TW200819460A - Antiviral phosphinate compounds - Google Patents

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TW200819460A
TW200819460A TW096124722A TW96124722A TW200819460A TW 200819460 A TW200819460 A TW 200819460A TW 096124722 A TW096124722 A TW 096124722A TW 96124722 A TW96124722 A TW 96124722A TW 200819460 A TW200819460 A TW 200819460A
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Anthony Casarez
Kleem Chaudhary
Aesop Cho
Michael Clarke
Edward Doerffler
Maria Fardis
Choung U Kim
Hyung-Jung Pyun
Xiaoning C Sheng
Jianying Wang
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Gilead Sciences Inc
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Description

200819460 九、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於具有 HCV抑制活性之次膦酸類 (phosphinate)化合物。 【先前技術】 C型肝炎係被認知爲特徵係爲肝病之肝的慢性病毒疾 病。雖然作用於肝之藥物係廣泛地使用且已顯示效用、毒 性及其他副作用，因而限制其用途。HCV之抑制劑係用於 限制HCV以及診斷分析爲HCV之建立及感染之發展。 存在對於新穎HCV治療藥劑之需求。 [發明內容】 在一具體例中，本發明提供本發明式I化合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： R1係獨立地選自Η、烷基、烯基、炔基、芳基、環烷 基、雜環、鹵素、鹵烷基、烷基磺醯胺基、芳基磺 -5- 200819460 醯胺基、-C(0)NHS(0)2-、或-s(0)2-，選擇性經一 或多個A3取代； R2係選自 a) -C(Y1)(A3) ^ b) (C2-10)烷基、（C3-7)環烷基或（C1-4)烷基-(C3-7)環 烷基，其中該環烷基及烷基-環烷基可選擇性經（C1-3)烷基單·、二-或三-取代，或 其中該烷基、環烷基及烷基-環烷基可選擇性經選 自羥基及〇-(Cl-4)烷基之取代基單-或二-取代， 或 其中各該烷基可選擇性經鹵素單-、二-或三-取 代，或 其中各該環烷基爲5-、6 -或7_員，一或兩個不直 接彼此連接之-CH2-基團可選擇性被-0-替換，如 此〇-原子係經由至少兩個C-原子連接至R2所 連接之N原子， c) 苯基、（C1-3)烷基-苯基、雜芳基或（C1-3)烷基-雜芳 基， 其中雜芳基爲具有選自N、〇及S之1至3個雜原 子之5-或6-員環，其中該苯基及雜芳基可選擇性經 選自鹵素、-OH、（C1-4)烷基、〇-(Cl-4)烷基、S-(C1-4)烷基、-NH2、-CF3、-NH((CM-4)烷基）及-N((Cl-4)烷基）2、-C〇NH2 &-CONH-(Cl-4)烷基之取 代基單-、二-或三-取代；及其中該（C 1-3)烷基可選 200819460 擇性經一或多個鹵素取代；或 d)_S(0)2(A3); R3爲Η或（C1-6)烷基； Υ1 係獨立地爲 Ο、S、N(A3)、N(0)( A3)、Ν(ΟΑ3)、 Ν(0)(0Α3)或 Ν(Ν(Α3)(Α3)); Ζ 爲 Ο、S 或 NR3 ; Z 1係選自下列結構：
Ra爲Η或（C1-6)烷氧基；
Rb 爲 Η、F、Cl、Br、I 或（C1-6)烷基；
Rc 爲 H、氰基、F、Cl、Br、I、-C( = 0)NRdRe、（Cl-6) 烷氧基、或選擇性經一或多個F、Cl、Br、I、（Cl- 6)烷基、或（Cl-6)烷氧基取代之苯基；
Rd及Re各自獨立地爲Η或（Cl-6)烷基； 各L獨立地爲CH或N; 200819460 乙2"爲 H、（C1-10)烷基、（C2-10)烯基、（C2-l〇)炔基， 其中任何碳原子可選擇性被選自0、S或N之雜原 子替換，或Z2a選擇性與一或多個R1、R2、Q1或 A3形成雜環； 221)爲 H、（C1-6)烷基、（C2-8)烯基、（C2-8)炔基； Q1爲（C1-8)烷基、（C2-8)烯基或（C2-8)炔基；或Q1及 Z2a —起與所連接之原子形成雜環，該雜環可選擇 性經一或多個酮基（ = 〇)或A3取代； A3係獨立地選自PRT、H、-OH、-C(0)0H、氰基、烷 基、烯基、炔基、胺基、醯胺基、醯亞胺基、亞胺 基、鹵素、CF3、CH2CF3、環烷基、硝基、芳基、 芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜環、-C(A2)3、 -C(A2)2-C(0)A2、-C(0)A2、-C(0)0A2、·0(Α2)、 -N(A2)2 ' -S(A2) > -CH2P(Y1)(A2)(OA2) > -CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ -CH2P(Y1)(OA2)(OA2) > -OCH2P(Y1)(〇A2)(OA2) > -OCH2P(Yi)(A2)(OA2) > .〇CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ -C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(0A2) > -C(0)0CH2P(Y1)(A2)(0A2) > C(0)0CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ' -CH2P(Y1)(OA2)(N(A2)2) ^ -OCH2P(Y1)(OA2)(N(A2)2) ' -C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(N(A2)2) ' -CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) > -C(0)0CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) ' 、-(CH2)m-雜環、 -(CH2)mC(0)0 烷基、·◦-(CHOm-O-qCO-O 烷基、 -0-(CH2)r-0-C(0)-(CH2)m-烷基、-(CH2)mO-C(0)- 200819460 〇-烷基、-(CH2)m0-C(0)-0-環烷基、 -N(H)C(Me)C(0)0-烷基、或烷氧基芳基磺_月安 基， 其中各A3可選擇性經1至4個如下取代基取 代： -R1 ^ -P(Y1)(OA2)(OA2) > -P(Y1)(OA2)(N(A2)2) ^ ^(Y'HA^COA2) > -P(Y1)(A2)(N(A2)2) > 或 P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) > -c( = 0)(n(a2)2)、鹵 素、烷基、烯基、炔基、芳基、碳環、雜環、 芳院基、芳基礦釀胺基、芳基院基擴酿胺基、 芳氧基磺醯胺基、芳氧基烷基磺醯胺基、芳氧 基芳基磺醯胺基、烷基磺醯胺基、烷氧基磺醯 胺基、烷氧基烷基磺醯胺基、芳硫基、 -(CH2)m 雜環、-(CH2)m-C(0)0·烷基、 -0(CH2)m0C(0)0 烷基、-0-(CH2)m-0-C(0)-(CH2)m-烷基、-(CH2)m-0-C(0)-0-烷基、 -(CH2)m-0-C(0)-0-環烷基、 -n(h)c(ch3)c(o)o-烷基、或烷氧基芳基磺醯 胺基，選擇性經R1取代； 選擇性地，各自獨立之A3及Q 1可一起與一或多個 A3或Q1基團形成一環； A2係獨立地選自PRT、Η、烷基、烯基、炔基、胺 基、胺基酸、烷氧基、芳氧基、氰基、鹵烷基、環 烷基、芳基、雜芳基、烷基磺醯胺基、或芳基磺醯 -9- 200819460 胺基’選擇性經A3取代；及 m爲〇至6。 本發明亦提供一種包括本發明化合物及至少一種藥學 上可接受載劑之藥學組成物。 本發明亦提供一種用於治療與HCV有關之失調症的 藥學組成物。 本發明亦提供一種進一步包括核苷類似物之藥學組成 物。 本發明亦提供一種進一步包括干擾素或長效型干擾素 之藥學組成物。 本發明亦提供一種藥學組成物，其中該核苷類似物係 選自利霸依寧（ribavirin)、依拉米定（Viramidine)、雷佛依 寧（levovirin)、L-核苷、及依沙陀寧比（isatoribine)，及該 干擾素爲α -干擾素或長效型干擾素。 本發明亦提供一種用於治療與C型肝炎有關之失調症 的方法，該方法包括將包括治療有效量之本發明化合物的 藥學組成物投服至一個體。 本發明亦提供一種抑制HCV之方法，其包括將抑制 HCV之有效量本發明化合物投服至患有與HCV活性相關 之病症的哺乳動物。 本發明亦提供本發明化合物在醫療治療上之用途（較 佳在抑制HCV或治療與HCV活性有關之病症的用途），以 及本發明化合物用於製造用於哺乳動物中抑制HCV或治 療與HCV活性有關之病症之藥劑的用途。 -10- 200819460 本發明亦提供合成方法及揭示於此處用 化合物之新穎中間物。本發明之一些化合牧 發明其他化合物。 在另一方面，本發明提供一種在一樣 HCV活性之方法，其包括用本發明化合物處 在一具體例中，本發明提供一種具有己夕 物動力性質之化合物，該改良抑制性或藥物 在活體內對抗病毒抗性之發展的增強活性、 物利用率、較大效力或延長之有效半生期。 合物可具有較小副作用、較不複雜之服藥時 口服活性。 本發明詳細說明 將更詳細地以一些本發明具體例加以說 以所附結構及化學式加以說明。雖然本發明 體例加以說明，然而需了解本發明並非被限 例。相反地，本發明係涵蓋所有的選擇、修 其可被包含在藉由具體例所定義之本發明範 本發明化合物 本發明化合物係排除先前已知之化合物 先前並不知具有在抗病毒目的上之抗病毒彳 動物上產生抗病毒功效）之化合物係在本發 在美國’本案化合物或組成物排除根據3 5 於製備本發明 係用於製備本 (s a m p 1 e)抑制 理該樣品。 良抑制性或藥 動力性質包含 改良之口服生 一些本發明化 間表，或較具 :明，其中實例 丨將以所列舉具 :制至這些具體 :改及等效物， 疇內。 。然而，使用 生質（例如，在 明之範疇內。 USC § 102 之 -11 - 200819460 規定已被佔先的或者根據35 USC § 103之規定已爲顯而 易知之化合物。 當此處所述化合物經多於一個所述相同基團（如“ R1 ” 或“A3”）取代時，則可了解該基團可相同或不同，亦即， 各基團係獨立地選取的。 “烷基”爲包含一級、二級、三級或環狀碳原子的C!-C18烴基。實例爲甲基（Me、-CH3)、乙基（Et、-CH2CH3)、 1-丙基（n-Pr、正丙基、-CH2CH2CH3)、2-丙基（i-pr、異丙 基、-CH(CH3)2)、1-丁基（n-Bu、正 丁基、 -CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基（i-Bu、異 丁基、 -CH2CH(CH3)2)、2-丁基（s-Bu、第二 丁基、 -CH(CH3)CH2CH3)、2·甲基-2-丙基（t-Bu、第三 丁基、 •C(CH3)3)、1-戊基（正戊基、-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊 基（-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基（-CH(CH2CH3)2)、2-甲 基-2-丁基（-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基（ -CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基（-ch2ch2ch(ch3)2)、 2_甲基-1-丁基（-〇112〇11(<：113)(：1120：113)、1-己基（ -CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基（-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、 3-己基（-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))、2-甲基-2-戊基（ •C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基（ •CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基（ -CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基（ •C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基（-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、 2,3-二甲基-2-丁基（-(：((：113)2(：11((：113)2)、3,3-二甲基-2-丁 -12- 200819460 基（-CH(CH3)C(CH3)3)。 “烯基”爲包含一級、二級、三級或環狀碳原子且具有 至少一不飽合端（即碳-碳sp2雙鍵）的C2-C18烴基。實例包 括，但不限於，乙儲基（ethylene或vinyl)(-CH = CH2)、嫌 丙基（-CH2CH = CH2)、環戊烯基（-C5H7)及5-己烯基（ -CH2CH2CH2CH2CH = CH2)。 “炔基”爲包含一級、二級、三級或環狀碳原子且具有 至少一不飽合端（即碳-碳sp三鍵）的C2-C18烴基。實例包 括’但不限於’乙快基（-C = CH)及丙快基（-CH2CsCH)。 “伸烷基”係指經由自母體（parent)烷烴之相同或二不 同碳原子移除二氫原子所衍生之具有兩個單價基中心之1-1 8碳原子的飽和、支鏈或直鏈或環狀烴基。典型伸烷基包 括，但不限於，伸甲基（-CH2·)、1，2-乙基 （-CH2CH2-)、 1,3-丙基 （-CH2CH2CH2-)、1，4- 丁基（·ΟΗ2(：Η2(：Η2(：Η2-) 等。 “伸烯基”係指經由自母體烯烴之相同或二不同碳原子 移除二氫原子所衍生之具有兩個單價基中心之2-18碳原 子的未飽和、支鏈或直鏈或環狀烴基。典型伸烯基包括， 但不限於，1，2-伸乙基（-CH = CH-)。 “伸炔基”係指經由自母體炔烴之相同或二不同碳原子 移除二氫原子所衍生之具有兩個單價基中心之2-18碳原 子的未飽和、支鏈或直鏈或環狀烴基。典型伸炔基包括， 但不限於，伸乙炔基（-C = C-)、伸丙炔基（-CH2C = C-)、及伸 4-戊炔基（-CH2CH2CH2CeCH-)。 -13- 200819460 “芳基”係指藉由自母體芳族環系統之單一碳原子移除 一個氫原子所衍生之6 - 2 0碳原子的單價芳族烴基。典型 芳基包括，但不限於，衍生自苯、經取代苯、萘、蒽、聯 苯等之基團。 方基纟兀基”係指非ί哀院基中氧原子中之一者所鍵結至 之一碳原子（典型爲終端或sp3碳原子）被芳基替換。典型 芳基院基包括，但不限於，苄基、2 -苯基乙-1-基、萘基甲 基、2-萘基乙-1-基、萘並苄基、2-萘並苯基乙-1-基等。芳 基烷基包括6至2 0碳原子，例如，芳基烷基之烷基部分 (包括烷基、烯基或炔基）爲1至6碳原子及芳基部分爲5 至1 4碳原子。 “經取代烷基”、“經取代芳基”及“經取代芳基烷基，，係 指院基、芳基及芳基院基各自之一或更多氫原子被一非氫 原子取代基替換。典型取代基包括，但不限於，-X、 -R、-CT、-OR、-SR、-S·、-NR2、-NR3、=NR、-CX3、 CN、-OCN、-SCN、-N = C = 0 > -NCS、-NO、-N〇2、 =N2、_N3、NC( = 0)R、-C( = 〇)R、_C( = 0)NRR、-S( = 0)2〇' 、-s( = o)2〇h、-S( = 0)2R、-0S( = 0)20R、-S( = 0)2NR、 -S( = 0)R、-0P( = 0)02RR、-P( = 〇)〇2rr、_p( = 〇)(〇 )2、 -P( = 0)(0H)2、-C( = 0)R、-C( = 〇)X、-C(S)R、-C(0)0R、 -C(0)0·、-C(S)OR、-C(0)SR、-C(S)SR、-C(0)NRR、 -C(S)NRR、-C(NR)NRR，其中各x係獨立地爲鹵素：F、 Cl、Br或I;各R係獨立地爲-Η、烷基、芳基、雜環、保 護基或前藥部分。伸烷基、伸烯基及伸炔基亦可同樣地被 -14- 200819460 取代。 此處所用“雜環”包括例如下列文獻中所述雜環但並非 限制這些雜環：Paquette，Leo A. ; Principles of Modern Heterocyclic Chemistry (W. A. Benjamin， New York， 1968)、特別是第 1，3，4，6，7 及 9 章；The Chemistry of Heterocyclic 化合物，A Series of Monograph (John Wiley & Sons，New York, 1 9 5 0 至現在）、特別是第 13，14，16, 19 及 28 冊；及 J. Am. Chem. Soc. ( 1 960) 82:5 5 66。在本 發明之一特定具體例中，“雜環”包括此處所定義“碳環”中 一或更多（例如，1、2、3或 4)碳原子被雜原子（例如， Ο、N或S)替換。 雜環之實例包括，但不限於，吡啶基、二氫吡啶基、 四氫吡啶基（哌啶基）、噻唑基、四氫噻吩基、硫經氧化之 四氫噻吩基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑 基、咪唑基、四唑基、苯並呋喃基、硫萘基 (thianaphthalenyl)、吲哚基、吲哚烯基（indolenyl)、喹啉 基、異喹啉基、苯並咪唑基、哌啶基、4 -哌啶酮基、吡咯 烷基、2 -吡咯烷酮基、吡咯啉基、四氫呋喃基、四氫喹啉 基、四氫異喹啉基、十氫喹啉基、八氫異喹啉基、氮雜環 辛四烯基（azocinyl)、三嗪基、6H-1，2,5-噻二嗪基、 2Η，6Η-1，5,2·一 噻嗪基、噻吩基、噻蒽基（thianthrenyl)、 吡喃基、異苯並呋喃基、戎烯基（chromenyl)、咕噸基 (xanthenyl)、吩噻噁基、2H-吡咯基、異噻唑基、異噁唑 基、吡嗪基、噠嗪基、吲嗪基（indolizinyl)、異吲哚基、 -15- 200819460 3 Η-吲哚基' 1 Η-吲唑基、嘌呤基、4H_喹嗪基、酞嗪基、 萘D定基、喹噁啉基、喹唑啉基、噌啉基、蝶啶基、4 η -咔 口坐基、昨哇基、β -咔啉基、菲啶基、吖啶基、嘧啶基、菲 啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋咱基、吩噁嗪基、異哼基、 口克基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪 基、昭丨哄琳基、異吲哚啉基、嗝啶基、嗎啉基、噁唑烷 基、苯並三哩基、苯並異噁唑基、羥吲哚基、苯並噁唑啉 基、靛紅醯基（isatinoyl)、及雙-四氫呋喃基：
舉例說明但不用於限制，碳連結的雜環是連結在吡啶 的第2、3、4、5、或6位置、噠嗪的第3、4、5、或6位 置、嘧啶的第2、4、5、或6位置、吡嗪的第2、3、5、 或6位置、呋喃、四氫呋喃、硫呋喃、噻吩、吡咯或四氫 吡咯的第2、3、4、或5位置、噁唑、咪唑或噻唑的第 2、4、或5位置、異卩惡唑、卩比π坐、或異噻11坐的第3、4、或 5位置、氮雜環丙烷的第2或3位置、氮雜環丁院的第 2、3、或4位置、喹啉的第2、3、4、5、6、7、或8位 置、或異喹啉的第1、3、4、5、6、7、或8位置。更典型 地，碳連結的雜環包含厂吡啶基、吡啶基、仁吡啶基、 5 -吡啶基、6 -吡啶基、3 -喔曉基、4 -喔曉基、5 -喔曉基、 6-噠嗪基、2-嘧啶基、4_哺D定基、5_喃D定基、^喃11 定基、 2-吡嗪基、3-吡嗪基、5-啦曉基、6-耻曝基、2-噻嗤基、 -16- 200819460 4 -噻唑基、或5 -噻唑基。 舉例說明但不用於限制’氮連結的雜環是連結在氮雜 環丙烷、氮雜環丁烷、吡咯、吡咯烷、2 -吡咯啉、3 -吡咯 啉、咪唑、咪唑烷、2 -咪唑啉、3 -咪唑啉、吡唑、吡唑 啉、2 _吡唑啉、3 -吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、吲哚啉、 1H-吲唑的第1位置、異吲哚、或異吲哚啉的第2位置、 嗎啉的第4位置、及咔唑、或β -咔啉的第9位置。更典型 地’氮連結的雜環包含1 -氮雜環丙烷基、1 -氮雜環丁烷 基、1 -吡咯基、1 ·咪唑基' 1 -吡唑基、和1 -哌啶基。 “碳環”意指具有高至約25個碳原子之飽和、未飽和 或芳族環。典型地，具有約3至7個碳原子時爲單環，具 有約7至12個碳原子時爲雙環，及具有高達約25個碳原 子時爲多環。單環碳環典型地具有3至6個環原子，更典 型地具有5或6個環原子。雙環碳環典型地具有7至12 個環原子，例如，排列成爲雙環〔4，5〕 、 〔5,5〕、 〔5，6〕或〔6，6〕系統，或具有9或1 0個環原子，排列成 雙環〔5,6〕或〔6,6〕系統。碳環包括爲飽和或未飽和碳 環之“環烷基”。單環碳環的例子包括環丙基、環丁基、環 戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、 環己基、1-環己-1-烯基、1-環己-2-烯基、1-環己-3-烯 基、苯基、螺環基（spiryl)和萘基。當Q1及Z2a —起與所 連接之原子可典型地包括高達約2 5原子。 名稱“對掌性（chiral)”意指具有無法重疊於鏡像夥伴的 性質之分子，然而，“非對掌性（achiral)”意指可重疊於其 -17 - 200819460 鏡像夥伴之分子。 名稱“立體異構物，，意指具有相同的化學組成但原子或 基團的空間排列並不相同之化合物。 “非對映異構物，，意指具有二或多個對掌中心且其分子 不相互爲鏡像之立體異構物。非對映異構物具有不同的物 理性質，例如熔點、沸點、光學性質、和反應性。非對映 異構物的混合物可在高解析分析步驟（例如電泳和層析）下 分離。 “對映異構物”意指化合物之相互爲無法重疊鏡像之二 個立體異構物。 名稱“治療”（“treatment”或“treating”），當有關於一種 疾病或病症時，包括預防該疾病或病症的發生、抑制該疾 病或病症、消除該疾病或病症、及/或緩和該疾病或病症 之一或多種徵兆。 名稱“PRT”係選自此處所定義之名稱“前藥部分體，，及 “保護基”。 本文中所用之立體化學的定義和慣例一般是根據S . P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical T e r m s ( 1 9 8 4) M c G r a w - H i 11 Book Company, New York ;及 Eliel， E· and Wilen， S.， Stereochemistry of Organic Compounds( 1 994)John Wiley & Sons，Inc., New York。許 多有機化合物存在有光學活性型，即其具有旋轉平面偏光 的平面之能力。在描述光學活性化合物時，字首D和L或 R和S係用於表示該分子相對於其對掌中心的絕對構型。 -18- 200819460 字首d和1或（+ )和（-)係用以表示平面偏光被該分子旋轉 的符號，（-)或1表示該化合物是左旋的。字首（+ )或d表 示化合物爲右旋。對於指定的化學結構，這些立體異構物 是相同的，除了其相互爲彼此的鏡像。一特定的立體異構 物亦可爲對映異構物，而此異構物的混合物通常稱爲對映 異構混合物。對映異構物之5 0 : 5 0混合物稱爲外消旋混 合物或外消旋物，其可發生於沒有立體選擇性或立體專一 性的化學反應或過程的情況。“外消旋混合物”和“外消旋 物”意指二對映異構物之等莫耳混合物，不具光學活性。 本發明包括此處所述化合物之所有立體異構物。 前藥 名稱“前藥”意指當投服至生物系統時，經由自發的化 學反應、酶催化的化學反應、光解反應、及/或代謝的化 學反應而產生藥物物質（即活性成份）之任何化合物。因 此，前藥是治療活性化合物之共價改性的類似物或潛伏 型。 “前藥部分體”意指不穩定的官能基，其在代謝期間全 身地，在細胞內，經由水解、酶促裂解、或一些其他的過 程而與活性的抑制性化合物分離（Bundgaard，Hans， “Design and Application of Prodrugs’’ in A Textbook of Drug Design and Development(1991)? P. Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers，pp. 113_191)。可與本發明之膦酸系前藥化合 -19- 200819460 物進行酶促活化機制之酶包括，但不限於，醯胺酶、酯 酶、微生物酶、磷脂酶、膽鹼酯酶、和磷酸酯酶 (phosphases)。前藥部分體可用於增進溶解度、吸收性和 親脂性（1 i p 〇 p h i 1 i c i t y )以使藥物輸送、生物利用率和效力達 到最佳化。前藥部分體可包括活性代謝物或藥物本身。 前藥部分體的例子包括水解敏感性或不穩定的醯氧甲 基酯-CH20C( = 0)R9和醯氧甲基碳酸酯-CH20C( = 0)0R9， 其中119是Ci-Q烷基、Ci-Cs經取代的烷基、C6-C2G芳基 或C6-C2Q經取代的芳基。醯氧烷基酯是首先用作爲羧酸 之前藥策略，之後被應用於磷酸酯和膦酸酯 (phosphonate)，參見 Farquhar e t al.(1983)J. P harm. S c i · 72: 324 ；及 US 專利 4816570、 4968788、 5663159 和 5 79275 6。之後，醯氧烷基酯係用於輸送膦酸化合物橫過 細胞膜及增進口服生物利用率。醯氧烷基酯之一相近的變 化，烷氧羰氧烷基酯（碳酸酯），亦可於本發明之組合物的 化合物中以前藥部分體的形式增進口服生物利用率。醯氧 甲基酯之一例子是三甲基乙醯氧甲氧基， (POM) —CH20C( = 0)C(CH3)3。醯氧甲基碳酸酯前藥部分體 之一例子是三甲基乙醯氧甲基碳酸酯 (poc)-ch2oc( = o)oc(ch3)3。 磷基團的芳酯，特別是苯酯，經報導可增進口服生物 利用率（De Lombaert e t al.(1994)/. Me d. C h e m · 37: 498)。 帶有鄰位於磷酸酯的羧酸酯之苯酯亦已經被揭示（Khamnei and Torrence，(1996) J. Med. C hem. 39:4109-4115)。节酯已 -20- 200819460 經報導可形成母體膦酸。於一些例子中，在鄰位-或對位_ 位置之取代基可加速水解反應。具有醯化的苯酚或烷基化 的苯酚之苄基類似物可經由酶（例如，酯酶、氧化酶等）的 作用而形成酚系化合物，接著在苄基C-0鍵進行裂解而 形成磷酸和醌甲基化物中間物。此類前藥的例子已揭示於 Mitchell e t al.(1992)J. Che m. S o c. Perkin Trans. II 23 45; Glazier WO 91/19721。仍有其他的苄基前藥已經被揭示帶 有連結至苄基的伸甲基之含羧酸酯的基團（Glazier WO 9 1/1 972 1 )。含硫前藥已經被揭示可用膦酸系藥物之細胞內 輸送。這些原酯（proesters)含有乙硫基，其中硫醇基於被 醯基酯化或與另一硫醇基結合一起形成二硫化物。此二硫 化物之脫酯化反應或還原反應形成自由的硫中間物，其接 著裂斷成磷酸和表硫化物（6。丨5111^(^)(?116。11^&1.(1993) Antiviral Res.，22: 1 5 5 - 1 74; Benzaria e t al.(1996)J. Me d. Chem. 39: 4958)。 保護基 於本發明中，保護基包括前藥部分體和化學保護基。 “保護基”意指化合物之一部分體，其會遮蔽或改變官 能基的性質或全部化合物的性質。化學保護基和保護/去 保護的方法已爲熟悉此項技術人士所習知。參見’例如’ Protective Groups in Organic Chemistry， Theodora W. Greene, John Wiley & Sons，Inc” New York，1991。保護 基通常是用於遮蔽一些官能基的反應性，以促進所欲之化 -21 - 200819460 學反應的功效，例如，根據所計劃的方式依序形成和裂斷 化學鍵。化合物之官能基的保護除了被保護的官能基的反 應性之外亦改變其他的物理性質，例如極性、親脂性（斥 水性）、和其他可由一般分析工具所測得的性質。化學保 護的中間物本身可具生物活性或不具生物活性。 經保護的化合物於活體外和活體內亦可展現改變後的 性質，於一些情況中是最佳化的性質，例如，通過細胞膜 的性質和抗酶促降解或螯合（sequestration)的性質。此 時，具有所欲的治療功效之經保護的化合物可作爲前藥。 保護基之其他功能是將母體藥物轉換成前藥，如此，在前 藥進行活體內轉換時釋放出母體藥物。因爲活性前藥可比 母體藥物更有效地被吸收，前藥於活體內可具有比母體藥 物較大的效力。保護基可於活體外除去（當爲化學中間物 的情況），或於活體內除去（當爲前藥的情況）。對於化學中 間物，在去保護後所得的產物，例如醇，是否爲生理可接 受的並不特別重要，即使通常如果產物是藥理上無毒的情 況是更爲所欲的。 保護基是可獲致的，習知和常用的，且選擇性地用於 防止被保護的基團在合成過程（即製備本發明之化合物的 途徑或方法）中進行副反應。大部分而言，當進行保護 時，決定那個基團被保護及化學保護基“PG”的性質將決定 於待保護的反應所對抗的化學條件（例如酸性、鹼性、氧 化、還原或其他條件）和所欲的合成目標。當化合物經數 個PG取代時，pg基並不需要且通常不是相同的。通常， -22- 200819460 PG將用於保護例如羧基、羥基、硫醇基、或胺基之官能 基’及因而防止副反應或者另一方面利於合成的功效。釋 出自由的去保護基團之去保護反應的順序決定於所欲的合 成方向和所遭遇的反應條件，且可以熟悉此項技術人士決 定之任何順序進行。 本發明之化合物的各種保護基可被保護。例如，-OH 基（不論是羥基、羧酸、膦酸、或其他官能基）的保護基包 括“醚-或酯-形成基”。醚-或酯-形成基可於下文所述之合 成途徑中用作爲化學保護基。然而，熟悉此項技術人士將 明白，部分羥基和硫醇基保護基既不是醚-亦不是酯-形成 基，且包括醯胺，如下所述。 許多羥基保護基和醯胺形成基和對應的化學裂斷反應 已揭不方令 Protective Groups in Organic Synthesis, Theodora W. Greene(John Wiley & Sons, Inc., New York, 1991，ISBN 0-471-62301-6)(“ Greene”）。亦參見 Kocienski， Philip J. ; Protecting Groups(Georg Thieme Verlag Stuttgart，New York，1 994)，其內容完全倂入本文以供參 考。特 S[J 是 Chapter 1，Protecting Groups: An Overview, pages 1-20，Chapter 2，Hydroxyl Protecting Groups, pages 21-94， Chapter 3， Diol Protecting Groups， pages 95-117, Chapter 4，Carboxyl Protecting Groups，pages 118-154, Chapter 5，Carbonyl Protecting Groups, pages 1 5 5 - 1 84 ° 對於羧酸、膦酸、膦酸酯、磺酸的保護基和其他酸的保護 基請參見下文中之Greene。 -23- 200819460 A3和A2可爲Η、烷基、或醚-或酯-形成基。”醚-形成 基’’意指可以在母體分子和下式所示的基團間形成安定的 共價鍵的基團： S一〇-va(v1)3 , J—o-ya{y^){y2) ， S~〇_va(v3) S—〇-vb(v1)2 , S—〇—vb(v2)，或 S—o-vjv^ 其中va是四價原子，通常是選自C和Si;Vb是三價原 子，通常是選自 B、A1、N、和P，更常是選自N和P; Vc是二價原子，通常是選自 〇、S、和Se，更常是選自 S ; Vi是與Va、Vb或Vc鍵結而形成一安定的共價單鍵的 基團，通常Vi是A2基；V2是與Va或Vb鍵結而形成一安 定的共價雙鍵的基團，其先決條件是 V2不爲=0、=S或 = N·，通常〜2是=0(¥1)2，其中V!是如上所述；及V3是 與Va鍵結而形成一安定的共價參鍵的基團，通常V3是 ，其中V!是如上所述。 ”酯-形成基“意指可以在母體分子和下式所示的基團 間形成安定的共價鍵的基團： s—〇-Va(V1)(V4) S—〇-Vb(V4) , S—〇-Vd(V1)2(V4) 5 1 o-vd(v4)2j S~o-vjvwvj，或 f—o-vjvwva -24- 200819460 其中Va、vb、和V!是如上所述；vd是五價原子，通常是 選自P和N;Ve是六價原子，通常是選自S;及V4是與 va、Vb、Vd或ve鍵結而形成一安定的共價雙鍵的基團’ 其先決條件是至少一個V4是=0、=S或=N_Vi，通常當V4 不是=〇、=S或=N-時，其是其中 Vi是如上所 述。 -OH官能基（羥基、酸或其他官能基）的保護基是屬於” 醚-或酯-形成基“的體系。特別興趣的是可在本文所述的合 成過程中作爲保護基之醚-或酯-形成基。然而，熟悉此項 技術人士均知，部分羥基和硫基保護基既不是醚-也不是 酯-形成基，係涵蓋在如下文所述之醯胺內，其可保護羥 基或硫基使得母體分子水解而形成羥基或硫基。 當爲酯-形成基時，A3或A2通常與任何的酸性基團鍵 結，例如（舉例說明但不用於限制）-C02H或-(：(3)011基， 如此而形成-C02A2或-C02A3。例如，A2是由 WO 9 5/07920所列舉的酯基衍生而得。 A2的例子包含： C3-C12雜環（如上所述）或芳基。此芳族基團選擇性地 爲多環或單環。其例子包含苯基、螺環基（spiryl)、2-和 3 -吡咯基、2 -和3 -噻吩基、2 -和4 -咪唑基、2 -、4 -和5 -噁 唑基、3 -和4 -異噁唑基、2 -、4 -和5 -噻唑基、3 -、4 -和5 -異噻唑基、3 -和4 -吡唑基、1 -、2 -、3 -和4 -吡啶基、和卜 、2 -、4 ·和5 _嘧啶基，其中C 3 - C i 2雜環或芳基經下列基團 所取代··鹵基、R1、R1 - 〇- c 1 - c 12伸院基、c 1 - c 12院氧 -25- 200819460 基、CN、N02、OH、羧基、羧酸酯、硫醇、硫酯、CrCu 鹵烷基（1-6個鹵原子）、C2_C12烯基或C2_C12炔基。此類 基團包含2-、3-和4-烷氧基苯基（Κ12烷基）、2-、3-和 4-甲氧基苯基、2-、3-和 4-乙氧基苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-和3,5-二乙氧基苯基、2-和3-乙氧羰基-4-羥 基苯基、2_和 3 -乙氧基-4-羥基苯基、2 -和 3 -乙氧基-5-羥 基苯基、2-和3-乙氧基-6-羥基苯基、2-、3-和4-0-乙醯基 苯基、2-、3-和 4-二甲胺基苯基、2-、3-和 4-甲硫基苯 基、2-、3-和4-鹵基苯基（包含2-、3-和4-氟苯基和2_、 3- 和4_氯苯基）、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-和3,5-二甲 基苯基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-和3,5-二羧乙基苯 基、2,3-、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-和3,5-二甲氧基苯基、 2,3·、2,4-、2,5-、2,6-、3,4-和 3,5-二鹵基苯基（包含 2,4-二氟苯基和3，5·二氟苯基）、2-、3-和4-鹵烷基苯基（1至5 個鹵原子、Ci-C^烷基，包含4-三氟甲基苯基）、2-、3-和 4- 氰基苯基、2-、3-和4-硝基苯基、2-、3-和4-鹵烷基苄 基（1至5個鹵原子、Ci-C^烷基，包含4-氟甲基苄基和 2_、3-和4-三氯甲基苯基和2-、3-和4-三氯甲基苯基）、 4-N-甲基哌啶基、3-N-甲基哌啶基、1-乙基哌嗪基、苄 基、院基水楊基本基（C1-C4院基’包含2-、3 -和4 -乙基水 楊基苯基）、2-、3 -和4 -乙醯基苯基、1,8 -二羥基萘基（ -C1GH6-OH)和芳氧基乙基[C6-C9芳基（包含苯氧基乙基）]、 2,2’-二羥基聯苯基、2-、3-和4-N，N-二烷胺基苯酚（ C6H4CH2-N(CH3)2)、三甲氧基苄基、三乙氧基苄基、2-烷 -26- 200819460
-CHr0-C(0)
烷基） 基啦B定基（C 1 - 4
Xs) < \==/ ; 2-羧苯基的C4-C8酯；和伸烷基-C3-C6芳基（包含苄基、-CH2-吡咯基、-CH2-噻吩基、-CH2-咪 唑基、-CH2-噁唑基、-CH2-異噁唑基、-CH2-噻唑基、_ CH2-異噻唑基、-CH2-吡唑基、-CH2-吡啶基和-CH2-嘧啶 基），而其芳基經3至5個鹵原子或1至2個選自鹵素、 Ci-C^烷氧基（包含甲氧基和乙氧基）、氰基、硝基、OH、
CpCu鹵烷基（1至6個鹵原子；包含- ch2-cci3)、C”C12 烷基（包含甲基和乙基）、C2_C12烯基或C2_C12炔基的原子 或基團所取代； 烷氧基乙基[CbG烷基，包含-ch2-ch2-o-ch3 (甲氧 基乙基）]; 烷基，經如上所述之所有芳基的取代基所取代，特別 是OH，或爲1至3個下列基團所取代：鹵原子（包含 -CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、 -(CH2)3CH3、-(CH2)4CH3、-(CH2)5CH3、-CH2CH2F、
-CH2CH2C1、-CH2CF3、和-CH2CC13) ; ^一’ ； -N-2- 丙基嗎啉基、2,3-二氫-6 -羥基節、芝麻酌（sesamol)、兒茶 酚單酯、、 -CH2-S(0)(R1) ' -CH2- 8(0)2(111)、-CHyCHCOCHCOdR^-CKOC^COCm1)、膽 甾醇基、烯醇丙酮酸（HOOC-C( = CH2)-)、甘油； 5或6碳的單糖、二糖或低聚糖（3至9個單糖基團）； -27- 200819460 三甘油酯，例如a-D-β-二甘油酯（其中脂肪酸含有甘 油酯脂質，而其一般是天然存在的飽和或未飽和的 C6-26、c6_18或c6_1()脂肪酸，例如亞油酸、月桂酸、肉豆 蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、油酸、棕櫚油酸、亞麻酸等脂肪 酸），經由三甘油酯的甘油基的氧而與母體分子的醯基相 連結； 磷脂，經由磷脂的磷酸基而與羧基相連結； 酞基（如 Clayton et al·，JgeWs C/zemo· 5(6)·· 670-671 [1974]之圖 1 所示）； 環狀碳酸酯，例如（5-Rd-2-酮-1，3-二噁茂烯（dioxolen) -4-基）甲酉旨（Sakamoto e t a 1., Che m. Pharm. Bull. 32 (6) 224 1 -2 248 [ 1 984])，其中 Rd 是 Ri、r4 或芳基；及 Γ~\ 9 本發明之化合物的羥基選擇性地經WO 94/2 1 604中之 III、IV或V群基團所取代，或經異丙基所取代。 另一體系中，表A列示A2酯基的例子，而其，例 如，可經由氧而鍵結至_C(0)0-和-P(〇)(R)(0-)基團。表中 亦列示數個醯胺化物，其係直接鍵結至-C ( Ο)-或-P ( 〇 ) 2。 結構式1-5、8-10和16、17、19-22的酯係藉由令具有自 由羥基的該化合物與對應的鹵化物（氯化物或醯氯等）和 Ν，Ν·二環己基-N-嗎啉甲脒（或其他的鹼例如DBU、三乙 胺、CsC03、Ν，Ν-二甲基苯胺等）於DMF (或其他的溶劑例 如乙腈或Ν -甲基吡咯烷酮）中反應而製得。當Α3是膦酸酯 時，結構式5 - 7、1 1、1 2、2 1、和2 3 - 2 6的酯係藉由令醇 -28- 200819460 或醇鹽（或例如1 3、1 4和1 5化合物時，爲對應的胺）與單 氯膦酸酯或二氯膦酸酯（或其他活化的膦酸酯）反應而製 得。 表A_ 1. -CH2-C(0)-N(Ri)2 * 2. -CH2-S(0)(Ri) 3. -CH2-S(0)2(Ri) 4. -CH2-〇-C(0)-CH2-C6H5 5. 3-膽甾醇基 6· 3-吡啶基 7. Ν-乙基嗎啉基 8. -CH2-〇-C(0)-C6H5 9. -CH2-〇-C(0)-CH2CH3 10. -CH2-0-C(0)-C(CH3)3 11. .CH2-CCI3 12. -C6H5 13. -NH-CH2-C(0)0-CH2CH3 14. -N(CH3)-CH2-C(0)0-CH2CH3 15. -NHRi 16. -CH2-〇-C(0)-Ci〇Hi5 17. -CH2-〇-C(0)-CH(CH3)2 18. -CH2-C#H(0C(0)CH2Ri)-CH2--(〇C(0)CH2R〇*
-ch2-〇-c(o) 22.
23.
CH30(0)C
24.
#-對掌中心是（R)、（S)或外消旋的。 -29- 200819460 其他適合於本文所用的酯揭示於歐洲專利案 632,048 ° A 亦包a形成雙酯“的原官能性（profunctionalities)
基團’例如-CH2〇C(〇)〇cH3、 〇、-ch2scoch3、 -CH2OCON(CH3)2、或結構式- (^(1^)0(((:0)113 7)或 -CHiRhUCCOOR38)所示之烷基-或芳基-醯氧基烷基（連結 至酸性基團的氧），其中R3 7和R3 8是烷基、芳基、或烷 芳基（參見US 4,968,7 8 8)。通常，R37和R38是大體積的 基團，例如支鏈烷基、鄰位取代的芳基、間位取代的芳 基、或其組合，包含具1至6個碳原子之正（直鏈）、第 二、異-和第三-烷基。其例子是三甲基乙醯氧基甲基。當 特別用作爲口服的前藥時，可利用的A2的例子是烷醯氧 基甲酯及其衍生物，包含-CH(CH2CH20CH3)0C(0)C(CH3)3、
-CH2OC(O)C10H15、-CH20C(0)C(CH3)3、 -ch(ch2och3)oc(o)c(ch3)3、-ch(ch(ch3)2)oc(o)c(ch3)3、 -CH20C(0)CH2CH(CH3)2 ' -CH2〇C(0)C6Hi 1 ' -CH2〇C(0)C6H5 ^ -CH2〇C(0)Ci〇H15 ^ -CH20C(0)CH2CH3 ' -CH20C(0)CH(CH3)2、-CH20C(0)C(CH3)3 和 -CH20C(0)CH2C6H5。 當用作爲前藥時，所擇的酯通常是如上文所述之用作 爲抗病毒藥物者，特別是環狀碳酸酯、雙酯、或酞酯、芳 酯或烷酯。 -30- 200819460 如上所述，A3或A2基選擇性地用於在合成期間防止 被保護的基團產生副反應，因此其功用係在合成期間作爲 保護基（PRT)。大部分有關誰被保護、何時保護、及PRT 的性質的討論均決定於所欲保護對抗的反應的化學（例如 酸性、鹼性、氧化、還原或其他條件）及所欲的合成方 向。如果化合物被多個PRT所取代時，PRT基團並不需要 相同，且通常不是相同。通常，PRT將用於保護羧基、羥 基或胺基。去保護以形成自由基團的順序決定於所欲的合 成方向及所遭遇的反應條件，可以任何順序進行，均由熟 悉此項技術人士決定。 於一些體系中，A2被保護的酸性基團是酸性基團的 酯，A2是含有羥基的官能基。其他的體系中，胺基化合物 是用以保護酸官能基。適合之含有羥基或胺基的官能基係 如上文所述或參見 WO 95/07920。特別有興趣的是胺基 酸、胺基酸酯、多肽、或芳醇。典型的胺基酸、多肽和羧 基-酯化的胺基酸揭示於WO 95/07920第11-18頁和相關 部分中之L1或L2。WO 95/07920特別教示膦酸的醯胺化 物，但是須明白的是所述的醯胺化物是由任一種文中所述 的酸基與WO 95/07920所述的胺基酸基團所形成。 用於保護A3酸性官能基之典型的A2酯亦揭示於 WO 9 5/0 7920，同樣地，須明白的是可由本文中所揭示的 酸性基團與’920文獻的膦酸系基團形成相同的酯。典型的 酯至少定義於WO 95/07920第8 9-93頁（R31或R35之定 義）、第105頁的表、和第21-23頁（R1的定義）。特別有興 -31 - 200819460 趣的是下列基團的酯：未經取代的芳基（例如苯基）或芳烷 基（例如节基）、或經經基-、鹵-、院氧基-、殘基-及/或院 酯羧基-取代的芳基或烷芳基（特別是苯基、鄰-乙氧基苯 基、或C1-C4院酯殘基苯基（水楊酸Ci-C^院酯））。 經保護的酸性基團A3，特別是當使用 WO 95/07920 的酯或醯胺時，可用作爲口服的前藥。然而，並無必要爲 了使本發明的化合物有效地經口投服而保護A3酸性基 團。當本發明之化合物具有被保護的基團時，特別是當全 身或經口投服胺基酸醯胺化物或經取代和未經取代的芳基 酯時，其可進行活體內水解反應而產生自由酸。 一或多個酸性羥基被保護。如果一個以上的酸性羥基 被保護，則可使用相同或不同的保護基，例如酯可不同或 相同，或可使用混合的醯胺化物和酯。 典型的A2羥基保護基揭示於Greene (第14-1 18頁）， 包含醚類（甲基）；經取代的甲基醚類（甲氧甲基、甲硫甲 基、弟二丁硫甲基、（苯基二甲基5夕垸基）甲氧甲基、节氧 甲基、势-甲氧基苄氧基甲基、（4-甲氧基苯氧基）甲基、癒 瘡木酚（guaiacol)甲基、第三丁氧甲基、4-戊烯氧甲基、矽 烷氧基甲基、2 -甲氧基乙氧甲基、2，2,2 -三氯乙氧基甲 基、二（2-氯乙氧基）甲基、2-(三甲基矽烷基）乙氧甲基、 四氫吡喃基、3 -溴四氫吡喃基、四氫噻喃基、1 -甲氧基環 己基、4-甲氧基四氫吡喃基、4-甲氧基四氫噻喃基、4-甲 氧基四氨嚷喃基iSj-二氧化物、1-[(2 -氯-4 -甲基）苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基、35、1，4-二噁烷-2-基、四氫呋喃基、四 -32- 200819460 9 3 h 4 5 6 7 7a -八氫-7,8,8-二甲基-4，7 -伸 氫硫呋喃基、2,3,3a，4,5,6，， 士的9其W ·砰取代的乙基醚類（1 -乙氧基乙 甲基苯並呋喃_ 2 -基））， 其、1-甲基_1-甲氧基乙基、1_甲基- 基、1-(2-氯乙氧基）乙基1十签 1·节氧基乙基、卜甲基-卜节氧基|氯乙基、2,2,2_三氯乙 基、2-三甲基矽烷基乙基、2苯硒基）乙基、第三丁基、 2丙基、势-氯苯基、鈐-甲氧基苯基、2,4_二硝基苯基、 苄基）；經取代的苄基醚類（劈-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基 苄基、I-硝基苄基、身-硝基苄基、劳-鹵基苄基、2,6-二 氯苄基、势-氰基苄基、势-苯基苄基、2_和4_吡啶甲基、 3 -甲基_ 2 - _ Π定甲基氧化物、一本基甲基、對，對-一硝 基二苯甲基、5-二苯並環庚基、三苯基甲基、α_萘基二苯 基甲基、费-甲氧基苯基二苯基甲基、二（劈-甲氧基苯基） 苯基甲基、三（劳-甲氧基苯基）甲基、4-(4溴苯甲醯甲氧 基）苯基二苯基甲基、4,4，，4，，-三（4,5-二氯酞醯亞胺基苯基） 甲基、4,4，，4，，-三（乙醯丙醯氧基苯基）甲基、4,4’，4”-三（苯 甲醯氧基苯基）甲基、3-(咪唑-卜基甲基）二（4’，4”-二甲氧基 基）甲基 基、9-(9-苯基）咕噸基、9-(9-苯基-10-酮基）蒽基、1,3-苯 並二噻茂院（benzodithiolan)-2-基、苯並異噻卩坐基 S,S -二 氧化物）；矽烷基醚類（三甲基矽烷基、三乙基矽烷基、三 異丙基矽烷基、二甲基異丙基矽烷基、二乙基異丙基矽烷 基、二甲基己基矽烷基、第三丁基二甲基矽烷基、第三丁 基二苯基矽烷基、三（苄基）矽烷基、三（對二甲苯基）矽烷 基、三苯基矽烷基、二苯基甲基矽烷基、第三丁基甲氧基 -33- 200819460 苯基矽烷基）；酯類（甲酸酯、苯甲醯基甲酸酯、乙酸酯、 氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧 基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、劈-氯 苯氧基乙酸酯、數-聚-苯基乙酸酯、3_苯基丙酸酯、4 -酮 戊酸酯（乙醯丙酸酯）、4,4-(乙二硫基）戊酸酯、三甲基乙酸 酯、金剛烷酸酯、巴豆酸酯、4_甲氧基巴豆酸酯、苯甲酸 酯、苯基苯甲酸酯、2,4,6-三甲基苯甲酸酯（釆酸酯））； 碳酸酯類（甲基、9 -芴基甲基、乙基、2，2,2 -三氯乙基、2· (三甲基砂院基）乙基、2-(苯磺醯基）乙基、2-(三苯膦基）乙 基（2 - (t r i p h e n y 1 p h 〇 s p h ο n i 〇 ) e t h y 1))、異丁基、乙嫌基、_ 丙基、教-硝基苯基、苄基、劈-甲氧基苄基、3，4-二甲氧 基苄基、廣-硝基苄基、劈-硝基苄基、心苄基硫代碳酸 酯、4-乙氧基-1-萘基、甲基二硫代碳酸酯）；具有促進裂 斷的基團（2-碘苯甲酸酯、4-疊氮基丁酸酯、4-硝基-4-甲 基戊酸酯、第-(二溴甲基）苯甲酸酯、2-甲醯基苯磺酸酯、 碳酸2-(甲硫基甲氧基）乙酯、4-(甲硫基甲氧基）丁酸酯、 2-(甲硫基甲氧基甲基）苯甲酸酯）；其他的酯類（2,6-二氯-4-甲基苯氧基乙酸酯、2,6-二氯-4-(l，l,3,3-四甲基丁基）苯 氧基乙酸酯、2，4-二（1,1-二甲基丙基）苯氧基乙酸酯、氯二 苯基乙酸酯、異丁酸酯、單琥珀酸酯、（五）-2-甲基-2-丁烯 酸酯（惕各酸酯）、藏-(甲氧羰基）苯甲酸酯、身-聚-苯甲酸 酯、α-萘酸酯、硝酸酯、AM# 四甲基磷酸二醯胺烷 酯（卩1103?1101：0心3111丨(1&16)、#-苯基胺基甲酸酯、硼酸酯、二 甲基膦硫醯基（dimethylphosphinothioyl)、2,4-二硝基苯基 -34- 200819460 亞磺酸酯（sulfenate));及磺酸酯類（硫酸酯、甲磺酸酯 (mesylate)、苄基磺酸酯、對甲苯磺酸酯）° 特別的是，A2羥基保護基包含經取代的甲基醚、經取 代的苄基醚、矽烷基醚、和酯（包含磺酸酯）’更特別的是 三烷基矽烷基醚、對甲苯磺酸酯和乙酸酯° 典型的1，2-二醇保護基（因此，通常是二個0H基與 A2保護性官能基一起）揭示於Greene文獻的第118“ 42 頁，包含環狀縮醛和縮酮類（亞甲基、亞乙基、丨_第三丁基 亞乙基、1-苯基亞乙基、（4 -甲氧基苯基）亞乙基、2，2,2-三 氯亞乙基、丙酮化物（acetonide)(亞異丙基）、亞環戊基、 亞環己基、亞環庚基、苯亞甲基、靜-甲氧基苯亞甲基、 2，4_二甲氧基苯亞甲基、3，4 -二甲氧基苯亞甲基、2 -硝基 苯亞甲基）；環狀原酸酯類（甲氧基亞甲基、乙氧基亞甲 基、二甲氧基亞甲基、1-甲氧基亞乙基、1-乙氧基亞乙 基、1，2-二甲氧基亞乙基、ex-甲氧基苯亞甲基、1-(見二 甲基胺基）亞乙基衍生物、a-d#-二甲基胺基）苯亞甲基衍 生物、2-氧雜亞環戊基）；矽烷基衍生物（二-第三丁基亞矽 烷基 、1,3-(1，1，3,3-四異丙基二矽氧烷亞基 (disiloxanylidene))、及四-第三丁氧基二砂氧院-1，3 -二亞 基）、環狀碳酸酯類、環狀硼酸酯類、乙基硼酸酯和苯基 硼酸酯。 特別的是，1，2 -二醇保護基包含表Β所示者，更特別 的是環氧化物、丙酮化物、環狀縮酮和芳基縮醛。 -35- 200819460 ο όο γο ο B 表
To- C το\ γο Ν b R9ο ο V、 a /0 R9 ο r9( πχ。 ο
其中R9是Ci-C^烷基。 A2亦是Η、胺基的保護基或含羧基的化合物的基團， 特別是Η、-C(〇)R4、胺基酸、多肽、或非-C(0)R4、胺基 酸或多肽的保護基。形成醯胺的A2是可見於例如A3基 團。當 A2是胺基酸或多肽時，其具有結構式 Ri5NHCH(Ri6)C(〇)·’其中Ri5是H、胺基酸或多肽基團， 或R 1 5和R 1 6係如下所定義。
Ri 6是低級烷基或經胺基、羧基、醯胺、羧酸酯、羥 基、c6-c7芳基、胍基、咪唑基、吲哚基、锍基、亞礪、 及/或院基憐酸醋所取代之低級院基（C 1 _ C 6 )。R 1 0亦是與胺 基酸的αΝ —起形成脯胺酸基團（Ri〇 = -(CH2)3-)。然而，Rio 通常是天然發生的胺基酸的側基，例如Η、-CH3、 -CH(CH3)2、-CH2-CH(CH3)2、-chch3_ch2-ch3、-ch2-c6h5、-CH2CH2-S-CH3、-CH2OH、-CH(OH)-CH3、-CH2- sh、-ch2-c6h4oh、-ch2-co-nh2、-ch2-ch2-co-nh2、 -CH2-COOH、-CH2-CH2-COOH、-(ch2)4-nh2 和 _(ch2)3· NH-C(NH2)-NH2。R1g亦包含1-胍基丙-3-基、苄基、4-羥 -36- 200819460 基苄基、咪唑_4_基、吲哚-3 -基、甲氧基苯基和乙氧基苯 基。A2大部分是羧酸的殘基，但亦可爲Greene文獻第 3 i 5 -3 8 5頁所揭示之任何的典型胺基保護基。其包含胺基 甲酸酯類（甲基和乙基、9_芴甲基、9-(2-磺基）芴甲基、9-(2,7-二溴）芴甲基、2,7-二-第三丁基-[9-(10，10-二酮-10,10,10,10 -四氫噻噁烷基）]甲基、4 -甲氧基苯甲醯甲 基）；經取代的乙基（2，2，2 -三氯乙基、2 -三甲基矽烷基乙 基、2 -苯基乙基、1-(1-金剛烷基甲基乙基、ι,ι_二甲 基-2 -鹵乙基、1，1-二甲基-2,2 -二溴乙基、1,1·二甲基-2,2,2-三氯乙基、1-甲基-1-(4-聯苯基）乙基、1-(3,5-二-第 三丁基苯基）-1-甲基乙基、2-(2’-和 4’-吡啶基）乙基、2_ (見二環己基甲醯胺基）乙基、第三丁基、1-金剛烷基、 乙烯基、烯丙基、1-異丙基烯丙基、肉桂基、4-硝基肉桂 基、8-喹啉基、iV-羥基哌啶基、烷基二硫基、苄基、菽-甲 氧基苄基、势-硝基苄基、激-溴苄基、劳-氯苄基、2,4-二 氯苄基、4-甲基亞磺醯基苄基、9-蒽甲基、二苯基甲基）； 具有促進裂斷的基團（2-甲硫基乙基、2-甲基磺醯基乙基、 2-(势-甲苯磺醯基）乙基、[2-(1，3-二噻烷基）]甲基、4-甲硫 基苯基、2，4-二甲硫基苯基、2-鱗基乙基、2_三苯膦基異 丙基、1，1-二甲基-2-氰基乙基、獻-氯-鈐-醯氧基苄基、 劈-(二羥基氧硼基）苄基、5-苯並異噁唑基甲基、2-(三氟 甲基）-6-色酮基甲基）；可光裂解的基團（獻-硝基苯基、 3，5-二甲氧基苄基、齋-硝基苄基、3,4-二甲氧基-6_硝基苄 基、苯基（瘳-硝基苯基）甲基）；脲類衍生物（吩噻嗪基- -37- 200819460 (10)-羰基、AT-身-甲苯磺醯基胺基羰基、ΛΤ-苯基胺基硫 羰基）；其他的胺基甲酸酯類（第三-戊基、心苄基硫代胺基 甲酸酯、輿-氰基苄基、環丁基、環己基、環戊基、環丙 基甲基、教-癸氧基苄基、二異丙基甲基、2，2_二甲氧基羰 乙烯基、藏-(見iV-二甲基甲醯胺基）苄基、1，1-二甲基-3-(見iV-二甲基甲醯胺基）丙基、ι，ι_二甲基丙炔基、二（2-吡 B疋基）甲基、2 -咲喃甲基、2 -碘:乙基、異冰片基、異丁基、 異菸鹼基、身-(對甲氧基苯基偶氮基）苄基、1-甲基環丁 基、1-甲基環己基、1·甲基-1-環丙基甲基、1-甲基- Ιο, 5-二曱氧 基苯基 ） 乙基、 丨-甲基 -b(教-苯基偶 氮苯基 ） 乙 基、1-甲基-1-苯基乙基、1_甲基-1-(4-吡啶基）乙基、苯 基、劳-(苯基偶氮）苄基、2,4,6-三-第三丁基苯基、4-(三 甲基銨）苄基、2,4,6-三甲基苄基）；醯胺類（I甲醯基、ΛΓ-乙醯基、氯乙醯基、I三氯乙醯基、tV_三氟乙醯基、#-苯基乙醯基、iV-3-苯基丙醯基、吡啶甲醯基、iV-3-吡啶 基甲醯胺、7V-苯甲醯基苯基丙胺醯基、苯甲醯基、 靜-苯基苯甲醯基）；具有促進裂斷的醯胺類（#_瘳_硝基苯 基乙醯基、iV-藏-硝基苯氧基乙醯基、乙醯基乙醯基、 (Λ^-二硫代苄氧羰胺基）乙醯基、激-羥基苯基）丙醯 基、3 - -硝基苯基）丙醯基、#_ 2 -甲基-2 -(第-硝基苯氧 基）丙醯基、ΛΑ-2-甲基苯基偶氮苯氧基）丙醯基、#-4-氯丁醯基、τν-3-甲基-3-硝基丁醯基、7V-康-硝基肉桂醯 基、乙醯基甲硫胺酸、硝基苯甲醯基、UT-(苯甲 醯氧基甲基）苯甲醯基、4,5-二苯基-3-噁唑啉-2-酮）；環狀 -38- 200819460 醯亞胺衍生物（#-酞醯亞胺、iV-二硫雜琥珀醯基、#-2，3-二 苯基順丁烯二醯基、#_2,5_二甲基吡咯基、#-1，1，4,4-四甲 基二矽烷基氮雜環戊烷加合物、5 -取代的1，3 -二甲基-1，3,5 -三氮雜環己-2·酮、5-取代的1,3 -二苄基-1，3-5 -三氮 雜環己-2-酮、1-取代的3,5-二硝基-4-吡啶酮基）；f烷基 和芳基胺類（W-甲基、7V-烯丙基、τν-[2-(三甲基矽烷基） 乙氧基]甲基、7V_3 -乙酸氧基丙基、#-(1-異丙基-4-硝基- 2-酮基-3 -吡咯啉-3 -基）、四級銨鹽、7V-苄基、tV-二（4 -甲氧基 苯基）甲基、#-5-二苯並環庚基、7V-三苯基甲基、#-(4-甲 氧基苯基）二苯基甲基、#-9_苯基芴基、f2,7-二氯-9-芴基 亞甲基、7V-二茂鐵基甲基、#-2-吡啶甲胺ΛΓ-氧化物）、亞 胺衍生物（H1-二甲硫基亞甲基、苯亞甲基、iV-激-甲 氧基苯亞甲基、#-二苯基亞甲基、TV-[(2-D比Π定基）釆基]亞 甲基、#，（#’，#’-二甲基胺基亞甲基、亞異丙基、iV-教-硝基苯亞甲基、A^亞水楊基、iV-5-氯亞水楊基、7V-(5-氯-2-羥基苯基）苯基亞甲基、亞環己基）；烯胺衍生物 (iV-(5,5-二甲基_3-酮基-1-環己烯基））；iV-金屬衍生物（#-硼 烷衍生物、二苯基硼酸衍生物、[苯基（五羰基鉻_或_ 鎢）]碳烯基、f銅或鋅螯合物）；N-N衍生物（I硝基、 亞硝基、氧化物）；N-P衍生物（#-二苯膦基、二甲 硫膦基、二苯硫膦基、f二烷基磷醯基、7V-二苄基磷醯 基、7V-二苯基磷醯基）；N-Si衍生物；N-S衍生物；N-亞 磺醯基（sulfenyl)衍生物（7V-苯亞磺醯基、V-廣-硝基苯亞磺 醯基、7V-2,4-二硝基苯亞磺醯基、iV-五氯苯亞磺醯基、#- -39- 200819460 2 —硝基-4-甲氧基苯亞磺醯基、TV-三苯基甲基亞磺醯基、f 3 -硝基吡啶亞磺醯基）；和磺醯基衍生物（y-身-甲苯磺 醯基、7V-苯磺醯基、#-2,3,6-三甲基-4-甲氧基苯磺醯基、 7V-2,4,6 -二甲氧基苯磺酸基、#-2,6-一甲基-4-甲氧基苯擴 醯基、五甲基苯磺醯基、#-2,3,5,65-四甲基-4-甲氧基苯 磺醯基、#-4 -甲氧基苯磺醯基、7V-2,4,6-三甲基苯磺_ 基、iV-2,6-二甲氧基-4-甲基苯磺醯基、#-2,2,5,7,8-五甲基 口克-6-磺醯基、f甲磺醯基、/3 -三甲基矽烷基乙磺醯 基、#-9-蒽磺醯基、#-4-(4’，8’-二甲氧基萘甲基）苯磺醯 基、苄基磺醯基、三氟甲磺醯基、f苯甲醯甲磺醯 基）。 更特別地，經保護的胺基包含胺基甲酸酯和醯胺，更 特別的是-NHC^COR1或-N^Ci^NiR1)】。可在 A3位置用作 爲前藥之其他的保護基，特別是胺基或-NH(R5)的保護 基，是如下所示：
參見例如 Alexander，J. et al·; J. Med. Chem. 1996, 39, 480-486 ° A2亦是H或含胺基的化合物的基團，特別是胺基 酸、多肽、保護基、-NHS02R4、nhc(o)r4，-n(r4)2、nh2 或-NH(R4)(H)，如此’例如A3的羧基或膦酸基與胺反應 -40- 200819460 以形成醯胺，如同-C(0)A2、-P(0)(A2)2或 -Ρ(0)(0Η)(Α2)。通常，A2 具有結構式 R17C(0)CH(R16)NH- ，其中R17是OH、OA2、OR5、胺基酸或多肽基團。 胺基酸是低分子量化合物，低於約1，000 MW，含有 至少一個胺基或亞胺基和至少一個羧基。通常，胺基酸存 在於自然界，即可於生物材料中檢測得到，例如細菌或其 他微生物、植物、動物或人類。適合的胺基酸通常是α-胺 基酸，即特徵爲一胺基或亞胺基氮原子與一羧基的碳原子 被一單取代或未經取代的α碳原子所分隔開之化合物。特 別有興趣的是斥水性基團例如單-或二-烷基或芳基胺基 酸、環烷基胺基酸等。此類基團藉由增加母體藥物的分配 係數而提供細胞穿透性。通常，所述基團不含有锍基或胍 基取代基。 天然發生的胺基酸基團是天然存在於植物、動物或微 生物（特別是其蛋白質）中的基團。最通常地，多肽是實質 上由所述之天然發生的胺基酸基團所組成。所述的胺基酸 是甘胺酸' 丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、異白胺酸、絲胺 酸、蘇胺酸、半胱胺酸、甲硫胺酸、榖胺酸、門冬胺酸、 離胺酸、羥基離胺酸、精胺酸、組胺酸、苯基丙胺酸、酷 胺酸、色胺酸、脯胺酸、門冬醯胺、榖胺醯胺和羥基脯月安 酸。 當Α2是單一胺基酸基團或多肽時，其通常是被取代 在Α3。此共軛物是藉由在胺基酸（或例如多肽的C-端胺基 酸）的羧基與胺基氮之間形成醯胺鍵而得到。同樣地，# -41 - 200819460 軛物是在A3與胺基酸或多肽的胺基間形成。通常，只有 母體分子中的一個位置是被文中所述的胺基酸醯胺化，雖 然將胺基酸導入一個以上之允許的位置是在本發明的範圍 內。通常，A3的羧基被胺基酸醯胺化。通常，胺基酸的α-胺基或〇c-羧基或多肽的末端胺基或羧基係鍵結至母體官能 基，即胺基酸側鏈中的羧基或胺基通常是不用於與母體化 合物形成醯胺鍵的（雖然上述基團在合成共軛物期間可能 需要被保護，如下文所述）。 關於胺基酸或多肽之含羧基的側鏈，須明白的是，羧 基將選擇性地被保護，例如被Α2，被Α2酯化或被Α2醯胺 化。同樣地，胺基側鏈R16將選擇性地被Α2保護或被R5 取代。 所述之與側鏈胺基或羧基形成的酯或醯胺鍵，例如與 母體分子形成的酯或醯胺，是選擇性地於活體內或活體外 在酸性（pH<3)或鹼性（pH>10)條件下水解。或者，其在人 類胃腸道內實質上是安定的，但是於血液或細胞內的環境 下會進行酶促水解反應。酯或胺基酸或多肽醯胺化物亦可 用作爲製備含有自由胺基或羧基的母體分子的中間物。母 體化合物的自由酸或鹼，例如，係由本發明之酯或胺基酸 或多肽共軛物經由傳統的水解步驟而立即形成。 當胺基酸基團含有一或多個對掌中心時，適當的話， 可使用D、L、內消旋、蘇型（threo)或赤型（erythro)外消 旋物、非消旋物（scalemates)或其混合中任一者。通常， 如果中間物是在非酶促的條件下水解時（在醯胺是用作爲 -42- 200819460 自由酸或自由胺的化學中間物的情況），可使用D異構 物。反之，L異構物是更適合的，因爲其同時容許非酶促 和酶促的水解反應，且於胃腸道內可更有效地爲胺基酸或 二肽基傳送系統所傳送。 適合的胺基酸（其基團係以A2表示）的例子包含下列： 甘胺酸； 胺基多元羧酸，例如門冬胺酸、β -羥基門冬胺酸、榖 胺酸、β-羥基穀胺酸、β-甲基門冬胺酸、β-甲基榖胺酸、 β，β -二甲基門冬胺酸、γ -羥基榖胺酸、β，γ -二羥基穀胺酸、 β-苯基榖胺酸、γ-亞甲基榖胺酸、3-胺基己二酸、2-胺基 庚二酸、2-胺基辛二酸和2_胺基癸二酸； 胺基酸醯胺，例如榖胺醯胺和門冬醯胺； 多胺基-或多鹼-單元羧酸，例如精胺酸、離胺酸、β_ 胺基丙胺酸、γ-胺基胺基丁酸、鳥胺酸、瓜胺酸、高精胺 酸、高瓜胺酸、羥基離胺酸、別羥離胺酸 (allohydroxylsine)和二胺基 丁酸； 其他鹼性胺基酸基團，例如組胺酸； 二胺基二羧酸，例如α，α，-二胺基琥珀酸、α，α，_:胺 基戊一酸、α，α’·二胺基己二酸、α，α’_二胺基庚二酸、 α，α’-二胺基-β-羥基庚二酸、α,α，—二胺基辛二酸、α，α、二 胺基壬二酸、和α，α，-二胺基癸二酸； 亞胺酸，例如脯胺酸、羥基脯胺酸、別羥脯胺酸、γ_ 甲基脯胺酸、哌啶酸、5-羥基哌啶酸、和氮雜環丁烷-2-甲 酸； -43- 200819460 單-或二-烷基（通常是Ci-Cs支鏈或直鏈）胺基酸，例 如丙胺酸、纈胺酸、白胺酸、烯丙基甘胺酸、胺基丁酸、 正纈胺酸、正白胺酸、胺基庚酸、α-甲基絲胺酸、α-胺基-α-甲基-γ-羥基戊酸、α-胺基-α_甲基-δ-羥基戊酸、α-胺基· α-甲基-ε-羥基癸酸、異纈胺酸、α-甲基穀胺酸、α-胺基異 丁酸、α_胺基二乙基乙酸、α-胺基二異丙基乙酸、α-胺基 二正丙基乙酸、α-胺基二異丁基乙酸、α-胺基二正丁基乙 酸、α-胺基乙基異丙基乙酸、α-胺基-正丙基乙酸、α-胺基 二異戊基乙酸、α-甲基門冬胺酸、α-甲基穀胺酸、1-胺基 環丙烷· 1 -甲酸、異白胺酸、別異白胺酸、第三白胺酸、β-甲基色胺酸和α-胺基-β-乙基-β-苯基丙酸； β-苯基絲胺基（serinyl); 脂族α-胺基-β-羥基酸，例如絲胺酸、β-羥基白胺 酸、β-羥基正白胺酸、β-羥基正纈胺酸、和α-胺基-β-羥基 硬脂酸； α-胺基、α-、γ-、δ-或ε-羥基酸，例如高絲胺酸、γ_ 羥基正纈胺酸、δ-羥基正纈胺酸和ε-羥基正白胺酸基團； 刀豆胺酸（canavine)和副刀豆胺酸（canaline) ; γ-羥基鳥胺 酸； 2 -胺基己糖酸，例如D -胺基葡萄糖酸或D -胺基半乳 糖酸； α-胺基-β-硫醇，例如青黴胺、β-锍基正纈胺酸或β_锍 基胺基丁酸； 其他含硫的胺基酸基團，包含半胱胺酸；高胱胺酸、 •44- 200819460 β -苯基甲硫胺酸、甲硫胺酸、s _烯丙基-半胱胺酸亞颯、 2-疏基組胺酸、胱硫醚、和半胱胺酸或高胱胺酸的硫醚； 苯基丙胺酸、色胺酸和環-取代的α_胺基酸，例如苯 基-或環己基胺基酸（X-胺基苯基乙酸、心胺基環己基乙酸 和α-胺基-β-環己基丙酸；含有芳基、低級烷基、羥基、 胍基、氧烷基醚、硝基、硫或鹵基-取代的苯基之苯基丙 胺酸類似物和衍生物（例如酪胺酸、甲基酪胺酸和鄰-氯—、 對-氯-、3,4-二氯、鄰-、間-或對-甲基-、2,4,6-三甲基·、 2 ·乙氧基-5 -硝基-、2 -經基-5 -硝基-和對-硝基-苯基丙胺 酸）；呋喃基-、噻吩基-、吡啶基·、嘧啶基-、嘌呤基-或 萘基-丙胺酸；和含有犬尿胺酸、3 -羥基犬尿胺酸、2 -羥基 色胺酸和4-羧基色胺酸之色胺酸類似物和衍生物； α-胺基取代的胺基酸，包含肌胺酸（Ν-甲基甘胺酸）、 Ν-苄基甘胺酸、Ν-甲基丙胺酸、Ν-苄基丙胺酸、Ν-甲基苯 基丙胺酸、Ν-苄基苯基丙胺酸、Ν-甲基纈胺酸和Ν-苄基 纈胺酸；及 α-羥基和經取代的ex-羥基胺基酸，包含絲胺酸、蘇胺 酸、別蘇胺酸、磷酸絲胺酸和磷酸蘇胺酸。 多肽是胺基酸的聚合物，其中胺基酸單體的羧基是藉 由醯胺鍵而鍵結至鄰近的胺基酸單體的胺基或亞胺基。多 肽包含二肽、低分子量多肽（約 150〇-5 000 MW)和蛋白 質。蛋白質選擇性地含有3、5、10、50、75、100或更多 的基團，且適當地，實質上爲人類、動物、植物或微生物 蛋白質之序列同系物。其包含酶（例如過氧化氫酶）以及免 -45- 200819460 疫原例如KLH、或希望提升免疫反應之 蛋白質。多肽的性質和同一性可廣泛地i 多肽醯胺化物可作爲免疫原以提增 物的其他部分上之多肽（如果其在所投 免疫抗原性的（i m m u η 〇 g e n i c ))或抗原決 〇jjS3 體。 可與母體的非肽化合物結合的抗體 分離出母體化合物，例如於診斷或製備 體化合物和多肽的共軛物於親近的同種 多肽更具免疫抗原性，因而使得多肽更 於提增抗體。因此，多肽或蛋白質於通 動物（例如兔子、小鼠、馬或大鼠）體內 的，但是最終的共軛產物於至少一個上 疫抗原性的。多肽選擇性地在鄰近酸性 二基團間的肽鍵含有酶促肽基裂解位置 識別結構物（例如肽基裂解酶所識別的2 側面相接。 用於裂解本發明之多肽共轭物的肽 的，特別地，包含羧肽酶。羧肽酶藉由 化多肽，且於許多情況中對特定的C-端 類酶和其受質的一般要求是已知的。督 對指定的基團和自由竣基端基）是經由 化合物之磷或碳原子間的共價鍵結合的 時，預期此肽將被適合的肽基裂解酶所 任何類型的抗體或 變化。 對抗本發明之化合 服的動物體內不是 定基（epitope)的抗 是用於自混合物中 母體化合物時。母 動物體內通常是比 具免疫抗原性有利 常用於提增抗體的 未必是免疫抗原性 述動物體內應是免 雜原子之第一和第 。此裂解位置與酶 S團的特定序列）的 基裂解酶是爲已知 除去c-端基團而消 序列具專一性。此 U如，二肽（具有一 其α-胺基與本文的 。當Α3是膦酸酯 裂解，使鄰近胺基 -46- 200819460 酸基團的竣基自身催化地裂解膦酸醯胺（P ho spho no am id ate) 鍵。 適合的二肽基（根據其單字母碼命名）是：AA、AR、 AN、AD、AC、AE、AQ、AG、AH、AI、AL、AK、AM、 AF、AP、AS、AT、AW、AY、AV、RA、RR、RN、RD、 RC、 RE、RQ、RG、RH、RI、RL、RK、RM、RF、RP、 RS、RT、RW、RY、RV、NA、NR、NN、ND、NC、NE、 NQ、NG、NH、NI、NL、NK、NM、NF、NP、NS、NT、 NW、NY、NV、DA、DR、DN、DD、DC、DE、DQ、 DG、DH、DI、DL、DK、DM、DF、DP、DS、DT、DW、 DY、DV、CA、CR、CN、CD、CC、CE、CQ、CG、CH、 Cl、CL、CK、CM、CF、CP、CS、CT、CW、CY、CV、 EA、ER、EN、ED、EC、EE、EQ、EG、EH、El、EL、 EK、EM、EF、EP、ES、ET、EW、EY、EV、QA、QR、 QN、 QD、QC、QE、QQ、QG、QH、QI、QL、QK、QM、 QF、QP、QS、QT、QW、QY、QV、GA、GR、GN、GD、 GC、GE、GQ、GG、GH、GI、GL、GK、GM、GF、GP、 GS、GT、GW、GY、GV、HA、HR、HN、HD、HC、HE、 HQ、HG、HH、HI、HL、HK、HM、HF、HP、HS、HT、 HW、HY、HV、IA、IR、IN、ID、IC、IE、IQ、IG、IH、 II、IL、IK、IM、IF、IP、IS、IT、IW、IY、IV、LA、 LR、LN、LD、LC、LE、LQ、LG、LH、LI、LL、LK、 LM、LF、LP、LS、LT、LW、LY、LV、KA、KR、KN、 KD、KC、KE、KQ、KG、KH、KI、KL、KK、KM、KF、 -47- 200819460
ΚΡ、 KS、 KT、 KW 、KY 、KV 、MA、MR、 MN、 MD MC、 ME 、MQ 、MG 、MH、MI、 ML、MK、 MM、 MF ΜΡ、 MS、 MT、 MW、 MY 、MV 、FA、FR、FN 、FD、 FC FE、 FQ、 FG、 FH、 FI、 FL、 FK 、FM、FF 、FP、 FS FT、 FW、 FY、 FV、 PA、 PR、 PN 、PD 、 PC 、PE、 PQ PG、 PH、 PI、 PL、 PK、 PM、 PF 、PP 、 PS 、 PT、 PW PY、 PV、 SA、 SR、 SN、 SD、 SC 、SE 、 SQ 、SG、 SH SI、 SL、 SK、 SM、 SF、 SP、 ss 、ST、SW、 SY、 S V ΤΑ、 TR、 TN、 TD、 TC、 TE ' TQ 、TG、TH 、TI、 TL ΤΚ、 TM、 TF、 TP、 TS、 τ τ、τ w 、TY、TV、 WA、 WR WN、 WD 、WC 、WE 、WQ、WG、 WH、WI、 WL、 WK WM、 • WF 、WP 、WS 、wt、ww、 WY、wv、 YA、 YR YN、 YD、 YC、 YE、 YQ、 YG、 YH 、YI、YL、 YK、 YM YF、 YP、 YS、 YT、 YW、 YY、 YV 、VA、VR 、VN、 VD VC、 VE、 VQ、 VG、 VH、 VI、 VL 、VK、VM 、VF、 VP VS、VT、VW、VY 和 vv。
X 三肽基團亦可用作爲A2。當A3是膦酸酯日寸，序列-X4_pro-X5-(其中X4是任何胺基酸基團而Χ5是一胺基酸 基團、脯胺酸的羧酸酯、或氫）將可爲魯米那竣狀酶 (luminal carboxypeptidase)所裂斷而形成具有自由竣基的 •因而預計會自體催化裂斷膦酸醯胺鍵。χ5的殘基選擇 性地被苄基所酯化。 二肽或三肽物質可根據已知之可影響腸黏膜或其他細 胞類型的傳送之傳送性質及/或對肽酶的感受性而選擇° -48- 200819460 缺乏α-胺基的二肽和三肽爲發現於腸黏膜細胞的刷狀緣膜 之肽傳送子的傳送受質（8&丨，】^.，“？1^〇111^3.” 9:969-978 ( 1 992))。因此具傳送能力的肽可用於增進醯胺化物的 生物吸收率。具有一或多個D構型之胺基酸的二-或三肽 亦與肽的傳送相容，可用於本發明之醯胺化物。D構型的 胺基酸可藉由刷狀緣常見的蛋白酶（例如胺基肽酶N (EC 3 · 4.11 · 2 ))而用於減少二-或三肽對水解的感受性。此外， 二-或三肽亦可根據其對發現於腸內腔的蛋白酶之水解的 相對抗性而交互選擇。例如，缺asp及/或glu的三肽或多 肽是胺基肽酶A (EC 3.4.11. 7)的不良受質，斥水性胺基酸 (leu、tyr、phe、val、trp)的N-端缺乏胺基酸基團的二-或 三肽是肽鏈內切酶24.11 (EC 3.4.24.11)的不良受質，及在 羧基端的倒數第二個位置上缺乏pro基團的肽是羧肽酶P (EC 3.4.17)的不良受質。類似的考量亦可應用於對細胞溶 質、腎臟的、肝臟的、血清或其他肽酶的水解作用具相對 抗性或相對的感受性之肽的選擇。此類難以裂斷的多肽醯 胺化物是免疫抗原（immunogens)或者可用於結合蛋白質以 供製備免疫抗原。 HCV-抑制性化合物 本發明之化合物包含具有HCV -抑制活性化合物及用 於製備該活性化合物之中間化合物。名稱”HCV-抑制性化 合物“包含抑制HCV的化合物。 通常，本發明之化合物的分子量是自約200 amu至約 -49- 200819460 1 0,000 amu ;於本發明之一特定體系中，化合物的分子量 低於約5000 amu ;於本發明之另一特定體系中，化合物的 分子量低於約25 00 amu ;於本發明之另一特定體系中’化 合物的分子量低於約1〇〇〇 amu ;於本發明之另一特定體系 中，化合物的分子量低於約 8 0 0 a m u ;於本發明之另一特 定體系中，化合物的分子量低於約6 0 0 a m u ;及於本發明 之另一特定體系中，化合物的分子量低於約600 amu且分 子量大於約400 amu。 本發明之化合物之l〇gD (極性）亦通常低於約5。於本 發明之一體系中，化合物之l〇gD低於約4 ;於本發明之另 一體系中，化合物之l〇gD低於約3 ;於本發明之另一體系 中，化合物之logD大於約_5 ;於本發明之另一體系中， 化合物之logD大於約-3 ;及於本發明之另一體系中，化 合物之logD大於約0且低於約3。 在本發明之化合物範圍中所擇之取代基出現遞歸 (recursive)的程度。因此，”遞歸取代基”意指一取代基可 引用本身的其他範例。由於此類取代基的遞歸性質，理論 上，可多次地出現於任何指定的體系中。例如，Rx含有 Ry取代基。Ry可爲R2，因此其可爲R3。如果R3是選爲 R3°，則可選擇Rx的第二個例子。熟悉藥物化學技術的人 士均知此類取代基的總數合理地受限於所指化合物的所欲 性質。所述的性質包含（僅作爲範例而不用於限制發明地） 物理性質（例如分子量、溶解度或1 〇 g P )、應用性質（例如 對抗所欲的標的之活性）、和實施性質（例如合成的容易 -50- 200819460 性）。 僅作爲範例而不用於限制’於特定體系中’ A3、A2和 R 1均是遞歸取代基。通常，於一特定體系中’各個取代基 可各自獨立地出現20、19、18、17、16、15、14、13、 12、 11、 10、 9、 8、 7、 6、 5、 4、 3、 2、 1、或 〇 次。更 常地，於一特定體系中，各個取代基可各自獨立地出現12 或更少次。當本文所述之化合物係經一個以上之相同的指 定基團所取代時，例如，”R1 “或”A3“，則須明白的是，該 基團可相同或不同，即各個基團係各自獨立地選擇。波浪 線表示連結基團（group, moiety)或原子之共價鍵的連結位 置。 於本發明之一體系中，化合物係以單離或純化的形式 存在。通常，”單離和純化“乙辭表示化合物實質上不含生 物性物質（例如血液、組織、細胞等）。於本發明之一特定 體系中，該辭表示至少約5 0重量％之本發明之化合物或共 軛物不含生物性物質；於另一特定體系中，該辭表示至少 約7 5重量％之本發明之化合物或共轭物不含生物性物質； 於另一特定體系中，該辭表示至少約90重量％之本發明之 化合物或共軛物不含生物性物質；於另一特定體系中，該 辭表不至少約9 8重量％之本發明之化合物或共軛物不含生 物性物質；及於另一特定體系中，該辭表示至少約9 9重 里％之本發明之化合物或共軛物不含生物性物質。於另一 特疋體系中，本發明提供由合成方法（例如，活體外）製備 而得之本發明之化合物或共軛物。 -51 - 200819460 細胞的積聚 於一體系中，本發明提供可於人類PBMC (末梢血液 單核細胞）中積聚的化合物。PBMC意指具有圓形淋巴細胞 和單核白血球之血液細胞。生理上，PBMC是對抗感染的 機制的關鍵成份。PBMC可藉由自正常健康提供者的肝素 化全血或血沉棕黃層（buffy coats)單離出，其方法是標準 密度梯度離心及由界面收集、沖洗（例如經磷酸鹽緩衝的 鹽水）和貯存於冷凍介質中。PBMC可於多井微量盤中培 養。在數次的培養中，可除去上清液以進行評估，或者可 收集和分析細胞（Smith R· etal (2003)5/0(^ 102(7):2532-2 5 40)。此體系的化合物可進一步地含有膦酸酯或膦酸酯 前藥。更通常地，膦酸酯或膦酸酯前藥可具有如文中所述 之結構式A3。 立體異構物 本發明之化合物可具有對掌中心，例如，掌性碳或掌 性磷原子。本發明之化合物因此包含所有立體異構物的外 消旋混合物，包含對映異構物、非對映異構物、和位阻對 映異構物（atropisomers)。此外，本發明之化合物包含任何 或全部不對稱的掌性原子之富含或解析的光學異構物。換 言之，以上說明所述之對掌中心係以對掌異構物或外消旋 混合物的形式提供。外消旋和非對映異構混合物二者，以 及單離或合成的個別光學異構物，實質上不含其對映異構 -52- 200819460 物或非對映異構物夥伴，且全部在本發明的範圍內。外消 旋混合物係藉由已知的技術而單離成其個別之實質上光學 純質的異構物，例如，分離由光學活性添加物（例如酸或 鹼）所形成的非對映異構鹽，繼之轉換回光學活性物質。 大多數的情況中，所欲的光學異構物是由所欲的起始物之 適合的立體異構物開始利用立體專一性反應而製得的。 本發明之化合物於某些情況中亦可以互變異構物的形 式存在。雖然只能描述一種不定位的（delocalized)共振結 構式，但是所有此類的形式均涵蓋在本發明的範圍內。例 如，烯-胺互變異構物可存在於嘌呤、嘧啶、咪唑、胍、 眯、和四唑系統內，所有可能的互變異構形式均在本發明 的範圍內。 鹽和水合物 本發明化合物生理上可接受鹽之實例包括衍生自適當 鹼之鹽，該適當鹼如鹼金屬（例如，鈉）、鹼土金屬（例如， 鎂）、銨及nx4+ (其中义爲Ci-C*烷基）。氫原子或胺基之 生理上可接受鹽包括有機羧酸（如乙酸、苯甲酸、乳酸、 反丁烯二酸、酒石酸、順丁烯二酸、丙二酸、羥基丁二 酸、isethionic、乳糖醛酸及丁二酸）之鹽；有機磺酸（如甲 磺酸、乙磺酸、苯磺酸及對甲苯磺酸）之鹽；及無機酸（如 鹽酸、硫酸、磷酸及胺基磺酸）之鹽。羥基化合物之生理 上可接受鹽包括該化合物之陰離子與適當陽離子（如Na+及 NX4+，其中X係獨立地選自11或Ci-C*烷基）之組合物。 -53- 200819460 在治療用途上，本發明化合物之活性成份之鹽一般爲 生理上可接受的，即爲衍生自生理上可接受酸或鹼之鹽。 然而，亦可使用非生理上可接受之酸或鹼之鹽，例如，於 生理上可接受化合物之製備或純化上。所有鹽，無論是否 衍生自生理上可接受酸或鹼，均係在本發明之範疇內。 金屬鹽通常係藉由令金屬氫氧化物與本發明之化合物 反應而製得。由此方法所製得的金屬鹽的例子是含有 Li+、Na+、和K +的鹽。水溶性較低的金屬鹽可由水溶性較 高的鹽藉由添加適合的金屬化合物而沉澱出。 此外，鹽可由一些有機和無機酸（例如，HC1、HBr、 h2so4、h3po4或有機磺酸）與鹼性中心（通常是胺）或至酸 性基團之酸加成反應而形成。最後，須明白的是，本文所 述之組成物包含呈非離子化的形式及兩性離子形式之本發 明的化合物，及其與化學計量的水（例如水合物中的水）之 組合。 具有一或多個胺基酸之母體化合物的鹽亦涵蓋在本發 明的範圍內。任一種天然或非天然胺基酸是適合的，特別 是天然發生之作爲蛋白質的組份之胺基酸，雖然胺基酸通 常帶有具鹼性或酸性基團的側鏈（例如離胺酸、精胺酸或 穀胺酸）、或帶有具中性基團的側鏈（例如甘胺酸、絲胺 酸、蘇胺酸、丙胺酸、異白胺酸、或白胺酸）。 HCV的抑制方法 本發明之另一方面係有關抑制HCV活性的方法，包 -54- 200819460 含以本發明之化合物或組成物處理懷疑含有HCV的樣品 之步驟。 本發明之化合物可用作爲HCV的抑制劑、作爲此抑 制劑的中間物、或用於其他下文所述的用途。抑制劑通常 結合至肝的表面上或內腔內之位置。化合物可以不同程度 的可逆性結合至肝內。實質上不可逆結合的化合物是本發 明之方法的理想候選人。一旦標記後，實質上不可逆結合 的化合物可用作爲檢測HCV的探計。因此，本發明係有 關檢測懷疑含有H C V的樣品中之N S 3的方法，包含下列 步驟：以含有與標記物結合之本發明化合物之組成物處理 懷疑含有HCV的樣品；及觀察樣品對標記物的活性之影 響。適合的標記物係已知於診斷領域，包含安定的自由 基、螢光團、放射線同位素、酶、化學發光團、和發色 團。本文中之化合物藉由習用的方法利用官能基（例如羥 基或胺基）而加以標記的。本發明之一體系係提供式（I)化 合物，其包括一或多個可檢測之標記物或其結合或連接至 一或多個可檢測之標記物。 在本發明範圍內，懷疑含有HCV的樣品包含天然或 人造的材料例如活的有機體；組織或細胞培養物；生物性 樣品例如生物材料樣品（血液、血清、尿液、腦髓液、淚 液、痰、唾液、組織樣品等等）；實驗室樣品；食物、 水、或空氣樣品；生物產物樣品例如細胞萃取物，特別是 用於合成所欲的糖蛋白之重組合的細胞；等等。通常樣品 被懷疑含有HCV。樣品可置於任何介質中，包含水和有機 -55- 200819460 溶劑/水混合物。樣品包含活的有機體例如人類、 的材料例如細胞培養物。 本發明之處理（治療）步驟包含將本發明之化合 樣品或包含將組成物的前驅物加至樣品。添加步驟 何上文所述之投服方法。 必要時，在應用上述的化合物後，HCV的活性 任何方法觀察，包含直接或間接的檢測HCV活 法。涵蓋所有定量、定性、和半定量之檢測HCV 方法。通常使用一種上文所揭示之篩選方法，然而 應用任何其他的方法，例如活的有機體的生理性 察。 許多有機體含有HCV。本發明之化合物可用於 預防動物或人類之與HCV的活化相關的病症。 然而，篩選可抑制HCV的化合物時，須注意 分析的結果不必然與細胞培養物分析有關連性。因 細胞爲基礎的分析通常應爲主要的篩選工具。 HCV抑制劑的篩選 本發明之化合物係利用傳統之酶活性的評估技 選出抗HCV的抑制活性。在本發明的範圍內，通 合物是先根據活體外抑制HCV而篩選出，接著根 內活性而篩選出具有抑制活性的化合物。適合於活 用之化合物的活體外Ki (抑制常數）是低於約5x1 (T 常低於約lxl〇_7M，更宜低於約5x10_8M。 和人造 物加至 包含任 可利用 性的方 活性的 ，亦可 質的觀 治療或 的是酶 此，以 術而篩 常，化 據活體 體內使 6M，通 -56- 200819460 可用的活體外篩選方法已經被詳細描述。 藥學調合物 本發明之化合物係與根據一般實務所擇之傳統的載體 和賦形劑一起調製。錠劑將含有賦形劑、助流劑、塡充 劑、結合劑等。水性調合物係製成無菌的形式，而當以口 服以外的途徑輸送時，通常調成等滲透壓。所有調合物將 選擇性地含有賦形劑，例如 Handbook of Pharmaceutical Excipients ( 1 986)所揭示者。賦形劑包含抗壞血酸和其他 抗氧化劑、螯合劑例如EDTA、碳水化合物例如糊精、羥 基烷基纖維素、羥基烷基甲基纖維素、硬脂酸等。調合物 的pH範圍是自約3至約1 1，但通常是約7至1 0。 雖然活性成份可單獨投服，但較宜是以藥學調合物的 形式提供。本發明之調合物（包括獸醫和人類使用者）包含 至少一種如上所述之活性成份，以及一或多種可接受的載 體，及選擇性地其他的治療成份。就與調合物的其他成份 相容性而言，載體必須是”可接受的“，且對患者是生理上 無毒性的。 調合物包含適合於上述的投服途徑者。調合物可便利 地以單劑形式存在，且可由任何藥學上已知的方法製備。 技術和調合物一般可見於 Remington’s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co. ? Easton, PA)。此類方法包 含將活性成份與由一或多種輔助成份構成的載體混合在一 起的步驟。通常，調合物係藉由均勻和緊密地將活性成份 -57- 200819460 和液態載體或細分的固態載體或必要時二者混合在一起， 接著必要時使產物塑形。 適合經口投服之本發明的調合物可以不連續的單元形 式存在，例如膠囊、藥包或錠劑，而其分別含有預定量的 活性成份；或以粉末或顆粒的形式存在；於水性或非水性 的液體中之溶液或懸浮液的形式存在；或以水包油液態乳 液或油包水液態乳液的形式存在。活性成份亦可以大九 劑、藥糖劑或膏劑的形式投服。 錠劑可經由選擇性地與一或多種輔助成份一起壓製或 模塑而製得。壓製的錠劑可經由於適合的機器中壓製自由 狀態（例如粉末或顆粒）的活性成份，選擇性地混合黏合 劑、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、表面活性劑或分散劑 而製得。模塑的錠劑可經由於適合的機器中模製經惰性液 態稀釋劑潤濕的粉末狀活性成份的混合物而製得。錠劑可 選擇性地塗覆或劃切割線，及選擇性地製調成緩釋或控釋 活性成份的形式。 爲了投服至眼睛或其他外部組織（例如口和皮膚），調 合物宜以局部使用的軟膏或乳霜的形式應用，而其中活性 成份的含量爲，例如，0 · 0 7 5至2 0 % w/w (包含活性成份的 範圍在 〇. 1 %和 20%之間，並以 〇· 1 % w/w (例如 0.6% w/w、0.7% w/w等）的量增加），宜爲〇·2至1 5% w/w，更 宜爲0.5至10% w/w。當調製成軟膏時，活性成份可與石 躐性或水混溶性軟膏基礎物一起應用。或者，活性成份可 與水包油乳霜基礎物一起調製成乳霜。 -58- 200819460 必要時，乳霜基礎物的水相可包含，例如，至少 w/w的多元醇，即具有二或多個羥基的醇，例如丙二 丁烷1，3 -二醇、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油和聚乙 (包含PEG 4 00)及其混合物。局部用的調合物必要時 有可增進活性成份通過皮膚或其他受影響的區域之吸 穿透能力的化合物。此類皮膚穿透增進劑包含二甲亞 相關的類似物。 本發明之乳液的油相可利用已知的方法由已知的 製得。雖然油相可只含有一種乳化劑（emulsifier，或 emulgent)，必要時可含有由至少一種乳化劑與脂肪或 脂肪和油二者所形成的混合物。較佳的是，親水性乳 與作爲安定劑之親脂性乳化劑一起混合使用。使用油 肪二者亦屬較合宜的。乳化劑與或不與安定劑形成所 乳化蠟，而該蠟與油和脂肪一起形成所謂的乳化的軟 礎物，其形成乳霜調合物的油性分散相。 適合用於本發明之調合物的乳化劑（emulgent)和 安定劑包含Tween® 60、Span® 80、鯨蠟基硬脂醇 醇、肉豆蔻醇、甘油單硬脂酸酯和月桂基硫酸鈉。 適合於調合物之油或脂肪的選擇係根據達成所欲 粧品性質。乳霜宜爲不油腻的、不染色的和可沖洗 物，且具有適合的堅實度以避免由管子或其他容器裂 可使用直鏈或支鏈之單-或二元酸烷酯例如二·異己 酯、硬脂酸異鯨蠟酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉 酸異丙酯、油酸癸酯、棕櫚酸異丙酯、硬脂酸丁酯、 3 0% 醇、 二醇 可含 收或 礪和 成份 稱爲 油或 化劑 和脂 謂的 膏基 乳液 、苄 的化 的產 開。 二酸 豆蔻 掠欄 -59- 200819460 酸2-乙基己酯或支鏈酯的摻合物（稱爲Crodamol CAP)， 其中以最後三種爲較佳的酯。其可單獨使用或混合使用， 決定於所欲的性質。或者，使用高熔點脂質（例如白軟石 蠟及/或液態石蠟或其他礦油）。 本發明之藥學調合物含有一或多種本發明之化合物及 一或多種藥學上可接受之載體或賦形劑，以及選擇性地含 有其他的治療劑。含有活性成份的藥學調合物可爲任何適 合所欲的投服方法的形式。當用於口服時，可製成例如， 錠劑、糖錠、藥片、水性或油性懸浮液、分散性粉末或粒 劑、乳液、硬或軟質膠囊、糖漿或酏劑。供口服用的組成 物可根據任何先前技藝已知之藥學組成物的製法而製備， 而爲了提供美味的製劑，此類組成物可含有一或多種包含 增甜劑、調味劑、染色劑和防腐劑之試劑。含有活性成份 且混有適合錠劑用之無毒性之藥學上可接受的賦形劑之錠 劑是可接受的。所述之賦形劑可爲，例如，惰性稀釋劑， 例如碳酸銘或碳酸鈉、乳糖、乳糖單水合物、交聯纖維素 鈉、聚乙烯吡咯烷酮（povidone)、磷酸鈣或磷酸鈉；粒化 劑和崩散劑，例如玉米澱粉、或藻酸；黏合劑，例如纖維 素、微晶纖維素、澱粉、明膠或金合歡膠；及潤滑劑，例 如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑可未經塗覆或可利用已 知技術加以塗覆，包含微包膠以延遲於胃腸中的崩散和吸 附’如此而提供較爲長期的緩釋作用。例如，可使用時間 延遲材料例如甘油單硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯，單獨或 與蠟倂用。 -60- 200819460 口服用調合物亦可以硬質明膠膠囊的形式存在，其中 活性成份與惰性固態稀釋劑（例如磷酸鈣或高嶺土）混合， 或者以軟質明膠膠囊的形式存在，其中活性成份與水或油 性介質（例如花生油、液態石鱲或橄欖油）混合。 本發明之水性懸浮液含有活性成份且混合有適合於製 備水性懸浮液用的賦形劑。此類賦形劑包含懸浮劑（例如 羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸 鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和金合歡膠）、及崩散劑或 潤濕劑（例如天然發生的磷脂（例如卵磷脂）、環氧烷和脂肪 酸的縮合產物（例如聚氧乙烯硬脂酸酯）、環氧乙烷與長鏈 脂族醇的縮合產物（例如十七（伸乙氧基）十六烷醇）、環氧 乙烷與由脂肪酸和己糖醇酐所得的部分酯之縮合產物（例 如聚氧伸乙基山梨糖醇酐單油酸酯）。水性懸浮液亦可含 有一或多種防腐劑（例如對羥基苯甲酸乙酯或正丙酯）、一 或多種染色劑、一或多種調味劑、及一或多種增甜劑（例 如蔗糖或糖精）。 油性懸浮液可藉由將活性成份懸浮於植物油（例如花 生油、橄欖油、芝麻油或椰子油）或礦物油（例如液態石蠟） 中而製得。口服懸浮液可含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠘或 鯨蠟醇。可加入增甜劑（例如上文所述者）和調味劑以得到 美味的口服製劑。上述的組成物中可添加抗氧化劑（例如 抗壞血酸）加以防腐。 適合於加水而製成水性懸浮液之本發明之分散性粉劑 和粒劑含有活性成份並混合有分散劑或潤濕劑、懸浮劑、 -61 - 200819460 及一或多種防腐劑。適合的分散劑或潤濕劑和懸浮劑係如 上文所列舉。亦可存在有其他的賦形劑例如增甜劑、調味 劑和染色劑。 本發明之藥學組成物亦可以水包油乳液的形式存在。 油相可爲植物油（例如橄欖油或花生油）、礦物油（例如液態 石蠟）、或其混合物。適合的乳化劑包含天然發生的膠（例 如金合歡膠和黃蓍膠）、天然發生的磷脂（例如大豆卵磷 脂）、由脂肪酸和己糖醇酐所得的酯或部分酯（例如山梨糖 醇酐單油酸酯）、和上述的部分酯與環氧乙烷的縮合產物 (例如聚氧伸乙基山梨糖醇酐單油酸酯）。乳化劑亦可含有 增甜劑和調味劑。糖漿和酏劑可與增甜劑（例如甘油、山 梨糖醇或蔗糖）一起調製。此類調合物亦可含有緩和劑 (demulcent)、防腐劑、調味劑或染色劑。 本發明之藥學組成物可呈無菌注射製劑的形式，例如 無菌注射水性或油質懸浮液。懸浮液可根據先前技藝利用 上述之適合的分散劑或潤濕劑和懸浮劑而調製。無菌注射 製劑亦可爲於無毒性胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中之無 菌注射液或懸浮液，例如於1，3_丁-二醇中的溶液或製成 冷凍乾燥粉末。在可接受的載體和溶劑中，可使用的是 水、R i n g e r氏溶液和等渗透壓的氯化納溶液。除此之外， 無菌凝固的油類可便利地用作爲溶劑或懸浮介質。爲此目 的，可使用任何溫和凝固的油類’包含合成的單·或二甘 油酯。此外，脂肪酸（例如油酸）可同樣地應用於注射製 劑。 -62- 200819460 可與載體材料倂用以形成單一劑型之活性成份的量可 根據待處理的宿主和特定的投服模式而變化。例如，用於 經口投服至人類的緩釋型調合物可含有約1至1 000 mg的 活性材料，並混合有適合和便利量的載體材料，而該載體 材料的量可佔總組成物的約5至約95% (重量：重量）。藥 學組成物可製成供投服用之容易測量的量。例如，供靜脈 內注射用之水溶液可於每毫升溶液內含有約3至5 00 pg 的活性成份，如此可產生約3 0 mL/hr速率之適合的注射 量。 適合於投服至眼睛之調合物包含眼睛滴劑，其中活性 成份溶解或懸浮於適合的載體中，特別是適合活性成份之 水性溶劑。活性成份存在於此類調合物中的量宜爲0.5至 2 0%，有利的是0.5至10%，特別是約1.5% w/w。 適合於口腔內局部投服之調合物包含藥片，含有活性 成份以及調味的基質，通常是蔗糖和金合歡膠或黃蓍膠； 糊劑，含有活性成份以及惰性基質，例如明膠和甘油、或 蔗糖和金合歡膠；及漱口水，含有活性成份以及適合的液 態載體。 經直腸投服的調合物可爲與適合的基質（包含例如椰 子油或水楊酸酯）製成的栓劑形式。 適合於經肺內或鼻投服之調合物的顆粒大小爲，例 如，0.1至500微米（包含介於〇.1至500微米範圍內之以 例如0.5、1、30微米、35微米等量增加者），其係利用鼻 通道快速吸入或或口腔吸入以達到肺泡囊。適合的調合物 -63- 200819460 包含活性成份之水性或油性溶液。適合於氣溶膠或乾粉投 服之調合物可根據習知的方法製備，且可與其他的治療劑 一起輸送，例如在本發明之前之用於治療或預防與HCV 活性相關的病症之化合物。 適合於經陰道投服之調合物可製成子宮托、棉塞、乳 霜、凝膠、糊劑、泡沬或噴劑調合物的形成，除了活性成 份外，亦含有先前技藝習知之適合的載體。 適合於胃腸外投服之調合物包含水性和非水性無菌注 射液（可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑和可使調合物與 所欲的患者的血液等滲透壓的溶質）；及水性和非水性無 菌懸浮液（可包含懸浮劑和增稠劑）。 調合物係裝在單劑或多重劑容器（例如密封的安瓿和 小瓶）內，且可貯存在冷凍乾燥（凍乾）的條件下，只需要在 使用前添加無菌液態載體，例如注射用的水。立即注射的 溶液和懸浮液係由上文所述之無菌粉末、顆粒和錠劑製 成。較佳的單位劑型調合物是含有如上文所述之每日劑量 或單位每日多次劑量或其適合的分數之活性成份者。 須明白的是，除了上文特別提及的成份之外，本發明 之調合物可包含其他先前技藝中所欲類型的調合物習用的 試劑，例如適合於經口投服的調合物可包含調味劑。 本發明另外提供獸醫用組成物，其包含至少一種上述 之活性成份以及獸醫用載體。 獸醫用載體是適合於投服組成物的目的之材料，可爲 固態、液態或氣態材料，爲惰性且可爲獸醫界所接受者， -64- 200819460 且可與活性成份相容。獸醫用組成物可經口、胃腸外或任 何其他所欲的途徑投服。 本發明之化合物亦可調製成控制活性成份的釋出以減 少投藥的頻率或改良活性成份之藥動學或毒性變化曲線。 因此，本發明亦提供含有一或多種本發明之化合物之持釋 或控釋型組成物。 活性成份的有效劑量決定於待治療的病症、毒性、藥 物是否預防性地使用（低劑量）、輸送方法、及藥學調合物 的性質中至少一者，及將由臨床醫生根據習知之劑量漸增 硏究的結果而決定。有效劑量可預期爲每日自約0.0 0 0 1 至約 100 mg/kg體重，通常是每日自約 0.01至約 10 mg/kg體重，更常是每日自約〇.〇1至約5 mg/kg體重。更 常是每日自約〇.〇5至約0.5 mg/kg體重。例如，對約70 kg體重的成人而言，每日的候選劑量爲1 mg至1000 m g，宜爲5 m g至5 0 0 m g，且可以單劑或多重劑的形式投 服。 投服途徑 一或多種本發明之化合物（本文中稱爲活性成份）可由 任何適合於待治療的病症之途徑投服。適合的途徑包含 口、直腸、鼻、局部（包含頰和舌下）、陰道和胃腸外（包含 皮下、肌內、靜脈內、皮內、鞘內和硬腦膜外）等等。須 明白的是較佳的投服途徑可因例如患者的病症而變化。本 發明之化合物的一優點是其爲口服生物可吸收的，且可每 -65- 200819460 日投服。 組合式治療 本發明之活性成份亦可與其他的活性成份倂用。此類 組合物係根據待治療的病症、成份的交互反應性和組合物 的藥學性質而選擇。 本發明之任何化合物亦可與一或多種其他的活性成份 混合於單一劑型中以供同時或依序投服至患者。組合式治 療可以同時或依序的攝生法投服。當依序投服時，組合物 可以二或多次投服的方法投服。 組合式治療可提供”協同性“和”協同作用“，即當活性 成份一起使用時所達到的效果大於各個化合物分開使用時 的效果的總和。協同作用可於下列情況下獲致：（1)活性成 份於一組合的調合物中共同調製及同時投服或輸送；（2)活 性成份係以獨立不同的調合物的形式交互或平行地輸送； 或（3)活性成份係由其他的攝生法輸送。當以交互治療的方 式輸送時，化合物依序地投服或輸送（例如，於獨立不同 的錠劑、九劑或膠囊內，或於獨立不同的針筒內利用不同 的注射方式）時，可得到協同作用。通常，在交互治療期 間，有效劑量之各個活性成份是依序投服的，即連續地投 服，然而於組合式治療中，有效劑量之二或多種活性成份 的是一起投服的。 本發明之化合物的代謝物 -66 - 200819460 本文之化合物的活體內代謝產物亦涵蓋在本發明的範 圍內。此類產物可由所投服的化合物之例如氧化反應、還 原反應、水解作用、醯胺化作用、酯化反應等所產生’主 要是由酶促反應產生。因此，本發明包含由令本發明之化 合物與哺乳動物接觸一段足以產生其代謝產物的時間之方 法所產生的化合物。此類產物通常是經由下列方法鑑定 的：製備經放射標記（例如，C14或H3)之本發明的化合 物，利用胃腸外途徑將可檢測的劑量（例如，大於約0.5 mg/kg)投服至動物（例如大鼠、小鼠、天竺鼠、猴或人 類），給予充份的時間使進行代謝作用（通常約3 0秒至3 0 小時），及由尿液、血液或其他生物樣品中單離出轉換產 物。此類產物是輕易地被單離出，因爲其是被標記的（其 他的是利用存活於代謝物中之可結合抗原決定基的抗體而 單離出）。代謝物的結構係由習知的方法測定，例如，利 用MS或NMR分析。通常，代謝物的分析係利用與熟悉 此項技術人士所習知之傳統的藥物代謝硏究相同的方法進 行。只要轉換產物是未於活體內被發現，其可用於本發明 之化合物的治療性投藥的診斷分析，即使其本身可能不具 有HCV-抑制活性。 化合物於替代的胃腸分泌物中的安定性的測量方法係 爲已知。本文中之化合物於胃腸道中是安定的，在37 °C下 培育1小時後，低於約5 0莫耳百分率的被保護基團在替 代的腸液或胃液中被去保護。簡單地因爲化合物於胃腸道 中安定並不表示其無法於活體內被水解。本發明之膦酸酯 -67- 200819460 前藥通常於消化系統中是安定的，但其於消化腔、肝或其 他代謝器官內或於一般細胞內實質上水解成母體藥物。 本發明之化合物的製備方法之範例 本發明亦有關製備本發明之組成物的方法。組成物係 由任何適當的有機合成技術而製備。許多此類技術已見於 先前技藝。然而，許多已知技術詳述於 Compendium of Organic Synthetic Methods (John Wiley & Sons, New York), V o 1. 1，Ian T. Harrison and Shuyen Harrison，1971; V o 1. 2, Ian T. Harrison and Shuyen Harrison, 1 974; V o 1. 3 ,
Louis S. Hegedus and Leroy Wade, 1 977; V o 1. 4，Leroy G. Wade, j r., 1 9 8 0; V o 1. 5, Leroy G. Wade, Jr., 1984; and V o 1. 6, Michael B. Smith; as well as March, J·，Advanced Organic Chemistry， Third Edition, (John Wiley & Sons， New York, 1 9 8 5)， Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modern Organic Chemistry In 9 Volumes, Barry M. Trost, Editor-in-Chief (Pergamon Press, New York，1993 印刷中）。適合用於製備 本發明化合物之其他方法述於國際專利申請公開案號 WO 2006/020276 ° 許多製備本發明之組成物的方法的例子揭示於下文 中。所述之方法係用於說明製法的特性決不用於限制可應 用的方法的範圍。 通常，反應條件（例如溫度、反應時間、溶劑、收拾 -68- 200819460 步驟等）將是先前技藝中對所欲進行的特定反應所習見的 條件。引用的參考文獻以及其中所引用的文獻包括該條件 的詳細說明。通常溫度爲-100 °C至200 °c，溶劑爲非質子 性或質子性，及反應時間爲1 〇秒至1 〇天。收拾步驟通常 包括使任何未反應的試劑停止反應及繼之於水/有機層系 統間分配（萃取）和分離出含有產物的層。 氧化和還原反應通常在接近室溫（約20°c)的溫度下進 行，雖然金屬氫化物還原反應之溫度常降低至0°C至-100 °c，還原反應之溶劑通常是非質子性，而氧化反應之溶劑 可爲質子性或非質子性。反應時間可調整至達到所欲的轉 換率 ° 縮合反應通常係在接近室溫的溫度下進行，雖然對未 平衡之動力學控制的縮合反應而言，較低的溫度（0 °c至-1 〇〇 °c )亦是常見的。溶劑可爲質子性（常見於平衡反應）或 非質子性（常見於動力學控制的反應）。 標準的合成技術（例如共沸蒸餾除去反應副產物和利 用無水反應條件（例如惰性氣體環境））是先前技藝中所習見 的，且將適當地應用。 ”處理 “（treated、treating、treatment 等）乙辭，當用於 化學合成操作時，意指接觸、混合、反應、使之反應、使 之接觸、及其他此技術領域常用的用語，用以表示以此方 法處理一或多種化學個體以使之轉換成一或多種其他的化 學個體。此表示”以化合物2處理化合物1 “同義於”使化合 物1與化合物2反應“、”令化合物1與化合物2接觸“、” -69- 200819460 反應化合物1和化合物2 “、及其他有機合成技術領域常用 的表示法，以合理地表示化合物1經化合物2”處理“、化 合物1與化合物2”反應“、”使“化合物1與化合物2”反應 “等。例如，”處理“表示使有機化學品反應之合理和一般 的方法。除非特別指明，使用的是普通的濃度（0.0 1 Μ至 10Μ，通常是0.1 Μ至1 Μ)、溫度（-100°C至250 °C，通常 是-78°C至150°C，較通常是_78°C至100°C，更常是〇。(：至 l〇〇t )、反應容器（通常是玻璃、塑膠、金屬）、溶劑、壓 力、氣氛（對氧和水不敏感的反應通常是空氣，或者，對 氧或水敏感的反應通常是氮或氬）等等。有機合成技術領 域中已知的類似反應的知識可用於選擇特定方法中之，，處 理“的條件和裝置。特別地，熟悉有機合成技術之人士根 據先前技藝的知識而選擇可合理地預期會成功地進行所述 之方法的化學反應之條件和裝置。 各個例示的反應圖和實例（以下稱”例示的反應圖“）的 改良可得到特定例示的材料之多種類似物。上文引用之揭 示有適合的有機合成方法的文獻可應用於所述的改良。 於各個例示的反應圖中，有利的是將反應產物彼此分 離及/或與反應起始物分離。利用先前技藝習知的技術將 各步驟或連續步驟之所欲的產物分離及/或純化（以下稱爲 分離）至所欲的均勻度。通常此種分離包括多相萃取、由 溶劑或溶劑混合物結晶、蒸餾、昇華、或層析。層析可包 括多種方法，例如，包含：逆相和正相；體積排阻（size exclusion);離子交換；高、中、和低壓液相層析法和裝 •70- 200819460 置；小量分析；模擬移動床（simulated moving bed)(SMB) 和製備型薄層或厚層層析，以及小量薄層和快速層析。 另一種分離方法包括以一試劑處理混合物，而該試劑 經擇以結合或者提供可分離之所欲的產物、未反應的反應 起始物、反應副產物等。該試劑包含吸附劑或吸收劑，例 如活性碳、分子篩、離子交換介質等。或者，試劑可爲酸 (當爲鹼性材料時）、鹼（當爲酸性材料時）、結合劑（例如抗 體、結合性蛋白質、選擇性螯合劑（例如冠醚、液/液離子 萃取試劑（LIX)))等。 適當的分離方法的選擇決定於所涉及的物質的性質。 例如，蒸餾和昇華時之沸點和分子量、層析時是否存在有 極性官能基、多相萃取時物質於酸性和鹼性介質中的安定 性等。熟悉此項技術人士將應用最可能的技術以達到所欲 的分離。 單一立體異構物，例如對映異構物，實質上不含其之 他種立體異構物，可藉由外消旋混合物的解析而得到，其 方法是例如利用光學活性解析劑形成非對映異構物之方法 (Stereochemistry of Carbon Compounds, (1962)by E L · Eliel， McGraw Hill; Lochmuller, C. H·， （ 1 975) J. 1 13:(3 )2 8 3 -3 02)。本發明之對掌性化合物的 外消旋混合物可由任何適合的方法分離和單離，包含：（1 ) 與對掌性化合物形成離子性非對映異構鹽及利用分步結晶 或其他方法而分離，（2)與對掌性衍生試劑形成非對映異構 化合物、分離非對映異構物、及轉換成純質立體異構物， -71 - 200819460 及（3 )直接在對掌性條件下分離出實質上純質或富含的立體 異構物。 方法（1)中，非對映異構鹽可經由令對映異構純質的對 掌性驗（例如番木鱉鹼（brucine)、金雞鈉鹼、麻黃鹼、馬 錢子鹼（strychnine)、α-甲基-β-苯基乙胺（安非他命）等）與 帶W酸性官能基（例如羧酸和磺酸）之不對稱的化合物反應 Μ开彡）¾ °非對映異構鹽可藉由分步結晶或離子層析法而分 H °分離胺基化合物的光學異構物時，添加對掌性羧酸或 磺酸（例如樟腦磺酸、酒石酸、扁桃酸、或乳酸）可形成非 對映異構鹽。 或者，方法（2)中，待解析的受質與對掌性化合物之一 對映異構物反應而形成一雙非對映異構物（Eliel，E· and Wilen，S. ( 1 994) Stereochemistry of Organic Compounds，
John Wiley & Sons, Inc.，p. 3 2 2)。非對映異構化合物的製 法&含：令不對稱的化合物與對映異構純質的對掌性衍生 試劑（例如薄荷基衍生物）反應，及繼之分離非對映異構物 和進行水解反應而得自由的對映異構富含的咕噸。光學純 度的測量方法包括：製備外消旋混合物之對掌性酯（例如 薄荷醇酯，例如（-)氯甲酸薄荷醇酯在鹼的存在下，或 Mosher酯（α·甲氧基-α-(三氟甲基）苯基乙酸酯）（Jac〇b III. ( 1 982) Ckm· 47:4 1 65)，及分析 NMR 光譜以檢測
二位阻異構之非對映異構物的存在。位阻異構物之安定的 非對映異構物的分離和單離方法包括：分離位阻異構的萘 基-異喹啉及接著進行正相和逆相層析法（Hoye, T·，WO -72- 200819460 9 6 /1 5 1 1 1)。方法（3 )中，二對映異構物之外消旋混合物可 利用對掌性固相的層析法而分離（Chiral Liquid Chromatography ( 1 989) W. J. Lough, Ed. Chapman and Hall， New York; Okamoto, ( 1 990)J. of Chromatogr. 5 1 3:3 7 5 - 3 78)。富含或純化的對映異構物可利用可區分其他對掌性 分子的不對稱碳原子的方法而加以區別，例如旋光度和偏 極光譜（circular dichroism)。 本發明特定具體例 國際專利申請案WO 2006/020276揭示某些特定化合 物。在本發明一特定具體例，本發明化合物排除下列化合 物：
-73- 200819460
在本發明另一具體例中，本發明排除如下化合物： -74- 200819460
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲環戊基或第三丁基； Z 1係選自下列結構： HN-
Ra R〇
Rb N-
S
Ra爲甲氧基； R b 爲 H， 1^爲選擇性經一或多個？、01、：^、1、（(：1-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 -75- 200819460 A3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（X)化 物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲（CM-6)烷基或（C3-6)環烷基； Z 1係選自下列結構：
Ra爲甲氧基；
Rb 爲 Η ;
Rc爲選擇性經一或多個F、Cl、Br、I、（Cl-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 Α3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（X)化 合物： -76- 200819460
Rp
Vo h/n
g 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲環戊基或第三丁基； Z 1係選自下列結構： HN-
S
Ra
Rc
Ra爲（C1-6)烷氧基；
Rb 爲 Η ; 1^爲選擇性經一或多個？、〇1、81、1、（(：1-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 A3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（X)化 合物：
-77- (X) 200819460 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲（C1-6)烷基或（C3_6)環垸基； Z 1係選自下列結構：
Ra爲（C1-6)院氧基；
Rb 爲 Η ; 1^爲選擇性經一或多個？、〇1、8^1、（(：1-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 Α3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（XI)化 合物：
(XI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲環戊基或第三丁基； -78- 200819460 z1係選自下列結構：
Ra爲甲氧基；
Rb 爲 Η ; 11。爲選擇性經一或多個？、0：1、；^、1、（(：1-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 Α3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（XI)化 合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Rp爲（C1-6)烷基或（C3-6)環烷基； Z1係選自下列結構： -79- 200819460
R a爲甲氧基； R b 爲 Η， 1爲選擇性經一或多個？、€1、：61*、1、（(：1-6)烷基或 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 A3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（XI)化 合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲環戊基或第三丁基； Z 1係選自下列結構：
80- 200819460
Ra爲（C1-6)烷氧基；
Rb 爲 Η ;
Rc爲選擇性經一或多個F、C 1、B r、I、（ C 1 - 6 )烷基或 (Cl-6)烷氧基取代之苯基；及 A3爲此處定義之任何基團。 在本發明另一具體例中，本發明化合物排除式（XI)化 合物··
RP
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： RP爲（C1-6)烷基或（C3-6)環烷基； Z1係選自下列結構： HN-
S R〇
Ra爲（C卜6)烷氧基；
Rb 爲 Η ;
Rc爲選擇性經一或多個F、Cl、Br、I、（CM -6)烷基或 -81 - 200819460 (C1-6)烷氧基取代之苯基；及 A3爲此處定義之任何基團。 在本發明特定具體例中，Z 1係選自下列結構：
-82- 200819460
N
在本發明特定具體例中，Z1係： -83- 200819460
在一特定具體例中，本發明提供式（II)化合物：
(II) 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中：
Rf爲Η、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、或環烷 基，該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨立地爲鹵基、羥基、氰基、芳硫基、環烷 基、芳基、雜芳基、烷氧基、NFURi、-CtCONRhl^，其中 各芳基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基，胺基、烷氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代； -84- 200819460 及 各Rh及R,係獨立地爲η、烷基、或鹵烷基。 在本發明特定具體例中，Rf爲經芳基取代之烷基、烯 基、或炔基，該芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥 基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、院氧基羰基、烷醯氧 基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代。 在本發明特定具體例中，Rf爲經芳基取代之院基，該 芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、氰基、硝 基、胺基、垸氧基、院氧基鑛基、院醒氧基、鹵垸基、或 鹵烷氧基取代。 在本發明特定具體例中，Rf爲經苯環取代之（C 1-6)烷 基，該苯環係選擇性經1、2或3個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰基、院酸氧基、鹵 院基、或鹵院氧基取代。 在本發明特定具體例中，爲苄基或苯乙基，其選擇 性經1、2或3個烷基、鹵基、羥基、氰基、硝基、胺 基、烷氧基、烷氧基羰基、烷醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧 基取代。 在本發明特定具體例中，Rf爲H、甲基、乙基 '丙 基、丁基、環丙基甲基、3-丁烯基、2 -甲基丙基、異丙 基、乙烯基、順_卜丙烯基、反-1-丙烯基、順-1-丁烯基、 2-甲基丙烯基、2-苯基乙烯基、2-苯基乙炔基、3-甲基- 2-丁烯基、2-羥基乙基、2-羥基-2-甲基丙基、氰基甲基、甲 氧基甲基、N-(2,2,2-三氟乙基）-2-胺基乙基、苯乙基、2- -85- 200819460 氯苯乙基、2-氟苯乙基、2 -甲基苯乙基、2-氯-6-氟苯乙 基、苯硫基甲基、苄基、4-氟苄基、3-氟苄基、2-氟苄 基、4-氰基苄基、3-氰基苄基、2-氰基苄基、4-甲氧基苄 基、3-甲氧基苄基、2-甲氧基苄基、2-溴苄基、2-三氟甲 氧基苄基、2-異丙氧基苄基、2-甲基苄基、3-甲基苄基、 4-甲基苄基、2-乙基苄基、4-三氟甲基苄基、3-三氟甲基 节基、2 -三氟甲基节基、4 -氯节基、3 -氯节基、2 -氯节 基、2,6-二氟苄基、2-氯-6_氟苄基、2,6-二氯苄基、2-甲 氧基-6-氟苄基、2,6-二甲基苄基、2,6-二氟-3-氯苄基、 2,6-二氟-4-氯苄基、2-氯-3,6-二氟苄基、2,3,6-三氟苄 基、3 -氯-2,4 -二氟节基、2 -氯-3,6_二氟节基、2，3·二氯- 6-氟苄基、2-硝基苄基、2-胺基苄基、2-噻吩基甲基、2-呋 喃基甲基、3-呋喃基甲基、5-三氟甲基呋喃-2-基甲基、5-吡唑基甲基、2-噁唑基甲基、4-甲基噻唑-2-基甲基、3-吡 D定基、2 -卩比Π定基甲基、3 -經基-2 -卩比D定基甲基、6 -氯-2 - D比D疋 基甲基、2 -吡嗪基甲基、5 -嘧啶基甲基、2 -嘧啶基甲基、 4-嘧啶基甲基、苯基、2-噻唑基、Ν，Ν-二甲基胺基羰基甲 基、Ν-甲基胺基羰基甲基、胺基羰基甲基、1-丙炔基、或 2 -甲基噻唑-4-基甲基。 在一特定具體例中，本發明提供式（III)化合物： -86- 200819460
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中：
Rj爲1_[Ν-(2,2,2-三氟乙基）亞胺基]乙基、α，α-二氟苯 乙基、環丙基乙醯基、丁醯基、4，4,4-三氟丁醯基、3,3,3_ 三氟丙基磺醯基、3，3-二甲基丁醯基、環戊基胺基-羰基、 環丙基乙醯基、2-原冰片烷基乙醯基、2-胺基-3,3-二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4-三氟甲基苯基、3-三氟甲基苯 基、2-三氟甲基苯基、或4-第三丁基噻唑-2-基。 在本發明式（ΠΙ)化合物之特定具體例中，Ζ爲OiY1 爲Ο ;及Z2a及Z2b各爲氫。 在本發明特定具體例中，Q1爲乙烯基。 在一特定具體例中，本發明提供式（IV)化合物：
-87- 200819460 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（V)化合物： η
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（VI)化合物：
(VI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中：
Rf爲Η、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、或環烷 基，該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨地爲鹵基、經基、截基、方硫基、環院 基、芳基、雜芳基、烷氧基、NRhl、-CbC^NRhl，其中 200819460 各芳基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基、胺基、烷氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代； 及 各Rh及Ri係獨立地爲Η、烷基、或鹵烷基；及 Rj爲1-[Ν-(2,2,2 -二氟乙基）亞胺基]乙基、α，α -二氟苯 乙基、環丙基乙醯基、丁醯基、4,4,4-三氟丁醯基、3,3,3_ 三氟丙基磺醯基、3，3 -二甲基丁醯基、環戊基胺基羰基、 環丙基乙醯基、2-原冰片烷基乙醯基、2-胺基-3,3-二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4 -三氟甲基苯基、3 -三氟甲基苯 基、2-三氟甲基苯基、或4_第三丁基噻唑基。 在—特定具體例中，本發明提供式（VII)化合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中：
Rf爲Η、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、或環烷 基’該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨立地爲鹵基、羥基、氰基、芳硫基、環烷 基、方基、雜芳基、烷氧基、NRhRi、-C( = 0)NRhRi，其中 各方基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 -89- 200819460 氰基、硝基、胺基、烷氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代； 及 各Rh及I係獨立地爲Η、烷基、或鹵烷基；及 心爲1-[Ν·(2,252 -三氟乙基）亞胺基]乙基、α，α-二氟苯 乙基、環丙基乙醯基、丁醯基、4，4,4-三氟丁醯基、3，3,3-三氟丙基磺醯基、3，3 -二甲基丁醯基、環戊基胺基羰基、 環丙基乙醯基、2-原冰片烷基乙醯基、2-胺基-3，3-二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4 -三氟甲基苯基、3 -三氟甲基苯 基、2-三氟甲基苯基、或4-第三丁基噻唑-2-基。 在一特定具體例中，本發明提供化合物之前藥或其藥 學上可接受鹽。 在一特定具體例中，本發明提供式（VIII)前藥：
或其藥學上可接受鹽，其中：
Rk爲前藥部分。 在本發明特定具體例中，Rk爲苄氧基甲基、三甲基乙 醯氧基甲基碳酸酯、2-甲基丙氧基-羰氧基甲基、4-羥基-2-丁烯基、苯甲醯氧基甲基、乙氧基羰氧基甲基、或下式 -90- 200819460 基團：
在一特定具體例中，本發明提供式I、II、III或 化合物，其中Q1及z2a —起與所連接之原子形成12· 雜環，該雜環可選擇性經一或多個酮基（ = 〇)或A3取f 在一特定具體例中，本發明提供式（IX)化合物： VIII 18員
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（X)化合物： -91 - (X) 200819460 η
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XI)化合物： η
(XI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XII)化合物： -92- (XII) 200819460 η
〇 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XIII)化合物： π
在一特定具體例中，本發明提供式（XIV)化合物： -93- (xiv) 200819460
在一特定具體例中，本發明提供式（XV)化合物
(XV) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XVI)化合物： -94- 200819460
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（χνιι)化合物：
(XVII) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XVIII)化合物： -95- (XVIII) (XVIII)200819460
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XXIV)化合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XXV)化合物： -96- 200819460
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式（XXVI)化合物：
或其藥學上可接受鹽、或前藥。 在一特定具體例中，本發明提供式I化合物：
〇
- 97- (I) 200819460 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： R1係獨立地選自Η、烷基、烯基、炔基、芳基、環烷 基、雜環、鹵素、鹵烷基、烷基磺醯胺基、芳基磺 醯胺基、-C(0)NHS(0)2-、或-S(0)2-，選擇性經— 或多個A3取代； R2係選自 a) -C(Y1)(A3) ^ b) (C2-10)烷基、（C3-7)環烷基或（C1-4)烷基-(C3-7)環 烷基，其中該環烷基及烷基-環烷基可選擇性經 (C1-3)烷基單-、二-或三-取代，或 其中該烷基、環烷基及烷基-環烷基可選擇性經 選自羥基及〇-(Cl-4)烷基之取代基單-或二-取 代，或 其中各該烷基可選擇性經鹵素單-、二-或三-取 代，或 其中各該環烷基爲5-、6-或7-員，一或兩個不直 接彼此連接之-CH2-基團可選擇性被-〇-替換， 如此〇-原子係經由至少兩個C-原子連接至R2 所連接之N原子， c) 苯基、（C1-3)烷基-苯基、雜芳基或（C1-3)烷基-雜 芳基， 其中雜芳基爲具有選自Ν、Ο及S之1至3個雜 原子之5-或6-員環，其中該苯基及雜芳基可 -98- 200819460 選擇性經選自鹵素、-OH、（C1-4)烷基、O-(C1-4)烷基、S-(Cl-4)烷基、-NH2、-CF3， -NH((Cl-4)烷基）及-N((Cl-4)烷基）2、-CONH2 及-CONH-(Cl-4)烷基之取代基單-、二-或三-取代；及其中該（C 1-3)烷基可選擇性經一或多 個鹵素取代；或 d)-S(0)2(A3)； R3爲Η或（C1-6)烷基； Υ1 係獨立地爲 Ο、S、N(A3)、N(0)( A3)、Ν(ΟΑ3)、 Ν(0)(0Α3)或 Ν(Ν(Α3)(Α3)); Ζ 爲 Ο、S 或 NR3 ; Z 1係選自下列結構=
Ra爲Η或（C1-6)烷氧基；
Rb 爲 Η、F、Cl、Br、I 或（C1-6)烷基； -99- 200819460
Rc 爲 Η、氰基、F、Cl、Br、I、-C( = 0)NRdRe、或係 選擇性經一或多個F、Cl、Br、I、（Cl-6)烷基、或 (Cl-6)烷氧基取代之苯基；
Rd及Re各自獨立地爲H或（C卜6)烷基； 各L獨立地爲CH或N; 冗2&爲 H、（C1-10)烷基、（C2-10)烯基、（C2-10)炔基， 其中任何碳原子可被選自 〇、S或N之雜原子替 換，或Z2a選擇性與一或多個R1、R2、Q1或A3形 成碳環或雜環； 冗21)爲 H、（C1-6)烷基、（C2-8)烯基、（C2-8)炔基； Q1爲（C1-8)烷基、（C2-8)烯基或（C2-8)炔基；或Q1及 Z2a —起與所連接之原子形成碳環或雜環，該碳環 或雜環可選擇性經一或多個酮基（ = 〇)或A3取代； A3係獨立地選自PRT、Η、-OH、_C(0)0H、氰基、烷 基、烯基、炔基、胺基、醯胺基、醯亞胺基、亞胺 基、鹵素、CF3、CH2CF3、環烷基、硝基、芳基、 芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜環、-C(A2)3、 -C(A2)2-C(0)A2、-C(0)A2、-C(0)0A2、-0(A2)、 -N(A2)2 ' -S(A2) > -CH2P(Y1)(A2)(OA2) > -CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ' -CH2P(Y1)(〇A2)(OA2) ^ -OCH2P(Y1)(〇A2)(OA2) > -OCHzPCY^CA^COA2) ^ -OCH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ' -C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(0A2) > -C(0)0CH2P(Y1)(A2)(0A2) > -C(0)0CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ -CH2P(Y1)(〇A2)(N(A2)2) ' -0CH2P(Y1)(0A2)(N(A2)2) ' -100- 200819460 -C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(N(A2)2) > -CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) ' -C(0)0CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) > -(CH2)m-雜環、 -(CH2)mC(0)0 烷基、-0-(CH2)m-0-C(0)-0 烷基、 -0-(CH2)r-0-C(0)-(CH2)m-烷基、-(CH2)m0-C(0)-〇-烷基、-(CH2)m0-C(0)-0-環烷基、 -N(H)C(Me)C(0)0-烷基、或烷氧基芳基磺醯胺 基， 其中各A3可選擇性經1至4個如下取代基取 代： -R1 > -P(Yl)(OA2)(OA2) > -P(Y1)(OA2)(N(A2)2) ^ -P(Y1)(A2)(OA2) 、 -P(Y1)(A2)(N(A2)2)、或 P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) > -c( = o)(n(a2)2)、鹵 素、烷基、烯基、炔基、芳基、碳環、雜環、 芳烷基、芳基磺醯胺基、芳基烷基磺醯胺基、 芳氧基磺醯胺基、芳氧基烷基磺醯胺基、芳氧 基芳基磺醯胺基、烷基磺醯胺基、烷氧基磺醯 胺基、烷氧基烷基磺醯胺基、芳硫基、 -(CH2)m 雜環、-(CH2)m-C(0)0-烷基、 -0(CH2)m0C(0)0 烷基、-0-(CH2)m-0-C(0)-(CH2)m-烷基、-(CH2)m-0-C(0)-0-烷基、 -(CH2)m-0-C(0)-0-環烷基、-n(h)c(ch3)c(o)o-烷 基、或烷氧基芳基磺醯胺基，選擇性經R1取 代； -101 - 200819460 選擇性地，各自獨立之A3及Q1可一起與一或多個A3 或Q1基團形成一環； A2係獨立地選自PRT、Η、烷基、烯基、炔基、胺 基、胺基酸、烷氧基、芳氧基、氰基、鹵烷基、環 烷基、芳基、雜芳基、烷基磺醯胺基、或芳基磺醯 胺基，選擇性經Α3取代；及 m爲0至6 ; 惟本案化合物並非下列式之任一者：
-102- 200819460
【實施方式】 反應圖及實例 這些一般之示範性方法述於下文及述於實例中。下列 方法之各產物係可在用於後續方法之前選擇性地加以分 離、單離及/或純化。 一些用於製備本發明化合物之示範性方法係提供於此 -103- 200819460 處，例如，下文實例中。這些方法係用於說明此類製備之 本質，而非用於限制可應用方法之範疇。某些本發明化合 物係可用於製備其他本發明化合物之中間物。例如，各種 本發明膦酸類化合物之互相間轉變係述於下文。 製備中間物： 製備膦酸中間物： 1.合成及解析（1S，2R)-1-胺基-2·乙烯基環丙烷-1-膦酸二乙 酯·二苯甲醯基-L-酒石酸鹽
Ph
Cs0HH20 + 」nNEt3+Cr OEt
Ph^V? - OEt 严 1 N HCI / CH2CI2 - OEt严 與二苯甲醯基 _L-酒石酸結晶
PhOCO^COOH PhOCO'' ΧΟΟΗ
II P-OEt OEt 當（N-亞苄基胺基甲基）膦酸二乙酯（50g，196 mmol)、 反-1，4·二溴-2-丁烯（50g，23 5 mmol)及氯化苄基三乙基銨 (4.5g，19.6 mmol)於二氯甲院（1.0 L)中之溶液加入氫氧化 鉋單水合物（82g，490 mmol)時，用機械攪拌器在室溫下攪 拌。所得混合物在加入另一部分氫氧化鉋單水合物（8 2g， 490 mmol)後攪拌18小時。所得混合物另攪拌24小時。 所得鹽然後經由塞里塑料5 2 1墊過濾，濾液在室溫下以 IN HC1水溶液攪拌3小時。所得混合物經由另一塞里塑 -104- 200819460 料5 2 1墊過濾，及將濾液之二相分離。有機相部分以1 n HC1水溶液（25 0 mLxl)萃取。水相部分以二氯甲烷（250 mLxl)清洗，及混合的水相部分以乙酸乙酯（500 mL)攪 拌，同時小心地加入 84g (1 mol)NaHC03，接著加入過量 NaCl直到飽和。所得混合物經由塞里塑料521墊過濾以 移除過量NaCl及一些黑焦油，將兩層分離，且水相部分 以乙酸乙酯（25 0 mLx 2)進一步萃取。有機萃取液以飽和 N a C 1溶液（2 5 0 m L X 1)清洗，加以混合、乾燥（M g S Ο 4)及濃 縮，製得〜1 6.5 -1 7 g粗製品胺。 粗製品胺部分藉由使用1 6 5 - 1 70 g矽膠先後以乙酸乙 酯（100%，- 5 00 mL)及5%甲醇於乙酸乙酯（〜1 200 mL)中之 溶液洗提進行管柱層析純化。將包含產物之部分倒出及加 以濃縮，得到1 1 . 5 -1 2 g部分純化胺。 此胺加入18.8 - 19· 6g (1莫耳當量）二苯甲醯基-L-酒 石酸於151.5 - 158 mL乙腈（5倍鹽的量）中之溶液。加熱 混合物直到其變成一溶液，並在室溫下緩慢地冷卻，製得 固體。經過一整夜後，固體經由過濾收集及以乙腈清洗。 在室溫下自相同量乙腈再結晶固體，製得1 1 . 5 g光學上純 之鹽。 lU NMR (300MHz? CD3OD)5 8.14 (br5 2H)? 8.11 (d， J=1.2Hz，2H)，7.64 (tt5 J = 7.5 及 1.2Hz，2H)，7·51 (br t， J = 7.5Hz，4H), 5.94 (s，2H)，5.82 (dt, J=17.1 及 9.9Hz，1H)， 5.32 (dd9 J=17.1 及 1.2Hz，1H)，5.13 (dd5 J=10.5 及 1.2Hz, 1H)，4.11 -4·26 (m，4H)，2.11 (m，1H)，1.3 3 - 1.47 (m，2H)， -105 - 200819460 1.37 (dt，J=l〇.2 及 7·2Ηζ，6H) ; 31P NMR (1 21 ·4ΜΗζ， CD3OD)5 22.5 5。 分析：胺之光學純度可藉由Mosher醯胺於DMSO-d6 中之31P NMR加以測定。結晶之物質（25 mg)溶於飽和 NaHC03 7JC溶液（5 mL)及飽和NaCl水溶液（5 mL)之混合物 及自由胺以二氯甲烷（10 mLx 2)萃取。萃取液以飽和 N a H C Ο 3水溶液（5 m L)及飽和N a C 1水溶液（5 m L)之混合物 清洗一次，加以乾燥（MgS04)及濃縮。 在室溫下，殘餘物及N，N-二甲基胺基吡啶（〜3.5 mg) 於吡啶（〇·1 mL)中之溶液加入（R)-(-)-a-甲氧基- α-(三氟甲 基）苯基乙醯氯。攪拌1 ·5小時後，將吡啶蒸發掉，殘餘物 溶於0·5 N HC1 (10 mL)及乙酸乙酯（10 mL)。將兩層分開 後，有機層以水（10 mLxl)及飽和NaHC03水溶液（10 mLxl) 清洗，加以乾燥（MgS04)及濃縮。在殘餘物於DMSO-d6中 之31P NMR，預期胺出現在23.00 ppm，而非預期胺出現 在 22.79 ppm 〇 2.製備膦酸中間物：
CbzCI / Na2C〇3 二噁烷/H20
1150C, 1〇 小時 75%
胺 I (9.0g，41.1 mmol)溶於 1，4 -二噁烷（1 0 〇 m L)。 -106- 200819460
Na2C03 (13.1g，123.3 mmol)於 H20 (50 mL)中之溶液加至 反應混合物及在室溫下攪拌5分鐘。加入氯甲酸苄酯（8.4g， 4 9.3 mmol)後，反應溶液在室溫下攪拌整夜。有機相以 EtOAc稀釋及以H20及鹽水萃取。有機相以MgS04乾 燥。將自真空過濾移除Mg S04之濾液濃縮，製得一油，該 油經由管柱層析單離（Si02，20% EtOAc於己烷中之溶 液），得到澄清油之中間物Π (1 1.6g，80%)。 lU NMR (3 00MHz? CDC13)5 7.33 (s? 5H)? 6.05 (dt9 J = 9.9? 17.1Hz，1H)，5.65 (d，J = 23.7Hz，1H), 5.31 (d，J=17.1Hz， 1H)，5.06 (m，3H), 4.06 (m，4H)，2.09 (m，1H)，1.73 (m， 2H)，1 · 1 5 (dt，J = 8. 1，26，4Hz，6H) 。31 P N M R (1 2 1 · 4 Μ H z， CDC13) δ 23.7。 中間物 II (11.6g5 32·9 mmol)及 N a I (2 4 _ 5 g，1 6 4 · 3 mmol)溶於吡啶（1 10 mL)。反應溶液加熱至1 1 5 °C，歷時 1 0小時。冷卻至室溫後，濃縮反應溶液以移除吡啶。H20 (5 0 mL)加至粗產物。水相以二乙醚（2x100 mL)清洗。然後 藉由加入1M HC1水溶液將水相調整至PH = 2。產物III (7.5g，23.0 mmol)經由以二氯甲烷萃取而加以單離，並不 進一步純化而直接用於下一步驟。 lH NMR (300MHz? CDC13)6 8.63 (br9 1H)? 7.33 (s9 5H)? 5.95 (dt9 J = 9.9? 17.1Hz, 1H)? 5.65 (d? J = 23.7Hz? 1H) 5 5.31 (d，J=17.1Hz，1H)，5.06 (m，3H)，4.06 (m，2H)，2.09 (m，1H)，1.73 (m，2H)，1.23 (dt，J = 8.1，26，4Hz，3H)，31P NMR (121.4MHz，CDC13) δ24·6。LC/MS = 326 (M + +1)，348 -107- 200819460 (M + + Na)。 3 .製備次膦酸中間物： 從化合物ΙΠ開始製備次膦酸之一般反應圖示於下（反 應圖1)。 反應圖1
製備次膦酸之另一反應圖（反應圖2)示於下。 反應圖2
膦酸中間物in (l.〇g，3.1 mmol)溶於甲苯（6 mL)。然 後在室溫下，將此溶液逐滴加至（C Ο C 1) 2 (1 . 1 m L , 1 2.4 mmol)及 DMF (47 pL，0·6 mmol)溶於 6 mL 甲苯中之溶 液。室溫下攪拌1小時後，將反應物濃縮，並與甲苯共沸 -108- 200819460 3次，製得爲油之粗產物ιν。 當 1.0 M LiAlH(0-tBu)3 (23.5 mL，23.5 mmol)於 10 分鐘期間加入，所得於THF (20 mL)中之黑色黏稠殘餘物 在-7 8 °C下攪拌。溶液升溫至室溫，歷時3 0分鐘。反應混 合物冷卻至0°C，並以冰冷IN HC1 (200 mL)驟冷。產物以 醚（200 mLx2)萃取，有機相部分以冰冷in HC1 (100 mL) 及H20 (1〇〇 mL)清洗。將有機相部分乾燥（MgS04)及濃 縮，殘餘物使用己烷/乙酸乙酯爲洗提液經由組合之快速 管柱層析純化，製得 IV (1.89g，78.3%)。4 NMR (3 00MHz, CDC13) δ 8.14 (bs? 1H), 7.35 (s? 5H), 6.22 (s? 1H), 5·89 (m，2H)，5.39 (bd，J=11.7Hz，1H)，5.30 (s，2H)， 5.21 -5.104 (m5 3H)? 4.13 (m, 2H)? 2.16 (m? 1H)? 1.72 -1 .66 (m，2H)，1 ·3 1 (m，3H)。31P (121 ·4ΜΗζ，CD3OD)： δ32·31 1，29.24 1 ° 所得次膦酸與二肽中間物偶合，如反應圖3所示。 -109- 200819460 反應圖3
⑴HCI/二噁烷
(2) HATU / NMM / DMF OH
4.製備二肽中間物： A .合成苯基喹啉二肽中間物：
步驟 1· 喹啉（7.6g，30.1 mmol)、N-t-Boc-順-4 -110- 200819460 基-L·脯胺酸甲酯（8.9g，36.3 mmol)和三苯膦（17.4g，66.3 mmol)溶於THF (25 0 mL)。冷卻反應溶液至〇°C後，於15 分鐘內加入DIAD (13.4g，66.3 mmol)。反應物在室溫下攪 拌12小時，並以EtOAc稀釋（700 mL)及以NaHC03水溶 液、H20和鹽水沖洗。有機相經Mg S04乾燥。濃縮後，利 用EtOAc (100 mL)和己烷（50 mL)進行結晶以除去大部分 的三苯膦氧化物，以管柱層析（Si02，70% EtOAc/己烷）單 離出所欲的產物，爲油狀物（11.9 g，85%)。4 NMR (3 00MHz, CDC13)5 8.0 3 (m, 2H), 7.50 (m9 5H)9 7.18 (m5 1H)，6.97 (m，1H), 5.15 (m，1H)，4·99 (m，2H)，4.06 (s， 3H)，3.99 (m，1H)，3.75 (s, 3H)，2.79 (dd，J = 8.7，14.3Hz， 1H)，2.45 (ddd, J = 3.5，10.7, 13·8Ηζ5 1H)，1.15 (s，9H) 〇 LC/MS = 479 (M + + 1)，501 (M + + Na)
步驟2.上述反應所得之產物（9.6g，20·8 mmol)溶於 二氯甲烷（2 0 m L)。於反應溶液中緩緩地加入4 · 0 Μ之H C1 的二噁烷溶液（50 mL)，反應溶液在室溫下攪拌5小時。 在高真空下濃縮30分鐘後，粗產物溶於DMF (70 mL)。 於反應溶液中加入酸（6.1g，25.0 mm〇l)、HATU (11.9g， -111 - 200819460 31.2 mmol)和 N-甲基嗎啉（l〇.5g，104.0 m m ο 1)。反應溶液 在室溫下攪拌一夜，及以EtOAc (5 00 mL)稀釋和以NH4C1 水溶液、NaHC03水溶液和鹽水沖洗。有機相經MgS04乾 燥。濃縮後，利用管柱層析（Si02，90% EtOAc/己烷）單離 出固態所欲產物（l〇.〇g， 80%)。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D)5 8.3 3 (d，J = 9.6Hz，1 Η)，8 · 0 9 (m，2 Η)，7 · 7 4 (m， 3H)，7.65 (m 1H)，7.52 (m 1H)，7.24 (dd，J = 2.1，9·6Ηζ， 1H)，5·91 (m，1H)，5.04 (m，1H)，4.81 (d，J = 9.0Hz5 1H)， 4.76 (d，J = 9.0Hz，1H), 4.46 (m，1H)，4.23 (m，1H), 4.06 (s， 3H)，3.99 (m，1H)，3.75 (s，3H)，2.99 (dd，J = 9.0，14·7Ηζ， 1H), 2.53 (ddd3 J = 3.35 1 0 · 5，1 3 · 8 H z，1 H)，1 · 4 2 - 1 · 7 8 (m，
步驟 3.上述甲酯（9.2g，15.3 mmol)溶於 THF (30 mL)、MeOH (10 mL)和 H20 (10 mL)。將 LiOH (1.8g，76.5 mmol)加至反應溶液中，反應溶液在室溫下攪拌7小時。
加入EtOAc (1 50 mL)以稀釋反應溶液後，藉由加入1M HC1水溶液而將水相調整至pH = 2。以EtOAc (2x100 mL) 萃取而單離出二肽酸VI(8.6g，95%)，直接用於下一步驟 -112- 200819460 無須進一步純化。1H NMR (3 00 MHz, CD3OD)5 8·38 (d， J = 9.6Hz，1H)，8·ΐι (ln，2H)，7.76 (m，3H)，7.65 (m 1H), 7.55 (m 1H)5 7.24 (dd, J = 2.1? 9.6Hz? 1H) , 5.89 (m5 1H), 5.04 (m，1H)，4.81 (d，J = 8.7Hz, 1H)，4.76 (d，J = 8.7Hz， 1H)，4.46 (m，1H)，4.23 (m，1H)，4.06 (s，3H)，3.99 (m， 1H)，2.99 (dd，J = 9.〇，14 7Hz，ih)，2.53 (ddd，J = 3.3，10.5, 13.8Hz，1H)，1.42 - 1.78 (m，5H), 1.05 (s，9H) LC/MS = 590 (M + + 1)，612 (M + + Na)。 Β·合成1-(2-環戊氧羰基胺基·3,3_二甲基-丁醯基）_心【2- (2-異丙基胺基-噻唑-4_基）-7_甲氧基-喹啉-4_基氧基卜吡咯 院· 2 -甲酸：
步驟 1 . 在由羥基噻唑喹啉（20.0g，63.5 mmol)於 THF (400 mL)所形成的溶液中加入順-Boc-羥基脯胺酸甲 酯（18.7g，76.2 mmol)、和三苯膦（3 6 6g，139.7 mm〇i)。溶 液冷卻至〇 °C，及緩緩加入DIAD (27 mL，139.7 mmol)。 將溶液升溫至室溫歷時1小時並攪拌一夜。在低壓下除去 溶劑’將粗質反應混合物溶於乙酸乙酯中並以水萃取，繼 之以鹽水萃取。有機相經Mg S04乾燥、過濾及在低壓下除 -113- 200819460 去溶劑。利用（2 5 % -1 0 0 %)乙酸乙酯/己院快速梯度將粗質 物洗提通過矽膠墊，得32.5 g所欲產物，爲黃色固體，其 摻雜有 1 〇 % -1 5 %三苯膦氧化物。1 η N M R (3 0 0 Μ Η z， CDC13):5 7.9 8， （d， J = 9.2Hz， 1Η)， 7.46 (m， 2Η)5 7·37 (d5 J = 2.4Hz，1H)，7.31 (s，1H)，7·09 (d，J = 91Hz，1H)，5.26 (m，1H)5 4.96 (m，1H)，4.62 (t，卜7 3Hz，1H)，5.57 (t， J=15Hz，1H)，3.97 -3.84 (bs，5H)，3 76 -3·66 (bs，5H)， 2.77 (m5 1H)，2.42 (m，1H)，2.03 (s，ih)，1.43 (s，9H), 1.33 (d，J = 6.4Hz5 6H)。L C / M S : 5 4 3 ( m + + 1)。
步驟2·在〇°C下，在由上述甲酯（30.Og, 55 mmol)於 二氯甲烷（150 mL)中的溶液中加入4 N之HC1的二噁烷溶 液（150 mL)。反應物升溫至室溫歷時1小時。當反應進行 時，產物自溶液沉澱出。過濾固體並以二乙醚反覆沖洗， 得胺的HC1鹽（20.67g，78%)，爲晶狀黃色固體。1H NMR (3 00MHz，CD3OD):6 8.45 (d，J = 9.2Hz，1H)，8·35 (s，1H)， 7.85 (s，1H)，7.79 (s，1H)，7.45 (d，J = 9.5Hz，1H)，6.02 (m， 1H)，4.22 (m，1H)，4.07 (s，3H)，4.02 (d，J = 3.9Hz，1H)， 3.98 (s5 1H)，3.92 (s，3H), 3.66 (s，1H)，3.03 (m，1H)， 2.82 (m5 1H)，1.36 (d5 J = 6.4Hz5 6H)，1.33 (d，J = 6.4Hz， -114- 200819460 6H)。LC/MS: 443 (M + +1)。在室溫下，在由 HC1胺鹽 (20.96g，43.8 mmol)於DMF (3 00 mL)所形成的溶液中加入 胺基甲酸環戊酯-第三白胺酸羧酸（13.〇g，52·6 mmo1)、和 HATU (25.0g，65.7 mmol)。反應物在室溫下攪拌10分 鐘，接著加入Hunig氏鹼（45 mL，262 mmol)歷時5分鐘。 反應物在室溫下攪拌1小時，並以LCMS監視反應。在低 壓下除去溶劑，並以乙酸乙酯稀釋。以飽和NaHC03萃取 反應混合物，繼之以水和鹽水萃取。以Mg S04乾燥有機 相，過濾固體及在低壓下除去溶劑。使粗質物洗提通過矽 膠墊以除去過量的鹽，除去溶劑，及以乙酸乙酯和己烷再 結晶產物，得二肽甲酯（23.5 g，81%)，爲黃色晶狀固體。 lH NMR (3 00MHz? CDC13)：5 7.9 85 (d? J = 9.1Hz? 1H)5 7.67 (s，1H)，7.51 (s5 1H)，7·27 (s5 1H)，7·16 (d，J = 7.3Hz，1H)， 5.62 (m, l.H)，5.54 (m，1H)，5.27 (d，J = 9.7Hz，1H)，4·81 -4.71 (bs，2H)，4.49 (d，J=12.5Hz，1H)，4.28 (d，J=10Hz， 1H)，4.14 (m，1H)，4.04 (s，3H)，3.78 (s，3H)，3.60 (m， 1H)，2.76 (m，2H), 2.51 (m, 2H)，1.63 - 1.5 0 (m，10H) 1.26 (d? J = 6.4Hz? 6H)? 1.07 (s5 9H)。LC/M S : 6 6 8 (M + +1)。
VII -115- 200819460 步驟 3.在由甲酯（2 1.〇g，31·5 mmo1)於 THF (3 00 mL) 和甲醇（15 mL)所形成的溶液中加入由氫氧化鋰粉末（4· 5心 187 mmol)於水（丨5〇 mL)所形成的溶液。反應物在室溫1^ 攪拌一夜。在低壓下除去有機溶劑，及以1 0% HC1的水溶 液調整至pH 2-3。以乙酸乙酯萃取溶液（2 x 250 mL) °合併 有機相並以M g S Ο 4乾燥、過濾及在低壓下除去溶劑’得^ 肽羧酸 VII(19.3g，94%)，爲黃色固體。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 8.29 (d, J = 9.5Hz? 1H)5 8.17 (s，1H)5 7.72 (s，2H)，7.33 (d，J = 7.6Hz，1H)5 5.77 (s, 1H)， 4.80 (t，J = 9.1Hz，1H)，4.77 (d，J=12Hz，1H)，4.44 (m, 1H)， 4.19 - 4.04 (bs，6H)，2·96 (m，1H)，2.50 (m，1H)，1.62 -1.50 (bs, 8 H) ? 1.35 (d，J = 6.7 H z , 6 H), 1.05 (s , 9H) o LC/MS: 65 5 (M + +1)。 5 .製備二肽中間物： 二肽中間物之合成示於反應圖4及反應圖5。 反應圖4
OH
-116- 200819460 反應圖 Βο^Ν~ν〇Μβ Ο 〇2
_ 〇2 Br*H〇KS02CI
OMe 酸 〇2
+ HN-S^OMe Ο Β^Λ Li0H A α°ιV〇 s
Boc 〇 IX 〇2
OMe Ο
HATU
XI
X 胺（7.00g，28.55 mmol)及 DABCO (5.13g，45.94 mmol) 溶於甲苯（30 mL)。加入對溴苯基磺醯氯（brosylchloride) (10.22g，40.01 mmol)的甲苯（11 mL)溶液。反應混合物在 室溫下攪拌整夜。反應物以EtOAc (210 mL)稀釋及加入 0.5N HC1 (200 mL)。將兩層分離，及水層以EtOAc萃取（2 x200 mL)。混合有機層以鹽水（200 mL)清洗，以Na2S04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗產物經由組合-快速層析純 化，製得12.23 g中間物IX，產率92%。 X (12.8g，20.7 mmol)於 CH2C12 (50 mL)中之溶液加入 4 N HC1的1，4-二噁烷（50 mL，200 mm〇l)。反應混合物在 室溫下攪拌2小時，並在真空下濃縮、乾燥20分鐘，然 後溶於 CH3CN (50 mL)。加入飽和NaHC03水溶液（50 mL)，並攪拌5分鐘。加入新鮮製得之氯甲酸環戊酯於 THF (50 mL)中之溶液。反應在1小時內完成。在低壓下 移除溶劑，殘餘物以EtOAc稀釋。混合物以IN HC1調整 -117- 200819460 至pH = 2，且將兩層分離。有機層以鹽水清洗，以Na2S04 乾燥，加以過濾及濃縮，製得粗產物（3.18 g)。 所得粗質酯（3.18g, 5.07 mmol)溶於 THF (25 mL)、 H20 (25 mL)及 MeOH (6 mL)，並加入 LiOH (660 mg，25·4 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌i小時，並以EtOAc稀 釋。反應混合物以IN HC1酸化至pH 2，且將兩層分離。 水層以EtO Ac萃取（2 X)。混合的有機層以鹽水清洗，以 Na2S04乾燥，在真空下濃縮及乾燥，製得3.09 g酸XI。 脯胺酸可偶合至次膦酸酯，製得二肽，如反應圖6所 不 °
6.製備8 -氯- 2- (2-異丙基胺基-噻Π坐-4-基）甲氧基-喹啉-4-醇： 8_氯嗤琳之合成不於反應圖7。相同合成係用於製備 8-溴、氟及甲基類似物。 -118- 200819460
8 -氯-4-淫基-7-甲氧基喹啉-2-羧酸：8 -氯-4-經基-7-甲 氧基喹啉-2-羧酸甲酯（36.5g，0.145 mol)於1:1之MeOH: THF混合物（共160 mL)中的溶液加入LiOH (30.5g，0.725 mol)於H20 (80 mL)中之溶液。當LCMS分析顯示完全轉 變成羧酸時，所得混合物在室溫下攪拌1小時。藉由移除 揮發物處理反應，及使用6N HC1水溶液將溶液之pH調整 至6。過濾所得膠黏殘餘物及在凍乾器乾燥2天，製得 34.4g (99.6 %)白色固體產物。El MS (m/z)253.9 [M + H]。 異丁基碳酸2-(2-二偶氮-1-酮基）-8-氯-7-甲氧基喹啉-4-基酯：在〇°C於氬氛圍中，8-氯-4-羥基-7-甲氧基喹啉-2 羧酸（10.2g，0.04 mol)於THF (400 mL)中之溶液加入三乙 胺（12.3 mL，0.08 8 mol)及氯甲酸異丁酯（11.6 mL，0·088 mol)。當LCMS分析顯示反應完成時’所得混合物在〇°C 攪拌1小時，製得所欲之混合酸酐。El MS (m/z)454.0 [M+H]。 在0 °C下，經由塑膠漏斗將1 Μ重氮甲院（1 2 1 m L， 0.121 mol)的二乙醚溶液加至該酸酐之反應混合物°擾拌 -119- 200819460 此混合物，同時升溫至室溫歷時另外2小時。混合物藉由 L CMS分析，顯示反應完成。移除隔板，在移除溶劑前， 另外攪拌反應物20分鐘。所得殘餘物在高真空下進一步 乾燥並繼續下一步驟。El MS (m/z)3 77.9 [M + H]。 從MNNG製備重氮甲烷：在冰上之130 mL之40% KOH水溶液及130 mL二乙醚的溶液加入N-甲基-Ν’-硝基-Ν-亞硝基胍（18g，0.121 mol)之泥漿，歷時15分鐘。當看 到沒有進一步泡泡產生時，所得混合物在冰上另外攪拌1 5 分鐘。有機層倒至另一燒瓶，及以KOH九粒存放用於下 一步驟。 8_氯- 2-(2-(異丙基胺基）噻唑-4-基）-7 -甲氧基喹啉-4-醇：在〇°C下，異丁基碳酸2-(2-二偶氮-1-酮基）-8-氯-7-甲 氧基喹啉-4-基酯（15.2g，0.040 mol)於 THF (268 mL)中之 經冷卻溶液在15分鐘期間緩慢地加入48% HBr (23 mL， 0.201 mol)。當LCMS分析顯示反應完成時，所得溶液在 〇°C下另攪拌40分鐘。在〇°C下，藉由加入IN NaOH水溶 液（180 mL)將水層pH調整至9，以處理反應。將兩層分 離，水層以EtOAc清洗（2x200 mL)。混合有機萃取液以鹽 水清洗及以Mg S04乾燥。在真空下移除溶劑，製得17.7 g 黃色固體。El MS (m/z)431.9 [M + H]。 當反應之L C M S分析顯示完全轉變成所欲之產物時， 將上述反應製得之溴酮溶液懸浮於異丙醇（270 mL)及在 7 2°C下加熱2小時。反應物冷卻至室溫，以使產物自溶液 沉澱出。過濾前，反應物進一步冷卻至0 °C達1 2小時。濾 -120- 200819460 液以醚清洗及在凍乾器上乾燥，製得8.0 3 g橘色固體之所 欲產物。1H NMR (500MHz，CDC13)J 8.21(d，J = 9Hz，1H)， 7.74 (s，1H)，7.44 (d，J=10Hz)，1H)，7.07 (s，1H)，4.05 (s， 3H)，3.92 (五峰，J = 6Hz，1H)，1.25 (d，J = 7Hz，6H)。EIMS (m/z) 3 50.0 [M + H]。 實例1:製備化合物1
膦酸中間物（1-苄氧羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）_膦酸 單乙酯111(415 mg, 1.28 mmol)溶於甲苯（8 mL)。將此溶液 冷卻至 〇°C，並逐滴加入（C0C1)2 (222 μί，2.56 mmol)。接 著加入DMF (44 μί，0.56 mmol)。反應在〇 °c下進行2小
時，並以 31P NMR測量反應是否完全。3lp NMR (121.4MHz，CDC13):5 39·0，38.5，37.4，36.5，17.0，16.2, 16.0， 15.4 。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (6.4 mL)中，溶液冷卻至_ 78°C。逐滴加入丨.4 Μ甲基鋰的二乙醚溶液（1.37 mL，192 mmol)。40分鐘後逐滴力口入更多的甲基鋰（456 μί，〇.64 200819460 mmol)。10分鐘後，在-78°C下於反應物中加入飽和NH4C1 水溶液以使反應驟停。有機相經 EtOAc稀釋並以飽和 NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04乾燥。真空過 濾除去Mg S04後濃縮濾液得橘色油狀物，由此利用管柱層 析（Si02，100% EtOAc)單離出產物，爲澄清油狀物（214 mg，二步驟共 52%)。h NMR (300MHz，CDC13):3 7.33 (s， 5H)，6.09 (dt，J = 9.9? 17·1Ηζ，1H)，5.65 (d，J = 23.7Hz? 1H)， 5.31 (d，J=17.1Hz5 1H)，5.06 (m，3H)，4.06 (m，2H)，2.09 (m，1H)，1.73 (m，2H) ，1.40 (d，3H)5 1.13 (dt，J = 8.1， 26.4Hz, 3H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13):S 53.7，50.8。 LC/MS = 324 (M + + 1)，346 (M + + Na)。 (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-甲基-次膦酸乙 酯（100 mg，0.3 0 8 mmol)於 CH3CN(7.7 mL)中之溶液冷卻至 〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μί，1·54 mmol)。反應物升溫 至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至〇 °C，並逐 滴加入額外之TMSI (110 μί，0.77 mmol)。反應物升溫至 室溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至〇 °C ’並逐滴加入 2,6-二甲基P比II定（360 μL，3·lmmol)。接著加入Et3N(lmL， 7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物然後在真空下濃縮》及 粗質胺基次膦酸直接用於下一反應。 二肽 VII (81 mg，0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液 冷卻至-30°C。Et3N (34 pL，0.246 mmol)加至此溶液，接 著加入 ClC02Et (18 μί，0.185 mmol)。反應物在- 20°C 及 -3(TC之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (34 μί， -122- 200819460 0.246 mmol)及 ClC02Et (18 μι，0.185 mmol)。反應混合物 在-20 °C及-3 0 °C之間的溫度另攪拌30分鐘。在-3 0°C下加入 粗質胺基次膦酸於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物升 溫至室溫並攪拌2小時。藉由加入飽和NH4C1水溶液使反 應驟停。有機相以EtOAc稀釋，並依序以飽和NH4C1 7jc 溶液、H20及鹽水清洗。有機相然後以Na2S04乾燥，之 後藉由真空過濾移除Na2S04。濾液在真空下濃縮，殘餘 物溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出 爲黃色固體之化合物1 (37 mg，37%)。4 NMR (3 00MHz， CD3CN):5 8.5 0 (m，lH)，8.11(d，J = 9.6Hz，1H)，8.02 (s， 1H)，7.75 (s，1H)，7·38 (s5 1H)，7.21(dd，J = 2.1，9.3Hz, 1H)，7.00 (m，1H)，6.03 (m，1H)，5.97 (dt，J = 6.9，17.1Hz， 1H)， 5.67 (s， 1H)， 5.14 (d，J=17.1Hz， 1H)5 5.01(d,
J=11.4Hz，1H), 4.63 (m? 2H)? 4.44 (s? 1H)? 4.17 (m? 2H)? 4.08 (s，1H)，4.04 (s，3H)，2.74 (dd，J = 7.2，14.1Hz，1H)， 2·43 (ddd，J = 3.3，10.5，13·5Ηζ, 1H)，2.08 (m，1H)，1.24 -1.75 (m，19H)，1.15 (m，1H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz， CD3CN)3 46.6。LC/MS = 797 (M + + 1)， 819 (M + + Na) 〇 實例2:製備化合物2 -123- 200819460
膦酸中間物 III (208 mg，0.64 mmol)溶於甲苯（8 mL)。將此溶液冷卻至0°C，並逐滴加入（C0C1)2 (1 1 1 pL， 1.28 mmol)。接著加入 DMF (22 μί，0.28 mmol)。反應在 〇°C下進行2小時，並以31P NMR測量反應是否完全。 31P NMR (121.4MHz，CDC13):S 39.0，38.5，37.4，36.5，17.0, 16.2， 16.0， 15.4。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於T H F ( 6 · 4 m L)中，此溶液冷卻 至-7 8°C。逐滴加入 EtLi的二丁醚溶液（1.7 M，5 66 μί， 0.9 6 mmol)。40分鐘後逐滴加入更多的EtLi (189 μ、0.32 mmol)。10分鐘後，在-78°C下於反應物中加入飽和NH4C1 水溶液以使反應驟停。有機相經 EtOAc稀釋並以飽和 NH4C1 zK溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04乾燥。真空過 濾除去Mg S04後濃縮濾液得橘色油狀物，由此利用管柱層 析（Si02，100% EtOAc)單離出所欲產物，爲澄清油狀物 (67 mg，二步驟共 31%)。NMR (300MHz，CDC13)S 7.33 (s，5H)，6.09 (dt5 J = 9.9，17.1Hz，1H 非對映異構物 1)，5·94 (dt，J = 9.9，17.1Hz，1H 非對映異構物 2)，5.65 (d， J = 23.7Hz，1H)，5.31(d, J=17.1Hz，1H)，5.06 (m，3H)，4·06 -124- 200819460 (m，2 Η)，2.0 9 (m，1 Η)，1 · 7 3 (m，2 Η )，1 · 5 0 (m，2 Η)，1 · 2 5 (m，4H)，1.13 (dt5 J = 8.1，26，4Hz，3H)。3 P NMR (121.4MHz, CDCl3)5 54.0，53.6，51.3，50.8 LC/MS = 338 (M + + 1)，3 60 (M + + Na)。 (1·节氧基簾基胺基乙基環丙基）-乙基-次膦酸乙 酯（104 mg，0.3 0 8 mmol)於 CH3CN (7.7 mL)中之溶液冷卻 至〇°C，並逐滴加入TMSI (220 0，1,54 mm〇i)°反應物升 溫至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至0 °c ’並 逐滴加入額外之TMSI (110 μ[，〇.77 mmol)°反應物升溫 至室溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至0 °c，並逐滴加 入2,6 -二甲基吡陡（360 3.1 mmol)。接著加入Et3N (1 mL，7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物然後在真空下濃 縮，及粗質胺基次膦酸直接用於下一反應。 二肽 VII (81 mg，0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液 冷卻至- 30°C。Et3N (34 μΐ^, 0.246 mmol)加至此溶液’接 著加入 ClC02Et (18 kL，0.185 mmol)。反應物在- 20°C 及 -30°C之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (34 μί， 0.246 mmol)及 C 1C Ο 2 E t (1 8 pL，0 · 1 8 5 m m ο 1)。反應在 -2CTC及- 3 0°C之間的溫度另攪拌30分鐘。在- 30°c下加入粗 質胺基次膦酸於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物升溫 至室溫。藉由加入飽和NH4C1水溶液使反應驟停。有機相 以EtOAc稀釋，並依序以飽和NH4C1水溶液、H20及鹽水 清洗。有機相然後以Na2S04乾燥，之後藉由真空過濾移 除Na2S〇4。濾液在真空下濃縮，殘餘物溶於MeOH (1 .5 -125- 200819460 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出爲黃色固體之化合 物 2 (37 mg，37%)。iH NMR (3 00MHz，CDC13 ):5 8.2 7 (d5 J = 9.6Hz，1H)，8.18 (s，1 H), 7 · 7 5 ( d，J = 2 · 1 H z，1 H )，7.7 3 ( d， J = 3.9Hz? 1H)? 7.3 1 (dd5 J = 2.1 ? 9.3 H z，1 H) 5 5.9 7 (d t，J 二 6 · 9， 17_1Ηζ，1H)，5.77 (s，1H)，5.26 (d，J=17.1Hz，1H)，5.08 (d， J=1 1.4Hz? 1H)，4.63 (m，2H)，4.44 (s5 1H)，4.17 (m，2H)， 4.08 (s，1H)，4.04 (s5 3H)，2.74 (dd5 J = 7.2，14·1Ηζ5 1H)， 2.43 (ddd，J = 3.3，10.5，13.8Hz，1H)，2.08 (m，1H)，1.84 (m5 2H)，1.54 (m，5H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H), 1.34 (m，2H)， 1.15 (dt5 J = 7.8，18·3Ηζ，3H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz, CDC13)：5 50.6 。 LC/MS = 81 1 (M + + 1)， 834 (M + + Na)。 實例3:製備化合物3
膦酸中間物 III (3 8 6 mg，1.19 mmol)溶於甲苯（14.9 mL)。將此溶液冷卻至οπ，並逐滴加入（c〇cl)2 (155 μί， 1.78 mmol)。接著加入 DMF (20 μΙ^5 0.2 6 mmol)。反應在 〇°C下進行2小時，並以31P NMR測量反應是否完全。3ip -126- 200819460 NMR (121.4MHz，CDC13):5 3 9.0, 3 8.5，37.4，36·6，17.0, 16.2，16.1，15.4。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (1 1.9 mL)中，此溶液冷卻 至- 78°C。逐滴加入2.0M n-BuLi的戊烷溶液（595 pL，1.19 mmol)。40分鐘後逐滴力口入更多的n-BuLi (520 pL，1.04 mmol)。10分鐘後，在-78°C下於反應物中加入飽和NH4C1 水溶液以使反應驟停。有機相經EtOAc稀釋並以飽和 NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04乾燥。真空過 濾除去M g S Ο 4後濃縮濾液得橘色油狀物，由此利用管柱層 析（Si02，7/3 EtOAc:己烷）單離出所欲產物，爲澄清油狀 物（243 mg，二步驟共 56%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.3 5 (s，5H)，6.12 (dt，J = 9.9，16.8Hz，1H 非對映異構物 1)， 5.96 (dt，J=10.2，16·8Ηζ，1H 非對映異構物 2)，5.33 (m, 2H)，5.09 (m，3H)，4.11(m，2H)，2.01(brd，J = 6.6Hz，1H), 1.5 0 - 1.90 (m，6H)，1.37 (brd? J = 5.1Hz, 2H)? 1 .26 (quart., J = 6.2Hz? 3H)，0.9 (m，3H) 31P NMR (121 ·4ΜΗζ，CDC13):S 52.8，52.4，50.2，49.7 LC/MS = 3 66 (M + + 1), 3 8 8 (M + + Na)。 (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-丁基-次膦酸乙 酯（3 64 mg，0.996 mmol)於 CH3CN (25 mL)中之溶液冷卻至 〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μ、1.54 mmol)。反應物升溫 至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至〇°C，並逐 滴加入額外之TMSI (711 μί，4.98 mmol)。反應物升溫至 室溫，及攪拌1小時。反應物再冷卻至〇 °C，並逐滴加入 -127- 200819460 2,6-二甲基吡啶（1 mL，10.1 mmol)。接著加入 Et3N (1 mL， 7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物升溫至室溫，然後在真 空下濃縮。粗混合物直接用於下一反應。 起始二肽 VII (100 mg，0_153 mmol)於 THF (2 mL)中 之溶液冷卻至-30°C。Et3N (32 μι, 0.23 0 mmol)加至此溶 液，接著加入ClC02Et (22 μί，0·23 mmol)。反應物在 -20°C及-30°C之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (32 μί，0·23 mmol)及 ClC02Et (22 μί，0·23 mmol)。反應 在-20 °C及-3 (TC之間的溫度另攪拌30分鐘。在-30 °C下逐滴 加入步驟1之粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應 物升溫至室溫。藉由加入飽和NH4C1水溶液使反應驟停。 有機相以EtOAc稀釋，並依序以飽和NH4C1水溶液、H20 及鹽水清洗。有機相然後以Na2S04乾燥，之後藉由真空 過濾移除Na2S04。濾液在真空下濃縮，殘餘物溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出所欲之產物。 此偶合反應在相同規模重複進行一次，並將兩次反應所得 單離之產物混合物混合。 自偶合反應所得混合產物溶於CH3CN (5.4 mL)，然後 加入2,6-二甲基吡啶（149 pL，1·29 mmol)。此溶液冷卻至 〇°C及逐滴加入TMSI (184 μί，1.29 mmol)。反應物在室溫 下攪拌1小時，然後冷卻至〇°C。加入額外之2,6-二甲基 耻 Π定（125 μί，0.645 mmol)及 TMSI (92 pL，0.645 mmol)， 及反應物升溫至室溫。然後將反應物冷卻至0°C，及逐滴 加入 Et3N (1.5 mL，20.4 mmol)，接著加入 MeOH (5 mL)。 -128- 200819460 反應物在真空下蒸發，然後溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆 相HP LC自此溶液單離出爲黃色固體之化合物3 (86 mg， 二步驟共 33%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13”5 8.26 (d， J = 9Hz, 1H)，8.15 (s5 1H)，7.70 (d，J = 2.1Hz，2H)，7.24 (dd， J = 2.1，9Hz，1H)5 5.93 (dt，J = 9.6，19.5Hz，1H)，5.71(s，1H)5 5.11(d，J=16.8Hz，1H)，4.95 (d，J=12.3Hz，1H)，4.70 (d， J=1 2.3Hz? 1H)，4.62 (dd，J = 7.2，9·3Ηζ，1H)，4.51(s，1H)， 4.21(s，1H)，4.14 (q，J = 6.6Hz，1H)，4·07 (dd，J = 2.4，9.9Hz， 1H)，4.02 (s，3H)，2.82 (dd，J = 7.5 ，14·4Ηζ，1H)，2.45 (ddd? J = 3.95 10.2，14.1Hz，1H)，1.98 (m，1H)，1.40 -1.80 (m，1 3H), 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.14 -1.32 (m, 3H), 1.01(s，9H)，0.86 (t，J = 7.2Hz，3H)。31P NMR (121.4MHz， CDC13):5 43.1。LC/MS = 8 3 9 (M + + 1)，861(M + + Na)。 實例4:製備化合物4
膦酸中間物 III (415 mg，1.28 mmol)溶於甲苯（8 mL)。將此溶液冷卻至（TC，並逐滴加入（C0C1)2 (222 μί5 2.56 mmol)。接著加入 DMF (44 μΐ^，0.56 mmol)。反應在 -129- 200819460 〇°C下進行2小時，並以31P NMR測量反應是否完全。31ρ NMR (121·4ΜΗζ，CDC13):5 39.0，38.5，37.4，36.5，17·0, 16.2， 16.0， 15.4。 反應物ί辰|fg至橘頁色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (6.4 mL)中，此溶液冷卻 至_7 8 °C。逐滴加入1·4 Μ第二丁基鋰的環己烷溶液（1. 3 7 mL，1 · 92 mmol)。40分鐘後逐滴加入更多的第二丁基鋰的 環己烷溶液（456 μί，0.64 mmol)。10分鐘後，在-78。(：下於 反應物中加入飽和NH4C1水溶液以使反應驟停。有機相經 EtOAc稀釋並以飽和NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經 M gS04乾燥。真空過濾除去Mg S04後濃縮濾液得橘色油 狀物，由此利用管柱層析（Si02，60% EtOAc/己烷）單離出 產物，爲澄清油狀物（146 mg，二步驟共31%)。i NMR (3 00MHz? CDC13)：6 7 · 3 3 (s , 5 Η)，6 · 0 7 (dt，J = 9.9，1 7.1 Hz, 1H), 5.55 (d，J = 23.7Hz? 1 H)5 5.31(d，J=17.1Hz，1H), 5.06 (m，3H)，4.06 (m，2H)5 2.0 9 (m, 1H)，1.6 5 - 1.8 3 (m，3H)， 1.58 (m, 1H) 1.41(m，1H)，1.03 - 1.3 2 (m，6H)，0_97 (dt， J = 8.1，26，4Hz，3H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13):5 54.9, 54.3，50.8，50.0 LC/MS = 3 66 (M + + 1)，3 8 8 (M + + Na)。 (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-第二丁基-次膦 酸乙酯（112 mg，0.308 mmol)於 CH3CN (7.7 mL)中之溶液 冷卻至〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μί，1.54 mmol)。反應 物升溫至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至 〇°C，並逐滴加入額外之TMSI (110 μί，0.77 mmol)。反應 -130- 200819460 物升溫至室溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至〇 °C ’並 逐滴加入2,6-二甲基吡啶（3 60 μ!^，3.1 mmol)。接著加入 Et3N (1 mL，7.2 mmol)及 MeOH (4 mL)。反應物然後在真 空下濃縮。所得粗產物直接用於下一反應。 二肽 VII (81 mg5 0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液 冷卻至-30°C。Et3N (34 μί，0.246 mmol)加至此溶液，接 著加入 ClC〇2Et (18 pL，0.185 mmol)。反應物在-20°C 及 _30°C之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (34 μί, 0.246 mmol)及 ClC〇2Et (18 pL，0.185 mmol)。反應在 -20 °C及-3 0 °C之間的溫度另攪拌30分鐘。在-30 °C下逐滴加 入步驟1之粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物 升溫至室溫並攪拌2小時。藉由加入飽和NH4C1水溶液使 反應驟停。有機相以EtOAc稀釋，並以飽和NH4C1水溶 液、H20及鹽水萃取。有機相然後以Na2S04乾燥’之後 藉由真空過濾移除Na2S04。濾液在真空下濃縮，殘餘物 溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出爲 黃色固體之化合物 4 (42 mg，41%)。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.27 (d9 J = 9.6Hz? 1 H)，8 . 1 8 (s，1 H)，7 · 7 5 (d， J = 2.1Hz，1H)，7.39 (d，J = 3.9Hz， 1H)，7.31(dd，J = 2.1， 9·3Ηζ，1H)，6.01(dt，J = 6.9，17.1Hz，1H)，5.77 (s，1H)， 5.26 (d，J=17.1Hz，1H)，5.08 (d，J=11.4Hz，1H)，4.63 (m， 2H)，4.44 (s，1H)5 4.17 (m，2H)，4.08 (s，1H)，4.04 (s，3H)， 2.76 (dd，J = 7.2，14.1Hz，1H)5 2.43 (ddd，J = 3.3，10.5, 13.8Hz? 1H)? 2.08 (m? 1H)5 1.96 (m5 2H), 1.60 - 1.82 (m? -131 · 200819460 9H)? 1.34 (d? J = 6.3Hz5 6H)9 1.22 (m5 6H)? 1.04 (s? 9H), 0.99 (m，3H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD)5 52.4，52.2 LC/MS = 8 3 9 (M + + 1)，861(M + + Na)。 實例5:製備化合物5
膦酸中間物 III (415 mg，1.28 mmol)溶於甲苯（8 m L)。將此溶液冷卻至0 °C，並逐滴加入（C Ο C 1) 2 (2 2 2 μ L， 2.56 mmol)。接著加入 DMF (44 pL，0.56 mmol)。反應在 〇°C下進行2小時，並以31P NMR測量反應是否完全。 31P NMR (121.4MHz，CDC 13):5 3 9.0，38.5，37.4，36.5，17.0, 16.2， 16.0， 15.4 。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (6.4 mL)中，此溶液冷卻 至-7 8°C。逐滴加入0.7 Μ異丙基鋰的戊烷溶液（2.74 mL， 1.92 mmol)。40分鐘後逐滴加入更多的異丙基鋰（912 μί， 0·64 mmol)。10分鐘後，在-78°C下於反應物中加入飽和 NH4C1 7JC溶液以使反應驟停。有機相經EtOAc稀釋並以飽 和NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04乾燥。真 -132- 200819460 空過濾除去M g S Ο 4後濃縮濾液得橘色油狀物，由此利用管 柱層析（Si02，100% EtOAc)單離出產物，爲澄清油狀物 (200 mg，二步驟共 45%)。NMR (3 00MHz，CD3CN):3 7.38 (s，5H)，6.69 (m，1H)，6.12 (m，1H)，5·35 (m，1H)， 5.06 (m，4H)，4.06 (m，2H)，2.09 (m，1H)，1.55 (m，1H) 1 · 4 1 (m，1 H)，1 · 0 2 - 1 . 3 5 (m，9 H)。31 P N M R (1 2 1.4 Μ H z， CD3CN):3 56.0，53.5。LC/MS = 352 (M + + 1)，3 74 (M + + Na)。 (1-节氧基鑛基胺基-2-乙烯基環丙基）-異丙基-次膦酸 乙酯（108 mg, 0.3 08 mmol)於 CH3CN (7.7 mL)中之溶液冷 卻至〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μί，1.54 mmol)。反應物 升溫至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至〇°C， 並逐滴加入額外之TMSI (110 μ、0·77 mmol)。反應物升 溫至室溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至〇 °C，並逐滴 加入2,6-二甲基吡啶（3 60 μί，3.1 mmol)。接著加入Et3N (1 mL，7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物然後在真空下 濃縮，所得粗產物直接用於下一反應。 VII (81 mg，0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液冷卻 至-30°C。Et3N (34 μί，0.246 mmol)加至此溶液，接著加 入 ClC02Et (18 pL，0.185 mmol)。反應物在-20°C 及-30°C 之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (34 μί，0.246 mmol)及 ClC02Et (18 μί，0.185 mmol)。反應物在-20°C 及 -30°C之間的溫度另攪拌30分鐘。在-30°C下逐滴加入步驟 1之粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物升溫至室 溫並攪拌2小時。藉由加入飽和NH4C1水溶液使反應驟 133- 200819460 停。有機相以EtOAc稀釋，並以飽和nh4C1水溶液、H2〇 及鹽水萃取。有機相然後以Na2S04乾燥，之後藉由真空 過濾移除Na2S〇4。濾液在真空下濃縮，殘餘物溶於MeOH (1·5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出爲黃色固體之 化合物 5 (40 mg，40%)。4 NMR (3 00MHz，CD3CN):5 8.27 (d，J = 9.6Hz，1H)，8.11 (m，1H), 8.05 (s5 1H)，7·75 (d， J = 2.1Hz，1H), 7.53 (d，J = 3.9Hz，1H)，7.31 (dd5 J = 2.1， 9.3Hz，1H)，6.75 (m，1H)，6.06 (dt，J = 6.9，17.1Hz，1H)， 5.77 (m，2H)，5.26 (d，J=17.1Hz，1H)，5.08 (d，J=11.4Hz， 1H), 4.63 (m，2H)，4.17 (m，2H), 4.08 (s，1H)，4.04 (s， 3H)，2.74 (dd，J = 7.2，14.1Hz，1H)，2.53 (ddd, J = 3.3，10.5, 13.8Hz，1H)，2.21(m，1H)，2.08 (m，1H)5 1.42 - 1.78 (m， 8H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.34 (m，2H) 1.15 (m，5H)， 1.04 (s5 9H)，0.99 - 1.03 (m5 3H)。31P NMR (121.4MHz， CD3CN)』50.6。LC/MS =825 (M + + 1)，847 (M + + Na)。 實例6:製備化合物6
膦酸中間物 III (415 mg，1.28 mmol)溶於甲苯（8 -134- 200819460 mL)。將此溶液冷卻至0°C，並逐滴加入（C0C1)2 (222 μί， 2.56 mmol)。接著加入 DMF (44 pL，0·56 mmol)。反應在 〇 °C下進行2小時，並以31 P NMR測量反應是否完全。31 P NMR (121.4MHz? CDC13)：6 3 9.0, 3 8.5, 3 7.4, 3 6.5, 1 7.0, 16.2， 16.0, 15.4 。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (6.4 mL)中，此溶液冷卻 至-78°C。逐滴加入1·〇 Μ溴化乙烯基鎂的四氫呋喃溶液 (2.6 mL, 2.6 mmol)。40分鐘後逐滴加入更多的溴化乙烯 基鎂（2.6 mL，2.6 mmol)。10分鐘後，在-78 °C下於反應物 中加入飽和NH4C1水溶液以使反應驟停。有機相經EtOAc 稀釋並以飽和NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04 乾燥。真空過濾除去MgS04後濃縮濾液得橘色油狀物，由 此利用管柱層析（Si02，100% EtOAc)單離出產物，爲澄清 油狀物（214 mg，二步驟共 40%)。1H NMR (3 00MHz， CDC13):6 7·33 (s, 5H)，6.09 -6·15 (m，2H)，5·55 (m，1H)， 5.31(m，1H)，5·05 (m，4H)，4.06 (m，2H)，2.09 (m，1H)， 1.73 (m，1H)，1.60 (m，1H)，1.43 (m，1H)，1.13 (dt，J = 8.1， 26，4Hz，3H)。31P NMR (121.4MHz, CDC13):3 36.5，34.6。 LC/MS = 3 3 6 (M + + 1)，3 5 8 (M + + Na)。 (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）_乙烯基-次膦酸 乙酯（103 mg，0_3 08 mmol)於 CH3CN (7.7 mL)中之溶液冷 卻至〇°C，並逐滴加入TMSI (220 pL，1.54 mmol)。反應物 升溫至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至〇 °C， -135- 200819460 並逐滴加入額外之TMSI (110 μί，0.77 mmol)。反應物升 溫至室溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至0 °C，並逐滴 加入2,6-二甲基吡啶（3 60 μΐ^，3.1 mmol)。接著加入Et3N (1 mL，7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物然後在真空下 濃縮，所得粗產物直接用於下一反應。 二肽 VII (81 mg，0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液 冷卻至-30°C。Et3N (34 μΐ^，0.246 mmol)加至此溶液，接 著加入 ClC02Et (18 μί，0.185 mmol)。反應物在- 2(TC 及 -30°C之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (34 μ、 0.246 mmol)及 ClC02Et (18 μί，0.185 mmol)。反應物在 -20 °C及-3 0 °C之間的溫度另攪拌30分鐘。在-3 (TC下逐滴加 入步驟1之粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物 升溫至室溫並攪拌2小時。藉由加入飽和NH4C1水溶液使 反應驟停。有機相以EtOAc稀釋，並以飽和NH4C1水溶 液、H20及鹽水萃取。有機相然後以Na2S04乾燥，之後 藉由真空過濾移除Na2S04。濾液在真空下濃縮，殘餘物 溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出爲 黃色固體之化合物 6 (45 mg 5 4 5 %)。4 NMR (3 00MHz， CD3CN)5 8.25 (br，1H)，8.20 (d，J= 9·6Ηζ，1H)，8·02 (s， 1H), 7.75 (s5 1H)，7.39 (s5 1H)5 7.2 3 (dd，J = 2.1，9·3Ηζ， 1H)9 6.84 (br, 1H)? 6.35 (m? 2H)? 5.97 (m? 3H)? 5.77 (m? 1H)， 5.61(s， 1H)9 5.2 6 (d? J=17.1Hz? 1H)， 5.08 (d, J= 1 1.4Hz, 1 H)，4.63 (m，2H)，4.44 (s，1H)，4· 1 7 (m，2H)， 4·08 (s，1H)，4.04 (s，3H)，2.74 (dd，J = 7.2，14·1Ηζ, 1H)， •136- 200819460 2.43 (ddd5 J = 3.3，10.5，13·8Ηζ，1H)5 1.41-1.78 (m, 8H)， 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.34 (m，2H)，1.15 (m，1H), 1.04 (s, 9H) 31P NMR (121 ·4ΜΗζ，CD3CN)5 30.2。LC/MS = 809 (M + + 1)， 83 1 (M + + Na)。
膦酸中間物 III (451 mg，1.39 mmol)溶於甲苯（17_4 mL)。將此溶液冷卻至〇°C，並逐滴加入（c〇Cl)2 (1 ·21 mL， 13·87 mmol)。接著加入 DMF (24 μί，0.3 06 mmol)。反應
在0 °C下進行2小時，然後在室溫下進行1 8小時。以31 P NMR 測量反應是否完全。3ip nmR (121.4MHz，CDC13)5 39.3，38.8，37.6，36.8，17.2，16.4，16.3，15.6。 反應物濃縮至橘黃色油狀物，接著置於高真空下達1 小時。所得的殘餘物溶於THF (13.9 mL)中，此溶液冷卻 至-78°C。逐滴加入 1.8M PhLi 的 Et20 溶液（1·2 mL，2.17 mmol)。30分鐘後，在-78T：下於反應物中力D入飽和NH4C1 水溶液以使反應驟停。有機相經Et0Ac稀釋並以飽和 -137- 200819460 NH4C1水溶液和鹽水萃取。有機相經MgS04乾燥，該 MgS04隨後藉由真空過濾除去。濃縮濾液產生橘色油狀 物，自此利用管柱層析（Si02，7/3 EtOAc:己烷）單離出所 欲產物，爲澄清油狀物（243 mg，二步驟共56%)，藉由 31P NMR 測得純度 73%。4 NMR (3 00MHz，CDC130 7.75 (m, 2H), 7.56 (m，1H)，7·20 -7.44 (m，7H)，6·18 (m，1H)， 5.39 (d，J=17.1Hz，1H)，4.8 0 -5.3 0 (m，4H)，4.0 -4.3 (m5 2H)，1.91(m，1H)，1.69 (m，1H)，1.2 -1.4 (m，4H)。31P NMR (121.4MHz, CDC13)6 3 7.8, 3 7.4, 3 6.2, 3 6.0, 3 5.0? 34.7，3 3.4, 3 3.3 LC/MS = 3 8 6 (M + + 1)，408 (M + + Na)。 (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-苯基-次膦酸乙 酯（150 mg，0.389 mmol)於 ACN (10 mL)中之溶液冷卻至 〇°C，並逐滴加入TMSI (27 8 μΐ^, 1.95 mmol)。反應物升溫 至室溫，並攪拌1小時。然後將反應物冷卻至〇 °C，並逐 滴加入 Et3N (1.5 mL，20.4 mmol)及 MeOH (5 mL)。反應物 然後在真空下濃縮，所得粗產物直接用於下一反應。 二肽 VII (50 mg，0.076 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液 冷卻至-30°C。Et3N (16 μί，0.114 mmol)加至此溶液，接 著加入 ClC02Et (15 μί，0.114 mmol)。反應物在- 20°C 及 -30°C之間的溫度攪拌30分鐘。加入另外之Et3N (16 μί， 0.114 mmol)及 ClC02Et (15 μ!>，0.114 mmol)。反應物在 -20 °C及-3 0 °C之間的溫度另攪拌30分鐘。在-30 °C下逐滴加 入步驟1之粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物 -138- 200819460 升溫至室溫。藉由加入飽和NH4C1水溶液使反應驟停。有 機相以EtOAc稀釋，並以飽和NH4C1水溶液、H20及鹽水 萃取。有機相然後以Na2S04乾燥，之後藉由真空過濾移 除Na2S04。濾液在真空下濃縮，殘餘物溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自此溶液單離出爲黃色固體之化合 物 7 (17 mg，25%)。4 NMR (300MHZ, CDC13)S 8.22 (d, J = 9.6Hz，1H)，8.18 (s，1H), 7.89 (dd，J = 6.9，1 1.7Hz, 2H)， 7·74 (d，J = 2.1Hz，1H)，7.72 (s，1H)，7.53 (m，3H)，7.30 (dd， J = 2.1 ? 9Hz, 1H), 6.14 (dt， J= 1 0 · 2， 1 9.5 Hz， 1 H)， 5.71(s，1H)，5.22 (d，J=17.1Hz，1H)，5.02 (d，J=10.2Hz， 1H)，4.55 (m，2H)，4.40 (s，1H)，4.18 (quint·，J = 6.6Hz， 1H)，4.11 (s, 1H), 4.04 (m，4H)，5.60 (dd，J = 6.9，14.1Hz5 1H)? 2.23 (ddd? J = 3.6, 10.2, 13.8Hz, 1H)? 2.12 (m? 1H)5 1.72 (m，1H)，1.40 - 1.66 (m，9H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)， 1.03 (s，9H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CDC13)S 34.0 LC/MS = 8 5 9 (M + + 1)，881(M + + Na)。 實例8:製備化合物8
-139- 200819460 1 (677 mg，0.79 mmol)於 DME (5 mL)及 H20 (0.4 mL) 中之溶液加入對甲苯磺醋肼（737 mg, 3.96 mmol)及NaOAc (650 mg, 7.93 mmol)。反應混合物加熱至 95 °C達 1·5小 時，及冷卻至室溫。加入數滴3 Ν HC 1將pH調整至2。 粗產物經由HPLC純化，製得8 (5 8 7 mg，76%)，爲黃色固 體。1H NMR (3 00MHz，CD3CN):3 8.16 (m，1H), 8·06 (s， 1H)，7.71(s，1H)，7.44 (s，1H)，7.25 (m，1H)，6.83 (m，1H)， 5.92 (m，1H)5 5.61(br，1H)，4.58 (m，2H)，4.41(m，1H)， 4.14 (m，2H)，4.05 (m，4H)，2.76 (m，1H)，2.45 (m，1H)， 1·80 (m，2H)，1.65 (m，10H) 1.38 (d，J = 6.3，6H)，1.21(m， 1 H)? 0.98 (m， 12H)。31P NMR (121.4MHz, CD3CN):5 46.569。LC/MS = 799 (M + + 1)。 實例9:製備化合物9
加入硤三甲基砂院（3 4 5 μ 1，2 · 4 2 m m ο 1)時，次膦酸酯 (IV)(150 mg，0.48 mmol)於 CH3CN (1 mL)中之溶液在 0°C 下攪拌。所得溶液在室溫下攪拌45分鐘，及再冷卻至 〇°C，並加入三乙胺（1 mL，7.33 mmol)及 MeOH (2mL)。所 -140- 200819460 得溶液升溫至室溫，並另攪拌2 0分鐘。然後將溶液濃 縮、與甲苯共沸（χ2)及在高真空下乾燥達30分鐘。在室溫 下使用 HATU (3 04 mg，0.80 mmol)及 ΝΜΜ (176 μΐ，1.60 mmol)於DMF (1 mL)之溶液整夜，使所得粗質物與 VII (209 mg，0.32 mm ο 1)偶合。將反應物濃縮及以 Gilson HPLC純化，製得 9，爲黃色固體。h NMR (3 00MHz， CD3OD):S 8.18 (s，1H)，8.20 (m，2H)，7.78 (s，1H)，7·38 (m，1H)，6.20 (s5 J = 9.2Hz，1H)，5·90 (m，1H)，5.80 (bs， 1H)，5.23 (dd，1H)? 5.18 (d，J = 9.0Hz? 1H) 4.78 (s? 1H)， 4·58 (m，1H)，4.30 (m，1H)，4.20 (q，2H)5 4.05 (m，2H)， 4.01(s，3H)，2.79 (m，1H)，2.57 (m，1H)，2.15 (m，1H)5 1.62 (m，2H)，1.50 (m，2H) 1.30 (d，3H)5 1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):3 22.768，22.682。 實例1 〇:製備化合物1 〇
使用實例6之相同製程，製得化合物 10。h NMR (3 00MHZ，CD3OD)3 8.25 (d J = 9Hz，1H)，8.18 (s，1H)，7.75 (m，2H)，7·30 (dd，J = 9.3，2·1Ηζ，1H)5 5·96 (dt，J = 6.95 -141 - 200819460 19·8Ηζ，1H), 5.77 (s，1H)，5.25 (d，J=17.1Hz，1H) 5 5.0 6 (d, J=1 0.5Hz, 1H)，4.64 (m，2H)，4.44 (s, 1H), 4.15 (m，3H)， 4.04 (m，3H)，2.76 (dd，J = 7.5，14.1Hz，1H)，2.43 (ddd, J = 3.9，10.2，13.8Hz，1H), 2.08 (m，1H)，1.4 -1.9 (brm， 14H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s，9H)，1.02 (m，3H)。 31P NMR (121.4MHz，CD3OD)5 48.8 LC/MS = 82 5.3 (M + + 1)，847.2 (M + + Na) 0 實例11:製備化合物n
加入2-溴乙酸乙酯（3 9 5 μί，3·65 mmol)前’次膦酸酯 IV (499 mg，1.61 mmol)、Hunig 氏鹼（794 KL，3 8 8 mmo1) 及氯三甲基矽烷（590 μ、3.57 mmol)於dCh (7.5 mL)中 之溶液在室溫下攪拌30分鐘。所得溶液在40°C加熱達7· 5 小時。將溶液濃縮，殘餘物溶於乙酸乙酯（3〇 mL)然後以 H20清洗（30 mLx2)。水層以乙酸乙酯萃取（30 mL)°將混 合有機層乾燥（Mg S04)及濃縮。殘餘物經由管柱層析以己 烷：乙酸乙酯爲洗提液加以純化，製得[(1 —节氧基Μ基胺 基-2-乙烯基環丙基）-乙氧基-次膦醯基卜乙酸乙醋（344 mg， -142- 200819460
54%)。h NMR (3 00MHz，CDC13)J 7.34 (s，5H)，6·04 (m， 0.39H)，5.91 (m，0.53H)，5.72 (d，1H)，5·42 (s5 1H)，5.36 (s，1H)，5.30 (s，2H)，5.09 (m, 3H)，4.18 (m，4H), 3.04 (m， 2H)，2.30 (m，1H)，2.03 (m，1H), 1.85 (m，2H)，1.70 (m， 2H)，1.58 (m，2H)，1 .38 (m，2H)，1.25 (m，6H)。31P (121.4MHz，CDC13):8 43.406，42.646，3 9.0 8 7。 加入 1 N NaOH (9 8 0 μΕ，0.98 mmol)時，[(1-苄氧基羰 基胺基-2-乙烯基環丙基）-乙氧基-次膦醯基]-乙酸乙酯（352 mg，0.89 mmol)於THF (3 mL)中之溶液在0°C下攪拌。所 得溶液在室溫下攪拌整夜，然後加以濃縮，以H20 (10 mL) 稀釋及以乙酸乙酯清洗。水層以IN HC1 (5 mL)酸化及以 乙酸乙酯萃取（x2)。有機萃取液以H20清洗、加以乾燥 (MgS04)及濃縮，產生[(1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙 基）-乙氧基次膦醯基]-乙酸（224 mg，69%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.34 (s，5H)，5.91(m，2H)，5.20 (m， 2H)，4.21(m，2H), 3.11(m，2H)，2.30 (m，1H)，2·03 (m，1H)， 1.85 (m，2H)，1·70 (m5 2H)，1.58 (m，2H)，1.38 (m，2H)， 1.25 (m， 3H)。31P (121.4MHz， CDC13):5 45.1 09， 41.119, 40.965，39.514 ° 在室溫下，上述酸（224 mg，0.61 mmol)、氯化二甲基 鏡（125 mg，1.53 mmol)、HATU (697 mg，1.83 mmol)及 N-甲基嗎啉（600 μΐ, 5.46 mmol)之溶液在DMF (3 mL)中攪拌 2.5小時。將溶液濃縮，殘餘物溶於乙酸乙酯（3 0 m L)及以 H20 (2 x 3 0 mL)及鹽水清洗。水層以乙酸乙酯（30 mL)萃 -143- 200819460 取，及將混合有機萃取液乾燥（M g S Ο 4)及濃縮。殘餘物以 CH2C12 (10 mL)硏磨及加以過濾。將濾液濃縮，殘餘物以 CH2C12處理然後力卩以過濾。經由管柱層析以己院：乙酸乙 酯爲洗提液單離出所欲之產物（240 mg，99%)。NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.33 (s，5H)，6.38 (s，1H)，6.00 (m， 1H)，5.44 (s，1H)，5.38 (s，1H)，5.30 (s，2H)，5.04 (m，4H)， 4.23 (m，2H)，3.18 (s，1.08H), 3.09 (s，1.62H)，2.88 (s， 1.08H)，2.81(s，1.62H)，2.38 (m，1H), 1.87 (m，1H), 1.76 (m，1H)，1.45 (m，1 H) , 1.23 (m, 3 H)。31 P (1 2 1.4MHz， CDC13):5 46.664，45.538，42.765，42.417。中間物 VII 進 行去保護及偶合，製得11。LC/MS = 868 (M++l)。 實例1 2 :製備化合物1 2
中間物IV (840 mg，2.7 mmol)溶於8 mL·乾THF及冷 卻至-40°C。逐滴加入 IN NaHMDS (4.1 mL，4·1 mm〇l)於 THF的溶液，及反應物在-40°C下攪拌3〇分鐘。卜溴—厂甲 基-丙烯（446 μΐ，4.1 mmol)溶於1 mL之THF，然後逐滴加 入反應物。反應物升溫至室溫。在室溫下攪拌一夜後，反 _ 144- 200819460 應物冷卻至〇°C及加入3 00 μΐ乙酸以使反應驟停。所得混 合物然後在真空下濃縮及以乙酸乙酯稀釋。有機層然後以 水萃取一次及以鹽水萃取一次。有機層然後以MgS〇4乾 燥，並在真空下濃縮，製得油狀殘餘物。然後藉由矽膠層 析（3:卜乙酸乙酯：己烷）自殘餘物單離出產物（83 mg，9%)。 ]H NMR (3 00MHz? CDC13)6 7.3 6 (s? 3H)5 6.0 (m5 1H)? 5.30 (m，2H), 5·10 (b，4H)，4.13 (m，2H)，2.13 (m，2H)，1.79 (m， 3H)，1.54 - 1.3 9 (m，4H)，1.28 (m，3H), 1.03 (m，6H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CDC13)5 50.26，47.54。LC/MS =366 (M + + 1)。 如上所述偶合至二肽 VII，製得化合物 12 (28 mg， 28%)。lH NMR (3 00MHZ, CD3〇D) 8.27 (d? J = 9.3Hz, 1H), 8.22 (s? 1H)? 7.76 (s5 2H)? 7.31 (d? J = 9.0Hz? 1H) 5 5.94 (m? 1H)， 5·79 (b， 1H)， 5.25 (d, J=17.1Hz， 1H)， 5.07 (d， J = 9.9Hz，1H)，4.64 (m，2H)，4·43 (s，1H)，4.15 (m, 2H)， 4.11(s? 1H)? 4.04 (s5 3H)? 2.80 (m? 2H)? 2.45 (m5 1H), 2.15 (m，1H)，1.75 (m，1H)，1.60 - 1.40 (m，8H), 1.35 (d， J = 6.3Hz? 12H)， 1.04 (s， 10H)。31P NMR (121·4ΜΗζ， CD3OD)5 24.48。LC/MS = 8 3 9 (M + +1) 0 實例13:製備化合物13 -145- 200819460
實例1 3至1 5用實例1 2之相同方法加以製備。1 Η NMR (3 00MHz，CD3〇D):5 8.26 (m，1H), 8.17 (m，1H)， 7.76 (s，2H)，7.32 (m，1H)，5.95 (m，1H)，5·80 (br，1H)， 5.36 (m，1H)，5.13 (m，1H)5 4.63 (m，2H), 4.41(m，1H)， 4.15 (m，2H), 4.04 (m，4H)，2.66 (m，1H)，2.33 (m，1H)， 1.94 (m，2H)，1.65 (m，13H) 1.38 (d，J = 6.3Hz，6H)5 1.04 (s， 9H) 。 31P (121.4MHz， CD3OD):6 3 3.642 。 LC/MS = 837 (M + +1)。 實例14:製備化合物14
- 146- 1 U NMR (3 00MHz5 CD3〇D):5 8.27 (d9 J = 9.6Hz, 1H)? 8.18 (m，1H)，7.74 (s，2H)，7.32 (m，1H)，5.89 (m，2H)， 5.78 (br，1H)，5.26 (m，1H)，5.09 (m，2H)，4.97 (m，1H)， 4.65 (m，2H)，4.44 (m，1H)，4.17 (m, 2H)，4.04 (m，4H)5 200819460 2.75 (m? 1H)? 2.38 (m, 2H)? 2.09 (m? 1H)? 1.91(m, 1H), 1.65 (m，8H) 1.34 (d5 J = 6.3Hz，6H)5 1.04 (s，9H)。31P (121.4MHz, CD3〇D):5 3 1.45 3 〇 LC/MS = 837 (M + +1)。
實例11製得之[(1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙 基）-乙氧基-次膦醯基]-乙酸（340mg，0.92 mmol)懸浮於 5mL 之 DMF 中。加入 HATU (l.〇4g，2.76 mmol)、氯化銨 (123mg， 2·32 mmol)，接著力□入 Ν Μ Μ ( 9 1 0 μ 1， 8.2 8 mmol)。2小時後，將反應物濃縮，及在EtOAc與Η20間 分配。水層以EtO Ac萃取三次。有機層以Mg S〇4乾燥， 加以過濾及濃縮。產物（1 -苄氧基羰基胺基-2 -乙烯基-環丙 基）-胺基甲醯基甲基次膦酸乙酯，爲棕色油（21 4mg， 64%)，其以粗質物用於下一步驟。 粗質物（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-胺基甲 醯基甲基-次膦酸乙酯（107mg，0.29 mmol)懸浮於lmL之 CH3CN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(20 8 pl， 1.46 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 -147- 200819460 冷卻至 0°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。使用 HATU (133mg，0.35 mmol)及 ΝΜΜ (77μ1，0.70 mmol)的條 件下，殘餘物與VII (94mg，0.14 mmol)偶合。所得混合物 藉由Gilson HPLC純化，製得15 (15.4mg，13%)，爲黃色 固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.23 (d5 J = 9.5Hz，1H)， 8.20 (s5 1H), 7.79 (s，2H)，7.33 (d，J = 8.8Hz, 1H)，5.95 (m, 1H)，5.78 (s，1H)，5.22 (d，J = 9.6Hz，2H)，5.13 (d，J = 9.0Hz， 2H)，4.63 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)5 4.0 5 (s， 3H)，3.25 (m，1H)，2.80 (m，2H)，2.45 (m，1H)，2.15 (m，
1H)，1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)，1.05 (s，9H).31P (121.4MHz，CD3OD) :53 7.2 83。 實例1 6 :製備化合物1 6
使用Grignard試劑製備實例16-23。詳細製程述於實 例 19。4 NMR (3 00MHZ，CD3CN)』8.25 (m，1H)，8.20 (m，1H)，7.63 (s, 1H)，7.41(m，1H), 7·23 (m，1H)，6.81(br， -148- 200819460 1Η)，6·37 (m，1H)，6.02 (m，3H)，5.60 (br, 1H)，5.13 (m， 1H)，4.98 (m, 1H)，4.60 (m，2H), 4.19 (m，2H)，4.05 (m， 2H)，4.00 (s，3H)，2.70 (m，1H)，2.43 (m，1H)，1.65 (m，8H) 1.38 (d，6H)5 1.21 (m，1H)，1.05 (s，9H)。31P (121·4ΜΗζ， CD3CN) :53 0.642 LC/MS = 809 (M + +1) 實例1 7 :製備化合物1 7
NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.27 (d? J = 9.6Hz? 1H)? 8.18 (s，1H)，7.75 (s5 2H), 7.31 (m，1H)，6.67 (m，1H)， 5.93 (m，2H)，5.77 (bs，1H)，5.24 (d，J=17.1Hz，1H)，5.07 (d，J=11.4Hz，1H)，4.63 (m，2H)? 4.43 (bs，1H)，4.20 (m， 2H), 4.04 (m, 5H)，3.23 (m，1H)，2.76 (m，1H)，2.40 (m, 1H)5 2.08 (m, 1H)，1.90 (m，3H)，1.72 - 1.40 (m5 8H)，1.38 (d， 6H)? 1.05 (m， 9H)。31P (121.4MHz, CD3OD):5 3 3.223。LC/MS = 8 2 3 (M + +1) 實例18:製備化合物18 -149- 200819460
lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.27 (d? J = 9.6Hz? 1H)? 8.17 (s，1H)，7.74 (s5 2H)，7.32 (m，1H)，6.63 -6_41(m， 1H)，5.98 (m，2H)，5.77 (bs，1H)，5.24 (d，J=17.1Hz，1H)， 5.07 (d，J=11.4Hz，1H)，4.63 (m，2H)，4.43 (bs5 1H)，4.17 (m, 2H)，4.07 (m，4H)，2.75 (m, 1H)，2.42 (m，1H)，2.10 (m， 1H)，2.07 (m，3H)? 1 .72 - 1 .40 (m，8H), 1.34 (d， J = 6.3Hz，6H)，1.04 (m，9H)。31P (121 ·4ΜΗζ，CD3OD)』 3 3.7 8 1。LC/MS = 823 (M + + 1)
中間物 111 (1 · 0 g，3 . 1 m m o 1)溶於甲苯（2 0 m L)。此溶 液冷卻至〇°C及逐滴加入（COCl)2 (l.6g, 12.4 mmol)。然後 加入DMF (45 mg，0.62 mmol)。反應在〇。〇下進行2小 -150- 200819460 時’並以31 P N M R測量反應是否完全。將反應物濃縮成橘 黃色油狀物，並置於高真空下1小時。所得殘餘物溶於 T H F ( 6 · 4 m L)及此溶液冷卻至-7 8 °C。逐滴加入1 · 0 Μ溴化 順-1-丁烯鎂的THF溶液（9.1 mL，9.1 m m ο 1)。反應混合物 升溫至室溫並攪拌3小時。在0 °C下，藉由加入飽和 NH4C1 溶液使反應驟停。有機相以EtOAc稀釋，並以飽 和NH4C1水溶液及鹽水萃取。有機相以MgS04乾燥。在 真空過濾移除MgS04後，濃縮濾液，製得橘色油狀物，此 橘色油狀物經由管柱層析（Si02，100% EtOAc)單離出（1-苄 氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-丁 -1-烯基-次膦酸乙酯， 爲澄清油狀物（100 mg，二步驟共8%)。h NMR (300MHz， CDC13):6 7.33 (m，5H)，6·60 -6.3 5 (m，1H) 6·18 -5.83 (m， 1H)，5.68 (m，1H)，5.38 (m，2H)，5.10 (m，3H)，4.05 (m， 2H)，2.57 (m，2H)，2.01(m，1H)，1.78 (m，1H)，1.50 (m， 1H)， 1.23 (m，3H) ， 1.00 (m，3H)。31P (121.4MHz, CDC13)J 3 7.3 97，3 5.87 5 非對映異構物 上述次膦酸酯（100mg，0.275 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至 0°C。加入碘三甲基矽烷（ΤΜ3Ι)(190μ1， 1.3 8 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（0.5mL，3.6 mmol)及 0.5mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下30分鐘。在逆 相HPLC純化後，所得固體偶合至VII，製得化合物19。 lH NMR (3 00MHz? CD3〇D):5 8.25 (d? J = 9.0Hz? 1H)? 8.19 -151 - 200819460 (s，1Η)，7·73 (s，2H)，7.35 (m，1H)，6.52 -6·28 (m, 1H)， 5.95 (m，2H)，5.77 (s，1H)，5.24 (d，J=17.9Hz，1H)，5.06 (d，J=ll.lHz，1H)，4.65 (m，4H)，4.44 (bs，1H)，4.20 (m， 2H)，4.04 (m，4H)，2.76 (m，1H)，2.52 (m，3H), 2.43 (m， 1H)，2.13 (m，1H)，1.62 - 1.3 5 (m，10H) 1.38 (d, J = 6.3Hz， 6H)， 1.03 (m5 12H)。31P (121.4MHz, CD3OD):5 34.248。 LC/MS = 8 3 7 (M + +1)。 實例2 0 :製備化合物2 0
lli NMR (3 00MHz9 CD3〇D):5 8.2 7 (a, J = 9.6Hz? 1H), 8·18 (s5 1H)，7.74 (s，2H)，7.32 (m，1H)，5.97 (m，1H), 5.72 (m? 2H)，5.24 (d，J=16.5Hz? 1H)，5.07 (d? J=10.5Hz? 1H)，4.66 (m，2H)，4.43 (bs，1H)，4.20 (m，2H)，4.06 (m， 5H)，2.75 (m，ih)，2.43 (m，1H)，2.11(m，4H)，1.91(m，3H)， 1.72 - 1.40 (m5 i〇H)? 1.38 (d? J = 6.2Hz? 6H)? 1.04 (m， 9H) ° 31P (121.4MHz，C D 3 0 D ): δ 3 3 · 7 8 6。L C/M S = 8 3 7 (M + +1)。 實例2 1 :製備化合物2 1 -152- 200819460
!H NMR (300MHz, CD3〇D):5 8.25 (d? J = 9.0Hz, 1H)? 8.15 (s5 1H)，7.74 (m，1H)，7.68 (m，1H)，7.57 (m, 2H)，
7.40 (m，4H)，6.57 (m，1H)，5.98 (m，1H)5 5.68 (bs5 1H)， 5.27 (d，J=17.1Hz，1H)，5.10 (d，J = 9.0Hz，1H)，4.63 (m， 2H)5 4.44 (bs，1H)，4.18 (m，2H)，4.04 (m，4H)，3.31 (m， 1H)5 2.7 0 (m，1H)，2.38 (m，1H), 2.15 (m，1H)，1.72 -1.40 (m，8H)? 1.38 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.03 (m，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD)』3 3.3 72。LC/MS = 8 85 (M + +1)。 實例22:製備化合物22
lH NMR (3 00MHz9 CD3〇D)5 8.25 (d? J = 9Hz? 1H)? 8.17 (s，1H)，7·74 (d，J = 2.1Hz，1H)，7.68 (s，1H)，7.55 (d， J = 6.9Hz? 2H)，7.2 -7.5 (m，4H)，6.05 (dt，J = 9.6, 17.1Hz)， 5.71(s，1H)5 5.2 7 (d，J=17.4Hz，1H)，5.09 (d，J = 9.6Hz，1H)， 4.7 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.6 (d，J=12.6Hz，1H)，4.51(s，1H)， -153- 200819460 4·06 -4.2 (brm, 3H)，4.04 (s，3H)，2.74 (dd，J = 7.8，13·8Ηζ, 1H)? 2.57 (m5 in), 2.28 (m, 1H)5 1.36 -1.9 (brm9 10H)? 1.33 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz, CD3OD) δ 1〇·2 〇 LC/MS = 8 8 3 (M + + 1) 〇 製備化合物23
實例23: 次膦酸酯 IV (3 63 mg, 1·17 mmol)懸浮於 5mL THF，並 冷卻至-40°C。逐滴力□入 IN NaN(TMS)2 (1.41mL, 1.41 mmol)，歷時 15分鐘，接著加入 1-溴-3 -甲基丁 -2-烯 (1 6 4 μ 1，1 · 4 1 m m ο 1 )於1 m L T H F中的溶液。所得溶液在 -40 °C至室溫攪拌45分鐘。反應物以EtO Ac稀釋，並使用 2 0mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化之，製得棕色油 狀物之（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(3-甲基-丁- 2-烯基）次膦酸乙酯（219mg，50%)。此油狀物（135mg，0.36 mmol)懸浮於lmL CH3CN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基 矽烷 （254 μΐ, 1.79 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘 後，溶液再次冷卻至0 °c，及加入三乙胺（1 m L，7.3 3 m m 01) -154- 200819460 及2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌 分 鐘。將溶液濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高Ϊ % γ 、'^ F 3〇 分鐘。在HPLC純化後，所得粗質物與VII偶合，制〜 ^傳化 合物 23。4 NMR (300MHz，CD3OD)J 8.30 (d，j>9 .5H2, 1H)5 8.2 0 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7.30 (m，4H)，5 9 (如， 1H)? 5.80 (s? 1H)? 5.25 (d? J = 9.6Hz? 2H)? 5.13 (d9 j^〇 * 0 H 2： 2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)5 4 〇 • 3 (s， 3H)? 3.33 (s? 2H)? 2.80 (m? 1H), 2.52 (m? 1H)5 2 is , J (m5 1H)9 1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)，1.05 ( s，9H)。3lp (121.4MHz，CD3OD):6 42.83 7。 實例24:製備化合物24
逐滴加入 MeOH (710 μΙ〇時，硼氫化鈉（82 mg，2.17 mmol)及得自實例91之[(1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環 丙基）-乙氧基次膦醯基]-乙酸乙酯 （344 mg，0.87 mmol)於
THF (3.5 mL)中之懸浮液在50°C下攪拌20分鐘。在50°C 下20分鐘後，將反應物濃縮，所得殘餘物於乙酸乙酯（15 m L)中之溶液以η 2 Ο及鹽水清洗。水層以乙酸乙酯萃取， -155- 200819460 及將混合有機層乾燥（MgS04)及濃縮，產生醇（282 mg, 9 1.8%)。產物不進一步純化直接用於下一步驟。1H NMR (3 00MHz， CDC13 ):5 7.3 5 (s， 5H)， 5.99 (m， 1H)， 5.64 (d， 1H)，5.38 (dd，1H), 5.07 (s，2H)，4.12 (m，2H), 3.91 (m， 2H), 2.96 (bs, 1H), 2.18 (m，3H)，1.76 (m，1H)，1,62 (m， 1H)， 1.50 (m， 1H)， 1.26 (m，3H)。31P (121.4MHz, CDC13)』52.75 5，49.793。 上述醇（1 12 mg，0.32 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並 冷卻至〇°C。加入碘三甲基矽烷 （22 5 μΐ，1.58 mmol)，所 得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次冷卻至0°C，及 加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及2mL MeOH。所得溶液升 溫至室溫，並另攪拌2 0分鐘。將溶液濃縮，與甲苯共沸 兩次，及置於高真空下30分鐘。所得固體 （104mg，0.16 mmol)懸浮於 lmL DMF。力口入 HATU (152mg， 0.40 mmol)、VII (61mg， 0.32 mmol)及 NMM (88μ1， 0.80 mmol)。所得溶液在室溫下攪拌整夜。混合物經由逆相 HPLC純化，製得 24 (3 3.3mg，25%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz? CD3〇D):6 8.2 3 (d? J = 9.5Hz5 1H), 8.20 (s? 1H)，7.79 (s，2H) 5 7.3 3 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.95 (m，1H), 5.78 (s，1H)，5.22 (d5 J = 9.6Hz，2H)，5.13 (d，J = 9.0Hz，2H)， 4.63 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (m，3H)，4-05 (s，3H)， 3.83 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.78 (s，3H)5 2.4 5 (m，1H), 2-20 (m，1H)，2.15 (m，1H)，1·62 (m，2H)，1.50 (m，6H) 1 .3 8 (d，6H)，1 .05 (s，9H)。 -156- 200819460 P (121.4MHz, CD3OD):3 45.011。 實例2 5 :製備化合物2 5
lU NMR (3 00MHz, CD3OD)6 8.29 (d，J = 9.6Hz? 1H)， 8.18 (s，1H)，7.75 (m，2H)，7.32 (dd，J = 3，9 · 3 Hz)，6.0 0 (dt， J=10.2，16.5Hz，1H)，5.78 (s? 1H)，5.27 (d，J=15.6Hz)， 5.10 (d，J=12Hz，1 H), 4.64 (m，2H)，4.44 (1H)，4.17 (m， 2H)，4.08 (m，1 H )，4 · 0 5 ( s，3 H)，2 · 7 6 ( d d，J = 6 · 6，1 3 .5Hz? 1H)，2.45 (m, 1H)，2.32 (m，1H)5 2.0 9 (m，2H)，1.37 -1.65 (brm，16H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.05 (s，9H)。31P NMR (121 ·4ΜΗζ，CD3OD)5 45.7。L C / M S = 8 5 4 · 7 (M + + 1)。 實例26:製備化合物26
-157· 200819460 中間物 IV (467 mg, 1.5 mmol)溶於 5·0 mL 乾 DCM。 依序加入 DIEA (523 μ1，3·0 mmol)及 381 μΐ (3.0 mmol)TMSCI，反應物然後在室溫下攪拌5分鐘。然後加 入 DIEA (523 μΐ，3.0 mmol)及 209 μΐ (3.0 mmol)溴乙腈。 反應物升溫至40°C及攪拌整夜。反應物然後以乙酸乙酯稀 釋，及加以濃縮以移除 DCM。有機相然後以飽和 NH4C1、7jc及鹽水清洗。有機相以MgS04乾燥。真空過濾 移除Mg S04後，濃縮濾液，製得橘色油狀物，該橘色油狀 物經由管柱層析（Si02，純質乙酸乙酯）單離出產物，爲澄 清油狀物（190 mg，37%)。4 NMR (300MHz，CDC13)S 7·35 (s，5Η)，5.81(m，1Η)，5·60 - 5.26 (m，2Η)，5·11 (s, 2Η), 4.23 (m，2H)，2.99 (m，2H)，2·18 (m，1H)，1.85 -1·70 (m，
1H)， 1.65 - 1.47 (m， 1H)， 1.35 (m， 3H)。31P NMR (121.4MHz, CDC13)S 3 9.04，3 6.3 3。LC/MS = 3 70 (M + +1)。 如上所述，去保護及偶合至二肽VII，製得26 (60 mg 40%)。4 NMR (3 00MHz，CD3OD) 8.30 (d，J = 9.3Hz，1H)， 8.23 (s，1H), 7·74 (s, 2H)，7.30 (d，J = 2.1，8.7Hz，1H), 5.90 (m，2H)，5.76 (b，1H)，5.20 (d，J=17.4Hz，1H)，5.05 (d，J=ll.lHz，1H), 4·61(πι，2H)，4.55 (s，1H)，4.18 (m， 2H)，4.11(s，1H)，4.04 (s，3H)，3.0 (m，2H)，2.70 (m，1H), 2.60 (m，1H)，2.00 (m，1H)，1.41-1.78 (m，8H)，1·34 (d，J = 6·3Ηζ，6H)5 1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD)S 24.48 LC/MS = 822 (M + + 1) -158- 200819460 實例27:製備化合物27
次膦酸酯 IV (43 6 mg，1.40 mmol)、Hunig 氏鹼（593 pL，3.40 mmol)及氯三甲基砂院（378 μί，3.12 mmol)於 CH2C12 (5 mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時。加入氯（甲 氧基）甲烷（220 μί，3.17 mmol)後，所得溶液在40°C加熱2 小時。將溶液濃縮，殘餘物於乙酸乙酯（3〇 mL)中之溶液 以H20 (3 0 mLx2)清洗。水層部分以乙酸乙酯（30 mL)萃取 及將混合有機相部分乾燥（Mg S04)及濃縮。殘餘物經由管 柱層析以己烷：乙酸乙酯爲洗提液加以純化，製得27 (297 mg，60%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.35 (s，5H)，6.00 (m，1H)，5.44 (m，2H)，5.15 (m，1H), 5.07 (s5 2H)，4·18 (m， 2H)，3.87 (m，1H)，3.77 (d，J = 6.6Hz5 2H)，3.43 (s5 3H)， 2.20 (m，1H)，2.07 (m，1H)，1.80 (m，1H)，1.64 (m，1H), 1.48 (m，1H)，1.28 (m，3 H)。31 p (l 2 1 · 4 Μ H z，CDC13):5 44.0099， 43.403， 40.648， 40.353 ° 如上所述，進行去保護及偶合至二肽VII，製得27。 LC/MS = 827 (M+ +1) -159- 200819460 實例2 8 :製備化合物2 8
化合物 IV (1.64g，5.31 mmol)溶於 CH2C12 (60 mL)及 冷卻至。加入二異丙基乙胺（1.96 mL)及攪拌15分 鐘。逐滴加入氯三甲基矽烷（1. 40 mL)。反應混合物升溫至 室溫，並攪拌1小時。加入溴乙酸乙酯（2.92 mL)，及反應 物加熱至45°C整夜。反應混合物冷卻至室溫，以 CH2C12 稀釋，以NHUC1水溶液清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃 縮。粗產物經由管柱層析純化，製得1 . 1 5 g [(1 -苄氧基羰 基胺基-2-乙烯基·環丙基）-乙氧基次膦醯基]-乙酸乙酯，產 率 5 5%。 在-78°C 下，上述酯（679 mg，1·72 mmol)於甲苯（25 mL) 中之溶液加入 1.0 M DIBAL 於 CH2CI2 (6.6 mL，6.6 mmol) 中的溶液及攪拌2小時。所得混合物倒至冰冷6 N H C1 (1 0 0 m L)，以 E t O A c萃取及加以濃縮。殘餘物再溶於 CH2C12，不溶物經由塞里塑料過濾移除，將濾液濃縮，製 得無色油狀物。該油狀物溶於CH2C12 (20 mL)，然後依序 加入AcOH (0.52 mL)、三氟乙胺（260 mg)及三乙醯氧基硼 -160- 200819460 氫化鈉（73 0 mg)。混合物在室溫下攪拌16小時。反應物 在CH2C12及飽和NaHC03間分配。將有機層濃縮及經由 管柱層析純化，製得3 1 0 mg次膦酸酯油狀物。 在〇°C下，次膦酸酯於CH3CN (1 mL)中之溶液加入碘 三甲基矽烷（0.03 mL)。反應混合物升溫至室溫，攪拌〇.5 小時’並冷卻至0°C。加入三乙胺（0.2 mL)，接著加入 Me OH (2 mL) ’反應物升溫至室溫。混合物在真空下濃縮 及乾燥，製得23 mg粗產物之胺。 酸 VII (35 mg)溶於 DMF (0.8 mL)。加入 HATU (30 mg) ’所得混合物冷卻至〇°c。加入DIPEA (0.04 mL)，所 得混合物在室溫下攪拌1小時。加入上述胺於CH2C12 (2 mL)中之溶液’並攪拌1小時。藉由加入H20使反應驟 停，及在真空中移除CH2C12。非揮發殘餘物經由HPLC純 化’製得 19.9 mg 化合物 28。h NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.2 8 (d，J = 9.3Hz，lH)，8.18 (s，1H)? 7.74 (s? 2H)，7_30 (dd5 J = 2.4，9.0Hz，1H)，5.97 (m，1H)，5.79 (brs， 1H)，5.23 (d，J=17.7Hz，1H)，5.06 (d，J=11.7Hz，1H)，4·65 (m，2H)，4.46 (brs，1H)，4.15 (m，2H)，3·90 -4.10 (m，6H)， 3.55 (m，1H)，3.39 (m，1H)，2.80 (m，1H)5 2.4 5 (m，1H)， 2.12 (m，3H)，1.4 -1.7 (m，10H)，1.34 (d5 J = 6.3Hz，6H)， 0.95 -1.15 (brs，9H)。 實例29:製備化合物29 -161 - 200819460
化合物 IV (149 mg5 0.482 mmol)於 THF (2.41 mL)中 之溶液冷卻至-4 0 °C。此溶液加入 1 Μ N a Η M D S的 T H F (0.578 mL)溶液，所得混合物攪拌30分鐘，然後加入2-漠乙基苯 （1 0 7 m g，0 · 5 7 8 m m ο 1)。所得溶液另擾伴2小 時，直到藉由LCMS測知所有起始物質被消耗掉。藉由在 真空中移除溶劑以處理反應。殘餘物溶於EtOAc及以飽和 NH4C1水溶液清洗。將有機層乾燥，產物藉由矽膠層析純 化，製得74 mg澄清油狀物之產物。
El MS (m/z)43 6.1 [M + Na]。 (1S，2S)-1-((S)-乙氧基（苯乙基）磷醯基）-2-乙烯基環丙 基胺基甲酸苄酯（72 mg，0.174 mmol)於乾乙腈（1·74 mL)中 之溶液加入TMSI (0.124 mL，0.87 mmol)。反應物在周溫 攪拌1小時，直到LCMS分析顯示反應完全。藉由加入 TEA (0.243 mL，1.74 mmol)接著加入 MeOH (10 mL)使混 合物驟冷。將殘餘物乾燥，且不進行進一步純化直接用於 下一步驟。
El MS (m/z)252.3 [MH + ]，274.1 [M + Na]。 (S)-((1S，2S)-1-胺基-2-乙烯基環丙基）（苯乙基）次膦酸 (43 mg，0.171 mmol)、羧酸 VII (112 mg，0.171 mmol)於 -162- 200819460 DMF及CH2C12 (1.7 mL)之1:1 溶液中之溶液以HATU (98 mg，0.256 mmol)及 DIEA (0.119 mL，0.685 mmol)擾拌 1 小 時直到反應完全。產物經由逆相：^1^(八^0.05%丁？八-H20，0.05% TFA)純化，製得所欲之產物。4 NMR (3 00MHz, CD3OD)5 8.27 (d，1H，J = 9Hz)，8.16 (s，1H)， 7.75 -7.71(m，2H)，7.30 (d, 1H，J = 11Hz)5 7.27 -7.22 (m， 5H)，6.01(dt，1H，J=17，10Hz)，5.75 (br s，1H)，5.28 (d, 1H，J二 17Hz)，5.11 (d5 1H, J=llHz)，4.6 8 -4.5 8 (m，2H)， 4.44 (brs5 1H)? 4.22 -4.10 (m? 2H)? 4.04 (s? 3H), 3.05 -2.83 (m? 2H)? 2.82 -2.70 (m? 1H)? 2.48 -2.3 7 (m, 1H) 2.18 -2.03 (m，3H)5 1.68 - 1.40 (m，l〇H)，1.33 (d，6H，J = 6Hz)， 0.99 (s5 9H); 31P (121.4MHz, CD3〇D)5 47.2 ; El Ms (m/z) 887.4 [MH + ]。 實例3 0 :製備化合物3 0
實例3 0至3 3係以實例29之相同方法加以製備。 經由製備性逆相 HPLC，製得化合物 30 (10mg， 33%)，爲黃色固體。h NMR (300MHz, CD3OD):5 8·27 (d， -163- 200819460 J = 9.4Hz，1H)，8·16 (s，1H)，7·74 (s，1H)，7.72 (s，1H)， 7.32 (m，3H)，7.23 (m，2H) 6_00 (m, 1H)，5.75 (s，1H)， 5.27 (m，1H)，5.10 (m，1H) 4.64 (m5 2H)，4.46 (m，1H), 4.16 (m，3H)，4.04 (s，3H)，3.10 (m，2H)，2.76 (m，1H)， 2.43 (m，1H)，2.10 (m，3H)，1.60 (m，8H) 1.34 (m，6H)， 1.02 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 44.597 LC (跑6分鐘，停留時間=3·82分鐘）MS (921.6，M + l) 實例31:製備化合物31
經由製備性逆相HPLC純化，製得化合物31 (23mg， 47%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.22 (d， J = 9.2Hz? 1H), 8_1 l(s, 1H)，7.70 (s，1H)，7.68 (s，1H)，7.25 (m，3H)5 6.99 (m，2H) 5.98 (m，1H)，5.70 (s，1H)，5.21(m, 1H)，5.05 (m，1H) 4.58 (m，2H)，4.40 (s，1H)，2H), 3.99 (s? 3H), 2.91 (m? 2H)? 2.70 (m, 1H) 5 2.3 8 (m? 1H)5 2·08 (m，3H), 1·50 (m，8H) 1.29 (m，6H)，0.93 (s，9H)。 31P (121.4MHz, CD3OD):5 44.896。LC (跑 6 分鐘，停留時 -164- 200819460 間=3.70 分鐘）MS (905.5，M + l) 實例32:製備化合物32
經由製備性逆相Η P L C純化，製得化合物3 2 ( 8 5 m g， 65%)，爲黃色固體。iH NMR (300MHz，CD3OD)J 8.215 (d，J = 9.3Hz? 1H)，8.1 l(s，1H)5 7.7 0 (s，1H)，7.69 (s，1H)， 7.25 (m? 2H)? 7.025 (m? 4H) 5.95 (m5 1H)? 5.69 (s? 1H), 5.22 (m，1H)，5.06 (m, 1H) 4.59 (m，2H)，4.40 (s, 1H)， 4.10 (m，2H)，3.99 (s，3H)，2.90 (m, 2H)，2.70 (m, 1H)， 2.36 (m, 1H)，2.26 (s，3H) 2.10 (m, 3H)，1.50 (m, 8H) 1.29 (m， 6H)， 0.93 (s? 9H) 。 31P (121.4MHz， CD3OD):5 45.420 °LC (跑6分鐘，停留時間=3.77分鐘）MS (902.6, M + 1)。 實例3 3 :製備化合物3 3 -165- 200819460
經由製備性逆相HPLC純化，製得化合物33 (70mg， 55%)，爲黃色固體。iH NMR (300MHz，CD3OD):5 8.25 (d， J = 9.1 Hz? 1H), 8.17 (s，1H)，7_74 (m, 2H)，7·31 (m，1H)， 7.21 (m，2H)，7.04 (m，1H ) 5.95 (m，1H)，5.75 (bs5 1H), 5.25 (m, 1H)，5.10 (m，1H) 4.60 (m，2H)，4.40 (bs，1H)， 4·13 (m，2H)，4.04 (s，3H)，3.09 (m，2H)，2.70 (m, 1H)， 2.42 (m，1H)，2.10 (m，3H)，1.50 (m, 8H) 1.33 (m，6H)， 0.97 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD)』44.588。LC (跑 6 分鐘，停留時間=4.22分鐘）MS (940.3，M + l)。 實例3 4 :製備化合物3 4
中間物 IV (1.08g，3.5 mmol)溶於 CH2C12 (40 mL)，並 -166- 200819460 冷卻至〇°C。加入二異丙基乙胺（950 mg, 7.35 mmol)’並 攪拌 15分鐘。逐滴加入氯三甲基矽烷（8〇〇 mg, 7.35 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1小時。加入氯 甲硫基-苯（2.77g，17 mmol)，反應物加熱至45 °C整夜。反 應混合物冷卻至室溫，以CH2C12稀釋，以nh4ci水溶液 清洗，以Na2S04乾燥，及加以乾燥。粗產物經由組合快 速層析純化，製得222 mg次膦酸酯。 在0°C下’上述製得之次膦酸酯（222 mg, 0.52 mmol) 於CH3CN (1 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（〇·36 mL， 2.58 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌30分鐘，然 後冷卻至〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（〇.3 mL)及MeOH (0.6 mL)，並攪拌1 0分鐘。濃縮溶劑，殘餘物與甲苯（5 mL)共 蒸發，及在真空下乾燥20分鐘，製得粗質胺。與酸VII (168 mg，0.26 mmol)偶合，製得 1 5 0 m g 化合物 3 4。1Η NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.27 (d，J = 9.6Hz，1Η)，8.20 (s， 1H)，7.72 (s5 2H)，7.41(d，J = 7.8Hz，1H)5 7.27 (m，3H)， 7.15 (d，J = 7.2Hz，1H)，5.94 (m，1H)，5.74 (s，1H)，5.28 (d5 J = 1 7.1 H z, 1 H)，5 · 1 1 (d，J = 1 1 · 1 H z，1 H)，4 · 6 3 (m，2 H)，4 · 4 8 (s，1H)，4.16 (m，2H), 3.36 (m，2H)，2.74 (m，1H), 2.46 (m， 1 H)，2 · 1 0 (m，1 H)，1 · 7 0 -1 · 4 0 (m，8 H)，1 · 3 0 (m，6 H) 5 0 · 9 7 (s，9H) 31P (121.4MHz，CDC13 ):6 3 9.1 74 LC/MS = 905.20 (M + +1) 實例3 5 :製備化合物3 5 -167- 200819460
lU NMR (3 00MHz5 CD3〇D)5 8.2 9 (d，J = 9.3Hz， 8.18 (s, 1H)，7·75 (s，2H)，7.17 -7.34 (brm，6H)，5.96 J = 9.9? 17.1Hz，1H)，5.79 (s，1H)，5.27 (d，J=17.1Hz， 5.09 (d? J=10.2Hz, 1H)? 4.69 (m? 2H), 4.46 (s? 1H)9 4. 4.2 (brm，3H)，4.05 (s，3H)，3.29 (d, J=15.6Hz，2H)， (dd，J = 7.5，14.1Hz，1H)，2.48 (m，1 H)? 2 · 1 1 (m，1 H)，1 _ 1.7 (brm，10H)，1 · 3 4 ( d，J = 6 · 3 H z，6 H)，1.02 (s? 9H) NMR (121 ·4ΜΗζ，CD3OD)5 43·3。LC/MS = 872.7 (M 8 94.5 (M + + Na)。 實例3 6 _·製備化合物3 6 1H)， (dt， 1H), 07 -2.78 38 -31P 卜 + l)，
5 m L 次膦酸酯 IV (4 0 9 m g，1 · 3 2 m m ο 1)懸浮於 2 · -168- 200819460 cdci3。經由抽真空自反應燒瓶移除空氣並以N2替代。力口 入Hunig氏驗（552μ1，3.16 mmol)，接著加入氯三甲基砂 烷（3 6 8 μ1，2·90 mmol)。5分鐘後，加入1-(溴甲基）-2-氟 苯（3 3 4 μΐ，2.7 7)，所得溶液在40 °C下加熱。4小時後，將 反應物濃縮。殘餘物在EtOAc及H20間分配及以H20清 洗。有機層以Mg S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物經由 組合快速層析系統以梯度50% EtOAc/己烷至100% EtOAc 純化，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2-氟-苄基）次膦酸乙酯 （142.8mg，26%)，爲棕色油狀物。1Η NMR (3 00MHz, CDC13)6: 7.29 -7.48 (m, 6H)9 7.16 -7.29 (m，1H)，7.16 -6.98 (m，2H)，6.06 (dt，0.4H，J=17.1 及 10·2Ηζ)，5.76 (dt，0.6H，J=17.1 及 9·9Ηζ)，5·28 - 5.41 (m， 0·6Η)，4.96 -5·22 (m5 3.8H), 4.90 (d，0·6Η，J二9·9Ηζ)5 3·9 -4·17 (m，2Η)，3.0 5 - 3.5 3 (m，2Η)，2.11-2.26 (m，0.4Η)， 1.91-2.05 (m? 0.6H)? 1.70 - 1.82 (m, 1.4H)? 1.5 0 - 1.60 (m, 0.6H)，1.05 -1.3 2 (m，4H)。31P (121.4MHz? CDC13)：6 46.3 3 3，（〇·4Ρ)，49.339 (0.6P)。1 9 F (1 2 1 · 4 Μ Η z，C D C 13): δ -1 12.931 (0.6F), -118·315，0.4F)。
殘餘物（142.8mg，0.34 mmol)懸浮於 lmL CH3CN’ 並 冷卻至 0°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(243 μΐ，1·71 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再冷卻至 〇°C，並加入三乙胺（1 mL，7.33 mmol)及 MeOH (2mL)。所 得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。然後將溶液濃 縮，與甲苯共沸兩次及置於高真空下30分鐘。使用HATU -169- 200819460 (218 mg，0.58 mmol)及 NMM (126 μΐ，1.15 mmol)的條件 下，使所得粗質物與酸VII (148 mg，0.23 mmol)偶合，經 由Gilson HPLC純化後，製得36 (122 mg, 60%)，爲黃色 固體。4 NMR (3 0 0MHz，CD3OD):5 8.30 (d，J = 9.5Hz，1H), 8.20 (s? 1H)? 7.79 (s? 2H), 7.42 (t, 1H)? 7.35 (d? J = 8.8Hz? 1H)? 7.22 (m? 1H)? 7.15 (m? 2H)? 5.95 (m? 1H)? 5.78 (s? 1H)，5.35 (d5 J = 9.6Hz，2H)，5.15 (d5 J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs5 1H)，4.20 (s，2H)，4_05 (s，3H)，3.33 (m， 2H)? 2.80 (m9 1H)? 2.52 (m5 1H), 2.20 (m? 1H)? 1.62 (m? 6H)， 1.3 8 (d，6H)， 1 .05 (s5 9H) 。31P (121.4MHz， CD3OD):5 42.259。
次膦酸酯 IV (3 5 0mg，1.13 mmol)懸浮於 2.5mL CDC13。經由抽真空自反應燒瓶移除空氣並以N2替代。力口 入Hunig氏鹼（472μ1，2·71 mmol)，接著加入氯三甲基矽 烷 （315μ1，2.48 mmol)。5分鐘後，加入1-(溴甲基）-3-氟 苯 （449mg，2·37)於5 0 0μ1 CDC13中之溶液，所得溶液在 -170- 200819460 4〇°C下加熱。4小時後，將反應物濃縮。殘餘物在EtOAc 與H20間分配，及以H20清洗。有機層以MgS04乾燥， 加以過濾及濃縮。粗質物經由組合快速層析系統以梯度 50% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化’製得（1-苄氧基羰基 胺基-2-乙嫌基環丙基）-(3 -氟-节基）-次膦酸乙酯（ll〇mg， 23%)，爲棕色油狀物。 殘餘物（ll〇mg，0.26 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷 卻至〇°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(187 μ15 1.31 mmol)， 所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再冷卻至〇°C，並 加入三乙胺（1 mL，7.33 mmol)及MeOH (2mL)。所得溶液 升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。然後將溶液濃縮，與甲 苯共沸兩次及置於高真空下30分鐘。與酸VII偶合，製 得 37 (86.5 mg，57%)，爲黃色固體。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 8.3 0 (d? J = 9.5Hz? 1 Η)，8 · 2 0 (s，1 Η)，7 · 7 9 (s，
2 Η) 5 7 · 3 3 (m，2 Η)，7.1 8 (m，2 Η)，6 · 9 8 (t, 1 Η)，5 · 9 5 (m， 1H) 9 5.7 8 (s? 1H)? 5.22 (d? J = 9.6Hz, 2H)? 5.13 (d? J = 9.0Hz? 2H)，4.65 (m，2H)，4.42 (bs5 1H)5 4.20 (s，2H)，4.05 (s， 3H)，3.33 (m，2H)5 2.8 0 (m，1H)，2.45 (m，1H)，2.15 (m， 1H)，1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)，1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 42.8 5 5。 實例3 8 :製備化合物3 8 -171 - 200819460
次膦酸酯 IV (404mg，1.30 mmol)懸浮於 2.5mL C D C 13。經由抽真空自反應燒瓶移除空氣並以N 2替代。力口 入Hunig氏驗（543μ1，3.12 mmol)，接著加入氯二甲基石夕 院（363μ1, 2.86 mmol)。5分鐘後，加入1-(溴甲基）-4 -氟苯 (3 3 7 μΐ，2.77 mmol)，所得溶液在40 °C下加熱。4小時後， 將反應物濃縮。殘餘物在EtOAc與H20間分配，及以 H20清洗。有機層以MgS04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質 物經由組合快速層析系統以梯度50% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-(4-氟-苄基）-次膦酸乙酯（164mg，30%)，爲棕色油狀物。該 粗質物 （1 5 1 m g，0 · 3 6 m m ο 1)懸浮於1 m L C Η 3 C N，並冷卻 至〇°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(25 7 μΐ，1.81 mmol)，所 得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再冷卻至〇°C，並加 入三乙胺（1 mL, 7_33 mmol)及MeOH (2mL)。所得溶液升 溫至室溫，並另攪拌20分鐘。然後將溶液濃縮，與甲苯 共沸兩次及置於高真空下30分鐘。所得固體（1-胺基-2-乙 烯基-環丙基）-(4-氟苄基）-次膦酸直接用於下一步驟。 上述酸 VII (157mg，0_24 mmol)懸浮於 lmL DMF。加 入 HATU (228mg5 0.6 0 mmol)、（卜胺基-2-乙烯基-環丙 -172- 200819460 基）（4-氟-苄基）-次膦酸（92mg，0.36 mmol)，接著加入 ΝΜΜ (132μ1，1.20 mmol)。所得溶液在室溫下攪拌整夜。 混合物藉由Gilson HPLC純化，製得3 8 ( 1 3 3 mg，62%) ’ 爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz， CD3OD):5 8.30 (d， J = 9.5Hz? 1H)，8.20 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7.35 (d, J=8.8Hz， 1H), 7.05 (t，2H)，5.95 (m，1H), 5.78 (s，1H)，5.35 (d5 J = 9.6Hz，2H)，5.15 (d，J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s5 2H)，4.05 (s, 3H)，3.33 (m，2H)，2.80 (m5 1H)，2.52 (m，1H)，2.20 (m, 1H)，1.62 (m，6H)，1.38 (d5 6H)，1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz, CD3OD)』43.659。 實例3 9 :製備化合物3 9
逐滴加入氯三甲基矽烷 （285 μΐ, 2.25 mmol)時，次膦 酸酯 IV (3 3 0 mg, 1 · 0 7 mmo 1)及 Huni g 氏驗（3 9 2 μ 1，2.2 5 mmol)於CH2C12 (9.7 mL)中之溶液在（TC下攪拌。所得溶 液升溫至室溫，40分鐘後，加入2-(溴甲基）苯甲腈（461 mg，2 ·3 5 mmol)，所得溶液在40 °C下加熱5小時。溶液在 室溫下攪拌12小時，並加以濃縮。殘餘物在CH2C12及 -173- 200819460 NH4C1間分配。將有機層乾燥（MgS〇4)及濃縮。粗質物以 組合快速層析系統純化，製得（1 -节氧基鑛基胺基-2 -乙烯 基-環丙基）-(2-氰基-苄基）_次膦酸乙酯（180 mg，40%)。lH NMR (3 0 0MHz, CDC13):8 7.58 (m? 4H)? 7.33 (m? 5H) 6.18 -5.83 (m，1H)，5.7 8 - 5.3 9 (m，1H)，5.10 (s, 3H)，4.89 (m， 1H), 4.05 (m，2H)，3.55 (m，2H), 2.21(m，1H)，1·78 (m， 1H)， 1.50 (m， 1H)， 1 . 1 0 (m， 3 H) 。 31 P ( 1 2 1 ·4ΜΗζ， CDC13):3 43.997，41.885 非對映異構物。 加入碘三甲基矽烷（301 μΐ, 2.12 mmol)時，上述次膦 酸酯（180 mg, 0.42 mmol)於 CH3CN (1 mL)中之溶液在 0C 下攪拌。所得溶液在室溫下攪拌，然後再次冷卻至0 °C， 並加入三乙胺（1 mL，7.33 mmol)及MeOH (2 mL)。所得溶 液升溫至室溫，並攪拌20分鐘。將溶液濃縮，與甲苯共 沸兩次，及在高真空下乾燥達30分鐘。所得固體不進一 步純化直接用於下一步驟。 酸 VII (137mg，0.21 mmol)懸浮於 3mL DMF。加入 HATU (200mg，0.53 mmol)、上述製得之胺（lllmg, 0.42 mmol)，接著力□入ΝΜΜ (136μ1, 1.05 mmol)。所得溶液在 室溫下攪拌整夜。所得混合物藉由Gilson HPLC純化，製 得 39 (43mg，23%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.29 (d5 J = 8.7Hz? 1H)5 8.18 (s5 1H)，7·76 (s， 2H)5 7.68 (m，2H)，7.61(m，1H)，7.35 (m，2H) 5 5.9 9 (m， 1H)5 5.80 (s， 1H)，5.31 (d, J=17.5Hz, 1H)，5.14 (d， J=10.8Hz? 1H)? 4.68 (m, 2H)? 4.52 (bs, 1H)? 4.16 (m5 2H)9 -174- 200819460
4.07 (m，4H)，3.62 (t5 J=15.3Hz，1H)，3.42 (t，J=15.6Hz， 1H)，2.83 (m，1H)，2.66 (m，1H)，2.18 (m，1H)，1.62 -1.40 (m， 1 OH) 1.38 (d, J = 6.3Hz，6H)， 1.04 (s， 9H)。31P (121.4MHz9 CD3〇D):6 3 6.642 LC/MS = 8 9 8 (M + + 1) 實例40:製備化合物40
次膦酸酯 IV (3 20mg，1·04 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至 0°C。逐滴力〇入 Hunig氏鹼 (342 μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基矽烷（285 μ1，2.25 mmo 1 )。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力口入 3-(溴甲 基）苯甲腈（461mg，2·35 mmol)，所得溶液在40°C下加熱5 小時。然後，反應物在室溫下攪拌1 2小時。殘餘物在 CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以
Mg S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析 系統純化之，製得（1 -节氧基簾基胺基-2 -乙基-環丙基）-
(3-氰基-苄基）-次膦酸乙酯（190mg，42%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13)：5 7.5 8 (m? 4H)? 7.37 (m? 5H)? 6.13 (m? -175- 200819460 1H)5 5.8 3 - 5.7 8 (m，1H)，5.65 (m，1H), 5.39 (m，1H)，5·10 (s，2H)，3.98 (m，2H)，3.25 (m，2H)，2·15 (m，1H)，1.78 (m， 1H)，1.41(m，1H)，1.10 (m，3H)。31P (121.4MHz，CDC13):5 4 4.5 52，42.1 03非對映異構物。
上述次膦酸酯（180mg，0.42 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至〇°C。加入碘三甲基矽烷 （ΤΜ8Ι)(301μ1， 2.12 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（lmL, 7.33 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下30分鐘。在3 mL DMF、HATU (200mg，0.53 mmol)、ΝΜΜ (136μ1，1.05 mmol)中，所得固體與酸VII (137mg，0·21 mmol)偶合。所 得溶液在室溫下攪拌整夜。混合物藉由 Gilson HP LC純 化，製得 40 (40mg，22%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz， CD3OD):5 8.29 (d，J = 9.9Hz5 1H)， 8.17 (s， 1H)， 7·76 (s，2H)，7.62 (m，1H)，7.59 (m，1H)，7.41(m，2H)， 7.34 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.89 (m，1H)，5·78 (s，1H)，5.24 (d， J=15.9Hz，1H)，5.02 (d，J=10.8Hz，1H)，4.66 (m，2H)，4.46 (bs，1H)，4.15 (m，20H)，4.05 (m，4H)，3.22 (m，2H)，2.78 (m，1H)，2.49 (m，1H)，2.09 (m，1H)，1.62 - 1.5 0 (m，10H) 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1 · 0 2 (s, 9 H)。31 P (1 2 1.4 Μ H z, CD3OD):5 40.005。 LC/MS = 8 9 8 (M + + 1) -176- 200819460 實例4 1 :製備化合物4 1
次膦酸酯 IV (3 3 0mg，1.07 mmol)懸浮於 9.7mL C Η 2 C 12。所得溶液冷卻至 〇 °C。逐滴加入 H u n i g氏鹼 (342μ1, 2.25 mmol)，接著加入氯三甲基砂院（285μ1，2.25 m m ο 1 )。所得溶液升溫至室溫，4 0分鐘後，力Π入4 -(溴甲 基）苯甲腈（7)(461mg，2.35 mmol)，所得溶液在40°C下加 熱5小時。然後，反應物在室溫下攪拌12小時。殘餘物 在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以 Mg S04乾燥，力口以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層析系 統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(4-氰基-苄基）-次膦酸乙酯（200mg，45%)。i NMR (3 00MHz， CDC13):S 7.58 (m, 4H)，7.37 (m，5H)，6·13 -5.83 (m, 1H)， 5.78 -5·65 (m，2H)，5.39 (m，1H)，5.10 (s，2H)，3.98 (m， 2H)，3.25 (m，2H)，2.15 (m，1H)，1.78 (m，1H)，1.41(m， 1H)， 1.10 (m， 3H)。31P (1 2 1.4 M Hz，C D C13): δ 4 6 · 1 6 4， 43.998非對映異構物。
上述次膦酸酯 （1 8 0 m g，0 · 4 2 m m ο 1) 懸浮於 1 m L -177- 200819460 CH3CN，並冷卻至0°c。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(301pl, 2· 12 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及 2mL Me OH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮’與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。在3 mL DMF、HATU (200mg，0.53 mmol)、ΝΜΜ (136μ1，1.05 mmol)中，剩下之固體與酸vil (137mg, 0.21 mmol)偶合。 所得混合物藉由 Gilson HPLC純化，製得 41 (55mg，
30%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.29 (d， J = 9.3Hz，1H)，8.17 (s5 1H)，7.75 (s，2H)，7.63 (m，2H)， 7.52 (m，2H)，7.32 (m，1H)，5.89 (m5 1H)，5.79 (s，1H)， 5.26 (d，J=17.1Hz5 1 H)? 5.06 (d，J=10.8Hz，1H)，4.68 (m， 2H)，4.45 (bs，1H), 4.17 (m，2H)，4.08 (m，4H)，3·37 (m， 2H)，2.76 (m，1H)，2.48 (m，1H)，2.07 (m，1H)，1.61-1.40 (m， 1 OH) 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)， 1.0 1 (s，9H) 〇 31P (121.4MHz? CD3OD):5 3 6.642 LC/MS = 898 (M + + 1) 實例42:製備化合物42 -178- 200819460
中間物 iv (2.1g，6.79 mmol)溶於 THF (20 mL)及冷卻 至-78°C。逐滴加入 1M NaN(TMS)2 的 THF 溶液（8.83 mL， 8· 83 mmol)，反應混合物在-78 °C下攪拌1小時。加入2-甲 氧基苄基氯（1.23 mL，8.83 mmol)，及移除冷浴。反應混合 物在室溫下攪拌6小時。反應以NH4C1驟停及反應混合物 以EtOAc萃取。有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加 以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 2.15g次膦酸酯，產率74%。 在室溫下，上述製得次膦酸酯（2.15 g)於TFA (10 mL) 中之溶液加入DM S (3 mL)及攪拌整夜。所得混合物加以 濃縮及與甲苯共沸。殘餘物溶於1 /1 i p r 〇 Η /庚烷，及以 6Ν HC1 (3x100 mL)清洗。在冷浴中，以NaOH使水層pH =1〇。水層以EtOAc萃取。有機層以鹽水清洗，以Na2S〇4 乾燥’加以濃縮，製得3 8 6 mg胺，根據標準製程，使該 胺在DMF及HATU中偶合至中間物VI，製得粗產物。粗 產物經由組合快速層析純化，製得1 · 1 g三肽，產率 8 7%。 上述製得三肽（l.lg，1.18 mmol)溶於 CH3CN (10 mL) -179- 200819460 及冷卻至 〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（0.85 mL, 5.91 mmol)，並攪拌10分鐘。力[[入2,6 -二甲基吡陡（0.82 mL)。 加入MeOH (10 mL)，及濃縮反應混合物。粗產物經由 HPLC 純化，製得 645 mg 化合物 42。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.3 0 (d5 J = 9.5Hz? 1 Η)，8 · 2 0 (s，1 Η)，7 · 7 9 (s， 2H)，7.35 (d，J = 8.8Hz, 1H)5 7·05 (t，2H)，5.95 (m，1H)， 5.78 (s，1H)，5.35 (d，J = 9.6Hz，2H)，5·15 (d，J = 9.0Hz，2H)， 4.75 (m，2H)，4·45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)，4.05 (s，3H)， 3.33 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.52 (m，1H)，2.20 (m，1H)， 1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)，1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):5 ·43·6 5 9。 實例43:製備化合物43
次膦酸酯 IV (3 73 mg，1.21 mmol)懸浮於 5mL THF ’ 並 冷卻至-40°C。逐滴加入 IN NaN(TMS)2 (1.43mL5 1.43 mmol)達15分鐘，接著加入1 -(氯甲基）-3 -甲氧基苯 (212μ1，1.46 mmol)於lmL THF中之溶液。所得溶液從
-40°C至室溫攪拌整夜。反應物以EtOAc稀釋及使用20mL -180- 200819460
IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以 MgS04乾 燥，及加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至 100% EtOAc純化，製得（1·苄氧 基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）_ (3-甲氧基-苄基）-次膦酸乙 酯 （95.9mg， 19%)，爲棕色油狀物，其懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至0°C。此混合物加入碘三甲基矽烷（TMSI) (1 5 8μ1，1.1 1 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後， 溶液再次冷卻至〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將 溶液濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。 在 HATU (142mg，0.38 mmol)及 ΝΜΜ (83μ1，0·75 mmol) 中’該固體（1-胺基-2-乙矯基-環丙基）-(3 -甲氧基-节基）-次 膦酸與 VII (95mg，0.16 mmol)偶合，經由 Gilson HPLC 純 化後，製得化合物 43。h NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.80 (s，1H)，8.30 (d，J = 9.5Hz，1H)，8.20 (s，1H)，7.79 (s5 2H), 7.35 (d，J = 8.8Hz，1H)，7.18 (m, 1H)，6.85 (m，2H)，6.78 (m，1H)，5.95 (m，1H)，5·78 (s，1H)，5.50 (s，1H)，5.35 (d， J = 9.6Hz，2H)，5.15 (d5 J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4_45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)5 4.05 (s，3H)，3.80 (s，3H)，3.33 (m， 2H)，2.80 (m，1H)，2.52 (m，1H)，2.20 (m，1H), 1.62 (m， 6H)， 1.38 (d， 6H), 1.05 (s? 9H)。31P (121.4MHz? CD3OD):5 43.3 7 1。 實例44:製備化合物44 -181 - 200819460
次膦酸酯 IV (341mg，1.10 mmol)懸浮於 5mL THF ’ 並 冷卻至-40°C。逐滴力口入 IN NaN(TMS)2 (1.32mL， 1.32 mmol)達15分鐘，接著加入1 -(氯甲基）-4 -甲氧基苯 (180μ1，1.3 2 mmol)於lmL THF中之溶液。所得溶液從 -40°C至室溫攪拌整夜。反應物以EtOAc稀釋及使用20mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04乾 燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以梯 度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化，製得（1-苄氧基 羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(4-甲氧基-苄基）-次膦酸乙酯 (135mg，27%)，爲棕色油狀物。上述殘餘物懸浮於lmL CH3CN，並冷卻至 0°C。力□入碘三甲基矽烷（TMSI)(215pl， 1.5 1 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（lrnL，7.33 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。所得 固體（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-(4-甲氧基-苄基）-次膦酸直 接用於下一步驟。 上述酸 VII (130mg，0.20 mmol)懸浮於 lmL DMF。加 -182- 200819460 入 HATU (190mg，0.50 mmol)、（1-胺基-2-乙烯基-環丙 基）（4 -甲氧基-节基）-次膦酸（80mg，0.30 mmol)，接著加入 ΝΜΜ (ΙΙΟμΙ，1.00 mmol)。所得溶液在室溫攪拌整夜。混 合物藉由Gilson HPLC純化，製得44 (85.4mg，47%)，爲 黃色固體。1H NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.80 (s5 1H)， 8.30 (d，J = 9.5Hz，1H)，8·20 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7·35 (d， J = 8.8Hz，1H)，7.21 (d，J = 8.9Hz，2H)，6.85 (d5 J = 9.2Hz， 2H)，5·95 (m，1H)，5.78 (s，1H)，5.50 (s，1H)，5.35 (d5 J = 9.6Hz，2H)，5.15 (d，J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)5 4.20 (s，2H)，4.05 (s，3H), 3.80 (s，3H)，3.33 (m， 2H)，2.80 (m，1H)5 2.5 2 (m，1H)，2.20 (m, 1H)5 1.62 (m5 6H)， 1.38 (d， 6H)， 1.05 (s， 9H) 。 31P (121.4MHz, CD3OD)』43.93 9。 實例45:製備化合物45
次膦酸酯 IV (3 3 0mg，1·07 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至 0°C。逐滴加入 Hunig氏鹼 (342μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基矽烷（2 8 5 μ1，2.25 -183- 200819460 mmol)。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力卩入1-(溴甲 基）-3 -甲基苯（43 5mg, 2.35 mmol)，所得溶液在40°C下加 熱5小時。然後，反應物在室溫下攪拌12小時。殘餘物 在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以 MgS04乾燥，力口以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層析系 統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2-甲基-苄基）-次膦酸乙酯（190mg，43%)。]H NMR (3 00MHz， CDC13):6 7·37 (m，5H)，7.18 (m，4H)，6.13 (m， 1H)， 5·78 (m，1H)，5.39 (m，1H)，5.10 (m，2H)，3.98 (m，2H)，3·25 (m，2H)5 2.15 (s，3H), 1.80 (m，2H)，1.41 (m, 1H)，1.10 (m， 3H)。31P (121.4MHz，CDC13):5 46.105，43.225 非對映異構 物。 上述次膦酸酯（173mg，0.42 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至 0DC。力卩入碘三甲基矽烷（TMSI)(301pl， 2.12 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 0°C，及加入三乙胺（lmL, 7.33 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。所得 固體直接使用，不進一步純化。 上述酸 VII (137mg，0.21 mmol)懸浮於 3mL DMF。力口 入 HATU (200mg，0.53 mmol)、上述製得之粗質胺（105mg， 0.42 mmol)，接著加入 ΝΜΜ (136μ1，1.05 mmol)。所得溶 液在室溫攪拌整夜。混合物藉由Gilson HPLC純化，製得 45 (60mg， 34%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz， -184- 200819460 CD3〇D):5 8.29 (d，J = 9.9Hz，lH)，8.19 (s，lH), 7.77 (s， 2H)，7.30 (m，3H)，7.11(m，2H), 5·95 (m，1H), 5.81(s，1H)， 5.32 (d，J=17.7Hz，1H)9 5.13 (d5 J=10.8Hz，1H), 4.67 (m， 2H)，4.44 (bs，1H)，4.16 (m，2H)，4.08 (m，4H)，3.30 (m， 2H)，2.75 (m，1H), 2.50 (m，1H)，2.38 (m，3H)，2.16 (m， 1H)，1.63 - 1.3 5 (m，6H) 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.03 (s， 9H)。31P (121.4MHz, CD3OD):5 42.1 00 LC/MS = 8 8 7 (M + + 1) 實例46:製備化合物46
次膦酸酯 IV (3 3 0mg，1.07 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至 〇°C。逐滴加入 Hunig氏鹼 (342μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基矽烷（2 8 5 μ1，2.25 mmol)。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力D入1-(溴甲 基）-3 -甲基苯（435mg, 2.35 mmol)，所得溶液在40C下加 熱5小時。然後，反應物在室溫下攪拌12小時。殘餘物 在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以 -185- 200819460 M g S Ο 4乾燥，力口以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層析系 統純化之，製得（卜苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(3-甲基-苄基）-次膦酸乙酯（2〇〇mg，45%)。h NMR (3 00MHz， CDC13)：5 7.38 (m? 5H)? 7.18 (m? 4H)? 6.13 (m, 1H)? 5.78 (m，1H)，5.39 (m，1H)，5.10 (m，2H)，4.02 (m，2H)5 3.25 (m，2H)，2.30 (s5 3H)，1.98 (m，1H)，1.80 (m，1H)5 1.50 (m， 1H)，1.18 (m，3H)。31P (121.4MHz，CDC13):6 47.8 8 5, 44.00 1非對映異構物。 如實例4 5般，進行去保護及偶合反應，製得化合物 46，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.29 (d， J = 9.0Hz，1H)，8.17 (s5 1H)，7·75 (s，2H)，7.33 (d，J = 9.3, 1H)，7.13 (m，3H)，7.01(m，1H)，5.96 (m，1H)，5.79 (s， 1H) 5 5.2 7 (d，J= 17.1Hz，1H)，5.08 (d，J = 9.9Hz，1H)，4.68 (m，2H)，4.46 (bs，1H)，4.16 (m，2H)，4.06 (m，4H)，3.27 (m，2H)，2.78 (m, 1H)，2.52 (m，1H)，2.29 (s，3H)5 2.13 (m， 1H)，1.62 - 1.40 (m? 1 OH) 1 · 3 4 (d，J = 6 · 3 H z，6 H)，1.03 (s, 9H)。31P (121·4ΜΗζ，CD3OD):5 42.1 00 LC/MS = 8 8 7 (M + + 1) 實例47:製備化合物47 -186- 200819460
次膦酸酯 IV (3 3 0mg5 1·07 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至0°C。逐滴加入 Hunig氏鹼 (342μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基石夕院（285μ1，2.25 mmol)。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力[]入1-(溴甲 基）-4-甲基苯（43 5mg，2.35 mmol)，所得溶液在40°C下加 熱5小時。然後，反應物在室溫下攪拌12小時。殘餘物 在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以 Mg S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層析系 統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(4-甲基-苄基）-次膦酸乙酯（195mg，44%)。4 NMR (3 00MHz， CDC13)：5 7.3 8 (m? 5H), 7.18 (m? 4H), 6.13 (m? 1H), 5.78 (m，1H)，5.39 (m，1H)，5.10 (m，2H)，4.04 (m，2H)，3.25 (m，2H)，2.30 (s，3H)，1.98 (m，1H), 1.80 (m，1H)，1.50 (m， 1H)，1.18 (m，3H)。31P (12 1.4MHz, CDC13)：5 45.99 1 ? 42.1 00非對映異構物。 如實例45般，進行去保護及偶合反應，製得化合物 47，爲黃色固體。 lU NMR (3 00MHz? CD3〇D):8 8.26 (d? J-9.5Hz, 1H)? 8.19 -187- 200819460 (s，1H)，7.74 (s, 2H)，7.30 (m，1H)，7.19 (m，2H)，7.06 (m， 2H)5 5.9 4 (m? 1H)? 5.78 (s, 1H)? 5.25 (d9 J=17.1Hz? 1H), 5.06 (d, J = 9.0Hz，1H)，4.68 (m，2H)，4.47 (bs，1H)，4.16 (m，2H)，4.05 (m，4H)，3.26 (m，2H), 2.77 (m, 1H)5 2.48 (m，1H)，2.27 (s，3H)，2.09 (m，1H)，1.65 - 1.43 (m，8H) 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.02 (s5 9H)。31P (121.4MHz， CD3〇D):6 42.1 00 LC/MS = 8 8 7 (M + + l) 實例4 8 :製備化合物4 8
次膦酸酯 IV (3 3 0mg，1·〇7 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至 〇°C。逐滴力卩入 Hunig氏鹼 (342μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基石夕院（285μ1，2.25 m m ο 1)。所得溶液升溫至室溫，4 0分鐘後，力[]入1 -(溴甲
基）-1-(三氟甲基）苯（45 6mg，2.35 mmol)，所得溶液在4(TC 下加熱48小時。然後，反應物在室溫下攪拌1 2小時。殘 餘物在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機 層以MgS04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層 -188- 200819460 析系統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙 基）-(2-三氟甲基-苄基）-次膦酸乙酯（225mg，45%)。4 NMR (3 00MHz? CDC13)：5 7.61(m5 2H)? 7.43 (m? 2H)? 7.33 (m，5H)，6.13 (m，1H)，5.83 (m，1H)，5.78 (m，1H)5 5.39
(m，1H)5 5.10 (s，2H)，3.88 (m，2H), 3.25 (m，2H)，2.10 (m， 1H)5 1.78 (m，1H)，1.41(m，1H)，1.10 (m，3H)。31P (12 1.4MHz，C DC 13): δ 4 5.3 3 7，42.005 非對映異構物。 如實例4 5般，進行去保護及偶合反應，製得化合物 48，爲黃色固體（80mg，45%)。 lH NMR (3 00MHz5 CD3OD):5 8.28 (d, J = 9.3Hz, 1H)? 8.19 (s，1H)，7.76 (s5 2H)，7.69 (m，2H)，7.53 (t，J = 7.8Hz，1H)， 7.39 (t5 J = 7.5Hz，1H)，7.32 (d，J = 9.3Hz，1H)，5.95 (m，1H)， 5.82 (s，1H)，5.30 (d，J=17.4Hz，1H)，5.12 (d5 J=ll.lHz， 1H)，4.69 (m，2H)，4.43 (bs，1H)，4.17 (m，2H)，4.06 (m， 4H)? 3.65 (t? J=15.3Hz, 1H)? 3.43 (t, J=16.5Hz? 1H), 2.79 (m，1H), 2.53 (m，1H)，2.17 (m，1H)，1.70 - 1.40 (m, 10H)， 1·34 (d5 J = 6.3Hz，6H)，1.01(s，9H)。 31P (121·4ΜΗζ，CD3OD):S 40.995。LC/MS = 94 1 (M + +1) 實例4 9 :製備化合物4 9 -189- 200819460
次膦酸酯 IV (3 3 0mg，1.07 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至0°C。逐滴加入 Hunig氏鹼 (3 42μ1，2.25 mmol)，接著加入氯三甲基矽烷（2 8 5 μ1，2·25 mmol)。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力卩入1-(溴甲 基）-3-(三氟甲基）苯（456mg，2.35 mmol)，所得溶液在40 °C 下加熱4 8小時。然後，反應物在室溫下攪拌1 2小時。殘 餘物在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機 層以MgS04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層 析系統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙 基M3-三氟甲基-苄基）-次膦酸乙酯（23 0mg，46%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13):3 7.43 (m，4H)，7.33 (m，5H)，6.13 (m，1H)，5.83 (m，1H)，5.78 (m，1H)，5·39 (m5 1H)，5.10 (s， 3H)5 3·88 (m，2H)，3.25 (m，2H)，2.11(m，1H), 1.78 (m， 1H)，1.41(m，1H)，1.10 (m，3H)。31P (121.4MHz，CDC13):5 45.3 3 7, 42.005非對映異構物。 如實例4 5般，進行去保護及偶合反應’製得化合物 49，爲黃色固體（80mg, 45%)。 lU NMR (3 00MHz? CD3OD)：6 8.28 (d9 J = 9.3Hz, 1H), 8.18 (s，1H)，7.75 (s, 2H)，7.65 (m，1H), 7.59 (m，1H)，7.46 (m， -190- 200819460
2H), 7.31 (d, J = 9.0Hz, 1H), 5.87 (m, 1H), 5.80 (s, 1H), 5.23 ( d ? J= 1 7.1 Hz ? 1H), 5.02 (d，J= 1 0.2Hz9 1H)，4.66 (m， 2H)，4.46 (bs，1H)，4.18 (m，2H)，4.07 (m，4H)，3.38 (m， 2H), 2.81 (m，1H)，2.51 (m, 3H)，2.10 (m，1H)，1.63 -1.50 (m， 1 OH), 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)， 1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz? CD3OD):5 40.995 LC/MS = 94 1 (M + + 1) 實例5 0 :製備化合物5 0
次膦酸酯 IV (3 3 0mg, 1.07 mmol)懸浮於 9.7mL CH2C12。所得溶液冷卻至0°C。逐滴加入Hunig氏鹼 (342μ1, 2.25 mmol)，接著加入氯三甲基矽烷（2 8 5 μ1，2.25 mmol)。所得溶液升溫至室溫，40分鐘後，力[]入1-(溴甲 基）-4_(二氟甲基）苯（456mg，2.35 mmol)，所得溶液在40°C 下加熱48小時。然後，反應物在室溫下攪拌1 2小時。殘 餘物在CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機 層以MgS04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層 -191 - 200819460 析系統純化之，製得（1 -苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙 基）-(4-三氟甲基-苄基）-次膦酸乙酯（205mg，41%)。i NMR (3 00MHz? CDC13)：5 7.5 5 (m? 4H)? 7.39 (m5 5H)? 6.13 (m，1H)，5.83 (m，1H)5 5.78 (m，1H), 5.39 (m，1H)，5.10 (s, 2H)，3.88 (m，2H)，3.25 (m，2H)，2.03 (m，1H)，1.78 (m， 1H)，1.41(m，1H)，1.10 (m，3H)。31P (121.4MHz，CDC13):5 45.337，42.005非對映異構物。 如實例4 5般，進行去保護及偶合反應’製得化合物 50，爲黃色固體（80mg，45%)。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):6 8.27 (d? J = 9.3Hz? 1H)? 8.19 (s，1H)，7.75 (s, 2H), 7.51(m，4H)，7.27 (m，1H)，5.92 (m， 1H)， 5.81(s， 1H)， 5.23 (d， J=17.1Hz， 1H)， 5.04 (d， J=10.5Hz，1H)，4.67 (m, 2H)，4.46 (bs，1H)，4.17 (m，2H)， 4.04 (m，4H)，3.35 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.49 (m，1H)5 2.08 (m? 1H) 5 1.62 - 1.3 9 (m, 8H), 1.32 (d, J-6.3, 6H)9 1.02 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD)』40.995 LC/MS = 94 1 (M + + 1) 實例5 1 :製備化合物5 1
-192- 200819460 中間物 IV (13.42g，43.4 mmol)溶於 CH2C12 (3 00 mL) 及冷卻至〇C ’加入二異丙基乙胺（15.4 mL，91.1 mmol)。 逐滴加入氯三甲基矽烷（11.4 mL，91.1 mmol)。反應混合物 升溫至室溫’並攪拌1.5小時。加入氯苄基氯（15.6§， 9 5.5 mmol)，反應物加熱至5〇。(；達48小時。反應混合物 冷卻至室溫，以CHWh稀釋，以NH4C1水溶液清洗，以 N a2 S〇4乾燥’及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 化，製得次膦酸酯。 上述次膦酸酯（5.Og，11.55 mmol)(147mg，0.34 mmol) 懸浮於lmL CHbCN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷 (TMSI)(241pl，1·70 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分 鐘後，溶液再次冷卻至〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20 分鐘。將溶液濃縮’與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0 分鐘。所得粗質物與酸VII偶合，製得化合物51。1H NMR (3 00MHz5 CD3〇D):6 8.3 0 (d? J = 9.5Hz? 1H), 8.20 (s9 1H)，7.79 (s，2H)，7.50 (d，J = 8.8Hz，1H)，7.38 (m，2H)， 7.20 (m，2H)，5.95 (m，1H)，5.80 (s，1H)5 5.2 5 (d，J = 9.6Hz， 2H)，5.15 (d，J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)， 4.20 (s, 2H)? 4.05 (s9 3H)9 3.33 (s? 2H)? 2.80 (m9 1H)? 2.52 (m，1H)，2.15 (m5 1H)，1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)， 1.05 (s5 9H)。31P (121.4MHz，CD3OD)』42.155。 實例5 2 :製備化合物5 2 -193- 200819460
次膦酸酯 IV (369mg，1.19 mmol)懸浮於 5mL THF ’ 並 冷卻至-40°C 。逐滴力□入 IN NaN(TMS)2 (1.43mL， 1.43mmol)，歷時15分鐘，接著加入1-氯- 3- (氯甲基）苯 (1 82μ1，1.43 mmol)於lmL THF中的溶液。所得溶液在 -4 0 °C至室溫攪拌4 5分鐘。反應物以E10 A c稀釋，並使用 2 0mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化之，製得棕色油 狀物之（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(3-氯-苄基） 次膦酸乙酯（90.5mg， 24%)。此粗質物懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至 〇°C。力卩入碘三甲基矽烷（TMSI)(148pl， 1 · 0 4 m m ο 1 )，所得溶液升溫至室溫。4 5分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及 2mL M e Ο Η。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌2 0分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。所得 固體（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-(3-氯-苄基）_次膦酸直接使 用。上述酸（8 7 m g，0 · 1 3 m m ο 1)懸浮於1 m L D M F。加入 HATU (123mg 5 0.3 3 mmol)、VII (54.6mg, 0.20 mmol)， -194· 200819460 接著加入ΝΜΜ (71μ1，0.65 mmol)。所得溶液在室溫攪拌 整夜。混合物藉由Gilson HPLC純化，製得52 (6 8.5mg， 59%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.3 0 (d5 J = 9.5Hz，1H)? 8.20 (s? 1H)? 7.79 (s? 2H)? 7.40 (s? 1H), 7.35 (d，J = 8.8Hz，1H), 7.23 (m，1H)，6.85 (m，2H)，6.78 (m，1H)，5.95 (m, 1H)，5.78 (s5 1H)，5.50 (s，1H) 5 5.3 5 (d， J = 9.6Hz, 2H)5 5.15 (d? J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)，4.05 (s，3H), 3.33 (m，2H)，2.80 (m， 1H)，2_52 (m，1H)，2.20 (m，1H), 1.62 (m，6H), 1.38 (d， 6H), 1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 42.73。 實例53:製備化合物53
次膦酸酯 IV (3 70mg，1·20 mmol)懸浮於 5mL THF，並 冷卻至-40°C。逐滴力卩入 IN NaN(TMS)2 (1.43mL，1.43 mmol)，歷時 15分鐘，接著加入 1-氯-4-(氯甲基）苯 (23 1 μΐ，1.43 mmo 1)於1 mL THF中的溶液。所得溶液在 -40°C至室溫攪拌整夜。反應物以EtOAc稀釋，並使用 -195- 200819460 2 0mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化之，製得棕色油 狀物之（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(4-氯-苄基） 次膦酸乙酯（94mg，26%)。所得殘餘物（94.9mg，0.22 mmol) 懸浮於lmL CKhCN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷 (ΤΜΞΙ)(15 5μ1，1.09 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分 鐘後，溶液再次冷卻至〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20 分鐘。將溶液濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0 分鐘。所得次膦酸與中間物VII (96mg，0.15 mmol)在lml DMF、HATU (142mg，0.37 mmol)及 NMM(821，0.75 mmol) 中偶合，製得 53 (75.2mg，55%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):6 8.3 0 (d, J = 9.5Hz, 1H)? 8.20 (s5 1H)? 7.79 (s，2H)，7.30 (m，4H)，5.95 (m，1H)，5.80 (s，1H)， 5.25 (d，J = 9.6Hz，2H)，5.13 (d，J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m5 2H)，4.45 (bs5 1H)，4.20 (s，2H)，4.05 (s5 3H)，3.33 (s， 2H)，2.80 (m，1H), 2.52 (m，1H)5 2.15 (m，1H)，1.62 (m， 6H)， 1.38 (d， 6H)? 1.05 (s? 9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):5 42.83 7。 實例5 4 :製備化合物5 4 -196- 200819460
中間物 IV (398 mg，1.3 mmol)溶於 CH2C12 (25 mL)， 並冷卻至〇°C。加入二異丙基乙胺（0.5 mL，2.7 mmol)，並 攪拌 25分鐘。逐滴加入氯三甲基矽烷（0.4 mL，2.7 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1小時。加入2-溴苄基溴（1 .6g，6.4 mmol)，反應物加熱至4 5 °C達18小 時。反應混合物冷卻至室溫，以CH2C12稀釋，以NH4C 1 水溶液清洗，以N a2 S Ο 4乾燥，及加以濃縮。粗產物經由 組合快速層析純化，製得346 mg次膦酸酯，產率56%。
在0°C下，上述製得之次膦酸酯（346 mg，0.72 mmol) 於CH3CN (1 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（〇6 mL, 3.6 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌3〇分鐘，然後冷 卻至〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（〇· 5 mL)及MeOH (1 mL)， 並攪拌1〇分鐘。濃縮溶劑，殘餘物與甲苯（5 mL)共蒸 發，及在真空下乾燥20分鐘，製得粗質胺。與酸VII (23 0 mg，0·36 mmol)偶合，製得 36〇 mg 化合物 54。lH NMR (3 00MHz，DMSO):8 8.3〇 (s，1H)，8 2〇 (s，1H)，7 88 (s，1H)，7·79 (s，1H)，7.54 (d，J = 7 5Hz，1H)，7 4 5 (d， J = 7.8Hz，1H)，7.29 (m，1H)，7 n (dd，J = 7 8，7 8Hz，iH)， 7.01 (d，J = 7.5Hz，1H)，6.00 (m，1H)，5 7 8 (s，1H)，5 15 (d， J=17，1Hz，1H)，5.00 (d，J”l7Hz, ih)，4.60 - 4.40 (m， « 197- 200819460 3H)，3.43 (dd, J=15.1， 15.1Hz? 1H), 3.25 (dd，J=15.9, 15.9Hz, 2H)，2.58 (m，1H)，2.32 (m, 1H)，1.94 (m，1H),
1.70 - 1.40 (m，8H)，1.29 (m，6H)，0.92 (s，9H)。31P (121.4MHz， CDC13)S 3 9.97 5 。 LC/MS = 95 1.20 (M + + 1)， 975.20 (M + + Na)。 實例5 5 :製備化合物5 5
4 NMR (3 00MHz，CD3OD)』8·28 (d，J二9.3Hz，1H)， 8.17 (s，1H)，7·76 (s5 2H)，7.56 (m，1H)，7.33 (m，4H)， 5.96 (m，1H)，5.81(bs，1H)，5.31 (d，J=17.1Hz，1H)5 5·12 (d，J=1 0.5Hz, 1H)，4.69 (m，2H)，4.45 (bs, 1H)，4.18 (m， 2H)，4.06 (m，4H)5 3.40 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.52 (m， 1H)，2.16 (m，1H)，1.6 8 - 1.5 0 (m，10H) 1.34 (d，J = 6.3Hz， 6H)，1.01 (s，9H)。31P (121.4 MHz，CD3OD):5 40.042。 LC/MS =95 7 (M + + 1)。 實例56:製備化合物56 -198- 200819460
Η
ο
j/OH
,0- 次膦酸酯 IV (1.5g, 4·85 mmol)懸浮於 40mL CH2C12。 所得溶液冷卻至〇°C。逐滴加入Hunig氏鹼（1.73 ml，10.2 mmol)，接著力□入氯三甲基矽烷（1.28 ml，10·2 mmol)。所
得溶液升溫至室溫，4 0分鐘後，加入1 -(溴甲基）-2 -異丙 氧基-苯（2 · 4 5 g，1 0 · 7 mm ο 1 )，所得溶液在4 0 °C下加熱1 2小 時。然後，反應物在室溫下攪拌1 2小時。殘餘物在 CH2C12及NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以 M gS04乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物以組合快速層析系 統純化之，製得（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2-異丙氧基基-苄基）-次膦酸乙酯（l.lg，50%)。4 NMR (3 00MHz? CDC13”5 7.3 3 (m，5H)，7.10 (m，2H), 6.89 (m， 2H), 6.18 -5.83 (m9 1H)? 5.7 8 - 5.3 9 (m5 1H)? 5.10 (m9 3H)? 4.89 (m，1H)，4.05 (m，2H)，3.55 (m，2H)，2.97 (m，1H)， 2.01 (m，1H)，1.78 (m，1H)，1.50 (m，1H)，1.20 (m，9H)。 31P (121.4MHz，CDC13):5 45.097，44.7 8 5 非對映異構物。
上述次膦酸酯（700 mg, 1 _07 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(727 μΐ， 5· 3 5 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入二乙胺（2 mL，14.6 mmol)及 2mL -199- 200819460
MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與申苯共沸兩次，及置於高真空下30分鐘。所得 固體胺偶合至酸VII，製得化合物56。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):6 828 (d? J = 9.6Hz9 1 Η) 5 8 . 1 8 (s，1 Η)，7 · 7 5 (s， 2H)，7.38 (m，2H)，7.17 (m，1H)，6.92 (m，1H)，6.82 (m， 1H)，5.95 (m，iH)，5.80 (s，1H)，5.27 (d5 J=17.1Hz，1H)， 5.06 (d, J>9 〇Hz，ih)，4.63 (m，4H)，4·46 (bs，1H)，4.17 (m，2H)，4.07 (m，4H)，3.34 (m，3H)，2.73 (m，1H)，2.51 (m，1H)，2·13 (m，1H)，1.62 (m，1H)，1.50 (m，8H) 1.38 (m， 12H)，1·〇5 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD)J 3 6.642。 LC/MS = 931 (Μ + +υ。 實例5 7 :製備化合物5 7
在〇°C下，（2-乙基-苯基）-甲醇（3g，22 mmol)於醚（10 mL)中之溶液加入PBr3 (2.18g，8.1 mmol)於醚（3 mL)中之 溶液。反應混合物升溫至室溫達4 5分鐘，並冷卻至〇 °C。 反應混合物以50%KOH水溶液（15 mL)處理及將兩層分 離。有機層以KOH九粒乾燥及加以乾燥，製得3.9 g之h -200- 200819460 漠甲基-2 -乙基-苯。 中間物 IV (1.29g 5 3.8 8 mmol)溶於 CH2C12 (40 mL)， 並冷卻至〇°C。加入二異丙基乙胺（1.41 mL，8.15 mmol)， 並攪拌15分鐘。逐滴加入氯三曱基矽烷（1.丨mL，u 5 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1小時。加入2-溴苄基溴（3.86g，19.4 mmol)，反應物加熱至45 t：整夜。反 應混合物冷卻至室溫’以C Η 2 C 12稀釋，以N Η 4 C 1水溶液 清洗，以Na2 S 04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快 速層析純化，製得6 8 3 mg次膦酸酯，產率4 1 %。 在〇°C下，上述製得之次膦酸酯（6 5 0 mg，1.52 mmol) 於CH3CN (3 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（1.52g，7.6 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌30分鐘，然後冷 卻至 〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（〇.9 1111〇及％6〇11(1.5 mL) ’並攪拌1 0分鐘。濃縮溶劑，殘餘物與甲苯（5 mL)共 蒸發，及在真空下乾燥20分鐘，製得粗質胺，該粗質胺 與酸VII (500 mg，0.76 mmol)偶合，製得化合物57 (480 mg，70%)。4 NMR (300MHz，DMSO):5 8.2 8 (s，1 H)? 8.21(d, J = 9.6Hz, 1H) 9 7.8 8 (s? 1H)? 7.79 (s? 1H) 5 7.3 2 (d, J=ll.lHz? 1H)5 7.19 -7.01(m? 4H)? 6.00 (m? 1H)9 5.78 (s5 1H)，5.17 (d，J=17.1Hz，1H)，5.02 (d，J=12.3Hz，1H)，4.54 (m，2H)，4.47 (bs，1H)，4.16 (m，3H)，3.97 (s，3H)，3.15 (m，2H)，2.60(m，lH)，2.29(m，3H)，1.94(m，lH)，1.70-2.40 (m，8H)，1.30 (m，6H)，0.92 (s，9H)。31P (121.4MHz， CDC13 ):5 40.942 。 LC/MS = 90 1.24 (M + + l)， 924.1 7 -201 · 200819460 (M + + Na)。 實例5 8 :製備化合物5 8
次膦酸酯1v (327 mg，1.06 mmol)懸浮於 5mL THF， 並冷卻至-40°C。逐滴加入 IN NaN(TMS)2 (1.27 mL，1.39 mmol)，歷時15分鐘，接著加入2-(溴甲基）-l，3-二氟苯 (176 μΐ，1.3 9 mmol)於lmL THF中的溶液。所得溶液在 -4 0 °C至室溫攪拌整夜。反應物以 EtO Ac稀釋，並使用 20mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化之，製得棕色油 狀物之（1·苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2,6-二氟-苄 基）次膦酸乙酯（147 mg，33%)。此次膦酸酯（94.7 mg, 0.22 mmol)懸浮於lmL CH3CN，並冷卻至0 °C。加入碘三甲基 矽烷（TMS 1)(15 5 μΐ，1.0 8 mmol)，所得溶液升溫至室溫。 45分鐘後，溶液再次冷卻至0°C，及加入三乙胺（lmL， 7.33 mmol)及2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪 •202- 200819460 拌2 0分鐘。將溶液濃縮’與甲苯共沸兩次’及置於高真 空下30分鐘，製得粗質胺，（1-胺基-2-乙燒基-環丙基）-(2,6-二氟-苄基）-次膦酸乙酯。 上述酸（9 6 m g，0 · 1 5 m m ο 1)懸浮於 1 m L D M F。加入 HATU (143 mg, 0.37 mmol)、上述製得之胺（60 mg，0.22 mmol)，接著力卩入NMM (83 μΐ，0.75 mmol)。所得溶液在 室溫攪拌整夜。混合物藉由 Gilson HPLC純化，製得58 (67 mg5 53%)，爲黃色固體。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8·30 (d，J = 9.5Hz，1H)，8·20 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7·35 (d， J = 9.3Hz，1H)，7.33 (m，1H)，6.94 (m，2H), 5.95 (m，1H), 5.80 (s，1H)，5.25 (d，J = 9.6Hz，2H)，5·17 (d，J = 9.0Hz，2H)， 4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s, 2H)，4.05 (s，3H)， 3.40 (m，2H), 2.80 (m，1H)，2.52 (m，1H)，2.15 (m，1H)， 1.62 (m，6H)，1.38 (d，6H)，1.05 (s，9H)。31P (121.4 MHz, CD3OD):5 40.8 9 8。 實例5 9 :製備化合物5 9
B〇c-羥基脯胺酸甲酯（5g，2〇4 mm〇1;^ dcM (50mL) -203- 200819460 及TFA (5 0mL)中處理。反應物在室溫攪拌1 .5小時，然後 濃縮及與甲苯（2x50mL)共沸。殘餘物在DCM (200mL)中處 理，加入第三白胺酸之胺基甲酸環戊酯（5.5g，22.4 mmol)，接著力口入 HATU (11.6g，30.6 mmol)及 NMM (9mL， 8 1·6 mmol)。反應物在室溫攪拌整夜，然後用NH4C1飽和 溶液使反應驟停，反應物以水清洗，然後以鹽水清洗，加 以乾燥及濃縮。然後殘餘物以快速層析純化，製得所欲之 二肽（7.56g)。 上述甲酯在 THF (70mL)中處理，加入水（70mL)、甲 醇（70mL)及 Li0H-H20 (8.6g，204 mmol)。反應物在室温攪 拌1小時，然後以水稀釋及以HC1酸化。反應物以乙酸乙 酯萃取，以鹽水清洗，加以乾燥及濃縮，製得所欲之酸 (5.9 8 g粗質物，二步驟共8 2 %)。 在 〇°C 下，羧酸（2.62g，7.36 mmol)在 THF (75mL)中處 理，及加入TEA (3·1 mL，22.0 8 mmol)及氯甲酸乙酯（〇·7〇 mL，7.36 mmol)。反應物升溫至室溫及攪拌30分鐘。將固 體過濾掉及將反應物濃縮。殘餘物在乙酸乙酯中處理，以 IN HC1清洗，加以濃縮及經由快速層析純化，製得所欲 之內酯（1.81g，73%)。 在實例83製得之胺（〇.25g, 0.83 mmol)的存在下，此 內酯（0.44g，1.3 mmol)在甲苯（8mL)及水（8mL)中處理。加 入乙基己酸鈉（0.3 2g，1.95 mmol)，反應物在8(TC下攪拌整 夜。反應物以乙酸乙酯萃取，以碳酸氫鈉溶液、IN HC1 及鹽水清洗，加以乾燥、濃縮及經由快速管柱純化，製得 - 204- 200819460 三肽（0.2 5 g，5 0 % )。 脯胺醇（〇.93g，i·45 mm〇l)與對甲苯磺醯氯（〇.52g， 2.03 mmol)及 DABCO (0.26g，2.32 mmol)於甲苯（3mL)中混 合及在室溫攪拌3小時。反應物以乙酸乙酯萃取，以碳酸 氫鈉溶液、IN HC1、鹽水清洗，加以濃縮及經由快速層析 純化，製得對甲苯磺酸酯（0.99 5 g，80%)。 上述對甲苯磺酸酯（0.995 g，1.16 mmol)在NMP (12mL) 中處理，及加入8-氯-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸（〇.38g， 1.16 mmol)及碳酸鉋（0.38g, 1.16 mmol)。反應物在 60t 下 攪拌4小時，然後在室溫下攪拌整夜。反應物以乙酸乙酯 萃取，以碳酸氫鹽溶液清洗，加以濃縮及經由快速層析純 化，製得產物（〇.86g，84%)。 此甲酯（〇.86g，0.97 mmol)在 THF (10mL)中處理，及 在〇°C下加入水（10mL)及NaOH (2mL之1M溶液）。反應 物攪拌1 ·5小時，以水稀釋，以HC1酸化及以乙酸乙酯萃 取。將有機層乾燥及濃縮，製得一羧酸。此殘餘物在THF 中處理，加入 T E A ( 0 . 1 5 m L，1 · 0 7 m m ο 1)，所得混合物冷 卻至〇°C。加入氯甲酸異丁酯（〇.14mL，1.07 mmol)，反應 物在室溫攪拌40分鐘。重氮甲烷（2· 0當量）加至醚溶液（從 MNNG製備），及反應物在0°C攪拌30分鐘，然後在室溫 攪拌2小時。然後將反應物濃縮，製得重氮曱酮（0.5 8g， 二步驟共6 7 %)。
在〇°C下，上述重氮甲酮（〇.58g, 0.646 mmol)在THF 中處理，及加入濃HBr (〇.4mL)。攪拌反應物及以LCMS -205- 200819460 偵測反應。當全部轉變時，加入乙酸乙酯，所得混合物以 NaHC03溶液清洗，力卩以乾燥及濃縮。所得殘餘物在IPA (10mL)中處理，及加入異丙基硫脲（015g，；ι·29 mmol)。反 應物加熱至7 5 °C達1小時，然後濃縮。所得殘餘物在乙腈 中處理及加入TMSI (0.5mL，3.23 mmol)。反應物在室溫攪 拌15分鐘，以0.4mL 2,6-二甲基吡啶稀釋，然後以甲醇 使反應驟停，加以濃縮及經由HPLC純化，製得化合物59 (443 mg，73%)。1 Η NM R ( 3 Ο Ο Μ H z 5 C D 3 0 D ) δ 8 · 2 9 (m，2 Η)， 7.79 (m，1H)，7.59 (m，1H)，7.24 (m，1H)，6.86 (m，2H), 5.97 (m，1H)，5.75 (brs5 1H)，5.32 (m，1H)，5.09 (m，1H)， 4.77 (m，1H)，4.60 (m，1H)，4.40 (brs, 1H)，4.14 (s，3H)， 3.95 (m，1H)，3.41 (m, 3H)，2.73 (m，2H)，2.18 (m，1H)， 1.61 (m，8H)，1.47 (m，5H)，1.03 (s，9H)。31P NMR (121.4 MHz, CD3OD) δ 40.279。LCMS : 943 (M+l)。 實例6 0 :製備化合物6 0
次膦酸酯 IV (l.Og，3.24 mmol)懸浮於 30mL CH2C12。 所得溶液冷卻至〇t：。逐滴加入Hunig氏鹼（1036μ1，6·79 -206- 200819460 mmol)，接著力□入氯三甲基石夕院（863μ1，6.79 mmol)。所得 溶液升溫至室溫，40分鐘後，加入2_溴甲基-1-氯-3-氟-苯（1.5 8g，7.13 mmol)，所得溶液在40 °C下加熱12小時。 然後，反應物在室溫下攪拌12小時。殘餘物在CH2C12及 NH4C1間分配，並以NH4C1清洗。有機層以MgS04乾 燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統純化 之’製得（1-卞氧基鑛基胺基-2-乙儲基-環丙基）-(2_氯-6_ 氟-苄基）-次膦酸乙酯（75 0mg，51%)。4 NMR (3 00MHz， CDC13)：8 7.33 (m9 5H)9 7.17 (m5 2H)? 6.95 (m9 1H)5 6.18 -5.83 (m，1H)5 5·78 -5·39 (m，1H)，5.10 (m，3H)5 4.8 9 (m， 1H)，4.05 (m，2H)，3.55 (m，2H)，2.21 (m，1H)，1.78 (m5 1H)， 1.50 (m， 1H)， 1.10 (m， 3H)。31P (121.4MHz， CDC13):5 45·8 9 7，42.1 8 5 非對映異構物。 上述製得之次膦酸酯（73 0mg，1·62 mmol)懸浮於 lmL CH3CN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI)(1112pl， 8.18 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次 冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（2mL，14·6 mmol)及 2mL MeOH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌2〇分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘。所得 粗質胺直接使用。與 VII偶合，製得化合物60。h NMR (3 00 MHz, CD3OD)：5 8.23 (d? J = 9.5Hz, 1H), 8.20 (s5 1H)? 7.79 (s，2H)，7.33 (m，ih)，7.21(m，2H), 7.03 (m，1H)， 5.95 (m，1H)，5.78 (s，ih)，5.22 (d，J = 9.6Hz，1H)，5.13 (d， J = 9.0Hz，1 H)，4 · 6 3 ( m，2 H)，4.4 5 (b s，1 H)，4 · 2 0 (m，3 H)， -207- 200819460
4.05 (s，3H)，3.22 (m，1H)，3.20 (d，1H)，3.18 (s，1H)， 2.80 (m，1H)，2.78 (s，3H)，2.45 (m，1H)，2.15 (m，1H)， 1.62 (m，1H)，1.50 (m，8H) 1.38 (d，6H)，1·05 (s5 9H)。31P (121.4MHz, CD3〇D):5 3 6.642 LC/MS = 92 5 (M + + 1)。 實例6 1 :製備化合物6 1
lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.2 8 (d? J = 9.3Hz5 1H), 8.18 (s5 1H)，7.76 (s，2H)，7.37 (m，3H)，7.20 (m，1H)， 5.99 (m，1H)，5.81 (bs，1H)，5.29 (d5 J=17.1Hz，1H)，5.11 (d，J=10.5Hz? 1H)，4.72 (m，2H)，4.45 (bs，1H)，4.18 (m， 2H)，4.05 (m，4H)，3.79 (m, 2H)，2.81(m，1H)，2.59 (m, 1H)，2.21 (m，1H)，1.6 8 - 1.5 0 (m，10H) 1·38 (d，J = 6.3，6H)5 1.04 (s，9H)。31P (121.4 MHz, CD3OD)』41.451 LC/MS = 941(M + + 1)。 實例62:製備化合物62 -208- 200819460
中間物 iv (2.06g，6.7 mmol)溶於 CH2Cl2 (6〇 mL)，並 冷卻至〇°C。加入二異丙基乙胺（2.48 mL，14.3 mmol)，並 攪拌15分鐘。逐滴加入氯三甲基矽烷（1.92 mL，14.3 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1.5小時。加入 氟-6-三氟甲基苄基氯（8.61g, 33.5 mmol)，反應物加熱至 4 5°C整夜。反應混合物冷卻至室溫，以CH2C12稀釋，以 NH4C1水溶液清洗，以Na2S〇4乾燥，及加以濃縮。粗產 物經由組合快速層析純化，製得1 · 1 4 g次膦酸酯，產率 3 5%。 在下，上述製得之次膦酸酯（550 mg，1.13 mmol) 於CH3CN (2 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（1.13g, 5.66 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌30分鐘，然後冷 卻至〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（0.7 mL)及MeOH (1 mL)， 並攪拌10分鐘。濃縮溶劑，殘餘物與甲苯（5 mL)共蒸 發，及在真空下乾燥20分鐘，製得粗質胺，該粗質胺與 酸 VII 偶合，製得化合物 62 (339 mg)。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 .8.28 (d? J = 9.3Hz5 1H)5 8.18 (s? 1H), 7.76 (m? 2H)，7.54 -7.31 (m，4H) 5 5.9 9 (m，1H)，5.82 (s，1H)，5.29 (d，J=17.1Hz，1H)5 5.13 (m，1H)，4.71 (m，2H)，4.43 (s， -209- 200819460 1Η)，4·22 -4.05 (m，2H)，3.7 8 -3.49 (m，2H)，3.31 (m，2H)， 2.82 (m，1H)，2.57 (m, 1H)5 2.20 (m, 1H)5 1.6 8 - 1.4 8 (m， 8H)， 1.34 (m， 6H)， 1.0 1 (s， 9H)、31P (121.4 MHz, CDC13 ):5 4 0.0 1 9 LC/MS = 9 5 9.3 7 (M + + 1)，9 8 1.25 (M + + Na)。 實例63:製備化合物63
lU NMR (3 00MHz? CD3〇D):8 8.28 (d? J = 9.6Hz, 1H)? 8‘18 (s5 1H)，7.76 (s，2H)，7.33 (m，1H), 7.18 (m，1H)， 6·77 (m，1H)，6.68 (m，1H)，5.94 (m，1H)，5.81(bs，1H)， 5.27 (d，J 二 16.8Hz，1H)，5.08 (d, J = 9.0Hz，1H)，4.68 (m， 2H)，4.46 (bs，1H)，4.17 (m, 2H)，4.05 (m, 4H), 3.81 (m， 3H)? 3.37 (m? 2H)? 2.79 (m, 1H)? 2.57 (m? 1H), 2.16 (m9 1H)，1.61-1.50 (m, 10H) 1.38 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s5 9H)。31P (121.4 MHz，CD3OD):3 42.834 LC/MS = 921(M + + 1)。 實例64:製備化合物64 -210- 200819460
中間物 IV (94 8.8 mg5 3.0 7 mmol)溶於 THF (9.5 mL) 及冷卻至-40°C。逐滴加入1M NaN(TMS)2的THF溶液（4 mL，4 mmol)，反應混合物在-40 °C下攪拌40分鐘。加入 2,6-二甲基苄氯（623.2 mL，4.03 mmol)於 THF (2 mL)中之 溶液，及移除冷浴。反應混合物在室溫下攪拌20小時。 反應以IN HC1 (50 mL)驟停及反應混合物以EtOAc萃取（2 x50 mL)。有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾 及濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得679.9 mg 次膦酸酯，產率52%。 加入碘三甲基矽烷（0.67 mL，4.71 mmol)時，上述次膦 酸酯（400.1 mg，0.94 mmol)於 CH3CN (4 mL)中之溶液在 〇°C下攪拌。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1 . 5小時。反 應混合物冷卻至〇°C及加入TEA (10.76 mL)及MeOH (4 mL)。所得溶液在室溫下攪拌0.5小時及加以濃縮。殘餘 物以甲苯（8 mL)硏磨及濃縮。粗產物加以乾燥並用於下一 步驟。 酸 VII (408.5 mg，0·63 mmol)及上述製得之胺溶於 DMF (5 mL)及冷卻至 0°C。加入 HATU (891.2 mg5 2.34 mmol)及NMM (0.52 mL, 4.73 mmol)，所得混合物升溫室 -211 - 200819460 溫並攪拌3小時。粗產物經由HPLC純化，製得266 mg 之 64。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.26 (d, 1H，J = 9.0Hz)， 8.20 (s，1H)，7.74 (br，2H)，7.30 (dd，1H，J = 9.0 及 2.0Hz)， 6.95 (s5 3H)，6.01 (dt5 1H，J=17.1 及 9.8Hz)，5.80 (br，1H)， 5.29(dd，lH，J=17.1&1.9Hz)55.13(dd，lH，J = 9.8& 1.9Hz)，4.62 -4.77 (m，2H)，4.46 (br，1H)，4.05 -4.22 (m， 3H)，4.04 (s，3H)，3.47 (t，1H，J=15.3Hz)，3.35 (t，1H， J=15.3Hz)，2.81(dd，1H，J=13.5 及 7.2Hz)，2.45 - 2.57 (m， 1H), 2.39 (s? 6H)? 2.12 -2.26 (br m? 1H)? 1.3 9 - 1.70 (m? 10H)，1·34 (d，6H，J = 6.6Hz)，1.03 (s，9H)。31P (121.4 MHz, CD3OD):5 42.678。 LC/MS = 90 1 (M + + 1) 實例65:製備化合物65
中間物 IV (3.9g，12·6 mmol)溶於 CH2C12 (60 mL)及冷 卻至〇C 加入一異丙基乙胺（4.5 mL，26.4 mmol)。逐滴 加入氯三甲基砂烷（3·3 mL，26.4 mm〇1)。反應混合物升溫 -212- 200819460 至室溫，並攪拌1小時。加入2,6 -二氟-3 -氯苄基氯（4.5g， 18·8 mmol)，反應物加熱至42 °C整夜。反應混合物冷卻至 室溫，以CH2C12稀釋，以NH4C1水溶液清洗，以Na2S04 乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 3.7 g次膦酸酯，產率61%。上述次膦酸酯以TMSI處理， 並與 VII偶合，製得化合物 65。h NMR (3 00MHz， CD3OD)5 8.23 (d5 J = 9.5Hz，1H)，8.20 (s, 1H)5 7.79 (s，2H)， 7·36 (m，2H)5 6.97 (m，1H)，5.95 (m，1H)，5.78 (bs，1H)， 5.32 (d, J = 9.6Hz5 1H)，5.18 (d5 J = 9.0Hz，1H)，4.63 (m5 2H)，4.45 (bs5 1H)，4.20 (m，3H)，4.05 (s，3H)，3.34 (m， 2H)? 2.80 (m? 1H)9 2.45 (m, 1H), 2.15 (m? 1H)? 1.68 -1.50 (m，8H) 1.38 (d5 6H)，1.05 (s，9H)。31P (121·4ΜΗζ， CD3〇D):5 40.079 LC/MS-943 (M + + 1) 實例66:製備化合物66
NMR (3 00MHz? CD3OD):5 8.23 (d? J = 9.5Hz9 1H)? 8.20 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7.36 (m，1H)，7.06 (m5 2H)， 5.95 (m，1H)，5.78 (bs，1H)，5.32 (d，J = 9.6Hz，1H)，5.18 -213- 200819460 (d, J = 9.0Hz，1 H)? 4.63 (m，2H)，4.45 (bs5 1H)，4.20 (m， 3H)，4.05 (s, 3H)，3.34 (m，2H)，2.80 (m, 1H), 2·45 (m， 1H)5 2.15 (m，1H)，1.6 8 - 1.5 0 (m，8H) 1.38 (d，6H)，1.05 (s, 9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 40.8 79 LC/MS = 943 (M + + 1) 實例67:製備化合物67
4 NMR (3 00MHz，CD3OD)』8.28 (d，J = 9.3Hz，1H)， 8.17 (s5 1H)，7.75 (m，2H)，7.68 (m，1H)，7.32 (d, J = 9.3Hz， 1H)，7.08 (dd，J = 9.6, 9·6Ηζ，1 H), 5.94 -5.82 (m，2H)，5.79 (s，1H)，5.26 (d，J=1 7. 1Hz, 1 H), 5.05 (d，J=10.2Hz，1H)， 4.65 (m，2H)，4.15 (m，3H)，4.05 (s，3H)，3.31 (m，2H)5 2.80 (m，1H)，2.51 (m, 1H)，1H)，1.63 -1·49 (m， 8H)，1.34 (m，6H)，1.00 (s，9H)。31P (121.4MHz，CDC13):S 40.908 LC/MS = 943.27 (M + + 1)，96 5.03 (M + + Na) 實例68:製備化合物68 -214- 200819460
ln NMR (3 00MHz，CD3〇D)5 8.2 8 (d5 J = 9.3Hz，1H), 8.16 (s，1H)，7.77 (s，1H)，7.72 (d，J = 2.1Hz，1H)，7.33 (d， J=12Hz，1H)，7.14 (m5 1H)，6.91 (m, 1H)，5.98 (dt，J=10.2, 17.1Hz，1H)，5.79 (s，1H)，5.31 (d，J=16.8Hz，1H), 5.13 (d， J=11.7Hz，1H)，4.71(t，J = 9Hz)，4.63 (d，J=ll.lHz，1H)? 4.5 (s，1H)，4.1-4.2 (brm，3H), 4.05 (s, 3H)，3.44 (dd， J = 5.1，15.6Hz，2H)，2.77 (m，1H)，2.59 (m，1H)，2.19 (m， 1H)，1.44 -1.7 (m，10H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H), 1.04 (s， 9H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD” 37.8 LC/MS = 927.3 (M + + 1) 實例69:製備化合物69
-215- 200819460 中間物 IV (15.5g，50.3 mmol)溶於 CH2C12 (300 mL)， 冷卻至〇°C及加入二異丙基乙胺（22 mL，126 mmol)。逐滴 加入氯三甲基砂院（17 mL，126 mmol)。反應混合物升溫至 室溫，並攪拌1小時。加入2，3，6 -三氟苄基溴（3 7 g，1 6 5 mmol)’反應物在室溫攪拌整夜。力p入NH4C1水溶液（200 mL)及攪拌30分鐘。將兩層分離，水層以CH2C12清洗。 混合有機層以N a2 S Ο 4乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組 合快速層析純化，製得7.3 g次膦酸酯。 在室溫下，上述製得次膦酸酯（7.2g, 15.8 mmol)於 TFA (45 mL)中之溶液加入DMS (10 mL)及攪拌整夜。所 得混合物加以濃縮及與甲苯共沸。殘餘物溶於1 /1 i P r Ο Η /庚烷，及以6 N HC1清洗3次。在冷浴中，以Na〇H使 混合水層pH=10。水層以EtOAc萃取（3x100 mL)。有機層 以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以濃縮，製得3.8 g胺， 該胺進行偶合及去保護反應，製得化合物69，產率75%。 lH NMR (3 00MHz? CD3〇D):5 8.27 (d? J = 9.3Hz? 1H), 8.18 (s，1H)，7.76 (d5 J = 3.0Hz，2H)5 7.43 (m，1H)，7.28 (d， J = 2.4Hz，1H), 7.03 (dd，J = 8.7，8·7Ηζ，1H)，5.91(m，1H), 5.81 (s，1H)，5.27 (d，J=17.1Hz，1H)，5.08 (d，J=11.4Hz， 1H)，4.68 (m，2H)，4.46 (s，1H)，4.16 (m，3H)，3.36 (m， 2H)，2.80 (m，1H)，2.55 (m，1H)5 2.13 (m，1H)，1.62 -1.46
(m， 8H)， 1.34 (d，J = 6.3Hz， 6H)， 1.02 (s, 9H)。31P (121.4MHz， CDC13):5 4 1.9 8 6。LC/MS 二 943.27 (M + +1)， 965.03 (M + + Na)。 -216- 200819460 實例70:製備化合物70
中間物 IV (3 80 mg，0.78 mmol)溶於 CH2C12 (15 mL)，並冷卻至 〇°C。加入二異丙基乙胺（0.4 mL，2.3 mmol)，並攪拌15分鐘。逐滴力[]入氯三甲基矽烷（0.32 mL， 2.3 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1小時。加入 1-溴甲基-5-氯-2，4-二氟-苯（940 mg5 3.9 mmol)，反應物加 熱至45°C達18小時。反應混合物冷卻至室溫，以CH2C12 稀釋，以NhCl水溶液清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃 縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得1 90 mg次膦酸 酯，產率52%。 在〇°C下，上述製得之次膦酸酯（190 mg，〇.41 mmol) 於CH3CN (1 mL)中之溶液加入碘三甲基砂院（〇·3 mL，2 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌分鐘，然後冷 卻至〇°C。加入2,6·二甲基吡啶（0.23 mL)及MeOH (lmL)，並攪拌10分鐘。濃縮溶劑，殘餘物與甲苯（5 mL) 共蒸發’及在真空下乾燥20分鐘，製得粗質胺，該粗質 •217- 200819460 胺與酸VII (1 30 mg，0.2 mmol)偶合，製得化合物70。 Η NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.23 (d，J = 9.5Hz，1Η)，8·20 (s， 1H)，7.79 (s，2H)，7.36 (m，1H)，7.14 (m，2H)，5.95 (m， 1H)，5.78 (bs，1H)，5·32 (d，J = 9.6Hz，1H)，5.18 (d， J = 9.0Hz，1H)，4.63 (m，2H)，4.45 (bs，1H)5 4.20 (m，3H)， 4.05 (s5 3H), 3.34 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.45 (m，1H)5 2.15 (m? 1H)? 1.6 8 - 1.5 0 (m, 8H) 1.38 (d5 6H)? 1.05 (s, 9H)。31P (121·4ΜΗζ，C D 3 〇 D): δ 40.5 7 8。LC/MS = 943 (M + + 1)。 實例7 1 :製備化合物7 1
lK NMR (3 00MHz9 CD3〇D):5 8.28 (d? J = 9.6Hz? 1H)? 8.18 (s5 1H)，7.76 (s，2H)，7.44 (m, 1H)，7·34 (m，1H)， 7.08 (t9 d = 9.0Hz? 1H)? 5.95 (m? 1H), 5.80 (bs? 1H)? 5.29 (d，J=17.4Hz，1H)，5.13 (d，J = 9.0Hz，1H)，4.69 (m，2H), 4.47 (bs，1H)，4.18 (m，2H)，4.06 (m，4H)，3.58 (m，2H)， 2.79 (m，1H)，2.57 (m，1H)，2·19 (m，1H)，1.6 8 - 1.5 0 (m5 10H) 1.38 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s，9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):5 40.778。LC/MS = 95 9 (M + + 1)。 -218- 200819460 實例7 2 :製備化合物7 2
次膦酸酯 IV (1.62mg5 5.27 mmol)懸浮於 5mL THF， 並冷卻至-40°C。逐滴加入 IN NaN(TMS)2 (6.32mL，6.31 mmol)，歷時15分鐘’接者加入1-(溴甲基）·2 -硝基苯 (1 .3 6g，6.3 2 mmol)於lmL THF中的溶液。所得溶液在 -4 0°C至室溫攪拌45分鐘。反應物以EtO Ac稀釋，並使用 20mL IN HC1使反應驟停。有機層以鹽水清洗，以MgS04 乾燥，加以過濾及濃縮。粗質物使用組合快速層析系統以 梯度30% EtOAc/己烷至100% EtOAc純化之，製得棕色油 狀物之（1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2-硝基·苄 基）次膦酸乙酯（196mg，8%)。
此次膦酸酯 （1 9 6 m g，0 · 4 4 m m ο 1 )懸浮於 1 m L CH3CN，並冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（TMSI) (155μ1， 1.08 mmol)，所得溶液升溫至室溫。45分鐘後，溶液再次
冷卻至 〇°C，及加入三乙胺（lmL，7.33 mmol)及 2mL
Me OH。所得溶液升溫至室溫，並另攪拌20分鐘。將溶液 濃縮，與甲苯共沸兩次，及置於高真空下3 0分鐘，製得 -219- 200819460 (1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-(2-硝基苄基）-次膦酸。在 HATU (276mg，0.73 mmo 1)及 NMM (1 6 0 μ 1，1 · 4 5 mmo 1 ) 中，該酸（124mg，0.44 mmol)與中間物 IV (191mg? 0.29 mmol)偶合，製得化合物72 (1 40mg，53%)，爲黃色固體。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):8 8.30 (d? J = 9.5Hz? 1H)? 8.20 (s，1H)，7.79 (s，2H)，7.35 (d，J = 9.3Hz，1H)，7.33 (m，1H)5 6.94 (m，2H)，5.95 (m，1H)，5.80 (s，1H)，5.25 (d，J = 9.6Hz， 2H)，5.17 (d，J = 9.0Hz，2H)，4.75 (m，2H)，4.45 (bs，1H)， 4.20 (s，2H)，4.05 (s5 3H)，3.40 (m，2H)，2.80 (m，1H)， 2.52 (m，1H)，2.15 (m，1H), 1.62 (m, 6H)，1.38 (d，6H)， 1.05 (s，9H)。31P (121·4ΜΗζ5 CD3OD):5 40.898。 實例7 3 :製備化合物7 3
化合物72 (80mg，0.08 mmol)懸浮於EtOH及加入 SnCl2 2H20 (98mg，〇·44 mmol)。所得溶液加熱至回流。3 小時後’起始物質被消耗掉。將溶液過濾及濃縮。所得混 合物藉由Gilson HPLC純化，製得73 (20mg，53%)，爲黃 色固體。1H NMR (3 00MHz，CD3〇D):5 8.30 (d，J = 9.5Hz， -220- 200819460 1H), 8.20 (s，1H)，7.79 (s，2H)? 7.35 (d，J = 9.3Hz，1H), 7.33 (m，1H)，6.94 (m, 2H)，5.95 (m，1H)，5.80 (s，1H)， 5.25 (d, J = 9.6Hz, 2H)，5.17 (d，J = 9.0Hz, 2H)，4.75 (m， 2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (s，2H)，4·05 (s，3H)，3.40 (m， 2H)，2.80 (m，1H)，2.52 (m，1H)，2.15 (m，1H)，1.62 (m， 6H)， 1.3 8 (d， 6H)5 1.05 (s5 9H)。31P (121.4MHz, CD3OD):5 40.898。 實例74:製備化合物74。
在 〇°C下，化合物 IV (96 mg，0.31 mmol)於 CH2CI2 (2.82 mL)中之溶液加入 DIEA (0.114 mL，0.652 mmol)及 TMSC 1 (0.0 8 3 mL，0.652 mmol)。反應物升溫至室溫，及 攪拌i小時。所得混合物加入2-(溴甲基）吡啶（173 mg， 0.683 mmol)於 DIEA (0.054 mL，0.31 mmol)中之溶液。此 反應在室溫下攪拌2天，直到經由LCMS觀察到起始物質 被完全消耗掉。加入另外之CH2C12及飽和NH4C1水溶液 處理反應物。有機層在真空中乾燥及經由矽膠層析純化， 製得 91 mg產物，爲澄清油狀物。El MS (m/z)401.0 -221 - 200819460 [M + H]。
(1S，2S)-1-((S)-乙氧基（吡啶-2-基甲基）磷醯基）-2-乙烯 基環丙基胺基甲酸苄酯 （96 mg，0.23 9 mmol)於2.39 mL 之6N H C 1水溶液中之溶液在7 0 °C下加熱7小時，並在室 溫下攪拌1 2小時。藉由移除所有揮發物處理反應混合 物，及不進行純化繼續進行下一步驟。El MS (m/z)267-3 [MH + ]。 ((1 S，2 S )-1-胺基-2·乙烯基環丙基）（吡啶-2-基甲基）次 膦酸（S)·乙酯（64 mg，0.24 mmol)、羧酸 VII (157 mg，0.24 mmol)於 1:1 之 D M F - C H 2 C 12 (1.2 m L)溶液中之溶液以 HATU (137 mg5 0.36 mmol)及 DIEA (0.168 mL，0.962 mmol)攪拌2.5小時，直到反應完全。產物經由矽膠層析 (EtOAc-EtOAc/MeOH)純化，製得 82 mg所欲之產物。EI MS (m/z)90 1.4 [MH + ]。 (S)-l-((2S，4R)-2-(((lS，2S)-l-((S)-乙氧基（吡啶-2·基 甲基）磷醯基）-2-乙烯基環丙基）胺基甲醯基）-4-(2-(2-(異丙 基胺基）噻唑-4-基）-7-甲氧基喹啉-4-基氧基）吡咯烷-1-基）_ 3, 3 -二甲基-丨-酮基丁 ·2·基胺基甲酸環戊酯（68 m§，0.074 mmol)及 TMSI (0.053 mL，0.371 mmol)之溶液在乾乙睛 (0.74 mL)攪拌1小時，直到經由LCMS測得反應完全。使 用 TEA (〇· 104 mL，0.742 mmol)使反應驟停，接著加入 M e Ο Η (1 〇 m L)。反應混合物在低壓下乾燥’殘餘物經由 RP HPLC (ACN, 0.05% TFA-H20，0.05% TFA)純化，製得 42 mg 所欲之產物。lH NMR (3 00MHz，CD3〇D)S 8.60 (d -222- 200819460 1H，J = 5Hz), 8.44 (t，1H，J = 9Hz), 8·31 (d，1H，J = 9Hz)， 8.17 (s5 1H)，7.98 (d，1H，J = 9Hz)，7.86 (t，1H，J = 6Hz)， 7.76 (s? 2H)? 7.33 (d? 1H? J=llHz)? 5.83 (brs? 1H), 5.55 (dt，1H，J = 9，17Hz)，4.98 (d，1H5 J=17Hz)，4.78 -4.65 (m5 2H)，4.66 -4.51(m，2H)，4.21-4.07 (m，3H)，4.05 (s，3H)， 3.54 (d? 1H? J = 8Hz)? 3.48 (d, 1H? J = 6Hz)? 2.8 7 -2.8 2 (m, 1H)? 2.61-2.45 (m? 1H)? 2.0 8 - 1.94 (m? 1H)? 1.70 - 1.44 (m, 8H)5 1.5 -1.35 (m，2H)，1.34 (d，6H，J = 7Hz)，1·〇8 (s，9H); 31P (121.4MHz? CD3OD )δ: 23.5 ； El MS ( m/z) 8 73.7 [MH + ]。 實例75:製備化合物75
在 Ot：下，化合物 IV (161 mg，0.521 mmol)於 CH2C12 (4·7 mL)中之溶液力口入 DIEA (0.190 mL，1.09 mmol)及 TMSC1 (0.139 mL，1·09 mmol)。反應物升溫至室溫’及攪 拌1小時。所得混合物加入3-(溴甲基）吡啶（290 mg，1· 15 mmol)於 DIEA (0.091 mL，0.521 mmol)中之溶液。此反應 在室溫下攪拌3天，直到經由LCMS觀察到起始物質被完 -223- 200819460 全消耗掉。加入另外之CH2C12及飽和NH4C1水溶液處理 反應物。有機層在真空中乾燥及經由砂膠層析純化，製得 91 mg 產物，爲澄清油狀物。El MS (m/z)401.0 [M + H]。 當反應完成時，在室溫下，（1S，2S)-1-((S)-乙氧基（吡 啶-3-基甲基）磷醯基）-2-乙烯基環丙基胺基甲酸苄酯（41 mg， 0.102 mmol)於乙腈（1.02 mL)中之溶液以 TMSI (0.073 mL， 0.512 mmol)處理 2 小時。藉由加入 TEA (0.142 mL, 1.02 mmol)及MeOH (10 mL)使反應驟停，將殘餘物乾燥並直接 使用。 當反應完成時，（S)-((1S，2S)-1-胺基-2-乙烯基環丙 基）（吡啶-3-基甲基）次膦酸（24 mg，0.10 mmol)、羧酸VII (66 mg5 0.1 0 0 mmol)於 DMF (1·0 mL)中之溶液以 HATU (57 mg，0.15 mmol)及 DIEA (0·070 mL，0.403 mmol)攪拌 1 小時。產物經由 RP HPLC (ACN，0 · 0 5 % T F A - Η 2 Ο，0 · 0 5 % TFA)純化，製得 28 mg所欲之產物。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D)6 8.8 9 (s， 1H)5 8.61(d， lH， J = 5Hz)， 8.52 (d5 lH， J = 8Hz)，8.30 (d，1H，J = 9Hz)5 8.17 (s，1H)，7.90 (t5 1H，J = 6Hz)，7.76 (s，2H)，7·32 (d，1H，J=10Hz)，5.80 (brs，1H)， 5.77 -5.65 (m，1H)，5.07 (d，1H，J=17Hz)，4.79 (d，1H， J=llHz)，4.71-4.63 (m5 2H), 4.49 (brs，1H)，4.23 -4.09 (m， 3H)，4.05 (s，3H)，3.46 -3.23 (m，2H)，2·90 - 2.78 (m，1H)， 2.5 7 -2.46 (m5 1H)? 2.07 - 1.93 (m, 1H)? 1.70 - 1.43 (m? 8H)? 1.43 - 1_30 (m，2H)，1.34 (d，6H，J = 6Hz)，1.03 (s，9H); 31P (121.4MHz, CD3〇D)6.3 1.7; El MS (m/z) 874.0 -224- 200819460 [MH + ]。 實例76:製備化合物76
在 〇°C 下，化合物 IV (22 8 mg，0.73 7 mmol)於 CH2C12 (6.7 mL)中之溶液加入 DIEA (0.270 mL，1.55 mmol)及 TMSC1 (0. 1 96 mL，1 .55 mmol)。反應物升溫至室溫，及攪 拌1小時。所得混合物加入2-溴甲基-3-羥基吡啶鹽酸鹽 (436 mg，1.62 mmol)於 DIEA (0.128 mL，0.737 mmol)中之 溶液。此反應在室溫下攪拌1天，並加入CH2C12及飽和 NH4C 1水溶液。有機層在真空中乾燥及經由矽膠層析純 化，製得20 5 mg (67%)產物，爲澄清油狀物。El MS (m/z) 43 9.0 [M + H]。 當反應完成時，在室溫下，（1S，2S)-1-((S)-乙氧基（（3 羥基吡啶-2 -基）甲基）磷醯基）-2 -乙烯基環丙基-胺基甲酸苄 酯（205 mg，0.492 mmol)於乙腈（4.92 mL)中之溶液以 TMSI (0.350 mL，2.46 mmol)處理 2 小時。藉由加入 TEA (0.685 mL, 4.92 mmol)及MeOH (10 mL)使反應驟停，將殘餘物乾 燥並直接使用。 -225- 200819460 當反應完成時，（S)-((1S，2S)-：1-胺基-2-乙烯基環丙 基）（（3-羥基吡啶-2-基）甲基）次膦酸（214 mg，0.328 mmol)、羧酸 VII (125 mg，0.493 mmol)於 DMF (1.5 mL)中 之溶液以 HATU (188 mg，0.493 mmol)及 DIEA (0·228 mL， 1.30 mmol)攪拌 1 小時。產物經由 RP HPLC (ACN，0.05°/。 TFA-H20，0.05% TFA)純化，製得54 mg所欲之產物。h NMR (3 00MHz，CD3OD)6 8·29 (d，1H，J = 9Hz)，8.17 (s，1H)， 8.11(d，1H，J = 8Hz)，7.82 (d，1H，J = 8Hz)5 7.7 6 (s，2H)， 7.69-7.61 (m，1H), 7.3 1 (d，1 H，J = 9 H z)，5.2 8 (b r s，1H)， 5.71(dt，lH，J=10，17Hz)，5.04(d，lH,J=17Hz)，4.79-4.63 (m，2H)，4.50 (brs，1H)，4.25 -4.05 (m，3H)5 4.0 5 (s5 3H)? 3.68 (appt，lH，J=15Hz),3.41(t，lH，J=16Hz)，2.95-2.84 (m，1H)，2.60 -2.48 (m，1H)，2.08 - 1.97 (m，1H)，1.70 -1.45 (m，8H)，1.45 - 1.3 5 (m，2H)，1.34 (d，6H，J = 7Hz)， 1.03 (s? 9H); 31P (121.4MHz5 CD3〇D)5.26.7 ; El MS (m/z) 889.7 [ MH + ]。 實例77:製備化合物77
-226- 200819460 3-氯-6-甲基吡啶（220 mg, 1.72 mmol)於四氯化碳（4 mL)中之溶液與NBS (284 mg，1.60 mmol)及過氧化苯甲醯 (1 0 0 m g)加熱3天。反應物藉由移除溶劑加以處理及再懸 浮於CH2C12中。有機層以2N NaOH水溶液（2x50 mL)清洗 及在真空中乾燥，製得170 mg澄清油狀物之產物；El MS (m/z)208.0，210.0 [M + H]。 在 〇°C 下，化合物 IV (102mg，0.3 3 0mmol)於 CH2C12 (3.0mL)中之溶液力卩入 DIEA (0.121mL， 0.692mmol)及 TMSC1 (0.088mL，0.692 mmol)。反應物升溫至室溫’及攪 拌1小時。所得混合物加入2-(溴甲基）-6-氯吡啶（102 mg， 0.3 3 0 mmol)於 DIEA (0.121 mL，0·692 mmol)中之溶液。 反應物以另外之CH2C12及飽和NH4C1水溶液處理時’在 室溫下攪拌整夜。有機層在真空中乾燥及經由矽膠層析純 化，製得1 4 0 m g ( 9 7 %)產物，爲澄清油狀物。EI M S (m/z)45 7.0 [M + Na]。 當反應完成時，在室溫下，（lS，2S)-l-((S)-((6-氯吡 啶-2-基）甲基）（乙氧基）磷醯基）-2 -乙烯基環丙基胺基甲酸 苄酯（118 mg，0.271 mmol)於乙腈（2.71 mL)中之溶液以 TMSI (0.193 mL，1/35 mmol)處理 1.5 小時。藉由加入 TEA (0.377 mL，2.71 mmol)及 MeOH (10 mL)使反應驟停’將殘 餘物乾燥及直接使用；El MS (m/z)273.1 [MH + ]。 當反應完成時，（S)-((1S，2S)-1-胺基-2-乙烯基環丙 基）（（6-氯吡啶-2-基）甲基）次膦酸（74 mg，0.271 mmol)、羧 酸 VII (177 mg，0.271 mmol)於 DMF (1.3 mL)中之溶液以 -227- 200819460 HATU (155 mg，0.407 mmol)及 DIEA (0.189 mL, 1·09 mmol)攪拌 1 小時。產物經由RPHPLC(ACN，0·05%TFA-H20，0.05% TFA)純化，製得37 mg所欲之產物。h NMR (3 00MHz，CD3〇D)5 8.29 (d，1H，J = 9Hz)，8·17 (s，1H)， 7.77 -7.6 5 (m，3H)，7.43 (dd，1H，J = 25 8Hz)，7.3 5 -7.27 (m， 2H)，5.92 -5.7 5 (m，2H)，5.23 (d，1H，J=17Hz)，5.01 (d， 1H? J=12Hz)? 4.75 -4.61 (m? 2H)9 4.50 (brs, 1H)? 4.20 -4.08 (m，3H)，4.05 (s，3H)，3.53 (dd，2H，J = 3，17Hz)，2.84 -2.74 (m? 1H)5 2.6 5 - 2.5 3 (m5 1H)9 2.1 6 -2.04 (m, 1H)? 1 .70 - 1.42 (m，10H)，1.34 (d，6H，J = 6Hz)，1 .03 (s，9H); 31P (121.4MHz，CD3OD)5 40.7; El MS (m/z) 907.4 [MH + ]。 實例7 8 :製備化合物7 8
實例7 8至8 1以類似於製備實例74之方式加以製 備。 製得產物（實例78)，爲黃色固體（48 mg，15%)。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.73 (s，1H)，8.53 (s，1H)，8.44 (s，1H) 8.28 (d，J = 9.2Hz，1H) 8.195 (s，1H) 7.76 (s5 2H) -228- 200819460 7·31 (d，J=8.8Hz，1H) 5.84 (m，2H)，5.20 (m，1H)5 4.99 (m， 1H)，4.71(m，2H), 4.48 (bs，1H)，4.15 (m，3H) 4.04 (s5 3H)5 3·60 (m，2H)，2.75 (m，1H)，2.54 (m，1H)，2.02 (m，1H)， 1.54 (m，8H) 1.34 (m，8H)，1.01(s，9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):5 38.710。LC (跑6分鐘，停留時間=3.50分鐘） MS (8 75.5，Μ + 1)。 實例79:製備化合物79
製得產物（實例79)，爲黃色固體 （7 mg，5%)。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 9.00 (s? 1H) 8.82 (s9 2H) 8.29 (d，J = 8.8Hz，1H) 8.18 (s，1H) 7.75 (s，2H)，7.32，（d， J = 8.1Hz，1H) 5.80 (m，2H)，5.18 (m, 1H)，4.95 (m，1H)， 4.66 (m? 2H)? 4.47 (bs5 1H)5 4.18 (m? 3H)? 4.05 (s9 3H) 2.77 (m，1H), 2.49 (m，1H)，2.06 (m，1H)，1.50 (m，8H)， 1.34 (m，8H)，1.01(s，9H)。無足夠物質進行 31P NMR。LC (跑6分鐘，停留時間=3.42分鐘）MS (8 75.5, M+l)。 實例8 0 :製備化合物8 〇 -229- 200819460
製得產物（實例80)，爲黃色固體 （1 1 mg，15%) ]H NMR (3 00MHz，C D 3 O D ): δ 8 · 7 4 ( d , J = 4 · 9 Η z , 2 Η) 8.29 (d，J = 9.4Hz，1H) 8·17 (s5 1H) 7.76 (m，2H)，7·35 (m， 2H) 5.86 (m, 2H), 5·22 (m，1H)，5.00 (m, 1H)，4.70 (m， 2H)，4.49 (bs，1H)，4.17 (m，3H)5 4.05 (s5 3H) 3·70 (m, 2H) 2.78 (m，1H)，2.59 (m，1H)，2.12 (m，1H)，1.59 (m，8H)， 1.34 (m，8H)，1.02 (s，9 H )。31 P (1 2 1 · 4 Μ H z, CD3〇D):5 37.909。LC (跑 6 分鐘，停留時間=3.21 分鐘）MS (875.6，M + 1)。 實例8 1 :製備化合物8 1
-230- 200819460 製得產物（實例81)，爲黃色固體 （85 mg, 51 %)。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 9.02 (s? 1H) 8.65 (d， J = 5.2Hz，1 H) 8.28 (d，J = 9.5Hz? 1H) 8.18 (s, 1 H) 7.75 (m， 2H), 7.66, (d，J = 5.0Hz，1H) 7.30 (m，1H) 5.86 (m，2H)， 5.20 (m，1H)，5.00 (m，1H)，4.68 (m，2H)，4.47 (bs，1H)， 4.17 (m，3H)，4.05 (s，3H) 3.57 (m，2H) 2.78 (m，1H)，2.56 (m，1H)，2.08 (m，1H)，1.60 (m，8H), 1.34 (m，8H)，1.02 (s, 9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):3 36.81。LC(跑 6 分鐘，停 留時間=3.21 分鐘）MS (8 75.5，M + l)。 實例8 2 .•製備化合物8 2
lR NMR (3 00MHZ，CD3OD) 8.27 (d，J = 9.0Hz，1H)， 8.20 (s，1H), 7.76 (s5 2H)，7·31 (b，1H)，7.221 (b，1H)， 7.00 (b，1H), 6.93 (m，1H)，5.95 (m，1H)，5.80 ((b，1H)， 5.24 (d5 J=17.4Hz，1H)，5.07 (d，J=10.2Hz，1H)，4.68 (m， 2H)，4.46 (s，1H)，4.17 (m，2H)，4.11(s，1H)，4.04 (s，3H)， 3.49 (d，15Hz，2H)，2.75 (m，1H)，2.47 (m，1H)，2.08 (m5 1H)，1.41 -1.62 (m，8H), 1.34 (d, J = 6.3Hz，6H)，1.03 (s5 -231 - 200819460 9H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD)3 39.122 LC/MS = 8 79 (M + + 1) 實例83:製備化合物83
以如下方式從糠基醇於原處形成糠基溴。糠基醇3 · 5 m L (41 mmol)溶於 20 mL乾乙醚，並冷卻至 0°C。PBr3 (1.4 mL, 15.1 mmol)溶於4mL乾乙醚，然後在0°C加入。 加入後，所得溶液升溫至室溫。在室溫下45分鐘後’溶 液冷卻至〇°C及加入12 ml之50%KOH水溶液。醚層然後 倒至乾燒瓶，並在-20 °C以固體KOH存放。在另一燒瓶 中，3 92 mg (1.27 mmol)IV 溶於 5_0 mL 乾 DCM。分別加 入 465 μΐ (2.67 mmol) DIEA and 3 3 9 μΐ (2.67 mmol) TMSC1，反應物然後在室溫下攪拌5分鐘。然後加入465 μΐ (2.67 mmol)DIEA及上述在原處形成之1.7 mL之糠基 溴的醚溶液。反應物升溫至40 °C並置於40°C整夜。然後反 應物以乙酸乙酯稀釋及加以濃縮以移除DCM。有機相然後 以1 .0 Μ檸檬酸清洗一次，以水清洗兩次及以鹽水清洗一 次。有機相以MgS04乾燥。真空過濾移除MgS04後，濃 -232- 200819460 縮濾液，產生橘色油狀物，橘色油狀物經由管柱層析 (Si02，3:卜乙酸乙酯：己烷）單離出產物7，爲澄清油狀物 (1 60 mg，二步驟共 32%)。h NMR (3 00MHz，CDC13) 7.33 (s? 5H)? 6.31 (m? 2H)9 6.0 0 (m, 1H)? 5.30 (m5 2H), 5.04 (m? 4H)，4.10 (m，2H)，3.35 (m，2H), 1·96 (m，2H))，1.80 (m， 1H)，1.60 (m5 1H)，1.303 (m，3H)。31P NMR (121.4MHz， CDC13)5 44.879，4 1.5 75。LC/MS = 3 90 (M + + 1)。 上述製得之次膦酸酯（103 mg，0.3 08 mmol)於 ACN (7.7 mL)中之溶液冷卻至〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μί， 1.5 4 mmol)。反應物升溫至室溫，並在室溫下攪拌1小 時。反應物再冷卻至〇 °C，及逐滴加入2，6 -二甲基吡啶 (3 60 μ!>，3.1 mmol)。此接著加入 Et3N (lmL，7.2 mmol)及 Me OH (4 mL)。然後，在真空中濃縮反應物，所得粗質物 直接用於下一反應。 步驟1所得粗殘餘物、HATU (190 mg, 0.5 mmol)、二 肽 VII (130 mg5 0.2 mmol)及 N-甲基嗎啉（1 10 μ15 1·0 mmol)溶於2 mL DMF中，並在室溫下攪拌整夜。粗反應 混合物然後經由逆相製備性HP L C純化，直接製得6 0 m g 之 83 (60 mg5 34%)。NMR (3 00MHz，CD3OD) 8.82 (s， 1H)，8.26 (d，J = 9.6Hz，1H)，8.20 (s5 1H)，7.75 (s5 2H)， 7.35 (s，1H)，7.29 (dd，J = 2.1，9.3Hz，1H)，6·30 (m，2H)， 5.95 (m，1H), 5.80 ((b，1H)，5.24 (d, J=11.4Hz5 1H)，5.07 (d，J=12Hz，1H)，4.65 (m，2H)，4.45 (s，1H)，4.17 (m5 2H), 4.ll(s，1H)，4.04 (s，3H)，3.35 (m，2H)，2.80 (m，1H)， -233- 200819460 2.50 (m，1H)，2.10 (m，1Η)，1·41·1.78 (m，8H)，1.34 (d5 J = 6.3Hz, 6H)， 1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz， CD3OD)5 40.029 LC/MS = 863 (M + +1)。 實例8 4 :製備化合物8 4。
中間物 IV (3 60 mg，1.2 mmol)溶於 5.0 mL 乾 DCM。 依序加入 DIEA (418 μΐ，2·4 mmol)及 343 μΐ (2.4 mmol) TMSC1，反應物然後在室溫下攪拌5分鐘。然後分別加入 更多之 DIEA (418 μ15 2.4 mmol)及 3 43 μΐ (2.4 mmol)之 5- (三氟甲基）糠基溴。反應物升溫至40 °C，並在40 °C下攪拌 整夜。然後反應物以乙酸乙酯稀釋，加以濃縮以移除 DCM。有機相然後以飽和NH4C1溶液清洗一次，以水清洗 兩次，及以鹽水清洗一次。有機相以 MgS04乾燥。將 MgS 04過濾掉後，濃縮濾液，製得橘色油狀物，橘色油狀 物經由管柱層析（Si02，純質乙酸乙酯）單離出產物，爲澄 清油狀物（3 13 mg，56%)。進行去保護及偶合至二肽VII， 製得化合物84。 lH NMR (3 0 0MHz? CD3OD) 8.27 (d9 J = 8.7Hz, 1H)5 8.2 0 (s? -234- 200819460 1H)，7.75 (s，2H)，7.35 (s，1H)，7.29 (d，J = 2.1，9·3Ηζ，1H)5 6.86 (b，1H)，6.48 (b，1H)，5.90 (b，1H)，5.79 (b，1H)， 5.25 (d，J=17.4Hz，1H)，5.07 (d，J=1 0.8Hz, 1H)，4.67 (m5 2H)，4.45 (s，1H)，4.16 (m, 2H)，4.11 (s，1H)，4.04 (s, 3H)， 3.43 (m，2H), 2.80 (m, 1H)，2.50 (m，1H)，2.10 (m，1H)， 1.62 - 1.3 3 (m, 8H), 1.34 (d5 J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s，9H)。 31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD)5 3 6.68 LC/MS = 93 1 (M + + 1) 實例8 5 :製備化合物8 5
在 〇°C 下，5-甲基·1H_ 吡唑（5g，61.05 mmol)於 CH3CN (5 0 mL)中之溶液加入二碳酸二第三丁酯（16g，73.26 mmol) 及DMAP (740 mg，6.10 mmol)。反應混合物升溫至室溫， 並攪拌2小時。反應混合物以EtO Ac稀釋（30 mL)及以1N HC1清洗（2x30 mL)。有機層以飽和NaHC03溶液（30 mL) 及鹽水（30 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得 8.7 g粗產物之5-甲基-吡唑-1-羧酸第三丁酯。 5-甲基-吡唑-1-羧酸第三丁酯於CCi4 (40 mL)中之溶 -235 - 200819460 液加入NBS (3.3g，18.5 mmol)及過氧化苯甲酸（450 mg, 1.86 mmol)。反應混合物加熱至回流4小時及冷卻至室 溫。將不溶物過濾掉，溶液以EtOAc稀釋。有機層以飽和 NaHC03溶液及H20清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃 縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得1.67 g之5-溴 甲基-吡唑-1羧酸第三丁酯，產率52%。 中間物 IV (8 00 mg，2.56 mmol)溶於 CH2C12 (30 mL) 及冷卻至〇°C。加入二異丙基乙胺（1 mL，5.36 mmol)，並 攪拌15分鐘。逐滴加入氯三甲基矽烷（〇.8 mL，5.36 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌1小時。加入固 體之5-溴甲基-吡唑-1-羧酸第三丁酯（1 .67g, 6.4 mmol)， 及反應物加熱至4 5 °C整夜。反應混合物冷卻至室溫，以 CH2C12稀釋，以NH4C1水溶液清洗，以Na2S04乾燥，及 加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得682 mg 次膦酸酯，產率5 5 %。 在 〇°C 下，次膦酸酯（682 mg，1.4 mmol)於 CH3CN (2 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（i.o mL，7 mmol)。反應混 合物升溫至室溫，並攪拌30分鐘。加入另外之碘三甲基 矽烷（1 mL，7 mmol)，並攪拌30分鐘。加入2,6-二甲基吡 啶（0.8 mL)及MeOH (1.6 mL)，攪拌20分鐘，在真空中濃 縮，及乾燥20分鐘，製得胺。該胺與中間物VII偶合， 製得次膦酸 85。NMR (3 00MHz，CD3〇D):6 8.3 0 (d， J = 7.8Hz，1H)，8.17 (s，1H) 7.76 (s，2H)，7.61(m，4H)，7·61 (s，1H)，7·34 (d5 J = 9.3Hz5 1H)，6·37 (s，1H), 5.82 (m，2H)， -236- 200819460 5.22 (d J-l7.7Hz? 1H)? 5.00 (d J=ll.lHz, 1H)? 4.68 (m? 3H)，4.49 O，1H)，4.16 (m，2H)，4.05 (m，3H)，3.35 (m5 2H)，2.79 (m，1H), 2.51 (m，1H)，2.09 (m，1H)，1.63 -1.48 (m， 8H)， 1.34 (m， 6H)， 1.02 (s， 9H)。LC/MS = 8 63.1 2 (M + +1)。 實例8 6 :製備化合物8 6。
步驟1。在〇°C下，次膦酸酯（結構示於上，170 mg， 0.44 mmol)於CH3CN中之溶液加入碘三甲基矽烷（0.31 mL， 2.1 8 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌1小時，及冷 卻至0°C。加入2,6-二甲基吡啶（0.51 mL)，接著加入另外 之MeOH (0.5 mL)及升溫至室溫。所得混合物在真空下濃 縮及乾燥，製得所欲之胺基次膦酸粗產物。 步驟2。中間物VII (142 mg，0.22 mmol)及步驟1所 得之胺基次膦酸（〇 · 4 4 m m ο 1)溶於 D M F (2 m L)。加入 HATU (16 6 mg， 0.44 mmol)及 NMM (0.07 mL, 0.65 mmol)，所得混合物在室溫下攪拌整夜。反應物以CH2C12 稀釋及以5% LiCl清洗兩次。有機層以飽和NaHC03溶液 -237- 200819460 清洗，以Na2S04乾燥，及力口以濃縮。粗產物經由HPLC 純化，製得 83.2 mg 化合物 86。iH NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.2 8 (d? J = 9.3Hz? 1H)，8.17 (s，1H)，7.96 (s， 1H)，7.77 (s，2H) 5 7.3 0 (dd，J = 2.4，9.0Hz，1H)，7.07 (s5 1H)，5.97 (m，1H)，5.79 (brs，1H)，5.23 (d，J=17.7Hz，1H)， 5.06 (d，J=11.7Hz，1H)，4.65 (m，2H)，4.46 (brs，1H)，4.15 (m，3H)，3.97 (s5 3H)5 3.6 (d，2H)，2.80 (m，1H), 2.45 (m， 1H)，2.12 (m，1H), 1.4 -1.7 (m，10H)，1.34 (d5 J = 6.3Hz， 6H)，0.95 -1.15 (brs9 9H) ;31P (121.4 MHz, CD3OD):5 3 6.8 84; LC/MS = 864 (M + + 1)。 實例8 7 :製備化合物8 7
燒瓶裝入1.1 mL (10.2 mmol)新鮮蒸餾之2,5-二甲基 噻唑及 25 ml 乾 THF。4.6 mL (2.8 mmol)之 2.2 M nBuLi 逐滴加至此混合物，反應物在-7 8 °C下攪拌3 0分鐘。中間 物次膦酸酯IV (從1 · 1 g之hi製得，3.4 mmol)溶於20 mL 乾THF，並在-78。(：下，逐滴加至在原處形成之2.5 -二甲基 -238- 200819460 噻唑之鋰陰離子溶液。3 0分鐘後，在-7 8 °C下，藉由加入 飽和NH4C1水溶液使反應驟停。有機相以EtOAc稀釋，
及以飽和NH4C1水溶液及鹽水清洗。有機相以MgS04乾 燥。真空過濾移除Mg S04後，濃縮濾液，製得橘色油狀 物，該橘色油狀物經由管柱層析（Si02，3:1乙酸乙酯：己烷） 單離出產物，爲澄清油狀物（220 mg，二步驟共15%)。4 NMR (3 0 0MHz9 CDC 13 ) 5 7.3 3 (s, 5H)? 6.64 (d? 1H), 5.80 (dt5 J= 9.9，17.1Hz，1H)，5.18 (b, 4H)，4.10 (m，2H)，3.60 (m，2H)，2.0 (m，1H) 1.80 (m，2H)，1 · 2 0 (m，3 H)。31P NMR (121.4MHz， CDC13)5 4 4.9 5 2， 4 1 · 1 3 5 。 L C / M S = 4 2 1 (M + + 1)。 如上所述般進行去保護及偶合反應，製得87。（產率 =65 mg, 6 6%)。4 NMR (3 00MHZ，CD3OD) 8.28 (d， J = 9.6Hz? 1H), 8.27 (s5 1H)，7.77 (s，2H)，7.45 (s，1H), 7.3 1 (dd，J = 2.1 ? 9·3Ηζ，1 H)? 5.84 (br, 1H)，5.70 (m，1H)， 5.12 (d，J=1 1.4Hz5 1 H) 5 4.8 3 (d，1 H) 4.69 (m，2H)，4.51(s， 1H)，4.17 (m5 2H)5 4.0 8 (s，1H)，4.04 (s5 3H)，3.80 (m， 2H)? 2.84 (dd, J = 7.2? 14.1Hz? 1H)? 2.45 (m? 4H)? 1.41- 1.78 (m，8H)，1·34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz, CD3OD)3 26.015。LC/MS = 894 (M + + 1)。 實例8 8 :製備化合物8 8 -239- 200819460
次膦酸酯 IV (501.3 mg, 1.62 mmol)、Hunig 氏驗（680 μί，3.90 mmol)及氯三甲基矽烷（460 μί，3.62 mmol)於 CH2C12 (8 mL)中之溶液在室溫下攪拌20分鐘。在室溫 下，經由套管加入4-(氯甲基）-2-甲基噻唑 （510 mg，2.77 mmol)、碘化四 丁基錢（598.4 mg，1.620 mmol)及 Hunig 氏 鹼（530 μί，3.04 mmol)於 CH2CI2 (1.5 mL)中之溶液。所得 溶液在4 0 °C下攪拌4.5天，並冷卻至室溫。將溶液濃縮’ 殘餘物溶於乙酸乙酯（30 mL)。有機層以H20清洗兩次及 水層以乙酸乙酯萃取（30 mL)。將有機相部分乾燥（Mg S04) 及濃縮。殘餘物經由組合快速管柱層析以己烷：乙酸乙酯 爲洗提液純化之，製得次膦酸酯（449 mg, 66%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13 ):5 7.3 5 (s5 2.15H)，7.33 (s，2.85H)，7.03 (d? J = 3.3Hz, .43H), 6.94 (d? 3.9Hz? .57H)? 6.72 (s? .57H)? 6.60 (s，·43Η)，6.04 (m，1H)5 5.71 (s，1H)，5.40 -5.34 (d5 J=17.1Hz，1H), 5.29 (s5 2H)，5.10 (m，3H)，4.76 -4.73 (d5 J=10.2Hz，1H)，4.20 (m，2H)，3.55 (m，2H)，3.32 (m，2H)， 2.67 (s，3H)5 2.27 (m，2H)5 1.71(m，4H)，1.23 (m，3H)， 1.13 (m，1H)? 0.93 (m，1 H)。31 P (1 2 1 · 4 Μ H z，C D 3 0 D ) ·· δ -240- 200819460 48.382， 47.151， 44.628， 43.811 ° 實例8 9 :製備化合物8 9
用類似實例 7之方式進行（其他的呋喃）。產率=2 3 0 mg (40%)。4 NMR (300MHZ，CDC13) 7.33 (s，5H)，6.41 (d，1H)，6.00 (m，1H)，5.30 (m，1H)，5.08 (m，3H)，4·05 (m， 2H)，2.96 (m，2H)，2·08 (m，1H)), 1.77 (m，1H)，1.46 (m， 1H)，1.21 (m，3H)。31P NMR (121.4MHz, CDC13)5 45.73, 42.55 LC/MS = 3 90 (M + +l) NMR (3 00MHz，CD3OD) 8.27 (d, J = 9.3Hz? 1H), 8.19 (s，1H)，7.75 (s，2H)，7.42 (m，1H)，7.30 (m，1H)， 6.46 (s， 1 H)? 5.95 (m， 1H)， 5.80 ((b， 1H)， 5.24 (d， J=17.1Hz，1 H)? 5.06 (d，J=10.2Hz，1H)，4.67 (m，2H)，4.45 (s，1H)，4.17 (m，2H)，4.11 (s，1H)，4.04 (s，3H)，3.06 (d， 15Hz，2H)，2.77 (m，1H)? 2.45 (m? 1H)5 2.0 7 (m，1H)， 1.41-1.78 (m，8H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.04 (s5 9H)。 31P NMR (121.4MHz， CD3OD)6 41.17 。 LC/MS = 863 -241 - 200819460
燒瓶裝入13.0 mL乾乙醚及2.95 mL之2.2 M nBuLi 的己烷溶液。所得混合物冷卻至-78 °C。然後加入新鮮經蒸 飽溴噻P坐587 μΐ (6.5 mmol)，反應物在_78 °C攪拌 20分 鐘。中間物次膦酸酯IV (從1.0 g之III所製得，3.1 mmol)溶於13.0 mL THF，然後在- 78°C下逐滴加至所得陰 離子溶液。2 0分鐘後，在-7 8。(：下經由加入飽和N Η 4 C1水 溶液使反應驟停。有機相以EtOAc稀釋，及以飽和NH4C1 水溶液及鹽水清洗。有機相以MgS04乾燥。真空過濾移除 MgS〇4後’濃縮濾液，製得橘色油狀物，該橘色油狀物經 由管柱層析（SiCh，純質乙酸乙酯）單離出產物，爲澄清油 狀物（45 0 mg，二步驟共 37%)。4 NMR (3 00MHZ, CDC13)5 8.07 (s，1H)，7.667 (s, 1H)，7.33 (s5 5H)，6.20 一 5.90 (m，1H)，5.82 (s，1H)，5.55 (d，J = 38.1Hz，1H)，5.20 (m，1H)，5.06 (m，3H), 4·24 (m，2H)，2·05 (m，1H)，1·96 -
1.70 (m5 2H)? 1.52 (m，1H)，1 · 3 0 3 (m，3 H)。31 P N M R -242- 200819460 (121.4MHz，CDC13)3 2 8.845，26.1 5 6。LC/MS = 3 93 (M + + 1)， 4 15 (M + + Na)。 上述製得之次膦酸酯（3 00 mg，0.77 mmol)於ACN (6.5 niL)中之溶液冷卻至 〇°C及逐滴加入TMSI (764 pL，5.4 mmol)。反應物升溫至室溫，並攪拌1小時。反應物再冷 卻至 〇°C，並逐滴加入 2,6·二甲基吡啶（897 μί，2.6 mmol)。此接著加入 Et3N (2.7 mL, 19.3 mmol)及 MeOH (8 niL)。反應物然後在真空中濃縮，所得粗質物直接用於下 一反應。二肽 VII (150 mg，0.23 mmol)於 THF (4 mL)中之 溶液冷卻至-3 0 °C。E13 N ( 8 1 μ L，0.5 8 m m ο 1)加至此溶液， 接者加入 ClC〇2Et (44 μΙ^5 0.46 mmol)。反應物在-20°C 與 -3(TC間之溫度攪拌30分鐘。 在-30°C下，逐滴加入步驟1所得粗質物於CH2C12 (2 mL)中之溶液，及反應物升溫至室溫並攪拌2小時。經由 加入飽和NH4C1水溶液使反應驟停。有機相以EtOAc稀 釋，及以飽和NH4C1水溶液、H2〇及鹽水萃取。有機相然 後以 Na2S〇4乾燥，Na2S04隨後經由真空過濾移除之。濾 液在真空中濃縮，殘餘物溶於MeOH (1.5 mL)。此溶液經 由逆相 HPLC單離出化合物 90，爲黃色固體 （82 mg， 41%)。4 NMR (300MHz，CD3OD)8 8·25 (m，2H)，8.20 (m5 2H)，8.02 (s，1H)，7.75 (s，2H), 7.39 (d，J = 8.7Hz, 1H)， 5.97 (b，2H)，5.77 (b，1H)，5.06 (d，J=11.4Hz，1H), 4.63 (m，2H) 4.44 (s，1H)，4.17 (m，2H)，4.08 (s5 1H)，4·04 (s， 3H)，2.75 (b，1H) 2·57 (b5 1H)，2.10 (b，1H)，1.7 -1.5 (b， -243- 200819460
8H)，1.34 (d，J = 6.3Hz, 6H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz? CD3CN)5 18.28 LC/MS = 866 (M + + 1)。
實例11所得[(1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）乙
氧基-次膦醯基]-乙酸（290mg，0.79 mmol)懸浮於 4mL DMF。力口入 HATU (901mg，2.37 mmol)、甲基胺（133mg， 1.97 mmol)，接著加入 NMM (781μ1，7.11 mmol)。2 小時 後，將反應物濃縮，並在EtOAc與Η20間分配。水層以
EtOAc萃取三次。有機層以MgS04乾燥，加以過濾及濃 縮。製得之棕色油狀物（2 64mg，8 8%)係以粗質物使用。 殘餘物懸浮於lmL CEUCN，並冷卻至（TC。加入碘三 甲基石夕院（TMSI)(187pl，1·31 mmol)，所得溶液升溫至室 溫。45分鐘後，溶液再冷卻至，及加入三乙胺（lmL， 7·33 mmol)及2mL MeOH。溶液升溫至室溫，並另擾祥2〇 分餘。彳谷液濃Ifg ’與甲本共沸兩次，及置於高真空下3 〇
分鐘。與中間物VII偶合，製得91，爲黃色固體。lH -244 - 1 200819460 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.2 3 (d, J = 9.5Hz，1H)，8.20 (s， 1H)，7.79 (s，2H)，7.33 (d，JUHz，1H)，5.95 (m，1H)， 5.78 (s，1H)，5.22 (d，J = 9.6Hz，2H)，5.13 (d，J = 9.0Hz，2H)， 4.63 (m，2H)，4.45 (bs5 1H)，4.20 (m，3H), 4.05 (s，3H)， 3.22 (m，1H)，3.20 (d，1H)，3.18 (s，1H)，2.80 (m，1H)， 2.78 (s，3H)，2.45 (m，1H), 2.15 (m，1H)，1.62 (m，2H)， 1.50 (m，6H) 1.38 (d5 6H)，1.05 (s，9H)。31P (121·4ΜΗζ， CD3OD):5 36.642。 實例92:製備化合物92
步驟1。二肽化合物（中間物X11經Boc保護）（2.86g， 4.27 mmol)及2-第三丁氧基羰基胺基羥基-丁酸（9 5 8 mg， 4.37 mmol)溶於D M F (1 8 m L)及冷卻至 〇 °C。依序加入 T E A (1 . 0 9 m L，8 · 5 4 m m ο 1)、Η 〇 B T (6 3 4 m g，4.7 m m ο 1)及 E D C M 1 . 7 g)。反應混合物在0 °C下攪拌1小時，並升溫至 室溫整夜。反應混合物藉由加入Η2〇使反應驟停’並以 EtOAc萃取兩次。有機層以5% LiCl、飽和NH4C1溶液及 -245- 200819460 鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組 合快速層析純化，製得2.2 1 g三肽，產率6 2 %。31 P NMR (121.4MHz，CDC13)3 46.4，43.9。LC/MS = 8 3 6.0 (M++1)， 8 5 6.0 (M + + Na)。 步驟2。得自步驟1之醇（2.06g, 2.5 mmol)及戊-4-烯 酸（0.64 mL，6.25 mmol)溶於 CH2C12 (18.75 mL)/ DMF (6.25 mL)。依序加入 EDCI (1.8g，9·38 mmol)及 DMAP (92 mg，0.75 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌7小時及加以 濃縮。反應混合物以H20稀釋，及以EtOAc萃取兩次。 有機層以5% LiCl及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以 濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得2.1 6 g酯產 物，產率 96%。31P NMR (121.4MHz，CDC13)5 44.5，43.9, 43.2，42.3。LC/MS = 917.9 (Μ+ +1)，856.0 (M + + Na)。 步驟 3。上述之酯（2.16g，2.36 mmol)溶於 CH2C12 (236 mL)及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (486 mg， 0.5 9 mmol)，並另脫氣 20分鐘。反應混合物加熱至 50°C 達 5.5小時及冷卻至室溫。加入三（羥基甲基）膦（3.66g， 29.5 mmol)，接著加入另外之 TEA (8.2 mL，59 mmol)及 H20 (20 mL)。反應混合物加熱至50°C達5小時，然後置 於室溫整夜。將兩層分離。有機層以〇·5 N HC1及鹽水清 洗，以Na2S〇4乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速 層析純化，製得1.4 8 g環化之化合物，產率7 1 %。31 P NMR (121.4MHz，CDC13)3 44.4，43.1。LC/MS = 8 8 8.1 (M + + 1)，909.9 (M + + Na)。 -246- 200819460 步驟 4·環烯烴（1.48g，1.67 mmol)於 CH2C12 (10 mL)中 之溶液加入 4 N HC1 於 1，4-二噁烷（6·26 mL，25.05 mmol) 中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌3 · 5小時’加以濃 縮，在真空中乾燥整夜，然後溶於THF (14.3 mL)/ H2〇 (2.4 mL)。加入化合物碳酸環戊酯2,5-二酮基-吡咯烷 基酯（398 mg，1.75 mmol)及 TEA (0.7 mL，5.01 mmol)。反 應物在室溫下攪拌2小時，並加入另外之碳酸環戊酯2,5-二酮基-吡咯烷-1-基酯（38 mg)。反應物攪拌2小時。反應 物經由0.5 N HC1使反應驟停，並以EtOAc稀釋。將兩層 分離。有機層以 〇·5 N HC1及鹽水清洗，以Na2S04乾 燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 I. 45 g胺基甲酸環戊酯，產率96%。31P NMR (121.4MHz， CDC13)5 44.4，43.1。LC/MS = 902.0 (M+ +1)。 步驟5。上述之胺基甲酸環戊酯（1.4g，1.55 mmol)及 8-氯- 2-(2-異丙基胺基-噻唑-4-基）-7-甲氧基喹啉-4-醇（542 mg，1.55 mmol)於 NMP (15 mL)中之溶液以 Cs2C03 (1.26g， 3.88 mmol)處理。反應混合物加熱至63 °C達5小時，然後 冷卻至室溫。反應物以EtO Ac稀釋及以NaHC03清洗。 有機層以5% LiCl及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以 濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得1 . 1 8 g所欲之 產物，產率7 5 %。 步驟6。在0°C下，上述製得之產物 (1.18g, 1.16 mmol) 於CH3CN(12mL)中之溶液加入2,6-二甲基吡啶（l.35mL， II. 6 mmol)及碘三甲基矽烷（1.66 mL，11.6 mmol)。反應混 -247- 200819460 合物在室溫下攪拌3小時，並冷卻至。加入2,6-二甲 基吡啶（0.27 mL，2.32 mmol)，接著加入另外之MeOH (5 mL)，及升溫至室溫達10分鐘。將混合物濃縮，在真空中 乾燥。粗產物經由逆相組合快速層析接著HPLC純化，製 得 1.01 g 之 92，產率 88%。4 NMR (300MHz，CD3OD )δ 8.26 (m，2Η)，7.85 (s，1Η), 7.68 (d，J = 9.6Hz，1Η)5 7·26 (t， J = 8.1Hz，1H)5 6·93 (t，J = 7.8Hz, 2H)，5.84 (m，2H)，5.67 (t， J=1 0.8Hz? 1H)? 5.08 (dd，J = 6.3? 9·9Ηζ， 1H)，4.75 (t， J = 8.4Hz，1H)? 4.68 (d，J=11.7Hz，1H)? 4.42 (d9 J = 9.9Hz, 1H)，4.3 (m，2H)，4.17 (s，3H)，4.00 (quint·，J = 6.6Hz，1H)， 3.55 (t，J=15.3Hz，1H)，3.31 (t, J=15.3Hz，1H)5 2.91(m，
2H)? 2.6 (m9 1H)? 2.46 (dd? J = 5.4, 16.8Hz? 1H)? 2.30 (m, 1H)，2.20 (m，1H)，1.4 -1·7 (brm，10H)，1.37 (dd，J = 2.1， 6·6Ηζ，6H)，1.25 (d，J = 6 · 3 H z，3 H)，1.04 (m, 1H)。3〗P NMR (121.4MHz, C D 3 O D ) δ 3 8.9。L C / M S = 9 8 5 · 1 (M + + 1 )。 實例9 3 :製備化合物9 3
步驟1。乙醯亞胺酸乙酯鹽酸鹽（1.23g，9.95 mmol)及 -248- 200819460 2,2,2 -三氟乙基胺鹽酸鹽（1.35g，9·95 mmol)溶於CH2Cl2 (32 mL)/ H20 (3.2 mL)。加入 K2C03 (0.69g，4·98 mmol)， 並攪拌30分鐘。將兩層分離。水層以CH2C12萃取（2xl〇 mL)。混合有機層以Na2S〇4乾燥及加以濃縮，製得ία g 之N-(2,2,2-三氟-乙基）_乙醯亞胺酸乙酯，爲淡黃色液 體，產率8 7 %。 步驟2。經Boc保護之三肽次膦酸酯以實例58所述 之類似方式加以製備，並以如下方式加以去保護。三肽 (5 00 mg，0·54 mmol)溶於 CH3CN (5 mL)及冷卻至 〇。〇。加 入碘三甲基矽烷（0· 77 mL)。反應混合物升溫至室溫，攪拌 0 · 5小時，並冷卻至0 °C。加入2，6 -二甲基吡啶（丨.3 〇 mL)，接著加入MeOH (5 mL)。將所得混合物濃縮，與 CHAl2共蒸發兩次，及在真空下濃縮，製得爲2,6-二甲基 口比D疋鹽之fl女基次膦酸酯。該鹽（8 〇 m g，0 · 0 2 5 m m ο 1)溶於 DMF (0_45 mL)及〇·1 N磷酸鹽緩衝液（0·9 mL)。加入2 N NaOH (86 μ!〇將PH調整至9。加入N-(2,2,2-三氟-乙基ν 乙釀亞肢酸乙醋（150 mg，0.89 mmol)於DMF (0.1 mL)中之 溶液，並攪拌1 8小時。將反應混合物過濾，濾液經由 HPLC純化’製得8.8 mg之93，爲黃色固體。 實例9 4 :製備化合物9 4 -249- 200819460
Ο Jl/OH (1-苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-甲基-次膦酸乙 酯 （100 mg，0.308 mmol)於ACN (7.7 mL)中之溶液冷卻至 〇°C，並逐滴加入TMSI (220 μί，1.54 mmol)。反應物升溫 至室溫，並攪拌1小時。反應物然後冷卻至〇°C，及逐滴 加入另外之TMSI (110 μί，0.77 mmol)。反應物升溫至室 溫，及攪拌3 0分鐘。反應物再冷卻至〇°C ’並逐滴加入 2,6-二甲基吡啶（3 60 μ、3.1 mmol)。此接著加入 Et3N (lmL，7.2 mmol)及MeOH (4 mL)。反應物然後在真空中濃 縮，所得粗質物直接用於下一反應。 VI (72 mg，0.123 mmol)於 THF (2 mL)中之溶液冷卻 至-30°C。Et3N (34 μ、0.246 mmol)加至此溶液，接著加 入 ClC02Et (18 pL，0.185 mmol)。反應物在-20°C 與-30°C 間之溫度攪拌達30分鐘。另外之Et3N (34 μί，0·246 mmol)及 ClC02Et (18 μί，0.185 mmol)加至反應物。在 -2(TC與- 3 0°C間之溫度下，反應物另攪拌30分鐘。在_30°C 下，逐滴加入步驟1所得粗產物於CH2C12 (2 mL)中之溶 液，反應物升溫至室溫，並攪拌2小時。藉由加入飽和 NH4C1水溶液使反應驟停。有機相以EtOAc稀釋’以飽和 -250- 200819460 NH4C1水溶液、H20及鹽水萃取。有機相然後以 Na2S〇4 乾燥，Na2S04隨後經由真空過濾移除。濾液在真空中濃 縮，所得殘餘物溶於MeOH (1.5 mL)。藉由逆相HPLC自 此溶液單離出化合物94，爲黃色固體 （35 mg，38%)° 4 NMR (3 00MHz， CD3OD)5 8.25 (d，J = 9.3Hz， 1H)，8.16 (m， 2H)，7.68 (m，3H)5 7.49 (m 1H)，7.39 (m 1H)，7.24 (dd， J = 2.1，9·3Ηζ，1H)5 6.45 (m，1H)，5.97 (m，2H)，5.69 (s5 1H)，5.26 (d，J=17.1Hz，1H), 5.08 (d，J=11.4Hz，1H)，4.63 (m，2H)，4.24 (m，1H)，4.08 (m，1H)，4.04 (s，3H)5 2.76 (dd? J = 7.2, 14.1Hz，1H)，2.43 (ddd5 J = 3.3，10.5，13.8Hz， 1H)，1.42 - 1.78 (m，8H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，3H)，1.34 (m， 1H)5 1.15 (m，1H)，1.0 4 ( s，9 H)。31 P N M R (1 2 1.4 Μ H z， CD3OD)5 41.2。LC/MS = 73 3 (M + +1)，75 5 (M + + Na)。 實例95:製備化合物95
IX (12.38g, 26_68 mmol)及 2-胺基-7-甲氧基-喹啉-4-醇（7.11g，3 7.3 5 mmol)於NMP (133 mL)中之混合物加入 Cs2C03 ( 1 0.43 g, 32.01 mmol)。反應混合物加熱至 80°C 整 -251 - 200819460 夜，及冷卻至室溫。混合物倒至鹽水（5 00 mL)及以EtOAc (600 mL)萃取。有機層以飽和NaHC03溶液（300 mL)、鹽 水（200 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物 經由組合快速層析純化，製得4.02 g之4-(2-胺基-7-甲氧 基-喹啉-4-基氧基）_吡咯烷-12 —二羧酸 1-第三丁酯2-甲 酯，產率2 6 %。 上述製得之酯（4.02g, 9.62 mmol)及 3-甲基-1-亞硝氧 基-丁烷（7.18 mL，48.5 mmol)於 HOAc (21 mL)中之混合物 在室溫下攪拌36小時，倒至H20 (500 mL)及以CH2C12萃 取（2x150 mL)。水層以鹽水稀釋（200 mL)，及以 10% MeOH/CH2Cl2萃取（2χ 1 50 mL)。混合有機層以Na2S04乾 燥及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 3.39g之4-(2-羥基-7-甲氧基-喹啉-4-基氧基）-吡咯烷-1，2-二羧酸1-第三丁酯2-甲酯，產率79%。 粗質物 4-(2-羥基-7-甲氧基-喹啉-4-基氧基）-吡咯烷-1，2-一竣酸1-第三丁酯 2 -甲酯（3.18g，7.60 mmol)溶於 POCI3 (76 mL)，並加熱至40 °C整夜。反應混合物在真空 濃縮，並溶於CH2C12 (40 mL)。加入4N HC1於1，4-二噁 烷中之溶液（40 mL)，並在室溫下攪拌1小時。粗質物在 H20與CH2C12間分配，用NaHC03及1 N NaOH將pH調 整至1 1。水層以CH2C12萃取（3x150 mL)。混合有機層以 Na2SCU乾燥及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化， 製得2.05g之4-(2 -氯-7 -甲氧基·喹啉-4-基氧基）-啦略院-1，2-二羧酸1-第三丁酯2 -甲酯。 -252- 200819460 上述製得之胺（562 mg，1.67 mmol)、2 -環戊氧基羰基 胺基-3,3-二甲基-丁酸（489.8 mg5 2.01 mmol)及 HATU (1.27g，3.34 mmol)溶於 DMF (16 mL)，及冷卻至 0°C。加 入NMM (0.74 mL，6.73 mmol)。反應混合物升溫至室溫， 並攪拌整夜。產物在H20 (3 00 mL)與EtOAc (3x100 mL)間 分配。混合有機層以 H20 (1 00 mL)、NH4C1(100 mL)、 NaHC03 ( 1 00 mL)、鹽水（100 mL)清洗，以 Na2S04 乾燥， 加以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 691.6 mg二肽甲酯，產率71%。 上述之酯（664 mg5 1.18 mmol)溶於 THF (4 mL)、H20 (4 mL)中，及加入 MeOH (4 mL)及 LiOH (142.2 mg，5.94 mmol)。反應混合物在室溫攪拌2小時。混合物以H20 (1 5 mL)/ EtOAc (20 mL)稀釋，以 1·〇 N HC1 酸化至 pH = 2，且 將兩層分離。水層以EtOAc萃取（3x50 mL)，以Na2S04乾 燥，加以過濾及濃縮，製得661 mg之酸。該酸（931 mg， 1· 87 mmol)、（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-苄基次膦酸乙酯 (548.1 mg，2.07 mmol)及 HATU (1.42g，3.74 mmol)溶於 DMF (19 mL)，並冷卻至 〇°C。加入 NMM (1·〇3 mL, 9.37 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌整夜。產物在 H20 (300 mL)與EtOAc (3x100 mL)間分配。混合有機層以 H20 ( 1 00 mL)、NH4C 1 (100 mL)、NaHC Ο3 (1 〇〇 mL)、鹽 水（100 mL)清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗 產物經由組合快速層析純化，製得1.2 1 g三肽次膦酸酯， 產率8 1 %。 -253 - 200819460 上述之三肽次膦酸酯溶於C Η 3 C N (1 m L)，及冷卻至 〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（72 μ、0.51 mmol)。反應混 合物在〇°C下攪拌45分鐘，並加入2,6-二甲基吡啶（0.5 mL)。加入MeOH (0.5 mL)，及將反應混合物濃縮。粗產 物經由HPLC純化，製得61 .5 mg之95，產率79%。4 NMR(3 00MHz，CDCl3)5:8.10(d，J = 9.3Hz，lH)，7.37-7.17 (m，6H), 7.14 (dd，J = 9.3，2·1Ηζ，1H)，7.06 (s，1H)， 5·95 (dt，J=17.1, 9·3Ηζ，1H)，5.48 (bs，1H)，5·32 - 5.21 (m， 1H), 5.11-5.03 (m, 1H)? 4.68 -4.51(m, 3H)5 4.22 (s? 1H)? 4.06 -3.9 8 (m? 1H), 3.95 (s? 1H)? 3.3 5 - 3.23 (m? 2H)? 2.73 -2.62 (m5 1H)? 2.41-2.28 (m? 1H)? 2.17 -2.04 (m? 1H)? 1.82 -1.33 (m? l〇H)? 1.03 (s? 9H); 31P (121.4MHz, CDC13)5: 47.5; LCMS (M + l): 767.06。 實例9 6 :製備化合物9 6
得自實例 95之氯喹啉（51.7 mg, 0.06 mmol)於DMF (0.43 mL)中之溶液以4-氟苯基硼酸（13.5 mg，0·1〇 mmo1) -254- 200819460 及四（三苯基膦）鈀（7.3 mg)處理。K2C03 (9 mg5 0·06 mmol) 於Η20 (0.22 mL)中之溶液加至上述混合物。反應混合物 在微波中於1〇〇 °C加熱1小時。在HPLC純化後，製得所 欲之酯（46.7 mg)。 上述之酯（44.8 mg, 0.05 mmol)溶於 CH3CN (0.53 mL)，並冷卻至 〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（37.5 μί， 0.2 7 mmol)。反應混合物在 0 °C下攪拌1小時，及加入 2,6-二甲基吡啶（0·3mL)。加入MeOH(0·3mL)，並濃縮反 應混合物。粗產物經由HPLC純化，製得17.7 mg之96， 產率 41%。iH NMR (300MHz, CDC13)6: 8.37 (d5 J = 9.0Hz， 1H)，8.20 -8.12 (m，2H)，7.71-7.44 (m，7H)，7·44 -7.18 (m， 3H)，5.96 (dt，J=16.8，1 0.2Hz? 1H)，5.83 (bs，1H), 5.25 (d， J=16.8Hz，1H)，5.11-5.04 (m? 1H)? 4.74 -4.65 (m9 2H), 4.51-4.42 (m，1H)，4.22 -4·09 (m，2H)，4.05 (s，3H)，3.26 (d，J=15.6Hz，2H)，2.87 -2.76 (m，1H)，2·54 -2.41(m，1H)， 2.16 -2.03 (m，1H), 1.71-1.28 (m，10H)，1.02 (s，9H); 31P (121.4MHz，C D C 13 ) δ : 42.3，32.6; LCMs (M+l): 827.06。 實例97:製備化合物97 -255- 200819460
得自實例95之氯喹啉（78.2 mg，〇·1〇 mmol)於DMF (0.65 mL)中之溶液以2-氟苯基硼酸（20.1 mg，0·15 mmol) 及四（三苯基膦）鈀（6.0 mg)處理。K2C03 (13.6 mg，0.10 mmol)於Η2〇 (〇·33 mL)中之溶液力[]至上述混合物。反應混 合物在微波中於100 °C加熱1小時。在HPLC純化後，製 得所欲之醋（73.3 mg)。 上述製得之次膦酸酯（73·3 mg，0.09 mmol)溶於 CH3CN (0.85 mL)，並冷卻至〇°C。逐滴力口入碘三甲基矽烷 (6 1 μ。0.43 mmol)。反應混合物在0°C下攪拌1小時，及 加入2,6-二甲基吡啶（0.3 1111〇。力[[入1^^〇11(0.3 1111〇，及 濃縮反應混合物。粗產物經由 HPLC純化，製得97。 LCMS (M+1)： 827.1 5 實例98:製備化合物98 -256- 200819460
得自實例95之氯喹啉（78.0 mg, 〇·1〇 mmol)K DMF (0.98 mL)中之溶液以3-氟苯基硼酸（21.9 mg，0.16 mmol) 及四（三苯基膦）鈀（6.4 1^)處理。尺2<：03(13.5 1^，〇.1 mmol)於Η20 (〇·3 mL)中之溶液力Π至上述混合物。反應混 合物在微波中於100 °C加熱1小時。在HPLC純化後，製 得所欲4 1 m g之酯，產率4 9 %。 上述之酯（41 mg，0.05 mmol)溶於 CH3CN (0.48 mL)， 並冷卻至 〇t。逐滴加入碘三甲基政烷（34 pL, 0.24 mmol)。反應混合物在〇°C下攪拌1小時，及力p入2,6-二甲 基吡啶（〇·3 mL)。加入MeOH (〇·3 mL)，並濃縮反應混合 物。粗產物經由HPLC純化，製得23 mg之酸98。LCMS (M + 1): 827.1 3。 實例9 9 :製備化合物9 9 -257- 200819460
得自實例95之氯喹啉（78.4 mg，0.10 mmol)於DMF (0·98 mL)中之溶液以4-甲氧基苯基硼酸（23 mg，0.15 mmol) 及四（三苯基膦）把（5.9 mg)處理。K2C03 (13·5 mg，〇·1 mmol)於Η2〇 (〇·3 mL)中之溶液力日至上述混合物。反應混 合物在微波中於100 °C加熱1小時。粗產物經由HP LC純 化後，製得4 3 . 8 mg之酯，產率5 1 %。 上述之酯（43.8 mg，0·05 mmol)溶於 CH3CN (0.5 mL)，並冷卻至 0°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（36.5 pL， 0.26 mmol)。反應混合物在0 °C下攪拌1小時，及加入 2,6-二甲基吡啶（0.3 1111〇。加入^^〇11(0.3 1111〇，並濃縮反 應混合物。粗產物經由HPLC純化，製得29 mg之酸99。 實例100:製備化合物1〇〇 -258- 200819460
得自實例95之氯喹啉（79.9 mg，0.10 mmol)於DMF (0.98 1111〇中之溶液以2-甲氧基苯基硼酸（24.4 11^，〇.16 mmol)及四（三苯基膦）鈀（5.9 mg)處理。K2C03 (13.7 mg， 0.1 mmol)於H20 (0.3 3 mL)中之溶液加至上述混合物。反 應混合物在微波中於1〇〇 °C加熱1小時。粗產物經由HP LC 純化後，製得29.9 mg之酯，產率36%。 上述之酯（29.9 mg，0.03 mmol)溶於 CH3CN (0.35 mL)，並冷卻至〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（25 μ。0.18 mmol) 〇 反應混合物在〇°C下攪拌1小時，及加入2,6-二甲 基吡啶（0.3 mL)。加入MeOH (0.3 mL)，並濃縮反應混合 物。粗產物經由HPLC純化，製得19 mg之酸100。 實例1 ο 1:製備化合物1 〇 1
-259 - 200819460 實例1 0 1 -1 03中之二肽在先前之文獻中係已知的。經 由與實例3 5相同之方法，各偶合至次膦酸苄酯ρ 1。使用 製備性 HPLC，製得（實例 l〇l)(22mg，24%)。4 NMR (3 00MHz? CD3OD)：5 8.14 (d? J = 8.8Hz? 1H), 7.90 (d5 J = 6.0Hz，1H)，7.30 (m，8H)，5.91 (m，1H)，5.84 (bs，1H), 5.21(m，1H)，5.05 (m，1H) 4.63 (m，2H)，4.50 (m，1H)， 4.03 (m，1H)，3.94 (s，3H)，3.32 (m，2H)，2.65 (m，1H)， 2.33 (m，1H)，2.11 (m，1H)，1.60 (m，10H) 1.03 (s，9H)〇 31P (121.4MHz，CD3OD):5 42.1 75.LC (跑 6 分鐘，停留時 間=4.15 分鐘）MS (733.7，M + l)。 實例102:製備化合物102
製備性 HPLC 製得（實例 1 02) (29mg，26%)。i NMR (3 0 0MHZ, CD3〇D):6 8.07 (d? J = 9.2Hz, 1H)? 7.30 (m? 8H)? 7.00 (d5 J = 8.9Hz? 1H) 6.82 (d? J = 6.1Hz, 1H) 5.92 (m9 1H), 5.30 (m, 2H)? 5.05 (m? 1H) 4.83 (bs? 1H) 4.58 (m? 1H), 4.42 (m，1H), 4.03 (m，1H)，3.90 (s，3H)，3.32 (m，2H)， 2.65 (m, 1H)，2.28 (m，1H)5 2.0 6 (m，1H)，1.60 (m，10H) 1.03 (s5 9H)。31P (121.4MHz, CD3OD)』42.159。LC (跑 6 •260- 200819460 分鐘，停留時間=4.32分鐘）MS (73 2.7, Μ + l)。 實例103:製備化合物103
製備性 HP LC 製得（實例 103) (15mg，19%)。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.18 (d， J = 8.0Hz? 1 Η), 7.80 (d, J = 8.2Hz，1H)，7·30 (m，8H)，6.97 (d J = 7.6Hz，1H) 5.92 (m, 1H)5 5.30 (m，2H)，5.05 (m，1H) 4.83 (bs5 1H) 4.56 (m， 1H)，4.45 (m，1H)，4.05 (m，1H)，3.32 (m，2H)，2.67 (m， 1H)，2.28 (m，1H)，2.07 (m, 1H)，1.60 (m，10H) 1.03 (s， 9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):3 42.125 LC (跑6分鐘，停留時間=4.37分鐘）MS (702.7, M + l)。 實例1〇4:製備化合物104
-261 200819460 化合物94 ( 1 00 mg，0· 14 mmol)溶於吡啶（3 mL)，接著 加入苯酚（129 mg，1.37 mmol)，所得溶液在60 °C下加熱1〇 分鐘。被加熱之溶液加入二環己基碳化二亞胺 （169 mgs， 0.82 mmol)，並另加熱反應混合物3小時。反應混合物然 後冷卻至室溫，並在低壓下移除溶劑。反應混合物以 EtOAc稀釋，並將固體過濾出。在低壓下移除溶劑，粗產 物經由組合快速層析以EtOAc/己烷爲洗提液，製得23 mg 次膦酸酯前藥，產率 21%。iH NMR (3 00MHz, CDC13):5 8.07 -7.99 (m9 2H)5 7.5 5 - 7.00 (m? 11H)? 5.8 9 - 5.8 3 (m? 1H), 5.45 -4.91(m, 4H), 4.3 3 - 3.96 (m9 5H)? 2.56 (m? 2H)? 1.97 -0.90 (m, 28H)。31P (121.4MHz，CDC13): 51.6 (s， 31P), 48.86 (s，31P); LC/MS: M + Na=831。 實例1 〇 5 :製備化合物1 0 5
步驟1。8-氯-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸 （5 00 mg， 1·97 mmol)及 2.0 Μ 二甲基胺於 THF (2 mL，3.94 mmol)中 之溶液溶於 DMF (20 mL)。加入 HATU (1.5g, 3.94 mmol) -262- 200819460 及NMM (69 7 mg，6·89 mmol)，所得混合物在室溫下攪拌 整夜。反應物以EtOAc稀釋，及以1NHC1酸化。將兩層 分離。有機層以 2% LiCl、飽和NaHC03溶液及鹽水清 洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得8-氯-4-羥基-7-甲 氧基-喹啉-2-羧酸二甲基醯胺。 實例58之對溴苯基磺酸酯（1〇〇 mg，0.11 mmol)及上 述製得之苯酚（35 mg，0.11 mmol)於NMP (5 mL)中之溶液 以 Cs2C03 (76 mg， 0·22 mmol)處理。反應混合物力口熱至 8 0°C達3小時及冷卻至室溫。反應物以EtOAc稀釋及以 H20清洗。水層以 IN HC1使pH = 4，及以 5% MeOH / EtOAc萃取兩次。混合有機層以 Na2S04乾燥及加以濃 縮，製得58 mg次膦酸酯。 在 0°C 下，次膦酸酯（58 mg，0.06 mmol)於 CH3CN (0.5 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（0.05 mL，0.32 mmol)。反 應混合物升溫至室溫，並攪拌3 0分鐘，然後冷卻至〇 °C。 加入2,6-二甲基吡啶（〇·32 mL)及MeOH (0·5 mL)，並攪拌 1 〇分鐘。將溶劑濃縮，及粗產物經由HPLC純化，製得酸 105。4 NMR (3 00MHz，C D 3 Ο D): δ 8 · 2 0 (d，J = 9 · 3 H z，1 Η)， 7.48 (d，J = 8.7Hz5 1H)，7.28 (m，1H)，7.14 (s，1H)，6.95 (m， 2H)，6.00 (m，1H)，5.52 (m，1H)，5.38 (m，1H)，5.12 (m， 1H)，4.62 (m，2H)5 4.31 (bs，1H)，4.17 (s，3H)，4.06 (m， 3H)，3.20 (m，6H)，2.74 (m，1H)，2.42 (m，1H)5 2.2 0 (m， 1H)? 1.70 - 1.40 (m? 8H)9 1.30 (m? 2H)? 1.01 (s，9H)。 LC/MS = 874.1 3 (M + + 1)，896.27 (M + + Na)。 -263- 200819460 實例106:製備化合物106
8-氯-4·羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸 （115 mg，0.45 mmol)及氯化錢（36 mg，0.68 mmol)溶於 DMF (4 mL)。加 入 HATU (342 mg? 0.9 mmol)及 NMM (159 mg，1.58 mmol)，所得混合物在室溫下攪拌整夜。力Π入另外之氯化 銨（72 mg，13.5 mmol)，並加熱至53 °C達18小時。反應混 合物冷卻至室溫及加以濃縮，製得8氯-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸醯胺，爲黃色固體。 實例58之對溴苯基磺酸酯 （380 mg，0.44 mmol)及8-氯-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸醯胺（100 mg，0.4 mmol) 於 NMP (3 mL)中之溶液以 Cs2C〇3 (287 mg5 0.88 mmol)處 理。反應混合物加熱至8 0 °C整夜，然後冷卻至室溫。反應 混合物以EtOAc稀釋及以H20清洗。水層以IN HC1使 pH = 4，及以EtOAc萃取兩次。混合有機層以Na2S04乾燥 及加以濃縮。製得3 3 4 mg粗產物。 在〇C下，上述製得之粗產物（78 mg，0.09 mmol)於 -264 - 200819460 CH3CN (0·5 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（89 mg，0.45 mmol)。反應混合物在〇°C下攪拌20分鐘。力□入2,6-二甲 基吡啶（0.06 mL)及Me OH (0.5 mL)，並攪拌20分鐘，在 真空中濃縮，及乾燥20分鐘，製得酸，其以TFAA處 理，製得 106。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.21(d， J = 9.6Hz，1H)，7·56 (d，J = 9.6Hz，2H)，7·44 (s，1H)，7.28 (m，1H)，6.96 (m，2H)，5.96 (m，1H)，5.54 (s, 1H)5 5.30 (d5 J=1 7. 1 Hz? 1H)5 5·1 1 (d，J=12.0Hz，1H)，4.69 -4.5 6 (m，2H)， 4.36 (bs，1H)，4.17 -4.00 (m，6H)，3.38 (m，2H)5 2·74 (m， 1H)，2.45 (m，1H)，2.20 (m，1H)，1.67 - 1.54 (m，8H)，1_47 (m，2H)，1.02 (s5 9H)。31P (121·4ΜΗζ, CDC13):5 4 1.479。 LC/MS = 8 74.1 3 (M +十 1)，8 9 6.2 7 ( M ++ N a)。 實例107:製備化合物107
在室溫下，酸 VI (160 mg，0.27 mmol)、HATU (256 mg，0.67 mmol)、酸（實例 9)(80 mg，0.54 mmol)及 NMM (148 μΐ，1.35 mmol)之溶液在DMF (1 mL)中攪拌整夜。將 -265- 200819460 溶液濃縮，及以Gilson HPLC純化，製得1 07 (2 5.3 mg, 13%)，爲白色固體。4 NMR (300MHz，CD3OD):3 8.39 (d， J = 9.0Hz? 1H)? 8.10 (d? J = 9.3Hz, 2H)? 7.79 (m? 2H)? 7.63 (s，1H)，7.58 (s，1H)，7.39 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.87 (m，2H)5 5.30 (d5 J = 9.6Hz，1H)，5.18 (d，J = 9.0Hz，1H) 4.78 (m，3H)， 4.20 (s，1H)，4·05 (s，3H)，2.80 (m，1H)，2.50 (m，1H)， 2.10 (m，1H)，1.62 (m，2H，）1.40 (m，2H) 1·05 (s5 9H)。 31P (121.4MHz，CD3OD):5 23.1 3 5。 實例1 0 8 ·.製備化合物1 0 8
如實例2所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。1Η NMR (3 00MHz, CD3OD) 8 8.3 6 (d，J = 9.3Hz，1H)，8.1 (m， 2H), 7.76 (m，3H)，7.65 (s，1H)，7.55 (d，J = 2.1Hz，1H)5 7.38 (dd，J二2.4，9.3Hz, 1H)，5.96 (dt，J = 9.9，17.1Hz5 1H)， 5.85 (s，1H)，5.26 (d，J=16.8Hz，1H)，5.08 (d，J=12Hz，1H)， 4.66 (m，2H)，4.46 (s5 1H)，4.16 (s, 1H)，4.08 (m，1H)， 4.06 (s，3H)，2.78 (dd，J = 6.6，14.1Hz，1H)，2.43 (ddd， -266- 200819460 J = 3.9, 10.2，14·1Ηζ，1H)，2.08 (m，1H)，1.83 (m5 2H)，1·39 -1.65 (brm，10H), 1.14 (dt，J = 7.8，18·3Ηζ，3H)，1.04 (s， 9H)。 31P NMR (121.4MHz, CD3〇D)5 5 0.6 LC/MS = 746.8 (M + +1) 實例109:製備化合物109
如實例10所述般製備PI次膦酸胺，及與VI偶合。 lH NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.3 8 (d? J = 9.6Hz? 1H)? 8.11 (m, 2H)，7·76 (m，3H)，7.65 (m 1H)，7.55 (m 1H)，7.24 (dd， J = 2A ? 9·6Ηζ, 1H)，6.02 (m, 1H)，5.81(m，1H) 5 5.2 2 (d， J = 9.6Hz，1H)，5.09 (d，J = 9.0Hz，1H), 4.63 (m? 2H)，4.45 (bs，1H)，4.20 (m，1H)，4.07 (m，4H)，2.80 (m，1H)，2.41 (m， 1H), 2.10 (m5 1 H) 9 1.8 9 - 1.3 3 (m， 13H)， 1.05 (m， 12H)。31P (121 ·4ΜΗζ, C D 3 O D ): δ 4 8.6 6 3 LC/MS 二 761 (M + + 1) -267- 200819460 實例1 1 0 :製備化合物1 1 ο
酸 VI (82mg，0.14 mmol)懸浮於 lmL DMF。力口入 HATU (133mg，0.35 m m ο 1 )、（ 1 -胺基-2 -乙烯基-環丙基）-(2-羥基-乙基）-次膦酸（實例24)(53mg, 0.28 mmol)，接著 加入 ΝΜΜ (77μ1，0.70 mmol)。所得溶液在室溫攪拌整 夜。所得混合物藉由 Gilson HPLC純化，製得 11〇 (28.3mg? 2 7%)，爲白色固體。NMR (300MHz， CD3OD):5 8.39 (d，J = 9.0Hz，1H)，8.10 (d，J二 9.3Hz，2H)， 7.79 (m，2H)，7.63 (s，1H)，7.58 (s，1H)5 7.39 (d，J = 8.8Hz， 1H)， 5.87 (m， 2H), 5.30 (d， J = 9.6Hz， 1H)， 5.18 (d? J = 9.0Hz，1H) 4.78 (m，3H)，4.20 (s5 1H)，4.05 (s，3H)， 3·80 (m，1H)，2.80 (m，1H)，2.50 (m，1H)5 2.20 (m，1H)， 2.10 (m，1H)，1.62 (m，2H，）1.40 (m，2H) 1.20 (d，3H)， 1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 44.493。 實例1 1 1 :製備化合物1 1 1 -268- 200819460
在室溫下，酸 VI (100 mg，〇·17 mmo1)、HATU (l61 mg, 0.42 mmol)、實例 x 之胺（65 mg，0.34 mmol)及 NMM (93 μΐ，0.85 mmol)之溶液在DMF (lmL)中攪拌整夜。將溶 液濃縮，及以 Gilson HPLC純化，製得111 (97 75%)，爲白色固體。4 NMR (300MHz，CD3OD)J 8.39 (d J = 9.0Hz，1H)，8.10 (d，J = 9.3Hz，2H), 7·79 (m，2H)，7 63 (s，1H)，7.58 (s，1H)，7.39 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.87 2H) 5·30 (d，J = 9.6Hz，1H)，5.18 (d，J = 9.0Hz，1H) 4.78 3H) 4.20 (s，1H)，4.05 (s，3H)，2.80 (m，1H)，2.50 (m，1H) 2.10 (m，1H)，1.62 (m，2H，）1.40 (m，2H) 1.05 (s，9h)。 31P (121.4MHz，CD3OD):5 3 7.043。 實例112:製備化合物n2
-269- 200819460 如實例17所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。 JH NMR (3 00MHz? CD3CN):5 8.25 (d? J = 9.0Hz? 1H)? 8.06 (m，2H), 7.80 (m 1H)，7.63 (m 3H)5 7.31 (m，2H)，6.50 (m， 1H)，5.89 (m，2H)，5.64 (bs，1H)，5.04 (d，J=16.5Hz? 1H)， 4.9 1 (d，J=10.5Hz，1 H)，4 · 6 2 (m，3 H)，4.2 0 (m，1H)，3.98 (m, 4H)，2.67 (m，1H)，2.39 (m, 1H) 1.90 (m，1H)，1.89 1.23 (m，12H)，1 · 0 5 ( s , 9 H)。31 P (1 2 1 · 4 Μ H z , C D 3 C N): δ 3 3.463。LC/MS = 7 5 9 (M + + 1)。 實例113:製備化合物113
如實例18所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。 lK NMR (3 00MHz9 CD3〇D):5 8.3 6 (d? J = 9.6Hz? 1H)? 8.08 (m, 2H), 7.76 (m, 3H), 7.65 (m 1H)，7·55 (m 1H)，7.39 (dd5 J-2.1 , 9·6Ηζ，1H)，6.63 -6.41 (m，1H)，5.96 (m，2H)，5.81 (bs，1H)，5.25 (d，J=16.8Hz, 1 H)? 5.07 (d，J=12.0Hz, 1H)， 4.65 (m，2H)，4.44 (bs，1H)，4·15 (m，1H)，4.04 (m，4H)， 2.77 (m, 1H)，2.43 (m，1H)5 2.10 (m，3H)，1.69 - 1.3 3 (m， -270- 200819460 8H)，1.05 (s5 9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 3 3.4 1 2 LC/MS = 7 5 9 (M + + 1) 實例1 1 4 :製備化合物1 1 4
]H NMR (3 00MHz, CD3OD):6 8.3 7 (d, J = 9.0Hz? 1H)? 8.09 (m，2H)，7.77 (m，3H)，7.67 (m 1H)，7.53 (m 1H)， 7.38 (m， 1H)， 5.98 (m， 1H)， 5.84 (bs, 1H)， 5.24 (d， J=16.8Hz5 1 H)? 5.07 (d，J=10.2Hz，1H)，4.70 (m，2H)，4.46 (bs，1H)，4.17 (m，1H)，4.06 (m，4H)，2.80 (m, 1H)，2.54 (m，1H)，2.21(m，1H)，1.98 (m，3H)，1.69 - 1.3 3 (m，8H), 1.05 (s， 9H) 。 31P (121.4MHz， CD3〇D):5 10.616 。 LC/MS = 7 5 7 (M + + 1)。 實例1 1 5 :製備化合物1 1 5
如實例35所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。 -271 - 200819460 lU NMR (3 00MHz? CD3〇D):5 8.3 8 (d? J = 9.3Hz, 1H), 8.10 (m，2H)，7.77 (m，3H)，7.65 (m 1H)，7·55 (m 1H)5 7.24 (m， 1H), 5.98 (m, 1H)? 5.87 (bs? 1H)? 5.27 (d? J=17.1Hz, 1H)? 5.08 (d，J = 10.5Hz，1H)，4.72 (m，2H)，4.46 (bs，1H)，4.17 (m，1H)，4.07 (m5 4H)，2.83 (m，1H), 2.48 (m，1H)，2.09 (m，1H)，1.97 (m, 3H)，1.69 - 1.3 3 (m，10H)，1.05 (s5 9H)。 31P (121.4MHz，CD3OD):6 40.676。 L C / M S = 8 0 9 (M + +1)。 實例1 1 6 :製備化合物1 1 6。
如實例83所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D)5 8.3 9 (d J = 9.6Hz, 1H)5 8.10 (dd，J=1.2Hz，5.4Hz，2H)5 7.77 (m，5H)，7.68 (s，1H)，7.55 (s，1H)，7.38 (m，2H)，6.30 (m，2H)，5.89 (m，1H)，5.82 (s5 1H)，5.20 (d，J=17.1Hz，1H)，5.07 (d，J = 8Hz，1H)，4.75 (m, 2H), 4.51(b，1H)，4.17 (s，1H)，4.07 (s，3H)，3.35 (m，2H)， 2.78 (m，1H)5 2.50 (m, 1H)，2.10 (m, 1H)，1.41- 1.78 (m， 8H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD)5 3 9.3 2。 LC/MS = 79 9 (M + +1)。 -272- 200819460 實例1 1 7 :製備化合物1 1 7
如實例87所述般製備P1次膦酸胺，及與VI偶合。 lU NMR (3 00MHz? CD3〇D)5 8.3 9 (d J = 9.6Hz, 1H)，8.10 (dd? J=1.2Hz? 5.4Hz, 2H)? 7.77 (m, 5H), 7.68 (s? 1H), 7.55 (d，J = 2.1Hz? 1 H), 7.42 (m，2H)，5.89 (br，1H)，5.75 (m， 1 H), 5.10 (d，J=17.1Hz，1H)，4.80 (d，1 H) 4.69 (m，2H)， 4.51 (b, 1H)，4.17 (s，1H)，4.07 (s5 3H)5 3.72 (m，2H)， 2.78 (m，1H), 2.50 (m, 4H), 2.17 (m，1H), 1.41-1.78 (m， 8H)，1.04 (s，9H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD)5 24.93。 LC/MS = 8 3 0 (M + + 1)。 實例1 1 8 :製備化合物1 1 8 >273- 200819460
如實例88所述般製備P 1次膦酸胺，及與VI偶合。 lR NMR (3 00MHz9 CD3OD):6 8.3 7 (d? 1H9 J = 9.3Hz)? 8.05 - 8.17 (m，2H)，7.70 -7.8 3 (m，3H)，7.68 (s，1H)，7.50 - 7.62 (m，2H)，7.35 (dd，1H，J = 9.3 及 2.1Hz)，5.89 (br，1H)， 5.72 (dt，1H，J=17.1 及 9.9Hz)，5.09 (d，1H，J=17.1Hz)， 4.70 -5.04 (m，4H)，4.51(br，lH)，4.21(br，lH)，4.04- 4.18 (m? 1H)? 4.05 (s? 3H)? 3.3 6 -3.5 0 (m? 2H), 2.82 -2.94 (m，1H)，2.80 (s, 3H), 2.5 0 -2.6 5 (m, 1H)，2.09 (br m, 1H)， 1.3 2 - 1.80 (m， 9H)， 1.05 (s， 9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):5 3 3.449。LC/MS = 8 3 0 (M + + 1)。 實例1 1 9 :製備化合物1 1 9
-274- 200819460 酸 VI (85mg，0.14 mmol)懸浮於 lmL DMF。加入 HATU (133mg，0.35 mmol)、（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）胺 基甲醯基甲基-次膦酸（59mg，0.29 mmol)，接著加入NMM (77μ1，0.7 0 mmol)。所得溶液在室溫攪拌整夜。所得混合 物藉由Gilson HPLC純化，製得119 (30mg, 27%)，爲白 色固體。1H NMR (3 00MHz，CD3OD):S 8.39 (d，J = 9.0Hz， 1H)5 8_10 (d，J = 9.3Hz，2H)，7·79 (m5 2H)，7.63 (s，1H), 7.58 (s5 1H)，7.39 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.87 (m，2H), 5.83 (s， 1H)? 5.22 (d? J = 9.6Hz, 1H)? 5.13 (d? J = 9.0Hz? 1H)? 4.78 (m，2H), 4.50 (s，1H)，4.20 (s，1H)，4.05 (s, 3H)，3.15 (m， 1H)，2.80 (m，1H)，2.50 (m, 1H)，2.10 (m，1H)，1.62 (m， 4H)9 1.40 (m， 2H), 1.05 (s? 9H)。31P (121.4MHz, CD3OD):5 3 6.428。 實例1 2 0 :製備化合物1 2 0
酸 VI (76mg，0· 1 3 mmol)懸浮於 lmL DMF。加入 HATU (123mg，〇·32 mmol)、（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-甲 -275- 200819460 基胺基甲酸基甲基-次膦酸（56mg, 0.26 mmol)，接著加入 ΝΜΜ (71μ1，0.65 mmol)。所得溶液在室溫攪拌整夜。所 得混合物藉由 Gilson HPLC純化，製得 1 20 (93mg, 91%)，爲白色固體。4 NMR (300MHz，CD3OD)J 8.39 (d， J = 9.0Hz，1H)，8.10 (d5 J = 9.3Hz，2H)，7·79 (m，2H)，7.63 (s，1H)，7.58 (s，1H)，7.39 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.87 (m，2H)， 5.30 (d，J = 9.6Hz，1H)，5.18 (d，J = 9.0Hz，1H) 4.78 (m，3H)， 4.20 (s，1H)，4.05 (s，3H), 3.30 (m，1H)，3.20 (d，1H), 3.18 (m，3H)，2.87 (s，3H)，2.80 (m, 1H)，2.50 (m, 1H)， 2·10 (m，1H), 1.62 (m，2H，）1.40 (m，2H) 1.20 (d，3H)， 1.05 (s，9H)。31P (121.4MHz，CD3OD):5 3 7.8 02。 實例1 2 1 :製備化合物1 2 1
酸 VI (100mg，0.17 mmol)懸浮於 lmL DMF。加入 HATU (161mg，0.42 mmol)、（1-胺基-2-乙烯基-環丙基二 甲基胺基甲醯基甲基-次膦酸（78mg，0·34 mmol)，接著加 入ΝΜΜ (93μ1，0.85 mmol)。所得溶液在室溫攪拌整夜。 所得混合物藉由 Gilson HPLC純化，製得121 (112mg， -276- 200819460 82%)，爲白色固體。4 NMR (300MHz，CD3OD)J 8.39 (d， J = 9.0Hz，1H)5 8.10 (d，J = 9.3Hz，2H)? 7.79 (m，2H), 7.63 (s5 1H), 7.58 (s，1H)，7.39 (d，J = 8.8Hz，1H)，5.87 (m，2H)， 5，30 (d，J 二 9.6Hz，1H)，5.18 (d? J 二 9.0Hz，1H) 4.78 (m， 3H)，4.20 (s, 1H)5 4.05 (s，3H)，3.30 (m，1H)，3.20 (d，1H)， 3.18 (m，3H)，2.87 (s，3H)，2.80 (m，1H)，2.50 (m, 1H)， 2.10 (m，1H)5 1.62 (m，2H，）1.40 (m，2H) 1.05 (s5 9H)。 31P (121.4MHz，CD3OD):3 3 7.043。 實例122:製備化合物122
化合物 94 (200 mg，0.27 mmol)溶於 ACN (5 mL)，接 著加入TEA (1 mL)及所得溶液70 °C下加熱10分鐘。所加 熱溶液加入碳酸異丁酯氯甲酯’反應混合物進一步加熱5 小時。反應混合物然後冷卻至室溫並在低壓下移除溶劑。 粗產物經由逆相製備性HPLC純化’接著凍乾，製得1 〇2 mg次膦酸酯前藥，產率 49%。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 8.0 1 -7.95 (m? 3H), 7.57 -7.48 (m9 3H)? 7.39 (s9 1H)，7.26 (m，1H)，7.09 (m，1H)，6.7 8 -6.70 (m，1H)，5.98 -277- 200819460 -5.55 (m，4H)，5.35 -5.10 (m，2H)，4.74 -4.64 (s，1H)， 4.5 5 -4.52 (m, 2H)? 4.29 -4.26 (m? 1H)? 4.07 -4.03 (m? 1H)9 3.95 _3·81 (m，4H)，3.34 -3.31 (m，1H)，2.69 -2.63 (m, 1H)， 2.38 -2·13 (m，2H)，1.99 - 1.3 3 (m，12H)，1.31- 0.80 (m， 18H)。31P (121.4MHz，CD3OD) : 53.15 (s，31P); LC/MS : M + l = 8 63 ° 實例123:製備化合物123
步驟 1。二肽（l.Og，2.70 mmol)溶於 20 mL THF 中之 溶液加入DSC (1 .38g，5·40 mmol)，接著加入NaH (60%於 礦物油中之懸浮液）（270 mg，6.75 mmol)。反應物回流 6 小時，藉由加入120 mL 1M HC1的水溶液使反應驟停’以 EtOAc萃取，及使用無水硫酸鎂乾燥之。有機相在真空中 濃縮，溶於6 mL DCM，及加至微波燒瓶。所得溶液加入 2-哌啶-1 -基-5-三氟甲基-苯基胺 （1 . 98 mg，8 · 1 0 mmol)。 將微波燒瓶密封，及置於微波裝置上。反應物加熱至65°C 達1小時。反應物經由使用Si02之矽膠管柱層析（以0%至 -278- 200819460 100% EtOAc /己烷洗提）純化，製得粗質物，爲黃色固體 (l.Og，58%)。LC/MS = 641 (M+ +1)
步驟2。所得粗質物（1 0 0 m g，0 . 1 5 6 m m)溶於1 . 5 m 1 吡啶中之溶液加入Nal (467 mg，3.12 mm)。反應物加熱至 1 1 5 °C達 6小時。冷卻回至室溫後，在高真空下移除吡 啶。所得粗質物溶於2 mL H20，以二乙醚（2x5mL)清洗， 及加入3M HC1水溶液調整PH = 2。所得粗質酸經由EtOAc 萃取（2x30mL)而單離之，且不進一步純化直接用於下一步 驟。所得粗質酸加入（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-甲基-次膦 酸（實例 1)(50 mg，0.312 mm)、HATU (148mg，0.390 mm)、NMM (7 9 mg，0·7 8 mm)及 DMF (5 mL)。反應物在室 溫下攪拌12小時。反應溶液被過濾之及經由逆相HPLC (以10°/。至75% H20 / CH3CN洗提）純化，製得123，爲白 色固體（45 mg，37%)。4 NMR (3 00MHz，CD3CN):S 7.39 (m, 3H)，6.ll(br，1H) 5 5.8 5 (m，1H), 5.41 (bs, 2H)，5.21 (m，1H)，5.03 (m，1H)，4.90 -4.40 (m，6H)，4.33 (m，1H), 3.90 (m5 1H)，2.95 -2.80 (m，6H)，2.45 -2.3 5 (m，2H)，2.17 -2.07 (m，1H)5 1.8 5 - 1.3 3 (m，17H)，1.02 (s，9H)。31P NMR (1 2 1 ·4ΜΗζ，C D 3 C N ) : δ 5 1 · 2 9 7。L C/M S : 7 7 0 (M + + 1)。 實例124:製備化合物124 -279- 200819460
步驟1。5 -羥基-1 , 3 -二氫-異吲哚-2 -羧酸第三丁酯 (2.00g，0.85 mmol)及 2-氯-N，N-二甲基乙胺鹽酸鹽（1.47g， 1.02 mmol)溶於 20 mL CH3CN。加入碳酸鉋（6.92g, 2.12 m m ο 1)，且所得溶液加熱至6 5 °C達1 8小時。混合物冷卻至 室溫，並將固體過濾掉。將濾液濃縮，殘餘物溶於1 5 % MeOH/CH2Cl2，以Η 2 Ο清洗兩次，以N a2 S Ο 4乾燥，加以 過濾及濃縮。粗產物經由矽膠管柱層析（CH2Cl2/MeOH)層 析，製得胺 （2.50g，19 %)，爲棕色臘狀固體。1H NMR (3 00ΜΗΖ，CDC13)：5 7.16 (m? 1H)? 6.85 (m? 2H) 5 5.3 0 (s? 1H)? 4.61 (t, 4H), 4.08 (m9 2H) 2.77 (m? 2H)? 2.35 (s? 6H)? 1 ·5 1 (s，9H)。 步驟 2。所得胺（480 mg, 1 .57 mmol)以 5 mL 4N HC1 / 1，4-二噁烷及2 mL CH2C12處理。反應混合物在室溫攪拌 整夜。將溶液濃縮，與甲苯（X 2)、CHC13共蒸發，及在真 空下乾燥，製得二胺（416 mg，95%)，爲深色固體。 步驟3。二肽，1-(2-環戊氧基羰基胺基-3,3-二甲基丁 醯基）-4-羥基-吡咯烷-2-羧酸甲酯（200 mg，0.54 mmol)溶於 2 mL CH2C12，及加入 CDI (109 mg，0.67 mmol)。所得混 合物在室溫下攪拌5小時。三乙胺（0.24 mL，1.72 mmol)及 -280- 200819460 二胺（377 mg，1·35 mmol)於 1 mL CH2CI2 中之混合物加 至反應物。反應混合物在室溫下攪拌整夜。將溶液濃縮’ 及產物在H20及1 5% MeOH / CH2C12 (X 3)間分配。將有 機層濃縮，及使用Gilson HPLC純化之，製得酯（277 mg， 85%)。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 7·16 (d，J = 8.3Hz，1H)， 7.08 (d，J = 8Hz，1H)，6·85 (m，2H)，6.73 (s，1H)，5.38 (s， 1H)，5.21 (d，J = 9.5Hz，1H)，4.72 (t，2H), 4.66 (m，2H), 4.25 (m? 2H) 5 4.0 5 (m? 2H)? 3.79 (s, 3H)? 2.79 (m5 2H)? 2.54 (m，1H)，2.47 (s，6H)，2.22 (m，1H)，1.61(m, 1H), 1.55 (m，2H), 1.45 (m，2H), 1.04 (s, 9H)。 步驟 4。酯（275 mg，0.46 mmol)溶於 4 mL H2〇 / CH3CN (1 / 1)，及力口入 NaOH (183 mg5 4.60 mmol)。反應 混合物在室溫下攪拌1小時。在真空移除CH3CN，及水層 以IN HC1酸化之。產物以15% MeOH / CH2C12萃取（X 3)，加以乾燥（Na2S04)，過濾及濃縮。粗產物（201 mg， 75%)偶合至次膦酸（實例1)，製得124 (52 mg，21%)，爲 白色泡沬。1H NMR (3 00MHz，CD3OD)J 7·29 (d，J = 8.6Hz， 1H)，7.19 (d5 J = 8.2Hz5 1H)，7.01(m，2H), 5.96 (m，1H)， 5.31 (s，1H)，5.12 (d，J=10.7Hz，1H)，4.68 (t，2H)，4.50 (t， 1H)? 4.38 (s? 1H)9 4.14 (s? 1H) 5 3.8 4 (d, 1H)? 3.62 (m? 2H)? 3.31 (s，3H)，2.98 (m，6H)，2.44 (m，1H)5 2.21 (m，1H)， 2.18 (m，1H)，1.61 (m，1H)，1.55 (m5 2H)，1.45 (m，2H), 1.04 (s5 9H);，31P (121.4MHz，CD3OD):5 47.57。 -281 - 200819460 實例125:製備化合物125
次膦酸（10 mg，1·3 μπιοί)溶於 H20 (0.2 mL)，及以 0.1N NaOH處理使pH=l 1。將所得混合物凍乾，溶於NMP (0.3 mL)及加熱至6(TC。加入TEA (7 μΙ〇及碳酸異丁酯氯 甲酯（19 mg，0.013 mmol)。反應混合物在60°C攪拌1小 時。反應混合物冷卻至室溫，及經由 HPLC純化，製得 4.5 mg 之 125，產率 39%。NMR (300MHz，CD3OD):3 8.30 (d，J = 9.3Hz，1H)，8·20 (s，1H)，7.80 (m，2H)，7.35 (d， J = 9.0Hz, 1H)，6.0 5 - 5.60 (m，4H), 5·40 (m，1H)，5.20 (m， 1H)，4.65 (m，2H)，4.45 (broad, s，1H)? 4.20 -4.00 (m，7H)， 2.80 (m，1H), 2.45 (m，1H)，2.20 (m，1H), 1.8 0 - 1.45 (m， 10H)，1.40 - 1 .22 (m，14H), 1.00 (m，1 0 H); 31 P (1 2 1 · 4 Μ H z， CD3OD):5 57.1 7, 52.94; LC/MS: 913。 實例126:製備化合物126 -282- 200819460
个 根據類似於化合物125之製備的實驗製程，製得18.4 mg 之化合物 126。iH NMR (300MHz，CD3OD)J 7.91·8·15 (m，5Η)，7.31- 7·66 (m，7Η)，7.23 (s，1Η)，7·07 (d，1Η， J = 8_7Hz)，5.79 -6.10 (m，3H)，5.45 -5.5 6 (br m，1H)，5.34 及 5·28 (二 d，1H，J=〜11Hz)，5 · 1 7 及 5.0 8 (二 d，1 H 5 J = 〜11Hz)，4.73 (br m，1H)，4.46 - 4 · 5 7 (b r m，2 H)，4 · 2 6 ( s， 1H)，3.9 8 -4.0 8 (m, 1H)，3.95 及 3.91 (:s，3H)，2.56- 2.70 (m? 1H), 2.23 -2.3 8 (m? 1H)? 2.09 -2.23 (m, 1H), 1.37 -1.83 (m，13H)，1.05 及 1.02 (二 s，9H)。31P (121.4MHz， CD3OD):3 57·517，5 3.03 1。LC/MS = 867 (M + +1)。 實例127:製備化合物127
-283- 200819460 化合物 94 (200 mg，0.27 mmol)溶於 ACN (5 mL)，接 著加入TEA (1 mL)，所得溶液在70°C下加熱10分鐘。所 加熱溶液加入碳酸異丁酯氯甲酯，反應混合物進一步加熱 5小時。反應混合物然後冷卻至室溫，並在低壓下移除溶 劑。粗產物經由逆相製備性HPLC純化，接著凍乾，製得 102 mg 次膦酸酯前藥，產率 49%。4 NMR (3 00MHz， CDC13):5 8.06 -8.0 1 (m? 3H)? 7.56 -7.48 (m? 4H), 7.21- 7.01(m，3H)，6.14 -6.08 (m，1H)5 5.8 7 -4.9 8 (m，6H)，4.59 -3.97 (s，8H)，3_34 -3.31 (m，1H)，2.5 8 -2.52 (m，2H)， 2.20 - 1.96 (m5 1H), 1.70 - 1.04 (m，26H)。31P (121.4MHz， CDC13): 51.12 (s5 31P); LC/MS: M + l = 8 3 5，M + Na=8 5 7。 實例128:製備化合物128
化合物94 ( 1 00 mg，0· 14 mmol)溶於吡啶（3 mL)，接著 加入間氯苯酉分（1 7 5 m g，1 . 3 7 m m ο 1)，所得溶液在6 0 °C下加 熱1 0分鐘。所加熱溶液加入二環己基碳化二亞胺 （169 mg，0.8 2 mmol)，及反應混合物進一步加熱3小時。反應 -284- 200819460 混合物然後冷卻至室溫，並在低壓下移除溶劑。以EtOAc 稀釋反應混合物，及過瀘固體。在低壓下移除溶劑，及以 組合快速層析（EtOAc/己烷）純化粗產物’製得46 mg次膦 酸酯前藥，產率40%。1HNMR(300MHz，CDCl3):δ8.10-7.99 (m，2H)，7.5 7 -6.99 (m，10H)，5.89 - 5.8 3 (m，1H)， 5.41- 4.93 (m? 4H)? 4.73 -3.96 (m? 5H)5 3.1 5 - 2.8 0 (m? 2H)? 2.56 (m, 1H)，2.05 0 · 9 1 ( m，2 7 H )。31 P (1 2 1 · 4 MH z， CDCls): 51.12 (s? 31P); LC/MS: M + l = 843 ° 實例1 2 9 :製備化合物1 2 9
酸化合物 58 ( 1 28 mg，0.14 mmol)溶於 CH3CN (2.5 mL) 及加熱至65°C達l〇分鐘。加入TEA (0.2 mL，1.41 mmol) 及BOMC 1 (480 mg，2.82 mmol)。反應混合物在65°C下攪 拌24小時及冷卻至室溫。藉由加入H20使反應驟停，及 將有機溶劑蒸發掉。水層以EtOAc萃取。水層調整至 pH = 2，及以EtOAc萃取。混合有機層以Na2s〇4乾燥，力口 以過濾及濃縮。粗產物經由Η P L C純化，製得1 〇 m g之 -285- 129 ° 200819460 實例1 3 0 :製備化合物1 3 0
化合物 35 (725 mg，0.831 mmol)於 CH3CN (20 mL)中 之溶液加入TEA (1.16 mL，0.831 mmol)，所得溶液在70 下加熱10分鐘。然後將P0C-C1加至反應混合物，並持續 加熱5小時。混合物在低壓下濃縮，及以逆相HPLC純 化，製得 219 mg次膦酸酯前藥，產率 27%。4 NMR (3 00MHz，CD3〇D):5 8.89 (s? 1H), 8.30 (m? 1H), 8.18 (s, 1H)5 7.76 (s，ih)，7.3 5 -7.23 (m，6H)，6.03 - 5.77 (m，2H)， 5.5 7 -5.2 8 (m，3H)，5.15 -5.01 (m，2H)，4.86 -4.65 (m，2H)， 4-45 (s9 1H), 4.22 -4.05 (m? 5H)9 3.6 5 - 3.2 0 (m? 2H)? 2.81-2.74 (m? 2H)5 2.5 0 -2.44 (m9 2H)5 2.18 -2.15 (m? 1H)5 1·77 - 1.23 (m 5 2 3 H)，1.19 -0.97 (m，10H)。31P (121.4MHz， CD3OD): 4 8.5 5; LC/MS : M + l = 9 8 9。 實例1 3 1 :製備化合物1 3 1 -286- 200819460
根據類似於化合物1 3 0之製備所述之實驗製程，製得 15 mg 化合物 131。iH NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.05 (d， 1H，J = 9.6Hz)，7.48 及 7.46 (二 s，1H)，7.43 (s，1H)，7.36 (d，1H)，7.04 (dd，1H，J = 9.6Hz)，5.76 - 6 · 0 6 (m，1 H)，5 · 5 6 -5·76 (m，2H)，5.48 (br，1H)，5.26 -5.3 8 (m，1H)，5.14 (appt t，1H，J =〜12Hz)，4.78 (br，1H)，4.46 -4.57 (m, 2H), 4.28 (s，1H)5 4.06 (br d, 1H，J =〜1 1 H z)，3 · 9 5 (s， 3H)，3.8 8 -4.00 (m，1H)，3.80 及 3.72 (二 s，3H)，2.94 (br m，0.5H)，2.62 -2.75 (m，1.5H)，2.22 -2.42 (m，1H)，2.06 -2.22 (m，1H)，1.42 - 1.84 (m，1 OH), 1.32 (d，6H，J = 6.6Hz)? 1.27 - 1.3 6 (m? 1H)，1 .20 ( appt t，1H，J = 7.4Hz)，1 .06 及 1.04 (二 s, 9H)。31P (121.4MHz, CD3〇D):5 5 7.60 8, 5 3.23 2。LC/MS = 8 8 5 (M + + 1)。 實例1 3 2 :製備化合物1 3 2 -287- 200819460
NH
次膦酸（500 mg, 5.73 mmol)及醇（1.87g，57.3 mmol)溶 於 DMF (3 mL)。加入 PyBop (843 mg, 20.06 mmol)、TEA (0.4 mL，2 8.65 mmol)及 DMAP (14 mg，1.15 mmol)。反應 混合物在室溫下攪拌3小時及加以濃縮。產物在鹽水與 CH2C12間分配三次。有機層以Na2S04乾燥及力口以濃縮。 殘餘物經由組合快速層析純化，製得406 mg中間物矽烷 醚，產率60%。所得矽烷醚（406 mg，3.44 mmol)溶於THF (3 ML)及力口入 1.0 M TBAF 的 T H F 溶液（0 · 4 3 m L，4 · 3 mmol)。反應混合物攪拌1小時及加以濃縮。產物在H20 與CH2C12間分配。將有機層濃縮，及經由HPLC純化， 製得 227 mg 之 132，產率 70%。4 NMR (3 00MHz, CDC13 ):5 8.8 0 (s? 1H)? 8.20 (m? 1H)? 7.80 (m, 2H), 7.65 (m? 3H)? 7.45 -7.17 (m5 6H)? 5.8 0 - 5.6 5 (m, 2H)? 5.40 - 5.05 (m，4H)，4.65 (m，2H)，4.40 -3.95 (m，8H)，3.60 -3.20 (m，3H)，2.70 (m，1H)，2.00 (m，1H), 1.80 ·1·35 (m，13H)， 1.05 -0.95 (m5 16H); 31P (121.4MHz， CDC13):5 5 0.24, 4 8.92; LC/M S ·· 943。 實例1 3 3 :製備化合物1 3 3 -288- 200819460
步驟 1。4,5-二甲基-2 -酮基-1，3-二噁茂（dioxole)(5g， 43.8 2 mmol)、NBS (8.19g，46.01 mmol)及過氧化苯甲醯 (20 mg)溶於CC14 (3 0 mL)，及加熱至80°C達1·5小時。反 應混合物冷卻至室溫，及將固體過濾掉。將濾液濃縮。殘 餘物經由矽膠管柱純化，製得8.29 g之4-溴甲基-5-甲基-2-酮基-1，3-二噁茂，爲黃色油狀物。TEA (12 mL，86·1 mmol)逐滴加至 4-溴甲基-5-甲基-2·酮基-1，3-二噁茂（6g， 31.09 mmol)及甲酸（3.36 mL)於 CH3CN (96 mL)中之溶 液，同時將溫度維持在20 °C以下。混合物在室溫下攪拌2 小時及加以濃縮。產物在H20與EtOAc間分配三次。有 機層以Na2S04乾燥，加以濃縮及在真空中乾燥，製得粗 質甲酸酯。所得甲酸酯溶於Me Ο Η (40 mL)，及加入〇·5 m L濃H C1。所得混合物在室溫下攬拌5小時，加以濃 縮，及與甲苯共蒸發。粗產物經由矽膠管柱純化，製得 2.8g之4-羥基甲基-5-甲基-2-酮基-1，3-二噁茂，產率 69%。4 NMR (300MHz，CDC13):6 4.40 (s5 2H)，2.60 (brs， 1H)，2.20 (s，3H)。 次膦酸（150 mg，0.17 mmol)及4 -羥基甲基-5 -甲基-2- -289- 200819460 酮基-1,3-二噁茂（112 mg，0.85 mmol)溶於 DMF (1 mL)。 加入 PyBop (179 mg，0.34 mmol)、TEA (0.07 mL，0.51 mmol)及DMAP (7 mg)。所得混合物在室溫下攪拌整夜。 產物在NaHC03水溶液與EtOAc間分配三次。有機層以 NH4C1及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產 物先後經由HPLC及矽膠管柱純化，製得40 mg (133)，產 率 24%。4 NMR (3 00MHz，CDC13):6 8.00 (d5 J = 9.3Hz， 1H)，7·5 (s，1H)，7.40 (m，2H)，7.30 -7.20 (m，5H)，7.00 (d，J = 8.7Hz，1H)，5.95 - 5 · 8 0 (m，2 H)，5 · 4 0 - 5 · 1 0 (m，5 H)， 5.00 (brs，1H)5 4.70 -4·40 (m，5H)，4.00 (s，5H)，3.70 (m， 1H)，3.30 (m，2H)，2.80 (m，1H)，2.60 (m，1H)，2.00 -1.35 (m? 16H)? 1.05 (m? 12H); 31P (121.4MHz? CDC13)：6 5 0.8 1, 47.3 9; LC/MS: M + l = 985。 實例1 3 4 :製備化合物1 3 4
步驟1。2-第三丁氧羰基胺基-戊二酸1-苄酯（4.06g， 12 mmol)及 TEA (5 mL，35.87 mmol)溶於 THF (60 mL)， 及冷卻至 Ot：。逐滴加入氯甲酸乙酯（3.4 mL，35.7 -290- 200819460 mmol)。所得混合物在〇°C下攪拌5分鐘’及升溫至室溫1 小時。加入 NaBH4 (1 .88g，49.7 mmol) ’接著加入 1滴 H20。反應混合物在室溫下攪拌整夜。在〇°C下加入4N HC1，及以 EtOAc (100 mL)萃取。水層以 H20 ( 1 00 mL)、 NaOH (2x100 mL)、H20 ( 1 00 mL)及鹽水（100 mL)清洗。 有機層以Na2S04乾燥，力口以過濾及濃縮。粗產物經由組 合快速層析純化，製得2.89 g之2-第三丁氧羰基胺基- 5-羥基-戊酸苄酯，產率75%。 醇2-第三丁氧羰基胺基-5-羥基-戊酸苄酯（1.64g，5.07 mmol)於醚（15 mL)中之溶液加入 Ag2〇 (4.08g，17.61 mmol) 及烯丙基溴（2.6 mL，29.87 mmol)。反應混合物在室溫下攪 拌整夜。反應混合物經由塞里塑料過濾及加以濃縮。粗產 物經由組合快速層析純化，製得940 mg之5-烯丙氧基-2-第三丁氧羰基胺基-戊酸苄酯。 步驟2。5-烯丙氧基-2-第三丁氧基羰基胺基-戊酸苄 酯（5.95g，16.38 mmol)於 CH2C12 (100 mL)中之溶液加入 4 N HC1的1，4-二噁烷溶液（1〇〇 mL，400 mmol)。反應混合 物在室溫下攪拌2小時，加以濃縮，及在真空下乾燥，製 得胺鹽酸鹽。所得胺鹽酸鹽溶於THF (150 mL)及H20 (25 mL)。加入TEA (7 mL，50.2 mmol)及碳酸環戊酯2,5 -二酮 基-吡咯烷-1-基酯（3.92g，17.25 mmol)。反應混合物在室 溫下攪拌1小時。加入H20 (200 mL)，及經由旋轉蒸發減 少有機溶劑。剩下之混合物以EtOAc萃取（3x150 mL)。混 合有機層以IN HC 1、H2〇及鹽水清洗，以Na2S04乾燥， 291 - 200819460 加以濃縮及乾燥，製得6.41 g酯，爲粗產物。 上述之酯（6.41g，17.07 mmol)溶於 THF (65 mL)/ H20 (75 mL)及加入 LiOH (1.63g，3 8.8 5 mmol)。反應混合物在 室溫攪拌整夜，並以EtOAc稀釋。反應混合物以IN HC1 酸化至pH = 2，及將兩層分離。水層以EtOAc萃取（3x150 mL)。混合的有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，在真空 下濃縮及乾燥，製得4.87 g之5-烯丙氧基-2-環戊氧基羰 基胺基-戊酸。 步驟 3·中間物 XII (2.25g，3.07 mmol)於 CH2C12 (20 mL)中之溶液加入4N HC1的1,4-二噁烷溶液（20 mL，80 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌1小時，加以濃縮，及 在真空中乾燥，製得胺鹽酸鹽。所得胺鹽酸鹽及酸（1.05 g, 3.67 mmol)溶於 DMF (30 mL)。加入 HATU (2.36g，6.20 mmol)及NMM (1.56g，15.46 mmol)，所得混合物在室溫下 攪拌2小時。反應物以EtOAc稀釋及以20% LiCl清洗（2x 100 mL)。有機層以 NH4C1水溶液 （200 mL)清洗，以 Na2S04乾燥，及力口以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 化，製得2.5g二烯，產率94%。 步驟 4。上述之二嫌（2.59g，2.87 mmol)溶於 CH2Cl2 (3 00 mL)及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G 1 (664.5 mg，0.73 mmol)，並另脫氣20分鐘。反應混合物加熱至 45 °C整夜，及冷卻至室溫。加入三（羥基甲基）膦（5.03 g， 40.54 mmol)，接著加入 TEA (11.2 mL，80.35 mmol)及 H20 (47 mL)。反應混合物加熱至45°C達4小時，然後置 -292- 200819460 於室溫整夜。將兩層分離。有機層以0.5 N HCl、鹽水清 洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速 層析純化，製得1.03 g大環次膦酸酯。 步驟5.上述之次膦酸酯（l.OOg，1.15 mmol)及8-氯-2-(2-異丙基胺基-噻唑-4-基）-7-甲氧基-喹啉-4-醇（469 mg)於 NMP (12 mL)中之溶液以Cs2C03 ( 1.20 g)處理。反應混合 物加熱至70 °C整夜，然後冷卻至室溫。反應物以5% LiC 1 (150 mL)稀釋及以EtOAc萃取（3x150 mL)。混合的有機層 以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由 組合快速層析純化，製得964.3 mg所欲之產物。 上述製得之產物（964.3 mg，0.98 mmol)於 DME (10 mL)/ H2O (1 mL)中之溶液加入對甲苯磺醯肼（1.37g，7.36 mmol)及 NaOAc (1.22g，14·8 mmol)。反應混合物力口熱至 95t達2小時，及冷卻至室溫。混合物以EtOAc稀釋（125 mL)及以飽和NaHC03溶液清洗（2x50 mL)。水層以EtOAc 萃取（25 mL)。混合有機層以鹽水（25 mL)清洗、以Na2S04 乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 43 7.6 mg 之 134。4 NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8·36 (d， J = 8.9Hz，1H)，8·19 (s，1 H)，7 · 9 0 (s，1 H)，7 · 6 4 (d，J = 9.7 H z， 1H)，7.2 (m，1H)，6.86 (m，2H)，5.9 (bs，1H)，4.77 (m，1H)， 4.63 (m，1H)5 4.4 0 (m，1H)，4.3 -3.95 (m，8H)，3.60 (bs， 3H)，3.5 5 -3.3 5 (m，5H)，2.81 (m，1H)，2.68 (m，1H) 2.15 -25H) 。 LC/MS = 959.29 (M + +1 LC/MS = 9 5 9.29 (M + +1) 0 -293- 200819460 實例1 3 5 :製備化合物1 3 5
全部經保護之次膦酸酯（如實例5 8所述般合成，經 B 〇 c保護基保護）以H C 1處理，以移除B 〇 c保護基。所得 胺用於製備化合物135-141。 此胺（390 mg，0.47 mmol)於 EtOAc (50 mL)中之溶液 加入飽和NaHC03溶液（60 mL)及劇烈攪拌。加入環戊基乙 醯氯（76 mg，0.52 mmol)於EtOAc (1 mL)中之溶液，並攪 拌1 5分鐘。將兩層分離。有機層以鹽水清洗及加以濃 縮。經乾燥殘餘物溶於CH3CN (5 mL)及冷卻至0°C。加入 碑三甲基砂院（0.60 mL，2.37 mmol)。反應混合物升溫至室 溫，攪拌〇·5小時，及冷卻至0°C。加入2,6-二甲基吡啶 (1.5 mL，4.73 mmol)，接著加入 MeOH (5 mL)。在真空中 將混合物濃縮。殘餘物經由HPLC純化，製得3 3 7.2 mg化 合物 135。4 NMR (3 00MHz，CD3〇D):5 8.25 (d? J = 9.0Hz5 1H)? 8.15 (s? 1H)? 7.76 (s? 1H), 7.73 (d? J = 2.1Hz? 1H)9 7·32 (dd，J = 2.4，9·0Ηζ，1H)，7.23 (t，J = 7.8Hz，1H)，6.90 (t， J = 7.8Hz， 2H)， 5.99 (m， 1H)， 5.78 (brs, 1H)， 5.30 (d， -294- 200819460 J=15.3Hz，1H)，5.12 (d? J=11.7Hz，1H), 4.67 (m，2H)，4.50 (m，1H)，4.14 (m，2H)，4.05 (s，3H)，3.40 (m，2H)，2.75 (m， 1H)，2.63 (m，1H)，2.0 -2.4 (m，3H)5 1.91(m，1H)，1.4 -1.7 (m，8H)，1.34 (d，J = 6.3Hz，6H), 0.95 - 1.15 (brs，11H); 31P (121.4MHz? CD3〇D):5 42.09 1; LC/MS = 907 (M + +1)。 實例1 3 6 :製備化合物1 3 6
根據類似於化合物135之製備中所述實驗製程，製備 化合物 136。iH NMR (3 00MHz，C D 3 〇 D): δ 8.25 (d， J = 9.0Hz，1H)，8.17 (s，1H)，7.76 (s，1H), 7.75 (d, J = 2.1Hz， 1H), 7.33 (dd9 J = 2.1 ? 9.0Hz, 1H), 7.26 (t，J = 7.8Hz，1H)， 6.93 (t，J = 7.8Hz，2H)，5.97 (m5 1H)，5.50 (brs，1H)，5.31 (d，J=15.9Hz? 1H)? 5.12 (d，J=12.0Hz，1H)，4.66 (m，2H)， 4.49 (t，1H)，4.14 (m，2H)，4.06 (s，3H)，3.41 (d，2H)， 2.77 (m，1H)，2.56 (m，1H)，2.22 (m，1H)，2.06 (m，2H)， 1.62 (m，1H)5 1.47 (m，1H)，1.2 -1.4 (m，8H)，1.07 (s，9H)， 0.80 (t，J = 7.4Hz，3H); 31P (121.4MHz，CD3OD):5 4 1.043。 -295- 200819460 實例1 3 7 :製備化合物1 3 7
根據類似於化合物135之製備中所述實驗製程’製備 化合物 137。NMR (300MHz，CD3〇D):5 8.26 (d, J = 9.0Hz5 1H)? 8.17 (s, 1H)? 7.76 (s? 1H), 7.75 (d? J = 2.7Hz9 1H), 7.32 (dd? J = 2.7? 9.2Hz? 1H)5 7.2 6 (t? J = 7.8Hz9 1H), 6.93 (t，J = 7.8Hz，2H), 5.97 (m，1H)，5.81(brs，1H)，5.31 (dd，J=1.4，17.0Hz，1H)，5.12 (dd，J=1.4, 10.5Hz, 1H)， 4.70 (m，2H)，4.41 (t，1H)，4.14 (m，2H)，4.05 (s, 3H)， 3.41(d，2H)，2.79 (m5 1H)，2.57 (m，1H)，2.33 (m，2H)， 2.19 (m，1H)，2.04 (m，2H)，1.64 (m，1H)，1.46 (m，1H)， 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)，1.06 (s，9H); 31P (121.4MHz， CD3OD): δ 41.952。 實例1 3 8 :製備化合物1 3 8 -296- 200819460
根據類似於化合物13 5之製備中所述實驗製程，製備 化合物 I38。NMR (300MHz， CD3OD):5 8.25 (d， J = 9.3Hz，1H)，8.18 (s5 1H)，7.76 (s，2H)，7.33 (dd, J = 2.4, 9.0Hz? 1H), 7.26 (t? J = 7.8Hz? 1H)? 6.93 (t? J = 7.8Hz5 2H)? 5.97 (m，1H), 5.79 (brs，1H)，5·32 (d5 J=15.9Hz，1H)，5.13 (d，J=12.0Hz，1H)5 4.67 (m，2H)，4.48 (t，1H)，4.14 (m5 2H)，4.05 (s，3H)，3.42 (d5 2H)，2.78 (m，1H)，2.57 (m5 1H)9 2.2 0 (m， 1H)， 1.98 (d，J=12.6Hz? 1H), 1.90 (d， J=12.6Hz，1H)，1.64 (m，1H)，1.48 (m，1H)，1.34 (d5 J = 9.6Hz, 6H)，1.06 (s，9H，0·80 (s，9H); 31P (121.4MHz， CD3OD):3 4 1.077; LC/MS = 8 95 (M + + 1)。 實例1 3 9 :製備化合物1 3 9。
-297- 200819460 根據類似於化合物135之製備中所述實驗製程，製備 化合物 139 。 1H NMR (3 00MHz， CD3〇D):8 8.27 (d， J = 9.6Hz，1H)，8.16 (s，1H), 7.74 (s，2H)，7.34 (dd5 J = 2.1， 9.3Hz? 1H)5 7.2 5 (t? J = 7.8Hz? 1H)? 6.92 (t? J = 7.8Hz, 2H), 5.96 (m，1H)，5.79 (brs，1H)，5.30 (d，J=17.1Hz, 1H)，5.12 (d，J=10.5Hz, 1H)，4.72 (t，1H)，4.52 (d，1H)，4.14 (m， 2H)，4.05 (s，3H)，3.41 (d, 2H)，3.00 (t，J = 8.3Hz，2H)， 2.59 (m，3H)，2.19 (m, 1H)，2.04 (m，2H)，1.63 (m，1H)， 1.47 (m，1H), 1.34 (d5 J = 6.3Hz? 6H)5 1.10 (s9 9H); 31P (121.4MHz，CD3OD):6 3 8.1 90，40.829。 實例1 4 0 :製備化合物1 4 0。
步驟1。乙醯亞胺酸乙酯鹽酸鹽（1.23g，9.95 mmol)及 2,2,2-二氟乙基胺鹽酸鹽（l.35g，9.95 mmol)溶於 CH2CI2 (32 mL)/ H2〇 (3.2 mL)。加入 K2CO3 (〇.69g5 4.98 mmol) ’ 並攪拌30分鐘。將兩層分離。水層以CH2C12萃取（2x10 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥及力卩以濃縮，製得1.48g -298- 200819460 所欲之醯胺化物，爲淡黃色液體，產率87%。 步驟 2。次膦酸酯（500 mg，0·54 mmol)溶於 CH3CN (5 mL)，及冷卻至〇°C。加入碘三甲基矽烷（0.77 mL)。反應 混合物升溫至室溫，攪拌〇 · 5小時，及冷卻至0 °C。加入 2,6二甲基吡啶（1.30 mL)，接著加入MeOH (5 mL)。將混 合物濃縮，與CH2C12共蒸發兩次及在真空下濃縮，製得 所欲之胺基次膦酸，爲2,6-二甲基吡啶鹽。 步驟3。得自步驟2之胺基次膦酸（80 mg，0.025 mmol) 溶於DMF (0.45 mL)及0.1 N磷酸鹽緩衝劑（0.9 mL)。藉由 加入2N NaOH (8 6 μΙ〇將pH調整至9。加入得自步驟1之 酿胺化物（150 mg，0.89 mmol)於DMF (0.1 mL)中之溶液， 並攪拌1 8小時。將反應混合物過濾，濾液經由HPLC純 化，製得 8.8 mg 化合物 140。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):6 8.27 (d, J = 9.6Hz, 1 Η)，8 · 1 6 ( s，1 Η)，7 · 7 4 (s， 2H)，7.34 (dd，J = 2.1, 9·3Ηζ，1H)，7.25 (t, J = 7.8Hz，1H)， 6.92 (t，J = 7.8Hz，2H)，5.97 (m，1H)，5.79 (brs，1H)，5.30 (d，J=17.1Hz，1H)5 5.12 (d，J=l〇.5Hz，1H)，4·72 (t，1H)， 4.52 (d，1H)，4·14 (m，2H)，4.05 (s，3H)，3.41 (d，2H), 3.31 (s，3H)，3.01(t，J = 8.3Hz，2H), 2.80 (m，1H)，2.59 (m， 5H)，2.19 (m，1H)，1.63 (m，1H)，1.47 (m5 1H), 1.34 (d5 J = 6.3Hz，6H)，1.10 (s，9H); 31P (1 2 1.4 Μ H z，C D 3 O D ): δ 40.829 ° 實例1 4 1 :製備化合物i 4 i -299- 200819460
步驟1。α-酮基酯酮基-苯基-乙酸甲酯（820 mg，5 mmol)及 Deoxo-Fluor (2.43g，11 mmol)之混合物加熱至 4 5 T：，及在N2中攪拌16小時。所得混合物冷卻至室溫’ 倒至冰水，及加入CH2C12 (40 mL)。收集CH2C12層’及 加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化’製得5 3 6 對應之二氟酯，爲無色油狀物。在-7 8 °C下，上述二氟酯 (536 mg，2.88 mmol)於甲苯（20 mL)中之溶液加入1.0M DIBAL的CH2C12溶液，並在- 78°C攪拌2小時。反應混合 物倒至冰冷6N HC1 (100 mL)，及以CH2C12萃取。有機層 經由塞里塑料過濾，濃縮至體積40 mL，並用於下一反應 步驟。 步驟2。胺基次膦酸（實例140，步驟2)(65 mg，0.02 mmol)於CH2C12 (1 mL)中之溶液加入得自步驟1之醛於 CH2C12 /甲苯（1 mL)中之溶液。力口入 TFA (50 μΙ〇及
NaBH(OAc)3 (21 mg)，並攪拌 1 6 小時。另外力卩入
NaBH(OAc)3 (63 mg)及上述醛於 CH2C12 / 甲苯（2 mL)中之 溶液。攪拌反應混合物24小時。反應物以CH2C12 (30mL) 稀釋，及以飽和NaHC03清洗。有機層以0.1N HC1清洗 -300- 200819460 及加以濃縮。殘餘物溶於CH2C12，經由 Acrodisk過濾， 及加以濃縮。粗產物經由 HPLC純化，製得 28.2 mg (141)。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.15 (s，1H)，8.10 (d， J = 9.3Hz，1H)，7.76 (s，1H)，7.56 (s，1H)，7.44 (d5 J = 7.2Hz， lH)，7.33(t，J = 8.1Hz，2H)，7.26(t，J = 7.8Hz，lH)，7.05- 7.20 (m? 3H)? 6.92 (t? J = 7.8Hz? 2H)? 5.97 (m? 1H)? 5.84 (brs，1H)，5.3 1 (d，J=16.8Hz，1H)，5.12 (d，J=10.5Hz? 1H)， 4.85 (m，2H)，4·43 (d，1H)5 4.13 (m，2H)，3.98 (s，3H)， 3_41 (d，2H)，3.22 (m，2H), 2.85 (m，1H)，2.60 (m，1H)， 2.21 (m， 1H)， 1.65 (m， 1H)， 1.50 (m， 1H)， 1.34 (d， J = 6.3Hz，6H)，1.09 (s，9H); 31P (1 2 1.4 Μ H z，C D 3 0 D ) : δ 40.804 ° 實例142:製備化合物142
92 (600 mg，〇·61 mmol)於 DME (9.1 mL)及 H20 (1.02 mL)中之溶液加入對甲苯磺醯肼（856 mg，4.57 mmol)及
NaOAc (749 mg，9.14 mmol)。反應混合物力口熱至 95°C 達 3 小時，並冷卻至室溫。將混合物濃縮，溶於CH2C12，以 -301 - 200819460
H20接著以微酸性H20清洗。有機層以Na2S04乾燥及加 以濃縮。粗產物以逆相組合快速層析接著以HPLC純化， 製得酸 142 (3 66 mg，61%)，爲黃色固體。h NMR (3 00MHz, CD3〇D )δ 8.31(s, 1H)，8 · 3 0 (d，J = 9Hz，1H)9 7.87 (s? 1H)5 7.6 7.(d5 J = 9.3Hz? 1H)? 7.28 (m? 1H)? 6.96 (t5 J = 7.8Hz，2H)，5.84 (s5 1H), 4.95 (dd，J = 6，10.2Hz，1H)5 4.76 (d? J=11.4Hz，1H)，4.71 (d，J = 8.4Hz5 1H)，4.35 (d， J=10.5Hz，1H)，4.20 (m，2H)，4.17 (s，3H)5 4.04 (quint·， J = 6.6Hz, 1H)，3.49 (t，J=15Hz，1H)，3.33，（t5 J=15Hz，1H)5 2.88 (dd，J = 7.5, 14.7Hz，1H)，2.56 -2.74 (brm, 2H)，2.29 (m，1H)，1.92 (m，2H)，1.40 - 1.79 (brm，10H)，1.37 (dd5 J=1 .8, 6.6Hz，6H)，1 · 3 1 (m，4 H)，1 · 2 3 (d，J = 6 H z，3 H) 5 1 · 0 0 (m， 1H) 。 31P NMR (121.4MHz， CD3〇D)6 3 9.8 。 LC/MS = 9 87.1 (M + + 1)。 實例143:製備化合物143
步驟 1。中間物 VIII (1.96g，5.36 mmol)、苄基- (1-苄 氧基羰基胺基-2-乙烯基-環丙基）-次膦酸乙酯（730 mg, -302- 200819460 2.75 mmol)、2 -乙基己酸鈉（300 mg)、甲苯（5 mL)及水（10 mL)之混合物在80 °C下攪拌16小時。所得反應混合物在乙 酸乙酯及5 %碳酸氫納水溶液間分配。有機層先後以冰冷 0 · 5 N N a Ο Η、1 N H C1及鹽水清洗，然後加以濃縮，製得所 欲之產物（l」5g，66 %)，爲油狀物。 步驟2。得自步驟1之醇（1.15g，1.82 mmol)及 DABCO ( 410 mg，3.66 mmol)於甲苯（2 mL)中之溶液力口入 4-溴苯磺醯氯（ 840 mg，3.38 mmol)於甲苯（2 mL)中之溶 液，及在室溫下攪拌1小時。反應混合物以乙酸乙酯稀 釋，及先後以冰冷0.5N NaOH、IN HC1及鹽水清洗，然 後加以濃縮，製得對溴苯基磺酸化產物（1.38 g，89 %；)。 步驟3。得自步驟2之中間物（589 mg，0.69 mmol)於 CH2C12 (60 mL)中之溶液以氮清洗5分鐘。加入釕觸媒 (Gl，110mg，0.14 mmol)，所得混合物在5(TC下攪拌16小 時。冷卻後，加入三（羥基甲基）膦（860 mg, 6.9 mmol)、三 乙胺（0.96 mL，6.9 mmol)及水（20 mL)，劇烈攪拌混合物4 小時。取出有機層，先後以1N HC1及鹽水清洗，並加以 濃縮。殘餘物經由組合快速層析純化，製得3 2 8 mg所欲 之油狀大環物。 步驟4。得自步驟3之對溴苯基磺酸化之化合物（348 mg，0.42 mmol)、2-(2-異丙基胺基-噻唑-4·基）-7-甲氧基-陸啉-4 -醇（133 mg，0.42 mmol)及碳酸鉋（210 mg，0.63 mmol)於NMP (3 mL)中之混合物在60 °C下攪拌3小時。加 入乙酸（0.1 mL)，所得混合物以水（〇.5❿匕彡及DMF (2 mL) -303- 200819460 稀釋。所得粗溶液進行HP LC純化，製得所欲之產物（1 32 m g，3 5 %)。 步驟5。得自步驟4之化合物（170 mg，0.19 mmol)於 CH3CN (10 mL)中之懸浮液加入溴三甲基矽烷（0.2 mL)。 反應混合物在室溫下攪拌3小時，然後加熱至5 0 t：達1小 時。反應物冷卻至室溫，及加入MeOH (1 mL)。將混合物 濃縮，殘餘物溶於DMF (5 mL)。粗產物經由HPLC純化， 將包含所欲胺基次膦酸之所欲部分混合，及濃縮至體積2 0 mL，其用於下一步驟。 步驟6。得自步驟5之化合物置於酸性水中。加入三 乙胺（lmL)使溶液之 pH = 9。逐滴加入氯甲酸環戊酯（0.1 mL)，同時加以攪拌直到起始物質完全轉變成產物。濃縮 混合物至體積10 mL。產物在EtOAc與飽和NH4C1間分 配。水層以EtOAc萃取。濃縮混合有機層。殘餘物經由 HPLC純化，製得16 mg化合物143，爲黃色蓬鬆粉末。 lH NMR (3 00MHz? CD3〇D):6 8.3 3 (d? J = 9.0Hz? 1H)? 8.18 (s，1H)5 7·74 (s，1H)，7.73 (s，1H), 7.13 -7.33 (m，6H), 5.83 (brs，1H)，5.70 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.28 (t， J = 9.6Hz, 1H)，4.73 (t，J = 8.7Hz，1H), 4.40 (brs，1H)，4.03 -4.22 (m，3H)，4.02 (s，3H)，3.39 (t，J = 15.9Hz，1H)，3_18 (t，J=15.9Hz，1H), 2.80 (m，1H)，2.61(m，1H)，2.26 (m， 1H)，1.82 (m，3H)，1.2 -1 · 7 (m，23 H); 31 P (1 2 1 ·4ΜΗζ， CD3OD):5 42.259; LC/MS = 8 8 5 (M + + 1)。 -304- 200819460 實例144:製備化合物144
步驟1。次膦酸酯（步驟4，實例143，132 mg, 0.15 mmol)及2,4,6-三異丙基苯磺醯肼（440 mg)於THF(10 mL) 中之溶液加入TEA (0.2 mL)。反應混合物加熱至55t達4 小時。加入另外之醯肼（440 mg)及TEA (0.2 mL)，並在 55°C攪拌16小時。加入更多之醯肼（400 mg)及TEA (0.2 mL)，並攪拌4小時。濃縮反應混合物，層析殘餘物，製 得包含起始物質、所欲之產物及亞磺酸副產物之部分。移 除溶劑後，所得物質再溶於T H F。依序加入醯胼（4 4 0 m g ) 及TEA (0.4 mL)。反應混合物在55°C下攪拌16小時。爲 了使反應完全，加入另外之醯肼（660 mg)及 TEA (0.4 mL)，並在5 5 °C攪拌6小時。濃縮反應混合物，層析殘餘 物，製得包含所欲產物之部分。移除溶劑後，殘餘物在 CH2C12 (100 mL)及冰冷 〇_5 N NaOH (20 mL)間分配。 CH2C12 層以 0.5 N NaOH (20 mL)及鹽水（30 mL)清洗，及 加以濃縮。製得93 mg所欲之飽和大環物’爲黃色固體。 步驟2。得自步驟1之飽和大環物（93 mg，〇·ΐ mmol) 於C Η 2 C 12 ( 1 〇 m L)中之溶液加入溴三甲基矽院（0 · 2 m L)， " -305 - 200819460 及在室溫下攪拌2小時。加入2,6-二甲基吡啶（〇·1 mL)， 及在室溫下攪拌1 6小時。L C M S顯示所欲之產物具有經 tert-Boc保護之次膦酸爲微量產物。加入另外之溴三甲基 矽烷（0.1 mL)。所得混合物加熱至回流1小時。加入 MeOH (3 mL)，及加以濃縮。粗產物溶於DMF (5 mL)及 H20 (0.5 mL)，及經HPLC純化，製得27 mg所欲之胺基 次膦酸，爲蓬鬆固體。 步驟3。得自步驟2之胺基次膦酸及三乙胺（0.2 mL) 於CH3CN (10 mL)及H20 (1 mL)中之溶液加入氯甲酸環戊 酯（5 0 μΙ〇。反應混合物在室溫下攪拌0.5小時。加入另外 之氯甲酸環戊酯（50 μ!〇，並攪拌1小時。移除溶劑後，殘 餘物溶於DMF (1 .8 mL)及Η20 (0.2 mL)，及經由HPLC純 化，製得 12 mg 化合物 144。4 NMR (300MHz，CD3OD):3 8.28 (d，J = 9.0Hz，1H)，8.18 (s，1H)，7.75 (s，1H)，7_74 (s, 1H), 7.13 -7.33 (m，6H)5 5.82 (brs，1H), 4.85 (d，J=12.3Hz， 1H)? 4.68 (t? J = 8.7Hz? 1H)? 4.24 (brs, 1H), 4.04 -4.23 (m? 3H)，4.03 (s， 3H)， 3.34 (t，J=15.9Hz? 1H)? 3.22 (t? J = 15.9Hz，1H), 2.78 (m，1H)，2.49 (m，1H)5 1.1-2.0 (m， 27H); 31P (121.4MHz, CD3OD):5 44.79 1; LC/MS = 887 (M + +1)。 實例145:製備化合物145 -306- 200819460
VIII (1.67g，4·56 mmol)及胺，（1-胺基-2-乙烯基-環 丙基）-(2-氟-苄基）-次膦酸乙酯（972 mg, 3.5 mmol)，於甲 苯（10 mL)中之黃色溶液加入2-乙基己酸鈉（871 mg, 5.25 m m ο 1)於Η 2 0 ( 3 0 m L)中之溶液。反應混合物力□熱至8 0 °C 整夜，及冷卻至室溫。反應混合物以EtOAc稀釋，以飽和 NaHC03、0.5N HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以 濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得1.47 g醇，產 率65%。1HNMR(300MHz，CDCl3):δ7.68(s，lH)7·43-7.34 (m，2H), 7.24 -6.98 (m，2H)，6·07 -5·98 (m，1H), 5.82 -5.60 (m? 2H)? 5.31 (m? 1H)? 5.19 -5.09 (m5 2H), 5.03 -5.00 (m, 1H)5 4.96 -4.9 1 (m? 2H)? 4.83 (m, 1H), 4.69 (m, 1H), 4.51-4.37 (m, 2H)? 4.34 -4.29 (m? 2H)? 4.09 -4.02 (m? 3H)? 3.8 9 -3.79 (m? 3H)? 3.69 (m9 2H)? 3.43 -3.0 9 (m? 2H), 2.39 -2.07 (m? 2H)? 2.02 -2.00 (m9 1H) 5 1.8 3 - 1.5 2 (m? 2H)? 1.43 (s, 9H), 1.38 -1.21(m? 2H)，1.16 (m，3H); 31P (121.4MHz，CDC13):5 45.47 (s，31P)，42.84 (s，31P)。 LC/MS: M + l = 650。 醇（992 mg，1.53 mmol)及 DABCO(5 50 mg, 4.89 mmol) 溶於甲苯（8 mL)。逐滴加入對溴苯基磺醯氯（i.25g，4.89 -307- 200819460 mmol)的甲苯（8 mL)溶液。反應混合物在室溫攪拌3小 時。反應物以EtOAc稀釋，及俾用飽和NaHC03使反應驟 停。將兩層分離，有機層以 0·5Ν HC1、鹽水清洗，以 Na2S04乾燥，力口以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速層析 純化，製得764 mg對溴苯基磺酸酯，產率58%。4 NMR (300MHz，CDC13)』7.81-7.7 (m，4H)，7.63 (m5 1H)，7·38 (m，lH)，7_26 -6.96 (m，5H)，6.10-6.04(m，lH)，5.80-5·70 (m，1H)，5.28 (m，1H)，5·18 -4.87 (m, 6H)，4·64 (m， 1H)，4.3 0 -3.7 8 (m，7H)，3.29 -3.06 (m，4H)，2.76 -2.60 (m， 2H)? 2.3 6 -2.28 (m, 2H)? 2.22 -2.0 5 (m5 2H), 1.74 - 1.5 6 (m, 3H)? 1.43 (s，9H)，1.39 -1.10 (m? 4H); 31P (121.4MHz, C D C13): δ 46.34 (s， 31P)， 43.32 (s， 31P)。LC/MS : M+ 1 =870。 對溴苯基磺酸酯（760 mg, 0·87 mmol)溶於CH2C12 (56 mL)，及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (180 mg， 〇·22 mmol)，並另脫氣2 0分鐘。反應混合物加熱至5 0 °C 整夜，及冷卻至室溫。加入（經甲基）膦（1.35g，11 mmol)， 接著加入 TEA (3.1 mL5 22 mmol)及 H2〇 (10 mL)。反應混 合物加熱至5 (TC達4小時，然後置於室溫整夜。將兩層分 離。有機層以〇·5Ν HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及 加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得4 8 7 mg 環化烯烴，產率66%。1HNMR(300MHz，CDCl3):δ7.82-7.68 (m5 4H)? 7.47-7.40 (m5 1H)? 7.32-6.96 (m? 3H)9 6.6 0 -6.54 (m，1H)，5.66- 4.98 (m，6H)，4.46- 3.97 (m，8H)， -308- 200819460 3·84· 3.74 (m，1H)，3.44-3.13 (m，3H)，2.53- 2·32 (m，4H)， 2.09- 1.07 (m5 18H); 31P (121.4MHz? CDC13)：6 45.3 4 (s9 31P)，43.41 (s，31P)。LC/MS: M+l=842。烯烴（798 mg， 0.95 mmol)及2 - (2 -異丙基肢基-嚷卩坐-4 -基）-7 -甲氧基D奎卩林-4-醇（3 00 mg, 0.95 mmol)於 NMP (10 mL)中之溶液以 Cs2C03 (3 1 0 mg，0.95 mmol)處理。反應混合物加熱至 6 5 °C整夜，然後冷卻至室溫。反應物以EtO Ac稀釋，及以 H20清洗。用IN HC1使水層pH = 4，及以EtOAc萃取兩 次。混合有機層以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經 由組合快速層析純化，製得625 mg所欲之產物，產率 72%。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 8.02 _7.98 (m，1H)， 7·47 (s，1H)，7.34 -6·96 (m，7H)，5·69 -5.60 (m，1H) 5·40 -5.25 (m，4H)，4.51-4.07 (m, 3H) 4·03 -3.71(m，8H)，3.54 -3.36 (m, 4H)，3·16 -3·05 (m，2H)，2·8 5 -2.68 (m，2H)， 2.40 - 1.07 (m, 28H); 31P (121.4MHz, CDC13 ):5 4 5.1 5 (s, 31P)，44.29 (s，31P)。LC/MS: M+l=919。 在 〇°C下，上述製得之產物（625 mg，0.68 mmol)於 CH3CN (10 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（0.5 mL，3·4 mmol)。反應混合物在〇°C下攪拌5分鐘。力[[入2,6-二甲基 吡啶（0.48 mL)，並攪拌1小時。加入TEA (2 mL)及MeOH (3 mL)，並攪拌 30分鐘。將混合物濃縮，與甲苯及 CH3CN共蒸發，及乾燥20分鐘，製得粗質酸。該粗質酸 溶於CH3CN (5 mL)。加入飽和Na2C03於H20 (5 mL)中之 溶液，並攪拌5分鐘。加入新鮮製備之氯甲酸環戊酯的 -309- 200819460 THF溶液。反應在〇 · 5小時內完成及加以濃縮。殘餘物溶 於EtOAc，力□入 1·〇 N HC1使ρΗ = 2。將兩層分離，將有 機層濃縮。粗產物經由HPLC純化，製得3 27 mg產物 145，產率 53%。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 8.89.(s，1H), 7.34 (d? J = 9.5Hz, 1H)5 8.18 (s? 1H)5 7.76 -7.73 (m? 2H), 7.3 9 -7.02 (m，5H)，5.84 (brs, 1 H )，5 · 7 7 ( d t，J = 8.9 H z， 9.1Hz，1H)，5.29 (t，J = 9.5Hz，1H)，4.86 (s，1H)，4.72 (t， J = 9.2Hz，1H)，4.38 (s，1 H )，4 · 2 2 - 4.0 3 (m，6 H)，3 · 5 7 - 3 · 4 3 (m，lH)，3.32-3.17(m，lH)，2.8 5 -2.7 8 (m，2H)，2.66-2.58 (m，1H)，2.31- 2.23 (m，1H)，1·94 - 1.82 (m，3H)，1.58 -1.33 (m，24H); 31P (121·4ΜΗζ，CD3OD):5 41.98 (s，31P)。 LC/MS: M + l = 903。 實例146:製備化合物146
145 (30 mg，0.033 mmol)於 DME (1 mL)/ H2O (0.1 mL) 中之溶液加入對甲苯磺醯肼（31 mg，0.17 mmol)及NaOAc (1 9 mg，0.23 mmol)。反應混合物加熱至95 °C達2小時， 及冷卻至室溫。加入數滴3 N HC1使pH = 2。粗產物經由 -310- 200819460 HPLC 純化，製得 4 mg 酸 146。iH NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.31 (d， J = 9.4Hz， 1 H )， 8 · 1 8 ( s， 1 H )， 7 · 7 5 ( s， 2H)，7.3 9 -7.04 (m5 5H)，5.84 (brs，1H)，4.81- 4.68 (m， 3H), 4.44 (s，1H)，4.25 -4_04 (m，7H)，3.47 -3.23 (m，2H)， 2.84 -2.77 (m, 2H)5 2.5 5 -2.5 2 (m, 2H), 1.9 5 - 1.3 3 (m? 30H); 31P (121 ·4ΜΗζ5 CD3OD)』43.74 s)，31P)。LC/MS: M + l = 905。 實例1 4 7 :製備化合物1 4 7
用實例58之次膦酸酯，如實例145所述般製備化合 物 147。4 NMR (3 00MHz，CD3OD)5 8.32 (d，1H，J=10Hz)， 8.19 (s，1H)，7.81-7.72 (m，2H)，7·35 -7·20 (m，2H), 6.94 (t5 2H? J = 8Hz)? 5.85 (br s? 1H), 5.74 (app q5 1H? J = 8Hz)5 5.32 (t, 1H, J=10Hz)5 4.74 (t, 1H? J = 8Hz)? 4.40 (brs, 1H), 4.23 -4.05 (m，3H)，4·04 (s，3H), 3.58 (t，1H，J = 14Hz)， 3.3 6 -3.22 (m，1H)，2.90 -2.77 (m，1H)，2.70 -2.5 8 (m，1H)， 2.3 7 -2.24 (m，1H)，1.93 - 1.76 (m，2H)，1.69 - 1.3 7 (m， 17H)，1.34 (d，6H，J = 7Hz); 1 9 F N M R (2 8 2 · 6 Μ H z，C D 3 O D) δ -311 - 200819460 -114.6; 31P (121.4MHz, CD3〇D)6 40.7; El MS (m/z) 920-6 [MH + ]。 實例148:製備化合物148
如實例146所述般製備化合物。LC/MS: 923 (Μ +1) 實例149:製備化合物149
得自實例147之對溴苯基磺酸酯（1.49§，L73 mmol)及 氟喹啉（合成方式述於下）（〇.58g，1.73 mmol)在NMP (18 mL)中以碳酸鉋（〇.57g，1.73 mmol)處理。反應物在60°C下 攪拌1 5小時，加以冷卻，加至乙酸乙酯。所得混合物以 -312- 200819460 碳酸氫鹽溶液及水清洗，加以乾燥、濃縮，及經由快速層 析純化，製得所欲之B 〇 c -胺（0.9 4 2 g , 5 7 % )。 此 Boc-胺（〇_942g，0.098 mmol)加至 DCM (1 0 mL)及 加入4N HC1的二噁烷（2.5 mL)溶液。所得混合物在室溫 攪伴1小時，然後濃縮。殘餘物在乙腈（10 mL)及水（10 mL)中處理。加入氯甲酸環戊酯（5當量）及碳酸鈉（0.125g， 1.17 mmol)，反應物在室溫攪拌1.5小時。反應混合物在 H20及乙酸乙酯間分配，以鹽水清洗，加以乾燥（Mg S04) 及濃縮。此殘餘物加至乙腈（10mL)及以 TMSI (0.70 mL, 4.93 mmol)處理1 5分鐘，在此時加入2,6 -二甲基吡啶（1 0 當量）。反應物加入甲醇使反應驟停，加以濃縮及經由 HPLC純化，製得所欲之次膦酸酯化合物1 49 (5 3 3 mg，3 步驟共 58%) ]H NMR (3 00MHZ, C D 3 Ο D ): δ 8.6 2 ( s，1H)， 8.18 (m，2H)，7.74 (s，1H)，7.61 (m，1H)，7.25 (m，1H)， 6.93 (m，2H)，5.79 (m，2H)，5.36 (m，1H)，4.76 (m，2H)， 4.38 (m，1H)，4·16 (m，1H)，4.12 (s，3H)，4.05 (m, 1H)， 2.81(m，2H)，2.65 (m5 1H)，2.32 (m，1H)，1.86 (m，1H)， 1.60 (m，22H)，1.37 (d, J = 6.4Hz，6H)。31P NMR (75MHz, CD3OD)3 40.807。LCMS : 940 (M-l)。 用下列方式製備上述之喹啉：2_氟-3_甲氧基苯甲酸 (10g，58.8 mmol)及 Hunig 氏驗（12.3 mL，70.5 mmol)加至 甲苯（5 OmL)及第三丁醇（5 OmL)中，並在活化4埃分子篩上 攪拌1小時。加入苯基磷醯基疊氮（15.2mL, 70.5 mmol)， 反應物升溫至回流整夜。將混合物冷卻，加以過濾及濃 -313- 200819460 縮。殘餘物然後加至乙酸乙酯，以水及鹽水清洗、加以乾 燥及濃縮，製得15.6g粗質物。Boc-苯胺然後加至4N HC1 的二噁烷（26 OmL)溶液在室溫下處理1小時。將反應物濃 縮，然後加至乙酸乙酯，以碳酸氫鈉溶液接著以鹽水清 洗，加以乾躁及濃縮，製得苯胺（l〇g)。此粗質苯胺（l〇g, 71 mmol)加至甲醇（200mL)，及加入乙炔二羧酸二甲酯 (10.4mL, 85 mmol)。所得混合物回流2小時，然後濃縮及 經由管柱層析（乙酸乙酯/己烷）純化，製得所欲之產物 (11.64g，58%)。此烯烴（11.6g)加至二苯基醚（80mL)。準備 沙浴及升溫至3 5 (TC。反應物置於此溫熱之沙浴，並偵測 內部溫度。當內部溫度達到240 t，計時5分鐘。5分鐘 後，自沙浴移除反應物，並使反應物冷卻。沉澱出棕色固 體，並將該棕色固體過濾出及以二乙醚清洗，製得8-氟-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸 （5.5g)。 此甲酯（3.95g, 15.7 mmol)加至 THF (50mL)、水（50mL) 及甲醇（50mL)中，並加入LiOH (3.3g, 79 mmol)。反應物 在室溫攪拌1小時，然後使用HC1將之酸化。產物自溶液 沉澱出，然後將之過濾及經由凍乾加以乾燥，製得酸 (3 · 5 7 9，9 6 %)。 在 〇°C 下，此酸（3.57g，15 mmol)加至 THF (150mL)。 加入三乙胺（4.6mL，33.1 mmol)及氯甲酸異丁酯（4.3mL， 3 3.1 mm〇l)，所得混合物攪拌1小時。在此時間，加入重 氮甲烷（2.2當量）的醚溶液（自MNNG製備）。反應物在 下攪拌3 0分鐘，及升溫至室溫達2小時。然後將混合物 -314- 200819460 濃縮，製得以碳酸異丁酯保護羥基之重氮酮喹啉。在〇 t 下，將此重氮酮（15 mmol)加至THF (lOOmL)，並加入濃 HBr (8.5mL，75.3 mmol)。反應物攪拌1小時，然後加至 乙酸乙酯，以碳酸氫鹽清洗，加以乾燥及濃縮。殘餘物加 至異丙醇，及加入異丙基硫脲（3.5g，30 mmol)。反應物加 熱至75 °C達1小時，然後冷卻整夜。將橘色固體過濾及乾 燥，製得胺基噻唑喹啉 （1 .7g，33%)。iH NMR (3 00MHz， CD3〇D):6 8.62 (s? 1H)? 8.18 (m? 2H)? 7.74 (s5 1H)? 7.61(m? 1H)，7.25 (m, 1H)，6.93 (m, 2H)，5.79 (m, 2H)，5.36 (m， 1H)，4.76 (m，2H)，4.38 (m，1H)，4.16 (m，1H)，4.12 (s， 3H)，4.05 (m，1H)，2.81(m，2H)，2.65 (m，1H)，2.32 (m， 1H)5 1.86 (m，1H), 1.60 (m，22H)，1.37 (d5 J = 6.4Hz, 6H)。 31P NMR (75MHz，CD3OD)5 40.807。LC/MS: 940 (M -1)。 實例1 5 0 :製備化合物1 5 0
化合物 1 49 (528mg，0.5 6 mmol)加至 DME (5mL)及水 (0.5mL)中。加入乙酸鈉（0.69g，8.43 mmol)及對甲苯磺醯 胼（0.78 5 g，4.2 1 mmol)，並在95 °C加熱反應物。在5小時 -315- 200819460 後經由LCMS偵測反應是否完全，在此時間反應物冷卻至 〇°C，及加入HC1 (1.4mL 6N溶液），將反應物濃縮。殘餘 物經由 HPLC純化，製得所欲之飽和產物化合物 150 (3 9 0mg，74%)。1 Η N M R ( 3 0 0 Μ H z，C D 3 Ο D ) δ 8.16 (m，2Η)， 7·72 (s，1Η)，7·64 (m, 1Η)，7.27 (m，1Η)，6.95 (m, 2Η)， 5.81 (br s，1H)，4.75 (m，2H)，4.47 (m，1H)，4.28 (m，1H)， 4.12 (s? m? 4H)? 4.04 (m? 1H) 5 2.8 0 (m? 1H)? 2.59 (m? 1H)? 1.98 (m，1 H), 1.82 (m, 2H)，1 · 3 7 (m, 3 1 H)。3 1P NMR (121.4MHz，CD3OD)5 42.3 8 1。LCMS: 942 (M + l)。 實例1 5 1 :製備化合物1 5 1
步驟1。中間物VIII (22.03 g，60· 12 mmol)及（卜胺基-2_乙烯基-環丙基）-(2,6 -二氟-苄基）-次膦酸乙酯（述於實例 58, 1 2.97g, 40.48 mmol)於甲苯（16〇 mL)中之混合物加入 2-乙基己酸鈉（lO.Olg, 60.26 mmol)及 H20 (240 mL)。反應 混合物加熱至8 0 °C，並攪拌4 8小時。反應混合物冷卻至 室溫，以EtOAc稀釋（400 mL)及將兩層分離。水層以
EtOAc 萃取（200 mL)。混合有機層以 1N HC1 (400 mL)、 -316- 200819460
NaHC03 (300 mL)、鹽水（4 0 0 m L)清洗，以 N a2 S O 4 乾 燥，及在真空下濃縮。製得偶合產物（2 3.2 5 g)，爲粗產 物。LCMS(M+ 1): 667.97 步驟 2。上述製得之產物（23.25 g，34.82 mm ο 1)及 DABCO (6.26g，55·79 mmol)溶於甲苯（55 mL)。加入 4 -溴 苯磺醯氯（12.48g，48.9 mmol)的甲苯（15 mL)溶液。反應混 合物在室溫攪拌整夜，並同時加入另外之4溴-苯磺醯氯 (7.14g，39.12 mmol)及 DABCO (3.13g，27.9 mmol)。反應 物攪拌3小時。反應混合物以EtOAc稀釋（3 5 0 mL)及加入 0.5N HC1 (4 00 mL)。將兩層分離。有機層以鹽水（400 mL) 清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及在真空中濃縮。粗產 物經由矽膠管柱層析（EtOAc-己烷）純化，製得20.3 8 g對 溴苯基磺酸酯。LCMS (M+ 1 ): 8 87.75 步驟3。對溴苯基磺酸酯 （1 1.96g，13.49 mmol)溶於 CH2C12 (1.33 L)，及將所得溶液脫氣30分鐘。溶液加熱 至 40 °C，及加入 Grubb 氏 G1 觸媒（2.78g，3.38 mmol)。反 應物加熱至45 °C及攪拌整夜。加入另外之Grubb氏G1觸 媒（5 6 7 mg)，並在45 °C下攪拌7小時。加入三羥基甲基膦 (25.24g，0.17 mol)、TEA (57 mL，0.34 mol)及 H20 (200 mL)，及使反應混合物回流整夜，同時冷卻至室溫，並將 兩層分離。有機層以H20 (2x200 mL)及鹽水（400 mL)清 洗，以Na2S04乾燥，及在真空中濃縮。粗產物經由矽膠 管柱層析（EtOAc-己烷）純化，製得5.79 g大環狀烯烴，產 率 50〇/〇。LCMS (M + 1): 857.88 -317- 200819460 步驟4。上述之大環狀烯烴（5.78g，6.74 mmol)及8-氯-4-羥基-7-甲氧基-喹啉-2-羧酸甲酯（2.17g，8.10 mmol) 溶於 NMP (68 mL)及加入 Cs2C03 (2.21g，6.77 mmol)。反 應混合物加熱至 70°C，並攪拌 6小時。加入另外之 Cs2C03 (219 mg5 0.68 mmol)，並在 70°C 下攪拌 5 小時。 反應混合物冷卻至室溫，並攪拌整夜。混合物倒至h2o/ 鹽水（900 mL / 100 mL)及以 EtOAc 萃取（3 x2 5 0 mL)。有 機層以 2% LiCl (3 00 mL)、NaHC03 (300 mL)、鹽水(300 mL)清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗產物經由 矽膠管柱層析（EtOAc-己烷）純化，製得4.11 g酯，產率 69%。LCMS (M + 1 ): 8 8 9.1 4 步驟 5。上述製得之酯（4.11g，4.62 mmol)於CH2C12 (23 mL)中之溶液加入 4N HC1的 1，4-二噁烷溶液（23 mL)。反應混合物在室溫下攪拌1.5小時，及在真空中濃 縮。粗質 HC1 鹽溶於 CH3CN (46 mL)/飽和 Na2C03 (46 mL)，及加入氯甲酸環戊酯的THF溶液（46 mL)。反應在 20分鐘內完成。自有機層倒出沉澱之固體，在真空中濃縮 後，用CH3CN及CH2C12清洗該固體。該沉澱之固體溶於 H20 (250 mL)，及以 CH2C12 萃取（2x125 mL)。混合的有 機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及在真空中濃縮。粗 產物經由矽膠管柱層析（EtOAc-己烷）純化，製得4.00g胺 基甲酸環戊酯。LCMS (M + 1): 901.13
步驟6。上述之胺基甲酸環戊酯（4.39g，4.87 m m ο 1)溶 於 THF (48 mL)/ H20 (48 mL)，及冷卻至 〇°C。加入 NaOH -318- 200819460 (200 mg，5.0 mmol)。反應混合物在0°c下攪拌40分鐘， 並加入另外之NaOH (200 mg，5.0 mmol)。反應物攪拌15 分鐘。反應混合物以H20稀釋（200 mL)，並用IN HC1酸 化至pH = 2 ’以 EtOAc萃取（3 x 3 00 mL)。混合有機層以 Na2S04乾燥，加以過濾、濃縮，及在真空中乾燥，製得 4.26 g 酸，產率 98%。 步驟7。在〇°C下，上述之酸（2.20g，2.48 m m ο 1)於 THF (25 mL)中之溶液加入 TEA (0·38 mL，2·73 mmol)，及 攪拌5分鐘。在0°C下，逐滴加入氯甲酸異丁酯（0.36 mL， 2.75 mmol)，及攪拌反應混合物40分鐘。加入重氮甲烷（5 mL，5 mmol)的醚溶液後，反應混合物升溫至室溫，並攪 拌 2小時。濃縮混合物，及將殘餘物溶於Et0Ac (400 mL)。EtOAc 層以飽和 NaHC03 溶液（150 mL)、H20 (150 mL)、鹽水（150 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮， 製得2.22 g粗質重氮酮產物。LCMS (M + 1): 911.33 步驟 8。重氮酮（2.22g，2.44 mmol)溶於 THF (25 m L)，冷卻至0 °C，同時逐滴加入Η B r水溶液（1 . 3 8 m L， 4 8 %，1 2 · 2 m m o 1)，並攪拌反應物1 · 5小時。反應混合物以 EtOAc稀釋（400 mL)及以NaHC03清洗。水層以EtOAc萃 取（150 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥，加以過濾及濃 縮，及在真空中乾燥，製得2.36 g之α-溴酮。LCMS (M + 1): 965.01 步驟9。α-溴酮（2.36g，2.44 mmol)及異丙基硫脲（580 mg，4.91 mol)於2-丙醇（25 mL)中之混合物加熱至75°C， -319- 200819460 並攪拌1 . 5小時。反應混合物冷卻至室溫，及加以濃縮。 殘餘物溶於EtOAc (3 00mL)及以NaHC03清洗（3 5 0 mL)。 水層以EtOAc (200 mL)萃取。混合有機層以鹽水清洗（200 mL)，以Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得2.64g酯產物。 LCMS (M + 1 ): 9 8 3.3 1 步驟 10。上述之酯（2.64g，2.68 mmol)溶於 CH3CN (18 mL)，及冷卻至〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（1 .95 mL， 1 3 · 7 m m ο 1)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌3 5分鐘。加 入2,6-二甲基吡啶（4 mL)及MeOH (4 mL)，及濃縮反應混 合物。粗產物經由Η P L C純化，製得1 · 7 8 g化合物1 5 1。 'H NMR (3 00MHz? CDC 1 3 ) 5 8.3 8 (d, J = 9.3Hz? 1H)? 8.30 (s9 1H)，7.60 (d，J二 9.3Hz，1H)，7.32 -7.19 (m5 1H)，6.99 -6.87 (m，2H)，5.84 (bs，1H)，5.73 (bq, J = 8.9Hz，1H), 5.32 (dd， J = 9.9，9.9Hz，1H), 4.96 -4.82 (m，1H)，4.80 -4.71 (m，1H)， 4.27 (bs，1H)，4.20 -3.78 (m，3H)，4·16 (s，3H)，3.66 -3.52 (m5 1H)9 3.3 6 - 3.22 (m, 1H), 2.92 -2.73 (m9 2H)9 2.7 3 -2.59 (m? 1H), 2.3 5 -2.22 (m? 1H)? 1.93 -1.71(m? 2H) 1.71-1.20 (m，17H) 1.38 (d，J二6·6Ηζ，6H)。31P NMR (121.4MHz， CD3OD )δ 40.5; LCMS (M + l): 95 5.43。 實例152:製備化合物152 -320- 200819460
步驟 1。中間物 XI (17.42g，28.30 mmol)溶於 THF (13 6 mL)，及冷卻至〇°C。所得溶液加入N-甲基嗎啉 （4 7 mL，42.7 mmol)。在〇°C下10分鐘後，逐滴加入氯甲酸異 丁酯（4.05 mL，3 0.96 mmol)。又過1小時後，緩慢地加入 (1·胺基·2_乙烯基環丙基）-(2,6-二氟-苄基）-次膦酸乙酯（述 於實例 58，8.94g，29.70 mmol)於 THF (20 mL)中之溶液。 所得懸浮液升溫至室溫，2小時後，其在H2〇 (400 mL)及 乙酸乙酯（200 mL)間分配。水層以乙酸乙酯萃取（200 mLx 2)，及混合有機層以HC1 (IN, 225 mL)及H2〇 (200 mL)清 洗。混合酸洗及水洗，及以乙酸乙酯逆萃取（175 mix 2, 100 mlx2)。混合有機層以鹽水清洗（400 mL)，以Na2S04 乾燥，及在真空中濃縮，製得25.06 g粗質二烯，產率 98.5%。LCMS (M + 1 ): 8 9 8.06 步驟2。上述之粗質二嫌產物（12.91g，14.36 mmol)溶 於CH2C12 ( 1 440 mL)，及將所得溶液脫氣30分鐘。溶液 加熱至 40°C，及加入 Grubb氏 G1觸媒（2.95g，3.59 mmol)。反應物回流17小時，同時加入三-羥基甲基膦 (22.3g，18.0 mmol)、TEA (50 mL，35.9 mmol)及 H20 (400 mL)，反應混合物另加熱至回流1 6小時。反應混合物冷卻 -321 - 200819460 至室溫，且將兩層分離。有機層以H20 (400 mL)及鹽水 (3 00 mL)清洗，以MgS04乾燥，及加以濃縮。粗質殘餘物 經由砍膠層析純化，製得8 · 3 0 g大環狀烯烴產物，產率 66%。LCMS (M + 1): 870.09。 步驟3。上述之大環狀_烴（7.34g，8.42 m m ο 1)溶於乙 酸乙酯（105 mL)，及加入铑/氧化鋁（5重量％，2.945g， 0 · 4 0重量％)。將系統排空及以Η 2 (1 a t m)沖洗三次。3小 時後，系統加入更多铑/氧化鋁（5 %重量％，8 4 2 m g，0 . 1 0 重量％)，及將之排空及以H2 (1 atm)沖洗三次。又過1小 時後，將懸浮液過濾及在真空中濃縮，製得6.49 g還原之 大環物，粗產率 88%。LCMS (M + 1): 872.04。 步驟4。上述之對溴苯基磺酸酯大環物（6.4 9 g，7.6 7 mmol)溶於N-甲基吡咯烷酮（25.0 mL)及8-氯-2-(2-異丙基 胺基-噻唑-4-基）-7-甲氧基-喹啉-4-醇（2.5 64 g，7.33 mmol)，接著力口入 Cs2C03 (4.40g，13.50 mmol)。所得混合 物加熱至6 5 °C達6小時，然後以乙酸乙酯（2 0 0 m L )稀釋及 以LiCl (5%，250 mL)清洗。水層以乙酸乙酯萃取（100 mLx 2)，混合有機層以鹽水清洗（150 mL)，加以乾燥（Na2S04/ Mg SCU)及在真空中濃縮。粗質殘餘物經由矽膠層析（乙酸 乙酯-甲醇）純化，製得4 · 3 9 g胺基噻唑產物，產率5 8 %。 LCMS (M + 1 ): 98 5.2 8。
步驟5。次膦酸酯（23.7g，24.05 mmol)溶於CH3CN (240 mL)，及冷卻至0°C。快速逐滴加入碘三甲基矽烷 (17.4 mL，122.3 mmol)，10分鐘後，加入2,6 -二甲基吡啶 -322- 200819460 (17.0 mL，146·4 mmol)。反應混合物緩慢地升溫至室溫， 攪拌1小時，然後再冷卻回至0 °C，加入2,6 -二甲基吡啶 (11.1 mL5 95.6 mmol)，接著加入 MeOH (24 niL)。溶液在 真空中濃縮，粗質殘餘物經由HP LC純化，製得12.68 g 化合物 152，產率 55°/〇。4 NMR (300MHz，CDC13)S 8.35 (d，J = 9.3Hz，1H)，8.28 (s，1H) 5 7.8 5 (s, 1H)，7.64 (d， J = 9.6Hz? 1H)? 7.3 5 -7.22 (m, 1H), 7.02 -6.89 (m? 2H)? 5.85(bs，lH)，4.82-4.71(m，2H)，4.33(bs，lH)，4.28-3.99 (m5 3H)? 4.16 (s? 3H), 3.5 7 -3.2 8 (m? 2H)? 2.90 -2.78 (m，1H)，2.63 -2.5 0 (m，1H)，2.08 - 1.91 (m，1H)，1.91-170 (m, 2H)，1.70 -1.13 (m，22H)，1.37 (d，J = 6.9Hz, 6H); 31P NMR (121.4MHz，CD3OD )δ 42.4; LCMS (M+l): 95 7.3 5。 實例1 5 3 :製備化合物l 5 3
得自實例1 4 7之對溴苯基磺酸酯（6 0 3.2 mg，0.70 mmol) 及8-溴-4-羥基-7_甲氧基-喹啉-2_羧酸甲酯（263 4 mg，〇.84 mmol)溶於 NMP (7〇 mL)及加入 Cs2C03 (25 1.5 mg，0.77 mmol)。反應混合物力D熱至70°C，並攪拌整夜。反應混合 -323- 200819460 物冷卻至室溫，倒至 H20 ( 1 75 mL)/鹽水（25 mL)，及以 EtOAc 萃取（3x100 mL)。有機層以 2% LiCl (125 mL)、 NaHC03 ( 1 5 0 mL)、鹽水（100 mL)清洗，以 Na2S04 乾燥， 加以過濾及濃縮，製得 6 5 5 mg粗產物。LCMS (M+1): 934.94 ° 上述製得之產物（65 5 mg，0.70 mmol)於 CH2C12 (3.6 mL)中之溶液加入4N HC1的1，4·二噁烷（3.4 mL)。反應混 合物在室溫下攪拌1小時及在真空中濃縮。所得粗質鹽酸 鹽溶於CH3CN (7 mL)/飽和Na2C03 (7 mL)溶液，及加入 氯甲酸環戊酯的THF溶液。反應在20分鐘內完成。將有 機層自沉澱之Na2C03倒出，該固體以CH3CN及CH2C12 清洗後在真空中濃縮。該固體Na2C03溶於H20 (75 mL)， 及以CH2C12萃取（2x75 mL)。混合有機層以鹽水清洗（75 mL)，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速 層析純化，製得473 mg胺基甲酸環戊酯，產率71%。 LCMS (M+ 1 ): 945.1 0。 上述製得之甲酯（4 73 mg，0.5 mmol)溶於THF (1.6 mL)/ H20 (1.7 mL)，及冷卻至 〇°C。加入 LiOH (60.4 mg， 2.52 mmol)於H20 (1.7 mL)中之溶液。反應混合物在〇°c 下攪拌 40分鐘，及加入另外之 NaOH (200 mg，5.0 mmol)。反應物攪拌15分鐘。反應混合物以h20稀釋（20 mL)，以IN HC1酸化至pH=l，及以EtOAc萃取（3x25 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥，加以過濾、濃縮及在真 空乾燥，製得酸。 -324- 200819460 在 〇°C 下，上述之酸（466 mg，0.50 mmol)於 THF (5 mL) 中之ί谷液加入TEA (77 μί，0.55 mmol)，及擾拌5分鐘。 在〇°C下，逐滴加入氯甲酸異丁酯（72 pL，0·55 mmol)，所 得反應混合物攪拌1小時。加入重氮甲院（2.7 0 m L，1.0 8 mmol)的醚溶液，反應混合物升溫至室溫，並攪拌2小 時。將混合物濃縮，殘餘物溶於EtOAc (75 mL)。EtOAc 層以飽和 NaHC03 溶液（60 mL)、H20 (50 mL)、鹽水（50 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得粗產物。 重氮酮粗產物（478 mg，0_5 mmol)溶於THF (5 mL)， 及冷卻至〇°C，逐滴加入HBr (0.29 mL，2.52 mmol)，及攪 拌反應物15分鐘。反應混合物以EtOAc稀釋（200 mL)及 以NaHC03清洗（75 mL)。水層以EtOAc萃取（20 mL)。混 合有機層以Na2S04乾燥，加以過濾、濃縮及在真空中乾 燥，製得 403.4 mg 溴酮。LCMS (M + 1): 1008.91。 溴酮（403.4 mg，0.4 mmol)及異丙基-硫脲（94.4 mg，0.8 mol)於2-丙醇（25 mL)中之混合物加熱至75°C，並攪拌0.5 小時。反應混合物冷卻至室溫，及濃縮之。殘餘物溶於 CH2C12 (150mL)及以 NaHC03 清洗（30 mL)。水層以 CH2C12萃取（150 mL) 〇混合有機層以鹽水清洗（50 mL)， 以Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得424.1 mg所欲之產 物。LCMS (M + 1): 1 029.1 7。 上述製得之酯（424.1 mg, 0.41 mmol)溶於 CH3CN (4.1 mL)，及冷卻至〇°C。逐滴加入碘三甲基矽烷（0.3 mL，2.07 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌20分鐘，及冷卻至 -325- 200819460 〇°C。加入 2,6 二甲基吡啶（0.5 mL)及 MeOH (0.5 mL)，及 濃縮反應混合物。粗產物經由HPLC純化，製得23 2.1 mg 化合物 153，產率 46%。4 NMR (300MHz，CDC13)5: 8.43 (d，J = 9.0Hz，1H) 5 8.3 3 (s，1H)，7.90 (s，1H)，7.60 (d5 J = 9.3Hz，1H)，7.35 -7.21 (m，1H)，6.95 (dd，J = 7.8，7.5Hz， 2H) 5.88 (s5 1H)，5.84 -5.71 (m，1H)，5.34 (dd，J = 9.3, 9.0Hz，1H)，4.77 (dd，J = 8.4，7.5Hz，1H)5 4.24 -4.0 1 (m， 7H)，3.60 (t，J=15.3Hz，1H)，3.32 (t，J=15.3Hz，1H)，2.95 -2.75 (m? 2H)? 2.75 -2.5 8 (m, 1H)? 2.3 7 -2.2 3 (m? 1H)5 1.96 -1.61 (m5 2H)，1.61- 1.15 (m，17H) 1.38 (d，J = 6.6Hz5 6H); 31P (121.4MHz， CD3〇D)6 40.9; LCMS (M + ): 1001.20° 實例1 5 4 :製備化合物1 5 4
153 (221 ·3 mg，〇·22 mmol)、乙酸鈉（274.1 mg，3.34 mmol)及對甲苯磺醯肼（310.7 mg, 1.67 mmol)於 DME (2 1111〇及H20 (0·2 mL)中之混合物加熱至95°C達I.5小時。 反應混合物冷卻至室溫，及以4 N HC1 (0.8 mL)處理。粗 -326· 200819460 產物經由HPLC純化，製得101 mg之154，產率47%。β NMR (3 00MHz, CDC13 )5 8.40 (d? J = 9.3Hz? 1H), 8.29 (s? 1H)，7.88 (s，1H)，7.63 (d，J = 9.6Hz，1H)5 7.3 3 -7.2 1 (m, 1H)? 6.96 (t, J = 7.8Hz? 2H .) 5.86 (bs? 1H)? 4.83 -4.70 (m? 1H)，4.31- 4.00 (m, 5H)，4.17 (s，3H)，3.5 7 -3.47 (m，1H)， 3.47 -3.3 3 (m，1H), 2.90 -2.78 (m5 1H), 2.64 -2.52 (m，1H)， 2.06 - 1.92 (m，1H)，1.90 - 1.69 (m，2H), 1.69 -1.12 (m， 22H), 1.37 (d， J = 6.6Hz， 6H); 31P (1 2 1 · 4 Μ H z， C D 3 O D ) δ 42_2。 實例1 5 5 :製備化合物1 5 5
大環狀次膦酸酯（實例147)(212.6 mg，0.25 mmol)及 2-(2 -異丙基胺基-噻唑-4-基）-7 -甲氧基-8-甲基-喹啉-4-醇 (82.0 mg，0.25 mmol)於 NMP (3 mL)中之溶液以 Cs2C03 (81.3 mg，0.25 mmol)處理。反應混合物加熱至7(TC整夜， 然後冷卻至室溫。反應物以 5% LiC 1 (10 mL)稀釋及以 EtOAc萃取 （3x10 mL)。混合的有機層以鹽水清洗，以 Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 -327- 200819460 化，製得166.1 mg所欲之產物，產率70%。 上述製得之化合物（ 1.3 8 3 g, 1.45 mmol)於CH2C12 (7.5 mL)中之溶液加入4 N HC1的1，4-二噁烷溶液（7.5 mL，30 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2小時，並在真空下濃 縮、乾燥20分鐘，然後溶於CH3CN (15 mL)。加入飽和 NaHC03水溶液（15 mL)，並攪拌5分鐘。加入新鮮製備之 氯甲酸環戊酯（7.7 mmol)於THF (15 mL)中之溶液。反應 在1小時內完成。在旋轉蒸發器上移除溶劑，及殘餘物以 EtOAc稀釋。用IN HC1使混合物pH = 2，且將兩層分離。 有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。 製得爲粗產物之胺基甲酸環戊酯（1.21 g)。 在 〇t：下，上述之胺基甲酸環戊酯（194.9 mg，0.20 mmol)於CH3CN (2 mL)中之溶液力□入5當量碘三甲基矽 烷。反應混合物在0°C下攪拌35分鐘。加入2,6-二甲基吡 啶（0.4 mL)，並攪拌5分鐘。加入MeOH (0.4 mL)，並攪 拌20分鐘。將混合物濃縮，所得粗質酸經由HPLC純 化，製得 97.4 mg 酸 155，產率 51%。LC/MS = 935.40 (M + + 1)〇 實例1 5 6 :製備化合物1 5 6 -328- 200819460
155 (46.8 mg, 0.05 mmol)於 DME (0.5 mL)/ mL)中之溶液加入對甲苯磺醯肼（69.7 mg, 0.80 NaOAc (61.8 mg? 〇·75 mmol)。反應混合物加熱 2.5小時，及冷卻至室溫。加入數滴3 N HC1使 產物經由Η P L C純化，製得2 0 · 6 m g酸1 5 6，產 LC/MS = 9 3 7.3 3 (M+ +1)。 實例1 5 7 :製備化合物1 5 7 H20 (0.05 mm ο 1)及 至9 5 °C達 pH = 2。粗 率 44% °
酸 XI (3.09g，5·03 mmol)及 NMM (0.78 mmol)溶於THF (40 mL)，及冷卻至（TC。逐滴力口 異丁酯（0.69 mL，5.3 mmol)，及在 〇t：攪拌 1 小 地加入（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）_(2,3,6 -三氟 mL ? 7.06 入氯甲酸 時。緩慢 基次膦 -329- 200819460 酸乙酯（如實例68以DMS製備）（1.75g，5.48 mmol)，所 得混合物在室溫下攪拌1 · 5小時。反應物以E t Ο A c稀釋及 以IN HC1、飽和NaHC03溶液/鹽水清洗，以Na2S04乾燥 及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得2.7 g 化合物二烯，產率59%。 上述之二烯化合物（2.7g，2.94 mmol)溶於CH2C12 (300 mL)，及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (970 mg， 1.18 mmol)，及另脫氣2 0分鐘。反應混合物加熱至4 5 °C 整夜，及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦（9 g)，接著加入 TEA (20 1111〇及H20 (40 mL)。反應混合物加熱至5(TC整 夜。將兩層分離。有機層以 〇 · 5 N HC 1、鹽水清洗，以 Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 化，製得2.01 g大環狀化合物，產率77%。 上述之大環狀化合物（2.〇g, 2.25 mmol)及8-氯-2-(2-異丙基胺基-嚷嗤基）-7 -甲氧基-D奎琳-4-醇（786 mg，2.25 mmol)於 NMP (1 1 mL)中之溶液以 C s 2 C Ο 3 ( 8 8 0 m g，2 · 7 m m ο 1)處理。反應混合物加熱至6 0 °C達1小時。加入另外 之 Cs2C03 (1.13g，3.47 mmol)，及在 60°C下攪拌 1.5 小 時。溫度降低至4 0 °C整夜，然後冷卻至室溫。反應物以 EtOAc稀釋，及以5% LiCl (3x)及鹽水清洗。有機層以 Na2S04乾燥及力口以濃縮。粗產物直接用於下一反應步驟。 在 0°C 下，殘餘物（2.07g，2.07 mmol)溶於 CH3CN (20 mL)。此混合物加入碘三甲基矽烷（1·48 mL， 10.39 mmol)。反應混合物在〇°C下攪拌5分鐘。力D入2,6-二甲基 -330- 200819460 Π定（1 · 4 4 m L，1 2 · 4 6 m m o 1)，並攪样 1 · 5 小時。加入
MeOH，並攪拌30分鐘。將混合物濃縮，及再溶於少量 MeOH，並分成兩部分。一部分經由HPLC純化，製得404 mg 之 157。LC/MS = 9 73 (M+ +1)。
實例157X:製備化合物157X
如實例 156所述般，將化合物 157還原，製得 157X。LC/MS = 975 (M+ +1)。 實例1 5 8 :製備化合物1 5 8
在0°C下，（卜苄氧基羰基胺基-2-乙烯基環丙基）-(3- -331 - 200819460 氯·2,6-二氟-苄基）-次膦酸酯（實例 65)(8g，17.1 mmol)於 TFA (46 mL，614 mmol)中之溶液力口入 DMS (12.1 mL， 164.2 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌整夜。反應混合 物倒至冰冷4N HC 1 (500 mL)，及以1/1 iPrOH /庚烷（500 mL)萃取。有機層以4N HC1清洗（5x5 00 mL)。在冰浴中， 將混合水層調整至 pH=10。水層以 EtOAc萃取（5x500 mL)。有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮， 製得4.1g胺，產率66%。 得自中間物X之酸（8.4g，13.86 mmol)及上述製得之 胺（3.9g，11.55 mmol)溶於 DMF (100 mL)。加入 HATU (10.97g，2 8.8 8 mmol)及 NMM (5.9g，5 7.7 5 mmol)，所得混 合物在室溫下攪拌2小時。反應物以EtOAc稀釋及以20% LiCl清洗（2x5 0 0 mL)。有機層以NH4C1水溶液（5 00 mL)清 洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速 層析純化，製得 8.2 g 三肽。4 NMR (3 00MHz，CDC13):3 7.74 (m，4H)，7.24 (m，1H)，6.83 (m，1H)，6.07 (m，1H), 5.78 (m，2H)，5.25 (m，1H)，5.17 (m，1H)，4·98 (m，1H)， 4.67 (d，1H)，4.38 (m，2H)，4.18 (m，2H)，4.12 (m，2H)， 3.83 (m，2H)，3.65 (m，2H)，3.32 (m，3H)5 2.24 (m，3H)， 2.04 (m，4H)，1.80 (m，2H)，1·63 (m，1H)，1.51(m，2H)， 1.42 (m，9H), 1.25 (m, 3H)。31P (121.4MHz? CDC13):5 4 5.1 1 0, 4 4.254非對映異構物。 三肽（5.〇g, 5.43 mmol)溶於 CH2C12 (60 0 mL)，及以 N2 脫氣 30 分鐘。加入 Grubb 氏 G1 (1.34g，1.63 mmol)， -332- 200819460 並另脫氣30分鐘。反應混合物加熱至45 °C整夜，及冷卻 至室溫。加入三（羥甲基）膦（9.9g，80.1 mmol)，並攪拌20 分鐘。加入TEA (1 6· 5g, 1 62.9 mmol)，並攪拌20分鐘， 接著加入H20 (60 mL)。反應混合物加熱至50T：達4小 時，然後置於室溫整夜。將兩層分離。有機層以 〇·5Ν HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經 由組合快速層析純化，製得2. lg環化之化合物。1H NMR (3 0 0MHz，CDOD3):5 7·87 (m，4H)，7·40 (m，1H)，7.03 (m， 1H)，6.75 (m，1H)5 5·78 (m, 1H)，5·60 (m，1H)，5.40 (m， 1H)，5.11 (m，1H)，4.90 (m, 1H)，4.37 (m，3H)，3.83 (m， 2H)，3.75 (m, 2H)，3.51(m，1H) 3.22 (m，2H)，2.24 (m，3H), 2.04 (m, 4H)5 1.80 (m, 2H), 1.63 (m, 1H), 1.51 (m，2H)， 1.42 (m? 9H)? 1 · 2 5 (m，3 H)。31 P (12 1 · 4 Μ H z，C D O D 3): δ 45.978, 45.6 1 3 非對映異構物。 環狀次膦酸酯（2.1g，2.35 mmol)及 8-氯_2-(2 -異丙基 胺基-噻唑-4-基）-7-甲氧基-喹啉-4-醇 （820 mg，2.35 mmol) 於 NMP (50 mL)中之溶液以 Cs2C03 ( 1.53g, 4.7 mmol)處 理。反應混合物加熱至8 (TC達6小時，然後冷卻至室溫。 反應物以EtOAc稀釋，及以H20清洗。用IN HC1將水層 調整至 pH = 4，及以 10% MeOH / EtOAc 萃取（2x200 mL)。 將混合有機層濃縮。將所得粗質物溶於CH2C12 (1L)，以 Na2S04乾燥及加以濃縮。粗產物在真空中乾燥，並用於下 一反應步驟。 上述製得之粗產物（1.5g，1.5 mmol)CH2Cl2 (5 mL)中 - 333- 200819460 之溶液加入4 N HC1的1，4-二噁烷（5 mL，20 mmol)。反應 混合物在室溫下攪拌0.5小時，並在真空下濃縮、乾燥2 0 分鐘，然後溶於 CH3CN (20 mL)。加入 Na2C03 (1.5g，18 mmol)於H20 (30 mL)中之溶液，並攪拌5分鐘。力日入新鮮 製備之氯甲酸環戊酯（l.llg，7.5 mmol)的THF溶液。反應 在1小時內完成。溶劑在旋轉蒸發器上移除，及殘餘物以 EtOAc稀釋。用IN HC1將混合物調整至PH = 2，且將兩層 分離。有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及 濃縮。粗產物在真空中乾燥整夜，及溶於CH3CN (3 mL)/ CH2C12 (1 mL)。反應混合物冷卻至，及加入碘三甲基 矽烷（1.1 mL，7.5 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌 30分鐘，及冷卻至〇°C。加入2，6-二甲基吡啶（1 mL)及 Me OH (1 mL)，並攪拌10分鐘。將混合物濃縮，粗產物經 由 HPLC 純化，製得 560 mg 產物 158。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 8.91 (s， lH)， 8.36 (d5 J = 9.0Hz5 2H)， 8.30 (s， 1H)，7.85 (s，1H)，7·65 (d，J = 9.6Hz，2H)，7.39 (m，1H), 7.00 (t，J = 9.0Hz，1H)，5.85 (s，1H)，5.77 (m，1H)，5.33 (m， 1H)，4.78 (m，1H), 4.38 (m，1H)，4.22 (m，2H)，4.07 (s， 3H), 3.75 (m，1H)，3.38 (m，2H)，2.85 (m，1H)，2.57 (m，
1 H) 1.9 8 - 1.3 7 (m，2 1 H)，1 · 3 3 (m，6 H)。31 P NM R (121.4MHz，CD3OD):6 40.23 1; LC/MS = 989 (M + + 1)。 實例159:製備化合物159。 -334- 200819460
158 (771 mg，0.79 mmol)於 DME (5 mL)/ H2〇 (0·4 mL) 中之溶液加入對甲苯磺醯肼（737 mg, 3.96 mmol)及NaOAc (650 mg, 7.93 mmol)。反應混合物加熱至95 °C達l·5小 時，及冷卻至室溫。加入數滴3 Ν HC1使ρΗ = 2。粗產物 經由 HPLC純化，製得 5 8 7 mg酸 159，產率 76%。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.8 9 (s，1H)，8.39 (d5 J = 9.5Hz， 2H)，8.25 (s，1H)，7.82 (s，1H)，7.60 (d，J = 9.5Hz，2H)， 7·40 (m，1H)，7.01 (m，1H)，5.84 (s，1H)，4.75 (m，1H)， 4·38 (m，1H)，4.22 (m, 2H)，4.07 (s，3H)，3·75 (m，1H)， 3.38 (m，2H)，2.83 (m，1H)，2.58 (m，1H)，2.31 (m，1H) 1·82 (m， 1H), 1.58 (m, 23H)， 1.35 (m, 6H)。31P (121.4MHz，CD3OD):3 41.136; LC/MS = 991(M + + 1)。 實例160:製備化合物16〇 -335- 200819460
步驟 1。N-Boc-L-絲胺酸（l〇.26g，50 mmol)於 DMSO (200 mL)中之溶液以NaH (4g，100 mmol)處理。所得混合 物在室溫下攪拌1小時，及加入5-溴-1-戊烯 （6 mL，50 mmol)。力□入另外之NaH (4g，100 mmol)，及攪拌反應混 合物整夜。反應物以EtO Ac稀釋 （200 mL)，及緩慢地加 入H20使反應驟停。加入EtOAc (200 mL)，及加入1N HC1使pH = 2。將兩層分離。有機層以h20、鹽水清洗，以 N S04乾燥，加以過濾及濃縮。殘餘物以〇.1 N NaOH (200 mL)處理，及以己烷萃取（2X200 mL)。用IN HC1使 水層pH = 2，及以EtOAC萃取（2 x 200 mL)。有機層以 Na2S04乾燥及加以濃縮，製得8g酸。1H NMR (3 00MHz， CDC13)』5.7 (m，1H)，5.36 (d，j = 8.4Hz，1H)，5.11 (s5 1H)， 4.92 (m? 2H)5 4.41 (q, J-5.7Hz, 1H)? 3.82 (dd? J = 9.9, 21.6Hz，1H)，3.52 (m，2H)，3 3 4 (m, 3H)，2.21 (m5 1H)， 1.95 (m，3H)，1.52 (dt，J = 7.8，14.4Hz，2H)，1.34 (s，9H)。 LC/MS = 3 69.9 (M + +l)，3 92·〇 (M + + Na)。 步驟 2。中間物 IX (6.〇g，12 9 匪〇1)以 4N HC1 /1，4- 一螺院（3 2 m L)處理，及攪拌1小時。反應混合物在真空 下濃縮及乾燥20分鐘。粗質胺鹽酸鹽溶於DMF (70 -336- 200819460 mL)，及加入酸（7.1g，25.8 mmol)。加入 HATU (12g，32.25 mmol)及NMM (6.6g，64.5 mmol)。反應混合物在室溫下攪 拌整夜。反應物以EtOAc稀釋（3 00 mL)，以IN HC1 (200 mL)、飽和NaHC03溶液、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及 加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得7.5 g二 肽。1H NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.76 (m，4H)，5.81(m， 2H)，5.35 (m，1H), 5.19 (m，1H)，5.01 (m，2H)，4.73 (m， 1H)，4.48 (m，1H)，4.03 (m，1H)，3.79 (m，1H)，3.68 (m， 3H)，3.63 (m，1H)，3.43 (m，3H)，2.41 (m，1H)，2.11 (m， 2H)，1.67 (m，2H)，1.48 (m，9H)。 二肽（7.1g，11.5 mmol)於 CH2C12 (5 mL)中之溶液加入 4 N HC1於1，4-二噁烷（29 mL, 115 mmol)中之溶液。反應 混合物在室溫下攪拌1小時，及在真空中濃縮20分鐘。 環戊醇（4.9g，57.5 mmol)溶於 THF (70 mL)，及加入光氣 (9.7 g , 9 7.8 m m ο 1)於甲苯中之溶液。反應物攪拌1 . 5小時 及濃縮至一半體積以移除光氣。粗質胺鹽酸鹽溶於EtOAc (200 mL)。加入 Na2C03 (17.1g，138 mmol)於 H20 (100 mL) 中之溶液，並攪拌5分鐘。加入新鮮製備之氯甲酸環戊酯 的THF溶液。反應在1.5小時內完成。將兩層分離。有機 層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗產 物經由組合快速層析純化，製得3.9g產物。4 NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.76 (m，4H)，5.81 (m，2H)，5.35 (m， 1H)，5.19 (m5 1H)，5·01 (m，2H)，4.73 (m，1H)，4.48 (m， 1H)5 4.03 (m，1H)，3.79 (m，1H)，3.68 (m，3H)，3.63 (m， -337- 200819460 1H)，3.43 (m，3H)，2·41 (m，1H), 2.11 (m，2H)，1.67 -1·31 (m，10H)。 上述製得之酯（3.9g，6.2 mmol)溶於THF (30 mL)、 H20 (30 mL)及 MeOH (10 mL)，及加入 LiOH (1.3g，31 mmol)。反應混合物在室溫攪拌 1小時，並以 EtOAc稀 釋。反應混合物以IN HC1酸化至PH = 2。水層以EtOAc萃 取。混合的有機層以鹽水清洗，以N a2 S Ο 4乾燥，在真空 下濃縮及乾燥，製得酸。製得之粗質酸及胺（實例147，步 驟 l)(2.1g，6.8 mmol)溶於 DMF (50 mL)。加入 HATU (5.9g，15.5 mmol)及 NMM (3.1g，31 mmol)，所得混合物在 室溫下攪拌2小時。反應物以 EtOAc稀釋，及以IN HC1、飽和NaHC03溶液/鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及 加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得3 · 7 g所 欲之二烯化合物。1H NMR (300MHz，CDC13)J 7.76 (m， 4H)，7.19 (m，1H)，6.82 (m，1H)，5.95 -5.62 (m，3H)，5.49 -5.20 (m，3H)，5.19 (m，1H)，5.01 (m，2H)，4.73 (m，1H)， 4.48 (m，1H)，4.19 -3.82 (m，3H)，3.79 -3.21 (m5 7H)，2.41 (m，1H)，2.23 (m，1H)，2.11 (m，2H)，1.83 -1.31 (m，12H)， 1.09 (m, 3H)。31P NMR (121 ·4ΜΗζ，CDC13 ):6 45.1 6 8, 43.313非對映異構物。 上述之二烯（3.7g，4.3 mmol)溶於 CH2C12 (400 mL)及 以 N2 脫氣 30 分鐘。加入 Grubb 氏 G1 (l.lg，1.3 mmol)， 並另脫氣30分鐘。反應混合物加熱至45 °C達3小時及冷 卻至室溫。加入三（羥甲基）膦（8.0g, 64.5 mmol)，接著加 -338- 200819460 入 TEA (13.1g，129 mmol)及 H20 (3 0 mL)。反應混合物攪 拌整夜，及分離兩層。有機層以0.5 NHC1、鹽水清洗， 以N a2 S Ο 4乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析 純化，製得 1.7g 環化之化合物。1H NMR (3 00MHz， CDC13):8 7.76 (m，4H)5 7.19 (m，1H)5 6.82 (m，1H)，5.81 (m，1H)，5.58 (m，1H)，5.19 (m，1H)，5.01 (m，2H)，4.73 (m，1H)，4.48 (m，1H)，4.19 -3.82 (m，3H)，3.79 -3.21 (m， 7H)，2.41 (m，1H)，2.23 (m，1H)，2.11 (m，2H)，1.83 -1.31 (m，12H)，1.09 (m，3H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CDC13):5 45.76 8, 4 1.8 1 3非對映異構物。 環化之化合物（1.7g，1.9 mmol)及8-氯-2-(2-異丙基胺 基-噻唑-4 -基）-7 -甲氧基-喹啉-4 -醇（〇.62g，1.8 mmol)於 NMP (40 mL)中之溶液以 Cs2C03 (1.3g，3.8 mmol)處理。 反應混合物加熱至80 °C達6小時，然後冷卻至室溫。反應 物以EtOAc稀釋，及以h20清洗。使水層pH = 4，及以 5% MeOH / EtOAc 萃取（2x200 mL)。混合有機層以 Na2S〇4 乾燥及加以濃縮。殘餘物經由組合快速層析純化，製得 1 . 6 g產物。 上述製得之酯（1.6g，1.6 mmol)溶於 CH3CN (3 mL)， 及冷卻至〇C。逐滴加入碑三甲基5夕院（i.6g，8.1 mmol)。 反應混合物升溫至室溫，並攪拌〇. 5小時。反應物冷卻至 〇C ’及加入2,6·二甲基[]比u定（1 mL)。加入MeOH (1 mL)， 及濃縮反應混合物。粗產物經由HPLC純化，製得600 mg 酸’其以對甲苯磺醯肼（75 8 mg，4·1 mmol)及NaOAc (672 -339- 200819460
mg，8.2 mmol)還原，製得 1 60 (3 90 mg)。4 NMR (3 0 0MHz，CD3OD):5 8.32 (d，J = 9.6Hz，1H)，8.26 (s，1H)， 7.86 (s，1H)，7.65 (d，J = 9.3Hz，1H)，7.26 (m，1H)，6.92 (t， J = 6.9Hz，2H)，5.86 (s，1H)5 4.75 (m，1H)，4.65 (m，1H)， 4.48 (m，2H)5 4.21 (m5 1H)，4.18 (s，3H)5 4·07 (m，1H)， 3·75 (m，6H), 3.53 (m，2H)，2.83 (m，1H)，2.58 (m，1H)，
1.87 (m5 3H)，1.68 - 1.3 6 (m5 17H)，1 · 3 6 (m，6 H)。31P NMR (121.4MHz, CD3OD):6 42.637。LC/MS = 959 (M + + 1)。 實例1 6 1 :製備化合物1 6 1
步驟1。2-氧雜-5-氮雜-雙環並[2.2.1]庚烷-3-酮胺鹽 酸鹽（1 .〇g，6.7 mmol)及酸（實例 160,步驟 l)(2.73g，10 mmol)溶於 CH2C12 (60 mL)/DMF (7 mL)。力口入 HATU (7.64g，20.1 mmol)及 NMM (2.94 mL，26.80 mmol)，及混 合物在室溫下攪拌1小時。反應物以CH2C12稀釋，及以 5% LiCl清洗兩次。有機層以飽和NaHC03溶液清洗，以 Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析接著 Η P L C純化，製得7 2 5 m g化合物，產率2 9 %。 -340- 200819460 步驟2。得自步驟1產物（725 mg，1.97 mmol)及實例 58之胺（l.Og，3.30 mmol)於甲苯（5 mL)中之黃色溶液加入 己酸鈉（327 mg，1.97 mmol)於H2〇 (15 mL)中之溶液。反 應混合物加熱至70 °C達60小時。反應混合物以EtO Ac稀 釋，以飽和NH4C1溶液（2x)、飽和NaHC03溶液（2χ)及鹽 水清洗。有機層以Na2S04乾燥，加以濃縮，及在真空中 乾燥，製得520 mg爲粗產物之醇。上述之醇（520 mg， 0.78 mmol)及 DABCO (279 mg，2.48 mmol)溶於甲苯（4 mL)。逐滴加入對漠苯基礦釀氯 （635 mg，2.48 mmol)的甲 苯（4 mL)溶液。反應混合物在室溫攪拌1小時。反應物以 EtOAc稀釋，及力[]入飽和NaHC03溶液使反應驟停。將兩 層分離，有機層以〇.5N HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾 燥，加以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製 得 621 mg對溴苯基磺酸酯，產率 90%。31P NMR (121.4MHz，CDC13 )5 47.0，44.5，42.8，41·6。LC/MS = 8 90.4 (Μ + +1) 〇 步驟3。對溴苯基磺酸酯（620 mg，0.70 mmol)溶於 CH2C12 (70 mL)及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (144 mg，0.18 mmol)，並另脫氣20分鐘。反應混合物加 熱至5 0 °C達5 · 5小時及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦 (1.09g)，接著加入 TEA (2.44 mL)及 H20 (10 mL)。反應 混合物加熱至50 °C達6小時，然後置於室溫整夜。將兩層 分離。有機層以0.5N HC1及鹽水清洗，以Na2S04乾燥， 及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得5 〇4 mg -341 - 200819460
烯烴，產率 84%。 4 NMR (3 00MHz， CDC13)：5 31P (121.4MHz? CDC13)5 步驟4。化合物烯烴（504 mg，0.59 mmol)及2-(2-異丙 基胺基-噻唑-4 -基）-7 -甲氧基-喹啉-4 -醇（185 mg，〇·59 mmol)於 ΝΜΡ (5.9 mL)中之溶液以 Cs2C03 (191 mg，〇·59 mmol)處理。反應混合物加熱至63 °C達7小時，然後冷卻 至室溫整夜。反應物以EtOAc稀釋及以NaHC03清洗。 有機層以5% LiCl及鹽水清洗，以Na2S04乾燥’及加以 濃縮。粗產物（551 mg)直接用於下一反應步驟。 在0°C下，上述製得之粗產物（551 mg，0.59 mmol)於 CH3CN (5.9 mL)中之溶液力口入碘三甲基矽烷（〇·42 mL，2.94 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌30分鐘，及冷卻至 〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（0.69 mL，5.87 mmol)，接著加 入MeOH (3 mL)及升溫至室溫。將混合物濃縮，在真空中 乾燥，然後溶於CH3CN (3 mL)。加入飽和Na2C03的H20 (3 mL)溶液，並攪拌5分鐘。加入新鮮製備之氯甲酸環戊 酯（4.11 mmol)的THF溶液。反應在1小時內完成。溶劑 在旋轉蒸發器上移除。殘餘物被處理及經由HPLC純化’ 製得 180 mg 之 161。4 NMR (3 00MHz，CD3OD )δ 8.27 (d， J = 9.6Hz，1H)，8.2 (s，1H)，7.76 (m，2H), 7·32 (dd，J = 2.4, 9.3Hz，1H)5 7.2 6 (m，1H)，6.94 (t，J = 7.5Hz，2H)，5.84 (s， 1H)，5.67 (dd, J = 8.4，9.9Hz，1H)，5.45 (t，J = 9.9Hz，1H)， 4.77 (t，J = 8.1Hz，1H)，4.69 (d，J=12Hz，1H), 4.54 (m，2H)， 4.17 (m，3H)，4.03 (s，3H)，3·26 -3·73 (brm，7H)5 2.81 (dd， -342- 200819460 J = 7.8，14·1Ηζ，1H)，2.5 -2.7 (brm，2H)，2·38 (m，1H)，2.2 (m，1H)，1.4 -1.7 (brm，10H)，1.36 (d，J=15.6Hz)，31P NMR (121.4MHz? CD3OD)5 40.9 ° LC/MS = 92 5 · 5 (M + +1 )。 實例162:製備化合物162。
161 (103 mg，0.11 mmol)於 DME (18 mL)/H2〇 (1.8 mL) 中之溶液加入對甲苯磺醯肼（156 mg，0.84 mmol)及NaOAc (13 8 mg，1· 68 mmol)。反應混合物加熱至95 °C達3小時及 冷卻至室溫。將混合物濃縮，溶於CH2C12，及以H20清 洗。水層以CH2C12萃取兩次。有機層以Na2S04乾燥及加 以濃縮。粗產物經由Η P L C純化，製得7 4 m g酸16 2，產 率 71 %。4 NMR (3 0 0MHz? CD3OD )δ 8.25 (d， J = 9Hz， 1H)，8.19 (s，1H)，7.74 (d，J = 3.6Hz，2H)，7.34 (dd，J = 2.1, 9.3Hz，1H)，7.26 (qd，J = 2.1，8.7Hz，1H)，6.95 (t，J = 7.8Hz， 2H)，5.84 (s5 1H)，4.7 (t，J = 8.4Hz，1H)，4·61 (brs，2H)5 4.52 (dd，J = 3.0，3.6Hz，1H)，4.17 (m，2H)，4.03 (s，3H)， 3.67 (m，3H)，3.45 (m，1H)，3_33 (m，2H), 2.82 (dd，J = 7.8, 14.4Hz，1H)，2.53 (ddd，J = 3.9，8.7，13.5Hz，1H)，1.4 - 2.0 -343- 200819460 (brm，19H)，L34 (d，J = 6.3HZ)。31p NMR (121·4ΜΗ CD3〇D)5 42.9 LC/MS = 927.6 (M + + l) 〇 實例163:製備化合物163
在0°C下，2-烯丙氧基-乙醇（20§，196 mm〇1)於吡啶 (3.48 mL，43 mmol)中之溶液加至 PBr3 (7.45 mL，78·4 mmol)。反應混合物在室溫攪拌整夜。將白色沉M物過爐 出。有機層以醚稀釋，以飽和NaHC〇3溶液及鹽水清洗’ 以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速 層析純化，製得6.3g之3-(2-溴-乙氧基）_丙儲’產率 8 5 0/〇°1HNMR(3 00MHz，CDCl3 ):5 5.8 5 (m，lH)，5.19- 5.38 (m，2H)，4.15 (d，2H)，3·78 (dd，2H)，3.48 (dd，2H)。 LC/MS = 165 (M + + 1)，187 (M + + Na)。 N-Boc-L-絲胺酸（7g，34 mmol)於 DMSO (100 niL)中之 溶液以60% NaH (1.36g，34 mmol)處理。混合物在室溫下 攪拌1小時，及加入化合物3_(2_溴-乙氧基）-丙烯（5.6g， 34 mmol)。加入另外之NaH (1.36g，34 mmol)，反應混合 -344- 200819460 物攪拌整夜。反應物冷卻至〇°C，以EtOAc稀釋，及緩慢 地方加入IN HC1使反應物PH = 4而使反應驟停。將兩層 分離。有機層以H20及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以 過濾及濃縮。殘餘物以〇·3Ν NaOH處理及以己烷萃取兩 次。用IN HC1使水層PH = 4，及以EtOAc萃取。有機層以 Na2S04乾燥及加以濃縮，製得 3.75 g酸。1H NMR (3 00MHz，CDC13)：5 5.90 (m5 1 Η)，5 · 1 9 - 5.3 8 (m，2H)， 4.42 (m，1H)，4.15 (dd，2H)，3.98 (dd，2H), 3.60 (d，2H)， 3.70 (d，2H)。LC/MS = 2 8 9.9 (M + + 1)。 中間物 XI (4g，5.45 mmol)於 CH2C12 (30 mL)中之溶 液力[]入4N HC1的1，4-二噁烷（32 mL，129 mmol)溶液。反 應混合物在室溫下攪拌0.5小時，並在真空下濃縮及乾燥 20分鐘，製得胺鹽酸鹽。所得胺鹽酸鹽及上述製得之酸 (2.4g，8.42 mmol)溶於 DMF (30 mL)。加入 HATU (5g， 13.1 mmol)及 NMM (2·8 mL，26 mmol)，所得混合物在室 溫下攪拌整夜。粗產物經由組合快速層析純化，製得 3.65g 三肽，產率 75%。iH NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.80 (m，4H)，7.18(m，lH)，6.89(m，2H)，5.98(m,2H)，5_42-5·02 (m，5H)，4.78 (m，1H)，4·58 (m，1H)，4.20 -3.31 (m， 12H)5 2.8 2 (s, 2H), 2.58 -2.21 (m? 2H)5 1.80 (m? 1H), 1.42 (S， 9H)， 1.35 -1.08 (m9 5H) 。 J (121 ·4ΜΗζ, CDC13)：6 .44.89, 44.82 。LC/MS = 90 5.80 (M + + 1)，92 8.1 3 (M + + N a) 〇 三肽（3 · 6 5 g，4 mm o 1)於 CH2C12 (20 m L)中之溶液加入 -345- 200819460 4 N H C 1的1，4 -二B惡院（2 0 m L，8 0 m m ο 1)溶液。反應混合物 在室溫下攪拌0.5小時，並在真空下濃縮，及乾燥20分 鐘，然後溶於 EtOAc (50 mL)。加入 Na2C03 (5.9g，48 mmol)於Η2 Ο (2 5 mL)中之溶液，並攪拌5分鐘。力日入新鮮 製備之氯甲酸環戊酯（2.93g，19.73 mmol)的THF溶液。 反應在1 .5小時內完成。溶劑在旋轉蒸發器上移除，殘餘 物以EtOAc稀釋。用IN HC1使混合物pH = 2，且將兩層分 離。有機層以鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃 縮。製得胺基甲酸環戊酯（3.5 g)。4 NMR (3 00MHz， CDC13)： !H NMR (3 00MHz? CDC13)：5 7.7 8 (m, 4H)5 7.18 (m，1 H), 6 · 9 0 (m，2 H)，6 · 1 8 - 5 · 8 5 (m，2 H)，5 . 5 8 - 4.9 0 (m， 5H)? 4.78 (m, 1H)? 4.60 (m? 1H)? 4.20 -3.25 (m, 13H)? 2.81 (s，2H), 2.60 -2.20 (m，2H)，1.9 -1.3 (m，9H)，1.30 -1.05 (m，5H) 31P (121 ·4ΜΗζ，CDC13):5 44.70, 42.66。 LC/MS= (M + + 1)，940.98 (M + + Na)。 上述之胺基甲酸環戊酯（3.26g，3.56 mmol)溶於 CH2C12 (4 5 0 mL)，及以N2脫氣30分鐘。加入Grubb氏 G1 (880 mg, 1.07 mmol)，及另脫氣30分鐘。反應混合物 加熱至45 °C整夜，及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦（6.7 g， 53.4 mmol)，接著加入 TEA (15 mL，107 mmol)及 H20 (50 mL)。反應混合物加熱至回流整夜。將兩層分離。有機層 以0.5N HC1、鹽水清洗，以Na2S〇4乾燥，及加以濃縮。 粗產物經由組合快速層析純化，製得2.73 g環狀三肽。 環狀三肽（1.75g, 1.97 mmol)及中間物 X (622 mg, 1·78 -346- 200819460 mmol)於 NMP (35 mL)中之溶液以 CS2CO3 (1.24g，3.82 mmol)處理。反應混合物加熱至8(TC達6小時’然後置於 室溫整夜。反應物以EtOAc稀釋，及以H2〇清洗。用1N H Cl使水層pH二4，及以5% Me OH / EtO Ac萃取兩次。混 合有機層以Na2S04乾燥及加以濃縮。粗產物經由組合快 速層析純化，製得2.0 g烯烴中間物。
在 〇。(：下，烯烴中間物（487 mg，0.49 mmol)於 CH3CN (2.5 mL)中之溶液在0°C加入碘三甲基矽烷（〇·34 mL，2·4 mmol)。反應混合物升溫至室溫，並攪拌30分鐘’然後冷 卻至 〇°C。加入 2,6-二甲基吡啶（0.34 mL)及 MeOH (2·5 mL)，並攪拌10分鐘。將溶劑濃縮，粗產物經由HPLC純 化，製得 246 mg 酸 163。4 NMR (3 00MHz, CD3OD):6 8.32 (d, J=11.4Hz，2H)，7·86 (s5 1H)，7.67 (d，J = 9.3Hz， 1H)，7.28 (m，1H)，6.96 (dd，J = 7.8，7.8Hz，2H)，5.85 (s5 1H)，4.67 (m，1H)，4.56 (m，2H), 4.47 (bs，1H), 4.24 (m5 1H)，4.17 (s，3H)，4.03 (m，1H)，3.99 -3.46 (m，10H)，3.32 (m，3H)5 2.8 7 (m，1H)，2.61 (m，1H)，2.04 - 1.25 (m， 18H)。 31P (121.4MHz， CD3OD):5 42.463 。 LC/MS = 975.3 0 (M + + 1)。 實例1 6 4 :製備化合物1 6 4 -347- 200819460
藉由套管加入3-丁烯磺醯氯於Ch2C12 (3 mL)中之溶 液時，2.17g (9.36 mmol)2-第三丁氧羰基胺基-3-胺基丙酸 甲酯及 1.56 mL (11.19 mmol)三乙胺於 CH2C12 (20 mL)中 之溶液在0 °C下攪拌。3 0分鐘後，混合物在室溫下攪拌1 4 小時及加以濃縮。黏稠殘餘物溶於乙酸乙酯（50 mL)及以 0 · 3 Μ H C 1水溶液清洗。水層部分以乙酸乙酯萃取（3 0 mL)。有機相邰分以水及鹽水各清洗一次，加以乾燥 (MgS04)及濃縮。殘餘物經由組合快速層析（120 g管柱）以 己烷及乙酸乙酯爲洗提液進行純化，製得1.54g (49%)爲 淡黃色固體之磺醯胺。 3-(3-丁烯基磺醯胺基）-2-第三丁氧羰基胺基-丙酸甲酯 (1.5 4g，4·5 8 mmol)溶於4 N HC1的二噁烷溶液，所得溶液 在室溫下攪拌1小時及加以濃縮。乾燥後，殘餘物在高真 空下乾燥20分鐘，殘餘物及三乙胺（1.92 mL，13.78 mmol) 溶於H20 (23 mL)，及將THF (23 mL)及環戊氧基羰氧基 丁二醯胺（1.10g，4.83 mmol)加至所得溶液。在以H20 (30 mL)稀釋前，溶液在室溫下攪拌3.5小時及濃縮至一半體 積。產物以乙酸乙酯萃取（50 mLx2)，及萃取液以h20 (50 -348- 200819460 mLxl)及飽和 NH4C1水溶液（50 mLxl)清洗，加以乾燥 (MgS04)及濃縮製得1.52g (95%)。在0°C下，所得甲酯 (1.52g，4.36 mmol)及 LiOH (522.5 mg，21.82 mmol)溶於 H20 (20 mL)、甲醇（20 mL)及 THF (2 0 mL)，所得混合物 在室溫下攪拌9小時。將溶液濃縮以移除THF及甲醇，所 得濃縮溶液以H20稀釋 （30 mL)及以乙酸乙酯清洗（30 mL xl)。水層部分以6N HC1 (5 mL)酸化後，產物以乙酸乙酯 萃取（4 0 mLx3)。萃取液以鹽水清洗（40 mLxl)，加以乾燥 (MgS04)及濃縮，製得 1.30g (89%)酸。 二肽 XII (3.20g，4.36 mmol)溶於 16.5 mL 之 4N HC1 的二噁烷溶液，且在室溫下攪拌1小時。將所得溶液濃縮 及在真空中乾燥。在室溫下，所得殘餘物於DMF (7 mL) 中之溶液加至上述之酸（1.30g，3.89 mmol)、HATU (2.22g， 5.83 mmol)及 N-甲基嗎啉（1.5 mL，13.64 mmol)於 DMF (8 mL)中之溶液。2小時後，所得溶液以5% LiCl水溶液（60 mL)攪拌20分鐘，在以乙酸乙酯萃取（100 mLx2)前，混合 物進一步以H20稀釋（50 mL)。有機萃取液以IN HC1 (100 mLxl)、飽和 NaHC03 水溶液（100 mLxl)及鹽水（100 mLxl) 清洗，加以乾燥（Mg SO 4)及濃縮。殘餘物經由組合快速層 析純化（12(^管柱），製得1.31§(35.5%)三肽。 三肽（1.30g5 1.37 mmol)於 CH2C12 (260 mL)中之溶液 脫氣 30 分鐘，及將 Grubb 氏 G 1 (2 8 3 m g，0 · 3 4 4 mm ο 1)加 至溶液。溶液在4 5 °C浴中回流5小時，及在另加熱4小時 前，加入另外之觸媒（112 mg，0.137 mmol)。溶液加入三 -349- 200819460 (經甲基）膦（2.98g，24 mmol)、三乙胺（6.7 mL，48.07 mmol) 及H20 (5 5 mL)。所得混合物在50°C浴中攪拌3小時。混 合物以 H20 (200 mL)及飽和 NH4C1水溶液（200 mL)稀 釋，及將兩層分離。水層部分進一步以CH2C12萃取（100 mLx2)。有機相部分以 H20 (250 mix 1)清洗，加以乾燥 (MgS04)及濃縮。殘餘物經由組合快速層析純化，製得 456 mg (36%)主產物。 製得之產物（456 mg，0.495 mmol)溶於 NMP (5 mL)及 將 8-氯- 2-(2-異丙基胺基噻唑-4-基）-7-甲氧基-喹啉-4-醇 (173 mg，0.495 mmol)及 Cs2C03 (323 mg，0.991 mmol)加 至所得溶液。所得混合物在7 0 °C浴中攪拌1 6小時，及在 以5% LiCl水溶液（20 mL)攪拌30分鐘之前，先以乙酸乙 酯（2 5 mL)稀釋。將兩層分離後，水層部分以乙酸乙酯萃 取（30 mLxl)。有機相部分以 h20清洗一次，加以乾燥 (MgS04)及濃縮。殘餘物經由經由組合快速層析以CH2C12 及甲醇爲洗提液進行層析，製得25 9 mg具有一些雜質的 產物。 上述之不純產物（286 mg，.25 0 mmol)、甲苯磺醯肼 (350 mg，1.88 mmol)及乙酸鈉（308 mg，3.75 mmol)於 DME (2·5 mL)及H20 (0.25 mL)中之混合物在95°C浴中回流3小 時。將另外之甲苯磺醯肼（3 5 0 mg，1.88 mmol)及乙酸鈉 (3 0 8 mg，3.75 mmol)加至所得混合物，及使混合物回流 1 ·5小時。混合物以H2〇稀釋（50 mL)及飽和NaHC03水溶 液（50 mL)稀釋，及以乙酸乙酯萃取（40 mLx2)。萃取液以 -350- 200819460 H2〇清洗（xl)，加以乾燥（MgS〇4)及濃縮。殘餘物經由逆 相組合快速層析（43g管柱）以H20及含0.05% TFA之乙腈 爲洗提液進行純化。將混合之部分濃縮以移除乙腈，所得 水溶液以飽和NaHC03水溶液稀釋，再以乙酸乙酯萃取 (x2)，製得135 mg具有一些雜質之產物。 加入 TMSI (0.18 mL，1.27 mmol)時，不純產物（135 mg，0.130 mmol)及 2,6-二甲基吡啶（0.19 mL，1.63 mmol) 於乙腈（3 mL)中之溶液在下攪拌。所得混合物在室溫 下攪拌2小時後，加入甲醇（2 mL)，溶液在室溫下攪拌1 小時。將溶液濃縮，殘餘物經由經由逆相HPLC純化。將 包含產物的部分倒出，加以濃縮及凍乾，製得74.6 mg (51%)，爲 TFA 鹽。1H NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.26 (d， 1H5 J = 9.3Hz)? 8.24 (s? 1H), 7.78 (s? 1H)? 7.60 (s? 1H)? 7.24 (appt quint，1H，J = 7.2Hz), 6.92 (t，1H，J = 7.5Hz)， 5.83 (br，1H)，4.67 -4.78 (m，2H)，4.74 (dd，1H)，4.40 (br， 1H)，4.21 (d，1H，J=12.0Hz)，4.15 (s，3H)，3.99 (hept，1H， J = 6.3Hz)，3.07 -3.5 4 (m，6H)，2.89 (dd，1H，J=12.9 及 6·9Ηζ)，2.44 -2.5 9 (m，1H)，1.92 -2.26 (m，3H)，1·15 -1·81 (m， 16H)， 1.3 8 (d， 6H， J = 6.3Hz)。31P (121.4MHz? CD3〇D):6 40.1 77。 19F (2 82MHz, CD3〇D):5 -77.3 11 (CF3COOH salt), - 1 14.754。LC/MS = 1 00 8 (M + + 1)。 實例165:製備化合物165 -351 - 200819460
步驟 1。VIII (477 mg，1 . 3 0 mmol)及（I -胺基-2-乙烯 基-環丙基）-(2_甲氧基-苄基）-次膦酸乙酯（實例42)(274 mg， 0.93 mmol)於甲苯（4.5 mL)中之黃色溶液加入2-乙基-己酸 鈉（77 mg，〇·46 mmol)於H20 (4.5 mL)中之溶液。反應混 合物加熱至7〇 °C達22小時。加入另外之2-乙基-己酸鹽 (100 mg)，在70 °C下攪拌22小時及冷卻至室溫。反應混 合物以 EtOAc稀釋，以飽和 NH4C1溶液（2x)、飽和 NaHC03溶液（2x)及鹽水清洗。有機層以Na2S04乾燥及力口 以濃縮。粗產物經由管柱層析純化’製得468 mg醇。 LC/MS = 661 ·9 (M+ +1)、6 8 3 · 9 (M+ +Na)。 步驟 2。醇（46 8 mg，0.71 mmol)及 DABCO (2 5 5 mg, 2.27 mmol)溶於甲苯（3.5 mL)。逐滴加入對甲苯磺醯氯 (580 mg，2.27 mmol)的甲苯（3.5 mL)溶液。反應混合物在 室溫攪拌 1小時。反應物以 EtOAc稀釋’及以飽和 NaHC03溶液使反應驟停。將兩層分離，有機層以 〇·5Ν HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。粗產 物經由組合快速層析純化，製得402 mg對溴苯基磺酸 酯，產率 49%。31P NMR (121.4MHz，CDC13)5 46.5, 44.1。LC/MS = 881.4 (M + +1)，903.8 (M + + Na)。 -352- 200819460 步驟 3。對溴苯基磺酸酯（402 mg，0.46 mmol)於 CH2C12 (3.4 mL)中之溶液力口入4 N HC1的1，4-二螺院溶液 (3.4 mL，1 7 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌2小時，加 以濃縮及在真空中乾燥整夜，然後溶於THF (3.4 mL)。加 入新鮮製備之氯甲酸環戊酯（2.33 mmol)於THF (4.6 mL)中 之溶液。TEA (0.32 mL，2.28 mmol)加至反應混合物。反 應在1小時內完成。反應物藉由加入飽和NH4C1溶液使 反應驟停，並以EtOAc稀釋。將兩層分離。有機層以飽 和NH4C1及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。粗 產物經由管柱層析純化，製得349 mg胺基甲酸環戊酯， 產率 86%。31P NMR (121.4MHz， CDC13)5 46.4，44.1。 LC/MS = 8 93.8 (M + +1)，915.6 (M + + Na)。 步驟4。胺基甲酸環戊酯（349 mg，0.39 mmol)溶於 CH2C12 (2 8 mL)，及以N2脫氣20分鐘。力口入Grubb氏G1 (8 0 mg，0· 10 mmol)，並另脫氣20分鐘。反應混合物加熱 至50 °C達6.5小時。加入另外之Grubb氏G1 (40 mg)，及 加熱至60 °C達8小時。加入更多之Grubb氏G1 (40 mg)， 在5 0 °C攪拌5小時，及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦 (1.21g)，接著加入 TEA (2.7 mL)及 H20 (5 mL)。反應混 合物加熱至5 0 °C達6小時，然後置於室溫整夜。將兩層分 離。有機層以〇·5 N HC1及鹽水清洗，以Na2S04乾燥， 及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得2 1 0 mg 化合物烯烴，產率62%。 LC/MS = 8 65.5 (M+ +1)、8 8 7.5 (M+ +Na) -353- 200819460 步驟5。上述之化合物燒烴（210 mg, 0·24 mmol)及2-(2-異丙基胺基-噻唑-4-基）-7 -甲氧基-喹啉-4-醇（77 mg， 0.24 mmol)於 NMP (2.4 mL)中之溶液以 CS2CO3 (79 mg， 0.24 mmol)處理。反應混合物加熱至65 °C達6小時，然後 冷卻至室溫整夜。反應物以EtOAc稀釋，及以NaHC03清 洗。有機層以5% LiCl及鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及 加以濃縮。粗產物（229 mg，0.24 mmol)溶於 CH3CN (3 mL)，在0°C下加入2,6-二甲基吡啶，接著加入碘三甲基矽 烷（0.52 mL，3.65 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌3 小時，及冷卻至〇°C。加入2,6-二甲基吡啶（0.2 mL)，接著 加入Me OH (2.5 mL)及升溫至室溫。將混合物濃縮及經由 HPLC純化，製得 98 mg產物 165，產率 44%。4 NMR (3 00MHZ，CD3OD )δ 8.13 (d, J = 9.3Hz，1H)，7.99 (s，1H)， 7.55 (s，2H)，7.09 (m，2H)，7.00 (m，1H)，6.73 (d，J = 8.4Hz， 1H), 6.67 (t，J = 7.5Hz，1H), 5.63 (s5 1H), 5.45 (q，J = 9Hz， 1H)，5.08 (t，J = 9.9Hz，1H)，4.7 (d，J=12Hz, 1H), 4.55 (t， J = 9.3Hz，1H)，4.24 (s，1H)，3.99 (m，2H)，3.89 (dd，J = 2.4, 11·7Ηζ，1H)，3.83 (s，3H)，3.62 (s，3H)，3.29 (t，J=15Hz， 1H)，3.10 (t，J=15Hz，1H)，2·6 (dd5 J = 7.5，14.1Hz，1H)， 2·6 (m，1H)，2.42 (ddd，J = 3.6，9_6，13.5Hz，1H)，2.05 (m， 1H)， 1.64 (m，2H)5 1.22 - 1.46 (brm， 17H)， 1.16 (d， J = 6.5Hz? 6H)。 31P NMR (121.4MHz, CD3OD )543.4 LC/MS = 914.6 (M + + 1) -354- 200819460 實例1 6 6 :製備化合物1 6 6
1 65 ( 8 8 7 mg，0.97 mmol)於 DME (87 mL)/ Η20 (8.7 mL)中之溶液加入對甲苯磺醯肼（1.45g，7.28 mmol)及
NaOAc (1.19g, 1 4 · 5 7 mmol)。反應混合物加熱至 9 5 °C 達 4 小時及冷卻至室溫。將混合物濃縮，溶於CH2C12，及以 H20清洗。水層以CH2C12萃取兩次。有機層以Na2S04乾
燥，加以濃縮及在真空中乾燥30分鐘。殘餘物溶於DME (60 mL)及 H2O (6 mL)。加入 NaOAc (1.19g，14.57 mmol) 及對甲苯磺醯肼（1.45g，7.28 mmol)。反應混合物加熱至
9 5 °C達6小時及冷卻至室溫。反應物被處理及經由HP LC 純化，製得 318 mg 酸 166，產率 36%。h NMR (300MHz， CD3〇D)5 8.23 (d? J = 9.6Hz, 1H? 8.18 (s9 1H)9 7.69 (s9 1H)? 7·31 (dt，J=1.8，7·2Ηζ, 1H)，7.25 (dd，J = 2.1，9.3Hz，1H)， 7.18 (t, J = 7.8Hz, 1H), 6.92 (d? J = 8.1Hz? 1H)? 6.87 (t, J = 7.5Hz, 1H)，5·79 (s，1H)，4.8 (d，J=11.7Hz5 1H)，4.69 (t5 J = 8.7Hz? 1H)，4·47 (s5 1H)，4·23 (dd，J = 2.7，10.2Hz，1H)， 4.15 (t，J = 6.3Hz，1H)，4.1 (d，J=11.1Hz，1H)，3.98 (s，3H)， -355- 200819460 3.81 (s，3H)，3.43 (t，J=15Hz，1H)，3.32 (t，J=15Hz，1H)， 2.76 (dd，J = 8.1，14.4Hz，1H)，2.49 (ddd，J = 3.6，9，13.2Hz? 1H)，1.98 (m，1H)，1.79 (m，2H), 1.34 (d，J = 6.3Hz，1H)， 1.2 -1.7 (m，22H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD )δ 45.5。 LC/MS = 915.3 (M + + 1)。 實例1 6 7 :製備化合物1 6 7。
製得產物（實例167)，爲黃色固體。 NMR (3 00MHz, CD3〇D):6 8.32 (d? J = 9.3Hz? 1H)? 8.18 (s，1H)，7.71 (m，2H)，7.67 (m，2H)，7·53 (m, 1H)，7.37 (m， 2H), 5.86 (s5 1H)，5.75 (m，1H) 5 5.3 4 (m，1H)，4.73 (m， 1H)，4.11 (m，3H)，4.04 (s，3H) 3.72 (m，1H) 5 3.3 8 (m， 1H)，2.80 (m，3H)，2.64 (m，1H)，2.31 (m，1H) 1.80 (m， 1H), 1.65 -1.2 (m? 24H); 31P NMR (121.4MHz9 CD3〇D):5 39.599。LC (跑6分鐘，停留時間=3.67分鐘）MS (954.6, M + 1)。 實例168:製備化合物168 -356- 200819460
製得產物（實例168)，爲黃色固體。4 NMR (300MHz， CD3〇D):5 8.29 (d? J = 9.5Hz? 1H), 8.17 (s? 1H), 7.69 (m9 4H)，7.56 (m, 1H)，7.37 (m，2H)，5.86 (s5 1H)，4.80 (m， 1H)，4.74 (m，1H)，4_38 (s5 1H) 4.11 (m，3H), 4.04 (s，3H) 3.3 0 -3.62 (m，3H)，2.80 (m, 1H)，2.59 (m，1H), 2.01 (m， 1H) 1.78 (m, 1 H)? 1.65 -1.2 (m， 26H)。31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD):5 41.418。LC (跑 6 分鐘，停留時間= 3.65 分鐘）MS (95 6.5，M+1)。 實例169.•製備化合物169
在室溫中，次膦酸酯（述於實例51)(5.0g，11.55 mmol) -357- 200819460 於 TFA (31 mL，416 mmol)中之溶液加入 DMS (8.2 mL， 1 1 1 mm ο 1)及攪拌整夜。反應混合物倒至冰冷4 N H C 1 (3 5 0 mL)及以1/1 iPrOH/庚烷（420 mL)萃取。有機層以4 N HC1清洗（5x500 mL)。在水浴中，使混合水層pH=10。 水層以EtOAc萃取（5 x 5 00 mL)。有機層以鹽水清洗，以 Na2S04乾燥，及加以濃縮，製得2.9 g胺，產率84%。4 NMR (3 00MHz，CDC13): 7.58 (m，1H)，7.41 (m，1H)，7.18 (m，2H)，5.96 (m，1H) 5 5.6 0 (m，1H)5 5.19 (m，2H)，5·09 (m? 1H)? 4.03 (m? 2H)? 3.44 (m? 2H)? 1.83 (m? 1H)? 1.32 (m, 3H)，1.19 (m，2H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13) :δ 49.684，47.5 12° VIII (3.5g，9.56 mmol)及胺（2.2g，7.36 mmol)於甲苯 (20 mL)中之黃色溶液加入己酸鈉（1.83g，11.04 mmol)於 H20 (60 mL)中之溶液。反應混合物加熱至8(TC達40小時 及冷卻至室溫。反應混合物以 EtOAc稀釋，以飽和 NaHC03、0.5N HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及力口以 濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得4,4g醇，產 率 69%。iH NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.48 (m， 1H)，7.36 (m，1H)，7.18 (m，2H)，6·07 (m, 1H)，5.78 (m，2H)，5·50 (m, 1H)，5.30 (m，1H)，5.17 (m, 1H)，4.67 (d，1H)，4.48 (m， 2H) 5 4.3 3 (m，2H)，4.12 (m，2H)，3.83 (m，2H)，3.65 (m， 2H) 5 3.3 2 (m, 3H)，2·24 (m，3H)，2.04 (m，4H)，1.80 (m， 2H)5 1.63 (m, 1H)，1.51 (m，2H)，1.42 (m，9H)，1.25 (m， 3H)。31P NMR (121.4MHz， CDC13 ):5 4 5.1 9 1， 43.161 非對 -358- 200819460 映異構物。 醇（1.4g，2.1 mmol)及 DABCO (750 mg，6.7 mmol)溶於 甲苯（20 mL)。逐滴加入對溴苯基磺醯氯（1.7g，6.7 mmol) 的甲苯溶液。反應混合物在室溫攪拌3小時。反應物以 EtOAc稀釋，及以飽和NaHC03溶液使反應驟停。將兩層 分離，有機層以〇.5N HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥， 加以過濾及濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 1.3g對溴苯基磺酸酯，產率 70%。4 NMR (3 00MHz， CDC13)：6 7.74 (m5 4H)5 7.4 8 (m, 1H)? 7.36 (m? 1H)? 7.18 (m? 2H)5 6.07 (m5 1H)? 5.78 (m9 2H)? 5.25 (m? 1H)? 5.17 (m，1H)，4.98 (m，1H)，4.57 (d，1H)5 4.48 (m，2H)，4.33 (m， 2H)，4.12 (m，2H)，3.83 (m，2H)，3.65 (m，2H)，3.32 (m， 3H)，2.24 (m, 3H)，2.04 (m，4H)，1.80 (m, 2H)，1.63 (m， 1H)，1.51 (m，2H)，1.42 (m，9H)，1.25 (m，3H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13):6 46.2 1 6，43.654 非對映異構物。 對溴苯基磺酸酯 （1.48g，1.61 mmol)溶於CH2C12 (200 mL)及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (413 mg，0.5 mmol)，並另脫氣20分鐘。反應混合物力Π熱至45t整夜， 及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦（3· 4g，27.4 mmol)，接 著加入TEA (8 mL，50 mmol)及H20 (20 mL)。反應混合物 加熱至5 0 °C達4小時，然後置於室溫整夜。將兩層分離。 有機層以〇·5Ν HC1、鹽水清洗，以Na2S04乾燥，及加以 濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得907 mg環狀 次膦酸酯。1H NMR (3 00MHz，CDC13):5 7.76 (m，4H)，7.40 -359- 200819460 (m，1H)，7.30 (m，1H)，7.12 (m，2H)，5.78 (m，1H)，5·60 (m，1H)，5.40 (m，1H)，5.07 (m5 1H) 5 4.9 0 (m，1H)，4·37 (m，3H)，3.83 (m，2H)，3.75 (m，2H)5 3.51 (m，1H) 3·22 (m， 2H), 2.24 (m，3H)，2.04 (m，4H)，1·80 (m，2H), 1.63 (m， 2H)，1.51 (m，2H)5 1.42 (m，9H)，1.25 (m, 3H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13):5 45.216，44.1 5 3 非對映異構物。 環狀次膦酸酯（857 mg，1_0 mmol)及苯酣（316 mg，1.0 mmol)於 NMP (10 mL)中之溶液以 Cs2C03 (65 1.6 mg，2.0 mmol)處理。反應混合物加熱至65°C整夜，然後冷卻至室 溫。反應物以EtOAc稀釋及以H20清洗。用IN HC1使 水層 pH = 4，及水層以 5% MeOH / EtOAc 萃取（2x50 mL)。 混合有機層以Na2S04乾燥及加以濃縮。粗產物經由組合 快速層析純化，製得 670 mg所欲之產物。4 NMR (3 00MHz，C D C13) ： lU NMR (3 00MHz, CDC13)：6 8.02 (d? J = 9.1Hz，1H)，7.47 (s，1H)，7.37 (m，2H)，7.15 (m，2H)， 7.02 (m，2H)，5.69 (m，1H)，5.40 (m，1H)，5.35 (m，1H)， 5.28 (m, 1H)，4.82 (m，1H)，4.69 (m, 2H)，4.39 (m，1H)， 4·18 (m，4H)，3.98 (s5 3H), 3·90 (m5 2H)，3.80 (m，2H)， 3.42 (m，1H)，3.23 (m, 1H)5 2.71 (m，1H)，2.40 (m，3H) 2.02 (m，2H)，1.76 (m，2H)，1.36 (m, 9H)，1.30 (m，6H)， 1.15 (m，3H)。31P NMR (121.4MHz，CDC13)：5 45.1 52, 44.29 1非對映異構物。 在 0°C下，上述製得之產物（670 mg，0.72 mmol)於 CH3CN (2 mL)中之溶液加入碘三甲基矽烷（717 mg，3·58 -360- 200819460 mmol)。反應混合物在（TC下攪拌20分鐘。加入2,6-二甲 基D比卩定（1 mL)及MeOH (1 niL)’擾梓20分鐘’在真空中 濃縮，及乾燥2 0分鐘，製得粗質酸。環戊醇（3 〇 8 m g， 3.58 mmol)溶於 THF (7.8 mL)，及加入光氣（3.2 mL，6·09 mmo 1)於甲苯中之溶液。反應物攪拌1小時，及濃縮至一 半體積以移除光氣。粗質酸溶於CH3CN (20 mL)。加入 Na2C03 (l.lg, 8.64 mmol)於 H20 (10 mL)中之溶液，並攪 拌5分鐘。加入新鮮製備之氯甲酸環戊酯的THF溶液。反 應在1小時內完成及加以濃縮。殘餘物溶於EtOAc，及加 入1.0N HC1使PH = 2。將兩層分離，及濃縮有機層。粗產 物經由 HPLC純化，製得產物 169。4 NMR (3 00MHz， CD3OD):6 8.8 9 (s， 1H)， 8·34 (d， J = 9.5Hz， 2H)， 8·18 (s， 1H)5 7.7 6 (m，2H)，7.39 (m，1H), 7.30 (m, 1H)，7.21 (m， 2H)，5.83 (s5 1H)，5.70 (m, 1H)，5.31 (m, 1H)，4.73 (m， 1H)，4.40 (m，1H)，4.16 (m，2H)，4.02 (m，4H)5 3.7 2 (m， 1H)? 3.38 (m? 2H)? 2.81 (m? 1H), 2.62 (m? 1H)? 2.29 (m? 1H) 1.9 5 - 1.3 7 (m? 21H)， 1.34 (m5 6H)。31P NMR (121.4MHz, CD3〇D):5 4 1.998 LC/MS = 919 (M + + 1)。 實例170:製備化合物170 -361 - 200819460
169 (50 mg，0.05 mmol)於 DME (1 mL)/ Η2〇 (〇·1 mL) 中之溶液加入對甲苯磺醯肼（76 m§，〇.41 mmol)& Na0Ac (6 6 mg，0.8 1 mmol)。反應混合物加熱至95°C達1.5小時及 冷卻至室溫。加入數滴3 N HC1使pH = 2。粗產物經由 HPLC 純化，製得 25 mg 酸 170。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.8 9 (s，lH)，8.30 (d，J = 9.4Hz，2H), 8.16 (s， 2H)，7.75 (m，3H)，7.41 (m，4H)，7.22 (m，3H)，5.84 (s， 1H)，4.74 (m，2H), 4.42 (m，1H)，4.18 (m，2H)，4.07 (m， 4H)，3.52 (m，1H)，3.31 (m, 2H)，2.77 (m，1H)，2.52 (m， 1H)，2.00 (m，1H)，1.81 (m，1H)，1·58 (m，21H)，1.35 (m， 6H)〇 31P NMR (121.4MHz, CD3〇D):6 44.04 1 LC/MS = 92 1 (M + +1)。 實例1 7 1 :製備化合物1 7 1 •362- 200819460
步驟1。加入氯甲酸乙酯（209 μ 1, 2.19 mmol)時，4- 羥基吡咯烷-1，2-二羧酸1-第三丁酯（460 mg，1·99 mmol) 及 Et3N (417 μΐ，2.99 mmol)於 THF (13 mL)中之溶液在-43°C下攪拌。所得混合物在-40°C及-25°C間攪拌30分鐘。 此混合物逐滴加入（1-胺基-2-乙烯基-環丙基）-膦酸二乙酯 (480 mg，2.19 mmol)於THF (13 mL)中之溶液，同時將溫 度保持在低於-35t。所得溶液升溫至室溫，及以H20使 反應驟停。反應混合物以EtO Ac萃取。混合有機清洗液然 後以鹽水、IN HC1 (2x)及鹽水萃取。有機層以MgS04乾 燥。粗產物（7 6 0 m g，8 8 %)未純化直接使用。L C / M S = 4 3 3 (Μ + +1)、454.9 (Μ+ +Na)。 步驟 2。上述之酯（760 mg，1·75 mmol)於 CH2C12 (4.40 mL)中之溶液加入 4N HC1/二噁烷（4.40 mL，17·5 mmol)。反應物在室溫下攪拌2小時。將反應物濃縮，殘 餘物在真空中乾燥2小時。所得粗質胺未純化直接使用。 LC/MS = 333.3 (M+自由鹼+1)、454.9 (M+自由鹼+Na)。 步驟3。上述之胺（644 mg，1.75 mmol)、2-第三丁氧 鑛基胺基-壬-8-烯酸及 HATU (665 mg，1.75 mmol)於 CH2C12 (13.125 mL)及 DMF (4·3 7 5 mL)中之溶液力口入 N-甲 -363- 200819460 基-嗎啉（524 μ。4· 77 mmol)。反應物在室溫下攪拌30分 鐘。用 5% LiCl (20 mL)使反應驟停，及攪拌混合物直到 兩層分離。混合物以EtOAc萃取（75 mL)，水層進一步以 EtOAc萃取。混合有機層以飽和NaHC03溶液、鹽水清 洗，然後以Mg S04乾燥。將濾液濃縮，殘餘物經由管柱層 析純化，製得三肽（440 mg，43°/。）。31 P N M R (1 2 1.4 Μ Η z， CD3OD)5 22·3。LC/MS 二 5 86.0 (Μ + +1)，607.9 (M + + Na)。 步驟4。三肽（2.4g，4.10 mmol)於CH2C12中之溶液（其 藉由N2通氣加以脫氣20分鐘）及Grubb氏G1觸媒（844 mg，1 .02 5 mmol)加熱至 4 0 °C。反應在 4 0 °C下攪拌 4小 時，加入另外之Grubb氏G1觸媒（150 mg，0.18 mmol)， 所得溶液在40 °C下持續攪拌整夜。加入另外之Grubb氏 G1觸媒（132 mg，0.16 mmol)，所得溶液在 5 0 °C油浴中回 流。4小時後，加入三（經甲基）膦（8.48g，68.34 mmol)，及 在加入Et3N (19 mL，136 mmol)前，攪拌溶液10分鐘，接 著加入H20 (20 mL)。混合物在50°C下於N2中攪拌2小時 後’加入另外之H20 (10 mL)，所得混合物在50°C下另加 熱4小時，然後在室溫攪拌整夜。移除水相，有機相以 H20、0.5N HC1及飽和NaHC03溶液清洗。有機相然後以 Mg S04乾燥及加以濃縮。殘餘物經由管柱層析純化，製得 烯烴（1.85g， 81%) 。 31P NMR (121·4ΜΗζ， CDC13)5 22.1 60。LC/MS = 5 5 8.0 (M + +1)，5 79.8 (M + + Na)。 步驟5。上述之烯烴（1 .85g，3.32 mmol)及碘化鈉 (4.98g5 33.2 mmol)於吡啶（33.2 mL)中之溶液在l〇5°C下加 -364- 200819460 熱1 0小時。反應然後在室溫下進行2天。加入另外之碘 化鈉（1.50g，10.0 mmol)，所得溶液在105°C下加熱2小 時。反應物然後冷卻至室溫。 此溶液加入4-二（甲胺基）吡啶（41 mg，0.33 mmol)及乙 酸酐（4.10 mL，43.16 mmol)。反應物在室溫下攪拌2小 時，然後冷凍整夜。將溶液解凍及加入EtOAc。加入飽和 NaHC03溶液調整pH至7 - 8，然後將兩層分離。有機層以 H20萃取，用IN HC1將混合水層酸化至pH 1-2。水層以 200 mL乙酸乙酯萃取四次，及混合的有機層以鹽水清 洗，以MgS04乾燥，及加以濃縮。殘餘物使用逆相HPLC 純化之，製得單酸（1.15g，61 %)，爲白色固體。31P NMR (121.4MHz，CDC13)5 21.3，20.9。LC/MS = 571 ·8 (M + +1)。 步驟 6。乙二醯氯（589 μΐ, 6.75 mmol)於甲苯（16.9 mL) 中之溶液逐滴加入二甲基甲醯胺（26 μΐ，0.34 mmol)。所得 溶液在室溫下攪拌10分鐘。上述之單酸（965 mg，1.69 mmol)於甲苯（8 mL)中之溶液逐滴加至前述溶液，所得混 合物在室溫下攪拌3 0分鐘。將混合物濃縮，及置於高真 空下 20分鐘。殘餘物溶於 THF (16.9 mL)，及冷卻至-35°C。逐滴加入氯化正丙基鎂（845μ1，1.69 mmol)，反應物 在-30°C下攪拌30分鐘。加入另外之氯化正丙基鎂（845 μ1， 1.69 mmol)，反應物升溫至-25 °C，並攪泮20分鐘。加入 另外之氯化正丙基鎂（845 μΐ，1.69 mmol)，反應物在-251 下攪拌20分鐘。加入更多之氯化正丙基鎂（845 μ1，1.69 mmol)，並在-2 5 °C下另攪拌1 5分鐘。加入最後之氯化正 -365- 200819460 丙基鎂（84 5 μ 1, 1.69 mmol)，所得溶液在-3 0°C下攪拌。在-3 0 °C下，使用飽和NH4C1溶液使反應驟停。反應物升溫至 室溫，並以EtOAc稀釋。有機層以飽和NH4C1溶液及鹽 水清洗，以Mg S04乾燥，及加以濃縮。殘餘物經由管柱層 析單離出所欲之產物（468 mg，46%)，爲白色泡沬。 LC/MS = 5 9 8.0 (M+ +1)、6 1 9.9 (M+ +N a)。 步驟7。上述製得之產物於CH2C12 (9.8 mL)中之溶液 加入4N HC1/二噁烷（4.90 mL，19_58 mmol)，及在室溫下 攪拌1 . 5小時。將溶液濃縮，及在高真空中乾燥。所得白 色固體不進一步純化直接使用。LC/MS = 497.8 (M+自由鹼 + 1)、519.9 (M+自由驗 +Na)。 步驟 8。胺於 CH3CN (7.83 mL)、H20 (783 μΐ)及
Et3N (273 mL，1.96 mmol)中之溶液攪拌5分鐘，之後逐滴 加入氯甲酸環戊酯（173 μΐ，1.17 mmol)。反應物在室溫下 攪拌3 5分鐘，加以濃縮，及在乙酸乙酯中處理。有機相 以飽和NH4C1溶液及鹽水清洗。有機層以MgS04乾燥及 加以濃縮。經由管柱層析自殘餘物純化胺基甲酸環戊酯 (3 8 8mg，二步驟共 86%)。31P NMR (121.4MHz，CDC13)5 50.2， 49·6, 48·8， 47.9。LC/MS = 6 09.8 (M + +1)， 631.0 (M + + Na)。 步驟 9。逐滴加入 LiOH (27 mg，0.64 mmol)於 H2〇 (3.16 mL)中之溶液時，上述之胺基甲酸環戊酯（388 mS， 0.64 mmol)於 THF (9.54 mL)及 MeOH (6.36 mL)中之溶液 在0 °C下攪拌。然後攪拌反應物4 5分鐘。反應物然後藉由 -366- 200819460 加入飽和NH4C 1溶液使反應驟停，及以CH2C12萃取。有 機層以Mg S〇4乾燥，及加以濃縮。所得醇置於高真空中， 且不進一步純化直接使用。 步驟 10。醇（361 mg，0.64 mmol)及 DABCO (200 mg， 1.78 mmol)於甲苯（1.27 mL)中之溶液加入4-溴苯磺醯氯 (45 5 mg，1.78 mmol)於甲苯（1.27 mL)中之溶液。反應物在 室溫下攪拌2小時。反應物以甲苯稀釋，及加入1 μ Na2C03使反應驟停。有機層然後以1 M Na2C03萃取，以 小體積THF稀釋，及以0.5M HC1清洗。有機層然後以 H20清洗，以Mg S04乾燥，及加以濃縮。經由管柱層析純 化得自殘餘物之對溴苯基磺酸酯（3 23mg，65%)，爲白色泡 沬 / 半結晶固體。LC/MS = 6 8 5.5 (M+ +1)。 步驟11。對溴苯基磺酸酯 （100 mg，0.13 mmol)、2-(2-異丙基胺基-噻唑-4-基）-7 -甲氧基-喹啉-4-醇（40 mg5 0.13 mmol)及 CS2CO3 (42 mg，0.13 mmol)於 1-甲基-2-P比咯 烷酮（2 mL)中之溶液在6(TC下攪拌10小時，然後置於室 溫整夜。反應物然後再加熱至6 0 °C，並另攪拌5小時。反 應物以EtOAc稀釋，以H20與飽和NaHC03溶液之1:1 溶液清洗，然後以鹽水清洗。有機層以Na2S04乾燥及加 以濃縮。殘餘物置於高真空中整夜。逐滴加入碘三甲基矽 院（181 μΐ，1.27 mmol)時，所得粗質物（110 mg，0.03 mmol) 及 2,6-二甲基 Π比 D定（148 μΐ，1.27 rnmol)於 CH3CN (2 mL)中 之溶液在〇 °C下攪拌。反應物在室溫下攪拌3 · 5小時。反 應物然後冷卻至〇°C，加入另外之2，6-二甲基吡啶（74 μΐ， -367- 200819460 0.64 mmol)及碘三甲基矽烷（91 μΐ，0.64 mmol)。反應物升 溫至室溫1小時。反應物冷卻至〇°C，然後加入Et3N (200 μΐ)及MeOH (2.5 mL)。將反應物濃縮，及經由HPLC自殘 餘物單離出 171 (4 7.6 mg，45%)，爲黃色固體。NMR (3 00MHz，CD3〇D )δ 8.30 (d，J = 9Hz，1H)，8.18 (s，1H)， 7.72 (s，2H)，7.27 (dd，J = 2.4，9.3Hz，1H)，5.79 (s，1H)， 5.60 (dd5 J = 8. 1 , 17.7Hz，1H)，5.21 (t，J = 9.6Hz5 1H)，4.58 (s，1H)，4.69 (t5 J = 9.3Hz，1H), 4.39 (s，1H)，4.04 -4.22 (brm，3H)，4.01 (s5 3H)，2.8 (m，1H), 2.77 (dd，J = 7.2, 14.4Hz，1H)，2.56 (ddd，J = 4.2，9.9，14·1Ηζ, 1H)，2.20 (m， 1H)，1.2 -1.9 (brm，23H)，1.34 (d，J = 6.3Hz5 6H)，1.01 (t， J = 7.5Hz, 3H)。31P NMR (1 2 1.4 Μ H z，C D 3 0 D) δ 4 8.2。 LC/MS = 8 3 6.8 (M + +1)。 實例172:製備化合物172
包含對溴苯基磺酸酯（40 mg，0.05 mmol)及5% Rh/ Al2〇3 (12 mg)於EtOAc (2mL)中之溶液的反應容器在真空 中排空，其中之氛圍並以H2替代。此排空/再加壓循環重 -368- 200819460 複兩次。反應物然後在室溫下於H2中攪拌1 6小時。反應 物經由塞里塑料5 4 1之墊過濾，及將濾液濃縮。經由管柱 層析自殘餘物單離出飽和化合物（22 mg，55%)，爲白色g|
體。31P NMR (121.4MHz，CDC13)5 54.2，50.8。LC/ MS = 7 8 7.5 (M + +1)。 如實例1 7 1所述般進行替代及去保護，製得化合物 172。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.2 8 (d5 J = 9.3Hz，1H)， 8.17 (s，1H)，7.74 (s，2H)，7.31 (dd，J = 2.1，9Hz，1H)，5·81 (s，1H), 4.81 (d5 J=12Hz, 1H)5 4.6 7 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.42 (s，1H), 4.17 (m，2H)，4.02 (dd，J = 2.7，12.3Hz，1H)，4·03 (s，3H)，2.80 (dd，J = 7.8，15Hz, 1H)，2.49 (ddd，J = 3.9，9·3, 13·8Ηζ，1H)，1.25 -1.9 (brm，29H), 1.34 (d，J = 6.3Hz，6H)， 1.06 (t，J = 7.5Hz，3H)。31P NMR (121 ·4ΜΗζ，CD3〇D)6 50.3。LC/MS = 8 3 9.3 (M + + 1)。 實例173:製備化合物173
加入PBr3歷時5分鐘時，噻吩-2-基-甲醇（3·〇 mL， 31.7 mmol)於1 5 mL醚中之溶液在〇 °C下攪拌。在0 °C下 -369- 200819460 1·5小時後，加入50% KOH (15 mL)水溶液，將有機層分 離出’以Κ Ο Η九粒在冷凍器中乾燥1小時。2 -漠甲基-噻 吩之粗質溶液用於下一反應。 加入 TMSC1 (2.55 mL，20.09 mmol)時，IV (2.78g， 8.98 mmol)及 DIEA (3.75 mL，21.53 mmol)方令 30 mL CH2C12中之溶液在室溫下攪拌。30分鐘後，加入上述之 粗質溴化物（1 6 m L )，所得溶液在4 0 °C下攪拌1 6小時。將 溶液濃縮，殘餘物於水（50 mL)中之溶液以乙酸乙酯萃取 (5 0 m L X 2 )。有機相部分以水（5 0 m L )清洗後，加以乾燥 (MgS04)及濃縮。殘餘物經由組合快速管柱層析以己烷：乙 酸乙酯爲洗提液進行純化，製得次膦酸酯（2.1 9 1 g，6 0 %)， 爲二非對映異構物之混合物。 上述製得之次膦酸酯（2.032g，5.01 mmol)於16 mL TFA及4 mL Me2S中之溶液在室溫下攪拌6小時。所得溶 液在25 °C下濃縮，殘餘物於乙酸乙酯（60 mL)中之溶液以 冰冷1 N NaOH (60 mLx2)及鹽水（60 mL)清洗。水層部分 以乙酸乙酯萃取（60 mL)。將混合之有機部分乾燥（MgS04) 及濃縮，製得 1.22g (90%)胺。VIII (845 mg，2.31 mmol) 及胺（404.8 mg，1·49 mmol)於甲苯（2.7 mL)中之混合物加 入 2 -乙基己酸鈉（164 mg，〇·99 mmol)及 H2〇 (5.5 mL)。反 應混合物加熱至80°C，並攪拌19小時。加入另外之VIII (150 mg)於甲苯（1 mL)中之溶液，及在8(TC下攪拌7小 時。反應混合物冷卻至室溫，以IN HC1 (50 mL)使反應驟 停及以EtOAc萃取 （2x40 mL)。混合有機層以IN HC1清 -370- 200819460 洗（40 mL)。水層以 EtOAc (50 mL)萃取前，先以 2 N NaOH (60 mL)中和之。混合有機層以飽和NaHC〇3溶液（2 x50 mL)及鹽水 （20 mL)清洗，以Na2S〇4乾燥，及加以濃 縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得740.5 mg三肽 醇，產率7 8 %。 醇（740.8 mg，1.16 mmol)及 DABCO (209.2 mg，1.87 mmol)溶於甲苯（1.1 mL)。逐滴加入對溴苯基磺醯氯 (476.8 mg，1.87 mmol)於甲苯（0.8 mL)中之溶液。反應混 合物在室溫下攪拌2小時。反應物以 EtOAc (35 mL)稀 釋，及以1 N Na2C03清洗。有機層以IN HC1 (30 mL)及 H20 (2x3 0 mL)清洗，以Na2S04乾燥，加以過濾及濃縮。 粗產物經由組合快速層析純化，製得915.9 mg對溴苯基 磺酸酯，產率92%。 對溴苯基磺酸酯（915.9 11^，1.07 111111〇1)溶於（：112(：12 (150 mL)及以N2脫氣20分鐘。加入Grubb氏G1 (221.2 mg，0.27 mmol)，及另脫氣 20分鐘。反應混合物加熱至 5〇°C整夜，及冷卻至室溫。加入三（羥甲基）膦（1.67g，3.45 mmol)，接著力口入 TEA (3.75 mL，26.9 mmol)及 H20 (30 mL)。反應混合物在室溫下攪拌5小時。將兩層分離。有 機層以Η20、0.5 N HC1及飽和NaHC03清洗，以Na2S04 乾燥，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 75 3.4 mg環狀次膦酸酯，產率85%。 環狀次膦酸酯（753.4 mg，0.91 mmol)及2-(2 -異丙基胺 基-噻唑-4-基）-7-甲氧基-喹啉-4-醇（301.3 mg，0.96 mmol) -371 - 200819460 於 NMP (10 mL)中之溶液以 CS2CO3 (364.1 mg，1.12 mmol) 處理。反應混合物加熱至7 0 °C達1 2小時，然後冷卻至室 溫。反應混合物以EtOAc (50 mL)及H20 (70 mL)稀釋，及 經由塞里塑料過濾。將兩層分離。有機層以H20 (70 mL) 及飽和NaHC03溶液（2x70 mL)清洗。水層以EtOAc萃取 (5 0 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥及加以濃縮。粗產物 經由在C18管柱進行組合快速層析純化之，製得470.3 mg 化合物。 上述製得之產物（470.3 mg, 0.52 mmol)於 CH2C12 (3.25 mL)中之溶液加入4 N HC1於1，4-二噁烷（3·25 mL， 13 mmol)中之溶液。反應混合物在室溫下攪拌2.5小時及 加以濃縮。殘餘物以CH3CN硏磨及加以濃縮。殘餘物在 真空中乾燥2 0分鐘，製得粗質胺鹽酸鹽。所得粗質胺鹽 酸鹽溶於CH3CN (5 mL)及冷卻至0°C。加入Na2C03 (3 60 mg，3.4 mmol)於H20 (5 mL)中之溶液，並攪拌5分鐘。加 入新鮮製備之氯甲酸環戊酯於CH3CN (5 mL，2.64 mmol) 中之溶液。反應在1小時內完成及加以濃縮。殘餘物溶於 EtOAc (40 mL)及以 H20 (40 mL)及鹽水（20 mL)清洗。水 層以EtOAc (20 mL)萃取。混合有機層以Na2S04乾燥及加 以濃縮。粗產物經由HPLC純化，製得286.9 mg胺基甲酸 環戊酯之產物，產率60%。 加入碘三甲基矽烷（0.07 mL, 0.49 mmol)時，上述胺基 甲酸環戊酯（87.9 mg，0.096 mmol)及2,6-二甲基吡啶（0.07 mL，0·6 mmol)於CH3CN (3 mL)中之溶液在〇°C。反應混合 -372- 200819460 物升溫至室溫，並攪拌 3.5小時。反應混合物冷卻至 〇°C，及加入另外之碘三甲基矽烷（〇.〇1 mL)及2,6-二甲基 吡啶（0.0 1 mL)。混合物在室溫下攪拌1小時。加入Me OH (1 mL)，並攪拌1小時。將混合物濃縮，粗產物經由 HPLC 純化，製得 71.2 mg 之 173，產率 74%。4 NMR (3 00MHz，CD3〇D):5 8.29 (d? 1H? J = 9.3Hz)? 8.19 (s? 1H)? 7.70 (s? 2H)? 7.20 -7.28 (m? 2H)? 6.91-6.97 (m? 2H)? 5.79 (br， 1H)， 5.65 (appt q， 1H，J =〜9 H z)， 5.2 3 (t， 1 H， J =〜9Hz), 4.88 (d9 1 H, J=12Hz), 4.71 (t, 1H，J = 8.4Hz)， 4.42 (br，1H)? 4 · 1 1 - 4.2 4 (m，2 H)，4 · 0 6 ( d，1 H，J = 9 · 9 H z)， 3.99 (s， 3H)? 3.64 (t， 1H， J 二 15.6Hz)， 3.38 (t， 1H， J=15.6Hz), 2.72 -2.90 (m? 2H), 2.5 5 -2.66 (m, 1H), 2.17 -2.30 (m, 1H)? 1.81 (br m? 2H)? 1.17 -1.70 (m? 17H)? 1.34 (d，6H，J = 6.3Hz)。31P (1 2 1 · 4 Μ H z，C D 3 O D ): δ 3 8 · 6 4 4。 LC/MS = 891 (M + +1)。 實例174:製備化合物174
加入 TEA (0·59 mL，4.23 mmol)於 THF (1 mL)中之溶 -373- 200819460 液歷時ίο分鐘時，實例173製得之烯烴（193.6 mg，0·21 mmol)及對甲苯磺醯肼（1.26g，4.22 mmol)於 THF (8 mL)中 之溶液加熱至60 °C。反應混合物在60 °C下攪拌27小時。 在60°C下加入另外之醯肼（1.26g，4.22 mmol)及TEA (0.59 mL，4.2 3 mmol)，並攪拌24小時。反應物冷卻至室溫及將 一些固體過濾掉。將濾液濃縮，殘餘物經由組合快速層析 純化，製得100.5 mg之包含起始物質及所欲產物之混合 物。所得混合物溶於THF (5 mL)。加入醯肼（65 5.2 mg， 2-20 mmol)及 TEA (0.31 mL，2.22 mmol)。所得混合物在 60°C下攪拌 20小時。將反應混合物濃縮，殘餘物溶於 CH2C12。將固體過濾掉，及將濾液濃縮。殘餘物經由組合 快速層析純化，製得68.1 mg飽和化合物，在加入碘三甲 基矽烷（0.1 mL，0.7 mmol)時，該飽和化合物以2,6二甲基 吡啶（0.1 mL，0.86 mmol)於 CH3CN (3 mL)及 CH2C12 (1.5 mL)中之溶液水解及在〇°C下攪拌。反應混合物升溫至室 溫，並攪拌1.5小時。加入Me OH (1 mL)，及在室溫攪拌 0.5小時。將混合物濃縮，粗產物經由HPLC純化，製得 51.3 mg 之酸 174。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8·22 (d， 1H，J = 9.3Hz)，8.19 (s5 1H)，7·69 (s，2H)，7.25 (appt d, 2H， J = 3.8Hz), 7.01 (br，1H)，6·91·6·98 (m，1H)，5.78 (br，1H)， 4.80 (d，1H，J二 11.7Hz)，4.67 (t，1H，J = 8.4Hz)，4.45 (br， 1H)，4.03 -4.27 (m，3H)，3.98 (s，3H)，3.57 (t， 1H， J=15.6Hz)，3·44 (t，1H，J二 15.6Hz)，2.70 -2.82 (m，1H)， 2.42 -2.54 (m9 1 H)， 1 · 0 8 -1 · 9 6 (m，2 5 H)， 1.34 (d? 6H, -374- 200819460 J = 6.3Hz)。31P NMR ( 1 2 1 · 4 Μ H z，C D 3 O D ): δ 4 1.072。 LC/MS = 8 93 (M + + 1)。 實例1 7 5 :製備化合物1 7 5
內酯（VIII)(860 mg, 2.35 mmol)、胺（實例 83 所製 得）（300 mg, 1.18 mmol)及 2-乙基己酸鈉（60 mg，0.35 mmol)於甲苯（10 mL)及H20 (10 mL)中之溶液在80°C下攪 拌12小時，然後在室溫下攪拌72小時。乙酸乙酯（5 OmL) 加至所得溶液，及以飽和碳酸鈉（20mL)、1M HC1 (20 mL) 及鹽水（15 mL)清洗。將有機層乾燥及濃縮。 所得二烯醇（700 mg，1.13 mmol)及 DABCO (200 mg， 1.58 mmol)於甲苯（2 mL)中之溶液加入 4_溴甲苯磺醯氯 (400 mg，1.81 mmol)於甲苯（5 mL)中之溶液。所得溶液在 室溫下攪拌1 .5小時，之後，反應物以甲苯稀釋，及以 1M Na2C03使反應驟停。有機層以1M Na2C03清洗，以乙 酸乙酯稀釋，然後再以〇·5Μ HC1及接著以H2〇清洗，加 以乾燥及濃縮。粗質物經由快速層析純化，製得所欲之對 溴苯基磺酸酯。此二烯（290 mg，0.35 mmol)置於經過脫氣 -375- 200819460 之 CH2C12 (40 mL)中，及加入 Grubb 氏 G1 觸媒（7.1 mg， 〇 · 〇 9 m m ο 1)。反應混合物在4 0 °C下攪拌1 5小時。加入另 外之5莫耳％觸媒，所得溶液在4 〇艺持續攪拌1 . 5小時。 加入另外之Grubb氏G1 (5莫耳％)，所得溶液在40°C下 持續攪拌 1 · 5小時。加入三（羥甲基）膦（7 5 0 g，1 · 1 2 mmol)、三乙胺（1·7 mL)及H20 (25 mL)。所得溶液在4〇r 下攪拌3小時，然後在室溫下攪拌整夜。所得溶液然後以 H2〇清洗；將有機層乾燥及濃縮。粗質物經由HPLC純 化’產生所欲之置換反應之產物（2 6 4 m g)。此大環狀對漠 苯基磺酸酯（260 mg，0.32 mmol)、Cs2C03 (104 mg，0.32 mmol)及胺基噻唑喹啉 （101 mg，0.32 mmol)於N-甲基吡 咯烷酮（3 mL)中之溶液在60°C下加熱5小時。反應混合 物以乙酸乙酯稀釋，及以飽和碳酸氫鈉溶液使反應驟停。 有機相以飽和碳酸氫鹽溶液及鹽水清洗，然後加以乾燥及 濃縮。所得濃縮物經由管柱層析純化，製得產物（1 2 8 m g，二步驟共4 2 %)。 加入三氟乙酸（5 00 μΐ)時，Boc-胺（128 mg，0.14 mmol) 在CH2C12 (1 mL)中之溶液加以攬拌。所得溶液在室溫下 攪拌1小時。將溶液濃縮，及與甲苯共沸兩次。殘餘物在 THF (1 mL)中攪拌，及加入氯甲酸環戊酯（0.72 mmol)及三 乙胺（240 μΐ，1.73 mmol)於THF (5 00 μΐ)中之溶液，並置 於室溫1小時。反應混合物在Η20及乙酸乙酯間分配，以 鹽水清洗，加以乾燥（M g S 0 4)及濃縮。粗質物經由管柱層 析純化，製得胺基甲酸環戊酯（68 mg，66%)。 -376- 200819460
此次膦酸乙酯（68 mg, 0.08 mmol)於 CH3CN (1 mL)中 之溶液加入TMSI (54 μΐ，0.38 mmol)。30分鐘後，加入 2,6-二甲基吡啶（5 00 μΐ)，接著加入甲醇。將反應混合物濃 縮及共沸。粗質物經由HPLC純化，製得化合物175 (15 mg，23%)。4 NMR (3 00MHz, CD3OD):5 8.3 1 (d9 J = 9.4Hz? 1H), 8.17 (s，1H), 7·75 (m，2H)，7.43 (m，1H)，7.36 (m， 1H)，6.36 (m，1H)，6.28 (m，1H)，5.85 (m，1H)，5.73 (m， 1H)，5·28 (m，1H), 4.73 (m，1H)，4.35 (m，1H)，4.18 (m， 2H)? 4.04 (s5 3H)? 2.79 (m? 2H), 2.60 (m? 1H)9 2.26 (m? 1H) 1.83 (m，4H)，1.59 (m，9H)? 1.35 (m, 6H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD): 40.29 1; LCMS: 8 7 5.3 9 (M + l)。 實例176:製備化合物176
得自實例175之置換反應產物（1.2g， 1.48 mmo 1)在乙 酸乙酯（15mL)中處理及加入 Degusssa -型式之铑/氧化鋁 (0.6g5 50% w/w)。將反應容器排空及置於氫氛圍中，在室 溫下攪拌5小時。當反應完成時，所得溶液經由塞里塑料 過濾及加以濃縮，製得 1 · 〇 8 g產物，其直接用於下一步 -377- 200819460 此對溴苯基磺酸酯（l.〇8g, 1.33 mmol)在甲基吡咯 烷酮 （1 5mL)中處理，加入胺基噻唑喹啉 （0.42g, 1.33 mmol)及碳酸絶（0.43g，1.33 mmol)。反應混合物在6(TC下 加熱4小時，然後在室溫下攪拌整夜。加入乙酸乙酯，有 機層以飽和碳酸氫鈉溶液清洗，加以乾燥及濃縮。殘餘物 經由快速層析純化，製得所欲之產物（〇.45g，二步驟共 3 8%) ° 此Boc -胺 （0.45g，0.5 mmol)在乙腈（5mL)中處理，及 加入TMSI (0.3 6mL，2.5 mmol)。反應混合物在室溫下攪拌 15分鐘 （LCMS分析顯示全部轉變）。力[]入2,6二甲基吡啶 (0.2mL)，接著以甲醇使反應驟停，將反應物濃縮及與甲 苯共沸（3x20 mL)。殘餘物然後在乙腈/水（各5mL)中處 理。加入碳酸鈉（〇 · 6 4 g，6 m m ο 1)及氯甲酸環戊酯（5當 量），反應混合物在室溫下攪拌1.5小時。LCMS顯示全部 轉變，然後將反應物濃縮、過濾及經由HPLC純化，製得 化合物 1 76 ( 1 80 mg，41%)。iH NMR (3 00MHz，CD3OD)5 8.30 (d，1H，J = 9.4Hz)，8.07 (s，1H)，7.75 (s，2H)，7.43 (m， 1H)，7.35 (m，1H)，6.37 (m，1H)，6.29 (m，1H)，5.83 (m， 1H)，4.79 (m，1H)，4.65 (m，1H)，4.41 (m，1H)，4.18 (m5 3H)，4.04 (s，3H)，2.79 (m，1H)，2.51 (m，1H)，1·89 (m5 2H)，1.76 (m，2H)，1.42 (m，24H)，1.34 (d，6H，J = 6.7Hz)。 31P NMR (121.4MHz, CD3OD)』42.676。LCMS: 8 77.1 6 (M+ 1)。 -378- 200819460 實例1 7 7 :製備化合物1 7 7
環狀對溴苯基磺酸酯（實例173)(44 8.5 mg，〇·54 mmol) 及7 -甲氧基-2-苯基-喹啉-4-醇（145 mg，0.58 mmol)於NMP (6_8 mL)中之溶液以 Cs2C03 (224 mg，0.69 mmol)處理。反 應混合物加熱至7 0 〇C達8小時，然後冷卻至室溫。反應混 合物以EtOAc稀釋（80 mL)及以H20稀釋（2xl〇〇 mL) ’接 著以飽和NaHC03溶液稀釋（2x100 mL)。水層以EtOAc萃 取（80 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥及加以濃縮。粗產 物經由組合快速層析純化，製得295.7 mg所欲之產物’ 產率6 5 %。 上述製得之產物（295.7 11^，0.35 111111〇1)於〇112(：12(2.2 mL)中之溶液加入 4 N HC1的1，4 -二噁烷（2 · 2 m L，8.8 mmol)溶液。反應混合物在室溫下攪拌2小時及加以濃 縮。殘餘物以CH3CN硏磨及加以濃縮。殘餘物在真空中 乾燥20分鐘，製得粗質胺鹽酸鹽。環戊醇（〇·16 mL，1.76 mmol)溶於THF (6 mL)，及加入20%光氣於甲苯（1·5 mL， 2.84 mmol)中之溶液。攪拌反應物1小時及加以濃縮。殘 -379- 200819460 餘物溶於CH2C12及加以濃縮，製得粗質氯甲酸環戊酯。 該粗質胺鹽酸鹽溶於CH3CN (2 mL)及冷卻至0°C。加入
Na2C03 (225 mg，2.12 mmol)於 H2〇 (3 mL)中之溶液，並 攪拌5分鐘。加入新鮮製備之氯甲酸環戊酯於CH3CN (4 m L)中之溶液。反應在1小時內完成及加以濃縮。殘餘物 溶於 EtOAc (30 mL)及以 H20 (3 0 mL)及鹽水（20 mL)清 洗。水層以EtOAc萃取（20 mL)。混合有機層以Na2S04乾 燥及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得 255.9 mg 產物。 加入碑三甲基石夕院（〇·〇8 mL, 0.56 mmol)時，上述製得 之產物（97.5 mg，0.11 mmol)及 2，6-二甲基吡啶（〇.〇8 mL， 0.69 mmol)於CH3CN (2 mL)中之溶液在0°C下攪拌。反應 混合物在〇 °C下攪拌6小時，然後升溫至室溫3 0分鐘。加 入Me OH (1 mL)，並攪拌20分鐘。將混合物濃縮，粗產 物經由HPLC純化，製得96.1 mg之酸177，產率90%。 lU NMR (3 00MHz, CD3〇D):5 8.43 (d5 1H, J = 9.3Hz)? 8.09 (dd，2H，J = 8.0 及 1.7Hz)，7.71-7.82 (m，3H)，7.67 (s，1H)， 7.55 (d，1H，J = 2.4Hz), 7.38 (dd，1H5 J = 9.3 及 2.4Hz)，7.18 -7·23 (m，1H)，6.90 -6.96 (m，2H)，5.89 (br，1H)，5.64 (appt q，1H5 J =〜9Hz)，5.24 (appt t，1H，J = 9.9Hz)，4.96 (1H)，4.74 (dd，1H，J = 9.3 及 7.5Hz)，4.42 (br，1H)，4.18 (d， 1H)5 4.0 7 (d，1H)，4.03 (s，3H)，3.62 (t5 1H，J=15.3Hz)， 3.36 (t9 1H? J=15.3Hz), 2.74 -2.88 (m? 2H)5 2.5 5 - 2.6 7 (m? 1H)? 2.17 -2.29 (m? 1H), 1.80 (br m, 1H), 1.16 -1.69 (m5 -380- 200819460 18H) 。 31P NMR (121.4MHz， CD3〇D):6 3 8.060 。 LC/MS = 827 (M + + 1)。 實例1 7 8 :製備化合物1 7 8
於10分鐘期間加入TEA (0.26 mL)於THF (1 mL)中 之溶液時，次膦酸乙酯（實例177，158.1 mg，0.18 mmol)及 對甲苯磺醯肼（551.9 mg，1.85 mmol)於THF (6 mL)中加熱 至7 (TC。反應混合物在6 0 °C攪拌整夜。加入另外之醯肼 (5 5 5 mg)及 TEA (0·26 mL)於 THF (1 mL)中之溶液，並在
6〇°C下攪拌16小時。加入更多之醯肼（5 52 mg)及 TEA (0.26 mL)於THF (1 mL)中之溶液，及在60 °C下攪拌9小 時。所得混合物存放在冷凍器中5.5天。加入醯肼（1 . 1 1 g) 及TEA (0.52 mL)，及在60°C下攪拌20小時。將反應混合 物濃縮，殘餘物以 0.5 N NaOH (2 x 5 0 mL)清洗前先以
EtOAc稀釋。7jc層以EtOAc萃取（2x25 mL)。有機層以鹽 水清洗，以Na2S04乾燥，及加以濃縮。殘餘物經由組合 快速層析純化，製得88.3 mg包含1〇%產物之混合物。所 得混合物溶於CH3CN (5 mL)。力卩入醯肼（618 mg，2.07 -381 - 200819460 mmol)及TEA (0.29 mL)。所得混合物在60 °C下攪拌整夜。 將反應混合物濃縮，殘餘物溶於E t O A c ( 3 0 m L)。所得溶 液以冰冷1 N NaOH (2x20 mL)及鹽水清洗。水層以EtOAc 萃取（2x20 mL)。混合有機層以Na2S04乾燥及加以濃縮。 殘餘物經由薄層層析純化，製得7 1 · 5 mg飽和化合物。 加入碘三甲基砂院（0.06 mL, 0.42 mmol)時，飽和化合 物（71.5 mg，0.08 mmol)及 2,6-二甲基吡啶（0.06 mL，0.52 mmol)於CH3CN (2 mL)中之溶液在0°C下攪拌。反應混合 物升溫至室溫，並攪拌2小時。加入Me OH (1 mL)，並攪 拌1小時。將混合物濃縮，粗產物經由HPLC純化，製得 49.2 mg 之酸 178。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):6 8.36 (d， 1H，J = 9.3Hz)，8.09 (dd，2H，J = 8.1 及 1.5Ηζ)，7·68 -7.81 (m，3H)，7.66 (s，1H)，7.56 (d，1H，J = 2.1Hz)，7·37 (dd5 1H， J = 9.3 及 2.1Hz)，7.24 (d，1H，J = 4.8Hz)，7.00 (br，1H)， 6.95 (dd，1H，J = 4.8 及 3.3Hz)，5.89 (br，1H)，4.87 (d，1H， J =〜12Hz)，4.71 (t，1H，J = 8.4Hz)，4.43 (br，1H)，4.24 (m， 1H)，4·09 (m，1H)，4.02 (s，3H)，3.56 (t，1H，J=15.6Hz)， 3.43 (t，1H，J=15.6Hz)，2.81 (dd，1H，J=14.1 及 7.5Hz)，
2.44 -2 · 5 6 (m， 1 H)， 1 . 1 〇 -1 · 96 (m， 2 5 H)。31 P NMR (121.4MHz，CD3OD):5 41.123。LC/MS = 829 (M + +1)。 實例179:製備化合物179 -382- 200819460
在60 °C下，得自實例175之對溴苯基磺酸酯（255 mg, 0·31 mmol)、CS2CO3 (102 mg, 0.31 mmol)及苯基嗤啉（79 mg，0.31 mmol)在N -甲基D比略院酮（3 mL)中攪拌。4小時 後，反應物以乙酸乙酯稀釋，及以飽和NaHC03溶液使反 應驟停。有機層以飽和NaHC03溶液（2x)及鹽水清洗。將 有機層乾燥及濃縮。所得物質經由管柱層析純化，製得所 欲之產物（1 1 4 m g，4 1 %)。
Boc-胺（114 mg，0.14 mmol)及三氟乙酸（5 00 μΐ)於 CH2C12 (1 mL)中之溶液在室溫下攪拌1小時。所得溶液然 後加以濃縮，及與甲苯共沸兩次。殘餘物在THF (1 mL)中 攪拌，及依序加入氯甲酸環戊酯（〇·69 mmol)及三乙胺（230 μ 1，1 · 6 6 m m ο 1)於T H F ( 5 0 0 μ 1)中之溶液。所得溶液在室溫 下攪拌1小時。反應混合物在水及乙酸乙酯間分配。有機 層以鹽水清洗，加以乾燥（Mg S04)及濃縮。所得粗質物經 由管柱層析純化，製得次膦酸乙酯（86 mg，76%)。 攪拌次膦酸乙酯（39 mg，0.04 mmol)及 TMSI (30 μΐ， 0.23 mmol)於CH3CN (1 mL)中之溶液30分鐘，然後加入 2，6-二甲基吡啶（5 00 μΐ)。將溶液濃縮，及與甲醇及甲苯共 沸。所得粗質物經由HP LC純化，製得化合物179 (21 mg， -383- 200819460 56%)。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):S 8·40 (d5 1H，J = 9.4Hz)， 8.08 (m，1H)，7.73 (m，5H)，7.52 (m, 1H)，7.38 (m，2H)， 6.33 (m，1H)，6.22 (m，1H)，5.91 (m，1H)，5.73 (m 1H)， 5.26 (m，1H)，4.71 (m，1H)，4.35 (m，1H)，4.15 (m，1H), 5.24 (s，m，4H)，2.80 (m，2H)，2.62 (m，1H)，2.26 (m, 1H)， 1.81 (m， 2H)， 1.50 (m， 1 4 H ) 。 31 P N M R (1 2 1.4 Μ H z) δ 40.245。LCMS. 812 (M + l)。 實例180:製備化合物180
根據述於製備化合物1 52之類似製程，製備化合物 180。4 NMR (3 00MHz，C D 3 Ο D) δ 8 . 3 4 (d，J = 9.6 Η z，1H)， 8.31 (s，1H)，7.86 (s，1H)，7.65 (d，J= 9·6Ηζ，1H)，5·84 (bs9 1H)? 4.84 (m，1H)9 4.67 (t? J = 7.5Hz，1H)，4.33 (bs， 1H)，4.17 (m，1H)，4.16 (s，3H)，4.03 (m，2H)，3.47 (m5 2H)，2.83 (m，1H), 2.58 (m, 1H)，2.0 -2.3 (m，2H)，1.6 -2.0 (m，2H)，1.2 -1.6 (m，31H)。31 P N M R (12 1 · 4 M Hz 5 CD3OD)S 3 8.8 3 1; LCMS (M + l): 95 6.2。 -384- 200819460 實例1 8 1 :製備化合物i 8 i
封溴苯基磺酸酯（實例171)(182 mg，0.23 mmol)、 Cs2C03 (76 mg，0·23 mmol)及 7-甲氧基-2-苯基-喹啉-4-醇 (58 mg, 0.23 nnnol)於1-甲基-2-吡略垸酮（2.3mL)中之溶液 在65t下攪拌3.5小時。所得溶液以EtOAc稀釋，及以 2.5% NaHC03溶液使反應驟停。有機相以2.5% NaHC03溶 液（2x)及鹽水清洗，加以乾燥（MgS04)，及加以濃縮。 逐滴加入碘三甲基矽烷（99 μΐ，0.70 mmol)時，粗產物 (93 mg，0.12 mmol)及 2，6-二甲基啦 D定（81 μΐ，0.70 mmol) 於CH3CN (3 mL)中之溶液在0°C下攪拌。所得溶液升溫至 室溫，及攪拌1 .5小時。將所得溶液冷卻回至〇 °C，及加 入另外之2，6-二甲基吡啶（40 μΐ，0.35 mmol)及碘三甲基 矽烷（49 μΐ，0.35 mmol)。所得溶液在室溫下再次攪拌1·5 小時。所得溶液冷卻至〇°C，及加入Et3N (5 00 μΐ)及
MeOH (1 mL)。將反應混合物濃縮，及經由HPLC純化製 得 181 (70 mg，78%)，爲白色固體。4 NMR (300MHz， CD3〇D):6 8.42 (d? J = 9.3Hz, 1 Η)，8 · 0 8 (d，J = 6.9 Η z，2 Η)， 7.76 (m，3H)，7.66 (s，1H), 7·55 (s，1H)，7.35 (d，J = 9.3Hz， -385- 200819460 1H)，5.88 (s, 1H)，5.54 (q，J = 9Hz，1H)，5.18 (t5 J = 9.6Hz， 1H)，4.9 (s，1H)，4.73 (t5 J = 8.7Hz5 1H)，4.42 (s，1H)，4.17 (d，J=11.4Hz，1H)，4.07 (d，J=1 1·7Ηζ，1 H )，4 · 0 2 (s，3 H )， 2.80 (m，2H)，2.58 (m，1H)，2.20 (m，1H)5 1.2 -2.0 (brm，2 1H)， 1.00 (t， J = 7.2Hz， 3H)。31P NMR (121.4MHz， CD3〇D):6 46.5 LC/MS = 773.8 (M + + 1)。 實例182··製備化合物182
於5分鐘期間逐滴加入Et3N (137 μΐ，0.98 mmol)時， 次膦酸酯（實例181，81 mg，0.10 mmol)及2,4,6-三異丙基 苯-磺醯肼（292 mg，0.98 mmol)於THF (3 mL)中之溶液在 6 0 °C下攪拌。1小時後，將反應物冷卻及加入另外之2，4， 6·三異丙基苯磺醯肼（292 mg，0·98 mmol)。接著緩慢地加 入更多之Et3N (137 μΐ，〇·98 mmol)。1小時後，加入更多
之2,4,6-三異丙基苯-磺醯肼（292 mg，0·98 mmol)及Et3N (137μ1，0·98 mmol)。1小時後，反應物以EtOAc稀釋， 及以飽和NH4C1清洗兩次。THF加至有機層’及以飽和 -386- 200819460 NH4C1、飽和Na2C〇3及H20萃取。所得單相溶液以 EtO Ac萃取。混合有機層以鹽水萃取，以Mg S04乾燥及力口 以濃縮。飽和次膦酸酯（70 mg，87%)之殘餘物經由HPLC 純化，產生玻璃狀白色固體。LC/MS = 802.7 (M+ +1)、 824.4 (M+ +Na) 飽和次膦酸酯（70 mg，0·09 mmol)及2，6-二甲基吡啶 (61 μΐ，0.52 mmol)於 CH3CN (3 mL)中之溶液冷卻至 〇°C， 及逐滴加入碘三甲基矽烷（75 μΐ，〇· 52 mmol)。所得溶液在 室溫下攪拌1小時。反應物然後冷卻至0 °C ’及加入另外 之2，6-二甲基吡啶（30 μΐ，0.26 mmol)及碘三甲基矽烷（37 μΐ，0.26 mmol)。然後將所得溶液再次升溫至室溫，並攪 拌3小時。反應物冷卻至〇°C，及加入Et3N (5 00 μΐ)及 MeOH (1 mL)。將反應物濃縮，及經由HPLC自殘餘單離 出 182 (46 mg，69%)，爲灰白色固體。1H NMR (300MHz， CD3OD )δ 8.37 (d，J = 9Hz，1H)，8.08 (m，2H)，7.76 (m，3H), 7.66 (s5 1H)，7.55 (s5 1H)，7.39 (dd，J=l.8，9·3Ηζ，1H)， 5·89 (1H)，4.69 (t，J = 9Hz，1H)，4.43 (s，1H)，4.24 (d，
J = 7.5Hz，1H)，4.09 (d，J=12Hz，1H)，4.04 (s，3H)，2.82 (dd， J = 7.2，14·4Ηζ)，2.50 (ddd，J = 4.2，9.3，13.8Hz，1H)，1.2 -2.0 (brm? 28H)? 1.05 (t， J = 7.2Hz? 3H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD):5 5 0.3 6。LC/MS = 775.3 (M + + 1)。 實例1 8 3 :製備化合物1 8 3 -387- 200819460
步驟1。經BOC保護之次膦酸酯（述於實例2.22g， 2.46 mmol)於 CH2C12 (10 niL)中之溶液加入 4N HC1 於 1, 4-二噁烷（50 mL，200 mmol)中之溶液。反應混合物在室溫 下攪拌3.5小時，加以濃縮，與CH2C12共蒸發，及在真空 中乾燥，製得所欲之胺，爲棕色固體。 步驟2。在0°C下，得自步驟1之胺（60 mg，0.075 mmol)於CH2C12 (0.7 mL)中之溶液力□入6.8 Μ異氰酸環戊 酯於CH2C12 (0.2 mL，0.062 mmol)中之溶液。反應混合物 攪拌1小時，置於-2 0 °C冷凍器整夜，及加以濃縮。殘餘物 經由組合快速層析純化，製得50·6 mg中間物酯。所得酯 (5 0 mg)溶於CH3CN (2 mL)及冷卻至〇°C。加入碘三甲基矽 烷（0.2 mL)。反應混合物升溫至室溫，攪拌〇.5小時，及 冷卻至 〇°C。加入 TEA (0.5 mL)，接著加入 MeOH (2 mL)。將混合物濃縮及經由HPLC純化，製得11·6 mg化 合物 183。iH NMR (3 00MHz，CD3OD)J 8.35 (d，J = 9.3Hz, 1H)9 8.19 (s? 1H), 7.74 (s? 2H)5 7.1 5 -7.42 (m, 6H), 5.82 (brs，1H)，5.68 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H), 5.27 (t5 J = 9.6Hz， 1H)5 4.8 3 (d，J=12.0Hz，1H)，4.72 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.31 (d，J = 8.7Hz，1H)，4.07 -4.23 (m，2H)，4.03 (s，3H), 3.51 -388- 200819460 (m? 1H)? 3.38 (t? J=15.9Hz? 1H)? 3.17 (t5 J=15.9Hz, 1H)5 2.79 (m，1H)，2.61 (m，1H)5 2.2 5 (m，1H)，1.2 -1.9 (m5 26H)。31P NMR (121.4MHz，CD3OD).8 42.114; LC/MS = 884 (M + +1)。 實例184:製備化合物184
4 -三氟丁酸（15.5 mg，0.11 mmol)及胺鹽酸鹽（實例183, 70 mg，0.084 mmol)溶於 CH2C12 (1 mL)/ DMF (0.5 mL)。 加入 HATU (47.8 8 mg，0.13 mmol)及 DIPEA (0.06 mL? 0.3 4 mmol)，所得混合物在室溫下攪拌15分鐘。將反應混 合物濃縮，再溶於EtOAc，以5% LiCl、飽和NaHC03溶 液及鹽水清洗，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 化，製得33.4 mg中間物酯。所得酯（33.4 mg，0.036 mmol) 溶於CH3CN (2 mL)及冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（0·2 mL)。反應混合物升溫至室溫，攪拌0.5小時，及冷卻至 〇°C。加入 TEA (0.5 mL)，接著加入 MeOH (2 mL)。將混 合物濃縮，及經由 HPLC純化，製得17.7 mg化合物 184。4 NMR (300MHZ，CD3〇D):5 8.29 (d，J = 9.3Hz，1H)， -389- 200819460 8.18 (s? 1H)? 7.75 (s, 2H)9 7.1 5 -7.42 (m? 6H)? 5.85 (b rs? 1H)，5.73 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.30 (t，J = 9.6Hz，1H)， 4.69 (dd，J = 7.5，9.3Hz, 1 H)? 4.30 (d，J = 9.6Hz，1H)，4.05 · 4.22 (m， 2H)， 4.04 (s， 3H)， 3.51 (m， 1H)， 3.39 (t， J=1 5.3Hz? 1H)，3_18 (t，J=15.3Hz，1H), 2.81 (m，2H)，2.61 (m，lH)，2.25(m，3H)，2.02(m，2H)51.50(m，3H)51.4-1.6 (m, 8H)? 1.34 (d? J = 6.3Hz5 6H); 31P NMR (121.4MHZ, CD3OD):6 42.5 63; LC/MS = 8 97 (M + + 1)。 實例1 8 5 ··製備化合物1 8 5
根據製備化合物184之類似實驗製程，製備化合物 185。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):6 8.29 (d，J = 9.3Hz，1H)， 8.19 (s? 1H)? 7.76 (s? 2H)9 7.1 5 - 7.3 8 (m? 6H)? 5.84 (brs, 1H)，5.73 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.29 (t，J = 9.6Hz，1H)， 4.94 (d, J=12.0Hz，1H)，4.69 (t，J = 8.7Hz, 1H)5 4.3 6 (d， J = 8.7Hz，1H)，4.07 -4.23 (m，2H), 4·05 (s，3H)，3.38 (t5 J=15.9Hz5 1H)? 3.18 (t9 J=15.9Hz, 1H), 2.82 (m? 2H)? 2.61 (m，1H)，2.25 (m，1H)，2.02 (d，J = 7.5Hz，2H)，1.85 (m， -390- 200819460 CD3〇D):5 3H)5 1.2 -1·9 (m，23H); 31P NMR (121.4MHz， 42.453; LC/MS = 8 83 (M + + 1) 0 實例1 8 6 ·.製備化合物1 8 6
備化合物 根據製備化合物184之類似實驗製程 186。LC/MS = 909 (M+ +1)。
胺（實例 185)( 1 3 0 mg，0.16 mmol) &B〇c-L-酸（45 mg，0.20 mmol)溶於 CH2C12 (2 mL)/ mL)。加入 HATU (93 mg，〇·24 mmol)及 DIPEA 第三-白胺 DMF (0.5 (0 . 1 3 mL 9 -391 - 200819460 0 · 45 mmol)，所得混合物在室溫下攪拌15分鐘。將反應混 合物濃縮，再溶於EtO Ac，以5% LiCl、飽和NaHC03溶 液及鹽水清洗，及加以濃縮。粗產物經由組合快速層析純 化，製得1 3 3 m g四肽，產率8 1 %。 上述之四肽中間物（133 mg，0.13 mmol)溶於CH3CN (2 mL)及冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（0.2 mL)。反應混合 物升溫至室溫，攪拌0.5小時，及冷卻至〇°c。加入TEA (0·4 mL)，接著加入MeOH (2 mL)。將混合物濃縮，及經 由HPLC純化，製得82·6 mg之187，產率57%。4 NMR (3 00MHz，CD3〇D):6 8.24 (d? J = 9.3Hz? 1H)? 8.21 (s? 1H)? 7.78 (s, 2H)，7.36 (dd，J = 2.4, 9.0Hz，1H) 7.15 -7.38 (m5 5H)，5.86 (brs，1H)，5.78 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.33 (t， J = 9.6Hz，1H)，4.86 (d，J二 12.0Hz，1H)，4.67 (t，J二 8.7Hz， 1H)，4.54 (d，J = 8.7Hz，1H)，4.1-4.25 (m，2H)，4.06 (s，3H)， 3.47 (s? 1H)，3.36 (t，J=15.9Hz? 1H), 3.19 (t, J=1 5.9Hz, 1H)，2.82 (m，2H)5 2.61 (m，1H)，2.32 (m，1H)，2.02 (d， J = 7.5Hz，1H)5 1.98 (m，2H)，1.23 -1.7 (m，8H)，1.34 (d， J 二 6.3Hz, 6H)， 0.83 (s， 9H); 31P NMR (121.4MHz， CD3OD):5 42.48 5; LC/MS = 8 8 6 (M + + 1)。 實例1 8 8 :製備化合物1 8 8 •392- 200819460
實例185製得之胺（60 mg，0.075 mmol)及對甲苯硼酸 (20 mg，0.15 mmol)於CH2C12 (4 mL)中之混合物依序加入 分子篩（150 mg)、TEA (0.2 mL)及Cu(OAc)2。反應混合物 在空氣中以乾燥之試管攪拌18小時’以CH2C12稀釋，及 經由賽里塑料過濾。將濾液濃縮，及經由HPLC純化，製 得 100 mg中間物酯。上述之酯（100 mg，0.075 mmol)及 2,6-二甲基吡啶（〇·〇9 mL，0·75 mmol)溶於 CH3CN (2 mL)，及冷卻至 0°C。加入碘三甲基矽烷（0.05 mL, 0·38 mmol)。反應混合物升溫至室溫，攪拌1小時，及冷卻至 〇°C。加入MeOH (0.2 mL)，及升溫至室溫。將混合物濃 縮，及經由HPLC純化，製得4.6 mg之188，爲黃色固 體。1H NMR (3 00MHZ，CD3〇D):5 8.19 (s，1H)，7.96 (d， J = 9.0Hz，1H)，7.81 (s，1H)，7.74 (s，1H)，7·25 7.35 (m， 6H)，6.61 (m，4H)，5.84 (brs，1H)，5.78 (dd，J = 8.6，18·3Ηζ， lH)，5.36(t，J = 9.6Hz，lH)，4.64(t，J = 8.7Hz，lH)，4.30- 4.47 (m，2H)，4.10 -4.25 (m，2H)，4.08 (s，3H)，3.39 (t， J=15.9Hz，1H)，3.18 (t，J=15.9Hz，1H)，2.75 (m，1H), 2.63 (m，1H)，2.28 (m，1H)，1.98 (s5 3H)，1.7 -2.1 (m，3H)，1.2 -1.7 (m，14H); 31P NMR (121.4MHz, CD3OD):5 42.409； -393- 200819460 LC/MS = 8 63 (M + + 1)。 實例189:製備化合物ι89
根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化合 物 189。4 NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.20 (s，1Η)，8·13 (d， J = 9.0Hz，1Η)，7·82 (s，1Η)，7·80 (s，1Η)，7·20 -7,3 8 (m, 6H)，6.88 (d，J = 8.1Hz，2H)，6.50 (d，J = 8」Hz，2H)，5.94 (brs5 1H)，5.77 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.36 (t，J = 9.6Hz， 1H)，4.74 (t，J = 8.7Hz, 1H)，4.60 (d，J=12.3Hz，1H)，4.43 (m, 1H)，4.10 -4·25 (m，2H)，4.07 (s, 3H)，3.36 (t， J=15.9Hz，1H)，3.20 (t，J=15.9Hz，1H)，2.63 -2.82 (m，2H)，
2.24 (m? 1H), 1.7 -2.1 (m? 3H)? 1.2 -1.7 (m? 14H); 31P NMR (121·4ΜΗζ，CD3OD):3 42.592; LC/MS = 917 (M + + 1)。 實例1 9 0 :製備化合物1 9 0 -394- 200819460
根據述於製備化合物184之類似實驗製程’製備化合 物 190。4 NMR (300MHz，CD3OD):5 8_18 (s，1H)，7.99 (d， J = 9.3Hz，1H)，7.76 (s，1H)，7.75 (s, 1H)，7·15 -7·33 (m， 6H)，6.90 (m，2H)，6.78 (d，J = 7.5Hz，1H)，6.72 (d， J = 7.5Hz，1H)，5.89 (brs, 1H)，5.75 (dd，J = 8.6，18·3Ηζ，1H)， 5.34 (t，J = 9.6Hz，1H)，4.72 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.49 (brs， 1H)，4.44 (d，J=12.3Hz，1H)，4.10 -4.30 (m，2H)，4.07 (s， 3H)，3.35 (t，J=15.9Hz，1H)，3.19 (t，J=15.9Hz，1H)，2.63 -2.82 (m? 2H)? 2.24 (m? 1H)9 1.7 -2.1 (m, 3H)? 1.2 -1.7 (m5 14H); 31P NMR (121.4MHz, CD3OD):6 42.205; LC/MS = 917 (M + + 1)。
-395- 200819460 根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化合 物 191。1H NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.16 (s，1H)，8.12 (d， J = 9.3Hz? 1H)，7.75 (s，1H)，7.74 (s，1H)，7.15 -7.33 (m， 6H)，7.08 (t，J = 7.2Hz，1H)，6.81 (d，J = 7.2Hz，1H)，6.63 (d5 J = 7.2Hz，1H)，5.88 (brs，1H)，5.75 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)， 5.40 (t，J = 9.6Hz，1H)，4.78 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.64 (m，1H)， 4.39 (d，J=12.3Hz5 1H)，4.10 -4.30 (m，2H), 4.06 (s，3H)， 3.35 (t9 J=15.9Hz? 1H)? 3.21 (t? J=15.9Hz? 1H)? 2.63 -2.82 (m，2H)，2.24 (m，1H)，1.7 -2.1 (m，3H)，1.2 -1.7 (m5 14H); 31 P NMR (121.4MHz， C D 3 O D ): δ 42.896; LC/MS = 9 1 7 (M + + 1)。 實例192:製備化合物192
實例185步驟1製得之胺（70 mg，0.08 7 mmol)於THF (2 mL)中之溶液加入硫羰基二咪唑，及在室溫下攪拌1小 時。加入2.0 Μ銨的MeOH (1 mL)溶液，及在加蓋管中於 -396- 200819460 50°C下攪拌1小時，及加以濃縮。殘餘物溶於CH2C12 (2 mL)，加入溴酮（35 μΙ〇，在5(TC下攪拌1小時，及加以濃 縮。粗產物經由組合快速層析純化，製得8 0 m g次膦酸 酯。以碘三甲基矽烷（0.1 mL)去保護，製得192。4 NMR (300MHZ，CD3OD)：6 8.20 (s? 1H), 8.16 (d, J = 9.3Hz, 1H)? 7.80 (s，1H), 7.77 (s，1H)，7.73 (s，1H)，7.18 -7.38 (m， 6H), 5·95 (brs，1H) 5 5.7 9 (dd，J = 8.6，18.3Hz，1H)，5.39 (t5 J = 9.6Hz，1H)，4.82 (t，J = 8.7Hz，1H)，4.72 (brs，1H)，4.44 (d5 J=12.3Hz? 1H)9 4.2 4 (dd5 1=12.6, 3.3Hz5 1H)? 4.17 (m, 1H)， 4.03 (s， 3H)， 3.39 (t， J=15.9Hz? 1H)， 3.18 (t，
J=15.9Hz，1H)5 2.8 2 (m，1H), 2.61 (m，1H), 2.24 (m，1H)， 1.91 (m，2H)，1.65 (m，1H)，1.2 -1.7 (m，23H); 31P NMR (121.4MHz，CD3OD):3 42.306。 實例193:製備化合物193
化合物 184 (308 mg，0.305 mmol)、甲苯磺醯肼（425 mg，2.28 mmol)及乙酸鈉（375 mg 5 4.5 8 mmol)於 1，2-二甲 氧基乙烷（5.5 mL)及水（〇·6 mL)之混合溶劑中之混合物在 -397- 200819460 9 5 °C攪拌3小時。然後將反應混合物濃縮至3 mL體積， 及加以過濾。濾液經由HPLC純化，製得2 5 0 mg (81 %) 化合物 193。iH NMR (3 00MHz，CD3OD):5 8.27 (d， J = 9.6Hz, 1H)，8.17 (s，1H)，7·76 (s，2H)，7.2 -7.4 (m，6H)， 5.84 (brs，1H)，4.83 (d，J=12.3Hz，1H)，4.65 (t，J = 8.7Hz， 1H)，4.39 (m，1H), 4.24 (b r s，1 H)，4.0 4 - 4.2 3 (m，3 H)， 4.15 (m，2H)，3.39 (t，J=15.9Hz，1H)，3.28 (t，J=15.9Hz， 1H)，2.78 (m，1H)，2.49 (m, 1H)，2.30 (m，2H)，1.7 -2.1 (m5 5H)，1.1-1.7 (m? 19H); 31P NMR (121.4MHz, CD3OD):6 44.910; LCMS= 899 (M + + 1)。 實例194:製備化合物194
根據述於製備化合物184之類似實驗製程’製備化合 物 194。4 NMR (3 00MHz， CD3OD):5 8.26 (d， J = 9.3Hz， 1H)，8.18 (s，1H)5 7.75 (s，2H)，7·20 -7.3 5 (m，6H)，5·82 (brs? 1H)5 4.84 (d9 J=12.3Hz? 1H), 4.64 (t9 J = 8.7Hz? 1H)? 4.44 (m，1H)，4.15 (m, 3H)，4.05 (s，3H)? 3.34 (t， J=15.9Hz? 1H) 5 3.2 2 (t? J=15.9Hz5 1H)? 2.77 (m5 1H)? 2.48 -398- 200819460 (m，1H), 2.04 (d5 2H)，1_7 -2.0 (m，3H)，1.1-1.7 (m，26H)， 1.00 (m，2H)； 31P NMR (121.4MHz, CD3OD):6 44.979; LC/MS= 8 8 5 (M + +1) 〇 實例1 9 5 :製備化合物1 9 5
全部經保護之大環狀次膦酸酯（其之合成述於實例 152，以Boc保護基保護）以HC1處理，以移除Boc保護 基。所得胺用於製備化合物195-200。 此胺（34 mg，0.04 mmol)於 EtOAc (2 mL)中之溶液加 入飽和NaHC03溶液（2 mL)，及劇烈攪拌。力□入氯甲酸 2,2-二甲基丙酯（7 μ!〇，並攪拌15分鐘。將兩層分離。有 機層以鹽水清洗，及加以濃縮。乾燥之殘餘物溶於CH3CN (1 mL)及冷卻至0°C。加入碘三甲基矽烷（0.20 mL)。反應 混合物在〇°C下攪拌0.5小時。加入2,6·二甲基吡啶（〇.6 mL)，接著加入 MeOH (3 mL)。所得混合物在真空中濃 縮。殘餘物經由HPLC純化，製得25·2 mg化合物195。 LC/MS = 9 5 9.1 (M+ +1) 〇 -399- 200819460 實例196:製備化合物196
根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化 物 196。LC/MS = 915.2 (M+ +1)。 實例197:製備化合物197
根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化 物 197。LC/MS = 95 5.1 (M++1)。 實例1 9 8 :製備化合物1 9 8 -400- 200819460
根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化合 物 198。LC/MS = 9 83.1 (M+ +1)。 實例199:製備化合物199
根據述於製備化合物184之類似實驗製程，製備化合 物 199。LC/MS = 944.3 (M+ +1)。 實例200:製備化合物200 -401 - 200819460
根據述於製備化合物1 94之類似實驗製程，製備化合 物 200。LCMS (M+1): 955.24。 實例201:製備化合物201
根據述於製備化合物1 77之類似實驗製程，製備化合 物 201。LCMS (M+1): 821.36。 實例202:製備化合物202 -402- 200819460
化合 根據述於製備化合物178之類似實驗製程，製備 物 202。LCMS (M+ 1 ): 823.3 7。 實例203:製備化合物203
使用述於化合物153之相同方法製備化合物203 用6-甲氧基-1-萘醇進行對溴苯基磺酸酯之置換反應。 步驟類似先前所述方法。最終產物經由逆相HPLC (A:水 /0.05% TFA，B:乙腈 /0.5% TFA)。4 (3 00MHz，CD3〇D):6 8.13 (d J = 9Hz? 1H)? 7.40 -7.35 2H), 7.30 -7.16 (m5 6H)，7.01 (d5 J=llHz, 1H)，6·85 (m，1H)，5.73 (q，J=llHz，1H)，5.42 -5·34 (m，2H)，4 4.76 (m，1H)，4.64 -4.55 (m，2H)，4.32 (d，J = 8Hz， 。使 後續 純化 NMR (m9 -6.80 .85 -1H)， -403- 200819460 4.06 -3.97 (m9 1H)? 3.90 (s5 3H)? 3.39 -3.11 (m? 2H)9 2.87 -2.70 (m，1H)，2.70 -2.5 7 (m，1H)，2.45 -2.24 (m，2H), 1.9 5 - 1.25 (m, 19H)。31P NMR (1 2 1 . 4 Μ H z，C D 3 O D): δ 43.13 。
El Ms (m/z) 743.7 [M + H] + , 76 5.7 [M + Na]+。 實例2〇4:製備化合物204
製得化合物 204，爲白色固體。4 NMR (3 00MHZ， CD3OD):6 8.3 3 (m， 1H)， 7.90 (m, 1H)， 7.55 (m， 1H)， 7.31 (m，3H)，6.94 (m，2H) 5.90 (bs，1H)，5.73 (m，1H)，5.33 (m, 1H)，4.74 (m，2H)，4.42 (bs，1H)，4.13 (m，2H)，4.00 (s，3H)，3.57 (m，1H)，2.76 (m，2H)5 2.5 7 (m, 1H) 2.31 (m， 1H)? 1.86 (m9 2H) 1.65 -1.2 (m9 18H); 31P NMR (121.4MHz? CD3OD):5 3 9.3 8 6 LC (跑6分鐘，停留時間=4.79分鐘）MS (781.2，M + 1)。 實例20 5:製備化合物205 -404- 200819460
製得化合物 205，爲白色固體。4 NMR (3 00MHz， CD3〇D):5 8.2 8 (d? J = 9.2Hz, 1H)? 7.90 (d? J = 6.4Hz? 1H), 7.50 (d，J = 6.8Hz，1H)5 7.31 (m, 3H)，6.98 (m, 2H)，5.89 (bs, 1H)，4.74 (m，2H)，4.42 (bs5 1H)，4.24 (m，1H) 4.08 (m, 1H)，3.98 (s，3H) 3.40 (m，2H)，2.76 (m，1H)，2.48 (m， 1H) 1.99 (m，1H)，1.79 (m, 2H) 1.65 -1.2 (m, 22H); 31P NMR (121.4MHz，CD3OD):3 41.217。LC (跑 6 分鐘，停留 時間=4.74 分鐘）MS (783_2，M+ 1)。 實例206:製備化合物206
使用類似述於化合物185之方法製備化合物206。 LCMS (M+ 1 ): 9 5 3.3 2 -405- 200819460 實例207:製備化合物207
使用類似於此處所述之製程製備化合物207。LCMS (M+ 1 ): 745。 實例2 0 8 :製備化合物2 0 8
使用類似於此處所述之製程製備化合物208。LCMS (M+ 1 ): 942。 實例209:製備化合物209 -406- 200819460
HCI
MeCN，飽和NaHC03水溶液
a·胺基酸（702 mg5 3.16 mmol)在 MeCN (31 mL)中泥 化，及逐滴加入飽和N a H C 0 3 (水溶液，3 2 m L )，接著加入 N-環戊氧基（羰氧基）丁二醯亞胺（l.00g, 4·4ΐ mmol)。在室 溫下2小時後，所得混合物在真空中濃縮，及在乙酸乙酯 (40 mL)/ H20 (30 mL)中分配，同時以HCI (1N)酸化至 pH=l。將水層移除，及以乙酸乙酯萃取（8〇 mLU)。混合 有機層以鹽水清洗（80 mL)，以Na2S04乾燥，及在真空中 濃縮，製得1·32 g之（R)-3-甲基-8-壬烯酸產物，其受到 N-環戊氧基（羰氧基）丁二醯亞胺之污染。[CMS (M + 1): 297.88 〇
-對溴苯基磺醯基脯胺酸甲基酯（1.77g， 3·80 mmol)溶於dcm (16 mL)，及緩慢地加入HCI (4N的 二Di院，16 mL)。在室溫下1.5小時後，溶液在真空中濃 縮’所得粗質固體溶於DMF (32 mL)。此溶液加入粗質 (R)-3·甲基-8-壬烯酸（132g，316 mmol)及 HATU (2.40g， 6·32 mmGl) °所得泥漿冷卻至〇°C，逐滴加入N-甲基嗎啉 -407- 200819460 (1.75 mL，15.92 mmol)，同時移除冷浴。在室溫下16小時 後，將溶液倒至LiCl (2%水溶液，25 0 mL)及以乙酸乙酯萃 取（100 mLx3)。混合有機層以LiCl (2%水溶液，25 mL)、 飽和 NaHC03 (1 00 mL)、飽和 NH4C1 (100 mL)、鹽水 (1 0 0 m L)清洗，以M g S Ο 4乾燥，及在真空中濃縮。所得粗 質殘餘物經由矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純化，製得1.99 g 醯胺產物，產率 98%。LCMS (M+1): 644.87。
c.脯胺酸甲酯（1.98g，3.07 mmol)於 THF (10 mL)及 MeOH (10 mL)中之溶液逐滴加入 LiOH溶液（3 79 mg， 0·91 5 mmol, 1 〇 mL H20)。在室溫2小時後，所得懸浮液 以 H20稀釋及酸化至 PH=1。水層以乙酸乙酯萃取（50 mLx4)。混合有機層以鹽水清洗（75 mL)，以 MgS04乾 燥，及在真空中濃縮。所得粗質固體溶於DMF (30 mL)， 加入胺基次膦酸酯（1.1 3g, 3.74 mmol)，接著加入HATU (2.34 g, 6.14 mmol)。所得泥漿冷卻至〇°C，逐滴加入N-甲 基嗎D林（1.70 mL5 15.46 mmol)，同時移除冷浴。在室溫下 16小時後，所得溶液倒至LiCl (5%，水溶液，200 mL)， 及以乙酸乙酯萃取（1〇〇 mLx3)。混合有機層以LiCl (5%水 -408- 200819460 溶液，100 mL)、HC1 (〇·5 N，100 mL)、飽和 NaHC〇3 (100 mL)及鹽水（100 mL)清洗，以MgS〇4乾燥，及在真空中濃 縮。所得殘餘物經由矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純化，製得 2.17 g 醯胺產物，產率 78%。LCMS (M+1): 912.02。
c·次膦酸酯-二烯溶於CH2C12 (23 7 mL)及將所得溶液 脫氣30分鐘。所得溶液加熱至回流，及加入Grubb氏G1 觸媒（4 92 mg，0.5 9 8 mmol)。在回流下20小時後，力[]入三 羥甲基膦（3.71g，29.90 mmol)、TEA (8.6 mL，59.8 mmol) 及H 2 O (1 0 0 m L)，及使反應混合物回流整夜。冷卻至室溫 後，將兩層分離。有機層以 H20 (1 00 mL)、1/2飽和
NaHC03 (100 mLx2)、LiCl (5% 水溶液，100 mL)、鹽水 (100 mL)清洗，以MgS04乾燥，及在真空中濃縮。粗質殘 餘物經由矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純化，製得1.32 g產 物，產率 63%。LCMS (M + 1): 884.01。 -409- 200819460
d.大環物（1.32g，1.49 mmol)、羥基喹啉（5 23 mg，1·49 mmol)及 Cs2C03 (973 mg，2.98 mmol)在 NMP (5.0 mL)中 泥化，及加熱至65 °C達8小時。所得混合物倒至LiCl (5% 水溶液，50 mL)及以乙酸乙酯萃取（30 mLx3)。混合有機層 以 LiCl (5% 水溶液，35 mLx3)、飽和 NaHC03 (40 mL)、 1/2 飽和 NaHC03 (50 mL)、鹽水（50 mL)清洗，以 Na2S04乾燥，及在真空中濃縮。粗質殘餘物經由砂膠層析 (乙酸乙酯-己烷）純化，製得1 · 1 3 g胺基噻唑，產率 76%。LCMS (M + 1)·· 997.31。
e.胺基噻唑（1.13g，1.13 mmol)溶於 MeCN (11.2 mL)，及冷卻至0°C (觀察到沉澱）。冷卻之泥漿中逐滴加入 碘化三甲基矽烷（800 pL，5.62 mmol)，同時移除冷浴。在 -410- 200819460 室溫下35分鐘後，所得溶液冷卻至0°C，加入2,6-二甲基 吡啶（1.3 mL，11.2 mrnol)，接著加入 MeOH (1.3 mL)。所 得溶液在真空中濃縮，及經由逆相HPLC (MeCN-含0.1 % TFA之H20)純化，製得1.002 g次膦酸，產率80%。i NMR (3 00MHz，CD3OD) 6 8.3 3 (d，J = 9.9Hz，1H)，8·32 (s， 1H)，7·87 (s，1H)5 7·65 (d，J = 9.3Hz，1H)，7·33 -7.21 (m， 1H)，6.94 (dd? J = 7.8? 7.5Hz，2H)，5.85 (s，1H)，5.76 -5.66 (m，1H)，5.35 (dd，J = 9.9Hz, 1 H)? 4.73 (dd, J = 9.3? 7.5Hz, 1H), 4.18 (s, 3H)，4.15 -4.01 (m，3H)，3.8 3 - 3.77 (m，1H), 3.64 (s? 3H)9 3.6 2 - 3.5 5 (m, 1H)? 2.92 -2.81 (m9 1H)? 2.78 -2.58 (m，2H)，2.48 -2·32 (m，1H)，2.07 - 1.91 (m，1H)， 1.84 - 1.76 (m，1H)，1.75 -1 · 2 2 (m，2 3 H), 1.19 -1.01 (m， 2H)，0.97 - 0.90 (m, 3H); (M+l): 969.42。 實例2 1 0 :製備化合物2 1 0 -411 - 200819460
次膦酸（702 mg，0.632 mmol)、乙酸鈉（778 mg，9.48 mmol)及甲苯磺醯肼（886 mg，4.76 mmol)在 DME (5.75 mL) 及H20 (5 75 μΙ〇中泥化，及加熱至95°C達1.5小時。之 後，加入更多之乙酸鈉（160 mg5 1·95 mmol)及甲苯磺醯肼 (1 7 7 m g，0 · 9 5 m m ο 1)，所得混合物另在9 5 °C下加熱1 . 2小 時。在真空中濃縮，殘餘物溶於MeOH，加以過濾，及經 由逆相HPLC (MeCN_含0.1 % TFA之H20)純化，製得371 mg 次膦酸，產率 53%。iH NMR (3 00MHz，CD3OD)5 8.32 (t，J = 4.5Hz，2H)，7·88 (s，1H) 7.66 (d，J = 9.3Hz，1H)，7·38 -7.25 (m，1H)，6·98 (dd，J = 7.8Hz，2H)，5.85 (s，1H)，4.73 (dd，J = 8.7，8·4Ηζ，2H)，4·17 (s，3H)，4.12 -3.98 (m，3H)， 3.79 (d，J=10.5Hz，1H)，3.73 -3.67 (m，1H)，3·5 7 -3.5 0 (m， 1H)，3.43 (d5 J=10.5Hz，1H)，2.94 ·2·85 (m，1H)，2.58 - 2.47 (m? 1H)，2.04 -1.91 (m，1H)，1.8 5 - 1.04 (m，24H) -412- 200819460 1·37 (d，J = 6.6Hz，6H)，0.90 (d，J = 6.6Hz，3H); LCMS (M + l): 971.28° 實例2 1 1 :製備化合物2 1 1
a·脯胺酸甲酯（4.85g，8.67 mmol)溶於 MeOH (30 mL) 及THF (30 mL)。該有機溶液緩慢地加入氫氧化鋰（3.60g， 86.7 mmol)於H20 (30 mL)中之溶液。所得混合物在室溫 攪拌1小時，同時以H20 (20 mL)稀釋，以HC1 (1N)酸化 至 pH = 2，以乙酸乙酯萃取（40 mL X 3)。混合有機層以 M gS04乾燥，及在真空中濃縮，製得4.55 g酸，粗產率 9 6%。
b.次膦酸乙；I#基環丙酯（5.90g, 13.6 mmol)溶於THF (100 mL)，及緩慢地加入硼烷-THF錯合物（ΐ·〇 μ的THF 溶液，1 3 · 6 m L，1 3 · 6 m m ο 1)。在室溫下2小時後，緩慢地 加入過氧化氫（3 0 %水溶液，1 · 4 m L，1 3 · 6 m m ο 1)，接著加入 氫氧化鈉（1·0 M，17.7 mL, 17·7 mmol)，所得混合物在室 -413- 200819460 溫下另攪拌1小時。混合物然後以H2〇稀釋（100 ml)及以 乙酸乙酯萃取（100 mLx 3)。混合有機層以鹽水清洗（100 mL)，以Na2S04乾燥，及在真空中濃縮。粗質殘餘物經由 矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純化，製得4.19 g醇，產率68
c·胺基醇（1.57g, 3.47 mmol)、烯丙基溴（1.50 mL，17.3 mmol)及分子篩（4埃）在DCM (17 mL)中攪拌30分鐘。所 得混合物加入氧化銀（2.80g，12.14 mmol)，及在室溫下攪 拌整夜。將混合物過濾及在真空中濃縮。粗質殘餘物經由 矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純化，製得465 mg烯丙基化產 物，產率2 7 %。
d·在室溫下，胺基醚（1.43g，2.89 mmol)在 TFA (6 mL) 及二甲基硫（2 mL)中攪拌整夜。所得溶液以乙酸異丙酯（30 mL)/庚烷（3 0 mL)稀釋，及以HC1萃取（1N，30 mLx2)。有 機層進一步以庚院（30 mL)稀釋，及以HC1 (1 N，30 mL)萃 取。以庚烷稀釋及以HC1萃取重複兩次。混合水層以氫氧 化鈉驗化至pH=12，及以乙酸乙酯萃取（1〇〇 mLxS)。混合 有機層以鹽水（100 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及在真空 中濃縮，製得 754 mg胺，產率 72%。LCMS (M+1): -414- 200819460 360.07 〇
e.脯胺酸（303 mg，0.555 mmol)及 TEA (85 μ、0.61 m m o 1)溶於T H F (4 · 0 m L)及冷卻至〇 °C。所得溶液加入氯甲 酸異丁醋（80 pL，0.61 mmol)。在0C下另外40分鐘後， 溶液於THF (1.5 mL)中並使所得混合物升溫至室溫時，加 入胺（200 mg，0.5 5 5 mmol)。室溫下2小時後，混合物以 飽和NaHC03稀釋及以乙酸乙酯萃取。混合的有機層以鹽 水清洗、以Mg S04乾燥，及在真空中濃縮。粗質殘餘物經 由砂膠層析（乙酸乙酯-己垸）純化，製得3 0 6 m g醯胺產 物，產率 62%。LCMS (M+ 1 ): 889.87。
Grubb's G1 DCM f·次膦酸酯-二烯（986 mg，1·11 mmol)溶於 DCM (100 mL)，及使所得溶液脫氣3 0分鐘。溶液加熱至回流，及加 入Grubb氏G1觸媒（250 mg，〇·31 mmol)。在回流下16小 時後，加入更多之GrubbS G1觸媒（45mg，0.055 mmol)。 在回流下另外3小時後，加入更多之Grubb氏G1觸媒（45 -415- 200819460 mg，0.0 5 5 mmol)。在回流下另外3小時後，加入三羥甲基 膦（2.3g，18.5 mmol)、TEA (5.1 mL，37 mmol)及 H2〇 (20 mL)，及使反應混合物回流整夜。冷卻至室溫後，將兩層 分離。水層以DCM (50 mL)清洗，以Na2S04乾燥，及在 真空中濃縮。粗質殘餘物經由矽膠層析（乙酸乙酯-己烷）純 化，製得 440 mg 產物，產率 46%。LCMS (M + 1): 859.93。
g·大環物（5 3 2 mg，0.62 mmol)、羥基喹啉（216 mg， 0.62 mmol)及 Cs2C03 (404 mg，1.24 mmol)在 NMP (6.0 mL) 中泥化，及加熱至6 5 °C達8小時。混合物倒至l i C 1 ( 5 %水 溶液，60 mL)及以乙酸乙酯萃取（30 mLx3)。混合有機層以 1^(：1(5%水溶液，35 111]^><3)、飽和&11(：03(4〇1111〇、鹽水 (5 0 mL)清洗，以NaeCU乾燥，及在真空中濃縮。粗質殘 餘物經由矽膠層析（甲醇-乙酸乙酯）純化，製得4 5 6 m g胺 基噻唑，產率 76%。LCMS (M+1): 973.27。 -416- 200819460
h.大環物（456 mg，0.468 mmol)溶於 MeCN (5.0 mL)及 逐滴加入TMSI (0.34 mL，2.35 mmol)。在室溫下10分鐘 後’加入2,6 - 一^甲基啦D定（0.27 mL，2.33 mmol)，接著加入 Me OH (0.27 mL) ’所得溶液在真空中濃縮。粗質殘餘物溶 於 MeCN (3.0 mL)，及加入飽和 NaHC03 (3.0 mL)。雙層 谷液中加入N -環戊氧基（鑛氧基）丁二醯亞胺（127 mg, 0.56 mmol)。在室溫下2小時後，將兩層分離，將水層酸化至 pH = 2，及以乙酸乙酯萃取（7 mLx3)。混合有機層在真空中 濃縮，粗質殘餘物溶於DMF，及直接經由逆相製備性 HPLC (管柱：Phemomenex Gemini 5u, C18，1 1 0 A, 7 5 x 3 0 mm，梯度：3 0-95 %乙腈-含0.1% TFA之水）純化，製得 216 mg 次膦酸，產率 48%。LCMS (M+1): 957.20。 實例212:製備化合物212 -417- 200819460
次膦酸（210 mg，0·22 mmol)、乙酸鈉（270 mg，3·29 mmol)及甲苯磺醯肼（310 mg，1.65 mmol)在 DME (5.0 mL) 及H20 (5 0 0 μ!〇中泥化，及加熱至95°C達2小時。所得混 合物冷卻至 〇°C，加入 HC1 (6N，550 μί，3.29 mmol)，及 在真空中濃縮，溶於 MeOH，加以過濾，及經由逆相 HPLC (管柱：Phemomenex Gemini 5u，C18，ΠΟΑ, 75x3 0 mm,梯度：3 0-9 5 % 乙腈-含0. 1 % T F A之水）純化，製得 170 mg 次膦酸，產率 80%。LCMS (M+1): 959.33。 實例2 1 3 :製備化合物2 1 3 -418- 200819460
在 0°C 下，（A)(25 0 mg，0.272 mmol)於 CH3CN (3 mL， 0·1 M)中之溶液加入碘三甲基矽烷（194 μί，1·36 mmol)。 反應混合物在〇°C下攪拌5分鐘。加入2,6-二甲基吡啶 (315 μί，2.72 mmol)，並攪拌 1.5 小時。力D 入 MeOH，並 攪拌30分鐘。將所得混合物濃縮，並再溶於少量Me OH， 及經由逆相HPLC純化，製得1 90 mg (70%)(B)，爲TFA 鹽。1H NMR (3 00MHz，CDC13):5 8.15 -8.0 (m，4H)，7.49 (d，J = 7.3，3H), 7.26 -7.04 (m，5H)，6.74 (dd，J = 7.1Hz， J = 8.2Hz，2H)，5.68 (d, J = 8.2Hz，1H)，5.48 (m, 1H)，4.85 (m，1H)，4.62 -4.3 6 (m，3H)，4.25 -3.99 (m，5H) 5 3.4 8 (t， J = 15.3Hz，1H)，3.21 (t, J=16.5Hz，1H)，2.60 (m，1H)，2.16 (m，1H)，1.7 3 - 1.23 (m，22H); 31P (75MHz, CDC13):5 42.04。LC/MS: M+l = 891。 實例213:製備化合物213 -419- 200819460
(C)(35 mg5 0.03 9 mmol)於 DME (1 mL)/ Η2〇 (Ο」mL) 中之溶液加入對甲苯磺醯肼（37 mg，0.196 mmol)及NaOAc (3 2 m g，0 · 3 9 m m ο 1)。反應混合物加熱至9 5 °C達1 · 5小時’ 及冷卻至室溫。加入數滴IN HC1使pH = 2。粗產物經由逆 相HPLC純化，製得12.4 mg酸（D)，產率36%。4 NMR (3 0 0MHz，CDC13)：5 8.3 2 - 8.24 (m9 2H)? 7.92 (d? J = 6.4Hz5 2H)，7.56 -7.27 (m，5H)，7.00 (m，1H)，6·71·6·66 (m，2H)， 5·73 (s，1H)，5.54 (d，J = 7.3Hz，1H)，4.76 -4.73 (m，2H)， 4.47 -4.43 (ln，2H)，4.14 (s，3H)，3.39 (t，J=15.6Hz，1H)， 3.24 (t，J=14.6Hz，1H)，2·61 (m，1H)5 1.79 -1.19 (m，31H); 31P (75MHz，CDC13)3 42.77 (s，IP)。LC/MS: M + l = 8 93。 實例214:製備化合物214-225 使用類似於此處所述製程，亦可製備下列化合物 214-225 〇 -420- 200819460
-421 - 200819460
221
224 225 生物分析 NS3酶促效力： 純化的NS3蛋白酶與NS4A肽複合，接著與連續稀釋 的化合物（使用DMSO作爲溶劑）培育。添加雙重標記的肽 受質以引發反應，及測量所得之螢光動力學增加量。對速 率數據進行非線性回歸以計算1C 5〇。測量起始之抗基因型 1 b蛋白酶的活性。根據所得之抗基因型1 b的效力，可測 -422- 200819460 試其他的基因型（la、2a、3)和/或抗蛋白酶抑制劑性的酶 (D168Y、D168V、或 A156T突變種）。在全部分析期間內 使用B IL N - 2 0 6 1作爲對照組。本發明代表性化合物在此分 析中加以評估，並發現一般具有IC 5 〇値低於約1 μιη。 複製子效力和胞毒性：
Huh-luc 細胞（安定複製的 Bartenschlager 之 13 8 91\1。-ubi-neo/NS3-3 ’/ET基因型lb複製子）經連續稀釋的化合物 (使用DMSO作爲溶劑）處理72小時。利用生物發光而測 量複製子的複製數量，及進行非線性回歸以計算EC 5G。利 用P r 〇 m e g a C e 11T i t e r - G1 〇細胞生存力分析法對經相同稀釋 濃度的化合物處理之平行試驗盤進行胞毒性分析。根據所 得之抗1 b複製子的效力，可測試化合物之抗基因型1 a複 製子及/或編碼有D 1 6 8 Y或A 1 5 6T突變種之抗抑制劑性的 複製子之效力。在全部分析期間內使用B I L N - 2 0 6 1作爲對 照組。本發明代表性化合物在此分析中加以評估，並發現 一般具有EC5Q値低於約5μιη。 血清蛋白質對複製子效力的影響： 於提供有生理濃度的人類血清白蛋白（40 mg/mL)或 α-酸糖蛋白（1 mg/mL)的一般細胞培養介質（DMEM + 10% FBS)中進行複製子分析。存在有人類血清白蛋白時的 ECso與一般介質中的EC 5〇相比較以測量效力的倍數變 化。 -423- 200819460 酶促選擇性： 哺乳動物的蛋白酶（包含豬的胰彈性蛋白酶、人類白 血球彈性蛋白酶、蛋白酶3、和組織蛋白酶D)的抑制作用 係利用各個受質對各種酶的Km而測量。比較各個酶的 ICw與由NS3 lb蛋白酶所得之IC5()以計算選擇性。本發 明之代表性化合物顯示具有活性。 MT-4細胞的胞毒性： MT4細胞經連續稀釋的化合物處理5天。在處理終了 時利用Promega CellTiter-Glo分析法測量細胞的生存力， 並進行非線性回歸以計算C C 5 〇。 在ec5〇時之與細胞相關的化合物濃度：
Huh-luc培養基與濃度相等於EC5()的化合物一起培 育。在數個時間點（0-72小時）以冰冷的培養基沖洗細胞 (2X)並以85%乙腈萃取之；同時亦萃取在各個時間點所得 之培養基的樣品。利用LC/MS/MS分析細胞和培養基萃取 物以測量各個餾份中之化合物的莫耳濃度。本發明之代表 性化合物顯示具有活性。 溶解度和安定性： 取一份 10 mM DMSO母液及製備於測試介質液 (PBS，pH 7.4 和 〇·1Ν HC1，pH 1.5)(DMSO 的總濃度爲 1%) 200819460 中的最終濃度爲1 〇 〇 μ Μ的化合物以測量溶解度。測試介 質液在室溫下培育且同時振盪1小時。接著離心溶液，及 於HPLC/UV上分析回收的上清液。比較測試液中的化合 物的含量與於相同濃度下於DMS Ο中所測得的含量以計算 溶解度。同時亦測量在37t下與PBS培育1小時後之化合 物的安全性。 於低溫保存的人類、狗、和鼠的肝細胞中的安定性： 各個化合物於肝細胞懸浮液（100 μί，80,000細胞/井） 中在37°C下培育達1小時。低溫保存的肝細胞於無血清的 培養介質中再構成。將懸浮液移至9 6 -井微量盤（5 0 μ L /井） 中。將化合物於培養介質中稀釋成2 μΜ，接著加至肝細 胞懸浮液中以開始培育。在開始培育後之第〇、1 〇、3 0和 60分鐘取樣，及利用由0.3%甲酸於90%乙腈/10%水所形 成的混合物使反應驟停。利用LC/MS/MS分析各樣品中之 化合物的濃度。肝細胞懸浮液中之化合物消失的半生期係 藉由將濃度-時間數據與單相指數方程式相配合而測定。 同時亦將數據按比例增加以表示固有的肝細胞清除率及/ 或總肝細胞清除率。 於人類、狗、和鼠肝的S9片斷中的安定性： 各個化合物於S9懸浮液（5 00 μ!^，3 mg蛋白質/mL)中 在37t下培育達1小時（n = 3)。將化合物添加至S9懸浮液 中以開始培育。在開始培育後之第0、10、3 0和6 0分鐘 -425- 200819460 取樣。利用LC/MS/MS分析各樣品中之化合物的濃度。S9 懸浮液中之化合物消失的半生期係藉由將濃度-時間數據 與單相指數方程式相配合而測定。 C a c。 2滲透性： 利用簽約服務（Absorption Systems，Exton，PA)分析化 合物。化合物係以隱密的方式提供給簽約者。同時測量正 向（A-至-B)和逆向（B -至-A)滲透性。於 12 -井 Co star Transwell®盤中生長Caco-2單層細胞以使聚集在塗覆有膠 原之微孔性聚碳酸酯膜上。將化合物投至上側以測量正向 滲透性（A-至-B)，而將化合物投至底側以測量逆向滲透性 (B-至-A)。細胞於濕潤的培育器內在37°C和5% C02下培 育。在開始培育時及在培育後的1小時和2小時’自接收 室內取出2 0 0 - μ L樣品，並以新鮮的分析緩衝液取代。利 用LC/MS/MS分析各樣品中之化合物的濃度。計算表觀滲 透性，Papp 。 血漿蛋白質結合力： 血漿蛋白質結合力係利用平衡透析法測量。將各個化 合物摻入空白血漿內使最終濃度爲2 μΜ。將摻雜的血漿 和磷酸鹽緩衝液分別置於組合透析池的二側，接著於3 7 °C 水浴中緩緩旋轉。在培育的終了時，測量血漿和磷酸鹽緩 衝液中化合物的濃度。利用下列方程式計算未結合百分 比： -426- 200819460 f c ) 未結合％=100· 其中cf和cb分別係根據透析後的緩 而測得之自由和結合的濃度。 CYP450 分析： 各個化合物分別與5種重組合的人類 CYP1A2、CYP2C9、CYP3A4、C YP2D6 和 和無NADPH的存在下培育。在開始培育 5、1 5、3 0、4 5和 6 0分鐘自培育混合物 LC/MS/MS測量培育混合物中之化合物的 間點之培育後殘留化合物的百分比係藉由 樣品相比較而計算得到。 於鼠、狗、猴和人類血漿中的安定性： 化合物於血漿（鼠、狗、猴或人類）中 2小時。於血漿內加入化合物至最終i pg/mL。在添加化合物後之第〇、5、1 5、 分鐘分別取樣。利用LC/MS/MS測量各個 和主要代謝物的濃度。 所有刊物、專利及專利文獻，雖係個 此處爲參考資料。本發明已參考不同特定 技術而加以說明之。雖然，需了解到在本 內係可進行很多變異及修改。 衝液和血漿濃度 C YP45 0酶（包含 CYP2C19)在有 和在培育後的第 連續取樣。利用 濃度。在各個時 與開始培育時的 在3 7 °C下培育達 農度爲 1和10 30 、 60 、和 120 丨時間點之化合物 別倂入，均倂入 及較佳具體例及 發明精神及領域 -427-

Claims (1)

  1. 200819460 十、申請專利範圍 1. 一種式I化合物，
    或其藥學上可接受鹽、或前藥，^巾： R係獨1地選自Η、烷基、烯基、炔基、芳基、環烷 基、雜ί哀、鹵素、鹵烷基、烷基磺醯胺基、芳基磺 醯胺基、-C(0)NHS(〇)2、、或-S(〇)2_，選擇性經一 或多個A3取代； R2係選自 a) -C(Y1)(A3) ^ b) (C2-10)院基、（C3-7)環烷基或（C1_4)烷基 _(c3-7)環 烷基，其中該環院基及烷基-環烷基可選擇性經 (CM-3)烷基單-、二·或三-取代，或 其中該烷基、環烷基及烷基-環烷基可選擇性經 選自羥基及〇-(C 1-4)烷基之取代基單-或二-取 代，或 其中各該烷基可選擇性經鹵素單-、二-或三-取 代，或 -428- 200819460 其中各該環院基爲5-、6 -或7 -員，一或兩個不直 接彼此連接之-CH2-基團可選擇性被-〇-替換’ 如此〇-原子係經由至少兩個C-原子連接至R2 所連接之N原子， c) 苯基、（C1-3)烷基-苯基、雜芳基或（C1-3)烷基-雜芳 基， 其中雜芳基爲具有選自Ν、Ο及S之1至3個雜 原子之5-或6-員環，其中該苯基及雜芳基可選 擇性經選自鹵素、-OH、（C1-4)烷基、0-(Cl-4) 烷基、S-(Cl-4)烷基、-NH2、-CF3、-NH((Cl-4) 烷基）及-N((Cl-4)烷基 h、-CONH2 及-CONH-(C1-4)烷基之取代基單-、二-或三-取代；及其 中該（C 1-3)烷基可選擇性經一或多個鹵素取 代；或 d) -S(0)2(A3)； R3爲Η或（C1-6)烷基； Υ1 係獨立地爲 0、S、N(A3)、N(0)( A3)、Ν(ΟΑ3)、 Ν(0)(0Α3)或 Ν(Ν(Α3)(Α3)); Ζ 爲 Ο、S 或 NR3 ; Z1係選自下列結構： -429 - 200819460
    Ra爲Η或（C1-6)烷氧基； Rb 爲 H、F、Cl、Br、I 或（C1-6)烷基； Rc 爲 H、氰基、F、CM、Br、I、-C( = 0)NRdRe、（CM-6) 烷氧基或選擇性經一或多個F、Cl、Br、1、（Cl-6) 烷基、或（Cl-6)烷氧基取代之苯基； Rd及Re各自獨立地爲Η或（C1-6)烷基； 各L獨立地爲CH或N; 乂“爲 H、（C1-10)烷基、（C2-10)烯基、（C2-10)炔基， 其中任何碳原子可選擇性被選自Ο、S或N之雜原 子替換，或Z2a選擇性與一或多個Ri、R2、Q1或 A3形成雜環； 221)爲 H、（C1-6)烷基、（C2-8)烯基、（C2-8)炔基； Q爲（C1-8)院基、（C2-8)嫌基或（C2_8)炔基；或Q1及 Z2a —起與所連接之原子形成雜環，該雜環可選擇 性經一或多個酮基（ = 〇)或A3取代； -430- 200819460 A3係獨立地選自PRT、H、-OH、-C(0)0H、氰基、烷 基、烯基、炔基、胺基、醯胺基、醯亞胺基、亞胺 基、鹵素、CF3、CH2CF3、環烷基、硝基、芳基、 方院基、院氧基、方氧基、雜環、-C(A2)3、 -C(A2)2-C(0)A2、-C(0)A2、-C(0)0A2、-0(A2)、 -N(A2)2 ' -S(A2) > -CH2P(Y1)(A2)(OA2) ^ -CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ -CH2P(Y1)(〇A2)(OA2) ' -OCH2P(Y1)(〇A2)(OA2) ' -OCH2P(Y1)(A2)(OA2) > -OCH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ -C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(0A2) ^ - C(0)0CH2P(Y1)(A2)(0A2)、-C(0)0CH2P(Y1)(A2)(N(A2)2) ^ - CH2P(Y1)(〇A2)(N(A2)2) 、 -OCH2P(Y1)(OA2)(N(A2)2)、- C(0)0CH2P(Y1)(0A2)(N(A2)2) ^ .CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) ^ -C(0)0CH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) > -OCH2P(Y1)(N(A2)2)(N(A2)2) ' -(CH2)m-雜環、-((^2)^(:(0)0 烷基、-0-(CH2)m-0-C(0)-0 烷基、-0-(CH2)r-0-C(0)-(CH2)m-烷基、 -(CH2)m〇-C(0)-〇-院基、-(CH2)m〇-C(0)-0-環院 基、-N(H)C(Me)C(0)0-烷基、或烷氧基芳基磺醯 胺基， 其中各A3可選擇性經1至4個如下取代基取 代： -R1 ^ -P(Y1)(OA2)(OA2) > -P(Y1)(OA2)(N(A2)2) > -ΡίΥ^Α^ΟΑ2)、-Ρπ^Α^ΝίΑ2：^)、或 -C( = 0)(N(A2)2)、鹵 素、烷基、烯基、炔基、芳基、碳環、雜環、 -431 - 200819460 芳烷基、芳基磺醯胺基、芳基烷基磺醯胺基、 芳氧基磺醯胺基、芳氧基烷基磺醯胺基、芳氧 基芳基磺醯胺基、烷基磺醯胺基、烷氧基磺醯 胺基、院氧基院基礦釀胺基、方硫基、-(CH2)m 雜環、-(CH2)m-C(0)0-烷基、-0(CH2)m0C(0)0 烷基、-〇-(CH2)m-0-C(0)-(CH2)m-烷基、 -(CH2)m-0-C(0)-0-烷基、·（CHOm-O-CCCO-O-環烷基、-n(h)c(ch3)c(o)o-烷基、或烷氧基 芳基磺醯胺基，選擇性經R1取代； 選擇性地，各自獨立之A3及Q1可一起與一或多個A3 或Q 1基團形成一環； A2係獨立地選自 PRT、Η、烷基、烯基、炔基、胺 基、胺基酸、烷氧基、芳氧基、氰基、鹵烷基、環 烷基、芳基、雜芳基、烷基磺醯胺基、或芳基磺醯 胺基，選擇性經Α3取代；及 m爲0至6 ; 惟該化合物不是下列式中之任一者：
    -432- 200819460
    0 丫 -433- 200819460
    2 .如申請專利範圍第1項之化合物，該化合物進一步 不爲式（X)或（XI)化合物：
    (X) (XI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Rp爲（C1-6)烷基或（C3-6)環烷基； -434- 200819460
    Ra爲（C1-6)烷氧基； Rb爲Η ;及 Rc爲選擇性經一或多個F、Cl、Br、I、（Cレ6)烷基、 或（Cl-6)烷氧基取代之苯基。 3 .如申請專利範圍第1項之化合物，其中Z 1係選自下 列結構=
    -435 200819460
    列結構： -436- 200819460
    5 .如申請專利¥E圍弟1項之化合物’其爲式（Π)化 物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Rf爲Η、院基、燃基、快基、方基、雜芳基、或環院 基，該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨_LL地爲鹵基、經基、氨基、芳硫基、環院 基、芳基、雜芳基、烷氧基、NRhRi、-ChCONRhR,，其中 各芳基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基，胺基、烷氧基、烷氧基羰基 '烷醯氧基、鹵 燒基、或鹵烷氧基取代；及 各Rh及Ri係獨立地爲Η、烷基、或鹵烷基。 6 ·如申請專利範圍第5項之化合物，其中Rf爲烷基、 燦基、或炔基，該經芳基取代，該芳基係選擇性經一 或多個院基、鹵基、經基、氰基、硝基、胺基、院氧基、 -437 - 200819460 烷氧基羰基、烷醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代。 7 .如申請專利範圍第5項之化合物，其中Rf爲經芳基 取代之烷基，該芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥 基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰基、烷醯氧 基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代。 8 .如申請專利範圍第5項之化合物，其中Rf爲經苯環 取代之（C1 -6)烷基，該苯環係選擇性經1、2或3個烷基、 鹵基、羥基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰基、 院醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代。 9. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中Rf爲苄基或 苯乙基，其選擇性經1、2或3個烷基、鹵基、羥基、氰 基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰基、烷醯氧基、鹵烷 ®、或鹵烷氧基取代。 10. 如申請專利範圍第5項之化合物，其中Rf爲Η、 甲基、乙基、丙基、丁基、環丙基甲基、3-丁烯基、2-甲 基丙基、異丙基、乙烯基、順-1-丙烯基、反-1-丙烯基、 _ -1-丁烯基、2-甲基丙烯基、2-苯基乙烯基、2-苯基乙炔 基、3-甲基-2-丁烯基、2-羥基乙基、2-羥基-2-甲基丙基、 氰基甲基、甲氧基甲基、Ν-(2,2,2-三氟乙基）-2-胺基乙 基、苯乙基、2-氯苯乙基、2-氟苯乙基、2-甲基苯乙基、 2、氯-6-氟苯乙基、苯硫基甲基、苄基、4-氟苄基、3-氟苄 _、2-氟苄基、4-氰基苄基、3-氰基苄基、2-氰基苄基、 4一甲氧基苄基、3 -甲氧基苄基、2 -甲氧基苄基、2-溴苄 基、2-三氟甲氧基苄基、2_異丙氧基苄基、2-甲基苄基、 -438- 200819460 3 -甲基苄基、4 -甲基苄基、2-乙基苄基、4-三氟甲基苄 基、3_三氟甲基苄基、2-三氟甲基苄基、4-氯苄基、3-氯 苄基、2-氯苄基、2,6-二氟苄基、2-氯-6-氟苄基、2,6-二 氯苄基、2-甲氧基-6-氟苄基、2,6-二甲基苄基、2,6-二氟-3-氯苄基、2,6-二氟-4-氯苄基、2-氯-3,6-二氟苄基、 2,3,6-三氟苄基、3-氯-2,4二氟苄基、2-氯-3,6-二氟苄 基、2,3-二氯-6-氟苄基、2-硝基苄基、2-胺基苄基、2-噻 吩基甲基、2-呋喃基甲基、3-呋喃基甲基、5-三氟甲基呋 喃-2-基甲基、5-吡唑基甲基、2-噁唑基甲基、4 -甲基噻 唑-2-基甲基、3-吡啶基、2-吡啶基甲基、3-羥基-2-吡啶基 甲基、6 -氯-2 -吡啶基甲基、2 -吡嗪基甲基、5 -嘧啶基甲 基、2 -嘧啶基甲基、4 -嘧啶基甲基、苯基、2 -噻唑基、 Ν,Ν-二甲基胺基羰基甲基、N-甲基胺基羰基甲基、胺基羰 基甲基、1-丙炔基、或2-甲基噻唑-4-基甲基。 1 1.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（III)化合 物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： -439- 200819460 Rj爲環戊氧基羰基、1-[N_(2,2,2-三氟乙基）亞胺基]乙 基、α，α -二氟苯乙基、環戊基乙醯基、丁醯基、4，4,4 -三 氟丁醯基、3，3,3 -三氟丙基磺醯基、3，3 -二甲基丁醯基、環 戊基胺基羰基、2-原冰片烷基乙醯基、2 -胺基-3，3 -二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4-三氟甲基苯基、3-三氟甲基苯 基、2-三氟甲基苯基、3,3,3-三氟丙醯基、5,5,5-三氟戊· 基、第二丁基胺基鐵基、2，2 -二甲基丙氧基鑛基、或4 -第 三丁基噻唑-2-基。 1 2 ·如申請專利範圍第丨1項之化合物，其中Ζ爲〇 ; Υ1爲0 ; Z2a及Z2b各爲氫。 1 3 ·如申專利軺圍第1項之化合物，其中Q】爲乙稀 基。 14·如申請專利範圍第1項之化合物，其中Ql及Z2S 一起與所連接之原子形成1 2 - 1 8員雜環，該雜環可選擇性 經一或多個酮基（ = 0)或A3取代。 15·如申請專利範圍第i項之化合物，其爲式（ιχ)化合
    -440- 200819460 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 16.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（X)化合 物： π
    (X) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 17.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XI)化合 物： π
    σ (XI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 18.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XII)化 -441 - 200819460 π
    (XII) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 19.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XIII)化 合物： π
    (XIII) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 20.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XIV)化 合物： -442- 200819460
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 2 1.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（IV)化合 物：
    (IV) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 22.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（V)化 物： -443- 200819460
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 23.如申請專利範圍第19項之化合物，其爲式（VI)化 合物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Rf爲Η、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、或環烷 基，該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨立地爲鹵基、羥基、氰基、芳硫基、環烷 基、芳基、雜芳基、烷氧基、NRhl、-CpC^NRhR,，其中 各芳基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基、胺基、烷氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代； -444- 200819460 及 各Rh及Ri係獨立地爲Η、院基、或鹵院基；及 R_j爲環戊氧基羰基、1-[Ν-(2,2,2-三氟乙基）亞胺基]乙 基、α，α-二氟苯乙基、環戊基乙醯基、丁醯基、4,4,4-三 氟丁醯基、3，3,3-三氟丙基磺醯基、3，3-二甲基丁醯基、環 戊基胺基羰基、2-原冰片烷基乙醯基、2_胺基-3,3-二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4 -三氟甲基苯基、3_三氟甲基苯 基、2_三氟甲基苯基、3，3, 3-三氟丙醯基、5,5，5-三氟戊醯 基、第三丁基胺基羰基、2,2-二甲基丙氧基羰基、或4-第 三丁基噻唑-2-基。 24.如申請專利範圍第20項之化合物，其爲式（VII)化 合物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Rf爲Η、烷基、烯基、炔基、芳基、雜芳基、或環院 基，該Rf係選擇性經一或多個Rg取代； 各Rg係獨立地爲鹵基、羥基、氰基、芳硫基、環院 基、芳基、雜芳基、烷氧基、NRhRi、-C( = 0)NRhRi，其中 -445- 200819460 各芳基及雜芳基係選擇性經一或多個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基、胺基、烷氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代； 及 各Rh及R,係獨立地爲Η、烷基、或鹵烷基；及 Rj爲環戊氧基鑛基、1-[Ν-(2,2,2-三氟乙基）亞胺基]乙 基、α，α-二氟苯乙基、環戊基乙醯基、丁醯基、4,4,4_三 氟丁醯基、3，3,3 -三氟丙基磺醯基、3，3 -二甲基丁醯基、環 戊基胺基羰基、2-原冰片烷基乙醯基、2 -胺基-3，3·二甲基 丁醯基、4 -甲基苯基、4 -三氟甲基苯基、3 -三氟甲基苯 基、2-三氟甲基苯基、3,3,3_三氟丙醯基、5,5,5_三氟戊醯 基、第三丁基胺基羰基、2，2 -二甲基丙氧基羰基、或4 -第 三丁基噻唑-2-基。 25.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（χν)化 合物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 26·如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（χνΐ)化 -446- 200819460 合物： η
    (XVI) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 2 7.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XV II)化 合物： η
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 28.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XVIII) 化合物： -447- (XVIII) 200819460
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 29.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XIX)化 合物：
    (XIX) 或其藥學上可接受鹽、或前藥，其中： Ra爲Η或（C1-6)烷氧基； Rb 爲 Η、F、Cl、Br、I、或（C1-6)烷基； Rf爲經芳基取代之烷基，該芳基係選擇性經一或多個 烷基、鹵基、羥基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基 羰基、烷醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代；及 -448- 200819460 Rw爲Η或（C1-6)烷基。 谓之化合物，其爲式（XX)化 3 0 .如申請專利範圍第1广 物··
    (XX) 或其藥學上可接受鹽、或前其中· Ra爲Η或（C1-6)烷氧基； Rb 爲 Η、F、Cl、Br、I、或（C1-6)院基； Rf爲經芳基取代之烷基，該芳基係選擇性經一或多個 烷基、_基、羥基、氰基、硝基、胺基、院氧基、院氧基 羰基、烷醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代；及 Rw爲Η或（C1-6)烷基。 3 i .如申請專利範圍第29或30項之化合物，其中Ra 爲（C1-6)烷氧基。 32.如申請專利範圍第29或30項之化合物，其中Ra 爲甲氧基。 3 3.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rb爲Η、 F、CM、Br、I、或（C1-6)烷基。 -449- 200819460 3 4.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rb爲Η。 3 5.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rb爲F、 Cl 、 Br 、或 I 。 36.如申請專利範圍第29項之化合物，其中 Rb爲 C卜 3 7.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rb爲（C Ιό)烷基。 3 8.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rf爲經苯 環取代之（C 1-6)烷基，該苯環係選擇性經1、2或3個烷 基、鹵基、羥基、氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰 基、烷醯氧基、鹵烷基、或鹵烷氧基取代。 3 9.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rf爲苄基 或苯乙基，其選擇性經1、2或3個烷基、鹵基、羥基、 氰基、硝基、胺基、烷氧基、烷氧基羰基、烷醯氧基、鹵 烷基、或鹵烷氧基取代。 40.如申請專利範圍第29項之化合物，其中Rf爲2，6- 二氟苄基。 4 1 .如申請專利範圍第2 9項之化合物，其中Rw爲甲 基。 4 2.如申請專利範圍第29項之化合物，其中 Rw爲 氫。 43.—種式（XXI)化合物， -450- 200819460
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 44.一種式（XXII)化合物，
    (XXII) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 45.—種式（XXIII)化合物， -451 - 200819460
    (XXIII) 或其藥學上可接受鹽、或前藥。 46. 如申請專利範圍第1項之化合物，其爲實例中所 述化合物1-208中之任一者，或其藥學上可接受鹽或其前 藥 ° 47. 如申請專利範圍第1項之化合物，其爲其前藥或 藥學上可接受鹽。 48. 如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（VIII)之 前藥=
    或其藥學上可接受鹽，其中 Rk爲前藥部分。 -452 200819460 4 9.如申請專利範圍第48項之化合物，其中Rk爲苄氧 基甲基、三甲基乙醯氧基甲基碳酸酯、2-甲基丙氧基-羰氧 基甲基、4-羥基-2-丁烯基、苯甲醯氧基甲基、乙氧基羰氧 基甲基、苯基、氯-苯基、或下式基團：
    〇 50.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XXIV) 之化合物：
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 5 1.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XXV)之 化合物： -453- 200819460
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 52.如申請專利範圍第1項之化合物，其爲式（XXVI) 之化合物： η
    或其藥學上可接受鹽、或前藥。 5 3.如申請專利範圍第1項之化合物，其係選自： -454- 200819460
    216 217 Cl
    -455- 221 220 200819460
    及其藥學上可接受鹽，及前藥。 54. —種藥學組成物，其包括如申請專利範圍第1 之化合物及至少一種藥學上可接受載劑。 55. 如申請專利範圍第54項之藥學組成物，其用於 療與HCV有關之失調症。 56. 如申請專利範圍第55項之藥學組成物，其進一 包括核苷類似物。 -456- 200819460 5 7 ·如申請專利範圍第5 6項之藥學組成物’其進一步 包括干擾素或長效型干擾素（pegylated intei*f〃or〇。 5 8 .如申請專利範圍第5 7項之藥學組成物’其中該核 苷類似物係選自利霸依寧（ribavirin)、依拉米定 (viramidine)、雷佛依寧（levovirin)、L-核苷、及依沙陀寧 比（isatoribine)，及該干擾素爲α-干擾素或長效型干擾 素。 / ' 5 9 . —種用於治療與c型肝炎有關之失調症的藥學組 成物’其包括治療有效量之如申請專利範圍第1項之化合 物。 6 〇 ·如申g靑專利範圍第1項之化合物，其係用於醫療 上。 61·-種如申請專利範圍帛i項之化合物之用途，係 用於製備用於動物中治療C型肝炎或者與c型肝炎有關之 失調症的藥劑。 -457、 200819460 七、指定代表圖： [一！）、本案指定代表圖為：無 (二）、本代表圖之元件代表符號簡單說明：無 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學 式：
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