KR20050016331A - 신장암 치료를 위한 뎁시펩티드 - Google Patents

Abstract

본 발명은 화학식(I)의 FK228 또는 그의 염을 포함하는, 신장암 치료에를 제공한다. 본 발명에서 활성 성분인 FK228 또는 그의 염은 신장암에 대하여 생체내에서 우수한 항종양 활성을 나타낸다.

Description

신장암 치료를 위한 뎁시펩티드{DEPSIPEPTIDE FOR THERAPY OF KIDNEY CANCER}

본 발명은 신장암 치료 방법 및 신장암 치료제에 관한 것이다.

시험관 데이타에만 기초하여 항종양 활성을 갖는 것으로 보고된 물질 및 화합물은 통상 생체내 결과에서는 그들의 효능을 기대할 수 없다고 지적받았다. 즉, 시험관에서 항종양 활성을 보이는 물질은 생체내에서도 항종양 활성을 항상 나타내는 것은 아니므로, 항암제로서 시험관에서 항종양 활성을 보이는 물질을 직접 사용하는 것은 문제가 있다.

예를 들면, 하기 화학식(I)의 화합물 (서열 목록 서열번호: 1)은 히스톤디아세틸라제를 선택적으로 저해하여 강력한 항종양 활성을 유도한다고 보고되어 있다:

이 물질은 이 물질로 처리된 세포에서 히스톤의 고도한 아세틸화를 유도하여, 그 결과 다양한 유전자의 전사 조절 활성, 세포주기 저해 활성 및 세포고사 저해 활성을 유도하는 것으로 보고되었다(JP-B-7-64872, H. Nakajima et al., Exp. Cell Res. 241,126-133 (1998)). 그러나 이러한 상황하에서 어는 종양 등에 대한 생체내 적용에서의 시험관내 효능 결과, 생체내 효능과 같이 해결해야여 할 문제가 다수 존재한다. 신장암에 대한 시험관내 항종양 활성은 보고되었지만, 신장암에 대한 생체내 항종양 활성은 보고된 바 없었다.

히스톤 디아세틸라제는 활성 중심에 배위된 Zn을 갖는 금속 디아세틸라제이다(M. S. Finnin et al., Nature, 401,188-193 (1999)). 이 효소는 DNA에 대하여 다양한 아세틸화된 히스톤의 친화력을 변화시키는 것으로 사료된다. 그에 의해 제공되는 직접적인 생물학적 현상은 크로마틴 구조 변화이다. 크로마틴 구조의 최소 단위는 146 bp DNA가 시계반대방향으로 히스톤 옥타머(각각 H2A, H2B, H3 및 H4,2 분자, 코어 히스톤) 주위를 1.8배로 감고 있는 뉴클레오솜이다. 각 히스톤 단백질의 N-말단의 양 전하는 DNA와 상호작용하기 때문에 코어 히스톤은 뉴클레오솜 구조를 안정화시킨다. 히스톤의 탈아세틸화는 히스톤 아세틸트랜스퍼라제가 관여하고 있는 아세틸화 반응, 및 히스톤 디아세틸라제가 관여하고 있는 탈아세틸화 반응 사이의 평형 관계에 의해 조정된다. 히스톤의 아세틸화는 히스톤 단백질의 N-말단내 진화론적으로 잘-보존되는 리신 잔기에서 발생하고, 이로써 코어 히스톤 단백질은 N-말단의 전하를 잃고, DNA와의 상호작용은 감소하고 뉴클레오솜의 구조는 불안정화되는 것으로 판단된다. 따라서, 역으로, 히스톤의 탈아세틸화는 뉴클레오솜 구조를 안정화시키는 것으로 판단된다. 그러나, 아세틸화에 의해 발생하는 크로마틴 구조 변화 정도는 불분명하고 2차로 유도되는 전사 조절과 어떠한 관련성을 갖는지는 불분명하다.

발명의 개시

본 발명자들은 상기 언급한 문제를 해결하기 위한 시도를 집중적으로 연구하여 생체내, 특히 신장암을 갖는 인간 환자에서 그의 항종양 효능을 확인할 수 있는신장암 치료제를 발견하게 되었고, 이로써 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명은 하기를 제공한다.

(1) 유효량의 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 신장암을 치료하는 방법:

(2) 상기 (1)에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 치료 방법:

(3) 상기 (1)에 있어서, 포유동물이 인간인 치료 방법.

(4) 치료학적 유효량의 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법:

(5) 상기 (4)에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법:

(6) 상기 (4)에 있어서, 생체내에서 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법.

(7) 상기 (6)에 있어서, 생체내는 인간의 신체내를 의미하는 방법.

(8) 활성 성분으로서 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포함하는, 신장암 치료제:

(9) 상기 (8)에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 치료제:

(10) 상기 (8)에 있어서, 생체내 항종양 활성을 갖는 치료제.

(11) 상기 (8)에 있어서, 인간을 위해 사용되는 치료제.

(12) 신장암 치료제를 제조하기 위한 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염의 용도:

(13) 상기 (12)에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 용도:

(14) 상기 (12)에 있어서, 신장암 치료제가 생체내 항종양 활성을 갖는 용도.

(15) 상기 (12)에 있어서, 신장암 치료제가 인간을 위해 사용되는 용도.

(16) 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염, 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 신장암을 치료하기 위한 약제학적 조성물:

(17) 상기 (16)에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 약제학적 조성물:

(18) 상기 (16)에 있어서, 생체내에서 항종양 활성을 갖는 약제학적 조성물.

(19) 상기 (16)에 있어서, 인간을 위해 사용되는 약제학적 조성물.

(20) 상기 (16) 내지 (19)중 어느 하나의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물을 신장암 치료를 위해 사용할 수 있거나 사용하여야 한다고 언급하고 있는, 관련 사용 설명서를 포함하는 상업용 패키지.

도면의 간단한 설명

도 1은 마우스에서 이식된 인간 신장 종양 (RXF-631L)에 대한 FR901228의 항종양 활성을 나타내는 그래프이다.

본 발명의 신장암 치료제는 활성 성분으로서 화학식(I)의 화합물(이하, FK228로 언급함) 또는 그의 염을 포함한다. 본 발명의 신장암 치료 방법은 인간을 포함하는 포유동물에 유효량의 FK228을 투여하는 것을 포함한다. 화학식(I)의 화합물중 입체이성체인 화학식(II)의 화합물(이하, FR901228로 언급함)이 바람직하다. 이들 화합물은 강력한 히스톤 디아세틸라제 저해 활성을 갖고(Nakajima, H. et al. ; ibid (1998) ), 특히 FR901228은 더욱 강력한 히스톤디아세틸라제는 저해 활성을 갖는다. 그러므로, 이는 적절하게 본 발명의 신장암 치료제에 포함되고, 적절하게 본 발명의 신장암 치료 방법에서 사용될 수 있다.

달리 언급하지 않는 한, 본 명세서에서 FK228에 대한 단순한 언급은 입체이성과 상관없이 화학식(II)의 화합물을 포함하는 화합물 그룹을 의미한다.

FK228 및 그의 염은 공지된 물질이고 수득할 수 있다. 예를 들면, FK228의 입체이성체중 하나인 FR901228은 FR901228를 생산할 수 있는 크로모박테리움(Cromobacterium)속에 속하는 세균 균주를 호기 조건하에서 배양하고, 물질을 배양 배지로부터 회수하여 수득할 수 있다. FR901228를 생산할 수 있는 크로모박테리움(Cromobacterium)속에 속하는 세균 균주의 예는 크로모박테리움 바이올라세움(Cromobacterium violaceum) WB968 (FERM BP-1968)이다. JP-B-7-64872의 개시에 따라 본 생산 세포로부터 FR901228 물질을 수득할 수 있다. FR901228을 더욱 용이하게 수득할 수 있기 때문에 FR901228를 생산할 수 있는 크로모박테리움(Cromobacterium)속에 속하는 세균 균주로부터 FR901228을 수득하는 것이 바람직할 수 있다. 그러나, 합성 또는 반-합성 FR901228도 추가의 정제 단계가 필요치 않거나 단순하게 제조될 수 있기 때문에 이롭다. 유사하게, FR901228외의 FK228은 통상 공지된 방법에 의해 합성 또는 반-합성될 수 있다. 특히 Khan W. Li, et al. (J. Am. Chem. Soc. , vol. 118,7237-7238 (1996))에 의해 보고된 방법에 따라 제조될 수 있다.

FK228의 염은 통상 비-독성인 생물학적으로 허용가능한 염이고, ? 예로서 알칼리 금속 염(예: 나트륨 염, 칼륨 염 등 ), 알칼리토 금속 염 (예: 칼슘 염, 마그네슘 염 등 ), 암모늄 염, 유기 아민 염과 같은 유기 염기와의 염(예: 트리에틸아민 염, 디이소프로필에틸아민 염, 피리딘 염, 피콜린 염, 에탄올아민 염, 트리에탄올아민 염, 디사이클로헥실아민 염, N, N'-디벤질에틸렌디아민 염 등), 무기산 부가 염 (예: 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 설페이트, 포스페이트 등 ), 유기 카복실 설폰산 부가염(예: 포름에이트, 아세테이트, 트리플루오로아세테이트, 말레이트, 타르트레이트, 푸마레이트, 메탄설포네이트, 벤젠설포네이트, 톨루엔설포네이트 등 ), 염기 또는 산 아미노산과의 염(예: 아르기닌, 아스파트산, 글루탐산 등 ) 등을 포함하는 염기 또는 산 부가염과의 염을 예로 포함한다.

FK228은 광학 이성체, 기하 이성체 등과 같은 비대칭 탄소 원자 및 이중 결합에 기초한 입체이성체를 갖고 그 모두 및 그의 혼합물은 본 발명에 포함된다.

추가로, FK228, FR901228 및 그의 염의 용매화물 화합물(예: 수화물 등과 같은 내포화합물) 또한 본 발명에 포함된다.

본 발명에서, 생체내 및 시험관내는 본 분야에서 사용되는 바와 같은 의미를 갖는다. 즉, "생체내"는 신체내, 예로서 하기 언급되는 다양한 포유동물의 신체내, 바람직하게 인간 신체내에서 표적의 생물학적 작용 및 반응이 발현되는 것을 의미한다. 용어 "시험관내"는 조직 배양 시스템, 세포 배양 시스템, 무세포 시스템 등을 포함하는 테스트 튜브에서 표적의 생물학적 작용 및 반응이 발현되는 것을 의미한다.

히스톤디아세틸라제 저해제인 FK228은 다양한 종양에 대하여 항종양 활성을 발휘한다. 이들중 신장암에 대하여 생체내 및 인간에서 현저한 효능을 나타낸다.

본 발명의 신장암의 치료제는 인간, 개, 소, 말, 래트, 기니픽 등과 같은 포유동물에 대하여 사용할 수 있다.

본 발명의 신장암의 치료제는 경구 또는 비경우 적용에 적절한 유기 또는 무기 담체 또는 부형제와 함께 활성 성분으로서 FK228 또는 그의 염을 포함하는 고형, 반-고형 또는 액상 약제학적 제제로서 사용될 수 있다.

활성 성분은 분말제, 정제, 펠릿, 캡슐제, 좌제, 액제, 유제, 현탁제, 에어로졸, 스프레이와 같은 제형 및 사용하기 위한 다른 제형으로 적절한 통상의 비독성 약제학적으로 허용가능한 담체와 형태와 혼합될 수 있다. 필요한 경우, 보조제, 안정화제, 점착제 등을 사용할 수 있다. 필요한 경우 이들 담체 및 부형제는 안정화될 수 있거나, 안정화 처리는 제제로 제형화된 후 사용될 수 있다. FK228 및 그의 염은 주위 조직으로의 침윤, 말단부(distal part)로부의 전이, 및 암 성장과 같은 신장암에 대한 치료학적 효능을 나타내기에 충분한 양으로 신장암 치료제에 포함된다.

본 발명의 신장암의 치료제를 투여하는 방법은 상기 기술된 바와 같은 신장암에 대한 치료학적 효능을 갖는 한 특별히 제한하지 않는다. 특히 본 발명의 신장암의 치료제를 사용할 때, 비경구 투여가 바람직하고, 즉, 정맥 투여, 근육내 투여, 조직내로의 직접 투여, 비강내 투여, 진피내 투여, 뇌척수액내로의 투여, 담관내 투여, 질내 투여 등이 바람직하다. 또한, 리포좀 방법 등이 바람직하게 사용될 수 있다. 이 치료제를 인간게에 사용할 때, 정맥 투여, 근육내 투여 또는 경구 투여가 적용에 바람직하게 사용된다. 활성 성분 FK228 또는 그의 염의 치료학적 유효량은 치료하고자 하는 각 환자의 연령 및 상태, 암 유형에 따라 달라질 수 있다. 정맥 투여 경우, FK228의 1일 투여량은 인간 신체 표면 m²당 통상 0.1-100 mg, 바람직하게 1-50 mg, 더욱 바람직하게 5-30 mg이고, 종양을 치료하기 위하여 주입하여 연속 투여된다. 주입에 의한 연속 투여 시간은 투여량에 따라 달라진다. 3-6 h, 더욱 바람직하게 3.5-4.5 h, 가장 바람직하게 4 h이 바람직하다. 투여 횟수는 18-30일 간격으로 1 내지 4회 투여를 포함하는 사이클에 기초하고, 2 내지 7의 상기 사이클인 바람직하게 적용된다. 또한, FK228 및 레티논산을 사용한 병용 치료법(바람직하게 모든-트랜스-레티논산: ATRA) 또한 바람직하다.

본 발명은 하기 실시예를 통해 더욱 상세히 기술된다. 본 발명은 이들 실시예로서 제한되는 것은 아니다.

실시예 1: FK228의 인간 신장 종양 이종이식에 대한 항종양 효과

(1) 약물 제조

FR901228의 권장량을 측량하고 용매(10% HCO-60 (Nihon Surfactant Kogyo K. K./염수)를 가하고 용해시키기 위하여 혼합물을 초음파처리하였다. 양성 대조군 물질인 탁솔을 시험하기 전에 Cremophor EL (SIGMA/에탄올(1:1))에 농도 24 mg/mL 로 용해시키고, 냉장고에 저장하였다. 사용시, 9배량의 생리 식염수를 가하여 물질을 2.4 mg/mL로 용해시켰다(용매 성분: 5% Cremophor EL-5% 에탄올-90% 염수).

(2) 동물

약물의 항종양 활성 테스트를 위해 BALB/cANnNCrj-nu/nu 마우스 (암컷, 6-주령)를 Charles River Japan (Yokohama, Japan)로부터 구입하고, 1주 이상동안 순응시킨 후, 테스트하였다. 식음료를 자유롭게 이용할 수 있는 SPF 환경하에서 마우스를 사육하였다.

(3) 종양

BALB/cANnNCrj-nu/nu 마우스에서 연속 계대배양하여 2-3X10⁷ 인간 신장 종양 (RXF-631L: Cancer Chemotherapy Center, Japan Foundation for Cancer Research, Tokyo, Japan)을 피하에 유지시켰다.

(4) 실험상 피하주입 및 그룹화

RXF-631L 종양의 단편(3x3x3 mm)을 BALB/cANnNCrj-nu/nu 마우스의 오른쪽 옆구리살에 피하주입하였다. 종양 주입후 종양의 용적인 100-300 mm³에 도달하였을 때, 종양 용적내에서의 분포를 막기하여 마우스를 그룹화하였다(그룹단 6마리). 종양 용적을 하기 식으로부터 계산하였다:

종양 부피 (mm³) = 1/2 x L x W²(여기에서, L 및 W는 각각 종양 매스의 길이 및 너비를 나타낸다).

(5) 투여

마우스를 그룹화한 날(0일) 투여를 시작하였다. FR901228 (3.2 및 1.8 mg/kg)을 FR901228 투여 그룹에 4일마다 3회씩(q4dx3) 정맥 투여하였다. 양성 대조군 물질, Taxol을 연속 5일동안(qdx5) Taxol 투여 그룹에 정맥 투여하였다(24 mg/kg). 용매(10% HCO-60/염수)만을 대조군 그룹(q4dx3)에 투여하였다.액체 투여량은 투여한 날 측정된 체중에 기초하여 산출하였다(0.1 mL/10 g 체중). FR901228 및 Taxol의 MTD(최대내약용량((maximum tolerance dose))은 각각 3.2 mg/kg/일 (q4dx3) 및 24 mg/kg/일 (qdx5)이었다.

(6) 종양 크기 및 체중 측정

종양 크기(길이, 너비) 및 체중을 0일부터 1주일 2번씩 측정하였다.

결과를 도 1에 나타내고, 여기에서, -●-는 대조군 그룹의 종양 크기 변화를 나타내고, -■-는 1.8 mg/kg의 FR901228 투여에 의한 결과를 나타내고, -▲-는 3.2 mg/kg의 FR901228 투여에 의한 결과를 나타내고, -◆-는 24 mg/kg의 Taxol투여에 의한 결과를 나타낸다.

FR901228는 생체내에서 인간 신장암의 성장을 억제시켰다.

실시예 2: 항종양 반응

1명의 환자(환자 번호 31-00-83-2)에서 부분 반응이 입증되었다. 환자는 1996년 진단받은 투명세포 신장 암종 병력을 갖는 38세 여성이었다. 환자는 총 10번의 FR901228을 투여 받았다: 4시간동안 연속 주입하여 FR901228을 1회 싸이클(21일)중 1일 및 5일째 9.10 mg/m²로 투여하고, 2회 싸이클(21일)중 1일째 9.10 mg/m² 투여하고, 3회 싸이클(28일)중 1일 및 5일째 9.10 mg/m² 투여하고, 4회 싸이클(22일)중 1일째 9.10 mg/m² 투여하고 5회 싸이클(20일)중 1일째 12.70 mg/m² 투여하고 6회 싸이클(23일)중 1일째 17.8mg/m² 투여하고 7회 싸이클(23일)중 1일째 17.8mg/m² 투여하고 8회 싸이클(21일)중 1일째 17.8mg/m² 투여하였다. 치료 효과는 RECIST 기준에 기초하여 평가하였다.

처음 2회 싸이클 후 이 환자는 부분 반응을 보였고, 8회 싸이클후에 질환의 진행이 주시되었다.

산업상 이용가능성

활성 성분으로서 히스톤디아세틸라제 저해 활성을 갖는 FK228 (특히 FR901228) 또는 그의 염을 포함하는 본 발명의 신장암의 치료제는 시험관내뿐만 아니라 생체내에서도 우수한 항종양 활성을 나타낸다. 본 발명의 신장암의 치료제 는 신장암을 갖는 인간 환자에서 우수한 항종양 활성을 나타낸다. 따라서, 본 발명은 신장암 치료에 사용하기 적절할 수 있다.

서열 목록 프리-텍스트

서열 번호 : 1: Xaa는 식 NH₂C(CHCH₃)COOH의 아미노산이다. 식 COOHCH₂ CH (CHCHC₂H₄SH)OH에서, 카복실 그룹은 첫번째 아미노산 Val의 아미노 그룹과 결합하고, 하이드록실 그룹은 4번째 아미노산 Val의 카복실 그룹과 결합하고, SH 그룹은 디설파이드 결합에 의해 두번째 아미노산 Cys의 SH 그룹와 결합한다.

본 출원은 미국에서 출원된 특허 출원 60/369,868에 기초하고, 이는 참고 문헌으로서 전체적으로 인용된다.

SEQUENCE LISTING <110> FUJISAWA PHARMACEUTICAL CO., LTD. <110> THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, represented by the Secretary, Department of Health and Human Services <120> TREATMENT METHOD AND THERAPEUTIC AGENT OF KIDNEY CANCER <130> 09537 <150> US60/369,868 <151> 2002-04-05 <160> 1 <210> 1 <211> 4 <212> PRT <213> Chromobacterium sp. <220> <223> Inventor: Yoshinori Naoe <223> Inventor: Susan E. Bates <220> <221> SITE <222> (3) <223> Xaa is an amino acid represented by the formula NH2C(CHCH3)COOH. <220> <221> SITE <222> (1), (2), (4) <223> In the formula COOHCH2CH(CHCHC2H4SH)OH, the carboxylic group is bonded with the amino group of the first amino acid Val, the hydroxyl group is bonded with the carboxylic group of the fourth amino acid Val, and the SH group is bonded with the SH group of the second amino acid Cys via a disulfide bond. <400> 1 Val Cys Xaa Val 4

Claims (20)

1. 유효량의 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 신장암을 치료하는 방법:
2. 제 1항에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 치료 방법:
3. 제 1항에 있어서, 포유동물이 인간인 치료 방법.
4. 유효량의 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포유동물에게 투여하는 것을 포함하는, 포유동물에서 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법:
5. 제 4항에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법:
6. 제 4항에 있어서, 생체내에서 신장의 암성 종양의 성장을 억제하는 방법.
7. 제 6항에 있어서, 생체내는 인간의 신체내를 의미하는 방법.
8. 활성 성분으로서 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염을 포함하는, 신장암 치료제:
9. 제 8항에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 치료제:
10. 제 8항에 있어서, 생체내 항종양 활성을 갖는 치료제.
11. 제 8항에 있어서, 인간을 위해 사용되는 치료제.
12. 신장암 치료제를 제조하기 위한 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염의 용도:
13. 제 12항에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 용도:
14. 제 12항에 있어서, 신장암 치료제가 생체내 항종양 활성을 갖는 용도.
15. 제 12항에 있어서, 신장암 치료제가 인간을 위해 사용되는 용도.
16. 하기 화학식(I)의 화합물, 또는 그의 염, 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는, 신장암을 치료하기 위한 약제학적 조성물:
17. 제 16항에 있어서, 화학식(I)의 화합물이 하기 화학식(II)의 화합물인 약제학적 조성물:
18. 제 16항에 있어서, 생체내에서 항종양 활성을 갖는 약제학적 조성물.
19. 제 16항에 있어서, 인간을 위해 사용되는 약제학적 조성물.
20. 제 16항 내지 제 19항중 어느 한 항의 약제학적 조성물 및 약제학적 조성물을 신장암 치료를 위해 사용할 수 있거나 사용하여야 한다고 언급하고 있는, 관련 사용 설명서를 포함하는 상업용 패키지.