TW201202261A - Process for the synthesis of azacitidine and decitabine - Google Patents

Description

201202261 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明涉及阿紮胞苷（azacitidine)[還被稱作胺基 -1 - β - D -呋喃核糖基-丨，3，5 ·三阱-2 (1 //) ·酮]和地西他濱 (decitabine)[還被稱作4_胺基-1-(2-去氧- β-D-呋喃核糖基 -1，3, 5-三畊_ 2(1//)-酮]的合成法。 【先前技術】 與天然核苷具有類似化學結構的多種藥物被用於抗病 毒藥和抗腫瘤藥的領域。 阿紮胞苷，其結構式如下所示’

阿紮胞苷1 是有效用於治療骨髓增生異常症候群（MDS)的抗腫 瘤藥並且它是由FDA批准的對於該疾病的第一種藥。

Collect. Czech. Chem. Commun. 29, 2060( 1 964)φ Μ 次報導了其合成法，該合成法基於起始於適當取代的糖的 s -三畊環的構建，並且也在US3350388中報導。提供氮胞 嘧啶的矽烷化和隨後與核糖衍生物的偶合的合成方案允許 以較少步驟製備阿紮胞苷，氮胞嘧啶的結構式如下所示： 201202261

氮胞嘧啶 2 根據以下所示的合成方案，通常使用在第2位置具有 醯氧基的 D -核糖的衍生物，所述醯氧基根據貝克爾規則 (Baker’s rule)確定了有利於偶合反應中的β異構體的良 好的選擇性。 1 )與下式偶合

2 3 異構體β(1) 異構體a 在科學文獻和專利文獻中顯示按照此合成途徑的多個 實驗步驟。 在1.〇1.(：11611(1.3 5,49 1 ( 1 970)中描述了藉由使矽烷化的 氮胞嘧啶3與三-0-乙醯基-D-呋喃核糖基溴化物反應合成 阿紮胞苷。所指出的產率等於34%，在結晶’後降爲1 1 %。 這樣的產率連同使用像核糖的溴化物衍生物的難於處理的 試劑使得這樣的程序不適於以工業規模製備阿紮胞苷。

Vorbriiggen 和 Niedballa 在 J.Org.Chem.39,3672 (1974) 和US 3 8 1 79 8 0中描述了用於以81%的產率製備保護的阿紮 201202261 胞苷的方法。該文章未指明脫保護後的產率。該方法提供 了氮胞嘧啶與在吡啶中的六甲基二矽氮烷（HMDS)和氯化 三甲基矽烷（TM SCI)的混合物的矽烷化。反應結束時，除去 過量的試劑和吡啶以避免偶合催化劑的失活[見 Vorbriiggen 和 Niedballa J.Org.Chem. 39，3654(1974)]。 這種操作是藉由真空下蒸餾直至液體獲得結晶並用苯 洗滌而進行。 鑒於當處理和攪拌固化的蒸餾殘餘物時遇到的困難和 涉及使用對健康有害的溶劑如苯的問題，這樣的操作如何 在小規模實驗室製備中找到應用是明顯的。 該程序使用四氯化錫作爲偶合催化劑，遵循該程序觀 察到的另一缺陷在於難以將在最終的阿紮胞苷中殘餘的錫 保持在可接受的水準的事實。 對合成阿紮胞苷的這些問題的解決方案的貢獻在 P i s k a 1 a 和 S 〇 r m 的文章中說明[N U c 1 e i c A c i d C h e m i s t r y 435(1978)]:在此情況下，當純化矽烷化的氮胞嘧啶時，使 用較低毒性的溶劑甲苯代替苯。此外，對於隨後的偶合反 應，作者使用乙腈中的三-〇-苯甲醯基-D -呋喃核糠基氯化 物，不添加催化劑。然而，仍存在由矽烷化反應中過量使 用的六甲基二矽氮烷（HMDS)的去除所表明的困難，即使在 此情況下進行所述去除直至獲得固化的殘餘物，並且此 外，藉由引起偶合反應，其中提供了使用實驗室刮勺以將 反應混合物分裂爲小片。明顯地，這樣的方法不可升級爲 201202261 生產藥用阿紮胞苷。 US7038038描述了以下方法：四乙醯基-D-核糖（4)與矽 烷化的氮胞嘧啶（3)反應’該矽烷化的氮胞嘧啶又藉由氮胞 嘧啶與六甲基二矽氮烷（HMDS)在硫酸銨存在下’在加熱下 反應（2小時）而獲得（參見以下所示的合成方案）。

在與四乙醯基核糖偶合之前，過量的甲矽烷基化劑藉 由蒸餾爲殘餘物而除去。偶合反應發生在二氯甲烷中，提 供了三氟甲磺酸三甲基矽酯 （TMSOTf)作爲催化劑的用 途’並具有2小時的持續時間。最後，藉由與甲醇中的甲 醇鈉反應而發生乙醯基的去除。這樣的方法允許以44.9% 的產率生產阿紮胞苷，但該產率也不適於阿紮胞苷以工業 規模生產，因爲需要除去過量的HMDS直至獲得難以攪拌 的糊狀混合物。解決這樣的問題的嘗試可在相同的文獻 (U S 7 0 3 8 0 3 8 )中發現，如在實施例5和實施例6中所示：採 用試劑（HMDS和氯化三甲基矽烷）在乙腈中的混合物進 行矽烷化反應；將作爲偶合催化劑的T M S Ο T f和核糖的四 乙醯基衍生物加入含有矽烷化的核苷鹼基（nucleobase)的 反應混合物以獲得保護的氮胞嘧啶。雖然表現出對合成的 簡化’但這樣的方法導致反應時間的增加（對於矽烷化和 201202261 偶合均爲20小時）並導致降低產率，所述產率對於粗製產 物等於4 1 . 3 %，所述粗製產物的純度或轉化爲阿紮胞苷的 產率未指明，所述阿紮胞苷是將其用作人類使用的活性成 分所需的醫藥水準。 核苷鹼基氮胞嘧啶2還用於合成另一藥物（地西他濱 5)的起始物質，地西他濱的主要適應症是骨髓增生異常症 候群（MDS)。

地西他濱 關於阿紮胞苷的合成所描述的問題還在來源於以下事 實的進一步複雜化的地西他濱的情況下觀察到，所述事實 是’地西他濱的第2 ’位置不存在羥基則不允許利用偶合反 應中當醯化的經基存在於該位置時對異構體β的較大選擇 性（貝克爾規則）。 文獻中存在使用藉由從氮胞嘧啶2的雙矽烷化獲得的 衍生物3 (j艮據以下所示的方案）也用於製備地西他濱。

201202261 還是在這種情況下，爲了避免在該方法隨後的步驟中 可能的干擾，在反應結束時存在的所有揮發性組分都藉由 蒸餾除去（參見實例 US 3 8 1 7980、EP2048151 和 W〇2〇090 8 66 8 7 )。考慮到在濃縮期間的殘餘物易於固.化並 因此攪拌系統可能運轉不規則或被損壞，上述程序不適於 工業水準的生產。在J.Org.Chem.51，3211(1986)中指出的地 西他濱的合成中，將雙矽烷化的氮胞嘧啶加入反應混合 物。即使是這個操作也幾乎不可應用於生產規模，其中， 該操作需要處理對與環境水分接觸敏感的物質》

”偶合 幻脫保護

在US 20 1 0/003 6 1 1 2中描述的是用於合成阿紮胞苷的 方法，所述方法包括氮胞嘧啶與六甲基二矽氮烷（HMDS)的 矽烷化反應，如此獲得的矽烷化的中間體與1 _ 〇 -乙醯基 -2，3,5-三-0-苯甲醯基-β-D-呋喃核糖在乙腈中的偶合反 應，和偶合反應產物隨後的脫保護反應而獲得阿紮胞苷。 矽烷化反應在大量莫耳過量的六甲基二矽氮烷中直接進 行，因此具有高生產成本；此外，如此獲得的矽烷化的中 間體在經過隨後的乙腈中的偶合反應之前必須被分離，這 進一步增加了生產成本。 因此，目前可用於合成源自氮胞嘧啶的核苷的方法仍 201202261 顯示與其可能在工業水準上的用途相關的未解決的問題， 這是明顯的。\ •一 【發明內容.】 以總部在.Via dei Lavoratori 54，20092 CINISELLO B ALSAMO MILAN的CHEMI S.p. Α·的名義對標題爲“合成 阿紮胞苷和地西他濱的方法”的工業發明的描述。 本發明第一次發現了一種用於適於商業生產規模的阿 紮胞苷和地西他濱的合成方法，所述合成方法在不必使用 大量莫耳過量的矽烷化試劑且沒有除去反應結束時仍存在 的過量矽烷化試劑的操作的情況下，能夠允許產物以高產 率和高純度分離。隸屬於本發明的方法的所有操作適於阿 紮胞苷和地西他濱的工業規模的生產’並且可方便地進行 從而避免中間體的建立（workuP)和分離步驟’因此減少 方法的持續時間和改善生產能力。 本發明的實施實例在於根據以下方案製備阿紮胞苷。

催化劑 其中AC表示乙醯基並且R1較佳選自乙醯基和/或苯甲 醯基》 201202261 用於合成地西他濱的相應的方案如下所示：

催化劑 2 3 7 5 .其中R2較佳選自乙醯基、對-甲苯醯基、對-氯-苯甲醯 基和/或對-硝基-苯甲醯基並且X較佳選自烷氧基、醯氧基 或鹵素，較佳爲甲氧基、乙醯氧基或氯原子。 令人驚奇地發現，藉由使用N，0 -雙-三甲基甲矽烷基-三氟乙醯胺（BSTFA)作爲核苷鹼基氮胞嘧啶2的矽烷化試 劑以獲得矽烷化的氮胞嘧啶3，在較低溫度下並且在短時 間內使用低莫耳過量的BSTFA完成矽烷化反應是可能的。 此外還發現，在不必替換溶劑且不必除去過量甲矽烷基化 劑或其反應副產物的情況下，藉由將糖的衍生物和催化劑 簡單地加入矽烷化反應的混合物中而直接進行隨後的偶合 反應是可能的。甚至該第二個反應也在溫和條件下進行並 且其完成發生在不多的幾個小時內》 引起有利地簡化阿紮胞苷和地西他濱的生產方法的本 發明的一個突出的特徵在於這樣的事實，矽烷化的氮胞嘧 陡3不被離析。 此外，最後的脫保護反應可在以下的情況下進行’·不 用必須離析保護的核苷，但在進行適當的溶劑改變之後’ -10- 201202261 藉由使用諸如例如甲醇鈉或氨水的合 先前的偶合反應的混合物。 可選擇地，在仍避免了離析保護 使用現有技術中描述的條件，例如在 後，使用在甲醇中的甲醇鈉或在甲醇 多種有機溶劑可用於矽烷化反應 方法，較佳爲非質子有機溶劑，還更 溶劑，其中可使用二氯甲烷、二氯乙 二氯甲烷和/或乙腈用作溶劑。有機溶 物的量之間的比例不是本方法的關鍵 量（千克）份的氮胞嘧啶可使用3至 有機溶劑。 隸屬於本發明的方法允許避免目 的矽烷化試劑的浪費；事實上，可使 雙矽烷化所規定的量稍稍較高的莫耳 胞嘧啶可使用2至3莫耳的BSTFA， 嘧啶使用2.2至2.5莫耳。 本方法進一步特別有益的方面在 化的氮胞嘧啶的處理被最小化了，所 是在與水和大氣水分接觸時不穩定的 矽烷化反應可在0 °C與反應混合 溫度下進行，較佳在2 5 °C與所述回流 l〇0°c以下的溫度。 適的試劑而直接鹼化 的核苷的情況下，可 簡單的水溶液建立之 中的氨水脫保護。 和偶合以實施本發明 佳爲非矽烷化的有機 院和/或乙腈；較佳， 劑與留下來反應的底 參數，並且對於每重 100體積（升）份的 前使用的方法中特有 用相對於氮胞嘧啶的 量。較佳，每莫耳氮 還更佳，每莫耳氮胞 於這樣的事實：矽烷 述矽烷化的氮胞嘧啶 化合物。 物的回流溫度之間的 溫度之間，還更佳在 -11 - 201202261 藉由在本發明方法的反應條件下操作，氮胞嘧啶的矽 烷化反應在少數幾個小時內完成，並且通常這樣的完成發 生在少於4小時。 在偶合反應中使用具有乙醯化的羥基官能基團 (function)的 D-呋喃核糖的衍生物用於實施本發明合成 阿紮胞苷的方法。這其中可方便地使用的是1，2,3,5 -四- 0-乙醯基-D-呋喃核糖或1-0-乙醯基-2,3,5-三-Ο-苯甲醯基 -D-呋喃核糖商業衍生物，更佳爲使用l，2,3,5-四-0-乙醯基 -D·呋喃核糖。 在第1位置具有離去基團且其他爲乙醯化的羥基官能 基團的D-2-去氧呋喃核糖的衍生物可用於合成地西他濱。 在第1位置的離去基團可以是烷氧基、醯氧基或鹵素，更 佳，該離去基團可以是甲氧基、乙醯氧基或氯，還更佳爲 氯。在醯基中，乙醯基、對-甲苯醯基、對-氯-苯甲醯基和 對硝基-苯甲醯基可方便地用於保護去氧核糖的其他羥基 官能基團；對-甲苯醯基和對-氯-苯甲醯基可較佳地使用。 較佳用於合成地西他濱的商品是1-氯-3,5-二-對-甲苯醯基 -2-去氧-D-呋喃核糖和1-氯-3, 5-雙-對-氯苯甲醯基-2-去氧 -D-呋喃核糖。 路易士酸催化劑的存在促進偶合反應。通常用於此類 反應的催化劑如四氯化錫、四氯化鈦、氯化鋅、醚合三氟 化硼、三氟甲磺酸三甲基矽酯以及全氟丁基磺酸三甲基矽 酯（trimethylsilylnonaflate)是較佳的。三氟甲磺酸三甲 -12- 201202261 基矽酯（TMSTfO)是在偶合反應中作爲催化劑特別佳 的。 仍對於所述偶合反應，反應溫度可由0°C與反應混合 物的回流溫度之間的溫度構成，較佳在2 5 °C與所述回流溫 度之間，還更佳在1 〇O°C以下。在所示反應條件下’在阿 紮胞苷以及地西他濱的情況下，反應都在短的時間內進行 並且通常在小於4小時內完成。 對於兩種產物，偶合反應結束時，藉由用脫醯反應的 溶劑簡單地替換用於偶合的反應溶劑而直接進行最後的脫 保護反應是可能的，所述脫醯反應的溶劑可較佳爲 醇，較佳甲醇。 這樣的方法是極其實用且特別有利的，因爲其在整個 合成序列中允許避免水溶液的使用。考慮到存在於本發明 目標分子中的三阱環與水接觸時快速降解，這樣的結果是 特別有意義的（參見例如J.Med.Chem. 21，204(1978))。 可選擇地，偶合反應結束時，可按照文獻中的教導（例 如參見 J.Org.Chem. 35，491 ( 1 970)、J.Org.Chem. 39, 3 672( 1 974)和US703 803 8 )使用緩衝水溶液洗滌反應混合 物。 在不必藉由色譜法和/或藉由結晶法進行中間體（保護 的核苷）的離析及其純化的情況下，不管在偶合反應結束 時採取的建立的類型’根據本領域中先前已知的方法 (J.Org.Chem. 3 5,49 1 ( 1 9 70) > J.Org.Chem. 3 9,3 67 2( 1 9 74) -13- 201202261 和US7038038)，藉由在C1-C4醇中（較佳爲在甲醇中） 用氨水或甲醇鈉的脫保護而完成合成。 在阿紮胞苷的情況下，藉由使用甲醇作爲脫保護反應 中的溶劑，其在反應期間發生直接結晶而獲得良好品質的 阿紮胞苷（HPLC純度>90%)，產率超過35 %且甚至超過 75%。從DMSO /甲醇混合物中的單次重結晶得到HPLC純 度=99.8%的阿紮胞苷。 甚至在地西他濱的情況下，如果使用甲醇作爲脫保護 反應中的溶劑，在反應期間發生產物的直接結晶而獲得超 過3 0%產率的高品質地西他濱（HPLC純度>99% )。 方法的簡單性同時獲得高品質產物與高方法產率的組 合使得本發明對以工業規模製備阿紮胞苷和地西他濱是特 別有利的。 以下的實施例具有說明本發明的某些可能的實施方案 的目的並且它們不意圖對本發明是限製性的。 【實施方式】 實施例1 ·阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6.3.g氮胞嘧啶在126mL二氯 甲烷中的懸浮液。該混合物採用回流溫度並將其攪拌90分 鐘。在約1〇分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯 然後是16.7gl,2,3,5-四-0-乙醯基-D-呋喃核糖在33mL二 氯甲烷中的溶液加入該澄清溶液中，保持攪拌回流2小 時，將其冷至室溫並將其倒入9.5 g碳酸氫鈉在330 ml水 -14- 201202261 中的溶液。將其攪拌10分鐘，使用乙酸將pH調節至 ρΗ = 4·5。任其沉降，使相分離，水相洗滌2次，每次洗滌 使用125ml二氯甲烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水 (anhydrify)的有機相被合倂。在低壓下進行濃縮直至獲得 粘稠的殘餘物。用2 5 0 mL甲醇將該殘餘物回收’將其在低 壓下再次濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。加入2 5 0 mL甲醇， 將其加熱至50 °C並加入10 mL 10 %的甲醇鈉在甲醇中的溶 液。將其攪拌1小時，冷至室溫’攪拌至完成沉澱’然後 固體藉由在濾紙上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得6.5 g HPLC純度（UV 254 nm ) 爲93.8 %的阿紮胞苷。 實施例2.阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6_3g氮胞嘧啶在126mL乙腈 中的懸浮液。該混合物採用5〇°C並將其攪拌90分鐘。在 約10分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯然後是 16.7 g 1,2,3,5-四-0-乙醯基-D-呋喃核糖在33 mL乙腈中的 溶液加入該澄清溶液中’保持攪拌7 5分鐘’將其冷至室溫 並將其緩慢倒入由5 00 ml二氯甲烷和3 3 0 ml水構成的混 合物，9.5 g碳酸氫鈉先前已溶於該混合物中。攪拌進行15 分鐘並使用乙酸將PH調節至PH = 4.5。任該混合物沉降然 後使相分離。水相洗滌2次’每次洗滌使用1 25 ml二氯甲 烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水（anhydrify)的有機 相被合倂。在低壓下進行濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。用 -15- 201202261 2 50 mL甲醇將該殘餘物回收，將其在低壓下再次濃縮直至 獲得粘稠的殘餘物。加入250 mL甲醇，將其加熱至50 °C 並加入15 mL 10%的甲醇鈉在甲醇中的溶液。將其攪拌1 小時，冷至室溫，攪拌至完成沉澱，然後固體藉由在濾紙 上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得8.5 g HPLC純度（UV 2 5 4 nm ) 爲98.7 %的阿紮胞苷。 實施例3.阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL二氯 甲烷中的懸浮液。該混合物採用回流溫度並將其攪拌90分 鐘。在約1〇分鐘內，將62mLlM四氯化錫在二氯甲烷中 的溶液然後是16.7 g 1，2,3,5-四-0-乙醯基-D-呋喃核糖在 3 3 mL二氯甲烷中的溶液加入骸澄清溶液中，保持攪拌回 流75分鐘，將其冷至室溫並將其倒入9.5 g碳酸氫鈉在330 ml水中的溶液。將其攪拌1〇分鐘，使用30%氫氧化鈉水 溶液將pH調節至ρΗ = 4·5。任其沉降’將其在土濾器上過 濾並使相分離，水相洗滌2次，每次洗滌使用125ml二氯 甲烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水（anhydrify)的有 機相被合倂。在低壓下進行濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。 用2 5 0 mL甲醇將該殘餘物回收，將其在低壓下再次濃縮直 至獲得粘稠的殘餘物。加入2 5 0 m L甲醇’將其加熱至5 0 °C 並加入10 mL 10 %的甲醇鈉在甲醇中的溶液。將其攪拌1 小時，冷至室溫，攪拌至完成沉澱’然後固體藉由在濾紙 -16 - 201202261 上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得5.2 g HPLC純度（UV 254 nm ) 爲96.5%的阿紮胞苷。 實施例4.阿紮胞苷的製備 將3 4.7 mL BSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL乙腈 中的懸浮液。該混合物採用50°C並將其攪拌90分鐘。在 約10分鐘內，將7mL四氯化鈦然後是16.7gl，2,3,5-四- 0-乙醯基-D-呋喃核糖在33 mL乙腈中的溶液加入該澄清溶液 中，保持攪拌120分鐘，將其冷至室溫並將其緩慢倒入由 500 ml二氯甲烷和330 mL水構成的混合物，9.5 g碳酸氫 鈉先前已溶於該混合物中。攪拌進行15分鐘並使用30%氫 氧化鈉水溶液將pH調節至PH = 4.5。將其在土濾器上過濾， 任該混合物沉降然後使相分離。水相洗滌2次，每次洗滌 使用125ml二氯甲烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水 (anhydrify)的有機相被合倂。在低壓下進行濃縮直至獲得 粘稠的殘餘物。用250mL甲醇將該殘餘物回收，將其在低 壓下再次濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。加入250 mL甲醇， 將其加熱至50°C並加入15 mL 10%的甲醇鈉在甲醇中的溶 液。將其攪拌1小時，冷至室溫，攪拌至完成沉澱，然後 固體藉由在濾紙上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得4.7 g HPLC純度（UV 254 nm) 爲97.2 %的阿紮胞苷。 實施例5.阿紮胞苷的製備 -17- 201202261 將34.7mLBSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL乙腈 中的懸浮液。該混合物採用50。(：並將其攪拌90分鐘。在 約10分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯然後是 29.0 g 1-0-乙醯基-2,3,5-三-〇-苯甲醯基-D·呋喃核糖在5〇 mL乙腈中的懸浮液加入該澄清溶液中，保持攪拌75分鐘， 將其冷至環境溫度並將其緩慢倒入由5 0 0 m 1二氯甲烷和 330ml水構成的混合物，9.5g碳酸氫鈉先前已溶於該混合 物中。攪拌進行15分鐘並使用乙酸將pH調節至pH = 4.5。 任該混合物沉降然後使相分離。水相洗滌2次，每次洗滌 使用125 ml二氯甲烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水 (anhydrify)的有機相被合倂。在低壓下進行濃縮直至獲得 粘稠的殘餘物。用25〇 mL甲醇將該殘餘物回收，將其在低 壓下再次濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。加入250mL甲醇， 將其加熱至5 0 °C並加入1 5 mL 1 0 %的甲醇鈉在甲醇中的溶 液。將其攪拌1小時，冷至環境溫度，攪拌至完成沉澱， 然後固體藉由在濾紙上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得5.4 g HPLC純度（UV 254 nm) 爲94.1%的阿紮胞苷。 實施例6.阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL二氯 甲烷中的懸浮液。該混合物採用回流溫度並將其攪拌90分 鐘。在約1〇分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯 然後是16.7gl,2,3,5-四-0-乙醯基-D-呋喃核糖在33mL二 -18 - 201202261 氯甲烷中的溶液加入該澄清溶液中，保持攪拌回流 2小 時，將其冷至室溫，加入控製冰浴中的溫度的250 mL甲 醇。在低壓下進行濃縮直至獲得約150mL的殘餘物體積。 加入250 mL甲醇並在低壓下再次進行濃縮直至獲得約150 mL的殘餘物體積。加入200mL甲醇，將其加熱至50°C並 加入48 mL 10%的甲醇鈉在甲醇中的溶液。將其攪拌1小 時，冷至室溫，攪拌至完成沉澱，然後固體藉由在濾紙上 用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得9.9 g HPLC純度’（UV 254 nm ) 爲98.9 %的阿紮胞苷》 從甲醇-二甲基亞颯中重結晶後，HPLC純度（UV 254 nm)爲 99.7%。 實施例7.阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL二氯 甲烷中的懸浮液。該混合物採用回流溫度並將其攪拌90分 鐘。在約10分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯 然後是29 g 2,3,5-三-0-苯甲醯基-1·〇-乙醯基-D-呋喃核糖 在50 mL二氯甲烷中的溶液加入該澄清溶液中，保持攪拌 回流2小時，將其冷至室溫，並將反應混合物倒入控製冰 浴中的溫度的250mL甲醇。在低壓下進行濃縮直至獲得約 150 mL的殘餘物體積。加入250 mL甲醇並在低壓下再次 進行濃縮直至獲得約150 mL的殘餘物體積。加入200 mL 甲醇，將其加'熱至5 0 °C並加入4 8 m L 1 0 %的甲醇鈉在甲醇 -19- 201202261 中的溶液。將其攪拌1小時’冷至室溫，攪拌至完成沉澱， 然後固體藉由在濾紙上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得9.3 g HPLC純度（UV 254 nm) 爲91.6%的阿紮胞苷。 實施例8.阿紮胞苷的製備 將34.7mLBSTFA加入6.3g氮胞嘧啶在126mL二氯 乙烷中的懸浮液。該混合物採用回流溫度並將其攪拌90分 鐘。在約10分鐘內，將11.35 mL三氟甲磺酸三甲基矽酯 然後是16.781，2,3,5-四-〇-乙醯基-〇-呋喃核糖在501111^二 氯乙烷中的溶液加入該澄清溶液中，保持攪拌回流60分 鐘，將其冷至環境溫度並將其倒入9.5g碳酸氫鈉在330ml 水中的溶液。將其攪拌1〇分鐘，使用乙酸將pH調節至 pH = 4.5。任其沉降，使相分離，水相洗滌2次，每次洗滌 使用125 ml二氯乙烷。藉由用無水氯化鈣對其處理而脫水 (anhydrify)的有機相被合併。在低壓下進行濃縮直至獲得 粘稠的殘餘物。用250 mL甲醇將該殘餘物回收，將其在低 壓下再次濃縮直至獲得粘稠的殘餘物。加入250mL甲醇， 將其加熱至50 °C並加入10 mL 10 %的甲醇鈉在甲醇中的溶 液。將其攪拌1小時，冷至室溫，攪拌至完成沉澱，然後 固體藉由在濾紙上用甲醇洗滌而過濾。 在低壓下乾燥後獲得5.0 g HPLC純度（UV 254 nm ) 爲9 1.4 %的阿紮胞苷。 實施例9 .地西他濱的製備 -20- 201202261 將34mLBSTFA加入6.4g氮胞嘧歧 的懸浮液。該混合物採用50°C並將其攪 冷至環境溫度，在約1〇分鐘內’將6·3 甲基矽酯和11_18 1-氯-3,5-二-對-甲苯 喃核糖加入溶液。將其攪拌丨4〇分鐘’ 溫度的4 〇 〇 m L甲醇。在低壓下進行濃縮 餘物，加入4〇〇 mL甲醇，將其加熱至5〇°C 甲醇鈉在甲醇中的溶液。將其攪拌1小 拌至完成沉澱，然後固體藉由在濾紙上用 在低壓下乾燥後獲得2.3 g HPLC純 爲9 9 · 2 %的地西他濱。

從甲醇中重結晶後，HPLC純度（UV 【圖式簡單說明】 Μ 。 【主要元件符號說明】 〇 /»w [在300mL乙腈中 拌90分鐘。將其 mL三氟甲磺酸三 醯基-2 -去氧-D -呋 加入控製冰浴中的 直至獲得粘稠的殘 並加入3 6 m L 3 0 % 時，冷至〇°C，攪 甲醇洗滌而過濾。 度（UV 254 nm ). 254 nm)爲 9 9.8%° -21-

Claims (1)

1. 201202261 七、申請專利範圍： 1. 一種用於合成阿紮胞苷（azacitidine)或地西他濱 (decitabine)的方法，其包括在甲矽烷基化劑存在下，在 有機溶劑中氮胞嘧啶的矽烷化反應，其特徵在於該甲矽 烷基化劑是N，0-雙-三甲基甲矽烷基-三氟乙醯胺。 2 .如申請專利範圍第1項的方法，其中該有機溶劑是非質 子有機溶劑’較佳爲選自二氯甲烷、二氯乙烷和/或乙腈。 3 ·如申請專利範圍第1項的方法，其中對於每重量份的氮 胞嘧啶使用3至1〇〇體積份的該有機溶劑。 4 .如申請專利範圍第1項的方法，其中每莫耳氮胞嘧啶使 用2至3莫耳N，0 -雙-三甲基甲矽烷基-三氟乙醯胺，較 佳爲從2.2至2.5莫耳。 5 ·如申請專利範圍第1項的方法，其中該矽烷化反應在包 括0 °C與反應混合物的回流溫度之間的溫度下進行。 6. 如申請專利範圍第1項合成阿紮胞苷的方法，其包括如 此獲得的矽烷化的氮胞嘧啶3與具有醯化的羥基官能基 團的D-呋喃核糖衍生物的偶合反應。 7. 如申請專利範圍第6項的方法，其中該衍生物選自 1，2,3,5-四-0-乙醯基-0-呋喃核糖和1-0 -乙醯基- 2,3,5-三-Ο-苯甲醯基-D-呋喃核糖。 8 .如申請專利範圍第1項合成地西他濱的方法，其包括如 此獲得的矽烷化的氮胞嘧啶與D - 2 -去氧呋喃核糖的衍 生物的偶合反應，該D-2-去氧呋喃核糖在1號位置具有 -22- 201202261 離去基團並具有餘下的醯化的羥基官能基團。 9.如申請專利範圍第8項的方法，其中該離去基團選自烷 氧基、醯氧基或鹵素’較佳爲烷氧基、醯氧基或氯原子。 10. 如申請專利範圍第8項的方法，其中該醯基選自乙醯 基、對-甲苯醯基、對-氯-苯甲醯基和對-硝基-苯甲醯基。 11. 如申請專利範圍第8項的方法，其中該D-2 -去氧呋喃核 糖衍生物選自1-氯-3,5-二-對-甲苯醯基-2-去氧-D-呋喃 核糖和1-氯-3,5-雙-對-氯苯甲醯基·2-去氧-D-呋喃核 糖。 1 2 .如申請專利範圍第8項至第1 1項中任一項的方法，其 中該偶合反應在路易士酸存在下進行。 13.如申請專利範圍第12項的方法，其中該路易士酸選自 四氯化錫、四氯化欽、氯化鋅、醚合三氟化硼、三氟甲 磺酸三甲基矽酯和全氟丁基磺酸三甲基矽酯。 1 4 ·如申請專利範圍第8項至第1 1項中任一項的方法，其 中該偶合反應在與該矽烷化反應相同的溶劑中進行。 15.如申請專利範圍第14項的方法，其中該偶合反應在包 括〇°C與反應混合物的回流溫度之間的溫度下進行。 1 6.如申請專利範圍第8項至第1 1項中任一項的方法，其 包括如此獲得的醯化的中間體隨後的脫保護。 17.如申請專利範圍第16項的方法，其中該脫保護在質子 有機溶劑中進行，該質子有機溶劑較佳爲Ci-CU醇，更 佳爲甲醇。 -23- 201202261 1 8 .如申請專利範圍第1項至第1 7項中任一項的方法，其 中該烷基化的氮胞嘧啶3不是分離的。 -24- 201202261 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：無。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 〇 y\\\ 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：