PL210794B1 - Zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK228 lub jego soli - Google Patents
Zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK228 lub jego soliInfo
- Publication number
- PL210794B1 PL210794B1 PL368708A PL36870802A PL210794B1 PL 210794 B1 PL210794 B1 PL 210794B1 PL 368708 A PL368708 A PL 368708A PL 36870802 A PL36870802 A PL 36870802A PL 210794 B1 PL210794 B1 PL 210794B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- tumor
- gene
- expression
- cell
- histone deacetylase
- Prior art date
Links
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 title claims abstract description 40
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 36
- 229940121372 histone deacetylase inhibitor Drugs 0.000 title abstract description 42
- 239000003276 histone deacetylase inhibitor Substances 0.000 title abstract description 42
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims abstract description 92
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 claims abstract description 46
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 21
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 105
- 102100020870 La-related protein 6 Human genes 0.000 claims description 25
- 108050008265 La-related protein 6 Proteins 0.000 claims description 25
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 24
- KYIKRXIYLAGAKQ-UHFFFAOYSA-N abcn Chemical compound C1CCCCC1(C#N)N=NC1(C#N)CCCCC1 KYIKRXIYLAGAKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- 101000891649 Homo sapiens Transcription elongation factor A protein-like 1 Proteins 0.000 claims description 22
- 101000596402 Mus musculus Neuronal vesicle trafficking-associated protein 1 Proteins 0.000 claims description 22
- 101000800539 Mus musculus Translationally-controlled tumor protein Proteins 0.000 claims description 22
- 101000781972 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) Protein wos2 Proteins 0.000 claims description 22
- 101001009610 Toxoplasma gondii Dense granule protein 5 Proteins 0.000 claims description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 15
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 11
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims description 11
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 claims description 9
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 claims description 9
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 abstract description 113
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 53
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 abstract description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 abstract description 13
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 11
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 abstract description 9
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 66
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 31
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 27
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 27
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 24
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 23
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 20
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 17
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 206010038389 Renal cancer Diseases 0.000 description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 13
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 11
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108090000353 Histone deacetylase Proteins 0.000 description 10
- 102000003964 Histone deacetylase Human genes 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 208000008839 Kidney Neoplasms Diseases 0.000 description 9
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 9
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 9
- 201000010982 kidney cancer Diseases 0.000 description 9
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 9
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 8
- 108700024542 myc Genes Proteins 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 108010033040 Histones Proteins 0.000 description 6
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 6
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 6
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 5
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 5
- 238000011530 RNeasy Mini Kit Methods 0.000 description 5
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 5
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108091028690 C-myc mRNA Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 108010047956 Nucleosomes Proteins 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 239000012830 cancer therapeutic Substances 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 210000001623 nucleosome Anatomy 0.000 description 4
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 4
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 201000010174 renal carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010077544 Chromatin Proteins 0.000 description 3
- 241000588881 Chromobacterium Species 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 3
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 210000003483 chromatin Anatomy 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- 230000006195 histone acetylation Effects 0.000 description 3
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 3
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000008389 polyethoxylated castor oil Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- NEAQRZUHTPSBBM-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxy-3,3-dimethyl-7-nitro-4h-isoquinolin-1-one Chemical compound C1=C([N+]([O-])=O)C=C2C(=O)N(O)C(C)(C)CC2=C1 NEAQRZUHTPSBBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JHRPHASLIZOEBJ-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine-3-carbaldehyde Chemical compound CC1=NC=CC=C1C=O JHRPHASLIZOEBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 102100026550 Caspase-9 Human genes 0.000 description 2
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100039869 Histone H2B type F-S Human genes 0.000 description 2
- 101001035372 Homo sapiens Histone H2B type F-S Proteins 0.000 description 2
- 101001030211 Homo sapiens Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 description 2
- 101001001500 Homo sapiens Phosphatidylinositol N-acetylglucosaminyltransferase subunit H Proteins 0.000 description 2
- 101000599464 Homo sapiens Protein phosphatase inhibitor 2 Proteins 0.000 description 2
- 102100033468 Lysozyme C Human genes 0.000 description 2
- 102100026931 Mitogen-activated protein kinase 10 Human genes 0.000 description 2
- 102100034449 N-myc-interactor Human genes 0.000 description 2
- 102100036162 Phosphatidylinositol N-acetylglucosaminyltransferase subunit H Human genes 0.000 description 2
- 102100037976 Protein phosphatase inhibitor 2 Human genes 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 2
- 230000009876 antimalignant effect Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 230000022131 cell cycle Effects 0.000 description 2
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 2
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 2
- 208000010749 gastric carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 2
- 102000053563 human MYC Human genes 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000005918 in vitro anti-tumor Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 description 2
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 description 2
- 231100000682 maximum tolerated dose Toxicity 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 201000001514 prostate carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JWOGUUIOCYMBPV-GMFLJSBRSA-N (3S,6S,9S,12R)-3-[(2S)-Butan-2-yl]-6-[(1-methoxyindol-3-yl)methyl]-9-(6-oxooctyl)-1,4,7,10-tetrazabicyclo[10.4.0]hexadecane-2,5,8,11-tetrone Chemical compound N1C(=O)[C@H](CCCCCC(=O)CC)NC(=O)[C@H]2CCCCN2C(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@@H]1CC1=CN(OC)C2=CC=CC=C12 JWOGUUIOCYMBPV-GMFLJSBRSA-N 0.000 description 1
- UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 1-methylmethylene Chemical compound C[CH] UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 2-(cyclohexen-1-yl)cyclohexan-1-one Chemical compound O=C1CCCCC1C1=CCCCC1 GVNVAWHJIKLAGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100027962 2-5A-dependent ribonuclease Human genes 0.000 description 1
- 108010000834 2-5A-dependent ribonuclease Proteins 0.000 description 1
- GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 2-benzyl-3-phenylpropane-1,2-diamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(N)(CN)CC1=CC=CC=C1 GRWKNBPOGBTZMN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 2-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical class CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 102100020969 ATP-binding cassette sub-family E member 1 Human genes 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 208000003950 B-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M Bisulfite Chemical compound OS([O-])=O LSNNMFCWUKXFEE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102100026437 Branched-chain-amino-acid aminotransferase, cytosolic Human genes 0.000 description 1
- 101100167062 Caenorhabditis elegans chch-3 gene Proteins 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000034565 Carbonyl Reductase (NADPH) Human genes 0.000 description 1
- 108090000492 Carbonyl Reductase (NADPH) Proteins 0.000 description 1
- 102100021973 Carbonyl reductase [NADPH] 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100024931 Caspase-14 Human genes 0.000 description 1
- 108090000566 Caspase-9 Proteins 0.000 description 1
- 102100039292 Cbp/p300-interacting transactivator 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000588879 Chromobacterium violaceum Species 0.000 description 1
- 101150065749 Churc1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000725101 Clea Species 0.000 description 1
- 108050006400 Cyclin Proteins 0.000 description 1
- 102000016736 Cyclin Human genes 0.000 description 1
- 108090000266 Cyclin-dependent kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000003903 Cyclin-dependent kinases Human genes 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 229940122964 Deacetylase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100037573 Dual specificity protein phosphatase 12 Human genes 0.000 description 1
- 101710161408 Folylpolyglutamate synthase Proteins 0.000 description 1
- 101710200122 Folylpolyglutamate synthase, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100035067 Folylpolyglutamate synthase, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- 108010093223 Folylpolyglutamate synthetase Proteins 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 206010053759 Growth retardation Diseases 0.000 description 1
- 102000003893 Histone acetyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000246 Histone acetyltransferases Proteins 0.000 description 1
- 102000006947 Histones Human genes 0.000 description 1
- 101000783786 Homo sapiens ATP-binding cassette sub-family E member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000766268 Homo sapiens Branched-chain-amino-acid aminotransferase, cytosolic Proteins 0.000 description 1
- 101000896985 Homo sapiens Carbonyl reductase [NADPH] 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000761467 Homo sapiens Caspase-14 Proteins 0.000 description 1
- 101000983523 Homo sapiens Caspase-9 Proteins 0.000 description 1
- 101000888413 Homo sapiens Cbp/p300-interacting transactivator 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000924017 Homo sapiens Dual specificity protein phosphatase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000881110 Homo sapiens Dual specificity protein phosphatase 12 Proteins 0.000 description 1
- 101001039207 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor-related protein 8 Proteins 0.000 description 1
- 101000628949 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000996055 Homo sapiens N-myc-interactor Proteins 0.000 description 1
- 101001124792 Homo sapiens Proteasome subunit beta type-10 Proteins 0.000 description 1
- 101000864780 Homo sapiens Pulmonary surfactant-associated protein A1 Proteins 0.000 description 1
- 101000621390 Homo sapiens Wee1-like protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 208000031671 Large B-Cell Diffuse Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 108010061306 Lipoprotein Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000011965 Lipoprotein Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100040705 Low-density lipoprotein receptor-related protein 8 Human genes 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 102100028397 MAP kinase-activated protein kinase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010041980 MAP-kinase-activated kinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 102100037510 Metallothionein-1E Human genes 0.000 description 1
- 108700027654 Mitogen-Activated Protein Kinase 10 Proteins 0.000 description 1
- 108700027649 Mitogen-Activated Protein Kinase 3 Proteins 0.000 description 1
- 102100024192 Mitogen-activated protein kinase 3 Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical class CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- JWOGUUIOCYMBPV-UHFFFAOYSA-N OT-Key 11219 Natural products N1C(=O)C(CCCCCC(=O)CC)NC(=O)C2CCCCN2C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CN(OC)C2=CC=CC=C12 JWOGUUIOCYMBPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 229920002565 Polyethylene Glycol 400 Polymers 0.000 description 1
- 229920002685 Polyoxyl 35CastorOil Polymers 0.000 description 1
- 101710155795 Probable folylpolyglutamate synthase Proteins 0.000 description 1
- 102100029081 Proteasome subunit beta type-10 Human genes 0.000 description 1
- 102100038239 Protein Churchill Human genes 0.000 description 1
- 108010041520 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000000528 Pulmonary Surfactant-Associated Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102100027773 Pulmonary surfactant-associated protein A2 Human genes 0.000 description 1
- 101710151871 Putative folylpolyglutamate synthase Proteins 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 108700005075 Regulator Genes Proteins 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- 238000010818 SYBR green PCR Master Mix Methods 0.000 description 1
- 101100325792 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) BAT1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100325791 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) eca39 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010042971 T-cell lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000027585 T-cell non-Hodgkin lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 229930189037 Trapoxin Natural products 0.000 description 1
- RTKIYFITIVXBLE-UHFFFAOYSA-N Trichostatin A Natural products ONC(=O)C=CC(C)=CC(C)C(=O)C1=CC=C(N(C)C)C=C1 RTKIYFITIVXBLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical class OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M Trifluoroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102100029948 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type substrate 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710183617 Tyrosine-protein phosphatase non-receptor type substrate 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100023037 Wee1-like protein kinase Human genes 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 108010082820 apicidin Proteins 0.000 description 1
- 229930186608 apicidin Natural products 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 101150016587 bcat-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 150000002169 ethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- 102000030722 folylpolyglutamate synthetase Human genes 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000006197 histone deacetylation Effects 0.000 description 1
- 102000051554 human BCAT1 Human genes 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M hydrogensulfate Chemical compound OS([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000009928 nephrosis Diseases 0.000 description 1
- 231100001027 nephrosis Toxicity 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N oxirane;propane-1,2,3-triol Chemical compound C1CO1.OCC(O)CO QUANRIQJNFHVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N pentaethylene glycol Chemical compound OCCOCCOCCOCCOCCO JLFNLZLINWHATN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 150000003222 pyridines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 201000006845 reticulosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 208000029922 reticulum cell sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M sodium butyrate Chemical compound [Na+].CCCC([O-])=O MFBOGIVSZKQAPD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012453 solvate Substances 0.000 description 1
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 108091035539 telomere Proteins 0.000 description 1
- 102000055501 telomere Human genes 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical group 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 108010060597 trapoxin A Proteins 0.000 description 1
- RTKIYFITIVXBLE-QEQCGCAPSA-N trichostatin A Chemical compound ONC(=O)/C=C/C(/C)=C/[C@@H](C)C(=O)C1=CC=C(N(C)C)C=C1 RTKIYFITIVXBLE-QEQCGCAPSA-N 0.000 description 1
- 230000005760 tumorsuppression Effects 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57407—Specifically defined cancers
- G01N33/57434—Specifically defined cancers of prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- A61K38/12—Cyclic peptides, e.g. bacitracins; Polymyxins; Gramicidins S, C; Tyrocidins A, B or C
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/34—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving hydrolase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
- C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Zoology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
Description
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK228 lub jego soli.
W ostatnich latach „medycyna na miarę zaczyna być postrzegana, jako metoda, która bierze pod uwagę osobnicze różnice między pacjentami, a poszukiwanie markera do różnicowania nowotworu, w stosunku do którego środek farmaceutyczny jest skuteczny, z nowotworem przeciwko któremu, środek farmaceutyczny jest nieskuteczny, uważa się za konieczne. Jest to próba etycznej i medycznej poprawy efektywności kosztów leczenia przez podawanie pacjentom środka farmaceutycznego po wcześniejszej weryfikacji prawdopodobieństwa jego działania, dzięki czemu uzyskuje się większą skuteczność, jak i unika się toksyczności środka farmaceutycznego i zmniejsza się zastosowanie nic nie wnoszącego środka farmaceutycznego. W leczeniu raka, celowe jest opracowanie sposobu przewidywania skuteczności środków przeciwnowotworowych, ponieważ mogą to być ważne środki wypełniające lukę między badaniem podstawowym a zastosowaniem klinicznym.
Ponadto, w odniesieniu do substancji lub związku powszechnie opisywanych jako mające działanie przeciwnowotworowe podkreślano, że jeśli opis ich działania jest oparty wyłącznie na wynikach in vitro, takie wyniki nie prowadzą bezpośrednio do przewidywalnych wyników in vivo. Innymi słowy, problem polega na tym, że substancja wykazująca działanie przeciwnowotworowe in vitro nie koniecznie wykazuje działanie przeciwnowotworowe in vivo, a zastosowanie substancji wykazującej działanie przeciwnowotworowe in vitro bezpośrednio jako środka przeciwnowotworowego jest trudne.
Na przykład, opisano że związek przedstawiony wzorem (II)
wprowadza silne działanie przeciwnowotworowe przez selektywne hamowanie deacetylazy histonowej (substancja ta była również opisywana, jako powodująca silną acetylację histonu w komórce traktowanej tą substancją i w wyniku tego, indukowała aktywność kontrolującą transkrypcję różnych genów, aktywność hamowania cyklu komórkowego i aktywność hamowania apoptozy (JP-B-7-64872, H. Nakajima i wsp., Exp. Cell Res. 241, 126-133 (1998))). Jednakże, w żadnej z publikacji nie ustalono czynnika zdolnego do przewidywania działania przeciwnowotworowego badanego związku i w obecnej sytuacji, wiele problemów musi być jeszcze rozwiązanych, takich jak to czy wyniki in vitro mogą być bezpośrednio stosowane in vivo, czy związek wykazuje lub nie praktyczne działanie in vivo w odniesieniu do każ dego raka i tym podobne.
Deacetylaza histonowa jest metalo-deacetylowanym enzymem, w którym Zn jest skoordynowany w centrum aktywnym (M.S. Finnin i wsp. Nature, 401, 188-193 (1999)). Uważa się, że enzym ten zmienia powinowactwo DNA różnych acetylowanych histonów. To bezpośrednie zjawisko biologiczne doprowadza do zmian w strukturze chromatyny. Najmniejszą jednostką struktury chromatyny jest nukleosom, gdzie 146 par zasad DNA jest owiniętych 1,8 razy w kierunku przeciwnym do kierunku ruchu wskazówek zegara dokoła oktameru histonu (H2A, H2B, H3 i H4, każda 2 cząsteczek, rdzeń histonu). Rdzeń histonu stabilizuje strukturę nukleosomu, ponieważ ładunek dodatni na końcu N każdego białka histonu oddziałuje z DNA. Acetylacja histonu jest kontrolowana przez równowagę między reakcją acetylacji, w której bierze udział acetylotransferaza histonowa, a reakcją deacetylacji, w której bierze udział deacetylaza histonowa. Acetylacja histonu następuje w ewolucyjnie dobrze konserwowanej reszcie lizyny na końcu N białka histonu, gdzie, jak się uważa, białko rdzenia histonu traci ładunek na końcu N, oddziaływanie z DNA jest osłabione, a struktura nukleosomu staje się niestabilna. Zgodnie z powyższym, uważa się, że deacetylacja histonu zachodzi odwrotnie, mianowicie, w kierunku stabiliPL 210 794 B1 zacji struktury nukleosomu. Jednakże, nadal pozostaje wiele niejasnych aspektów, takich jak stopień zmian acetylacji struktury chromatyny i jak to odnosi się do drugorzędowo indukowanej kontroli transkrypcji i tym podobne.
Niniejszy wynalazek dotyczy zastosowania związku przedstawionego wzorem (I) (poniżej określony jako FK228; Sekw. Id. Nr: 5)
lub jego soli do wytwarzania środka do leczenia raka prostaty.
Korzystnie związek przedstawiony wzorem (I) jest związkiem przedstawionym wzorem (II) (poniżej określony jako FR 901228).
Bardziej korzystnie środek do leczenia raka prostaty ma działanie przeciwnowotworowe in vivo.
Twórcy niniejszego wynalazku przeprowadzili intensywne badania próbując rozwiązać powyżej wymienione problemy i znaleźli środek terapeutyczny do leczenia raka prostaty i środek terapeutyczny do leczenia chłoniaka złośliwego, który umożliwia potwierdzenie działania przeciwnowotworowego in vivo. Ponadto, obecni twórcy stwierdzili, że działanie przeciwnowotworowe inhibitora deacetylazy histonowej zmienia się w zależności od rodzaju nowotworu i że obserwowana jest zmienność w połączeniu ze zmianami stanu ekspresji konkretnego genu lub biał ka i w oparciu o taką obserwację , ustalili sposób określania działania przeciwnowotworowego inhibitora deacetylazy histonowej.
Krótki opis figur
Na Fig. 1 przedstawiono wykres pokazujący działanie przeciwnowotworowe FR901228 na ludzkiego raka prostaty, gdzie oś pionowa wskazuje szybkość wzrostu nowotworu, oś pozioma wskazuje liczbę dni upływających od wstępnego podania, a szybkość wzrostu nowotworu jest wyrażona jako względny stosunek objętości guza od dnia 0 względem objętości guza w dniu 0 przyjętej jako 1.
Fig. 2 obejmuje wykresy pokazujące działanie przeciwnowotworowe FR901228 w ludzkim chłoniaku, gdzie oś pionowa wskazuje stosunek ilości myszy, które przeżyły, a oś pozioma wskazuje liczbę dni upływających od wszczepienia komórek guza.
Fig. 3 obejmuje wykresy pokazujące działanie przeciwnowotworowe FR901228 na ludzkiego raka prostaty ((a); PC-3) i raka nerek ((b); ACHN), gdzie oś pionowa wskazuje szybkość wzrostu guza, oś pozioma wskazuje liczbę dni upływających od wstępnego podania, a szybkość wzrostu guza jest wyrażona jako względny stosunek objętości guza od dnia 0 względem objętości guza w dniu 0 przyjętej jako 1.
PL 210 794 B1
Fig. 4 obejmuje wykresy pokazujące działanie FR901228 na ekspresję genu p21 in vitro (komórka PC-3, komórka ACHN).
(a), (b); Oś pionowa wskazuje względną ilość ekspresji genu p21, a oś pozioma wskazuje czas kontaktu (godz.) z FR901228.
(c); Oś pionowa wykazuje względną ilość ekspresji genu p21.
Fig. 5 obejmuje wykresy pokazujące działanie FR901228 na ekspresję genu p21 i ekspresję genu c-myc in vivo (Komórka PC-3, Komórka ACHN), gdzie oś pionowa wskazuje względną ilość ekspresji genu p21 lub c-myc, a oś pozioma wskazuje liczbę dni upływających od podawania FR901228.
Środek terapeutyczny do leczenia raka prostaty w zastosowaniu według niniejszego wynalazku obejmuje, jako składnik aktywny, związek (FK228) przedstawiony wzorem (I) lub jego sól. Ze związków o wzorze (I), korzystny jest związek (FR901228) przedstawiony wzorem (II), będący stereoizomerem. Związki te mają silne działanie hamujące aktywność deacetylazy histonowej (Nakajima, M. i wsp; ibid. (1998)), a FR901228 jest szczególnie korzystny, gdy jest zawarty w środku terapeutycznym do leczenia raka prostaty według niniejszego wynalazku, ponieważ ma silniejsze działanie hamujące aktywność deacetylazy histonowej.
W niniejszym opisie, proste odniesienie do FK228 oznacza grupę związków bez względu na ich stereoizomeryzację, włącznie ze związkami przedstawionymi wzorem (II), jeśli nie wskazano inaczej.
FK228 i jego sól są znanymi, i dostępnymi substancjami. Na przykład, FR901228, który jest jednym ze stereoizomerów FK228, można otrzymać przez hodowlę szczepu zdolnego do produkowania FR901228 i należącego do rodzaju Chromobacterium w warunkach aerobowych i odzyskanie substancji z bulionu hodowlanego. Jako szczep zdolny do produkowania FR901228 i należący do rodzaju Chromobacterium, może być wymieniony, na przykład, Chromobacterium violaceum WB968 (FERM BP-1968). Bardziej szczegółowo, FR901228 może być otrzymany ze szczepu produkującego FR901228 według sposobu opisanego w opisie JP-B-7-64872 (odpowiadającemu patentowi USA nr 4977138). FR901228 jest korzystnie odzyskiwany ze szczepu zdolnego do produkowania FR901228 i należącego do rodzaju Chromobacterium, ponieważ jest łatwiej otrzymywany. Jednakże, syntetyczny lub pół-syntetyczny FR901228 jest również korzystny, ponieważ nie jest konieczny żaden lub tylko kilka etapów oczyszczania. Podobnie, FK228 inny niż FR901228 może być również pół-syntetyzowany lub całkowicie syntetyzowany według tradycyjnie znanego sposobu. Bardziej szczegółowo, może on być wytworzony według sposobu opisywanego przez Khana W. Li, i wsp (J. Am. Chem. Soc., vol. 118, 7237-7238 (1996)).
Sól FK228 jest biologicznie dopuszczalną, na ogół nietoksyczną solą, i przykłady takich soli obejmują sole z nieorganiczną zasadą (np., sole metali alkalicznych, takie jak sól sodowa, sól potasowa itp., sole metali ziem alkalicznych, takie jak sól wapniowa, sól magnezowa itp., i sól amonowa), sole z organicznymi zasadami (np., organiczne sole aminowe, takie jak sól trietyloaminowa, sól aminowa diizopropyloetylowa, sól pirydynowa, sól pikolinowa, sól etanolaminowa, sól trietanolaminowa, sól dicykloheksyloaminowa, sól N,N'-dibenzyloetylenodiaminowa itp.), nieorganiczne sole addycyjne z kwasem (np., chlorowodorek, bromowodorek, wodorosiarczan, fosforan itp.), organiczne kwasy karboksylowe, sulfonowe sole addycyjne z kwasem (np. mrówczan, octan, trifluorooctan, maleinian, winian, fumaran, metanosulfonian, benzenosulfonian, toluenosulfonian itp.), sole z zasadowymi lub kwasowymi aminokwasami (np. argininą, kwasem asparaginowym, kwasem glutarowym itp.), sole z solami addycyjnymi z kwasem lub zasadą.
FK228 może mieć stereoizomer (np., FR901228), taki jak izomer optyczny lub izomer geometryczny oparty na asymetrycznym atomie węgla lub podwójnym wiązaniu i wszystkie izomery i ich mieszanina są w zakresie niniejszego wynalazku.
Związki solwatów FK228, FR901228 i ich sole (np., związki inkluzyjne (np., hydrat itp.)) również są objęte zakresem niniejszego wynalazku.
W niniejszym wynalazku, in vivo i in vitro maj ą ogólnie przyję te znaczenie, jak jest to stosowane w odnośnej dziedzinie. To znaczy, „in vivo odnosi się do stanu, w którym przedmiotowa funkcja biologiczna lub reakcja zachodzi w żywym organizmie, a „in vitro odnosi się do wyrażania takiej funkcji lub reakcji w probówce testowej (układ hodowli tkankowej, układ hodowli komórkowej, układ bez komórek itp.).
Nowotwór, który ma być celem w niniejszym wynalazku, jest nowotworem, na który FK228, będący inhibitorem deacetylazy histonowej, działa przeciwnowotworowo, a przykłady takich nowotworów obejmują raka prostaty i chłoniaka złośliwego, gdzie działanie in vivo jest szczególnie znaczące. Korzystne jest, aby chłoniak złośliwy, przeciwko któremu środek terapeutyczny z zastosowania według niniejszego wynalazku wykazuje działanie przeciwnowotworowe, był inny niż chłoniak z limfocytów T,
PL 210 794 B1 taki jak chłoniak z limfocytów B, chłoniak histiocytozowy i tym podobne. W niniejszym wynalazku wykazano doskonałe działanie przeciwnowotworowe in vivo zwłaszcza przeciwko tym nowotworom.
Środek terapeutyczny przeciwko rakowi prostaty w zastosowaniu według niniejszego wynalazku i środek terapeutyczny przeciwko chłoniakowi złoś liwemu może być stosowany jako preparat farmaceutyczny w postaci ciała stałego, ciała pół-stałego lub cieczy zawierającej jako składnik aktywny, FK228 lub jego sól w mieszaninie z organicznym lub nieorganicznym nośnikiem lub zaróbką odpowiednimi do podawania doustnego lub pozajelitowego. Składnik aktywny może być zmieszany z tradycyjnym, nietoksycznym, farmaceutycznie dopuszczalnym nośnikiem, aby utworzyć, na przykład, proszek, tabletkę, peletkę, kapsułkę, czopek, ciecz, emulsję, zawiesinę, aerozol, rozpyloną ciecz i inną postać odpowiednią do stosowania. Gdy jest to konieczne, środek pomocniczy, środek stabilizujący, środek zagęszczający i tym podobne mogą być również stosowane. Te nośniki i zaróbki mogą być stosowane po działaniu sterylizującym, gdy jest to konieczne, lub mogą być sterylizowane po wytworzeniu preparatu. FK228 lub jego sól może być obecna w ilości dostatecznej, aby zapewnić działanie przeciwnowotworowe, środka terapeutycznego przeciwko rakowi prostaty i środka terapeutycznego przeciwko chłoniakowi złośliwemu.
Gdy środek farmaceutyczny jest podawany człowiekowi, korzystnie jest on podawany dożylnie, domięśniowo lub doustnie. Podczas gdy terapeutycznie skuteczna dawka FK228 lub jego soli, które są składnikami aktywnymi, zmienia się w zależności od wieku i stanu poszczególnych pacjentów podlegających leczeniu i od rodzaju raka oraz od rodzaju chłoniaka złośliwego, wynosi na ogół 0,1-100 mg, korzystnie 1-50 mg, korzystniej 5-30 mg, dziennie w ilości FK228 na powierzchnię ciała ludzkiego (m2) w przypadku podawania doż ylnego do leczenia guza.
Sposób określenia działania przeciwnowotworowego inhibitora deacetylazy histonowej służy do znalezienia inhibitora deacetylazy histonowej, który może wywierać działanie przeciwnowotworowe na docelową komórkę guza bez faktycznego podawania inhibitora do organizmu człowieka.
Termin „inhibitor deacetylazy histonowej oznacza związek, który wiąże się z miejscem aktywnym deacetylazy histonowej, kompetycyjnie z substratem, lub związek, który wiąże się z miejscem innym niż miejsce aktywne deacetylazy histonowej i zmienia aktywność enzymu deacetylazy histonowej, i obejmuje związek już znany jako inhibitor deacetylazy histonowej, którego zastosowanie jest znane, wszystkie związki (syntetyczne lub naturalne) opisywane jako związki o aktywności inhibitora deacetylazy histonowej i wszystkie związki, które będą opisywane w przyszłości. Konkretnie mogą być wymienione, wspomniany powyżej FK228, jego sól i jego pochodne (np., acetylowany FK228, forma tiolowa, w której wiązanie S-S zostało zredukowane itp.). Ponadto opisano trichostatynę A, maślan sodu, kwas suberoiloanilido hydroksamowy (SAHA), MS-275, peptyd zawierający cykliczny kwas hydroksamowy, apicydynę, trapoksynę i tym podobne związki, których aktywność inhibitora deacetylazy histonowej wykazano.
Sposób określania działania przeciwnowotworowego inhibitora deacetylazy histonowej obejmuje przynajmniej (i) etap traktowania badanej komórki inhibitorem deacetylazy histonowej i (ii) etap pomiaru zmiany ekspresji specyficznego genu i/lub białka w badanej komórce przed i po traktowaniu tym inhibitorem i porównanie ilości uzyskanych w wyniku obu ekspresji. Każdy etap został wyjaśniony szczegółowo poniżej.
(i) etap traktowania badanej komórki inhibitorem deacetylazy histonowej
W tym etapie, badana komórka jest hodowana w roztworze zawierającym inhibitor deacetylazy histonowej.
Podczas gdy komórka stosowana w teście nie stanowi ograniczenia tak długo dopóki obejmuje deacetylazę histonową, ponieważ określenie działania przeciwnowotworowego inhibitora deacetylazy histonowej, zwłaszcza specyficzność miejsca nowotworowego inhibitora, stanowi jeden z problemów rozważanych w niniejszym wynalazku, komórka użyta w teście, która ma być stosowana, korzystnie pochodzi z nowotworu, na który badanie wpływu jest celowe. Na przykład, gdy ma być określony wpływ na raka prostaty, stosowana jest komórka PC3, która jest hodowlaną ludzką komórką raka prostaty i tym podobne komórki, a gdy ma być określony wpływ na raka nerki, stosowana jest komórka ACHN, która jest hodowaną ludzką komórką raka nerki i tym podobne. Różne hodowane ludzkie komórki raka mogą być stosowane jako komórki testowe, w tym, komórki raka dostępne w handlu, lub dostępne z różnych banków komórek i tym podobnych. Do badania wpływu długoterminowego działania leczniczego, lub skuteczności u poszczególnych pacjentów, mianowicie, medycyna na miarę, możliwa jest hodowla komórek nowotworowych, które można uzyskać z nowotworu od pacjenta i zastosowanie takiej komórki nowotworowej jako komórki testowej.
PL 210 794 B1
Inhibitor deacetylazy histonowej stosowany w tym etapie jest taki jak wymieniono powyżej.
Warunki traktowania komórki testowej i inhibitora deacetylazy histonowej są wolne od jakiegokolwiek szczególnego ograniczenia tak długo jak długo może być w pełni wywierany wpływ inhibitora deacetylazy histonowej i odpowiednio ustalony zgodnie z czynnikami, takimi jak rodzaj stosowanej komórki testowej i rodzaj inhibitora deacetylazy histonowej, który ma być badany i tym podobne.
Rozpuszczalnik do otrzymywania roztworu inhibitora deacetylazy histonowej nie jest konkretnie ograniczony tak długo, jak może on rozpuszczać inhibitor deacetylazy histonowej i nie wykazuje toksyczności wobec komórki testowej. Ogólnie, przygotowuje się zatężony roztwór z etanolem, PEG400, 10% roztworem HCO-60, sulfotlenkiem dimetylu i tym podobnymi, rozpuszczalnik stanowiący ich mieszaninę i tym podobne i rozcieńcza się do żądanego stężenia pożywką hodowlaną, buforem fizjologicznym i tym podobne i stosuje się. Stężenie inhibitora deacetylazy histonowej w roztworze wynosi na ogól 0,001-1000 nM, korzystnie 0,01-100 nM, bardziej korzystnie 0,1-10 nM, a w niektórych przypadkach, roztwór jest seryjnie rozcieńczany i serie kolejnych rozcieńczeń są wykonywane i stosowane.
W tym sposobie okreś lania, liczba komórek testowych, które mają być inokulowane, może być odpowiednio podwyższona lub obniżona w zależności od czasu traktowania inhibitorem deacetylazy histonowej i tym podobnych. Na ogół wynosi około 1x103-1x106 komórek, korzystnie około 1x1041x105 komórek, na 1 ml pożywki hodowlanej.
Czas traktowania (czas hodowli) komórki testowej z inhibitorem deacetylazy histonowej jest odpowiednio ustawiony zgodnie z rodzajem i stężeniem komórki testowej i inhibitora i innych warunków hodowli i różni się w zależności od określonego obiektu, ale ogólnie wynosi 1-100 godzin, korzystnie 1-72 godzin. Jeśli celowe jest potwierdzenie długoterminowego przedłużonego działania przeciwnowotworowego, ustawiony jest porównywalnie dłuższy czas traktowania. Komórka testowa jest na ogół traktowana (hodowana) w temp. 37°C w obecności 5% CO2+95% O2.
(ii) Etap pomiaru zmiany ekspresji specyficznego genu i/lub specyficznego białka w komórce testowej przed i po traktowaniu tym inhibitorem i porównanie ilości uzyskanych w wyniku obu ekspresji
Etap ten można przeprowadzić dowolnym sposobem, w którym można obserwować poziom ekspresji specyficznego genu i/lub specyficznego białka w komórce testowej. Na przykład, mogą być wymienione procedury opisane poniżej.
(1) Gen, zwłaszcza mRNA, lub białko ekstrahuje się z komórki testowej przed traktowaniem inhibitorem deacetylazy histonowej.
(2) Jak szczegółowo opisano pod wspomnianym powyżej (i) etap traktowania komórki testowej inhibitorem deacetylazy histonowej, po potraktowaniu komórki testowej inhibitorem deacetylazy histonowej i hodowaniu przez podany okres, z traktowanych komórek ekstrahuje się gen, zwłaszcza mRNA, lub białko w ten sam sposób jak wymieniono powyżej w (1).
(3) Stosując substancje o specyficznym powinowactwie względem specyficznego genu (lub specyficznego białka), wykrywa się specyficzny gen (lub specyficzne białko). Specyficzny gen (lub specyficzne białko) oznacza tutaj gen lub białko, które wykazuje zmianę poziomu ekspresji przed i po traktowaniu inhibitorem deacetylazy histonowej i wykazuje korelację między zmianą poziomu ekspresji a dział aniem przeciwnowotworowym inhibitora deacetylazy histonowej. Konkretnie mog ą być wymienione gen p21 (białko) i gen c-myc (białko). Gen p21 jest genem regulującym cykl komórkowy biorącym udział w supresji postępu cyklu komórkowego, a o jego produkcie wiadomo, że hamuje aktywność cykliny/kompleksu kinazy zależnej od cykliny, przez co blokowany jest postęp cyklu komórkowego. Gen c-myc koduje wewnątrzjądrowe białko, a ekspresja tego genu znacząco zmienia się wraz ze wzrostem komórki, rozwojem komórki i rakowaceniem. Zatem, przyciąga uwagę zaangażowanie produktu genu we wzrost komórki.
Dla konkretnego genu (lub konkretnego białka), który ma być zmierzony wystarczająco przydatny jest jeden rodzaj pomiaru, lecz gdy konieczne jest bardziej szczegółowe poznanie działania przeciwnowotworowego korzystnie mierzy się dwa lub więcej rodzajów konkretnych genów (lub konkretnych białek).
Substancja o specyficznym powinowactwie do konkretnego genu lub konkretnego białka jest wolna od jakiegokolwiek szczególnego ograniczenia, tak długo, jak ma taką czułość, która pozwala na wykrycie ekspresji w komórkach testowych. Termin „specyficzne powinowactwo, jak stosowano, oznacza właściwość hybrydyzacji lub wiązania się jedynie z docelowym genem lub białkiem. Jako substancja do wykrywania konkretnego genu, może być wymieniona substancja całkowicie komplementarna do całego lub części tego genu, lub substancja zawierająca jedną lub kilka niezgodności w zakresie zadawalającym wymienioną powyżej właściwość. Konkretne przykłady obejmują oligo- lub
PL 210 794 B1 polinukleotydy zawierające część lub całość podstawowej sekwencji genu i sekwencji do niego komplementarnych i tym podobnych a wybiera się odpowiednią substancję w zależności od postaci genu, który ma być wykryty. Substancja nie stanowi ograniczenia, dopóki substancja wykazuje specyficzne powinowactwo do genu i może być syntetyzowana lub utworzona przez odcięcie od genu koniecznej części i oczyszczenie części tradycyjnym sposobem. Substancja może być znakowana substancją fluorescencyjną, enzymem, izotopem promieniotwórczym i tym podobne. Jako substancję, która ma być stosowana do wykrywania konkretnego białka, można wymienić, na przykład, przeciwciało mające specyficzne powinowactwo do białka lub jego fragmentu. Jego specyficzne powinowactwo oznacza zdolność do szczególnego rozpoznawania białka w reakcji antygen-przeciwciało i jego związania. Przeciwciało i jego fragment nie są szczególnie ograniczone tak długo, jak mogą one specyficznie wiązać się z białkiem i mogą być dowolnym poliklonalnym przeciwciałem, monoklonalnym przeciwciałem i ich funkcjonalnymi fragmentami. Te przeciwciała i ich funkcjonalne fragmenty mogą być wytworzone według sposobu ogólnie stosowanego w odnośnej dziedzinie. Te przeciwciała i ich fragmenty mogą być znakowane substancją fluorescencyjną, enzymem, izotopem promieniotwórczym i tym podobne.
Ekstrakcję genu, zwłaszcza mRNA, jak i ekstrakcję białka z komórki testowej można przeprowadzić sposobem ogólnie stosowanym w odnośnej dziedzinie, lub przez odpowiednie połączenie takich sposobów. Gdy ekstrahowano mRNA, jego ekspresję badano zgodnie ze sposobem ogólnie stosowanym w odnośnej dziedzinie, takim jak Northern blot, RT-PCR i tym podobne, z użyciem substancji mających specyficzne powinowactwo do wymienionego powyżej specyficznego genu. Z drugiej strony, gdy ekstrahowano białko, jego ekspresję badano zgodnie ze sposobem ogólnie stosowanym w odnośnej dziedzinie, takim jak immunoblot, Western blot i tym podobne, z użyciem substancji (przeciwciało, jego fragment itp.) mających specyficzne powinowactwo względem wymienionego powyżej specyficznego białka.
W ten sposób, zmierzono i porównano zmiany w ekspresji specyficznego genu (lub specyficznego białka) w komórce testowej przed i po traktowaniu inhibitorem deacetylazy histonowej, aby określić czy badany inhibitor deacetylazy histonowej skutecznie wykazał lub nie działanie przeciwnowotworowe w testowanej komórce. Gdy jako wskaźnik stosuje się gen p21 (lub białko), a działanie inhibitorem deacetylazy histonu zwiększa poziom ekspresji, inhibitor jest określony, jako wykazujący działanie przeciwnowotworowe przeciwko nowotworowej komórce testowej. Gdy jako wskaźnik stosowany jest gen c-myc (lub białko), a działanie inhibitorem deacetylazy histonowej obniża poziom ekspresji, inhibitor jest określony, jako wykazujący działanie przeciwnowotworowe przeciwko nowotworowej komórce testowej. Gdy nowotworowa komórka otrzymana od pacjenta w warunkach klinicznych jest stosowana jako komórka testowa, osiągalne jest przewidywanie działania przeciwnowotworowego odzwierciedlającego osobniczą specyficzność pacjenta.
Przez wykorzystanie wymienionego powyżej sposobu określania działania przeciwnowotworowego inhibitora deacetylazy histonowej może być dostarczony sposób przeszukiwania inhibitora deacetylazy histonowej mającego specyficzne działanie przeciwnowotworowe w stosunku do miejsca nowotworu (rodzaju). Specyficzność każdego inhibitora w stosunku do miejsca nowotworu może być określona przez stosowanie komórki testowej pochodzącej z docelowego nowotworu, traktowanie jej inhibitorem deacetylazy histonowej, którego działanie ma być zmierzone, określenie obecności lub w inny sposób dział ania przeciwnowotworowego zgodnie z wymienionym powyż ej sposobem.
Ponadto opisano sposób otrzymywania genu, który ma być wskaźnikiem do przewidywania skuteczności FK228. Przez analizowanie ekspresji genu (grupy) otrzymanej w takim sposobie można uzyskać informację czy FK228 jest przydatny lub nie w leczeniu, czy lub nie docelowy rak jest zaatakowany przez FK228 i tym podobne, co może mieć wkład w „medycynę na miarę.
Sposób przeprowadzono konkretnie jak następuje. (1) etap traktowania komórki nowotworu wrażliwej na FK228 i komórki nowotworu odpornej na FK228.
Komórka nowotworu wrażliwa na FK228 oznacza tutaj nowotworową komórkę, której wzrost jest stłumiony przez typ FK228. Na przykład, można wymienić, komórkę raka prostaty PC-3, jak przedstawiono w przykładach opisanych poniżej. Ponadto, SC-6, która jest komórką raka żołądka, jest rodzajem komórki nowotworu wrażliwej na FK228. Z drugiej strony, komórką nowotworu odporną na FK228 jest nowotworowa komórka, typu FK228, która nie wykazuje supresji swego wzrostu, aFK228 nie może zapewnić swojego działania na supresję nowotworu. Na przykład, można wymienić komórkę raka nerki ACHN, jak przedstawiono w przykładach opisanych poniżej. Ponadto, A498, która jest komórką raka nerki, jest jedną z rodzaju komórek nowotworowych odpornych na FK228.
Traktowanie komórek nowotworowych FK228 przeprowadza się w ten sam sposób jak wspomniano powyżej w Etapie traktowania badanej komórki inhibitorem deacetylazy histonowej.
PL 210 794 B1 (2) Etap selekcji genów, które wykazują podwyższoną lub obniżoną ekspresję w wyniku traktowania w etapie (1) powyżej.
Ten etap selekcji genów można przeprowadzić stosując techniki opisane w niniejszym opisie i sposoby ogólnie stosowane w odnośnej dziedzinie. Technika wykorzystująca czip genowy jest korzystnie stosowana z uwagi na korzyści możliwej analizy dużej ilości produktu ekspresji genu w jednym czasie.
(3) Etap wyboru, z genów wybranych w etapie (2) powyżej, (i) gen, który wykazuje zwiększoną ekspresję ze względu na traktowanie FK228, wyższą ekspresję w komórce nowotworowej wrażliwej na FK228 i obniżoną ekspresję w komórce nowotworowej odpornej na FK228, (ii) gen, który wykazuje zwiększoną ekspresję ze względu na traktowanie FK228, obniżoną ekspresję w komórce nowotworowej wrażliwej na FK228 i wyższą ekspresję w komórce nowotworowej opornej na FK228, (iii) gen, który wykazuje obniżoną ekspresję ze względu na traktowanie FK228, wyższą ekspresję w komórce nowotworowej wrażliwej na FK228 i obniżoną ekspresję w komórce nowotworowej odpornej na FK228, lub (iv) gen, który wykazuje obniżoną ekspresję ze względu na traktowanie FK228, obniżoną ekspresję w komórce nowotworowej wrażliwej na FK228 i wyższą ekspresję w komórce nowotworowej odpornej na FK228.
Innymi słowy, etap ten jest przeznaczony do selekcji genów, które wykazują pewne zmiany w ekspresji (wzrost lub obniżenie) ze względu na traktowanie FK228 i wykazują różne stany ekspresji w zależności od tego czy są wrażliwe na FK228, czy nie. Analiza stanu ekspresji genu (grupy) moż e być użytecznym środkiem do przewidywania skuteczności FK228 bez podawania FK228.
Sposób określania wzrostu lub obniżania ekspresji genu można przeprowadzić zgodnie ze sposobem ogólnie stosowanym w odnośnej dziedzinie i jest przeprowadzony przy użyciu technik również opisanych w niniejszym opisie. Technika wykorzystująca czip genowy jest korzystnie stosowana ze względu na korzyści możliwej analizy wysokiego poziomu ekspresji genu w jednym czasie.
P r z y k ł a d y
Niniejszy wynalazek został wyjaśniony konkretnie i szczegółowo poniżej w następujących przykładach, które nie mają być uważane za ograniczające zakres wynalazku.
P r z y k ł a d 1 (1) Wytwarzanie środka farmaceutycznego
Odważono konieczną ilość FR901228 i dodano rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie). Mieszaninę sonikowano aby umoż liwić rozpuszczenie. Substancję Paklitaksel bę d ą c ą kontrolą pozytywną rozpuszczono w roztworze Cremophor EL/etanol (1:1) do 24 mg/ml przed testem, i zabezpieczono w chłodziarce. Tuż przed użyciem, rozcieńczano 9-krotną ilością fizjologicznego roztworu soli w wodzie do 2,4 mg/ml (skład rozpuszczalnika: 5% Cremophor EL-5% etanol-90% roztwór soli w wodzie}.
(2) Test na zwierzętach
Do badania przeciwnowotworowego środka farmaceutycznego, nabyto myszy BALB/cANnNCrj-nu/nu (samce, 6-cio tygodniowe) od Charles River Japonia i po aklimatyzacji przez nie mniej niż jeden tydzień, zastosowano w teście. Myszy hodowano w środowisku SPF i pozostawiono im wolny dostęp do wody i karmy.
(3) Test nowotworowy
Hodowana ludzka linia komórkowa raka prostaty (PC-3: dostępna od Japanese Foundation for Cancer Research, Cancer Chemotherapy Center, Fundamental Research) została podskórnie wszczepiona nagiej myszy w ilości 2-3x107 komórek. Rosnący guz lity hodowano w hodowli następczej przez nie mniej niż 3 pokolenia i stosowano w teście.
(4) Wszczepienie doświadczalne i grupowanie
Guz lity hodowany u nagiej myszy został podskórnie wszczepiony po prawej stronie grzbietu myszy jako około 3 mm kwadratowy fragment tkanki nowotworowej. Po wszczepieniu nowotworu, gdy objętość nowotworu (1/2 x dłuższa średnica x krótsza średnica2) osiągnęła 100-300 mm3, myszy grupowano w grupy po 6 myszy na grupę, aby określić poziom wielkości guza.
(5) Podawanie
Podawanie rozpoczęto w dniu grupowania (Dzień 0). FR901228 podawano dożylnie grupie podawania FR901228 3 krotnie co 4 dni (q4dx3) (3,2 i 1,8 mg/kg). Paklitaksel (24 mg/kg) podawano dożylnie przez 5 kolejnych dni (qdx5) grupie będącej kontrolą pozytywną dla otrzymującej substancję
PL 210 794 B1
Paklitaksel. Tylko rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie) podawano (q4dx3) grupie kontrolnej. Ilość płynu przy każdym podawaniu obliczono (0,1 ml/10 g masy ciała) w oparciu o masę ciała mierzoną w dniu podawania. Należy zauważyć, że 3,2 mg/kg/dzień (q4dx3) FR901228 i 24 mg/kg/dzień (qdx5) Paklitakselu stanowiło maksymalną tolerowaną dawkę (MTD).
(6) Pomiar wielkości guza i masy ciała
Wielkości nowotworu (dłuższa średnica, krótsza średnica) i masę ciała mierzono dwa razy w tygodniu od dnia 0.
(7) Ocena działania przeciwnowotworowego
Poziom wzrostu guza określono w oparciu o szybkość wzrostu nowotworu (względem objętości nowotworu). Zwiększenie stopnia supresji wyrażono jako względny stosunek objętości guza po dniu 0 do objętości guza w dniu 0 jako 1. Działanie przeciwnowotworowe określono 14 dnia (Dzień 14) od rozpoczęcia podawania środka farmaceutycznego. Gdy stosunek szybkości wzrostu nowotworu w grupach otrzymują cych ś rodek farmaceutyczny wzglę dem grupy kontrolnej (podawanie rozpuszczalnika), (T/C%), wynosił nie więcej niż 50% i znacząca różnica (P<0,01) została stwierdzona w teście Mann Whitney u-test, środek farmaceutyczny określono jako skuteczny.
Wyniki przedstawiono na Fig. 1. FR901228 wykazał działanie przeciwnowotworowe in vivo przeciwko ludzkiemu rakowi prostaty.
P r z y k ł a d 2 (1) Wytworzenie środka farmaceutycznego
Odważono konieczną ilość FR901228 i dodano rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie). Mieszaninę sonikowano aby umo ż liwić rozpuszczenie.
(2) Test na zwierzętach
Do badania przeciwnowotworowego środka farmaceutycznego nabyto myszy Fox Chase C.B17/Icr-SCID.Jcl (samce, 6-cio tygodniowe) od CLEA JAPONIA INC. i po aklimatyzacji przez nie mniej niż jeden tydzień, stosowano w teście. Myszy hodowano w środowisku SPF i pozostawiono im wolny dostęp do wody i karmy.
(3) Test nowotworowy
Hodowaną ludzką linię komórkową chłoniaka (U937: otrzymaną od Dr Minowada, Hayashibara Biochemical Laboratories, Inc.) hodowano w RPMI (zawierającej 10% FCS) i subkulturowano in vitro.
(4) Wszczepienie doświadczalne i grupowanie
Myszom podano śródotrzewnowo Cyklofosfamid (Shionogi & Co., Ltd., 150 mg/kg). Następnego dnia wszczepiono śródotrzewnowo chłoniak (1x10-7 komórek) hodowany w hodowli następczej in vitro. Po wszczepieniu nowotworu, aby określić poziom masy ciała, myszy grupowano w grupy po 6 myszy (grupa kontrolna 12).
Podawanie
Podawanie rozpoczęto w dniu grupowania (Dzień 0). FR901228 podawano śródotrzewnowo grupie otrzymującej FR901228 raz lub dwa razy w tygodniu (0,1-1,0 mg/kg). Grupie kontrolnej podawano tylko rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie) .
(6) Ocena
Jako działanie przeciwnowotworowe, policzono dni przeżycia myszy.
Wyniki przedstawiono na Fig. 2. Na Fig. 2(a) przedstawiono wyniki podawania FR901228 raz w tygodniu, a na Fig. 2(b) przedstawiono wyniki podawania FR901228 dwa razy w tygodniu. FR901228 wykazywał działanie przeciwnowotworowe in vivo przeciwko ludzkiemu chłoniakowi.
P r z y k ł a d 3 (1) Wytworzenie środka farmaceutycznego
Odważono konieczną ilość FR901228 i dodano rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie). Mieszaninę sonikowano, aby umoż liwić rozpuszczenie. Substancję będącą kontrolą pozytywną Paklitaksel rozpuszczono w roztworze Cremophoru EL/etanol (1:1) do 24 mg/ml przed testem, i zabezpieczono w chłodziarce. Tuż przed użyciem, rozcieńczano 9-krotną ilością fizjologicznego roztworu soli w wodzie do 2,4 mg/ml (skład rozpuszczalnika: 5% Cremophor EL-5% etanol-90% roztwór soli w wodzie).
(2) Test na zwierzętach
Do badania przeciwnowotworowego środka farmaceutycznego, myszy BALB/cANnNCrj-nu/nu (samce, 6-cio tygodniowe) zakupiono od Charles River Japonia i po aklimatyzacji przez nie mniej niż jeden tydzień, stosowano w teście. Myszy hodowano w środowisku SPF i pozostawiono im wolny dostęp do wody i karmy.
PL 210 794 B1 (3) Test nowotworowy
Hodowaną ludzką linię komórkową raka nerki 1 (ACHN: dostępną z ATCC) i hodowaną ludzką linię komórkową raka prostaty 1 (PC-Si dostępną z ATCC) wszczepiano podskórnie w ilości 2-3x107 komórek u nagiej myszy. Rosnący guz lity hodowano w hodowli następczej nie mniej niż 3 pokolenia i stosowano w teście.
(4) Wszczepienie doświadczalne i grupowanie
Guz lity hodowany w hodowli następczej nagiej myszy został podskórnie wszczepiony po prawej stronie grzbietu myszy jako około 3 mm kwadratowy fragment tkanki nowotworowej. Po wszczepieniu nowotworu, gdy objętość nowotworu (1/2 x dłuższa średnica x krótsza średnica2) osiągnęła 100-300 mm3, myszy grupowano w grupy po 6 myszy na grupę, aby określić poziom wielkości nowotworu.
(5) Podawanie
Podawanie rozpoczęto w dniu grupowania (Dzień 0). FR901228 podawano dożylnie grupie otrzymującej FR901228 3 razy co 4 dni (q4dx3) (3,2 i 1,8 mg/kg). Paklitaksel podawano dożylnie (24 mg/kg) przez 5 kolejnych dni (qdx5) grupie będącej kontrolą pozytywną, dla grupy otrzymującej Paklitaksel. Tylko rozpuszczalnik (10% HCO-60/roztwór soli w wodzie) podawano (q4dx3) grupie kontrolnej. Ilość płynu przy każdym podawaniu obliczono (0,1 ml/10 g masy ciała) w oparciu o masę ciała mierzoną w dniu podawania. Należy zauważyć, że 3,2 mg/kg/dzień (q4dx3) FR901228 i 24 mg/kg/dzień (qdx5) Paksitaksela były ich MTD.
(6) Pomiar wielkości guza i masy ciała
Wielkości nowotworu (dłuższa średnica, krótsza średnica) i masy ciała mierzono dwa razy w tygodniu od dnia 0.
(7) Ocena działania przeciwnowotworowego
Poziom wzrostu guza oceniano w oparciu o szybkość wzrostu nowotworu (Relatywna Objętość Nowotworu). Szybkość supresji wzrostu wyrażono jako względny stosunek objętości guza po dniu 0 do objętości guza w dniu 0 jako 1. Działanie przeciwnowotworowe określono w dniu 14. (Dzień 14) od rozpoczęcia podawania środka farmaceutycznego. Gdy stosunek grupy otrzymującej środek farmaceutyczny do szybkości wzrostu nowotworu w grupie kontrolnej (podawanie rozpuszczalnika) (T/C%) wynosił nie więcej niż 50%, i istotna różnica (P<0,01) została stwierdzona w teście Manna Whitney U-test, środek farmaceutyczny określono jako skuteczny.
Wyniki przedstawiono na Fig. 3. FR901228 wykazywał silne działanie przeciwnowotworowe przeciwko PC-3 w dawce 3,2 mg/kg (Fig. 3(a)) lecz nie wykazywał działania przeciwnowotworowego przeciwko ACHN (Fig. 3(b)).
P r z y k ł a d 4 (1) Wytwarzanie środka farmaceutycznego
Odważono konieczną ilość FR901228 i rozpuszczono w rozpuszczalniku (99,5% etanol) do stężenia 1 mg/ml. Następnie, roztwór rozcieńczono pożywką hodowlaną.
(2) Test nowotworowy
Hodowaną ludzką komórkę raka (PC-3 i ACHN) hodowano w DMEM (zawierającej 10% FCS).
(3) Hodowla i ekstrakcja RNA
Komórki zaszczepiono w ilości 2x106 komórek na szalkę hodowlaną i hodowano w obecności FR901228 (5 ng/ml) przez określony czas. Po zakończeniu hodowli, RNA ekstrahowano odczynnikiem TRIZOL (GIBCO BRL) według podręcznej instrukcji.
(4) PCR w czasie rzeczywistym
RNA poddano odwrotnej transkrypcji stosując odczynnik odwrotnej transkrypcji Taq-man (PE Biosystem) według podręcznej instrukcji. Następnie, gen p21 amplifikowano stosując mieszaninę SYBR green PCR master (PE Biosystem) i starter 5'-GGC AGA CCA GCA TGA CAC ATT-3' (p21 powyżej) (Id. Sekw. Nr 1), 5'-GGA TTA GGG CTT CCT CTT GGA G-3' (Id. Sekw. Nr 2) według podręcznej instrukcji, i wykrywano detektorem sekwencji ABI 7700 PRISM (PE Biosystem). Poziom ekspresji genu p21 obliczono na podstawie krzywej standardowej, podzielonej przez poziom ekspresji genu β-aktyny, który stosowano jako wewnętrzny wzorzec, i wyrażono jako standaryzowany względny poziom ekspresji.
Wyniki przedstawiono na Fig. 4. W wyniku kontaktu z FR901228 in vitro, PC-3 (Fig. 4 (a)) z upływem czasu wykazywał zwiększoną ekspresję genu p21. Przeciwnie, ACHN nie wykazywał zwiększonej ekspresji genu p21 (Fig. 4(b)). Gdy nie był traktowany, gen p21 wykazywał niewielką ekspresję w PC-3, ale wykazywał ekspresję w ACHN (Fig. 4(c)).
PL 210 794 B1
P r z y k ł a d 5
Ludzki rak prostaty PC-3 lub rak nerki ACHN został podskórnie wszczepiony nagiej myszy, a gdy wielkość nowotworu osią gnęła 100-300 mg, podawano doż ylnie FR901228 (3.2 mg/kg). Nowotwór usunięto z wygaśnięciem czasu, i po ekstrakcji RNA, poziom ekspresji genu p21 i genu c-myc wyznaczano metodą PCR w czasie rzeczywistym, w ten sam sposób jak w przykładzie 4. Gen c-myc amplifikowano stosując mieszaninę SYBR green PCR master mix (PE Biosystem) i starter 5'-GAG AGA TCA GCA ACA ACC GAA A-3' (ludzki c-myc powyżej) (Id. Sekw. Nr 3), 5'-TTG TGT GTT CGC CTC TTG ACA T-3' (ludzki c-myc poniżej) (Id. Sekw. Nr 4) według podręcznej instrukcji, i wykrywano detektorem sekwencji ABI 7700 PRISM (PE Biosystem).
Wyniki przedstawiono na Fig. 5. PC-3 wykazywał zwiększoną ekspresję genu p21 in vivo z pikiem w 3 godziny po podawaniu FR901228 (Fig. 5(a)). Przeciwnie, ACHN nie wykazał zwiększonej ekspresji genu p21 (Fig. 5(a)). Podczas gdy gen c-myc wykazywał obniżoną ekspresję w PC-3 i wykazywał zwiększoną ekspresję w ACHN (Fig. (b)).
P r z y k ł a d 6: Analiza (in vitro) ekspresji genu przez FK228 w komórce nowotworowej stosując moduł genowy
Wpływ FK228 na ekspresję in vitro genu w ludzkich nowotworowych komórkach analizowano stosując moduł genowy.
<materiał * procedura>
(1) Materiały testowe
Środek farmaceutyczny FK228 (FR901228)
Stosowane stężenie: 50 ng/ml sposób wytwarzania: roztwór 10 mg/ml wytworzono w etanolu wcześniej i seryjnie rozcieńczono pożywką hodowlaną, aby otrzymać roztwory 50 ng/ml, postać dawkowania: roztwór (przygotowano tuż przed użyciem)
Zastosowane komórki: ludzki rak prostaty (PC-3), ludzki chłoniak (U937), ludzki rak nerki (ACHN)
Pożywka hodowlana: DMEM (dla PC-3, ACHN), RPMI1640 (dla U937); Obie otrzymane z Nikken Biomedical Laboratory, również zawierające FCS (Moregate) i Penicylinę-Streptomycynę (ICN Biomedicals Inc.).
ekstrakcja RNA: Zestaw RNeasy Mini (50) (Qiagen) RNaza, DNaza bezwodna (Life Technologies)
Synteza DNA: Superscript Choice System (Life Technologies) Etachinmate (Nippon gene)
T7-(dT)24 Starter (Amersham Pharmacia) synteza cRNA: Zestaw BioArray RNA Transcript Labeling (Amersham Pharmacia) fragmentacja cRNA: Trizma Base (SIGMA) lodowy kwas octowy (SIGMA) octan magnezu (SIGMA) octan potasu (SIGMA)
Hybrydyzacja: Zestaw do kontroli eukariotycznej hybrydyzacji (Amersham Pharmacia)
0,5M roztwór EDTA (SIGMA)
MES Sól sodowa (SIGMA)
MES wolny kwas jednowodorowy (SIGMA)
Sperma śledzia DNA (Promega)
Acetylowana Albumina z surowicy bydlęcej Soln. (Life Technologies)
Barwienie: Fikoerytryna-Streptawidyna (Molecular Probes) kozie IgG, Czyste do analizy (SIGMA)
Anty-streptawidyna ab (kozia), biotynylowana (Vector Lab)
Zastosowany czip: test HuGeneFL (Amersham Pharmacia) (2) Uzyskiwanie komórek i ekstrakcja RNA
Ludzkie nowotworowe komórki (PC-3, U937, ACHN), które osiągnęły konfluencję w kolbach F75 poddano działaniu trypsyny, aby otrzymać zawiesinę pojedynczych komórek, które szczepiono do pięciu kolb F75 i hodowano przez 24 godziny. Pożywkę hodowlaną usunięto i dodano świeżą pożywkę hodowlaną (18 ml) i 10-krotne stężenie (50 ng/ml) roztworu FR901228 (2 mL). Mieszaninę hodowano w inkubatorze w CO2 w temp. 37°C przez okreś lony czas (0, 1, 3, 12 i 24 godziny). Po zakoń czeniu hodowli, pożywkę hodowlaną usunięto i całkowity RNA ekstrahowano według protokołu zestawu RNeasy Mini Kit (50) (Qiagen). RNA określano ilościowo i potwierdzano elektroforetycznie.
PL 210 794 B1 (3) Synteza cRNA
Według podręcznika GeneChip, rozdział 2 - rozdział 4, i podręczników do RNeasy Mini Kit i RNA Transcript Labeling Kit, oczyszczono RNA, cDNA zsyntetyzowano, cRNA zsyntetyzowano i cRNA fragmentowano.
(4) Hybrydyzacja, Przemywanie-barwienie. Skanowanie
Hybrydyzację, przemywanie-barwienie i skanowanie przeprowadzono według podręcznika GeneChip rozdział 5 - rozdział 7.
(5) Analiza
Analizowano stosując GeneSpring (oprogramowanie do analizy układów danych: wyprodukowane przez Silicon Genetics).
<Wyniki>
Ludzki rak prostaty PC-3 i ludzki chłoniak U937, których komórki nowotworowe są wrażliwe na FK228s, i ludzki rak nerki ACHN, którego komórki nowotworowe są odporne na FK228, doprowadzono do kontaktu in vitro z FK228 z wygaśnięciem czasu, a następnie ekstrahowano RNA, i 7070 genów wykrywalnych stosując GeneChip badano pod kątem genów wykazujących zmianę ekspresji ze względu na FK228. Takie geny analizowano według poniższej procedury.
Analiza 1: Selekcja genu, który wykazuje zmianę ekspresji ze względu na hamowanie deacetylazy histonu.
Aby ograniczyć gen, który wykazuje zmianę ekspresji ze względu na FK228, wybrano gen wykazujący liniową zmianę ekspresji (analiza stanu genu według GeneSpring: gen, który wykazuje zmianę ekspresji w czasie 0,5 lub więcej lub 0,5 lub mniej w każdym czasie).
Analiza 2: Selekcja genu, zaangażowanego w wydajność
W wyniku kontaktu z FK228 przez 72 godziny, efekt supresji wzrostu w PC-3, U937 i ACHN daje odpowiednio wartość IC50 3,17; 3,20 i 4;25 ng/ml, wykazując prawie ten sam stopień wzrostu działania supresyjnego na te komórki nowotworowe. Na podstawie tych wyników, geny odnoszące się do wzrostu supresji uważane były za ogólnie wykazujące zmianę ekspresji w dowolnej komórce. Stwierdzono 105 genów, które typowo wykazywały podwyższoną ekspresję w tych trzech rodzajach ludzkich nowotworowych komórek i 100 genów, które ogólnie wykazują obniżoną ekspresję w trzech rodzajach ludzkich nowotworowych komórek.
P r z y k ł a d 7: Analiza ekspresji genu (in vivo) z zastosowaniem FK228, w komórce nowotworowej stosując czip genowy
Analizowano wpływ FK228 na ekspresję in vivo genu w ludzkiej komórce nowotworowej stosując czip genowy.
<materiał • procedura>
(1) Materiały testowe
Środek farmaceutyczny FK228 (FR901228) dawka: 10 mg/kg dawka podawana: 10 ml/kg rozpuszczalnik: 10% HCO-60/roztwór soli w wodzie postać dawkowania: roztwór (przygotowano tuż przed użyciem)
Komórka guza: ludzki rak prostaty PC-3 (podskórne fragment guza 3 mm x 3 mm x 3 mm/miejsce wszczepienia myszy) ludzki rak żołądka SC - 6; otrzymany od Central Institute for Experimental Animals (fragment guza 3 mm x 3 mm x 3 mm/podskórne miejsce wszczepienia myszy) ludzki rak nerki ACHN (fragment guza 3 mm x 3 mm x 3 mm/miejsce wszczepienia myszy podskórnie) ludzki rak nerek A4 98; otrzymany z ATCC (fragment guza 3 mm x 3 mm x 3 mm/podskórne miejsce wszczepienia myszy)
Hodowano w hodowli następczej u zwierzęcia: samiec BALB c/nu/nu ekstrakcja RNA: RNeasy Mini Kit (50) (Qiagen)
RNaza, DNaza bezwodna (Life Technologies)
Synteza DNA: Superscript Choice System (Life Technologies) Etachinmate (Nippon gene) T7-(dT)24 Starter (Amersham Pharmacia) synteza cRNA: BioArray RNA Transcript Labeling Kit (Amersham Pharmacia) fragmentacja cRNA: Trizma Base (SIGMA) lodowy kwas octowy (SIGMA) octan magnezu (SIGMA) octan potasu (SIGMA)
Hybrydyzacja: Eucaryotic Hybrydyzacja Control Kit (Amersham Pharmacia)
PL 210 794 B1 roztwór 0,5 M EDTA (SIGMA)
MES Sól sodowa (SIGMA)
MES wolny kwas jednowodorowy (SIGMA)
Sperma śledzia DNA (Promega)
Acetylowana albumina z surowicy bydlęcej Soln. (Life Technologies)
Zastosowany moduł: test HuGeneFL (Amersham Pharmacia) (2) Uzyskiwanie komórek i ekstrakcja RNA mm kwadratowy nowotworowy fragment (PC-3, SC-6, ACHN, A498) został podskórnie wszczepiony nagiej myszy i gdy nowotwór osiągnął około 100 mg (dłuższa średnica 9 mm, krótsza średnica 8 mm), podawano dożylnie FR901228 (10 mg/kg). 0, 0,5; 1; 2 i 4 godziny po podaniu FR901228, nowotwór usunięto i wyekstrahowano całkowite RNA według protokołu zestawu RNeasy Mini Kit (50) (Qiagen). RNA określono ilościowo i potwierdzono elektroforetycznie.
(3) Synteza cRNA
Według podręcznika GeneChip. Rozdział 2 - Rozdział 4, i podręczników RNeasy Mini Kit i RNA Transcript Labeling Kit, oczyszczono RNA, zsyntetyzowano cDNA, zsyntetyzowano cRNA i fragmentowano cRNA.
(4) Hybrydyzacja, Przemywanie-barwienie, Skanowanie
Hybrydyzację, przemywanie-barwienie i skanowanie przeprowadzono według podręcznika GeneChip Rozdział 5 - Rozdział 7.
(5) Analiza
Analizowano stosując GeneSpring (oprogramowanie do analizy układów danych: wyprodukowane przez Silicon Genetics).
<Wyniki>
FR901228 (10 mg/kg) podawano dożylnie myszy niosącej ludzkiego raka prostaty PC-3, ludzkiego raka żołądka SC-6, ludzkiego raka nerki ACHN i ludzkiego raka nerki A498 i nowotwór usunięto z wygaś nię ciem czasu (0, 0,5; 1, 2 i 4 godziny). RNA nastę pnie ekstrahowano i 7070 genów wykrywalnych za pomocą GeneChip, badano pod kątem genów wykazujących zmianę ekspresji ze względu na FR901228.
Zwiększenie stopnia supresji ludzkiego raka prostaty PC-3, ludzkiego raka żołądka SC-6, ludzkiego raka nerki ACHN i ludzkiego raka nerki A498 przez podawanie FR901228 (3,2 mg/kg) wynosiło odpowiednio 98%, 84%, 20% i 29%. Dlatego, PC-3 i SC-6 określono jako wrażliwe na FK228 nowotwory, a ACHN i A498 określono jako odporne na FK228 nowotwory.
P r z y k ł a d 8: Tryb ekspresji genu w nowotworach wrażliwych na FK228 i w nowotworach odpornych na FK228
Korelację pomiędzy trybem ekspresji genu a wydajnością FK228 wyznaczano w nowotworze, którego wrażliwość lub odporność potwierdzono w przykładzie 7. Uważne spojrzenie skierowano na geny (105 genów), które wykazywały zwiększoną ekspresję w wyniku działania FK228 i geny (100 genów), które wykazywały obniżoną ekspresję przez co, jak wykazano w teście in vitro w przykładzie 6, i zbadano korelację mię dzy tymi genami a wydajnoś cią . Ponadto przeszukiwano, genu, który wykazywał wysoką ekspresję w nowotworze wrażliwym i niską ekspresję w nowotworze odpornym i genu, który wykazywał niską ekspresję w nowotworze wrażliwym i wysoką ekspresję w nowotworze odpornym. W wyniku tego, ze 105 genów, które wykazywały zwiększoną ekspresję in vitro w wyniku działania FR901228, stwierdzono że 6 genów przedstawia wysoką ekspresję w nowotworze wrażliwym i niską ekspresję w nowotworze odpornym, a 4 geny przedstawiają niską ekspresję w nowotworze wrażliwym i wysoką ekspresję w nowotworze odpornym (Tabela 1). Ponadto, ze 100 genów, które wykazywały obniżoną ekspresję in vitro w wyniku traktowania FR901228, stwierdzono że 4 geny wykazują wysoką ekspresję w nowotworze wrażliwym i niską ekspresję w nowotworze wrażliwym, a 9 genów przedstawia niską ekspresję w nowotworze wrażliwym i wysoką ekspresję w nowotworze odpornym (Tabela 2).
T a b e l a 1: geny, które wykazywały wysoką ekspresję w nowotworze wraż liwym i niską ekspresję w nowotworze odpornym, lub geny, które wykazywały niską ekspresję w nowotworze wrażliwym i wysoką ekspresję w nowotworze odpornym (geny, które wykazywały zwiększoną ekspresję in vitro w wyniku traktowania FR901228)
Nowotwór wrażliwy (Wysoka) i Nowotwór odporny (Niska)
M13686_s_at (SFTP1) płucne białko związane z surfakantem
U68111_at (PPP1R2) Źródło: inhibitor genu ludzkiego białka fosfatazy
PL 210 794 B1 (PPP1R2), egzon 6 i peł en cds.
U60521_at (CASP9) kaspaza 9 proteaza cysteinowa związana z apoptozą
L19783_at (PIGH) fosfatydyloinozytolo glikan, klasa H
X60487_at (H4/h)
J04056_at (CBR1) reduktaza karbonylowa 1
Nowotwór wrażliwy (Niska) i Nowotwór odporny (Wysoka)
U56998_at (CNK) kinaza cytokino-indukcyjna
X68277_at (DUSP1) podwójnie specyficzna fosfataza 1
U65092_at (MSG1) specyficzny gen kodujący melanocyt 1
X01703_at Źródło: Ludzki gen kodujący alfa-tubulinę (b alfa 1).
T a b e l a 2: geny, które wykazywały wysoką ekspresję w nowotworze wrażliwym i niską ekspresję w nowotworze odpornym, lub geny, które wykazywały niską ekspresję w nowotworze wrażliwym i wysoką ekspresję w nowotworze odpornym (geny, które wykazywały obniżoną ekspresję in vitro w wyniku traktowania FR901228)
Nowotwór wrażliwy (Wysoka) i Nowotwór odporny (Niska)
X74987_s_at (RNASELI) rybonukleaza L (2',5'-oligoizoadenylan zależny od syntetazy) inhibitor
J03801_f_at (LYZ) lizozym (nerczyca skrobiowata)
U09578_at (MAPKAPK3) kinaza białek 3 aktywowana przez kinazę białek aktywowaną mitogenem
D50678_at (LRP8) lipoprteinowy receptor-związany z białkiem 8 o niskiej gęstości
Nowotwór wrażliwy (Niska) i Nowotwór odporny (Wysoka)
Y10375_s_at (SIRP-alpha 1)
Z14982_rnal_at (kodująca MHC proteasomowa podjednostka genu LAMP7-E1) alternatywne składanie
X62048_at (WEE1) weel + (S. pombe) homolog
X71874_cdsl_at (PSMB10) proteasom (prosom, macropain), podjednostka, typ beta, 10
U32849_at (NMI) N-myc (i STAT) interaktor
D55716_at (Plcdc47) Źródło: Ludzki mRNA dla Plcdc47, pełen cds.
M98045_at (FPGS) syntetaza folilopoliglutaminianowa U21551_at (ECA39)
Źródło: Ludzkie ECA39 mRHA, pełen cds.
U06681_at
U07620_at (PRKM10) kinaza białek aktywowana mitogenem 10 (kinaza MAP)
Geny te sugerują korelację z wydajnością FK228, i korelację z wrażliwością lub odpornością na działanie FK228, zatem wskazują na możliwość zastosowania tych genów jako znaczników do przewidywania skuteczności.
Zastosowanie przemysłowe
Środek terapeutyczny przeciwko rakowi prostaty według niniejszego wynalazku i środek terapeutyczny przeciwko chłoniakowi złośliwemu zawierają, jako składnik aktywny, FK228 (zwłaszcza FR901228) lub jego sól mające aktywność inhibitora deacetylazy histonowej, mają doskonałe działanie przeciwnowotworowe nie tylko in vitro lecz również in vivo. Dlatego, mogą być stosowane klinicznie, szczególnie są odpowiednie do leczenia raka. Ponadto stosując ujawniony tu sposób określania lub sposób przeszukiwania można opracować inhibitor deacetylazy histonowej zdolny do powodowania działania przeciwnowotworowego specyficznego dla docelowej komórki nowotworowej bez faktycznego podawania inhibitora człowiekowi.
Wolny tekst listy sekwencji
Id. Sekw. Nr 1: oligonukleotyd przeznaczony do działania jako starter PCR dla p21 mRNA.
Id. Sekw. Nr 2: oligonukleotyd przeznaczony do działania jako starter PCR dla p21 mRNA.
Id. Sekw. Nr 3: oligonukleotyd przeznaczony do działania jako starter PCR dla c-myc mRNA.
Id. Sekw. Nr 4: oligonukleotyd przeznaczony do działania jako starter PCR dla c-myc mRNA.
Id. Sekw. Nr 5: Xaa oznacza aminokwas przedstawiony wzorem NH2C(CHCH3)COOH.
Grupa karbonylowa we wzorze COOHCH2CH(CHCHC2H4SH)OH jest związana z grupą aminową Val, która jest pierwszym aminokwasem, a grupa hydroksylowa jest związana z grupą karboksylową Val, która jest czwartym aminokwasem, i grupa SH jest związana wiązaniem dwusiarczkowym z grupą SH Cys, która jest drugim aminokwasem.
Obecne zgłoszenie jest oparte na zgłoszeniu patentowym nr 2001-250846 złożonym w Japonii, zawartość którego jest załączona jako odnośnik.
PL 210 794 B1
Lista sekwencji <110> FUJISAWA PHARMACEUTICAL CO., LTD.
<120> Zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK 228 lub jego soli <130> 09491 <150> JP 2001-250846.
<151> 2001-8-21 <160> 5 <210> 1 <211> 21 <212> DNA <213> Sekwencja sztuczna <220>
<223> Oligonukleotyd zaprojektowany do stosowania jako starter PCR dla mRNA p21.
<400> 1 ggcagaccag catgacacat t 21 <210> 2 <211> 22 <212> DNA <213> Sekwencja sztuczna <220>
<223> Oligonukleotyd zaprojektowany do stosowania jako starter PCR dla mRNA p21.
<400> 2 ggattagggc ttcctcttgg ag 22 <210> 3 <211> 22 <212> DNA
PL 210 794 B1 <213> Sekwencja sztuczna <220>
<223 > Oligonukleotyd zaprojektowany do stosowania jako starter PCR dla mRNA c-myc.
<400> 3 gacagatcag caacaaccga aa 22 <210> 4 <211> 22 <212> DNA <213> Sekwencja sztuczna <220 >
<223> Oligonukleotyd zaprojektowany do stosowania jako starter PCR dla mRNA c-myc.
<400> 4 ttgtgtgttc gcctcttgac at 22 <210> 5 <211> 4 <212> PRT <213> Chromohacterium sp.
<22 0>
<221> MIEJSCE <222> (3) <223> Xaa oznacza aminokwas przedstawiony wzorem
NH2C(CHCH3) COOH.
<220>
<221> MIEJSCE <222> (1), (2), (4) <223> We wzorze COOHCH2CH (CHCHC2H4SH) OH, karboksylowa grupa jest związana z grupą aminową pierwszego aminokwasu Val, hydroksylowa grupa jest związana z grupą karboksylową czwartego aminokwasu Val, i grupa SH jest związana z grupą SH drugiego aminokwasu Cys mostkiem dwusiarczkowym.
Claims (4)
1. Zastosowanie związku przedstawionego wzorem (I) lub jego soli do wytwarzania środka do leczenia raka prostaty.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że związek przedstawiony wzorem (I) jest związkiem przedstawionym wzorem (II)
3. Zastosowanie według zastrz. 1, znamienne tym, że środek do leczenia raka prostaty ma działanie przeciwnowotworowe in vivo.
PL 210 794 B1
Rysunki
Szybkość wzrostu guza (stosunek względny objętości guza) —O— kontrola
FR901228 (1,8 mg/kg)
-B- FR901228 (3,2 mg/kg) — a — Paclitaxel (24 mg/kg)
Fig. 1
PL 210 794 B1 <r> 00-0 roztwór soli n = 12
CW n=6 (10% HCO60 —□ roztwór soli n = 12
ICO £3·
80 60 40 20 O xx dni po szczepieniu komórek dni po szczepieniu komórek
Fig. 2 — 10% HCO60 roztworso
O
FR901228
Δ- FR901228 (0,18 mg/kg)
O (0,32 mg/kg)
FR901228 □
oc
ER901228
V
FR901228 n-S (10% HCO60 sć
-·-
10% HCO60
roztwór soli
-O-
FR901228
(0,1 mg/kg)
-Δ-
HR901228
(0,18 mg/kg)
—o—
FR901228
(0,32 mg/kg)
FR901228
(0,56 mg/kg)
—V—
FR901228
(1 mg/kg)
PL 210 794 B1
Fig. 3
PC-3 ątkowego podań poc
ACHN dni od ątkowego podania poc —A— kontrola
FR901228 (1,8 mg/kg)
FR901228 (3,2 mg/kg) Paclitaxel (24 mg/kg) ra
N
3
U
-3
,--,
ω
1-1
Π3
c
tri
N
3
N
3
N
3
tn
3
12
Ή
'U
(U
U
Ό
d
'72
O
3
O
K
ω
O
12
o
O
Al
4-)
•m
N
cn
U
ω
O o
Ν σ> γ d
3
τ)
+4
a?
---
ω
r—i
ω
o
02
N
3
N
3
N
3
Cn
3
12
•r—1
Ό
(U
u
'72
d
'cn
O
d
O
IZ
Cfl
-p
Ό
0
d>
4->
•m
N
ra
JD
ω
O
PL 210 794 B1 (a) i-l
OJ a
G σ
•H i
0)
G a
ω a:
ε o
“Η
Ν □
(b) ί-*ί
CN a
G
G
-r-i n
ra <u
G a
a:
ε o
•H
N
O
Of o
0 1 3 12 24 czas (godziny) kontaktu z FR901228
0 ! 3 12 24 czas (godziny) kontaktu z FR901228 (c)
Ol a
G o
4) σι ~r-f 'ΓΊ
4!
G a
m a;
ε o
•H
M
O a
250
200
150
100
PC-3 ACHN poziom ekspresji genu p21 bez traktowania
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001250846 | 2001-08-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL368708A1 PL368708A1 (pl) | 2005-04-04 |
| PL210794B1 true PL210794B1 (pl) | 2012-03-30 |
Family
ID=19079582
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL368708A PL210794B1 (pl) | 2001-08-21 | 2002-08-20 | Zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK228 lub jego soli |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8470783B2 (pl) |
| EP (1) | EP1426054B1 (pl) |
| JP (1) | JP4238728B2 (pl) |
| AT (1) | ATE526029T1 (pl) |
| CA (1) | CA2457043A1 (pl) |
| DK (1) | DK1426054T3 (pl) |
| ES (1) | ES2371630T3 (pl) |
| HU (1) | HU229521B1 (pl) |
| MX (1) | MXPA04001612A (pl) |
| NO (1) | NO331682B1 (pl) |
| PL (1) | PL210794B1 (pl) |
| PT (1) | PT1426054E (pl) |
| RU (1) | RU2298414C2 (pl) |
| WO (1) | WO2003015810A1 (pl) |
Families Citing this family (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1492596A1 (en) * | 2002-04-05 | 2005-01-05 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Depsipeptide for therapy of kidney cancer |
| EP1595952A4 (en) * | 2003-02-19 | 2008-05-21 | Astellas Pharma Inc | METHOD FOR EVALUATING THE ANTITUMOR EFFECT OF A HISTONE DEACETYLASE INHIBITOR |
| DK2238982T3 (da) * | 2003-06-27 | 2013-01-28 | Astellas Pharma Inc | Terapeutisk middel til blødt væv-sarcom |
| US7314862B2 (en) * | 2003-09-25 | 2008-01-01 | Astellas Pharma Inc. | Antitumor agent |
| EP1713460A2 (en) * | 2003-12-10 | 2006-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Fk228 analogs and their use as hdac-inhibitors |
| WO2005059167A1 (en) * | 2003-12-18 | 2005-06-30 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P Angeletti Spa | Method for identifying histone deacetylase inhibitors |
| US7951780B2 (en) | 2004-02-25 | 2011-05-31 | Astellas Pharma Inc. | Antitumor agent |
| KR101167601B1 (ko) * | 2004-02-25 | 2012-07-27 | 아스텔라스세이야쿠 가부시키가이샤 | 항종양제 |
| US20050187148A1 (en) * | 2004-02-25 | 2005-08-25 | Yoshinori Naoe | Antitumor agent |
| JP2006000113A (ja) * | 2004-05-20 | 2006-01-05 | Masatomo Sakurai | 漢方医療の診断に用いる遺伝子およびその利用方法 |
| EP2522395A1 (en) | 2005-02-03 | 2012-11-14 | TopoTarget UK Limited | Combination therapies using HDAC inhibitors |
| US7604939B2 (en) | 2005-03-01 | 2009-10-20 | The Regents Of The University Of Michigan | Methods of identifying active BRM expression-promoting HDAC inhibitors |
| EP2494969B1 (en) | 2005-05-13 | 2015-03-25 | TopoTarget UK Limited | Pharmaceutical formulations of HDAC inhibitors |
| ZA200800901B (en) | 2005-07-14 | 2010-05-26 | Takeda San Diego Inc | Histone deacetylase inhibitors |
| WO2007024574A2 (en) * | 2005-08-19 | 2007-03-01 | Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Topical formulations of histone deacetylase inhibitors and methods of using the same |
| AU2006313517B2 (en) | 2005-11-10 | 2013-06-27 | Topotarget Uk Limited | Histone deacetylase (HDAC) inhibitors (PXD101) for the treatment of cancer alone or in combination with chemotherapeutic agent |
| WO2007061939A2 (en) * | 2005-11-18 | 2007-05-31 | Gloucester Pharmaceuticals, Inc. | Metabolite derivatives of the hdac inhibitor fk228 |
| WO2007145704A2 (en) | 2006-04-24 | 2007-12-21 | Gloucester Pharmaceuticals | Gemcitabine combination therapy |
| WO2007146730A2 (en) * | 2006-06-08 | 2007-12-21 | Gloucester Pharmaceuticals | Deacetylase inhibitor therapy |
| AU2007340129B2 (en) | 2006-12-26 | 2012-02-02 | Pharmacyclics Llc | Method of using histone deacetylase inhibitors and monitoring biomarkers in combination therapy |
| CN101687010A (zh) * | 2006-12-29 | 2010-03-31 | 格洛斯特制药公司 | 制备Romidepsin |
| AU2007342028B2 (en) | 2006-12-29 | 2013-06-13 | Celgene Corporation | Purifiction of romidepsin |
| WO2008095050A1 (en) | 2007-01-30 | 2008-08-07 | Pharmacyclics, Inc. | Methods for determining cancer resistance to histone deacetylase inhibitors |
| CA2700173C (en) | 2007-09-25 | 2016-10-11 | Topotarget Uk Limited | Methods of synthesis of certain hydroxamic acid compounds |
| MY185130A (en) | 2010-07-12 | 2021-04-30 | Celgene Corp | Romidepsin solid forms and uses thereof |
| US8859502B2 (en) | 2010-09-13 | 2014-10-14 | Celgene Corporation | Therapy for MLL-rearranged leukemia |
| SG2014014419A (en) | 2011-09-13 | 2014-07-30 | Pharmacyclics Inc | Formulations of histone deacetylase inhibitor in combination with bendamustine and uses thereof |
| AU2013202506B2 (en) | 2012-09-07 | 2015-06-18 | Celgene Corporation | Resistance biomarkers for hdac inhibitors |
| AU2013202507B9 (en) | 2012-11-14 | 2015-08-13 | Celgene Corporation | Inhibition of drug resistant cancer cells |
| NZ630311A (en) | 2013-12-27 | 2016-03-31 | Celgene Corp | Romidepsin formulations and uses thereof |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8817743D0 (en) | 1988-07-26 | 1988-09-01 | Fujisawa Pharmaceutical Co | Fr901228 substance & preparation thereof |
| US6030961A (en) | 1997-03-11 | 2000-02-29 | Bar-Ilan Research & Development Co., Ltd. | Oxyalkylene phosphate compounds and uses thereof |
| US6399568B1 (en) | 1997-09-02 | 2002-06-04 | Japan Energy Corporation | Cyclic tetrapeptide derivatives and medicinal use thereof |
| CA2308565A1 (en) * | 1997-11-05 | 1999-05-14 | Baylor College Of Medicine | Sequences for targeting metastatic cells |
| JPH11335375A (ja) | 1998-05-20 | 1999-12-07 | Mitsui Chem Inc | ヒストン脱アセチル化酵素阻害作用を有するベンズアミド誘導体 |
| PL200861B1 (pl) | 1999-09-08 | 2009-02-27 | Sloan Kettering Inst Cancer | Pochodna kwasu suberynowego, jej zastosowanie i kompozycja farmaceutyczna |
| ATE353663T1 (de) * | 1999-12-08 | 2007-03-15 | Cyclacel Pharmaceuticals Inc | Verwendung von depsipeptide und deren analoge als immunosuppressiva zur behandlung von infektionskrankheiten, autoimmunerkrankungen, allergien und hyperproliferativer hautkrankheiten |
| CA2317003A1 (en) | 2000-02-28 | 2001-08-28 | Hidenori Nakajima | Gene expression potentiator |
| JP2001348340A (ja) * | 2000-06-07 | 2001-12-18 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | ヒストン脱アセチル化酵素阻害剤 |
| JP4810784B2 (ja) * | 2000-07-17 | 2011-11-09 | アステラス製薬株式会社 | 還元型ｆｋ２２８およびその用途 |
| EP1492596A1 (en) * | 2002-04-05 | 2005-01-05 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Depsipeptide for therapy of kidney cancer |
| DK2238982T3 (da) * | 2003-06-27 | 2013-01-28 | Astellas Pharma Inc | Terapeutisk middel til blødt væv-sarcom |
| US7314862B2 (en) * | 2003-09-25 | 2008-01-01 | Astellas Pharma Inc. | Antitumor agent |
| US7951780B2 (en) * | 2004-02-25 | 2011-05-31 | Astellas Pharma Inc. | Antitumor agent |
-
2002
- 2002-08-20 MX MXPA04001612A patent/MXPA04001612A/es active IP Right Grant
- 2002-08-20 WO PCT/JP2002/008355 patent/WO2003015810A1/ja active Application Filing
- 2002-08-20 ES ES02760663T patent/ES2371630T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-20 CA CA002457043A patent/CA2457043A1/en not_active Abandoned
- 2002-08-20 US US10/486,833 patent/US8470783B2/en active Active
- 2002-08-20 RU RU2004108137/15A patent/RU2298414C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2002-08-20 AT AT02760663T patent/ATE526029T1/de active
- 2002-08-20 EP EP02760663A patent/EP1426054B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-08-20 HU HU0400668A patent/HU229521B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2002-08-20 DK DK02760663.1T patent/DK1426054T3/da active
- 2002-08-20 PL PL368708A patent/PL210794B1/pl unknown
- 2002-08-20 PT PT02760663T patent/PT1426054E/pt unknown
- 2002-08-20 JP JP2003520768A patent/JP4238728B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2004
- 2004-02-20 NO NO20040731A patent/NO331682B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2003015810A1 (fr) | 2003-02-27 |
| ES2371630T3 (es) | 2012-01-05 |
| HU229521B1 (hu) | 2014-01-28 |
| NO20040731L (no) | 2004-04-20 |
| JP4238728B2 (ja) | 2009-03-18 |
| JPWO2003015810A1 (ja) | 2004-12-02 |
| RU2004108137A (ru) | 2005-05-10 |
| PL368708A1 (pl) | 2005-04-04 |
| MXPA04001612A (es) | 2004-07-08 |
| US8470783B2 (en) | 2013-06-25 |
| HUP0400668A3 (en) | 2012-09-28 |
| RU2298414C2 (ru) | 2007-05-10 |
| EP1426054A4 (en) | 2006-09-13 |
| US20050191713A1 (en) | 2005-09-01 |
| NO331682B1 (no) | 2012-02-20 |
| EP1426054B1 (en) | 2011-09-28 |
| ATE526029T1 (de) | 2011-10-15 |
| HUP0400668A2 (hu) | 2005-01-28 |
| EP1426054A1 (en) | 2004-06-09 |
| CA2457043A1 (en) | 2003-02-27 |
| DK1426054T3 (da) | 2011-12-12 |
| PT1426054E (pt) | 2011-12-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL210794B1 (pl) | Zastosowanie inhibitora deacetylazy histonowej FK228 lub jego soli | |
| US7888473B2 (en) | Non-functional P2X7 receptor | |
| EP1595952A1 (en) | Method of estimating antitumor effect of histone deacetylase inhibitor | |
| US20200397894A1 (en) | Compositions and methods for treating cancer | |
| US20110269699A1 (en) | Cancer therapy | |
| BR112019017851A2 (pt) | método para tratar câncer em um indivíduo que precisa do mesmo, método para identificar um indivíduo que tem um câncer como um candidato para o tratamento com um antagonista de smarca2, método para identificar uma célula cancerosa como sensível ao tratamento com um antagonista de smarca2, antagonista de smarca2 para uso no tratamento de câncer em um indivíduo que precisa do mesmo, antagonista de smarca2 para uso como um medicamento no tratamento de câncer em um indivíduo que precisa do mesmo e uso do antagonista de smarca2 na fabricação de um medicamento no tratamento de câncer em um indivíduo que precisa do mesmo | |
| US20170240896A1 (en) | Inhibitory Oligonucleotides for Treating Tumors | |
| JP2005514918A (ja) | 転移に関連するホスファターゼ | |
| EP2773427B1 (en) | An androgen receptor or estradiol receptor inhibitor for use in the treatment of a cancerous or non-cancerous condition | |
| US20230121867A1 (en) | Compositions and methods for treating diseases and conditions by depletion of mitochondrial or genomic dna from circulation | |
| US9895410B2 (en) | Methods for preventing and treating oral cancers | |
| CN111139299B (zh) | Josd2蛋白在制备治疗恶性肿瘤药物中的应用 | |
| US20220096594A1 (en) | Macrocyclic peptides for targeted inhibition of autophagy | |
| CN113557297A (zh) | 具有抗肿瘤活性的肽 | |
| WO2024020491A1 (en) | Methods of treating cancer of the central nervous system comprising 5-ethynyl-2'-deoxyuridine | |
| WO2014172634A1 (en) | Compositions and methods for inhibiting chemoresistance in cancer and improving response to therapy |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RECP | Rectifications of patent specification |