TW201032810A - Treatment for glomerulonephritis - Google Patents

Description

201032810 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於-種治療患有或易患腎小球性腎炎的人 類和非人類患者的方法。 【先前技4标】 腎小球性腎炎（GN)是涉及腎小球炎症的疾病之總稱。 腎树㈣炎可钱涉及_腎小鹤害，包減體沉積、 補體活化、細胞繁殖和腎小球硬化症的類型來分類。這些結 構和功能性異常通常導致血尿、蛋白尿、腎高血壓和腎機能 不全。 當前腎小球性腎炎的治療主要集中在支持性治療方 面，通常結合非專一性免疫抑制藥物，或與一種商品名為 Lucentis®的抗體結合治療。取決於腎小球性腎炎的類型， § 刖患者的預後不良。Hricik，Chung-Park and Sedor.

Glomerulonephritis. N Engl J Med 1998; 339:888-899。很清 ❹ 楚，這一疾病需要有效的治療方法，尤其是需要有效的口服 治療。 #於腎小球性腎炎療法的現狀，顯然需要更有效和耐受 性更好的療法。 蛋白激酶參與某些信號傳輸事件，這些信號事件控制細 胞因細胞外介質和環境變化而發生激活、生長和分化。總而 言之，這些激酶分為幾類：優先磷酸化絲胺酸和/或蘇胺酸 殘基的激酶和優先磷酸化酪胺酸殘基的激酶[S. K. Hanks and T.Hunter，FASEB. J” 1995, 9, pages 576-596]。絲胺酸/蘇 201032810 胺酸激酶包括如蛋白激酶C同工酶[A. C. Newton, J. Biol. Chem” 1995，270, pages 28495-28498]和一組細胞週期蛋白 依賴性激酶如 cdc2 [J. Pines, Trends in Biochemical Sciences， 1995，18, pages 195-197]。酪胺酸激酶包括跨膜生長因子受 體’如表皮生長因子受體[S. Iwashita and M.Kobayashi， Cellular Signalling, 1992, 4, pages 123-132] ’ 以及胞漿非受體 激酶’如 p56tck、p59fYn、ZAP-70 和 csk 激酶[C. Chan et. al., Ann. Rev· Immunol.，1994, 12, pages 555-592]。 蛋白激酶活性過南涉及許多因細胞異常功能而導致的 疾病。這種情況的出現可能是直接或間接的，例如，由於與 酶的突變、過度表現或不適當激活相關的激酶妥善控制機制 的失效；或由於也參與激酶上游或下游的信號轉導的細胞激 素或生長因子的產生過多或不足。在所有這些情況下，預期 選擇性抑制激酶的活性可能會產生有利的影響。

Syk是一種72-kDa胞漿蛋白酪胺酸激酶，它表現在各 種造血細胞中’是將抗原受體與細胞應答偶合的若干級聯反 應中的基本要素。因此，Syk在肥大細胞内高親和力IgE受 體FcsRl的信號傳輸過程中，在τ和B淋巴細胞内抗原受 體的信號傳輸過程中，都起著一種關鍵的作用。存在於肥大 細胞、T細胞和b細胞内的信號轉導通路具有共同的特點。 受體的配體結合域缺乏内在的酪胺酸激酶活性。然而，它們 與含有基於免疫受體酪胺酸的活化區（ITAMs)傳導次單元 相互作用[M. Reth，Nature，1989, 338, pages 383-384]。這些 區存在於FcsRl的β和γ次單元内、τ細胞受體（TCR)的ξ- 201032810 次單元内以及B細胞受體（BCR)的IgGa和IgG β次單元内 [N. S. van Oers and A. Weiss, Seminars in Immunology, 1995, 7, pages 227-236]。在抗原結合和多聚化時，該iTAM殘基 被Src家族中的蛋白酪胺酸激酶填酸化。syk屬於獨特的一 類絡胺酸激酶’它含有兩個串聯的Src蛋白同源2 ( SH2 ) 結構域和一個C端催化結構域。這些SH2結構域與ITAMs 以咼親和力結合，此SH2介導的Syk與一激活受體的結合 ❹ 刺激Syk激酶活性並使Syk定位於質膜。 本發明提供治療（即延遲發作、減緩病程進展，和/或 逆轉）腎病（如腎小球性腎炎，和/或腎纖維化，和/或糖尿 病腎病）的方法。這些方法有的涉及向需要的患者施用藥學 上有效量的Syk激酶抑制劑。 腎臟是高血壓的一個主要目標器官。長時間高血壓可誘 發各種腎臟損害，主要因腎金管損傷造成。其中，腎金管的 收縮和彈性纖維的退化性損傷可導致血壓進一步升高。一般 ❹ 認為’高血壓使腎小球之間的壓力增高，從而使腎小球負擔 過重，刺激纖維化和系膜區增大，結果發展成腎小球硬化。 糖尿病腎病也是這樣，腎小球内壓力的增高接著會出現痕量 蛋白尿’逐漸發展成腎小球硬化。最後，腎功能降低，造成 慢性腎衰竭，從而需要進行人工透析治療。近年發現，因晚 期腎衰竭而開始人工透析的患者中，20%有糖尿病腎病作為 潛在病症。可能要接受人工腎透析的患者數目傾向於逐年增 加，成為醫療護理系統的一大問題。目前，據說报少有慢性 腎衰竭的理想治療方法，甚至降血壓治療也可能會加重而不 5 201032810 是改善腎衰竭病情。 腎病和尚血壓之間的關係，已有很多臨床和實驗研究資 料的報導。現已確定，腎臟直接或間接地涉及高血愿的# 作，且容易受到高血壓的影響。但是，現在對慢性腎小球4 腎炎的高企壓認識很不清楚，尤其是對造成高血壓的因素、 高血壓對腎炎病程的影響’以及降血壓治療的預防性致果等 並不清楚。 當前，腎炎被認為是不同實體之不同疾病的一種臨床表 現。隨著腎臟活檢的普遍化，對腎病有了重新考慮，結果將〇 腎病重新定義為一種以具有蛋白尿為特徵的廣泛的疾病 ("Shibata's Internal Medicine of the Kidneys，” by Seii

Shibata，Bunkodo, 1988)。腎小球性腎炎以前被認為是〜種1 翠一疾病’現在已分化成腎小球性腎炎、慢性腎盂腎炎、了 腎病、結節性動脈外膜炎、痛風、糖尿病、系統型紅 (SLE)、肝梗塞、遺傳性腎病、澱粉樣變性，以及韋 肉芽腫病。 、 此外，也考慮了另外類型的腎病，可用結構式W的化❹ 合物治療’從而產生預防姐善，_者兼 疾病包括：庫德帕斯徹症候群、腎小球膜毛纟总 _= 許蘭氏紫癲、柏格氏病(IgA腎病)、膜性腎:二、了： 局灶節段性腎小球性腎炎、狼瘡性腎炎匕腎J 增生性GN、薄腎小球基底膜病、新月 J二上 (piGN)。 和感染後腎小球性腎炎 6 201032810 琴官有關的糖尿病加速d管損害和/或形成其他 I i發症，對預期壽命有很大影響。相應地，很重 ==期間將血壓控制在正常範圍，同時控制糖尿 病亚改善或防止動脈硬化。 【發明内容】 ❹ 物。本發明提供-種獅或治療糖尿鱗病或腎小雜腎炎的藥 本發明之概要 為的’結構式為1的化合物，或其藥學上可接 /口療腎病或腎炎方面报有用。這樣的化合物在預防或户 腎病或腎小球性腎炎方面可能是有效的。本發明的主： 化&物或其鹽為Syk激酶抑制劑。 龜本發明係關於—種預防或治療糖尿病腎病或腎小 包含下面所桃结構式為1齡合物或其蔑作 $露了種/α療哺乳動物糖尿病腎病或腎小雜 ^包^施賴學上有效量的下面所雜構式ι所絲的 或其樂學上可接受的鹽的步驟。 明 這-化合物的合成披露於國際專辦請：嶋33798。 本發明之概要 法：本發_.，_式1的化合物治小雜腎炎的方 7 201032810

式i 么明針對式I的化合物現已發現，在一個腎小球性 腎炎動物模型中，該化合物 本發明的另-個方面是一種治療腎小球性腎炎的藥物 組合物。 t發月的又；$r面；種治療腎小球内炎症的方法。 發明的另—方面是總體上用桃抑制劑治療患者的 腎小球性腎炎。 田。化合物可作為腎小球性腎炎的有效口服治療劑使 β 基於我們獲得的資料，我們預見Syk抑制劑大體 種疾病的有用藥劑。我們這些結論所依據 貧才+概如下〇 本發明之詳細說明 榀从，，’在一個方面，本發明係針對一種包含通式I化合 r2 ^勿組合物，該化合物亦稱為2-[4-(7-乙基_5H-吼咯並 [2,3仰比卞6_基)-苯基]-丙-2_醇。 音說明書中’「本發明之化合物」及其相當的表述， 表述S t上所述的通式1之化合物，當上下文允許時，該 物，可包括其酯前體藥物、藥學上可接受的鹽以及溶劑合 益执β水合物。類似地，在上下文允許時，當提及中間體時， 疋否就其本身S出專利權要求，均意為包括它們的鹽和 201032810 溶劑合物。為了明晰起見，有時當上下文允許時會在文中 出某些具體實例，但這些實例純粹是作為例證，並非旨 除上下文允許的其他實例。 曰 這一化合物的合成披露於國際專利申抹， W02008/033798 ° °月’ 本文引述的每篇專利文件的内容和其他文獻均以其整 體作為參考文獻而納入本文。

縮寫詞表 如上文所用及貝牙本發明的說明，除非另有說明，下列 縮寫詞應被理解為具有以下含義： ACN 乙猜 AIBN 2,2'-偶氮異丁腈 bid 每曰兩次 BOC 或 Boc 胺基甲酸叔丁醋 BOP 苯並三唑-1-基氧三(二甲基胺基)鐫 n-Bu3SnH 三正丁基氫化錫 t-Bu 叔丁基 Cbz 胺基曱酸苄酯 PTC 相轉移觸媒 DAST (二乙基胺基)三氟化硫(Et2NSF3) DCC 二環己基碳二亞醯胺 DCM 二氯曱烷(CH2CI2) DIC —異丙基石炭二亞酿胺 DIPEA 二異丙基乙胺 ❹ 201032810 DMAP 4-(N，N-二曱基胺基)吡啶 DMP試劑 戴斯·馬丁高價碘試劑 DMF 二曱基甲醯胺 DMSO 二甲基亞砜 EA 元素分析 EDCI 1-乙基-3-(3-二曱基胺基丙基)碳二亞醯胺鹽 酸鹽 eq 當量 f Et 乙基 Et2〇 二乙醚 EtOH 乙醇 EtOAc 乙酸乙酯 FMOC 9-芴基曱氧基甲醯基 HOAt 1-羥基-7-氮雜苯併三唑 HOBT 1-羥基苯併三唑 HOSu N-羥基琥珀醯胺 _ HPLC 高效液相層析法 LAH 氫化锂1呂 Me 甲基 Mel 曱基碘 MeOH 曱醇 MeOC(O) 氯曱酸曱酯 MOMCI 曱氧基曱基氯 MOM 曱氧基曱基 201032810 MS 質譜法

NaBH4 哪氫化鈉

NMR P PO PyBOP TBD RP-HPLC TBSCI TCA TFA Tf2〇 THF THP TLC

Na2C4H4〇6酒石酸鈉 核磁共振 聚合物鍵 口服 o 笨並三唾-1·基氧三吡咯烷鱗六氟磷酸鹽 1，5,7-三氮雜二環μ 4 〇]_癸_5_烯 逆相高壓液相層析法 叔丁基二曱基甲矽烷基氯 三氣乙酸 三敗乙酸 三氟曱續酸酐 四氫咬喃 四氫吡喃 薄層層析法 如上文所用以及貫穿本發明之說明，除非另有說明，下 列術語應理解為具有以下含義： 「酸性生物電子等排體」意指在化學和物理方面類似於 羧基、顯示出十分相似生物特性的基團（參閱Lipinski， Annual Reports in Medicinal Chemistry, "Bioisosterism In Drug Design (藥物設計中的生物等排性）"21，283 (1986); Yun, Hwahak Sekye, "Application of Bioisosterism To New 11 201032810

Drug Design (生物等排性在新藥設計中的應用）"33, 576-579, (1933); Zhao, Huaxue Tongbao, "Bioisosteric

Replacement And Development Of Lead Compounds In Drug Design (藥物設計中的生物等排置換和先導化合物的研發） 34-38, (1995); Graham, Theochem, "Theoretical Studies Applied To Drug Design ab initio Electronic Distributions In

Bioisosteres (始於等排體電子分佈的應用於藥物設計的理論 研究）” 343, 105-109,（1995))。代表性的酸性生物電子等排 體包括-C(0)-NHOH、-C(0)-CH20H、-C(0)-CH2SH、❹ -C(0)-NH-CN、磺基、膦醯基、烷基磺醯基胺基甲醯基、四 唑基、芳基磺醯基胺基甲醯基、N-甲氧基胺基甲醯基、雜芳 基磺醯基胺基甲醯基、3-羥基-3-環丁烯_i，2-二酮、3,5-二氧 代-1，2,4-噁二唑烷基，或羥基雜芳基如3_羥基異噁唑基、3_ 羥基-1-甲基吼唑基等等。 「有效量」意為能有效地產生所希望治療效果的本發明 之化合物/組合物的量。 水合物」意為 種>谷劑合物’其中的溶劑分子是H2〇。 「患者」包括人類和其他哺乳動物。 內it上可接受㈣」意指可在體内水解並包括在人體 分解而剩下母體化合物或其鹽的那些醋，適宜的醋基 =例如從藥學上可接受的脂族鲮酸尤其是烷基羧酸、烯 中母個烧基或烯基有利地含有不多於6個碳原子。代 醋包括甲酸醋、乙酸醋、丙酸，、丁酸醋、丙稀酸醋、乙基 12 201032810 琥珀酸酯等等。 本文戶2述的「藥學上可接受的前體藥物」意指本發明之 化ό物的這樣些如體藥物：在合理的醫學判斷範圍内，對 於那些易王現過度的毒性、刺激和過敏性反應等的患者，它 們適口於與身體組織接觸的用途，且具有合理的受益/風險 比，且它=在本發明之化合物的預期用途方面是有效的。術 浯「則體藥」係指這樣一些化合物，它們在體内迅速轉化， 〇 例如透過在血液中水解，從而產生具有上述結構式的母體化 合物。可透過代謝裂解迅速轉化的官能團，在體内形成了一 類能與本發明之化合物的羧基反應的基團。它們包括但不限 於這樣一類基團，如烷醯基（如乙醯基、丙醯基、丁醯基等）、 未取代的和取代的芳醯基（如苯曱醯基和取代的苯甲醯 基）、烷氧基羰基（如乙氧基羰基）、三烷基甲矽烷基（如三 曱基甲矽烧基和二乙基曱矽院基）、與二羧酸（如丁二醯基） 形成的單酯等等。由於本發明之化合物的可代謝裂解基團易 ❹ 於在體内裂解，故含有這類基團的化合物可像前體藥那樣起 作用。含有可代謝裂解基團的化合物的優點在於，由於該可 代謝裂解基團之存在，提高了母體化合物的溶解性和/或吸 收速率’故可顯示出更好的生物效應。以下文獻提供了詳盡 的討論：Design of Prodrugs(前體藥物的設計），H. Bundgaard， ed” Elsevier (1985); Methods in Enzymology (酶化學方法）； K. Widder et al, Ed., Academic Press, 42, 309-396 (1985); A Textbook of Drug Design and Development (藥物言史計和研發 教程），Krogsgaard-Larsen and H. Bandaged, ed.，Chapter 5; 13 201032810 "Design and Applications of Prodrugs··(前體藥物的設計和應 用）113-191 (1991); Advanced Drug Delivery Reviews，Η. Bundgard, 8, 1-38, (1992); J. Pharm. Sci., 77, 285 (1988); Chem. Pharm. Bull., N. Nakeya et al, 32, 692 (1984)； Pro-drugs as Novel Delivery Systems (用作新型給藥系統的 前體藥物），T. Higuchi and V. Stella, 14 A.C.S· Symposium Series ’ 以及 Bioreversible Carriers in Drug Design (藥物設 計中的生物可逆性載體），Ε·Β· Roche，ed.，American

O

Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987，上述 文獻此處透過引用而納入本文。

「藥學上可接受的鹽」係指相對無毒性的本發明之化合 物的無機酸和有機酸加成鹽以及鹼加成鹽。這類鹽可在該化 合物最終分離和純化期間在現場製備。尤其是，酸式加成鹽 的製備，可透過讓游離鹼形式的純化後化合物與適當的有機 或無機酸分別反應、然後分離所形成的鹽來實現。代表性的 酸式加成鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷 酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸❹ 鹽、硬月曰酸鹽、月桂酸鹽、爛酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、碟 酸鹽、曱苯績酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀 酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚酸鹽、乳糖酸^、 胺基％酸鹽、丙一酸鹽、水揚酸鹽、丙酸鹽、亞甲基-雙 經基萘甲酸鹽、龍膽酸鹽、經乙基續酸鹽、二對曱苯醯基酒 石酸鹽、曱磺酸鹽、乙基磺酸鹽、苯磺酸鹽、對曱苯磺酸 環己基胺基磺酸鹽和月桂基磺酸鹽等等。參閱，例如s.M 201032810

Berge，et al” "Pharmaceutical Salts (藥用鹽），，j Sci., 66, M9 (1977)，此處透過引用而納入本文。鹼式加成 鹽也可透過讓以酸的形式存在的純化後化合物與適^的°有 機鹼或無機鹼分別反應，然後分離所形成的鹽來製備。鹼式 加成鹽包括藥學上可接受的金屬鹽和胺鹽。適當的金屬鹽^ 括鈉、鉀、鈣、鋇、鋅、鎂以及鋁鹽。鈉和鉀鹽是首選 適當的無機鹼式加成鹽是從金屬的鹼製備的，該金屬的鹼包 ❿ 括氫化鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鋁、氫 氧化鐘、氫氧化鎮、氫氧化鋅等。適宜的胺的驗式加成鹽^ 從某些胺製備的，這些胺具有足夠的驗性以形成穩定的睡， 首選的是醫藥化學中經常使用的那些胺，因為它們具有^合 於醫學用途的低毒性和可接受性：氨、乙二胺、队曱基葡糖 胺、賴胺酸、精胺酸、鳥胺酸、膽鹼、N，N，_:苄基乙二胺、 氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N_苄基苯乙胺、二乙胺、 哌嗪、三（羥基曱基)-胺基甲烷、四曱基氫氧化銨、三乙胺、 ❹ 二苄基胺、二苯羥曱胺、脫氫樅胺、N-乙基哌咬、爷A胳、 四甲基錄、四乙基錄、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、土臉性 胺基酸如賴胺酸和精胺酸，以及二環己胺等等。 「溶劑合物」意為本發明之化合物與一個或數個溶劑分 子的物理締合。這種物理締合包括氫鍵鍵合。在某些情況 下例如g、纟。曰曰固體的晶格内含有一個或數個溶劑分子時， 溶劑合物可被分離。「溶劑合物」包括溶液相以及可分離的 溶劑合物。代表性的溶劑合物包括水合物、乙醇鹽、甲醇鹽 15 η 201032810 「治療」意指施用-種化合物來改善—種疾病狀況或障 礙’或預防-種疾病狀況或障礙。或延緩—種疾病狀況或障 礙的進展。14-缺還指降低對—種疾錄況或障礙的易感 性。該術語還包括但不限於非治癒性緩解治療。 【實施方式】 μ 實施例 以下是與本文敘述的發明相關的具體實施例。 種依照本發明的特別實施例是一種治療腎小球性腎 炎的方法，該方法給需要治療的患者施用有效量的式ι的化 合物：

或種對應的Ν-氧化物前體藥、或其藥學上可接受《 鹽或溶劑合物。 本發明的另一個特定的實施例為一種治療腎小 合物，其中包含式“匕合物’或-種對二 .則體藥、或其藥學上可接受的鹽，並與一種藥學上 接受的賦形劑結合使用。 仲明的另一個實施例為―種為患有或易患某種症灶 效量的式1化合物可獲得改善的人類或非人卖 動物患者咕治療的方法。 201032810

式i 本發明的另一個實施例是一種治療腎小球性腎炎的方 法，該方法給需要治療的患者施用有效量的Syk抑制劑化合 物。 ❹ 本發明的另一個實施例是一種治療腎病的方法，該方法 給需要治療的患者施用有效量的式I化合物：

式I 或一種對應的N-氧化物前體藥、或其藥學上可接受的 鹽或溶劑合物，其中的腎病選自下面一組疾病：腎小球性腎 炎、庫德帕斯徹症候群、腎小球膜毛細管GN、感染後腎小 球性腎炎、亨諾_許蘭氏紫癲、柏格氏病（IgA腎病）、膜性 腎小球性腎炎、局灶節段性腎小球性腎炎、狼瘡性腎炎、遺 腎炎\系膜増生性GN、薄腎小球基底膜病、新月體性 ^ (亦稱為急進性腎小球性腎炎，或RpGN)。 法本發明的另一個實施例為一種治療腎小球性腎炎的方 '，該方法包括向需要的患者施用式I化合物，其中的化合 物為鹽酸鹽形式。 口 17 1 201032810 本發明之化合物可任選地以鹽的 受㈣些鹽尤其令人感興趣，因為它們在前述化合物的給^ =程中可用於醫學目的。㈣學上可接受㈣可在製造過程 中用於分離和提純的目的’在某些情況下可祕分離本發明 之化合物的立體異構形式。後—種情輯於從光學活性胺製 備的胺鹽而言尤其如此。 當本發明之化合物含有一個叛基或一個足夠酸性的生 物電子等排體時，可形成驗式加成鹽，且該鹽是更便於使用 的形式；實際上’使職的形式在本質上相#於使麟離酸❹ 形式。 同樣，當本發明之化合物含有一個鹼基或一個足夠鹼性 的生物電子等排體時，可形成酸式加成鹽，且該鹽是更便於 使用的形式；實際上’使用鹽的形式在本質上相當於使用游 離鹼形式。 曰本發明的另一個目的是提供一種藥物組合物，它由療效 里的式1化合物和藥學上可接受的載體或稀釋劑組成。 本發明的另一個目的是提供一種藥物組合物，它本身在❹ 一種有益的組合治療中是有效的，因為它含有多種可依照本 發明而利用的活性成分。 本發明還提供包括兩種或多種活性成分的藥劑盒或單 一藥盒，可用於為患者治療或預防黃斑變性。一個藥劑盒可 能提供式1化合物（單獨或與藥學上可接受的稀釋劑或2劑 組合）和其他活性成分（單獨或與藥學上可接受 載劑組合）。 ^ 18 201032810 製備式1化合物可藉由應用或改進已知的方法，如此前 用過或文獻中所述的方法，或藉由本文所彼露的方法。 在前述的任何應用中’式1化合物的量可為療效量咬低 於最佳的量，或兩者的組合，只要這些成分的最終組合能構 成一種有效地治療或預防患者黃斑變性的療效量化合物。 本發明之化合物的製備

Ο 本發明化合物的起始材料和中間體可透過應用或改變 已知的方法來製備。 本發明之化合物可透過應用或改進已知的方法來譽 備’所謂已知的方法是指此前用過的方法或文獻中所述的方 法，如 R.C. Larock 在 Comprehensive Organic Transformations (有機官能團轉換），VCH publishers, (1989)中所述的那此 方法。 二 尤其是，結構式為I的化合物可按照國際專利申於 W〇2〇08/033798中所述的方法來製備。 按照本發明的一個進一步特點，本發明之化合物可藉由 本發明之其他化合物的相互轉化來製備。 3 酸式加成鹽是用其中存在鹼性官能團如亞胺基 子、胺基或單取代基錢取代基的本發明之化合物形成的] 一種較佳的酸式加成鹽是藥學上可接受的酸 藥用劑，條件下其陰離子對患者無毒性的鹽，使得 内在的有㈣心會因陰離子的副作用而受到損害。 ”選，故可與通常的藥物載體相容並可適用於經口 腔或腸胃外途徑給藥。本發明之化合物的酸式加成鹽可透 201032810

2 ，改進已知方法讓游離鹼與適當的酸進行反應來製 汾^發明之化合物的料加成鹽可透過將該游離驗 醇的水’容液’或其他含有適當酸的適當溶劑及透 該☆液而分離出該鹽；或者是讓該游離驗在一種有機 =中與酸反應，在此情況下可直接分離出該鹽或可透過濃 式而獲得該鹽。某些適用於製備這類鹽的酸是 =1虱溴酸、磷酸、硫酸、各種有機紐和雜如乙酸、 二疒L丙酉二、琥珀酸、苯曱酸、酒石酸、富馬酸、扁桃酸、 Γ 、ψ俩、f苯俩、脂肪酸、扁桃酸、 甲韻、甲笨姐、脂肪酸、己二酸鹽、 壞血酸鹽、天冬胺酸鹽、苯韻鹽、苯曱酸鹽、 ^ 葡糖酸鹽、十一燒基硫酸鹽 、硫酸氫鹽、 鹽、己酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、等等。 本發明之化合物的酸式加成鹽可透過應用或改進已 的，法從鹽再生。例如，透過用-種驗例如碳酸氫納水溶 或氨水溶液處理，本發明的母體化合物可從它們的酸式加 鹽再生。 诚二：u f、月才圭酸鹽、月桂基硫酸鹽、馬來酸鹽、氫 :酸鹽、Λ祕乙俩鹽、甘_酸鹽、苦味㈣、新戊酸 ^、雙經萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3_苯基丙酸鹽、硫 氰酸鹽、2_萘賴鹽、十—酸鹽、_鹽、半硫酸鹽、

虽本發明之化合物含有一個羧基或一個足夠酸性的生 物電子等排體時，可形成驗式加成鹽。可用於製備驗式加成 鹽的最佳驗是這樣—祕，當它們鱗雜結合時，將形 20 201032810 成藥學上可接受的鹽，即在藥用 無毒性的鹽，使得該游離鹼内在 副作用而受到損害。 劑量條件下其陽離子對患者 的有益作用不會因陽離子的 睫和：：入：臨：的鹽’包括那些從本發明範圍内的鹼金屬 :作铷、：祭孤何生的鹽’將包括從下列鹼衍生的那些鹽: 二:-ί化納1氣氧化卸、氫氧化舞、氫氧化銘、氮氧 ❹

越此金風：化鎂、氫氧化辞、氨、乙二胺、甲基葡糖胺、 賴胺酸、精胺酸、鳥胺酸、膽驗。Ν，Ν，_二錄乙二胺、氯 普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、Ν•节基苯乙胺、二乙胺、 派啡基、二(減甲基)_胺基甲燒、四甲基氫氧化錢等等。 本發明之化合物可透過應用或改進已知的方法從它們 的鹼式加成鹽再生。例如，透過用一種酸例如鹽酸處理，本 發明的母體化合物可從它們的鹼式加成鹽再生。 在本發明的製備過程中，本發明之化合物可以溶劑合物 (如水合物）的开>式报方便地製備或形成。透過使用有機溶 劑如二噁英、四氫呋喃或甲醇，以從水與有機溶劑的混合物 中重結晶的方式’可很方便地製備本發明之化合物的水合 物。 藥理學 本文所述的依照本發明之化合物因能夠抑制Syk激酶 所以是有用的，它們也可用於治療腎小球性腎炎和相關的腎 病。尤其是，結構式為1的化合物在國際專利申請 W02008/033798中已被證明為一種Syk激酶抑制劑。 本發明的一個特別方面提供了一種以藥物組合物形式 21 201032810 給藥的本發明之化合物，儘管該化合物也可單獨給藥。取決 於給藥方式的性質、劑量和形式，「藥物組合物」意為一種 含有j 1化合物以及至少—種選自下列群組之成分的組合 物：藥學上可接受的載劑、稀釋劑、包衣、佐劑、賦形劑或 媒劑，如防腐劑、填充劑、崩散劑、潤濕劑、乳化劑、乳液 穩定劑、懸浮劑、等滲劑、甜味劑、調味劑、芳香劑、著色 劑抗菌齊！才几真菌劑、其他治療劑、潤滑劑、吸附延緩咬 =劑、以及分配劑。藥物組合物可以下列形式給藥：旋劑、 粒、粉劑、水溶液或懸浮液、注射溶液、 唐衆。代表性的懸浮劑包括乙氧基化異硬脂醇、聚氧= 4糖醇酯和失水山梨糖醇酯、微晶纖維素， 潤土、壤脂和黃箸膠，或這些物質的混合物烏t匕=、膨 微生物作用的抗菌劑和抗真菌劑包括 ^的，防 醇、苯紛、山梨酸等。代表性的等滲劑氯丁 代表性的詩賴吸㈣⑽賴 靜，等等。 勝。代表性的用於增加吸收的吸附促"^硬7銘和明 相關類似物。代表性的載劑、稀釋劑、2 一甲基亞碾和 乳化劑和乳液穩㈣包括水、氯仿劑;^、媒劑、増溶劑」 碳酸乙醋、乙酸乙醋、苯甲醇、四氫糠醇丙醇、 元醇、丙二醇、1，3-丁二醇、甘油、聚乙二,甲酯、多 胺、Tween® 60，Span® 60，鯨蠟醇/硬 一罗基甲醯 醇、單硬脂酸甘油醋和月桂基硫===、肉豆慧 (sorbitan)脂肪酸酯、植物油（如棉籽 笊山4糖醇 胚芽油、撖欖油、E麻油和芝麻油)以及可注=機 22 201032810 油酸乙酯等，或這些物質的適當混合物。代表性的職形劑包 括乳糖、牛奶糖、彳寧樣酸納、碳酸釣和鱗·酸二i弓。代表性的 崩散劑包括澱粉、藻酸以及某些絡合矽酸鹽類。代表性的潤 滑劑包括硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉、滑石粉，以及高分子量 聚乙二醇。

其他治療劑可與本發明的化合物組合使用。與本發明之 化合物組合使用的其他治療劑可單獨、同時或依次給藥。除 式I化合物以外，藥物組合物中其他物質的選擇，通常取決 於活性化合物的化學性質如可溶性、給藥的特定方式和用’藥 過程中須遵守的規定。例如，賦形劑如乳糖、檸檬酸鈉、= 酸鈣、磷酸二鈣，崩散劑如澱粉、藻酸以及某些鱼硬俨酸鎂屄 滑石粉等潤滑劑相結合的絡合、“鹽類都 藥物組合物可以下列形式給藥：鍵劑、丸劑 劑、水溶液或懸浮液、注射溶液、_、或糖^。祕、如 液體劑型」意為準備給患者施用 液態，例如藥學上可接受的乳液、溶液、縣浮液°:是處於 劑。除活性化合物之外，液體劑型可^心播漿和酿 性稀釋劑，例如溶劑、增溶劑和乳化解。細常用的惰 試/使用水絲浮液時，它們可含有乳化㈣ΐ«柏 乳液狀藥物組合物的油相可以已 乃式由巳知的成 23 201032810 分組成。雖_油射僅由—魏化劑組成，但它最好含有 由至少-種=匕劑與-種脂肪或油、或與脂肪和油兩者所组 成的混合物。在1首選的實_巾，—種親找與一 種作為蘇劑的親脂乳化劑—起使用。該乳 盘 ，:起構=壤’與油和脂肪-起則構成乳 質，後者形成乳《藥劑的油性分散相。

如果需要，？L膏基質的水相可包括例如至少3〇% 士 的多元醇’即含有兩個或兩個以上M基的醇，如丙二醇、 丁-醇、甘露醇山梨糖醇、甘油和聚乙二醇（包括pEG働） 及其混合物。局部應用㈣劑可理想地含有一種能促進吸收 或促進活性成分穿透皮膚或其他受影響部位的化合物。

適合於某種配方的油類或脂肪的選擇是基於能否達到 =想的性質。因此’該乳f最好應是―種非油脂、不著色及 ^易洗去的產品’並具有適當的稠度以避免從軟管或其他容 器中滲漏。直鏈或支鏈、一元或二元的烷基酯如豆蔻酸二異 丙知、油酸癸酯、棕搁酸異丙酯、硬脂酸丁酯、棕櫊酸_2_ 乙基己醋或被稱為鯨臘硬脂醇乙基己酸酯（Cr〇dam〇1 CAP) =支鏈酯混合物均可使用。取決於所需的性質，這些助劑可 單，使用或結合使用。或者，也可使用高熔點脂質如白色軟 石喂和/或液體石蠟或其他礦物油。 實際上’本發明之化合物/藥物組合物可以一種適合於 ^和動物的配方形式，透過局部性或全身性給藥方式施用， 、匕括口服、吸入、直腸、鼻腔、口腔、舌下、陰道、結腸、 '主射（包括皮下、肌内、靜脈、皮内、鞘内和硬膜外）、腦 24 201032810 池内，以及腹腔内給藥。應該理解，首選的途徑可隨例如受 藥者的身體狀況而改變。 藥學上可接受的劑型」系指本發明之化合物的劑型， 包括如錠劑、糖衣丸、粉劑、酏劑、糖漿、包括懸浮液在内 的液體製劑、喷霧劑、吸入錠劑、錠劑、乳液、溶液、顆粒、 膠囊和栓劑，以及用於注射的液體製劑，包括脂質體製劑。 其技術和配方通常可在雷氏藥學大全（Remingt〇n，s 〇 Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, latest edition )中找到。 ’ 「適合於口腔給藥的藥劑」可製成獨立的單元如每劑含 有預定量活性成分的膠囊、扁囊劑或錠劑；或粉末或顆粒； 或溶液或水基或非水基懸浮液；或水包油乳液或油包水乳 液。活性成分也可製成大丸劑、藥糖劑或糊劑。 錠劑可以壓製或模製的方式製備，還可任選地含有一種 ，多種輔助成分。壓製錠劑可透過將活性成分以散粒形式如 ⑩ 粉末或顆粒，任選地與粘合劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐 劑、表，活性劑或分散劑混合，再在適當的機器中壓製而 成1模製錠劑可透過用惰性液體稀釋劑潤濕的粉末狀化合物 混f物在適當的機器中模製而成。旋劑可任選地加包層^刻 =號，也可配製成使所含活性成分得以緩慢地或控制性釋 用於直腸給藥的固體組合物包括按照已知方法配 栓劑’並含有至少一種本發明之化合物。 如果需要，並為了更有效地分佈，該化合物可用微膠囊 25 201032810 密封或附著於一種緩釋或靶辦紙 可生物降解的聚合物基質系:例刚 物）、脂質體和微球體，並透過，1_歧/聚甘醇酸共聚 的技術進行皮下注射或肌内注=被稱為皮下或肌内貯庫 時間内得以持續緩慢地釋玫。4匕合物在兩周或更長 例如，透過除菌過濾n過據’ =^ 各種方式消毒， 組合物，在使用前再溶敎菌水劑加入無菌固體藥物 上…、固水或其他無菌注射介質。 魯腔‘1途:對徑給藥的藥劑」意為適合於經 咖爾粉末0 =，劑方式給藥的藥劑可按照傳統方法製備，並可與二 ^口療劑-起給藥。吸入治療劑可容易地透過計量吸入器給 ^ +適合於口腔給藥的藥劑」意為適合於經口腔給患者給〇 藥的藥劑形式。該藥劑可製成所需的獨立單^如每劑ς有 定量活性成分的膠囊、扁㈣錢劑；或粉末或顆粒；或溶 液或水基或非水基懸浮液；或水包油乳液或油包水乳液。活 性成分也可製成大丸劑、藥糖劑或糊劑。 —「適合於非腸道給藥的藥劑」意為適合於給患者注射的 藥劑形式。此藥劑是無菌的’且包括乳液、懸浮液、水基與 非水基注射液，可含有懸浮劑和增稠劑以及抗氧化劑、緩衝 26 201032810 液、抑菌劑，以及使該藥劑與預期受藥者的血液等滲，並調 節至適當pH值的溶質。 「適合於直腸或陰道給藥的藥劑」意為適合於經直腸或 陰道給患者給藥的藥劑形式。栓劑是這類藥劑的一種首選形 式，可將本發明之化合物與適當的無刺激性賦形劑或載體如 可可月曰、聚乙一醇或某種栓劑用蠛混合的方式來製備。這 些賦形劑或載體在常溫下是固體但在體溫下成為液體，因此 〇 可在直腸或陰道腔中融化並釋放活性組分。 「適合於全身性給藥的藥劑」意為適合於給患者全身性 給藥的藥劑形式20。此藥劑最好是以包括肌肉、靜脈内、 腹腔内和皮下注射在内的注射方式給藥。用於注射時，本發 明之化合物可配製在液體溶液中，尤其是生理上相容的緩衝 液如漢克(Hank)溶液或林格氏(Ringer)溶液中。此外，該化 合物可配製成固態形式並在使用之前再重新溶解或懸浮。凍 乾形式也包括在内。全身性給藥也可採取經黏膜或經皮的方 ® 式’或者該化合物也可經口腔途徑給藥。對於經黏膜或經皮 方式給藥，在藥劑中使用適合於被穿透障礙的滲透劑。這類 滲透劑是本領域内眾所周知的，且包括用於經黏膜給藥的例 ^膽汁鹽和梭鏈孢酸衍生物。此外，還可使用促進滲透的洗 淨劑。經黏膜給藥可透過使用例如鼻腔喷劑或栓劑來實現。 搿於口腔給藥方式，該化合物被配製成常規的口腔給藥形式 如膠囊、錠劑以及滋補劑。 工 適合於局部給藥的藥劑」意為適合於給患者局部給藥 形式。可將此藥劑配製成本領域内眾所周知的局部& 的藥 4 201032810 化t物可經由皮膚障礙 或水溶性軟膏基質—祕用=ί性: 可以水包油乳膏基質配製成乳膏 2成刀 體中，尤盆1 成分系溶解或懸浮於一種適當的載 八π適合於該活性成分的水溶性溶劑。 := 上的藥劑包括調味基質中含有活性成： 質中二f生!，糖和阿拉伯膠或黃蓍膠;還包括惰性基❹ 成为的芳香錠劑，該惰性基質的例子為明膠和 甘油，或讀和阿拉伯膠；還包括在適體麵中含 性成分的漱口劑。 〇 固體劑型」思為本發明之化合物的冑彳型是固態形式， 例如膠囊（劑、丸劑、粉末、糖衣丸或顆粒。在這種固體 劑型中’本發明之化合物與至少—種常用的惰性賦形劑（或 載體）混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣或（a)填充劑或增量 劑，如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和矽酸，（b)粘 合劑，如羧甲基纖維素、藻酸鹽類、明膠、聚乙烯^^比咯烷_、 蔗糖和阿拉伯樹膠’（C)保濕劑，如甘油，（d)崩散劑，如 瓊脂、碳酸鈣、馬鈐薯粉或木薯澱粉、藻酸、某些絡合的矽 酸鹽類和碳酸鈉’（e)溶液阻滞劑，如石蠟，（f)吸收促進 劑，如季銨化合物’（g)潤濕劑，如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油 酯，（h)吸附劑，如高嶺土和膨潤土，（i)潤滑劑，如滑石 粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉， 201032810 f劑（k)缓衝劑，以及可在腸道内某—部分以緩 釋方式釋放本發明之化合物的_。 、本發月的藥物組合物所含活性成分的冑際劑量水準可 以便確定活性成分的療效量，使得患者對某種特定 的合物和給藥方法產生理想的治療反應。因此，為任 者選擇的㈣水準取決於各翻素’包括所希望的 知1'舌:、〇藥途控、所希望的治療持續時間、疾病的病因 W、患者的病情、體重、性別、飲食和年齡、每種活 本刀的難和效能H代謝和/或排泄的速率及其他 因素。 Θ患者每曰單次或分次服用的本發明之化合物的曰總劑 董可以是’例如’每天按每公斤體重計約0.001至議 更佳的是0.01至l〇mg/kg。例如，成人每日按每公 斤體重計的吸入劑量通常是約G.G1至H)0mg/kg，更佳的是

G =.01至10 mg/kg，每日按每公斤體重計的口服劑量是約 .至100 mg/kg，更佳的是約0.1至70 mg/kg ;尤佳的是 〇.5至H)mg/kg;每日按每公斤體重計的靜脈内給藥劑量是 至50 mg/kg，更佳的是〇 〇1至1〇吨心。藥物組合 物中活性組分的百分比可以改變，但它仍應構成—定的比 *曰以獲付某-適當的劑量。單位劑量藥物組合物的含量可 =疋，日劑1的-部分’由若干單位劑量組成每日劑量。顯 然’歲種形式的單㈣量可叫伟時給藥。為了獲得理想 的:療效果’可以根據需要而儘量頻繁地細某—劑量。某 些患者可能會對較高或較低的劑量迅速作出反應，也可能會 29 201032810 發現低得多的維持劑量已經足夠。對於另一些患者，可能有 必要按照每個具體患者的生理要求，進行每日1至4劑的長 期治療。自不待言’對於另一些患者，將有必要規定每日不 超過一劑或兩劑。 該配方可用藥劑學領域中眾所周知的住何方法製備成 單位劑量形式。這些方法包括將活性成分與構成一種或多種 輔助成分的載體相結合的步驟。通常，這些藥劑將活性組分 與液體载體或磨得很細的固體載體或這兩者一起均勻和緊 密地結合，然後，若有必要，使產品成形。 ❹ 這些藥劑可置於單位劑量或多劑量容器内，例如密封的 安親劑和帶膠塞的管形瓶’並可在凍乾（冷凍乾燥）條件下 儲存，只需在即將使用之前加入無菌液狀載體如注射用水。 即時準備的注射溶液和懸浮液可從前述的那類無菌粉末、顆 粒和錠劑製備。 根據文獻和下文所述的試驗，本發明範圍内的化合物展 示了顯著的藥理學活性’該試驗結果據信是與在人和其他哺 乳動物中的藥理學活性相關的。 ❹ 就化學反應在本發明之化合物製備方面最廣義的應用 而吕’以上引述的參考文獻只是一般性地彼露了其所述的化 學反應。有時，對於本文所披露化合物範圍内的每種化合 物，上述化學反應也可能不適用。出現這種情況的化合物將 為本領域熟練技術人員很容易地識別。在所有這類情況下， 或者可以透過本領域熟練技術人員熟知的常規性修改措施 例如保護干擾基團、透過改用替代的常規反應劑、透過例行 30 201032810 的修改反應條件等等而成功地實現這些反應；或者將本文彼 露的其他反應或其他常規反應應用於本發明之相應化合物 的製備。在所有的製備方法中，所有初始原料均是已知的或 可從已知的初始原料製備。 利用本發明之化合物和/或組合物治療患有腎小球性腎 炎的患者時，所採用的療法是按照各種因素選擇的，包括年 齡體重、性別、飲食以及患者的病情、感染的嚴重性、給 ❹ 藥途徑、藥理學方面的考量如所採用具體化合物的活性、效 能、藥代動力學和毒性，以及是否使用給藥系統等因素。本 文披露的藥物組合的給藥通常應持續一段時期直至用藥可 被接受，顯示疾病已被控制或根除。接受本文所披露藥物結 合治療的患者可透過常規腎功能測量方法而得到監護以確 定治療的有效性。對於用這些方法所獲資料的連^析，使 得在治療期間可對治療方案做出修改，從而使藥物組合中每 種組分的給藥量達到最優，從而能夠確定治療的 。 〇 ，此，治療過程中可合理地修改治療方案/藥量計畫，使得 藥物組合中每種化合物的給藥量達到最低，卻又能在一起展 現令人滿意的效果，並使得藥物組合中這些化合物的給藥時 間僅持續至成功治療腎病所必需的時間。 本發明包括將上述抗VEGF抑咖和具有帥活性的化 合物結合使用以治療或餅腎小球性腎炎，由於它們的累加 或協同個’其中-種或多種這類化合細療效量存在，而 其餘的一種或多種化合物則可以低於臨床療效量或有效量 存在。本文所用的術語「累加作用」描述了兩種（或兩種^ 31 201032810 上）活性藥劑的合併作用，它等於每種藥劑單獨給藥時作用 的總和。協同作用是指兩種（或兩種以上）醫藥活性劑的合 併作用大於每種藥劑單獨給藥時作用的總和。 式I化合物之體内效能 研究目的：腎小球性腎炎是一種複雜的疾病，涉及細胞 因子、細胞浸潤、細胞繁殖和腎功能的迅速惡化。這一動物 模型將提供相對較短的研究時間和腎小球性腎炎的定量測 定。該項研究設計用來確定式j化合物是否將會減輕由3〇 微克靜脈注射的克隆a84 (lgG2a)誘發的腎小球性腎炎。❹ 這一單克隆抗體透過結合到腎小球基底膜蛋白質上而誘發 疾病。這-模式中’以兩種方式監視疾病進展。首先，，古 ，出的尿液中的蛋白質水準。這—讀數用作腎病的一個快速 檫記值。第二個監視腎病的機制是透過組織檢查查看腎臟的 結構。 結果 模财，透過監_倾舰 :觀察到，式1化合物可抑制該疾病。與對照=广〇、❹ 和3〇mg/kg的化合物分別降低尿蛋白 4 · 3〇mg/kg , 一種抗-TNF或腫瘤壞死因子化合 、…、（nbrel® 實驗方法學： 附完整研究報告 1. 一般資訊 化合物：式I化合物的鹽酸強。 32 201032810 研究目標·腎小球性腎炎是—種複雜的疾病，涉及細胞 因子、細胞浸满、細胞繁殖和腎功能的迅速惡化。這一動物 模型提供相對較短的研究時間和腎小球性腎炎的定量測 足。該項研究没相來確定式〗化合物之鹽酸鹽是否會減輕 由30微克靜脈庄射的克隆a84 (IgG2a)誘發的腎小球性腎 炎。 2.實驗程序 0 動物： 物種、特種、供應商：大鼠、WKY、Charles River 性別：雄性 出生日期：11/26/07 收到日：2/5/08 治療開始時動物的體重和/或年齡：研究開始時，動物 年齡大約為11-12週。 每組動物數目：每組有3、4或8隻動物。 Q 動物存放條件：動物按NIH「實驗動物護理和使用指南」 中所列的條件存放在一個完全認證的AALAC設施中，符合 美國農業部「動物福利法」的要求。 食物：Purina 5001鼠糧，有過濾水可供隨意飲用。 隨機化和識別：受試動物選自一個健康的動物群，並在 尾部以去不掉的標記識別。籠子上的卡片表明劑量組。 動物的環境適應：在研究開始之前，大鼠先在設施適應 環境至少5天。研究開始之前或在研究過程中的任何時候， 都沒有對動物禁食。 33 201032810 克隆a84 (IgG2a)激發： 名稱，目錄號，批號和供應商：腎源單克隆抗體a84， 目錄號 70215，批號 060775，Chondrex。 劑量：30 ug/動物 載劑：0.9%氯化鈉注射液 給藥途徑：靜脈 注射體積：0.1 ml 治療的持續時間和頻度：第〇天大約劑量後i小時，B 組到F組以及η組到L組接受30 ug a84抗體靜脈注射。® 對照動物的治療：A組和G組動物接受0.1 mi 0.9%氯 化鈉靜脈注射。 測試的化合物： 式Ϊ化合物的鹽酸鹽 劑罝.3.0、1〇 和 3〇 mg/kg 載劑·含有0.2% Tween 80的0.5%曱基纖維素 給藥途徑：口腔管飼法 施用體積：lOml/kg ❹ 治療的持續時間和頻度：C、D和E組每隻動物從第〇 i，6天每天上午和下午各接受一次劑量，劑量間隔大 8 λ]、。了、了 ^ τ_ 下 _和尺組母隻動物從第0天到第3天每天上午和 、 夂劑置’劑®間隔大約8小時。劑量在第〇夭 庄射a84抗體前大約i小時的時候開始。

對照動物的治療：載劑（含有0.2% Tween 80的〇.5%甲 土纖維素）l〇ml/kg。A組和B組每隻動物從第〇天到第G 34 201032810 天每天上午和下午各接受一次劑量，劑量間隔大約8小時。 G組和Η組每隻動物從第〇天到第3天每天上午和下午各接 受一次劑量，劑量間隔大約8小時。劑量在第〇天注射a84 抗體前大約1小時開始。 參考化合物： 化合物和批號：Enbrel (依那西普），批號D092246 供應商：Amgen/Wyeth © 劑量：5.〇mg/kg 載劑：0.9%氯化鈉注射液，目錄號0409-4888-50，批號

44-199-DK 給藥途徑：腹膜内（ip) 施用體積：10 ml/kg /α療的持續時間和頻度：F組和L組每隻動物第0天注 射a84抗體前大約卜】、時接受-次上午劑量，並在第3天接 受一次下午劑量。 ❾ 蛋白質測定： 試劑盒：尿蛋白測定試劑盒 供應商：Chondrex 目錄號：9040 研究的參數/檢查/樣品： 内測:^的=天到第7天’在大約16小時的期間 的瓜職分1尿蛋白。收獲腎臟用於組織料估以及可能 °平估方法·大鼠尿蛋白水準用上面第2.3節說明的試劑 35 201032810

盒測定。 所用設備：l)MettlerPM 天平 2)MettlerAE160 分析 天平3)Cyprane公司的麻醉機4)BeckmanGS-15R離心機 5)Thermomax微板讀板器6)RetschMM301混合球磨機 檢查和/或取樣時間表：1)根據化合物和施用劑量，大 鼠被分成6個8隻動物組、6個4隻動物組和1個3隻動物 組：A組載劑（含有0.2% tween 80的0.5%曱基纖維素）+ 靜脈注射鹽水η = 8 ’ B組載劑（含有0.2% tween 80的0.5°/。0 曱基纖維素）+ a84抗體靜脈注射n = 8，C組式I化合物鹽 酸鹽3.0 mg/kg + a84抗體靜脈注射n = 8，D組 SAR397769A 10 mg/kg + a84 抗體靜脈注射 η = 8，Ε 組式 I 化合物鹽酸鹽3.0 mg/kg + a84抗體靜脈注射n = 8，F組 Enbrel 5.0 mg/kg + a84抗體靜脈注射，G組載劑（含有0.2% tween 80的0.5%甲基纖維素）+靜脈注射鹽水n = 4，Η組載 劑（含有0.2% tween 80的0.5%曱基纖維素）+ a84抗體靜 脈注射η = 4 ’ I組式I化合物鹽酸鹽3.0 mg/kg + a84抗體靜 脈注射η = 4，J組SAR397769A 10 mg/kg + a84抗體靜脈注❹ 射η = 4，K組式I化合物鹽酸鹽3.0 mg/kg + a84抗體靜脈 注射 η = 4，L 組 Enbrel 5.0 mg/kg + a84 抗體靜脈注 n = 4， 以及Μ對照組η = 3°2)第〇天，在注射a84抗體之前【小 時’對大鼠施用治療藥物。A組到E組以及G組到K組的 動物透過口腔給藥。從第〇天到第6天，A組到£組每天繼 續兩次給藥，給藥間隔大約為8小時。從第〇天到第3天，

G組到K組每天繼續兩次給藥，給藥間隔大約為8小時。F 36 201032810 組::L組的動物在注射咖抗體之前 1小時給藥。這些動物 量二3了腹膜内劑量。第3天下午，這些動物再次接受了劑 里 <)第〇天，大鼠接受了一次30 ug a84抗體靜脈注射， /主射知用26G，3/8英时針頭。4)第3天，處死μ組的對 …、大鼠並在研究過程中的某個時間點取出腎臟。5)從第6_7 天起，將大鼠放在代謝籠中大約16小時，以收集尿樣。在 進行蛋白質分析之前’尿樣在-40°C下冷凍保存。6)第4天， φ 處死〇組到L組的動物^ a組到F組的動物在第7天處死。 7)可能會從每隻大鼠採集2_3 ml血樣。8)如果採集了血 樣’則將全血在4000 下離心分離5分鐘^ 9)然後將血 清轉移到標識獨特的試管中並貯存在_4〇。(：下。1〇)收集兩 邊的腎臟。並對腎臟的組織學參數進行評估。 3.結果的表示和統計分析 結果用相對於載劑動物的平均尿蛋白mg/ml +/-標準 誤差和mg/16小時平均+/_標準誤差來表示。資料輸出到

EverStat V5中的passereiie V5中進行統計分析（SAS System release 8.2 for SUN 4, SAS Institute Inc.，SAS Campus Drive，Cary，North Carolina 27513, USA)。與載劑動物相比 較，P<0.05被認為統計上具有顯著性。 研究計劃的變更 1) 由於缺少抗體，在a84抗體注射過程中，排除了 I 組、J組和L組。 2) 由於缺少抗體，一隻F組動物在第0天上午劑量後 被排除。 37 « 201032810 表1中的實驗化合物rExpCmpd」^指結構式為【的化 合物的魏®。上述研究的結果以表格形式顺表卜並以 圖形形式給在圖1中。在實驗動物模型中，利用這一化合物 治療降低了總尿蛋白。從這一發現中可以預期，這一化合物 在治療人類受試者或患者方面應該是有效的。 總床蛋白水準（mg)的％抑制 30uga84 抗馥 30uga84 抗體 30 ug a84 抗體 30 ug a84 抗艘 30uga84 抗艘 動物 載剤lOmVkg 實驗化合物3.0 實驗化合物10 mg/kg 實驗化合物30 mg/kg Enbrel 5.0 mg/kg mg/kg 1 65.58 35.61 81.26 63 92 2 -3.63 11.63 92.32 22.67 3 -0.60 46.17 84.66 50.26 4 9.50 64.93 L 85.65 33.67 5 -5.97 71.77 L 79.73 6L10 6 54.11 76.96 86.92 46.54 7 43.80 81.22 88.28 58 91 8 42.33 43.56 84.82 25.64 53.98 85.46 48.15 28.83 23.93 3.94 15.27 平均值 標準差 10.19 8.46 1.39 5.77

表1 在不背離其精神或基本屬性的前提下，本發明也可以其 他特定形式實施。 【圖式簡單說明】 38 201032810 本發明之上述和其他的方面、特點和優越性將透過以下 結合附圖的詳細說明而得到更好的理解，所有這些附圖僅以 例證的方式提供，並非旨在限制本發明，其中： 圖1 :一個腎小球性腎炎動物模型中，總尿蛋白水準 (mg)的抑制百分數。 【主要元件符號說明】 無 ◎

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Claims (1)

1. 201032810 七、申請專利範圍： 1. 一種治療腎小球性腎炎的方法，包括給需要治療的患者 施用有效量的式I化合物：

   式I 或，其對應的N_氧化物、前體藥、或其藥學上可接受的 鹽或溶劑合物。 2. —種治療腎小球性腎炎的藥物組合物，其中包含式I化 合物，或其對應的N-氧化物前體藥、或其藥學上可接 受的鹽，與一種藥學上可接受的賦形劑組合使用。 3. —種治療患有或易患某種病症但經過施用療效量的式I 化合物可獲得改善的人類或非人類動物患者的方法：

   式I 4. 一種治療腎小球性腎炎的方法，包括：給需要治療的患 者施用一種有效量的化合物，該化合物為Syk抑制劑。 5. 一種治療腎病的方法，包括給需要治療的患者施用有效 量的式I化合物： 201032810

   式i 或其對應的N-氧化物、前體藥、或其藥學上可接受的鹽 或溶劑合物，其中的腎病選自下面一組疾病：腎小球性 腎炎、庫德帕斯徹症候群、腎小球膜毛細管腎小球性腎 炎、感染後腎小球性腎炎、亨諾-許蘭氏紫癲、柏格氏 病、膜性腎小球性腎炎、局灶節段性腎小球性腎炎、狼 瘡性腎炎、遺傳性腎炎、系膜增生性腎小球性腎炎、薄 腎小球基底膜病、新月體性腎炎，以及急進性腎小球性 腎炎。 6. 一種治療腎小球性腎炎的方法，該方法包括對需要的患 者施用如申請專利範圍第1項所述之式I化合物。