TW201033192A - A novel cyanopyrimidine derivative - Google Patents

Description

201033192 … 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明有關於一種新穎之氰基嘧啶化合物、其醫藥組 成物以及包含上述化合物的配方。 【先前技術】 腺核苷（adenosine)是一種當結合至細胞表面的受體 (receptor)時，能抑制許多生理活性的物質。位於細胞表 面的腺核苷受體屬於G蛋白耦合性受體家族（G_pr〇tein— ❹ coupled receptor family)，並且分類成 A1、A2a、A2b、 A3。在其中’腺核苷A1以及腺核苷A3受體和Gi-蛋白耗 合’且其活性化的結果造成細胞内c-AMP的水平（ievei) 降低。另外’腺核苷A2a以及腺核苷A2b受體和Gs-蛋白 耦合後’其活性化的結果造成細胞内c-AMP的水平升高。 已分別複製（clone)上述4種腺核苷受體的亞型 (subtype) 〇 ❹ 已經有許多的報導是有關可以作用在上述各腺核苷受 體亞型的促效劑（agonist)和括抗劑（antagonist)的研”w 究。在其中，腺核苷A2a受體促效劑不僅表現出有效的降_, 壓（antihypertensive)活性，能有效作為上述藥物，諸如 降壓藥、用來治療/預防心臟或腦的缺血性疾戚疏羞劑， 及抗動脈硬化藥（antiarteriosclerotic)，並且表現出眼 睛的降壓活性（請參見 J. Pharmcol. Exp. Then 320-326, 1995) 〇 在WO 2005/105778文件中記載氰基嘧啶化合物為一種 3 321758 201033192 • ' > 腺核苷A2a受體促效劑。然而，WO 2005/105778並未明確 地揭露任何一種如本發明之特定氰基嘧啶化合物。 【發明内容】 (發明欲解決之課題） 本發明的目的為提供一種安全有效，且具有腺核苷A2a 受體促效活性的新穎化合物 (解決課題之方法） 本發明人為了達到上述目的廣泛研究的結果，發現下 述化合物表現出有效的腺核苷A2a受體促效活性且非常安 全。另外’本發明人也發現下述化合物表現出對眼睛的睫 狀動脈的血官舒緩作用以及對視網膜神經節細胞的神經保 護作用。本發明是以這些發現為基礎，更進一步研究而完 成。 本發明提供一種示於下列第1項中的氰基嘧啶化合 物，包含該化合物的組成物及配方，該化合物之用途，治 療或預防疼病的方法，以及該化合物的製造。 第1項.一種下式（1)的氰基嘧啶化合物或其鹽，其中R為 氫、經（低級燒基）、鹵代（低級院基）或（低級燒氧基）幾基 -（低級烧基）。

4 321758 201033192 第2項·如第1項之氰基嘧啶化合物或其鹽，選自包含下 列化合物之組群： (1) N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-侧氧基-3-(4-(哌啶 -4-基曱基）哌畊-丨_基）丙基）吡啶_2—基）甲硫基）一嘧 咬-4-基）苯基）乙酿胺； (2) N-(4-(.6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-羥乙基） -哌啶-4-基）曱基）哌啡q —基）_3_侧氧基丙基）吡啶 -2-基）甲硫基）鳴啶-4-基）苯基）乙醯胺； (3) N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(3-羥基一丙 基）旅咬_4一基）甲基）派哄基）_3_侧氧基丙基）一吼 啶-2-基）曱硫基）嘧啶—4-基）苯基）乙醯胺； (4) N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-氟乙基） -哌啶-4-基）甲基）哌畊q —基）_3_侧氧基丙基）吡啶 -2-基）甲硫基）嘧啶—4-基）苯基）乙醯胺；以及 (5) N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-曱氧基一 ⑩ 羰乙基）派啶-4-基）甲基）旅哄+基）_3一側氧基丙基） 吡啶-2-基）曱硫基）嘧啶—4-基）苯基）乙醯胺。 第3項.一種包含第]項或第2項之化合物或其鹽的醫藥 組成物，以及製樂可接受的載體 acceptable carrier)。 第4項.一種如第3項之醫藥組成物，係用來治療或預防 眼睛疾病。 第5項.一種如第4項之醫藥組成物，係用來治療或預防 青光眼。 5 321758 201033192 第6項.一種第1項或第2項之化合物或其鹽之用途，係 作為腺核苷A2a受體促效劑。 第7項.一種治療眼睛疾病的方法，包含提供有效劑量之 第1項或第2項之化合物或其鹽類給予需要此種治療的動 物或人類。 第8項·一種包含第3項之醫藥組成物的水性液體製劑。 第9項.如第8項之水性液體製劑，更進一步包含一種或 多種添加劑，該添加劑係選自製藥可接受的緩衝液、等張 劑（isotonic agent)、防腐劑、助溶劑（solubilizer)以及 ❹ pH調節劑。 第10項.如第9項之水性液體製劑，其中緩衝液係選自琥 珀酸、硼酸、磷酸、胺基酸及其製藥可接受的鹽類。 第11項.如第10項之水性液體製劑，其中緩衝液為琥珀 酸0 第12項.如第8項之水性液體製劑，其中等張劑為一種或 兩種選自下列組群的等張劑：葡萄醣、山梨醇、甘露酵、 氣化鈉、氯化卸、丙二醇以及甘油。 ❹ 第13項.如第9項之水性液體製劑，其中防腐劑係選自氯 化苯二曱經銨（benzalkonium chloride)、氣化笨铵松寧 (benzethonium chloride)、苯度溴銨（benzododecinium bromide，BOB)、氯己定葡糖酸鹽（chl〇rhexidine gluconate)、對位羥基苯甲酸甲酯（Methyl paraoxybenzoate)、對位羥基苯曱酸丙醋（proPyi paraoxybenzoate)、氣丁醇（chl〇robutanol)以及苯甲醇 6 321758 201033192 ·/ * (benzyl alcohol) ° 第14項· 一種如第8項至第13項中任一項之水性液體製 劑，其中pH值約為5· 0至9. 0者。 上述通式中定義的各基團的具體例子如下。 在此所使用的函素原子包括氟、氯、溴以及硬原子。 在此所使用的（低級烷氧基）羰基包括烷氧基羰美 (alkoxycarbonyl)，其中烷氧基部分（alk〇xym〇iety)g^ 1至6個碳的直鏈或分支狀的烷氧基。具體而言，例如I 括甲氧基羰基、乙氧基羰基、正-丙氧基羰基、異丙氧基羰 基、正-丁氧基羰基、異丁氧基羰基、第三丁氧基羰基^第 二丁氧基羰基、正-戊氧基羰基、新戊氧基羰基、正—己氧 基幾基、異己氧基羰基、3-甲基戊氧基羰基等等。 在此所使用的齒代（低級烷基）包括低級烷基（較佳為丄 至6個碳的直鏈或分支狀的烷基）經丨至7個鹵素原子，較 佳為1至3個鹵素_原子取代者。具體而言，例如包括氟^ ❹基、二氟甲基、二氟甲基、氯甲基、二氣甲基、三氯甲基、 溴甲基、二溴甲基、二氣氟甲基、2, 2_二I乙基、2, 二氟乙基、五氟乙基、2-氟乙mt：乙磨、3,5扣3_三銳她 丙基、七氟丙基、2’2, 3, 3, 3-五氟丙基、七氟異丙基、3一 . 氣丙基、2 -氯丙基、3 -溴丙基吻勤♦三翁予潘,碎^，3 3一 μ 五氟丁基、4-氯丁基、4-涛丁基、2-氯丁基、5, 5, 5_三氟 戊基、5-氯戊基、6’6, 6-三氟己基、6—氯已基、全氟己基 等等。 ^ 在此所使用的羥（低級烷基）包括上述低級烷基（較佳 321758 7 201033192 為1至6個碳的直鏈或分支狀的烷基）經1至5個羥基，較 佳為1至3個羥基取代者。具體而言，例如包括羥基曱基、 2-羥基乙基、1-羥基乙基、3-羥基丙基、2, 3-二羥基丙基、 4- 羥基丁基、3, 4-二羥基丁基、1,卜二甲基-2-羥基乙基、 5- 羥基戊基、6-羥基己基、3, 3-二甲基-3-羥基丙基、2-甲基-3-羥基丙基、2, 3, 4-三羥基丁基、全羥基己基 (perhydroxyhexyl)等等。 在此所使用的（低級烷氧基）羰基低級烷基包括上述低 級烷基（較佳為含1至6個碳的直鏈或分支狀的烷基），具 ◎ 有1至3個（較佳為1至2個）上述（低級烷氧基）幾基（較佳 為具有1至6個碳的直鏈或分支狀的烷氧羰基）者。具體而 言’例如包括曱氧基羰基曱基、乙氧基羰基甲基、1-曱氧 基獄基乙基、2—甲氧基羰基乙基、2-乙氧基羰基乙基、1- 乙氧基幾基乙基、2-第三丁氧基羰基乙基、3_曱氧基羰基 丙基、3乙氧基羰基丙基、乙氧基羰基丁基、5-異丙氧 基羰基戊基、6-正-丙氧基羰基己基、}，卜二甲基_2_正- 丁氧基j基乙基、1-曱基-1_甲氧基羰基乙基、2-甲基-1_ 甲氧基羰基丙基、2-曱基-3-第三丁氧基羰基丙基、3-甲基 -1-甲氧基羰基丁基、二乙氧基羰基曱基、一二乙氧基羰 基乙基、2-正-戊氧基羰基乙基、正-己氧基羰基曱基等等。 在上述通式（1)中所表示的嘧咬衍生物可由許多方式 製儀。例如該等衍生物可根據下述方法1至方法4製備。 方法1 8 321758 201033192

(la) Ra一X (2) τ

其中Ra為羥（低級烧基）、南代（低級烷基）或（低級烷氧基） m(低級院基）’ X為_素原子或是能完成如同鹵素原子取 代反應的基團。

在式（2)的化合物中X表示之鹵素原子，包括氟、負 溴、碘原子。 以Λ 7、犯元成如同鹵素原子之取代反應的基 例如包括脫離基（leav. _ 以及芳基郝氧基。⑽1^)’諸如（低級统）確_ 的（低級燒*)磺酿氧基，包括具有1至1 奴的直鏈或分支肤的 ^ , 的坡磧醯氧基。具體而言’例如包4 烷磺醯氧基、乙焓;^ "峻氣基、異丙烧項醯氧基、正〜兩^ 321758 9 201033192 醯氧基、正-丁烷磺醯氧基、第三丁烷磺醯氧基、正-戊烷 磺醯氧基、正-已烷磺醢氧基等等。 此處所使用的芳基磺醯氧基，例如包括苯基磺醯氧 基、萘基磺醯氧基等等。芳基可具有1至3個選自下列組 群之取代基，例如：含有1至6個碳的直鏈或分支狀的烷 基、含有1至6個碳的直鏈或分支狀的烷氧基、硝基以及 鹵素原子。芳基磺醯氧基的具體例子如下，包括例如苯基 磺醯氧基、4-甲基苯基磺醯氧基、2-曱基苯基磺醯氧基、 4-硝基苯基磺醯氧基、4-甲氧基苯基磺醯氧基、2-硝基苯 基磺醯氧基、3-氯苯基磺醯氧基等等。萘基磺醯氧基的具 體例子如下，包括例如α -萘基磺醯氧基、-萘基磺醢氧 基等等。 式（lb)的化合物可藉由將化合物（la)以及化合物（2) 反應而製得。 上述反應係在不會對反應有不良影響的常見溶劑中進 行，例如水；醇類溶劑諸如甲醇、乙醇、異丙醇、正-丁醇、 三氟乙醇以及乙二醇；酮類溶劑諸如丙酮、丁酮；醚類溶 劑諸如四氫α夫喃、二氧陸圜（dioxane)、二乙趟以及二甘醇 二曱醚（digl yme );醋類溶劑諸如乙酸曱醋、乙酸乙醋；非 質子極性溶劑（aprotic polar solvent)諸如乙腈、N，N-二曱基曱醯胺以及二曱亞砜；鹵化烴溶劑諸如二氯甲烷以 及二氯乙烷；或其他有機溶劑。另外，反應可以在上述常 見溶劑的混合物中進行。 上述的反應通常在鹼性化合物的存在下進行。鹼性化 10 321758 201033192 合物包含常見的無機鹼和有機驗。 此處所使用的無機鹼包含例如鹼金屬諸如鈉或鉀，鹼 金屬碳酸氫鹽諸如碳酸氫鋰、碳酸氫鈉以及碳酸氫鉀；鹼 金屬氫氧化物諸如氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鉀以及氬 氧化鉋；鹼金屬碳酸鹽諸如碳酸鋰、碳酸鈉、碳酸鉀以及 碳酸铯；鹼金屬（低級烷醇鹽）諸如曱醇鈉以及乙醇鈉；鹼 金屬氫化物化合物諸如氫化鈉以及氫化鉀等等。 ❹ 此處所使用的有機鹼例如包括三烷基胺諸如三甲基 胺、三乙基胺以及N-乙基二異丙基胺；吡啶；喹啉；哌啶； 咪唑，甲》比咬（pic〇line);二甲胺p比啶 (dimethylaminopyridine);二甲基苯胺；N_甲基嗎啉；1，5-一氮雜一裱[4. 3. 0]壬-5-烯（DBN) ; 1，4-二氮雜雙環[2· 2. 2] 辛烧（DABC0) ’· 1’8_二氮雜雙環[5 4 〇]十一_7_婦⑽们等 等。 驗化合物可以使用單一成分或任何兩種或更多種成分 φ 的組合。 此處使用的驗化合物的量一般是化合物（la)的〇 5至 10倍莫耳量，較佳為化合物（la)的〇. 5至6倍莫耳量。當 鹼化合物是液態時也可以做為澪劑。 上述反應的；〖質包括可作為&應磨择進靜龄驗^金嘱域仍》w:; 物，適合者諸如破化卸以及破化納。 上述方法1中使用之化合物（la)和化合物（2)的比例 至少為1莫耳，較佳為每1莫耳的化合物（la)使用1至5 莫耳的化合物（2)。 321758 11 201033192 反應溫度並無任何限制，反應通常在冷卻狀態、室溫 或是加熱狀態下進行。較佳為上述的反應約在室溫下進行 1至30小時。 方法2

X HN 八 CHS

H〇j〇’ ⑷

其中R的定義同上述。 化合物（1)可藉由將化合物（3)或其羧基經活化的反應 性衍生物與化合物（4 )或其亞胺基經活化的反應性衍生物 反應而製得。 在化合物（3)中羧基較佳的反應性形式包含酸鹵化物 12 321758 201033192 (acid halide)、酸酐、活性醯胺（amide)、活性酯等等。 較佳的羧基反應性形式包括酸氯化物（acid chloride);醯 基疊氮（acidazide);經取代磷酸的混合酸酐（如二烷基磷 酸（dialkyl phosphoric acid)、苯基磷酸（phenyl phosphoric acid)、聯苯基磷酸（diphenyl phosphoric acid)、聯苯曱基鱗酸（dibenzyl phosphoric acid)以及鹵 代磷酸（halogenated phosphoric acid))、二燒基亞填酸 (dialkyl phosphorous acid)、亞硫酸、硫代硫酸、硫酸、 m _ 確酸（如曱磺酸）、脂族酸（如乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、 三曱基乙酸、戊酸、異戊酸、2-乙基丁酸、三氯乙酸）或芳 香酸（如安息香酸）；對稱酸酐；咪唑的活性醯胺、4-取代 的咪唑、二曱基吡唑、三唑或是四唑；活性酯（如氰甲基酯、 甲氧基甲基醋、一甲基亞胺基甲基醋、乙稀基醋、快丙基 醋、對-硝基苯基酯、2, 4-二硝基苯基酯、三氯苯基酯、五 氯本基醋、甲確醯基苯基醋（meSylphenyl ester)等等）或 ❹是與N-經基化合物（如N，N-二曱基羥胺、1-經基一2-(11〇-°比^疋_、N-經基破ίό 酿亞胺（N-hydroxysuccinimide)、N-經基鄰本二甲醯亞胺（N-hydr〇xyphthalimide)、1-經基 -1H-苯並三唑等等）所成的酯。可根據化合物的種類從 這些反應性衍生物中選擇適當的化合物。 在上述反應中若化合物（3)係使用游離酸或其鹽時，反 應較佳係在縮合劑存在下進行。縮合劑包含常見且著名 的，例如N’N-二氯己基碳二亞胺；N_環己基_N，—嗎啉基乙 基碳二亞胺（N-cyclohexyl~N，_ 321758 13 201033192 morphol inoethylcarbodiimide); N-環己基-N，-(4-二乙基 胺基環己基）碳二亞胺；N, Ν’-二乙基碳二亞胺；N，Ν’-二異 丙基碳二亞胺；Ν-乙基-Ν’-(3-二曱基胺基丙基）碳二亞胺 或其鹽酸鹽；N，Ν’-羰基雙（2-曱基-咪唑）；五亞甲基烯酮 -Ν-環己基亞胺（pentamethyleneketene-N-cyclohexylimine);聯笨烯酮-N-環己基亞胺 (diphenylketene-N-cyclohexylimine);乙氧基乙炔、1-烧氧基-1-氯乙稀；亞鱗酸三院酯（trialkyl phosphite); 聚填酸乙酯（ethyl polyphosphate);異丙基聚雄酸酯 〇 (isopropyl polyphosphate);碟醯氯（phosphorus oxychloride)(績醯氣）；三氯化鱗（phosphorus trichloride);聯苯礦醢叠氮（diphenyl sulfonyl azide);亞硫酿氯（thionyl chloride);草醯氯（oxalyl chloride);(低級烧基）鹵代曱酸酯（如氯曱酸乙酯、氣甲 酸異丙酯等等）；三苯膦；2-乙基-7-羥基苯並異噁唑鑷鹽 (2-ethy 1-7-hydroxybenzisoxazolium salt)；氫氧化 2~ 乙基_5-(間-績酸基笨基）異°惡β坐鐵内鹽（2-ethy 1 -5-(ιη·~ Ο sulfophenyl)isoxazolium hydroxide inner salt)；笨并 三唑-1-基氧基-三-(二曱胺基）鱗六氟磷酸鹽；1-(對-氣笨 磺醯基氧基）-6-氯-1H-苯並三唑；維爾斯邁爾試劑 (ViIsmeier reagent)係可使N，N-二甲基曱醚胺與亞碗酿 氯、二氯化幾（phosgene)、氯曱酸三氣曱酯、碟醯氯等反 應而製得。反應更佳係在上述縮合劑存在下，且與活性醋 化劑諸如N-羥基琥珀醯亞胺、N-羥基苯二曱醯亞胺、1-趣 14 321758 201033192 基-1 Η-苯並三竣接觸下進行。 化合物（4)中亞胺基的較佳反應性衍生物包括希夫鹼 型（Schiff base-type)亞胺基或由化合物（4)和裁基化合 物諸如醛類及酮類反應而得的烯胺型（enamine_type)互變 異構物（tautomer);由化合物（4)和矽基化合物諸如雙（三 甲基矽基）乙醯胺（bis(trimei：hylsilyi)acetamide)、單 (二甲基矽基）乙醯胺以及雙（三甲基矽基）脲反應而得的矽 φ基衍生物（silyl derivative) ·,由化合物（4)和三氣化磷、 一氯化幾反應而得的衍生物等等。 反應通常在不會對反應有不良影響的溶劑中進行，例 如水；醇類溶劑諸如甲醇、乙醇、異丙醇、正_丁醇、三氟 乙醇以及乙二醇·，酮類溶劑諸如丙嗣、丁酮；醚類溶劑諸 如四氫呋喃、二氧陸圜、二乙醚、二異丙醚以及二甘醇二 甲醚；醋類溶劑諸如乙酸曱醋和乙酸乙醋；非質子極性、容 劑諸如乙腈、N，N-二甲基甲醯胺以及二甲亞石風；烴溶劑諸 ©如正戊烧、正己烧、正庚烧以及環己烧；齒化烴溶劑諸如 一氯甲烷以及二氯乙烷；或其他有機溶劑。另外，反應可 以在上述常見溶劑的混合物中進行。 " 上述的反應可在驗存在下進行。驗包括各式各樣已知 的無機驗和有機驗。此處所使用的無機驗包括，例如驗金 屬諸如納及钟；驗金屬碳酸氫鹽諸如碳酸氫鐘、碳酸氯納 以及唆酸氫鉀；驗金屬氫氧化物諸如氫氧⑽、氫氧化納、 風氧化钟以及氫氧化錄；鹼金屬碳酸鹽諸如碳酸鐘、碳酸 納、碳酸舒以及碳酸錄；鹼金屬低級炫醇鹽諸如甲醇納以 321758 15 201033192 及乙醇納；驗金屬氫化物化合物諸如氫化納以及氫化鉀等 等。此處所使用的有機鹼例如包括為三烷基胺諸如三曱基 胺、三乙基胺以及N-乙基二異丙基胺；吡啶；喹啉；哌啶； 咪唑；曱吡啶；二曱胺基吡啶；二曱基苯胺；N-曱基嗎啉； 1，5-二氮雜二環[4.3.0]壬-5-烯（08们；1，4-二氮雜雙環 [2.2.2]辛烷（0人8〇));1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯 (DBU)等等。並且，當鹼化合物是液態時也可以做為溶劑。 驗化合物可以使用單一成分或是任何兩種或更多種成分的 組合。此處使用的驗化合物的量一般約為每1莫耳化合物 (3)使用0.1至10莫耳，較佳為每1莫耳化合物（3)使用 0. 1至3莫耳。 上述方法2中所用化合物（3)和化合物（4)的比例至少 為1莫耳，較佳為每1莫耳的化合物（4)使用1至5莫耳的 化合物（3)。 反應溫度並無任何限制，反應通常在冷卻狀態、室溫 或是加熱狀態下進行。上述反應較佳為在室溫至l〇〇°C下 反應30分鐘至30小時，較佳為30分鐘至5小時。 上述反應中作為反應起始材料的化合物（3)是已知的 化合物，且化合物的製作流程如下所述（方法4)。 方法3 16 321758 201033192

H〇J〇N’（5)

移除N-保護基

17 321758 201033192 其中W為N-保護基。 化合物（6)可由化合物（3)和化合物（5)經類似方法2 的方式反應而製得。再者，化合物（la)可藉由移除保護 基而製得。 此處所使用的N-保護基以W表示，包括例如（低級烧 氧基）羰基、低級烷醯基、芳基取代的（低級烷基）基團等等。 在此所使用的（低級烷氧基）羰基包括具有1至6個碳 的直鏈或分支狀的烷氧羰基。舉例而言，諸如曱氧羰基、

乙氧羰基、丙氧羰基、丁氧羰基、第三丁氧基羰基、戊氧 羰基、己氧羰基等等。 此處所使用的低級烷醯基包括具有1至6個碳的直鏈 或分支狀的烧醯基，例如甲醮基、乙醯基、丙醯基、丁醯 基、異丁醯基、戊醢基、第三戊醯基、己醯基等等。 此處所使用的芳基取代的（低級烷基），例如包括苄 〇 基、2-苯乙基、1-苯乙基、3__苯丙基、4_苯丁基、5_苯戊 基、6-苯己基、二苯曱基、三笨甲基（tri坊1)等等，以及 含有1 S 6個碳的直鏈或分支狀的烧基，其經i至3個苯 基取代°苯基的取代基包括’例如具有i至6個碳的直鍵 或分支狀的烧基’其可選擇性的以i i 3個選自㈣原子 以及經基所成組群之基取代者（諸如甲基、乙基、丙基、正 丁基、第一丁基、第二丁基、正一戊基、正一己基、經甲基、 2羥乙基1羥乙基、3~羥丙基、2,3-二羥丙基、4-羥丁 ^ 1’1 -甲基2’乙基、5,5,4_三經戊基、卜經戍基 (5顿—、6-羥己基、卜經異丙基、2-甲基-3-321758 18 201033192 羥丙基、三氟曱基、三氯甲基、氯曱基、溴甲基、氟甲基、 碘甲基、二氟甲基、二溴甲基、2-氯乙基、2, 2, 2-三氟乙 基、2, 2, 2-三氯乙基、3 -氯丙基、2, 3二氯丙基、4, 4, 4-三氣丁基、4-敗丁基、5-氯戊基、3-氯-2-曱基丙—基、5-溴己基、5, 6-二氯己基、3-羥基-2-氯丙基等等）；具有1 至6個碳的直鏈或分支狀的烷氧基，其可選擇性的以1至 3個選自鹵素原子以及羥基所成組群之基取代（如甲氧基、 乙氧基、丙氧基、正-丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、 ® 正-戊氧基、正-己氧基、羥甲氧基、2-羥乙氧基、卜羥乙 氧基、3-羥丙氧基、2, 3-二羥丙氧基、4-羥丁氧基、1，1-二曱基-2-羥乙氧基、5, 5, 4-三羥戊氧基、5-羥戊氧基、6-羥己氧基、1-羥異丙氧基、2-曱基-3-羥丙氧基、三氟曱氧 基、三氯甲氧基、氯曱氧基、溴甲氧基、氟甲氧基、破甲 氧基、二氟曱氧基、二溴甲氧基、氣乙氧基、2, 2, 2-三 氟乙氧基、2，2, 2-三氯乙氧基、3 -氯丙氧基、2，3-二氯丙 φ 氧基、4, 4, 4-三氯丁氧基、4-氟丁氧基、5-氯戊氧基、3-氯_2_甲基丙氧基、5-漠己氧基、5，6_二氯^己氧-基、3-經基 -2-氯丙氧基等等）；以及鹵素原子（如氟、氣、漠〜碘原子>_ 苯基若有兩個或以上的取代基時，取代基可以相同或是不 同。 移除N-保護基：W可透過常用的方法，例如是水解反 應或是氫化反應進行。反應一般在常見且不會對反應有不 良影響的溶劑中進行，例如是水；醇類溶劑諸如甲醇、乙 醇、異丙醇、正-丁醇、三氟乙醇以及乙二醇；酮類溶劑諸 19 321758 201033192 如丙酮及丁醚類溶劑諸如四氫呋喃、二氧陸圜、_ 醚、二甲氧基乙烷、以及二甘醇二甲醚；酯類溶劑諸如= 酸甲酯及乙酸乙酯；非質子極性溶劑諸如乙腈、N，N—二甲 基曱醯胺、二曱亞砜以及N-甲基吡咯烷酮；鹵化烴溶^諸 如二氣曱烷以及二氣乙烷；或其他有機溶劑。另外，反應 可以在上述常見溶劑的混合物中進行。 (1)水解反應： 水解反應較佳的是在驗或是包括路易斯酸（Lewis acid)的酸存在下進行。 此處所使用的鹼包括常見的無機鹼和有機鹼。較佳的 無機驗例如包括鹼金屬諸如鈉及鉀；驗土金屬諸如鎂及 鈣；驗金屬和鹼土金屬的氫氧化物、碳酸鹽或是碳酸氫鹽。 較佳的有機鹼包括，例如三烷胺諸如三曱基胺以及三乙義 胺；曱吡啶；1,5-二氮雜二環[4. 3.0]壬-5_烯等等。 此處所使用的酸包括常見的有機酸和無機酸。較佳的 有機酸包括例如脂族酸諸如甲酸'乙酸以及丙酸；以及= 鹵乙酸諸如三氯乙酸以及三氟乙酸。較佳的無機酸包括， © 例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氣化氫、溴化氫等等。此處所 使用的路易斯酸包括例如三氟化硼合乙醚（boron trif luoride etherate)、三溴化硼、氯化麵 ' 氯化鐵等等。 若以鹵乙酸或路易斯酸作為酸使用時，反應較佳是在 陽離子清除劑（cation scavenger)諸如苯甲醚以及笨紛 (phenol)存在下進行。 此處使用的鹼或酸的量並無限定’用量只要足以水解 321758 20 201033192 即可。 反應的溫度-般是在〇至12rc，較佳為室溫 °c，更佳為室溫至8〇t：。反應時間通常是3〇分鐘至 時，較佳為30分鐘至12小時，更佳為1至8小時。小 (2)氫化反應： ' 此處進行的氫化反應是使用常見的/已知的氳化 應。常見的氫化反應包括例如化學還原反應、催化還 應等等。 ’'夂 β &學勒反應使賴較㈣㈣包城化物諸如碰化 氫、硫化氫、氫德IS、硕氫化細及氰基硼氫化納；'或 是金屬諸如鈦、鋅以及鐵；或是金屬化合物的組合（如氯化 鉻俥、乙酸鉻等等）以及有機或無機酸（如甲酸、乙酸、丙 酸、三氟乙酸、對甲苯續酸、鹽酸、氫溴酸等等）。 催化還原反應使用的較佳催化劑包括鉑催化劑諸如鉑 板（platinum plate)、海綿狀鉑（sp〇ngif〇rm platinum)、 參鉑黑、翻膠體（colloidal platinum)、氧化翻以及翻絲； 纪催化劑諸如海綿狀鈀'鈀黑、氧化鈀、鈀碳、鈀/硫酸 鋇以及鈀/碳酸鋇；鎳催化劑諸如還原鎳、氧化鎳以及雷 氏鎳（Raney nickel);鈷催化劑諸如還原鈷以及雷氏鈷 (Raney cobalt);鐵催化劑諸如還原鐵等等。 化學還原反應使用的酸為液態時，也可作為溶劑。 催化還原反應所使用之還原劑和催化劑的量可為但不 限於一般使用的量。 反應溫度一般為0至120°C ’較佳為室溫至l〇〇°c，更 21 321758 201033192 佳為室溫至80°C。反應時間一般為30分鐘至24小時，較 佳為30分鐘至10小時，更佳為30分鐘至4小時。 方法4

化合物（3)可由化合物（5)和化合物（6)反應而製得。反 應根據參考文獻（El-Sharabsy, S. A. ; Abdel Gawad，S. M.; Hussain, S. M.; J.Prakt. Chem.，1989，331 (2)，207) 或其相似的方法而進行。 反應在不會對反應有不良影響的常見溶劑中進行，例 如水；醇類溶劑諸如甲醇、乙醇、異丙醇、正-丁醇、三氟 乙醇以及乙二醇；酮類溶劑諸如丙酮及丁酮；醚類溶劑諸 如四氫σ夫喃、二氧陸圜、二乙醚以及二甘醇二甲醚；酯類 溶劑諸如乙酸曱酯及乙酸乙酯；非質子極性溶劑諸如乙 腈、Ν,Ν-二甲基甲醯胺以及二曱亞砜；鹵化烴溶劑諸如二 22 321758 201033192 氯甲烷以及二氯乙烷；或其他有機溶劑。另外，反應可以 在上述常見溶劑的混合物中進行。 上述反應可在催化性化合物不存在或是酸性催化劑的 存在下進行。一般而言，較佳的是反應在鹼性化化物的存 在下進行。雜化合物包括-般料錢和有紐。 此處使用的無機驗包含例如驗金屬諸如鋼及钟；驗金 屬碳酸氫鹽諸如碳酸氫鐘、碳酸氣鋼以及碳酸麟；驗金 屬氫氧化物諸如氫氧脑、氫氧Μ、氫氧缺以及氳氧 化絶；驗金屬碳酸鹽諸如碳_、魏納、碳酸鉀以及竣 酸铯；驗金屬（低烧氧化物）諸如以及乙醇鈉；驗金 屬氫化物化合物諸如氫化鈉以及氫化鉀等等。 此處所使用的有機驗例如包括為三烧胺諸如三甲基 胺、三乙基胺以及[乙基二異丙基胺；錢；料；旅咬； 口米峻；甲㈣；二甲胺基㈣；二甲基苯胺；卜甲基嗎淋； DBN ; DABC0 ; DBU 等等。 ❹ =化合物可以使用單—成分或是任何兩 的組合。 的驗化合物的量1係催化量着 Γ = ^為物至化合物⑸㈣倍莫耳 1。當鹼化合物是液態時也可以做為溶劑。 為莫耳’較佳為每1莫耳的化合物⑻使用i至 5莫耳的化合物（5)。 反應溫度並無任何限制，但反應通常在冷卻狀態、室 321758 23 201033192 = 進行。較佳為上述的反應可在回流溫度 進打1至小時。 ’化合物⑺可進―步氧化而得到化合物 2合物⑺的氧化反應可透過在此㈣領 對本醌⑽Q) ' N〜壤琥賴亞胺⑽s)等等。 氧化反應通常在*含水或是在不會對 的常見溶劑中進行，例如醇類溶劑諸如甲醇*良= 醇、正-丁醇、二盔，β 吁吳丙 籽一氟乙醇以及乙二醇；酮類溶 二_溶劑諸如_、二氧陸圜、二乙二及 -甲鱗，_溶劑諸如乙酸甲g旨 - :極性溶劑諸如乙猜、n，n-二甲基甲醯胺以及二;日亞， 鹵化烴溶劑諸如-备m a τ兑石風； 劑。另外，反康及二氣⑻或其他有機溶 〜了以在上述常見溶劑的混合物中進 的莫::使用的氧化劑量一般是催化量至超過化合物⑺ 或是任何:制’反應通常在冷卻狀態、室溫 至75小時/下進订。上述反應較佳可在回流溫度進行0.5 異構物攻方去4中的化合物⑺包括在環上有雙鍵位置的 作為起始材料的化合物⑷是可獲得的已知化合物。 321758 24 201033192 上述方法使用的起始材料可以 在每一反應中的期望化^ 〃適田的鹽類，以及 上诚古：：也可以是適當的鹽類。 過濾、浪縮、萃取等等的方式 7部、 以層析法、再蛀日等等的方 衣的反應產物，接著 丹、、、°日日羊等的方式純化粗製產物。 化合物（1)較佳的鹽類為製藥可接 起 ο =:r鹽類(如驗金屬鹽諸如“= 屬鹽諸如郎以及㈣）、㈣、驗金屬碳酸鹽（如碳酴 石鐘酸石^卸、碳賴、_鉋等等）、驗金屬碳酸氫鹽（如 反虱、碳酸氫鈉、碳酸氳鉀等等），以及鹼金屬氳氧化 物（如氯氧切、氫氧化納、氫氧⑽、氫氧化铯等等）； 魯 與有機鹼諸如三（低級）烷胺（三甲基胺、三乙基胺、N_ 乙基一異丙基胺等等）、吡啶、喹啉、哌啶、咪唑、甲吡啶、 一曱胺基吡啶、二曱基苯胺、N-(低級）烷基嗎啉（如N-甲 基嗎啉等等）、DBN、DBU以及MBc〇所成的鹽； 與無機酸所成鹽類諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、 硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽；以及 與有機酸所成的鹽類諸如曱酸鹽、乙酸鹽、丙酸鹽、 草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、反丁烯二酸鹽、順丁烯二 酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、碳酸鹽、 苦味酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽以及對甲苯磺酸鹽、麩胺 酸鹽。 上述方法使用的起始材料類似上述化合物（1)，可為其 25 321758 201033192 鹽類，以及每一反應的期望化合物也可以是其適當的鹽類。

另外’在每個通式中包括起始材料以及期望化合物的 溶劑化物(solvate)(如水合物、乙醇合物(ethan〇late)iU 及類似物）。較佳的溶劑化物為水合物。 本發明之式（1)化合物，包括異構物諸如幾何異構物、 立體異構體以及光學異構物。 本發明亦包括式⑴化合物中’該化合物之一或更多個 原子被-或更多個其同位素取代。可併入本發明化合物的 同位素的例子包括’例如氩、碳、兔、氧、硫、氣以及氣❿ 的同位素’具體而言，諸如2jj、3jj、％、％、1、％、％、 18F、36C1等等。特定的同位素標記化合物包含上述的同位 素以及/或其他原子的同位素，舉例而言，包含放射性同位 素諸如％以及％的化合物，在化合物以及/或是物質的型 態分3析（t:pographical assay)上很有幫助。超重氮標記 (即3H)或是e-l4標記（即uG)同位素化合物制受到偏好 是由於其容易製備和偵測的緣故。更進一步，且有像重氫 (deUteriUm)(即％較重同位素之化合物也被_具有治❹ 療的優點諸如促進代謝穩定度(如增加在生物體内的半生 期）以及減少#丨量。具有同位㈣子的化合物通常可❹任 何可獲得的同位素標定製劑，以上述的方法以及/或是以下 的實例而製得。 本發明的化合物及其鹽類具有腺核督A2a受體促效活 性’如此可有效作為喷乳類包括人類的腺核誓A2a受體促 效劑。因此’本發明亦提供作為如腺核苦A2a受體促效劑 26 321758 201033192 的藥劑之醫藥組成物^ 以下，醫藥組成物暫且稱為“本醫藥la成物，，。. I發明之醫藥組成物可由—般的製藥配方製備， 方包含有效量的至少—種選自本發明化合物及其鹽所成J 群的化合物，以及一些製藥可接受的載體而製得。本發 醫藥組成物使用之製藥可接受的載體可為固體諸如鹎形 劑，或疋液體例如稀釋劑。載體的舉例包括乳糖、硬脂萨 鎂、澱粉、滑石粉、明膠、洋菜、果膠、阿拉伯膠、 油、芝麻油、可可脂、乙二醇、純水等等。 另外，本醫藥組成物可由適合服藥的劑量單位的配方 而製得。包括適合口服的固體以及液體配方諸如藥片、藥 丸、膠囊、顆粒、粉末，以及液體，也可為非經口服投藥 的配方，諸如注射（靜脈注射、肌肉注射等等）、滴眼劑（ο% drops)、眼用軟膏（ophthalmic ointment)、栓劑 (suppository)、經皮膚的吸收劑（percutane〇us ❿ absorption agent)以及類似物。特別的是，由於本發明的 腺核苷A2a受體促效活性’咸認本發明的醫藥組成物可作 為降眼壓劑（intraocular pressure reducing agent)，—, 種治療青光眼或是類似疾病的藥物使用，因此較佳的製藥 配方為滴眼劑。 本醫藥組成物可製成水性液，以及更進一步作為眼用 醫藥組成物。舉例而言，諸如如下述所製備的水性液配方。 必要的話’可在本發明化合物（包括其鹽類，以下皆同） 中選擇性的加入一種或是更多種添加劑，該添加劑係選自 321758 27 201033192 製藥可接受的緩衝液处 節劑，而期望的林助科ux及诚調 水性液配方所使二=過常見的方法製请。 以及麟酸；有_諸如縣酸以及琥 如蝴酸 接受的鹽類。較佳的緩衝液為琥賴 ;^及其製藥可 鈉。緩衝液可以是單_+ I以及碟酸二氫 合。 成分或是兩種或更多成分的任^ 在製程中以琥轴酸或其製藥可接受的 ::於活性成分與號雜酸的鹽有很高：作衝液 長時間的保存下，能夠避免發生活 因此在 動的=rr用的緩衝液濃度較佳為二變 = 二而言，不超過2%一)，較佳為不超 過〇.6%(w/v)，更佳為不超過G 2%(w/v)。 水性液製備時使用的p H調節劑包括例如鹽酸、硫酸、 乳酸、乙酸、氫氧_、氫氧化鈉、氫氧㈣、氫氧化鎮、 單乙醇胺、三乙醇胺、-s系辟的 、 一異丙醇胺、三異丙醇胺，以及其 製藥可接又的鹽類。較佳的邱調節劑包括鹽酸以及氣氧化 納。ΡΗ調節劑可以使用單一成分或是兩種或更多種成分的 任意組合。 製備水ϋ液所使用的等張劑是為了製備水樣液 (叫動US⑽10的等張液。此處所使用的等張劑為滴眼劑 心㈣型’包括氣化納、氯化钟、職、碼酸納（s〇di⑽ b㈣⑻、甘露醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、麥芽糖、蔬 糖、山梨醇、㈣糖等等。較佳的為甘油、㈣醣、甘露 321758 28 201033192 醇、丙二醇以及山梨醇。更佳的為甘油。等張劑可以使用 單一成分或是兩種或更多成分的任意組合。 製備時使用甘油作為等張劑，由於甘油不會對活性成 分的溶解度有不良影響，因此在長時間保存下，可防止活 性成分或其相關物質的沈積。含有等張劑的水性製備液的 滲透壓（osmotic pressure)為例如 170 至 460 mOsm/kg， 較佳為 229 至 372 mOsm/kg，更佳為 256 至 316 m〇sm/kg。 此處所使用的防腐劑例如包括四級錢鹽諸如苯二甲烴 ⑩ 銨、苯銨松寧（benzethonium)、苯度銨 (benzododecinium);陽離子化合物諸如氯己定 (chlorhexidine);對羥基苯甲酸鹽諸如對位羥基苯甲酸甲 酯以及對位羥基苯甲酸丙酯（Propyl para-oxybenzoate); 以及醇類化合物諸如氯丁醇以及苯曱醇。較佳的防腐劑包 括氯化苯二甲煙錢以及苯度溴錢，更佳的為鹽酸苯二甲烴 銨以及溴化苯度銨，其中烷鏈僅由12個碳組成者。 ❹ 必要時，本醫藥組成物可包含助溶劑。此處所使用的 助溶劑例如包括聚合物諸如聚乙烯-β比嘻咬_、聚乙二醇…〜 (macrogol，polyethyleneglycol)、聚乙烯醇以及經丙基讀 甲基纖維素；界面活性劑諸如聚山梨醇酯、聚氧乙稀氫化 萬麻油（polyoxyethylene hydrogenated castop oil)以及1 聚氧乙稀聚氧丙烯；多元醇諸如丙二醇；有機酸諸如苯甲 酸以及山梨酸；胺基酸諸如天門冬胺酸、組胺酸、甘胺酸 以及離胺酸；以及黃嘌呤藥物諸如咖啡鹼。較佳的助溶劑 包括聚乙烯吡咯啶酮、聚乙二醇、聚乙烯醇、苯曱酸、山 29 321758 201033192 是兩種或更多成 梨酸以及藻酸（alginic acid);特別是聚 及聚乙二醇。助溶劑可以使用單一成分或 分的任意組合。 含有本發明醫藥組成物的水溶性製備液的邱值 至9’較佳的約為5至8,更佳的為6至7，特別佳的皋為 至6. 9。 為6. 本發明的固體配方適用於口服投藥的諸如藥片、〜

以及顆粒，可透過將本發明的化合物和至少一種的惰粉末 體（inert carrier)諸如乳糖、甘露醇、蔗糖、經内基=栽 素、微晶纖雉素、澱粉、聚乙烯吡咯啶酮、偏矽酸、、維 (meta-silicic)以及鎂鋁酸鹽混合而製得，並且按照火 的方法配藥。製備方法可更進一步配製包含額外的^二見 加劑，舉例而言，潤滑劑（lubricant)諸如硬脂酸鎮；^二 劑（disintegrator)諸如纖維素羥乙酸鈣（calcium cellulose glycolate);穩定劑諸如乳糖；溶解劑諸如麩 胺酸以及天門冬胺酸；以及類似物。可更進一步配藥包含 甜味劑、風味劑、香料、保藏劑（preservative agent)以 及類似物。必要時’藥片和藥丸可用蔗糖、明膠、羥丙基 纖維素以及羥丙基曱基纖維素苯二甲酸酯 (hydroxypropylmethyl cellulose phthalate)包裹成糖衣 膜或是胃内（intragastric)或腸内（enteric)包覆膜。 適合口服投藥的液態藥劑諸如乳劑、溶液、懸浮液、 糖漿以及酏劑（elixir)可透過將本發明的化合物溶解或是 分散於一般使用的惰性稀釋劑，諸如純水或是乙醇中。液 30 321758 201033192 態藥劑亦可包括助劑（auxiliary agent)諸如潤濕劑 (wetting agent)或是懸浮劑（suspending agent)、甜味 劑、風味劑、香料、保藏劑以及類似物。 非口服投藥用的注射液包括無菌液（aseptic a(JUe〇US) 或非水性溶液、懸浮液、乳劑以及類似物。水性注射液可 按照一般的方法製備，舉例而言，以注射用蒸餾水及鹽水 作為稀釋劑。非水性注射液可按照一般的方法製備，舉例 ❹而言，使用稀釋劑或是載體諸如丙二醇、聚乙二醇或是植 物油諸如橄欖油；醇類諸如乙醇；聚山梨醇酯。注射液 可進一步包括助劑諸如保藏劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑、 穩定劑（如乳糖）以及溶解劑（如麩胺酸和天門冬胺酸）。注 射液係按照-般方法消毒，舉例而言，以慮菌用滤紙滤除 細菌，添加抗微生物劑或是放射線照射諸如伽瑪射線 (gamma-ray)。另外，注射液可製備為權宜製備配方，而在 使用前將所製備的無g固體_溶解在無g水絲菌溶劑 φ 中供注射用。 本發明醫樂組成物在不同.配方的劑量型，會按照每^— 案例的情形來決定，根據患者（用藥的對象）的情況判斷該 給予何種醫藥組成物、年齡、性別等因素來考量。一般而 a，含有本發明醫藥組成物的滴眼劑的劑量可定為，在滴 眼劑中所含活性化合物的濃度為〇· 〇〇〇1至1〇%(w/v)，較 佳為 0. 001 至 1· 〇%(w/v)，更佳為 〇. 01 至 〇· 3%(w/v)， 天中可滴入或是塗抹數次。對於使用者而言，滴眼劑的 用量一般為一個成人〇. 001至lml。 31 321758 201033192 至於本發明醫藥組成物的口服製劑或是注射液，劑量 的用法可訂為給予一個成人每天〇 〇〇1至1〇〇〇mg的本發明 化合物。每日劑量可以是一天一次投予，但較佳的是一天 刀成數次。上述的劑量僅是建議量，因此可以增量或是減 量。如同上述，劑量的決定最好是每一次根據不同的情況 來判之。相對應地，根據情況減少劑量也可以顯示出充分 的效果。 (發明的效果） 本醫藥組成物和化合物具有腺核苷A2a受體促效的多 Ο 種活性，諸如降眼壓、增加視神經頭（〇ptical nervehead) 的血流、保護視神經、血管舒緩作用（vas〇dilati〇n)、冠 狀動脈擴張（coronary dilatation)、降血壓、抑制血小板 凝集作用、抗血栓作用（antithrombotic effect)、抗發炎 (antiinflammation) ' 支氣管擴張（bronchiectasis)以及 免疫抑制作用（immunosuppression)。 因此本醫藥組成物以及化合物適於作為治療眼睛疾病 諸如青光眼（如正常眼壓性青光眼（normal tension glaucoma)、尚眼壓性青光眼（ocuia;r hypertension glaucoma)、術後繼發性青光眼（p0St〜surgical secondary glaucoma)等等）、降眼壓、糖尿病性視網膜病變（diabetic retinopathy)、老年性黃斑部病變（age—reiated macular degeneration ’ ARDM)、色素性視網膜炎（retinitis pigmentosa’ RP)以及由青光眼所引起視網膜的疾病；高血 壓；鬱血性心衰竭（congestive heart failure);冠狀動 32 321758 201033192 脈疾病（coronary ailmenO ;心絞痛（angina)，動脈粥狀 硬化症；缺血性心臟病（ischemic heart disease);缺血 性腦血管疾病（cerebrovascular ischemia);再灌注性傷 害（reperfusion injury);血栓症（thrombosis);癲癇 (epilepsy);鼻炎（rhinitis);鼻竇炎（sinusitis);肺氣 腫（emphysema);慢性阻塞性肺臟疾病（C0PD);氣喘病 (asthma);支氣管炎；呼吸道疾病；呼吸道機能不全症候 群（respiratory insufficiency syndrome)；敗血性休克 (septic shock);肺纖維化（pulmonary fibrosis);胃炎 (gastritis);轉移性胃炎（metastasis gastritis);潰瘍 性結腸炎（ulcerative colitis);克羅恩氏病（Crohn’s disease);發炎性結腸疾病（inflammatory colonic disease);創傷癒合（wound healing);濕療（eczema);皮 膚過敏（cutaneous hypersensitivity);皮膚炎 (dermatitis);牛皮癬（psoriasis);慢性類風濕性關節炎 ❹ (chronic rheumatoid arthritis);糖尿病;多發性硬化 症（multiple sclerosis);自體免疫疾病等等。 另外’本醫藥組成物以及化合物能夠作為心肌梗塞的 診斷劑。 以下’藉由本發明製備起始化合物的參考例以及製備 化合物及配方的實施例以及藥理學的試驗詳細說明本發 明，但不以此為限。 以下舉例中所提到的核磁共振儀（NMR)頻譜是在下述 的情況下測得。各縮寫符號的定義如下。 321758 33 201033192 裝置：JNM-AL300(JEOL) 内部標準物質：TMS s :單峰 d :二重峰 t :三重峰 q :四重峰 quint :五重峰 sext :六重峰 【實施方式】 參考例1 (E)-3-(6-羥基甲基吡啶-2-基）丙烯酸甲酯 將50. Og的2-溴π比咬-6-甲醇溶於250ml的無水N，N-二曱基曱醯胺中。在溶液中加入47. 9ml的丙烯酸甲酯、 73. 9g的四（正-丁基）氯化銨、47. 7g的碳酸氩鈉以及50. Og 的分子篩3A(1/16)，接著在氬氣的環境下於上述溶液中加 入2. 98g的乙酸鈀（II)。混合物在80°C攪拌5小時。在反 應混合物冷卻後，濾除產生的沈澱，將水加入濾液中，以 乙酸乙酯萃取。有機層以鹽水清洗，經無水硫酸鎂乾燥以 及在真空濃縮，得到50.2g的（E)-3-(6-羥基甲基吡啶-2-基）丙烯酸甲酯。 棕色粉末 34 321758 201033192 ^-NMR (CDC13) 7.72 (1H, t, J = 7.5 Hz) , 7.68 (1H, d, J = 15.6 Hz), 7.32 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.21 (1H, d, J = 7.5 H2) , 6.97 (1H, d, J = 15.6 Hz) , 4.78 (2H, d, J = 4.2 Hz), 3.85 (1H, t, J = 4.2 Hz), 3.83 (3H, s). 參考例2 3-(6-羥基甲基吡啶-2-基）丙酸甲酯 將50.2g的（E)-3-(6-羥基甲基吡啶-2-基）丙烯酸甲 S旨溶於502ml的異丙醇中。在溶液中加入2.51g的5%把 ® -(活性碳)，並且混合物在5(TC正常壓力氩氣下攪拌2. 5 小時。將反應混合物冷卻後濾除催化劑，並且濾液在真空 中濃縮得到50. Og的甲基3-(6-羥基曱基吡啶-2-基）丙酸 曱酉旨。 棕色油 ^-NMR (CDC13) 7.58 (1H, t, J = 7.5 Hz), 7.09 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.03 (1H, d, J = 7.5 Hz), 4.71 (2H, S), 4.01 (1H, br s), 3.69 (3H, s), 3.15 (2H, t, J = 7.2 Hz), 2.81 (2H, t# m . W J = 7.2 Hz). 參考例3 3-(6-甲磺醯基氧基甲基吼啶-2-基）丙酸甲酯 將50.0g的3-(6-經基甲基°比°定-2-基）丙酸甲.醋落於， 1000ml的乙酸乙S旨中。在溶液中加入53. 5ml的三乙基胺， 並且混合物在冰溫下攪拌10分鐘。在混合物中以10分鐘 逐滴加入23. 8ml的甲磺醯氯，所得混合物在冰溫下攪拌 30分鐘。在反應混合物中加入水，將混合物移至分液漏斗， 35 321758 201033192 並以飽和碳酸氩納水溶液和鹽水清洗，經無水硫酸鎂乾 燥，在真空下濃縮得到63.0g的3-(6-曱磺醯基氧基甲基 吡啶-2-基）丙酸曱酯。 棕色油 ^•H-NMR (CDC13) 7.63 (1H, t, J = 7.5 Hz), 7.26 (1H, d, J = 7.5 Hz), 7.19 (1H, d, J = 7.5 Hz), 5.28 (2H, s), 3.S7 (3H, s) , 3.12 (2H, t, J = 7.2 Hz), 3.07 (3H, S), 2.79 (2H# t, J =7.2 Hz). 參考例4 3-{6-[4-(4-乙酿胺基苯基）-6-胺基-5-氰基。密°定-2-基硫 甲基]吡啶-2-基}丙酸曱酯 將lOOOg的4-乙醯胺-苯甲醛溶於16000ml的乙醇中。 在混合物中加入607g的丙二腈（malononitrile)以及40g 的哌啶，所得混合物在回流下攪拌2小時。將反應混合物 冷卻至室溫，然後攪拌30分鐘。沈澱的結晶收集於濾紙 上，以2000ml的乙醇清洗，並乾燥得到1049gN-[4-(2, 2-二氰乙烯基）苯基]乙醯胺的黃色粉末。 將7. Og的3-(6-曱磺醯基氧基曱基吼啶-2-基）丙酸曱 酯溶於75ml的曱醇中，並隨後加入1.85g的硫脲 (thiourea)。混合物回流1. 5小時。將反應混合物冷卻後， 加入10. 7ml的三乙基胺，並且攪拌混合物一陣子。隨後， 加入75ml的曱醇、4. 33g上述的N-[4-(2, 2-二氰乙烯基） 苯基]乙醯胺以及3. 67g的N-溴琥珀醯亞胺，並且攪拌混 合物1小時。將沈澱的結晶物收集於濾紙上，以40ml的甲 36 321758 201033192 醇清洗，並乾燥得到5. 5g的3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基） -6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫曱基>比啶-2-基}丙酸甲酯。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 10.23 (1H, s) # 8.20-7.60 (2H, br s) 7 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7.72 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7.63 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.35 (1H, d, J = 7.8 Hz), 7.15 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.45 (2H, s), 3.57 (3H, s), 2.96 (2H, t, J = 7.2 Hz), 2,74 (2H, t, J = 7.2 Hz), 2.09 (3H, s) · ®參考例5 3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫 曱基]吡啶-2-基}丙酸 將5g的3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰基 °密β定-2-基硫甲基]σ比咬-2-基}丙酸曱醋懸浮於150ml的50 %含水乙腈中。在懸浮液中加入1. 35g的氫氧化裡單水合 物，並且混合物在室溫下攪拌1小時。接著，將4. llg的 φ 檸檬酸溶於20ml水的水溶液緩緩加入反應混合物中，反應 混合物在室溫下另攪拌2小時。將沈澱的結晶物收集於濾 紙上，以75ml的水清洗，並乾燥得到5g的3-{6-[4-(4-乙酿胺基苯基〇-6-胺基-5 -氰基。密11定-2-基硫曱基]n比唆-2-基}丙酸。 白色粉末 37 321758 201033192 ^-NMR (DMSO-de) 10.25 (1H, s) , 7.84 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7.72 (2H, d, J = 8.7 Hz), 7.64 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.36 (1H, d, J * 7.8 Hz), 7.16 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.47 {2H, s), 2.95 (2H, t, J » 7.2 Hz), 2.65 (2H, t, J = 7.2 Hz), 2.09 (3H, S). 參考例6 1-第三丁氧基羰基-4-(哌畊-1-基）曱基哌啶

將10g的1-第三丁氧基羰基-4-哌啶基曱醇溶於150ml 的乙酸乙酯中。在溶液中加入12. 8ml的三乙基胺，混合物 A Θ 在冰溫下攪拌一陣子。在混合物中緩緩滴入5. 4ml的曱磺 醯氯，且反應混合物在冰溫下攪拌30分鐘。在反應混合物 中加入水，將反應混合物移至分液漏斗，以50ml的水清 洗，並以50ml的乙酸乙酯萃取，共2次。合併的有機層經 無水硫酸鎂乾燥並在真空中濃縮。殘留物溶於200ml的乙 腈中，並在溶液中加入18g的α辰畊。混合物在回流下擾拌 3小時，反應混合物在真空中濃縮，接著濾除沈澱的哌畊。 在濾液中加入50ml的鹽水和50ml的乙酸乙酯，混合物攪 ❹ 拌整夜。將混合物移至分液漏斗中並分離有機層，以50ml 的鹽水清洗（兩次），並在真空中濃縮。將殘留物加至5 Om 1 的水中，並以IN的鹽酸在冰溫下中和。加入100ml的乙酸 乙酯，且攪拌混合物一陣子。將混合物移至分液漏斗並分 離水層。水層在冰溫下以5N的氳氧化鈉強力鹼化。混合物 以乙酸乙酯萃取，以無水硫酸鎂乾燥並在真空中濃縮，得 到9. 96g的卜第三丁氧基羰基-4-(哌哄-1-基）曱基哌啶。 38 321758 201033192 無色油 ^-NMR (CDC13) 4.11-4.05 (2H, m) , 2.87 UH, t, J = 4.8 Hz), 2.72-2.64 (2H, m) , 2.36 (4H, br s) , 2.14 (2H, d, J = 6.9

Hz), 1.74-1.65 (3H, m), 1.45 (9H, m), 1.13-0.99 (2H, m). 參考例7 4-((4-(3-(6-((4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶 -2-硫基）甲基）吼啶-2-基）丙醯基）哌畊-1-基）甲基）-1-第 三丁氧基羰基哌啶二鹽酸鹽 ® 將2. 16g的3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰 基^密咬-2-基硫甲基]吼咬-2-基}丙酸懸浮於44ml的丙_ 中。在懸浮液中依序加入781 mg的1 -經基-1H-苯並三β坐、 1. lg的1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基）碳二亞胺鹽酸鹽以 及1.5g的1-第三丁氧基幾基-4-(旅哄-1-基）甲基旅咬， 且混合物回流1小時。在真空中移除丙酮，接著加入30ml 的乙酸乙酯以及30ml的水，並攪拌混合物30分鐘。將混 φ 合物移至分液漏斗，依序以飽和的碳酸氫納水溶液和鹽水 清洗，經無水硫酸鎂乾燥並在真空中濃縮。將殘留物完全-溶解於25ml的甲醇中，接著在冰溫下將0. 85ml的濃鹽酸_ 缓缓地滴入，且混合物在室溫攪拌1小時。然後，再加入 50ml的乙醇，混合物在50°C樣拌,L小處力待反應混洽物洽&.. 卻後，將沈澱的結晶收集於濾紙上，並乾燥得到2. 95g的 4-((4-(3-(6-((4-(4-乙酿胺基苯基）-6-胺基-5-氛基〇密咬 -2-基硫基）曱基）《比啶-2-基）丙醯基）哌哄-1-基）曱基）-1-第三丁氧基羰基哌啶二鹽酸鹽。 39 321758 201033192 白色粉末 ^-NMR (DMSO-de) 10.30 (1H, s) 10.15 (1H, br-s) 〇 ^ (4H, m) 7.72 (2H, d, J = 8.7 Hz> 7.65 (1H, br-S> 7.4〇 (1H br-s) 4.57 (2H, s) 4.36-4.31 (1H, tn) 4.02-3.89 (3H m ) 3.70-3.30 (SH, m> 3.17-2.73 (8H, n〇 2.09 (3H, s> l99 (1H m) 1.78-1.73 (2H, tn) 1.39 (9H, s). 實施例1 1'1-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-侧氧基-3-(4~(1|辰。定_4一 基甲基）哌哄-1-基）丙基）吡啶-2-基）甲硫基）-喷咬_4_基） 苯基）乙醯胺三鹽酸鹽 在40 g的4-((4-(3-(6-((4-(4-乙醯胺基笨基）_6一胺 基-5-氰基嘧啶-2-基硫基）曱基）吨啶-2-基）丙酿基）派 畊-1-基）甲基）-卜第三丁氧基羰基哌啶二鹽酸鹽中加入 400ml的氯化氫[im〇i/L於乙酸乙酯]，且混合物在室溫中 攪拌24小時。沈澱物收集於濾紙上，並以8〇ml的乙酸乙 酯清洗。將沈澱物乾燥得到白色粗製的結晶。將粗製的結 晶在室溫下溶於245ml的水中並過濾。在攄液中緩緩加入 875ml的㈣，將混合物和其晶種麟6小時。沈殿的結 晶物收集於栽上’以14Gml的丙酮清洗，接著乾燥得到 29.8g 的 N-(4-(6-胺基_5_氰基_2_((6_(3_側氧基_3_(4_ (°底^42〒基）°底哄 啶-4-基）苯基）乙醯胺三鹽酸鹽。 白色粉末 321758 40 201033192 ^-NMR (DMSO-d6) 11.23 (1H, br-s) 10.43 (1H, s) 9.05 (1H, br-s) 8.93 (1H, br-s) 8.30 (1H, t, J = 7.8 Hz) 7.96 (1H, d, J = 7.8 Hz) 7.81 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.78-7.73 (3H, in) 4.77 (2H, s) 4.36-4.31 (1H, m) 4.02-3.74 (3H, m ) 3.53-3.45 (2H, m) 3.26-3.23 (5H, m) 3.02-2.81 (8H, m) 2.10-1.91 (6H, m) 1.50-1.39 (2H, m). 實施例2 N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-羥乙基）-哌 參啶-4-基）曱基）哌啡-1-基）-3-侧氧基丙基）-吼啶-2-基）甲 硫基）嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺順丁烯二酸鹽 將l.Olg的N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-侧氧基 -3-(4-(哌啶-4-基甲基）哌畊-1-基)丙基）吡啶-2-基）甲硫 基）-嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺三鹽酸鹽溶於15ml無水的 Ν,Ν-二甲基甲醯胺中。在溶液中加入186/z 1的2-氯乙醇、 0. 6ml的三乙基胺、386mg的碳酸鉀以及300mg的碘化鈉， 並且混合物在50°C下攪拌3小時。反應混合物在減壓狀態 ® 下濃縮，且殘留物以矽膠管柱層析（二氯曱烷：曱醇：28 %氨水=100 : 10 : 1)純化，得到220mg的N-(4-(6-胺基 -5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-羥乙基）哌啶-4-基）甲基） 哌哄-1-基）-3-側氧基丙基）吼啶-2-基）曱硫基）嘧啶-4-基） 苯基）乙醯胺。將化合物溶於5ml的曱醇中，並加入38. 8mg 的順丁烯二酸。攪拌混合物一陣子。溶液在實空'中濃縮得 到 250mg 的 N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-經乙基）_痕唆-4-基）甲基）旅哄-1-基）-3-側氧基丙基）-°比 41 321758 201033192 啶-2-基）曱硫基）嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺順丁晞二酸鹽。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-dg) 10.25 (1H, s) 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.71 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.63 (1H, t, J = 7.5 Hz) 7.35 (1H, d, J = 7.5 Hz) 7.15 (1H, d, J = 7.5 HZ), 6.04 (2H, S) 5.76 (1H, br-s) 4.47-4.35 (4H, m) 3.71 (2H, br-s) 3.45-3.32 (9H, m ) 3.11 (2H, br-s) 2.97-2.87 (4H, m) 2.73-2.69 (2H, m) 2.36-2.19 (3H, m) 2.09 (3H, s) 1.88-1.83 (3H, m) 1.35-1.31 (2H, m). 下列實施例3至實施例5係按照實施例2的相似步驟 製備。 又

42 321758 201033192 ❿ φ 實施例

R Η

OH

O _NMR數墟_ 1H-NMR (DMSO-d6) 11.23 (1H, br S) 10.43 (1H, s) 9.05 (1H, br-s) 8.93 (1H, br-s) 8.30 {1H, t, J 7.8 Hz) 7.96 (1H, d, J = 7.8 Hz) 7.81 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.78-7.73 (3H, m) 4.77 (2H, s) 4.36 4.31 (1H, m) 4.02-3.74 (3H, m ) 3.53-3.45 (2H, m) 3.25-3.23 (5H m) 3.02-2.81 (8H, m) 2.10-1.91 (6H, m) 1.50-1.39 (2H, m). DMSOd-6 ： 10.25 (1H, s) 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.71 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.63 (1H, t, J = 7.5 Hz) 7.35 (1H, d, J = 7.5 Hz) 7.15 (1H, d, J = 7.5 Hz), 5.04 (2H, S) 5.76 (1H, br-s) 4.47-4.35 (4H, m) 3.71 (2H, br-s) 3.45-3.32 (9H, m ) 3.11 (2H, br S) 2.97-2.87 (4H, m) 2.73-2.69 (2H, m) 2.36-2.19 (3H, m) 2.09 (3H, s) 1.88-1.83 (3H, m) 1.35- 1.31 (2H, m) ___ DMSOd-6 : (2H, d, J = 8.7 Hz) 10.25 (1H, S) 7.83 8.7 Hz) 7.72 (2H, d, 7.62 (1H, t, J = 7.8 J = Hz) 7.34 (1H, d, J = 7.8 Hz) 7.14 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.4S (2H, S) 3.44-3.29 (8H, m) 2.94 (2H, t, J = .7.5 Hz ) 2.87-2.83 (2H, m) 2.73-2.66 (2H, m) 2.34 (2H, br-s) 2.20-2.18 (4H, m) 2.09 (3H, s) 2.03 (2H, d, J 7.2 Hz) 1.87 (2H, br-s) 1.64- 1.43 (4H, m) 1.09-1.01 (2H, m) CDC13 : 7.99 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.75-7.60 (2H, m) 7.51 (1H, t, J 7.5 Hz) 7.27 (1H, d, J = 7.5 Hz) 7.07 (1H, d, J » 7.5 Hz), 5.85 (br-s, 2H) 4.65 (1H, t, J 5.1 HZ) 4.53-4.42 (1H, m) 4.49 (2H, s) 3.59 (1H, t, J = 4.8 Hz) 3.53-3.40 (2H, m) J.I3 f2IE, t> Jl 6.9 Hz) 3.00-2,90 (2H, ra 2.80 (2H, t, J = 6.9 Hz) 2.73 1H / ' t / J = 4.8 . λ - , ts, J «= 4.8 Hz) 2.38-2.25 (4H, m) 2.21 . (3H, s) 2.14 (2H, d, J = 7.5 Hz) 2.10-1.97 (2H, m) 1.85- 1.60 (2H, m) 1.55-1.40 (1H, m) 1.35-1.15 (2H, m) DMSOd-6 : 10.25 (IH, s) 7.84 (2H, d, J B 8 . 7 Hz) 7.72 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7. 62 (1H, t ,J = 7.8 Hz) 7.34 (1H, ·ά>' ^ = 7.8 Hz) 7.14 (1H, d. J = 7.8 Hz) 4.46 (2H, s) 3 .59 (3H, s) 3.50-3 .25 (4H, m) 2 · 98-2 •76 (3H, m ) 2.75- 2.50 (3H, m) 2.50-2.40 (4H, m) 2.25 -2.13 (4H, m) 2.09 (3H, s) 2.04 (2H, d, J = 7.2 Hz) 1.68- 1.55 (2H, m) 1.50-1.35 (1H, m) 1.15-0.98 (2H, m) 43 三鹽酸鹽 順丁烯二酸鹽 321758 201033192 實施例6 N_(4H胺基_5_氰基_2-(6-(3-側氧基 甲基）°底0井、1-基）丙基）°比咬-2-基）甲硫基） 基）乙罐〜1>3~胺三鹽酸鹽（6-3) NC、 HjN 一 Μ

HCI 〇 HCI HCI

〜（哌啶-4-基 〜嘧啶-4-基）笨 1)乙 eL|L-D3 TEA,CHtCI2 ^c.HCI, ΜβΟΗ EtOH

6-3 4 (4 (3-(6—(4_(4_乙醯_〇3_胺基笨基）__6_胺基—氰基嘧 啶-2-基硫基）曱基）吡啶_2_基）_丙醯基）哌哄η—基）甲基） 〇底咬―1 —綾酸第三丁酯二鹽酸鹽（6-2) 將 4g 的 4-(4-(3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基）_5— 氛基密定-2-基硫基）甲基）π比咬_2_基）丙酿基）σ辰哄—I—基） 甲基）哌啶―1-羧酸第三丁酯（6-1)溶於68ml的二氣甲烷 中。在冰溫下於溶液中加入1.4ml的三乙基胺，且攪拌混 5物陣子。將532μ 1乙醢基-D3氯缓緩滴入溶液中，且 在室溫下攪拌溶液整夜。再加入水並將混合物移至分液漏 斗。水層以二氯甲烷萃取（兩次），合併的有機層經無水硫 酸鎂乾燥並在真空下濃縮。殘留物以矽膠管柱層析（二氯曱 烷.甲醇=25 : 1)純化，得到 3. lg 的 4-(4-(3-(6-(4-(4-321758 44 201033192 乙酿-D3-胺基苯基）-6-胺基-5 -氛基。密咬-2-基硫基）曱基） 吡啶-2-基）丙醯基）哌畊-1-基）甲基）哌啶-1-羧酸第三丁 酯。將化合物完全溶解於20ml的甲醇中，在冰溫下缓緩滴 入1.7ml的濃鹽酸，混合物在室溫下攪拌3小時。接著， 加入40ml的乙醇並在50°C攪拌混合物1小時。待反應混 合物冷卻後，以濾紙收集沈澱的結晶，並乾燥得到2. 06g 的4-(4-(3-(6-(4-(4-乙醯-D3-胺基苯基）-6-胺基-5-氰基 嘧啶-2-基硫基）甲基）吡啶-2-基）-丙醯基）哌畊-1-基）甲 ® 基）哌啶-1-羧酸第三丁酯二鹽酸鹽（6-2)。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-dg) 10.29 (1H,S) 10.15 (1H, br-s) 8.00-7.90 » (1H, m) 7.82 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.73 (2H, d, J= 8.7 Hz) 7.59 (1Ή, m) 7.40 (1H, m) 4.57 (2H, s) 4.36-4.31 (1H, m) 4.02-3-89 (3H, m) 3.70-3.30 (8H, m) 3.17-2.73 (8H, m) 1.99 (1H, m) 1.78-1.73 (2H, m) 1.39 (9H, s). N-(4-( 6-胺基-5 -氰基-2-(6-(3-側氧基-3-( 4-(痕咬-4-基 ® 甲基）哌畊-1-基）丙基）σ比啶-2-基）曱硫基）-嘧啶-4-基）苯 基）乙醯-D3-胺三鹽酸鹽（6-3) 在 2. Og 的 4-(4-(3-(6-(4_(4_乙酿-D3-胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫基）曱基）吡啶-2-基）-丙醯基）哌 畊-1-基）甲基）哌咬-1-羧酸第三丁酯二鹽酸鹽（6-2)中加 入20ml的氯化氫[lmol/L於乙酸乙酯]，混合物在室溫下 攪拌41小時。以濾紙收集沈澱物並用4. 0ml的乙酸乙酯清 洗。將粗製的結晶在室溫下溶於10ml的水中並過濾。在濾 45 321758 201033192 液中緩緩加入40ml的丙酮，混合物和其晶種授拌2小時。 以濾紙收集沈澱的結晶，用4ml的丙酮清洗，接著乾燥得 到1.75g的N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-(6-(3-側氧基 -3-(4-(哌啶-4-基甲基）哌啡-卜基）丙基）σ比啶-2-基）曱硫 基）嘧啶-4-基）苯基）乙醯-D3-胺三鹽酸鹽（6-3)。 白色粉末 ^•H-NMR (DMSO-de) 11.06 (1H, br-s) 10.38 (1H, s) 8.94-8.81 (2H, m) 8.16 (1H, t, J= 7.8 Hz) 7.83-7.80 (3H, m) 7.75 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.64 (1H, d, J = 7.8 Hz) 4.70 (2H, s) 4.36-4.31 (1H, m) 4.02-3.74 (3H, m) 3.53-3.45 (2H, m) 3.26-3.23 (5H, m) 3.02-2.81 (8H, m) 2.10-1.91 (3H, m) 1.50-1.39 {2H, m). 實施例7

7-13 4-硝基苯曱酸曱酯-2, 3, 5, 6-D4(7-2) 46 321758 201033192 將5g的4-硝基苯曱-D4酸溶於100ml的甲醇中。在溶 液中加入1. Om 1的濃鹽酸，將混合物回流15小時。反應混 合物在真空中濃縮，接著在殘留物中加入水。以二氯乙烷 萃取混合物。以碳酸氫鈉水溶液清洗有機層，經無水硫酸 鎂乾燥，在真空中濃縮得到5. 3g的4-硝基苯曱酸曱酯-2, 3, 5,6-D4C7-2) ° 白色粉末 ^-NMR (CDC13) 3.99 (3H, s). 4-硝基苯甲基-2, 3, 5, 6-D4醇（7-3) 將5.3g的4-硝基苯曱酸曱酯-2,3,5,6-D4(7-2)懸浮 於53ml的二氧陸圜及53ml水的混合溶液中。在懸浮液中 加入9. 4g的硼氫化鈉，且混合物在室溫下攪拌6小時。反 應完成後，反應混合物以5NHC1稍微酸化，移至分液漏斗 中。以乙酸乙酯萃取水層，合併的有機層經無水硫酸鎂乾 燥，在真空下濃縮得到3.75g的4-硝基苯甲基-2,3,5, 6-D4 .醇（7-3) 〇 黃色粉末 XH-NMR (DMSO-d6) 5.53 (1H, t, J = 5.7 Hz) 4.64 (2H, d, J= 5.7 Hz). 4-胺基苯甲基-2,3,5, 6-D4醇（7-4) 將3. 75g的4_硝基苯甲基-2，3，5，6-D#醇（7-3)溶於 37ml乙酸乙酯及10ml二甲基甲醯胺的混合溶液中。在溶 液中加入400mg的5%Ιε-(活性碳J，且混合物在大氣氫氣 47 321758 201033192 壓下攪拌6小時。在反應完成後，以濾紙濾除催化劑，濾 液在真空中濃縮，得到2. 65g的4-胺基笨曱基-2,3, 5, 6-D4 醇（7-4)。 黃色油 ^-NMR (CDCla〉4.56 (2H, S). 4-乙醢胺基苯曱基-2,3,5, 6-D4乙酸酯（7-5) 將2.65g的4-胺基苯甲基-2,3,5,6-D4醇（7-4)溶於 53ml的乙酸乙酯中。在冰溫下於溶液中加入12. 9ml的三 乙基胺，攪拌混合物一陣子。接著再緩缓滴入5. 5ml的乙 醯氯，攪拌混合物1小時。在反應完成後，於反應混合物 中加入水，將混合物移至分液漏斗中。以乙酸乙酯萃取水 層，合併的有機層經無水硫酸鎮乾燥，在真空中濃縮得到 4. 28g的4-乙醯胺基苯甲基-2, 3, 5, 6-D4乙酸酯（7-5)。 黃色油 XH-NMR (DMSO-de) 4.99 (2H, s) 2.09 (6H, s). N-(4-(羥基曱基）苯基-2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-6) 將4. 28g的4-乙醯胺基苯甲基-2, 3, 5, 6-D4乙酸酯溶 於80ml的甲醇中。在溶液中加入2. 9g的碳酸鉀，攪拌混 合物1. 5小時。在反應完成後，過遽反應混合物。濾液在 真空中濃縮得到3.4§的[(4-(羥基曱基）苯基-2,3,5,6-D4)乙醯胺（7-6)。 黃色油 ^-NMR (DMSO-d6) 10.07 (1H, s) 4.42 (2H, s) 2.02 (3H, s). 48 321758 201033192 N-(4-甲醯基苯基-2, 3, 5, 6-M)乙醯胺（7-7) 將3.4g的N-(4-(羥基甲基）苯基-2,3,5,6-D4)乙醯胺 (7-6)溶於68ml的二曱基甲醯胺中。在溶液中加入17g的 二氧化錳，在60°C下攪拌混合物6小時。反應完成後，過 遽反應混合物。在濾液中加入水：並用乙酸乙醋萃取混合 物。有機層經無水硫酸鎂乾燥並在真空中漠縮，得到2. 5g 的N-(4-甲醯基苯基-2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-7)。 白色粉末 冒 ^-NMR (CDC13) 9.93 (1H, s) 7.50 (1H, br-s) 2.23 (3H, m). N-(4-(2，2-二氮乙稀基）笨基-2，3，5，6-D4)乙酿胺（7-8) 將2. 5g的N-(4-甲醯基苯基-2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-7) 溶於50ml的乙醇中。在溶液中加入1. lg的丙二腈以及2 滴的哌啶，且在室溫下攪拌混合物8小時。以濾紙收集沈 澱的結晶，以乙醇清洗，並乾燥得到2. lg的N-(4-(2, 2-二氰乙烯基）苯基-2,3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-8)。 參 黃色粉末 ^H-NMR (DMSO-d6) 10 · 52 (1H, S〉8.37 (1H, S〉2.12 (3H, s). N-(4-(6-胺基-5-氰基-2·~M基-3, 4-二氮°密咬-4-基）.苯基 _2，3，5.，6_D4)乙酿胺（7-9) 在20ml的乙醇溶液中溶解276mg的金屬納，並加入 760mg的硫脲，且在室溫下攪拌混合物1小時。接著，將 2. lg的N-(4-(2, 2-二氰乙烯基）苯基-2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺 (7-8)加入其中，且將混合物回流攪拌3小時。反應完成 後，在減壓狀態下移除乙醇。將殘留物溶於溫水中，用乙 49 321758 201033192 酸微酸化。將沈澱物收集於濾紙上並乾燥，得到2. 91g的 N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-巯基-3, 4-二氫嘧啶-4-基）苯基 -2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-9)。 黃色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 9.99 (1H, s) 9.69 (1H, s) 6.13 (2H, m) 4.93 (1H, s) 2.07 (3H, s). 3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基-2, 3, 5, 6-D4)-6-胺基-5-氰基 嘧啶-2~基硫甲基）吡啶-2-基）丙酸曱酯（7-10) 將2.918的1^(4-(6-胺基-5-氰基-2-疏基-3,4-二氫 嘧啶-4-基）苯基-2,3, 5, 6-D4)乙醯胺（7-9)溶於60ml的二 甲基甲醯胺中。在溶液中加入2. 73g的3-(6-甲確酿基氧 基甲基吼〇定-2-基）丙酸曱酯以及2. 76g的碳酸鉀，在室溫 下攪拌混合物整夜。接著，加入1.77g的N-溴琥珀醯亞胺， 另攪拌混合物1小時。在反應完成後，於反應混合物中加 入水，以乙酸乙醋萃取混合物。有機層經無水硫酸鎮乾燥， 並在真空中濃縮。以矽膠管柱層析（二氣曱烷：曱醇=: 1)純化殘留物，得到3. 52g的3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基 ~2, 3’ 5, 6-D4)-6-胺基-5-氰基嘧啶一2-基硫甲基）吡啶_2_ 基）丙酸甲S旨（7-10)。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-d6> 10.26 (1H, s) d, J= 7.8 Hz) 7.16 (1H, 3·57 (3H, s) 2.99 (2H, t, J* Hz) 2.09 (3H, s). 7-63 (1H, t, J« 7.8 Hz) 7 2ζ d/ J * 7*8 Hz) 4.46 (2H, s) 7-2 HZ) 2.73 (2H, t, 7.2 321758 50 201033192 3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基-2, 3, 5, 6-D4)“6-胺基-5-氰基 嘧啶-2-基硫曱基）吡啶-2-基）丙酸（7-11) 將3. 52g的3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基-2, 3, 5, 6 -D4)-6-胺基-5-氰基°密°定-2-基硫甲基）π比淀_2_基）丙酸曱 酯（7-10)懸浮於100ml的50%含水乙腈中。在懸浮液中加 入331mg，的氫氧化鋰單水合物，並且將混合物回流2時。 接著，將1· 59g的檸檬酸溶於l〇mi水的水溶液缓緩加入反 參應混合物中’且反應混合物在5(TC下攪拌1小時。將反應 混合物冷卻後’以滤紙收集沈澱的結晶，用水清洗，並乾 燥得到2. 29g的3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基_2,3,5,6 -D4)-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫甲基）吡啶_2_基）丙酸 (7-11)。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 10.25 (1H, s) , 7.64 (1H, t, j s 7.8 Hz), 7.36 (1H, d, J = 7.8 H2), 7.16 (1H, j s 7>8 Hz) 4.46 (2H/ S) 2.92 (2H, t, J = 7.2 Hz) 2.65 (2H, t, j = 7.2 Hz) 2. 〇9 (3H, s) · 4-(4-(3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基 _2, 3, 5, 6_D4)_6_ 胺基 -5-氰基嘧啶-2-基硫基）甲基）吡啶〜2~基）丙醯基）哌畊 基）甲基）派唆-1-幾酸第二丁醋二鹽酸鹽（7—j 2 ) 將 2.29g 的 3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基—2 3,5 6_D4) -6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫甲基>比啶_2_基）丙酸（7_u) 懸洋於46ml #丙嗣中。在懸浮液中依序加入82〇嗯的卜 經基-1H-苯並三唾、L16g的卜乙基|(3_二甲基胺基丙 321758 51 201033192 基）碳二亞胺鹽酸鹽以及1.43g的4-哌畊-1-基甲基_哌啶 1緩酸第二丁醋，且混合物回流1小時。在真空中移除丙 酮，接著加入23ml的乙酸乙酯以及23ml的水，並攪拌混 合物30分鐘。將混合物移至分液漏斗。依序以飽和的碳酸 氫鈉水溶液和鹽水清洗有機層，經無水硫酸鎂乾燥並在真 空中漢縮。在殘留物完全溶解於22.5ml的甲醇後，接著在 冰溫下將1.43ml的濃鹽酸緩緩地滴入，且混合物在室溫攪 拌1小時。然後，再加入45ml的乙醇，混合物在5〇。〇擾 拌1小時。將反應混合物冷卻後，將沈澱的結晶收集於濾 〇 紙上，並乾燥得到2. 35g的4-(4-(3-(6-(4-(4-乙酿胺基 本基-2, 3, 5, 6-D4)-6-胺基-5-氰基喷淀-2-基硫基）甲基） 吡啶-2-基）丙醢基）哌啡-1 —基）甲基）哌啶_丨_羧酸第三丁 酯二鹽酸鹽（7-12)。 白色粉末 "H-NMR (DMSO-d6) 10.30 (1H, s) 7.95 (1H, m) 7.65 (1H, ttl) 7.45 (1H, m) 4.59 (2H, s) 4.40-4.31 (1H, m) 4.10-3.85 (3H, m) 3.70-3.30 (8H, m) 3.17-2.73 (8Hf m) 2.09 (3H, s) I.99 (1H, m) 1.78-1.74 (2H, ra) 1.39 〇H, 3). N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-(6-(3-側氧基-3-(4-(哌啶-4·"基 甲基）0底哄-1-基）丙基）。比。定_2一基）曱硫基）—密唆_4-基）苯 基-2, 3, 5, 6-D4)乙醯胺三鹽酸鹽（7-13) 在 2· 35g 的 4-(4-(3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基-2, 3， 5, 6-D4)-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫基）甲基）吼啶-2-基） 丙酿基）哌哄-1-基）甲基）哌啶_1_羧酸第三丁酯二鹽酸鹽 52 321758 201033192 (7-12)中加入23ml的氯化氫[lmol/L於乙酸乙酯]，且混 合物在室溫中攪拌24小時。沈澱物收集於濾紙上，並以 4. 7ml的乙酸乙酯清洗。將粗製的結晶在室溫下溶於10ml 的水中並過遽。在濾、液中緩缓加入40ml的丙酮，混合物和 其晶種攪拌2小時。沈澱的結晶物收集於濾紙上，以4. 7ml 的丙酮清洗，接著乾燥得到1. 93g的N-(4-(6-胺基-5-氰 基-2-(6-(3-側氧基-3-(4-(哌啶-4-基甲基）哌畊-1-基）丙 基）吼啶-2-基）甲硫基）-嘧啶-4-基）苯基-2, 3, 5, 6-D4)乙 ®醯胺三鹽酸鹽（7-13)。 白色粉末 ^-NMR (DMS0-d6) 11.04 (1H, br-s) 10.38 (1H, s) 8.92-8.80 (2H, m) 8.10 (1H, m) 7.79 (1H, m) 7.59 (1H, m) 4.67 (2H, s) 4.37-4.33 (1H, m) 4.07-4.03 (1H, m ) 3.70-2.82 (17H, m) 2.10-1.98 (6H, m) 1.48-1.37 (2H, m). 以下，呈示下述化合物的製程作為參考例。

8-3 . - '8<4 3-(6-(4-胺基_6-(4-胺基苯基）-5-氰基嘧啶-2-基硫甲基) 53 321758 201033192 0比〇定-2 -基）丙酸（8 - 2 ) 將230mg的3-(6-(4-(4-乙酿胺基笨基）-6-胺基-5-氰 基嘧啶-2-基硫甲基）吡啶-2-基）丙酸（8-1)懸浮於20ml的 乙赌中。在.溶液中加入2nil的5N鹽酸，混合物在.60°C下 攪拌整夜。將反應混合物冷卻後，缓緩加入檸檬酸水溶液 以中和反應混合物。將沈澱的結晶收集於濾紙上，以乙醇 清洗，並乾燥得到150mg的3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基） -5-氰基嘧啶-2-基硫曱基）吡啶-2-基）丙酸（8-2)。 淡黃色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.74 (1H, t, J = 7.5 Hz) 7.30 (1H, d, J = 7.5 Hz) 7.12 (1H, d, J = 7.5 Hz) 6.61 (2H, d, J = 8.7 Hz) 5.90 (2H, br-s) 4.44 (2H, s) 2.91 (2H, t, J = 7.5 Hz) 2.48 (2H, t, J = 7.5 Hz). 4-(4-(3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基）-5-氰基嘧啶-2-基 硫基）甲基）吡啶-2-基）丙醯基）哌畊-1-基）曱基）哌啶-1-羧酸第三丁酯（8-3) 將2. 58g的3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基）-5-氰基嘧 啶-2-基硫甲基）吡啶-2-基）丙酸（8-2)懸浮於50ml的丙酮 中。在懸浮液中依序加入1.28g的1-經基-1H-苯並三π圭、 1.8g的卜乙基-3-(3-二甲基胺基丙基）-碳二亞胺鹽酸鹽 以及1. 8g的4-哌畊-1-基甲基-哌啶-1-羧酸第三丁酯，且 混合物回流1小時。在真空中移除丙酮，接著加入30ml的 乙酸乙酯以及30ml的水，並攪拌混合物30分鐘。將混合 物移至分液漏斗。依序以飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水清 54 321758 201033192 洗有機層，經無水硫酸鎂乾燥並在真空中濃縮。以;ε夕膠管 柱層析（二氯甲烷：曱醇：28%氨水=100 : 1〇 : 1)純化殘 留物’得到3. 9g的4-(4-(3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基） -5-氰基β密咬-2-基硫基）甲基）D比唆-2-基）丙醯基）派u井〜1一 基）甲基）哌啶-1-羧酸第三丁酯（8-3)。 淡黃色粉末 ^-NMR (CDC13) 7.95 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.50 (iu t-, ' L t U , U ss 7,5 Hz) 7.2S (1H, d, J = 7.5 Hz) 7.08 (1H, d, J = 7.s Hz) 6.71 (2H, d, J = 8.7 Hz) 5.70 (2H,br-s) 4.51 (2H, s) 4 ls 4.09 (4H, m) 3.59 (2H, t, σ=4.8Ηζ) 3.45 (2H, t/ J=4>8

Hz) 3.13 (2H, t, J = 7.5 Hz) 2.80 (2H, t, J » 7.S hZ) 2.75、 2·65 (2H, m) 2.34-2.30 (4H, m) 2.13 (2H, d, J β 7·2 Hz> 1.72-1.64 (1H, m) 1.46 (9H, s) 1.07-1.02 (2H, m). 4-胺基-6-(4-胺基苯基）-2-(6-(3-侧氧基-3-(4-(哌啶· 基甲基）°辰畊-1-基）丙基）π比啶一2-基）甲硫基嘧啶一5一甲 腈四鹽酸鹽（8-4) 在6g的4-(4-(3-(6-(4-胺基-6-(4-胺基苯基 氰基嘧啶-2-基硫基）曱基）吡啶_2_基）丙醯基）哌畊―丨―基） 曱基）底咬1-緩酸第二丁酯（8—3)中加入54ml的氯化氫 [lmol/L在乙酸乙酯中；]，且混合物在室溫中攪拌24小時。 將沈澱物收集於濾紙上，並以乙酸乙酯清洗。接焊 到4.3g的4一胺基.（4一胺基苯基）_2_(6_(m則氧基= =-(派咬-4-基甲基）辦+基）丙基）D比咬_2〜基）甲硫基） 嘧啶-5-甲腈四鹽酸鹽（8一4)。 321758 55 201033192 淡黃色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 11.23 (1H, br-s) 9.05 (1H, br-s) 8.93 (1H, br-s) 8.30 (1H, t, J = 7.5 Hz) 7.79-7.68 (4Ή, m) 6.92 (2H, d, J = 8.7 Hz) 4.77 (2H, s) 4.40-4.31 (8H, m) 3.36-3.18 (4H, m) 3.02-2.75 (6H, m) 2.21-1.98 (3H, m) 1.52-1.34 (2H, m). 以下，呈示下述化合物的製程作為參考例。

3-(6-羥曱基-卜氧基-吡啶-2-基）丙酸甲醋（9-2) 1. 37g的3-(6-羥曱基吡啶-2-基）丙酸甲酯（9-1)溶於 15ml的二氯甲烷中，並於其中缓緩加入1.46g溶在二氯甲 烷的間氯過苯曱酸溶液，攪拌混合物2小時。依序以10% 亞硫酸鈉水溶液、碳酸氫納水溶液以及水清洗反應溶液。 有機層經無水硫酸鎂乾燥，得到880mg的3-(6-羥曱基-1-氧基-吡啶-2-基）丙酸甲酯（9-2)。 白色粉末 56 321758 201033192 XH-NMR (CDC13) 7.48-7.29 (1H, m) 7.25-7.22 (2H, τη) 5.01 (1H, m) 4.80 (2H, S) 3·67 (3H, s) 3.23 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.87 (2H, t, J= 7.2 Hz). N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-巯基嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺 (9-4) 將1.52g硫脲懸浮於15ml的乙醇中，然後加入2. 12g 的碳酸鈉，在60°C攪拌混合物30分鐘。接著，加入4. 22g 的N-(4-(2，2-二氰乙稀基）苯基）乙驢胺（9-3) 且將混合 ❿ 物在回流下攪拌5小時。在反應完成後，於減壓狀態下移 除乙醇。殘留物溶於溫水中，並以乙酸微酸化。沈澱的結 晶以濾紙收集，並乾燥得到1.87g的N-(4-(6-胺基-5-氰 基-2-毓基嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺（9-4)。 黃色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 10.29 (1H, s) 7.73 (2H, d, J= 8.7 Hz) 7.64 (2H, d, J= 8.7 Hz) 2.09 (3H, s). 3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基琉 ❿曱基]-1-氧基-吡啶-2-基}丙酸曱酯（9-5) 將880mg的3-(6-羥甲基-1-氧基-吡啶-2-基）丙酸曱 酯（9-4)溶於18ml的二氯曱烷中。在溶液中加入1. 15ml的 三乙基胺，且混合物在冰溫下攪拌10分鐘。緩緩滴入 0.48ml.的甲磺醯氯，並且混合物在冰溫下攪拌30分鐘。 在反應混合物中加入水，將混合物移至分液漏斗。以飽和 的礙酸氫納水溶液和鹽水清洗有機層。接著，有機層經無 水硫酸鎂乾燥，得到3-(6-曱磺醯基氧基曱基-1-氧基-吡 57 321758 201033192 啶-2-基）丙酸甲酯。然後，將化合物溶解於10ml的二甲基 甲醯胺中，並加入1. 14g的N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-巯基 嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺以及1. lg的碳酸鉀，且混合物在 室溫下攪拌整夜。在反應完成後，將水加入溶液中。將沈 澱物收集於濾紙上，並乾燥得到580mg的3-{6-[4-(4-乙 轔胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫甲基]-l-氧基-0比〇定-2-基}丙酸曱醋（9-5)。 白色粉末 ^-NMR (DMSO-d6) 10.26 (1H, s) 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.74-7.69 (3H, m) 7.37 (1H, d, J= 7.8 Hz) 7.23 (1H, t, J= 7.8 Hz) 4.50 (2H, S) 3.59 (3H, S) 3.05 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.76 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.09 (3H, s). 3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫 曱基]-1-氧基比啶-2-基}丙酸（9-6) 將580mg的3_{6_[4-(4-乙酿胺基苯基）_6-胺基氮 基嘧啶-2-基硫曱基]-1-氧基-吡啶-2-基}丙酸曱酯（9-5) 懸浮於17ml的50%含水乙腈中。在懸浮液中加入53mg的 氩氧化鋰單水合物，且混合物在80°C攪拌2小時。接著， 加入253mg的檸檬酸，並且混合物在50°C攪拌1小時。待 反應物冷卻後，以滤紙收集沈澱的結晶，用水清洗，並乾 燥得到540mg的3-{6*~[4-(4-乙酿胺基苯基）-6-胺基-5-氮 基。密咬-2-基硫甲基]-1-氧基-β比咬-2-基}丙酸（9-6)。 白色粉末 58 321758 201033192 ^-NMR (DMSO-d6) 10.25 (1H, s) 7.83 (2H, d, J = 8.7 Hz) 7.74-7.68 (3H, m) 7.37 (1H, d, J= 7.8 Hz) 7,23 (1H, t, J= 7.8 HZ) 4.50 (2H, s) 3.02 (2H, t, J= 7.2 HZ) 2.67 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.09 (3H; s). 4 -（4-(3-(6-(4-(4-乙酿胺基苯基）-6 -胺基-5-氛基n密咬 -2-基硫基）曱基）-1-氧基-°比啶-2-基）丙醯基）-哌哄-1-基） 曱基）哌啶-1-羧酸第三丁酯（9-7) 將520mg的3-{6-[4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺基-5-氰 ® 基嘧啶-2-基硫曱基]-卜氧基-吡啶-2-基}丙酸（9-6)溶於 10ml丙酮和10ml二曱基甲醯胺的混合溶液中。在溶液中 依序加入224mg的1-經基-1H-苯並三唾、318mg的1-乙基 -3-(3-二甲基胺基丙基）-碳二亞胺鹽酸鹽以及315mg的4-哌畊-1-基甲基-哌啶-1-羧酸第三丁酯，且混合物回流2小 時。在真空中移除丙酮，接著加入乙酸乙酯和水，並攪拌 混合物30分鐘。將混合物移至分液漏斗，依序以飽和的碳 @ 酸氫鈉水溶液和鹽水清洗有機層，經無水硫酸鎂乾燥，並 在真空中濃縮。以矽膠管柱層析（二氯曱烷：甲醇=50 : I) 純化殘留物，得到470mg的4-(4-(3-(6-(4-(4-乙醯胺基〜. 苯基）-6-胺基-5-氰基嘧啶-2-基硫基）曱基）-1-氧基-吼啶 -2-基）丙醯基）σ底哄-1-基）甲基）α底唆-1-魏酸《第?，.三.丁醋㈣/、 (9-7)。 白色粉末 59 321758 201033192 ^•H-NMR (CDC13) 7.98 (2H, d, J= 8·7 HZ> 7.69_7·61 UH, m) 7.43 (1H, dd, J = 7.8, 1.8 Hz) 7.31 (1H, dd, 7.8, i.8 HZ) 7.09 (in, t, J= 7.8 Hz) 5.75 (2H, s) 4.65(2H, s) 4.12. 4.00 (2H, ra) 3.55 (2H, br-s) 3.46 (2H, br-s) 3.24 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.87 (2H, t, J= 7.2 Hz) 2.71-2-63 (2H, m) 2.32-2.29 <4H, m) 2.23 (3H, s) 2.11 (2H, d, J= 6.9 Hz> 1.71-1.67 (3H, m) 1.46 〇H, s) 1.07-0.97 (2H# m). N-（4-(6-胺基-5-氰基-2-( (6-( 3-側氧基-3-(4-( °底唆~4__ 基甲基）哌畊-1-基）丙基）-l-氧基比啶-2-基）甲硫基）喷 啶-4-基）苯基）乙醯胺三鹽酸鹽（9_8) 在450mg的4-(4-(3-(6-(4-(4-乙醯胺基苯基）-6-胺 基-5-氰基嘧啶-2-基硫基）甲基)一卜氧基-吡啶_2—基）丙醯 基）哌哄-1-基）甲基）哌啶_1_羧酸第三丁酯中加入4. 5ml 的氣化氫[lmol/L在乙酸乙酯中]，且混合物在室溫中攪拌 24小時。將沈澱物收集於濾紙上，以乙酸乙酯清洗，並乾 燥得到白色粗製的結晶。將粗製的結晶在室溫下溶於2. 5 m丄 的水中並過濾。在濾液中緩緩加入1〇ml的丙酮，混合物和 其晶種授拌6小時。將沈澱的結晶物收集於濾、紙上，以丙 嗣清洗’接著乾燥得至,j 230mg的N-(4-(6-胺基-5-氰基-2- ((6 J：3側氧基-3-(4-(派唆_4_基甲基）派啡—卜基）丙基） '卜氧基K2-基）甲硫基）射+基）苯基）乙酿胺三鹽 酸鹽。 白色粉末 321758 60 201033192 h-NMR (DMSO-ds> 10.65 (1H, m} 1〇·33 (1H/ 曰）8.80-8. SS (2H, m) 7.82 (2H, d, J β 8.7 Hz) 7.75-7.69 (3H, m) 7.43 (1H, J* 7.8 Hz) 7.25 (1H, t, J= 7.8 Hz) 4.50 (2H, s) 4.42-4.38 (1H, m> 4.18-4.09 (1H, m) 3.74-3.25 (8H, m) 3.08-3.01 (4H, m〉2.87-2.70 (4H, m) 2·09 (3H, S) 2.08-1.97 (2H, m) ι.47_ 1.39 (2H, m). 以下為包含本發明化合物的醫藥組成物的實施例。 實施例8 ❹ 在5L的不銹鋼燒杯中加入約4. 5kg的純水。加入i3〇g 濃縮甘油作為等張劑以及3. 5g的琥珀酸作為緩衝液，攪拌 混合物至溶解。接著，加入〇. 5g的N-(4-(6-胺基-5-氰基 -2-((6-(3-侧氧基-3-(4-(0底咬-4-基甲基）艰哄-1-基）丙 基）吡啶-2-基）甲硫基）-嘧啶-4-基）苯基）乙醯胺（實施例1 的化合物）’並攪拌混合物至溶解。在溶液中加入〇. 3g的 苯度溴錢作為防腐劑，並輕輕地授拌混合物’目視確認完 ❹全溶解。在溶液中緩緩地加入4%(w/w)氫氧化鈉將pH調 整至6. 6。在調整pH之後，在溶液中加水至總重為5. 〇kg， 並輕輕攪拌溶液。將溶液無菌過濾，接著將濾液無菌填充 入滴眼劑的瓶子中並將瓶子封好。 實施例Θ 實施例9的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 備’但使用3. 00g的磷酸二氫鈉取代號珀酸作為緩衝液。 實施例10 ° 實施例10的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 321758 61 201033192 備，但使用275g的i]萄糖取代濃縮甘油作為等張劑。 實施例11 實施例11的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 備，但使用255g的甘露醇取代濃縮甘油作為等張劑。 實施例12 實施例12的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 備，但使用68g的濃縮甘油以及5〇g的丙二醇取代濃縮甘 油作為等張劑。 ' 實施例13 實施例13的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 備，但使用105g的》農縮甘油以及43g的山梨醇取代濃縮甘 油作為等張劑。 實施例14 實施例14的醫藥組成物是以類似實施例8的方式掣 備，但使用50g的丙二醇、i〇〇g的甘露醇以及43g的山梨 醇取代漢縮甘油作為等張劑。 ' 實施例15 實施例15的醫藥組成物是以類似實施例8的方式製 備’但使用0.5g的氯化苯二曱烴銨取代笨度溴銨作為防腐 劑。 接著，描述使用本發明化合物的藥理試驗例。 測試1 :在細胞表現腺核苷A2a受體的c-AMP生成作用 測試參照以下的參考文獻（Klotz k. N. et al.， Naunyn-Schmiedeberg, s Arch. Pharmacol., (1998) 357, 62 321758 201033192 1 9 , Shryock J. C. et al., Molecular Pharmacology, (1998) 53，886-893)所揭露的方法進行。 測試所使用的細胞為表現腺核苷A2a受體的HEK293細 胞（人類XPerkinElmer Life Science, Code No. RBHA2AC) ° 使用含有10%FBS(胎牛血清）以及1遞丙酮酸鈉 (sodium pyruvate)Dulbecc〇’s modified Eagles 培養基 的（DMEM)作為培養液。 將細胞置於96孔盤中（ιχ105/孔）並培養整夜。在移除 上層液後，在每一孔中加入含有2〇mM HEPES的〇. lmlMEM 培養液（不含FBS)、0. ImM的3-異丁基-l_甲基黃嘌呤 (IBMX)，以及2單位/mL的腺核苷去胺酶（adenosine deaminase)，並在37°C培養30分鐘。接著，在每一孔中 加入0. lml含有預定濃度測試化合物的DMS〇溶液的培養 液，再培養額外的30分鐘。在移除上層液後，加入溶細胞 參性溶液（cytolytic solution)以抑制反應。使用c-AMP酵 素免疫分析（EIA)系統（Amersham Bi〇sciences，code No. RPN225)測定每一孔中的c-AMP量。 使用CGS-21680((2-對-羧乙基）苯乙胺基_5, _n-乙基 曱醯胺基腺苷鹽酸鹽）’（Sigma, code CU1)當作麥考化合啊 物重複同樣的分析。 將在參考培養基中由1 //Μ參考化合物所導致的c-AMP 合成量定義為100%。測定在每一測試培養基中c_amp的 合成量，以每一測試化合物之預定濃度計算產生5〇%c_AMp 321758 63 201033192 量的濃度，定義為EC5D值。 使用在上述實施例中製備的本發明化合物所獲得的上 述測試結果5 結果 列示於下表中。 樣品 A2a促效活性（EC5g，nM) 1 3. 3 2 2. 9 3 1. 8 4 6. 1 5 8.4

測試2 :實施例1化合物對於角膜上皮細胞的影響 [方法] 使用兔子角膜上皮細胞（KURAB0)作為測試細胞。將兔 子角膜上皮細胞置於96孔盤中，並加入實施例1之化合 物，樣品培養60分鐘。接著，樣品以日光模擬機（SOL500) 的UVA(3. 5mW/cm2)照射70分鐘。之後，以緩衝液清洗細胞， 經過24小時，以中性紅吸收分析（neutral red uptake assay)測試細胞存活率。 [結果] 結果表示於第1圖。在添加實施例1化合物（0. 25、0. 5 以及ImM)並以日光模擬機照射後，細胞的存活率分別為 106.3%、115.0%以及100.7%，因此並未觀測到任何細 胞存活率的降低。 321758 201033192 從上述的結果明 外的陽光下，使用高^ ^由於本發明化合物即使在室 本發明製劑可以使用高^ '、、顯不任何細胞毒性，因此， 使用的藥劑。 1並且’本發明製劑為可安全 測試3··血管舒緩作用 ❹ 眼睛循環失調發生於青光眼素腺 部病變、缺錢視神麵變、“f _㈣、黃斑 脈阻塞、糖尿病性視網膜病變以及膜動脈阻塞、視網膜靜 發生於視神經頭的循環失調被特別是’ 眼睛血流有兩個主要的循二作月先眼的重要因素。 由睫狀動脈，另一路捏是經:系統。其中之一路經是經 通往脈絡膜、視神‘ ^央視網臈動脈。睫狀動脈 面，中央視網膜以及睫狀體的動脈。另一方 商、，膜動脈通往視網膜動脈以及— 頭小動脈的視網膜動脈分支。 在視神經 流。因此，寄二狀動脈而視為改善眼睛的血 青光眼、色:以;化，為治療眼睛疾病，諸如 變、視網媒動脈阻:二m血性視神經病 病μ及虹膜睫狀體㈣有網膜 〈材料及方法〉 以靜脈崎過量的紅比轴使兔子齡，摘除目 /刀離出睫狀動脈。睫狀動脈上切出2mm長度的血管^月 =在顯微鏡觀測下放置到Danish多肌動描記器系統衣’

Danish multi myograph system)610M(Danish my〇 321758 65 201033192 tecy)。血管以克氏液（Krebs，s〇iuti〇n) 氧化碳及95%氧在3rc維持平衡n <二 為了嫁認企管的内皮層傷害1⑽— )測試睫狀動脈的舒緩作用。如果碳=驗 的舒緩作用超過3〇%’而血管的内皮層沒有受到傷， 即用於實驗。 場害者， 在以高_子〇〇-克氏液收縮睫狀動脈後， Μ至300 βΜ的實施例1化合物持續通入腔體中， (Danish myo techmology)測量張力。 <結果> 結果表示於下表及第2圖中。實施例1化合 依存性的舒緩了兔子睫狀動脈，其ECs。值為係劑量 此二^論是實施例1化合物對於睫狀方 .0从M。因 將0· 以

U

My〇daq 舒缓作用(%) 2. 6±0. 5 4. 8±1. 7. 9±2. 3 10 35.3+14. 30 65. 6±9. 100 82. 4±3. 7 300 90. 1±2. 剩試4 :神經保護作用 青光眼為一種會導致眼盲的眼睛疾病， 視網膜神經節 321758 66 201033192 細胞（RGC)係選擇性的受損。接著視神經受損，最後終於產 生視野缺損。睫狀動脈阻塞、睫狀靜脈阻塞以及缺血性視 神經病變也都是有關視神經損害的眼睛疾病。另外，色素 性視網膜炎、黃斑部病變以及，Leber氏視神經病變 (Leber’s hereditary optic neuropathy)為關於視網膜神 經細胞受損害的眼睛疾病。 實施例1化合物顯示對於視網膜神經節細胞的保護效 ©果’期望使用作為治療像睫狀動脈阻塞、睫狀靜脈阻塞、 糖尿病性視網膜病、缺血性視神經病變、色素性視網膜炎、 黃斑部病變以及Leber氏視神經病變等眼睛疾病的神經保 護藥劑。 <材料及方法〉 實驗係根攄（Invest Opthalmol Vis Sci. 39 : 972-981, 1998)所記載的方法進行。 從7天大的Long evans大鼠摘除眼睛，從眼睛將視網 ® 膜分離。將視網膜在含有15U/mL木本酶（papain)的神經基 本培養液（Neurobasal medium)中在37°C下培養30分鐘使 之解離，而備妥視網膜懸浮液。 視網膜懸浮液在室溫下於抗-SIRP抗體（Chemicon)-塗 覆燒瓶中培養30分鐘。將未附著的細胞移置到抗-thy-1 抗體（Chemicon)-塗覆燒瓶中。該細胞在室溫培養3〇分 鐘。最後將附著在燒瓶的細胞以神經基本培養液清洗。在 以800rpm離心5分鐘後，製備經純化的RGC。將細胞接種 在已經塗覆聚L-離胺酸（P〇ly-L-lysine)以及laminin(層 67 321758 201033192 黏連蛋白）的玻璃蓋玻片。將經純化的RGC培養在含有B27 補充劑、ImM 麵醯胺（giutamine)50ng/mL CNTF、l〇eM 氣 斯克寧（Forskolin)的神經基本培養液中。培養基保持在 37°C ’含有5%二氧化碳以及95%氧的增濕環境下。在接 種細胞後’立刻以BDNF(50ng/mL)或是最終濃度分別為 OnM(控制纟且）、3ηΜ、ΙΟηΜ或是30nM的實施例1化合物處 理。 以計數染色的RGC決定細胞存活（細胞存活率）。在培 養細胞5天後’以ΐβΜ酯化鈣黃綠素（Calcein-AM)(分子 探針）染色RGC。以螢光顯微鏡計數RGC的數目。以控制紐 為0%以及BDNF組為1〇〇%’計算出細胞存活的比例（細皰 存活率）。 〈結果〉 結果顯示於下表以及第3圖。實施例丨化合物顯示出 和劑量依存性的細胞存活。此結果表示實施例丨化合物對 RGC有神經保護的效旲0 組 η 細胞存活（％) 控制組 8 0.0±6.5 實施例1(3ηΜ) 8 10.9±7. 0 實施例l(l〇nM) 8 46.5±7. 0 實施例1(30ηΜ) 8 、 41.9±5.5 數據==平均數±標準差 以控制組為〇%以及BDNF組為1〇〇%，計算出細胞存活。 【圖式簡單說明】 68 321758 201033192 第1圖為在兔子角膜上皮細胞中分別加入0.25、0.5 以及IraM濃度之實施例1的化合物之細胞存活率。 第2圖為關於實施例1化合物對兔子睫狀動脈的影響。 第3圖為關於實施例1化合物對兔子網膜神經節細胞 的影響。 【主要元件符號說明】 無0 參

69 321758

Claims (1)

1. 201033192 七、申請專利範圍： 1· 一種下式（1)的氰基嘧啶化合物或其鹽類，其中，R為 氫、羥（低級烷基）、鹵代（低級烷基）或（低級烷氧基;) 羰基-(低級烷基）

   •如申請專利範圍第1項之氰基嘧啶化合物或其鹽，其 中’該化合物係選自下述組群者： (1) N-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-側氧基-3-(4- (哌啶-4-基甲基）娘π井+基）丙基）τ^β定_2_基）甲 硫基）-嘴°定-4-基）苯基）乙酿胺； (2) Ν-(4-(6-胺基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(2-經乙 基）一哌啶-4-基）甲基）哌哄_丨-基）_3_侧氧基丙基） -吡啶-2-基）甲硫基）嘧啶—4-基）苯基）乙醯胺； (3) N-(4-(6-fe基-5-氰基-2-((6-(3-(4-((1-(3-經基 -丙基）-哌啶-4-基）甲基）哌畊側氧基丙 基)_吡啶-2-基）曱硫基）嘧啶-4_基）苯基）乙醯胺； (4) N-(4-(6-胺基-5-氰基—2-((6_(3-(4-((1_(2_氟乙 基）-哌啶-4-基）甲基）哌啡_丨_基）_3_侧氧基丙基） 吡啶-2-基）甲硫基）嘧啶_4_基）苯基）乙醯胺 321758 70 201033192 (5) N-(4-(6^^-5-^^-2-C(6-(3-(4-((1_(2.f ^ ， 基—幾乙基）娘唆_4-基基）謂-1-基）|側氧 : 基丙基）吡啶基）甲硫基）嘧啶-4-基）苯基）一乙 醯胺。 3·-種醫藥組成物’係包含申請專利範圍第】項或第2 項之化合物或其鹽，以及製藥可接受的載體者。 4. 如申請專利範圍第3項 〇防眼睛疾病。 成物，係用來治療或預 5. -種如申請專利範圍第4項之醫藥組成物，係用來治療 或預防青光眼。 6. -種申請專利範圍第j項或第2項之化合物或其鹽之用 途，係作為腺核苷A2a受體促效劑。 7. 台療眼睛疾病的方法，包含投予有效量之申請專利 m 物\人相項或第2項之化合物或其鹽至f要此治療的動 物或人類。 8. 種水性液體製劑係包含申請專利範圍第3項之醫藥 組成物。.、 . .，、 專利範圍第8項之水性液體製劑，係進—步包含… m-i :種種選自製藥可接受的緩衝液、等張劑、防腐 , 助心劑以及邱調節劑之添加劑.κ〜 ” 利範圍第9項之水性液體製劑，其中，緩衝液 琥珀酸、硼酸、磷酸、胺基酸及其製藥可接受的 缓衝 u.如申請專利範圍第ίο項之水性液體製劑，其中 321758 71 201033192 液為破珀酸。 12·如申請專利範圍第8項之水性液體製劑，其中’等張齊] ^ 為一種或兩種選自下列組群的等張劑：葡萄醣、山梨 醇、甘露醇、氣化鈉、氯化鉀、丙二醇以及甘油。 13·如申請專利範圍第9項之水性液體製劑，其中，防腐劑 係選自氣化笨二甲烴按、氣化苯铵松寧（benzethonium chloride)、苯度溴銨（benzododecinium bromide)、氣 己定葡糖酸鹽（chlorhexidine gluconate)、對位經基 苯甲酸甲酯、對位羥基苯甲酸丙酯、氣丁醇以及笨曱醇。 ❹ 14.如申請專利範圍第8項至第13項中任一項之水性液體 製劑，其中，Ph為約5. 0至9. 0者。 ❹ 321758 72