TR2021021022A2 - Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇ - Google Patents
Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇Info
- Publication number
- TR2021021022A2 TR2021021022A2 TR2021/021022A TR2021021022A TR2021021022A2 TR 2021021022 A2 TR2021021022 A2 TR 2021021022A2 TR 2021/021022 A TR2021/021022 A TR 2021/021022A TR 2021021022 A TR2021021022 A TR 2021021022A TR 2021021022 A2 TR2021021022 A2 TR 2021021022A2
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- microliters
- carbon
- tissue
- dna isolation
- samples
- Prior art date
Links
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 238000007399 DNA isolation Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 20
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract description 18
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 239000012620 biological material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 18
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 claims description 10
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims description 9
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 5
- 229910002804 graphite Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000010439 graphite Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 4
- 239000008188 pellet Substances 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 2
- 239000003599 detergent Substances 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 2
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000003260 vortexing Methods 0.000 claims 5
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000007400 DNA extraction Methods 0.000 claims 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 229910001919 chlorite Inorganic materials 0.000 claims 1
- 229910052619 chlorite group Inorganic materials 0.000 claims 1
- QBWCMBCROVPCKQ-UHFFFAOYSA-N chlorous acid Chemical compound OCl=O QBWCMBCROVPCKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 3
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000013502 plastic waste Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/10—Processes for the isolation, preparation or purification of DNA or RNA
- C12N15/1003—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor
- C12N15/1006—Extracting or separating nucleic acids from biological samples, e.g. pure separation or isolation methods; Conditions, buffers or apparatuses therefor by means of a solid support carrier, e.g. particles, polymers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
- C07H1/08—Separation; Purification from natural products
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6806—Preparing nucleic acids for analysis, e.g. for polymerase chain reaction [PCR] assay
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Buluş, moleküler biyoloji, genetik, tıbbi genetik, mikrobiyal genetik, biyoteknoloji gibi alanlarda uygulanan ve araştırma ve teşhis koyma çalışmalarında biyolojik materyallerden (sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diğer vücut sıvıları veya doku örnekleri) viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini sağlayan karbon DNA izolasyon kiti ve yöntemi ile ilgilidir.
Description
TARIFNAME
KARBON DNA IZOLASYON KITI VE YÖNTEMI
Teknik Alan
Bulus, moleküler biyoloji, genetik, tbbi genetik, mikrobiyal genetik, biyoteknoloji gibi
alanlarda uygulanan ve arastmma ve teshis koyma çallSmaIarlnda biyolojik
materyallerden (sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diger vücut sivlar
veya doku örnekleri)viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglayan
karbon DNA izolasyon kiti ve yöntemi ile ilgilidir.
Teknigin Bilinen Durumu
Mevcut teknikte moleküler biyoloji, genetik, ttbbi genetik, mikrobiyal genetik,
biyoteknoloji gibi alanlardaarastîma ve teshis koyma çalismalarmida biyolojik
materyallerdenviral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesi için silisyum bazIEkitIer
vasîasýla genomik DNA elde edilmesi saglanmaktadI. Ancak mevcut
uygulamalarda kullanttan DNA kitleri yüksek maliyetli olup, otomasyonu zordur.
Bununla birlikte özellike kolon yönteminde plastik atm sorunu mevcuttur. Bu nedenle
teknigin bilinen durumunda yasanan zorluklarn ortadan kaldmllmaslni saglayan bir
kit ve yönteme ihtiyaç dogmustur.
Literatürde yap lan arastlnmada teknigin bilinen durumuna örnek olarak EP0462100
numaralüdoküman gösterilebilir. Söz konusu doküman, proteinli malzemeleri nükleik
asitlerden aymmak için bir yöntem ile ilgilidir. Bahsi geçen yöntem, proteinli
materyalleri ve nükleik asitleri içeren bir solüsyonun, bagl: ve bagi: olmayan
fraksiyonlar olusturmak üzere proteinleri baglayabilen bir kati: faz ekstraksiyon
materyali ile temas ettirilmesini ve ardlidan nükleik asitleri içeren baglanmamß
fraksiyonun izole edilmesini içermektedir. Bahsi geçen solüsyon, bir rehidrate silika
Sonuç olarak yukaruilaki problemlerin varILgzve mevcut çözümlerin yetersizligi, ilgili
teknik alanda bir gelistirme yapmayi lzorunlu k Im stln.
Bulusun Amacl l
Mevcut bulus yukarîia bahsedilen dezavantajlar:ortadan kaIdIan ve ilgili teknik
alana avantajlar getirenkarbon DNA izolasyon kiti ve yöntemiile ilgilidir.
Bulusun ana amac:arastîma ve teshis koyma çalßmalarlida biyolojik
materyallerden (sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diger vücut smîar:
veya doku örnekleri) karbon atomlarlidan olusan grafit tozu veya grafit kapi:
yüzeyler kullan tarak viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglayan bir
karbon DNA izolasyon kiti ve yöntemi ortaya koymakt r.
Bulusun amac ,yüksek maliyetli prob ve isik sistemlerine ihtiyaç duyulmadan viral,
bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglamaktln.
Bulusun bir diger amachüsük maliyetle kaliteli viral, bakteriyal ve genomik DNA
elde edilmesini saglamaktm.
Bulusun DetaylFJAçklamasFi
Bu detaylDaçtRIamada, bulus konusukarbon DNA izolasyon kiti ve yönteminin tercih
edilen alternatifleri, sadece konunun daha iyi anlastlrnasna yönelik olarak ve hiçbir
s nmlayÇLietki olusturmayacak sekilde açmlanmaktad m.
Bulus,moleküler biyoloji, genetik, t`bbi genetik, mikrobiyal genetik, biyoteknoloji gibi
alanlarda uygulanan ve arastmma ve teshis koyma çalßmalarmida biyolojik
materyallerden (sürüntü, idrar, sperm tam kan, serum ve diger vücut s vllarl lveya
doku örnekleri) viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglayan karbon
DNA izolasyon kiti ile ilgilidir.
Bulusa konu karbon DNA izolasyon kiti en temel halinde; pH5 Iizis tampon A
ve/veyapHS Iizis tampon B, pH8 yikama solüsyonu, izopropanol, %70'lik etanol, pH9
elüsyon solüsyonu, grafit tozu veya grafit kaplama yüzey içeren karbon DNA
izolasyon kitidir.
pH5 Lizis tampon A temel olarak sunlar,içermektedir;0,205 gram Sodyum Asetat
(NaHC03), , 1,089 mililitre
ml'ye tamamlanan ölçüde distile su içermektedir.
pH 5 Lizis tampon B temel olarak sunlar:içermektedir; 1 gram deterjan içerikli
solüsyon (SDS), 100 miIiIitre distile su içermektedir.
pH8 yikama solüsyonu sunlarü içermektedir; 0,205 gram Sodyum Asetat
(CZHSNaOZ), 50 miIiIitre %96`lLk etanol, 100 militreye kadar izopropanol
ve 50 miIiIitre %96`Ilk etanolün ls tma ile tam çözülmesi saglanln.
Bulusa konu karbon DNA izolasyon kitinde %99,8 oraninda izopropanol
kullanTmaktadm.
Elüsyon solüsyonunda distile suyun Ph`nIi NaOH ile 9 olmasEsagIanmaktadI. Uzun
müddet saklama kosullar: için elüsyon solüsyonu EDTA tuzu ve Tris HCL
içermektedir.
Grafit kaplama yüzey, plastik, metal veya cam olabilir.
Bulus ayn,zamanda,moleküler biyoloji, genetik, tümbi genetik, mikrobiyal genetik,
biyoteknoloji gibi alanlarda uygulanan ve arastlnma ve teshis koyma çaliSmaIar nda
biyolojik materyallerden (Sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diger vücut
sîifiarH veya doku örnekleri) viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini
saglayan karbon DNA izolasyon yöntemi ile ilgilidir.
Idrar, sürüntü, sperm örnekleri için ön hazmlk ve Iizis asamasüslem admnlarisu
sekildedir;
1. 90-200 mikrolitre oran mida sperm veya idrar veya sürüntü örnegi temiz
2. 200-500 mikrolitre Iizis tampon A eklenir. (Lizis tampon A için önerilen miktar
300 mikrolitredir.)
Kar slm 15 saniye vortekslenir.
300-500 mikrolitre yikama solüsyonu eklenir (Burada önerilen miktar 400
mikrolitredir.)
6. Karsmn 15 saniye vortekslenir.
Doku, tam kan ve serum örnekleri için ön hazîltk ve lizis asamasjslem adEhlarESu
sekildedir;
0.2-2 gram doku ya da 90-200 mikrolitre serum veya tam kan örnegi direkt
çalSmaya alîim. (Burada kan veya serum için önerilen miktar 100
mikrolitredir.)
200-500 mikrolitre Lizis Tampon A eklenilir. (Lizis tampon A için önerilen
miktar 300 mikrolitredir)
Kar Slm 15 saniye vortekslenir.
95°C de 10 dakika inkübe edilir. (Proteinaz K kullan lmasl durumunda bu
200-400 mikrolitre lizis tampon B veya 10 mikrolitre proteinaz k eklenir.
(Burada lizis tampon B için önerilen miktar 200 mikrolitredir.)
de 10 dakikad I.)
12000rpm'de 2 dakikadl.)
Süpernatant temiz bir tüpe aktarJE.
200-400 mikrolitre izopropanol eklenir (Burada önerilen miktar 300
mikrolitredir.)
Sürüntü, idrar, sperm, doku, tam kan, serum örnekleri için haz rlik asamas ndan
sonra DNA saflastinma asamasi su sekildedir;
Idrar, sürüntü, sperm örnekleri için ön hazlnl I( ve lizis asamasl Veya Doku,
tam kan ve serum örnekleri için ön hazmlk ve lizis asamasFIIe elde edilen
karßîna 70 miligram grafit tozu eklenir.
Kargmn homojen olana kadar vortekslenir ve karßEn siyah renk aim.
Karsmn, oda sßaklglida 5 dakika inkübe edilir.
ve süre 12000 rpm'de 1 dakikadl.)
Süpernatant atTm ve sWîFsFm atTarak pellet kßmîkalr.
500 mikrolitre %70`lik etanol eklenir.
Kargmn homojen olana kadar vortekslenir.
12000 rpm'de 1 dakikad r.)
Süpernatant atm vesmEkßEn atmarak pellet kîsmEkalI. (Burada kan ve
serum örnekleri için 15.16.17 ve 18.islem ad EnlarEtekrar edilebilir.)
60-75 “C'de 5-10 dakika tüpün kapagEaçE sekilde kuruma saglanana kadar
inkübe edilir.
Istenilen DNA miktarlia baglmlarak 90-200 mikrolitre elüsyonu solüsyonu
eklenir.
Karsmn homojen olana kadar vortekslenir.
60-70 °C de 5 dakika inkübe edilir.
14000 rpm'de 2 dakikad r.)
Süpernatant temiz bir tüpe aktar lln. Bu süpernant DNA içeren solüsyondur.
Aktarma yapmîken grafitin süpernatanta karFSmamasFBaglan T.
Claims (8)
- ISTEMLER Moleküler biyoloji, genetik, ttbbi genetik, mikrobiyal genetik, biyoteknoloji gibi alanlarda uygulanan ve arastIma ve teshis koyma çalismalarîida biyolojik materyallerden (sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diger vücut smîarîveya doku örnekleri) viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglayan karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi; - pH5 Iizis tampon A velveyapHS Iizis tampon B, pH8 ykama solüsyonu, izopropanol, %70'Iik etanol, pH9 elüsyon solüsyonu, grafit tozu veya grafit kaplama yüzey içermesidir.
- Istem 1'e uygun bir karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi; bahsedilen Iizis Klorit (NH4CI), 0,84 gram Sodyum Bikarbonat (NaHCog), 0,37 gram EDTA tamamlanan ölçüde distile su içermesidir.
- Istem 1'e uygun bir karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi; bahsedilen Iizis tampon B'nin1 gram deterjan içerikli solüsyon (SDS), 100 mililitre distile su içermesidir.
- Istem 1'e uygun bir karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi; agrlikça %99,8 oranlnda izopropanol içermesidir.
- Istem 1'e uygun bir karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi;bahsedilen elüsyon solüsyonunun EDTA tuzu ve Tris HCL içermesidir.
- Istem 1'e uygun bir karbon DNA izolasyon kiti olup, özelligi; bahsedilen grafit kaplama yüzeyin, plastik, metal veya cam olmasîil.
- Moleküler biyoloji, genetik, ttbbi genetik, mikrobiyal genetik, biyoteknoloji gibi alanlarda uygulanan ve arastmma ve teshis koyma çalîsmalarîida biyolojik materyallerden (sürüntü, idrar, sperm,doku, tam kan, serum ve diger vücut s vllarl lveya doku örnekleri) viral, bakteriyal ve genomik DNA elde edilmesini saglayan karbon DNA izolasyon yöntemi olup, özelligi; Idrar, sürüntü, sperm örnekleri veya doku, tam kan ve serum örnekleri için ön hazIIR ve Iizis asamasliîî yapÜInasü Idrar, sürüntü, sperm örnekleri için ön hazIIK ve Iizis asamas: veya doku, tam kan ve serum örnekleri için ön hazîltli ve Iizis asamasüle elde edilen karZSEna 70 miligram grafit tozu eklenmesi, Karîsmn homojen olana kadar vortekslenmesi ve karSEnIi siyah renk Kar slrlnlrli oda sldaklig nda 5 dakika inkübe edilmesi, Süpernatant atlmas ve 5 W klSmlrii atllarak pellet k smi kalmas, 500 mikrolitre %70`Iik etanol eklenmesi, Karsmnm homojen olana kadar vortekslenmesi, Süpernatant atji'nasîve sýEkßmmi attlilarak pellet kîsmEkalmas: 60-75 °C`de 5-10 dakika tüpün kapagüaçtß sekilde kuruma saglanana kadar inkübe edilmesi, Istenilen DNA miktarIia baglü olarak 90-200 mikrolitre elüsyonu solüsyonu eklenmesi, Karîsmnlihomojen olana kadar vortekslenmesi, 60-70 “C de 5 dakika inkübe edilmesi, Süpernatantlni temiz bir tüpe aktarilmasl i
- 8. Istem 7'ye uygun birkarbon DNA izolasyon yöntemi olup, özelligi; bahsedilen idrar, sürüntü, spermörnekleri için ön hazIIE ve Iizis asamasliîi; 0.2-2 gram doku ya da 90-200 mikrolitre serum veya tam kan örneginin direkt çal Ismaya alîimas: 200-500 mikrolitre Lizis Tampon A eklenmesi, Karîsmnli 15 saniye vortekslenmesi, (SO-75°C de 10 dakika inkübe edilmesi, 300-500 mikrolitre yikama solüsyonu eklenmesi, Karsmnmi 15 saniye vortekslenmesi istem T'ye uygun bir karbon DNA izolasyon yöntemi olup, özelligi; bahsedilen doku, tam kan ve serum örnekleri için ön hazIIK ve lizis asamasmiîi; - 0.2-2 gram doku ya da 90-200 mikrolitre serum veya tam kan örneginin direkt çalßmaya almimasm - 200-500 mikrolitre Lizis Tampon A eklenmesi, - KarßmnJ-:i 15 saniye vortekslenmesi, - 95°C de 10 dakika inkübe edilerek 10 mikrolitre proteinaz k eklenmesi veya 200-400 mikrolitre Iizis tampon B eklenmesi, - 60-75 °C de 10-20 dakika inkübe edilmesi, - Süpernatantlni temiz bir tüpe aktarilmasl,l - 200-400 mikrolitre izopropanol eklenmesi islem admnlarTtFiçermesidir.
Priority Applications (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TR2021/021022A TR2021021022A2 (tr) | 2021-12-26 | 2021-12-26 | Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇ |
PCT/TR2021/051590 WO2023121585A1 (en) | 2021-12-26 | 2021-12-29 | Carbon dna isolation kit and method |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TR2021/021022A TR2021021022A2 (tr) | 2021-12-26 | 2021-12-26 | Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇ |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TR2021021022A2 true TR2021021022A2 (tr) | 2022-01-21 |
Family
ID=85117025
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
TR2021/021022A TR2021021022A2 (tr) | 2021-12-26 | 2021-12-26 | Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇ |
Country Status (2)
Country | Link |
---|---|
TR (1) | TR2021021022A2 (tr) |
WO (1) | WO2023121585A1 (tr) |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP2191012A1 (en) * | 2007-09-21 | 2010-06-02 | Streck, Inc. | Nucleic acid isolation in preserved whole blood |
US10233508B2 (en) * | 2012-08-21 | 2019-03-19 | Qiagen Gmbh | Virus particle stabilisation and method for isolating viral nucleic acids |
-
2021
- 2021-12-26 TR TR2021/021022A patent/TR2021021022A2/tr unknown
- 2021-12-29 WO PCT/TR2021/051590 patent/WO2023121585A1/en unknown
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2023121585A1 (en) | 2023-06-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2608081B2 (ja) | 組換えタンパク質の精製方法及びその製品 | |
JP6571544B2 (ja) | 核酸の単離 | |
JP4175670B2 (ja) | 固体相核酸の単離 | |
WO2014063651A1 (zh) | 纯化核酸的方法及试剂盒 | |
CN110283816A (zh) | 一种磁珠法微生物基因组dna的提取试剂盒及提取方法 | |
CN103255131A (zh) | 采用固相支持物纯化dna的制剂和方法 | |
AU2010289430B2 (en) | Methods and compositions for direct chemical lysis | |
JP5867402B2 (ja) | smallRNAの取得方法 | |
CN103890176A (zh) | 制备生物材料的方法 | |
JP2024012495A (ja) | 核酸を抽出するための方法 | |
US8420801B2 (en) | Recovery of nucleic acids from magnetic glass particles | |
ES2730711T3 (es) | Materiales y métodos para inmovilizar, aislar y concentrar células usando superficies carboxiladas | |
TR2021021022A2 (tr) | Karbon dna i̇zolasyon ki̇ti̇ ve yöntemi̇ | |
EP3215620B1 (en) | Chaotrope- and volatile-free method for purifying nucleic acids from plasma | |
Thatcher | Nucleic acid isolation | |
ES2665280T3 (es) | Métodos para la extracción y purificación de componentes de muestras biológicas | |
JPS61293400A (ja) | ポリヌクレオチド配列の測定方法 | |
CN113801915B (zh) | 获取目标rna结合蛋白靶rna的方法 | |
US11155805B2 (en) | Target nucleic acid concentration and recovery method using antibody | |
WO2018119437A2 (en) | Electrophoresis diagnostic methods and kits | |
CN117701555A (zh) | 一种快速细菌基因组dna提取试剂盒、使用方法及应用 | |
RU2628695C1 (ru) | Способ выделения РНК и ДНК из сухих биологических образцов, хранившихся на бумажном носителе, и набор для его осуществления | |
CN114479129A (zh) | 一种磁珠法快速提取核酸的试剂及核酸提取方法 |