TW200901987A - Triazole derivatives which are Smo antagonists - Google Patents

Description

200901987 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於作為音速刺蝎蛋白（s〇nic Hedgeh〇g)路徑 抑制劑，尤其Smo拮抗劑之三唑衍生物。因此，本發明之 化合物適用於治療與異常刺蝎蛋白路徑活化相關之疾病， 包括癌症’例如基細胞癌、神經管胚細胞瘤、前列腺癌、 騰腺癌、礼癌、結腸癌、骨癌及小細胞肺癌及上gi道癌。 【先前技術】 f

刺蜎蛋白（Hh)係最先在果蠅似叩⑹幻中發現之分泌 J·生L號轉導蛋白。其為高度疏水性蛋白質，在分泌後可在 組織中擴散及建立梯度，其在胚胎正常發育中具有極為重 要的作用在人類中已鐘別三種具有不同空間及時間分布 模式之册同系物：音速刺螺蛋白(麵)、印度刺螺蛋白 (IHH)及沙漠刺蜎蛋白（DHH)。

Hh信號轉導級聯在Hh結合其受體斑片（p剛後起動。在 無Hh存在下，Ptch抑制另一跨膜蛋白，圓滑蛋白（㈣之 活性，為Hh信號轉導之關鍵介體。—具有類姆 白偶合受體（GPCR)超家族之結構，但不涉及任何Hh結 口 s Hh存在時，其結合ptch以形成無活性複合物，從而 消除Μ對如❶之抑制作用且活化册反應路徑。接著職 號經由蛋白複合物在果繩中傳送至轉錄因子前臂中斷 ㈣伽interrupt ’ Ci)及在哺乳動物中傳送至犯轉錄因 子。在無Hh信號轉導存在下，α裂解且胺基末端片段充當 Hh把基因轉錄之抑制劑。在剛言號轉導之後，。裂解被 i30071.doc 200901987 阻止且Ci成為靶基因轉錄之活化劑。 雖然SHH信號轉導之胚胎缺失可能導致獨眼畸形及其他 發育缺陷（Chiang C等人383:407-413 (1996))，但咸 信SHH路徑之不當活化將導致細胞增殖增加及腫瘤形成且 與許多不同類型之惡性疾病相關，該等惡性疾病包括基細 胞癌（BCC)、神經管胚細胞瘤、胰腺癌、小細胞肺癌、前 列腺癌（pc)、乳癌、消化道腫瘤及皮膚癌（Kisely〇v AS Anti-cancer Agents in Medicinal Chemistry 6:445-449 (2006)及 Sidransky D iVaiwre 14:7-8 (1996))。因 此’ Hh路徑為多種病狀之重要藥理學標靶。 癌症中Hh路徑之異常活化被視為係由路徑中之突變（配 位體獨立性）或由Hh過度表現（配位體依賴性）所引起。

Ptch 1中之突變已與痣樣基細胞癌症候群（亦稱為戈林症 候群（Gorlin syndrome))相關聯，其係一種特徵為多種發育 缺陷及發展多種基細胞癌（BCC)、神經管胚細胞瘤、橫紋 肌肉瘤及數種其他贅瘤之素因的病狀。在偶發性BCC及神 經管胚細胞瘤及多種其他偶發性腫瘤中亦已發現鈍化ptch 且活化 Smo之突變（Reifenberger J等人 Ca«cer 58:1798-1803 (1998)及 Xie J 等人iVaiwre 391:90-92 (1998))。 植物源致畸形生物鹼西洛帕明（cyclopamine)及芬芬驗 (jervine)已證明藉由結合Smo(Chen JK等人z>ev. 1 6:2743-2748 (2002))直接抑制 SHH信號轉導（c〇〇per MK 等 人 Scz.wce 280:1603-1607 (1998)及 Incardona JP 等人 Deve/opmwi 125:3553-3562 (1998))引起前腦無裂畸形。活 130071.doc 200901987 體外測試已展示致畸劑西洛帕明可抑制來自Ptch"·小鼠數 種神經膠母細胞瘤/神經膠質瘤細胞株、神經管胚細胞瘤 細胞株、鱗狀細胞癌細胞株及SCLC細胞株之纖維母細胞 之異常細胞生長（BakM等人P/7β|·；77(3c·¢?^r¢wc>wks4(4):411-429 (2003))。西洛帕明亦已在活體内在神經管胚細胞瘤模 型中展現功效（Dahmane N等人 Deve/opweW 128:5201-5212 (2001) 及 Berman CM 等人 Scz'ewce 297:1559-1561 (2002))。 已在SHH反應性細胞模型中鑑別合成Hh拮抗劑，其中一些 祀向 Smo(Chen JK 等人 Proc· Α/αί/. Jcat/· 5W. [/以 99:14071-14076 (2002)，Frank-Kamenetsky Μ等人J. 1:10 (2002)及 Williams JA 等人/Voc. Wai/. dead 5W, tASd 100:4616-4621 (2003))而其他則乾向Smo下游的未知標起 (Chen JK等人/V〇c. dead· *SW. t/M 99:14071-14076 (2002) )。 報導已展示在廣泛範圍之人類腫瘤活組織檢查切片及細 胞株（包括小細胞肺癌、胰腺癌、食道癌、胃癌及膽道 癌、前列腺癌、乳癌、結腸癌及肝癌）中偵測到Hh過度表 現，有時伴隨Hh靶基因表現增加（Rubin ll等人胸仏〜 £)^cove〇； 5:1026-33 (2006))。 US 2006/04〇459描述作為適用於治療代謝病症之1型u_ β-羥基類固醇脫氫酶（lip_HSD1或HSD1)抑制劑之特定三 口伞 〇 現意外發現此等化合物為Hh路徑之抑制劑，尤其為如〇 拮抗劑。 I30071.doc 200901987 【發明内容】 本發明提供結構式I之化合物： r1r2r3c

或其醫藥學上可接受之睡布.、交澈丨八 心…“ 一“劑合物用於製造治療或預防 了由W拮抗作用改善之病狀之藥劑之用途，其中：

中之兩者表錢原子，且另_者表*氧原子； 與其所連原子-起表示視情況經卜2個氟原子取代 之環丁基環，且R3表示氫或氟原子； 或 R1表示甲基； R2表示甲基或氟原子；且 R3表示氟原子。 本發明亦提供一種治療或預防可由Sm〇拮抗作用改善之 病狀之方法，該方法包含向有需要之患者投與有效量之式 I化合物或包含式I化合物之組合物。 本發明亦提供式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶 劑合物用於製造治療或預防癌症之藥劑之用途。 本發明亦提供一種治療或預防癌症之方法，該方法包含 向有需要之患者投與有效量之式丨化合物或包含式〗化合物 之組合物。 在一實施例中，X及Y之一為〇且另一者為N，且Z為N。 130071.doc -10· 200901987 在另一實施例中，X為Ο，Y為N且Z為N。 在另一實施例中，RI為甲基，R2為氟且R3為氟。 /另-實施例中，RjR2與其所連原子_起形成經㈣ 鼠原子取代之環丁基環，且R3為氫。 —在另一實施例中’…及尺2與其所連原子—起形成3,3-二 氟環丁基，且R3為氫。 本發明亦提供結構式Π之化合物：

或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療或預防 可由Smo拮抗作用改善之病狀之藥劑之用途，其中：r|、 R2及R3係如上文所定義。 關於式Π之較佳識別係如先前關於幻所定義並加以必要 的變更。

J 本發明亦提供化合物： 5-(1，1-二氟乙基甲基_5_[2_(三氟甲基）苯基]_4H_ 1，2,4-三唑_3_基}雙環[2 2 2]辛小基二唑. 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療與^ 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明亦提供化合物： 5-(3,3-^ ^ T ^)-3-(4.{4.f ^.5.[2_(^ ^ f 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療與— 130071.doc 200901987 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明亦提供化合物： 5-0-氟小甲基乙基）-3_(M4_甲基_5_[2_(三氟甲基）苯基]· ㈣二心三嗤-3_基}雙環[2.2.2]辛小基m，2,4_鳴二唑； 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療與— 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明亦提供化合物：

2H-二4乙基）-5-(4-{4_甲基_5·[2_(三氟曱基）苯基]_4h_ 1，2,4-三吐-3-基}雙環基）]，3,4-嗯二唑； 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療與化。 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明亦提供化合物： 2-(3,3_二氣環丁基）-5-(M4_甲基·5例三氟甲基）苯基]_ .U〆-三唾_3.基}雙環[2 2 2]辛小基-嗔二唑； 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物用於製造治療與— 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明亦提供化合物： 2-U-氟-卜曱基乙基）-5_(M4_甲基_5_[2_(三敗甲基）苯基]_ 4H_1，2,4-三唑_3_基}雙環[2·2.2]辛小基)]，3,4-噁二唑； 或其醫藥學上可接受之睡$、、六杰，丨 J按又之鹽或，谷劑合物用於製造治療與Sm〇 拮抗作用相關之疾病（諸如癌症）之藥劑之用途。 本發明之料内亦包括上述Μ化合物之^氧化物。通 常’該等Ν-氧化物可在任何可用氮料上形成。Ν_氧化物 可藉由習知方式形成，諸如使式“匕合物在濕氧化銘存在 130071.doc -12- 200901987 下與過硫酸氫卸反應。 本發明之範疇内包括上述式I化合物之前藥。通常，該 等前藥將為易於在活體内轉化為所需式j化合物的式j化合 物之官能衍生物。選擇及製備合適前藥衍生物之習知程序 描述於（例如）"Design of Pr〇drugs" ’ H Bundgaard編，

Elsevier，1985 中。 如藥可為需要在體内轉化以釋放活性藥物且具有優於母 藥分子之改良傳遞特性之生物活性物質（"母藥"或"母分子") 之藥理學無活性衍生物。活體内轉化可（例如）為某種代謝 過程之結果，諸如羧酸酯、磷酸酯或硫酸酯之化學或酶促 水解，或敏感官能基之還原或氧化。 本發明之範疇内包括式I化合物及其鹽之溶劑合物，例 如水合物。 本發明之化合物可具有不對稱中心、對掌性軸及對掌性 平面（如 E.L. Eliel及 S.H. Wilen，⑽c/2㈣Μ” ⑽ 績也 John Wiley & s〇ns，心…γ_，i994，第"a 1190頁中所述)且可以外消旋體、外消旋混合物及以個別 非對映異構體形式存在’所有可能的異構體及其混合物， 包括光學異構體、所有該等立體異構體均包括於本發明 内。另外’本文所揭示之化合物可以互變異構體形式存在 且儘管僅描述一種互變異構結構，但兩種互變異構形式均 意欲涵蓋於本發明之範嘴内。 該等化合物可以不同異構形式存在，所有㈣異構形式 均涵蓋於本發明内。 130071.doc 13 200901987 結構式！之化合物可（例如）藉由自合適溶劑（例如τ醇或 乙酸乙酿或其混合物）分步結晶或經由使用光學活性固定 相之對旱性層析來分離為其個別非對映異構體。絕對立體 =學可藉由結晶產物或所衍生之結晶中間物的㈣線結晶 予(若必要)利用含有已知絕對構型之不對稱中心的試劑來 判定。 或者，-般結構式!之化合物之任何立體異構體可使用 學純起始物質或具有已知絕對構型之試劑藉由立體特定 合成來獲得。 該等化合物可以多種不同多晶型存在。 式I化合物之游離鹼及其醫藥學上可接受之鹽及立體異 構體均包括於本發明内。本發明之化合物可在胺及/或含Ν 雜每部分之Ν原子處經質子化以形成鹽。術語"游離驗”传 指非鹽形式之胺化合物。所涵蓋之醫藥學上可接受之趟不 僅包括關於本文所述之转定 ^ 4之特疋化合物所例示之鹽，而且包括 式I化合物游離形式之所有典型醫藥學上可接受之睡。所 =述之特定鹽化合物之游離形式可使用此項技術中已知之 =來分離。舉例而言’游離形式可藉由用合適稀驗水溶 ^如稀Ν3〇Η、碳酸鉀、氨及碳酸氣鈉水溶液）處理鹽來 生；涛離形式與其各別鹽形式的些許區別在於某些物理 =，諸如於極性溶劑中之溶解度，但對於本發明而言酸 ^及驗式鹽在其他方面在醫藥學上等效於其各別游離形 可藉由習知化學方法白人亡 自3有鹼性邛分之本發明化合物合 130071.doc 200901987 成本發明化合物之醫藥學上可接受之鹽。通常，藉由離子 交換層析或藉由使游離鹼與化學計量之量或過量之所需成 鹽無機酸或有機酸於合適溶劑或各種溶劑組合中反應來製 備驗性化合物之鹽。

因此’本發明化合物之醫藥學上可接受之鹽包括本發明 化合物之習知無毒性鹽，其係藉由使本發明鹼性化合物與 無機酸、有機酸或聚合酸反應來形成。舉例而言，習知無 毒性鹽包括衍生自諸如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、亞 硫酸、胺基磺酸、磷酸、亞磷酸、硝酸及其類似物之無機 酸之鹽’以及自諸如順丁烯二酸、雙羥萘酸、羥基順丁烯 二酸、麵胺酸、水揚酸、甲苯磺酸、曱烷碘酸、乙烷二磺 酸、草酸、天冬胺酸、乙烷磺酸、乙烷二磺酸、三氟乙酸 及其類似物之有機酸製備之鹽。合適聚合鹽之實例包括衍 生自諸如鞣酸、羧基甲基纖維素之聚合酸之鹽。較佳地， 本發明之醫藥學上可接受之鹽含有i當量式⑴化合物及j、 2或3當量無機酸或有機酸。更特定言之，本發明之醫藥學 上可接焚之鹽為三氟乙酸鹽或氣化物鹽。在一實施例中， 鹽為三氟乙酸鹽。在另一實施例中，鹽為氣化物。 上述醫藥學上可#受之鹽及其他典型冑藥學i可接受之 鹽的製備更詳細描述MBerg等人〇977) /以 66:1_19 中。 亦應主思本發明之化合物可能為内鹽或兩性離子，因為 在生理條件下化人物φ夕丄# 1 , 中之去質子化酸性部分（諸如羧基）可 為陰離子性的，而此雷科开各 此冤何可旎在内部抵消質子化或烷基化 130071.doc 200901987 驗性部分（諸如四級氮原子）之陽離子電荷。 本發月之化合物可單獨或與醫藥學上可接受之載劑、賦 』，稀釋制、佐劑、填充劑、緩衝劑、穩定劑、防腐 劑、潤滑劑組合以磐縫 、一 乂面樂組合物形式根據標準醫藥實務投與 哺乳動物（較佳人類）。 本發月之化合物可藉由任何適宜投藥途徑全身性/外周 性^在所需作用部位投與受檢者，包括（但不限於）口服（例 如藉由攝取）；局部（例如 g枯、4皮、鼻内、眼、類及壬 、下）；肺（例如藉由估用〜丨1、产 古 入或吹入療法）；直腸.降、# · ^ 飞鼻之及 腸’陰道’非經腸（例如藉由注射，包 括皮下、皮内、肌肉内、 ^ 靜脈内、動脈内、心内、鞘内、 舍柱内、囊内、囊下、眶内、腹膜内 關節内、蛛網臈下及胸骨 s 、皮下、 在皮下或肌肉内）。 ），及精由植入藥物儲槽（例如 J檢者可為真核生物、動物'脊椎動物、 ω動物（例如，豚鼠、 動物、备 瓦虱、大鼠、小鼠、、 如，小鼠）、女抖叙輪/ 鼠科動物（例 鼠）大科動物（例如，狗）、貓科 馬科動物（例如，馬）、$ (例如’貓）、 J逮長類動物、猿（例1 猿）、猴（例如，狨猴、狒挑 ，猴或類人 想很 弗狒）、類人猿（例如，大 ㈣、獲獲、長臂猿）或人類。 大猩獲、黑 =明亦提供包含1多種本發明之 可接受之載劑之醫藥組合物。含有活性成份=樂學上 可為適用於口服應用之 之酉藥組合物

v式，例如錠劑、D人A 水性或油性懸浮液、可 3錠、含片、 刀放之粉末或顆粒、 礼硬、硬膠囊 130071.doc 200901987 2膠囊、或糖漿或酏劑。可根據製造醫藥組合物之技術 …夫之任何方法來製備意欲用於口服應用之組合物，且 4專組合物可含有—或多種選自由以下各物組成之群之藥 …甜味劑、調味劑、著色劑及防錢，讀提供醫藥學 上優良且適口之贺碼〖 Μ ^ 性醫藥學上可接適用於製造_之無毒 又之賦形劑混合之活性成份。此等賦形劑 可為(例如)惰性稀釋劑，諸如碳酸詞、碳酸納、乳糖、鱗 _或她；成粒劑及崩解劑，例如微晶纖維素、交聯 趣甲纖維素納、玉米殿粉或褐藻酸；黏合劑，例如殿粉、 明膠、聚乙婦口比略㈣或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂 酸鎮、硬脂酸或滑石。趁劑可未經包衣或其可藉由已知技 術包衣以掩蔽藥物之不良味道或延遲在胃腸道内之崩解及 吸收，且藉此提供較長時間内之持續作用。舉例而士可 使用諸如經丙基甲基纖維素或經丙基纖維素之水溶崎味 材料，或諸如乙基纖維素、乙酸丁酸纖維素之延時材料。 u 供口服應用之調配物亦可呈現為硬明膠膠囊形式，其中 將活性成份與例如碳_、磷㈣或高嶺土之惰^固體稀 釋劑混合；或呈現為軟明膠膠囊形式，其中將活性成份血 諸如聚乙二醇之水溶性載劑或例如花生油、液體石壤或橄 欖油之油介質混合。 水性懸浮液含有與適用於製造水性懸浮液之賦形劑混入 的活性物質。料賦形劑為懸浮劑，例如Μ基纖_ 納、甲基纖維素、經丙基甲基纖維素、褐藻酸納、聚乙炼 。比…、黃箸膠及阿拉伯冑；分散劑或潤满劑 130071.doc 200901987 然產生之鱗脂，例如印磷脂，或氧化婦與脂肪酸之縮合產 物，例如聚氧乙婦硬脂酸醋，或氧化乙稀與長鍵脂族醇之 纩。產物例如十七伸乙基氧基録壤醇，或氧化乙稀與衍 生自脂肪酸及己聽醇之偽陆 哔您偏自日的細合產物，諸如聚氧乙烯山 梨糖醇單油酸醋，或氧化乙婦與衍生自脂肪酸及己酷醇軒 偏-曰的縮口產物’例如聚乙烯脫水山梨糖醇單油酸醋。 Γ ^ &亦可含有_或多種例如對經基苯甲酸乙醋或對 羥基苯甲酸正丙醋之防腐劑、一或多種著色劑、一或多種 調味劑及-或多種諸如魏、糖精或阿斯巴甜糖之甜味 劑。 '油«浮液可藉由將活性成份懸浮於例如花生油、橄欖 油、芝麻油或椰子油之植物油中或諸如液體石峨之擴物油 中來調配。油性懸浮液可含有增稠劑，例如蜂蟻、硬石蠟 或紅蠘醇。可添加諸如以上所列之甜味劑及調味劑以提供 適口之口服製劑。可藉由添加諸如丁基化經基大茵香喊或 α-生育紛之抗氧化劑來保存此等組合物。 適用於藉由添加水來製備水性懸浮液之可分散粉末及顆 拉提供與分散劑或濕潤劑、懸浮劑及一或多種防腐劑混合 之’舌I·生成伤。合適分散劑或濕潤劑及懸浮劑由上文已提及 /等丨τ亦可存在其他賦形劑，例如甜味劑、調味劑 ^著^，卜可藉由添加諸如抗壞錢之抗氧化劑 此 4組合物。 可HZ之醫藥組合物亦可為水包油型乳液之形式。油相 …、物油（例如，橄欖油或花生油）或礦物油（例如，液體 130071.doc -18- 200901987 石增* )或此專物暂夕、、日 物質之此σ物。合適之乳化劑可為天然產生 之磷脂（例如，大豆卩磁 穴卵磷知）及衍生自脂肪酸及己醣醇酐之 酉曰或偏自日（例如，脫水山梨糖醇單油酸醋）及該等偏醋與氧 t /縮σ產物（例如，聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸 8曰）。礼液亦可含有甜味劑、調味劑、防腐劑及抗氧化 劑。 ▲減及㈣j可使用甜味劑，例如甘油、丙二醇、山梨糖 醇或蔑糖調配。該耸鋼耐& + 1 λ 这4調配物亦可含有緩和劑、防腐劑、調 味劑及著色劑以及抗氧化劑。 醫藥、·且σ物可為無菌可注射水溶液之形式。可接受之媒 劑及溶劑中可使用水、林格氏溶液⑻㈣〜。iuti〇n)及等 張氣化鈉溶液。 無菌可注射製劑亦可為活性成份溶解於油相中之無菌可 注射水包油型微乳液。舉例而言，可首先將活性成份溶解 於大豆油與㈣脂之混合物中。接著將油溶液引入水與甘 油混合物中且經處理以形成微乳液。 可注射之溶液或微乳液可藉由局部快速注射引入患者血 流内。或者，可有利地以使得維持本發明化合物之怪定循 環濃度之方式投與溶液或微乳液。為維持該恒定濃度，可 利用連續靜脈内傳遞裝置。該裝置之實例為De^ c細^ PLUS™型5400靜脈泵。 醫藥組合物可為用於肌肉内及皮下投藥之無菌可注射水 性或油性懸浮液之形式。此懸浮液可使用上文已提及之彼 等合適分散劑或濕潤劑及懸浮劑根據已知技術來調配。無 130071.doc 200901987 困可注射製劑亦可為於益毒 劑中 …、母性非，！腸可接欠之稀釋劑或溶 .‘，，、痛可注射溶液或懸浮液，例如為於丨，3_丁二醇中 之溶液。此外，習知@ . 、、Λ八 用無鹵 '不揮發性油作為溶劑或懸 汙"質。對此而言，可使用人。 便用包括口成早甘油酯或二甘油酯 之任何無刺激性不揮發性、法。 / 另外，啫如油酸之脂肪酸亦 可用於製備注射劑。 /式1化合物亦可以栓劑形式投與以供直腸投與藥物。可 藉由將藥物與在當、;+ 興隹常，凰下為固體但在直腸溫度下為液體且因 此將在直腸中融化以釋放藥物的合適非刺激性賦形劑混合 來製備此等組合物。該等材料包括可可脂、甘油明膠、氫 化植物油、多種分早暑夕取r t 1 里之1乙一醇之混合物及聚乙二醇之 脂肪酸酯。 對於局部應用而言，可使用含有式I化合物之乳膏、軟 膏、凝膠、溶液或懸浮液等。（對於此施用而言，局部施 用可包括漱口劑及含漱劑）。 本發明之化合物可經由局部使用合適鼻内媒劑及傳遞裝 置以鼻内形式’或經由經皮途徑使用普通熟習此項技術者 熟知之經皮貼片之彼等形式投與。對於以經皮傳遞系統之 形式投與，在整個劑量方案中劑量投與當然將為連續而非 間斷的。亦可使用諸如可可脂、甘油明膠、氫化植物油、 多種分子量之聚乙二醇之混合物及聚乙二醇之脂肪酸酿之 基質以检劑形式傳遞本發明之化合物。 當將本發明之化合物投與受檢者時，所選劑量將視多種 因素而定，包括（但不限於）特定化合物之活性、個體症狀 13007 丨.doc •20- 200901987 :=:?!途徑'投藥時間、化合物排泄速率、治療 串者之年龄且σ使用之其他藥物、化合物及/或物質以及 患者之年齡、性別、體重、 扃狀、一般健康情況及先前病 史。化&物之量及投藥途徑最終將由醫師決定’但通常叫 量將在作用部位達到可達 艰吊j 有害副作用之局部濃度。作用而不造成實質傷害或 在整個治療過程中，，，壬辨 π 體内技樂可以連續或間斷投盥—

個劑量(例如以合適間隔分次投藥)。確定投藥最有效方式 及劑量之方法為熟習此項技術者所熟知且將隨療法所用調 配物、療法目@、所治療靶細胞及所治療受檢者而變化。 可進行單次或多次投藥，其中劑量及方式由治療醫師選 疋通常活性化合物之合適劑量在每天每公斤受檢者體 重約100 pg至約250 mg之範圍内。若活性化合物為鹽、 醋、前藥或其類似物時，投藥量係以母化合物為基準計 算’因此按比例增加所使用實際重量。 本發明提供抑制刺螺蛋白信號轉導路徑之活化，（例如） 以抑制由諸如Pteh功能缺失、㈣蛋白功能獲得、圓滑蛋 白功能獲得或Gli功能獲得之表型所導致之異常生長狀態 之方法’ λ包括使細胞與足以促進正常化活性、括抗正 常刺蜎蛋白活性、拮抗圓滑蛋白活性或拮抗GH活性之量 的式I化合物接觸（例如），以逆轉或控制異常生長狀態。 本發明進一步提供治療過度增生性病症（亦即癌症）以及 其他刺*1蛋白路徑介導之病症或病狀，改善其—或多種症 狀或減輕其嚴重性之方法。 130071.doc 21 200901987 已發現許多腫瘤及增生性病狀與刺蜎蛋白路徑相關。該 等細胞之生長及存活可受到本發明化合物治療影響。舉例 而言，小分子抑制刺蜎蛋白路徑已顯示會抑制基細胞癌 (Williams等人尸见100: 4616-21 (2003))、神經管胚細胞 瘤（Berman 等人《Sc/ewce 297:1 559-6 1 (2002))、膜腺癌、胃 腸癌及食道癌（Berman 等人 iVaiwre 425:846-51 (2003)及 WO 05/013800)、肺癌（Watkins等人iVaiwre 422:313-7 (2003))及 前列腺癌（Karhadkar 等人 iVaiMre 431: 707-12 (2004))之生 長。 另外，已顯示許多癌症類型之刺蜎蛋白路徑之活化作用 已失去控制，例如乳癌（Kubo等人Carwcer /ieiearc/? 64:6071-4 (2004))、肝細胞癌（Patil 等人（2005)第 96 屆 AACR年會（96th Annual AACR conference)，摘要 #2942及 Sicklick 等人（2005) ASCO 年會（ASCO annual meeting)’ 摘 要#9610)、血液惡性疾病（Watkins及Matsui，結果未公 開）、基底癌（Bale 等人 fiiiman MoZec. Genet. B:757-762 (2001)，Xie等人iVaiwre 391: 90-92 (1998))、神經管胚細胞 瘤（Pietsch等人 Ca加er 心 57: 2085-88 (1997))及胃癌（Ma 等人 Carci’wogewei'z··? 5 月 19 日，（2005) (EPub))。 已知功能障礙性突變斑片基因之表現出現在偶發性及家 族性BCC中。亦已在偶發性神經管胚細胞瘤、腦膜瘤、乳 癌、食道鱗狀細胞癌及膀胱腫瘤中發現斑片基因突變或缺 失（Oncogene (1998) 17, 1 167-1 172)。 本發明之化合物可用於治療或預防可由Smo拮抗作用改 130071.doc -22- 200901987 善之病狀。本發明之化合物亦適用於製造治療或預防本文 所述疾病之藥劑。 本文所提供之化合物、組合物及方法尤其被認為適用於 治療癌症。可由本發明之化合物、組合物及方法治療之癌 症包括（但不限於）贲門：肉瘤（血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋 肌肉瘤、脂肪肉瘤）、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪 瘤及畸胎瘤；肺：支氣管癌（鱗狀細胞癌、未分化小細胞 癌、未分化大細胞癌、腺癌）、肺泡（細支氣管）癌、支氣管 腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤、錯構瘤、間皮瘤；胃腸： 食道（鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤）、胃（癌 瘤、淋巴瘤、平滑肌肉瘤）、胰腺（胰管腺癌、胰島素瘤、 升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌腫瘤、VIP瘤）、小腸（腺癌、 淋巴瘤、類癌腫瘤、卡波西氏肉瘤（Karp〇si,s sarc〇ma)、 平滑肌肉瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經纖維瘤、纖維瘤）、 大腸（腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌肉 瘤）、結腸、結腸直腸、直腸；泌尿生殖道：腎（腺癌、威 爾姆斯氏瘤（Wilm’s tumor)[腎胚細胞瘤]、淋巴瘤、白血 病）、膀胱及尿道（鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌）、前列 腺（腺癌、肉瘤）、睪丸（精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、 畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺 瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤）；肝：肝細胞瘤（肝細胞癌）、膽管 癌、肝胚細胞瘤、血管肉瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤；骨. 骨源性肉瘤（骨肉瘤）、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、 軟骨肉瘤、尤文氏肉瘤（Ewing's sarcoma)、惡性淋巴瘤（網 130071.doc •23- 200901987 織細胞肉瘤）、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤索脊瘤、骨 軟骨瘤（骨軟骨外生性骨疢）、良性軟骨瘤、軟骨母細胞 廇軟月黏液纖維瘤、骨樣骨瘤及巨細胞瘤；神經系統： (月瘤血^瘤、肉芽瘤、黃瘤、畸形性骨炎）、腦膜 (,腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經膠質瘤病）、腦（星細胞瘤、神經 S胚、’、田胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、胚組織瘤[松果體 瘤]、多形性神經膠母細胞瘤、少突神經膠質瘤、神經鞘 瘤視、.，罔膜胚細胞瘤、先天性腫瘤）、脊髓（神經纖維瘤、 、 職瘤、神經膠質瘤、肉瘤）；婦科：子宮（子宮内膜癌）、 子呂頌（子宮頸癌、腫瘤前子宮頸發育不良）、印巢（印巢癌 [水液11囊腺癌、黏液性囊腺癌、未分類癌]、粒層泡膜細 胞瘤支持-間質細胞瘤、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤）、陰 門（鱗狀細胞癌、上皮内癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤）、 陰C (透明細胞癌、鱗狀細胞癌、葡萄狀肉瘤（胚胎性橫紋 肌肉瘤）、輸即管（癌瘤）；血液科：血液（骨髓性白血病[急 性及慢性]、急性淋巴母細胞白血病、慢性淋巴細胞白血 ，$、骨髓增生性疾病、多發性骨_、㈣發育不良症候 群）、霍奇金氏病（Hodgkin，s disease)、非霍奇金氏淋巴瘤 [惡性淋巴瘤];皮膚：惡性黑素瘤、基細胞癌、鱗狀細胞 癌卡波西氏肉瘤、胎記發育不良疲、、脂肪瘤、血管瘤、 皮膚纖維瘤、瘋痕瘤、牛皮癬；及腎上腺：神經母細胞 瘤。因此’如本文所提供之術語"癌細胞,,包括罹患以上鑑 別之病狀中任一者之細胞。 在-實施例中，本發明之化合物可用於治療或預防選自 130071.doc •24- 200901987 以下之癌症：基細胞癌、神經管胚細胞瘤、前列腺癌、胰 腺癌、乳癌、結腸癌、小細胞肺癌、肉瘤、淋巴瘤、白血 病、胃腸癌、多發性骨髓瘤、神經膠質瘤及肝細胞癌。可 由本發明之化合物治療或預防之其他癌症包括偶發性及家 族性基細胞癌、偶發性神經管胚細胞瘤、腦臈瘤、乳癌、 食道鱗狀細胞癌及膀胱癌。 ㈣刺螺蛋白路徑已展示可改善牛皮癣之症狀等人, 20q: 126-131 (2004)及 US 2004/0072913)。 〇 本發明提供式1化合物用於製造治療或預防牛皮癖之藥 劑之用途。 本發明亦提供一種治療或預防牛皮癣之方法，該方法包 含向有需要之患者投與有效量之式！化合物或包含式丨化合 物之組合物。 刺蜎蛋白活化已展示可刺激血管新生（p〇la等人胸⑼以 7(6):706·711(2〇〇1)及 Nagase 等人仏㈣ μ。山 p 10(6):595-604 (2005))且因此充當刺蜎蛋白拮抗劑之化合 物可適用作血管新生拮抗劑。 本發明提供式I化合物用於製造治療或預防血管新生之 藥劑之用途。 本發明亦提供一種治療或預防血管新生之方法，該方法 包含向有需要之患者投與有效量之式j化合物或包含式j化 合物之組合物。 可由式I化合物治療或預防之由血管新生引起、支持或 與其相關之疾病包括癌症、眼部新生血管性疾病、年齡相 130071.doc -25- 200901987 關性黃斑變性、糖尿病性視網膜病、早產兒視網臈病、角 膜移植物排斥反應、新生血管性t光眼、晶狀體後纖維素 增生、流行性角膜結膜炎、維生素A缺乏病、隱形眼鏡超 戴症、遺傳性角膜炎、上角膜緣角膜炎、翼狀胬肉乾燥性 角膜炎、修格氏病（Sjogren's)、痤瘡、水皰性結膜炎、梅 毒、分枝桿菌感染、脂質變性、化學燒傷、細菌性潰瘍、 真菌性潰瘍、單純疱疹感染、帶狀疱疹感染、原生動物感 染、卡波西氏肉瘤、蠶蝕性潰瘍、特瑞恩氏邊緣性變性 (Temen’s marginal degenerati〇n)、邊緣性角質層分離、類 風濕性關節炎、全身性狼瘡、多動脈炎、外傷、韋格納氏 類肉瘤病（Wegeners sarcoidosis)、鞏膜炎、史蒂芬-瓊森氏 病（Stevens Johnson disease)、類天疱瘡放射狀角膜切開 術、角膜移植物排斥反應、類風濕性關節炎、骨關節炎慢 性炎症（例如’潰瘍性結腸炎或克羅恩氏病（Cr〇hn,s disease))、血管瘤、奥韋瑞氏病（〇sier_Webe卜Rendu disease)及遺傳性出血性毛細管擴張。 在一實施例中’本發明之化合物適用於治療及預防與斑 片功能缺失相關之癌症。 在另一實施例中’本發明之化合物適用於治療及預防與 圓滑蛋白功能獲得相關之癌症。 式1化合物亦適用作癌症治療之化學及放射致敏劑。其 適用於治療先前已經歷或目前正在經歷或將經歷癌症治療 之哺乳動物°該等其他治療包括化學療法、放射療法、外 科手術或免疫療法（諸如癌症疫苗）。 130071.doc -26- 200901987 本發明之化合物尤其適用於與治療劑、抗癌劑及/或放 射治療劑組合。因此，本發明提供一種同時、單獨或相繼 投藥之本發明之式〗化合物與治療劑、抗癌劑及/或放射治 療劑之組合。本發明之化合物與其他抗癌劑可增效或協同 作用。本發明之化合物與另—抗癌劑之協同組合可允許使 用此等藥劑中-或兩者之較低劑量及/或本發明之化合物 與其他抗癌劑中-或兩者之較低劑量頻率及/或以可降低 ”將藥劑技與交檢者相關之任何毒性而不降低藥劑癌症治 療功效之較低頻率投與藥劑。另彳，協同作用可能產生此 等藥劑治療癌症之改良功效及/鱗低與單獨使用任-藥 劑相關之任何不良或不當副作用。 可根據此項技術中熟知之治療方案投與治療劑、抗癌劑 二或放射療法。熟習此項技術者將清楚瞭解投與治療 別、抗癌劑及/或放射療法 ’、 視所治療之疾病及抗癌劑及/ 或放射療法對該疾病之已知 臨庆®作用而變化。並且，根據熟練 床醫師之認識，治瘆方

^ ^ ’、，、 如，投藥之劑量及時間）可 鑒於所投與治療劑（亦即 ;τ ™ 柷秦生劑或放射）對患者之所觀 不作用及鑒於疾病對所 規 不良反應而變化。 …療劑之所觀察反應及所觀察 施例中，式1化合物可與—或多種選自消n 抗組織胺劑、抗癌劑、 m 酶抑制劑(例如，酪胺酸5即1、治療性抗體及蛋白激 在另… 激酶抑制劑)之藥劑組合投與。 社力實施例中，提供—M门士 丹 1化合物與抗癌劑之組合。、 時、單獨或相繼投藥之式 130071.doc -27. 200901987 與本發明之化合物組合使用之抗癌劑或化學治療劑之實 例可見於V.T. Devita及s. HeUman(編者）之c o/〇„c〇/〇g>;，第6版（2〇〇1年2月 日）Lippincott Williams & WUkins pubnshers 及 w〇 2006/061638中。普通熟習此項技術者將能夠基於所涉及 藥物及癌症之特定特徵來辨別哪些藥劑組合適用。該等藥 劑包括：雌激素受體調節劑、雄激素受體調節劑、類視黃 素受體調節劑、細胞毒素劑/細胞生長抑制劑、抗增殖 劑、異戊烯基蛋白質轉移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑 制劑及其他血管新生抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉錄 酶抑制劑、細胞增殖及存活信號轉導之抑制劑、雙膦酸 鹽、芳香酶抑制劑、siRNA治療劑、分泌酶抑制劑、干 擾受體酪胺酸激酶（RTK)之藥劑及干擾細胞週期檢查點之 藥劑。該等藥劑之實例提供於WO 2006/061 638中。 適用於本發明之組合療法中之抗癌劑包括（但不限於）： 1)生物鹼，包括微管抑制劑（例如，長春新鹼（Vincristine)、 長春驗（Vinblastine)及長春地辛（Vindesine)等）、微管穩定 劑（例如，太平洋紫杉醇（paclitaxel)[紫杉酌'(Taxol)]及多稀 紫杉醇（docetaxel)、紫杉德（Taxotere)等），及染色質功能 抑制劑，包括拓撲異構酶抑制劑，諸如表鬼臼素（例如， 依託泊苷（Etoposide)[VP-16]及替尼泊苷（teniposide)[VM-26]等），及標靶拓撲異構酶I之藥劑（例如，喜樹鹼 (Camptothecin)及伊立替康（Isirinotecan)[CPT-1 1]等）；2) 共價DNA結合劑[烷基化劑]，包括氮芥子氣（例如，氮芥 130071.doc -28- 200901987 (Mechloretharnine)、苯丁 酸氮芥（chlorambucil)、環磷醯 胺（Cyclophosphamide)、異環磷醯胺（ifosphamide)及白消 安（busulfan)[邁樂寧（Myleran)]等）、亞硝基脲（例如，卡莫 司汀（Carmustine)、洛莫司汀（Lomustine)及司莫司汀 (Semustine)等）及其他烷基化劑（例如，達卡巴嗪 (Dacarbazine)、羥甲基三聚氰胺、塞替派（Thi〇tepa)及絲裂 黴素（Mitomycin)等）；3)非共價DNA結合劑[抗腫瘤抗生 素]’包括核酸抑制劑（例如，放線菌素D(Dactinomycin)[放 線菌素（Actinomycin)D]等）、蒽環黴素（anthracycline)(例 如，柔紅徽素（Daunorubicin)[道諾黴素（Daunomycin)及柔 毛徽素（Cerubidine)]、經道諾紅徽素（Doxorubicin)[阿黴素 (Adrianycin)]及去甲氧柔紅黴素（Idarubicin)[伊達比星 (Idamycin)]等）、蒽二酮（例如，蒽環黴素類似物，諸如[米 托蒽酉昆（Mitoxantrone)]等）、博萊黴素（bleomycin)(爭光黴 素（Blenoxane))等及普卡黴素（plicamycin)(米拉黴素 (Mithramycin))等；4)抗代謝物，包括抗葉酸劑（例如，曱 胺0票吟（Methotrexate)、菲林（Folex)及美沙（Mexate)等）、 嗓呤抗代謝物（例如，6-疏基嗓吟[6-MP，°票令硫醇 (Purinethol)]、6-硫鳥嗓吟[6-TG]、硫嗤0票吟（Azathioprine)、 阿昔洛韋（Acyclovir)、更昔洛韋（Ganciclovir)、氣去氧腺 苷、2-氯去氧腺苷[CdA]及2’-去氧助間型黴素（2，-Deoxycoformycin)[喷司他丁（Pentostatin)]等）、鳴 π定拮抗劑 (例如，氟嘲。定[例如，5-氟尿嘲咬（阿杜辛（Adrucil))、5-氟 去氧尿苷（FdUrd)(氮尿苷（Floxuridine))]等）及胞嘧啶阿拉 130071.doc -29- 200901987 伯糖苷（例如，赛德薩（Cytosar)[ara_c]及氟達拉濱 (FhKlarabine)等）；5)酶’包括^天門冬醯胺酶；6)激素， 包括糖皮質激素，諸如抗雌激素（例如，他莫昔芬 (Tamoxifen)等）、非類固醇抗雄激素（例如，敗他胺（Fiu_ide)

等）及芳香酶抑制劑（例如，安美達錠（anastr〇z〇le)[阿那曲 唑（Anmidex)]等）；7)鉑化合物（例如，順鉑（cispiatin)及卡 波始（Carb〇platin)等）；8)與抗㈣物、毒素及/或放射性核 素等結合之單株抗體；9)生物反應調節劑（例如，干擾素 [例如，IFN-α等]及介白素[例如，IL_2等]等” ι〇)接受性 免疫療法；11)造血生長因子；12)誘導腫瘤細胞分化之藥 齊J (例如王反-視汽酸等），1 3)基因療法技術；丨4)反義療 法技術；15)腫瘤疫苗；16)對抗腫瘤轉移之療法（例如，巴 汀米特（B—)等）；17)血管新生抑制劑及激酶抑制 劑0 在-實施例中，用作第二化合物之血管新生抑制劑係選 自酪胺酸激酶抑制劑、表皮源生長因子抑制劑、纖維母細 胞源生長因子抑制劑、血小板源生長因子抑制劑、 MMP(基質金屬蛋白酶）抑制劑、整合素阻斷劑、干擾素· α、介白素-12、多硫酸戊聚糖、環加氧酶抑制劑' 羧醯胺 基三唑、康柏斯達汀（Combretastatin)A_4、角鯊胺、 氯乙醯基-羰基-煙麯黴醇（fumagiH〇1)、沙立度胺 (thahdomide)、血管生長抑素、肌鈣蛋白_丨或針對之 抗體。在一實施例中’雌激素受體調節劑為他莫昔芬或雷 洛昔芬（raloxifene)。 130071.doc -30- 200901987 適用於本發明之組合療法中之治療性抗體包括對抗 HER2蛋白之抗體，諸如曲妥珠單抗（trastuzuinab);對抗生 長因子或生長因子受體之抗體，諸如標無血管内皮生長因 子之貝伐單抗（bevacizurnab)及標乾表皮生長因子之〇si_ 774 ;標乾整合素受體之抗體，諸如維他辛（Vitaxin)(亦稱 為MEDI-522)及其類似物。 在一實施例中，提供一種治療或預防基細胞癌 癌、前列腺癌、肉瘤、淋巴瘤、白血病、胃腸癌、多發性 骨髓瘤、小細胞肺癌、神經膠質瘤、乳癌、肝細胞癌或神 經管胚細胞瘤之方法，該方法包含向有需要之患者投與有 效罝之式I化合物與另一抗癌劑之組合。 在一實施例中，提供一種治療或預防牛皮癬之方法，該 方法包含向t 之患者投與錢f之式【化合物與一或 多種其他抗牛皮癬劑之組合，該等抗牛皮癬劑包括(但不 限於)皮質類固醇、焦油、鈣泊三醇(calcip〇triene卜他紮 羅Wtazarotene)、鈣調神經磷酸酶抑制劑、紫外線輻射、 甲胺嗓τ、類視黃素、環孢素㈣山—心）、免疫調節藥 物、依那西普（etan⑽ept)、阿來法塞⑷咖啡）、依法利 珠單抗（efalizumab)及英利昔單抗（祕_叫。 Z弋之化口物可與放射療法組合使用。術語"放射療法” 2使用電磁或粒子放射治療瘤形成且包括使及 電離放射。 h 13007i.doc 200901987 獨或與放射療法一起使用本發明之化合物引起。為預防或 治療嘔吐，本發明之化合物可與其他止吐劑結合使用，尤 其是神經激肽-1受體拮抗劑；5HT3受體拮抗劑，諸如昂丹 司瓊（ondansetron)、格拉司瓊（granisetron)、托烷司瓊 (tropisetron)及紮替司瓊（zatisetr〇n) ; GABAB 受體激動 劑，諸如巴氯芬（baclofen);皮質類固醇，諸如代卡龍 (Decadron)(地塞米松（dexamethasone))、可那龍（Kenalog)、 阿斯托克（Aristocort)、納沙立德（Nasalide)、布地奈德 (Preferid)、苯可特（Benecorten)或諸如美國專利第2,789，118、 2,990,401 ' 3,048,581 > 3,126,375 ' 3,929,768 ' 3,996,359 ' 3,928,3 26及3,749,712中所揭示之其他藥物；抗多巴胺藥 物，諸如吩噻嗪（例如，丙氣拉嗪（prochl〇rperazine)、氟奮 乃# (fluphenazine)、硫利達嗓（thioridazine)及美索達嗪 (mesoridazine))、曱氧氣普胺（met〇cl〇prarnide)或屈大麻酚 (dronabinol)。在另一實施例中，揭示與選自神經激肽]受 體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑及皮質類固醇之止吐劑之聯 合療法用於治療或預防可能因投與本發明化合物所引起的 "區吐。 本發明之化合物亦可與用於治療貧血之藥劑一起投與。 該貧血治療劑為（例如）連續紅血球生成受體活化劑（諸如以 依伯汀（epoetin alfa))。 本發明之化合物亦可與用於治療嗜中性白血球減少症之 藥劑-起投與。該嗜中性白血球減少症治療劑為(例 節嗜中性白血球之產生及功能之造血生長因子，諸如人類 130071.doc •32* 200901987 =細胞群落刺激因子（G_CSF)。G_CSF之實例包括非格司 亭（filgrastim)。 本發明之化合物亦可適用於與s i R N A治療劑組合治療或 預防癌症。 本發明之化合物亦適用於與以下治療劑組合治療癌症： 阿巴瑞克（abarelix)(pienaxis depot®)、阿地白介素 (aldesleiikin)(Pr〇kine®)、阿地白介素（Pr〇leukin®)、阿來組 單抗（Alemtuzumabb)(Campath®)、亞利崔托寧（aiitretin〇in) (Panretin )、別嗓醇（allopurinol)(Zyloprim®)、六甲嘲胺 (altretamine)(Hexalen®)、胺填汀（amifostine)(Ethy〇l®)、安 美達鍵（Arimidex®)、三氧化二坤（Trisenox®)、天門冬醯胺 酶（Elspar®)、阿紮胞苷（azaciticiiiie)(Vidaza®)、貝伐單抗 (Avastin®)、貝瑟羅汀（bexarotene)膠囊（Targretin®)、貝瑟 羅汀凝膠（Targretin®)、博萊黴素（Blenoxane®)、蝴替佐米 (bortezomib)(Velcade®)、白消安靜脈注射劑（Busulfex®)、 白消安口服劑（Myleran®)、卡普睪酮（calusterone) (Methosarb®)、卡培他濱（capecitabine)(Xeloda®)、卡在白 (Paraplatin®)、卡莫司汀（BCNU®、BiCNU®)、卡莫司汀 (Gliadel®)、卡莫司汀與聚苯丙生（Polifeprosan)20移植物 (Gliadel Wafer®)、塞來昔布（celecoxib)(Celebrex®)、西妥 昔單抗（cetuximab)(Erbitux®)、苯丁酸 It 芥（Leukeran®)、 順銘（Platinol®)、克拉屈濱（cladribine)(Leustatin®、2-CdA®)、 氯法拉濱（clofarabine)(Clolar®)、環構醯胺（Cytoxan®、 Neosar®)、環填醯胺（Cytoxan Injection®)、環填醯胺 130071.doc -33- 200901987 (Cytoxan Tablet®)、阿糖胞苷（cytarabine)(Cytosar-U®)、阿 糖胞苷脂質體（DepoCyt®)、達卡巴嗪（DTIC-Dome®)、放線 菌素 D(Cosmegen®)、α達貝汀（Darbepoetin alfa)(Aranesp®)、 柔紅黴素脂質體（DanuoXome®)、柔紅黴素（道諾黴素） (Daunorubicin®)、柔紅黴素（道諾黴素）（Cerubidine®)、地尼 介白素（Denileukin diftitox)(Ontak®)、右雷佐生（dexrazoxane) - (Zinecard®)、多浠紫杉醇（Taxotere®)、多柔比星（doxorubicin) (Adriamycin PFS®)、多柔比星（Adriamycin®、Rubex®)、多 柔比星（Adriamycin PFS Injection®)、多柔比星脂質體 (Doxil®)、丙酸屈他雄酮（DROMOSTANOLONE PROPIONATE) (DROMOSTANOLONE®)、丙酸屈他雄酮（MASTERONE INJECTION®)、依洛特氏 B 溶液（Elliott’s B Solution) (Elliott's B Solution®)、表柔比星（epirubicin)(Ellence®)、α 依伯汀（epogen®)、爾洛替尼（erlotinib)(Tarceva®)、雌莫司 汀（estramustine)(Emcyt®)、填酸依託泊 ^(Etopophos®)、依 託泊苷（VP-16)(Vepesid®)、依西美坦（exemestane)(Aromasin®)、 1 非格司亭（Neupogen®)、氮尿苦（動脈内）(FUDR®)、氟達拉 濱（Fludara®)、氟尿嘧啶（5-FU)(Adrucil®)、氟維司群 , (fulvestrant)(Faslodex®)、吉非替尼（gefitinib)(Iressa®)、吉 西他濱（gemcitabine)(Gemzar®)、吉妥珠單抗奥°坐米星 (gemtuzumab ozogamicin)(Mylotarg®)、乙酸戈舍瑞林 (goserelin acetate)(Zoladex Implant®)、乙酸戈舍瑞林 (Zoladex®)、乙酸組胺瑞林（histrelin acetate)(Histrelin implant®)、經基脲（Hydrea®)、替坦異貝莫單抗（Ibritumomab 130071.doc -34- 200901987

Tiuxetan)(Zevalin )、伊達比星（idamycin®)、異環填醯胺 (IFEX )、甲石買酸伊馬替尼（imatinib mesylate)(Gleevec®)、 α干擾素 2a(Roferon A®)、α干擾素-2b(Intron A®)、伊立替 康（Camptosar )、來那度胺（ienaiid〇mide)(Revnmid®)、雷 曲 σ坐（letrozole)(Femara®)、亞葉酸（ieucovorin)(Wellcovorin®、 Leucovorin )、乙酸免丙立德（LeUpr〇iide Acetate)(Eligard®)、 左旋咪唑（levamisole)(Ergamisol®)、洛莫司汀（CCNU) (CeeBU )、氮介（氮芬子氣）(Mustargen®)、乙酸曱地孕酮 Γ' (megestrol acetate)(Megace®)、美法侖（melphalan)(L- PAM)(Alkeran®)、巯基嘌呤（6-MP)(Purinethol®)、美司鈉 (mesna)(Mesnex®)、美司鈉（Mesnex tabs®) ' 甲胺喋呤 (Methotrexate®)、曱氧沙林（methoxsalen)(Uvadex®)、絲裂 黴素 C(Mutamycin®)、米托坦（mitotane)(Lysodren®) ' 米托 蒽酿>(Novantrone®)、苯丙酸諾龍（nandrolone phenpropionate) (Durabolin-50®)、奈拉濱（nelarabine)(Arranon®)、諾氟珠 單抗（Nofetumomab)(Verluma®)、奥普瑞白介素（Oprelvekin) f , k..’ （Neumega®)、奥沙利銘（oxaliplatin)(Eloxatin®)、太平洋紫 杉醇（Paxene®)、太平洋紫杉醇（Taxol®)、太平洋紫杉醇蛋 白質結合顆粒（Abraxane®)、帕利夫明（palifermin) (Kepivance®)、帕米膦酸鹽（pamidronate)(Aredia®)、培加 酶（pegademase)(Adagen (Pegademase Bovine)®)、培門冬酶 (pegaspargase)(〇ncaspar®)、聚乙二醇化非格司亭 (Pegfilgrastim)(Neulasta®)、培美曲塞二鈉（pemetrexed disodium)(Alimta®)、噴司他丁（Nipent®)、0辰泊漢院 130071.doc -35- 200901987 (pipobroman)(Vercyte®)、普卡黴素（米拉黴素）(Mithracin®)、 卟吩姆納（porfimer sodium)(Photofrin®)、丙卡巴肼 (procarbazine)(Matulane®)、米帕林（quinacrine)(Atabrine®)、 拉布立酶（Rasburicase)(Elitek®)、利妥昔單抗（Rituximab) (Rituxan®)、沙格司亭（sargramostim)(Leukine®)、沙格司 亭（Prokine®)、索拉非尼（sorafenib)(Nexavar®)、鏈佐星 (streptozocin)(Zanosar®)、川頁丁稀二酸舒尼替尼（sunitinib maleate)(Sutent®)、滑石（Sclerosol®)、他莫昔芬（Nolvadex®)、 替莫 11 坐胺（temozolomide)(Temodar®)、替尼泊苦（VM-26)(Vumon®)、睪内赂（testolactone)(Teslac®)、硫鳥嗓呤 (6-TG)(Thioguanine®)、塞替派（Thioplex®)、拓撲替康 (topotecan)(Hycamtin®)、托瑞米芬（toremifene)(Fareston®)、 托西莫單抗（Tositumomab)(Bexxar®)、托西莫單抗/1-1 3 1托 西莫單抗（Bexxar®)、曲妥珠單抗（Herceptin®)、維A酸 (tretinoin)(ATRA)(Vesanoid®)、烏拉莫司汀（Uracil Mustard) (Uracil Mustard Capsules®)、伐柔比星（valrubicin)(Valstar®)、 長春驗（Velban®)、長春新驗（Oncovin®)、長春瑞賓 (vinorelbine)(Navelbine®)、伏立諾他（vorinostat)(Zolinza®) 及0坐來膦酸鹽（zoledronate)(Zometa®) 〇 關於本發明之化合物之術語"投藥"及其變體（例如"投與" 化合物）意謂將化合物或該化合物之前藥引入需要治療之 動物系統内。當與一或多種其他活性劑（例如，細胞毒性 劑等）組合提供本發明之化合物或其前藥時，”投藥”及其變 體分別應理解為包括同時及相繼引入該化合物或其前藥及 130071.doc -36- 200901987 其他藥劑。 欲涵蓋包含指定量之指定 定成份之組合直接或間接 如本文所用，術語,，組合物”意 成份之產物，以及由指定量之指 產生之任何產物。 生12所用之術語"治療有效量”意謂研究員、獸醫、醫 =其他'床診療者所探尋的在組織、系統、動物或人類 中引發生物或醫藥反應之活性化合物或醫藥劑之量。戈人類

λ術°…療癌症"或·'癌纟治療"係指向罹患癌症病狀之哺 礼動物杈藥，且係指藉由殺死癌細胞來減輕癌症病狀之作 用而且係指引起抑制癌症生長及/或轉移之作用。 在未描述中間物及起始材料之合成的情況下，此等化合 物可購得或可自可購得之化合物藉由標準方法或藉由㈣ 本文之上述合成、流程及實例來製備。 法轉化為其他式I化合物 式I化合物可藉由已知方法或藉由本文實例中所述之方 在本文所述之任何合成程序期間，可能必需及/或需要 保濩任何有關分子上之敏感性或反應性基團。此可藉助於 省头保°蔓基來達成，諸如如g Oowp k 办祕e川，第3版，Greene，丁 w及貿此，p G Mm” Interscience，1999 及 K〇cienski，p j 卜〇零 Thieme，1994中所述之保護基。保護基可在適宜後續階段 使用此項技術中已知之方法移除。舉例而言，當存在 Boc(第三丁氧羰基）或苯甲羰基保護基時，其可藉由在約 室溫下添加諸如TFA、DCM及/或MeCN之溶劑來移除。化 130071.doc •37· 200901987 合物亦可使用標準方法，諸如在氫氣氛下在諸如曱醇之溶 劑中用諸如Pd/C之催化劑處理來氫化。亦可在約室溫下在 HC1及1,4-二噁烷存在下添加EtOAc來移除Boc或苯曱羰基 保護基。 當本發明之化合物具有對掌性中心時，可藉由標準分離 方法，諸如使用SFC自外消旋混合物分離非對映異構體。 發現本文所述且經下述檢定測試之例示性化合物具有小 於25 μΜ之IC5G值。 r 說明中所用之縮寫： AIBN:2,2|-偶氮雙異丁腈；BOC:第三丁氧羰基；9-BBN:9-硼雜雙環[3·3.1]壬烷；Bn:苯甲基；nBuLi:正 丁基鋰；Cbz :苯甲氧羰基；CDI : 1,1’-羰基二咪唑； MeOTf :三氟曱烷磺酸曱酯；（C0C1)2 :草醯氯；DAST : (二乙胺基）三氟化硫；DCM :二氯甲烷；DIEA :二異丙基 乙胺；DMAP : 4-(二曱胺基）吡啶；DMC : 2-氣-1,3-二甲 基咪咪鑌氯化物；DMF : N，N-二甲基曱醯胺；Et :乙基； U Et3N :三乙胺；EtOAc :乙酸乙酯；EtOH :乙醇；

Et2Zn :二乙基鋅；FCS :胎牛血清；HATU : 0-(7-氮雜苯 并三唑）-队队^，：^'-四甲基脲鑌六氟磷酸鹽；厘6:曱基； MeCN :乙腈；MeOH :曱醇；mCPB A :間-氣過苯甲酸； MS :質譜；NaOAc :乙酸鈉；NBS : N-溴琥珀醯亞胺； PBS :磷酸鹽緩衝生理食鹽水；Ph :苯基；PyBROP :溴 三吡咯啶基鎮六氟磷酸鹽；PPh3 :三苯膦；pyr :吡啶； SOCl2 :亞硫酸氯；TFA :三氟乙酸；TFFH : N，N，N',N'-四 130071.doc -38- 200901987 甲基曱脒鏽六氟磷酸鹽；THF :四氫呋喃；TLC :薄層層 析；及TsOH :對甲苯磺酸。

Shh-發光II(Shh-Light II)報導體檢定 設計檢定以在同一孔中量測螢火蟲及海腎螢光素酶。 在檢定之前’在生長培養基中培養Shh-發光η細胞 (ATCC 目錄號 CRL-2795)。 檢定方案： 第-1天：在DMSO/抑制劑存在下在檢定培養基中以75 pL/孔接種60,000個Shh-發光II細胞。 第0天：在37。(： 10% C〇2下培育隔夜後添加於水中3 μΜ 嘌呤嗎啉胺（Purmorphamine)(Calbiochem 540220) 〇 第1天：在37°C 10% C〇2下培育30小時後進行檢定，直 接向生長培養基中之細胞： -添加75 μΐ DualGlow螢光素酶試劑（Promega, E2940) -在黑暗中培育1〇 min -在照度計PerkinElmer製造之TopCount上讀盤 _添加 75 μΐ DualGlow Stop & Glow -在黑暗中培育1 〇 m i η -在照度計PerkinElmer製造之TopCount上讀盤 -輸出結果為螢火蟲/海腎計數之間的比值 生長培養基： 對於生長： 〇]\^河：含有〇11(}/1^?乂1'及吡哆醇（018(：0目錄號41966-029)之杜貝卡氏經改良依格培養基（Dulbecco’s Mod Eagle 130071.doc -39* 200901987

Medium)。培養基已補充10% FCS(胎牛血清）、1%青黴素-鏈黴素（10 mg/ml)(GIBCO, 15140-114)及 1% L-麩醯胺酸 200MM(100x)(GIBCO，3042190)及 0.4 mg/ml G418(Roche) 及 0.15 mg/ml 齊奥辛（Zeocyne)(Invitrogen R-250-01)。在 10% co2下培養細胞。 對於檢定： DMEM :含有0.11 G/L Pyr及吡哆醇（GIBCO目錄號 2 1〇63-〇45)而無酚紅之杜貝卡氏經改良依格培養基。培養 基已補充2% FCS(胎牛血清）、1%青黴素-鏈黴素（1〇 mg/ ml) (GIBCO，15140-114)及 1°/。L-麩醯胺酸 200MM(100x) (GIBCO, 3042190)。在 10% C02 0.25% DMSO下培養細 胞。 SHH Smo結合檢定 在經轉染之Cos7細胞中，能夠量測到SMO配位體西洛帕 明-氟棚螢（bodipy)之結合。 檢定方案： ( 第-1天：在10。111皮氏培養皿中接種3,500,000個（：〇87細 胞。 第❶天.用 Lipofectamine2000(Invitrogen)及質體 pSMO-Myc轉染細胞。5小時後在96孔培養盤中在生長DMEM(l〇 % FCS)中接種細胞，每1〇〇 4丨孔15,〇〇〇個細胞。 第1天：轉染後24小時，將培養基變換為檢定DMEM(無 盼紅’ 2% FCS)且添加化合物/0.5% DMSO。在37°C 5% C02下培育。 130071.doc -40- 200901987 第2天：16小時後，添加西洛帕明-氟蝴螢（Toronto Research Chemical, B674800)，最終濃度為 50 nM。在 37°C 5% C02下培育4小時。接著用3.5%甲醛以100 μΐ/孔固定細 胞10分鐘。將細胞用PBS洗滌3次且用1.5 μΜ碘化丙啶染色 細胞核。在Acumen探測器上讀數。 -生長培養基： 對於生長： DMEM :含有 0.11 G/L Pyr及"比哆醇（GIBCO, 41966-029) 之GIBCO杜貝卡氏經改良依格培養基。培養基已補充10% FCS(GIBCO, 10106-169)、1% 青黴素-鏈黴素（10 mg/ml) (GIBCO, 15140-1 14)及 1% L-麩醯胺酸 200MM(100x) (GIBCO, 3042190)。在5% C02下培養細胞。 對於檢定： DMEM :含有 0.11 G/L Pyr 及吡哆醇（GIBCO, 21063-045) 而無酚紅之GIBCO杜貝卡氏經改良依格培養基。培養基已 補充 2% FCS(GIBCO, 10106-169)、1°/。青黴素-鏈黴素（10 mg/ml)(GIBCO, 1 5 1 40-1 1 4)及 1 % L-麩醯胺酸 200MM (100x)(GIBCO, 3042190)。在 5% C02 0.5% DMSO下培養細 胞。 對鼠科神經管胚細胞瘤細胞之抗增殖活性 量測Smo拮抗劑抑制原發性同種異體移植物-擴增鼠科神 經管胚細胞瘤細胞增殖之能力。與已建立之腫瘤細胞株相 反，移植後之此等細胞中HH路徑仍保持活性，且腫瘤之 存活/增殖仍維持對HH路徑活化之特異相關性。在無或有 130071.doc -41 - 200901987 合成性Smo激動劑存在下，測定抑制細胞生長5 0%時所需 之濃度（CC50)。 自移植腫瘤獲得神經管胚細胞瘤細胞（Oncogene (2002) 21，75 80-75 84)且以1〇〇,〇〇〇個細胞/毫升之濃度再懸浮於 NPMM中，在100 μί NPMM中以5000個細胞/孔之初始濃度 接種於96孔微量培養盤中。在無或有〇·3 μΜ合成激動劑存 在下，添加經連續稀釋7個點（0.03-25 μΜ濃度範圍，0.25% DMSO)之Smo拮抗劑。接著在37。(3及5% c〇2T，將細胞培 育96 h，且在添加BrdU後再培育24 h。接著固定細胞，且 進行處理以便使用BrdU化學發光免疫檢定套組（R〇che Applied Science目錄號1 1669915〇〇1)按照製造商說明書偵 測與 DNA-結合之 BrdU。使用 Top Coupt儀器（Perkin Elmer) 里測彳δ號，在遞增拮抗劑濃度存在下，依據殘餘Brdu之結 合量測定CC5Q值。 本發明之化合物能夠隨劑量變化之方式抑制神經管胚細 胞瘤細胞增殖。此阻斷作用會受到添加選擇性&。激動劑 而被抑制’此表示可因干擾此等細胞中HH信號轉導而選 擇性抑制增殖作用。無激動劑存在下測得之％值為〇3 μΜ^而添加激動劑使CC5〇值移至大於3〇 在本發明之 狹窄範.内對於所有其他結構相關化合物均可合理預期類 原發性小鼠神經管胚細胞瘤異種

Smo拮抗劑對皮下移植、 移植物生長之作用 檢定本發明 之化合物於活體内抑制刺蜎蛋白 信號轉導相 130071.doc 42· 200901987 關性腫瘤生長之能力。採用以源自出生後受輻射之Ptch-l 雜合小鼠之原發性神經管胚細胞瘤進行之異種移植物模 式。 ' 使源自出生後受輻射之Ptch_/+小鼠小腦之神經管胚細胞 腫瘤（Oncogene (2〇〇2) 21，7580 - 7584)經皮下在活體内連 續繼代。對於此研究’移植腫瘤且在5週齡免疫免疫功能 - 不全小鼠中在50% Matrigel存在下皮下注射神經管胚細胞 瘤細胞之單細胞懸浮液（250萬個細胞/小鼠）。當腫瘤達到 f、 150 mm3之平均體積時’將小鼠隨機化且用在0.5%曱基纖 維素中稀釋之本發明化合物經口以4〇 mg/kg或80 mg/kg每 天治療一次’或以80 mg/kg每天治療兩次。對照小鼠僅用 相同體積之媒劑治療。每週量測腫瘤體積兩次。此實驗表 明本發明之化合物在40及80 mg/kg/天之劑量下引發腫瘤生 長抑制且在80 mg/kg每天兩次之劑量下導致腫瘤收縮。 在本發明之狹窄範疇内對於所有其他結構相關化合物均 可合理預期類似活性。 【實施方式】 實例1

5-(1,1-二氟乙基）-3-(4-(4-甲基·s_【2(三氟甲基）苯基卜4H_ 1，2,4-二唑-3-基}雙環口二…辛+基卜^心喊二唑…⑴ 130071.doc -43 - 200901987 Μ6〇2〇

co2h (1) (CICO)2, dmf ch2ci2_ (2) CH3NH2, THF ch2ci2

Me〇2<? (1)(CICO)2, DMF ch2ci2

cf3 甲苯，回流

1-B 1-Α

KOH, CH3OH H2〇

(1) CDI, CH2CI2 (2) NH4OH

三聚氣化氮 DMF

(1) CH3CF2C02H,

HATU, DIEA, DMF

(2) 110° C, 甲笨或 DMF 步驟A : 在氮氣氛下將4-(甲氧羰基）雙環[2.2.2]辛烷-1-甲酸卜A (Chapman，N. B.等人 J. Org. Chem.，1970，35, 917)(4.0 g， 18.9 mmol)溶解於12 mL無水二氯甲烷中，用草醯氯（於二 氣甲烷中2M，28 mL，56 mmol)處理且隨後用0.5 ml DMF處 理。將反應物在室溫下在氮氣氛下攪拌9〇 min，接著蒸發 且置於真空下歷時2〇 m in。將酸氯化物溶解於無水二氣甲 13007l.doc •44· 200901987 烷（75 mL)中，在冰浴中冷卻，且接著用甲胺溶液（於THF 中2M，57 mL，113 mmol)逐滴處理。添加胺後，移除冷卻 浴且將反應物在周圍溫度下攪拌3〇 min。將混合物用1〇〇〇 mL二氯甲烷稀釋且用〗Ν Ηα水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶 液及鹽水洗滌。將有機層經無水硫酸鈉乾燥且蒸發。藉由 急驟矽膠層析，用0-5% MeOH/CH2Cl2梯度溶離來純化產 物以得到呈白色固體狀之4-[(甲胺基）羰基]雙環[2.22]辛 烷-1-甲酸甲酯 1-B。MS (ESI+)=226.2 (M+1)。 步驟B : 將4-[(曱胺基）擬基]雙環[2.2,2]辛烧-1-甲酸甲西旨i_b (2.76 g，12·3 mmol)溶解於二氣甲烷（1〇〇 ml)中，且將草醯氣（於 DCM中2.0 M，15.3 ml)添加至所得溶液中，接著添加 〇ΜΡγ〇·19 ml，2_45 mmol)。接著將反應混合物在室溫下在 氮下攪拌2小時’之後將其濃縮且用曱苯洗脫3次。將殘餘 物再溶解於甲苯（100 ml)中，用5_[2·(三氟甲基）苯基卜1H_ 四唑（3· 15 g，14.7 mmol)處理，且在氮下回流12小時。將 以HC1鹽形式自反應混合物中沈澱出來的產物1，2,4-三唑1 -C溶解於DCM中’用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌兩次，乾燥 (MgS〇4)且洗脫以得到白色固體。MS (ESI+)=394.2 (M+1); Ή NMR (500 MHz, CDC13): δ 2.00 (6H, m), 2.18 (6H, m), 3.48 (3H, s), 3.72 (3H, s), 7.51 (1H, m), 7.71 (2H, m), 7.85 (1H, m) ppm。 步驟C : 在6〇°C下在氮氣氛中將甲酯lcg.w g, 3〇 mm〇1)s5% 130071.doc -45- 200901987 H2O/Me〇H(30 mi)中之溶液用 KOH(0_51 g，9〇 mm〇1)處理 18 h。將所得混合物濃縮，用水（150 ml)稀釋，用Et0Ac^ 滌且用HC1水溶液（1 n)酸化至pH=3。過濾沈澱物，用少量 水及乙謎洗滌且在真空下乾燥以得到粉紅色固體4_{4_曱 基-5-[2-(二氟曱基）苯基]_4H-1，2,4-三嗤-3-基}雙環[2.2.2] 辛烷-1-曱酸（1-D)。NMR (500 MHz，CD3〇D): δ 2.00 (6Η, m), 2.17 (6Η, m), 3.55 (3H, s), 7.62 (1H, m), 7.85 (2H, m)，7.96 (1H，m) ppm。 步驟D : 在室溫下在氮氣氛下將一部分固體4-{4-甲基_5_[2-(三氟 甲基）苯基]-4H-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2]辛烷_1_甲酸（1_ D，0.67 g，1.77 mmol)懸浮於 CH2C12(15 ml)中且用 ι'，ι，_ 叛 基二咪唑（〇·57 g，3.54 mmol)處理。2 h後，添加濃氫氧化 敍（40 ml)且將反應物攪拌1 8 h。將粗混合物用水（1 5〇 mi) 稀釋且用3份CH：2C12(70 ml)萃取。將有機洗滌液組合，用 鹽水洗滌，經NasSO4乾燥，且在減壓下移除溶劑以得到呈 白色粉末狀之羧醯胺1-E。MS (ESI+)=379.3 (M+1)。 步驟E : 在室溫下在氮氣氛下攪拌羧醯胺1-E(0.64 g，1.7 mmol)及 三聚氯化氰（0.47 g，2.53 mmol)於DMF(15 ml)中之溶液。2 h後’在真空中移除DMF，且將固體再溶解於Ch2C12(1〇〇 ml)中且用飽和碳酸氫鈉水溶液及鹽水洗滌，乾燥 (NadO4)，且在減麼下移除溶劑以得到呈黃色固體狀之腈 1-F。MS (ESI+)=361.3 (M+l); ’H NMR (500 MHz, CDC13): δ 130071.doc -46- 200901987 2.15 (6H，m)，2.22 (6H，m), 3.47 (3H，s)，7·51 (1H，m)，7·72 (2H，m), 7·87 (1H，m) ppm。 步驟F : 將腈1-F(0.56 g，1.6 mmol)及經基胺（50%水溶液，4 ml) 於乙醇（40 ml)中之溶液在80°C下加熱1 8 h。將所得混合物 冷卻至室溫且真空濃縮。將固體懸浮於甲苯中，在真空中 移除溶劑’且將固體（1-G)在減壓下乾燥，且不經進一步 純化用於下一步驟中。MS (ESI+)=394.3 (M+1)。 步驟G : 將 HATU(2.93 g，7.63 mmol)添加至 2,2-二氟丙酸（0.84 g, 7.63 mmol)及N，-羥基-4-{4-甲基-5-[2-(三氟甲基）苯基]-4H-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2]辛烷-1-羰醯亞胺醯胺（1_(3)(1.〇 g，2.54 mmol)於無水DMF(30 ml)中之溶液中，接著添加 DIEA(2.2 ml，12.7 mmol)。將所得混合物在室溫下攪拌48 小時’接著加熱至110。〇歷時3小時。在冷卻至室溫後，在 減壓下移除溶劑。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，用水、飽 和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌。藉由管柱層析使用1〇〇0/〇乙 酸乙酯作為溶離劑來純化粗產物以產生呈白色粉末狀之^ H ° MS (ESI + )=468.3 (M+l)； 'H NMR (500 MHz, CDC13)： δ 2.10-2.34 (15H, m)，3.57 (3H，s)，7.73-7.75 (3H, m)，7.86 130071.doc -47- 200901987

實例2

5-(3,3-二氟環丁基）-3-(4-{4-甲基_5_【2·(三氟甲基）苯基卜 AH、1，2,4-三唑 _3_基}雙環[2.2.2】辛 _1_基）-:1,2,4-噁二唑（2_Ε)

EtOH-CH2CI2

DAST

OBn 2-C

0 γ^Α〇η (1) CsC03, EtOH (2) BnBr, CH3CN

2·Β (1) GDI, CH2CI2

d-G)

步驟A : 將3側乳基環丁烧甲酸（2-A)(1.0 g, 10.0 mmol)溶解於無 水乙醇（25 ml)中，且添加碳酸铯（1.66 g, 5.1 mmol)。在室 溫下在氮下攪拌4小時後，將反應混合物濃縮。將殘餘物 再溶解於無水乙腈（5〇 ml)中且用苯曱溴（1_2 ml, 1〇.〇 ml)處 理。將混合物在室溫下在氮氣氛下攪拌12小時。接著在減 壓下移除溶劑且使殘餘物在乙酸乙酯與水之間分溶。使用 石夕膠層析用1 〇〇%己烷至96〇/。己烷/乙酸乙酯之梯度溶離來 130071.doc -48- 200901987 純化粗產物以得到 2-B。NMR (500 MHz，CDC13): δ 3.30-3.48 (5H，m)，5.22 (2H，s)，7.37-7.41 (5H，m) ppm。 步驟B : 將3-側氧基烷丁烷甲酸苯甲酯（2-B)(l.23 g，6.03 mmol) 溶解於二氣甲烷（35 ml)中。在氮下添加DAST(8.0 ml，6.03 mmol)，p遺後添加無水乙醇（0·4以，7.23 mmol)。將混合物 -攪拌12小時，之後將其用二氯甲烷稀釋，相繼用飽和碳酸 氫鈉溶液、1 N鹽酸水溶液及鹽水洗滌。將有機層經由無 〇 水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析用93%己烷/乙 酸乙酯作為溶離劑來純化粗產物以得到呈油狀之2-C。 NMR (500 MHz, CDC13)： δ 2.81- 2.93 (4Η, m), 3.01- 3.04 (1Η, m), 5.2 0 (2 Η，s)，7.3 6 - 7 4 2 (5 Η, m ) ρ ρ m。 步驟C : 將3,3->一氣環丁烧甲酸本甲醋（2-C)(0.84 g，3.72 mmol)溶 解於乙醇（40 ml)中，且添加約20 mg鈀/活性碳。將混合物 在室溫下在氫氣氛下攪拌12小時，且接著經由矽藻土墊過 (’ 濾。將濾液濃縮且在真空中乾燥以得到2-D。丨11 NMR (500 MHz, CDC13): δ 2.86-2.93 (4Η, m), 3.02-3.04 (1H, m) ppm。 步驟D : 將Ν’-羥基-4-{4 -甲基- 5-[2-(三氟甲基）苯基]-化“又‘三 唑-3 -基}雙環[2.2.2]辛烷-1-羰醯亞胺醯胺2〇 mg， 0.305 mmol)添加至經預攪拌之3,3-二氟環丁烷甲酸2_ D(166 mg，1.22 mmol)及碳基二咪唑（198 mg，1.22 mmol)於 130071.doc -49- 200901987 CH2C12(8 ml)中之溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌48 h ’接著濃縮。將固體再懸浮於甲苯中且在氮氣氛下回流3 h。藉由C-18逆相HPLC用30-80%乙腈/水（含0.1% TFA)溶 離來純化產物以得到呈白色粉末狀之2-E。MS (ESI+)=494.2 (M+l); ]H NMR (500 MHz, CDC13): δ 2.09 (6H, m), 2.31 (6H, m), 3.03-3.11 (4H, m), 3.57-3.61 (4H, m)，7.56 (1H，m)，7.71 (2H, m), 7.86 (1H，m) ppm。Shh-發光 II檢定：IC5〇 : 1.4 μΜ。 實例3

5-(1-氟-1-甲基乙基-3-(4-{4_甲基-5-[2-(三氟甲基）苯基卜 411-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2】辛_1-基）-1，2,4-噁二唑（3-八)

h2n n~f (1-G) (3) 100° C, 1.5 hr 將2-曱基-2-氟丙酸（108 mg，1.02 mmol)及Γ，1碳基二口米 唑（144 mg, 0.888 mmol)於無水DMF(2.5 ml)中之溶液在室 溫下在氮氣氛下搜拌30 min。向其中添加Ν'-經基-4-{4-甲 基_5-[2-(三氟甲基）苯基]-4H-1，2,4-三唑_3_基}雙環[2.2.2] 辛烧-1-羧醯亞胺醯胺（1-G)(139.5 mg，0.355 mmol)且將溶液 130071.doc -50- 200901987 在N2下擾掉隔夜。將反應物在加熱塊中在100°C下加熱1.5 小時。在真空中移除DMF且將固體再溶解於ch3CN(4如) 中。藉由C-18逆相層析用1〇_9〇% CH3cN(〇 1% TFA)/水 (〇_1% TFA)溶離來純化產物。移除溶劑且將殘餘物溶解於 DCM中且自飽和碳酸氫鈉水溶液分離游離驗。將有機層經

MgS〇4乾燥且過濾。將溶劑用CH3CN/水替換且凍乾以得到 呈白色固體狀之5-(1·氟-1_甲基乙基）_3_(4_{4_甲基巧_[2 (二氟甲基）苯基]_4H-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2]辛美） i，2,4U坐（3-A)。MS (ESI>464.13 (Μ+1)】η ⑽ MHz, CDC13)： δ 7.89-7.85 (m, 1 H), 7.75-7.69 (m 2 H) 7.55 (t，1H)，3.52 (s，3 H)，2.30 (dd，6 H) 2 (dd, 6 H), 1-90 (s，3 H)，1.86 (s，3 H)。Shh-發光 π檢定.Tri . \ .比5〇 : 4.2 μΜ。

實例4 F

2-(1,1-二 n 6 基）-5-(4-(4-甲基·5_[2_(三氟 f 基）苯基】 1，2,4-三嗤-3-基}雙環[2.2.2】辛小基二唑⑷b)

1-D 13007l.doc 200901987

ch3cf2cooh v_7 ch2ci2 步驟A : 將酸 1-D(1.0 g，2.64 mmol)溶解於 DMF(30 ml)中，且添 加TFFH(0.84 g，3.18 mmol)，隨後添加三乙胺（0.88 ml， 6.34 mmol)及無水肼（0.12 ml，3.95 mmol)。在室溫下在氮 下攪拌混合物12小時。接著將混合物在減壓下濃縮以移除 DMF。將殘餘物溶解於乙酸乙酯中且用飽和碳酸氫鈉溶液 及鹽水洗滌。將有機層經由無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃 縮。將產物（4-{4-曱基-5-[2-(三氟甲基）苯基]-4H-1,2,4-三 唑-3-基}雙環[2.2.2]辛烷-1-卡脲，4-八）藉由與甲苯共蒸發 數次來進一步乾燥，之後用於下一步驟中。MS (ESI+)= 394.2 (M+1)。 步驟B : 將4-{4-曱基-5-[2-(三氟甲基）苯基]-4H-1,2,4-三唑-3-基} 雙環[2_2.2]辛烧-1-卡腺（4-八）（334 111叾，0.85〇111111〇1)與2,2-二 氟丙酸（78 mg，0.708 mmol)之混合物懸浮於二氯甲烷中， 且添加固體形式之DMC( 1.2 g，7.08 mmol)。將混合物在室 溫下在氮下攪拌48小時，之後將其用二氯曱烷稀釋，用 水、飽和碳酸氫納溶液及鹽水洗蘇。藉由管柱層析來純化 粗產物以得到呈白色固體狀之4-B。MS (ESI+)=468.3 (M+1); ]H NMR (500 MHz, CDC13)： δ 2.15-2.33 (15H, m), 130071.doc •52- 200901987 3.52 (3H，s)，7.61 (1H，m)，7.72 (2H, m)，7.85 (1H, m) ppm。Shh-發光 II檢定：IC5〇 : 9.3 μΜ。 實例5

2-(3,3-二氟環丁基）_5·(4-{4-甲基-S-[2-(三氟甲基）苯基】 41^,2,4-三嗅-3-基}雙環【2.2.2】辛小基3

f 步驟A :

自酸肼4-A(119 mg，0.303 mmol)及3,3_二氟環丁院甲酸 (49.4 mg，0.363 mmol)使用實例4’步驟B中所述之方法來 製備三唑5-A。在藉由C-18逆相HPLC(使用20-8〇〇/。及25-50%乙腈/水（分別含0.1% TFA)溶離）純化兩次之後分離得 呈白色粉末狀之2-(3,3-二氟環丁基）-5-(4-{4-甲基_5_[2_(三 氟曱基）苯基]-4H-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2]辛-l_基）_ 1，3,4-噁二唑（5-A)。MS (ESI+)=494.2 (M+l)。Shh-發光 π 檢定：IC50 : 2 μΜ。 130071.doc -53- 200901987 實例6

N一 N CF3 2-(1-氟-1_甲基乙基）-5-(4-{4-甲基_5_丨2_(三氟甲基）苯基卜 4H-l，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2·2】辛-l_基）_l，3,4-噁二唑（6-B)

步驟A : 將2-甲基-2-氟丙酸（70 mg，0.66 mmol)及1，，Γ-碳基二咪 唑（107 mg，0.66 mmol)於無水DMF(2 ml)中之溶液在室溫 下在氮氣氛下攪拌30 min。向此溶液中添加醯肼4-a(200 mg，0.5 09 mmol)且將溶液在N2下攪拌隔夜。在真空中移除 DMF且將固體再溶解於含少許DMSO之CH3CN(4 ml)中。 藉由 C-18 逆相層析用 10-90% CH3CN(0.1% TFA)/水（0.1% TFA)溶離來純化產物。在真空中移除溶劑且自DCM及飽 和碳酸氫鈉水溶液分離游離鹼產物。將有機層經MgS04乾 燥且過濾。移除溶劑以得到產物6-A。MS (ESI+)=482.30 I30071.doc -54- 200901987 (M+l) 〇 步驟B : 向步驟A中獲得之物質中添加甲苯（3 mL)及亞硫醯氣（2 叫，且裝配回流冷凝器，將溶液在氮下加熱至饥。H、 時後在減壓下移除溶劑且將殘餘物溶解於甲苯中，在減壓 下移除甲苯。將殘餘物溶解SCH3CN(4⑺丨）中且藉由c_18 逆相層析用 10-90% CH3CN(0，1% TFA)/水（0.1% TFA)溶離 來純化產物。在真空中移除溶劑且自DCM及飽和碳酸氫鈉 、 水溶液分離游離鹼產物。將有機層用鹽水洗滌且經MgS04 乾燥且過濾。移除溶劑且自ch3cn及水凍乾產物以得到呈 白色固體狀之2-(1-氟-1-曱基乙基）-5-(4-{4-曱基-5-[2-(三 氟曱基）苯基]-4H-1，2,4-三唑-3-基}雙環[2.2.2]辛-1-基）-l，3,4-噁二唑（6_B)。MS(ESΓ)=463.98 (M+);1HNMR(500 MHz, CDC13)： δ 7.89-7.85 (m, 1H), 7.76-7.70 (m, 2H), 7.58 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.32 (dd, 6H), 2.20 (dd, 6H), 1.92 (s, 3H)，1.87 (s，3H)。 130071.doc 55-

Claims (1)

1. 200901987 十、申請專利範圍： 1.—種以下式I之化合物或其醫藥學可接受之鹽或溶劑合物 於製造治療或預防可由Smo拮抗作用改善之病狀之藥劑 上之用途， 、

   X/ Y及Z中之兩者表示氮原子，且另一者表示氧原子； R及R與其所連原子一起表示視情況經i _2個氟原子取代 之環丁基環，且R3表示氫或氟原子； 或 r1表示甲基； R表示甲基或氟原子；且 r3表示氟原子。 2.

   如請求項 Z為N。 之用途，其中X及γ之 —為Ο且另一者為N， 且 如明求項1之用途，其中該化合物具有結構式^ R1r2r3c

   130071.doc 200901987 4H-1 2 4既乙基）3 (4 {4_甲基'Η2·(三氟甲基）苯基]· 5们，—冰3.基则[2.2.2]辛小基心 P’·3--氟環丁基）-3-(4-{4-甲美 ς r 4H 1 ο ^ 土 _5吖2~(三氟甲基）苯基]_ -I，2,4-三唑_3_基}雙環[2 2 5_〇.^ , 』〒 K基）-1，2,4-噁二唑； (氟-1-甲基乙基）·3-(4-{4-甲甚ς r 4H-1 2 a _ 基·5~[2-(三氟甲基）苯基l· ’2,4-三唑_3_基}雙環[2 2 2-ri 1 - ^ !·基）-1，2,4-噁二唑； ，一軋乙基）-5-(4-(4-甲基_5，丨7 4H-1 2 d [2·(三氟甲基）苯基l· H】，2,‘三唑-3-基}雙環 X 2-(3 3 - 基）-1，3,4-噁二吐， H·3-—鼠環丁基）-5-(4-{4-甲 Λ $ 4H-1 2 4-^ . 土_5_[2_(三氟甲基）苯基]- ，，4-二唑_3_基}雙環[2 2 2]辛 2-(l-i 1 m «. 基）-l，3,4-噁二唑； -甲基乙基）-5-(4-{4-甲美ς F 4H-1 2 4-^ 土 '5，[2_(三氟甲基）苯基]- ，2,4-二唑_3_基}雙環[2 2 2]辛 或其醫筚風卜了拉戈 基）-1，3,4-噁二唑； 上菌樂予上可接受之鹽或溶劑合物。 5’々明求項1之用途，其_該化合物為： Η1，1·二氟乙基）-3_(4_{4甲基 _ * 4Η-1 2 4 - (二氣甲基）苯基]- ，2,4-二唑 _3_基}雙環[2 2 2]辛 或其醫鎗風， 基）·1，2,4-噁二唑； 醫樂予上可接受之鹽或溶劑合物。 6 ·如凊求項1 $田、全 ^ , 貝1之用途，其中該化合物為： 5_(3’3'二就環丁基）_3·(4-{4_ 甲基- 4Η- 1,24 — I (—鼠甲基）苯基]- ，-二唑-3-基}雙環ρ 2 2]辛 或其醫筚風^ 〒1-基）_〗，2,4-噁二唑； 7·如請求箱,— 物。 項1之用途，其中該化合物 ，3_基}雙卯·2·2]辛小基 13007I.doc 200901987 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物。 8. 如請求項1之用途’其中該化合物為： 2-(1小二氟乙基）_5_(4_{4_曱基_ 4Η·1，2,4-:唑 3 L (―軋甲基）苯基]- ，，—坐_3_基}雙環[2.22]辛小基）十3木。亞 或其醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物。 一坐， 9. 如凊求項1至8中任一馆夕田、全 一&+ 項之用途’其中該病狀為癌症。 10. 如晴求項9之用途，其中 £症 苒^ k目暴細胞癌、神經 二：胞瘤、前列腺癌、胰腺癌、乳癌、結腸癌、小細 ::、肉瘤、淋巴瘤、白血病、胃腸癌、多發性骨髓 、神經膠質瘤、肝細胞癌、偶發性及家族性基細胞 癌、偶發性神經管胚細胞瘤、腦膜瘤、乳癌、食道鱗狀 細胞癌及膀胱癌。 U. 一種如請求項1至8中任-項之化合物或其醫藥學上可接 受之鹽或溶劑合物之用途，其係用於製造癌症治療之化 學或放射致敏劑。 12.種用於冶療或預防癌症之醫藥組合物，其包含如請求 項至8中任項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽或溶 劑合物。 13. —種用於治療或預防癌症之醫藥組合，其包含供同時、 單獨或相繼投藥之如請求項1至8中任一項之化合物或其 醫藥學上可接受之鹽或溶劑合物及抗癌劑。 14. 一種如請求項1至8中任一項之化合物或其醫藥學上可接 受之鹽或溶劑合物之用途，其係用於製造治療或預防可 由Smo拮抗作用改善之病狀之藥劑。 130071.doc 200901987 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   130071.doc