TR201802626T4 - Bir siyanopirimidin türevi. - Google Patents

Abstract

Mevcut buluş yeni bir siyanopirimidin bileşiği ve güvenli ve kuvvetli bir adenozin A2a reseptör agonistik aktivitesi olan bir farmasötik bileşik ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME BIR SIYANOPIRIMIDIN TÜREVI TEKNIK SAHA Mevcut bulus yeni bir siyanopirimidin bilesigi ve bir farmasötik bilesik ve bilesigi içeren formülasyon ile ilgilidir.

ALTYAPI TEKNIGI Adenozin bir hücre yüzeyindeki bir reseptöre baglandiginda çesitli fizyolojik eylemler gösterebilen bir maddedir. Hücre yüzeyindeki adenozin reseptörü G-proteini-bagli reseptör ailesine aittir ve A1, A2a, A2b ve A3 olarak siniflandirilir. Aralarinda, adenozin A1 ve adenozin A3 reseptörleri Gi-proteini ile baglanir ve bunlarin aktivasyonu intrasellüler c- AMP düzeyini indirgeme ile sonuçlanir. Ayrica, adenozin A2a ve adenozin A2b reseptörleri Gs-proteini ile baglanir ve bunlarin aktivasyonu intrasellüler c-AMP düzeyini indirgeme ile sonuçlanir. Bu 4 adenozin reseptör alt tipinin her biri klonlanmistir.

Yukaridaki adenozin reseptör alt tipinin her birinde etki edebilen agonistler ve antagonistler hakkinda çesitli çalismalar önceden bildirilmistir. Aralarinda, adenozin A2a reseptör agonistlerin hem kuvvetli antihipertansif eylem gösterdigi ve bir antihipertansif ilaç, kardiyak veya serebral iskemik hastaligi tedavi etmeye/önlemeye yönelik bir ilaç ve antiarteriyosklerotik ilaç gibi yukarida belirtilen ilaçlar olarak yararli oldugu hem de bir oküler hipotansif eylem gösterdigi bildirilir (bakiniz J. Pharmcol. Exp. Ther. 320-326, 273 (1995). bilesiklerini açiklamaz.

BULUSUN AÇIKLAMASI (Bulus ile çözülecek sorun) Mevcut bulusun bir amaci güvenli ve kuvvetli bir adenozin A2a reseptör agonistik aktiviteye sahip olan yeni bir bilesik saglamaktir.

(Sorunu çözme araci) Mevcut bulusçular yukaridaki amaci gerçeklestirmek üzere kapsamli bir sekilde çalismis ve asagidaki bilesiklerin mükemmel bir güvenligin yani sira bir kuvvetli adenozin A2a reseptör agonistik eylem gösterdigi bulunmustur. Ayrica, mevcut bulusçular asagidaki bilesiklerin retinal gangliyon hücresi üstünde oküler silyer artere ve norökorumaya yönelik vasküler rahatlama gösterdigini de bulmustur. Mevcut bulus bu bulgulara dayanan ek Mevcut bulus asagidaki Madde 1'de gösterilen bir siyanopirimidin bilesigini, bilesigi içeren bir bilesim ve formülasyon ve bir göz hastaligini tedavi etmeye veya önlemeye yönelik bir yöntemde kullanima iliskin bilesigi saglar.

Madde 1. Formülün (1) bir siyanopirimidin bilesigi: veya bunun bir tuzudur.

Madde 2. Madde 1'in siyanopirimidin bilesigidir, N-(4-(6-amino-5-siyano-2-((6-(3-okso-3- (4-(piperidin-4-ilmetil)piperazin-1-il)pr0pil)piridin-2-il)metiltiyo)-pirimidin-4-il)fenil)asetamid, veya bunun bir tuzudur.

Madde 3. Madde 1 veya 2'nin bilesigini veya bunlarin bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim ve farmasötik olarak kabul edilebilen bir tasiyicidir.

Madde 4. Bir göz hastaligini tedavi etmede veya önlemede kullanima yönelik madde 3*ün farmasötik bilesimidir.

Madde 5. Madde 4”ün kullanimina yönelik farmasötik bilesim, burada glokomu tedavi etme Madde 6. Madde 1 veya 2'nin bilesiginin veya bunlarin bir tuzunun bir göz hastaligini tedavi etmeye yönelik bir ilaç hazirlamada kullanilmasidir.

Madde 7. Bir göz hastaligini tedavi etmede kullanima yönelik madde 1 veya 2'nin bir bilesigi veya bunlarin bir tuzudur.

Madde 8. Madde 3'ün farmasötik bilesimini içeren bir sulu sivi preparattir.

Madde 9. Farmasötik olarak kabul edilebilen bir tampon madde, izotonik ajan, koruyucu, çözündürücü ve pH düzenleyiciden seçilen bir veya daha fazla katki maddesini de içeren madde 8'in sulu sivi preparatidir.

Madde 10. Madde 9'un sulu sivi preparatidir, burada tampon madde süksinik asit, borik asit, fosforik asit ve amino asit ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzundan seçilir.

Madde 11. Madde 107un sulu sivi preparatidir, burada tampon madde süksinik asittir.

Madde 12. Madde 8'in sulu sivi preparatidir, burada izotonik ajan glukoz, sorbitol, mannitol, sodyum klorid, potasyum klorid, propilen glikol ve gliserinden seçilen bir veya iki izotonik ajandir.

Madde 13. Madde 9'un sulu sivi preparatidir, burada koruyucu benzalkonyum klorid, benzetonyum klorid, benzododesinyum bromidi klorheksidin glukonat, metil para- oksibenzoat, propil para-oksibenzoat, klorobutanol ve benzil alkoldür.

Madde 14. Madde 8 ila 13'ten herhangi birinin sulu sivi preparatidir, burada pH 5.0 ile 9.0'dir.

Yukarida belirtilen genel formülde tanimlanan her grup spesifik olarak asagidaki anlama Yukarida belirtilen genel formülde (1) belirtilen pirimidin türevleri çesitli araçlar ile hazirlanabilir. Örnek olarak, türevler asagidaki semalar 1 ila 3'e göre hazirlanabilir.

HzN NJ`s [Nx OH Burada R hidrojendir.

Bilesik (1), Bilesik (3) veya karboksil grubu aktive edilen bunun bir reaktif türevi ve Bilesik (4) veya imino grubu aktive edilen bir reaktif türevinin reaksiyona girmesi ile hazirlanir.

Bilesikteki (3) karboksilik grubun tercih edilen reaktif formu bir asit halid, bir asit anhidrid, bir aktif amid ve bir aktif ester içerir. Karboksilik grubun reaktif formunun tercih edilen örnekleri bir asit klorid; bir asit azid; sübstitüte bir fosforik asidin karisik bir anhidridini (örnegin, dialkil fosforik asit, fenil fosforik asit, difenil fosforik asit, dibenzil fosforik asit ve halojenli fosforik asit), bir dialkilfosforöz asit, bir sülfüroz asit, bir tiyosülfürik asit, bir sülfürik asit, bir sülfonik asit (örnegin metansülfonik asit), bir alifatik asit (örnegin asetik asit, propiyonik asit, bütirik asit, izobütirik asit, pivalik asit, pentanoik asit, isopentanoik asit, 2-etilbutirik asit, trikloroasetik asit) veya aromatik asit (örnegin benzoik asit); simetri asit anhidrid; imidazolun bir aktif amidi, 4-sübstitüte imidazol, dimetilpirazol, triazol veya tetrazol; bir aktif ester (örnegin siyanometil ester, metoksimetil ester, dimetiliminometil ester, vinil ester, propargil ester, p-nitrofenil ester, 2,4-dinitrofenil ester, triklorofenil ester, pentaklorofenil ester, mesilfenil ester) veya bir N-hidroksi bilesikli (örnegin N,N- dimetilhidroksilamin, 1-hidroksi-2-(1H)-piridon, N-hidroksisüksinimid, N-hidroksifitalimid, 1- hidroksi-1H-benzotriazol) bir ester içerir. Kullanilacak Bilesigin (3) türüne bagli olarak bu reaktif türevlerden herhangi bir uygun bilesigi seçmek mümkündür.

Yukaridaki reaksiyonda Bilesik (3) bir serbest asit veya bunun bir tuzu olarak kullanildiginda, reaksiyon tercihen bir yogunlastirma ajani içinde gerçeklestirilebilir.

Yogunlastirma ajani klasik ve iyi bilinen bir ajan içerir, örnegin N,N'- dikloroheksilkarbodiimid; N-sikloheksiI-N'-morfolinoetilkarbodiimid; N-sikloheksiI-N'-(4- dietilaminosikloheksil)karb0diimid; N,N'-dietilkarbodiimid; N,N'-diizopropilkarbodiimid; N- etil-N'-(3-dimetilaminopropil)karb0diimid veya bunun bir hidrokloridi; N,N'-karbonil bis(2- metilimidazol); pentametileneketen-N-sikloheksilimin; difeniIketen-N-sikloheksilimin; etoksiasetilen, 1-alk0ksi-1-kloroetilen; trialkil fosfit; etil polifosfat; izopropil polifosfat; fosfor oksiklorid (sülfonil klorid); fosfor triklorid; difenil sülfonil azid; tiyonil klorid; oksalil klorid; (düsük alkil) haloformat (örnegin etil kloroformat, izopropil kloroformat); trifenilfosfin; 2-etil- 7-hidroksibenzisoksazolyum tuzu; 2-etil-5-(m-sulfofenil) isoksazolyum hidroksit iç tuzu; benzotriazoI-1-iloksi-tris-(dimetilamin0)fosfonyum hekzaflorofosfat; 1-(p- klorobenzenesülfoniloksi)-6-kloro-1H-benzotriazol; N,N-dimetilformamidin tiyonil klorid, fosgen, triklorometil kloroformat veya fosfor oksiklorid ile reaksiyona girmesi yoluyla hazirlanan Vilsmeier reaktifi içerir. Daha çok tercih edildigi üzere, reaksiyon yukarida belirtilen yogunlastirma ajani ile ve N-hidroksisüksinimid, N-hidroksifitalimid ve 1-hidroksi- 1H-benzotriazol gibi bir aktif esterifikasyon ajani ile birlikte gerçeklestirilir.

Bilesikteki (4) imino grubun tercihen reaktif türevi bir Schiff baz-tipi imino grup veya Bilesik (4) ile aldehid ve keton gibi bir karbonil bilesiginin reaksiyona girmesi ile olusan bir enamin tipi tautomer; Bilesik (4) ve bis(trimetiIsilil)asetamid, m0no(trimetilsilil)asetamid ve bis(trimetilsilil)üre gibi bir silil bilesigin girmesi ile olusan bir silil türevi; Bilesik (4) ile fosfor triklorid veya fosgenin reaksiyona girmesi ile olusan bir türev içerir.

Reaksiyon genellikle reaksiyonu olumsuz etkilemeyen bir klasik solvent, örnegin su; metanol, etanol, izopropanol, n-butanol, trifloroetanol ve etilen glikol gibi bir alkol solvent; aseton ve metil etil keton gibi bir keton solvent; tetrahidrofuran, dioksan, dietil eter, diizopropil eter ve diglim gibi bir eter solvent; metil asetat ve etil asetat gibi bir ester solvent; asetonitril, N,N-dimetilformamid ve dimetilsülfoksit gibi bir aprotik polar solvent; n- pentan, n-hekzan, n-heptan ve siklohekzan gibi bir hidrokarbon solvent; metilen klorid ve etilen klorid gibi bir halojenli hidrokarbon solvent veya diger organik solventler içinde gerçeklestirilir. Ayrica, reaksiyon yukarida belirtilen klasik solventlerin bir karisiminda gerçeklestirilebilir.

Yukaridaki reaksiyon bir baz ile gerçeklestirilebilir. Baz çesitli bilinen inorganik ve organik bazlari içerir. Burada kullanilan inorganik baz, örnegin sodyum ve potasyum gibi alkali metal, Iityum hidrojen karbonat, sodyum hidrojen karbonat, ve potasyum hidrojen karbonat gibi alkali metal hidrojen karbonat; Iityum hidroksit, sodyum hidroksit, potasyum hidroksit ve sezyum hidroksit gibi alkali metal hidroksit; Iityum karbonat, sodyum karbonat, potasyum karbonat ve sezyum karbonat gibi alkali metal karbonat; sodyum metoksit ve sodyum etoksit gibi alkali metal düsük alkoksit; sodyum hidrit ve potasyum hidrit gibi alkali metal hidrit bilesik içerir. Burada kullanilan organik baz, örnegin trimetilamin, trietilamin ve N-etil diizopropilamin gibi trialkilamin; piridin; kinolin; piperidin; imidazol; pikolin; dimetilaminopiridin; dimetilanilin; N-metilmorfolin; : olabilir.

Ve baz sivi oldugunda bir solvent olarak da kullanilabilir. Baz tek bir içerik maddesi olarak veya iki veya daha fazla içerik maddesi ile birlikte kullanilabilir. Burada kullanilan bazik bilesik genellikle Bilesigin (3) her 1 molünde 0.1 ila 10 mol, tercihen Bilesigin (3) her 1 molünde 0.1 ila 3 moldür.

Yukaridaki Sema 2'de kullanilan Bilesik (3) ve Bilesik (4) en az 1 mol, tercihen Bilesigin (4) her 1 molünde Bilesigin (3) 1 ila 5 molüdür.

Reaksiyon sicakligi sinirli degildir ve reaksiyon genellikle sogutma altindai oda sicakliginda veya isitma altinda gerçeklestirilebilir. Tercihen yukaridaki reaksiyon 30 dakika ila 30 saat, tercihen 30 dakika ile 5 saat boyunca oda sicakligi ila 100°C arasinda gerçeklestirilebilir.

Yukaridaki reaksiyonda bir baslangiç materyali olarak kullanilan Bilesik (3) bir bilinen bilesiktir ve bilesigin prosesi asagida açiklanir (Sema 3).

N-koruyucu grubun ortadan kaldirilmasi Burada W, N-koruyucu gruptur.

Bilesik (6), Bilesik (3) ve Bilesigin (5) Sema 2`ye benzer bir sekilde reaksiyona girmesi ile hazirlanabilir. Ayrica Bilesik (1) N-koruyucu grubun ortadan kaldirilmasi ile hazirlanabilir.

Burada W olarak kullanilan N-koruyucu grubu örnegin bir (düsük alkoksi)karbonil grup, bir düsük alkanoil grup ve bir aril-sübstitüte (düsük alkil) gruptur.

Burada kullanilan (düsük alkoksi)karb0nil grup, 1 ila 6 karbon, örnegin metoksikarbonil, etoksikarbonil, propoksikarbonil, butoksikarbonil, tert-butoksikarbonil, pentiloksikarbonil ve heksiloksikarbonil içeren bir düz veya kollara ayrilmis zincir alkoksikarbonil grubu içerir.

Burada kullanilan düsük alkanoil grup 1 ila 6 karbon, örnegin formil, asetil, propionil, bütiril, izobütiril, pentanoil, tert-bütilkarbonil ve hekzanoil içeren bir düz veya kollara ayrilmis bir zincir alkanoil grubu içerir.

Burada kullanilan ariI-sübstitüte (düsük alkil) grup örnegin benzil, 2-feniletil, 1-feniletil, 3- fenilpropil, 4-fenilbütil, 5-fenilpentil, 6-fenilheksil, difenilmetil ve tritil ve 1 ila 3 fenil grup ile sübstitüte olan 1 ila 6 karbon içeren bir düz veya kollara ayrilmis zincir alkil grubu içerir.

Fenil gruplardaki ornatiklar, örnegin halojen atom ve hidroksi gruptan (örnegin metil, etil, propil, n-bütil, sec-bütil, tert-bütil, n-pentil, n-heksil, hidroksimetil, 2-hidroksietil, 1- ,5,4-trihidroksipentil, 5-hidroksipentil, 6-hidroksiheksil, 1-hidroksiizopropil, 2-metil-3- hidroksipropil, trifluorometil, triklorometil, klorometil, bromometil, fluorometil, iodometil, difluorometil, dibromometil, 2-kloroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 2,2,2-triklor0etil, 3-kloropropil, bromoheksil, 5,6-dikl0roheksil, 3-hidroksi-2-kloropropil) olusan gruptan seçilen 1 ila 3 grup ile istege bagli olarak sübstitüte olabilen 1 ila 6 karbon Içeren bir düz veya kollara ayrilmis zincir alkil grubu; halojen atomu ve hidroksi grubundan olusan gruptan (örnegin metoksi, etoksi, propoksi, n-butoksi, sec-butoksi, tert-butoksi, n-pentiloksi, n-heksiloksi, hidroksimetoksi, 2-hidroksietoksi, 1-hidroksiet0ksi, 3-hidroksipr0poksi, 2,3- dihidroksipropoksi, 4-hidroksibutoksi, 1,1-dimetiI-2-hidroksietoksi, 5,5,4- trihidroksipentiloksi, 5-hidroksipentiloksi, 6-hidroksiheksiloksi, 1-hidroksiisopropoksi, 2- metil-3-hidr0ksipropoksi, trifluorometoksi, triklorometoksi, klorometoksi. bromometoksi, fluorometoksi, iodometoksi, difluorometoksi, dibromometoksi. 2-klor0etoksi. 2,2.2- triklorobutoksi, 4-fluorobut0ksi, 5-kl0ropentil0ksi, 3-kloro-2-metilpr0poksi, 5- bromoheksiloksi, 5,6-dikloroheksiloksi, 3-hidroksi-2-klor0propoksi) seçilen 1 ila 3 grup ile istege bagli olarak sübstitüte olabilen 1 ila 6 karbon içeren bir düz veya kollara ayrilmis zincir alkoksi grubu; ve bir halojen atomu (örnegin florin, bromin, klorin, iyodin atomlari) içerir. Bu durumda fenil grupta 2 veya daha fazla ornatik oldugunda, ornatiklar ayni veya farkli olabilir.

N-koruyucu grubun ortadan kaldirilmasi: W hidroliz ve hidrojenasyon gibi klasik bir yöntem yoluyla gerçeklestirilebilir. Reaksiyon genellikle reaksiyonu olumsuz etkilemeyen klasik bir solvent, örnegin su; metanol, etanol, izopropanol, n-butanol, trifloroetanol ve etilen glikol gibi bir alkol solvent; aseton ve metil etil keton gibi bir keton solvent; tetrahidrofuran, dioksan, dietil eter, dimetoksietan ve diglim gibi bir eter solvent; metil asetat ve etil asetat gibi bir ester solvent; asetonitril, N,N-dimetilformamit, dimetilsülfoksit ve N-metilpirolidon gibi bir aprotik polar solvent; metilen klorid ve etilen klorid gibi bir halojenli hidrokarbon solvent; veya diger organik solventler içinde gerçeklestirilir. Ayrica, reaksiyon yukarida belirtilen klasik solventlerin bir karisiminda gerçeklestirilebilir. (i) Hidroliz: Hidroliz tercihen bir baz veya bir Lewis asidi içeren bir asit ile gerçeklestirilir.

Burada kullanilan baz, klasik inorganik bazlari ve organik bazlari içerir. Tercih edilen inorganik baz örnegin, sodyum ve potasyum gibi bir alkali metali; magnezyum ve kalsiyum gibi bir toprak alkali metali ve alkali metalin veya toprak alkali metalin bir hidroksit, karbonat veya hidrojen karbonatini içerir. Tercih edilen organik baz örnegin, trimetilamin ve trietilamin gibi bir trialkilamini; pikolin ve 1,5-diazabisiklo[4,3,0]non-5-en içerir.

Burada kullanilan asit klasik organik asitleri ve inorganik asitleri içerir. Tercih edilen organik asit örnegin formik asit, asetik asit ve propiyonik asit gibi bir alifatik asidi ve trikloroasetik asit ve trifloroasetik asit gibi trihaloasetik asit içerir. Tercihe edilen inorganik asit örnegin, hidroklorik asit, hidrobromik asit, sülfürik asit, hidrojen klorid ve hidrojen bromid içerir. Burada kullanilan Lewis asit örnegin, boron triflorid eterat, boron tribromid, alüminyum klorid ve ferrik kloridi içerir.

Bir asit olarak trihaloasetik asit veya bir Lewis asit kullanildiginda, reaksiyon tercihen anisol ve fenol gibi bir katyon tutucu ile gerçeklestirilir.

Burada kullanilan baz veya asit miktari, miktar hidroliz için yeterli oldugu sürece sinirli degildir.

Reaksiyon sicakligi genellikle 0 ila 120“C'dir, tercihen oda sicakligi 100°C'dir ve daha çok tercih edildigi üzere 80°C'dir. Reaksiyon süresi genellikle 30 dakika ila 24 saattir, tercihen dakika ila 12 saattir ve daha çok tercih edildigi üzere 1 ila 8 saattir. (ii) Hidrojenasyon: Burada kullanilan hidrojenasyon klasik/bilinen bir hidrojenasyon yardimiyla gerçeklestirilebilir. Klasik hidrojenasyon örnegin, kimyasal indirgemeyi ve katalitik indirgemeyi içerir.

Kimyasal indirgemede kullanilan tercih edilen indirgeme ajani, hidrojen iyodid, hidrojen sülfit, Iityum alüminyum hidrit, sodyum borohidrit ve sodyum siyanoborohidrit gibi bir hidrit veya kalay, çinko ve demir gibi bir metal veya bir metal bilesik (örnegin krom klorid, krom asetat) ve bir organik veya inorganik asidin (örnegin formik asit, asetik asit, propiyonik asit, trifloroasetik asit, p-toluensülfonik asit, hidroklorik asit, hidrobromik asit) bir kombinasyonudur.

Katalitik indirgemede kullanilan tercih edilen katalist, platin plakasi, sünger formunda platin, siyah platin, kolloidal platin, platin dioksit ve tel platin gibi bir katalist platini; sünger formunda paladyum, siyah paladyum, paladyum oksit, paladyum karbon, paladyum/baryum sülfat ve paladyum/baryum karbonat gibi bir paladyum katalisti; azaltilmis nikel, nikel oksit ve Raney nikel gibi bir nikel katalist; azaltilmis kobalt ve Raney kobalt gibi bir kobalt katalist ve azaltilmis demir gibi demir katalisti içerir.

Kimyasal indirgemede kullanilan asit sivi oldugunda bir solvent olarak da kullanilabilir.

Katalitik indirgemede kullanilan indirgeme ajani veya katalistin miktari genellikle kullanilan bir miktar olabilir.

Reaksiyon sicakligi genellikle 0 ila 120°C, tercihen oda sicakligi 100°C ve daha çok tercih edildigi üzere oda sicakligi 80°C'dir. Reaksiyon süresi genellikler 30 dakika ila 24 saat, tercihen 30 dakika ila 10 saat ve daha çok tercih edildigi üzere 30 dakika ila 4 saattir. 161 . (7) (6) Hz“ n' SßINjM cm Bilesik (3), Bilesik (5) ve Bilesigin (6) reaksiyon girmesi ile hazirlanabilir. Reaksiyon referansa göre (El-Sharabsy, S.A.; Abdel Gawad, S. M.; Hussain, S. M.; J.Prakt. Chem., Reaksiyon genellikle reaksiyonu olumsuz etkilemeyen bir klasik solvent, örnegin su; metanol, etanol, izopropanol, n-butanol, trifloroetanol ve etilen glikol gibi bir alkol solvent; aseton ve metil etil keton gibi bir keton solvent; tetrahidrofuran, dioksan, dietil eter, diizopropil eter ve diglim gibi bir eter solvent; metil asetat ve etil asetat gibi bir ester solvent; asetonitril, N,N-dimetilformamid ve dimetilsülfoksit gibi bir aprotik polar solvent; metilen klorid ve etilen klorid gibi bir halojenli hidrokarbon solvent; veya diger organik solventler içinde gerçeklestirilir. Ayrica, reaksiyon yukarida belirtilen klasik solventlerin bir karisiminda gerçeklestirilebilir.

Yukaridaki reaksiyon bir katalitik bilesik olmadan veya bir asit katalist ile gerçeklestirilebilir. Genellikle, reaksiyon tercihen bir bazik bilesik ile gerçeklestirilir. Bazik bilesik general inorganik ve organik bazlari içerir.

Burada kullanilan inorganik baz örnegin sodyum ve potasyum gibi alkali metali; lityum hidrojen karbonat, sodyum hidrojen karbonat ve potasyum hidrojen karbonat gibi alkali metal hidrojen karbonati; Iityum hidroksit, sodyum hidroksit, potasyum hidroksit ve sezyum hidroksit gibi alkali metal hidroksiti; Iityum karbonat, sodyum karbonat, potasyum karbonat ve sezyum karbonat gibi alkali metal karbonati; sodyum metoksit ve sodyum etoksit gibi alkali metali (düsük alkoksid): sodyum hidrit ve potasyum hidrit gibi alkali metal hidrit bilesigi içerir.

Burada kullanilan organik baz örnegin trimetilamin, trietilamin ve N-etil diizopropilamin gibi trialkilamin; piridin; kinolin; piperidin; imidazol; pikolin; dimetilaminopiridin; dimetilanilin; N- metilmorfolin; DBN, DABCO ve DBU içerir.

Kullanilan bazik bilesik tek bir içerik maddesi veya iki veya daha fazla içerik maddesinin herhangi bir kombinasyonu olabilir.

Burada kullanilan bazik bilesik genellikle Bilesik (5) molünün 10 kati, tercihen Bilesik (5) molünün 3.5 katina esdeger moldür. Bazik bilesik sivi oldugunda bir solvent olarak da kullanilabilir.

Bilesik (6) ve Bilesik (5) arasindaki oran Bilesigin (6) her 1 molünde en az 1 moldür, tercihen Bilesigin (6) her1 molünde Bilesigin (5) 1 ila 5 molüdür.

Reaksiyon sicakligi sinirli degildir ve reaksiyon genellikle sogutma altinda, oda sicakliginda veya isitma altinda gerçeklestirilebilir. Tercihen yukaridaki reaksiyon 1 ila 30 saat boyunca reflüks altinda gerçeklestirilebilir.

Reaksiyonda bir ara madde olarak dihidro-form Bilesik (7) üretildiginde, Bilesik (7), Bilesigi (8) saglamak üzere daha da okside edilebilir.

Bilesigin (7) oksidasyonu teknik alanda kullanilan bir klasik yöntem ile gerçeklestirilebilir.

Tercih edilen oksidasyon ajani örnegin, ve N- Oksidasyon reaksiyonu genellikle reaksiyonu olumsuz etkilemeyen düzgün veya bir klasik solvent, örnegin metanol, etanol, izopropanol, n-butanol, trifloroetanol ve etilen glikol gibi bir alkol solvent; aseton ve metil etil keton gibi bir keton solvent; tetrahidrofuran, dioksan, dietil eter, diizopropil atar ve diglim gibi bir eter solvent; metil asetat ve etil asetat gibi bir ester solvent; asetonitril, N,N-dimetilformamid ve dimetilsülfoksit gibi bir aprotik polar solvent; metilen klorid ve etilen klorid gibi bir halojenli hidrokarbon solvent veya diger organik solventler içinde gerçeklestirilir. Ayrica, reaksiyon yukarida belirtilen klasik solventlerin bir karisiminda gerçeklestirilebilir.

Burada kullanilan oksidasyon maddesinin miktari genellikle Bilesik (7) molünü asan bir katalitik miktardir.

Reaksiyon sicakligi sinirli degildir ve reaksiyon genellikle sogutma altinda, oda sicakliginda veya isitma altinda gerçeklestirilebilir. Tercihen, yukaridaki reaksiyon 0.5 ila 75 saat boyunca reflüks altinda gerçeklestirilebilir.

Yukarida Sema 3`teki Bilesik (7) halkada çift bagli saha kadar bir izomerdir.

Bir baslangiç materyali olarak kullanilan Bilesik (4) mevcut bilinen bir bilesiktir.

Yukaridaki semada kullanilan baslangiç materyali uygun bir tuzu olabilir ve her reaksiyonda istenen bilesikler de uygun tuzlar olabilir.

Yukaridaki her semada gösterilen her prosesin istenen bilesikleri ve bulusun bilesikleri klasik yönteme göre, örnegin konsantrasyonu ve ekstrasksiyonu sogutarak filtre ederek bir ham reaksiyon ürününü ayirarak ve sonra ham ürünü kromatografi, tekrar kristalizasyon ile aritarak ayrilabilir veya aritilabilir.

Bilesigin (1) tercih edilen tuzu farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzdur ve örnegin asagidakileri içerir: metal tuzu gibi inorganik bazli bir tuz (örnegin sodyum tuzu ve potasyum tuzu gibi bir alkali metal tuzu, kalsiyum tuzu ve magnezyum tuzu gibi bir toprak alkali metal tuzu), amonyum tuzu, alkali metal karbonat (örnegin Iityum karbonat, potasyum karbonat, sodyum karbonat, sezyum karbonat), alkali metal hidrojen karbonat (örnegin Iityum hidrojen karbonat, sodyum hidrojen karbonat, potasyum hidrojen karbonat), ve alkali metal hidroksit (örnegin Iityum hidroksit, sodyum hidroksit, potasyum hidroksit, sezyum hidroksit): tri(düsük)alkilamin (örnegin trimetilamin, trietilamin, N-etiI-diizopropilamin), piridin, kinolin, piperidin, imidazol, pikolin, dimetilaminopiridin, dimetilanilin, N-(düsük)alkiI-metilanilin (örnegin N-metilmorfolin), DBN, DBU, ve DABCO gibi organik bazli bir tuz; hidroklorid, hidrobromid, hidroiodid, sulfat, nitrat, fosfat gibi inorganik asidin bir tuzu; ve format, asetat, propiyonat, oksalat, malonat, süksinat. fumarat, maleat, Iaktat, malat, sitrat, tartrat, karbonat, pikrat, metansülfonat, etansülfonat ve p-toluenesülfonat, glutamat gibi organik asidin bir tuzu.

Yukaridaki semalarda kullanilan baslangiç materyali yukaridaki Bilesik (1) gibi bunun bir tuzu olabilir ve her reaksiyonda istenen bilesikler de uygun tuzlar olabilir.

Ayrica, baslangiç materyallerinin ve istenen bilesiklerin solvatlari (örnegin hidrat ve etanolat) her genel formüle dahil edilir. Tercih edilen solvat bir hidrat içerir.

Genel formülün (1) mevcut bilesikleri bir geometrik izomer, stereoizomer ve optik izomer gibi bir izomer içerir.

Mevcut bilesik, bilesikte bulunan bir veya daha fazla atomun bunun bir veya daha fazla izotopu ile degistirildigi bilesik formülünü (1) içerir. Mevcut bilesige eklenebilen izotop örnekleri, örnegin hidrojen, karbon, nitrojen, oksijen, sülfür, florin ve klorin izotoplarini ve izotopu(izotoplari) ve/veya diger atomun(at0mlarin) izotopunu(izotoplarini) içeren spesifik izotop etiketleme bilesigi, örnegin 3H ve 14C gibi radyoizotop(lar) içeren bilesik, bilesigin ve/veya maddenin bir topografik incelemesi açisindan yararlidir. Trityum etiketleme (baska bir deyisle 3H) veya C-14 etiketleme (baska bir deyisle 14C) izotopu bilesigi hazirlama kolayligi ve algilanabilirligi nedeniyle özellikle tercih edilir. Ayrica döteryum (baska bir deyisle 2H) gibi daha agir Izotopa(izotoplara) sahip bilesigin metabolik stabilitenin iyilestirilmesi (örnegin artan in vivo yari ömrü) ve dozajin azalmasi gibi bazi terapötik faydalar saglamasi beklenir. Izotop atomunu(at0mlarini) içeren mevcut bilesikler genellikle yukarida belirtilen semalar ve/veya asagidaki örnekler yardimiyla, herhangi bir mevcut izotop etiketleme reaktifi kullanilarak hazirlanabilir.

Bulusun bilesikleri ve bunun tuzlari bir adenozin A2a reseptör aktivitesine sahiptir ve bu yüzden insanlar dahil olmak üzere memelilere yönelik bir adenozin A2a reseptör agonistik aktivitesi bakimindan yararlidir. Dolayisiyla, mevcut buluslar adenozin A2a reseptör agonisti gibi bir ilaç olarak da farmasötik bilesimler de saglar.

Buradan itibaren, farmasötik bilesim istege bagli olarak “mevcut farmasötik bilesim” olarak ifade edilir.

Mevcut farmasötik bilesim, bulusun bilesikleri ve bunun tuzlarindan ve farmasötik olarak kabul edilebilir bazi tasiyicilardan olusan gruptan seçilen en az bir bilesigin etkili bir miktarini içeren bir olagan farmasötik formülasyon olarak hazirlanabilir. Bulusun farmasötik bilesiminde kullanilan farmasötik olarak kabul edilebilen tasiyicilar eksipiyan gibi bir kati veya seyreltici gibi bir sivi olabilir. Bu tasiyici örnekleri arasinda, örnegin susam yagi, kakao yagi, etilen glikol ve saf su yer alir.

Ayrica, mevcut farmasötik bilesim uygulama açisindan uygun bir dozaj ünitesi formülünde hazirlanabilir. Örnekler, enjeksiyon (damar içi enjeksiyon, kas içi enjeksiyon), göz damlalari, göz merhemi, fitil ve perkütan emme ajani gibi parenteral uygulamaya yönelik bir formülasyonun yani sira tablet, hap, kapsül, granül, toz ve sivi gibi oral uygulamaya uygun bir kati ve sivi formülasyonu içerir. Özellikle, bulusun farmasötik bilesimi adenozin A2a reseptör agonistik aktivitesine göre, bir intraokular basinç indirgeme ajani, glokomun tedavisine yönelik bir ilaç olarak kullanilabildiginden tercih edilen farmasötik formülasyon göz damlasidir.

Mevcut farmasötik bilesim bir 5qu sivi olarak hazirlanabilir ve bir oftalmik farmasötik bilesim olarak kullanilabilir. Örnegin bu tür sulu sivi formülasyon asagidaki gibi hazirlanabilir.

Mevcut bilesige (bir tuzu dahil olmak üzere, bundan böyle aynisi) istege bagli olarak. gerektiginde farmasötik olarak uygun tampon maddesi, izotonik ajan, koruyucu, çözündürücü ve pH düzenleyiciden seçilen bir veya daha fazla katki maddesi eklenir ve klasik bir proses yoluyla istenen sulu formülasyon hazirlanir. 8qu sivi preparatta kullanilan tampon madde örnegin, borik asit ve fosforik asit gibi bir inorganik asidi; amino asit ve süksinik asit gibi bir organik asidi ve farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzunu içerir. Tercih edilen tampon maddesi süksinik asit, fosforik asit ve sodyum dihidrojen fosfattir. Tampon maddesi tek bir içerik maddesi olarak veya iki veya daha fazla içerik maddesi ile birlikte kullanilabilir.

Süksinik asit veya farmasötik olarak uygun bir tuzunun tampon maddesi olarak kullanildigi preparat, süksinik asitli aktif içerik maddesinin tuzu daha yüksek çözünürlüge sahip oldugundan uzun vadeli bir depolama sirasinda aktif içerik maddesinin çökelmesini saglar.

Sulu sivi preparattaki tampon maddesinin konsantrasyonu tercihen pH degisikligini önlemek üzere, örnegin %2'den (w/v) fazla olmayan, tercihen %0.6'dan (w/v) fazla olmayan ve daha çok tercih edildigi üzere %0.2'den (w/v) fazla olmayan bir minimum konsantrasyondadir.

Sulu sivi preparatta kullanilan pH düzenleyici örnegin hidroklorik asit, sülfürik asit. laktik asit, asetik asit, potasyum hidroksit, sodyum hidroksit, kalsiyum hidroksit, magnezyum hidroksit, monoetanolamin, trietanolamin, diizopropanolamin, triizopropanolamin ve bunun farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzunu içerir. Tercih edilen pH düzenleyici hidroklorik asit ve sodyum hidroksit içerir. pH düzenleyici tek bir içerik maddesi olarak veya iki veya daha fazla içerik maddesi ile birlikte kullanilabilir_ Sulu sivi preparatta kullanilan izotonik ajan, preparati izotonik ile sulu çözmeye yöneliktir.

Burada kullanilan izotonik ajan göz damlasina yönelik klasik bir ajandir ve sodyum klorid, potasyum klorid, borik asit, sodyum borat, mannitol, gliserin, propilen glikol, polietilen glikol, maltoz, suktoz, sorbitol, glukoz, tercihen gliserin, glukoz, mannitol, propilen glikol ve sorbitol içerir. Daha çok tercih edildigi üzere, gliserindir. izotonik ajan tek bir içerik maddesi olarak veya iki veya daha fazla içerik maddesi ile birlikte kullanilabilir.

Bir izotonik ajan olarak gliserinin kullanildigi preparat, gliserin aktif içerik maddesinin çözünürlügünü olumsuz etkilemediginden uzun vadeli bir depolama sirasinda aktif içerik maddesinin veya ilgili maddelerin birikmesini önleyebilir. Bir izotonik ajan içeren sulu sivi ve daha çok tercih edildigi üzere 256 ila 316 mOsm/kg'dir.

Burada kullanilan koruyucu örnegin, benzalkonyum, benzetonyum ve benzododesinyum gibi bir dörtlü amonyum tuzu; klorheksidin gibi bir katyon bilesigi, metil para-oksibenzoat ve propil para-oksibenzoat gibi bir para-oksibenzoati ve klorobutanol ve benzilalkol gibi bir alkol bilesigi içerir. Tercih edilen koruyucu benzalkonyum klorid ve benzododesinyum bromid ve daha çok tercih edildigi üzere alkil zincirinin tam 12 karbondan olustugu benzalkonyum hidroklorid ve benzododesinyum bromid içerir.

Mevcut farmasötik bilesin gerektiginde bir çözündürücü içerebilir. Burada kullanilan çözündürücü örnegin polivinilpirolidon, makrogol (polietilen glikol), polivinil alkol ve hidroksipropilmetilselüloz gibi bir polimer; polisorbat, polioksietilen hidrojene kastor yagi ve polioksietilen polioksipropilen gibi bir sürfaktan; propilen glikol gibi bir polihidrik alkol; benzoik asit ve sorbik asit gibi bir organik asit; aspartik asit, histidin, glisin ve Iisin gibi bir amino asit ve kafein gibi bir ksantin türevini içerir. Tercih edilen çözündürücü polivinilpirolidon, makrogol, polivinil alkol, benzoik asit, sorbik asit ve alginik asit; özellikle polivinilpirolidon ve makrogol içerir. Çözündürücü tek bir içerik maddesi olarak veya iki veya daha fazla içerik maddesi ile birlikte kullanilabilir.

Mevcut farmasötik bilesimi içeren sulu sivi preparatin pH'i 4 ila 9, tercihen 5 ila 8, özellikle 6 ila 7 ve daha çok tercih edildigi üzere 6.3 ila 6.9'dur.

Tablet, toz ve granül gibi oral uygulamaya yönelik mevcut bulusun kati formülasyonu bulusun bilesigini Iaktoz, mannitol, glukoz, hidroksipropilselüloz, mikrokristalin selüloz, nisasta, polivinilpirolidon, meta-silisik asit ve magnezyum alüminat gibi en az bir atil tasiyici ile karistirarak ve karisimi klasik bir yönteme göre formüle ederek hazirlanabilir.

Preparat ek uygun katki maddeleri ile, örnegin magnezyum stearat gibi bir yaglayici, kalsiyum selüloz glikolat gibi bir parçalayici; Iaktoz gibi bir stabilizatör; glutamik asit ve aspartik asit gibi bir çözündürme ajani de formüle edilebilir. Ayrica bir tatlandirici, aroma verici, parfüm ve koruyucu ajan ile formüle edilebilir. Tablet ve hap gerektiginde sukroz, jelatin, hidroksipropilselüloz ve hidroksipropilmetilselüIoz ftalat kullanilarak bir seker kaplama filmi veya intragastrik veya enterik kaplama filmi kaplanabilir.

Emülsiyon, solüsyon, süspansiyon, surup ve eliksir gibi oral uygulamaya yönelik sivi ilaç, bulusun bilesigini saf su ve etanol gibi genellikle kullanilan bir atil seyrelticide çözerek veya dagitarak hazirlanabilir. Sivi ilaç islatma ajani ve askida tutan ajan gibi bir yardimci ajan, tatlandirici, aroma verici, parfüm ve koruyucu ajan da içerebilir.

Parenteral uygulamaya yönelik enjeksiyon aseptik sulu veya susuz solüsyon, süspansiyon ve emülsiyon içerir ve sulu enjeksiyon klasik bir yönteme göre, örnegin enjeksiyona yönelik distile su ve bir seyreltici olarak tuz kullanilarak hazirlanabilir. Susuz enjeksiyon klasik bir yönteme göre, örnegin propilen glikol, polietilen glikol gibi seyreltici veya tasiyici veya zeytinyagi gibi bitkisel yag; etanol gibi alkoller; polisorbat 80 kullanilarak hazirlanabilir. Enjeksiyon ayrica bir koruyucu ajan, bir islatma ajani, emülsifiye ajani, dagitma ajani, stabilizatör (örnegin Iaktoz) ve çözündürme ajani (örnegin glutamik asit ve aspartik asit) gibi bir yardimci ajan içerebilir. Enjeksiyon klasik bir yönteme göre, örnegin bakterilerin ortadan kaldirilmasina yönelik filtre ile filtrasyon, antimikrobiyal ekleme veya gama isini gibi radyasyon yoluyla sterilize edilir. Ayrica enjeksiyon, kullanimdan önce hazirlanan aseptik kati ilacin enjeksiyon amaçli aseptik su veya aseptik solvent ile çözündügü, ekstamporane bir sekilde hazirlanan formülasyon olarak hazirlanabilir.

Her formülasyondaki mevcut bulusun farmasötik bilesimine yönelik dozaj düzeni her durumda, farmasötik bilesimin uygulandigi hastalarin (uygulama denegi) durumuna, yasa ve cinsiyete göre belirlenecektir. Genelde mevcut bulusun farmasötik bilesimini içeren göz edildigi üzere %0.01-0.3 (w/v) düzeyinde bir konsantrasyonda aktif bilesigi içeren göz damlasi günde bir veya birkaç defa damlatilabilecek veya temizlenebilecek bir sekilde belirlenebilir. Bir kullanim için göz damlasi miktari genellikle, yetiskin biri için yaklasik Bulusun farmasötik bilesiminin oral ilaci veya enjeksiyonu durumunda, dozaj bulusun bilesigi yetiskinlerde günde 0.001-1000 mg'lik bir miktarda uygulanabilecek bir sekilde belirlenebilir. Günlük doz günde bir defa uygulanabilir, fakat tercihen birkaç defaya bölünebilir. Yukaridaki dozaj sadece genel bilgidir ve dolayisiyla artirilabilir veya azaltilabilir. Yukarida belirtildigi gibi, her seferinde kullanilacak dozaji çesitli kosullara bagli olarak belirlemek yararlidir. Bu yüzden, kosullara bagli olarak azaltilan dozaj yine de yeterli etkiler gösterebilir.

(Bulusun Etkisi) Bir adenozin A2a reseptör agonist olarak mevcut farmasötik bilesimler ve bilesikler, okular hipotansif, optik sinir kafasina artan kan akisi, vasodilasyon, koroner dilatasyon, kan basincinda düsüs, platelet agregasyon önlemesi, antitrombotik etki, anti inflamasyon, bronsektazi ve immünsüpresyon gibi çesitli aktivitelere sahip olabilir.

Bu yüzden, mevcut farmasötik bilesimler ve bilesikler, glokom (normal tansiyon glokom okular hipertansiyon glokom, ameliyat sonrasi sekonder glokom), okular hipertansiyon, diyabetik retinopati, yasla ilgili maküler dejenerasyon (ARDM), retinitis pigmentoz (RP) ve glokom, hipertansiyonun neden oldugu retinal hastalik gibi bir göz hastaligini, konjestif kalp sorunu; koroner rahatsizlik; anjin; aterosklerosiz; iskemik kalp hastaligi; serebrovasküler iskemi; reperfüzyon hastaligi; trombosiz, epilepsi; rinitis; sinüzit; emfizem; kronik obstrüktif pulmoner hastalik (COPD); astim; bronsit; solunum hastaligi; solunum yetersizligi sendromu; septik sok; pulmoner fibrosiz; gastrit; metastaz gastrit; ülseratif kolit; Crohn hastaligi; imflamatuar kolonik hastalik; yara iyilesmesi; egzema; kutanöz hipersensitivite; dermatit; sedef hastaligi; kronik romatoid artirit; diyabet; çoklu sklerosiz ve otoimmün hastaligi tedavi etmeye yönelik düzenlenebilir.

Ayrica, mevcut farmasötik bilesimler ve bilesikler miyokardiyal enfarktüse yönelik bir tani ajani olarak kullanilabilir.

Buradan itibaren, mevcut bulus. baslangiç bilesiklerini hazirlamaya yönelik Referans Örnekleri ve bilesikleri hazirlamaya yönelik Örnek ve bulusun formülasyonlari ve de farmakolojik testlerin deneyleri ile gösterilir. Referans Örnekleri, Örnekler ve istemlerin kapsaminda yer almayan deneyler örnek amaçlidir.

Asagida belirtilen örneklerdeki nükleer manyetik rezonans (NMR) spektra asagidaki kosullar altinda ölçülmüstür. Kisaltma sembolleri asagidaki gibi belirlenir.

Aparat: JNM-AL Iç standart madde: TMS s: tekli, d: ikili, t: üçlü, q : dörtlü, quint: besli, sext: altili SEKILLERIN KISA AÇIKLAMASI Sekil 1, 0.25, 0.5 ve 1 mMylik Örnek 1'in bilesiginin tavsan kornea epitelyum hücrelerine eklendikten sonra hücre yasayabilirliklerini gösterir.

Sekil 2, Örnek1 'in bilesiginin tavsanlardaki siliyer arterde etkilerini gösterir.

Sekil 3, Örnek 1tin bilesiginin Fare Retinal Gangliyon Hücresindeki etkisini gösterir.

BULUSU GERÇEKLESTIRMEYE YÖNELIK EN IYI MOD Referans Örnegi 1 Metil (E)-3-(6-hidroksimetilpiridin-2-iI)akrilat Solüsyona argon atmosfer altinda metil akrilat (479 ml), tetra(n-bütil)am0nyum klorid ayrica paladyum(ll) asetat (2.98 9) eklenmistir. Karisim 80°C'de 5 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, elde edilen çökelti filtrelenmistir ve etil aSetat ile ekstrakte edilen filtrata su eklenmistir. Organik katman tuzlu su ile yikanmistir, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmustur ve 50.2 9 metil (E)-3-(6- hidroksimetilpiridin-2-il)akrilat elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Kahverengi toz.

Referans Örnegi 2 Metil 3-(6-hidroksimetßpiridin-2-illgrogiyonat hemen çözündürülmüstür. Solüsyona %5 paladyum-(aktif karbon) (2.51 9) eklenmistir ve karisim normal basinçli hidrojen atmosferde 2.5 saat 50°C'de boyunca karistirilmistir.

Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, katalist filtrelenmistir ve filtrat 50.0 9 metil 3-(6- hidroksimetilpiridin-2-il)pr0piyonat elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Kahverengi yag.

Referans Örnegi 3 Metil 3-(6-metansüIfoniloksimetilgiridin-2-ilipropiyonat çözündürülmüstür. Solüsyona trietilamin (53.5 ml) eklenmistir ve karisim buz sicakliginda dakika boyunca karistirilmistir. Karisima 10 dakika boyunca damla damla metansülfonil klorid (23.8 ml) eklenmistir ve elde edilen karisim buz sicakliginda 30 dakika boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimina su eklenmistir ve karisim bir ayirma hunisine aktarilmis ve sulu doymus sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve 63.0 9 metil 3-(6- metansülfoniloksimetilpiridin-Z-iI)pr0piyonat elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Kahverengi yag.

Referans Örnegi 4 Metil 3-{6-[4-(4-asetiIaminofenil)-6-amino-5-sivano-pirimidin-g-iltivometil]piridin-g il ro i onat malononitril (607 g) ve piperidin (40 g) eklenmis ve elde edilen karisim 2 saat boyunca reflüks altinda karistirilmistir. Reaksiyon karisimi oda sicakligina sogutulmus ve sonra 30 dakika boyunca karistirilmistir. Elde edilen kristal bir filtrede toplanmis, etanol (2000 ml) ile yikanmis sari bir toz olarak 1049 9 N-[4-(2,2-disiyan0vinil)fenil]asetamid elde etmek üzere kurutulmustur.

Metil 3-(6-metansülfoniIoksimetilpiridin-2-il)propiyonat (7.0 9) metanol (75 ml) içinde çözündürülmüs ve sonra buna tiyoüre (1.85 9) eklenmistir. Karisim 1.5 saat boyunca reflüks edilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, buna trietilamin (10.7 ml) eklenmis ve karisim bir süre karistirilmistir. Ardindan metanol (75 ml), yukaridaki N-[4- eklenmis ve karisim 1 saat boyunca karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde -siyanopirimidin-2-iltiyometil]piridin-2-Il}propiyonat elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz.

Referans Örnegi 5 3-{6-[4-(4-AsetilaminofeniI)-6-amino-5-siyanopirimidin-2-iltiyometiIlpiridin-Z- il ro i onik asit Metil 3-{6-[4-(4-asetilaminofenil)-6-amino-5-siyano-pirimidin-2-iItiyometil]piridin-2- iI}pr0piyonat (5 g) %50 su içeren asetonitril (150 ml) içinde süspanse edilmistir.

Süspansiyona Iityum hidroksit monohidrat (1.35 9) eklenmis ve karisim oda sicakliginda 1 saat boyunca karistirilmistir. Sonra reaksiyon karisimina suda (20 mi) bir sitrik asit solüsyonu (4.11 9) yavas yavas eklenmis ve reaksiyon karisimi oda sicakliginda 2 saat daha karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, su (75 m) ile yikanmis ve 5 g 3-{6-[4-(4-asetilaminofeniI)-6-amino-5-siyanopirimidin-2-iltiy0metil]piridin-2-il}propiyonik asit elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz Referans Örnegi 6 1-tert-QtoksikarboniI-4-(piperagin-1-illmetilpiperidin 1-tert-Butoksikarbonil-4-piperidilmetan0l (10 g) etil asetat (150 ml) içinde çözündürülmüstür. Solüsyona trietilamin (12.8 ml) eklenmis ve karisim bir süre buz sicakliginda karistirilmistir. Karisima yavasça metansülfonil klorid (5.4 ml) damla damla eklenmis ve reaksiyon karisimi buz sicakliginda 30 dakika boyunca karistirilmistir.

Reaksiyon karisimina su eklenmis ve karisim bir ayirma hunisine aktarilmis, su (50 ml) ile yikanmis ve etil asetat (50 ml, iki defa) ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve vakumda konsantre edilmistir. Kalinti asetonitril (200 ml) içinde çözündürülmüs ve solüsyona piperazin (18 g) eklenmistir.

Karisim reflüks altinda 3 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimi vakumda konsantre edilmis, sonra çöken piperazin filtrelenmistir. Filtrata tuzlu su (50 ml) ve etil asetat (50 ml) eklenmis ve karisim gece boyunca karistirilmistir. Karisim bir ayirma hunisine aktarilmis ve organik katman ayrilmis, tuzlu su (50 ml, iki defa) yikanmis ve vakumda konsantre edilmistir. Kalintiya su (50 ml) eklenmis ve karisim 1N hidroklorik asit ile buz sicakliginda nötralize edilmistir. Buna etil asetat (100 ml) eklenmis ve karisim bir süre boyunca karistirilmistir. Sonra karisim bir ayirma hunisine aktarilmis ve sulu katman ayrilmistir. Sulu katman 5N sodyum hidroksit ile buz sicakliginda kuvvetli bir sekilde baz haline getirilmistir. Karisim etil asetat ile ekstrakte edilmis, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve 9.96 9 1-tert-butoksikarboniI-4-(piperazin-1-il)metilpiperidin elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Renksiz yag Referans Örnegi 7 iliproganoiligigerazin-1-iI)metil)-1-tert-butoksikarbonilgigeridin dihidroklorid asit (2.16 9) aseton (44 ml) içinde süspanse edilmistir. Süspansiyona sirayla 1-hidroksi- ve 1-tert-butoksikarbonII-4-(piperazin-1-il)metilpiperidin (1.5 9) eklenmis ve karisim1 saat boyunca reflüks edilmistir. Aseton vakumda çikarilmis ve sonra etil buna asetat (30 mi) ve su (30 ml) eklenmis ve karisim 30 dakika boyunca karistirilmistir. Karisim bir ayirma hunisine aktarilmis, sirayla doymus sulu sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat ile yikanmis ve vakumda konsantre edilmistir.

Kalinti metanol (25 ml) içinde tamamen çözündürülmüs, sonra buna konsantre hidroklorik asit (0.85 ml) yavasça damla damla buz sicakliginda eklenmis ve karisim oda sicakliginda 1 saat boyunca karistirilmistir. Ardindan buna etanol (50 ml) eklenmis ve karisim 50°C'de1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, çöken siyano-pirimidin-2-Iltiy0)metil)piridin-2-il)propanoil)piperazin-1-iI)metiI)-1-tert- butoksikarbonilpiperidin dihidroklorid elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz.

EpropiI)piridin-2-il)metiltivo)-pirimidin-4-il)fenil)asetamid trihidroklorid il)propanoiI)-piperazin-1-iI)metil)-1-tert-butoksikarbonilpiperidin dihidrokloride (40 g). 400 ml hidrojen klorid eklenmis [1 mol/L etil asetat içinde] ve karisim oda sicakliginda 24 saat boyunca karistirilmistir. Çökelti bir filtre üstünde toplanmis ve etil asetat (80 ml) ile yikanmistir. Bir beyaz ham kristal elde etmek üzere çökelti kurutulmustur. Ham kristal oda sicakliginda suda (245 ml) çözündürülmüs ve filtrelenmistir. Filtrata yavasça aseton (875 ml) eklenmis ve karisim bunun bir asi kristali ile 6 saat boyunca karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, aseton (140 ml) ile yikanmis ve sonra 29.8 9 N-(4-(6- il)metiltiy0)pirimidin-4-il)fenil)-asetamid trihidroklorid elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. iI)-3-oksopropj)_piridin-2-il)metiItiyo)pirimidin-4-il)fenil)asetamid maleat il)metiltiy0)-pirimidin-4-il)fenil)asetamid trihidroklorid (1.01 9) kuru N,N-dimetilformamid (15 ml) içinde çözündürülmüstür. Solüsyona 2-kloroetan0l (186 pl), trietilamin (0.6 ml), potasyum karbonat (386 mg) ve sodyum iyodid (300 mg) eklenmis ve karisim 50°C'de 3 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimi azaltilmis basinç altinda konsantre iI)-metil)piperazin-1-iI)-3-oksopropil)piridin-2-il)metil-tiyo)pirimidin-4-il)fenil)asetamid elde etmek üzere silika jel üstünde (metilen klorid : metanol : %28 sulu amonyak = 100 : 10 : 1) kromatografi ile aritilmistir. Bilesik metanol (5 ml) içinde çözündürülmüs ve buna maleik asit (38.8 mg) eklenmistir. Karisim bir süre karistirilmistir. Solüsyon 250 mg N-(4-(6- oksopropil)piridin-2-il)-metiltiyo)pirimidin-4-il)fenil)asetamid maleat elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Beyaz toz.

Asagidaki örnekler 3 - 5 Örnek 2lye benzer bir prosese göre hazirlanmistir.

H2N NÄSWNNß'R Örnek R NMR verisi m) 1.35-1.31 (2Hi m) trihidroklorid Örnek R NMR verisi Tuz (1H, m) 1.15-0.98 (2H, m) N-(4-(6-amino-5-sivano-Z-(G-(3-okso-3-(4-(piperidin-4-iI-metiI)mperazin-1- iIigropiI)piridin-2-il)metiltiyo)-pirimidin-4-il)fenil)aset-D3-amid trihidroklorid (6-3) 1›AsetilMaria-413M:Ilsiîgcjksig M1» “ksînwû. "2 0.1( Zbcérâamom Hßi n *sv/(O .1 6-2 iNHcuAcOEt xy tagi n“svj'tnßm iltiyo)metiI)piridin-2-il)-propanoil)piperazin-1 -il)metil)piperidin-1 -karboksilat dihidroklorid (6-2) iI)propanoiI)-piperazin-1-iI)metiI)piperidin-1-karboksilat (6-1) (3.4 9) metilen klorid (68 ml) içinde çözündürülmüstür. Solüsyona trietilamin (1.4 ml) buz sicakliginda eklenmis ve karisim bir süre boyunca karistirilmistir. Buna yavasça damla damla asetiI-D3 klorid (532 pl) eklenmis ve karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Buna su eklenmis ve karisim bir ayirma hunisine aktarilmistir. Sulu katman metilen klorid (iki defa) ile ekstrakte edilmis ve kombine organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus 6-amino-5-siyano-pirimidin-2-iltiyo)metil)piridin-2-il)propanoil)piperazin-1-il)metil)piperidin- 1-karboksilat elde etmek üzere silika jel üstünde (metilen klorid : metanol = 25 : 1) kromatografi ile aritilmistir. Bilesik metanol (20 ml) içinde tamamen çözündürülmüs, sonra konsantre HCI (1.7 ml) buna yavasça damla damla buz sicakliginda eklenmis ve karisim oda sicakliginda 3 saat boyunca karistirilmistir. Ardindan, buna etanol (40 ml) eklenmis ve karisim 50°C`de 1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan amidofeniI)-6-amino-5-siyanopirimidin-2-iltiyo)metil)piridin-2-iI)propanoiI)-piperazin-1- iI)metiI)piperidin-1-karboksilat dihidroklorid (6-2) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. (9H, s).

N-(4-(6-A_mino-5-sivano-g-(G-(3-okso-3-(4-t i eridin-4-ilmetil i erazin-1- il ro iI iridin-2-il)met_iltivo)-pirimigin-4-il)fenil)gcet-D3-amide trihidroklorid(6-3) hidrojen klorid [etil asetat içinde 1 mol/L] eklenmis ve karisim oda sicakliginda 41 saat boyunca karistirilmistir. Çökelti bir filtre üstünde toplanmis ve etil asetat (4.0 ml) ile yikanmistir. Ham kristal suda (10 ml) oda sicakliginda çözündürülmüs ve filtrelenmistir.

Filtrata yavas yavas aseton (40 ml) eklenmis ve karisim bir asi kristali ile 2 saat boyunca karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, aseton (4 ml) ile yikanmis ve iI)pr0piI)piridin-2-il)metiltiyo)pirimidin-4-il)feniI)-acet-D3-amide trihidroklorid (6-3) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz.

DV 'o HCI 0& man. 0 '0 N, 0 'ip &ama D o Hu& m& - « m ~ -- mk 'wird', mon o o DM! o o Piperidin o ' D uncu o p K,CO,.0M!.NBS 74 74 CN nin u su o m& 0 miJi` iiwsc.uoai «n 1' J Lion û", Ass-ton n 0 n14 i i c «yi II :var iyi ii s (EA) o 2› konsantre HCt. k" 1.10 7." uncu 7-12 11 m ncuuosi o mg` 21 !1,01 Aseton oû., tekrar kristal '5 i. FC' nci nci malî*i'\r'-^ß's*\ »i Metil 4-nitrobenzoat-2,3,5,6-D4 (7-2) 4-Nitr0benzoik-D4 asit (7-1) (5 g) metanolde (100 ml) çözündürülmüstür. Solüsyona konsantre hidroklorik asit (1.0 ml) eklenmis ve karisim 15 saat boyunca reflüks edilmistir.

Reaksiyon karisimi vakumda konsantre edilmis ve sonra kalintiya su eklenmistir. Karisim metilen klorid ile ekstrakte edilmistir. Organik katman sulu sodyum hidrojen karbonat ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve 5.3 9 metil 4-nitrobenzoat-2,3,5,6- D4 (7-2) elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Beyaz toz. 1H-N MR (CDCI3) 3.99 (3H, s). 4-NitrobenziI-2,3,5,6-D4 alkol (7-3) süspanse edilmistir. Süspansiyona sodyum borohidrit (9.4 9) eklenmis ve karisim oda sicakliginda 6 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, reaksiyon karisimi 5 N HCI ile hafifçe asitlestirilmis ve bir ayirma hunisine aktarilmistir. Sulu katman etil asetat ile ekstrakte edilmis ve kombine organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile konsantre edilmistir.

Sari toz. 4-Amin0benziI-2.3.5,6-D4 alkol (7-4) ml) karisiminda çözündürülmüstür. Solüsyona %5 paladyum-(aktif karbon) (400 mg) eklenmis ve karisim atmosferik hidrojen basinci altinda 6 saat boyunca karistirilmistir.

Reaksiyon tamamlandiktan sonra, katalist filtrelenmis ve filtrat 2.65 9 4-amin0benzil- 2,3,5,6-D4 alkol (7-4) elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Sari yag. 1H-N MR (CDCIs) 4.56 (2H, s). 4-Asetamidobenzil-2,3,5,6-D4 asetat (7-5) Solüsyona trietilamin (12.9 ml) buz sicakliginda eklenmis ve karisim bir süre boyunca karistirilmistir. Ve sonra buna asetil klorid (5.5 ml) yavasça damla damla eklenmis ve karisim 1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, reaksiyon karisimina su eklenmis ve karisim bir ayirma hunisine aktarilmistir. Sulu katman etil asetat ile ekstrakte edilmis ve kombine organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile vakumda konsantre edilmistir.

Sari yag.

N-(4-(Hidroksimetil)fenil-2.3,5.6-D4)asetamid (7-6) Solüsyona potasyum karbonat (2.9 9) eklenmis ve karisim 1.5 saat boyunca karistirilmistir. ReaksiyOn tamamlandiktan sonra reaksiyon karisimi filtrelenmistir. Filtrat konsantre edilmistir.

Sari yag.

N-(4-FormilfeniI-2,3,5,6-D4)asetamid (7-7) çözündürülmüstür. Solüsyona manganez dioksit (17 g) eklenmis ve karisim 60°C'de 6 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, reaksiyon karisimi filtrelenmistir. Filtrata su eklenmis ve karisim etil asetat ile ekstrakte edilmistir. Organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve 2.5 9 N-(4-f0rmilfenil-2,3,5,6- D4)asetamid (7-7) elde etmek üzere vakumda konsantre edilmistir.

Beyaz toz.

Solüsyona malononitril (1.1 9) ve piperidin (2 damla) eklenmis ve karisim oda sicakliginda 8 saat boyunca karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, etanol ile kurutulmustur.

Sari toz.

D4lasetamid (7-91 Metal sodyumun (276 mg) çözündürüldügü 20 ml bir etanol solüsyonuna tiyoüre (760 mg) eklenmis ve karisim oda sicakliginda 1 saat boyunca karistirilmistir. Ardindan buna, N-(4- altinda 3 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, etanol azaltilmis basinç altinda çikarilmistir. Kalinti ilik suda çözündürülmüs ve asetik asit ile hafifçe kurutulmustur.

Sari toz. iltiyometillpiridin-2-i“mpiyonat (7-10) 9) (2.91 9) dimetilformamid (60 ml) içinde çözündürülmüstür. Solüsyona metil 3-(6- metansülfoniIoksimetilpiridin-2-iI)propiyonat (2.73 9) ve potasyum karbonat (2.76 9) eklenmis ve karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Sonra buna, N- bromosüksinimid (1.77 9) eklenmis ve karisim 1 saat daha karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, reaksiyon karisimina su eklenmis ve karisim etil asetat ile ekstrakte edilmistir. Organik katman anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve 6-amin0-5-siyano-pirimidin-2-iltiy0metil)piridin-2-il)propiyonat (7-10) elde etmek üzere silika jel üzerinde (metilen klorid : metanol = 20 : 1) kromatografisi ile saflastirilmistir.

Beyaz toz. (3H, s). ilti ometil iridin-2-il ro i onik asit 7-11 Süspansiyona lityum hidroksit monohidrat (331 mg) eklenmis ve karisim 2 saat boyunca reflüks edilmistir. Sonra suda (10 mi) bir sitrik asit solüsyonu (1.59 9) yavas yavas reaksiyon karisimina eklenmis ve reaksiyon karisimi 50°C'de 1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, çöken kristal filtre üstünde siyanopirimidin-2-iltiyometil)piridin-2-il)propiyonik asit(7-11) elde etmek Üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. iltiyo)metiI)piridin-2-il)-propanoillpiperazind -il)metil)piperidin-1 -karboksilat dihidroklorid (7-12) sirayla 1-hidroksi-1H-benzotriazol (820 mg), 1-etiI-3-(3-dimetilaminopropiI)-karb0diimid ve karisim 1 saat boyunca reflüks edilmistir. Aseton vakumda çikarilmis ve sonra buna etil asetat (23 ml) ve su (23 ml) eklenmis ve karisim 30 dakika boyunca karistirilmistir.

Karisim bir ayirma hunisine aktarilmistir. Organik katman sirayla doymus sulu sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve vakumda konsantre edilmistir. Kalinti metanol (22.5 ml) içinde tamamen çözündükten sonra, buna konsantre HCI (1.43 ml) yavasça damla damla buz sicakliginda eklenmis ve karisim oda sicakliginda 1 saat boyunca karistirilmistir. Sonra buna, etanol (45 ml) eklenmis ve karisim 50°C'de 1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis ve 2.35 9 t-bütil 4-((4-(3-(6-((4- propanoil)piperazin-1-iI)metil)piperidin-1-karboksilat dihidroklorid (7-12) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. il)propiI)piridin-2-il)metiltiyo)-pirimidin-4-il)fenil-2,3,5,6-D4)asetamid trihidroklorid (7-131 iltiy0)metil)piridin-2-iI)-propan0il)piperazin-1-iI)metiI)piperidin-1-karboksilat dihidrokloride sicakliginda 24 saat boyunca karistirilmistir. Çökelti bir filtre üstünde toplanmis ve etil asetat (4.7 ml) ile yikanmistir. Ham kristal suda (10 ml) oda sicakliginda çözündürülmüs ve filtre edilmistir. Filtrata yavasça aseton (40 ml) eklenmis ve karisim bir asi kristali ile 2 saat boyunca karistirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, aseton (4.7 ml) ile trihidroklorid (7-13) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz.

Buradan itibaren asagidaki bilesiklerin prosesleri referans örnekleri olarak gösterilir. sn Hci jî" wsc, HOBQ. Aseton im N SU "i`m/U 0 "L nin nLs^~1I/“Y\/1~n”\ 8-3 5-4 3-(6-(4-Amino-6-(4-aminofeniI)-5-sivzmpirimidin-g-iltivo-metmpiridin-jipropivonik asit (8-1) (230 mg) asetonitril (20 ml) içinde süspanse edilmistir. Süspansiyona SN hidroklorik asit (2 ml) eklenmis ve karisim 60°C'de gece boyunca karistirilmistir.

Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, reaksiyon karisimini nötralize etmek amaciyla buna sulu sitrik asit yavasça eklenmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis, etanol iltiyometil)piridin-2-il)propiyonik asit (8-2) elde etmek üzere kurutulmustur.

Açik sari toz.

Mropanoillpiperazin-1-il)metil)piperidin-1-karboksilat (8-3) asit (8-2) (2.58 9) asetonda (50 ml) süspanse edilmistir. Süspansiyona sirayla 1-hidroksi- t-bütil 4-piperazin-1-iImetiI-piperidin-1-karboksilat (1.8 9) eklenmis ve karisim 1 saat boyunca reflüks edilmistir. Aseton vakumda çikarilmis ve sonra buna etil asetat (30 ml) ve su (30 ml) eklenmis ve karisim 30 dakika boyunca karistirilmistir. Karisim bir ayirma hunisine aktarilmistir. Organik katman sirayla doymus sulu sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat üzerinde kurutulmus ve vakumda pirimidin-2-iltiyo)metil)piridin-2-il)propanoil)piperazin-1-iI)metiI)piperidin-1-karboksilat (8-3) elde etmek üzere silika jel üstünde (metilen klorid : metanol : %28 sulu amonyak = 100 : : 1) kromatografi ile aritilmistir.

Açik sari toz. mpropiI)piridin-2-il)metiltivo)-pirimidin-5-karbonitril tetrahidroklorid (8-4) karistirilmistir. Çöken kristal birfiltre üstünde toplanmis, etil asetat ile yikanmis ve 4.3 9 4- il)metiltiyo)-pirimidin-5-karb0nitril tetrahidroklorid (8-4) elde etmek üzere kurutulmustur.

Açik sari toz. (4H, m) 3..

Buradan itibaren, asagidaki bilesiklerin prOSesleri referans örnekleri olarak gösterilir.

A_ Do' M0' MCPBA wNme-LLOI t)MsCI.E|,N. CH,C1, ”o U cn ci U »asi ° i . v ::04,x,co,,oiiir ”F “Aswwy 9.1 '3 G WSCJCOBi ` LiOH _ Aseton OMF nc 1: m HcuAcoei "" Tiyoure "" ”ci/Elf: oucio HC! nci mico, tekrar kristal "IJ/`j` N'GA-j NC. / NC N CN MN NIÄSH çözündürülmüs ve metilen klorid içinde bir m-kloroperbenzoik asit (1.46 9) buna yavasça eklenmis ve karisim 2 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon solüsyonu sirayla %10 sulu sodyum sülfit, sulu sodyum hidrojen karbonat ve su ile yikanmistir. Organik katman 880 mg metil 3-(6-hidroksimetiI-1-oksi-piridin-2-il)propiyonat (9-2) elde etmek üzere anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmustur.

Beyaz toz.

Tiyoüre (1.52 9) etanol (15 ml) içinde süspanse edilmistir ve sonra buna sodyum karbonat (2.12 9) eklenmis ve karisim 60°C'de 30 dakika boyunca karistirilmistir. Sonra buna, N-(4- (2,2-disiyanovinil)fenil)asetamid (9-3) (4.22 9) eklenmis ve karisim reflüks altinda 5 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, etanol azaltilmis basinç altinda çikarilmistir. Kalinti ilik suda çözündürülmüs ve asetik asit ile hafifçe asitlestirilmistir. Çöken kristal bir filtre üstünde toplanmis ve 1.87 9 N-(4-(6-amino-5-siyano-2-merkapto- pirimidin-4-il)fenil)asetamid (9-4) elde etmek üzere kurutulmustur.

Sari toz. (3H, s).

Metil 3-{6-[4-(4-aset_ilaminofenil)-6-amino-5-sivano-pirimidin-2-ilsülfanilmet_il]-1-oksi- piridin-Z-il}propiyonat (9-5) içinde çözündürülmüstür. Solüsyona trietilamin (1.15 ml) eklenmis ve karisim buz sicakliginda 10 dakika boyunca karistirilmistir. Metansülfonil klorid (0.48 ml) buna yavasça damla damla eklenmis ve karisim buz sicakliginda 30 dakika boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimina su eklenmis ve karisim bir ayirma hunisine aktarilmistir. Organik katman, doymus sulu sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmistir. Organik katman, metil 3-(6-metansüIfoniloksimetiI-1-0ksi-piridin-2- il)propiyonat elde etmek üzere anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmustur. Sonra, bilesik dimetilformamid (10 ml) içinde çözündürülmüs ve buna N-(4-(6-amino-5-siyano-2- merkaptopirimidin-4-il)fenil)asetamid (1.14 9) ve potasyum karbonat (1.1 9) eklenmis ve karisim oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Reaksiyon tamamlandiktan sonra, buna su eklenmistir. Çökelti bir filtre üstünde toplanmis ve 580 mg metil 3-(6-(4-(4- asetilaminofeniI)-6-amino-5-siyanopirimidin-2-ilsülfaniImetiI)-1-oksi-piridin-2-iI)-propiyonat (9-5) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. 3-{6-[4-(4-Aseti±aminofeniI)-6-amino-5-sivanopirimidin-2-ilsülfanilmetiI1-1-oksi- ro i onik asit 9-6 Metil 3-{6-[4-(4-asetilaminofenil)-6-amino-5-siyano-pirimidin-2-ilsülfanilmetiI]-1-oksi-piridin- Süspansiyona lityum hidroksit monohidrat (53 mg) eklenmis ve karisim 2 saat boyunca 80°C reflüks edilmistir. Sonra buna sitrik asit (253 mg) eklenmis ve karisim 50°C'de 1 saat boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimini soguttuktan sonra, çöken kristal filtre üstünde toplanmis, su ile yikanmis ve 540 mg 3-{6-[4-(4-asetilaminofeniI)-6-amino-5- siyanopirimidin-2-ilsülfanilmetil]-1-oksi-piridin-2-i|}propiyonik asit (9-6) elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz. oksi-piridin-2-il)propanoil)-piperazin-1-il)metil)piperidin-1-karboksilat (9-7) 3-{6-[4-(4-AsetilaminofeniI)-6-amino-5-siyano-pirimidin-2-ilsülfanilmetiI]-1-oksi-piridin-Z- çözündürülmüstür. Solüsyona sirayla 1-hidroksi-1H-benzotriazol (224 mg), 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)-karbodiimid hidroklorid (318 mg), t-bütil 4-piperazin-1-ilmetil-piperidin- 1-karb0ksilat (315 mg) eklenmis ve karisim 2 saat boyunca reflüks edilmistir. Aseton vakumda çikarilmis ve sonra buna etil asetat ve su eklenmis ve karisim 30 dakika boyunca karistirilmistir. Karisim bir ayirma hunisine aktarilmis ve organik katman sirayla doymus sulu sodyum hidrojen karbonat ve tuzlu su ile yikanmis, anhidröz magnezyum sülfat ile kurutulmus ve vakumda konsantre edilmistir. Kalinti 470 mg t-bütil 4-(4-(3-(6-(4- (4-asetamidofenil)-6-amino-5-siyan0pirimidin-2-iltiy0)metiI)-1-oksi-piridin-2- iI)propanoil)piperazin-1-iI)metiI)-piperidin-1-karboksilat (9-7) elde etmek üzere silika jel üstünde (metilen klorid : metanol = 50 : 1) kromatografi ile aritilmistir.

Beyaz toz. (9H, s)1.07-0.97(2H, m). oksi-piridin-2-il)metiI-tiyo)pirimidin-4-il)feniI)asetamid trihidroklorid (9-8) oksipiridin-2-iI)-propanoil)piperazin-1-iI)metiI)piperidin-1-karboksilata (450 mg) 4.5 ml hidrojen klorid [etil asetat içinde 1 mol/L] eklenmis ve karisim oda sicakliginda 24 saat boyunca karistirilmistir. Çökelti bir filtre üstünde toplanmis, etil asetat ile yikanmis ve bir beyaz ham kristal elde etmek üzere kurutulmustur. Ham kristal suda (2.5 ml) oda sicakliginda çözündürülmüstür ve filtrelenmistir. Filtrata yavasça aseton (10 ml) eklenmis ve karisim 6 saat karistirilmistir. Çökeltilmis kristal, filtre üzerinde toplanmistir, aseton ile ilmetil)piperazin-1 -iI)pr0piI)-1 -oksi-piridin-2-il)metiltiy0)pirimidin-4-il)fenil)aseta mid trihidroklorid elde etmek üzere kurutulmustur.

Beyaz toz.

Buradan itibaren, mevcut bilesikleri içeren farmasötik bilesimlerin bazi örnekleri gösterilir.

Bir 5 L paslanmaz behere saf su (yaklasik 4.5 kg) eklenmistir. Buna bir izotonik ajan olarak konsantre gliserin (130 g) ve bir tampon madde olarak süksinik asit eklenmistir ve karisim çözündürülmek üzere karistirilmistir. Sonra, N-(4-(6-amin0-5-siyano-2-((6-(3- 0kso-3-(4-(piperidin-4-ilmetil)piperazin-1-iI)propiI)piridin-2-iI)metiltiyo)-pirimidin-4- il)fenil)asetamid (Örnek 1'in bilesigi)(0.5 g) solüsyona eklenmis ve karisim çözündürülmek üzere karistirilmistir. Solüsyona bir koruyucu olarak benzododesinyum bromid (0.3 9) eklenmis ve karisim hafifçe karistirilmistir. Tam çözünme görsel olarak dogrulanmistir.

Solüsyona, pH degerini 6.6'ya ayarlamak üzere %4 (w/w) sulu sodyum hidroksit dereceli olarak eklenmistir. Toplam agirligi 5.0 kg yapmak üzere, pH degerini ayarladiktan sonra, solüsyona saf su eklenmis ve solüsyon hafifçe karistirilmistir. Solüsyon aseptik olarak filtrelenmis, sonra filtrat aseptik olarak bir göz damlasi sisesine koyulmus ve sise kapatilmistir. Örnek 8'e benzer bir sekilde süksinik asidin yerine bir tampon maddesi olarak sodyum dihidrojen fosfat (3.00 9) kullanilarak Örnek 9'un bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8'e benzer bir sekilde konsantre gliserin yerine bir izotonik ajan olarak glükoz (275 g) kullanilarak Örnek 10'un bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8'e benzer bir sekilde konsantre gliserin yerine bir izotonik ajan olarak mannitol (255 g) kullanilarak Örnek 11'in bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8“e benzer bir sekilde konsantre gliserin yerine bir izotonik ajan olarak konsantre gliserin (68 g) ve propilen glikol (50 g) kullanilarak Örnek 12'nin bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8`e benzer bir sekilde konsantre gliserin yerine bir izotonik ajan olarak konsantre gliserin (105 g) ve sorbitol (43 g) kullanilarak Örnek 13'ün bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8,e benzer bir sekilde konsantre gliserin yerine bir izotonik ajan olarak propilen glikol (50 g), mannitol (100 g) ve sorbitol (43 g) kullanilarak Örnek 14'ün bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir. Örnek 8'e benzer bir sekilde benzododesinyum bromid yerine bir koruyucu olarak benzalkonyum klorid (0.5 9) kullanilarak Örnek 15'in bir farmasötik bilesimi hazirlanmistir.

Buradan itibaren, bulusun bilesiklerini kullanan farmakolojik testlerin örnekleri açiklanir.

Test 1: Adenozin A2a Reseptör Iceren Hücrede c-AMP Olusturma Evlemi Test referansta açiklanan yönteme göre asagida açiklandigi gibi gerçeklestirilmistir (Klotz k.N. et al., Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol., (1998) 357, 1-9; Shryock J.C. et Testte kullanilacak hücre hakkinda, adenozin A2a reseptörü (Insan) (PerkinElmer Life Sciences, Kod No. RBHA2AC) içeren HEK293 hücresi kullanilmistir.

Kültür ortami bakimindan, %10 FBS (Fetal bovin serum) ve 1 mM sodyum piruvat içeren Dubecco'nun modifiye Eagles ortami (DMEM) kullanilmistir.

Hücre 96 gözlü plakaya (1 x 105/göz) yerlestirilmis ve gece boyunca kültürlenmistir. Üst fazin çikarilmasindan sonra, 20 mlVI HEPES, ve 2 ünite/mL adenozin deaminaz içeren her göze eklenmis ve 37°C'de 30 dakika boyunca inkübe edilmistir. Sonra, test bilesiginin DMSO solüsyonunu içeren kültür ortaminin 0.1 ml'si her göze eklenmis ve 30 dakika daha inkübe edilmistir. Üst fazin çikarilmasindan sonra, reaksiyonu bastirmak üzere sitolitik solüsyon eklenmistir.

Her gözdeki c-AMP miktari, c-AMP enzim immünolojik çalisma (EIA) sistemi (Amersham Biosciences, Kod N0.RPN225) kullanilarak ölçülmüstür.

Ayni çalisma bir referans bilesik olarak CGS-21680 (2-p-karboksietil)fenetilamin0-5'-N- etilkarboksamidoadenozin hidroklorid, (Sigma, kod C141) kullanilarak tekrar edilmistir.

Referans bilesigin 1 ,uM'si tarafindan neden olan referans ortamindaki elde edilen c-AMP miktari %100 olarak tanimlanmistir. Her test ortamindaki elde edilen c-AlVIP miktari ölçülmüs ve %50 c-AMP miktari üreten konsantrasyon, EC50 degeri olarak tanimlanan, önceden belirlenen konsantrasyondaki her test bilesiginin sonuçlarina göre hesaplanmistir.

Yukarida belirtilen örneklerde hazirlanan bulusun asagidaki bilesikleri kullanilarak elde edilen yukaridaki test sonuçlari asagidaki Tabloda gösterilmistir. Örnek A2a agonistik aktivite (EC50,nM) Test 2: Örnek 1'in bilesiginin korneal epitelyum hücresine etkisi Test hücresi olarak tavsan korneal epitelyum hücresi (KURABO) kullanilmistir. 96 gözlü plakasina yerlestirilen tavsan kornea epitelyum hücresine, Örnek 1'in bilesigi eklenmis ve numune 60 dakika boyunca inkübe edilmistir. Ardindan, numune UVA ( ile bir solar simülatör (SOL500) kullanilarak 70 dakika isinlanmistir. Bundan sonra, hücre bir tampon madde ile yikanmistir. 24 saat sonra, hücre canliligi nötr kirmizi alim çalismasi ile degerlendirilmistir.

Sonuç Sekil 1”de gösterilir. Örnek 1'in bilesiginin (0.25, 0.5 ve 1 mM) eklenmesinden sonra hücre canliliklari ve sonra solar simülatörü ile isinlama sirasiyla %106.3, %115.0 ve Yukaridaki sonuçtan, mevcut bilesik onu yüksek konsantrasyonda kullanarak herhangi bir sitotoksisite göstermediginden, mevcut preparatin açik alanda bile bir yüksek konsantrasyonda kullanilabildigi anlasilir ve mevcut preparat güvenli bir sekilde kullanilabilen bir ilaçtir.

Test 3: Vasküler rahatlama Oküler dolasimsal bozukluk glokom, tavukkarasi, maküler dejenerasyon, iskemik optik nöropati, retinal arter oklüzyon, retinal damar oklüzyonu, diyabetik retinopatik ve iridosiklitte olusur. Özellikle, optik sinir kafasindaki dolasimsal bozukluk glokomda önemli bir faktör olarak degerlendirilir.

Oküler kan akisi iki dolasimsal sisteme sahiptir. Biri siliyer arter yoluyla digeri de merkezi retinal arter yoluyladir. Siliyer arter koroid, optik sinir kafasi. iris ve siliyer gövdedeki arterlere geçer. Diger taraftan merkezi retinal arter retinadaki artere geçer ve merkezi retinal arterin bir kismi optik sinir kafasindaki arteriyola kollara ayrilir.

Siliyer arteri rahatlatan Örnek 1'in bilesiginin, oküler kan akisini iyilestirdigi bilinir. Bu yüzden, Örnek 1'in bilesigi glokom, tavukkarasi, maküler dejenerasyon, iskemik optik nöropati, retinal arter oklüzyonu, retinal damar oklüzyonu, diyabetik retinopati ve iridosilitis hastaliklarinin tedavisine yönelik etkili bir ilaç olmasi beklenir.

Tavsanlar damar Içi uygulama ile sodyum pentobarbitalin bir asiri dozu ile öldürülmüstür.

Gözler yuvalarindan çikarilmis ve siliyer arterler ayrilmistir. Vasküler halkalar siliyer arterlerden 2 mm uzunlugunda kesilmistir ve mikroskobik inceleme altinda Danish Multi Myograph System 610M'e (Danimarka myo teknolojisi) ayarlanmistir. Damarlar oksijenli krebs solüsyonunda %5 C02 ve %95 02 ile 37°C'de ekilibre edilmistir.

Damarlardaki endotelyum hasari dogrulamak üzere, siliyer arterin 100 ,uM karbakol ile rahatlamasi test edilmistir. Karbakol ile rahatlama %30'dan fazla oldugunda, endotelyumunda hiç hasar olmayan damarlar deneylerde kullanilmistir.

Siliyer artere High K*-krebs solüsyonu bulastiktan sonra, 0.3 pM'den 300 pM'ye bölünmek üzere Örnek 1'in bilesigi seri bir sekilde uygulanmistir. Tansiyon Myodaq ver 2.01 (Danimarka myo teknolojisi) tarafindan ölçülmüstür.

Sonuçlar asagidaki tabloda ve Sekil 2'de gösterilir. Örnek 1'in bilesigi doza bagli olarak tavsanlarda siliyer arteri rahatlatmistir ve EC50 degeri 17.0 ;N olarak ölçülmüstür. Bu yüzden, Örnek 1'in bilesiginin siliyer arterde rahatlama gösterdigi sonucuna ulasilir.

Konsantrasyon (pM) Rahatlama (%) 0.3 2.6±O.5 1 4.8±1.2 3 7.9±2.3 35.3±14.4 65.6±9.5 100 82.4±3.7 300 90.1 ±2.4 Test 4: Nörokoruma Glokomda, körlüge yol açan göz hastaliklarindan biri, retinal gangliyon hücresi (RGC) seçime bagli olarak hasar görmüstür. Sonradan, optik sinir hasar görmüs ve son olarak görsel alan kusuru ortaya çikmistir. Retinal arter oklüzyonu, retinal damar oklüzyonu, diyabetik retinopati ve iskemik optik nöropati de gözle ilgili optik sinir bozuklugu hastaliklaridir. Ayrica, maküler dejenerasyon, tavukkarasi ve Leber”in kalitsal optik nöropati de retinada nöronal hücrenin hasari ile ilgili göz hastaliklaridir.

RGC üstünde nörokoruyucu etkileri gösteren Örnek 1'in bilesiginin, retinal arter oklüzyonu, retinal damar oklüzyonu, diyabetik retinopati, iskemik optik nöropati, maküler dejenerasyon, tavukkarasi ve Leber'in kalitsal optik nöropati gibi hastaliklarin tedavisine yönelik kullanilan nörokoruyucu ilaç oldugu belirtilir. yönteme göre gerçeklestirilmistir. 7 günlük Long Evans farelerinin gözleri yuvalarindan çikarilmistir. Retinalar gözlerden ayrilmistir. Retinalar, 37°C'de 30 dakika boyunca 15 U/mL papain dahil olmak üzere Nörobazal ortam ile inkübe ederek ayrilmistir.

Retinal süspansiyon anti-SIRP antikorda (Chemicon)-kapli balonda oda sicakliginda 30 dakika boyunca inkübe edilmistir. Adherent olmayan hücreler anti-thy-1 antikor (Chemicon)-kapli balon içine yerlestirilmistir. Hücreler oda sicakliginda 30 dakika boyunca inkübe edilmistir. Son olarak, balondaki adherent hücreler Nörobazal ortam ile yikanmistir. 800 rpmlde 5 dakika boyunca santrifüjden sonra, aritilmis RGC hazirlanmistir. Hücreler, poIi-L-Iisin ve Iaminin ile kaplanmis cam Iamelde tohumlanmistir. Aritilmis RGC 827 katki maddesini, 1 mM glutamin 50 ng/mL CNTF, 10 [JM Forskolin içeren Nörobazal ortamda kültürlenmistir. Kültür %5 C02 ve %95 hava içeren nemlendirilmis atmosferde 37°C'de tutulmustur. 0 nM (kontrol), 3 nM, 10 nM veya 30 nM'Iik (50 ng/mL) son konsantrasyondaki BDNF veya Örnek 1'in bilesigi, hücre tohumlamadan hemen sonra uygulanmistir.

Hücre hayatta kalmasi (hücre canliligi) boyali RGC'yi sayarak belirlenmistir. Kültür basladiktan bes gün sonra, RGC 1 ,uM Kalsein-AM (Moleküler prob) ile boyanmistir. RGC sayisi florasan mikroskobu kullanilarak sayilmistir. Hücre hayatta kalmasi (hücre canliligi) kontrol gruplarinin sayimlarini %0 ve BDNF grubu sayimlarini %100 olarak kullanarak hesaplanmistir.

Sonuçlar asagidaki tabloda ve Sekil 3”te gösterilir. Örnek 1'in bilesigi hücre hayatta kalmada doza bagli artis göstermistir. Bu sonuç Örnek 1'in bilesiginin RGC üstünde nörokoruyucu etkilere sahip oldugunu ortaya koymustur.

Gruplar n Hücre hayatta kalmasi (%) Kontrol 8 0.0±6.5 Veri=Ortalama±SE Hücre hayatta kalmasi kontrol gruplari sayimlarinin %O'i ve BDNF gruplari sayimlarinin Hücre Yasayabilirlikleri (%) Rahatlama (%) 50 ~ 0 Örnek1 Konsentrasyon ( ;1 M) Örnek 1'in Tavsanlardaki Siliyer Arterde Etkileri Veri= Ortalama ±SE (n=6) Hücre yasayabilirligi (%) Kontrol 3 10 30 Örnek 1 (nM) Örnek 1'in Fare Retinal Gangliyon Hücresindeki Hücre Yasayabilirliginde Etkisi VERI: Ortalama ±SE (n=8)

Claims (1)

1. ISTEMLER Formülün (1) bir siyanopirimidin bilesigi: veya bunun bir tuzudur. Istem 1'e göre siyanopirimidin bilesigi olupi özelligi N-(4-(6-amino-5-siyano-2-((6- (3-0kso-3-(4-(piperidin-4-ilmetil)piperazin-1-il)propil)piridin-2-il)metiltiy0)-pirimidin- 4-il)fenil)asetamid veya bunun bir tuzu olmasidir. Istem 1 veya Z'ye göre bilesik veya bunlarin bir tuzunu içeren bir farmasötik bilesim ve farmasötik olarak kabul edilebilen bir tasiyicidir. Bir göz hastaligini tedavi etmede veya önlemede kullanima yönelik istem 3'e göre farmasötik bilesimidir. Istem 4'e göre kullanimina yönelik farmasötik bilesim olup, özelligi glokomun tedavi edilmesi veya önlenmesi amaciyla kullanilmasidir. Istem 1 veya 2'ye göre bilesiginin veya bunlarin bir tuzunun bir göz hastaligini tedavi etmeye yönelik bir ilaç hazirlamada kullanilmasidir. Bir göz hastaligini tedavi etmede kullanima yönelik istem 1 veya 2'ye göre bir bilesik veya bunlarin bir tuzudur. Istem Sie göre farmasötik bilesimi içeren bir sulu sivi preparattir. Farmasötik olarak kabul edilebilen bir tampon madde, izotonik ajan, koruyucu, çözündürücü ve pH düzenleyiciden seçilen bir veya daha fazla katki maddesini de içeren istem 8'e göre sulu sivi preparatidir. istem 9'a göre sulu sivi preparati olup, özelligi tampon maddenin süksinik asit, borik asit, fosforik asit, amino asit ve bunlarin farmasötik olarak kabul edilebilen bir tuzundan seçilmesidir. Istem 10'a göre sulu sivi preparat olup, özelligi tampon maddenin süksinik asit olmasidir. Istem 9'a göre 3qu sivi preparat olup, özelligi izotonik ajanin glukoz, sorbitol, mannitol, sodyum klorid, potasyum klorid, propilen glikol ve gliserinden seçilen bir veya iki izotonik ajan olmasidir. istem 9`a göre sulu sivi preparat olup, özelligi koruyucunun benzalkonyum klorid, benzetonyum klorid, benzododesinyum bromid, klorheksidin glukonat, metil para- oksibenzoat, propil para-oksibenzoat, klorobutanol ve benzil alkol arasindan seçilmesidir. Istemler 8 ila 13'ten herhangi birine göre sulu sivi preparat olup, özelligi pH degerinin 5.0 ila 9.0 olmasidir.