TW201247694A - 2'-Cyano Substituted Nucleoside Derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases - Google Patents

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F George Njoroge
Stephane Bogen
Angela Kerekes
Frank Bennett
Ying Huang
Latha Nair
Dmitri Pissarnitski
Vishal Verma
Qun Dang
Ian Davies
David B Olsen
Andrew Stamford
Joseph P Vacca
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Description

201247694 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於一種2’-氰基取代之核苷衍生物、包含至小 一種2·-氰基取代之核苷衍生物之組合物及2，_氰基取代之杪 苷衍生物用於治療或預防患者之HCV感染之方法。 【先前技術】 C型肝炎病毒（HCV)感染為導致大量感染個體（估計為世 界人口之2-15%)產生慢性肝病（諸如肝硬化及肝細胞癌）的 嚴重健康問題。根據美國疾病控制中心（U.s. Center fQl· Disease Control)，僅美國即有估計450萬人受感染。根據 世界術生組織（World Health Organization)，全球範圍内有 超過2億感染個體’其中每年至少3〇〇至4〇〇萬人感染。一 旦感染’約20%人可清除病毒’但其餘人在其餘生均帶有 HCV。10%至20%慢性感染個體最終產生肝破壞性肝硬化 或癌症。該病毒性疾病藉由受污染之血液及血液產品、受 污染之針非經腸傳播’或藉由性接觸傳播，以及由受感染 母體或母體攜帶者垂直傳播至其後代。HCV感染之當前療 法（其僅限於用重組干擾素-α單獨或與核苷類似物病毒唑 (Hbavidn)組合進行免疫療法）具有有限臨床效益。此外， 尚未製備出HCV疫苗。因此，急需有效對抗慢性HCV感染 之改良治療劑。已評述治療HCV感染之目前先進技術，且 參考以下出版物.B_ Dymock等人，「Novel approaches to the treatment of hepatitis C virus infection」，hiiWra/ 11:79-96 (2000) ; H. Rosen等 163528.doc 201247694 人， 「Hepatitis C virus: current understanding and prospects for future therapies j ， Molecular Medicine 5:393-399 (1999) ; D. Moradpour 等人，「Current and evolving therapies for hepatitis C」，European J, Gastroenterol. Hepatol., 11:1189-1202 (1999) ; R.
Bartenschlager, 「CandidateTargetsforHepatitisCVirus-Specific Antiviral Therapy」，/«ierWro/og兄 40:378-393 (1997) ; G.M. Lauer 及 B.D. Walker， 「Hepatitis C Virus Infection j , N. Engl. J. Med., 345:41-52 (2001) ； B.W. Dymock, 「Emerging therapies for hepatitis C virus infection」，五Drwgs, 6:13-42 (2001);及 C. Crabb， 「Hard-Won Advances Spark Excitement about Hepatitis C」，06-507 (2001);其全部内容以全文引用的方 式併入本文中。 已採取HCV療法之不同方法，其包括抑制病毒絲胺酸蛋 白酶（NS3蛋白酶）、解螺旋酶及RNA依賴性RNA聚合酶 (NS5B)及疫苗開發。 HCV病毒粒子為包膜正股RNA病毒，其具有編碼具有約 3,010個胺基酸之聚合蛋白質的具有約9600個鹼基的單個 寡核糖核苷酸基因組序列。HCV基因之蛋白質產物由結構 蛋白C、E1及E2以及非結構蛋白NS2、NS3、NS4A及NS4B 及NS5A及NS5B組成。咸信非結構（NS)蛋白提供病毒複製 之催化機構。NS3蛋白酶自聚合蛋白質鏈釋放NS5B(RNA 依賴性RNA聚合酶）。HCV NS5B聚合酶為自充當HCV複製 163528.doc 201247694 週期中之模板的單股病毒RNA合成雙股RNA所需。因此’ 認為NS5B聚合酶為HCV複製複合物中之基本組分[參見K. Ishi 等人，「Expression of Hepatitis C Virus NS5B Protein:
Characterization of Its RNA Polymerase Activity and RNA Binding」，29:1227-1235 (1999)及 V. Lohmann 等人，「BiochemicalandKineticAnalysesofNS5BRNA-Dependent RNA Polymerase of the Hepatitis C Virus」， 249:108-118 (1998)]。抑制 HCV NS5B 聚合酶可 阻止雙股HCV RNA形成，因此構成開發HCV特異性抗病 毒療法的具吸引力之方法。 開發具有治療HCV感染之潛力的HCV NS5B聚合酶抑制 劑評述於 M.P. Walker 等人，「Promising candidates for the treatment of chronic hepatitis C」，Expert Opin. Invest. 12:1269-1280 (2003)及 P. Hoffmann 等人，「Recent patents on experimental therapy for hepatitis C virus infection (1999-2002)」，Ther. Patents, 13:1707-1723 (2003)中。針對HCV聚合酶之嘌呤核糖核苷 的活性由 Α·Ε. Eldrup 等人， 「Structure-Activity
Relationship of Purine Ribonucleosides for Inhibition of HCV RNA-Dependent RNA Polymerase」，·/· Mec?. C/zew.， 47:2283-2295 (2004)報導 ° 仍需要結構不同之作為HCV聚合酶抑制劑之核苷衍生物 作為HCV療法之治療方法。本發明響應於此需要。 【發明内容】 201247694 在一個態樣中，本發明提供式（i)化合物： R2cf (I) 及其醫藥學上可接受之鹽， 其中： X為 Ο、S 或 CH2 ; B為天然或非天然嘌呤或嘧啶鹼基，或B選自如下基團 之一：
Y為 N或-C(R19)-;
Η 為 JR c lR13 〇=pI〇 Ηο I Η ο=ριο - ο 1 Η οπηρIο Ηο 1 Η ο=ρ——ο - ο ι Η ΟΗΡΙΟ I ο 1Η ΟΗΡI〇 f S-4 l(R2 ΟΜΠΠΡΙΝ
lR1 〇=ρIο I63528.doc 201247694 R2為H或 R17。、乂丨丨 或
或R1與R2接合形成具有下式之基團：
R3為Ci-C6院基、C|-C6鹵院基、Ci-C6經基炫•基、C2-C6 稀基、C2-C6快基或C3-C7環炫基； R4、R5、R7及R8各獨立地為Η、C】-C6烷基、CVC6鹵烷 基、C「C6羥基烷基、_ 基、-〇R20、_SR20或-N(R20)2 ; R6、R9、R1Q、R11各獨立地選自Η、C丨-C6烷基、C2-C6烯 基、C2-C6炔基、（：3-(：7環烷基、5或6員單環雜芳基、9或10員 雙環雜芳基、il 基、-OR20、-SR20、-S(0)R20、_S(0)2R20、 -S(O)2N(R20)2、-NHC(0)OR20、-NHC(O)N(R20)2、C,-C6i 烷基、CrCe羥基烷基、-CKCrQil 烷基）、-CN、-N02、
-N(R2Q)2、-NH(Ci-C6伸烷基）-(5或6員單環雜芳基）、-NH (CrC6伸烷基)-(9或 10員雙環雜芳基）、_c(〇)r2〇、·ε(〇)〇ιι20、 -c(o)n(r20)2& _NHc(o)r20，其中該 C2_C6烯基及該 C2_C6 163528.doc 201247694 炔基可視情況經齒基取代； R 2為 Η或-(CrCW 烧基）-T-R21 ; ^丨3為Η或-(Cl-C6伸烧基）_t_r2丨，或Rl2與r13可接合而在 R及R13所連接之氧原子之間形成^4伸垸基其中該 CrC4伸烷基經至少一個芳基取代；
Rl4為H、C6-Cl0芳基、5或6員單環雜芳基或9或1〇員雙 環雜方基，其中該C6_Ci〇芳基、該5或6員單環雜芳基及該9 或1 0員雙環雜芳基可視情況經R22取代； 鲁 R15為H、CVC6烷基、CVC：7環烷基、苯基或笨甲基，其 中該CVC6烷基可視情況經選自鹵基、_〇r20、_sr2〇、胍 基 ' -N(R20)2、-C(0)0R2。、_c(〇)n(r20)2、nhc(〇)r2。、5 或6員單環雜芳基及9或1〇員雙環雜芳基之基團取代，且其 中該苯基及該苯曱基可視情況經至多2個基團取代，該等 基團各獨立地選自Ci-Ce烷基、鹵基及 •OR20 ; R16為Η、CVC6烷基、c3_c7環烷基、苯基或笨曱基，其 中該C丨-C6烷基可視情況經選自鹵基、_〇R20、_Sr2〇、脈 0 基、_N(r2〇)2、-C(0)0R2。、-C(0)N(R2〇)2、-NHC(〇)r2。、5 或6員單環雜芳基及9或1〇員雙環雜芳基之基團取代，且其 中該苯基及該苯曱基可視情況經至多2個基團取代，該等 基團各獨立地選自CrQ烷基、_基及-OR20; R17為 H、CVCm 烷基、c2-C2〇烯基、-(CVC3 伸烷基）m_ (C^C：7環烷基）、-(CVC3伸烷基）m_(c6-C1()芳基）或金剛烷 基，其中該^-^烷基、該C2_C2〇烯基、該（：6-(：10芳基及該 金剛烷基可視情況經至多三個基團取代，該等基團各獨立地 163528.doc -9- 201247694 選自函基 ' -OR20、-C(0)OR20、CN、N02、CrC6l| 烷基、 C〗-C6羥基烷基、C3-C7環烷基、c6-c1()芳基、5或6員單環雜芳 基、9或 10員雙環雜芳基、-N(R20)2、_c(〇)N(R20)2-SR20、 -S(0)R20、-S(0)2R20、_s(O)2N(R20)2、-NHC(〇)R20、 -nhc(o)or2°及-nhc(o)n(r2°)2 ;及
Ri8為H、C丨-C6烷基、〇：3-(：7環烷基、伸烷基）m_ Q-Cw芳基、5或6員單環雜芳基、9或1〇員雙環雜芳基或：
其中該CpCw芳基、該5或6員單環雜芳基及該9或1〇員雙環雜 芳基可視情況經至多五個基團取代，該等基團各獨立地選自 Ci-C6烷基、c2-c6；fcffr基、c2-C6炔基、函基、_〇R20、_SR2〇、 Ci-Cei烷基、C〗-C6羥基烷基、_0_(C〗_C6齒烷基）、_CN、 -N〇2、-N(R )2、-C(〇)〇R2。、_c(〇)N(r2〇)2&_nhc(〇)r20 ; R19為H、C,-C6炫基、Cl_C6^院基、Ci_c6經基燒基齒 基、_〇R2。、-SR2。、N(R2°)2、C3-C4 院基、C6_Cl〇芳基、 5或6員單環雜芳基或9或1〇員雙環雜芳基； R20在每次出現時獨立地為H、C丨-C丨。烧基、C丨-C6函烷 基、CVC6經基烧基、_(Ci_c3伸&基環院基）、 -(c,-c3 伸烧基）m-(c6_Ci。芳基）、_(C1_C3 伸烧基至 7 員 雜環烧基）、.((:,-(:4烧基)m_(546員單環雜芳基）或 院基或i0員雙環雜芳基），其中該C3 C7祕基、該c6_c】〇 芳基、該4至7員雜環院基、該5或6員單環雜芳基或該9或 163528.doc 201247694 1 〇員雙環雜芳基可視情況經R26取代；
R21在每次出現時獨立地為Η、c丨-C6烷基、CVC6鹵烷 基、CVC6羥基烷基、c2-C6烯基、c2-c6炔基、c3-c7環烷 基、C3-C7環烯基、5或6員單環雜芳基、9或10員雙環雜芳 基、-〇r20、鹵烷基）或-n(r20)2，其中該 c2-c6烯 基、該CVC6炔基、該c3_c7環烷基、該c3-C7環烯基、該 C6-C1()芳基、該5或6員單環雜芳基及該9或10員雙環雜芳基 可視情況經至多五個基團取代，該等基團各獨立地選自 CVC6烷基、C2-C6烯基、c2-c6炔基、齒基 ' -OR20、-SR2〇 、CrCj 烷基、Ci-C6 羥基烷基、-〇-((：,-C6_ 烷基）、_CN > -N〇2 > -N(R20)2 ^ -C(0)R20 > -C(0)OR20 . -C(O)N(R20)2 及-NHC(〇)R20 ; R表示一至五個取代基，各獨立地選自烷基、鹵 基、-OR 、-SR2G、C〗-C6齒烷基、CVC6羥基烷基、-〇_ (CVCj 烷基）、_CN、·Ν02、-N(R20)2、_c(〇)〇R2。、_c(〇) N(R2Q)2及-NHC^O)!^，或相鄰環碳原子上之任何兩個R22 基團可組合形成-〇-r23-〇_ ; R23為-[C(R24)2]n_ ’· R24在每次出現時獨立地為H4Cl_C6烷基； R25在每次出現時獨立地為H、（VC6烷基、C2_c6烯基、 c2-c6块基、C3-Ce炫基…(CVC3伸燒基芳 基）、4至7員雜環烷基、5或6員單環雜芳基或9或1〇員雙環 雜芳基，其中該6<6烷基、該c^C6烯基、該炔基、 該c3-c7環烧基、該c6_c】0芳基、該4至7員雜環统基、該$ 163528.doc -11 - 201247694 或6員單環雜芳基或該9或1 0員雙環雜芳基可視情況經R26 取代；或兩個R25基團與其所連接之共同氮原子一起接合 形成4至7員雜環烷基； R26表示一至五個取代基，各獨立地選自Cl-C6烷基、c2-C6 烯基、C2-C6炔基、i 基、-〇r27、SR27、_ 烷基、 Cl-C6 經基烧基、齒燒基）、-CN、·Ν〇2、-N(R2 7)2 、-C(0)OR27、-C(0)N(R27)2及-NHC(0)R27 ; R27在每次出現時獨立地為Η、Cl-C6烷基、Cl-C6鹵烷 基、C「c6羥基烷基、-(Ci-C3伸烷基）m-(c3-c7環烷基）、 -(C|-C3 伸烧基）m-(c6-c10 芳基）、伸院基）m-(4 至 7 員 雜環烷基）、-(CrC：3伸烷基）m_(546員單環雜芳基）4_((：i_C3 伸烷基）m-(9或10員雙環雜芳基）； R為Η、CrCe烷基、（VCe鹵烷基、Ci-C6羥基烷基、 CVC6稀基、C2_C：6炔基、CrC7環烧基、C3-C7環稀基、5或 6員單環雜芳基、9或10員雙環雜芳基、_〇R2〇、_〇_(Ci_C6 鹵烷基）或-N(R20)2，其中該cvc；6烯基、該c2_C6炔基、該 h-c：7環烷基、該ο：3·。環烯基、該C6_Ci〇芳基、該5或6員 單環雜芳基及該9或10員雙環雜芳基可視情況經至多五個 基團取代，該等基團各獨立地選自Cl_c6烷基、（^匕烯 基、C2-C6炔基、函基、·ΟΪ12〇、_sr2〇、Ci_C6 齒烷基、Ci_c6 羥基烷基、_〇_(C「C6函烷基）、_CN、-N02、-N(R20)2、·〇(〇)Ι120 、-C(0)0R20、_c(〇)N(R20)2及 _NHC(0)R20 ; r29在每次出現時獨立地為H、C：「C6烷基、€ι_(：6鹵烷 基、C丨-c6羥基烷基、-(c丨-C3伸烷基）m_(c3_C7環烷基）、 163528.doc -12· 201247694 爪烧基)m-(C6-Cl。芳基卜(Ci_C3伸院基)m_(4至7員 雜環烧基）、-(Cl_C3伸统基）m_(5或6員單環雜芳基）或％夂 伸院基或U)員雙環雜芳基），其中該CA環院基、今 C0-ClQ芳基、該4至7員雜環烧基、該5或6員單環雜芳基或 該9或10員雙環雜芳基可視情況經R26取代·， T在每次出現時獨立地為n_sc(〇)…sc⑻_、 -oc(o)-及-oc(s)-;
m在每次出現時獨立地為〇或1 ;及 η在母次出現時獨立地為1或2。 式⑴化合物（在本文中亦稱作「2,-氰基取代之核苦衍生 物」）及其醫藥學上可接受之鹽可用於例如在患者中抑制 HCV病毋複I或複製子活性且用於治療或預防hCV感染。 在不受任何特定理論限敎情況下，咸信2,_氰基取代之核 苦衍生物藉由抑制HCVNS5B而抑制Hcv病毒複製。 因此，本發明提供治療或預防患者之HCV感染的方法， 其包含投與患者有效4之至少_種2，·氰基取代之核苦衍生 物。 本發明之詳情闡述於如下隨附【實施方式】中。 儘管任何類似於本文所述之方法及材料可用於本發明之 貫踐或測试，但現在描述說明性方法及材料。本發明之其 他實施例、態樣及特徵進一步描述於後續描述、實例及隨 附申請專利範圍中或由此而顯而易見。 【實施方式】 本發明係關於一種2’_氰基取代之核苷衍生物、包含至少 163528.doc -13- 201247694 一種2'-氰基取代之核苷衍生物之組合物及2’_氰基取代之核 苦衍生物用於治療或預防患者之HCV感染之方法。 定義及縮寫
本文所用術語具有其一般含義且該等術語之含義在其每 次出現時係獨立的。儘管如此且除非另外說明，否則以下 定義適用於整篇說明書及申請專利範圍。化學名稱、通用 名稱及化學結構可互換使用來描述同一結構。若使用化學 結構與化學名稱提及化合物且結構與名稱之間存在分岐， 則以結構為準。除非另外指明，否則此等定義均適用，無 論術語單獨使用抑或與其他術語組合使用。因此，「烷 基」之定義適用於「烷基」以及「羥基烷基」、「鹵烷 基」、「-〇-烷基」等之「烷基」部分。 疋 除非另外指明，否則如本文及本發明通篇使用之以下術 語應理解為具有以下含義： 患者」為人類或非人類哺乳動物。在一個實施例中， 患者為人類。在另一實施例巾，患者為黑獲獲 (chimpanzee) °
如本文所用之術語「有效量」係指2,_氰基取代之核与 生物及/或另冶療劑或其組合物在投與至罹患病毒域 或病毒相關録之患者時有效產生所要㈣性、改善姓 抑制性或預防性作用之吾 之量在本發明之組合療法中，有 量可指各個別藥劑或整人 、、且0 其_所投與之所有藥劑 量一起有效，但其中細人 、.0之各、·且分藥劑可能不個別地以 效量存在。 163528.doc -14· 201247694 如本文關於HCV病毒感染或HCV病毒相關病症所用之術 語·「預防」係指降低HCV感染之可能性或嚴重性。 如本文所用之術語「烷基」係指氫原子之一經一鍵置換 之脂族煙基《烷基可為直鏈或分支鏈且含有約1至約2〇個 碳原子。在一個實施例中，烷基含有約1至約12個碳原
子。在不同實施例中，烷基含有1至6個碳原子烷基） 或約1至約4個碳原子（Cl_C4烷基）。烷基之非限制性實例包 括曱基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、異 丁基、第二丁基、正戊基、新戊基、異戊基、正己基、異 己基及新己基。烧基可未經取代或經一或多個可相同或不 同之取代基取代，各取代基獨立地選自由以下組成之群： 函基、婦基、炔基、芳基、環烷基、氰基、羥基、_〇_烷 基、-〇-芳基、-伸烷基·〇_烷基、烷基硫基、_ΝΗ2、·ΝΗ(烷基) 、-Ν(烷基）2、_ΝΗ(環烷基）、_〇_c(〇)烷基、_〇c(⑺·芳 基、-〇-c(o)-環烷基、_c(0)〇H&_c(〇)〇烷基。在一個實 施例中，烧基為直鏈烧基4另—實施财，烧基為分支 鏈烷基。除非另外指明，否則烷基未經取代。 士本文所用之術居「稀基」係指含有至少__個碳碳雙鍵 且氫原子之-經-鍵置換的脂族煙基。稀基可為直鍵或分 支鏈且含有約2至約15個碳原子。在_個實施例中，缔基 含有約2至約12個碳原子。在另-實施例中，烯基含有約2 至約6個碳原子。烯基之非限難實例包括乙縣、丙烯 基、正丁稀基、3-甲基丁 _2_.陆且 _ , 烯基、正戊烯基、辛烯基及癸 稀基。烯基可未經取代或經-❹個可相同Μ同之取代 I63528.doc • 15- 201247694 基取代，各取代基獨立地選自由以下組成之群：齒基、烯 基、炔基、芳基、環烧基 '氰基、羥基、烧基、_〇芳基 、-伸烷基-0-烷基、烷基硫基、-NH2、-NH(烷基）、-N(烷 基）2、-NH(環烷基）、-〇-C(0)_ 烷基、_〇-C(〇)芳基、_〇_ C(O)-環烧基、-C(0)0H及-C(0)0-烷基ό術語「C2_c6烯 基」係指具有2至6個碳原子之烯基》除非另外指明，否則 烯基未經取代。 本文所用之術語「炔基」係指含有至少一個碳_碳參鍵 且氫原子之一經一鍵置換的脂族烴基。炔基可為直鍵或分 支键且含有約2至約1 5個碳原子。在一個實施例中，炔基 含有約2至約1 2個碳原子。在另一實施例中，炔基含有約2 至約ό個碳原子。炔基之非限制性實例包括乙炔基、丙炔 基、2 -丁块基及3 -甲基丁炔基《快基可未經取代或經一或 多個可相同或不同之取代基取代，各取代基獨立地選自由 以下組成之群：自基、烯基、炔基、芳基、環烷基、氰 基、羥基、-0-烷基、_〇-芳基、·伸烷基_〇_烷基、烷基硫 基、-ΝΗ2、-ΝΗ(烷基）、-Ν(烷基）2、·νη(環烷基）、·〇_ C(o)-烧基、-O-C(O)·芳基、-O-C(O)-環院基、_c(0)0H及 •C(0)0-烧基。術語「CrC6炔基」係指具有2至6個碳原子 之炔基。除非另外指明，否則炔基未經取代。 本文所用之術語「伸烷基」係指如上文所定義之烷基中 烷基之氫原子之一經一鍵置換。伸烷基之非限制性實例包 括-CH2-、-CH2CH2- ' -CH2CH2CH2-、_CH2CH2CH2CH2-、 -CH(CH3)CH2CH2-、-CH(CH3)-及-CH2CH(CH3)CH2- » 在一 163528.doc •16· 201247694 個實施例中，伸烷基具有丨至約6個碳原子。在另一實施例 中，伸烷基為分支鏈伸烷基。在另一實施例中，伸烷基為 直鏈伸烷基。在一個實施例中，伸烷基為。術語 伸烷基」係指具有1至6個碳原子之伸烷基。
本文所用之術語「芳基」係指包含約ό至約14個碳原子 之芳族單環或多環系統。在—個實施例中，芳基含有約6 至約10個碳原子。芳基可視情況經一或多個可相同或不同 且士下文所;t義之「環系統取代基」取代。在—個實施例 中’芳基可視情況與環烷基或環烷醯基稠合。芳基之非限 制性貫例包括苯基及萘基。在—個實施例中，芳基為苯 基。除非另外指明，否則芳基未經取代。 本文所用之術語「伸芳基」係指由上文定義之芳基的一 個：碳移除-個氫原子所衍生之芳基的二價基團。伸芳基 可銜生自包含約6至約14個碳原子之單環或多環系統。在 一個實施例中，伸芳基含有約6至約10個碳原+。在另一 貫施例巾，㈣基騎萘基。在另―實施财 伸笨基。伸芳基可視情況經-或多個可相同或不同且：ΐ 義之「環系統取代基」取代。伸芳基為二價基團且 二I上之任一可用鍵可連接於任一側接伸芳基之基團。 舉例而吕，基團「Α-伸芳基_Β」，其中伸芳基為：
應理解為表示： 163528.doc 201247694
及
稠t。例中’伸芳基可視情況與環烷基或環烧酿基 個實施例性實例包括伸苯基及伸蔡基。在-為： _方基未經取代。在另-實施例中，伸芳基
除非另外指明，否則伸芳基未經取代。 如本文所用之術語「環烧基」係指包含3至約10個環碳 原子之非芳族單it衣或多環系統。在一個實施例中，環烧基 含有約5至約H)個環碳原子。在另一實施例中，環炫基含 有3至約7個環原子。在另一實施例中，環烧基含有約$至 約6個環原子。術語「環烧基」亦涵蓋與芳基（例如苯）或雜 芳基環稍合之如上文所定義之環烧基。單環環院基之非限 制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基 '環己基、環庚基 及環辛基。多環環烷基之非限制性實例包括丨十氫萘基、 降蒱基及金剛烷基。環烷基可視情況經一或多個可相同或 不同且如下文所定義之「環系統取代基」取代。在一個實 施例中，環烷基未經取代。術語「3至6員環烷基」係指具 有3至6個環碳原子之環烷基。除非另外指明，否則環院基 未經取代。環炫基之環碳原子可官能化為羰基。該環烧基 I63528.doc -18- 201247694 (在本文中亦稱作「環烷醯基」）之一說明性實例包括（但不 限於）環丁醢基：
如本文所用之術語「鹵基」意謂-F、-a、-Br或-I。
如本文所用之術語「_烷基」係指如上文所定義之烷 基，其中烷基之一或多個氫原子經鹵素置換。在一個實施 例中’鹵烷基具有1至6個碳原子。在另一實施例中，鹵烷 基經1至3個F原子取代。鹵烷基之非限制性實例包括_Cil2F 、-chf2、-cf3、-ch2c丨及-CC13 〇 術語「Cl-c6ii 烷基」係 指具有1至6個碳原子之函烷基。 如本文所用之術語「羥基烧基」係指如上文所定義之院 基，其中烷基之一或多個氫原子經_〇H基團置換。在一個 實施例中，羥基烷基具有丨至6個碳原子。羥基烷基之非限 制性實例包括_CH2〇H、-CH2CH20H、.ch2ch2ch2oh及 -ch2ch(oh)ch3。術語「基烧基」係指具有丨至6 個碳原子之羥基烷基。 如本文所用之術語「雜芳基」係指包含約5至約個環 原子之方族單環或多環系統，其中i至4個環原子獨立地為 Ο—、N或s，且剩餘環原子為碳原子^在—個實施例中，雜 芳基具有5至10個環原子左 f十在另一貫施例中，雜芳基為單 %且具有5或6個環原子。. ^在另貫施例中，雜芳基為雙 163528.doc -19- 201247694 環。雜芳基可視情況經一或多個可相同或不同且如下文所 疋義之「環系統取代基」取代。雜芳基經由環碳原子接 合，且雜芳基之任何氮原子可視情況氧化成相應N_氧化 物。術語「雜芳基」亦涵蓋與苯環稠合之如上文所定義之 雜芳基。雜芳基之非限制性實例包括吡啶基、吡嗪基、呋 喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮（包括經取代之吡啶 酮）、異噁唑基、異噻唑基、噁唑基、噁二唑基、噻唑 基、吡唑基、呋咕基、吡咯基、三唑基、丨，2,4•噻二唑 基"比嗪基、㈣基、啥《基、耿噪基、經基十朵基、 味。坐并[l’2_a]*憾、切并[2l_b]i^基苯并咬咕 基、十朵基、氮雜十朵基、苯并味唾基、苯并嗟吩基、喧 啉基、咪唑基、苯并咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、 。塞吩并㈣基、㈣并㈣基、咪唾并㈣基、異喧琳 基、笨并氮雜°引°朵基、以，4-三嗪基、苯并嗟峡基及其類 似基團及其所有異構形式。術語「雜芳基」亦指部分飽和 之雜芳基部分，諸如四氫異啥淋基、四氫啥琳基及其類似 基團。在-個實施例中，雜芳基為5員雜芳基。在另一實 施例中’雜芳基為6員雜芳基。在另中，雜芳基 包含與苯環稠合之5至6員雜芸其 ^ , 貝雜方基除非另外指明，否則雜 方基未經取代。 本文所用之術#環烷基」係指包含3至約11個環 原子之非芳族飽和單環或多環系統，其中!至4個環原子獨 也為〇 S N或Si，且其餘環原子為碳原子。雜環 可經由環碳、環矽原子或 土 裒氮原子接合。在一個實施例 163528.doc *20. 201247694 中，雜％燒基為單環且具有3至約7個環原子。在另一實施 例中，料垸基為單環且具有約4至約7個環原？。在另一 實施例中，#環燒基為雙環且具有約7至約u個環原子。 在另一實施例中，雜環烷基為單環且具有5或6個環原子。 在一個實施例中，雜環烷基為單環，在另一實施例中，雜 環院基為雙環。環系統中不存在相鄰氧及/或硫原子。雜 環烷基環中之任何_NH基團可以諸如保護為·Ν(Β〇〇、 -N(CbZ)、-N(Tos)基團及其類似基團之形式存在；該等經 • 保護雜環烷基為本發明之考慮部分。術語「雜環烷基」亦 涵蓋與芳基（例如苯）或雜芳基環稠合之如上文所定義之雜 環烷基。雜環烷基可視情況經一或多個可相同或不同且如 下文所疋義之「環系統取代基」取代。雜環烷基之氮或硫 原子可視情況氧化成相應N-氧化物、S_氧化物或8,5_二氧 化物。單環雜環烷基之非限制性實例包括氧雜環丁烧基、 旅唆基、。比嘻咬基、略。秦基、嗎啉基、硫代嗎啉基 、°塞嗤 啶基、1，4-二氧雜環己烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、 • δ-内醯胺、δ-内酯、矽雜環戊烷、矽雜吡咯啶及其類似基 團及其所有異構體。含有石夕烧基之雜環烷基的非限制性說 明性實例包括：
163528.doc -21 · 201247694
雜環烷基之環碳原子可官能化為羰基。該雜環烷基之 說明性實例為： 义70
F
在-個實施例中’雜環烷基為5員單環雜環烷基。在另 一實施例中，雜環烷基為6員單環雜環烷基。術語「3至6
員單環環烷基」係指具有3至6個環原子之單環雜環A 術語「4㈣單環環烧基」係指具有4至心二 雜環烧基。術語「7至η員雙環雜環院基」係指具有7題 個環原子之雙環雜較基。除非另外指明，㈣雜環烧基 未經取代。 術語「天錢非天然嗓吟或㈣驗基」&括（但不限於）腺 W 心…（其中醯基為c(〇)(烧基、芳基、烧 基^基或芳基烧基））、N6-丰甲基* H·、i & ·« 4、n6-乙基·》吟 N6·块基》票吟、N"基。票吟、N6m基嗓吟、n6-硫基坑基嗓呤、 N2·坑&嘌呤、γ2·烷基-6·硫代嘌吟 、 、胸腺嘧啶、胞嘧啶、5-氟胞嘧 啶、5-甲基胞《、6-氮雜变。定（包括6_氣雜胞㈣）、2_疏 基嘴咬及/或4_毓基t定、尿㈣、5__尿㈣（包括5 尿嘧啶）、c5-坑基^、c5-苯甲基〇、c5.s"< 、 163528.doc ·22· 201247694 嘴咬、c5 a&e密 η定、c5-®*·*1*·嗓吟、c5-®**··®·? C5·*·基令咬、〇5-項&嘧啶 、 ^ 、Ν2·烷基* 吟、Ν2-烧基 _6·硫代«吟 k敗雜胞普基、5·氮雜尿喷咬基、三嗤并η比咬基、咪唾并 定基比咯并嘧啶基及吡唑并嘧啶基。嘌呤鹼基包括 (但不限於)鳥嘌呤、腺嘌呤、次黃嘌呤、2,6_二胺基嘌呤 及6-氯嗓吟。驗基上之官能性氧及氮基團可視需要或在必 要時進行保護。適合保護基為熟習此項技術者所熟知且 包括二甲基矽烷基、二曱基己基矽烷基、第三丁基二甲基 • 矽烷基及第三丁基二笨基矽烷基、三苯曱基、烷基、醯基 (諸如乙醯基及丙醯基）、甲烷磺醯基及對曱苯磺醯基。 如本文所用之術語「環系統取代基」係指連接於芳族或 非芳族環系統之取代基，其例如置換環系統上之可用氫。 環系統取代基可相同或不同，各獨立地選自由以下組成之 群··烧基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、-伸烷基-芳基、 -伸芳基-烷基、-伸烷基-雜芳基、-伸烯基·雜芳基、-伸炔 基-雜芳基、-ΟΗ、經基烧基、鹵烧基、-〇-烧基、鹵燒 鲁 基、-伸烧基-0-烧基、-〇-芳基、-0-伸烧基-芳基、酿基、 -C(0)-芳基、鹵基、·ν〇2、-CN、-SF5、-C(0)0H、-C(〇) 0-烷基、-C(0)0-芳基、-C(0)0-伸烷基-芳基、-s(0)-烷 基、-S(0)2-烷基、-s(0)-芳基、-s(0)2-芳基、-S(0)-雜芳 基、-S(0)2-雜芳基、-S-烷基、-S-芳基、-S-雜芳基、-S-伸 烷基-芳基、-S-伸烷基-雜芳基、-s(o)2-伸烷基-芳基、 -S(0)2-伸烷基-雜芳基、-Si(烷基）2、-Si(芳基）2、-Si(雜芳 基）2、-Si(烷基）（芳基）、-Si(烷基）（環烷基）、-Si(烷基）（雜 163528.doc -23· 201247694 芳基）、環烷基、雜環烷基、_〇_c(〇)_烷基、_〇_〇(〇)_芳 基、-O-C(O)-環烧基、-C(=N-CN)-NH2、-C(=NH)-NH2、 -C(-NH)-NH(烷基）、_伸烷基·Ν(γ】）（γ2)、 0(0)1^,)02)及-SCOhNCY^Y2)，其中γ〗及γ2可相同或 不同且獨立地選自由氫、烷基、芳基、環烷基及_伸烷基_ 芳基組成之群。「環系統取代基」亦可意謂同時置換環系 統上之兩個相鄰碳原子上之兩個可用氫（每個碳上一個Η) 的單一部分。該部分之實例為亞曱基二氧基、伸乙基二氧 基、-C(CH3)2-及其形成諸如以下之部分的類似部分：
術5吾「經取代」意謂指定原子上之一或多個氫經指定群 中所選基團置換，纟限制條件為不超出現有情形下指定原 子之正常原子價，且取代產生穩定化合物。取代基及/或 變數之組合僅在該等組合產生穩定化合物時為允許的。 穩定化合物」或「穩定結構」意謂足夠穩固以能夠經受 住自反應混合物分離為適用純度且調配成有效治療劑的化 合物。 如本文所用之術語「實質上經純化形式」係指在化合物 自合成製程（例如自反應混合物）、天然來源或其組合分離 後化合物之物理狀態。術語「實質上經純化形式」亦指在 化合物以足以由本文所述或熟習此項技術者熟知之標準分 析技術表徵之純度自本文所述或熟習此項技術者熟知之純 163528.doc -24- 201247694 化製程（例如層析、具社θ B w a 冉、·.α aB及其類似製程）獲得後化合物之 物理狀態。 亦應主意纟本文之正文、流程、實例及表格中假定 具有不飽和原子價之任何碳以及雜原子具有足夠數目之就 原子來滿足原子價。 當化合物之官能基稱作「經保護」時，此意謂該基團呈 呈修飾形式以在使該化合物進行反應時阻止經保護位點處 之不田曰彳反應。適合保護基為—般技術者所瞭解以及可參 • 考標準教科書（諸如T. W. Greene等人，h 心办祕如·j (1991)，Wiley，如〜Y〇rk)來瞭解。 除非另外指明，否則當任何取代基或變數（例如烷基、 R6、…等）在任何組分或在式⑴中出現一次以上時，其在 每次出現時之定義竭立於其在所有其他出現時之定義。 如本文所用之術語「組合物」意欲涵蓋包含指定量之指 定成分的產品以及自指定量之指定成分的組合直接或間接 產生之任何產品。 # 本文亦涵蓋本發明化合物之前藥及溶劑合物^ T.
Higuchi及 V. Stella, £)e"ve〇;办价似 (1987) 14，A.C.S. Symposium Series，及別
CaWen h Dr叹〜们如，（1987) Edward B. Roche 編， American Pharmaceutical Association and Pergamon Press 中提供對前藥之論述。術語「前藥」意謂在活體内轉化而 提供2'-氰基取代之核苷衍生物或該化合物之醫藥學上可接 受之鹽的化合物（例如藥物前驅物）。該轉化可藉由各種機 163528.doc -25- 201247694 制（例如藉由代謝或化學過程）發生，諸如經由在血液中水 解。 舉例而言，若2’-氰基取代之核苷衍生物或該化合物之醫 藥學上可接受之鹽、水合物或溶劑合物含有羧酸官能基， 則前藥可包含用以下基團置換酸基之氫原子所形成之酯： 諸如（Ci-C8)烧基、（C^-C〗2)烧醯氧基甲基、具有4至9個碳 原子之1-(烷醯氧基）乙基、具有5至1〇個碳原子之丨_曱基·卜 (烷醯氧基）-乙基、具有3至6個碳原子之烷氧基羰氧基甲 基、具有4至7個碳原子之丨·（烷氧基羰氧基）乙基、具有5至 8個碳原子之1_曱基_丨_(烷氧基羰氧基）乙基、具有3至9個 碳原子之N-(烷氧基羰基）胺基甲基、具有4至1〇個碳原子 之1-(N-(烧氧基幾基）胺基）乙基、％敝基、4_巴豆酸内酯 基、γ-丁内酯-4-基、二_n，N-(Ci-C2)烷基胺基（C2_c3)烷基 (諸如β-一甲基胺基乙基）、胺甲酿基_(Ci_c2)烧基、n，n_二 (Ci-C2)烷基胺甲醯基_(Ci_C2)烷基及哌啶基·、n比咯啶基_ 或嗎淋基（C2_C3)烷基及其類似基團。 類似地’若2’-氰基取代之核苷衍生物含有醇官能基，則 前藥可藉由用以下基團置換醇基之一或多個氫原子來形 成：諸如（CVCJ烷醯氧基甲基、烷醯氧基）乙 基丨·甲基-〖-((Ci-C6)烷醯氧基）乙基、（c〗-c6)烷氧基羰氧 基甲基N-(CrC6)烧氧基幾基胺基甲基、丁二醯基、（c^_c6) 烷醯基、α-胺基（C丨-C4)烷基、α胺基（c丨·C4)伸烷基芳 ^ 方基醢基及α_胺基酿基或α-胺基酿基·α·胺基醢基，其 中各(X·胺基醯基獨立地選自天然產生之L_胺基酸或糖基（移 163528.doc 201247694 除碳水化合物之半縮醛形式之羥基所產生的基團）。醇衍 生之前藥的其他非限制性實例包括-p(〇)(〇h)2 ; -p(o)(-〇-Ci-Ce烷基）2 ;-卩（〇)(-：^11-(〇1_胺基醢基））（-0-芳基）；-P(〇) (-O-CCi-C^伸烷基）-S-醯基）（-NH-芳基烷基）；在兩個核糖 羥基之間形成橋之任何環狀磷酸酯，諸如：
鹼基 ch3
其中環狀磷酸酯在3M3H基團與5'-0H基團之間形成橋；及 以下中所述之前藥：美國專利第7,879,815號；國際公開案 第 W02005/003047 號、第 W02008/082602 號、第 W02010/0081628 號、第 W02010/075517 號及第 W02010/075549號；Mehellou，C/2ew. MeA C/zew.，5:1841-1842 (2005) ; Bobeck 等人，15:935-950 (2010) ; Furman等人，Future Medicinal Chemistry, 1:1429-1452 (2009);及 Erion，Microso/we·? Drw客
Proceedings of the International Symposium,第 17 屆， Saratoga Springs，NY, United States, 2008 年 7 月 6-10 曰，7-12 (2008)。 若2’-氰基取代之核苷衍生物併有胺官能基，則前藥可藉 由用以下基團置換胺基之氫原子來形成：諸如R-羰基-、RO-羰基-、NRR；-羰基-，其中R及R'各獨立地為（CrCio)烷基、 (C3-C7)環烷基、苯曱基；天然α-胺基醯基；-C(0H)C(0) ΟΥ1，其中Y1為Η、（CVC6)烷基或苯曱基；-C(OY2)Y3，其 I63528.doc •27· 201247694 中Y2為（Ci-C4)烷基，且Y3為（Ci-C6)烷基；羧基（c丨-C6)烷 基；胺基（Ci-C4)烧基或單-N^Ci-Ce)院基胺基烧基或二-队]^-((：1-0：6)烷基胺基烷基；-〇(丫4)丫5，其中丫4為^1或甲 基，且Y5為單-N-CCVCe)烷基胺基嗎啉基或二-N，N-(C〗-C6) 烷基胺基嗎啉基；派啶-1-基或吡咯啶-1-基；及其類似基 團。 本發明化合物之醫藥學上可接受之酯包括以下組群： (1) 藉由酯化羥基化合物之羥基獲得的羧酸酯，其中酯基之 羧酸部分的非羰基部分選自直鏈或分支鏈烷基（例如甲 基、乙基、正丙基、異丙基、第三丁基、第二丁基或正丁 基）、烷氧基烷基（例如曱氧基曱基）、芳烷基（例如苯甲 基）、^氧基院基（例如苯氧基甲基）、芳基（例如視情況經 例如函素、C〗·4烷基、-0-((:,-4烷基）或胺基取代之苯基）； (2) 磺酸酯，諸如烷基磺醯基或芳烷基磺醯基（例如曱烷磺 酿基）；（3)胺基酸酯（例如L_纈胺醯基或L_異白胺醯基）； (4)膦酸酯及（5)單磷酸酯、二磷酸酯或三磷酸酯。磷酸酯 可由例如Cl·20醇或其反應性衍生物或由2,3-二（C6_24)醯基 甘油進一步酯化。 一或多種本發明化合物可以非溶劑化形式以及與醫藥學 上可接受之溶劑(諸如水、乙醇及其類似物)形成之溶劑化 形式存在’且預期本發明涵蓋溶劑化形式與非溶劑化形 式。「溶劑合物」意謂本發明化合物與一或多個溶劑分子 之物理締合。此物理締合步 π。"及不同私度之離子鍵結及共價 鍵結，包括氫鍵結。在特定愔 .,(^ 你幵疋It况下，例如當一或多個溶劑 163528.doc 201247694 分子併入結晶固體之晶格中時，溶劑合物將能夠分離。 「溶劑合物」涵蓋溶液相與可分離之溶劑合物。溶劑合物 之非限制性實例包括乙醇化物、甲醇化物及其類似物。 「水合物」為溶劑分子為水之溶劑合物。 一或多種本發明化合物可視情況轉化為溶劑合物。溶劑 合物之製備一般已知。因此，例如，M· caira等人，/· 93(3)，6〇1_611 (2〇〇4)描述抗真菌氟康 唑（fluconazole)於乙酸乙酯以及水中之溶劑合物的製備。
E. C. van Tonder 等人，心/办，各⑴，第 12 節， (2004)，及 A. L. Bingham 等人，c/iem. Commww·，603-604 (2001)描述溶劑合物、半溶劑合物、水合物及其類似物之 類似製備。典型的非限制性製程涉及在高於室溫下將本發 明化合物溶解於所要量之所要溶劑（有機溶劑或水或其混 合物）中，且以足以形成晶體之速率冷卻溶液，隨後藉由 標準方法分離晶體。分析技術（諸如IR光譜法）展示呈溶劑 合物（或水合物）形式之晶體中溶劑（或水）的存在。 2 -氰基取代之核苷衍生物可形成亦屬於本發明之範疇的 鹽。除非另外指0月’否則在本文中提及2'·氰基取代之核苦 何生物應理解為包括提及其鹽。如本文所用之術語「鹽」 表不與無機酸及/或有機酸形成之酸性鹽以及與無機驗及/ 或有機鹼形成之鹼性鹽。另外，當2，_氰基取代之核苷衍生 物含有鹼性部分（諸如（但不限於）吡啶或咪唑）與酸性部分 (諸如（但不限於）羧酸）時，可形成兩性離子（「内鹽」）且其 包括於如本文所用之術語「鹽」内。在一個實施:」中，鹽 163528.doc •29- 201247694 為醫藥學上可接受（亦即無毒 '生理學上可接受）之鹽。在 另-實施财’冑不為醫藥學上可接受之鹽。刊如藉由 使2 ’ -氰基取代之核苦衍生物與一定量（諸如等量）之酸或鹼 在介質（諸如使鹽沈澱之介質）中或在水性介質中反應，繼 而;東乾來形成式（I)化合物之鹽。 例示性酸加成鹽包括乙酸鹽、抗壞血酸鹽、苯甲酸鹽、 苯磺酸鹽、硫酸氩鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、樟腦 酸鹽、樟腦磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、 氫碘酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、萘磺酸 鹽、硝酸鹽、草酸鹽、磷酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二 酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、甲苯磺酸鹽 (toluenesulfonate)(亦稱作曱苯磺酸鹽（t〇sylate))及其類似 鹽。另外，一般視為適用於自鹼性醫藥化合物形成醫藥學 上適用之鹽的酸論述於例如以下文獻中：P. Stahl等人， Camille G.(編）Ζ/αη办00灸
Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH ； S 專尺，Journal of Pharmaceutical Sciences (\9Ί7) 66(1) 1-19 ; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217 ; Anderson 等人，TTie /Vaciice 〇/
Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York i 及 77ie J5ooA: (Food & Drug Administration，
Washington，D.C.,在其網站上）。此等揭示内容以引用的方 式併入本文中。 例示性鹼性鹽包括銨鹽；鹼金屬鹽，諸如鈉鹽、鋰鹽及 163528.doc -30- 201247694 鉀鹽；鹼土金屬鹽，諸如鈣鹽及鎂鹽；與有機鹼（例如有 機胺）形成之鹽，該等有機鹼諸如二環己胺、第三丁胺、 膽鹼；及與胺基酸形成之鹽，該等胺基酸諸如精胺酸、離 胺酸及其類似胺基酸。可用諸如以下試劑使鹼性含氮基團 四級銨化：低碳烷基画化物（例如甲基、乙基及丁基氣化 物、溴化物及碘化物）、硫酸二烷酯（例如硫酸二甲酯、硫 酸二乙酯及硫酸二丁酯）、長鏈齒化物（例如癸基、月桂基 及硬脂醯基氯化物、溴化物及碘化物）、芳烷基南化物（例 • 如笨甲基溴及苯乙基溴）及其他試劑。 出於本發明之目的，所有該等酸鹽及鹼鹽均意欲為屬於 本發明鉍疇之醫藥學上可接受之鹽且所有酸鹽及鹼鹽均視 為等效於相應化合物之游離形式。 非對映異構混令物可基於其個別非對映異構體之物理化 學差異而藉由熟習此項技術者所熟知之方法（諸如藉由層 析及/或分步結晶）分離為其個別非對映異構體。對映異構 體可藉由以下步驟來分離：藉由使對映異構混合物與適當 • 光學活性化合物（例如對掌性助劑，諸如對掌性醇或莫舍 氏酸氯化物（Mosher's acid chloride))反應將該對映異構混 合物轉化為非對映異構混合物，分離非對映異構體，且將 個別非對映異構體轉化（例如水解）為相應純對映異構體。 立體化學純化合物亦可藉由使用對掌性起始物質或藉由使 用鹽解析技術來製備❶此外，一些2，_氰基取代之核苷衍生 物可為滯轉異構體（例如經取代之聯芳），且其視為本發明 之 4 77。對映異構體亦可使用對掌性層析技術直接分 163528.doc -31 - 201247694 離。 2·-氰基取狀核苷衍㈣亦可㈣不同互變 在且所有該㈣式均涵蓋於本發明之料‘舉例而^存 =:匕合物之所有__稀醇及亞胺·稀胺形式均包括於树 本發明化合物之所有立體異構體(例如幾何異構 學異構體及其類似物)(包括該等化合物之鹽、溶劑合物、 水合物、醋及前藥以及前藥之鹽、溶劑合物及賴的立體異 構體广諸如因各種取代基上之不對稱碳而可能存在之立 體異構體’包括對映異構形式（其甚至在無不對稱碳的情 況下亦可能存在）、旋轉異構形式、滞轉異構體及非對映 異構形式’均涵蓋在本發明之範疇内。若2，-氰基取代之核 苦衍生物併有雙鍵或稠環，則順式與反式以及混合物均涵 蓋於本發明之範疇内。 本發明化合物之個別立體異構體可例如實質上不含其他 異構體，或可例如以外消旋體形式混合或與所有其他立體 異構體或其他所選立體異構體混合。本發明之對掌性中心 可具有如/i/^4C 1974 Rec〇mmendaticins所定義之8或&組 態。術語「鹽」、「溶劑合物」、「醋」、「前藥」及其類似術 語之使用欲同樣適用於本發明化合物之對映異構體、立體 異構體、旋轉異構體、互變異構體、位置異構體、外消旋 體或前藥之鹽、溶劑合物、酯及前藥。 在式（I)化合物中，原子可展現其天然同位素豐度，或一 或多個肩子可人為地富含具有相同原子序數但原子質量或 163528.doc •32- 201247694 ”數不同於自然界中主要存在之原子質量或質量數的特 定同位素。本發明意欲包括通式nb合物之所有適合同位 ^邕化形式。舉例而言’氫⑻之不同同位素形式包括氕 (¾及氣（¾。死為自然界中存在之主要氫同位素。富含 氣可提供特定治療優勢，諸如延長活體内半衰期或降低劑 量需：，或可提供適用作表徵生物樣品之標準物的化合 物曰3同位素之式⑴化合物可不經過度實驗而藉由熟習 此項技術者熟知之習知技術或藉由類似於本文流程及實例 籲巾所述之製程使用適當富含同位素之試劑及/或中間物製 備。在-個實施例中，式⑴化合物之一或多個氛原子經沉 置換。 2，-氰基取狀㈣魅物及2，·氛絲代之料衍生物之 鹽、溶劑合物、水合物、醋及前藥的多晶形式意欲包括於 本發明中。 在-些情況下’本發明化合物稱作「異構體匕及「異 構體2」。此命名係指關於如下文對於環狀及非環狀前㈣ 籲說明之5，-前藥部分之對掌性碟原子的立體異構體，其中結 構： Ο
視為表示以下兩種鱗立體異構體. 163528.doc -33- 201247694
且結構
視為表示以下兩種磷立體異構體：
可指定為已知絕對組 組態之立體異構體。 態 因 明 術語「異構體1」及「異構體2 之異構體或可用於描述未知絕對 此’使㈣語異構體丨」及「異構體2」不應解釋為表 兩種異構體之絕對組態已知。 下文使用以下縮寫且該等縮寫具有以下含義：Ac為乙醯 基或-C(0)CH3，Ac20為乙酸酐；Bu為丁基；t-BuMgCl為 氣化第三丁基鎂；DCM為二氣曱烷；戴斯-馬丁高碘烷 (Dess-Martin Periodinane)為 1，1，卜二乙酿氧基二氫·1，2· 苯并碘氧雜環戊-3(1 Η)·酮；DIB AL-H為氫化二異丁銨； 163528.doc -34- 201247694 DMAP為N，N- 一甲基胺基。比。定；EtOAc為乙酸乙醋；EtOH 為乙醇，HPLC為高效液相層析；KHMDS為六甲基二石夕院 胺基鉀；KOBut為第三丁醇鉀；LCMS為液相層析/質譜； MeOH為甲醇；NMI為曱基咪唑；Pd(〇H)2為氫氧化鈀； TBAF為氟化四正丁銨；TEMP〇為（2,2,6,6_四甲基派啶―卜 基）氧基；THF為四氫呋喃；TIPDSiCl2為1，3-二氣·ι，ι，3,3· 四異丙基二矽氧烷；且TLC為薄層層析。 式（I)化合物
本發明提供式（I)之2，-氰基取代之核苷衍生物：
及其醫藥學上可接受之鹽，其中B、x、Rl、r2及r3如上 文對於式（I)化合物所定義。
在一個實施例中，X為〇。 在另一實施例中，X為S。 在另-實施例中，X為CH2。 在一個實施例中，…為匸,-。烷基。 在另—實施例中，R3為甲基。 在一個C?施例中，對於式⑴或式（Ia)之化合物，R1為H :3 0
Rl7〇Y^NJ—g 0 H iRu ’或R1與R2接合形成具有下式之基團： 163528.doc -35- 201247694
〇R18 \ N(R29)2 或O，其中R、C6_Ci。芳基，其可視情 況如技術方案i所述經取代；以為㈣烷 基、C3-C7環烷基或C6_C|()芳基；且 為C|-C6烷 如對以⑴化合物 在一個實施例中，式⑴化合物具有式（Ia):
及其醫藥學上可接受之鹽， 其中： B為：
R2為H，或尺]與112接合形成具有下式之基團： \ /〇R18
163528.doc • 36 - 201247694 R6及R1。各獨立地為_N(R2〇)2 ; R9為-0-(Ci-c6烧基）； R14為C6_c10芳基，其可視情況經鹵基取代；
Rl5及Rl6各獨立地為Η或Ci-C6烷基； R為Ci-Ce烧基； 烷基、c3-c7環烷基或c6-c1()芳基；及 r20在每次出現時獨立地為Η或烷基）。 在一個實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B選自 以下基團之一：
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
其中R6及R10各獨立地為-NH2或-NHC(0)CH3，且R9為 -0-(Ci-C6^ 基）。 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
163528.doc -37- 201247694
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，B為：
在一個實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，R1為 163528.doc * 38 * 201247694 Η 或 在另一實施例中，對於式⑴或式（la)之化合物，
CH '3 〇 r17〇v^nJ-§ 〇 H ，或111與R2接合形成具有下式之基團： 0
V ,OR18 ，其中R14為C6-C10芳基，其可視情況如技術方 案1所述經取代；尺”為匚丨-匕烷基；且R18為CVC6烷基、 c3-c7環烷基或c6_c1()芳基。 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，R]為··
Η II I I H0—Ρ-0-ΡΌ-Ρ -1
OH OH OH 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，R1為 r17o
R1、6 ,R1 Ο II ^ N—P—> H | ^ 〇 OR14 在另一實施例中，對於式⑴或式（Ia)之化合物，R1為： CH3 ο r17o ο ? II ί Ν—Ρ—ί OR14 在另一實施例中，對於式（I)或式（Ia)之化合物，R1為： R1< /15 〇
r17q \/ || C ί ^，其中R14為C6_C10芳基’其可視情況如 0 OR14 技術方案1所述經取代；r1 5及Rl6中之一者為H且另—者為 CVC6烷基；且R〗7為Ci-C6烷基。 163528.doc -39- 201247694 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，R1為： ch3 〇 r17〇^Xn_II_^ Y㈡，其中R14為C6-C10芳基’其可視情況如 技術方案1所述經取代；且1117為（：1-(：6烷基。 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，R1為： QH3 〇
Rl7CSf^N——P—含 〇 H 0r14 ’其中R14為萘基或苯基’其可視情況經 F或C1取代，且R為曱基、乙基、異丙基、正丁基戒新戍 基0 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物，RI為：
163S28.doc -40· 201247694 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物’ R1為：
在一個實施例中，對於式⑴或式（la)之化合物，R2為 Η。 在一個實施例中，對於式⑴或式（la)之化合物，R1及R2 各為Η。
在另一實施例中，對於式⑴或式（Ia)之化合物，R1及R2 接合形成具有下式之基團： W ’其中烷基、C3-C7環烷基或C6-C10 芳基。 在另一實施例中，對於式⑴或式（Ia)之化合物，R1及R2 接合形成具有下式之基團：
其中R18為曱基、乙基、異丙基、環丁基或苯基。 在另一實施例中’對於式⑴或式（Ia)之化合物，Ri&R2 接合形成具有下式之基團：
I63528.doc 201247694
對於式⑴或式（la)之化合物，R】&R2
其中R18為曱基 、乙基、異丙基、環丁基或苯基。 在一個實施例中’對於式⑴或式（la)之化合物，Ri&r2 接合形成具有下式之基團：
在一個實施例中，對於式（I)或式（Ia)之化合物，
R14為萘基、苯基或經氯取代之苯基；及 R為曱基、乙基、異丙基、正丁基或新戍基。 在一個實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物， R2 為 Η ; Β為：
163528.doc •42- 201247694
在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物， R2 為 Η ; Β為： 163528.doc 43- 201247694
或
;及
為 1R
Ho
I Η ΟΠΜΡIο * ο 一 Η οηηριο I ο I Η OHMPIO 在另一實施例中，對於式⑴或式（Ia)之化合物’ B為：
nhc(o)ch3 〇 ‘N ΙΙ^ΝΗ Ν人、入<
或 :及 R1及R2接合形成具有下式之基團： \ /0R18
163528.doc ·44· 201247694 其中R18為甲基、乙基、異丙基、環丁基或苯基。 在另一實施例中，對於式（I)或式（la)之化合物， R1及R2各為Η ;及 Β為：
在一個實施例中，式（I)化合物具有式（lb):
或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： B為：
I63528.doc -45- 201247694 R1為 R17〇
R9為-OH或-0-(C丨-C6燒基）； R14為苯基，其可視情況經至多2個可相同或不同之鹵基 取代；及 烷基。 在一個實施例中，對於式（ib)化合物’ R14為未經取代之 苯基。 在另一實施例中，對於式（Ib)化合物，Rn為乙基或異丙 基0 在一個實施例中，對於式（lb)化合物，R〗4為未經取代之 苯基且R17為乙基或異丙基。 在另一實施例中，對於式（Ib)化合物，Ru為未經取代之 苯基且R17為乙基。 在另一實施例中，對於式（Ib)化合物，Ru為未經取代之 苯基且R17為異丙基。 在一個實施例中，式⑴化合物具有式（Ic):
163528.doc 201247694 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： B為：
R為芳基或(^-(：6烷基。 在—個實施例中，對於式（Ib)化合物，為 基。 ’、’、 在另—實施例中，對於式（Ic)化合物，R18為異丙 在另—實施例中，對於式（Ic)化合物，R18為曱基 在一個實施例中’對於式（lb)或式（Ic)之化合物，
Cl'C6^ 基。 〇 B為
在另一實施例中，對於式（lb)或式（Ic)之化合物， B為
B為 在另—實施例中，對於式（lb)或式（Ic)之化合物， 163528.doc • 47- 201247694 och3
在另一實施例中，對於式（lb)或式（Ic)之化合物，B為
在另一實施例中，對於式（lb)或式（Ic)之化合物，B為
〇
在一個實施例中，式（I)化合物具有式（Id):
或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： B為：
163528.doc -48- 201247694 R1為： 、HO—或 HO—H〇J_| 0H oh on oh Ah Ah ;及 R9為-OH或-CKCVCe烷基）》 在一個實施例中，式（I)化合物之變數B、x、Ri、尺2及 R3彼此獨立地進行選擇。 在另一實施例中，式⑴化合物為實質上經純化形式。 本發明之其他實施例包括以下： (a) —種醫藥組合物，其包含有效量之式⑴化合物或其 醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之载劑。 (b) 如（a)之醫藥組合物’其進一步包含選自由hcv抗病 毒劑、免疫調節劑及抗感染劑組成之群的第二治療劑。 (c) 如（b)之醫藥組合物’其中該HCV抗病毒劑為選自由 HCV蛋白酶抑制劑、HCV NS5B聚合酶抑制劑及HCV NS5 A抑制劑組成之群的抗病毒藥。 (d) —種醫藥組合’其為⑴式⑴化合物與（丨丨）選自由Rev 抗病毒劑、免疫調節劑及抗感染劑組成之群的第二治療 劑；其中該式（I)化合物及該第二治療劑各以使得該組合可 有效抑制HCV複製或治療HCV感染及/或降低hcV感染之 可能性或HCV感染症狀之嚴重性的量使用。 (e) 如（d)之組合，其中該HCV抗病毒劑為選自由HCV蛋 白酶抑制劑、HCV NS5B聚合酶抑制劑及HCV NS5A抑制 劑組成之群的抗病毒藥。 163528.doc • 49· 201247694 (f) 一種抑制有需要之個體之HCV複製的方法，其包含投 與該個體有效量之式（I)化合物。 (g) —種治療有需要之個體之HCV感染及/或降低有需要 之個體之HCV感染之可能性或HCV感染症狀之嚴重性的方 法’其包含投與該個體有效量之式（1)化合物。 (h) 如（g)之方法’其中該式（1)化合物係與有效量之至少 一種選自由HCV抗病毒劑、免。疫調節劑及抗感染劑組成之 群的第二治療劑組合投與。 (i) 如（h)之方法’其中該HCV抗病毒劑為選自由Hcv蛋 白酶抑制劑、HCV NS5B聚合酶抑制劑及HCV NS5A抑制 劑組成之群的抗病毒藥。 (j) 一種抑制有需要之個體之HCV複製的方法，其包含投 與該個體如（a)、（b)或（C)之醫藥組合物或如（d)或（e)之組 合。 (k) 一種治療有需要之個體之hCV感染及/或降低有需要 之個體之HCV感染的可能性或HCV感染症狀之嚴重性的方 法，其包含投與該個體如（a)、（b)或（c)之醫藥組合物或如 (d)或（e)之組合。 本發明亦包括本發明化合物，其係⑴用於如下用途， (ii)用作用於如下用途之藥物或（iii)用於製備供如下用途用 之藥物：（a)藥物，（b)抑制HCV複製或（c)治療HCV感染及/ 或降低HCV感染之可能性或HCV感染症狀之嚴重性。在此 等用途中，本發明化合物可視情況與一或多種選自Hcv抗 病毒劑、抗感染劑及免疫調節劑之第二治療劑組合使用。 I63528.doc •50· 201247694 本發明之其他實施例包括以上（a)_(k)中所述之醫藥組合 物、組合及方法及前段中所述之用途，其中所用本發明化 合物為上述化合物之實施例、態樣、類別、子類或特徵之 一的化合物。在所有此等實施例中，化合物可視情況視需 要以醫藥學上可接受之鹽或水合物形式使用。應瞭解提及 化合物適當時應包括其本發明形式以及不同形式（諸如多 晶型物、溶劑合物及水合物）的化合物。 在一個實施例中，本發明包括本發明化合物或其醫藥學 # 上可接文之鹽的用途，其係用於抑制HCV NS5A活性或預 防及/或治療有需要之患者之HCV感染的醫藥組合物。 此外，應瞭解，以上（a)至（k)提供之組合物及方法的實 施例應視為包括化合物之所有實施例，包括由實施例組合 產生之該等實施例。 在本文中，式（I)化合物可由化學結構及/或化學名稱提 及在提供式（I)化合物之結構與名稱且發現化學結構與相 應化予名稱之間存在差異的情況下，應瞭解將以化學結構 Φ 為準。 式⑴化合物之非限制性實例包括以下實例中所述之化合 物1-243及其醫藥學上可接受之鹽。 製備式（I)化合物之方法 式⑴化合物可由已知或易於· ^ 勿於氟備之起始物質根據熟習有 機〇成之技術者已知之方法製 衣1有適用於製備式（I)化合物 之方法闡述於以下實例中且如 甲且概括於以下流程Α-Ε中。替代 性合成路徑及類似結構對於孰 “、、>有機合成之技術者顯而易 163528.doc .51- 201247694 見。 肌程A展不適用於製備式之核普化合物的方法，該等 化口物對應於式（I)化合物，其中χ為〇 ; r1&r2各為Η ; r3 為曱基且B為： R®
A4
其中PG為保護基且R4及r5如上文對於式⑴化合物所定 義。 可使用四異丙基二矽氧烷基在核糠3'及5,位置處使式A1 之核苷化合物經雙保護，得到式A2化合物。隨後，使用例 如戴斯-馬丁高碘烷氧化式A2化合物，得到式A3之2，·酮。 用溴化甲基三苯基磷/六曱基二矽烷胺基鉀進行維蒂希稀 化（Wittig olefination)，得到式A4化合物。可在市售曱苯 磺醯基氰化物及苯基矽烷存在下，用適當鈷催化劑（本文 163528.doc •52· 201247694 詳細描述之合成方法）處理式A4化合物之烯烴部分，得到 式A5之2，-CN化合物。隨後，使用氟化四丁銨移除矽烷基 保護基，且隨後用甲醇氨移除胞苷保護基，得到式A6化合 物。 流程B展示適用於製備式B6之核普化合物的方法，該等 化合物對應於式（I)化合物，其中X為Ο ; R1及R2各為H ; R3 為曱基且B為：
0
流程B
B6 其中R4及R5如上文對於式⑴化合物所定義。 一夂”立置處使式幻化 合物經保護，得到式B2化合物。用戴斯、 内〗向硬規處理 式B2化合物，得到所要式B3之2·- @同。用、、自 用溴化甲基三笨基 鳞/六曱基二矽烷胺基鉀進行維蒂希烯化，得到一 163528.doc •53- 201247694 物。在市售甲苯磺醯基氰化物及苯基矽烷存在下，用適春 催化劑（諸如鈷催化劑）處理式B4化合物中之烯烴，得到田 要化合物BS。使用氟化四丁銨移除矽烷基保護基，得 B6化合物。 1式 該等 ;R3 流程C展示適用於製備式C9之核苷化合物的方法， 化合物對應於式⑴化合物，其中X為0;Ri及R2各為H 為甲基且B為：
流程C
其中PG為保護基且R4及R5如上文對於式⑴化合物 義。 又 163528.doc •54· 201247694 可使用熟知方法使式Cl化合物之所有羥基經保護，得到 式C2化合物。可隨後使式C2化合物經受光延條件 (Mitsimobu condition) ’得到式C3之嘌呤醚。隨後去除c3 之保護基羥基，得到式C4化合物，接著可使用四異丙基二 矽氧烷基使其3’-〇H及5'-OH經保護，得到式C5化合物。隨 後，使用例如戴斯-馬丁高碘烷氧化式C5化合物，得到式 C6之2’-酮化合物。用溴化曱基三苯基鱗/六曱基二矽烷胺 基鉀進行維蒂希烯化，得到sC7化合物。在市售甲苯磺醯 # 基氰化物及苯基矽烷存在下，用適當鈷催化劑（本文詳細 描述之合成方法）處理式（：7化合物中之烯烴，得到所要化 合物C8。隨後使用氟化四丁銨移除矽烷基保護基，繼而去 除經保護芳基胺基之保護基，得到式C9化合物。 流程D展示適用於製備式D3之核苷化合物的方法，該等 化合物對應於式⑴化合物，其中X為Ο ; R2為Η ; R3為曱 基’ Β如上文對於式⑴化合物所定義；且R1為：
其中Β、R】4、Rl5、R〗6及R17如上文對於式（I)化合物所定 163528.doc -55- 201247694 義。 可在漠化第三丁基鎂或N-曱基咪唑存在下使式D1化合 物與式D2化合物（式D2化合物可使用us 7,879,815 B2號中 所述之方法合成）偶合’得到式D3化合物。
流程E
(iPr)2N >-N(iPr)2
Rl8〇 其中B及R18如上文對於式⑴化合物所定義β 式D1化合物可與式El之胺基磷酸酯化合物反應，繼而 用例如間氣過苯甲酸氧化，得到式E2之環狀磷酸酯。
流程F
異搆^ 其中B、R14、R15、R16及R17如上文對於式（I)化合物所定 義。 可用五氟苯酚處理類型F1之化合物，得到兩種異構體F2 及1^。此等異構體可個別地與F3反應，得到類型F4之化合 物。 163528.doc -56- 201247694
流程G
其中R14、R15、R16及R〗7如上文對於式（I)化合物所定義。 可用諸如N-溴代丁二醯亞胺之試劑溴化類型G1之化合 物，得到類型G2之化合物。 流程Η
其中R14、R15、R〗6、尺17及尺2〇如上文對於式⑴化合物所定 義。 可使類型F4之化合物與各種乙醯基化試劑反應，得到类負 型Η1之化合物。
流程I
13 其中Β及R20如上文斜,τ、 又對於式（I)化合物所定義。 可用類型12之仆人榀老 〇物處理類型之化合物，得到類型13 之化合物。 主13 163528.doc -57- 201247694 流程j
其中Y及R2G如上文對於式（I)化合物所定義。 化合物J1與J2反應，得到J3。此化合物可用適當試劑二 羥基化，得到化合物J4。使用硫醯氣使醇磺醯化，得到化 合物J5。可使用氰化物源打開環狀硫酸酯，得到J6。用酸 性條件處理化合物J6，得到化合物J7。可用各種保護基保 護J7之二醇，得到J8。用氫化物源（諸如第三丁氧基氫化 鋰鋁）處理J8，得到醇J9。Γ-羥基可轉化為溴化物J10，其 可用類型J11之鹼基置換，得到類型J12之化合物。去除 J12之所有保護基，得到J13。
163528.doc -58- 201247694 其中B及R2G如上文對於式⑴化合物所定義。 可用類型K2之化合物處理類型Kl2化合物，得到類型 Κ3之化合物。
流程L
其中R20如上文對於式⑴化合物所定義。 可用類型L1之化合物處理類型J1〇之化合物得到類型 L2之化合物。L2可隨後與各種胺反應，得到類型L3之化 合物。 式 A6、B6、C9、D3、E2、F4、G2、H1、13、J13、K3 及L3之化合物可使用熟習有機合成之技術者熟知之方法或 例如以下實例中所述之方法進—步闡述以構成式⑴化合物 之完整範嘴。 熟習有機合成之技術者應認識到合成具有多個反應官能 基（諸如-OH及NH2)之化合物可能需要保護特定官能基（亦 即，出於與特定反應條件化學相容之目的進行衍生）。此 等化合物之各種官能&的適合保縣及其安裝及移除方法 為有機化學技術中所熟知。諸多此等方法之概述可見於 Greene 中 〇 熟習有機合成之技術者亦應認識到視附接取代基之選擇 而定，合成式（I)化合物之一種途徑可能較適宜。另外，熟 習相關技術者應認識到，在一些情況下，反應次序可能不 I63528.doc -59- 201247694 同於本文所提供之反應次序以避免官能基不相容性，由此 相應地調整合成途徑。 所用起始物質及使用流程A-L中所述之方法製備的中間 物必要時可使用習知技術（包括（但不限於）過濾、蒸館、結 晶、層析及其類似技術）分離且純化。該等物質可使用習 知方法（包括物理常數及光譜數據）表徵β 實例 通用方法 市售溶劑、試劑及中間物原樣使用。無法購得之試劑及 中間物以下述方式製備。1H NMR譜在Varian VNMR系統 400(400 MHz)上獲得’且以相對於Meji之低磁場百萬分 率形式報導，同時在括號中表明質子數、多峰性及偶合常 數（赫兹）。若提供LC/MS資料，則使用Agilent 6110A MSD 或 Applied Biosystems API-100 質譜儀及 Shimadzu SCL-10A LC管柱執行分析：Altech platinum C18，3微米，33 mm><7 mm ID ;梯度流：〇 分鐘·1〇% ch3CN，5 分鐘-95% CH3CN，5-7分鐘-95% CH3CN，7分鐘-停止。提供母離 子使用預裝填正相二氧化碎（來自Isco，Biotage, Inc.)或 散裝二氧化矽（來自Fisher Scientific)執行矽膠急驟層析。 除非另外指明，否則矽膠急驟層析係使用己烷/乙酸乙酯 之梯度溶離由1 〇〇%己烷至1 〇〇%乙酸乙酯執行。 實例1 製備中間化合物Int-lc 163528.doc 201247694
將化合物 Int-la(733 mg，1.33 mmol)懸浮於乙醇（1 〇 mL) 中’加熱所得懸浮液至80eC且攪拌5分鐘。隨後添加化合 物Int-lb(236 mg，1.33 mmol)且在8(TC下再攪拌所得反應 物2小時。隨後使用冰浴冷卻反應物至室溫且過濾反應混 合物。在真空下乾燥所收集之紅色固體，得到化合物111卜 lc(579 mg，72%)。 實例2 製備中間化合物Int-2e
HN-Ac
lnt-2d HN-Ac
步驟A -合成化合物2b 使胞苷（Int-2a，8.0 g，32.89 mmol)與吡。定（2xl5 mL) — 起共沸，隨後懸浮於。比啶（25 mL)中。經十五分鐘向懸浮 液中逐滴添加二氣化四異丙基二矽氧坑（12 〇 4 mmol)且在室溫下攪拌所得反應物約丨5小時。用水稀釋反 163528.doc -61 - 201247694 應混合物且用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機萃取物，經 硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮。用庚烷濕磨所得殘餘 物，得到13.5 g呈白色固體狀之化合*Int_2b，[m+h] = 486.5 ° 步驟B-合成化合物lnt-2c 將化合物 Int_2b(13.5 mmol ’ 27.8 mmol)溶解於乙醇（2〇〇 mL)中且用乙酸酐（1〇 mL)處理。加熱所得反應物至6^c且 在此溫度下攪拌3小時，隨後在真空中濃縮反應混合物。 在冰浴中冷卻所得殘餘物至〇。(：且用飽和碳酸氫鈉處理， 隨後用乙酸乙酯萃取。經硫酸鈉乾燥有機萃取物，過淚且 在真空中濃縮’得到14.5 g化合物int-2c，其不經進一步純 化即可使用。[M+H]= 528.6 步驟C-合成化.合物Int-2d 冷卻化合物Int-2c(8.0 g，15.15 mmol)於二氣甲烧（12〇 mL)中之溶液至〇°c，隨後添加戴斯馬丁高碘烷（15 g，34 3 mmol)。在室溫下攪拌所得反應物約丨5小時，隨後用乙醚 (400 mL)稀釋。用飽和碳酸氫鈉與1〇%硫代硫酸鈉之混合 物（1:1)洗滌所得溶液。收集有機相且經硫酸鈉乾燥，過濾 且在真空中濃縮，得到7.8 g化合物int-2d，其不經純化即 可使用。[M+H] = 526。 步驟D-合成化合物]^t-2e 用四氫呋喃（25 mL)稀釋溴化甲基三苯基鱗（2 72 g，7 6 mmol)，且向所得懸浮液中添加KHMdS(0.5 μ , 14.5 mL， 7·22 mmoip在室溫下攪拌所得反應物2〇分鐘，隨後使用 I63528.doc -62· 201247694 冰浴冷卻反應物至〇。〇且逐滴添加化合物Int_2d〇 〇 g，i 9 mmol)於四氫呋喃（5 mL)中之溶液。使所得反應物升溫至 室溫且攪拌4小時，隨後用飽和氯化銨淬滅反應且用乙酸 乙酯萃取。用鹽水洗滌有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，過遽 且在真空中濃縮。使用矽膠急驟層析（2:1己烷/乙酸乙酿） 純化所得殘餘物，得到750 mg化合物int-2e。[M+H] = 524.5 實例3 製備中間化合物Int-3d
步驟A -合成化合物3b 使尿普（Int-3a ’ 5.0 g，18.0 mmol)與》比咬（2xi5 mL) — 起共沸，隨後懸浮於吡啶（25 mL)中。經十五分鐘逐滴添 加二氯化四異丙基二矽氧烷（6.06 mL ’ 18.95 mmol)且在室 溫下攪拌反應物約15小時。用水稀釋反應物且用乙酸乙酯 萃取。用鹽水洗滌有機層，經硫酸鈉乾燥且在真空中濃 縮。使殘餘物與曱笨（2X5〇 mL) —起共沸，得到7·8 g呈白 163528.doc -63 - 201247694 色固體狀之化合物Int-3b，其不經純化即可使用。 [M+H]=487.42 ° 步驟B-合成化合物Int-3c 使用實例2步驟C中所述之方法將化合物Int-3b轉化為化 合物 Int-3c (3_8 g)。[Μ+Η]=485·2 步驟C-合成化合物lnt-3d 使用實例2步驟D中所述之方法將化合物Int-3c轉化為化 合物 Int-3d(750 mg)。[M+H] = 505.2。 實例4 製備中間化合物Int-4f
步驟A-合成化合物Int-4b 將鳥苷水合物（Int-4a，1 5 g，53 mmol)溶解於°比咬（1 20 mL)及乙酸酐（60 mL)中。添加N，N-二甲基胺基吡啶（6.46 g，53 mmol)，加熱反應物至70°C且在此溫度下攪拌3小 時。隨後於冰浴中冷卻反應物且用甲醇（60 mL)逐滴處 理。隨後在真空中部分濃縮反應混合物至其體積之一半。 用二氣曱烷稀釋所得溶液且依序用0.2 Μ硫酸二氩鉀、水 及碳酸氫鈉洗滌。隨後經硫酸鈉乾燥有機相，過濾且在真 163528.doc -64. 201247694 空中濃縮，得到殘餘物，使用矽膠急驟層析（5%甲醇之二 氣甲烷溶液）純化，得到22g化合物Int_4b。[M+H]=452.2 步驟B-合成化合物 將化合物Int-4b(3.2 g，7,09 mm〇1)溶解於二噁烷（5〇 mL)中且用二笨基膦（2 23 g，8 5 、偶氮二曱酸二異 丙酯（1.65 mL，8·5 mm〇i)及乙醇（391 mg，8 5 _〇1)處 理。在室溫下攪拌反應物十五分鐘，隨後在真空中濃縮反 應混合物。將所得殘餘物溶解於甲醇（15 mL)及氫氧化銨 • (15 mL)中且攪拌3小時。過濾反應混合物且在真空中乾燥 所收集之固體，得到1.4 g化合物Int_4c。隨後在真空中濃 縮濾液且用氯仿濕磨所得殘餘物，又得到〇5 g化合物化^ 4c 〇 [M+H]=354‘2 步驟C-合成化合物 使化合物 Int-4c(1.46 g，4.13 mm〇l)與吡啶（2x2〇 mL) 一 起共沸，隨後懸浮於吼咬（3〇社）中。經十五分鐘逐滴添 加二氯化四異丙基二矽氧烷（1 43 g，4 43 mm〇l)且在室溫 鲁 T授拌反應物3小時。用水（1 mL)稀釋反應物且在真空令 濃縮所得溶液。用水及乙酸乙酷稀釋所得殘餘物，收集有 機層且用鹽水洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃 縮。使所得殘餘物與甲苯㈣〇 mL)一起共彿且使用㈣ 急驟層析（5% f醇之二氣甲貌溶液）純化，得到225 g呈白 色固體狀之化合物Int-4d，[^/1+1^=596 2。 步驟D-合成化合物int_4e 使用實例2步驟C中所述之方法將化合物int_4d轉化為化 163528.doc -65· 201247694 合物1nt_4e。使用矽膠急驟層析（己烷/乙酸乙酯0%今100%) 純化產物’得到之⑹叫化合物Int4e。[M+h]=594.2 步驟E-合成化合物 使用實例2步驟D中所述之方法將化合物Int_4e轉化為化 合物Int-4f’進行矽膠急驟層析（2:1己烷/乙酸乙酯）純化， 4于到 170 mg化合物 int-4f。[M+H] = 592.2 實例5 製備化合物1及2
步驟A-合成化合物Int_5d 將化合物 Int-Sa(300 mg，0.57 mmol)、化合物 Int-lc(l〇 mg)及化合物jnt_5c(31 g，pi mmol)溶解於二噁烷（2 mL)中且在室溫下攪拌所得反應物$分鐘。隨後經2分鐘逐 滴添加苯基矽烷（68 mg，0.63 mmol)於乙醇（1 mL)中之溶 液且再揽拌反應物3〇分鐘。隨後用鹽水淬滅反應且用乙酸 乙酷萃取。用鹽水洗滌有機萃取物，經硫酸鈉乾燥，過濾 且在真空中濃縮。使用矽膠急驟層析（2:丨己烷/乙酸乙西旨） 純化所得殘餘物’得到化合物Int_5d(8〇 [m+H] = 163528.doc • 66 · 201247694 551.5 步驟B -合成化合物i 將化合物Int-5d(23 mg，〇·〇42 mmol)溶解於四氫呋喃（1 mL)中且向所得溶液中添加TBAF(1 〇 M，〇」爪爪❽丨）。攪拌 反應物1小時，隨後在真空中濃縮反應混合物且使用矽膠 急驟層析（20〇/〇曱醇之二氣甲烷溶液）純化粗殘餘物，得到 5.0 mg化合物1。 步驟C-合成化合物2 鲁 將化合物1(3.8 mg，0.012 mmol)溶解於7 Μ氨之甲醇溶 液（2 mL)中且在室溫下攪拌3小時。在真空中濃縮反應物 且使用矽膠急驟層析（25%甲酵之二氣曱烷溶液）純化殘餘 物’得到 3.0 mg化合物 2。W-NMR (400 MHz，CD3OD): 6:8.11 (d, 1Η, J=7.58 Hz), 6.38 (s, 1H), 5.90 (bs, 1H), 4.0 (m，3H)，3.8 (m，1H)，1.27 (s，3H)。 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS(M + H) 3 H〇' 290.2 化合物 3 W-NMR (4〇〇 MHz，CD3OD): δ:8·13 (d，1H， J=8.0 Hz), 6.33 (s, 1H), 5.7 (d, 1H, J=8.0 Hz), 4.06 (m, 1H)，4.0-3.95 (m，2H)，3.79 (m，1H)，1.33 (s，3H)。 實例6 -67- 163528.doc 201247694 製備化合物4及5
lnt-6a __ Η0^νΝ^Υ0^ HO" cn nYn nh2 5 步驟A -合成化合物Int-4f 使用實例5步驟A中所述之方法將化合物Int_4f轉化為化 合物 Int-6a。 步驟B-合成化合物4 使用實例5步驟B中所述之方法將化合物Int_6a轉化為化 合物4。 步驟C-合成化合物5 將化合物4(8 mg，0.021 mmol)溶解於7 Μ氨之甲醇溶液 (3 mL)中且在1 00°C下在壓力管中攪拌隔夜》濃縮反應物且 藉由管柱層析（CH2Cl2/MeOH，0〇/〇-->5。/〇)純化，得到6 mg 化合物 5。[M+H]=335.2。W-NMR (400 MHz，CD3OD): 5:8.3 (s, 1Η), 6.45 (s, 1H), 4.52 (m, 2H), 4.4 (d, 1H), 4.0 (m，2H)，3.87 (m，1H)，1.42 (m，3H)，1.13 (s，3H)。 化合物編號 結構 MS (M + H) 31 rNw° η〇μΧν0 Ηό' "CN NH2 321.2 163528.doc -68 · 201247694 化合物 31: iH-NMR (400 MHz，CD3〇D): δ:8 32 (s，1H)， 6.46(s，1H)，4.40 (m，1H)，4.05 (s，3H)，4.04 (m，2H) 3 87 (m，1H)，1.14 (s，3H)。 實例7 製備化合物6
NH2 lnt-7a ό Η：έΝ
NH, 向化合物5(8 mg，0.024 mmol)及N-曱基咪唑（8 mg， 0.096 mmol)於四氫呋喃（2 mL)中之溶液中逐滴添加化合物
Int-7a(26 mg，0.096 mmol，使用美國專利第 7,879,815 號 中所述之方法製備）於四氫呋喃（1 mL)中之溶液。在室溫下 攪拌所得反應物12小時，隨後在真空中濃縮反應混合物且 使用矽膠急驟層析（5%二氯曱烷/甲醇）純化所得殘餘物， 得到化合物6(3.5 mg)。
使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS (M + H) 7 -- : PEt ί^-Α^ΝΛκΝΗ2 00Η〇'''έΝ 668.7 8 OEt QHCi' dN 590.2 163528.doc -69· 201247694 9 OEt 九。仏。段 631.7 10 _ OEt 丫 6¾ 603.7 11 _ OEt 样2 F 607.7 12 _ OEt η^°^°/^Ννη 样2 Cl 623.7 13 _ OEt 6¾ 617.7 14 Μβ〇γ^,Χ〇^γνΗ 〇 X HO'，.，CN ό 509.2 15 Jn. HO CN 0 565 16 V〇H 9 ^〇Sim 0 N-P-O^^ ^ 1 HO CN 0 523 17 HO CN C! 543
163528.doc ·70· 201247694 18 fin ° bN 601.2 19 fin 〇 1 HO' tN φ Cl 557.0 30 MH 三 0 ο N—4 丫丫中^ 〇 1 Cl 0h6n Or 571.2
實例8 製備化合物20
向化合物2(30 mg，0.112 mmol)於四氫呋喃（2 mL)中之 懸浮液中添加氣化第三丁基鎂（1.0 Μ，0.394 mL，0.394 mmol)。攪拌所得反應物5分鐘，隨後逐滴添加化合物1|11-8a( 146 mg，0.394 mmol，使用美國專利第 7,879,815 號中 所述之方法製備）於四氫呋喃（1 mL)中之溶液。在室溫下攪 拌所得反應物12小時’隨後用飽和氣化銨淬滅反應且用乙 酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機萃取物’經硫酸鈉乾燥，過 濾’在真空中濃縮且使用矽膠急驟層析（10%二氣甲烷/甲 醇）純化所得殘餘物，得到化合物20(6 mg) ° 163528.doc -71 - 201247694 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS (M + H) 21 = 〇 NH2 508.2 22 564.2 59 墨 Γ^νη 0 1 Η0 bN ό 537.2 65 0 ? Η0 CN ό 585.2 68 0 1 HO CN 6 577.2 71 _ 0 丄 Η(5 CN όο 559.0 78 _ fin 0 1 HO CN Φ F 541.2
163528.doc 72- 201247694
79 fin Z ο π N—4 0 ° 1 H0 CN Φ F 555.0 80 Φ F 595.2 81 _ fin 九。 0 丄 H0 bN Φ Cl 599.2 82 〆 〈/ NH 0 ijaH6 &N 542.7 83 〆 〈/ NH 0 1 Η0 &N <Xc, Cl 576.6 84 Φ Cl 611.0 85 _ fin YVS|0"^〇1、 0 丄 H0 CN Cl 605.0 163528.doc -73- 201247694 86 ： rfH 九〇 0 Η0 *CN 489.2 87 〇Y〇^VV^ ηΛ 0=P-0 〇τό ^"SN 590.2 88 〇^Vy^ 〇x〇" 〇^CN 〇r° ^"SN 590.2 89 °Y° H2V V〇 ηΛ vn °t〇w0YN^ 〇^〇^"SN 0 620.2 96 〇 V 〇/ / r Hd \w N 648.2 104 t。 °i 〇γ^Γ 〇r。 604.2 105 。/K' σ。 590.2 108 HO CN 565 111 Jn. HO CN 0 523
163528.doc ·74· 201247694
163528.doc 112 HO CN V 543 115 0 Ν-ΡΌ^γ γ \ H6 “ 537 116 HO CN 0 551 117 .0 。 。0 φ H“N F 527 118 ό Ηό bN 607 119 L·^ HO CN 0 593 122 ^Hxo^fr ώ “。 615 124 OEt N - y]H〇'· eN 610.0 125 . OEt Qho''' eN Cl 610.6 126 OEt 九。 619.2 -75- 201247694 163528.doc 129 _ OEt Q)h〇'·' έΝ 616.2 131 OB 一 (Π|η〇0 έΝ Cl 652.7 132 _ OEt ήΗ 2 °^~°\^\ Cl ^rNH )T\ Λ 4 914.5 133 _ OEt r v ci YH 〇 J^O Cl 914.5 140 OMe ，八 Cv。/^ 0 H 又0^/ ΝΛΐΗ2 ζ)Η〇'·' έΝ 562.1 143 OMe ζ)Η^ 638.2 147 〇Y〇 HN 义，" f\__/° p-f°w°YN'/；N M 0 N=( \J h(5' &n nh2 575.9 150 〇Y〇 J、 rNw° /〇-^°w〇Yn'Y；n /=\ 0 N==< VJ H(3' cn nh2 618.2 76- 201247694
163528.doc
-77- 201247694 163528.doc
78- 201247694
181 〇J rNw° ϋ ”N K2 831.2 182 〇丫。 HN;、 [^NV/° cjM d bN w2 C，cl_0-〇Vj^ 955.2 183 又。义 Hd » 700.8 184 pO N 0- 九。 HCi' ' 668.2 187 n。」 Hd V 682.3 194 Q 〇 〇VN NH2 0 十 〇w〇^U όΗ：1 749.1 200 〇H rrNH2 y^r 〇丄〇 H(3 % 460.2 163528.doc 79- 201247694 201 h。 αΝΗ2 〇丄〇 Hd ^ 554.2 202 C'XX0 w〇；TX2 0 610.2 204 Cl、 々叫 ;0 556.2 205 606.2 207 Q^、Vr\>NH2 566 208 580 211 〇H rrNHj Hd' ^ 529.8 213 ηΛ rrNH2 M°t°-aNiN M Hd δΝ F 540.2
163528.doc 80- 201247694
215 9 Μ Ηό &Ν F 594.2 216 / 〇ν° ηΛ rrNH2 Μ Hd ^ Cl 584.2 224 όγ〇 丫L rN\_/°~- 1 Ο+Ο 0·γΝ^^Ν σ。士、 590.2 225 V'nh r^v-v0' σό少、 590.2 226 ττ〇 σ。少、 604.2 227 τ〇 〇J-〇 〇/Κ' 604.2 實例9 製備化合物23
四嗅 吡啶
163528.doc -81 - 201247694 步驟A-合成化合物Im9b 向化〇物3(44 mg，0.165 mmol)於吡啶（1 mL)中之溶液 中依序添加四。坐（092 mL , 0.413 mmol)於乙腈（1 mL)中之 溶液及1-異丙氧基·Ν，Ν，Ν，，Ν,_四異丙基膦二胺（Int-9a)。攪 掉反應混合物2小時，隨後在真空中濃縮反應混合物且用 EtOAc濕磨所得殘餘物。藉由過濾移除所形成之沈澱物且 在真空中濃縮濾液，得到殘餘物，使用矽膠急驟層析（二 氯甲炫*/曱醇）純化，得到呈白色固體狀之化合物Int-9b(20 mg) ’其不經進一步純化即可使用。 步驟B-合成化合物 向化合物 Int-9b(20 mg，0.056 mmol)於二氣曱烷（2 mL) 中之溶液中添加間氯過苯甲酸（15.2 mg，0.068 mmol)且在 室溫下攪拌所得反應物1 〇分鐘。隨後用水稀釋反應混合物 且用二氣甲烷（2x10 mL)萃取。在真空中濃縮經合併之有 機萃取物且使用矽膠急驟層析（二氣曱烷/甲醇）純化所得殘 餘物’得到白色固體產物。將白色固體產物溶解於 CH3CN(0.8 mL)及甲醇（〇·2 mL)中且使用逆相HPLC再純 化’得到化合物23(1.8 1^)，^4+11=3 71.2。 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。
163528.doc -82 - 201247694
25 νη2 NC 357.2 26 nh2 NC' 405.2 27 nh2 a>C〇^N NC 383.2 28 OEt 0 八 NH2 °Ύ^ N 438.9 32 rr° 異構體1 420.0 33 rr° 。、推丫H / CN o° 異構體2 420.0 . 34 〇丫 N _ ^CcnJ y~ 異構體2 371.2 163528.doc ·83· 201247694 163528.doc
·84·
201247694
42 0— 孩 Cr° 異構體2 451.0 43 0-/ °^v°r Λκ °-pC}-tcn NH2 Cr° 異構體1 465.0 44 o 〇,OicN NH2 Cr0 異構體2 465.0 45 cr° 異構體1 451.0 46 fVN °^^tcn NH2 cr0 異構體2 451.0 47 i^f〇 。、禮丫 y〇/、5 &N 異構體1 394.2 (M+Na) 163528.doc 85- 201247694 48 rf° 〜ΛΥΓ y〇/、5 δΝ 異構體2 394.2 (M+Na) 49 rr° ν_〇/^〇 CN 異構體1 380.2 (M+Na) 50 rr° 〜Γύ：ΎΝΗ Vc/Ήν 異構體2 380.2 (M+Na) 實例ίο 製備化合物29
1>質子海綿，P〇CI3 PO(OCH3)3 2) Bu3N,氣磷酸酯 DMF 3) TEAB(1M)
將l-[(2R，3R，4S，5R)-3-氰基-4-羥基-5-(羥基甲基）-3 -曱基 氧雜環戊烷-2-基]_ι，2,3,4-四氫嘧啶·2,4-二酮（2, 15 mg， mmol ’ 1·〇〇當量）於磷酸三曱酯（1 〇 mL)中之溶液置於 氮氣氛圍下。向此溶液中添加質子海綿（17 ，〇.〇8 mmol，1.50 g置）且冷卻所得反應物至〇。匸^向冷卻溶液中 添加雄醯二氣（32 mg，0.21 mmol , 4.50當量）且在〇。〇下攪 拌所得反應物4小時。隨後將焦磷酸酯（2〇〇 mg，〇 37 111111〇1，5.00當量）、：^，：^-二曱基曱醯胺（1.〇1111^)及三丁胺 (0.03 mL，10.00當量）添加至反應混合物中且在〇。〇下再攪 163528.doc -86 · 201247694 拌所得反應物1小時。隨後藉由添加3.0 mL碳酸氫三乙銨 緩衝液（1 M)淬滅反應且在真空中濃縮所得溶液。使用如 下製備型 HPLC(1#-Pre-HPLC-001(SHIMADZU))純化所得 殘餘物：管柱 ’ l#-PrepC-008(Atlantis HILIC 二氧化石夕 19x150 186003959 01 1018255 Ikk 03)，移動相：乙腈及含 有50 mmol碳酸氫銨之水；偵測器，UV 220及254 nm。得 到0.7 mg呈淡黃色固體狀之化合物29。iH-NMR (400 MHz, D20): δ 7.96 (d, 1Η), 6.45 (s, 1H), 6.16 (d, 1H), 4.39 (m, 1H)，4.31 (m，2H)，4.28 (m，1H)，1.31 (s，3H)。 31P，NMR (162 MHz，D20): δ -10.01 (d，1P)，-10.62 (d， IP), -22.28 (t, 1 P) MS (ESI) m/z 506.7 [M] 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS (M + H) 51 0 〇H 6» iH yL· Hd fcN 507.0 52 0 9 0 H〇 个 〇ϋ(Λ/νΝ nAnH2 OH OH OH \_ H0 fcN 545.8
NMR化合物51 : !H-NMR (400 MHz, D20): δ 7.95 (d, 1Η), 6.43 (s, 1H), 5.97 (d, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.34 (m, 1H), 4.32 (m, 1H), 163528.doc • 87 - 201247694 4.19 (m，1H)，1.38 (s，3H)。 31P-NMR (162 MHz, D20): δ -9·72 (bs，1P)，-10.7 (d， IP), -22.3 (t, IP) MS (ESI) m/z 506.9 [M]。 NMR化合物52 : W-NMR (400 MHz，D20): δ 8.09 (s，1H)，6.5 (s，1H)， 4.62 (m，1H)，4.39 (m，2H)，4.28 (m，1H)，1.23 (s，3H)。 31P-NMR (162 MHz, D20): δ -9.57 (bs，1P)，-10.6 (d， IP), -22.18 (t, IP) MS (ESI) m/z 546.5 [M]。 實例11 製備化合物53、54
類型Int-lla之磷醯胺基氣化物反應物可使用美國專利第 7,879,815號中所述之方法製備。 步驟A :合成Int-llb及11c 向經攪拌之Int-lla(i4.2 g，46.4 mmol)於二氣曱烷（112 mL)中之溶液中整份添加五氟苯酚（8 55 g，46 4 mm〇i)。 冷卻溶液至o°c且在氮氣下逐滴添加三乙胺（6 47 mL，46 4 163528.doc -88 - 201247694 mmol)。在室溫下擾拌反應物隔夜。LCMS顯示主要為產 物。用水（50 mL)洗滌反應混合物，經硫酸鈉乾燥，過濾 且在真空中濃縮。藉由矽膠層析（0-30%乙酸乙酯/己烷）純 化殘餘物，得到12.56 g白色固體。使用10% MBTE/己烷使 固體再結晶，得到6.15 g呈白色固體狀之Int-llb。在真空 中濃縮母液且藉由矽膠層析（1:1己烷/乙酸乙酯）純化，得 到 4.04 g異構體 Int-llc及 805 mg額外 Int-llb。 步驟B :合成53及54 • 在0°C下用氯化第三丁基鎂之溶液（4.49 mL，4.49 mmol) 處理核苷3(500 mg，1.87 mmol)於THF(10 mL)中之溶液。 在〇°C下攪拌反應物15分鐘，隨後逐滴添加Int-llc(962 mg，2.06 mmol)於THF( 13 mL)中之溶液。使反應物緩慢升 溫至室溫且攪拌18小時。用飽和NH4C1溶液（20 mL)淬滅反 應且用EtOAc(2x20 mL)萃取。經Na2S04乾燥有機相，過濾 且在真空中濃縮。藉由Si02層析（0-10% MeOH/DCM)純 化，得到 694.3 mg(67% 產率）53、98.4 mg(6% 產率）54 及 # 55.5 mg(ll%)回收之3。NMR 53 (400 MHz，CD3OD) δ 7.66 (d, /=8.0 Hz, 1H), 7.40-7.36 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 3H), 6.34 (s, 1H), 5.65 (d, /=8.0 Hz), 4.50 (ddd, J=12.0, 6.4, 2.0 Hz, 1H), 4.38 (ddd, 7=8.8, 6.4, 3.6 Hz, 1H), 4.13-4.00 (m, 1H), 4.03-3.97 (m, 2H), 3.93-3.84 (m, 2H), 1.91 (m, 1H), 1.38 (d, 7=6.8 Hz, 3H), 1.30 (s, 3H), 0.93 (d, •/=6.8沿，611)。式匚24113丨队〇9?之質量計算值550.2;觀測 值 MH+ (LCMS) 551.0 (m/z)。 163528.doc •89· 201247694 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或°式 劑製備以下本發明化合物。請注意，異構體之命名為任意 的且僅表明化合物為單一異構體。 化合物編號 結構 MS (Μ + Η) 55 ξ \ H(5 CN 異才i體1 620.7 56 f ο 0«^ 丫0 〇Γο\^~〇^ό:Ν^ Ηό tN 異構體2 620.8 57 〇 異構體1 621.2 (M+Na) 58 NH 異構體2 621.2 (M+Na) 60 ΎΫ«ϋ 〇 υ 1 HO CN 6 異構體1 537.2 61 '5 ? Hd bN ό 異構體2 537.2
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•91 - 201247694 163528.doc
92- 201247694
163528.doc
93- 201247694 99 〇 λ 〇\—(〇 丫 ςτ ^,5Ν ΟγΟ 異構體1 648.2 100 Ττ〇 〇τ。，ηΗ2 異構體1 618.2 101 Το 〇Γ。 異構體2 618.2 102 °^XH2Vv〇 ηΛ Nr^ 0=Ρ-0 ητό ΗΟ ΟΗ 異構體1 606.2 103 〇^ΧΗ2Νγγ〇/ ηΛ 0=Ρ-0 0^>Ν·^ ΟΗ 異構體2 606.2 106 十 ΟγΟ 人 Η f-NW°' 0=^0^ σ。分ν〜 異構體1 604.2 107 十 ΟγΟ ^νη rNw0^ 〇=ΡΌ, Ρ^ν^Τν 異構體2 604.2
163528.doc •94- 201247694
109 4 h“ 異構體1 565 110 HO CN 0 異構體2 565 113 ~Κ|〇^γΥΗ HO CN 9 異構體1 543 114 HO CN Cl 異構體2 543 120 HO CN 異構體1 531 121 HC' CN 異構體2 517 127 、 OEt l^jl H0' 0N 異構體1 674.1 128 k OEt έΝ. 異構體2 674.1 163528.doc -95- 201247694 130 _ OEt σ°Γίί|〇Λ〇/^：ΝΗ 0-¾ 異構體1 616.2 134 _ OEt c64 異構體1 626.1 135 _ OEt 00H〇° 6n 異構體2 626.2 136 _ OEt M) HO'-' δΝ 623.7 Cl 異構體1 137 _ OEt ^ V «i〇^y^NNH 釋2 623.7 Cl 異構體2 138 OEt ζ)Η〇'· έΝ 異構體1 589.7 139 _ OEt ^°T Η^〇^ν°/%ΝΗ 6¾ 異構體2 589.7 141 OEt 一 〇^<rt 異構體1 617.7 142 _ OEt 一 y)H〇'·' έΝ 617.7 163528.doc •96- 201247694
異構體2 144 . OMe ^ V ζ)Ηΰ'' 異構體1 562.0 145 _ OMe 〇η〇'° έΝ. 異構體2 562.0 146 _ OEt ζ)π〇''· έΝ 異構體1 604, 626.2[M+Na] 148 ( ΟγΟ HNJ、" -Νν)° \-J H(j cn νη2 異構體1 576.2 149 〇γ〇 ΗΝ」..." Γ^Νν)° H(j' bN nh2 異構體2 576.2 151 °T° N \ HN人’ Ϋ' \___/° 〇+〇 〇 N.々n /=\ 0 N==< HC5' bN nh2 異構體1 618.2 152 l· °r° N \ HN 人'， fK_____P /°-έ-°χ/〇γΝ'/^Ν M 0 N==( V_/ Hq' cn nh2 異構體2 618.2 163528.doc -97- 201247694 154 / ΟγΟ ΗΝ 又f^N\___/° H〇' CN NH2 異構體1 604.2 155 / 〇Y〇 hn』、 rNy)° j^-〇w〇 丫 Ν·^ν ^ bN NH2 異構體2 604.2 159 V 〇Y〇 HJ、 rNW° W H(j' bN NH2 異構體1 616.2 160 V 〇Y〇 HNJ、 fuy)° HC5' bN nh2 異構體2 616.2 163 〇ri hn 丄" rNw° _ 十 \_J) H(3' ch nh2 異構體1 634.2 164 0 i \ hn』、 rNw° HC3' *cn nh2 異構體2 634.2
163528.doc 98- 201247694
166 〇γ〇 rNw° /°-K-°w〇YnY；n Μ ° ν-ί- N=< H〇' &n NHz Cl 異構體1 596.2 167 Y N \ HN>、 f W〇 Μ 0 ho' ί：Ν ΝΗζ Cl 異構體2 596.2 171 / ΟγΟ ΗΝ 丄„ |-Ny> Hd δ" NH2 異構體1 654.2 172 / ΟγΟ hn」.、 p^Nvy° 〇-(；-〇 〇γΝ^Ν 異構體2 654.2 176 r 〇Y〇 f={\〇^L· n-<N Hd tN NHz 異構體1 626.2 177 r 〇Y〇 HN 人’ __/° /〇-^°W〇YN'f；N 異構體2 626.2 163528.doc -99- 201247694 179 〇γ〇 、 Ηό &N NH2 異構體1 612.2 180 Y N \ Ηό ，CN NHz 異構體2 612.2 185 φ N 0- Hd ' 異構體1 668.2 186 Φ n。_ 九。 HO' ' 異構體2 668.2 188 Φ n。」 九。 HO' ' 異構體1 682.3 189 Φ N。」 九。 HO' » 異構體2 682.3 228 V H2Vv° Xh χΝ 1 0=‘0 0 丫 Ν'"7 αώ Χ^"ξν 異構體1 576.19 實例12 製備化合物190
163528.doc •100· 201247694
向於冰浴中冷卻之經攪拌之化合物63(21 mg，0.038 mmol)於 DMF(2 mL)中之溶液中添加 NBS(10.18 mg，0.57 mmol)。用乙酸乙酯（5〇 mL)及水（50 mL)淬滅反應。經硫 酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空中濃縮。藉由矽膠管柱層
析（0-10〇/〇甲醇/二氯甲烷）純化殘餘物，得到190(20.5 mg， 85%)。 實例13 製備化合物191
lnt-5d p N 丫Μ Ο Ά 0 — 6 CN 〇Η lnM3a
ΝΗ2
Int-I3b ό Intllb 或 c lnt-13c νη2 ο 163528.doc 201247694 步驟A :合成Int-13a 在〇°C下向經攪拌之Int-5d(337 mg ’ 0.61 mmol)於四氣 呋喃（1.1 mL)與水（0.3 7 mL)之混合溶劑中之溶液中逐滴添 加TFA(0.68 mL，9·2 mmol)。在0°C下攪拌混合物3小時。 用EtOAc(10 mL)稀釋反應物，隨後添加飽和NaHC03至pH 6。用EtOAc(2><3 0 mL)萃取混合物。合併有機層，經 MgS〇4乾燥，過遽且在真空中濃縮，得到int_i3a(330 mg，95%)。粗產物不經進一步純化即可用於下一步驟。 步驟B :合成Int-13b 在室溫下將氨（7 Μ之MeOH溶液’ 8 mL，58 mmol)添加 至起始物質Int-13a(330 mg，0.58 mmol)中且在室溫下授 拌混合物4小時。在真空中濃縮混合物。藉由在丨小時内用 1 0°/〇曱醇/二氣甲烷溶離之矽膠管柱層析純化殘餘物，得到 呈白色固體狀之Int_13b(250 mg，82%)。 步驟C :合成Int-13c 在0°C下向單保護核苷Int-13b(550 mg，1.04 mmol)於 NMP(6.0 mL)與THF(33 mL)之混合物中之溶液中添加氣化 第三丁基鎂（1 Μ之THF溶液，2.71 mL)且攪拌反應物30分 鐘。添加 Int-llb 或 llc(471 mg，1.04 mmol)於 THF(2 mL) 中之溶液且攪拌反應物2小時。用飽和NH4C1溶液（20 mL) 淬滅反應，用EtOAc(2x20 mL)萃取，經MgS04乾燥，過濾 且在真空中濃縮。藉由矽膠管柱層析（0-10% MeOH/DCM) 純化殘餘物，得到所要白色固體產物Int-13c(715 mg， 86%) 〇 163528.doc -102· 201247694 步驟D :合成化合物191 在室溫下向經攪拌之起始物質Int-13c(980 mg，1.23 mm〇l)於四氫呋喃（22.0 mL)及MeOH(26.0 mL)中之溶液中 添加甲酸（8.0 mL，209 mmol)。將 CsF(1.12 g，7.39 mmol)
添加至反應混合物中且在50t下攪拌8小時。用乙酸乙醋 (3x30 mL)萃取反應混合物，用水及鹽水洗滌，經MgS〇4 乾燥’過濾且在真空中濃縮。藉由用〇·10% MeOH/CH2Cl2 溶離之石夕膠層析純化殘餘物’得到產物191，凍乾隔夜， 得到白色乾燥粉末（293 mg，44%)。 H NMR: 7.66 (1Η, d, J=7.58), 7.38 (2H, m), 7.27 (2H, m), 7.21 (1H, m), 6.37 (1H, s), 5.85 (1H, d, J=7.57), 4.96 (1H, m), 4.52 (1H, m), 4.37 (1H. m), 4.10 (1H, m), 3.93 (2H, m)，1.35 (3H，d，J=7.14)，1.22 (6H，s)，1.20 (3H，s)。 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。請注意，異構體之命名為任意 的且僅表明化合物為單一異構體。 化合物編號 結構 MS (Μ + Η) 193 J N 600.2 異構艚1 195 9。 為F2 536.2 異構體1 163528.doc -103- 201247694 163528.doc
• 104·
201247694
在〇C下向經擾拌之起始物質210(20 mg，0.037 mmol)與 DMAP(〇.5〇2 mg ’ 4.11 μιηοΐ)於四氫吱喃（1.0 mL)中之混合 物中添加 Et3N(0.016 mL，0.112 mm〇l)及水（0.7 mL)且在 163528.doc -105- 201247694 〇°C下攪拌混合物5分鐘《將異丁醯氣（0.037 mmol)緩慢添 加至反應混合物中。在0°C下攪拌反應物30分鐘，隨後用 HC1水溶液（1 M)酸化至pH 6-7。用EtOAc(2x20 mL)萃取混 合物’用水及鹽水洗滌，經MgS〇4乾燥，過濾且在真空中 濃縮。藉由在45分鐘内用10% MeOH/DCM溶離之石夕膠製備 型TLC純化殘餘物，得到白色固體》自乙腈/水凍乾固體， 得到乾燥粉末218(1 7 mg，75%)。 實例15 製備化合物219
在室溫下向經攪拌之起始物質31(20 mg，0.062 mmol)於 四氫呋喃（11111〇中之混合物中添加1^-甲基咪唑（0.035 111[， 0.437 mmol)且在35°C下攪拌混合物3分鐘。逐滴添加氣磷 酸酯 Int-15a(51 mg，0.25 mmol 於 0.5 ml THF 中）且在 35°C 下攪拌反應混合物1小時。用水（20 mL)淬滅反應且用乙酸籲 乙酯（2x30 mL)萃取混合物，用鹽水（25 mL)洗滌，用 EtOAc(30 mL)反萃取水層。用MgS04乾燥經合併之有機 層，過濾且濃縮。藉由矽膠製備型TLC(10% MeOH/DCM) 純化殘餘物，得到所要產物219(4.1 mg，13.4%)。 實例16 製備化合物220 163528.doc -106· 201247694
Int16h lnt161 Int 16J
步驟A :合成Jrit-J 6c 將 Int-16b(5.5 kg，15.2 mol，1·00 當量）於 DCM(15.4 L) 中之溶液置於50 L反應器中，且將Int-16a(2.35 kg，18.1 mol’ 1.19當量）於DCM(2.8 L)中之溶液添加至上述溶液 中’同時維持溫度在_5〇C約0.5小時來完成添加。使混合物 在-5 C下反應3小時直至LCMS顯示Int-16a之含量不超過 5%。在40°C下在真空中濃縮反應溶液。用石油醚（5 L)處 理殘餘物，過濾不溶性固體且用Et〇Ac:pE(1:i5，3x5L)洗 滌在40 C下在真空中濃縮渡液。藉由在真空（ι〇以爪Hg) 下蒸館純化殘餘物且收集>9〇t之館份，得到白色油狀物 ，產率：81%)。該物質不經任何進-步純化 即可用於下一步驟。 步驟B :合成I6d 用乙 I，2 —醇（3.0 kg，12·76 mol，4.00 當量）及 163528.doc 201247694 价11(：03(3.06 1<^，36_45 111〇1，3.0〇當量）於1^0(5.2 1〇中之 溶液處理 Int-16c(2.6 kg，12.15 mol，1.00 當量）於丙酮（40 L)中之溶液。將ΚΜηΟ4(2·02 kg，12.76 mol，1.05 當量）分 數份添加至以上溶液中，同時維持溫度在-WC — iOOC(約1 小時來完成添加）。使混合物在-15 °C〜-10°C下反應1小時直 至SM完全消耗。用NaHS03(25% w/w水溶液，5 L)淬滅所 得溶液，同時維持溫度低於4°C。執行過濾且用丙酮（3 X 1.0 L)洗滌濾餅。在真空中濃縮濾液且用Et〇Ac( 1 X 10 L，2X5 L)萃取殘餘物。合併有機層，經Na2SO4(3.0 kg)乾燥，過 濾且在真空中濃縮。用曱苯（1.5 L)及石油醚（9 L)處理殘餘 物。在-10°C~0°C下攪拌漿液10小時《收集固體，在40。(：下 乾燥，得到呈白色固體狀之純產物Int-16d(1.8 kg，產率： 60%) 〇 步驟C :合成16e 用 TEA(2.11 kg，20.93 mol，3.00當量）處理11^-16(1(1.73 kg ’ 6.97 mol ’ 1.00當量）於DCM( 17 L)中之溶液。隨後用 S0C12(1 _08 kg ’ 9.06 mol，1.30當量）逐滴處理反應物，同 時維持溫度在-5°C〜15°C (約0.5小時來完成添加）。在 15°C〜25°C下攪拌混合物1小時。用水（20 L)淬滅所得溶 液。用飽和NaHC〇3(lxlO L)洗滌經分離之有機層。將有機 層置於50 L反應器中且用MeCN(1.8 L)稀釋，繼而逐滴添 加NaOCl水溶液（6.9%，20 L)，同時維持溫度在 5°C〜20°C(約1小時來完成添加）。隨後使混合物在 15°C~25°C下反應40小時。用Na2S03水溶液（15%，1〇 l)淬 163528.doc -108- 201247694 滅所得溶液。用水（6χ5 L)、飽和NaHC03(lxl5 L)及飽和 鹽水（1x15 L)洗滌經分離之有機層，經Na2S04乾燥，過據 且在真空中濃縮，得到呈油狀之產物Int-16e(1.6 leg，產 率：74%)。 步驟D :合成16f 添加 Int-16e(900 g ’ 2_9 mo卜 1.00當量）於DMF(8.1 L)及 H2〇(900 mL)中之溶液且用 KCN(226 g，3.5 mol，1.20 當 量）處理。使混合物升溫至50°C且使其反應5小時直至TLC 顯示Int-16e完全消耗。用水浴冷卻所得溶液至3〇〇c且整份 添加 K2HP〇4(782 g ’ 4.5 mo 卜 1.55 當量）及 Bu4NHSO4(1.08 kg，3.2 mol，1.10當量）。使混合物反應隔夜。用
EtOAc(20 L)及水（10 L)稀釋反應混合物。用Et〇Ac(2><5 L) 萃取水層。合併有機層’經硫酸鈉乾燥，過遽且在真空中 濃縮，得到呈棕色油狀之粗產物1|^-16£(1.3 1^，〇]\/^之含 量為28°/e w/w，分離產率：65%)，其不經任何進一步純化 即可用於下一步驟。 步驟E :合成】6g 用 HC1(10 Μ ’ 233 g，2.3 mol，1.42 當量）處理111卜 16f(1.3 kg，1.6 mol，1_00當量）於Et〇H(7.8 L)中之溶液。 使混合物在20°C〜30。(：下反應15小時。藉由Tlc監測反應進 展直至 Int-16f 完全消耗。用 NaHC03(193 g，2.3 mo卜 1.42 mol)於水（193 g)中之溶液淬滅所得溶液。在真空中濃縮所 得溶液以移除大部分Et0H。用Et〇Ac(2x3 L，2x1.3 L)萃 取殘餘物《合併有機層，經NkSO4乾燥，過濾且在真空中 濃縮，得到呈棕色油狀之粗產物Int_16g(55〇 g ,理論產 163528.doc -109- 201247694 量：277 g)，其不經任何進一步純化即可用於下一步驟。 步驟F :合成Int-16h 用 TEA(360 g ’ 3.6 mol，1.00當量）及 DMAP(12.2 g，〇·ι mol，0.06當量）處理Int_i6 g(550 g，理論產量：277 g， 1.6 mol，1·00當量）於CH3CN(1.4 L)中之溶液。將BzCl(508 g，3.6 mol，2 ·20當量）逐滴添加至以上溶液中，同時維持 溫度在〇〜25 C下（約1.5小時來完成添加）。使混合物在 10°C〜25°C下反應1小時直至LCMS顯示Int-16g完全消耗。 用水（5 L)稀釋所得溶液，隨後用EtOAc(4x2 L)萃取。合併 有機層，用鹽水（35。/。，lxi L)洗滌，經Na2S04乾燥，過渡 且在真空中濃縮。用丙-2-醇（6 L)處理殘餘物（600 g)且在 20°C〜30 C下槐拌1小時。執行過遽且藉由自EtOAc(600 mL)及丙-2-醇（6000 mL)再結晶純化濾餅（300 g)，得到呈 白色固體狀之純產物Int-16h(270 g，產率：44%，純度： 97.6%) 〇 步驟G :合成Int-16i
在-30C 下在攪拌下向 Int-16h(l g，2.64 mmol，1.00 當 量）於THF(15 mL)中之溶液中逐滴添加Li(t-BuO)3AlH(l g，3.92 mmol ’ 1.50當量）於THF(10 mL)中之溶液。在-3(TC 下於液氮浴中攪拌所得溶液2小時。隨後藉由添加飽和 NH4C1(3 0 mL)淬滅反應。用EtOAc(3x50 mL)萃取所得溶 液。合併有機層’經無水Na2S04乾燥，過濾且在真空中濃 縮。將殘餘物施用於矽膠管柱且用10-20% EtOAc/己烷溶 離，得到呈白色固體狀之Int-16i。（800 mg，80%)。’H- 163528.doc -110- 201247694 NMR-Int-16i (300 MHz, CD3OD, ppm)\ δ 8.14-8.17 (ms 2H)，8.02-8.05 (m，2H)，7.39-7.65 (m，6H)，5.62-5.63 (m， 1H)，5.41-5.42 (m，1H)，4.61-4.83 (m，3H)，1.66 (s，3H)。 步驟H :合成I6j 向 Int-16i(3 g，7.87 mmo卜 1.00 當量）於甲苯（60 mL)中 之溶液中添加丁£八(3.2经，31.62 111111〇1，4,00當量）及氣膦 酸二苯酯（4.2 g，15.63 mmol，2.00當量）。在室溫下攪拌 所得溶液5小時後，用DCM(200 mL)稀釋。隨後藉由添加 飽和Na2CO3(40 mL)淬滅反應。用DCM(3x50 mL)萃取所得 溶液。合併有機層，經無水Na2S04乾燥，過濾且在真空中 濃縮。將殘餘物施用於矽膠管柱且用10-20% EtOAc/己烷 溶離，得到呈無色油狀之Int-16j(5.0 g)。W-NMR-Int-iej: (300 MHz, CDC13j ppm): δ 8.10-8.12 (m, 2H), 7.99-8.00 (m, 2H), 7.53-7.69 (m, 2H), 7.43-7.52 (m, 4H), 7.14-7.37 (m, 10H), 6.02 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.21 (d, 7=1.5 Hz, 1H), 4.61-4.66 (m，2H)，4.31 (q，·7=1.5 Hz，1H)，1.68 (s，3H)。 步驟I :合成16k 將 Int-16j(500 mg，0.81 mmol，1.00當量）及 33%溴化氫 / 乙酸（5 mL)置於用惰性氬氣氛圍吹洗且維持之25 mL圓底 燒瓶中。在室溫下攪拌所得溶液3小時，隨後用DCM(50 mL)稀釋。隨後藉由添加水/冰淬滅反應且用DCM(50 mL) 萃取所得溶液。合併有機層，用飽和Na2CO3(50 mL)洗 滌’經無水NasSO4乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物 施用於矽膠管柱且用（5-20%)EtOAc/己烷溶離，得到呈灰 白色泡沫狀之Int-16k(0.25 g，69%) » iH-NMR-Int-lGk: 163528.doc -Ill - 201247694 (300 MHz, CDCl33p^m): δ 8.25 (d, 7=11.4 Hz, 2H), 8.17 (d, ^=5.3 Hz, 2H), 7.59-7.77 (m, 2H), 7.44-7.50 (m, 4H), 6.39 (s, 1H), 5.35 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.73-4.92 (m, 3H), 1.76 (s 3H)。 ’ 步驟J :合成161 向經搜拌之4-氣-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（2.0 g，ι3〇2 mmol，1.00當量）於乙腈（1〇 mL)中之溶液中添加 KOBt(1.46 g，1.30當量）於第三丁醇（10 mL)中之溶液。在 至溫下攪拌所得溶液3〇分鐘。將jnt_16k(4 4 g，9 9〇 mmol，1.30當量）於乙腈mL)中之溶液添加至混合物 中。再攪拌所得溶液3 · 5小時，同時在油浴中維持溫度在 50°C。隨後冷卻反應混合物至室溫。用二氣曱烷（1〇〇 mL) 稀釋所得溶液且隨後藉由添加飽和NH4C1(50 mL)淬滅反 應。用DCM(3x50 mL)萃取所得溶液。合併有機層，經無 水NaaSCU乾燥’過濾且在真空中濃縮。將殘餘物施用於矽 膠管柱且用5-30% EtOAc/石油醚溶離，得到2.9 g(43°/。）呈 白色固體狀之Int-161。 ^-ΝΜΚ-Ιηί-Ιόΐ: (300 MHz, COCh, ppm): δ 8.73 (s, 1H), 814-8.19 (m, 2H), 8.06-8.09 (m, 2H), 7.60-7.70 (m, 2H), 7.46-7.55 (m, 5H), 6.97 (s, 1H), 6.66 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.79-5.81 (m, 1H), 4.92-4.96 (m, 1H), 4.71-4.79 (m, 2H), 1.60 (s，3H) » 步驟K :合成220 將 Int-161(50 mg ’ 0.10 mmol，1.00 當量）於氨飽和之i- 163528.doc •112· 201247694
PrOH(10 mL)中之溶液置於25 mL密封管中。在5〇<)(：下於油 浴中攪拌所得溶液2天。在真空中濃縮所得混合物。藉由 製備型HPLC用以下條件（1#_Pre-HPLC_〇11(Waters))純化粗 產物（40 mg):管柱 ’ SunFire Prep C18，19x150 mm 5 μηι;移動相：水及ci^CN(在6分鐘内5.0% CH3CN升至 23_0°/〇 ’在4分鐘内升至83.0% ’在1分鐘内升至ι〇〇·〇〇/0，在 2分鐘内降至3.0%);偵測器，UV 254及220 nm。得到呈灰 白色固體狀之化合物220。（20 mg，71〇/〇) LC-MS-220(ES, m/z): 290 [M+H]+ ^-NMR-llO: (300 MHz，CD3〇D，ppm): δ 8.12 (s，]H)，7.59 (d，·7=1·8 Hz，1H)， 6.70 (s, 1H), 6.65 (d, /=1.8Hz, 1H), 4.30-4.35 (m, 1H), 3.98-4.06 (m，2H)，4.85-3.90 (m, 1H), 0.99 (s，3H)。 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS(M + H) F NH2 222 Η〇~γ) N人 ^ 308 \_/— Η。' 實例17 製備化合物221
-113· 163528.doc 201247694 向經报拌之化合物3i(ii〇 mg，〇 343 mmol)於THF(6 mL)中之溶液中添加1 N HC1(6 mL)。在50t：下加熱溶液48 小時。在真空中移除溶劑。藉由HPLC(5%水/乙腈）純化殘 餘物’得到化合物 221。（71 mg)。ih_nmr (4〇〇 mHz， CD3OD): 5:8.48 (s5 1H), 6.41(s, 1H), 4.33 (m, 1H), 4.05-4.0 (m，2H)，3.85 (m，1H), 1.19 (s，3H)。 實例18 製備化合物223
步驟A :合成Int-18a 向經攪拌之6-氣-9H-嘌呤（348 mg，2.25 mmol，2.00當 量）於第三丁醇（5 mL)中之溶液中添加t_BuOK(253 mg， 2.26 mmol ’ 2.00當量）。在室溫下攪拌所得溶液3〇分鐘。 隨後添加 Int-16k(500 mg，1.13 mmol，1·〇〇 當量）於 MeCN(5 mL)中之溶液。在室溫下再攪拌所得溶液2 〇小 時。用1 N HC1調節溶液之PH值至7，隨後在真空中濃縮。 用乙酸乙酯（10 mL)稀釋所得溶液，用飽和nh4C1(2><10 mL)及飽和NaCl(2xlO mL)洗滌。經無水Na2s〇4乾燥有機 相’過濾且在真空中濃縮。將殘餘物施用於石夕膠管柱且用 EtOAc/石油醚（1:3)溶離，得到呈灰白色固體狀之 18a(180 mg’ 31%)。’H-NMR-Int-lSa: (300 MHz, CDCI3, 163528.doc 201247694 p/?m):5 8.82(S，lH)，8.32(s，lH)，8.18-8.13(m，2H)，8.10-8.02(m, 2H), 7.77-7.42(m, 7H), 6.75(s, 1H), 5.91(d, 7=6.0
Hz, 1H)，5.31(s，1H), 4_95-4.72(m, 3H), 1.39(s，3H)。 步驟B :合成223
將 Int-18a(180 mg，0.35 mmol，1.00 當量）及 NH3(1)(8 mL)於z’-PrOH(2 mL)中之溶液置於i〇 mL密封管中。在5(TC 下於油浴中攪拌所得溶液2天，隨後在真空中濃縮。藉由 製備型 HPLC 用以下條件（l#-Pre_HPLC-001(SHIMADZU)) 純化粗產物（80 mg):管柱，l#-PrepC-014(Atlantis T3 19x150 186003698 012139334114 02)，N ;移動相：水及 CHfN(在7分鐘内2.0% CH3CN升至25.0%，在1分鐘内升 至100.0%，在2分鐘内降至2_0%);偵測器，UV 254及220 nm。得到呈白色固體狀之化合物223(50 mg，50%)。 LC-MS-223: (ES，m/z): 291 [M+H]+。 (300 MHz, CD3OD，ppm): δ 8.65(s，1H)， 8.23(s, 1H), 6.63(s, 1H), 4.46(d, 7=6.0 Hz, 1H), 4.13- 4.04(m，2H), 3.98-3.88(m，1H)，1.13(s，3H)。 實例19 製備化合物71
3
163528.doc -115- 201247694 在〇C下用甲基咪唑（0.19 mL，2 29 mm〇1)逐滴處理化合 物3(75.8 mg，0.28 mmol)於四氫呋喃（2 5 mL)中之溶液。 攪拌反應物5分鐘，隨後逐滴添加前藥Int_19a(499 mg , 1.52 mmol，使用實例^中所述之方法製備）於四氫呋喃 (1.0 mL)中之溶液。使反應物升溫至室溫且攪拌i 5小時。 在真空中遭縮反應物。經由用1 〇%曱醇/二氣甲烧溶離之製 備型TLC純化粗物質。藉由逆相hplc進一步純化該物 質’得到非對映異構體之混合物，藉由SFC分離法分離， 付到呈灰白色固體狀之化合物71(36.5 mg)。4 NMR㈠〇0 MHz, CD3OD) δ 8.19-8.18 (m, 1H), 7.92-7.89 (m, 1H), 7.73 (d, /=8.0 Hz, 1H), 7.60-7.55 (m, 2H), 7.52-7.43 (m, 3H), 6.29 (s, 1H), 5.35 (d, J—8.0 Hz, 1H), 4.62 (ddd, /=12.0 4 8 2.0 Hz, 1H), 4.50 (ddd, 7=12.0, 6.4, 3.2 Hz, 1H), 4.15-4.12 (m, 1H), 4.09-4.01 (m, 1H), 3.94 (d, ./=8.4 Hz, 1H), 3 66 (s 3H), 1.35 (d，J=7.2 Hz, 3H)，1.18 (s，3H)。式 C25H27N4〇9P 之質量計算值558.5;觀測值1^^1+(1^]\48) 559.〇丨/„/4。 實例20
異構效1 異構體2 製備化合物49及50 將化合物3(50.0 mg，0.19 mmol)添加至密封管中且溶解 於四氫呋喃（1.5 mL)中。將中間物20a(67.2 mg，〇 24 mmol)溶解於四氫呋喃（2.0 mL)中且添加至密封管中，繼 163528.doc 116- 201247694 而添加5-(乙基硫基）_1付_四唑（24 3 mg ’ 0.187 mmol)。將 f密封且加熱至1〇〇它後維持2 5小時。冷卻反應物至室溫 且將第二丁基氫過氧化物（234 mL，18.7 mmol)添加至反 應物中。持續攪拌反應物16小時。將反應物轉移至圓底燒 瓶中且在真空中濃縮。經由製備型TLc於5%曱醇/二氣曱 烧中純化該物質，得到非對映異構體之混合物。藉由SFC 分離非對映異構體’得到化合物49(8 4 mg)及50(16.3
mg)。if! NMR·· 49 (400 MHz, CD3OD) 5 7.65 (d，《7=8.0 Hz， 1H), 6.60 (S, 1H), 5.77 (d, 7=8.0 Hz, 1H), 4.84-4.77 (m, 1H), 4.70-4.62 (m, 2H), 4.50-4.47 (m, 1H), 4.33-4.25 (m, 2H), 1.43 (Sj 3H), 1.41 (t, 7=7.2 Hz, 3H) ； LC-MS: 49: (ES, m/z): 358.2 〇 4 NMR: 50 (400 MHz, CD3OD) (5 7.67 (d，·7=8_0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.74 (d, /=8.0 Hz, 1H), 4.78-4.68 (m, 1H), 4.63-4.58 (m, 2H), 4.43-4.40 (m, 1H), 4.32-4.22 (m, 2H), 1.43-1.39 (m，6H) ; LC-MS: 50: (ES, /n/z): 358.2。
實例21 製備化合物206
206 163528.doc -117- 201247694 步驟A :合成Int-21b 在 OC 下向化合物 Int-13c(350 mg，0.664 mmol)於 NMP(1.0 mL)與THF(5 mL)之混合溶劑中之溶液中添加氣 化第三丁基鎂（1.99 mL，1 Μ之THF溶液）。在(TC下在氮氣 下攪拌溶液30分鐘。添加int-21a(561 mg，i 33 mm〇i，使 用實例11中所述之方法製備）於THF(2 mL)中之溶液。在 〇°C下在N2下攪拌溶液至室溫後維持3小時。用nH4C1水溶 液（10 mL)淬滅反應’用EtOAc(2x4〇 mL)萃取，乾燥 (MgS〇4)，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析（在1小時内〇_ 10% MeOH/CHWl2且繼續保持30分鐘）純化粗產物，得到 白色固體Int-21b(480 mg，89%)。 步驟β :合成化合物206 在室溫下向經攪拌之起始物質lnt_2ib(478 mg，0.59 mmol)於四氫呋喃（2.3 mL)及Me〇H(4.3 mL)中之混合物中 添加甲酸（3.92 mL，102 mmol)。將 CsF(448 mg，2.95 mmol)添加至反應混合物中且在5〇。〇下攪掉6小時。用水 (10 mL)淬滅反應混合物且用乙酸乙酯（3x3〇 mL)萃取，用 水及鹽水洗務，乾燥（MgS〇4)，過濾且濃縮。藉由在45分 鐘内用0-10〇/〇 MeOH/CH/h溶離之矽膠管柱層析純化殘餘 物’得到所要產物。將產物溶解於0.3 mi Ch3CN及2 〇 ml 水中’凍乾隔夜’得到白色粉末狀產物2〇6(128 mg， 39.50/〇)。 NMR: 7.64 (d5 1H, J=7.56), 7.37 (m, 2H), 7.24 (m, 3H)，6.36 (s，1H)，5.84 (d，1H，J=7.57)，4.51 (m，1H)，4.37 163528.doc 201247694 (m, 1H)，4.09 (m，1H)，3.8-4.0 (m，4H)，l90 (m，1H)’ 1 (d, 3H, J=7.18), 1.22 (s, 3H), 0.93 (s, 3H), °·90 (Sj 3H) 實例22
製備化合物188及189
Htf tN
188 NH2 異構《·
° Htf fcN 189 異構逋: 在氮氣下於冰浴中冷卻化合物5(100 mg ’ 0.299 mmol)於 NMP(1.5 mL)及THF(9 mL)中之溶液。向反應物中添加氣 化第三丁基鎂（1.017 mL，1.017 mmol)且在〇°C下攪拌反應 物 20分鐘。將Int 22a(175 mg，0.329 mmol，使用實例 11 中所述之方法製備）溶解於THF(1 mL)中之溶液逐滴添加至 此混合物中。在室溫下攪拌反應混合物1.5小時。用乙酸
乙酯（20 mL)稀釋反應物且用水（20 mL)、飽和NH4C1(20 mL)洗滌。經無水硫酸鈉乾燥有機層，過濾且在真空中濃 縮。藉由用20 g矽膠管柱（在40分鐘内用0-7%
MeOH/CH2Cl2溶離，隨後在10分鐘内用7〇/0 MeOH/DCM溶 離）進行管柱層析來純化殘餘物’得到100 mg產物。藉由 超臨界流體分離法分離兩種異構體，得到188(26 mg)及 189(43 mg) 〇 NMR 188: (400 MHz, CDC13): δ 8.12-8.08 (m, 1H), 7.66 (s, 〇>5h), 7.64 (s, 0.5H), 7.54-7.49 (m, 3H), 163528.doc -119- 201247694 7.48-7.44 (m，1H)，7.37 (t，J=7.86 Hz，lH)，6.24 (S，1H) 5.21 (s, 1H)，4.96-4.81 (m，3H)，4.50 (s，lH)，4·48 (S，1H) 4.46-4.41 (m，2H)，4.17-4.10 (m，1H)，3.82-3.66 (m，3H) 1.42 (t，1=7.09 Hz, 3H)，1.30 (d，J=7.13 Hz，3H)，1.09 (s 3H)，0.86 (s，9H) » 實例23
異構體a 於冰浴中冷卻化合物31(50 mg，0.156 mmol)於NMP(4 mL)及THF(16 mL)中之溶液且用氣化第三丁基鎂（〇·531 mL，0.531 mmol)處理。.攪拌溶液20分鐘後，將溶解於 THF(1 mL)中之Int 22a(100 mg，0.187 mmol ’ 使用實例 11 中所述之方法製備）逐滴添加至此混合物中。在室溫下攪 拌反應混合物1.5小時。用乙酸乙酯（20 mL)稀釋反應物且 用水（20 mL)、飽和NH4C1(20 mL)洗滌。經無水硫酸鈉乾 燥有機層，過濾且在真空中濃縮。藉由用20 g矽膠管柱（在 40分鐘内用〇-1〇〇/0 MeOH/CH/h溶離，隨後在1〇分鐘内用 7% MeOH/DCM溶離）進行管柱層析來純化殘餘物，得到43 mg兩種非對映異構體之混合物。藉由超臨界流體分離法分 163528.doc -120- 201247694 離兩種異構體’得到185(6.1 mg)及186(24 mg)。七NMR 185: (400 MHz, CDC13): δ 8.11-8.09 (m, 1H), 7.84-7.81 (m> 1H)，7.67-7.63 (m，1H)，7.54-7.50 (m，3H)，7.49-7.44 1H)，7.39-7.32 (m, 1H)，6.25 (s，1H)，5.25 (s，1H)，4 92_ 4.84 (m, 1H), 4.80-4.77 (m, 1H), 4.48-4.42 (m, 1H), 4 29. 4.24 (m，1H)，4.15-4.10 (m，1H)，4.02 (s，3H)，3.82 (s
0.5H)，3.79 (s，0.5H)，3.77-3.72 (m，1H)，3.70 (s，〇 5H) 3.67 (s，0.5H)，1.34-1.26 (m，3H)，1.07 (s，3H)，〇.86 (s 9H)。 實例24
製備化合物43及44
用5-(乙基硫基）-1Η-四。坐（7.79 mg，0.060 mmol)處理化 合物 5(20 mg，0.060 mmol)及 Int-24a(49.2 .mg，〇 I%
mmol)於四氫吱喃（1 mL)中之混合物。在93°C下於密封管 中加熱反應物2.5小時。冷卻反應混合物至室溫且用第三 丁基氫過氧化物（0.828 mL，5.98 mmol)處理。授拌隔夜 後，用水（10 mL)稀釋混合物且用EtOAc(2x20 mL)萃取。 用鹽水（20 mL)洗滌經合併之有機層，經硫酸鈉乾燥，過 濾且在真空中濃縮。藉由用乙腈/水+0.1% TFA(10〜95〜 30%)溶離之製備型HPLC純化殘餘物，得到化合物43(3.82 mg)及化合物 44(2.5 mg)。4 NMR 43: (400 MHz, CDC13): 163528.doc -121 - 201247694 δ 7.55 (s，1H)，6.34 (s，1H)，5.11-5.06 (m，1H)，4.84 (s， 2H), 4.67-4.57 (m, 1H), 4.56-4.48 (m, 2H), 4.39-4.35 (m, 1H), 1.99-1.86 (m, 4H), 1.83-1.72 (m, 2H), 1.73-1.55 (m, 4H), 1.45 (t, J=7.04 Hz, 3H)，1.27 (s，3H)。 實例25 製備化合物3 4
異構體· 異構體: 在80C下於密封管中加熱化合物3(263 mg，0.988 mmol)、Int 25a(516 mg，1.778 mmol)及 5-(乙基硫基）-1Η-四唑（141 mg，1·08 mmol)於18.8 mL乙腈中之懸浮液2小 時。冷卻混合物至室溫且用第三丁基氩過氧化物（70%之ί-BuOH溶液，636 mg，4.94 mmol)處理。揽拌混合物30分鐘 且用 DCM(20 mL)及飽和 NaHCO3(20 mL)稀釋。經 Na2S04 乾燥有機相，過濾且在真空中濃縮。使用C-l8管柱上逆相 層析使用水-乙腈梯度（添加〇·1曱酸作為改質劑）分離非對 映異構體，得到化合物34(38 mg)及化合物23(73 mg)。 ]H NMR 34: (400 MHz, CD3〇D) δ 7.70 (d, J=4.0 Hz, 1H)，6.58 (s，1H)，5.95 (m，1H)，4.80 (m，2H)，4.61 (m，1H)， 4.3 (m，2H)， 1.4 (m，6H)， 1.3 (s，3H)。ESI MS [M+H]=371.2 'H NMR 23: NMR (400 MHz, CD3〇D) δ 7.66 (d, J=4.〇 Hz，1H)，6.60 (s，1H)，5.94 (m，1H)，4.80 (m，2H)，4.70 (m， 163S28.doc •122· 201247694 1H)，4.45 (m，H)，4.40 (m，1H)，1.4 (m，6H)，1.3 (s，3H)。 ESI MS [Μ+Η] = 371·2 實例26 製備化合物243
丨 nt-2Sa int-26b
Bz〇Xt lnt-16h
Cl
nh2
步驟a :合成Int-26a
在-3 0°C下在攪拌下藉由逐滴添加2-(第三丁氧基）·2_甲基 丙烧側氧基-2 -亞铭猛基（alumanyl)第三丁基链水合物〇 g , 3.92 mmol，1.50當量）於氧雜環戊烷（10 mL)中之溶液 來處理Int_16h(l g，2.64 mmol，1·〇〇當量）於氧雜環戊烧 (15 mL)中之溶液。在-30°C下於液氮浴中攪拌所得溶液2小 時。隨後藉由添加飽和氯化銨水溶液（3〇 mL)淬滅反應且 用乙酸乙酯（3x50 mL)萃取。合併有機層，經無水Na2S〇4 乾燥’過濾且在真空中濃縮。將殘餘物施用於石夕膠管柱且 用乙酸乙酯/石油醚（10-20%)溶離’得到8〇〇 mg(8〇%)呈白 色固體狀之Int-26a。 JH-NMR (300 MHz, CD3OD, ppm)\ δ 8.14-8.17 (m 2H) 8.02-8.05 (m, 2H), 7.39-7.65 (m, 6H), 5.62-5.63 (m, 1H) 5.41-5.42 (m，1H)，4.61-4.83 (m，3H)，1.66 (s，3H)。 163528.doc •123- 201247694 步驟B :合成Int-26b 用二乙胺（3.2 g，31.62 mmol)及氣膦酸二苯酯（42 g， 15.63 mmol)處理 Int-26a(3 g，7.87 mmol)於曱苯（60 mL)中 之溶液。在室溫下攪拌所得溶液5小時，隨後用二氣甲烧 (200 mL)稀釋且藉由添加飽和Na2CO3(40 mL)淬滅。用二 氣曱烷（3x50 mL)萃取所得溶液。合併有機層，經無水硫 酸鈉乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物施用於矽膠管 柱且用乙酸乙酯/石油醚（5-20%)溶離，得到5 g呈無色油狀 之 Int-26b。 ^-NMR-Int-ieb: (300 MHz, CDC13, ppm): δ 8.10-8.12 (m, 2H), 7.99-8.00 (m, 2H), 7.53-7.69 (m, 2H), 7.43-7.52 (m, 4H), 7.14-7.37 (m, 10H), 6.02 (d, J=1.5 Hz, 1H), 5.21 (d，/=1.5 Hz，1H)，4.61-4.66 (m, 2H)，4.31 (q，/=1.5 Hz， 1H)，1.68 (s，3H)。 步驟C :合成lnt-26c 將 Int-26b(500 mg，0.81 mmol，1.00 當量）及 33%溴化氫/ 乙酸（5 mL)置於用惰性氬氣氛圍吹洗且維持之25 mL圓底 燒瓶中。在室溫下搅拌所得溶液3小時，隨後用二氣曱烧 (50 mL)稀釋且藉由添加水/冰淬滅。用二氣曱烷（5〇旧“萃 取所得溶液。合併有機層’用飽和Na2C03(水溶液）洗務， 經無水NhSCU乾燥，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物施用 於石夕膠管柱且用乙酸乙酯/石油趟（5_20。/。）溶離，得到0.25 g(69°/〇)呈灰白色泡沫狀之int_26c。 1H-NMR-Int-26c: (300 MHz, CDC13, ppm): δ 8.25 (d, */=11.4 Hz, 2H), 8.17 (d, J=5.3 Hz, 2H), 7.59-7.77 (m, 2H), 163528.doc -124- 201247694 7.44- 7.50 (m, 4H), 6.39 (s, 1H), 5.35 (d, 7=2.0 Hz, 1H), 4.73-4.92 (m，3H)，1.76 (s，3H)。 步驟D :合成Int-26d 在室溫下攪拌6-氯-9H-嘌呤-2-胺（382 mg，2.25 mmol)於 KOBu-t(2.25 mL，1 N之第三丁醇溶液）中之溶液3〇分鐘。 在室溫下將Int-26c(500 mg，1.13 mmol)於乙腈（5 mL)中之 溶液添加至混合物中。在油浴中維持溫度在5〇〇c的同時再 擾拌所得溶液2天後’用二氯甲烧（3 〇 mL)稀釋所得溶液且 _ 藉由添加飽和NH4C1(30 mL)淬滅反應。用二氣曱院（3χ5〇 mL)萃取所得溶液。合併有機層，經無水Na2S〇4乾燥，過 滤且在真空中濃縮。將殘餘物施用於石夕膠管柱且用二氣甲 烷/曱醇（2-10%)溶離’得到390 mg(65%)呈灰白色固體狀之 Int-26d。 ^-ΝΜΚ-Ιηί-Ίόά: (CDCI3, 400 MHz, ppw): 8.09-8.14 (m 2H), 7.98-8.06 (m, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.64-7.67 (m, 1H) 7.44- 7.58 (m, 2H), 7.36-7.42 (m, 2H), 6.50 (s, 1H), 6.12 (d • J=3,6Hz，lH)，5.72(brs，2H)，5.05-5.1〇(m，iH) 4 68_ 4.75 (m，2H)，1·39 (s，3H)。 步驟E :合成化合物243 用氨（10 mL)處理 Int-26d(140 mg，0.26 mm〇1)於丙 醇 (2 mL)中之溶液。在50°C下於油浴中攪拌所得溶液2天。在 真空中濃縮所得混合物。將殘餘物施用於矽膠管柱且用二 氣曱烷/甲醇（2-20%)溶離。得到30 mg(37〇/0)呈灰白色固體 狀之化合物243。 •125· 163528.doc 201247694 LC-MS-243: (ES, m/z): 306 [M+H] + !H-NMR-243: (CD3OD, 400 MHz, ppm): 8.23 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 4.45 (d, J=2A Hz, 1H), 4.04-4.08 (m, 2H), 3.88-3.91 (m，1H), 1.13 (s，3H)。 實例27 製備化合物242
242 步驟A :合成Int-27b 在-78°C下在攪拌下藉由逐滴添加磷醯氣（84〇 mg » 5.48 mmol)處理 Int-27a(2.0 g，11.01 mm〇i)於二氣曱烷（2〇 mL) 中之溶液。在-781：下向其中添加第一批n，N-二異丙基乙 胺（1.41 g，2.00當量）。在_78。〇下攪拌所得混合物3〇分 鐘。在-78°C下向其中添加第二批Ν，Ν·二異丙基乙胺（1 4ι g，2.00當量在室溫下攪拌所得混合物2小時。在下 在攪拌下向混合物中逐滴添加五氟苯酚（9〇7 mg，4$ mmol)於二氣甲烷（2 mL)中之溶液且隨後在〇。〇下在攪拌下 163528.doc -126- 201247694 逐扃添加N，N-二異丙基乙胺（637 mg，4.93 mmol)。在25 °C 下搜拌所得溶液隔夜，隨後在真空中濃縮。將殘餘物溶解 於50 mL乙醚中。濾出固體且在真空下濃縮濾液。將殘餘 物施用於矽膠管柱且用乙酸乙酯/石油醚（丨：丨）溶離，得到 900 mg(32%)呈白色固體狀之Int-27b。 LCMS04-Int-27b: 519[M+H] + 'H-NMR Int-27b: (300 MHz, CD3OD, ppm): 4.05-4.16(m, 2H)，3.86-3.98(m，4H), 3.69-3.77(m，2H)，1.87-2.00(m，2H), 1.42-1.60(m，6H)，0.79-1.00(m，12H) 31P-NMR Int-27b (300 MHz, CD3OD, ppm): 10.012(s) 步驟B :合成化合物2 4 2 在〇°C下在攪拌下用氣化第三丁基鎂（0 〇9 ，1.7 μ)逐 滴處理化合物5(50 mg，〇. 15 mmol，1.00當量）於DMF(8 mL)中之溶液。在〇°C下攪拌所得混合物3〇分鐘。 在攪拌下向其中逐滴添加Int-27b(78 mg，0.15 mmol， 1.01當量）於DMF(2 mL)中之溶液。在〇乞下攪拌所得溶液 隔夜，隨後用30 mL二氣甲烷稀釋且用10 mL飽和氣化銨洗 務。在真空中濃縮有機相。藉由製備型HPLC用以下條件 (l#-Pre-HPLC-011(Waters))純化粗產物（70 mg):管柱， SunFire Prep Cl 8，19χ 150 mm 5 μηι ;移動相：水及乙腈 (在8分鐘内20.0°/。乙腈升至71.0%，在2分鐘内升至 100.0% ’在1分鐘内降至20.0%);偵測器，UV 254及220 nm。得到24_1 mg(24°/〇)呈白色固體狀之化合物242。 LCMS-242: (ES，m/z): 669 [M+H] + 163528.doc •】27· 201247694 'H-NMR 242: (300 MHz, CD3OD, ppm): 7.95(s, 1H), 6.44(s, 1H), 4.47-4.58(m, 3H), 4.34-4.37(m, 2H), 4.15-4.18(m, 1H), 3.71-3.94(m, 6H), 1.83-1.91(m, 2H), 1.29-1.42(m, 9H), 1.15(s, 3H), 0.85-0.91(m, 12H) 3,P NMR-242: (300 MHz, CD3OD, ppm): 14.053(s) 使用以上實例中所述之方法且替代適當反應物及/或試 劑製備以下本發明化合物。 化合物編號 結構 MS (Μ + Η) 241 〇 OMe ^_/〇 ΐ) Hd fcN 655 實例28 製備化合物47及48 人人
將化合物3(20.8 mg ’ 0.078 mmol)添加至密封管中。將 中間物Int-28a(36.7 mg’ 0.126 mmol)溶解於四氫。夫喃（1 mL)中且添加至密封管中’繼而添加5_(乙基硫基）四唑 (13.4 mg，0_103 mmol)。將管密封且加熱至1〇〇t：後維持 2.5小時。冷卻反應物至室溫且將第三丁基氫過氧化物（1 mL)添加至反應物中。持續攪拌反應物16小時。將反應物 轉移至圆底燒瓶中且在真空中濃縮。藉由逆相HPLC經2〇 163528.doc •128· 201247694 分鐘使用 10% H2O(0.1% TFA)/CH3CN至90% ch3cn/h2o (0.1% TFA)之溶劑梯度純化該物質，得到47(1.7 mg)及 48(1.9 mg)。 *H NMR: 47 (500 MHz, CD3OD) δ 7.65 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.78 (d, /=8.0 Hz, 1H), 4.82-4.58 (m, 5H), 4.48-4.42 (m, 1H), 1.45-1.39 (m, 9H) ； LC-MS: 47: (ES，m/z)·· 371.1。 •H NMR: 48 (500 MHz, CD3OD) 3 7.72 (d，《7=8.0 Hz， 1H), 6.58 (s, 1H), 5.77 (d, J=8.0 Hz, 1H), 4.81-4.71 (m, 2H), 4.63-4.59 (m, 1H), 4.38 (d, J=9 Hz), 4.33-4.30 (m, 1H)，1.45-1.42 (m，9H) ; LC-MS: 48: (ES, 讲/z): 371.1。 實例29 製備化合物32及33
將化合物3(0.50 g，1.89 mmol)添加至密封管中且溶解於 四氫呋喃（8.0 mL)中。將中間物Int_29a(〇 78 g，2牦 mmol)溶解於四氫呋喃（8 〇 mL)中且添加至密封管中。將^ (乙基硫基四唑（0.26 g，！ 99 mm〇1)添加至管中密 封且加熱至後維持3小時。冷卻反應物至室溫且將第 二丁基II過氧化物（15.0 mL，12〇 mm〇1)添加至反應物中且 攪拌16小時。將反應物轉移至圓底燒瓶中且在真空中濃 163528.doc •129· 201247694 縮。經由管柱層析用2-10%曱醇/二氯甲烷之梯度純化該物 質，得到非對映異構體之混合物，藉由SFC分離法分離， 得到呈白色固體狀之化合物32(64.2 mg)及呈白色固體狀之 化合物33(279 mg) » 化合物 32: 4 NMR (500 MHz，CD3OD) δ 7.65 (d, 7=8.0 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.77 (d, 7=8.5 Hz, 1H), 5.10-5.04 (m, 1H), 4.83-4.75 (m, 1H), 4.72-4.65 (m, 1H), 4.64-4.57 (m, 1H), 4.48-4.42 (m, 1H), 1.98-1.87 (m, 4H)，1.86-1.77 (m，2H)，1.71-1.64 (m，2H)，1.44 (s，3H)。 LC-MS: 32: (ES，m/z): 371.1 [M-CN]+。化合物 33: 4 NMR (500 MHz, CD3OD) δ 7.72 (d, /=8.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.77 (d, 7=8.0 Hz, 1H), 5.05-5.01 (m, 1H), 4.83-4.76 (m, 1H), 4.62-4.57 (m, 2H), 4.34-4.32 (m, 1H), 2.02-1.93 (m, 4H)，1.87-1.82 (m，2H)，1.73-1.66 (m，2H)，1.44 (s，3H)。 LC-MS: 33: (ES，m/z): 371.1 [M-CN]+。 實例30 基於細胞之HCV複製子分析法 為量測所選本發明化合物的基於細胞之抗HCV活性，在 測試化合物存在下將複製子細胞以每孔5000個細胞接種於 96孔塗有膠原蛋白I之Nunc盤中。將各種濃度之測試化合 物（通常以10次連續2倍稀釋液形式）添加至分析混合物中， 起始濃度在250 μΜ至1 μΜ範圍内。在分析培養基中，二 甲亞砜之最終濃度為0.5%，胎牛血清為5%。在第3天藉由 添加lx細胞溶解緩衝液（Ambion目錄號8721)收集細胞。使 用即時PCR(Taqrnan分析法）量測複製子RNA含量。擴增子 163528.doc •130· 201247694
位於 5B。PCR 引子為：5B.2F，ATGGACAGGCGCCCTGA (SEQ ID. NO. 1) ； 5B.2R, TTGATGGGCAGCTTGGTTTC (SEQ ID. NO. 2);探針序列為經FAM標記之 CACGCCATGCGCTGCGG (SEQ ID. NO. 3)。使用 GAPDH RNA作為内源對照物，且使用製造商（PE Applied Biosystem)推薦之引子及經VIC標記之探針以與NS5B相同 之反應（多重PCR)擴增。使用以下程式在ABI PRISM 7900HT序列偵測系統上操作即時RT-PCR反應：48°C 30分 鐘，95°C 10分鐘，95°C 15秒χ40個循環，60°C 1分鐘。將 ACT值（CT5B-CTGAPDH)對測試化合物之濃度繪圖且使用 XLfit4(MDL)擬合S形劑量-反應模型。EC5G定義為相較於 投影基線達成ACT=1所必需之抑制劑濃度；EC9〇定義為相 較於基線達成ACT=3.2所必需之濃度。或者，為定量複製 子RNA之絕對量，藉由在Taqman分析法中包括複製子RNA 之連續稀釋T7轉錄物而建立標準曲線。所有Taqman試劑 均來自 petroleum ether Applied Biosystems。該分析程序詳 細描述於例如 Malcolm 等人，Antimicrobial Agents and C/zemoi/zerapy 50: 1013-1020 (2006)中。 使用此方法計算本發明化合物之HCV複製子分析資料且 所得複製子EC50資料提供於下表中。 化合物 lb ECs〇 (μΜ) 化合物 lb ECso (μΜ) 化合物 lb ECs〇 (nM) 1 14 11 17 21 25 2 12.6 12 1.7 22 18 3 >66 13 1.5 23 6.7 4 100 14 11 24 7.9 5 >100 15 Ί 5 25 >100 163528.doc -131 - 201247694 6 1.4 16 51 26 62 7 1 17 13 27 >100 8 11.7 18 1 28 2.7 9 0.7 19 15 29 NS5b IC5〇=0--^ μ Μ 10 15 20 16 30 571.2 實例31 刚藥活體外轉化為三碟酸核普 使用下述程序量測本發明之前藥化合物活體外轉化為其 相應三磷酸核苷之程度。 在5% DMSO/95% MeOH中製備前藥測試化合物之2 mM 儲備溶液，得到10 μΜ之最終樣品濃度。由此儲備溶液移 出5 μί等分試樣且添加至1 mL大鼠或人類低溫保存之肝細 胞樣品中’得到濃度為每毫升1百萬個細胞之對照樣品。 一式三份地分析此樣品且用作測試樣品。 在5% DMSO/95% MeOH中製備化合物a之2 mM儲備溶 液，得到10 μΜ之最終樣品濃度。 ΝΗ, η°Λ^^ν
Η0' 0Η 化合物A 由此儲備溶液移出5 μί等分試樣且添加至1 mL大鼠或人 類低溫保存之肝細胞樣品中’得到濃度為每毫升1百萬個 細胞之對照樣品。一式三份地分析此樣品且用作對照標準 物。 自液氮儲罐移出人類及大鼠肝細胞且藉由將肝細胞管浸 163528.doc •132· 201247694 於經預熱之3 7°C水浴中且輕輕地來回震盪管直至解凍來解 凍。隨後將經解凍之肝細胞輕輕地傾入肝細胞基本培養基 (50 mL，預先升溫至37°C)之容器中且洗滌。隨後用預先升 溫之肝細胞基本培養基沖洗肝細胞管，合併經洗務之肝細 胞及沖洗物且在室溫下在5〇〇 i.pm下離心4分鐘。隨後丟棄 上清液且將所得肝細胞集結粒用肝細胞基本培養基（預先 升溫至37°C )再懸浮且調節最終肝細胞濃度至每毫升1百萬 個細胞’得到最終肝細胞懸浮液。 • 自每毫升1百萬個細胞之最終肝細胞懸浮液移出1 mL等 分試樣，一式三份地分析且置於2〇 無蓋閃爍小瓶中。 隨後將2 mM前藥測試樣品添加至肝細胞懸浮液中，於1 mL肝細胞樣品中得到1〇 0河最終濃度。隨後在37它 C02下培育樣品4小時。亦以此方式培育空白肝細胞樣品以 及對照標準物。 使用移液管將所培育之肝細胞懸浮液樣品轉移至微型離 〜官中且在室溫下在500 rpm下離心4分鐘。丟棄上清液， • 使所得肝細胞集結粒再懸浮且用0.25 mL 70〇/〇曱醇/30%(20 福EDTA/2〇 mM EGTA)之代溶液（已使肖氫氧化鋼調節 至pH 8)提取細胞，隨後將所得提取溶液儲存於冰箱中4它 下直至準備使用，彼時首先將樣品進行渦旋/音波處理以 確保所有肝細胞均破裂。隨後將樣品在4t下在4〇〇〇 rpm 下離心10分鐘，且將所得上清液之1〇〇从等分試樣添加至 生物分析盤（2 mL正方形96孔盤，含有⑽叫錐形儲集器） 中’剩餘上清液立即儲存在·賦下以供必要時再分析。 163528.doc -133- 201247694 將空白對照上清液轉移至新管中以用作標準曲線之對照基 質。 或者，自 Celsis-In Vitro Technologies(Baltimore，MD)獲 得低溫保存之可塗佈肝細胞，且在抑制劑處理前三小時根 據製造商之方案以每毫升0.7><106個細胞塗佈於111乂丨匕〇 0尺0€?培養基中（6孔盤中每孔1.75><106個細胞）。在1=0時 將含指定濃度之抑制劑DMSO溶液的InVitro GRO CP培養 基添加至肝細胞中》在給藥後至多48小時之指定時間，用 冰冷PBS洗滌細胞，用冰冷1 mL 70%甲醇：30% 20 mM φ EDTA/EGTA提取且離心。將上清液儲存在-80〇C下直至分 析。對於細胞内NTP分析，首先藉由添加具有已知濃度之 NTP標準物的空白提取緩衝液產生NTP校準曲線。在耦接 於Shimazu UFLC系統且以正離子模式操作之QTRAP 5500 LC/MS/MS 系統（Applied Biosystems，Foster City, CA)上執 行LC/ESI-MS分析。HPLC系統由溶劑傳遞模組（LC20-AD XR)、自動注射器（SIL-20ACXR)及光電二極體陣列偵測器 (SPD-M20A PDA)(Shimadzu Corporation，Tokyo, Japan)組· 成。在40°C下執行所有HPLC分離。在BioBasic AX管柱（5 μηι粒徑，100x2.1 mm I.D.，Thermo Scientific)上使用 Α(乙 腈：10 mM NH4Ac=30:70，v:v，pH=6)及 B(乙腈：1 mM NH4Ac=30:70，v:v，pH=l0)作為移動相以 1.0 mL/min之流 速分析測試樣品。注射體積為50 μι。移動相梯度以0% B 開始，且經6分鐘線性增加至100% B。所有NTP之MS分析 在相同QTRAP 5500 MS儀器上以多離子監測模式（MRM)用 163528.doc -134- 201247694 TUrbo-Ion-Spray電離執行。所有分析物及標準物之碰撞能 量均為40 eV。四極質譜分析儀設定為單位解析。 結果以每微升細胞三磷酸酯之皮莫耳數報導。為估算三 鱗酸核苷之細胞内濃度（μΜ)，利用以下轉化方法：丨X丨 個肝細胞之體積為3 pL。
使用此方法獲得以10 μΜ測試之所選本發明化合物之資 料且呈現於下表中。此資料表明該等化合物可在活體外有 效轉化為其相應ΝΤΡ，從而對於其固有效能（Ki)產生顯著 覆蓋。亦呈現比較化合物（標§己為化合物B)之資料。
I63528.doc -135-
前藥活體内轉化為三鱗酸核苷之測定 使用下述程序量測本發明之前藥化合物活體内轉化為其 相應三構酸核"^之程度。 _ 經由冷;束甜程序（經由異氟烧使動物麻醉，用於液氮中 冷凍之改良鉗甜夾肝臟，隨後將所夹肝片置於液氮中以確 保完全冷凍；重複肝鉗夾程序以獲得第二片肝樣品；將樣 品儲存在-80°C下）自給與前藥的韋斯漢諾威大鼠（wistar Hannover Rat)或比格爾犬（Beagie Dog)收集肝樣品。使用 Spex樣品製備冷凍器/研磨機（Cry〇mi〗i)將肝樣品均質化； 低溫研磨操作之設定為：1個循環，2分鐘預冷凍時間，2 I63528.doc -136- 201247694 分鐘操作時严曰1，i分鐘冷卻時間，且速率為15個循環/秒 (―)以相同方式低溫研磨自給與媒劑之大鼠收集的對照 肝樣在此過程期間，重要的是使與肝樣品接觸之任何 物質（諸如所有CryQmill樣品容器/蓋及刮勺）—直保持冷康 於乾冰上。 使用經低溫研磨之對照肝樣品產生標準曲線。視需要標 準曲線數而定，稱量適當量之經低溫研磨對照肝樣品至錐 形管中，置於濕冰上，且用已用氫氧化鈉調節至pH 8之冷 • 7〇%曱醇/3〇%(20 mM EDTA/EGTA)以 1:4(肝：MeOH/EDTA- EGTA)之比率懸浮。將懸浮肝勻漿渦旋直至獲得均勻懸浮 液。私準曲線在10 ng/mL至50,000 ng/mL NTP標準物範圍 内，且QC樣品為i〇,〇〇〇 ng/mL.。將標準曲線上各點及各 QC之懸浮對照肝勻漿之5〇〇卟等分試樣移出且置於i 5 雒〜管中，且將丨25 各相應標準曲線或qC標準溶液添加 至各個別對照專分試樣中且再渦旋。在4。匚下以3645%離 心肝樣品等分試樣10分鐘，且將45〇 上清液等分至2 mL 籲 正方形96孔生物分析盤中。亦使用以上程序由懸浮對照肝 勻漿產生單一及雙重空白樣品，但用125叫水替代125 標準溶液。 稱量約1-2公克經低溫研磨肝樣品至5〇 mL錐形管中，置 於濕冰上’且用已用氫氧化納調節至pH 8之冷7〇%曱醇/ 3〇%(20 mM EDTA/EGTA)以 1:4(肝：MeOH/EDTA-EGTA)之 比率懸浮；將剩餘經低溫研磨之肝樣品儲存在·8(Γ(：下以 在必要時供可能之再分析。將懸浮肝勻漿渦旋直至獲得均 163528.doc •137- 201247694 勻懸浮液。移出各未知肝樣品之500 pL等分試樣且置於j 5 mL離心管中，將125 gL水添加至各等分試樣中且再渦旋。 在4。(：下以3645xg離心標準曲線/QC肝樣品等分試樣⑺分 鐘，將450 μί上清液等分至2 mL正方形96孔生物分析盤中 且將適當内標添加至所有樣品孔、標準曲線/QC孔及單一 空白孔中。將樣品盤健存在_8Qt：Ti至分析，且結果以 所量測之NTP的微米數報導。
使用此方法獲得以10刚測試之所選本發明化合物之實 料且呈現於下表中。此資料表明該等化合物可在活體内有 1 ^。=其相應NTP ’從而對於其固有效能（Ki)產生顯著 料。。呈現比較化合物（標記為化合物从化合物c)之資 化合物 —— ?^γχΝΗ 0—、Hcn〇 τ° 47 __¥體内穴鼠iNTP(5〇 mpk，4小時)/Ki 5χ ^nH2 cr0 0 45 ___ 14x r/ ?^°rNxN H._cn0 x 〇' v T〇 34 ----J 15x
163528.doc •138· 201247694
實例34
三磷酸核苷類似物對HCV NS5B聚合酶之抑制 為量測本發明之三磷酸核苷化合物對HCV NS5B RNA依 賴性RNA聚合酶之酶活性的抑制，使用經放射性標記之核 苷酸併入分析法。此分析法為國際公開案第 W02002/057287號中所述之分析法的改良形式。簡言之， 在室溫下培育 50 pL含有 20 mM HEPES(pH 7.3); 7.5 mM DTT ; 20 單位/ 毫升 RNasIN ;各 1 μΜ之 ATP、GTP、UTP及 CTP ; 20 pCi/mL [33P]-CTP ; 10 mM MgCl ; 60 mM NaCl ; 100 pg/ml BSA ; 0.021 μΜ DCoH 雜聚物 RNA 模板；及5 nM NS5B (lb-BKA55)酶的反應物1小時。隨後藉由添加500 mM EDTA(50 μΙ〇終止分析。將反應混合物轉移至 Millipore DE81過濾盤中且使用Packard TopCount測定經標 記CTP之併入。可隨後由實驗用抑制劑之1〇次連續3倍稀 釋液一式兩份地計算化合物IC5〇值。NTP抑制劑之固有效 能（Ki)由其NS5B IC50值使用如Cheng等人，价oc/iem 163528.doc -139· 201247694 尸22:3099-3 108 (1973)所述之如下競爭性抑制劑 之鄭-普魯索夫方程（cheng-prusoff equati〇n)獲得： KiHCWU + tS]/^) ’其中[S] = l μΜ ’且尺仍為在不存在外源 抑制劑之分析法中產生最大酶活性一半之同源1^丁1>濃度。 使用此方法獲得本發明之以下所選化合物之Ντρ類似物 的資料，且如下所闡述。此資料表明料化合物之三鱗酸 核苦（ΝΤΡ)為HCVNS5B聚合酶之強力有效抑㈣。亦^ 比較化合物（標記為化合物B及化合物C)之資料。 化合物 ΝΤΡΚΐ ίιιΜ、 t^f° °"r-〇H，cN〇 Ύ° _____ 47 0.3 rtNH2 。孩ϊ Ύ0 34 -------- 0.003 Μ .V—("CN νΗ2 CT6、。 _ 45 1 1 · 0.1 ----
163528.doc •140· 201247694
實例35
複製子活性及細胞毒性分析法
為量測本發明化合物的基於細胞之抗HCV活性，在用本 發明化合物處理前一天將複製子細胞（lb-Conl)以每孔5000 個細胞接種於96孔盤中。隨後將各種濃度之本發明測試化 合物之DMSO溶液添加至複製子細胞中，其中DMS0在分 析培養基中之最終濃度為0.5%且胎牛血清為10%。給藥後 三天收集細胞，且使用即時RT-PCR(Taqman分析）以 GAPDH RNA作為内源對照物來測定複製子RNA含量。由 實驗用抑制劑之10次連續兩倍稀釋液一式三份地計算EC50 值。為量測抑制劑在複製子細胞中之細胞毒性，在給藥後 三天根據製造商之用於CeUTiter 96單水溶液細胞增殖分析 法之方案（Promega，目錄號G3580)對經與複製子活性分析 法中相同之處理之細胞執行MT'S分析法。CC50為相較於媒 劑處理細胞產生50%抑制之抑制劑濃度。可使用相同MTS 方案量測其他類型細胞中之細胞毒性。 163528.doc -141 - 201247694 使用此方法獲得所選本發明化合物之資料且如下闡述。 此資料表明該等化合物對複製子活性具有顯著細胞毒性 窗。 化合物 複製子(lb)EC50 (μΜ) 細胞毒性 (μΜ) 0 57 34 >100 ： fjn υ T HO CN ό 61 8.3 >100 〆 〈’ NH 九。 0 丄 Η0 CN ό 64 1.4 >100 cnM-誓 υ Τ HO CN ό 70 2.4 ΝΑ 0 1 Η0 CN ό〇 74 2.7 >100
163528.doc •142· 201247694
163528.doc •143- 201247694
163528.doc • 144· 201247694 NA=未獲得 實例36 粒線體毒性分析法 抑制劑在複製子細胞中之粒線體毒性可藉由其相對於核 基因對照物對粒線體基因組複本數之影響來評估。在抑制 劑處理前一天將複製子細胞以每孔60,000個細胞接種於6 孔盤中。在處理第一日添加含各種濃度抑制劑之培養基且 之後每三天更新給藥培養基。在給藥後指定日收集細胞； 使用DNeasy血液及組織套組（Qiageri，目錄號69504)分離 總DNA且藉由標準分光光度法定量。可使用兩個替代性粒 線體特異性DNA引子組：i)5'-CACCCAAGAACAGGGTTTGT-3’（SEQ. ID. NO. 3) (F3212 ’ 正向）、5'-TGGCCATGGGTATGTTGTTAA-3, (SEQ. ID. NO. 4) (R3319，反向）、6不屬-5'-11八(：€00001(：丁00：八1'<：丁-3，-TAMRA(SEQ. ID. NO. 5)(探針）（參見 Bai 等人，如《好 JcM 5W 1011:304-309 (2004) ) ; 42)5'-TGCCCGCCATCATCCTA-3'(SEQ. ID. NO. ό) (COX II ’ 正向）、5，-CGTCTGTTATGTAAAGGATGCGT-3, (SEQ. ID. NO. 7) (COX II ，反向），6-FAM-5'-TCCTCATCGCCCTCCCATCCC-3'-TAMRA (SEQ. ID. NO. 8)(探針）（參見 Stuyver 等人，C/zewoMer 46:3854-3860 (2002))。在 Taqman定量 PCR分析中使用 500 nM之引子及200 nM之探針。同時使用ABI PDAR部件號 4310875 (20X)進行18S DNA之核基因對照物定量。將抑制 劑處理細胞之ACT值（mt DNA與18S DNA之間的CT差值）與 媒劑處理細胞相比較。可使用相同方案量測其他類型細胞 163528.doc -145- 201247694 中之粒線體毒性。 • 2、氰基取代之核普衍生物之用途 2氰基取代之核#彳$生物適用於人類及獸醫學以治療或 預防患者之病毒感染。在一個實施例中，2__氰基取代之核 皆衍生物可為病毒複製之抑制劑。在另-實施例中，2.-氰 基取代之㈣衍生物可為Hcv複製之抑㈣卜因此，2，氮 基取代之核苷衍生物適用於治療病毒感染（諸如HCV)。根 據本發明’ 2’_氰基取代之核皆衍生物可投與至需要治療或 預防病毒感染之患者。 因此，在一個實施例中，本發明提供治療患者之病毒感 染的方法，其包含投與患者有效量之至少一種2，氰基取代 之核苷衍生物或其醫藥學上可接受之鹽。 治療或預防黃病毒（F丨aviviridae Virus) 2'-氰基取代之核苷衍生物可用於治療或預防由黃病毒科 病毒引起之病毒感染。 可使用本發明方法治療或預防之黃病毒感染之實例包括 (但不限於）登革熱（dengue fever)、日本腦炎（Japanese encephalitis)、卡薩努森林病（Kyasanur Forest disease)、澳 洲馬勒谷腦炎（Murray Valley encephalitis)、聖路易斯腦炎 (St. Louis encephalitis)、碑媒腦炎（Tick-borne encephalitis)、西 尼羅河腦炎（West Nile encephalitis)、黃熱病及C型肝炎病 毒（HCV)感染。 在一個實施例中，所治療之黃病毒感染為C型肝炎病毒 感染。 163528.doc -146- 201247694 治療或預防HCV感染 2 -氰基取代之核苷衍生物適用於在基於細胞之系統中抑 制HCV、/α療HCV感染及/或降低HCV感染之可能性或 HCV感染症狀之嚴重性以及抑制HCV病毒複製及/或 病毒產生。舉例而言，2，-氰基取代之核苷衍生物適用於在 懷疑曾經因諸如輸血、體液交換、咬傷、意外針刺之方式 而暴露於HCV或在手術或其他醫療程序期間暴露於患者血 液後治療HCV感染。 在一個實施例中，C型肝炎感染為急性C型肝炎。在另 一實施例中’ C型肝炎感染為慢性c型肝炎。 因此，在一個實施例中，本發明提供治療患者之HCV感 染的方法’該等方法包含投與患者有效量之至少一種2，_氰 基取代之核苷衍生物或其醫藥學上可接受之鹽。在一特定 實施例中’投與量可有效治療或預防患者之HCV感染◊在 另一特定實施例中，投與量可有效抑制患者之HCV病毒複 製及/或病毒產生。 2·-氰基取代之核苷衍生物亦適用於製備抗病毒化合物及 執行抗病毒化合物之篩選分析。舉例而言，2，_氰基取代之 核皆衍生物適用於鑑別NS5B中具有突變之抗HCV複製子 細胞株’該等細胞株為更有效抗病毒化合物之極佳|帛選工 具。此外’ 2'-氰基取代之核苷衍生物適用於建立或確定其 他抗病毒藥與HCVNS5B聚合酶之結合位點。 本發明之組合物及組合可用於治療罹患與任何HCV基因 型有關之感染的患者。HCV類型及亞型的抗原性、病毒血 163528.doc -147· 201247694 症等級、所致疾病之嚴重性及對干擾素療法之反應可能不 同，如Holland等人，幻/，30(2):192-195 (1998)中所 述。廣泛使用Simmonds等人，厂卜〇/，74(第11部 分）:2391-2399 (1993)中所述之命名法且其將分離株分成六 種主要基因型1至6 ’其中有兩種或兩種以上相關亞型（例 如1 a及lb)。已提出其他基因型7-10及11，然而此分類所依 據之系譜基礎受到質疑’由此類型7、8、9及11分離株再 指定為類型6 ’且類型1〇分離株再指定為類型3(參見
Lamballerie等人，Gw Kiro/，78(第 1部分）:45-51 (1997))。 當對NS-5區域測序時，主要基因型定義為具有55%至 72%(平均值64.5%)之序列類似性，且類型内之亞型定義為 具有75%-86%類似性（平均值80%)(參見Simm〇nds等人，j Wro/，75(第 5部分）：1053-1061 (1994))。 組合療法 在另一實施例中，治療或預防Hcv感染之本發明方法可 -氰基取代之核苷衍生物之 進一步包含投與一或多種不為2 其他治療劑。 在一個實施例中，其他治療劑為抗病毒劑。 抑制劑。 因此，在一個實施例中， 在另-實施例中’其他治療劑為免疫調節劑，諸如免疫 ’本發明提供治療患者之病毒感
苷衍生物）或其醫藥學上可接受之鹽， 丨主>、—種2，-氰基取代 以上不同2，-經取代核 ，及（Π)至少一種不為 163528.doc -148- 201247694 2’-氰基取代之料衍生物之其他治療劑，丨巾投與量一起 有效治療或預防病毒感染。 當投與患者本發明之組合療法時，組合中之治療劑或包 含治療劑之醫藥組合物可以任何次序(諸如依序、共同、 起同時）投與。該組合療法中各種活性劑之量可為不 同量(不同劑量)或相同量(相同劑量)。由此，出於非限制 性說2目的’ 2，·氰基取代之核㈣生物及其他治療劑可
乂固疋$ (劑里）存在於單一劑量單位（例如膠囊、鍵劑及其 類似物）中。 在-個實施例中，至少一種21_氰基取代之核苦衍生物在 其他療劑發揮其預防或治療作用之時間期間投與，或反 之亦然。 Μ 在另實施例中，至少一種2，_ IS取代之核苦衍生物及 其他治療劑以該等藥劑用作治療病毒感染之單一療法時通 常所用之劑量投與。 在另一實施例中，至少一種2，_氰基取代之核普衍生物及 其他治療劑以小於該等藥劑用作治療病毒感染之單一療法 時通常所用之劑量的劑量投與。 在另一實施例中，至少一種2，_氰基取代之核苦衍生物及 其他治療劑起協同作用，且以小於該等藥劑用作治療病毒 感染之單一療法時通常所用之劑量的劑量投與。 在—個實施财，i少-種2,·氰基取代之核苦衍生物及 其他冶療劑存在於同一組合物中。在一個實施例中，此‘ 口物適用於經σ投與。在另_實施例+，此組合物適用於 163528.doc -149- 201247694 靜脈内投與。右x &办,士 ， 在另一貫施例中，此組合物適用於皮下投 與。在另-實施例令，此組合物適用於非經腸投與。 可使用本發明之組合治療方法治療或預防之病毒感染及 病毒相關病症包括（但不限於）上列病症。 在一個實施例中，病毒感染為Hcv感染。 至少m絲狀㈣衍生物及其㈣療劑可起加 ♦或協同作用。協同組合可允許使用轉低劑量之—或多種 藥劑及:或以較低頻率投與組合療法之一或多種藥劑。一 或多種藥劑之較低劑量或較低頻率投藥可降低療法毒性， 而不會降低療法功效。 在-個實_巾’投與至少—種21_氰基取代之核苦衍生 物及其他治療财抑㈣毒«對此等㈣之抗性。 i用於本發明組合物及方法之其他治療劑之非限制性實 例包括干擾素、免疫調節劑、病毒複製抑制劑、反義藥 齊j ~療^生疫苗、病毒聚合酶抑制劑、核普抑制劑、病毒 蛋白酶抑制劑、病毒解螺旋酶抑制劑、病毒粒子產生抑制 劑、病毒進人抑制劑、病毒組裝抑制劑、抗體療法（單株 或多株）及適用於治療RNA依賴性聚合酶相關病症之任何 藥劑。 在-個實施例中，其他治療劑為病毒蛋白酶抑制劑。 在另-實施例中’其他治療劑為病毒複製抑制劑。 在另實施例中，其他治療劑為Hcv NS3蛋白酶抑制 劑0 在另實施例中’其他治療劑為Hcv NS5B聚合酶抑制 163528.doc •150- 201247694 劑0 ，其他治療劑為核苷抑制劑。 ’其他治療劑為干擾素。 他/σ療劑為HC V複製酶抑制劑。 ’其他治療劑為反義藥劑。 其他治療劑為治療性疫苗。 其他〜療劑為病毒粒子產生抑制劑。 ’其他治療劑為抗體療法。
在另一實施例令 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 在另一實施例中 劑0 ’其他治療劑為HCV NS2抑制劑。 ’其他治療劑為HCV NS4A抑制劑。 ’其他治療劑為HCV NS4B抑制劑。 ’其他治療劑為HCV NS5A抑制劑。 ’其他治療劑為HCV NS3解螺旋酶抑制 在另一實施例中’其他治療劑為HCV IRES抑制劑。 在另一實施例中，其他治療劑為HCV p7抑制劑。 在另一實施例中，其他治療劑為HCV進入抑制劑。 在另一實施例中，其他治療劑為HCV組裝抑制劑。 在一個實施例中，其他治療劑包含病毒蛋白酶抑制劑及 病毒聚合酶抑制劑。 在另一實施例中，其他治療劑包含病毒蛋白酶抑制劑及 免疫調節劑。 在另一實施例中，其他治療劑包含聚合酶抑制劑及免疫 調節劑。 163528.doc -151 - 201247694 在另一實施例中，其他治療劑包含病毒蛋白酶抑制劑及 核苷。 在另一實施例中，其他治療劑包含免疫調節劑及核皆。 在一個實施例中，其他治療劑包含HCV蛋白酶抑制劑及 HCV聚合酶抑制劑。 在另一實施例中，其他治療劑包含核苷及HCV NS5 A抑 制劑。 在另一實施例中，其他治療劑包含病毒蛋白酶抑制劑、 免疫調節劑及核苷。 在另一實施例中，其他治療劑包含病毒蛋白酶抑制劑、 病毒聚合酶抑制劑及免疫調節劑。 在另一實施例中，其他治療劑為病毒α坐。 適用於本發明之組合物及方法的HCV聚合酶抑制劑包括 (但不限於）\^>-19744()^>^1;11八^1>〇?11&1!113)、？81-7851(?11〇111133361;)、 RG7128(Roche/Pharmasset)、PSI-7977(Pharmasset)、PSI-938(Pharmasset)、PSI-879(Pharmasset)、PSI-661(Pharmasset)、PF-868554/ 非利布韋（^1比\^卜)(？£^61〇、¥(：11-759/¥乂-759(ViroChem Pharma/Vertex) ' HCV-371(Wyeth/VirroPharma) > HCV-796(Wyeth/ViroPharma) 、 IDX-184(Idenix) 、 IDX-375(Idenix)、NM-283(Idenix/Novartis)、GL-60667(Genelabs)、JTK-109(Japan Tobacco)、PSI-6130(Pharmasset)、R1479(Roche)、R-1626(Roche)、R-7128(Roche)、MK-0608(Isis/Merck)、 INX-8014(Inhibitex) ' INX-8018(Inhibitex) ' INX-189(Inhibitex) ' GS 9190(Gilead)、A-848837(Abbott)、ABT-333(Abbott)、ABT- 163528.doc -152- 201247694 072(Abbott)、A-837093(Abbott)、BI-207127(Boehringer-Ingelheim)、 BILB-1941(Boehringer-Ingelheim) 、MK-3 281 (Merck)、 VCH-222/VX-222(ViroChem/Vertex)、VCH-916(ViroChem)、VCH-716(ViroChem) 、 GSK-71185(Glaxo SmithKline)、 ANA598(Anadys)、GSK-625433(Glaxo SmithKline)、XTL- 2125(XTL Biopharmaceuticals)，及 Ni 等人，
Opinion in Drug Discovery and Development, 7(4):446 (2004) ; Tan 等人，Λ/^iwre 1:867 (2002)，及
Beaulieu 等人，Cwrrewi 5:83 8 (2004)中所揭示之HCV聚合酶抑制劑。
適用於本發明之組合物及方法的其他HCV聚合酶抑制劑 包括（但不限於）國際公開案第WO 08/082484號、第WO 08/082488號、第 WO 08/083351 號、第 WO 08/136815號、 第 WO 09/032116 號、第 WO 09/032123 號、第 WO 09/032124號及第WO 09/032125號中所揭示之HCV聚合酶 抑制劑；及以下化合物：
及其醫藥學上可接受之鹽。 適用於本發明之組合物及方法的干擾素包括（但不限於） 干擾素a-2a、干擾素a-2b、干擾素aeon-1及PEG-干擾素α 結合物。「PEG-干擾素a結合物」為共價連接於PEG分子之 163528.doc -153- 201247694 干擾素α分子。說明性PEG-干擾素α結合物包括呈聚乙二醇 化干擾素a-2a形式之干擾素〇1-23(11〇£61>〇111^’11〇££'1118111^-Roche，Nutley，New Jersey)(例如以商標名 Pegasys™ 出 售）、呈聚乙二醇化干擾素a-2b形式之干擾素α-2b(IntronTM，來自 Schering-Plough Corporation)(例如以商 標名 PEG-IntronTM 自 Schering-Plough Corporation 出售）、干 擾素a-2b-XL(例如以商標名PEG-IntronTM出售）、干擾素α-2c(Berofor Alpha™ ，Boehringer Ingelheim, Ingelheim, Germany)、PEG-干擾素 X(Bristol-Myers Squibb 及 ZymoGenetics)、干擾素a-2b α融合多肽、與人類血液蛋白 質白蛋白融合之干擾素（Albuferon™，Human Genome Sciences)、ω 干擾素（Intarcia)、羅特隆（Locteron)控制釋放 干擾素（Biolex/OctoPlus)、拜奧門德（Biomed)-510(co 干擾 素）、Peg-IL-29(ZymoGenetics)、羅特隆€尺(0(^〇卩1115)、11-7025(Roche)、IFN-a-2b-XL(Flamel Technologies)、伯利羅 豐（belerofon)(Nautilus)及藉由測定天然產生之干擾素α的 共同序列所定義之複合干擾素（Infergen™，Amgen， Thousand Oaks，California)。 適用於本發明之組合物及方法的抗體治療劑包括（但不 限於）對IL-10具特異性之抗體（諸如美國專利公開案第 US2005/0101770號中所揭示之抗體-人類化12G8，一種針 對人類IL-10之人類化單株抗體，含有編碼人類化12G8輕 鏈及重鏈之核酸的質體分別以寄存編號PTA-5923及PTA-5922寄存於美國菌種保存中心（American Type Culture 163528.doc -154- 201247694
Collection，ATCC))及其類似物。 適用於本發明之組合物及方法的病毒蛋白酶抑制劑的實 例包括（但不限於）HCV蛋白酶抑制劑。 適用於本發明之組合物及方法的HCV蛋白酶抑制劑包括 (但不限於）以下中所揭示之HCV蛋白酶抑制劑：美國專利 第 7,494,988 號、第 7,485,625 號、第 7,449,447 號、第 7,442,695號、第 7,425,576號、第 7,342,041號、第 7,253，160 號、第 7,244,721 號、第 7,205,330 號、第 7，192,957 號、第 7，186,747號、第 7，173,057號、第 7，169,760號、第 7,012,066 號、第 6,914,122 號、第 6,911，428 號、第 6,894,072 號、第 6,846,802號、第 6,838,475號、第 6,800,434號、第 6,767,991 號、第 5,017,380 號、第 4,933,443 號、第 4,812,561 號及第 4,634,697號；美國專利公開案第1^20020068702號、第 US20020160962 號、第 US20050119168 號、第 US20050176648 號、第 US20050209164 號、第 US20050249702 號及第 US20070042968號；及國際公開案第WO 03/006490號、第 WO 03/087092號、第 W0 04/092161 號及第 WO 08/124148 號。 適用於本發明之組合物及方法的其他HCV蛋白酶抑制劑 包括（但不限於）VX-950(特拉派韋（Telaprevir)，Vertex) ' VX-500(Vertex)、VX-813(Vertex)、VBY-376(Virobay)、 BI-201335(Boehringer Ingelheim) > TMC-435(Medivir/Tibotec) ' ABT-450(Abbott/Enanta)、TMC-435350(Medivir)、RG7227(丹 諾普韋（Danoprevir) ， InterMune/Roche) 、 EA-058 163528.doc -155- 201247694 (Abbott/Enanta) 、 EA-063(Abbott/Enanta) 、 GS-9256 (Gilead)、IDX-320(Idenix)、ACH-1625(Achillion)、ACH-2684(Achillion) 、 GS-9132(Gilead/Achillion) 、 ACH-1095(Gilead/Achillon)、IDX-136(Idenix)、IDX_316(Idenix)、 ITMN-8356(InterMune)、ITMN-8347(InterMune)、ITMN-8096(InterMune)、ITMN-7587(InterMune)、BMS-650032 (Bristol-Myers Squibb) 、VX-985(Vertex)及 PHX1766 (Phenomix) o 適用於本發明之組合物及方法的HCV蛋白酶抑制劑的其 他實例包括（但不限於）以下化合物：
163528.doc 156 201247694
163528.doc -157- 201247694
163528.doc -158- 201247694
及其醫藥學上可接受之鹽。
適用於本發明之組合物及方法的病毒複製抑制劑包括 (但不限於）HCV複製酶抑制劑、IRES抑制劑、NS4A抑制 劑、NS3解螺旋酶抑制劑、NS5A抑制劑、NS5B抑制劑、 病毒*坐、AZD-2836(Astra Zeneca)、偉拉咪定（viramidine)、A-831 (Arrow Therapeutics) 、EDP-239(Enanta) 、ACH-2928(Achillion)、GS-5885(Gilead);反義藥劑或治療性疫 苗。 適用作本發明之組合物及方法中之第二其他治療劑的病 毒進入抑制劑包括（但不限於）PR〇-206(Progenics)、REP-9C(REPICor)、SP-30(Samarit.an Pharmaceuticals)及 ITX- 163528.doc •159- 201247694 5061(iTherx) ° 適用於本發明之組合物及方法的HCV NS4A抑制劑包括 (但不限於）美國專利第7,476,686號及第7,273,885號；美國 專利公開案第US20090022688號；及國際公開案第WO 2006/019831號及第WO 2006/019832號中所揭示之HCV NS4A抑制劑。適用作本發明之組合物及方法中之第二其 他治療劑的其他HCV NS4A抑制劑包括（但不限 於）AZD2836(Astra Zeneca)、ACH-1095(Achillion)及 ACH-
806(Achillion) 〇 適用於本發明之組合物及方法的HCV NS5A抑制劑包括 (但不限於）ACH-2928(Achilon)、A-832(Arrow Therpeutics)、 AZD-7295(Astra Zeneca/Arrow)、GS-5885(Gilead)、PPI-461(Presidio)、PPI-1301(Presidio)、BMS-824383(Bristol-Myers Squibb)及BMS-790052(Bristol-Myers Squibb)。適用 作本發明之組合物及方法中之第二其他治療劑的其他HCV NS4A抑制劑包括（但不限於）國際公開案第WO 2010/111483 號中所揭示之HCV NS4A抑制劑及以下化合物：
163528.doc 160· 201247694
及其醫藥學上可接受之鹽。 適用於本發明之組合物及方法的HCV複製酶抑制劑包括 163528.doc -161 - 201247694 (但不限於）美國專利公開案第US20090081636號中所揭示 之HCV複製酶抑制劑。 適用於本發明之組合物及方法的治療性疫苗包括（但不 限於）IC41(Intercell Novartis)、CSL123(Chiron/CSL)、GI 5005(Globeimmune) 、TG-4040(Transgene) 、GNI-103 (GENimmune)、亥帕瓦西（Hepavaxx)C(ViRex Medical)、 ChronVac-C(Inovio/Tripep)、PeviPROTM(Pevion Biotect)、 HCV/MF59(Chiron/Novartis) ' MBL-HCVl(MassBiologics)、GI-5005(GlobeImmune)、CT-011(CureTech/Teva)及西瓦司 (Civacir)(NABI) » 適用於本發明之組合物及方法的其他治療劑之實例包括 (但不限於）利托那韋（Ritonavir)(Abbott) 、TT033 (Benitec/Tacere Bio/PHzer)、司瑞那（Sirna)-034(Sirna Therapeutics)、GNI-104(GENimmune)、GI-5005 (Globelmmune)、 IDX-102(Idenix) ' Levovirin™(ICN Pharmaceuticals, Costa Mesa, California)；胡瑪司（Humax)(Genmab) 、 ITX-2155(Ithrex/Novartis) ' PRO 206(Progenics)、HepaCide-I(NanoVirocides)、MX3235(Migenix)、SCY-635(Scynexis); KPE02003002(Kemin Pharma)、來諾塔（Lenocta)(VioQuest Pharmaceuticals)、IET-干擾素增強療法（Transition Therapeutics)、日達仙（Zadaxin)(SciClone Pharma)、VP 50406™(Viropharma, Incorporated, Exton, Pennsylvania)； 他立韋林（Taribavirin)(Valeant Pharmaceuticals);硝’ e坐尼特 (Nitazoxanide)(Romark);德彪（Debio)025(Debiopharm); 163528.doc -162- 201247694 GS-9450(Gilead) ； PF-4878691 (Pfizer) ； ANA773(Anadys)； SCV-07(SciClone Pharmaceuticals) ； NIM-88 1 (Novartis)； ISIS 14803™(ISIS Pharmaceuticals, Carlsbad, California)； Heptazyme™(Ribozyme Pharmaceuticals, Boulder, Colorado);
Thymosin™(SciClone Pharmaceuticals, San Mateo, California) ; Maxamine™ (Maxim Pharmaceuticals, San Diego, California) ； NKB-122(JenKen Bioscience Inc., North Carolina);阿利那（Alinia)(Romark Laboratories)、 INFORM-l(R7128與ITMN-191之組合）；及黴酚酸嗎啉乙 SI (mycophenolate mofetil)(Hoffman-LaRoche, Nutley, New Jersey) o 用於治療或預防HCV感染之本發明組合療法中所用之其 他藥劑的劑量及給藥方案可由主治臨床醫師在考慮以下因 素下確定：藥品說明書中之批准劑量及給藥方案；患者之 年齡、性別及一般健康狀況；及病毒感染或相關疾病或病 症之類型及嚴重性。當組合投與時，2'-氰基取代之核苷衍 生物及其他藥劑可同時或依序投與（亦即，於同一組合物 中或於相繼投與之各別組合物中）。此在組合之組分以不 同給藥時程給與（例如一種組分每日投與一次且另一種組 分每六小時投與一次）時或在較佳醫藥組合物不同（例如一 者為錠劑且一者為膠囊）時尤其適用。因此，包含各別劑 型之套組為有利的。 一般而言，至少一種2'-氰基取代之核苷衍生物單獨或以 組合療法投與時之總日劑量可在約1至約2500毫克/天範圍 163528.doc -163- 201247694 内，但視治療目標、患者及投藥途徑而定將必然發生變 化。在一個實施例中，劑量為約1 0至約1000毫克/天，以 單次劑量或2-4個分次劑量投與。在另一實施例甲，劑量 為約1至約500毫克/天，以單次劑量或2-4個分次劑量投 與。在另一實施例中’劑量為約1至約100毫克/天，以單 次劑量或以2-4個分次劑量投與。在另一實施例中，劑量 為約1至約5 0毫克/天，以單次劑量或以2-4個分次劑量投 與。在另一實施例中，劑量為約500至約1 500毫克/天，以 單次劑量或以2-4個分次劑量投與。在另一實施例中，劑 量為約500至約1000毫克/天，以單次劑量或以2-4個分次劑 量投與。在另一實施例中，劑量為約1〇〇至約5〇〇毫克/ 天，以單次劑量或以2-4個分次劑量投與。 在一個實施例中’當其他治療劑為INTRON-A干擾素α 2b(可購自Schering-Plough Corp.)時，此藥劑係藉由每週三 次以3 MIU(12 mcg)/0.5 mL經皮下注射24週或48週（對於第 一次治療）來投與。 在另一實施例中，當其他治療劑為聚乙二醇化PEG_ INTRON干擾素 a2b(可購自 Schering-Pl0Ugh Corp.)時，此 藥劑係藉由每週以1.5 mcg/kg(每週40至150 mcg範圍内）經 皮下注射至少24週來投與。 在另一實施例中’當其他治療劑為ROFERON A干擾素 a2a(可購自Hoffmann-La Roche)時，此藥劑係藉由每週= 次以3 MIU(11.1 mcg/mL)經皮下或肌肉内注射至少48至52 週’或者每週二次以6 MIU注射12週、繼而每週三次以3 I63528.doc -164- 201247694 MIU注射36週來投與。 在另一實施例中，當其他治療劑為聚乙二醇化 PEGASUS干擾素 a2a(可講自 Hoffmann-La Roche)時，此藥 劑係藉由每週一次以180 mcg/1 mL或180 mcg/0.5 mL經皮 下注射至少24週來投與。 在另一實施例中，當其他治療劑為INFERGEN干擾素 aeon-1(可購自Amgen)時，此藥劑係藉由每週三次以9 meg 經皮下注射24週（對於第一次治療）來投與且每週三次以至 多1 5 meg經皮下注射24週（對於非反應性或復發治療）來投 與。 在另一實施例中，當其他治療劑為病毒唑（以REBETOL 病毒。坐購自Schering-Plough或以COPEGUS病毒β坐購自 Hoffmann-La Roche)時，此藥劑係以約600至約1400毫克/ 天之曰劑量投與至少24週。 在一個實施例中，一或多種本發明化合物與一或多種選 自以下之其他治療劑一起投與：干擾素、免疫調節劑、病 毒複製抑制劑、反義藥劑、治療性疫苗、病毒聚合酶抑制 劑、核苷抑制劑、病毒蛋白酶抑制劑、病毒解螺旋酶抑制 劑、病毒聚合酶抑制劑、病毒粒子產生抑制劑、病毒進入 抑制劑、病毒組裝抑制劑、抗體療法（單株或多株）及適用 於治療RNA依賴性聚合酶相關病症之任何藥劑。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與一或多種選 自以下之其他治療劑一起投與：HCV蛋白酶抑制劑、HCV 聚合酶抑制劑、HCV複製抑制劑、核苷、干擾素、聚乙二 163528.doc -165- 201247694 醇化干擾素及病毒唑。組合療法可包括此等其他治療劑之 任何組合。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與一種選自 HCV蛋白酶抑制劑、干擾素、聚乙二醇化干擾素及病毒唾 之其他治療劑一起投與。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與兩種選自 HCV蛋白酶抑制劑、HCV複製抑制劑、核苷、干擾素、聚 乙二醇化干擾素及病毒唑之其他治療劑一起投與。 在另實施例中，-或多種本發明化合物與HCV蛋白酶 抑制劑及病毒。坐-起投與。在另—特定實施例中，一或多 種本發明化合物與聚乙二醇化干擾素及病毒唾一起投與。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與三種選自 蛋白酶抑制劑、HCV複製抑制劑、核苦、干擾素、聚 乙二醇化干擾素及病毒唑之其他治療劑一起投與。 在一個實施例中，一或多種本發明化合物與一或多種選 自HCV聚合酶抑制劑、病毒蛋白酶抑制劑、干擾素及病毒 複製抑制劑之其他治療劑一起投與。在另一實施例中，— 或多種本發明化合物與一或多種選自HCV聚合酶抑制劑、 病毒蛋白酶抑制劑、干擾素及病毒複製抑制劑之其他治療 :一，投與。在另-實施例中，—或多種本發明化合物與 或夕種選自HCV聚合酶抑制劑、Hcv NS5A抑制劑、病 毒蛋白酶抑·、干擾素及病毒。坐之其他治療劑一起投 與。 在一個實施例中，-或多種本發明化合物與一種選自 163528.doc 201247694
Hcv聚合酶抑制劑、病毒蛋白酶抑制劑、干擾素及病毒複 製抑制劑之其他治療劑一起投與。在另一實施例中，一或 夕種本發明化合物與病毒》坐一起投與。 在一個實施例中，一或多種本發明化合物與兩種選自 HCV聚合酶抑制劑、病毒蛋白酶抑制劑、干擾素及病毒複 製抑制劑之其他治療劑一起投與。 在另一實施例中’一或多種本發明化合物與病毒唑、干 擾素及另一治療劑一起投與。 在另一貫施例中’一或多種本發明化合物與病毒嗤、干 擾素及另一治療劑一起投與，其中該另一治療劑選自HCV 聚合酶抑制劑、病毒蛋白酶抑制劑及病毒複製抑制劑。 在另一實施例中’一或多種本發明化合物與病毒唑、干 擾素及病毒蛋白酶抑制劑一起投與。 在另一實施例中’一或多種本發明化合物與病毒唑、干 擾素及HCV蛋白酶抑制劑一起投與。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與病毒唑、.干 擾素及保斯派韋（boceprevir)或特拉派韋一起投與。 在另一實施例中，一或多種本發明化合物與病毒唑、干 擾素及HCV聚合酶抑制劑一起投與。 在另一實施例中’一或多種本發明化合物與聚乙二醇化 干擾素α及病毒唑一起投與。 組合物及投藥 2’ -氰基取代之核音讨生物由於其活性而適用於獸醫及人 類醫學。如上所述’ 21-氰基取代之核苷衍生物適用於治療 163528.doc -167- 201247694 或預防有需要之患者的HCV感染。 當投與至患者時，2，-氰基取代之核芽衍生物可作為包含 醫藥學上可接受之載劑或媒劑之組合物的組分來投與。本 發明提供醫藥組合物’其包含有效量之至少一種2,_氰基取 代之核苦衍生物及醫藥學上可接受之載劑◎在本發明之醫 藥組合物及方法中，活性成分通常以與針對預期投藥形式 適當選擇之適合載劑物質混合且按照習知醫藥實踐來投 與’該投藥形式亦即口服鍵劑、膠囊（固體填充、半固體 填充或液體填充膠囊）、粉末構造、口服凝膠、酏劑、分 散性顆粒、糖锻、懸浮液及其類似形式。舉例而言對於 以錠劑或膠囊形式經口投與’活性藥物組分可與任何口服 無毒醫藥學上可接受之惰性載劑組合，諸如乳糖、澱粉、 嚴糖、纖維素、硬脂酸鎮、4酸氮詞、硫酸弼、滑石、甘 露糖醇、乙醇(液體形式)及其類似物。固體形式製劑包括 粉末、錠劑、分散性顆粒、膠囊、扁囊劑（eaehets)及检 劑。粉末及錠劑可包含約0.5至約95%本發明組合物。錠 劑、粉末、扁囊劑及膠囊可以適用於經口投與之固體劑型 使用。 此外’需要或必要時，亦可蔣搞人#人 』將適合黏合劑、潤滑劑、崩 解劑及著色劑併入混合物中。镝人針人w ^ T 週合黏合劑包括澱粉、明 膠、天然糖、玉米甜味劑、夭鈇a人上、_ J天然及合成膠（諸如阿拉伯據 (acacia))、海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇及蠟。紫 於用於此等劑型之湖滑劑’尤其可提及侧酸1甲酸納、 乙酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括澱粉、曱基㈣ -168- 163528.doc 201247694 素、瓜爾膠及其類似物。適當時’亦可包括甜味劑、調味 劑及防腐劑。 液體形式製劑包括溶液、懸浮液及乳液，且對於非經腸 注射液，可包括水或水-丙二醇溶液。 液體形式製劑亦可包括供鼻内投與之溶液。 亦包括欲在臨用前不久轉化為供經口或非經腸投與之液 體形式製劑的固體形式製劑。該等液體形式包括溶液、懸 浮液及乳液。
為製備栓劑，首先使低熔點蠟（諸如脂肪酸甘油酯或可 可脂之混合物)熔融，且藉由攪拌使活性成分均勻地分散 於其中。隨後將熔融之均勻混合物傾入適當尺寸模具中， 使其冷卻且從而固化。 〃 另外，本發明之組合物可以持續釋放形式調配以提供隹 何一或多種組分或活性成分的控速釋放來最佳化治療作用 、，即抗病脅活性及其類似治療作用）。用於持續釋放之 =型包括含有具不同崩解速率之層的分層錠劑或 分且定形為鍵劑形式或谬囊的控制釋放聚合物基 聚合物基質。 ’有4經浸潰或經囊封之多孔 在一個實施例令 衍生物^ ，經口投與一 或多種2'-氰基取代之核 苷 在另一實施例中 核苷衍生物。 在一個實施例中 經靜脈内投與一或多種2，-氰基取代之 包含至少一種2，·氰基取代之核苷衍生 I63528.doc -169- 201247694 物之醫藥製劑呈單位劑型。在該劑型中，製劑再分為含有 有效量活性組分之單位劑量。 組合物可分別根據習知混合、製粒或塗佈方法來製備， 且在-個實施例中，本發明組合物可含有約〇ι%至約9州 之2，-氰基取代之核苦衍生物（以重量或體積計）。在各實施 例中，本發明組合物在一個實施例中可含有約1%至約7〇% 或約5%至約60%之21_氮絲代之核普衍生物（以重量或體 積計）。 單位劑量製劑中2，-氰基取代之核苦衍生物之量可在約工 mg至約2500 mg之間變化或調整。在各實施例中，該量為 約10 mg至約1000 mg、i mg至約5〇〇 mg、i叫至約1〇〇呵 及1 mg至約loo mg。 為方便起見，必要時，總日劑量可在日間分成數份且逐 份投與。在一個實施例中，日劑.量以整份投與。在另一實 施例中’總日劑量以兩個分次劑量經24小時之時期投與。 在另一實施例中’總日劑量以三個分次劑量經24小時之時 期投與。在另一實施例中，總曰劑量以四個分次劑量經24 小時之時期投與。 2'-氰基取代之核苷衍生物之投藥量及頻率將根據主治臨 床醫師在考慮諸如患者年齡、病狀及體型以及所治療症狀 之嚴重性的因素下所作出之判斷來調節。一般而言，2，_氰 基取代之核苷衍生物之總日劑量在約0· 1至約2000毫克/天 之範圍内，但視治療目標、患者及投藥途徑而定將必然發 生變化。在一個實施例中，劑量為約1至約200毫克/天， 163528.doc •170· 201247694 以單次劑量或以2-4個分次劑量投與。在另一實施例中， 劑量為約10至約2000毫克/天，以單次劑量或以2·4個分次 劑量投與。在另一實施例中，劑量為約1〇〇至約2〇〇〇毫克/ 天，以單次劑量或以2_4個分次劑量投與。在另一實施例 中，劑量為約500至約2000毫克/天，以單次劑量或以2_4個 分次劑量投與。
本發明之組合物可進一步包含一或多種選自上文所列治 療劑之其他治療劑。因此’在—個實施例中，本發明提供 如下組合物’其包含：⑴至少—種2，·氰基取狀核普衍生 物或其醫藥學上可接受之鹽；(Η)—或多種不為2，_氰基取 代之核*衍生物之其他治療劑；及(m)醫藥學上可接受之 載劑’其令該等物質在組合物中之量可一起有效治療hcv 感染。 在個實施例中，本發明提供包含式⑴化合物及醫藥學 上可接受之載劑的組合物。 η施例中’本發明提供如下組合物，其包含式⑴ 化合物、醫藥學上可接受之載劑及選自由HCV抗病毒劑、 免疫調節劑及抗感染劑組成之群的第二治療劑。 在另實施例中，本發明提供如下組合 化合物、醫藥學卜可拉必 八匕3式（1) '、了接文之載劑及兩種其他治療劑，該等 其他治療劑各獨立地選自 抗感染劑組成之群。 “，劑、免疫調節劑及 套組 在一個態樣中 本發明提供-種套組，纟包含治療有效 163528.doc • 171 - 201247694 量之至；一種2’-氰基取代之核苷衍生物或該化合物之醫藥 干上可接文之鹽、溶劑合物、酯或前藥及醫藥學上可接受 之載劑、媒劑或稀釋劑。 在另態樣中，本發明提供一種套組，其包含一定量之 至少一種2，-氰基取代之核苷衍生物或該化合物之醫藥學上 了接又之鹽、溶劑合物、酯或前藥及一定量之至少一種上 列其他治療劑，其中該兩種或兩種以上活性成分之量產生 所要治療作用。在—個實施例中，在同—容器中提供—或 多種2’-氰基取代之核苷衍生物及一或多種其他治療劑。在 一個實施例中，在各別容器中提供一或多種2,_氰基取代之 核苷衍生物及一或多種其他治療劑。 本發明不欲受實例中所揭示且意欲作為本發明之數個態 樣之說明的特定實施例所限制，且功能上等效之任何實施 例均屬於本發明之範疇。實際上，除本文所示及所述以 外’本發明之各種修改將為熟習此項技術者顯而易見且欲 屬於隨附申請專利範圍之範疇。 本文中已引用許多參考文獻’其全部揭示内容以引用的 方式併入本文中。 163528.doc 172- 201247694 序列表 <110> 美商默沙東公司 <120> 2·-氰基經取代核苷衍生物及其用於治療病毒性疾病之方法 <130> 23065-WO-PCT <140> 101113292 <141> 2012-04-13 <150> 61/475,071 <151> 2011-04-13 <160> 9 <170> Patentln version 3.5 c210> 1 <211> 17 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 5B.2F引子 <400> 1 atggacaggc gccctga
<210> 2 <211> 20 <2X2> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 5B.2R 引子 <400> 2
ttgatgggca gcttggtttc <210> 3 <211> 17 <212> DNA <213> 人工序列 163528-序列表.doc 201247694 <220> <223> ,^ΑΜ標記之探針 <40〇> 3 cacgccatgc gctgcgg 11 0 12 3 1X11 2 2 2 2 VVV < 4 20 DNA 人工序列 <220> <223> F3212，正向引子 <400> 4 cacccaagaa cagggtttgt 20 <210> 5 <211> 21 <212> DNA <213> 人工序列 <220> R3319，反向引子 <400> 5 tggccatggg tatgttgttaa 21 <210> 6 <211> 19 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> ,^FAM-TAMRA 標記之探針 1 <400> 6 ttaccgggct ctgccatct 19 0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < <
7 17 DNA 人工序歹>J
<220> <223> COXII，正向引子 <400> 7 tgcccgccat catc'cta 163528-序列表.doc -2- 17 201247694 <210> 8 <211> 23 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> COXII，反向引子 <400> δ cgtctgttat gtaaaggatg cgt <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 經FAM-TAMRA標記之探針2 <400> 9 tcctcatcgc cctcccatcc c
163528-序列表.doc

Claims (1)

  1. 201247694 七、申請專利範圍： 1. 一種化合物，其具有結構：
    或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： X為 0、S 或 CH2 ; B為天然或非天然嘌呤或嘧啶鹼基，或B選自下列基
    Y為 N 或-C(R19)-； 、IR13 Η οππριο I I 為 1Κ C ο Η SSCP I Η ΟΗΡΙΟ 編 ο I Η ΟΗΡΙΟ Ηο I Η οππρIο - ο 一 Η ο=ρIο t ο I Η ο=ρIο C S ζ 25 o==p—N(R
    ο R17 或
    ο I63528.doc 201247694 R2為Η或
    或R1與R2接合形成具有下式之基團： \ /0R18 \ /N(R2〜 p 、p’ < Ο ; 以為匕心烷基、CVC6鹵烷基、c〗-C6羥基烷基、c2-c6 稀基、C2-C6快基或〇3-〇：7環烧基； R4、R5、R7及R8各獨立地為H、Ci_C6烧基、 院基、C〗-C6經基烧基、_ 基、_〇r20、_sr2(^_n(r20)2 ; R6、R9、R10、R11各獨立地選自 Η、crC6烧基、C2-C6 烯基、C2-C6炔基、C3-C7環烷基、5或6員單環雜芳 基、9或1〇員雙環雜芳基、鹵基、_〇r20、_sr20、_s(〇讯20 ' -S(0)2R2° ' -S(O)2N(R20)2 > -NHC(O) OR20 > -NHC(O)N(R20)2 Ci-c6函炫基、Ci-c6羥基烷基、-〇_(Ci_C6齒烷基）、 -CN、-N〇2、-N(R20)2、·(CVCW 院基 H5 或 6 員單 環雜芳基）、-NHCCVC6伸烷基）-(9或1〇員雙環雜芳 基）、-C(0)R2°、-C(〇)〇 R2。、-C(O)N(R20)2&_nhc(〇)r20， 其中該CrC6烯基及該（：2_(：6炔基可視情況經鹵基取 代； R12為 Η 或-((ν(：6 伸烷基）-T-R21 ; R13為Η或-(C丨-C6伸烷基）-T-R2丨，或R!2#Ri3可接合 而在R12及R13所連接之氧原子之間形成〇2<4伸烷基， 163528.doc 201247694 其中該Cs-C4伸烷基經至少一個c6-Ci〇芳基取代； R14為Η、C6-C1()芳基、5或6員單環雜芳基或9或10員 雙環雜芳基，其中該C6_C1()芳基、該5或ό員單環雜芳 基及該9或1 〇員雙環雜芳基可視情況經r22取代； R為Η、CVCe烷基、C3-C7環烷基、苯基或苯曱 基，其中該CVC6烷基可視情況經選自鹵基、_〇r2〇、_SR2〇 、胍基、-N(R2°)2、-C(；0)0R2()、-c⑼N (R20)2、-NHC(0)R20、 5或6員單環雜芳基及9或1〇員雙環雜芳基之基團取 φ 代’且其中該苯基及該笨曱基可視情況經多至2個基 團取代，該等基團各獨立地選自Cl-C6烷基、鹵基及 -OR20 ; R為Η、Ci-C^院基、C3-C7環烧基、苯基或苯曱 基’其中該CrC6烧基可視情況經選自鹵基、_〇R2〇、_sr20 、胍基、-N(R2°)2、-C(0)0R2。、_C(0)N (r2〇)2、_nhc(〇)r20 、5或6員單環雜芳基及9或1〇員雙環雜芳基之基團取 代，且其中該苯基及該苯甲基可視情況經多至2個基 9 團取代，該等基團各獨立地選自烷基、鹵基及 -OR20 ; R為Η、C丨-C20烧基、C2-C20稀基、_(c丨-C3伸烧 基）『((VC7環烧基）、-(CVC3伸烧基）m-(C6_Cl。芳基）或 金剛烷基，其中該CrC2。烷基、該cvc^烯基、該C6_Ci〇芳 基及該金剛烷基可視情況經多至三個基團取代，該等 基團各獨立地選自函基、-〇r20、_c(〇)〇r20、CN、 N02、CVC6 li ’院基、CVC6經基烧基、c3_C7環烷基、 163528.doc 201247694 6丨〇芳土 5或6員單環雜芳基、9或1〇員雙環雜芳 基（）2 C(〇)N(r20)2-SR20、-s(0)R20、-S(0)2R2〇、 -S(0)2N(R2°)2、 與L(〇)R“、-NHC(0)0R2°及 -nhc(o)n(r2°)2 ;及 R為H Ci-Ce貌基、c3_c7環烧基、·(〔々伸燒 基）m C6 C1()芳基、5或6員單環雜芳基、9或10員雙環雜 芳基或：
    其中該c6-c10芳基、該5或6員單環雜芳基及該9或1〇 員雙環雜芳基可視情況經多至五個基團取代’該等基 團各獨立地選自Cl-C6烷基、C2_Ce烯基、C2_C6炔基、 鹵基、-OR20、-SR20 Ci-C6羥基烧 Ci-C6鹵烷基 基、-〇-(CrC6函烷基）、-CN、-N02、-N (R20)2、_c(0)〇R20 、-C(〇)N(R20)2及-NHC(〇)R20 ; R19為Η、C丨-C6烷基、（：丨_匚6鹵烷基、Ci_c6羥基烷 基、_ 基、-OR2。、-SR2。、N(R2、、C3_C^院基、C6_Ci〇 ^基、5或6員卓環雜芳基或9或1〇員雙環雜芳美.· R20在每次出現時獨立地為Η、C丨-C,〇烷基、c〗_c6鹵 烷基、CVC6羥基烷基、-(CVC3伸烷基）m_(C3_c7環烷 基）、_(C〗-C3伸院基）m-(C6-C10芳基）、-(Ci-C〕伸貌基）_ (4至7員雜環烷基）、-(C^-C：3伸烷基）m_(5或6員單環雜芳 基）或-((VC3伸烷基）m-(9或10員雙環雜芳基），其中該 163528.doc • 4 · 201247694 CrC7環烷基、該C6-C10芳基、該4至7員雜環烷基、該 5或6員單環雜芳基或該9或10員雙環雜芳基可視情況 經R26取代；
    R21在每次出現時獨立地為H、Ci_c6烷基、Ci_C6^ 烷基、CVC6經基烧基、c2-c6稀基、c2-C6快基、C3-C7 環烷基、Ca-C7環烯基、5或6員單環雜芳基、9或10員 雙環雜芳基、-or20、-ckcvc^烷基）或_叫尺20)2,其 中忒CVC6烯基、該CVC6炔基、該C3_C7環烷基、該。—。環 烯基、該C6-Cl()芳基、該5或6員單環雜芳基及該9或1〇 員雙環雜芳基可視情況經多至五個基團取代，該等基 團各獨立地選自Cl-C6烷基、C2_C6烯基、c2_c6炔基、 南基、-OR2。、-Sr2。、Cl_C6函烷基、C]_C6經基烷 基 _〇-(C】-C6ii 烧基）、_CN、-N〇2、_n(R2〇)2、-C(0)R20 、C2(〇)〇R2°、-C(〇)N (R20)j-NHC(O)R2。； R表不一至五個取代基，各獨立地選自烷 齒基-OR 、_SR20、Ci_c6_ 烧基、Ci C6經基 元基·〇-(〇1-〇6_ 烷基）、-CN、-N02、-N(R20)2、 c(o)or、_c(o)n(r20)2及 _nhc⑼r2〇，或相鄰環碳 原子上之任何兩個R22基團可組合形成-〇-R23-〇·; R23為-[c(R2,2]n·; R24在每次出現時獨立地為Η或Ci_C6烷基； 在每次出現時獨立地為H、Cl-C6烧基、（^6稀 二其块基、c3_C7環院基、_(Ci_C3伸烧基LA-。 方土 4至7員雜環烧基、5或6員單環雜芳基或9或1〇 163528.doc 201247694 員雙環雜芳基’其中該Cl_C6烷基、該c2_c6烯基、該 C2-C6炔基、該(：3-(：7環烧基、該C6-Ci。芳基、該4至7員 雜環烷基、該5或6員單環雜芳基或該9或10員雙環雜 芳基可視情況經R26取代；或兩個R25基團與其所連接 之共同氮原子一起接合形成4至7員雜環烷基； R26表示一至五個取代基，各獨立地選自— 基、C2-C6稀基、C2-C6快基、_ 基、-〇R27、SR27、CVCe 齒烧基、CVC6經基烷基、_〇_(C|_C6齒烷基）、_CN、_n〇2 、-N(R27)2、-C(〇)〇R27、-C(0)N(R27)2&-NHC(0)R27 ; R27在每次出現時獨立地為η、Cl-c6烷基、Cl-Cd 院基、C丨-C6經基烷基' -(c丨_C3伸烷基）m_(c3_c7環烷 基）、-(CVC3伸烷基）m_(C6_Cl〇芳基）、_(C】_C3伸烷基）m_ (4至7員雜環烷基）、伸烷基）m_(5或6員單環雜芳 基）或-(Ci-C3伸烷基）m-(9或10員雙環雜芳基）； R28為Η、烷基、CVQ鹵烷基、（:丨-匕羥基烷 基、c2-c6烯基、C2_C6炔基、C3_C7環垸基、C3_c7環烯 基、5或ό員單環雜芳基、9或1〇員雙環雜芳基、_〇r2〇 、-〇-(<^-(：6鹵烷基）或·N(R2〇)2，其中該^心烯基、該 C2-C6炔基、該c3-c7環烧基、該c3-C7環烯基、該c6-C10 芳基、該5或6員單環雜芳基及該9或10員雙環雜芳基 可視情况經多至五個基團取代，該等基團各獨立地選 自c】-c6院基、c2-c6稀基、c2_c6炔基、鹵基、_〇r20 20 、-SR 、C〗-C6鹵烷基、c〗-C6羥基烷基、鹵 烷基）、-CN、-N〇2、-N(R20)2、-C(0)R2。、_c(0)〇R20 163528.doc -6 - 201247694 、-C(0)N(R2°)2及-NHC(0)R20 ; R29在每次出現時獨立地為H、Cl_C6烷基、Ci_c6_ 烷基、eve：6羥基烷基、_(Cl_C3伸烷基）m_(c3_c7環烷 基）、-(C「C3伸院基)m_(C6_Cl。芳基）、_((Vc3伸烧基V (4至7員雜環烷基）、-(CVC3伸烷基）〇1_(5或6員單環雜芳 基）或-(Ci-C3伸烷基1〇員雙環雜芳基），其中該 CrC7環烷基、該cvClG芳基、該4至7員雜環烷基、該
    5或6員單環雜芳基或該9或1〇員雙環雜芳基可視情況 經R26取代； -SC(S)- T在每次出現時獨立地為_s_、-〇_、_Sc(〇)_、 、-〇C(〇)-及-〇c(s)-; m在每次出現時獨立地為0或i :及 η在每次出現時獨立地為1或2。 2·如請求項1之化合物，其中乂為〇。 3.如請求項1或2之化合物，其令3為：
    及R各獨立地為_ΝΗ2或_Nhc(⑺cH3 ;且R9為_〇 (Ci-C6 烷基）。 月求項1至3中任一項之化合物，其中尺3為曱基。 5.如請求項1之化合物，其具有式： 163528.doc 201247694 B R1 〇 XJ：CH3 R2(f ^CN (la) 或其醫藥學上可接受之鹽 其中： B為：
    0
    NH
    或 r。 i \ΑΛΑ/ R9
    N R10 H 為 R1
    或 Ho I H OypIO - ? H o=plo I 0 1 H OMPIo R2為H，或Ri與R2接合形成具有下式之基團：
    R6及R1G各獨立地為-N(R2())2 ; R9為-〇_(Ci-C：6坑基）； R14為C6-Ci〇芳基，其可視情況經_基取代； R15及R16各獨立地為Η或CrC6烷基； 烷基； R18為C「C6烷基、c3-C7環烷基SC6-Ch)芳基；及 R20在每次出現時獨立地為Η或烷基）。 163528.doc 201247694 6.如請求項1之化合物，其具有式：
    或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： 為 Β Η2 Ν
    ο Ν. Ν
    •ο
    或 Ν .ο
    _2 Ν R1為： ch3 〇 R17。、入 ν_Μ! Η以； R9 為-OH 或-O-CCVCe 烷基）； R14為苯基，其可視情況經多至2個可相同或不同之 鹵基取代；及 尺”為心-匕烷基。 如請求項1之化合物，其具有式： η Β
    163528.doc -9- 201247694 或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： B為：
    R9為-OH或烷基）；及 R18為芳基或匕-心烷基。 8.如請求項1之化合物，其具有式：
    或其醫藥學上可接受之鹽， 其中： H2 N-
    N N—
    Ό ΟΛι±
    或 .ο
    2 N 為 R Ho H onupI〇 Ho I Η OHPIO I 0 1 H OHPI〇 或 Ho I Η ΟΜΠΡΙΟ- ο **Η ο=ρIο - ο I Η ΟΗηρI〇 及 R9為-OH或-CKCVC^烷基）。 163528.doc -10· 201247694
    9.如請求項1至8中任一項之化合物，其中]3為：
    10.如請求項1至4中任一項之化合物，其中Ri為η或 eH3 〇 R17〇rVH ’ 0 OR14 ’或R與R接合形成具有下式之基團
    其中R14為C6-C10芳基， 中所述經取代；RngCl_c6烷基 c3-c7環烷基或C6_Ci〇芳基。 其可視情況如請求項i ;且R18為Ci-C6燒基、 11.如請求項1至6中任一項之化合物，其中Ri為 CH〇 r17〇Y^\n__|__sS H Li，其中R14為萘基或苯基，其可視情況經？ 或C1取代；且！^7為甲基、乙基、異丙基基。 正丁基或新戊 12. 如請求項7之化合物，其中R18為c_6烷基。 13. 如請求項1至4中任一項之化合物，其中Rl&R2接合形成 163528.doc • 11 · 201247694 具有下式之基團： \ /N(r29)2
    14.如請求項1之化合物，其為以上說明書中編號1-243之化 合物中之任一者。 1 5.如請求項1之化合物，其具有如下結構： . och3 Ύ°Γ κj-o^y %NH2 ζ)Η〇'-' έΝ och3 0 <^X 0=f&' \ °Ύ^ N OEt _ OEt Ύ V κ|〇^/%ΝΗ2 Qh〇'·' έΝ NC nh2 NC (^)h〇'·' eN nh2 (^)h〇'·' 0n
    或其醫藥學上可接受之鹽。 16. —種醫藥組合物，其包含有效量之如請求項1至15中任 163528.doc -12- 201247694 一項之·化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接 受之載劑。 17如請求項16之醫藥組合物，其進一步包含選自由抗 病毒劑、免疫調節劑及抗感染劑組成之群的第二治療 劑。 18.如請求項17之醫藥組合物，其進一步包含選自由蛋 白酶抑制劑、HCV NS5A抑制劑及HCV NS5B聚合酶抑制 劑組成之群的第三治療劑。 # 19· 一種如請求項1至15中任一項之化合物或其醫藥學上可 接受之鹽的用途，其係用於製備在有需要之患者中抑制 HCVNS5A活性或預防及/或治療HCV感染的藥物β 20. —種治療感染HCV之患者的方法，其包含投與有效預防 及/或治療§玄患者HCV感染之量的⑴如請求項1至Η中任 一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或（ii)如請求項16 至18中任一項之組合物的步驟。 21·如請求項20之方法，其進一步包含投與該患者聚乙二醇 馨 化干擾素α及HCV蛋白酶的步驟。 22. 如請求項20之方法，其進一步包含投與該患者病毒唾 (ribavirin)之步驟。 23. 如請求項21之方法’其進一步包含投與該患者病毒哇之 步驟。 24. —種如請求項1至15中任一項之化合物或其醫藥學上可 接受之鹽的用途，其係用於有需要之患者中抑制HCV NS5A活性或預防及/或治療HCV感染的醫藥組合物中。 163528.doc 201247694 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：
    163528.doc
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