz,1H),3.92(d,J=12.3Hz,1H),4.39(d,J=12.3Hz,1H),4.41-4.50(m,1H),5.11(q,J=6.7Hz,1H),5.39(d,J=8.5Hz,1H),5.83(q,J=6.9Hz,1H),6.31(d,J=16.5Hz,1H),6.98(d,J=16.5Hz,1H),7.49(d,J=8.7Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.4Hz,1H),7.85(s,1H),7.89(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)622.2[M+H],Tr=2.48分鐘。
第二沖提非鏡像異構物。化合物101 1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 1.08(d,J=6.7Hz,3H),1.09(d,J=6.5Hz,3H),1.13(s,3H),1.43(s,3H),1.52-1.76(m,2H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.64(d,J=7.4Hz,3H),1.89-1.99(m,1H),2.19-2.28(m,2H),2.62-2.73(m,1H),3.55-3.71(m,3H),3.87(d,J=12.0Hz,1H),4.30(d,J=11.8Hz,1H),4.37-4.47(m,1H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),5.21(d,J=8.9Hz,1H),5.79(q,J=7.2Hz,1H),6.14(d,J=16.3Hz,1H),6.89(d,J=16.3Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.65(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.86(d,J=8.2Hz,1H),7.88(s,1H),8.26(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)622.3[M+H],Tr=2.47分鐘。
實施例102,103,104及105. 化合物102,103,104及105
化合物102a. 3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸乙基酯
3-羥基-環戊烷甲酸乙基酯(如PCT Int.Appl.2008131946所述予以製備，3.180g,20.1mmol)的二氯甲烷溶液(100mL)隨後用2,6-二甲吡啶(4.7mL,40.2mmol)和三氟甲磺酸鹽三異丙基矽基酯(8.1mL,30.15mmol)處理。攪拌達3.5小時之後，反應用pH 4緩衝溶液驟冷。水層用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至9：1之異己烷/二乙基醚的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(6.15g,97%)，其為淺黃色油狀物及為非鏡像異構物3.5：1混合物。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 1.04-1.08(m,27H),1.27(t,J=7.1Hz,4H),1.70-2.00(m,5.2H),2.04-2.21(m,2.6H),2.66-2.79(m,1H),2.97-3.10(m,0.3H),4.14(q,J=7.1Hz,2.6H),4.29-4.39(m,1H),4.43-4.50(m,0.3H)。
化合物102b. 1-(1-羥基-乙基)-3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸乙基酯
N,N-二異丙基胺(4.4mL,31.285mmol)的無水四氫呋喃冰(-78℃)溶液(60mL)用正丁基鋰(2.5M的己烷溶液，11.7mL,29.329mmol)處理。在-78℃攪拌達30分鐘之後，反應混合物用3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸乙基酯(6.15g,19.553mmol)的無水四氫呋喃溶液(20mL)處理。在-78℃攪拌達40分鐘之後，反應混合物用純淨乙醛(3.3mL,58.659mmol)處理。移除冷浴，及反應在室溫攪拌達50分鐘，接著在0℃用氯化銨飽和溶液(100mL)驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(6.61g,94%)，其為淺黃色油狀物及為非鏡像異構物的複雜混合物。
化合物102c. 3-三異丙基矽烷基氧基-1-乙烯基-環戊烷甲酸
氫化鈉(1.474g,36.868mmol,60%分散於礦物油中)的無水四氫呋喃冰(-78℃)懸浮液(60mL)用1-(1-羥基-乙基)-3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸乙基酯(6.61g,18.434mmol)溶液處理。在-78℃攪拌達10分鐘之後，反應混合物用N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟甲磺醯亞胺)(13.2g,33.615mmol)的無水四氫呋喃溶液(20mL)處理。移除冷浴，及使反應在室溫攪拌達24小時。添加更多的氫化鈉(1.474g,36.868mmol,60%分散於礦物油中)。在室溫攪拌達5小時之後，添加更多的氫化鈉(1.474g,36.868mmol,60%分散於礦物油中)。在室溫攪拌達17.5小時之後，反應在0℃用氯化銨飽和溶液(100mL)驟冷。水層用二氯甲烷萃取(2 x)。水層用鹽酸(2M)酸化至pH 2，和用二氯甲烷萃取。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物依序藉由矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/乙酸乙酯的連續梯度溶液沖提，和矽膠層析術使用100g Isolute匣以1：0至4：1之異己烷/二乙基醚的連續梯度溶液沖提予以純化之以提供標題化合物(876.9mg,15%)，其為淺黃色油狀物及為非鏡像異構物的3：1混合物。LCMS(m/z)311.2[M-H],Tr=4.05分鐘。
化合物102d. 1-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(795.0mg,1.493mmol)、3-三異丙基矽烷基氧基-1-乙烯基-環戊烷甲酸(466.6mg,1.493mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(91.0mg,0.299mmol)和三乙基胺(0.63mL,4.479mmol)的1,4-二溶液(20mL)藉由通入氮氣冒泡而除氧達5分鐘。反應混合物接著用三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(136.7mg,0.149mmol)處理。在100℃攪拌達40分鐘之後，反應被冷卻至室溫，及透過矽藻土過濾。該固體物用乙酸乙酯沖洗，且揮發物在真空中予以移除以提供粗製標題化合物(1.493mmol)，其為橙色泡沫物。LCMS(m/z)764.4[M-H],Tr=3.53分鐘。
化合物102e
粗製1-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-環丙基-2-羥基-乙醯基胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-3-三異丙基矽烷基氧基-環戊烷甲酸(1.493mmol)的乾燥二氯甲烷溶液(20mL)經由注射泵添加至2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(771.0mg,2.239mmol)、4-二甲基胺基吡啶(547.1mg,4.479mmol)之含有4Å分子篩的乾燥二氯甲烷溶液(500mL)中，歷經4.5小時。添加結束之後，反應在室溫攪拌達2小時，接著過濾，及揮發物在真空中部分地予以移除。有機液用鹽酸(0.5M,40mL)清洗。該酸性水層用二氯甲烷萃取。結合的有機液用碳酸氫鈉的飽和溶液清洗。鹼性水層用二氯甲烷萃取。結合的有機液在相分離器上過濾。揮發物在真空中予以移除，而殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至3：2之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化以提供標題化合物(459.6mg,41%)，其為白色固體物及為非鏡像異構物的複雜混合物。LCMS(m/z)746.5[M+H],Tr=4.35分鐘。
化合物102,103,104及105
化合物102e(459.6mg,0.616mmol)的乙腈/四氫呋喃溶液(20mL,9：1)在250mL圓底Teflon燒瓶內用氫氟酸(48wt%水溶液，1.3mL,30.8mmol)處理。在室溫攪拌達17小時之後，添加更多的氫氟酸(48wt%水溶液，1.3mL,30.8mmol)。在室溫攪拌達7小時之後，反應混合物緩慢倒至碳酸氫鈉的飽和溶液(100mL)。停止冒泡之後，水層用二氯甲烷萃取(2 x)。有機液被結合，透過相分離器過濾，且揮發物在真空中予以移除。殘留物藉由矽膠層析術使用50g Isolute匣以1：0至2：3之異己烷/丙酮的連續梯度溶液沖提予以純化。混合物進一步藉由逆相製備級HPLC以9：1至3：2之水(經0.1%三氟乙酸修飾)/乙腈(經0.1%三氟乙酸修飾)的連續梯度溶液沖提予以純化，收集2mL部分，以在蒸發揮發物之後提供4種不同異構物，其為三氟乙酸鹽。
化合物102(41.2mg,9.5%)，其為淺黃色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 0.46-0.56(m,1H),0.58-0.72(m,3H),1.23-1.36(m,1H),1.56-1.67(m,7H),1.69-1.85(m,3H),1.90-2.00(m,1H),2.01-2.12(m,1H),2.13-2.24(m,2H),2.46-2.54(m,1H),2.62-2.79(m,2H),3.58-3.66(m,1H),4.37-4.47(m,2H),4.94(d,J=8.7Hz,1H), 5.12(q,J=6.7Hz,1H),5.78-5.91(m,1H),6.50(明顯的d,J=3.1Hz,2H),7.57(d,J=8.5Hz,1H),7.73(d,J=8.5Hz,1H),7.89(s,1H),7.93(d,J=8.5Hz,1H),8.43(d,J=8.5Hz,1H),8.66(d,J=7.1Hz,1H)。LCMS(m/z)590.2[M+H],Tr=1.97分鐘。
化合物103(31.2mg,7.2%)，其為淺黃色膠狀物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 0.47-0.57(m,1H),0.60-0.74(m,3H),1.25-1.38(m,1H),1.54-1.79(m,9H),1.91-2.25(m,5H),2.48-2.90(m,3H),3.58-3.66(m,1H),4.37-4.47(m,2H),5.13(q,J=6.7Hz,1H),5.78-5.91(m,1H),6.48,6.55(ABq,J AB=16.3Hz,2H),7.57(d,J=8.5Hz,1H),7.73(d,J=8.5Hz,1H),7.83-7.96(m,2H),8.43(d,J=8.5Hz,1H),8.66(d,J=7.8Hz,1H)。LCMS(m/z)590.2[M+H],Tr=1.88分鐘。
化合物104(13.5mg,3.1%)，其為淺黃色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 0.44-0.57(m,1H),0.61-0.71(m,3H),1.28-1.40(m,1H),1.54-1.81(m,9H),1.91-2.13(m,4H),2.17-2.29(m,1H),2.43-2.59(m,1H),2.66-2.78(m,2H),3.58-3.66(m,1H),4.30-4.38(m,1H),4.40-4.48(m,1H),5.05-5.15(m,1H),5.78-5.91(m,1H),6.47,6.54(ABq,J AB=15.8Hz,2H),7.50(d,J=8.5Hz,1H),7.63-7.74(m,1H),7.80(s,1H),7.88(d,J=8.5Hz,1H),8.32(d,J=8.5Hz,1H),8.69-8.76(m,1H)。LCMS(m/z)590.2[M+H],Tr=1.93分鐘。
化合物105(6.0mg,1.4%)，其為淺黃色膠狀物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 0.45-0.55(m,1H),0.59-0.72(m,3H),1.27-1.44(m,1H),1.54-1.84(m,9H),1.90-2.00(m,2H),2.01-2.27(m,4H),2.45-2.54(m,1H),2.62-2.81(m,2H),3.57-3.66(m,1H),4.37-4.47(m,2H),4.96(d,J=8.9Hz,1H),5.11(q,J=6.9Hz,1H),5.78-5.90(m,1H),6.39-6.62(m,2H),7.52(d,J=8.5Hz,1H),7.70(d,J=8.5Hz,1H),7.80-7.92(m,2H),8.35(d,J=8.5Hz,1H),8.66-8.74(m,1H)。LCMS(m/z)590.2[M+H],Tr=1.97分鐘。
實施例106。化合物106
化合物106a. 4-(1-羥基-乙基)-四氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯
N,N-二異丙基胺(1.51g,2.1mL,15mmol)的無水四氫呋喃溶液(10mL)在-78℃和氮下攪拌。逐滴添加正丁基鋰(6mL,15mmol,2.5M的己烷溶液)，及反應混合物在-78℃攪拌達30分鐘。添加四氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯 (1.60g,10mmol)的四氫呋喃溶液(4mL)，且反應混合物在-78℃攪拌達20分鐘。接著一次性地添加乙醛(1.32g,1.7mL,30mmol)。移除冷浴，及反應混合物在室溫攪拌達1小時。反應混合物被冷卻至0℃，及添加冰-冷鹽酸(2M)以使反應混合物酸化至pH 2。將氯化鈉添加至飽和水相，及混合物用二乙基醚萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用3：1至1：3之戊烷/二乙基醚的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(1.77g,87%)，其為黃色油狀物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)：δ 0.96(d,J=6.5Hz,3H),1.46-1.73(m,2H),2.12-2.28(m,2H),2.43-2.57(m,4H),3.50-3.58(m,1H),3.63(s,3H),4.85(d,J=5.8Hz,1H)。LCMS(m/z)227.1[M+Na],Tr=1.53分鐘。
化合物106b. 4-(1-羥基-乙基)-1,1-二側氧基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯
4-(1-羥基-乙基)-四氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯(408mg,2mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)在0℃攪拌。添加間-氯過氧苯甲酸(70%純度，含有20%水和10%間-氯苯甲酸，830mg,4.8mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達3小時。添加額外的間-氯過氧苯甲酸(70%純度，含有20%水 和10%間-氯苯甲酸，830mg,4.8mmol)，且反應混合物在0℃攪拌達3小時。添加硫代硫酸鈉溶液及飽和碳酸氫鈉溶液，及混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用1：1至0：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(281mg,60%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)δ 0.99(d,J=6.5Hz,3H),1.90-2.30(m,4H),2.92-3.11(m,4H),3.64-3.71(m,4H),5.12(d,J=5.8Hz,1H)。LCMS(m/z)237.1[M+H],Tr=0.76分鐘。
化合物106c. 1,1-二側氧基-4-乙烯基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯
4-(1-羥基-乙基)-1,1-二側氧基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯(281mg,1.2mmol)的二氯甲烷溶液(10mL)在0℃和氮下攪拌。添加吡啶(284mg,0.3mL,3.6mmol)，和接著逐滴添加三氟甲磺酸酐(677mg,0.4mL,2.4mmol)，及反應混合物在0℃攪拌達30分鐘。添加飽和碳酸氫鈉溶液，且有機層被分離，和用鹽水清洗，及透過疏水性玻璃料過濾。濾液被蒸發至體積為~5mL，及粗製1,1-二側氧基-4-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-六氫-硫代哌喃-4-甲酸 甲基酯(1.2mmol)溶液立即用下一步驟。LCMS(m/z)368.9[M+H],Tr=2.27分鐘。粗製1,1-二側氧基-4-(1-三氟甲磺醯基氧基-乙基)-六氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯(1.2mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)在室溫和氮下攪拌。添加1,8-二氮雙環十一碳-7-烯(0.6mL,3.6mmol)，且反應混合物在室溫攪拌達45分鐘。反應混合物被冷卻至0℃，及用冰-冷鹽酸(2M)酸化至pH 2。混合物用二氯甲烷萃取。有機萃取液被結合、用水和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物藉由矽膠層析術使用4：1至1：1之異己烷/乙酸乙酯的梯度溶液予以純化以提供標題化合物(182mg,70%，共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 2.25-2.34(m,2H),2.59-2.66(m,2H),3.05-3.13(m,4H),3.79(s,3H),5.23(d,J=17.6Hz,1H),5.31(d,J=10.7Hz,1H),5.82(dd,J=17.6,10.7Hz,1H)。LCMS(m/z)219.1[M+H],Tr=1.33分鐘。
化合物106d. 1,1-二側氧基-4-乙烯基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸
1,1-二側氧基-4-乙烯基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸甲基酯(174mg,0.8mmol)的四氫呋喃(4mL)和甲醇(0.5mL)溶液在室溫和氮下攪拌。添加氫氧化鋰單水合物(134mg,3.2mmol)的水溶液(1mL)，且反應混合物在室溫攪拌達1小 時。反應混合物被冷卻至0℃，及用鹽酸(2M)酸化至pH 2。添加氯化鈉，且混合物用乙酸乙酯萃取。有機萃取液被結合和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(163mg,100%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,d 6 -DMSO)2.03-2.12(m,2H),2.33-2.42(m,2H),2.96-3.13(m,4H),5.23(d,J=17.6Hz,1H),5.25(d,J=10.7Hz,1H),5.87(dd,J=17.6,10.7Hz,1H),12.9-13.1(br s,1H)。LCMS(m/z)227.1[M+Na],Tr=0.96分鐘。
化合物106
1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(187mg,0.35mmol)、1,1-二側氧基-4-乙烯基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸(79mg,0.38mmol)、三(鄰-甲苯基)膦(21mg,0.07mmol)和三乙基胺(106mg,0.15mL,1.05mmol)的1,4-二的受攪拌溶液(10mL)用氮排氣達15分鐘。溶液受熱至50℃，及添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(32mg,0.035mmol)。反應混合物在80℃受熱達30分鐘。反應混合物被冷卻至室溫，及混合物透過疏水性玻璃料過濾，且濾液 被蒸發以提供粗製4-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-1,1-二側氧基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸(0.35mmol)，其為橙色油狀物。LCMS(m/z)658.2[M+H],Tr=1.57分鐘。2-甲基-6-硝基苯甲酸酐(241mg,0.7mmol)和4-(二甲基胺基)-吡啶(170mg,1.4mmol)之含有4Å分子篩(200mg)的二氯甲烷溶液(200mL)在室溫和氮下攪拌。逐滴添加粗製4-((E)-2-{2-[(R)-1-({(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-羰基}-胺基)-乙基]-喹啉-7-基}-乙烯基)-1,1-二側氧基-六氫-硫代哌喃-4-甲酸(0.35mmol)的二氯甲烷溶液(5mL)，歷經4小時，及反應混合物在室溫攪拌達4小時。反應混合物透過矽藻土過濾，及溶液被蒸發以提供體積為~30mL。溶液用冰-冷飽和氯化銨溶液、冰-冷飽和碳酸氫鈉溶液和鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發。殘留物依序藉由矽膠層析術以1：1：0至0：1：0至0：9：1之異己烷/乙酸乙酯/甲醇的梯度溶液沖提和藉由逆相製備級HPLC以9：1至1：1之乙腈(含有0.1%三氟乙酸)/水(含有0.1%三氟乙酸)的梯度溶液沖提予以純化。含有產物部分被結合及蒸發。殘留物被分配在二氯甲烷及飽和碳酸氫鈉溶液之間。有機層被分離和用鹽水清洗。有機溶液透過疏水性玻璃料過濾，且濾液被蒸發以提供標題化合物(14mg,7%，共2步驟)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 1.05(d,J=6.7Hz,3H), 1.09(d,J=6.7Hz,3H),1.59(d,J=6.7Hz,3H),1.62(d,J=7.1Hz,3H),1.63-1.71(m,2H),1.92-1.97(m,1H),2.17-3.25(m,11H),3.55-3.65(m,1H),4.40-4.46(m,1H),5.09(q,J=6.7Hz,1H),5.33(d,J=8.3Hz,1H),5.85(q,J=7.1Hz,1H),6.36(d,J=16.3Hz,1H),6.73(d,J=16.3Hz,1H),7.47(d,J=8.5Hz,1H),7.68(dd,J=8.5,1.6Hz,1H),7.85(br s,1H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),8.28(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)640.2[M+H],Tr=2.09分鐘。
實施例107. 化合物107
化合物107a. 2,2-雙-氟甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯
玻璃瓶裝載2,2-雙-羥基甲基-丁-3-烯酸乙基酯(0.88g,5.05mmol)、1,3-二氟丙酮(0.95g,10.1mmol)和對-甲苯-4-磺酸單水合物(0.96g,5.05mmol)。玻璃瓶被密封及在微波反應器內於100℃受熱達15分鐘。得到的棕色油狀物被分配在二氯甲烷及碳酸氫鈉水溶液之間。有機層透過疏水性玻璃料過濾和被蒸發以得到棕色油狀物(0.98g)。該 油狀物藉由矽膠層析術使用3：1之異己烷/乙酸乙酯予以純化以產生標題化合物(0.619g,74%)，其為無色油狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)：δ 1.31(t,J=7.1Hz,3H),3.96(d,J=12.0Hz,2H),4.27(q,J=7.1Hz,2H),4.34-4.69(m,6H),5.22-5.35(m,2H),5.67-5.79(m,1H)。
化合物107b。2,2-雙-氟甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸
將氫氧化鋰單水合物(311mg,7.42mmol)的水溶液(8mL)添加至2,2-雙-氟甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸乙基酯(619mg,2.47mmol)的四氫呋喃溶液/甲醇受攪拌溶液(12mL,4：1)中。反應混合物在室溫攪拌達1小時和接著冷卻至0℃，之後用鹽酸(1M)酸化至pH 4。混合物用氯化鈉飽和及接著用二氯甲烷萃取(3×10mL)。萃取液透過疏水性玻璃料過濾和被蒸發以得到標題產物(390mg,71%)，其為無色膠狀物。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 4.00(d,J=12.0Hz,2H),4.35-4.73(m,6H),5.30-5.43(m,2H),5.68-5.81(m,1H)。
實施例107. 化合物107
(S)-1-[(S)-2-((S)-2-羥基-3-甲基-丁醯胺基)-丙醯基]-六氫-嗒-3-甲酸[(R)-1-(7-溴-喹啉-2-基)-乙基]-醯胺(300mg,0.56mmol)、2,2-雙-氟甲基-5-乙烯基-[1,3]二-5-甲酸(125mg,0.56mmol)、三乙基胺(234μL,1.68mmol)和三(鄰-甲苯基)膦(34mg,0.112mmol)的1,4-二溶液(12mL)用氮沖洗達10分鐘，之後添加三(二亞苄基丙酮)二鈀(0)(51mg,0.056mmol)。受攪拌的反應混合物在60℃受熱達1小時。混合物被冷卻至室溫，透過矽藻土過濾，接著蒸發以產生橙色泡沫物。該泡沫物溶於二氯甲烷(10mL)，及得到的溶液經由注射泵添加至2-甲基-6-硝基-苯甲酸酐(482mg,1.4mmol)和4-(二甲基胺基)吡啶(350mg,2.8mmol)之含有粉末狀3Å分子篩的二氯甲烷溶液(205mL)中，歷經5小時。添加結束之後，溶液被攪拌達20分鐘，過濾，用碳酸氫鈉水溶液(150mL)清洗，接著透過疏水性玻璃料過濾和被蒸發以得到棕色膠狀物，其依序藉由逆相製備級HPLC使用4：1至0：1之水/乙腈的梯度溶液和藉由逆相製備級HPLC使用3：2之水(經0.1%甲酸銨修飾)/乙腈予以純化以提供標題化合物(39mg,10%)，其為白色固體物。1H NMR(300MHz,CD3OD)：δ 1.06(d,J=6.7Hz,3H),1.12(d,J=6.7Hz,3H),1.49-1.78(m,2H),1.61(d,J=6.7Hz,3H),1.66(d,J=7.1Hz,3H),1.92-2.02(m, 1H),2.13-2.30(m,2H),2.64-2.78(m,1H),3.58-3.66(m,1H),4.12-4.25(m,3H),4.35-4.92(m,6H),5.07(q,J=6.7Hz,1H),5.38(d,J=9.1Hz,1H),5.82(q,J=7.1Hz,1H),6.17(d,J=16.5Hz,1H),6.65(d,J=16.5Hz,1H),7.48(d,J=8.5Hz,1H),7.67-7.76(m,2H),7.87(d,J=8.5Hz,1H),8.27(d,J=8.5Hz,1H)。LCMS(m/z)658.2[M+H],Tr=2.46分鐘。
實施例108. 化合物108
化合物108
在室溫，於反應物74(7.5mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加正丁醯氯(1滴)。在室溫1小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留 物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到4.6mg(55%)的產物化合物108。1H NMR(400MHz,甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.63(dd,J=8.7,1.6Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.60(d,J=16.3Hz,1H),6.29(d,J=16.4Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.25(d,J=8.5Hz,1H),5.07(q,J=6.6Hz,1H),4.99(s,1H),4.41(d,J=13.2Hz,1H),3.57(m,1H),2.75-2.59(m,1H),2.34(t,J=7.3Hz,2H),2.31-2.06(m,3H),2.05-1.75(m,6H),1.75-1.62(m,3H),1.60(d,J=7.0Hz,3H),1.57(d,J=7.0Hz,3H),1.28(s,3H),1.06(d,J=6.8Hz,3H),1.01(d,J=6.8Hz,3H),0.98(t,J=6.8Hz,3H)。
LCMS(m/z)676.4[M+H],Tr 1.77分鐘(操作3分鐘)。
實施例109. 化合物109.
化合物109
在室溫，於74(7.3mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加丙醯氯(2滴)。5分鐘之後，添加乙酸乙酯(~1mL)及音波震盪使其成為懸浮液。20分鐘之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到6.0mg(75%)的產物化合物109。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.46(d,J=5.6Hz,1H),8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.5Hz,1H),7.78(s,1H),7.63(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.4Hz,1H),6.60(d,J=16.3Hz,1H),6.29(d,J=16.3Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.25(d,J=8.5Hz,1H),5.07(q,J=6.5Hz,1H),4.98(s,1H),4.47-4.34(m,1H),3.57(dd,J=11.8,3.0Hz,1H),2.68(td,J=13.0,3.1Hz,1H),2.38(q,J=7.6Hz,2H),2.28(dd,J=24.6,13.3Hz,1H),2.20-2.07(m,1H),2.05-1.74(m,5H),1.74-1.63(m,1H),1.60(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.37-1.19(m,3H),1.15(t,J=7.6Hz,3H),1.06(d,J=6.8Hz,3H),1.01(d,J=6.6Hz,3H),0.94-0.67(m,2H)。
LCMS(m/z)662.4[M+H],Tr 1.65分鐘(操作3分鐘)。
實施例110. 化合物110.
化合物110
在室溫，於反應物74(7.1mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加乙酸酐(2滴)。21小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到6.6mg(87%)的產物化合物110。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.83(d,J=8.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.62(dd,J=8.4,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.61(d,J=16.3Hz,1H),6.29(d,J=16.3Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.25(d,J=8.5Hz,1H),5.07(q,J=6.6Hz,1H),4.96(s,1H),4.41(dd,J=13.5,4.3Hz,1H),3.57(dd,J=11.8,2.9Hz,1H),2.68(td,J=13.0,3.2Hz,1H),2.39-2.20(m,2H),2.20-2.09(m,1H),2.07(s,3H),2.05- 1.75(m,6H),1.75-1.62(m,2H),1.60(d,J=7.3Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.06(d,J=6.8Hz,3H),1.01(d,J=6.6Hz,3H),0.98-0.69(m,2H)。
LCMS(m/z)649.5[M+H],Tr 1.54分鐘(操作3分鐘)。
實施例111. 化合物111.
化合物111
在室溫，於反應物75(7.1mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴)中添加丙醯氯(2滴)。5分鐘之後，添加乙酸乙酯(~1mL)及音波震盪使其成為懸浮液。20分鐘之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到7.3mg(94%)的產物化合物111。1H NMR(400MHz, 甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=8.5Hz,1H),7.82(d,J=8.4Hz,1H),7.77(d,J=1.7Hz,1H),7.61(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.55(d,J=16.4Hz,1H),6.26(d,J=16.4Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.28(d,J=8.6Hz,1H),5.06(q,J=6.4Hz,1H),4.78(dt,J=10.8,6.2Hz,1H),4.41(d,J=13.3Hz,1H),3.58(dd,J=11.7,3.1Hz,1H),2.68(td,J=12.9,3.2Hz,1H),2.58(d,J=14.1Hz,1H),2.42-2.11(m,4H),2.10-1.87(m,3H),1.80-1.63(m,3H),1.61(d,J=7.2Hz,3H),1.57(d,J=6.8Hz,3H),1.53-1.37(m,2H),1.17-1.06(m,6H),1.03(d,J=6.6Hz,3H),0.96-0.69(m,2H)。
LCMS(m/z)662.5[M+H],Tr 1.66分鐘(操作3分鐘)。
實施例112. 化合物112.
化合物112
在室溫，於75(7.3mg,0.012mmol)的吡啶溶液(3滴) 中添加乙酸酐(2滴)。18小時之後，混合物用乙酸乙酯稀釋，用10%檸檬酸溶液(x 1)和飽和NaHCO3溶液(x 1)清洗。含水部分用乙酸乙酯萃取(x 1)之後，2個有機液部分被結合、乾燥(MgSO4)及濃縮。殘留物藉由CombiFlash使用己烷-乙酸乙酯沖提液予以純化以得到5.76mg(73%)的產物化合物112。1H NMR(400MHz，甲醇-d 4)：δ 8.23(d,J=7.6Hz,1H),7.82(d,J=8.5Hz,1H),7.76(s,1H),7.61(dd,J=8.5,1.7Hz,1H),7.43(d,J=8.5Hz,1H),6.55(d,J=16.3Hz,1H),6.26(d,J=16.3Hz,1H),5.80(q,J=7.2Hz,1H),5.28(d,J=8.6Hz,1H),5.06(m,1H),4.77(dt,J=10.6,6.1Hz,1H),4.48-4.34(m,1H),3.64-3.51(m,1H),2.68(td,J=13.0,3.3Hz,1H),2.58(d,J=14.6Hz,1H),2.35(d,J=12.8Hz,1H),2.29-2.21(m,1H),2.17(ddd,J=13.0,7.9,6.4Hz,1H),2.02(s,3H),2.10-1.90(m,2H),1.80-1.63(m,3H),1.61(d,J=7.2Hz,3H),1.57(d,J=6.7Hz,3H),1.54-1.39(m,2H),1.07(d,J=6.8Hz,3H),1.03(d,J=6.6Hz,3H),0.89(m,2H)。
LCMS(m/z)648.4[M+H],Tr 1.53分鐘(操作3分鐘)。
生物實施例：肽基-脯胺醯基異構酶(PPIase)活性的抑制作用
PPIase試驗基於Janowski et al.(Anal.Biochem.1997,252,299)所述之程序。試驗緩衝溶液(1980L溶液，其含有35mM HEPES pH 7.8,50M DTT、及0.01% NP40)在配有 頂置攪拌器之石英光析槽預平衡至10℃。於此溶液中添加10L之化合物的DMSO溶液(最終濃度：0.5% DMSO)，接著添加5L之2M親環蛋白A的儲備溶液(最終濃度：5nM)。反應以添加5L之40mM之溶於0.5M LiCl的三氟乙醇溶液的四肽Succ-AAPF-pNA(100M最終濃度)啟動。反應一旦啟動之後，使用Beckman Coulter DU800分光光度計在330nm監測肽基材的吸光率達5分鐘。發展曲線擬合單一指數衰變模式(single-exponential decay model)以計算速率。使用GraphPad Prism軟體以四參數邏輯擬合法計算IC50值。
親環蛋白A TR-FRET競爭性結合試驗
使用競爭性結合試驗測量抑制劑效力，以時差性螢光共振能量轉移(time-resolved fluorescence resonance energy transfer)(TR-FRET)讀出。於含有35mM HEPES pH 7.8、100mM NaCl、0.01% NP-40(Pierce)、1mM DTT及1% DMSO之反應緩衝液中添加下列：5nM之modified at the在N-終端以8×組胺酸親和標籤修飾的親環蛋白A(CypA)；150nM之以連接至Cy5螢光團之連接子修飾的環孢素A(CsA-Cy5)；1nM Eu-標誌抗-(6×His)抗體(Perkin-Elmer)；和在各種濃度中的試驗化合物。試驗溶液的總體積為100L。培育2小時之後，使用Perkin Elmer Envision微板讀取機測量TR-FRET(在340nm激發，在590nm及665nm測量放射)。以在665nm之放射對在 590nm之放射速率計算信號。使用四參數邏輯擬合法計算IC50值。
當測事實，發現本發明的某些化合物抑制親環蛋白結合，如表1所列示。IC50以下述範圍呈現：其中A為100nM，B為101至1000nM，及C為1001至10,000nM。
抗病毒活性
可使用標準篩選實驗方案測量化合物的抗病毒活性：例如，如2011年12月8日申請之U.S.Ser.No.13/315,069(其藉由引用而被併入)中所述之基於細胞的黃病毒屬免疫檢測測定法及基於細胞的黃病毒細胞病變效應測定法。
本發明的一方面係關於抑制病毒感染的方法，包括治療疑有需要用本發明之組成物抑制之樣本或受試者之步驟。可使用已知的標準標準篩選實驗方案測量本發明之化合物的抗病毒活性。
以帶有HCV複製子之人類肝癌Huh-7細胞系測試本發明之化合物的抗-HCV活性。檢測包括下面步驟：
步驟1(化合物製劑及連續稀釋)：在384-井微板內以100% DMSO進行連續稀釋。以100% DMSO製備含有化合物之溶液(起始最終連續稀釋濃度的225倍濃度)，及將15μL添加至在聚丙烯384-井微板中之3列或13列的預先指定井中。384-井微板中的剩餘者填入10μL 100% DMSO，除了在23列及24列中添加10μL之在100% DMSO中的500μM HCV蛋白酶抑制劑(ITMN-191)。使用HCV蛋白酶抑制劑作為HCV複製100抑制%的對照組。接著將微板置於Biomek FX Workstation以啟動連續稀釋。連續稀釋係自3列至12列或自13列至22列進行3-倍稀釋的10次週期。
步驟2(準備細胞培養微板及化合物添加)：於黑色聚丙烯384-井微板中的每一井中以Biotek uFlow Workstation添加90μL細胞培養液，其含有1600懸浮的Huh-7 HCV複製子細胞。將體積為0.4μL的化合物溶液自連續稀釋微板移至在Biomek FX Workstation上的細胞培養微板。最終檢測條件下的DMSO濃度為n 0.44%。微板在37℃和5% CO2及85%濕度下培養達3天。
步驟3(細胞毒性的檢測和病毒複製的抑制)：a)細胞毒性的評價：以Biotek EL405微板清洗器抽吸出384-井細胞培養微板內的培養液。以Biotek uFlow Workstation將體積為50μl的溶液(其包含在100%PBS中的400nM Calcein AM)添加至微板的每一井中。微板在室溫下培養30分鐘，之後用Perkin Elmer Envision Plate Reader測量螢光信號(發射490nm，激發520nm)。
b)抑制病毒複製的評估：以Biotek EL405微板清洗器抽吸出384-井細胞培養微板中的鈣黃綠素-PBS溶液。以Biotek uFlow Workstation將體積為20μl的Dual Glo螢光素酶緩衝液(Promega，Dual Glo Luciferase Assay Reagent，產品目錄#E298B)添加至微板的每一井中。微板 在室溫下培養10分鐘。然後，以Biotek uFlowWorkstation將體積為20μl的溶液(其包含Dual Glo Stop & Glo基質(Promega，Dual Glo Luciferase Assay Reagent，產品目錄#E313B)和Dual Glo Stop & Glo緩衝液(Promega，Dual Glo Luciferase Assay Reagent，產品目錄#E314B)的1：100混合物)添加至微板的每一井中。微板在室溫下培養10分鐘，之後用Perkin Elmer Envision Plate Reader測量發光信號。
步驟4(計算)：藉由將鈣黃綠素AM轉化成螢光產物來測定細胞毒性百分比。將來自DMSO對照井的平均螢光信號定義為100%非毒性的。用來自測試化合物處理井的個別螢光信號除以來自DMSO對照井的平均信號，接著乘以100%以得到生存力百分比。相較於DMSO對照井，藉由來自測試井的發光信號測定抗HCV複製活性百分比。藉由來自HCV蛋白酶抑制劑處理井的平均發光信號測定背景信號，及來自測試井的信號以及來自DMSO對照井孔的信號減去背景信號。在3-倍連續稀釋之後，藉由將每一濃度下的抑制%擬合到下面方程式以計算EC50和CC50值：抑制%=100%/[(EC50/[I])b+1]其中b為Hill’s係數。參見參考文件Hill,A.V.,The Possible Effects of the Aggregation of the Molecules of Hœmoglobin on its Dissociation Curves,J.Physiol.40：iv-vii。(1910)。在特定濃度例如例如2μM的抑制%值亦可得 自上式。
當測試時，發現本發明的某些化合物抑制病毒複製，如表1所列：A為1μM，B為1.1至10μM，及C為10.1至100μM。
當測試時，發現本發明的某些化合物抑制病毒複製，如表1所列。EC50係以抑制%呈現。
觀察到的具體藥理學和生物化學反應可以根據且取決於下述因素而變化：所選擇的特定活性化合物或無論是否 存在藥學載劑、以及調合物類型和所應用的給藥方式，及依據本發明的實施預期結果中這樣的預期變化或差異。
儘管在本文中詳細闡述和詳細描述本發明的特定實施方式，本發明並不限於此。提供上述詳細說明作為本發明的示例，而不應當看作構成本發明的任何限制。

Claims (33)

  1. 一種式I化合物， 或其藥學上可接受之鹽，其中：A為鍵、-O-、-S(O)n-、-NH-、-N((C1-C4)烷基)-或(C1-C2)伸烷基；A1為(C1-C5)伸烷基、(C2-C5)伸烯基、(C2-C5)伸炔基、伸芳基、伸雜芳基、伸環烷基、伸雜環烷基、芳基(C1-C2)伸烷基、雜芳基(C1-C2)伸烷基、環烷基(C1-C2)伸烷基或雜環烷基(C1-C2)伸烷基，其中A1的sp3碳原子隨意地經-O-、-S(O)n-、-NH-或-N((C1-C4)烷基)-置換，和其中A1的sp3或sp2碳原子隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的基團取代：鹵基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、芳基、雜環烷基、環烷基、芳基(C1-C4)烷基、環烷基(C1-C4)烷基、雜環烷基(C1-C4)烷基、芳基雜環烷基(C1-C4)烷基、-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9和-N(R9)2；A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基、伸環烷基、(C1-C3)伸烷基、(C2-C3)伸烯基或(C2-C3)伸炔基，其中A2 隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：-OR9、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9、-N(R9)2、鹵基、鹵基(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷氧基、氰基和(C1-C8)烷基；L1為-O-C(O)-、-O-CH2-、-NR10-C(O)-、-NR11-CH2-、-NH-C(R10)2-或-NH-S(O)2-，其中每一個R10獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烯基或環烷基；和R11為(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烯基或環烷基；X1為鍵、-O-、-NH-、-N((C1-C4)烷基)-或伸雜環烷基；R1和R2獨立地為H、(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基、(C2-C4)炔基、鹵基、氰基或-C(O)-(C1-C4)烷基；或R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-、-C(=S)-或-C(=N(C1-C4)烷基)-；R3為H或(C1-C4)烷基，其隨意地經下列取代：鹵基、氰基、羥基或(C1-C4)烷氧基；R4a和R4b獨立地為H、(C1-C8)烷基、芳基、芳基(C1-C4)烷基、雜環烷基、雜環烷基(C1-C4)烷基、環烷基或環烷基(C1-C4)烷基，其中每一個R4a和R4b隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：氰基、-COOH、鹵基、羥基、胺基、(C1-C8)烷氧基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、芳基和雜芳基；R5a和R5b獨立地為H、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、 (C2-C8)炔基、(C1-C8)烷氧基、芳基、雜環烷基、環烷基、芳基(C1-C4)烷基、環烷基(C1-C4)烷基或雜環烷基(C1-C4)烷基，其中每一個R5a和R5b隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：-N3、氰基、-COOH、鹵基、羥基、胺基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、(C1-C8)烷氧基、芳基和雜芳基，或R5a和R5b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R6a和R6b獨立地為H、羥基、(C1-C8)烷基、(C2-C8)烯基、(C2-C8)炔基、(C1-C8)烷氧基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、芳基、雜環烷基、環烷基、-SR9、-S(O)R9、-S(O)2R9和-N(R9)2，其中每一個R6a和R6b隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、芳基、環烷基、雜環烷基、單(C1-C8)烷基胺基、二(C1-C8)烷基胺基、-NHS(O)R9、-NHC(O)R9和(C1-C8)烷醯基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環； 每一個R8獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基、(C2-C4)炔基、芳基、雜芳基、雜環烷基或環烷基，其中R8隨意地經下列取代：-OR、-N(R9)2、-CON(R9)2、或氰基；每一個R9獨立地為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C4)烷基、(C2-C4)烯基或(C2-C4)炔基；每一個n獨立地為0、1或2；且m為1、2、3、4或5。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中A1為伸乙烯基、伸丙烯基、伸丁烯基、伸乙基、伸丙基、伸丁基、氧基伸丙基、氧基伸丙烯基、伸吡唑基、伸苯基或伸嘧啶基。
  3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中A2為-CH(R8)-伸喹啉基、-CH(R8)-伸異喹啉基、-CH(R8)-伸啶基、-CH(R8)-伸啉基、-CH(R8)-伸喹啉基、-CH(R8)-伸苯基或-CH(R8)-伸鹵基苯基。
  4. 如申請專利範圍第3項之化合物，其中R8為甲基。
  5. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；和R3為H。
  6. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；R3為H；R4a和R4b中之一者為H，而另一者 為甲基；和R5a和R5b中之一者為H，而另一者為異丙基。
  7. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中X1為-O-、-NH-或-N(CH3)-；R1和R2與其兩者所連接之碳一起形成-C(=O)-；R3為H；R4a和R4b中之一者為H，而另一者為甲基；R5a和R5b中之一者為H，而另一者為異丙基；-CH(R8)-伸雜芳基，且R8為甲基。
  8. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R6a和R6b中之一者為H，而另一者為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基。
  9. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9。
  10. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為式II化合物： 或其藥學上可接受之鹽，其中：A1為 或A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基；X1為鍵、-CH2-、-O-、-NH-、-N(CH3)-、或 ；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、羥基(C1-C8)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷基；R5為H、(C1-C4)烷基、鹵基(C1-C8)烷基、羥基(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基、環烷基或雜環烷基；R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或 R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且R8為H或(C1-C4)烷基。
  11. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  12. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  13. 如申請專利範圍第10項之化合物，其為式II-c化合物： 或其藥學上可接受之鹽、酯或前藥，其中：R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、 和-S(O)2R9。
  14. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R6a和R6b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、(C1-C8)烷基、鹵基(C1-C8)烷基、(C1-C4)烷氧基(C1- C8)烷基、鹵基(C1-C4)烷氧基(C1-C8)烷基、、 、或。
  15. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R6a和R6b一起形成
  16. 如申請專利範圍第10項之化合物，其中R6a和 R6b一起形成或。
  17. 如申請專利範圍第10項之化合物，其為 或其藥學上可接受之鹽。
  18. 一種所選取之化合物，其為： 或其藥學上可接受之鹽。
  19. 如申請專利範圍第1項之化合物，其為式III化 合物： 或其藥學上可接受之鹽，其中L1為-O-CH2-、-N(CH3)-C(O)-、-NH-CH2-、-N(CH3)-CH2-、-NH-CH(CF3)-或-NH-S(O)2-； A1為 或A2為-CH(R8)-伸芳基、-CH(R8)-伸雜芳基、-CH(R8)-伸雜環烷基、-CH(R8)-伸環烷基、伸芳基或伸環烷基；X1為-O-、-N(CH3)-或-NH-；R4a為H、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；R5為H或(C1-C4)烷基；R6a和R6b獨立地為H、羥基、-CH2CH2CR9(=N(C1-C4)烷氧基)、(C1-C8)烷基或(C1-C8)烷氧基，隨意地經一或多個選自下列所組成之群組中的取代基取代：鹵基、羥基、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基、雜環烷基、(C1-C4)烷醯基或二(C1-C4)烷基胺基；或R6a和R6b一起形成具有式(a)之螺環： 其中式(a)的一或多個碳環原子隨意地經氮、氧或硫原子置換，和其中式(a)的環原子隨意地具有一或多個選自下列所組成之群組中的取代基：側氧基、鹵基、羥基、-NH2、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、-OC(O)R9、-C(O)2R9、和-S(O)2R9；R7a和R7b獨立地為H、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵基(C1-C4)烷氧基或(C1-C8)烷基；且R8為H或(C1-C4)烷基。
  20. 如申請專利範圍第19項之化合物，其中L1為-NH-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  21. 如申請專利範圍第19項之化合物，其中L1為-NH-S(O)2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  22. 如申請專利範圍第19項之化合物，其中L1為-N(CH3)-C(O)-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  23. 如申請專利範圍第19項之化合物，其中L1為-O-CH2-；R4a為甲基；R5為異丙基；R8為甲基；和A2為
  24. 如申請專利範圍第19項之化合物，其為 或其藥學上可接受之鹽。
  25. 一種藥學組成物，其包括治療有效量之如申請專利範圍第1項之化合物和藥學上可接受之賦形劑。
  26. 如申請專利範圍第25項之藥學組成物，進一步包括至少一種選自下列所組成之群組中的其他治療劑：干擾素、利巴韋林(ribavirin)、HCV NS3蛋白酶抑制劑、HCV NS5a抑制劑、HCV NS5B聚合酶的核苷或核苷酸抑制劑、HCV NS5B聚合酶的非核苷抑制劑、和TLR-7激動劑；或其混合物。
  27. 如申請專利範圍第26項之藥學組成物，其中該至少一種其他治療劑為利巴韋林、特拉匹韋(telaprevir)、博賽潑維(boceprevir)或PSI-7977。
  28. 一種治療黃病毒科病毒感染之方法，其包括投予治療有效量的如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受之鹽至需要彼之人類受試者。
  29. 如申請專利範圍第28項之方法，其中該病毒感染係由C型肝炎病毒引起的。
  30. 如申請專利範圍第28項之方法，其中該病毒感染所引起之疾病為登革熱、黃熱病、C型肝炎、日本腦炎、凱氏森林病(Kyasanur forest disease)、墨累穀腦炎(Murray valley encephalitis)、聖路易腦炎(St.Louis encephalitis)、蜱媒介性腦炎、或西尼羅病毒(West Nile encephalitis)。
  31. 一種治療冠狀病毒科(Coronaviridae)病毒感染之方法，其包括投予治療有效量的如申請專利範圍第1項之化合物或其藥學上可接受之鹽至需要彼之人類受試者。
  32. 如申請專利範圍第31項之方法，其中該病毒感染係由SARS冠狀病毒引起的。
  33. 如申請專利範圍第31項之方法，其中由該病毒感染所引起之疾病為嚴重急性呼吸道症候群(SARS)、癌症、發炎、肥胖、後天性免疫不全症侯群(AIDS)、或硬化。
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