TW201105324A - 2-(1,2-benzisoxazol-3-yl)benzylamine derivatives - Google Patents

Description

201105324 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明關於2- ( 1，2-苯並異嚀唑-3-基）苄胺衍生物類 、包含彼等之醫藥組成物及該等2- ( 1,2-苯並異嘌唑-3-基 )苄胺衍生物類於治療慢性神經病性疼痛之用途。 【先前技術】 D 神經病性疼痛或神經損傷後之自發性疼痛和異常敏感 性典型上係起因於創傷性傷害、感染或疾病或手術，且在 起初傷害經治癒後可長時間持續。對許多人而言，現有之 治療選項係有限或不適當的。 經超極化活化之環核苷酸閘控型（HCN )通道係電流 Ih、If或Iq之分子受質。HCN通道（亦稱爲起搏通道）首先 係於心臟起搏細胞內被鑑定（文獻Di Francesco，1993 Annu Rev Physiol. 5 5:45 5-472 )且亦已於各種不同之周圍 Q 和中樞神經元內被發現（例如文獻Notomi & Shigemoto 2004 J. Comp· Neurol· 471: 241-276)。此等通道係藉由 超極化作用被緩慢活化以產生去極化型內向電流（於心臟 細胞內被稱爲If且於神經元內被稱爲Ih )且可使鈉離子和 鉀離子通過。四種HCN通道同功型係存在於神經系統（其 包括丘腦、杏仁核、脊髓及初級感覺神經元）之痛覺處理 區。可能的是所有4個次單位係存在於脊髓背根神經節（ DRG )且HCN1顯現最大表現量。此情況係符合所記錄之 DRG的Ih電流之活化動力學（文獻Tu et al., J Neurosci. -5- 201105324

Res. 2004 76:7 1 3-722 ) ° 於涉及傷害感受之神經系統的許多區域（其包括脊髓 、DRG、杏仁核、扣帶皮質及丘腦之膠狀質）之神經元已 偵測到I h電流。I h電流被認爲係由中等/大D R G優先表現且 可能不存在於大多數之C型（小）DRG細胞體（文獻 S croggs et al., J Neurophysiol. 7 1: 27 1 -279; Tu et al., J Neurosci. Res, 2004 76:7 1 3-722 )。再者，業已報告大鼠 之神經損傷（Chung氏模式）增強大DRG之Ih電流密度且 於經連接之神經引起經起搏驅動之自發性作用電位。一種 Ih通道阻斷劑ZD 7288能減少Α-β和Α-δ纖維之異位性放電 的發射頻率且未引起傳導阻斷（文獻Lee et al 2005 J Pain 417-424)。 經由神經病性疼痛模式，腹膜內給予Ih通道阻斷劑ZD 728 8能取決劑量地逆轉機械性異常性疼痛（文獻 Chung/von Frey; Chaplan, et al 2003 J Neurosci. 23: 1 1 69-1178) 。ZD 728 8於發炎性疼痛之大鼠CFA模式中亦抑制 異常性疼痛且於大鼠之輕度熱傷害模式中阻斷自發性疼痛 。另一硏究團隊業已報告經由Brennan模式，在大鼠經手 術後4小時對坐骨神經局部給予ZD 728 8能減緩機械性異常 性疼痛（文獻 Dalle & Eisenach 2005 Reg. Anesth. and Pain Med 243-248 ) °

假設在慢性疼痛症狀期間，因發炎後末梢性致敏作用 及於與神經病變有關之神經損傷的部位上離子通道表現之 改變的緣故，主要傳入物質呈現過度興奮狀態。由ZD -6- 201105324 7288引起之對Ih的抑制作用減緩神經受損之具髓鞘的DRG 之自發性活性（文獻 Yagi et al，2000 Proc 9th World Congress on Pain 109-117) ’進而減輕相關疼痛。現有之 臨床前數據顯示U通道阻斷劑將可用於治療慢性神經病性 疼痛。 2- ( 1,2-苯並異嚀唑-3-基）苄胺衍生物類係揭露於國 際專利申請案 WO 97/40027 ( Akzo Nobel N.V.)和 WO 0 9 9/18941 ( Akzo Nobel N.V.)以作爲用於治療精神疾病（ 諸如抑鬱、焦慮及精神病）之U通道阻斷劑。經發現當該 等2- ( 1,2-苯並異of唑-3-基）苄胺衍生物於周圍神經損傷 引起神經病性疼痛之動物模式（神經病性疼痛之Chung氏 模式）中顯現活性時，具有高中樞神經系統（CNS )穿透 能力之該等化合物能在齧齒類動物體內產生功效之類似劑 量（倍數<2 )下引起副作用（諸如共濟失調和震顫）。 仍然需要具有特佳周圍活性之U通道抑制劑。 〇 【發明內容】 對此，本發明提供通式I之2- ( 1，2-苯並異嚀唑-3-基） 苄胺衍生物類 7

201105324 其中

Ri代表位於1,2-苯並異Df唑環之第5、6或7位置之一者 的 conr2r3基； R2和R3各別爲Η或（Ci-4)烷基；且 R4係環丙基、2-吡啶基或苯基，該苯基任意地經一或 多個鹵素取代； 或其藥學上可接受之鹽。 本發明之化合物與最接近之先前技藝（WO 97/40027 )化合物於結構上的不同係在於存有羧醯胺基CONR2R3， 並令人驚訝地發現本發明之化合物呈現有限度之CNS穿透 能力且於活體內神經病性疼痛（Chung氏）模式中並在未 觀察到CNS副作用之劑量（甚至劑量倍數>5 )下具有功效 〇 式I定義中所使用之（C!-4 )烷基表示具有1至4個碳原 子之支鏈或非支鏈烷基，如丁基、異丁基、三級丁基、丙 基、異丙基、乙基及甲基。較佳的是甲基。 鹵素表示F、Cl、Br或I。較佳的鹵素係F。式I定義中 所使用之2-吡啶基表示吡啶環’其中烷基鏈係與鄰接氮之 碳鍵結。 較佳的是式I之2 - ( 1,2 -苯並異嚀唑-3 -基）苄胺衍生物 類，其中I代表位於該1,2-苯並異曙唑環之第6位置的 CONR2R3 基。 更佳的是式I化合物，其中和R3皆爲甲基或氫，最 -8- 201105324 佳地R2和R3皆爲氫。 苄胺衍生物類係 1，2-苯並異嘴哩- 本發明之2- ( 1,2-苯並異嗜唑-3-基） 具有（S)-構形之單一鏡像異構牧I ° 本發明之一較佳體系提供通式151 2 _ 3-基）苄胺衍生物類

〇 其中 6或7位置之一者 -(1,2-苯並異噁

Ri代表位於1，2-苯並異嚀唑環之第5 的 CONR2R3 基； R2和R3各別爲Η或（Cu )烷基；且 R4係環丙基； 或其藥學上可接受之鹽。 本發明之另一較佳體系提供通式1之 唑-3-基）苄胺衍生物類 7

式I -9 - 201105324 其中 1代表位於l，2·苯並異谔唑環之第5、6磲7位置之一者 的 CONR2R3 基； R2和R3各別爲Η或（Ch)烷基；且 R4係2-吡啶基； 或其藥學上可接受之鹽。 本發明之另一較佳體系提供通式1之2- ( 1，2-苯並異nf 唑-3-基）苄胺衍生物類 7

其中 心代表位於1,2-苯並異nf唑環之第5、6或7位置之一者 的 CONR2R3 基； 尺2和R3各別爲Η或（Cm )烷基；且 R4係苯基，該苯基任意地經一或多個鹵素取代； 或其藥學上可接受之鹽。 特別較佳之2- ( 1,2-苯並異Of唑-3-基）苄胺衍生物係 選自： 3-(2-(1-(5) 胺基- 2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )苯並[d]異nf唑-6-羧醯胺； -3-(2-( (S) -1-胺基-2-苯基乙基）苯基）苯並[d] -10- 201105324 異》1唑-6-羧醯胺； -3-(2-(1-(5) ·胺基-2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )-#，#-二甲基苯並[d]異噚唑-6-羧醯胺； • 3-(2-(1-(5)-胺基- 2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )二甲基苯並[d]異d碧唑-7-羧醯胺； -3-(2-(l-(S)-胺基-2-環丙基乙基）苯基）苯並 [d]異噚唑-6-羧醯胺；及 -3-(2-(l-(S)-胺基- 2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )苯並[d]異噚唑_7_羧醯胺； 或其藥學上可接受之鹽。 藉由有機化學技藝中一般所習知之方法可製備本發明 之2_ ( 1，2-苯並異嗜唑-3-基）苄胺衍生物類。

自式2化合物（其中Rs係保護基’諸如三級丁氧羰基 (BOC )、苄氧羰基（CBZ)、三氯乙氧羰基（TROC )、 (i〇 -或（S)-三級丁基亞磺醯基及（Λ)-或（s)-對甲 苯亞磺醯基）可製備通式1之[(i，2-苯並異噚唑_3_基）节 胺衍生物類（其中1至！^係如前述所定義者）°去保護步 驟係爲熟習此技藝之人士所習知。可使用文獻Wuts P. G. -11 - 201105324 M and Greene T. W. 'Protecting Groups in Organic Synthesis’ New York, Wiley(2006)所描述之方法。自式2化 合物（其中R5係式SOR7之亞磺醯基（其中R7係烷基或任意 地經取代之芳基），諸如（A )-或（S )-三級丁基亞磺醯 基或（A)-或（S)-對甲苯亞磺醯基）可製備式I化合物。 該等方法包括於醇溶劑（諸如甲醇）中使用酸（例如氫氯 酸）。該等方法已見於文獻，例如文獻M. Wakayama and J . Ellman J. Org. Che m . 2009，74，2646-2650 戶斤描述之方法 ο 使用式HNR2R3之反應劑（其中112和R3係如前述所定 義者）自式3化合物（其中R5係氫原子且R6係烷基）可製 備式I化合物。於升高之溫度下或利用Lewis酸觸媒可進行 該酯之直接替換以生成醯胺。該等方法係爲熟習此技藝之 人士所習知。可使用文獻March J. ‘Advanced Organic Chemistry’ New York, Wiley (2007)所描述之方法。 7

於溶劑（諸如N-甲基吡咯啶酮或二氯甲烷）中’自式 3化合物（其中R6係氫原子）和式HNR2R3之胺反應劑且利 用標準醯胺偶合條件（諸如利用亞硫醯氯或草醯氯以生成 -12- 201105324 醯基氯）或利用反應劑（諸如ι,ι-羰基二咪唑或二環己基 碳二醯亞胺）並隨後與式hnr2r3之胺反應劑反應以生成 經活化之羰基物，可製備式2化合物（其中1係位於第5、 6或7位置之一者的式CONR2R3之醯胺基，其中R2和R3係各 別爲Η或（Ci_4 )烷基）。該等方法係爲熟習此技藝之人 士 所習知。可使用文獻 March J. ‘Advanced Organic Chemistry’ New York, Wiley (2007)所描述之方法。 可自式3化合物（其中R6係烷基）和式HNR2R3之反應 劑製備式2化合物（其中1^係位於第5、6或7位置之一者的 式CONR2R3之醯胺基）。於升高之溫度下或利用Lewis酸 觸媒可進行該酯之直接替換以生成醯胺。該等方法係爲熟 習此技藝之人士所習知。可使用文獻March J. ‘Advanced Organic Chemistry’ New York, Wiley (2007)所描述之方法

藉由使用式HNR2R3之胺（其中R2和R3係各別爲H或（ CL4)烷基）、一氧化碳及過度金屬觸媒（諸如四（三苯 膦）鈀（〇)或1，1’-雙（二苯膦基）二（環戊二烯）亞鐵 二氯鈀（Π))之胺基羰基化反應，自式4化合物（其中X -13- 201105324 係位於第5、6或7位置之一者的鹵素原子（較佳地溴或碘 )且&係保護基’諸如三級丁氧羰基（BOC)、苄氧羰基 (CBZ)、三氯乙氧羰基（TROC) 、（/?)-或（S)-三級 丁基亞磺醯基及（A)-或（^)-對甲苯亞磺醯基）可製備 式2化合物（其中Ri係位於第5、6或7位置之一者的式 CONR2R3之醯胺基，其中h和R3係各別爲Η或（Cm)烷基

7

Μ

式6 藉由加入式6之反應劑（其中Μ係金屬物（諸如鹵化鎂 或鋰）且X’係Η或一或多個鹵素原子），自式5化合物（其 中R5係手性（chiral )輔助基’諸如式SOR7之單一鏡像異 構物亞磺醯基，其中h係烷基或任意地經取代之芳基）’ 可製備式2化合物（其中Ri係位於第5、6或7位置之一者的 式CONR2R3之醯胺基（其中R2和R3之一或兩者係氫原子） 且Κ·4係任意地經一或多個鹵素原子取代之苯基）。藉由層 析或結晶使所欲之非鏡像異構物與其他不欲之非鏡像異構 物分離，可使式2化合物（其中係任意地經—或多個鹵 素原子取代之苯基）經分離爲單一非鏡像異構物。 -14- 201105324

藉由加入式7之反應劑（其中Μ係金屬物（諸如鹵化鎂 或鋰）），自式5化合物（其中R5係手性（chiral)輔助基 ’諸如式SOR7之（/?；)-或（S)-亞磺醯基，其中R7係烷基 或任意地經取代之芳基），可製備式2化合物（其中R!係 位於第5、6或7位置之一者的式CONR2R32醯胺基（其中 R2和R3之一或兩者係氫原子）且R4係2-吡啶基）。藉由層 析或結晶使所欲之非鏡像異構物與其他不欲之非鏡像異構 物分離，可使式2化合物（其中R4係2-吡啶基）經分離爲 單一非鏡像異構物。 自式4化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的 ^ 鹵素原子（較佳地溴或碘）且R5係保護基，諸如三級丁氧 〇 羰基（BOC)、苄氧羰基（CBZ)、三氯乙氧羰基（TROC )、（/?)-或（5)-三級丁基亞磺醯基或（及）-或（*$1)-對甲苯亞磺醯基），於低於〇°c之溫度下且於溶劑（諸如 二乙醚或四氫呋喃）中藉由使用烷基金屬反應劑（諸如正 丁基鋰）進行金屬取代反應並隨後令該中間體金屬物與一 氧化碳反應，可製備式3化合物（其中汉6係氫原子）。藉 由使用強鹼（諸如氫化鈉）使酸性NH部分經起初去質子 化作用，可進行該金屬-鹵素交換反應。 自式3化合物（其中R5係如上述所定義者且R6係烷基 -15- 201105324 )，藉由於溶劑（諸如甲醇或四氫肤喃）中使用例如氫氧 化物來源（諸如氫氧化鈉水溶液）進行皂化反應，可製備 式3化合物（其中R5係保護基（諸如三級丁氧羰基（BOC )、苄氧羰基（CBZ)、三氯乙氧羰基（TROC ) 、 ( R)- 或（S)-三級丁基亞磺醯基或（i?)-或（S)-對甲苯亞磺 醯基）且R6係氫原子）。 自式4化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的 鹵素原子（較佳地溴或碘），R4係任意地經一或多個鹵素 原子取代之苯基' 2-吡啶基或環丙基，且R5係保護基（諸 如三級丁氧羰基（BOC )、苄氧羰基（CBZ )、三氯乙氧 羰基（TROC) 、（ /?)-或（S)-三級丁基亞磺醯基及（Λ )-或（S)-對甲苯亞磺醯基）），藉由使用式r6〇h之醇 (其中R6係烷基）、一氧化碳及過度金屬觸媒（諸如四（ 三苯膦）鈀（〇)或1,1’ -雙（二苯膦基）二（環戊二烯） 亞鐵二氯鈀（II))之烷氧基羰基化反應，可製備式3化合 物（其中R6係烷基）。 自式3化合物（其中R5係保護基，諸如三級丁氧羰基 (BOC )、苄氧羰基（CBZ)、三氯乙氧羰基（TROC )、 (Λ)-或（<S)-三級丁基亞磺醯基及（J?)-或（S)-對甲 苯亞磺醯基），可製備式3化合物（其中〜係烷基且1係 氫原子）。該等去保護步驟係爲熟習此技藝之人士所習知 。可使用文獻 Wuts P. G. M and Greene T. W. ‘Protecting Groups in Organic Synthesis’ New York，Wiley (2006)戶斤描 述之方法。 -16 - 7 201105324

自式8化合物（其中r5係手性（chiral )輔助基，諸如 Ο 式SOR·7之（及；-或（S)-亞磺醯基，其中r7係烷基（較佳 地三級丁基）或任意地經取代之芳基），藉由加入式6之 反應劑（其中Μ和X’係如上述所定義者），可製備式4化 合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的鹵素原子（較 佳地溴或碘）且R4係任意地經一或多個鹵素原子取代之苯 基）。藉由層析或結晶使所欲之非鏡像異構物與其他不欲 之非鏡像異構物分離，可使式4化合物（其中R4係任意地 經一或多個_素原子取代之苯基，且R5係手性（chiral) 〇 輔助基，諸如式s〇R7之（/?)-或（S)-亞磺醯基，其中r7 係烷基（較佳地三級丁基）或任意地經取代之芳基）經分 離爲單一非鏡像異構物。 自式5化合物（其中R5係手性（chiral )輔助基，諸如 式SOR7之（i〇 -或（《S)-亞磺醯基，其中R7係烷基（較佳 地三級丁基）或任意地經取代之芳基）’藉由加入式7之 反應劑（其中Μ係金屬物，諸如鹵化鎂或鋰）’可製備式4 化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的鹵素原子（ 較佳地溴或碘）且R4係2-吡啶基）。藉由層析或結晶使所 -17- 201105324 欲之非鏡像異構物與其他不欲之非鏡像異構物分離，可使 式4化合物（其中R4係2-吡啶基，且R5係手性（chiral )輔 助基，諸如式SOR7之（i〇 -或（S)-亞磺醯基，其中117係 烷基（較佳地三級丁基）或任意地經取代之芳基）經分離 爲單一非鏡像異構物。 利用熟習此技藝之人士所習知的保護方法（諸如文獻 Wuts P. G. M and Greene T. W. 'Protecting Groups in Organic Synthesis’ New York，Wiley (2006)所描述者）， 自式9化合物（其中X和R4係如上述所定義者），可製備式 4化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的鹵素原子 (較佳地溴或碘），R4係任意地經一或多個鹵素原子取代 之苯基、2-吡啶基或環丙基，且115係保護基（諸如三級丁 氧羰基（B0C)))。

藉由熟習此技藝之人士所習知的方法，自分別對應式 10、11、12及13之消旋化合物（其中X、Ri、r4&r5係如 上述所定義者），可使式1、2、3、4及9之化合物（其中 1^係位於第5、6或7位置之一者的式CONR2R3之醯胺基（ 其中R2和R3係各別爲Η或（Cm )烷基），R4係任意地經 -18- 201105324 一或多個鹵素原子取代之苯基、2-吡啶基或環丙基，、係 保護基（諸如三級丁氧羰基（BOC )、苄氧羰基（CBZ ) 及三氯乙氧羰基（TROC ))，且X係位於第5、6或7位置 之一者的鹵素原子（較佳地溴或碘））經分離爲單一非鏡 像異構物。此等方法包括藉由具有手性靜止相之高效液相 層析（HPLC)、具有手性靜止相之超臨界流體層析（SFC )及利用高手性酸或鹼進行選擇性結晶之非鏡像異構性鹽 Q 的解析以分離所欲之鏡像異構物。

自式14化合物（其中R,係如上述所定義者且Ar係任意 地經一或多個鹵素原子取代之芳香族環（諸如苯基））’ 於-7 8 °C至周溫之溫度下且於溶劑（諸如四氫呋喃）中藉由 與鹼（諸如三級丁氧化鉀）反應並隨後加入式1 5之反應劑 (其中LG係離去基（諸如鹵素（較佳地溴或碘）或磺酸酯 -19- 201105324 基（諸如甲苯磺酸酯基））且L係任意地經一或多個鹵素 原子取代之苯基或h係環丙基）’可製備式ίο化合物（其 中R4係任意地經一或多個鹵素原子取代之苯基或R4係環丙 基）。經加入該鹼和式1 4化合物後，令該反應經酸化以使 中間體亞胺水解’隨後再經鹼化以分離所欲之產物。 藉由類似之方法，自式1 6化合物（其中X和Ar係如上 述所定義者）和式1 5化合物（其中R4係任意地經一或多個 鹵素原子取代之苯基或&4係環丙基）’可製備式13化合物 (其中R4係任意地經一或多個鹵素原子取代之苯基或R4係 環丙基）。

自式17化合物（其中Ri係位於第5、6或7位置之一者 的式CONR2R3之醯胺基，其中R2和R3係各別爲Η或（Cm) 烷基），藉由與式18之胺縮合，可製備式14化合物。該等 方法係爲熟習此技藝之人士所習知且包括例如於溶劑（諸 如二氯甲烷）中使用無水硫酸鎂作爲脫水劑。 -20- 201105324

自式19化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一者的 鹵素原子（較佳地溴或碘）），藉由與式18之胺縮合，可 q 製備式16化合物。該等方法係爲熟習此技藝之人士所習知 且包括例如於溶劑（諸如二氯甲烷）中使用硫酸鎂作爲脫 水劑。

〇 於溶劑（諸如N-甲基吡咯啶酮或二氯甲烷）中，自式 2〇化合物（其中羧酸部分係位於該苯並異嗖環的第5、6 或7位置之一者上），利用標準醯胺偶合條件（諸如利用 亞硫醯氯或草醯氯以生成醯基氯）或利用反應劑（諸如 Μ-羰基二咪唑）並隨後與式HNR2R3之胺反應劑反應以生 成經活化之羰基物，藉由與式HNR2R3之胺反應劑（其中 R2和R3係各別爲Η或（Cm )烷基）縮合，可製備式17化 合物（其中1係位於第5、6或7位置之一者的式CONR2R3 201105324 之醯胺基）。該等方法係爲熟習此技藝之人士所習知。可 使用文獻 March J. 'Advanced Organic Chemistry, New York，Wiley (2007)所描述之方法。

自式21化合物（其中R8係烷基或芳基或兩個R8基係經 鍵結一起形成烷基環系統且其中X係位於第5、6或7位置之 一者的鹵素原子（較佳地溴或碘）），藉由於低溫（較佳 地低於)下且於溶劑（諸如二乙醚）中利用烷基金屬 反應劑（例如正丁基鋰）進行金屬-鹵素交換反應且隨後 利用二氧化碳驟冷該金屬物，可製備式20化合物。如有必 要，加入酸性水解步驟進行反應以生成所欲之產物。 藉由熟習此技藝之人士所習知且描述於文獻March J. ‘Advanced Organic Chemistry’ New York, Wiley (2007)之 方法（其實例包括於酸觸媒（諸如對甲苯磺酸）之存在下 使用通式CH(OR8)3之原甲酸三烷酯）’可自式22化合物製 備式2 1化合物。 自式17化合物（其中1係位於第5、6或7位置之一者 的式CONR2R3之醯胺基，其中R2和R3係各別爲Η或（Cm) 烷基），藉由與式R5NH2之胺縮合’可製備式5化合物（其 -22- 201105324

中R5係手性（chiral)輔助基，諸如式SOR7& ( -或（S )-亞礎醯基，其中R·?係院基（較佳地三級丁基）或任意 地經取代之芳基）。可使用方法（諸如於溶劑（諸如二氯 甲烷或四氫呋喃）中使用硫酸鎂或四乙氧化鈦作爲脫水劑 者）或參考文獻 P. Z h 〇 u e ί a /，J1 e i r a A e d r 〇 «，2 0 0 4，6 0， 8003所描述之方法。 藉由令式22化合物（其中X係位於第5、6或7位置之一 0 者的鹵素原子（較佳地溴或碘））與式NH2R5之胺（其中 R5係如上述所定義者）進行縮合反應，可製備式8化合物 (其中R5係手性（chiral)輔助基，諸如式SOR72 (及）-或（S)-亞磺醯基，其中R7係烷基（較佳地三級丁基）或 任意地經取代之芳基）。該等方法係爲熟習此技藝之人士 所習知且包括例如於溶劑（諸如二氯甲烷或四氫呋喃）中 使用無水硫酸鎂或四乙氧化鈦作爲脫水劑者。 利用先前技藝之方法（諸如文獻WO 97/40027 ( Akzo 〇 Nobel N.V.)所描述者），可製備式22化合物。 具有（S)-構形的該式I之2-(1，2_苯並異of唑-3-基） 苄胺衍生物類及彼等之鹽可含有額外之手性（chiral )中 心並因此可以立體異構物（其包括非鏡像異構物）之形式 存在。本發明之範圍包括上述之立體異構物及該式I化合 物之每個個別R/S和S/S異構物及彼等之鹽（其實質上不含 有另一立體異構物，即含有低於5 % (較佳地低於2 %且特 佳地低於1%)之另一立體異構物），以及該等立體異構物 以任何比例所形成之混合物。 -23- 201105324 利用諸如手性鹽形式之結晶、手性層析解析或使用酶 催化方法之解析等方法，可得到經純化之立體異構物。該 等方法係爲熟習此技藝之人士所習知。可使用文獻 'Advanced Organic Chemistry ', March J., New York, Wiley ( 1 985)和 少 价，’（A.N. Collins ，G.N.

Sheldrake 及 J. Cosby 編輯，1 992; John Wiley)所描述之方 法。 本發明亦包含經同位素標記之本發明的式I之2- ( 1,2-苯並異嘌唑_3·基）苄胺衍生物類，該等2- (1,2 -苯並異噚 唑-3-基）苄胺衍生物係與本文所描述者相同，但是其中一 或多個原子係由具有與天然通常發現之原子量或原子數不 同的原子量或原子數之原子替代。可倂入本發明之化合物 的同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位 素，分別諸如 、A、13^、Me、15N、18〇、i7〇、18；ρ 及 36CI。 某些經同位素標記之式I化合物（例如經3 H和1 4c標記 者）係用於化合物及/或受質組織分佈測定。氚（即3H ) 和碳-14 (即14C )同位素因易於製備和可偵測性係爲特佳 者。進一步，經較重同位素（諸如氘（即2H))取代可提 供因較佳之代謝安定性所產生的某些治療益處（例如增加 活體內半生期或降低劑量需要），因此於某些情況下可能 係較佳的。藉由依循類似於下述反應圖及/或實施例所揭 露之方法且使用適當之經同位素標記的反應劑以替代未經 同位素標記之反應劑，通常可製備經同位素標記之式I化 -24 - 201105324 合物。 令呈自由鹼的式I之化合物與無機酸（諸如氫氯酸、 氫溴酸、磷酸及硫酸）或有機酸（諸如例如抗壞血酸、檸 檬酸、酒石酸、乳酸、順式丁烯二酸、丙二酸、反式丁烯 二酸、乙醇酸、丁二酸、丙酸、乙酸及甲烷磺酸）反應， 可得到藥學上可接受之鹽。較佳者係與氫氯酸和L-(+) · 酒石酸反應所得之鹽。 0 本發明之化合物可呈非溶劑化型式及與藥學上可接受 之溶劑（諸如水、乙醇及類似者）的溶劑化型式。通常， 對本發明之目的而言，溶劑化型式被視爲等同於非溶劑化 型式。 本發明另提供醫藥組成物，其包含與藥學上可接受之 輔助劑混合的通式I之2- ( 1,2-苯並異nf唑-3-基）苄胺衍生 物或其藥學上可接受之鹽及可任意地其他治療劑。該“可 接受”表示與該組成物之其他成分互溶且對該組成物之接 〇 受者無害。組成物包括例如適於口服、舌下、皮下、靜脈 內、硬膜外、椎管內、肌內、經皮、經肺、局部、經眼或 經直腸給藥之組成物或類似者，所有該等組成物係呈給藥 之單位劑量型式。較佳之給藥途徑係口服途徑。 對口服給藥，該活性成分可呈分開之多個單位，諸如 藥片、膠囊、粉末、粒子、溶液、懸浮液及類似者。 對非經腸給藥，本發明之醫藥組成物可於單位劑量或 多重劑量之容器中，例如於密封小瓶或安瓿中的例如預定 量之注射液體，且本發明之醫藥組成物亦可儲存於冷凍乾 -25- 201105324 燥之條件下，且使用前僅需加入無菌液體載體（例如水） 〇 與該等藥學上可接受之輔助劑（例如標準文獻 Gennaro, A.R. et al., Remington: The Science and Practice of Pharmacy (第 20 版，Lippinco11 Wi 11 iams & Wi 1 kins， 2000，特別參閱 Part 5: Pharmaceutical Manufacturing )戶斤 描述者）混合的活性劑可被壓縮成固體劑量單位（諸如九 或藥片）或經加工成膠囊、栓劑或貼劑。藉由使用藥學上 可接受之液體，該活性劑可以例如呈溶液、懸浮液、乳化 液之型式的注射製劑或呈噴霧（例如鼻噴霧）之流體組成 物施予。 爲製造固體劑量單位，允許使用慣用之添加劑，諸如 塡料、色料、聚合性結合劑及類似者。通常，可使用不會 干擾活性化合物之功能的任何藥學上可接受之添加劑。可 使本發明之活性劑以固體組成物之方式給予的適當之載體 包括乳糖、澱粉、纖維素衍生物及類似物、或彼等之混合 物，該等載體係適量使用。對非經腸給藥，可使用水溶性 懸浮液、等滲鹽水溶液及無菌可注射溶液，該等溶液含有 藥學上可接受之分散劑及/或潤濕劑，諸如丙二醇或丁二 醇。 本發明進一步包括前述之醫藥組成物與適合該醫藥組 成物之包裝材料的組合，該包裝材料包括該醫藥組成物用 於上述用途之使用指示說明。 藉由使用由HEK細胞表現之人HCN1逋道（參閱國際 -26- 201105324 專利申請案 WO 01/090142: “Full length human HCNl Ih channel subunits and variants” - Akzo Nobel N. V.)的膜 片夾電生理學測量，發現本發明之2-(1，2-苯並異of唑-3-基）苄胺衍生物類係Ih通道之抑制劑。 本發明之化合物可用於治療透過調節Ih通道媒介之疼 痛，較佳地神經病性疼痛或發炎性疼痛，諸如於病症（如 三叉神經痛、帶狀疱疹後神經痛（帶狀疱疹後之疼痛）、 Q 糖尿病性神經病、截肢後幻想肢疼痛、多發性硬化、化學 治療後疼痛、纖維肌痛（慢性肌肉疼痛疾病）、HIV感染 、酒精中毒）所發生之神經病性疼痛、癌症所發生之神經 病性疼痛（爲周圍神經上之癌的直接結果或爲某些化學治 療藥物之副作用）及非典型之臉部疼痛。 本發明之化合物亦可與其他藥物（例如止痛劑，諸如 類鴉片和非類固醇之抗發炎藥物（NSAIDs )，其包括 COX-2選擇性抑制劑）同時使用。 〇 可給予人體足夠量之本發明之化合物達充分之時間以 減輕徵狀。舉例而言，給予人體之劑量範圍可介於0.001 至50 mg/kg體重，較佳地介於0.01至20 mg/kg體重。 【實施方式】 實驗 化合物la: (4-溴-2-氟苯基）（2-(二乙氧基甲基） 苯基）甲醇 -27- 201105324

於氮氣下將正丁基鋰之己烷（414 mL )溶液（2·5 Μ )經30分鐘逐滴加入至經冷卻至-7 下之卜溴-2-(二乙 氧基甲基）苯（266 g)於乾二乙醚（1.5 L)中的經機械 攪拌之溶液中。令反應混合物於低於-6CTC之溫度下經攪拌 f) 45分鐘，隨後於維持該低溫下經1小時逐滴加入4_溴-2-氟 苯甲醛之乾二乙醚（1.5 L)溶液。除去冷卻浴並使反應物 經3小時回溫至+ 1 0 °C。藉由加入水（5 00 mL )使該反應驟 冷。分離有機層並令水層經乙酸乙酯（2x500 mL)沖洗。 令結合之有機層經鹽水沖洗並隨後置於無水硫酸鈉上乾燥 且經蒸發以生成黃色油狀之標的產物（371.1 g)。

藉由類似之方法，起始自3-溴-2-氟苯甲醛以製備化合 物lb : ( 3-溴-2-氟苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲 U 醇。 化合物2a : ( 4-溴-2-氟苯基）（2-(二乙氧基甲基） 苯基）甲酮

-28- 201105324 令（4-溴-2-氟苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲 . 醇（化合物la ; 1 16 g )於攪拌下溶解於三級丁醇（680 mL )中並對所生成之溶液先後加入水（1.4 L )和碳酸氫 鈉（54.2 g)。利用水浴以維持溫度接近20°C，先後加入 1,3-二溴-5,5-二甲基海因（48.3 g)和 TEMPO ( 0.51 g)且 令混濁黃色懸浮液於室溫下經隔夜攪拌。加入飽和碳酸氫 鈉溶液（360 mL )和硫代硫酸鈉（48 g )水溶液。令所生 Q 成之混合物經攪拌10分鐘，隨後經乙酸乙酯萃取，並令萃 取液經鹽水沖洗，置於無水硫酸鈉上乾燥且經蒸發以生成 暗黃色油狀之標的產物（118 g)。 藉由類似之方法，起始自（3-溴-2-氟苯基）（2-(二 乙氧基甲基）苯基）甲醇（化合物lb)以製備化合物2b: (3-溴-2-氟苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲酮。 化合物3a: (4-溴-2-(亞丙-2-基胺基氧）苯基）（2- (二乙氧基甲基）苯基）甲酮

〇 於氮氣和冰水浴冷卻下，將1M三級丁氧化鉀之四氫呋 喃（325 mL)溶液加入至丙酮肟（20.33 g)於四氫呋喃（ 500 mL)中之經機械攪拌的溶液中。於20 °C下令該濃稠白 -29- 201105324 色懸浮液經攪拌20分鐘，隨後歷時20分鐘加入（4-溴-2-氟 苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲酮（化合物2a)( 118 g)之四氫呋喃（400 mL)溶液並於室溫下攪拌所生 成之淡橙色懸浮液1小時’隨後再經回流2小時。令反應混 合物經水（680 mL)稀釋並經乙酸乙酯萃取。令結合之有 機層經鹽水沖洗，置於無水硫酸鎂上乾燥並經蒸發以生成 標的化合物（1 1 6 g )。 藉由類似之方法，起始自（3-溴-2-氟苯基）（2-(二 乙氧基甲基）苯基）甲酮（化合物2b )以生成化合物3b : (3-溴-2-(亞丙-2-基胺基氧）苯基）（2-(二乙氧基甲 基）苯基）甲酮。 化合物4a : 2_ ( 6_溴苯並[d]異of唑-3_基）苯甲醛

將2M氫氯酸（25 mL)加入至於70 °C下（4-溴- 2-(亞 丙-2-基胺基氧）苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲酮 (化合物3a) (18 g)於乙醇（50 mL)中之攪拌溶液中 。令該混合物於7〇t下經攪拌20分鐘以生成濃稠懸浮液。 加入水（500 mL )並令所生成之固體經過濾及於5〇°C下經 真空乾燥以生成標的化合物（1 2 g)。 藉由類似之方法，起始自（3_溴_2-(亞丙-2-基胺基 -30- 201105324 氧）苯基）（2-(二乙氧基甲基）苯基）甲酮（化合物3b )以製備化合物4b : 2- ( 7-溴苯並[d]異噚唑-3-基）苯甲醛 〇 化合物5: 6 -溴- 3-(2-(二乙氧基甲基）苯基）苯並 [d]異nf唑

先後將對甲苯磺酸（0.315 g)和原甲酸三乙酯（ 11.01 mL，9_81 g)加入至2-(6-溴苯並[<1]異噁唑-3-基） 苯甲醛（化合物4a) ( 10 g)於乾乙醇（1〇〇 mL)中之經 攪拌的懸浮液中。令該懸浮液於45°C下經攪拌，直至生成 澄清溶液，隨後於45°C下維持45分鐘。真空下除去溶劑並 隨後令該混合物經乙酸乙酯稀釋’經飽和碳酸鈉溶液和鹽 水沖洗且隨後置於無水硫酸鈉上乾燥，再經過濾及蒸發以 生成標的產物（12.6 g) ^ 化合物6: 3- (2-甲醯基苯基）苯並[d]異of唑-6-羧酸 Ο

-31 - 201105324 將正丁基鋰之己烷（55_8 mL)溶液（2.5M)逐滴加 入至於氮氣和-78 °C下6 -溴-3- (2-(二乙氧基甲基）苯基） 苯並[d]異嘌唑（化合物5 ) ( 50 g)之乾乙醚（3 3 0 mL) 溶液中並於-78 °C下持續攪拌45分鐘。令該濃稠褐色懸浮液 經由插管轉移至二氧化碳九粒固體於乙醚（250 mL，氮氣 下且經丙酮/乾冰浴冷卻）中之經機械攪拌的混合物中， 並令所生成之反應混合物裝滿二氧化碳九粒且於氮氣下和 冰冷浴中持續攪拌並經隔夜回溫至室溫。令該反應經2N HC1( 100 mL)驟冷且於減壓下除去該醚並力p入乙醇（300 mL)。令所生成之黃色懸浮液於60 °C下經攪拌15分鐘，隨 後經冷卻至室溫且於冰浴中經攪拌30分鐘，並令所生成之 黃色固體經過濾分離且於真空烘箱中於45。(：下經乾燥以生 成標的產物（29.76 g)。 化合物7 : 3- ( 2-甲醯基苯基）苯並[d]異嘌唑_6_羧醯 胺

室溫下將1，1'-羰基二咪唑（40.2 g) —次加入至3-( 2 -甲醯基苯基）苯並[d]異nf唑-6-羧酸（化合物6) ( 60.2 g)之N -甲基-2-卩比略陡酮（6〇〇 mL)溶液中並令該溶液於 -32- 201105324 室溫和氮氣下經攪拌2小時，隨後倒入至氨水溶液（比重 0.8 8 0 )中。令該懸浮液於室溫下經機械攪拌2小時並隨後 經過濾。令所收集之仍濕固體於室溫下和甲醇（2〇〇 mL ) 中經碾製並隨後經過濾，且令所得之產物再次經甲醇（ 100 mL)碾製，隨後經過濾和真空下乾燥以生成標的產物 (54.92 g)。 化合物8 :(五）-ΛΓ- ( 2- ( 6-溴苯並[d]異of唑-3-基） Q 亞苄基）-1,1-雙（4-氟苯基）甲胺

Q 將雙（4-氟苯基）甲胺（1.74 g )和無水硫酸鎂加入 至2- ( 6-溴苯並[d]異嚀唑-3-基）苯甲醛（化合物7) ( 2 g )之二氯甲烷（3 3 mL )攪拌溶液中並於室溫和氮氣下經 攪拌1 8小時。令濾液經過濾和蒸發並自二氯甲烷-甲醇結 晶析出以生成標的化合物（2 ·4 g )。 化合物9 : 1- ( 2- ( 6-溴苯並[d]異嘌唑-3-基）苯基）- 2-環丙基乙胺 -33- 201105324

於氮氣和攪拌下令（E ) -#- ( 2- ( 6-溴苯並[d]異噚唑_ 3-基）亞苄基）-1，1-雙（4-氟苯基）甲胺（化合物8)( 1.34 g)之乾四氫呋喃（15 mL)溶液經冷卻至-78°C並逐 滴加入三級丁氧化鉀之四氫呋喃（3.2 mL )溶液（1 Μ )。 溶液轉呈暗紫色。經20分鐘後，一次加入（碘甲基）環丙 烷（1.45 g )且令溶液緩慢回溫至室溫，於室溫下經攪拌 1.5小時，隨後經加入水（1 0 mL )驟冷且經乙酸乙酯萃取 。令有機萃取液置於無水硫酸鎂上乾燥並經蒸發以生成暗 紅色膠，且令該暗紅色膠溶解於丙酮（20 mL )中並加入 2N HC1水溶液（1 5 mL )，隨後令該混合物經隔夜攪拌。 藉由蒸發除去丙酮並令該水溶液經二氯甲烷萃取。令該水 溶液經加入碳酸氫鈉呈鹼性且經二氯甲烷萃取，置於無水 硫酸鎂上乾燥並經減壓下蒸發。先後經SCX純化（先後經 甲醇和氨之甲醇溶液洗提）和矽膠閃燦層析（經〇至5 %甲 醇之二氯甲烷溶液洗提），生成標的產物（0.39 g)。 化合物1 0 : 3 - ( 2- ((£)-(( S )-三級丁基亞磺醯 基亞胺基）甲基）苯基）苯並[d]異嚀唑-6-羧醯胺 -34- 201105324

將（51) - )-三級丁基亞磺醯胺（1. 化鈦（IV ) ( 4.8 mL)先後加入至3- ( 2-甲 Q 並[d]異嚀唑-6-羧醯胺（化合物7 ) ( 4.12 g (50 mL)懸浮液中。令該混合物經攪拌3天 經攪拌之冰水（200 mL )上且加入乙酸乙酯 再經通過矽藻土過濾且令固體塞物經熱乙酸 )沖洗，將有機層置於無水硫酸鎂上乾燥並 呈部分固化膠狀之標的化合物（5.7g)。 藉由類似之方法，製備下述之化合物： 化合物11a : ( 五）-ΛΓ- ( 2- ( 6-溴苯立 〇 基）亞苄基）-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺，起 苯並[d]異嚀唑-3_基）苯甲醛（化合物4a)。 化合物Ub : ( ，五）-#- ( 2- ( 7-溴苯立 基）亞苄基）-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺’起 苯並[d]異谔唑_3_基）苯甲醛（化合物4b)。 化合物 12 : 3- ( 2- ( ( S) -1- ( ( S) -1: 亞磺醯胺基）-2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 唑-6-羧醯胺 9 7 g )和乙氧 醯基苯基）苯 )之四氫呋喃 ，隨後倒入至 (2 0 0 m L )， 乙酯（200 mL 經蒸發以生成 g [d]異 nf 唑-3-始自2- ( 6-溴 Ud]異嚀唑-3-始自2- ( 7-溴 ，1_二甲基乙基 )苯並[d ]異嚀 -35- 201105324 ο

將正丁基鋰之己院溶液（2.5 Μ, 98 mL)經歷時40分· 鐘逐滴加入至於氮氣下且經冷卻至-72t下之2_甲啦陡（ 22.6 mL，21.3 g)之四氫呋喃（ 280 mL)溶液中且同時維 持內部溫度低於-70 °C。令該混合物於該溫度下經攪拌45分 鐘，隨後經歷時45分鐘逐滴加入3- ( 2-((五）-((s) _ 三級丁基亞磺醯基亞胺基）甲基）苯基）苯並[d]異嗤唑-6 -錢醯胺（化合物10) (28.2 g)之四氫呋喃（280 mL) 溶液（內部溫度低於-7(TC )，且隨後於該溫度下經攪拌30 分鐘。令反應混合物回溫至-3 0 °C並加入飽和氯化銨水溶液 (500 mL )。分離相層並令水層經乙醚（ 3x300 mL)沖洗 。令結合之有機萃取液經鹽水沖洗，置於無水硫酸鈉上乾 燥並除去溶劑。經矽膠閃爍層析（先後經乙酸乙酯和1至 5 %甲醇之乙酸乙酯溶液洗提）生成三個級分之產物並隨後 自最少量之乙酸乙酯中結晶析出，生成標的產物（17.2 g )° 藉由類似之方法，製備下述之化合物： 化合物 13: 3-(2-( (S) -1-( (S) -1，1-二甲基乙基 亞磺醯胺基）苯基乙基）苯基）苯並[d]異谔唑-6-羧醯 胺，起始自3 - ( 2 - ( ( E ) - ( ( S )-三級丁基亞磺醯基亞 -36- 201105324 胺基）甲基）苯基）苯並[d]異Df唑-6-羧醯胺（化合物10 )和苄基氯化鎂。 化合物 14a : ( S ) -#- ( ( 15) -^ ( 2- ( 6-溴苯並[d] 異of唑-3-基）苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基）_2 -甲基丙 烷-2-亞磺醯胺，起始自（S，E) _#_(2_(6_溴苯並[d]異嚀 唑-3-基）亞苄基）-2-甲基丙烷-2_亞磺醯胺（化合物lla) 和2 -甲吡啶》 化合物 14b : ( S ) -AT- ( ( ljS)-卜（2- ( 7-溴苯並[d] 異唑-3-基）苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基）_2 -甲基丙 垸-2-亞橫酿胺，起始自（s，E) -7V-(2-(7 -溴苯並[d]異喝 唑-3-基）亞苄基）-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（化合物lib )和2 -甲吡啶。 化合物15a __ 1- ( S) - ( 2- ( 6-溴苯並[d]異噚唑-3-基 )苯基）-2 -(吡啶-2 -基）乙胺

將 2N氫氯酸（10 mL )加入至（S ) -#- ( ( IS ) -1-( 2-(6-溴苯並[d]異嚀唑-3-基）苯基）-2-(吡啶-2-基）乙 基）-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺（化合物14a，1·76 g)之二 氯甲烷（10 mL)溶液中並令該混合物於室溫下靜置。將 所生成之混合物置入甲醇中並載入20 g SCX管柱上且先後 -37- 201105324 經純甲醇和氨-甲醇洗提，隨後令含有產物之級分經蒸發 以生成澄清黃色油狀之標的產物（1.25 g)。 藉由類似之方法，製備下述之化合物： 化合物15b : 1- ( S) - ( 2- ( 7-溴苯並[d]異嚀唑-3-基 )苯基）-2 -(吡啶-2 -基）乙胺，起始自（S )-#-(( 1 S )-1- ( 2- ( 6-溴苯並[d]異噚唑-3-基）苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基）_2_甲基丙烷-2-亞磺醯胺（化合物14b)。 化合物16a : 1- ( S) - ( 2- ( 6 -溴苯並[d]異嚯唑-3-基 )苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯

將二碳酸二（三級丁基）酯（1·24 g)加入至1-(S )-(2- ( 6 -溴苯並[d]異瘦哩-3-基）苯基）-2- ( ΰ比卩定-2-基 )乙胺（化合物15a) (2.13 g)之乾二氯甲院（1〇 mL) 溶液中並令該溶液於周溫下經攪拌2天。加入〇·5Μ檸檬酸 水溶液並令該反應混合物經二氯甲烷萃取’令萃取液經鹽 水沖洗，置於無水硫酸鈉上乾燥’再經過灑及蒸發以生成 暗褐色油，該產物經矽膠（40 g)管柱（經25%乙酸乙酯 之己烷溶液）純化以生成標的產物（1 ·72 g ) ° 藉由類似之方法’製備下述之化合物： -38- 201105324 化合物16b : 1- ( 〇 - ( 2- ( 7-溴苯並[d]異噚唑-3-基 )苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯，起始自 1-(5) - (2-(7-溴苯並[d]異nf唑-3-基）苯基）-2-(吡 U定-2-基）乙胺（化合物15b)。 化合物17 : 1- ( 2· ( 6_溴苯並[d]異nf唑-3-基）苯基 )-2-環丙基乙基胺甲酸三級丁酯，起始自1- ( 2- ( 6-溴苯 並[d]異嚀唑-3-基）苯基）-2-環丙基乙胺（化合物9)。 化合物18a : 3- ( 2- ( 1- ( S)-(三級丁氧羰基胺基 )_2-(吡啶_2·基）乙基）苯基）苯並[d]異nf唑-6-羧酸

將氫化鈉（3.34 g)之60 %礦物油分散液加入至於5 °C 下1- ( <S) - ( 2- ( 6-溴苯並[d]異嗶唑-3-基）苯基）-2-(吡 啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯（化合物16a) ( 1·72 g) 之二乙醚（30 mL)溶液中。令該分散液於5 °C下經攪拌10 分鐘並隨後經冷卻至-65t且加入正丁基鋰之己烷（5.57 mL )溶液（2·5Μ )。令該懸浮液於-70°C下經攪拌30分鐘 並隨後倒入至二氧化碳固體九粒上且經靜置直至該混合物 達至室溫。將水加入至該混合物中，經檸檬酸酸化並經乙 醚（ 3 x200 mL)萃取，將有機層置於無水硫酸鎂上乾燥並 -39- 201105324 經蒸發。閃爍層析（經1 〇%甲醇之二氯甲烷溶液洗提）生 成標的產物（0.71 g)。 藉由類似之方法，製備下述之化合物： 化合物18b : 3- ( 2- ( 1- ( S )-(三級丁氧羰基胺基 )-2-(吡啶-2-基）乙基）苯基）苯並[d]異nf唑-7-羧酸， 起始自1-(S) - (2-(7-溴苯並[d]異嚀唑-3-基）苯基）_2_ (吡啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯（化合物16b )。 化合物1 9 : 3 - ( 2 - ( 1 -(三級丁氧幾基胺基）-2 -環丙 基乙基）苯基）苯並[d]異嚀唑-6-羧酸，起始自1- ( 2_ ( 6_ 溴苯並[d]異of唑-3-基）苯基）-2-環丙基乙基胺甲酸三級 丁酯（化合物1 7 )。 化合物20a : 1- ( 51) · ( 2- ( 6-(氯羰基）苯並[(1]異0碧 唑-3-基）苯基）-2-(吡啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯

先後將三乙胺（127 μί)和亞硫醯氯（35.5 μί)加入 至於氮氣下且經冰浴冷卻之3- ( 2- ( 1 ( S)-(三級丁氧羰 基fee基）-2-(卩比Π定_2_基）乙基）苯基）苯並[d]異嘻哩-6 _ 羧酸（化合物18〇 ( 45 mg)之乾二氯甲烷（2 mL)溶液 中。經1 〇分鐘後，減壓下除去溶劑以生成標的產物。 -40- 201105324 藉由類似之方法，製備下述之化合物： 化合物 20b: 1-(S) - (2-(7-(氯羰 3 口坐_3 -基）苯基）-2-( D比D定-2 -基）乙基胺弓 起始自3-(2-(l-(S) ·(三級丁氧羰基胺 2-基）乙基）苯基）苯並[d]異嚀唑·7·羧酸 〇 化合物21: 1-(2-(6-(氯羰基）苯並 ^ )苯基）-2-環丙基乙基胺甲酸三級丁酯，:t 1-(三級丁氧羰基胺基）-2-環丙基乙基） 異嚀唑-6-羧酸（化合物19)。 化合物 22 : 3- ( 2- ( 1- ( S ) ·胺基-2-( 基）苯基）苯並[d]異谔唑-7-羧酸甲酯 :)苯並[d]異of 酸三級丁酯， S ) -2-(吡啶-(化合物1 8 b ) [d]異of唑-3-基 B 始自 3- ( 2-( 苯基）苯並[d] 吡啶-2 -基）乙

將1，1'-雙（二苯膦基）-二（環戊二烯 (II) (42 mg ) 、1，1·-雙（二苯膦基）二 亞鐵〇2 mg)及三乙胺（0.2 mL)加入至 (7 -溴苯並[d]異愕唑-3-基）亞苄基）-2 -甲 醯胺（化合物1 lb ) ( 145 mg )溶於乾甲醇 )亞鐵二氯鈀 (環戊二烯） (S,E) -N- ( 2-基丙烷-2-亞磺 (1 mL)和乾 -41 - 201105324 N，N-二甲基甲醯胺（3 mL)之溶液中。令該溶液於80至 9 0°C之溫度和一氧化碳氣體下經隔夜攪拌。閃爍層析（經 〇至5%甲醇之二氯甲烷溶液洗提）並隨後經蒸發，經2N HC1之乙醚（1 mL)溶液處理10分鐘，隨後先後經SCX層 析（先後經甲醇和氨之甲醇溶液洗提）和閃爍層析（經2 至10%甲醇之二氯甲烷溶液洗提）純化，生成標的化合物 (22 mg )。

C 實施例 實施例1: 3-(2-(1-(5)-胺基-2-(吡啶-2-基）乙 基）苯基）苯並[d]異噚唑-6-羧醯胺L-(+)-酒石酸鹽

將21^11(：1之二乙醚（35〇1111〇—次加入至3-(2-(( s) -1-( (S) -1，1-二甲基乙基亞磺酶胺基）-2-(吡啶-2- 基）乙基）苯基）苯並[d]異nf唑-6·羧醯胺（化合物12) (63 g)之甲醇（700 mL)溶液中。令該溶液於室溫下經 攪拌2.5小時，隨後加入乙醚（2 L )’再加入飽和碳酸鈉 水溶液（約1 . 5 L )至約pH 1 0。分離相層並令水溶液先後 經乙醚（X6 )和二氯甲烷（X3 )萃取’且令結合之有機級 -42- 201105324 分置於無水硫酸鈉上乾燥’經減壓下除去溶劑以生成黃色 泡沫，該黃色產物經砂膠（800 g)層析（經乙酸乙醋-甲 醇-7M氨之甲醇溶液（90:10:0.3)洗提）以生成白色泡沫 (35 g)，該白色產物經轉化爲L- ( + )-酒石酸鹽並自甲 醇結晶析出以生成標的化合物（52 g) ; MS ( ES ) ： m/z 3 5 9 [Μ + Η]+ ； [α]〇 ( MeOH, c = 4.4 ) +8.4。 藉由類似之方法，製備下述之化合物：

實施例2: 3-(2-( (S) -1-胺基-2-苯基乙基）苯基 )苯並[d]異嚀唑_6_羧醯胺氫氯酸鹽，起始自3-(2_( (S )-1-( (S) -1，1-二甲基乙基亞磺醯胺基）-2-苯基乙基） 苯基）苯並[d]異nf唑-6-羧醯胺（化合物13) ; MS(ES) ：m/z 3 58 [Μ + H]+ ； [α]〇 ( MeOH, c = 2.1) +34.3。 實施例3 : 3- ( 2- ( 1- ( S)-胺基-2-(吡啶-2-基）乙 基）苯基）二甲基苯並[d]異nf唑-6-羧醯胺L- ( + )-酒石酸鹽

G

將過量之二甲胺（2M四氫呋喃溶液）加入至1- ( 51)-(2-(6-(氯羰基）苯並[d]異嚀唑-3-基）苯基）-2-(吡 啶-2-基）乙基胺甲酸三級丁酯（化合物2 0a)溶於乾二氯 -43- 201105324 甲烷（2 mL )之經冰浴冷卻的攪拌溶液中並隨後令反應物 回溫至室溫。經1小時後，減壓下除去溶劑並令殘餘物經 閃爍層析（經1至4%甲醇之二氯甲烷溶液洗提）純化。令 該三級醯胺之純級分經蒸發並隨後溶解於二氯甲烷（2.5 mL)中且與三氟乙酸（0.5 mL)反應。蒸發及經SCX層析 (先後經甲醇和氨之甲醇溶液洗提）純化以生成胺自由鹼 (2 07 mg)，該產物與L- ( + )-酒石酸反應以生成標的化 合物（16 mg) ; MS (ES) : m/z 387 [Μ + H]+。 f 藉由類似之方法，製備下述之化合物： ^ 化合物23: 3-(2-(1-胺基-2-環丙基乙基）苯基）苯 並[d]異of唑-6-羧醯胺，起始自1-(2-(6-(氯羰基）苯並 [d]異嚀唑-3-基）苯基）-2-環丙基乙基胺甲酸三級丁酯（ 化合物2 1 )和氨。 實施例4 : 3- ( 2- ( 1- ( S)-胺基-2-(吡啶-2-基）乙 基）苯基）-#，#-二甲基苯並[d]異of唑-7-羧醯胺L- ( + )-酒石酸鹽，起始自卜（S) - ( 2- ( 7-(氯羰基）苯並[d]異 d碧唑-3 -基）苯基）-2 -(吡啶-2 -基）乙基胺甲酸三級丁酯 (化合物20b )。

-44 - 201105324 實施例5: 3- (2-( 1-(S)-胺基-2-環丙基乙基）苯 基）苯並[d]異嚀唑-6-羧醯胺L-(+)-酒石酸鹽

藉由SFC製備性層析（40 mL/分鐘，220 nm偵測，35°C， 100 Bar之ADH管柱，25%異丙醇/0.1 %異丙胺作爲改質劑） ，使溶於甲醇（50 mL)之3-(2-(1-胺基-2-環丙基乙基 )苯基）苯並[d]異嚀唑-6-羧醯胺（化合物23 ) ( 280 mg )經分離爲鏡像異構物成分。使第一洗提峰之自由鹼轉化 爲L-(+)-酒石酸鹽以生成標的化合物（73 mg) ； MS ( 〇 ES ) : m/z 3 5 9 [Μ + Η]+。當使用 SFC分析級層析（100 bar，4 mL/分鐘，25%異丙醇 /0.1%異丙胺，35°C，Chiralpak AD-H 管柱（25 cmx〇.46 cm)，220 nm UV偵測）時，與 消旋混合物相比較，此鏡像異構物係第一洗提峰。 實施例6 : 3- ( 2- ( 1- ( S )-胺基·2-(吡啶-2-基）乙 基）苯基）苯並[d]異of唑-7-羧醯胺L- (+)-酒石酸鹽 -45- 201105324

將3- ( 2- ( 1- ( S )-胺基_2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )-苯並[d]異af唑-7-羧酸甲酯（化合物22 ) ( 22 mg)之 7M氨的甲醇溶液（1 mL )置入密封管中並於75°C下經攪拌 4天’隨後經減壓下蒸發且經閃爍層析（經3至8 %甲醇之二 氯甲烷溶液洗提）純化，再經轉化爲L- (+)-酒石酸鹽以 生成標的化合物（17 mg) ； MS ( ES ) ： m/z 3 59 [Μ + Η]+。 實施例7 利用自動化膜片夾電生理之生物性測試 Α.細胞培養 於22 5 cm2燒瓶內，利用培養基MEM (含有Earle氏鹽

並補充10% Fetalclone II + 0.1 mM非必需胺基酸 + 1 mM 丙酮酸鈉 + 1 〇 mM HEPES + 0· 5 mg/mL G41 8 )培養 HEK- hHCNl-2H10細胞。該等細胞係慣常地維持於37°C 、 5%C02大氣及100%相對溼度下直至50%匯合。於使用前24 小時，於3 0 °C下培育細胞以增加HCN 1膜表現並於進行膜 片夾實驗前立即收取細胞。於真空下吸取該生長培養基並 利用Dulbecco氏磷酸鹽緩衝鹽水（5〇 mL;不含有CaCl2和 -46- 201105324

MgCl2 ; D-PBS )沖洗細胞。令該等細胞於37°C下與0.1% 胰蛋白酶/0.04 % EDTA之1:1混合物（5 mL)和細胞解離緩 衝液（CDS )培育2分鐘以使該等細胞解離。藉由加入生 長培養基（5 mL)中止細胞解離，隨後使用10 mL吸量管 藉由溫和碾碎3至4次使該等細胞經機械性解離。利用血細 胞計計數該等細胞，並藉由離心（212 g)達1.5分鐘回收 該等細胞且再懸浮於經過濾之外部測定溶液（5 mL ;參閱 Q 下述說明）中。該等細胞再次經上述之離心加以回收且再 懸浮於經過濾之細胞外溶液（細胞密度2x1 06細胞/mL;經 碾碎4至5次）中。立即將該等細胞轉移至IonWorks。 B.膜片夾測量 利用 IonWorks Quattro ( MDS Analytical Technologies )進行自動化膜片夾測量。該IonWorks Quattro係經裝塡 細胞內測量溶液（單位mM :葡糖酸鉀，130 ; NaCl, 10 ; Q MgCl2，1 ; EGTA，1 ; HEPES，10; pH 7_35)和細胞外測量 溶液（單位mM :葡糖酸鈉，104 ; NaCl，10 ; KC1, 30 ; MgCl2, 1 ; CaCl2, 1.8 ; Hepes, 10 ;葡萄糖，5 ; pH 7.35) 。建立穿孔膜片夾測量（含有0.1mg/mL兩性黴素B之 0.3 6% DMSO溶液）且該等細胞之電壓夾係-40mV。完整細 胞之穿孔膜片夾測量係分開實施2次，其中電壓步驟至-80 mV和-120 mV達1秒；於通道活化前，使用-10 mV電壓脈 衝進行漏減（leak subtraction )。測試化合物之1 2種濃度 (半對數間隔；1 % DMSO )並在電流記錄之間進行培育1 〇 -47- 201105324 分鐘。利用低於100 pS之完整細胞電流、密封電阻<50 ΜΩ 或若該密封電阻於實驗期間之變化係>50%以排除細胞。在 化合物加入之前或之後，測量由HCN媒介之取決時間的電 流之振幅，其係爲在瞬間步進測試電壓之電容後立即記錄 的電流與已達穩態振幅後測量之電流之間的差異。利用 IonWorks Quattro系統軟體（第2版）處理數據並利用 Activity Base XLFit 4.1版（使用標準4參數邏輯功能）進 行分析。產生具有適當之信賴間隔的濃度反應曲線並報告 化合物對hHCNl通道之功效（pEC5G値）。 本發明之化合物於-80 mV電壓步驟下具有大於4之 pEC5G活性且本發明之較佳化合物於-80 mV電壓步驟下具 有大於5之pEC5G活性。 實施例8 神經病性疼痛之大鼠（Chung氏）模型 於此模型中，藉由左L 5脊神經之緊密結紮以引起機械 性異常性疼痛。已成功地使用此測定以證實抗驚厥劑（加 巴噴丁（ gabapentin ))、抗抑鬱劑（千憂解（duloxetine ))及類鴉片止痛劑（嗎啡）之抗異常性疼痛的功效，該 等藥物於臨床上係用於治療神經病性疼痛。 本硏究使用Wistar雄大鼠（rats )(手術時體重228至 301 g)。大鼠被置於經升高（約4〇crn)之聚甲基丙靖酸 甲脂（Perspex)箱內的篩孔底板上且利用增強力量（26 至1 67 mN )之纖絲測量該大鼠對機械刺激（經刻度化之 von Frey纖絲）之退縮臨界値。該von Frey纖絲係施於腳 -48- 201105324 之跪表面且利用上下方法（up and down method;文獻 Chaplan S.R. et al.，J. Neurosci. Methods 53: 5 5-63，1994 ;Dixon. J. Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20: 44 1 -462, 1 9 8 0 )測定臨界値反應。若該腳敏銳地退縮，記爲正反應 。選擇截止値1 5 g作爲測試上限。在基礎測量後，每隻動 物皆經麻醉且緊密結紮L5脊神經。該等動物於該手術後恢 復至少3天。在給藥當天，再測量該腳退縮臨界値（〇分鐘 〇 )。在該讀値後立即對該等大鼠口服給予載劑或測試化合 物並於給予化合物後於不同之時間點測量讀値。 數據係以平均値±標準測量誤差表示。利用Kruskal-Wallis單向變異性分析（一種非參數性統計測試）進行統 計分析。利用非參數性Dunn氏測試，比較每個測試組與載 劑組。利用線性回歸（s字形劑量反應；可變斜率）且固 定截値〇和15 g分別爲底値和頂値（XLFit軟體），於tmax 時亦計算EDw値（逆轉異常性疼痛達約5〇%時之劑量）。 〇 -49-

Claims (1)

1. 201105324 七、申請專利範圍： k ~種通式I之2-(1,2-苯並異of唑-3-基）苄胺衍生 物

   r4 式I 其中 R1代表位於I，2-苯並異嘌唑環之第5、6或7位置之一者 的 CONR2r3基； 和R3各別爲Η或（Cm)烷基；且 R4係環丙基、2-吡啶基或苯基，該苯基任意地經—或 多個鹵素取代； 或其藥學上可接受之鹽。 2 ·如申請專利範圍第1項之2 - ( 1，2 -苯並異嚀唑-3 -基 )苄胺衍生物，其中R4係環丙基。 3 ·如申請專利範圍第1項之2- ( 1,2-苯並異嚀唑-3-基 )苄胺衍生物，其中R4係2-吡啶基。 4 ·如申請專利範圍第1項之2 - ( 1，2 -苯並異噚唑-3 -基 )卞fee衍生物’其中R_4係苯基’該苯基任意地經一或多個 鹵素取代。 5 如申請專利範圍第1至4項中任一項之2 - ( 1 , 2 -苯並 -50- 201105324 異of唑·3·基）苄胺衍生物，其中Ri代表位於12·苯並異噚 唑環之第6位置的CONR2R3基。 6. 如申請專利範圍第5項之2- ( i，2 -苯並異嚀唑-3-基 )苄胺衍生物，其中R2和R3皆爲甲基或氫，最佳地R2和R3 皆爲氫。 7. 如申請專利範圍第1項之2- ( 1,2-苯並異噚唑-3-基 )苄胺衍生物，其選自： Q - 3-(2-(1-(5)-胺基-2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )苯並[d]異嘌唑-6·羧醯胺； -3-(2-( (*S) -1-胺基-2-苯基乙基）苯基）苯並[d] 異嚀唑-6-羧醯胺； -3-(2-(1-(5)-胺基-2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )二甲基苯並[d]異嚀唑·6_羧醯胺； -3-(2-(1-(5)-胺基- 2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )二甲基苯並[d]異of唑_7·羧醯胺； 〇 - 3-(2-(l-(S)-胺基-2-環丙基乙基）苯基）苯並 [d]異嚀唑-6-羧醯胺；及 -3-(2-(1-( S)-胺基- 2-(吡啶-2-基）乙基）苯基 )苯並[d]異噚唑羧醯胺； 或其藥學上可接受之鹽。 - 8. 如申請專利範圍第1至4項中任一項之2- ( 1，2-苯並 異嗜唑-3-基）苄胺衍生物，其係用於治療。 9. 一種醫藥組成物，其包含與藥學上可接受之輔助 劑摻合之如申請專利範圍第1至7項中任一項之2- ( 1，2-苯 -51 - 201105324 並異Df唑-3-基）苄胺衍生物。 10. —種如申請專利範圍第1項之式I衍生物於製備 供治療經由調節U通道所媒介之疼痛（較佳地神經病性疼 痛或發炎性疼痛）的藥物上之用途。 -52- 201105324 四、指定代表囷： (一） 、本案指定代表圖為：無 (二） 、本代表圖之元件代表符號簡單說明：無 201105324 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式：式（I) 7

   式I

   -4-