TW200405817A - Treatment method and therapeutic agent of kidney cancer - Google Patents

Description

200405817 玫、發明說明 (發明說明應敘明··發明所屬之技術領域、先前技術、內容、實施方式及圖式簡單說明) (一） 發明所屬技術領域 本發明係關於一種腎癌之治療方法及腎癌之治療劑。 (二） 先前技術 技術背景 僅卓獨於活體外資料上被報告具有抗瘤活性之物質及 化合物，一般不被容許預期在活體內有相同效果已被指 明，換言之，在活體外顯示抗瘤活性之物質不必然在活體 內亦會顯示抗瘤活性，因此，在活體外顯示抗瘤活性之物 質直接作爲抗癌劑之應用是有疑問的。 例如，已被報告之式I化合物（序列號SEQ ID NO. 1 )

HN

ch、3 I CH-CH CH3 \

HN 藉由選擇地抑制組織蛋白去乙醯酶（histone deacetylase )而引發強烈抗瘤活性，以此物質處理會引起 細胞中組織蛋白之高度乙醯化亦被報告，且由此結果，誘 導各種基因之轉錄控制活性、細胞週期抑制活性及細胞凋 200405817 零抑制活性（JP-B-7-64872，H. Nakajima et al·，Exp. Cell Res.24 1, 1 26- 1 3 3 ( 1 9 9 8))。然而，當狀態持續時，有許多問 題尙未解決，例如活體外結果於活體內應用之有效性，活 體內抗任何腫瘤之有效性等。在活體外抗腎癌之抗瘤活性 已被報告，但在活體內抗腎癌之抗瘤活性則尙未被報告。 組織蛋白去乙醯酶爲一具有Zn配位在活化中心之金屬 去乙醯酶（M.S.Finninetal·，Nature，401，188-19 3( 1999))， 此酵素被認爲可改變各種乙醯化組織蛋白對DNA之親合 性，因此所提供之直接生物學現象爲染色質結構之改變。 染色質結構之最小單位爲染色質單體，其中14 6bp DNA逆 時針纏繞在組織蛋白八聚合體（H2A、H2B、H3及H4，每 分子各兩個，核心組織蛋白）周圍1 · 8次，此核心組織蛋 白作爲每一組織蛋白蛋白質之N-端正電荷與DNA交互作 用以穩定染色質單體結售。組織蛋白之乙醯化由乙醯化作 用反應（其中組織蛋白乙醯轉移酶被牽涉）與去乙醯反應 (其中組織蛋白去乙醯酶被牽涉）之間的平衡關係控制。 組織蛋白之乙醯化發生在組織蛋白蛋白質之N端上之演化 上保留完好的離胺酸殘基，因此，其被認爲核心組織蛋白 蛋白質喪失N端電荷，與DNA交互作用降低，且染色質 單體之結構被去穩定。反言之，此組織蛋白之去乙醯化被 認爲可穩定染色質單體結構，然而，由乙醯化所引起之染 色質結構中改變的程度是不淸楚的，而且其關於轉錄之二 次性誘導控制亦不淸楚。 (三）發明內容 200405817 發明揭示 本發明已徹底硏究嘗試實行解決上述問題，並發現用 於腎癌之治療劑，其能夠在活體中確認其抗瘤活性，特別 是在人類病患中，結果完成本發明。 因此，本發明所提供者如下： (1) 一種治療哺乳類腎癌之方法，其包含給予式（I )化 合物

HN CH \ CH〇 〇

C CH〇

CH —CH CH3 \ HN

S

H2C

CH

O HC h2 i Ο II C- S CH，

(I)

CH I "CH3 ch3 或其鹽類之有效量於哺乳類。 (2)如上述（1 )之腎癌治療方法，其中式（I )化合物爲 式（II )化合物。 200405817

其中式（I )化合物爲式（π )化合物。 200405817 ο

(6) 如上述（4 )之在活體中抑制哺乳類腎臟癌性腫瘤生長 之方法。 (7) 如上述（6 )之方法，其中在活體中係指在人體中。 (8) —種腎癌之治療劑，其包含作爲活性成分之式（I )化 合物 0

HN

C CH,

CH-CH CH3 \ HN C、 XH \ CH2 S I s CH2

CH HC h2 0 II C·

NH CH.

CH (I)

ο • c、 ο CH. CH3 或其鹽類。 (9)如上述（8 )之治療劑，其中式（I )化合物爲式（II ) 化合物。 -10- 200405817

(1 0)如上述（8 )之治療劑，其在活體中具有抗瘤活性。 (11) 如上述（8 )之治療劑，其被用於人類。 (12) —種式（I)化合物 ch3

HN

HC

s CH-CH S、 CH3 \

或其鹽類之使用於腎癌之治療劑之生產。 (13)如上述（12)之使用，其中式（I)化合物爲式（II) 化合物。 -11 - 200405817

(14)如上:述（12)之使用’其中上述腎癌治 具有抗瘤活性。 U5)如±述U2)之使用’其中上述腎癌治 類0 (16)-種治療腎癌之醫藥組成物’其包含式

HN ,CH \ CH, ΟII C- Ο

COJ3 / CH-CH CH3 \ HN // cs

O H2

S S ch9 h2c CH

(II) 療劑在活體中 療劑被用於人 (I )化合物 (I) ch3 或其鹽類，及一種醫藥上可接受載體。 (1 7)如上述（1 6 )之醫藥組成物，其中式（I )化合物爲 200405817

(1 8)如上述（1 6 )之醫藥組成物，其在活體中具有抗瘤活 性。 (1 9)如上述（1 6 )之醫藥組成物，其被用於人類。 (20) —種包含上述（16 )至（19 )中任一項之醫藥組成物 之商業包裝及其中有關的印刷品，此印刷品陳述此醫 藥組成物可以或應該被用於治療腎癌。 發明詳細說明

本發明之腎癌治療劑含有作爲活性成分之式（I )化合 物（下文亦被指爲FK22 8 )或其鹽類。本發明之腎癌治療 方法包括給予包括人類之哺乳類有效量之FK228，式（I) 化合物中，較佳爲式（II )化合物，其爲一種立體異構物 (下文亦被指爲FR90 1 228 )。此等化合物具有強力的組織 蛋白去乙醯酶抑制的活性（Nakajima, H. et al.; ibid (1 99 8 ))，且尤其是FR90 1 228具有較強力的組織蛋白去 乙醯酶抑制的活性。因此，其適合被包括於本發明之腎癌 治療劑中，且可適合用於本發明腎癌之治療方法中。 除非有具體指明，否則在本說明書中單純指稱FK228 -13- 200405817 意指一群化合物，不論立體異構現象均可，包括式（π ) 化合物。 FK228及其鹽類爲已知物質且可獲得的。例如，FK90 1 228 爲FK228之一種立體異構物，可在無菌條件下，經由培養 能夠生產FK9〇r22 8之色桿菌屬（CV〇i27〇hcieriui27)細菌株 而獲得，益自培養液恢復此物質。能夠生產FK9〇r228之 色桿菌屬細菌株，例如爲紫色色桿菌（CVoiKohcierii/ii/ WohceuiTi) WB968 (FERM BP-1968)。FK901228 物質可獲 鲁 自如JP-B-7 -64 872號中所揭示之生產細胞，其較佳自屬於 色桿菌屬之細菌株獲得FK901228，其能夠生產FK901228， 因爲 FK90 1 228較容易被獲得。然而，合成或半合成 FK90 1 228亦有優勢的，因爲不需額外的純化步驟或可容易 製作。相似地，FK228如FK90 1 228可以傳統已知方法被 合成或半合成，具體而言，可如Khan W. Li，et al. ( J. Am.

Chem. Soc·，v ol · 1 1 8 , 7 2 3 7 - 7 2 3 8 ( 1 9 9 6 ))所報告之方法來 生產。 FK2 2 8之鹽爲生物學上可接受鹽，其一般無毒，且可以 鹼或酸加成鹽舉例證明，包括無機鹼之鹽如鹼金屬鹽（例 如鈉鹽、鉀鹽等）、鹼土金屬鹽（例如鈣鹽、鎂鹽等）、銨 鹽’有機鹼之鹽如有機胺鹽（例如三乙基胺鹽、二異丙基 乙基胺鹽、吡啶鹽、甲基吡啶鹽、乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、 二環己基胺鹽、N，N，-二苄基乙烯二胺鹽等），無機酸加成 鹽（例如鹽酸鹽、溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽等），有機羧 酸•磺酸加成鹽（例如甲酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、順 -14- 200405817 丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、甲烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲 苯磺酸鹽等）’鹼性或酸性胺基酸之鹽（例如精胺酸、天 門冬胺酸、麩胺酸等）等。 F K 2 2 8基於非對稱碳原子及雙鍵而具有立體異構物，如 光學異構物、幾何異構物等，所有異構物及其混合物亦包 含於本發明中。 此外，FK2 2 8、FK9 0 1 22 8及其鹽類之溶劑化物化合物 (例如包含化合物如水合物等）亦包含於本發明中。 在本發明中，活體內及試管內意指此領域內習用之詞 意，即”活體內”意指標的生物學之功能並表示在身體中被 表現，如在下文中所提之各種哺乳類身體中，”試管內”意 指功能並表示在試管中表現，包括組織培養系統、無細胞 系統等。 FK2 2 8，爲組織蛋白去乙醯酶抑制劑，產生抗各種腫瘤 之抗瘤活性，在其它活性間，其在活體內及人類抗腎癌上 顯示顯著的效果。 本發明之腎癌治療劑可用於哺乳類，如人類、狗、牛、 馬、鼠、天竺鼠等。 本發明之腎癌治療劑可以含有FK228或其鹽類作爲活 性成分與有機或無機載體或於口服或腸胃外施用之適當賦 形劑之固體、半固體或液體醫劑被使用。活性成分可與適 合於劑量型式之一般、無毒性之醫藥可接受載體混合’如 粉劑、錠劑、小藥九、膠囊、栓劑、液體、乳劑、懸浮液、 噴霧劑、噴液及其它型式使用’需要時，輔助劑、穩定劑、 -15 - 200405817 膠黏劑等可被使用。此等載體及賦形劑在需要時 菌’或可於調配成藥劑後使用無菌處理。FK228及 以充足量被包含於腎癌治療劑中以產生在腎癌之 果’如浸潤至周圍組織、轉移至遠端部份及癌症生 制。 給予本發明腎癌治療劑之方法無任何特別限制 其可提供上述腎癌之治療效果，特別是當本發明之 療劑被使用時’以腸胃外給藥爲較佳，即，靜脈內 肌肉內給藥、直接給藥至組織中、給藥至鼻腔、皮內 腦脊髓液給藥、膽管給藥、陰道內給藥等，此外， 方法等可較佳地被使用。當此治療劑被應用於人時 給藥、肌肉內給藥或口服給藥爲較佳給藥方式。此 分之治療有效量，FK228或其鹽類，依據年齢及欲 之個別病患情況及癌症型式而變化。在靜脈給藥 中，FK228之每日劑量一般爲人類每m2之體表面積 〇.l-100mg，較佳爲 l-50mg，更佳爲 5-30mg，其經 以連續給藥來治療腫瘤，經由注射以連續給藥之時 劑量而變化，其較佳爲3-6h，更佳爲3.5-4.5h，最佳 給藥頻率以18-30天之期間中含有1至4次給藥之 基礎。此外，以F K 2 2 8及維他命A酸（r e t i η 〇 i c a c 佳爲全部皆爲反-維他命A酸：ATRA )合倂治療亦 的。 (四）實施方式 在下列中以實例之方式更詳細說明本發明。 可被滅 其鹽類 治療效 長之抑 ，只要 腎癌治 給藥、 給藥、 脂質體 ，靜脈 活性成 被治療 之情況 區域爲 由注射 間依據 爲4 h 〇 週期爲 i d )(較 爲較佳 -16- 200405817 實例1 : FK22 8在人類腎臟腫瘤異種移植上之抗瘤效果 (1 )藥之製備 稱重FR901228之建議量，加入溶齊!1 (l〇%HC〇-60， Nihon Surfactant Kogyo K.K· /食鹽水）並將此混合物 經超音波分解，陽性對照物質，紅豆杉醇（Taxol )， 在試驗之前，被溶解於聚氧乙嫌化蓖麻油（Cremophor EL) ( SIGMA/乙醇（1:1 ))成爲24mg/ml之濃度，並 保存於冷凍庫中。當使用時，加入9倍量之生理食鹽 水以稀釋物質至2.4mg/ml (溶劑成分：5%Cremophor £乙-5%乙醇-90%食鹽水）° (2 )動物 於此藥之抗腫瘤活性試驗上，BALB/cANnNCrj-nu/nu 鼠（雌性，6 週齢）購自 Charles River Japan( Yokohama， Japan)，並適應新環境超過1週的時間後再進行試驗。 此等鼠被飼育於SPF環境中，在該環境下可自由接近 水並給予飼料。 (3 )腫瘤 2-3 X 107 個人類腎臟腫瘤（RXF-631L: Cancer Chemotherapy Center, Japan Foundation for Cancer Research, Tokyo, Japan)藉由於 BALB/cANnNCrj-nu/nu 鼠中連續繼代被皮下維持。 (4)實驗性植入及分組 RXF-631L腫瘤之片段（3 X 3 X 3mm )經皮下植入 BALB/cANnNCn-nu/nu鼠之右側腹中，當腫瘤植入後 -17- 200405817 之腫瘤體積達到1 00-3 00mm3後，將鼠分組（每組6 隻）以避免腫瘤體積消散。腫瘤體積由下式計算：腫 瘤體積（mm3) =1/2xLxW2，其中L及W分別代表 腫瘤塊之長度及寬度。 (5 )給藥 在鼠被分組時（Day 0 )開始給藥，將FR90 1 22 8 ( 3.2 及1.8mg/kg )每4天3次（d4dx 3 )經靜脈注射給與 FR90 1 228給藥組；陽性對照物質，紅豆杉醇，於5個 連續天（qdx 5 )經靜脈注射給予紅豆杉醇給藥組，對 照組只給予溶劑（10% HCO-60/食鹽水）（q4dx 3 )。以 給藥日所測量之體重計算給藥之液體量（0.1ml/10g 體重），FR9 01 228及紅豆杉醇之MTD (最大忍受劑） 分別爲 3.2mg/kg/day( q4dx 3)及 24mg/kg/day( qdx 5)。 (6 )腫瘤大小及體重之測量 自Day 0開始每週2次測量腫瘤大小（長度，寬度） 及體重。 此結果示於第1圖中，其中一籲一顯示於對照組中腫 瘤大小之更動，一一顯示以1.8mg/kg之FR90 1 228給 藥，一▲—顯示以3.2mg/kg之FR90 1 228給藥，及一♦— 顯示以24mg/kg之紅豆杉醇給藥。FR90 1 22 8在活體內 抑制人類腎癌。 實例2 :抗瘤反應 一位病患（病患號碼3 1 - 0 0 - 8 3 - 2 )呈現部分反應，此病 患爲38歲女性，有於1 996年被診斷出明亮細胞腎癌之病 200405817 史，此病患總共接受1 〇劑之FR 9 0 1 2 2 8，以連續4小時注 射給予9.10mg/m2於第一周期（21天）之第1天及第5天， 9.10mg/m2於第二周期（21天）之第1天，9.10mg/m2於第 三周期（28天）之第1天及第5天，9.10m g/m2於第四周 期（22天）之第1天，12· 70g/m2於第五周期（20天）之 第1天，17.8mg/m2於第六周期（23天）之第1天，17.8mg/m2 於第七周期（23天）之第1天，及i7.8mg/m2於第八周期 (21天）之第1天。治療效果以RECIST標準來評估。此 | 病患在頭兩次周期後經歷部分反應且疾病進展在8次周期 後被紀錄。 工業可應用性 本發明之腎癌治療劑包含FK228 (尤其是FK901228) 或其鹽類，其具有組織蛋白去乙醯酶抑制活性，作爲活性 成分不僅在試管內顯示出優異抗瘤活性，在活體內亦同。 本發明之腎癌治療劑在有腎癌之人類病患中顯示優異抗瘤 活性。因此，本發明可適合應用於腎癌之治療。 讀| 序列列表附錄 SEQ ID N〇：1: Xaa被用來代表式NH2C(CHCH3)C〇〇H之 胺基酸，在式C〇〇H CH2CH(CHCHC2H4SH)〇H中，羧基被 鍵結至第一個胺基酸V a 1之胺基上，羥基被鍵結至第四個 胺基酸Val之羧基上，且SH基經由雙硫鍵被鍵結至第二 個胺基酸Cys之SH基上。 此申請案以在美國提出之專利申請案No.60/3 69,868號 爲基礎，其內容在此以參考文獻倂入。 -19- 200405817 (五）圖示簡單說明 第1圖爲顯示FR90 1 228於經移植人類腎臟腫瘤（RXF-6 3 1 L )鼠中之抗瘤活性。

-20- <110>200405817 <110> 序列列表 藤澤藥品工業股份有限公司 美國政府(由健康及人類服務部門代表) <120> AJWCER <130> <150> <151> <160> <210> <211> <212> <213> <220> <223> <223> <220> <221> <222> <223> 腎癌之治療方法及治療劑 551083 US60/369,868 2002-04-05 PRT色得 m之m 後·，Chromobacterium 卻· 發明者：直江吉則 發明者：蘇珊E.貝茲 SITE (3) Xaa被用來代表式NH2C(CHCH3)COOH之胺基酸。 <220> <221> <222> <223> SITE (1), (2), (4) 在式 C00H CH2CH(CHCHC2H4SH)OH 中 200405817 .羧基被鍵結至第一個胺基酸Val之胺基上，羥基被鍵結至苐四個胺基酸Val之羧 ‘基上，且SH基經由雙硫鍵被鍵結至第二個胺基酸Cys之SH基上。 <400> 1

Val Cys Xaa Val 4

22-

Claims (1)

1. 200405817 拾、申請專利範圍 1. 一種治療哺乳類腎癌之方法，其包含給予式（I )化合物 或其鹽類之有效量於哺乳類。 Ο HN C CH, CH-CH CH3 \ HN 々 C、 Ο XH \ CH. 〇II HCH2 g CH7 h2c \ CH

   2.如申請專利範圍第1項之腎癌治療方法，其中式（I )化 合物爲式（II)化合物。

   3 .如申請專利範圍第1項之腎癌治療方法，其中哺乳類爲 人類。 4. 一種抑制哺乳類腎臟癌性腫瘤生長之方法，其包含給予 式（I )化合物或其鹽類之有效量於哺乳類。 -23- 200405817 N H/ HN I o=cT: H3、C/H3 cl s-s ο Η3 c ——c \c/\ NH HN o 、//c CH H2h /c、，C'CH o α——a I :Ho c/c/ 5 .如申請專利範圍第4項之抑制哺乳類腎臟癌性腫瘤生長 之方法，其中式（I )化合物爲式（II )化合物。

   6.如申請專利範圍第4項之方法，其在活體中抑制腎臟癌 性腫瘤生長。 7 .如申請專利範圍第6項之方法，其中在活體中係指在人 體中。 8. —種腎癌之治療劑，其包含作爲活性成分之式（I )化合 物或其鹽類。 -24- (I) 200405817

   CH、3 丨 CH-CH ch3 ο ΗΝ

   CH I CH

   HN H2C

   NH

   CH I "ch3 ch3 9 .如申請專利範圍第8項之治療劑，其中式（I )化合物爲 式（II)化合物。

   1 〇.如申請專利範圍第8項之治療劑，其在活體中具有抗瘤 活性。 1 1.如申請專利範圍第8項之治療劑，其被用於人類。 1 2. —種式（I )化合物或其鹽類之用途，以生產腎癌治療 劑。 -25- 200405817 HN

   CH, CH-CH ch3 \ HN 1 3 .如申請專利範圍第1 2項之用途，其中式（I )化合物爲 式（II)化合物。

   14.如申請專利範圍第12項之用途，其中上述腎癌治療劑 在活體中具有抗瘤活性。 1 5 .如申請專利範圍第1 2項之用途，其中上述腎癌治療劑 被用於人類。 1 6. —種治療腎癌之醫藥組成物，其包含式（I )化合物或 其鹽類，及一種醫藥上可接受載體。 -26- 200405817

   1 7 ·如申請專利範圍第1 6項之醫藥組成物，其中式（1 2 )化 合物爲式（II )化合物。

   -27- 1 8 ·如申請專利範圍第1 6項之醫藥組成物，其在活體中具 有抗瘤活性。 1 9 .如申請專利範圍第1 6項之醫藥組成物，其被用於人類。 2 0. —種商業包裝，其包含如申請專利範圍第1 6至1 9項中任 一項之醫藥組成物及所內含之相關書面文件，該書面文 件敘述此醫樂組成物可以或應該被用於治療腎癌。