TR201802124T4 - Adrenomedullin'in polietilen glikol temelli ön ilacı ve bunun kullanımı. - Google Patents

Adrenomedullin'in polietilen glikol temelli ön ilacı ve bunun kullanımı. Download PDF

Info

Publication number
TR201802124T4
TR201802124T4 TR2018/02124T TR201802124T TR201802124T4 TR 201802124 T4 TR201802124 T4 TR 201802124T4 TR 2018/02124 T TR2018/02124 T TR 2018/02124T TR 201802124 T TR201802124 T TR 201802124T TR 201802124 T4 TR201802124 T4 TR 201802124T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
acute
disease
ali
pulmonary
chronic
Prior art date
Application number
TR2018/02124T
Other languages
English (en)
Inventor
Flamme Ingo
Köbberling Johannes
Lerchen Hans-Georg
Griebenow Nils
Schohe-Loop Rudolf
Wittrock Sven
Köllnberger Maria
Wunder Frank
Redlich Gorden
Knorr Andreas
Marley July
Pritchard Iain
Original Assignee
Bayer Ip Gmbh
Bayer Pharma AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ip Gmbh, Bayer Pharma AG filed Critical Bayer Ip Gmbh
Publication of TR201802124T4 publication Critical patent/TR201802124T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/36—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/40—2,5-Pyrrolidine-diones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/23—Calcitonins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0075—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a dry powder inhaler [DPI], e.g. comprising micronized drug mixed with lactose carrier particles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0078—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a nebulizer such as a jet nebulizer, ultrasonic nebulizer, e.g. in the form of aqueous drug solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/10—Antioedematous agents; Diuretics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Dermatology (AREA)

Abstract

Buluş, bir inert toksik olmayan farmasötik olarak uygun eksipiyan ile kombinasyon halinde, Adrenomedullin?in yeni polietilen glikol (PEG) temelli ön ilaçları veya bunların tuzları, solvatları veya tuzlarının solvatlarının bir tanesini içeren ilaçlar, burada ilaç inhalasyaona yönelik farmasötik bir formdadır, özellikle kardiyovasküler, ödemli ve/veya inflamatuvar bozukluklar olmak üzere hastaların tedavisi ve/veya önlenmesine yönelik kullanımı, spesifik PEG-adrenomedullin ön ilaçları ve bunun sentez ara ürünleri ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME ADRENOMEDULLIN'IN POLIETILEN GLIKOL TEMELLI öN ILACI VE BUNUN KULLANIMI Bulus; Adrenomullintin özgün polietilen glikol (PEG) temelli ön Ilaci, bununla ilgili preparasyon için prosesler, hastaliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için bunlarin kullanilmasi ve hastaliklarin, özellikle kardiyovasküler, ödematöz ve/veya inflamatuvar hastaliklarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için ilaçlarin üretilmesi amaciyla bunlarin kullanilmasi ile ilgilidir. 52 amino asit peptit hormon adrenomedullin (ADM); böbreküstü bezi, akciger, böbrek, kalp kasi ve diger organlarda üretilir. ADM'nin plazma seviyeleri daha düsük pikomolar araliktadir. ADM, peptitlerin kalsitonin gen ile baglantili peptit (CGRP) familyasinin bir üyesidir ve bu itibarla CRLR ve RAMP 2 ya da 3'ten olusan bir heterodimerik G-protein akuple reseptörüne baglanir (Kalsitonin-reseptör-benzeri reseptör ve reseptör aktivite modifiye/i' protein 2 ya da 3). ADM reseptörünün aktivasyonu, reseptör tasiyan hücrelerdeki adenozin 3', 5'-siklik monofosfat'in (cAMP) intraselüler yükselmeye neden olur. ADM reseptörleri, endotelyal hücreleri içeren hemen hemen tüm organlardaki farkli hücre tiplerinde mevcuttur. ADM, nötral endopeptidaz vasitasiyla metabolize oldugu düsünülmektedir ve ADM reseptörlerinin çok iyi ifade edildigi yerde agirlikli olarak akcigerde temizlenir [inceleme için bakiniz Gibbons C., Dackor R., Dunworth W., Literatürden elde edilen deneysel veriler; ADM'nin, digerleri arasinda kan basinci regülasyonu, bronkodilatasyon, böbrek fonksiyonu, hormon sekresyonu, hücre büyümesi, diferansiyasyon, nörotransmisyon ve immün yanit modülasyonunu içeren çesitli fonksiyonel rolleri kapsadigi önerilir. Ayrica ADM, endotelyal hücrelerin proliferasyonu ve rejenerasyonu süresince otokrin faktörü olarak çok önemli bir rol oynar [inceleme için bakiniz Garcia MA., Martin-Santamaria 8., de PascuaI-Teresa B., ADM'nin saglam bir endotelyal bariyer fonksiyonu için zorunlu oldugunu ve ADM'nin supra-fizyolojik seviyelere tatbik edilmesinin sepsis, akut akciger hasari ve bagirsak iltihabini içeren hayvan deneylerindeki çesitli inflamatuvar kosullarinda kuvvetli anti- ödematöz ve anti-inflamatuvar fonksiyonlarini ortaya koydugunu gösteren Iiteratürden elde edilen bir kanit vardir [inceleme için bakiniz, TemmesfeId-Wollbrück B., Hocke ADM'nin klinik testi; pulmoner hipertansiyon, hipertansiyon, kalp yetmezligi ve akut miyokard enfarktüsü gibi ölçülebilir bir hemodinamik son noktali kardiyovasküler endikasyonlarda bu zamana dek yürütülmüstür. ADM, daha önce bahsedilen durumlardan muzdarip hastalardaki birkaç çalismada hemodinamik etkiler göstermistir.
Ancak, etkiler, sadece kisa sürmüs ve uygulamanin bitimi sonrasinda derhal kesilmistir.
Bu bulgular, ADM'nin bilinen farmakokinetik profili ile iyi iliskilidir. Farmakodinamik etkiler, digerleri arasinda sistemik ve pulmoner arteriyal kan basincinin azalmasi ve kardiyak çikisin artisini kapsar [Troughton RW., Lewis L.K., Yandle T.G., Richards Noguchi T., Yamada N., Morii I., Kawamura A., Doi K., Miyatake K., Tomoike H., Özet olarak, hayvanlardaki bol miktardaki deneysel verilerden elde edilen kanitlarin temelinde, ADMinin suprafizyolojik seviyelere yükselen insanlardaki klinik çalismalar, insanlardaki ve hayvanlardaki çesitli hastalik durumlarinin tedavisi için bir hedef mekanizmasi olarak dikkate alinmalidir. Ancak, terapötik ajan olarak ADM kullaniminin baslica sinirlamasi, ADM'nin bolus uygulamalarindan kaynaklanabilen hipotansiyon bakimindan potansiyel olarak sinirli emniyet paylari ve potansiyel endikasyonlarin çogu için kullanimina engel olan sürekli infüzyon tedavisinin uygun olmayan uygulanabilirligidir.
Bu bulusun amaci; hastaliklarin, bilhassa kardiyovasküler, ödematöz ve inflamatuvar bozukluklarinin tedavisi için kullanilabilen özgün bilesikleri saglamasidir.
Birçok terapötik olarak aktif peptitler ya da proteinler, in vivoda yüksek açikliktan muzdariptir. Bu tip ilaçlarin enjekte edilebilir bir depo olusturmasi için birkaç yaklasim, makromoleküllerin kullanimini kapsadigi mevcuttur.
Kovalent olmayan bir baglanma durumundaki bir ilaç molekülünü içeren polimer matrisleri iyi bilinmektedir. Bunlar ayrica hidrojeller, mikro partiküller ya da miseller olarak da enjekte edilebilir olabilirler. Bu tip ilaç ürünlerinin salim kinetikleri, hastalar arasinda yüksek degiskenlik ile oldukça güvenilmez olabilir. Bu tip polimerlerin üretimi, etken madde hassasiyetine zarar verebilir ya da kendi degradasyonu süresince polimer Onlarin çözünürlügünü gelistirmek için peptitlerin ya da proteinlerin kalici PEGilasyonu, azalan immünojenesite ve azalan renal klerens ile artan yarilanma ömrü 1980'ler öncesinden beri iyi bilinen bir konsepttir (Caliceti P.,Ver0nese F.M., Adv. Drug Deliv. örnekte PEGiIasyon, bu konseptin artik daha fazla uygun olmadigi bir kapsam için etken maddenin etkinligini azaltir (T. Peleg-Shulman et al., J. Med. Chem., 2004, 47, 4897-4904).
Uygun bir alternatif polimer temelli ön ilaçlardir. Asagidaki terimler IUPAC durumu vasitasiyla ön ilaçlar için mevcut tanimlardir (International Union of Pure and Applied Chemistry and International Union of Biochemistry: GLOSSARY OF TERMS USED IN MEDICINAL CHEMISTRY (Recommendations 1998); in Pure & Appl. Chem. Vol 70, Ön ilaç: Bir ön ilaç, farmakolojik etkilerini sergilemeden önce biyotransformasyona maruz kalan herhangi bir bilesiktir. Ön ilaçlar böylece ana moleküldeki istenmeyen özellikleri elimine etmek için ya da degistirmek için geçici bir sekilde kullanilan özellesmis toksik olmayan koruyucu gruplari içeren ilaçlar olarak incelenebilir.
Tasiyiciya bagli ön ilaç (Tasiyici ön ilaç): Tasiyiciya bagli bir ön ilaç; genellikle bir hidrolik klevaj vasitasiyla in vivoda kolaylikla giderilebilen ve verilen bir aktif maddenin, arttirilan fizikokimyasal ya da farmakokinetik özellikleri üreten geçici bir tasiyici grup ile geçici bir baglantisini içeren bir ön ilaçtir.
Kaskad ön ilaç: Bir kaskad ön ilaci, bir aktive edici grubun sadece gerçek yüzünü gördükten sonra etkili olan tasiyici grubun klevaji için bir ön ilaçtir.
PEG temelli tasiyici ön ilaçlarin birkaç örnegi, çogunlukla enzimatik hidroliz vasitasiyla baslatilan aktif ilaç ile tasiyici arasinda baglayicinin enzimatik aktivasyon ihtiyaci ile onlarin çogunda mevcuttur. Esterler in vivoda çok kolay ve beklenmedik sekilde klevaj oldugundan dolayi. tasiyici ön ilaç için dogrudan ester baglayicilari kendi kullanilabilirligi için sinirlamalara sahiptir (J. Rautio et al., Nature Reviews Drug Yaygin olarak kullanilan alternatif yaklasimlar, peptit ya da proteindeki bir amin fonksiyonelligine ekli kaskad baglayicilardir. Kaskad baglayicilarda bir maskeleme grubu, kaskaddaki hiz sinirlayici basamak olarak giderilmesi gerekir. Bu, peptit ya da proteinin salimi için ikinci bir pozisyonda ayrismasi için baglayiciyi aktive eder. Yaygin Shabat et aL). konseptidir. Onlarin yaklasiminda bir fenoldeki maskeleme grubu, bir dahili nükleofil saldirisi ile tamamen pH'a bagimli bir sekilde giderilir. Bu, ayrica dekompozisyon için baglayiciyi aktive eder.
Shabat tarafindan tanimlanan yukarida bahsedilen ön ilaç sistemleri, geçici baglayicinin klevaji sonrasinda kinon metitler gibi potansiyel olarak toksik aromatik küçük molekül yan ürünlerinin salimidir. Potansiyel olarak toksik olusumlar, ilaç ile 1:1'lik bir stokiyometride salinir ve yüksek in vivo konsantrasyonlarini saglayabilir." Ayni problem, ayrica Hersel et al. sistemi için de geçerlidir.
Küçük organik moleküller için farkli ön ilaç yaklasimlarinin fazlaligi mevcuttur (J. Rautio için salim mekanizmasi olarak U. Hersel et al. tarafindan kullanilan yaklasim, 1980'ler öncesinden beri küçük moleküllerin fenolik gruplari için bir ön ilaç yaklasimi olarak Alternatif amin temelli ön ilaç sistemi, bir kaskad ön ilaci olarak bis-hidroksietil glisinin yavas hidrolizi üzerine kuruludur. Bis-hidroksietil glisinin hidroksi gruplari, esterazlar ile hidrolize egilimli olan esterler vasitasiyla maskelenir (R. Greenwald et al., J. Med.
Görüntüleme olarak kullanilmasi için isaretlenmis Adrenomullin türevleri ve ayrica Bu ADM türevlerinde radyoaktif izotoplara baglanabilen moleküler yapi benzeri bir komplekslestirme kafesi, dogrudan bir sekilde ya da potansiyel olarak kisa PEG dolgularini da içeren bir dolgu birimi vasitasiyla ADMlnin N ucuna eklenmistir. Bu ilaçlarin tanisal ya da terapötik degeri, radyoaktif molekülün hedeflenen iletiminden ileri Amin fonksiyonelliklerini maskelemenin tümü bazinda üzerine kurulu listelenen ön ilaç yaklasimlarinin aksine, mevcut bulus, ADM”deki bir tirozinin fenolik grubunu maskeleme üzerine kuruludur. Kullanilan tasiyiciya bagli bir ön ilaç, bu fenolik gruptaki bir karbamatin dahili nükleofil ile desteklenen klevaj üzerine kuruludur. Yukarida bahsedilen diger ön ilaç siniflarina karsi kilit avantaji, baglayici dekompozisyon ürününün toksikolojik olarak zararsizligidir, bir siklik üre tasiyiciya kalici olarak baglidir.
Buna ek olarak, ön ilacin dekompozisyonu, klevaj kinetiklerinin hastalar arasinda yüksek degiskenlige sebep olabilen enzimatik mekanizmalara bagimli degildir. Klevaj mekanizmasi, tirozin üzerine kurulu fenolik karbamata saldiran bir nükleofil islevi gören daha yüksek (nötral) pH'da aktive olan asidik pH'da protonlu olan bir dahili amin olarak sadece pH`a bagimlidir.
Bu bulus baglaminda, bilesiklerin; artik ADM ile karsilastirilirsa farmakolojik etkinin uzatilmis süresi ile yavas salinimli ADM-ön ilaçlari islevi gördügü ve sirasiyla endotelyal bariyer fonksiyonunun stabilizasyonu ve kan basincinin azalmasi gibi in vivoda sürekli anti-inflamatuvar ve hemodinamik etkileri -parenteral uygulama sonrasi- ortaya koyan bu spesifik etki mekanizmasi üzerine kurulu oldugu tanimlanmaktadir.
Bu bulus asagidaki formülün bilesiklerini saglar Y u_RQSMNNFQGLRSFGCRFGTCTVQKLAHOlYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NH2 n numara 0, 1, 2 ya da 3 temsil eder, R1 hidrojen, metil, etil, n-propil ya da izopropili temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer ya da dallanmis PEG 20kDa ile 80kDalyi, ve bunlarin tuzlarini, bunlarin solvatlarini ve bunlarin tuzlarinin solvatlarini temsil eder.
Bulusa göre bilesikler; formül (I)'in bilesikleri ile bunlarin tuzlari, bunlarin solvatlari ve bunlarin tuzlarinin solvatlari, formül (I) vasitasiyla sarilmis olan bilesiklerdir ve asagida belirtilmis formül ile bunlarin tuzlari, bunlarin solvatlari ve bunlarin tuzlarinin solvatlari ve formül (I) vasitasiyla yakalanan bilesiklerdir ve çalisma örnekleri olarak asagida belirtilenler ile bunlarin tuzlari, bunlarin solvatlari ve bunlarin tuzlarinin solvatlaridir ve eger formül (I) vasitasiyla yakalanan bilesikler ise asagida tanimlananlardir ve halihazirda tuzlar, solvatlar ve tuzlarin solvatlari degildir.
Yapilarina bagli olarak, bulusa göre bilesikler stereoizomerik formlarda (enantiyomerler, diastereomerler) mevcut olabilirler. Bulus bu nedenle enantiyomerleri ya da diastereomerleri ve bunlarin özel karisimlarini yakalar. Stereoizomerik olarak homojen bilesenler, enantiyomerler ve/veya diastereomerlerin bu tip karisimlarindan bilinen bir sekilde izole olabilirler.
Bulusa göre bilesikler totomerik formlarda meydana gelebildikleri zaman, bu bulus tüm Bu bulus baglaminda, tercih edilen tuzlar, bulusa göre bilesiklerin fizyolojik olarak kabul edilebilir tuzlaridir. Ayrica farmasötik uygulamalar için kendileri uygun olmayan tuzlar da dahildir, ancak örnek olarak, bulusa göre bilesiklerin izolasyonu ya da saflastirmasi için kullanilabilir.
Bulusa göre bilesiklerin fizyolojik olarak kabul edilebilir tuzlar; mineral asitlerin, karboksilik asitlerin ve sülfonik asitlerin asit ilave tuzlarini, örnek olarak hidroklorik asit, hidrobromik asit, sülfürik asit, fosforik asit, metansülfonik asit, etansülfonik asit, toluensülfonik asit, benzensülfonik asit, naftalindisülfonik asit, asetik asit, trifloroasetik asit, propiyonik asit, Iaktik asit, tartarik asit, maleik asit, sitrik asit, fumarik asit, maleik asit ve benzoik asit tuzlarini içerir.
Bulusa göre bilesiklerin fizyolojik olarak kabul edilebilir tuzlar ayrica; geleneksel bazlarin tuzlarini, örnek olarak ve tercihen etilamin, dietilamin, trietilamin, etildiizopropilamin, monoetanolamin, dietanolamin, trietanolamin, disiklohekzilamin, dimetilaminoetanol, prokain, dibenzilamin, N-metilmorfolin, arginin, Iizin, etilendiamin ve N-metilpiperidin gibi 1 ila 16 karbon atomu içeren organik aminlerden ya da amonyaktan türetilen örnek olarak ve tercihen alkali metal tuzlari (örnegin sodyum ve potasyum tuzlari), toprak alkali metal tuzlari (örnegin kalsiyum ve magnezyum tuzlari) ve amonyum tuzlarini da içerir.
Bulus baglaminda, solvatlar; kati ya da sivi durumda, solvent molekülleri ile koordinasyon vasitasiyla bir kompleks olusturan bulusa göre bilesiklerin formlarini ifade eder. hidratlar, su ile koordinasyondaki solvatlarin spesifik bir formundadir. Bu bulus baglamindaki tercih edilen solvatlar hidratlardir.
R2”de bahsedilen bir metoksi grubu ile sinirli olmayan bulus baglaminda. polietilen glikolün (PEG) oksijene baglanmayan ucundaki bir metoksi grubu, yeni PEG 40kDa- OMe ile substitüsyonlu oldugu anlamina gelir.
Tercih edilen, formül (I),in bilesiklerini vermesidir, burada n numara 1 ya da 2'yi temsil eder, R1 hidrojen ya da metil'i temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer PEG 40kDa'yi temsil eder.
Tercih edilen formül (l)'in bilesiklerini de vermesidir, burada n numara 1 ya da 2'yi temsil eder, R1 hidrojen'i temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer PEG 40kDa'yi temsil eder.
Tercih edilen, formül (I),in bilesiklerini de vermesidir, burada n, numara 1'i temsil eder.
Tercih edilen, formül (I)'in bilesiklerini de vermesidir, burada R1, hidrojen'i temsil eder.
Tercih edilen, formül (I)'in bilesiklerini de vermesidir, burada -NHR1 substitüentinin baglandigi karbon atomu, S konfigürasyonuna sahiptir.
Tercih edilen, formül (I)'in bilesiklerini de vermesidir, burada R2, bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer PEG 40kDa'yi temsil eder.
Tercih edilen, formül (la) yapisina sahip olan formül (I)'in bilesiklerini de vermesidir Y I u_RQSMNN FQGLRSFGCRFGTC`!'VC)KLAI~lCIIYQFTDKDKDNVAPRSKISPC.)GY-NH2 NH2 ;} n, R1 ve R2*nin her biri yukarida tanimlandigi sekilde, ve bunlarin tuzlari, bunlarin solvatlari ve bunlarin tuzlarinin solvatlaridir.
Radikallerin özel kombinasyonlari ya da tercih edilen kombinasyonlarinda verilen spesifik radikal tanimlar, belirlenen radikallerin özel kombinasyonuna bakilmaksizin diger kombinasyonlarin herhangi radikal tanimlari ile de yerdegistirir. Özellikle çok tercih edilen, yukarida bahsedilen tercih edilen araliklarin ikisinin ya da daha fazlasinin kombinasyonlarini vermesidir.
Bulus ayrica; formül (I)”in bilesikleri ya da bunlarin tuzlari, bunlarin solvatlari ya da bunlarin tuzlarinin solvatlarinin hazirlanmasi için bir prosesi saglar, burada formül (II)'nin bilesikleri asagidadir Y N_RQSMNNFOGLRSFGCRFGTCWOKLAHQlYOFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NHz 2burada n ve R“in her biri yukarida tanimlandigi sekilde olup, formül (III)'ün bilesikleri ile reaksiyon verir R2, yukarida tanimlandigi sekildedir.
Reaksiyon genel olarak ineit çözücülerde, tercihen standart basinçta O°C ila 50°C'lik bir sicaklik araliginda etkilenir.
Inert çözücüler; örnek olarak, pH 3 ila 5 arasindaki sitrat tamponlar, glisin-hidroklorür tamponlari, ftalat tamponlari ya da asetat tamponlaridir, tercihen pH 4'lük bir sitrat tamponu verilmektedir.
Formül (III)'ün bilesigi bilinmektedir ya da uygun baslangiç bilesiklerinden bilinen prosesler yoluyla sentezlenebilir.
Formül (Il),nin bilesikleri bilinmektedir ya da formül (lV)`ün bilesiklerinin reaksiyon vermesi yoluyla hazirlanabilir n ve R“in her biri yukarida tanimlandigi sekildedir, formül (V)'in bilesigi ile birinci asamada /5 / \> -0 uýTenbgeFv-reçine H-ROSMNNFQGLRSFGÇRFGT?TVQKLAHQIYOFTDKDKDNVAPRSKISPOGY B ve bir asit ile ikinci asamadadir.
Birinci asamadaki reaksiyon genel olarak; inert çözücülerde, bir dehidrasyon reaktifi varliginda, opsiyonel olarak bir baz varliginda, tercihen standart basinçta oda sicakligindan 70°C'ye kadar bir sicaklik araliginda etkilenir.
Inert çözücüler; örnek olarak diklorometan, triklorometan ya da 1,2-diklor0etan gibi halohidrokarbonlar, dioksan, tetrahidrofuran ya da 1,2-dimet0ksietan gibi eterler ya da aseton, dimetilformamit, dimetilasetamit, 2-bütan0n ya da asetonitril gibi diger çözücülerdir. Çözücülerin karisimlarinin kullanilmasi ayni ölçüde mümkündür. Tercihen dimetilformamit verilmektedir.
Bu baglamdaki uygun dehidrasyon reaktifleri; örnek olarak karbodiimidler. örnek olarak N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diizopropiI-, N,N'-disiklohekzilkarbodiimid, N-(3- dimetilamino-izopropil)-N'-etilkarbodiimid hidroklorür (EDC), N-siklohekzilkarbodiimid- N'-propil0ksimetilpolistiren (PS-karbodiimid) ya da karbonildiimidazol gibi karbonil bilesikleri ya da 2-etil-5-feniI-1,2-0kzazolyum 3-sülfat ya da 2-tert-bütil-5- metilizokzazolyum perklorat gibi 1,2-okzalyum bilesikleri ya da 2-et0ksi-1- etoksikarboniI-1,2-dihidrokinolin gibi asilamino bilesikleri ya da propanfosfonik anhidrit ya da izobütil kloroformat ya da bis-(2-okso-3-okzazolidiniI)fosforil klorür ya da benzotriazoliloksitri(dimetilamino)fosfonyum hekzaflorofosfat ya da O-(benzotriazol-1- iI)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat (HBTU), benzotriazoI-1-il-N-tetrametil- uronyum tetrafloroborat (TBTU), 2-(2-0kso-1-(2H)-piridiI)-1,1,3,3-tetrametiluronyum tetrafloroborat (TPTU) ya da O-(7-azabenzotriazol-1-II)-N,N,N', '-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat (HATU), ya da 1-hidr0ksibenzotriazol (HOBt) ya da benzotriazoI-1- iloksitris(dimetilamino)fosfonyum hekzaflorofosfat (BOP) ya da benzotriazol-1- iloksitris(pirolidino) fosfonyum hekzaflorofosfat (PYBOP) ya da N-hidroksisüksinimit ya da bunlarin bazlarla karisimlaridir.
Bazlar; örnek olarak, alkali metal karbonatlari, örnek olarak sodyum karbonat ya da potasyum karbonat ya da sodyum hidrojenkarbonat ya da potasyum hidrojenkarbonat ya da trialkilaminler gibi organik bazlar, örnek olarak trietilamin, N-metilmorfolin, N- metilpiperidin, 4-dimetilamin0piridin ya da N,N-diizopropiletilamin, tercihen N,N- diizopropiletilamin verilmektedir.
Tercihen, kondensasyon, N,N-diizopr0piletilamin varliginda TBTU ile yürütülmektedir.
Ikinci asama reaksiyon; opsiyonel olarak inert çözücülerde, tercihen standart basinçta oda sicakligindan 60°C'ye kadar bir sicaklik araliginda etkilenir.
Inert çözücüler; örnek olarak, diklorometan. triklorometan, karbon tetraklorür ya da 1.2- dikloroetan gibi halohidrokarbonlar ya da tetrahidrofuran ya da dioksan gibi eterlerdir, tercihen diklorometan verilmektedir.
Asitler; örnek olarak, dioksandaki hidrojen klorür ya da trifloroasetik asittir, tercihen konsantre trifloroasetik asit verilmektedir. Konsantre trifloroasetik asit; su, fenol, tiyoanizol ve 1,2-etandiol benzeri süpürücülerin ilavesi ile kullanilabilir. Tercihen, bu süpürücülerin herbirinin %1 ila 5'i verilmektedir.
Formül (V)'in bilesigi iyi bilinmektedir ve uygun baslangiç bilesiklerinden bilinen prosesler vasitasiyla sentezlenebilir (örnek 14A).
Formül (lV)`ün bilesikleri iyi bilinmektedir ve formül (Vl)`nin bilesiklerinin reaksiyon vermesi ile hazirlanabilirler H3C i k **30% li CH3 o CH2 n ve R“in her biri Paladyum(0) kaynagi ve bir indirgen madde ile, yukarida tanimlandigi sekildedir.
Reaksiyon genel olarak inert çözücülerde, opsiyonel olarak zayif bir bazin mevcudiyetinde, tercihen standart basinçta 0°C'den 50°C'ye kadar bir sicaklik araliginda etkilenir.
Inert çözücüler; örnek olarak, diklorometan ya da 1,2-dikl0r0etan gibi halohidrokarbonlar ya da dioksan, tetrahidrofuran ya da 1,2-dimet0ksietan gibi eterler ya da aseton, dimetilformamit, dimetilasetamit, 2-bütan0n ya da asetonitril gibi diger çözücülerdir. Çözücülerin karisimlarinin kullanilmasi ayni ölçüde mümkündür. Tercihen tetrahidrofuran verilmektedir.
Paladyum(0) kaynaklari; örnek olarak, reaksiyon süresince dogal durumundaki Paladyum(0)'i indirgeyen tetrakis(trifeniIfosfin)paladyum(0), tris(dibenzilidenaset0n)dipaIadyum(0) or Paladyum(ll) kaynaklaridir, tercihen tetrakis(trifenilfosfin)-paladyum(0) verilmektedir.
Indirgen maddeler; örnek olarak, formik asit ya da trietil silandir, tercihen formik asit verilmektedir.
Bazlar; örnek olarak, trietilamin, N,N-diizopropiletilamin ya da potasyum fosfat çözeltisidir, tercihen trietilamin verilmektedir.
Formül (Vl)'nin bilesikleri iyi bilinmektedir ya da formül (VII)'nin bilesiklerinin reaksiyon vermesi ile hazirlanabilir n ve Rl'in her biri formül (VIII) bilesigi ile, yukarida tanimlandigi sekildedir Reaksiyon genel olarak inert çözücülerde, bir dehidrasyon reaktifi varliginda, opsiyonel olarak zayif bir bazin mevcudiyetinde, tercihen standart basinçta oda sicakligindan 70°C'ye kadar bir sicaklik araliginda etkilenir.
Inert çözücüler; örnek olarak, diklorometan, triklorometan ya da 1,2-dikl0r0etan gibi halohidrokarbonlar ya da dioksan, tetrahidrofuran ya da 1,2-dimet0ksietan gibi eterler ya da aseton, dimetilformamit, dimetilasetamit, 2-bütan0n ya da asetonitril gibi diger çözücülerdir. Çözücülerin karisimlarinin kullanilmasi ayni ölçüde mümkündür. Tercihen diklorometan verilmektedir.
Bu baglamdaki uygun dehidrasyon reaktifleri; örnek olarak, karbodiimidler, örnek olarak N,N'-dietil-, N,N'-dipr0piI-, N,N'-diizopr0piI-, N,N'-disiklohekzilkarbodiimid. N-(3- dimetilamino-izopropiI)-N'-etilkarbodiimid hidroklorür (EDC), N-siklohekzilkarbodiimid- N'-pr0piloksimetilpolistiren (PS-karbodiimid) ya da karbonildiimidazol gibi karbonil bilesikleri ya da 2-etiI-5-fenil-1,2-0kzazolyum 3-sülfat ya da 2-tert-bütiI-5- metilizokzazolyum perklorat gibi 1,2-0kzalyum bilesikleri ya da 2-et0ksi-1- etoksikarboniI-1,2-dihidr0kin0lin gibi asilamino bilesikleri ya da propanfosfonik anhidrit ya da izobütil kloroformat ya da bis-(2-0kso-3-okzazolidiniI)fosf0ril klorür ya da benzotriazoliloksitri(dimetilamin0)fosf0nyum hekzaflorofosfat ya da O-(benzotriazol-1- iI)-N,N,N', '-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat (HBTU), benzotriazoI-1-iI-N-tetrametil- uronyum tetrafloroborat (TBTU), 2-(2-okso-1-(2H)-piridiI)-1,1,3,3-tetrametiluronyum tetrafloroborat (TPTU) ya da O-(7-azabenzotriazoI-1-iI)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat (HATU), ya da 1-hidroksibenzotriazol (HOBt) ya da benzotriazol-l- iloksitris(dimetilamino)fosfonyum hekzaflorofosfat (BOP) ya da benzotriazol-1- iloksitris(pir0lidino) fosfonyum hekzaflorofosfat (PYBOP) ya da N-hidroksisüksinimit ya da bunlarin bazlarla karisimlaridir.
Bazlar; örnek olarak, alkali metal karbonatlari, örnek olarak sodyum karbonat ya da potasyum karbonat ya da sodyum hidrojenkarbonat ya da potasyum hidrojenkarbonat ya da trialkilaminler gibi organik bazlar, örnek olarak trietilamin, N-metilmorfolin, N- metilpiperidin, 4-dimetilaminopiridin ya da N,N-diizopropiletilamin, tercihen N,N- diizopropiletilamin verilmektedir.
Tercihen, kondensasyon, N,N-diizopropiletilamin varliginda HATU ile yürütülmektedir.
Formül (VII) ve (VIII) bilesikleri iyi bilinmektedir ve uygun baslangiç bilesiklerinden bilinen prosesler vasitasiyla sentezlenebilir.
Bulusa göre bilesiklerin preparasyonu, asagidaki sentez semasi vasitasiyla resmedilir: . o DB` . o DIFAJNMF .0. NH Hac. '0 "H ii,q CHi o cii3 o cuz CH, 0 CH, mikrodalga O “3,, cuâ o “en __,_ 0 Üç . ./ 2-: ` Tetrilos O` N' . 'V '/ 0.: ~ w, y 0 o Nu2 o o' ' Nil, HATU _. o , 4-' 3 __ o _ Nu ”:5 .0. m Hac' " Bulusa göre bilesikler, farmakolojik aktivitenin beklenmeyen bir kullanisli spektrumunu gösterir.
Dolayisiyla insanlardaki ve hayvanlardaki hastaliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için ilaçlar olarak kullanilmasi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler, spesifik adrenomullin (ADM) salinimli ön ilaçlar olarak ayirt Bu bulus ayrica; hastaliklarin, özellikle kardiyovasküler, ödematöz ve/veya inflamatuvar hastaliklarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için bulusa göre bilesiklerin kullanilmasini Bu bulus için, “tedavi” terimi; bir hastalik, bozukluk, durum ya da halin inhibe edilmesi, geciktirilmesi, rahatlatilmasi, hafifletilmesi, durdurulmasi, indirgenmesini ya da regresyona sebep olmasini ve/veya bunlarin gelisimi ve/veya ilerleyisi ve/veya bunlarin semptomlarini içerir. “Önleme” ya da “önleyen” terimi; bir hastalik, bozukluk, durum ya da hale sahip olma, daralma ya da deneyim etme riskinin, bunlarin gelisimi ve/veya ilerleyisi ve/veya bunlarin semptomlarinin indirgenmesini içerir. önleme terimi profilaksiyi içerir. Bir hastalik, bozukluk, durum ya da halin tedavisi ya da önlenmesi kismen ya da tamamen etkili olabilir.
Onlarin farmakolojik özelliklere dayanarak, bulusa göre bilesikler; kardiyovasküler hastaliklarin, bilhassa kalp yetmezligi, özellikle kronik ve akut kalp yetmezligi, diyastolik ve sistolik (konjestif) kalp yetmezligi, akut dekompanse kalp yetmezligi, kardiyak yetersizlik, koroner kalp hastaligi, angina pektoris, miyokard enfarktüs, iskemi reperfüzyon hasari, iskemik ve hemorajik inme, arterioskleroz, ateroskleroz, hipertansiyon, özellikle esansiyel hipertansiyon, malignan esansiyel hipertansiyon, ikincil hipertansiyon, renovasküler hipertansiyon ve renal ve endokrin bozukluklar için ikincil hipertansiyon, hipertansif kalp hastaligi, hipertansif renal hastaligi, pulmoner hipertansiyon, özellikle ikincil pulmoner hipertansiyon, akut kor pulmonale ile ya da olmaksizin pulmoner embolizmi takiben pulmoner hipertansiyon, birincil pulmoner hipertansiyon ve periferik arter tikanikligi hastaliginin tedavisi ve/veya önlenmesi için kullanilabilir.
Bulusa göre bilesikler ayrica hipertansiyonlu ve hipertansiyonsuz (pre-eklampsi) gestasyonel [gebelige bagli] ödem ile proteinürinin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler ayrica; kronik obstrüktif pulmoner hastalik, astim, akut ve kronik pulmoner ödem, alerjik alveolit ve mantar partikülleri ile organik tuz nedeniyle pnömonit, aktinomisetik ya da baska bir köken, akut kimyasal bronsit, akut ve kronik kimyasal pulmoner ödem (örnegin azot oksit, fosjen inhalasyonu sonrasinda), nörojenik pulmoner ödem, radyasyon nedeniyle akut ve kronik pulmoner görünümler, akut ve kronik interstisyel akciger hastaliklari (ancak ilaca bagli interstisyel akciger hastaliklari ile sinirli degildir, örnegin ikincil Bleomisin tedavisi), yetiskinlerde ya da yenidoganlari içeren çocuklarda akut akciger hasari / akut solunum bozuklugu sendromu (ALI/ARDS), ALI/ARDS ikincil pnömoni ve sepsis, aspirasyon pnömonisi ve ALI/ARDS ikincil aspirasyon (kusturulmus mide içerigi nedeniyle aspirasyon pnömonisi ile sinirli degildir), ALI/ARDS ikincil duman gazi inhalasyonu, transfüzyon-iliskili akut akciger hasari (TRALI), ALi/ARDS ya da ameliyati takiben akut pulmoner yetmezlik, travma ya da yaniklar, ventilatör kaynakli akciger hasari (VILI), mekonyum aspirasyonu takiben akciger hasari, pulmoner fibroz ve dag hastaligi gibi pulmoner hastaliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler ayrica; kronik böbrek hastaliklari (asama 1-5), böbrek yetmezligi, diyabetik nefropati, hipertansif kronik böbrek hastaligi, glomerülonefrit, hizla ilerleyen ve kronik nefritik sendrom, belirli olmayan nefritik sendrom, nefrotik sendrom, herediter nefropatiler, akut ve kronik tübuIo-intersitisyel nefrit, akut böbrek hasari, akut böbrek yetmezligi, posttravmatik böbrek yetmezligi, travmatik ve islem sonrasi böbrek hasari, kardiyorenal sendromu ile böbrek nakillerinin korunmasi ve fonksiyonel gelisiminin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bilesikler buna ek olarak diabetes mellitus ile onlarin örnegin diyabetik makro- ve mikroanjiyopati, diyabetik nefropati ile nöropati gibi konsekütif semptomlarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler; viral ve bakteriyel menenjit and ansefalit (örnegin Zoster ansefalit), beyin hasari, beyin ve omuriligin primer ya da sekonder [metastaz] malign neoplazmi, radikülit ve poliradikülit, Guillain-Barre sendromu [akut (post-)infektif polinevrit, Miller Fisher Sendromu], amiyotrofik lateral skleroz [progresif spinal müsküler atrofi], Parkinson hastaligi, akut ve kronik polinöropatiler, agri, serebral ödem, Alzheimer hastaligi, sinir sisteminin dejeneratif hastaliklari gibi merkezi ve periferik sinir sistemi bozukluklari ile mesela multiple skleroz ile sinirli olmayan merkezi sinir sisteminin demiyelinizan hastaliklarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için kullanilabilir.
Bulusa göre bilesikler ayrica; portal hipertansiyon ve karaciger fibrozu [siroz] ile onun özafagus varis ve assit gibi sekellerinin tedavisi ve/veya önlenmesi için, malignler ya da inflamasyonlar için sekonder plevral effüzyonlarin tedavisi ve/veya önlenmesi için ve Bulusa göre bilesikler ayrica; inflamatuvar bagirsak hastaligi, Crohn hastaligi, ülseratif kolit gibi gastrointestinal kanalin inflamatuvar hastaliklari ile toksik ve vasküler bagirsak hastaliklarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler ayrica; sepsis, septik sok, bulasici olmayan kökenin sistemik inflamatuvar yanit sendromu (SIRS), hemorajik sok, organ disfonksiyonu ya da çoklu organ yetmezlikli (MOF) sepsis ya da SIRS, travmatik sok, toksik sok, anafilaktik sok, ürtiker, böcek sokmasi ve isirma ile iliskili alerjiler, anjiyonörotik ödem [Dev ürtiker, Quincke ödemi], akut Iarenjit ve trakeit ile akut obstrüktif Ierenjit [krup] ve epiglotitin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bilesikler ayrica; poliartrit, Iupus eritematozus, skleroderma, purpura ve vaskülit ile sinirli olmayanlar gibi otoimmün hastaliklari olarak sayilacak diger hastalik formlarinin ve romatoid tipi hastaliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler ayrica; oküler hipertansiyon (glokom), diyabetik retinopati ve makular ödemin tedavisi için uygundur.
Bulusa göre bilesikler ayrica; iskeminin operasyon ile ilgili durumlari ile cerrahi müdahaleler sonrasinda bunlarin konsekütif semptomlarinin, bilhassa bir kalp-akciger makinesi kullanilarak kalpteki müdahalelerin (örnegin bypass operasyonlari, kalp kapakçigi implantlari), karotid arterlerdeki müdahaleler, aorttaki müdahaleler ve kafatasinin üst bölümünün penetrasyonu ya da aletle yapilan açma islemi ile müdahalelerin tedavisi ve/veya önlenmesi için kullanilabilir.
Bilesikler ayrica; yara iyilesmesinin hizlandirilmasi ile nekahat süresinin kisaltilmasi amaci ile cerrahi müdahaleler durumunda genel tedavi ve/veya önleme için uygundur.
Onlar ayrica yara iyilesmesinin hizlandirilmasina uygundur.
Bilesikler ayrica; mesela osteoporoz, osteomalazi ve hiperparatiroidizm ile iliskili kemik bozukluklari ile sinirli olmayan kemik yogunlugu ve yapi bozukluklarinin tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bilesikler ayrica; cinsel islev bozukluklarinin, bilhassa erkek erektil disfonksiyonunun tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Tercih edilir bilesikler; kalp yetmezligi, koroner kalp hastaligi, iskemik ve/veya hemorajik inme, hipertansiyon, pulmoner hipertansiyon, periferik arter tikanikligi hastaligi, pre-eklampsi, kronik obstrüktif akciger hastaligi, astim, akut ve/veya kronik akciger ödemi, inhale organik toz ile mantar partikülleri, aktinomisetik ya da diger köken nedeniyle alerjik alveolit ve/veya pnömoni ve/veya radyasyon nedeniyle akut kimyasal bronsit, akut ve/veya kronik kimyasal akciger ödemi, nörojenik akciger ödemi, akut ve/veya kronik akciger manifestasyonlari, yetiskinlerde ya da yenidoganlari içeren çocuklarda akut ve/veya kronik interstisyel akciger hastaliklari, akut akciger hasari / akut solunum bozuklugu sendromu (ALI/ARDS), ALI/ARDS ikincil pnömoni ve sepsis, aspirasyon pnömonisi ve ALI/ARDS ikincil aspirasyon, ALI/ARDS ikincil duman gazi inhalasyonu, transfüzyon-iliskili akut akciger hasari (TRALI), ALI/ARDS ve/veya ameliyati takiben akut pulmoner yetmezlik, travma ve/veya yaniklar ve/veya ventilatör kaynakli akciger hasari (VILI), mekonyum aspirasyonu takiben akciger hasari, pulmoner fibroz, dag hastaligi kronik böbrek hastaliklari, glomerülonefrit, akut böbrek hasari, kardiyorenal sendromu, Ienfödem, inflamatuvar bagirsak hastaligi, sepsis, septik sok, bulasici olmayan kökenin sistemik inflamatuvar yanit sendromu (SIRS), anafilaktik sok, inflamatuvar bagirsak hastaligi ve/veya ürtiker'in tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Daha tercih edilebilir bilesikler; kalp yetmezligi, hipertansiyon, pulmoner hipertansiyon, astim, akut ve/veya kronik kimyasal akciger ödemi, yetiskinlerde ya da yenidoganlari içeren çocuklarda akut akciger hasari / akut solunum bozuklugu sendromu (ALI/ARDS), ALI/ARDS ikincil pnömoni ve sepsis, aspirasyon pnömonisi ve ALI/ARDS ikincil aspirasyon, ALI/ARDS ikincil duman gazi inhalasyonu, transfüzyon-iliskili akut akciger hasari (TRALI), ALI/ARDS ve/veya ameliyati takiben akut pulmoner yetmezlik, travma ve/veya yaniklar ve/veya ventilatör kaynakli akciger hasari (VILI), mekonyum aspirasyonu takiben akciger hasari, sepsis, septik sok, bulasici olmayan kökenin sistemik inflamatuvar yanit sendromu (SIRS), anafilaktik sok, inflamatuvar bagirsak hastaligi ve/veya ürtiker'in tedavisi ve/veya önlenmesi için uygundur.
Bu bulus ayrica; rahatsizliklarin, bilhassa yukarida bahsedilen rahatsizliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için bulusa göre bilesiklerin kullanilmasini saglar.
Bu bulus ayrica; rahatsizliklarin, bilhassa yukarida bahsedilen rahatsizliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi amaciyla bir ilacin hazirlanmasi için bulusa göre bilesiklerin kullanilmasini saglar.
Bu bulus ayrica; rahatsizliklarin, bilhassa bulusa göre bilesiklerin aktif bir miktari kullanilarak yukarida bahsedilen rahatsizliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için bir yöntem saglar.
Bulus ayrica; bilhassa yukarida bahsedilen rahatsizliklarin tedavisi ve/veya önlenmesi için bulusa göre bir bilesik ve bir ya da daha da fazla etken maddeyi içeren ilaçlari saglar. Örnek gösterilen ve tercih edilen etken madde kombinasyonlari: ACE inhibitörleri, anjiyotensin reseptör antagonistleri, beta-2 reseptör agonistleri, fosfodiesteraz inhibitörleri, glukokorticoid reseptör agonistleri, diüretikler ya da rekombinant anjiyotensin dönüstürücü enzim-2 ya da asetilsalisilik asit (aspirin).
Bulusun tercih edilen bir somut örneginde, bulusa göre bilesikler; örnek vasitasi ile ve tercihen enalapril, kinapril, captopril, Iisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, perindopril, silazapril, imidapril, benazepril, moeksipril, spirapril ya da trandopril gibi bir ACE inhibitörü ile kombinasyonda tatbik edilir.
Bulusun tercih edilen bir somut örneginde, bulusa göre bilesikler; örnek vasitasi ile ve tercihen Iosartan, kandesartan, valsartan, telmisartan ya da embusartan gibi bir anjiyotensin reseptör antagonist ile kombinasyonda tatbik edilir.
Bulusun tercih edilen bir somut örneginde, bulusa göre bilesikler; örnek vasitasi ile ve tercihen salbutamol, pirbuterol, salmeterol, terbutalin, fenoterol, tulobuterol, klenbuterol, reproterol ya da formoterol gibi bir beta-2 reseptör agonisti ile kombinasyonda tatbik Bulusun tercih edilen bir somut örneginde, bulusa göre bilesikler; örnek vasitasi ile ve tercihen milrinone, amrinone, pimobendan, silostazol, sildenafil, vardenafil ya da tadalafil gibi bir fosfodiesteraz (PDE) inhibitörü ile kombinasyonda tatbik edilir.
Bulusun tercih edilen bir somut örneginde, bulusa göre bilesikler; örnek vasitasi ile ve tercihen kortiosol, kortizon, hidrokortizon, prednizon, metiI-prednizolon, predniliden, deflazakort, fluokortolon, triamsinolon, deksametazon ya da betametazon gibi bir glukokortikoid reseptör agonisti ile kombinasyonda tatbik edilir.
Tercih edilen somut bir örnekte, bulusa göre bilesikler; furosemid, torasemid ve hidroklorotiazid gibi diüretikler ile kombinasyonda tatbik edilir.
Bu bulus ayrica; normal bir sekilde bir ya da daha fazla inert, toksik olmayan, farmasötik olarak uygun yardimci madde ile birlikte bulusa göre en azindan bir bilesik içeren ilaçlar ve yukarida bahsedilen amaçlar için burada kullanilmasi ile ilgilidir.
Bulusa göre bilesikler, sistemik olarak ve/veya lokal olarak rol oynayabilir. Bu amaçla, uygun bir yol ile örnek olarak parenteral, pulmoner, nazal, sublingual, Iingual, bukkal, dermal, transdermal, konjunktival, optik yol ile ya da implant ya da stent olarak tatbik edilebilir.
Bulusa göre bilesikler, bu uygulama yollari için uygun uygulama sekillerinde tatbik edilebilir.
Parenteral uygulama, bir absorpsiyon adimindan kaçinma (örnegin intravenöz, intraarteriyel, intrakardiyak, intraspinal ya da intralumbar) ile ya da bir absorpsiyonun inklüzyonu (örnegin intramüsküler, subkütanöz, intrakütanöz, perkütanöz ya da intraperitoneal) ile meydana gelebilir. Parenteral uygulama için uygun uygulama formlari; çözeltiler, süspansiyonlar, emülsiyonlar, Iiyofilizatlar ya da steril toz formunda enjeksiyon ve infüzyon için preparasyonlari içerir.
Diger uygulama yollari için uygunluk; örnek olarak inhalasyon (toz inhalasyon aleti, nebülizörleri içeren), burun damlasi, göz damlasi, çözeltiler ya da Spreyler; filmler/ilaç kapsülleri ya da sulu süspansiyonlar (Iosyonlar, sallama karisimlari), Iipofilik süspansiyonlar, merhemler, kremler, transdermal terapötik sistemler (örnegin eklemeler), süt, macunlar, köpükler, pudra tozlari, implantlar ya da stentler.
Parenteral uygulama, özellikle intravenöz uygulama tercih edilmektedir.
Bulusa göre bilesikler, düzenli uygulama sekillerine dönüstürülebilir. Bu; inert, toksik olmayan, farmasötik olarak uygun yardimci maddeler ile karistirma yoluyla bilinen bir sekilde kendiliginden meydana gelebilir. Bu yardimci maddeler; tasiyicilar (örnek olarak mikrokristalin selüloz, laktoz, mannitol), çözücüler (örnegin sivi polietilen glikoller), emülsifiye edici maddeler ile dispersanlar ya da islatici maddeler (örnek olarak sodyum dodesilsülfat, polioksisorbitan oleat), baglayicilar (örnek olarak polivinilpirolidon), sentetik ve dogal polimerler (örnek olarak albumin), dengeleyiciler (örnegin antioksidanlar, örnek olarak askorbik asit), renklendirioiler (örnegin inorganik pigmentler, örnek olarak demir oksitler) ve maskeleme aromalari ve/veya kokularini Etkili sonuçlar elde etmek için vücut agirligi bazinda yaklasik 0,001 ila 5 mg/kg, tercihen yaklasik 0,01 ila 1 mg/kg'lik tatbik miktarlarinda parenteral uygulama durumunda genel olarak avantajli oldugu bulunmustur.
Bilhassa vücut agirligi, ilaç uygulama yolu, etken maddeye bireysel yanit, preparasyonun dogasi ile gerçeklesen uygulama süresi ya da araliginin bir fonksiyonu olarak belirli miktarlardan türetildigi bazi durumlarda yine de gerekli olabilir. Örnek vermek gerekirse, yukarida bahsedilen minimum miktardan daha azi bazi durumlarda yeterli olabilir, oysa ki diger durumlarda belirli bir üst limit asilmalidir. Daha büyük miktarlarda ilaç uygulanmasi durumunda, günlük bireysel dozlarin ekseriyetini bunlara bölmek tavsiye edilebilirdir.
Asagidaki çalisma örnekleri bulusu resmeder. Bulus bu örneklerle sinirli degildir.
Asagidaki testlerdeki ve örneklerdeki yüzdeler aksi belirtilmedigi sürece, agirlikça yüzdelerdir; parçalar agirlikça parçalardir. Sivi/sivi çözeltileri için çözücü oranlari, dilüsyon oranlari ve konsantrasyon verilerinin her biri hacim bazindadir.
A. Örnekler Kisaltmalar AA amino asit Acm asetamidometil ADM adrenomedullin (insan) ADM(2-52) disülfit bagi ile C-terminal amidi içeren, ADM AA 2 ila AA 52'nin peptit sekansi approx. yaklasik olarak 800 teit-bütiloksikarbonil of theory karbonildiimidazol gün, ikili (NMRlde) ince-tabaka kromatografisi dogrudan kimyasal iyonizasyon (MS`de) ikilinin ikilisi (NMR'de) N,N-diizopr0piletilamin 4-dimetilaminopiridin N,N-dimetilformamit dimetil sülfoksit teorik (verimde) elektrosprey iyonizasyonu (MS”de) (9H-floren-9-iImetoksi)karbonil O-(7-azabenzotriazoI-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum hekzaflorofosfat yüksek basinçli, yüksek performansli sivi kromatografisi sivi kromatografisi ile akuple kütle spektroskopisi multiplet (NMR'de) kütle spektroskopisi nükleer manyetik rezonans spektroskopisi 2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sülfonil polietilen glikol ters faz (HPLC'de) oda sicakligi alikonma zamani (HPLC'de) singulet (NMR'de) benzotriazol-i-iI-N-tetrametil-uronyum tetrafloroborat tert-bütil trifloroasetik asit tetrahidrofu ran Amino asitlerin ve peptit sekanslarinin terminolojisi: International Union of Pure and Applied Chemistry and International Union of Biochemistry: Nomenclature and Symbolism for Amino Acids and Peptides (Recommendations 1983). In: Pure & Appl.
Geleneksel Isim Sembol Tek harfli sembol Arginin Arg R Asparajin Asn N Aspartik asit Asp D Sistein Cys C Glutamik asit Glu E Glutamin Gln Q Glisin Gly G Histidin His H Izolösin lIe I Lösin Leu L Lizin Lys K Metiyonin Met M Fenilalanin Phe F Prolin Pro P Treonin Thr T Triptofan Trp W Tirozin Tyr Y LC-MS ve MS yöntemleri Yöntem 1 (LC-MS): Alet tipi: Waters ACQUITY SQD UPLC Sistemi; kolon: ml %99 kuvvetli formik asit, mobil faz B: 1 1 asetonitril + 0,25 ml %99 kuvvetli Yöntem 2 (LC-MS): MS alet tipi: Waters (Micromass) Quattro Micro; HPLC alet tipi: Agilent 1100 serisi; kolon: Thermo Hypersil GOLD 3 p 20 mm x 4 mm; mobil faz A: 1 1 su + 0.5 ml %50 kuvvetli formik asit, mobil faz B: 1 1 asetonitril Yöntem 3 (HPLC): Alet tipi: HP 1200 Serisi; UV DAD; kolon: Phenomenex kuvvetli formik asit, mobil faz B: 1 1 asetonitril + 0,5 ml %50 kuvvetli formik asit; akis hizi: 2,5 mI/dak; firin: RT; UV deteksiyon: 210 nm.
Yöntem 4 (HPLC): Alet tipi: HP 1200 Serisi; UV DAD; kolon: Merck Chromolith formik asit, mobil faz B: 1 1 asetonitril + 0,5 ml %50 kuvvetli formik asit; firin: RT; UV deteksiyon: 210 nm.
Yöntem 5 (DCI MS): Alet tipi: Thermo Fisher-Scientific DSQ; kimyasal iyonizasyon; reaktant amonyak gazi; kaynak sicakligi: 200°C; iyonizasyon enerjisi 70eV.
Yöntem 6 (MALDI MS): Alet tipi Kratos PC-Kompact SEO V1.2.2 MALDI TOF MS, positif iyonizasyon modu, Lineer yüksek, Güç: 75.
Mikrodalga sentezleyici: Biotage Emrys Initiator Il sentezleyici, 20 ml reaksiyon hacmine kadar degisken vial boyutu ve "Robot 60" numune islemci ile pH 4 sitrat tamponu: Fluka No 82566; Sitrat tamponu pH 4, sodyum azit bilesimi ile stabilize edilmis: sitrik asit, ~0,056 M; sodyum azit, ~%0,05; sodyum klorür, ~0,044 M; sodyum hidroksit, ~0,068 M. 40kDa metoksi poli(etilen glikol) maleimido propiyonamid (lineer 40k Agirlik ortalamali molekül agirligi, Mw (GPC) 1,08.
Baslangiç bilesikleri Örnek 1A AlIil-N-(tert-bütoksikarbonil)-O-[(4-nitrofenoksi)karbonil]-L-tirosinat H3C o NH 0 CH3 0 CH2 piridin 1000 ml diklorometanda birlestirilmis ve 2 saat süresince oda sicakliginda karistirilmistir. Reaksiyon karisimi; yaklasik olarak 500 ml su ile ve yaklasik olarak 250 ml tuzlu su ile ekstrakte edilmis ve yaklasik olarak 100 g sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Çözücü, döner buharlastirici vasitasiyla giderilmis (yaklasik olarak 40°C, yaklasik olarak 200 mbar, yaklasik olarak 30 dak) ve ürün, sicak dietil eterde çözünmüs ve 4°C'de gece boyunca kristalize edilmistir. Kristaller; filtre edilmis, dietil eter ile yikanmis ve yüksek vakumda kurutulmustur (yaklasik olarak 0,1 mbar, 18 saat).
Verim, istenen verim olarak 29,86 g (59,6 mmol, terorinin %52'si) olmustur.
LC-MS (yöntem 1): R = 1,23 dak., m/z = + Örnek 2A (28)-4-{[(4-{(25)-3-(AIIiIoksi)-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]-3- oksopropil}fenoksi)karbonil]-amino}-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]bütanoik asit 309\0H3 H3C o NH CH3 o CH2 mmol) N,N-diizopr0piletilamin ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi 3 parçaya bölünmüstür. Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 75°C'deki bir sizdirmaz tüpte 30 dakika süresince isitilmistir. Çözücü, birlestirilen reaksiyon karisimindan döner buharlastirici vasitasiyla giderilmistir (yaklasik olarak 40°C, yaklasik olarak 200 mbar, yaklasik olarak 30 dak). Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 600 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan/etil asetat 4/1, diklorometan/etil asetat 1/1, diklorometan/metanol 4/1 ve diklorometan/ metanol 1/1 olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, Istenen ürünün 4.02 g'ini (6,54 mmol, teorinin %80'i) vermistir.
LC-MS (yöntem 1): R = 1,07 dak., m/z = ' Örnek 3A AlIil O-({(38)-4-{[(2R)-1-amino-1-okso-3-(tritiIsülfaniI)propan-2-il]amino}-3-[(tert- bütoksi-karbonil)amino]-4-oksobütil}karbamoiI)-N-(tert-bütoksikarboniI)-L- tirosinat ”30% T | CH3 o CH2 9 (4,42 mmol) HATU ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, 5 parçaya bölünmüstür.
Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 60°C'deki bir sizdirmaz tüpte 30 dakika süresince isitilmistir. Çözücü, birlestirilen reaksiyon karisimindan döner buharlastirici vasitasiyla giderilmistir (yaklasik olarak 40°C, yaklasik olarak 200 mbar, yaklasik olarak dak). Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 600 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan/etil asetat 2/1, diklorometan/etil asetat 1/1, diklorometan/metanol 20/1 ve diklorometan/metanol /1 olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga saflikta) vermistir.
LC-MS (yöntem 1): R = 1,36 dak., m/z = * Örnek 4A O-({(3S)-4-{[(2R)-1-Amino-1-okso-3-(tritiIsülfaniI)propan-2-il]amino}-3-[(tert- bütoksikarboniI)-amino]-4-oksobütiI}karbamoiI)-N-(tert-bütoksikarboniI)-L-tirozin tetrakis(trifenilfosfin)paladyum(0) ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Reaksiyon, yaklasik olarak 100 ml su ile seyreltilmis ve yaklasik olarak 100 ml diklorometan ile iki defa ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik fazlar; tuzlu su ile ekstrakte edilmis, sodyum sülfat üzerinde kurutulmus ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 500 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan, diklorometan/metanol 20/1 ve diklorometan/metanol olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek mmol, teorinin %59'u) saf ürün vermesi için bir su/metanol gradyani ile bir 018'de preparatif RP-HPLC vasitasiyla ayrica saflastirilmistir.
LC-MS (yöntem 1): Rt: 1,22 dak., m/z = + 1H-NMR (, 7.28-7.35 (m, Örnek 5A tert-BütiI-metil(2-oksotetrahidrofuran-3-iI)karbamat Bilesik, Alberico, Dino; Paquin, Jean-Francois; Lautens, Mark; Tetrahedron, 2005, cilt iyodometan, 100 ml kuru dimetil formamitte çözünmüstür. Çözelti O°C”ye sogutulmus ve 1,34 9 (mineral yapda %60, 33,5 mmol) sodyum hidrür ilave edilmistir. Reaksiyon, oda sicakligina isitilmis ve gece boyunca karistirilmistir. Reaksiyon karisimi, yaklasik olarak 400 ml suya ilave edilmis ve karisim, yaklasik olarak 300 ml etil asetat ile üç defa ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik fazlar, sodyum sülfat üzerinde kurutulmus ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, istenen ürünün 8,70 g'ini (25,7 mmol, teorinin %100”ü, %63 saflik) vermistir.
Analitik veriler, literatür ile uyumlu olmustur. Ürün, ayrica saflastirma olmaksizin sonraki sentetik adimda kullanilmistir. Örnek 6A 2-[(tert-Bütoksikarbonil)(metil)amino]-4-(1,3-di0kso-1,3-dihidro-2H-izoindol-2- il)bütanoik asit Örnek 5A bilesiginin 8,70 g'i (yaklasik olarak 25 mmol, yaklasik olarak %63 saflikta), edilmis ve reaksiyon karisimi 7 saat süresince 150°C'ye isitilmistir. Çözücünün yaklasik olarak 400 ml'si, döner buharlastirici vasitasiyla giderilmistir (yaklasik olarak 60°C, yaklasik olarak 10 mbar, yaklasik olarak 30 dak.). Reaksiyon karisimi; yaklasik olarak 100 ml su, 200 9 buz ve 15 ml asetik asidin bir karisimi içine dökülmüstür. Kalan buzun erimesinden sonra reaksiyon karisimi filtre edilmis ve filtrat, yaklasik olarak 100 ml diklorometan ile 3 defa ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik fazlar, sodyum sülfat üzerinde kurutulmus ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 70 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan/etil asetat 9/1 ila diklorometan/etil aSetat 6/4 olmustur. ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, 2,39 9 (6,04 mmol, teorinin LC-MS (yöntem 1): R = 0,92 dak., m/z = + Örnek 7A 4-Amirio-2-[(tert-bütoksikarbonil)(metil)amino]bütanoik asit H2N' N~CH3 23,8 ml (488 mmol) hidrazin hidrat reaksiyon karisimina ilave edilmistir. Gece boyunca karistirma sonrasinda, reaksiyon karisimi filtre edilmis ve filtrat, düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Ham ürün etanolde çözünmüstür ve yaklasik olarak 50 g silika jel ilave edilmistir, çözücü düsük basinç altinda giderilmistir. Sonuçta elde edilen kati, yaklasik olarak 500 9 bir silika kolonuna ilave edilmis ve kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler, diklorometan/metanol 9/1 ila diklorometan/metanol 1/1 olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, 2.98 9 (12,8 mmol, teorinin %39'u) ürün vermistir.
LC-MS (yöntem 2): R = 0,21 dak., m/z = + DCI MS (yöntem 5): m/z = + Örnek 8A 4-{[(4-{(28)-3-(AIliIoksi)-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]-3- oksopropil}fenoksi)karbonil]-amino}-2-[(tert- bütoksikarbonil)(metiI)amino]bütanoik asit CH3 o CH2 7A bilesiginin 0,455 g'i (1,92 mmol) ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, 2 parçaya bölünmüstür. Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 80°C'deki bir sizdirmaz tüpte 30 dakika süresince isitilmistir. Çözücü, birlestirilen reaksiyon karisimindan düsük basinç altinda giderilmistir. Ham ürün, 9/1 ila 1/9'luk bir su metanol gradyani ile bir C18 kolonunda preparatif RP-HPLC vasitasiyla saflastirilmistir. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, 2 diyastereomerin bir karisimi olarak istenen ürünün 0,523 g'ini (0,85 mmol, teorinin LC-MS (yöntem 1): R = 1,08 ve 1,11 dak., m/z = “ Örnek 9A All" O-[(4-{[(2R)-1-amino-1-okso-3-(tritiIsülfanil)propan-2-il]amino}-3-[(tert- bütoksikarboniI)-(metiI)amino]-4-oksobütiI)karbamoiI]-N-(tert-bütoksikarbonil)-L- tirosinat 9 (3,86 mmol) HATU ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, 5 parçaya bölünmüstür.
Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 60°C'deki bir sizdirmaz tüpte 30 dakika süresince isitilmistir. Çözücü, birlestirilen reaksiyon karisimindan döner buharlastirici vasitasiyla giderilmistir (yaklasik olarak 40°C, yaklasik olarak 200 mbar, yaklasik olarak dak). Ham ürün, 9/1 ila 1/9'Iuk bir su metanol gradyani ile bir 018 kolonunda preparatif RP-HPLC vasitasiyla saflastirilmistir. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, diyastereomerlerin bir vermistir.
LC-MS (yöntem 1): R = 1,41 ve 1,43 dak., m/z = * Örnek 1OA O-[(4-{[(2R)-1-Amino-1-okso-3-(tritilsüIfanil)propan-2-iI]amino}-3-[(tert- bütoksikarboniI)-(metiI)amino]-4-oksobütiI)karbamoiI]-N-(tert-bütoksikarbonil)-L- tirozin tetrakis(trifenilfosfin)paladyum(0) ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Reaksiyon, yaklasik olarak 50 ml su ile seyreltilmis ve yaklasik olarak 50 ml diklorometan ile iki defa ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik fazlar; tuzlu su ile ekstrakte edilmis, sodyum sülfat üzerinde kurutulmus ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 100 g silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan, diklorometan/metanol 50/1 ve diklorometan/metanol olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, diyastereomerlerin bir karisimi olarak 1,44 9 (1,61 mmol, LC-MS (yöntem 1): Rt = 1,20 ve 1,24 dak., m/z = + 1H-NMR (, 718-735 3H), 1.35 (5, 18H). Örnek 11A N5-[(4-{(ZS)-3-(Alliloksi)-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]-3- oksopropil}fenoksi)karbonil]-Nz-(tert-bütoksikarbonil)-L-0rnitin H3C CHa CH3 o CH2 (12,33 mmol) N2-(tert-Bütoksikarbonil)-L-0rnitin ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi 6 parçaya bölünmüstür. Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 75°C'deki bir sizdirmaz tüpte 90 dakika süresince isitilmistir. Birlestirilen reaksiyon karisimi yaklasik olarak 100 ml doymus amonyum klorür çözeltisi ile ekstrakte edilmistir. 8qu fazin her biri yaklasik olarak 30 ml diklorometan ile iki defa ekstrakte edilmistir. birlestirilen organik fazlar, yaklasik olarak 50 ml tuzlu su ile ekstrakte edilmis ve sodyum sülfat üzerinde kurutulmustur. Çözücü, düsük basinç altinda giderilmistir. Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 600 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur.
Kullanilan çözücüler; diklorometan, diklorometan/metanol 40/1 ila diklorometan/metanol 1/1 olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, istenen ürünün 2.63 g'ini (4.06 mmol, teorinin %33'ü, %89 saflikta) vermistir.
LC-MS (yöntem 1): Rt: 1,03 dak., m/z = ' Örnek 12A N5-[(4-{(ZS)-3-(Alliloksi)-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]-3- oksopropil}fenoksi)karbonil]-Nz-(tert-bütoksikarbonil)-L-ornitil-S-tritil-L- sisteinamid CH3 0 c 2 9 (2,07 mmol) HATU ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, 3 parçaya bölünmüstür.
Parçalar, bir mikrodalga sentezleyicide 60°C'deki bir sizdirmaz tüpte 30 dakika süresince isitilmistir. Çözücü, birlestirilen reaksiyon karisimindan döner buharlastirici vasitasiyla giderilmistir (yaklasik olarak 40°C, yaklasik olarak 200 mbar, yaklasik olarak dak). Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 400 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan/etil asetat 2/1, diklorometan/etil asetat 1/1 olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, istenen ürünün 1.30 g'ini (1,5 mmol, teorinin %56'si, %82 saflikta) vermistir.
LC-MS (yöntem 1): R = 1,35 dak., m/z = + Örnek 13A Nz-(tert-BütoksikarboniI)-N2-[(4-{(ZS)-2-[(tert-bütoksikarbonil)amino]-2- karboksietiI}fenoksi)-karbonil]-L-ornitil-S-tritiI-L-sisteinamid ”3 0 NH tetrakis(trifenilfosfin)paladyum(0) ilave edilmistir. Reaksiyon karisimi, oda sicakliginda gece boyunca karistirilmistir. Reaksiyon, yaklasik olarak 50 ml su ile seyreltilmis ve yaklasik olarak 50 ml diklorometan ile iki defa ekstrakte edilmistir. Birlestirilen organik fazlar; tuzlu su ile ekstrakte edilmis, sodyum sülfat üzerinde kurutulmus ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Ham ürün, diklorometanda çözünmüs ve yaklasik olarak 500 ml silika jel üzerinde kromatografiye tabi tutulmustur. Kullanilan çözücüler; diklorometan, diklorometan/metanol 40/1 ve diklorometan/metanol olmustur. Ürünü içeren fraksiyonlar birlestirilmis ve düsük basinç altinda kuruluga dek konsantre edilmistir. Bu, %86 saflikta 1,40 9 ham ürün vermistir. Ürün, 2 fraksiyon vermesi için bir su/metanol gradyani ile bir C18 kolonunda preparatif RP-HPLC vasitasiyla ayrica saflastirilmistir: 0,93 9 ürün (teorinin %45'i).
LC-MS (yöntem 1): R = 1,18 dak., m/z = * 1H-NMR (, 7.25-7.35 (m, Örnek 14A Tentagel temelli amit reçineye bagli ADM (2-52) /bwv\ /CHJ Peptit, otomatiklestirilmis bir peptit sentezleyicideki (Protein Technologies Inc.
Symphony) bir Tentagel temelli amit reçinede adim adim toplanmistir. 8 poli-propilen reaksiyon kabi, özdes kimyanin paralel gerçeklesmesinde kullanilmistir. Her kap, 0,4 mmollük bir toplam parti büyüklügü için 0,05 mmol Tentagel temelli Rink reçine ile yüklenmistir.
Her bir amino asit, reçinenin yüklenmesi ile ilgili 8 kat molar fazlasi ilave edilmistir.
Amino asitler, N-terminal koruyucu grup olarak Fmoc korumali olmustur ve asagida gösterilen koruyucu gruplar, yari zincir fonksiyonellikleri için kullanilmistir. Ayrica 188 mg ( DIEA ilave edilmistir.
Reaksiyonlar, çözücü olarak DMF'de gerçeklestirilmistir, oysa ki DMF, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda kullanilmistir ve serbestçe onu uyarmistir. Her amino asit basina reaksiyon süresi yaklasik olarak 1 saat olmustur. Fmoc koruyucu gruplarinin klevaji %20 piperidin/DMF kullanilarak elde edilmistir, oysa ki %20 piperidin/DMF, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda kullanilmistir.
Kuplaj sekansi asagida gösterildigi sekilde olmustur: 1. Tyr(tBu) (Tyr = Y = Insan ADM ile ilgili AA 52) .Gly (Gly = G = insan ADM ile ilgili AA 51) . GIn(Trt) (Gln = O = insan ADM ile ilgili AA 50) . Pro (Pro = P = insan ADM ile ilgili AA 49) . Ser(tBu) (Ser = 8 = insan ADM ile ilgili AA 48) . Ile (Ile = I = insan ADM ile ilgili AA 47) . Lys(Boc) (Lys = K = insan ADM ile ilgili AA 46) . Ser(tBu) (Ser = 8 = insan ADM ile ilgili AA 45) 9. Arg(pbf) (Arg = R = insan ADM ile ilgili AA 44) . Pro (Pro = P = insan ADM ile ilgili AA 43) 11. Ala (Ala = A = insan ADM ile ilgili AA 42) 12. Val (Val = V = insan ADM ile ilgili AA 41) CONOO'i-bwk) Asn(Trt) (Asn = N = insan ADM ile ilgili AA 40) Asp(OtBu) (Asp = D = insan ADM ile ilgili AA 39) Lys(Boc) (Lys = K = insan ADM ile ilgili AA 38) Asp(OtBu) (Asp = D = insan ADM ile ilgili AA 37) Lys(Boc) (Lys = K = insan ADM ile ilgili AA 36) Asp(OtBu) (Asp = D = insan ADM ile ilgili AA 35) Thr(tBu) (Thr = T = insan ADM ile ilgili AA 34) Phe (Phe = F = insan ADM ile ilgili AA 33) Gln(Trt) (Gln = O = insan ADM ile ilgili AA 32) Tyr(tBu) (Tyr = Y = insan ADM ile ilgili AA 31) Gln(Trt) (Gln = O = insan ADM ile ilgili AA 29) His(Trt) (His = H = insan ADM ile ilgili AA 28) Ala (Ala = A = insan ADM ile ilgili AA 27) Leu (Leu = L = insan ADM ile ilgili AA 26) Lys(Boc) (Lys = K = insan ADM ile ilgili AA 25) Gln(Trt) (Gln = Q = insan ADM ile ilgili AA 24) Val (Val = V = insan ADM ile ilgili AA 23) Thr(tBu) (Thr = T = insan ADM ile ilgili AA 22) Cys(Trt) (Cys = C = insan ADM ile ilgili AA 21) Thr(tBu) (Thr = T = insan ADM ile ilgili AA 20) Gly (Gly = G = insan ADM ile ilgili AA 19) Phe (Phe = F = insan ADM ile ilgili AA 18) Arg(pbf) (Arg = R = insan ADM ile ilgili AA 17) Cys(Acm) (Cys = C = insan ADM ile ilgili AA 16) Gly (Gly = G = insan ADM ile ilgili AA 15) Phe (Phe = F = insan ADM ile ilgili AA 14) Ser(tBu) (Ser = 8 = insan ADM ile ilgili AA 13) Arg(pbf) (Arg = R = insan ADM ile ilgili AA 12) Leu (Leu = L = insan ADM ile ilgili AA 11) Gly (Gly = G = insan ADM ile ilgili AA 10) GIn(Trt) (Gln = O = insan ADM ile ilgili AA 9) Phe (Phe = F = insan ADM ile ilgili AA 8) Asn(Trt) (Asn = N = insan ADM ile ilgili AA 7) Asn(Trt) (Asn = N = insan ADM ile ilgili AA 6) 48. Met (Met = M = insan ADM ile ilgili AA 5) 49. Ser(tBu) (Ser = 8 = insan ADM ile ilgili AA 4) 50. Gln(Trt) (Gln = O = insan ADM ile ilgili AA 3) 51. Arg(pbf) (Arg = R = insan ADM ile ilgili AA 2) Reçine üzerindeki oksidasyon, Iyodin (30 dakikalik bir reaksiyon süresi ile DIEA'nin 8 esdegeri arti Iyodin'in 8 esdegeri) kullanilarak bir disülfit bagi için oksidasyon ve koruyucu gruplarin konkominant klevaji ile Cys(Trt) ve Cys(Acm) kullanilarak elde edilmistir. Oksidasyon, HPLC ile MALDI-MS kullanilarak analiz ve numune klevaji vasitasiyla dogrulanmistir. 8 parti daha baska kullanim için toplanmistir. Örnek 15A O-{[(3S)-3-Amino-4-{[(2R)-1 -amino-1-okso-3-sülfanilpropan-Z-il]amino}-4- oksobütiI]-karbamoiI}-L-tyrosiI-adrenomedullin(2-52) oku/`VÃ`I/N`/ 1 5 2 52 Y Yu RQSMNNFQGLRSFGÇRFGTÇWQKLAHQlYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NHz ilave edilmistir. Ayrica DIEA da ilave edilmistir. Reaksiyon, çözücü olarak DMF ile gerçeklestirilmistir, oysa ki DMF, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda kullanilmistir ve serbestçe onu uyarmistir. Reaksiyon süresi oda sicakliginda yaklasik olarak 1 saat olmustur. Peptit, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda konsantre TFA kullanilarak kontaminant global deproteksiyon ile reçineden ayrilmis ve serbestçe onu uyarmistir, oysa ki TFA. 2 saatlik bir reaksiyon süreli süpürücüleri (su, fenol, tiyoanizol ve 1,2-etandiolün her biri süresince her zaman 4'ün altinda kalmasini garantiye almak için mobil fazlar olarak suda %0,1 TFA ile asetonitrilde %O,1 TFA kullanilarak RP-kromatografisi vasitasiyla saflastirilmistir. MALDI-MS analizi vasitasiyla dogru iyonu içeren tüm fraksiyonlar toplanmistir. Verim, kismen saflastirilan peptidin 44,0 mg'i olmustur (yaklasik olarak 0,0035 mmol, teorinin yaklasik olarak %4,7'si; tahmini saflik: yaklasik olarak %50, MALDI MS (yöntem 6): m/z = ( örnek 16A 0-{[4-{[(2 R)-1 -Amino-1-okso-3-sülfanilpropan-2-iI]amino}-3-(metiIamino)-4- oksobütil]-karbamoiI}-L-tirosil-adrenomedullin(2-52) S` \”'â RQSMNNFQGLRSFGICRFGTÇTVQKLAHQIYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NH2 ilave edilmistir. Ayrica DIEA da ilave edilmistir. Reaksiyon, çözücü olarak DMF ile gerçeklestirilmistir, oysa ki DMF, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda kullanilmistir ve serbestçe onu uyarmistir. Reaksiyon süresi oda sicakliginda yaklasik olarak 1 saat olmustur. Peptit, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda konsantre TFA kullanilarak kontaminant global deproteksiyon ile reçineden ayrilmis ve serbestçe onu uyarmistir, oysa ki TFA, 2 saatlik bir reaksiyon süreli süpürücüleri (su, fenol. tiyoanizol ve 1,2-etandiolün her biri süresince her zaman 4”ün altinda kalmasini garantiye almak için mobil fazlar olarak suda %O,1 TFA ile asetonitrilde %O,1 TFA kullanilarak RP-kromatografisi vasitasiyla saflastirilmistir. MALDI-MS analizi vasitasiyla dogru iyonu içeren tüm fraksiyonlar toplanmistir. Verim, kismen saflastirilan peptidin 34,0 mg'i olmustur (yaklasik olarak 0,0026 mmol, teorinin yaklasik olarak %3,5'i; tahmini saflik: yaklasik olarak %50, MALDI MS (yöntem 6): m/z = Örnek 17A O-{[(4R)-4-Amino-5-{[(2R)-1-amino-1 -okso-3-sü Ifanilpropan-Z-iI]amino}-5- oksopentil]-karbamoiI}-L-tyrosiI-adrenomedullin(2-52) 1 /H 2 52 Y " ß 'RQSMNNFQGLRSFGFR FGTCIZTVQKLA HQIYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGYvN Hz ilave edilmistir. Ayrica DIEA da ilave edilmistir. Reaksiyon, çözücü olarak DMF ile gerçeklestirilmistir, oysa ki DMF, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda kullanilmistir ve serbestçe onu uyarmistir. Reaksiyon süresi oda sicakliginda yaklasik olarak 1 saat olmustur. Peptit, reçineyi sisirmek için yeterli bir miktarda konsantre TFA kullanilarak kontaminant global deproteksiyon ile reçineden ayrilmis ve serbestçe onu uyarmistir, oysa ki TFA, 2 V2 saatlik bir reaksiyon süreli süpürücüleri (su, fenol, tiyoanizol ve 1,2-etandi0lün her biri süresince her zaman 47ün altinda kalmasini garantiye almak için mobil fazlar olarak suda %0,1 TFA ile asetonitrilde %0,1 TFA kullanilarak RP-kromatografisi vasitasiyla saflastirilmistir. MALDI-MS analizi vasitasiyla dogru iyonu içeren tüm fraksiyonlar toplanmistir. Verim, kismen saflastirilan peptidin 47 mg'i olmustur (yaklasik olarak 0,0037 mmol, teorinin yaklasik olarak %5,0`i; tahmini saflik: yaklasik olarak %50, MALDI MS (yöntem 6): m/z = çalisma örnekleri oksietiIen[40kDa]}etil)amino]propiI}pirolidin-3-il)süIfaniI]-1-oksopropan-Z- il}amino)-4-oksobütil]karbamoiI}-L-tyrosiI-adrenomedulIin(2-52) JJ\ -H2 H /Ego Ro PEG 40kDa -OCH3 Y u_RQSMN N FQGLRSFG?RFGTçTVQKLAHQIYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-N H2 Örnek 15A'nin ham peptitlerinin 44 mg`i, oda sicakliginda gece boyunca pH 4llük 9 ml poli(etilen glikol) maleimido propiyonamid ile karistirilmistir. Ham reaksiyon karisimi, bir preparatif HPLC sistemi üzerine iki kisimda enjekte edilmis ve bir su/asetonitril (her ikisi de % gradyani ile kromatografiye tabi tutulmustur. Fraksiyonlar, otomatiklestirilmis bir fraksiyon kolektöründeki 20 ml'Iik test tüplerinde toplanmistir.
Yeterli asiditeyi garanti etmek için her vial, toplama öncesinde 0,5 ml asetik asit ile doldurulmustur.
Reaksiyon vermeyen PEGlin yanisira, örnek 15Alnin yan ürünü olan ve bu reaksiyonda PEGiIasyona maruz kalmamis olan ADM(2-52) de tamamen giderilmistir. Örnek 1'i içeren tüm fraksiyonlar birlestirilmistir. Asetonitril, 30°C sicakliktaki su banyosunda ve yaklasik olarak 30 dakika süresince yaklasik olarak 50 mbarda bir döner buharlastirici üzerinde kismen giderilmistir. 0,5 ml asetik asit ilavesi sonrasinda, kalan çözelti Iiyofilize edilmistir. Örnek 1'in toplam verimi 109 mg (2,35 pmol, teorinin %33`ü) olmustur.
HPLC (yöntem 3): R = 4,23 - 4,30 dak poIi-oksietiIen[40kDa]}etiI)amino]propil}piroIidin-3-il)süIfanil]-1-oksopropan-Z- il}amino)-4-oksobütil]karbamoil}-L-tyrosil-adrenomedulIin(2-52) /PEG 40kDa -OCH3 Y N' 'RQSMNNFQGLRSFGCRFGTCTVQKLAHQIYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NH2 Örnek 16A'nin ham peptidinin 15 mg'ii oda sicakliginda gece boyunca pH 4'Iük 5 ml poli(etilen glikol) maleimido propiyonamid ile karistirilmistir. Ham reaksiyon karisimi, bir sistemi üzerine enjekte edilmis ve bir su/asetonitril (her ikisi de % gradyani ile kromatografiye tabi tutulmustur. Fraksiyonlar, otomatiklestirilmis bir fraksiyon kolektöründeki 20 ml'lik test tüplerinde toplanmistir. Yeterli asiditeyi garanti etmek için her vial, toplama öncesinde 0,5 ml asetik asit ile doldurulmustur.
Reaksiyon vermeyen PEG'in yanisira, örnek 16A'nin yan ürünü olan ve bu reaksiyonda PEGiIasyona maruz kalmamis olan ADM(2-52) de tamamen giderilmistir. Örnek 27yi içeren tüm fraksiyonlar birlestirilmistir. Asetonitril, 30°C sicakliktaki su banyosunda ve yaklasik olarak 30 dakika süresince yaklasik olarak 50 mbarda bir döner buharlastirici üzerinde kismen giderilmistir. 0,5 ml asetik asit ilavesi sonrasinda, kalan çözelti Iiyofilize edilmistir. Örnek 2'nin toplam verimi 50 mg (1,08 pmol, teorinin %43'ü) olmustur.
HPLC (yöntem 4): Rt = 2,02 - 2,08 dak oksietiIen[40kDa]}etil)amino]propil}pirolidin-3-il)süIfanil]-1-oksopropan-Z- il}amino)-5-oksopentil]karbamoil}-L-tyrosil-adrenomedullin(2-52) Y ”_RQSMNNFQGLRSFGCRFGTCTVQKLAHQIYQFTDKDKDNVAPRSKISPQGY-NHZ Örnek 17A'nin ham peptidinin 15 mg'i, oda sicakliginda gece boyunca pH 4'Iük 5 ml poli(etilen glikol) maleimido propiyonamid ile karistirilmistir. Ham reaksiyon karisimi, bir HPLC sistemi üzerine enjekte edilmis ve bir su/asetonitril (her ikisi de % gradyani ile kromatografiye tabi tutulmustur. Fraksiyonlar, otomatiklestirilmis bir fraksiyon kolektöründeki 20 ml'lik test tüplerinde toplanmistir. Yeterli asiditeyi garanti etmek için her vial, toplama öncesinde 0,5 ml asetik asit ile doldurulmustur.
Reaksiyon vermeyen PEG'in yanisira, örnek 17A'nin yan ürünü olan ve bu reaksiyonda PEGilasyona maruz kalmamis olan ADM(2-52) de tamamen giderilmistir. Örnek 3lü içeren tüm fraksiyonlar birlestirilmistir. Asetonitril, 30°C sicakliktaki su banyosunda ve yaklasik olarak 30 dakika süresince yaklasik olarak 50 mbarda bir döner buharlastirici üzerinde kismen giderilmistir. 0,5 ml asetik asit ilavesi sonrasinda, kalan çözelti Iiyofilize edilmistir. Örnek 3'ün toplam verimi 19,5 mg (0,42 umol, teorinin %17'si) olmustur.
HPLC (yöntem 4): R = 2,02 - 2,08 dak B. Farmakolojik aktivitenin degerlendirmesi Hastaliklarin tedavisi için bulusa göre bilesiklerin uygunlugu, asagidaki deney sistemleri kullanilarak kanitlanabilir: 1) Test açiklamalari (in vitro) 1a) Bir rekombinant adrenomedullin-reseptör raportör hücresindeki testler Bulusa göre bilesiklerin aktivitesi, insan adrenomeduIIin-reseptörünü tasiyan bir rekombinant Çin hamster ovaryumu (CHO) hücre dizisinin yardimi ile miktarlandirilir.
Ligandlar vasitasiyla reseptörün aktivasyonu, akuorin Iuminesansi vasitasiyla ölçülebilir. Hücre dizisinin yapisi ve ölçüm prosedürü detayli sekilde tanimlanmistir mikrotitre plakalari üzerine tohumlanir ve 24 saat süresince büyür. Kültür ortaminin kaldirilmasi sonrasinda, hücreler; bir hücre kültür inkübatöründe 0,2 mM 3-IzobütiI-1- metilksantin (IBMX) ile desteklenen Ca2*-serbest Tirod çözeltisindeki (130 mM sodyum klorür, 5 mM potasyum klorür, 20 mM HEPES (4-(2-hidroksietiI)-1-piperazinetansülfonik asit), 1 mM magnezyum klorür ve 0,6 ug/ml koelenterazin ile yüklenir. Bilesikler, %0,1 bovin serum albumin içeren kalsiyum?'- serbest Tirod çözeltisine 6 dakika süresince ilave edilir. 3 mM`Iük bir nihai konsantrasyona kalsiyum2+ ilavesi öncesinde derhal akuorin Iuminesansin ölçümüne, uygun bir Iuminometrenin kullanilmasi ile baslanir. Luminesans, 60 saniye süresince ölçülür. Tipik bir deneyde bilesikler, 1 x 10'13 ila 3 x 10'6 M'Iik bir konsantrasyon araliginda test edilir.
Bulusa göre bilesiklerden aktif adrenomedullinin saliminin belirlenmesi için, bilesikler; pH 7,4'deki farkli türlerden elde edilen fetal dana serumu, hücre kültür ortami ya da plazma ile desteklenen Tirod çözeltisinde 24 saate kadar farkli zaman araliklari için farkli konsantrasyonlarda inkübe edilir. Ilgili inkübasyon ortaminin kalsiyum2+ içerigi, numunelerin adrenomedullin-reseptör raportör hücreye ilavesi öncesinde 4 mM EDTA (etilen diamin tetraasetik asit) ilavesi ile tamponlanir.
Uygun ön inkübasyon sonrasinda, somut örnekler, ön inkübasyon öncesinden daha yogun bir sekilde adrenomedullin-reseptör raportör hücresini aktive eder. Bu; ECso degerlerinin, önce ön inkübasyon sonrasindan 10'a kadar daha küçük bir faktör ile belirlendigi gerçegi ile gösterilir ve bilesiklerden elde edilen aktif adrenomedullinin salimi ile açiklanabilir. öncesindeki ve sonrasindaki somut numuneleri temsil eden ECso degerleri, asagidaki Tablo 1'de verilmektedir: Örnek no. ECsu T = 0 saat [nM] E050 T = 24 saat [nM] 1 110 8,4 2 > 1000 161 3 124 12,3 1b) Endotelyal hücrelerdeki transselüler elektriksel direnç deneyleri Bulusa göre bilesiklerin aktivitesi, insan umbilikal venöz hücrelerindeki in vitro permeabilite deneylerinde karakterize edilmektedir (HUVEC, Lonza). Bir endotelyal tek katmani üzerindeki transendotelyal elektriksel direncin (TEER) degisikliklerinin ECIS aparatinin (ECIS: Electric Cell-substrate Impedance Sensing; Applied Biophysics Inc; Troy, NY) kullanilarak, hücrelerin beslenmis oldugu bir küçük altin elektrod kullanilarak sürekli olarak ölçülür. HUVEC, birbirine karisan tek katmanlar için 96 hazneli sensör elektrod plakalarinda (96W1E, lbidi GmbH, Martinsried) büyür ve hiperpermeabilite; TEER redüksiyonu ve endotelyal hücre temaslarinin tamamen bozulmasina sebep oldugu ispat edilmis olan Trombin, TNF-oi, IL-1ß, VEGF, Histamin ve hidrojen peroksit gibi inflamatuvar stimuli vasitasiyla indüklenebilir. Trombin, 0,5 U/ml'lik bir nihai konsantrasyonda kullanilir. Test bilesikleri, trombin ilavesinden önce ya da sonra ilave edilir. Tipik bir deneyde bilesikler, 1 x 10-10 ila 1 x 10'6 M'Iik bir konsantrasyon araliginda test edilir.
Somut örnekler, s 10'6 M olan konsantrasyonlardaki bu testteki hiperpermeabiliteyi indükleyen trombini inhibe eder. 1c) Endotelyal hücrelerdeki in vitro-permeabilite deneyleri Baska bir in vitro endotelyal modelinde bulusa göre bilesiklerin aktivitesi, makromoleküler permeabilitenin modülasyonu bakimindan incelenir. Insan umbilikal damar endotelyal hücreleri (HUVECS), üst bölmenin altinda büyüyen endotelyal hücreler ile bir alt doku kültür bölmesinin üstünü ayiran fibronektin-kapli Transwell® filtre membranlari (24 hazneli plakalar, 0,4 pM polikarbonat membranli 6,5 mm dolgular; Costar #3413) üzerinde birlesmek için büyürler. Üst bölme ortami, 250 tig/ml 40 kDa FITC-Dekstran (Invitrogen, D1844) ile desteklenir. Tek katmanin hiperpermeabilitesi, 0,5 U/ml'lik bir nihai konsantrasyona trombinin ilavesi ile indüklenir.
Ortam numuneleri, her 30 dakikada alt bölmeden toplanir ve zamanla makromoleküler permeabilite degisimleri için bir parametre olarak nispi floresan, uygun bir fluorimetrede ölçülür. Trombiniin görevi, endotelyal tek katmanlari üstünden hemen hemen çift bir FITC-dekstran geçisini indükler. Tipik bir deneyde bilesikler, 1 x 10'10 ila 1 x 10'6 M'Iik bir konsantrasyon araliginda test edilir.
Somut örnekler, S 10'6 M olan konsantrasyonlardaki bu testteki hiperpermeabiliteyi indükleyen trombini inhibe eder.
Za) Ölçümlenen kan basinci ve kalp atis hizi ölçümü, normotansif Wistar siçanlari Kardiyovasküler etkiler, kan basinci ve kalp atis hizinin radyotelemetrik ölçümü ile serbestçe hareket eden bilinçli disi Wistar siçanlarinda (vücut agirligi > 200 g) arastirilmistir. Kisaca, telemetrik sistem (DSI Data Science International, MN, USA) 3 temel elemandan olusmaktadir: implante edilebilir vericiler (TA11PA-C40), alicilar (RA1010) ve bilgisayar tabanli bir yazilim (Windows için DataquestTM A.R.T. 4.1).
Siçanlar, deneylerden önce en azindan 14 gün kronik kullanim için basinç implantlari ile donatilir. Sensör kateteri, kateter tipinden 0,5 cm'lik bir tipa meydana getirmek için birkaç defa 4-0 dikis ile baglanir. Kateter implantasyonu süresince siçanlar, pentobabital (Nembutal, Sanofi: 50 mg/kg intraperitoneal) ile uyusturulur. Karin yüzeyi trasi sonrasinda, bir orta hat abdominal insizyon yapilir ve sivi dolu sensör kateteri, bifurkasyon ile renal arterler arasinda görünen inen aort içine yukari yönde eklenir.
Kateter, tipaya birkaç defa baglanir. telemetrik kateterin ucu, sadece renal arterlere kaudal olarak yerlestirilir ve doku yapistiricilari ile güven altina alinir. Verici gövdesi, karnin kapatilmasi öncesinde iç peritoneal duvara eklenir. Abdominal insizyonun iki katmanli kapatilmasi, dis derinin kapatilmasini takiben peritoneum ve kas duvarinin ayri ayri dikilmesi ile uygulanir. Enfeksiyonlara ve agriya karsi ameliyat sonrasi koruma için, bir antibiyotik (Oksitetrasiklin %10 R, 5,0 mI/kg subkütanöz, beta-pharma GmbH&Co, Germany) ve analjezik enjekte edilir (Rimadil R, 5,0 mI/kg subkütanöz, Pfizer, Germany). Donanim konfigürasyonu, 24 hayvan için donatilir. Her siçan kafesi, ayri bir alici platformunun üstünde konumlandirilir. Implante edilen vericilerin aktivasyonu sonrasinda, bir online veri toplama sistemi verileri toplar ve mm Hg'yi telemetrik basinç sinyallerine dönüstürür. Bir barometrik basinç referansi, mutlak basincin (vakuma göre) çevresel atmosferik basinci ile iliskisine olanak saglar. Veri toplama yazilimi, her 5 dakikada 10 saniyelik araliklar için numune hemodinamik verilerini önceden tanimlar. Dosyaya verilerin toplanmasi, test bilesiklerinin tatbik edilmesinden 2 saat önce baslatilir ve 24 saatlik çevrimlerin tamamlanmasi sonrasinda bitirilir. Tipik bir deneyde test bilesikleri, 1 ila 1000 pg/kg vücut agirligi dozlarinda ya subkütanöz olarak ya da intravenöz olarak bolus seklinde tatbik edilir (peptit bileseni olarak anilacaktir).
Dogal sus tipi adrenomedullin (Bachem, H-2932), s 300 tig/kg vücut agirligi dozlarinda test edildigi zaman 5 4 saatlik süre ile bu testte kan basinci düsüsünü indükler [Sekil 1].
Sekil 1: Gösterildigi gibi (kesikli çizgi) ADM ya da aracin subkütanöz uygulamasi sonrasinda ölçümlenen normotansif disi Wistar siçanlarindan kaydedilen ortalama arteriyel kan basincinin (MABP) 24 saatlik profilleridir. Veri noktalari, her grup basina 4 hayvandan ortalama 30 dakikalik araliklardaki ± SEM ortalamalari olarak çizilmistir.
Tatbikten bir saat sonrasinda ADM ile tedavi edilen hayvanlar, pik noktasinda (dolu daireler) hemen hemen %20'Iik bir ortalama MABP azalmasi göstermistir. Yaklasik 3,5 saat sonra MABP, referans hatti seviyelerine dönmüs ve tedavi edilen hayvanlarin araliginda (açik daireler) olmustur.
Bu testte bu bulusa göre maddeler, s 500 tig/kg vücut agirligi dozlarinda 10 saate kadar kan basinci azalmasini indükler (peptit bileseni olarak anilacaktir) [Sekil 2].
Sekil 2: Gösterildigi gibi (kesikli çizgi) örnek 1 ya da aracin subkütanöz uygulamasi sonrasinda ölçümlenen normotansif disi Wistar siçanlanndan kaydedilen ortalama arteriyel kan basincinin (MABP) 24 saatlik profilleridir. Veri noktalari, her grup basina 6 hayvandan ortalama 30 dakikalik araliklardaki ± SEM ortalamalari olarak çizilmistir. 150 tig/kg'lik dozdaki örnek 1'in tatbik edilmesi (peptit bileseni olarak anilacaktir), uygulamanin 6 saat sonrasina dek MABP'de yaklasik %15 ila 19 azalmistir (dolu daireler). Uygulamadan 6 saat ile 14 saat sonrasinda MABP yavas yavas referans hatti degerlerine dönmüs ve en sonunda araç tedavili hayvanlarin araliginda olmustur. 2b) Wistar siçanlarinda cilt vasküler sizinti deneyi Bir intrakütanöz histamin bagisiklik testi, saglikli hayvanlardaki vasküler bariyer fonksiyonunda bulusa göre bilesiklerin etkisini degerlendirmesi için kullanilir. Erkek Sprague Dawley siçanlari (vücut agirligi > 200 g), izofloran ile uyusturulur (çevre havasinda %2-%3) ve sirtüstü pozisyona getirilir. Batin tras edilir ve bir kateter, femoral damar içine yerlestirilir. Uygun dozlarda sadece araç (0,5 rnl PBS + %0,1 bovin serum albumin) ya da test bilesikleri intravenöz bolus enjeksiyonlar olarak tatbik edilir. 15 dakika sonra çözeltisinin ikinci bir enjeksiyonu tatbik edilir ve daha sonra hemen uygun konsantrasyonlarda 100 uL histamin çözeltileri enjekte edilir. Evans mavi, yüksek derecede plazma proteine bagli bir boyadir ve daha sonra proteince zengin sivi ekstravazasyon ve vasküler sizinti için bir gösterge olarak kullanilir. Bu prosedürden 30 dakika sonra siçanlar, Izofloranin bir asiri dozu ile kurban edilir ve daha sonraki boyun dislokasyonu ile karin derisi eksize edilir. Kabarciklar, 8 mm`lik bir punch biyopsisinin kullanilmasi ile eksize edilir, doku numuneleri tartilir ve Evans mavisini ekstrakte etmek için 48 saat süresince formamide aktarilir. Numuneler, uygun bir fotometrede 620 nM ve 750 nM'e ölçülür ve numunelerin Evans mavisi pigmentleri için düzeltilir ve bir standart egrisine karsi hesaplanir [Wang L.F., Patel M., Razavi H.M., Weicker S., Joseph MG., McCormack D.G., Mehta S.. Am. Respir Crit Bu bulusa göre maddeler, bu testteki histamin bagisikligi ile indüklenen proteince zengin plazma sivisinin ekstravazasyonunu azaltir. 2c) Farelerdeki LPSlnin intra-trakeal instilasyonu Lipopolisakkaritli (LPS) bir intra-trakeal bagisiklik, akut akciger hasarinda bulusa göre bilesiklerin etkisini incelemek için kullanilir. Erkek BALB/C fareleri (ortalama hayvan agirligi 20-23 9), izofloran (%7) ile uyusturulur ve E-kolinden elde edilen LPS (örnegin serotip 055:BS; Sigma), bir mikropipet kullanilarak 100 ul saline zerkedilir. Bagisiklik için kullanilan LPS'nin tipik dozlari, 1 ila 10 mg/kg vücut agirligi araligindadir.
Instilasyon öncesinde ve sonrasinda farkli zaman noktalarindaki test bilesikleri, subkütanöz yoluyla tatbik edilir. Tipik dozlar, 1 ila 300 mg/kg vücut agirligi araligindadir. Bu testte test bilesiklerinin uygulanmasinin tipik zaman noktalari, LPS bagisikligindan 15 dakika öncesi ya da 1 saat sonrasidir. LPS farelerinin instilasyonundan 48 saat sonra izofloran ile derin bir biçimde uyusturulur ve boynun dislokasyonu vasitasiyla kurban edilir. 0,5 ml çok soguk salin ile bronkoalveoler boslugunun trekea Iavajinin kanülasyonu sonrasinda gerçeklestirilir. Akcigerler hazirlanir ve tartilir. Bronkoalveoler Iavaj sivisindaki (BALF) hücreler, bir hücre sayicida (Cell Dyn 3700, Abbott) sayilir. Bu testte akciger ödemi için bir ölçü olarak akciger agirligi, LPS bagisikligindan 48 saat sonra %50 ya da daha fazla suni kontrol vasitasiyla tekrarlanabilir sekilde arttigi bulunmustur. Akciger agirliklarinin gruplarda sadece çok düsük degiskenlik gösterdigi sekilde, mutlak akciger agirligi parametre olarak kullanilir. Beyaz kan hücrelerinin sayimi, LPS bagisikligi sonrasinda BALF'deki kontrol boyunca daima önemli ölçüde arttigi bulunmustur.
Bu bulusa göre maddelerin tatbik edilmesi, s 300 ug/kg vücut agirligi dozlarindaki bolus olarak tatbik edildigi zaman 48 saat sonra BALF”deki beyaz hücre sayilari ve akciger agirligi önemli ölçüde azalmasina yol açmistir (peptit bileseni olarak anilacaktir). 2d) Küçük domuzlarda akut akciger hasarinin indüksiyonu Akut akciger hasari, bagisiklayicilar olarak Iipopolisakkarit (LPS) ya da oleik asit kullanilarak küçük domuzlarin uyusturulmasinda indüklenir. Detayli olarak: 3,5 ila 3,3 kg vücut agirligindaki disi Göttingen küçük domuzlari (Ellegaard, Denmark), Ketavet®l Stresnil®'in bir intramüsküler enjeksiyonu ile premedikasyonundan önce Ketavet®, D0rmicum® ile Pancuronium®'un sürekli bir intravenöz infüzyonu vasitasiyla uyusturulmus sekilde tutulur. Intratrakeal entübasyon sonrasinda hayvanlar, 25 min'1'lik sabit frekans ve 30 ila 50 ml'lik bir tidal hacminde bir oksijen hava karisimi ile bir pediyatrik respiratör (Sulla 808V; Drâger, Germany) kullanilarak yapay sekilde havalandirilir. Arteriyel P3002, oksijen hava karisimi orani vasitasiyla solunan oksijenin (FIO2) fraksiyonunun düzenlenmesi ile yaklasik 40 mmHg'ye ayarlanir. Rutin olarak asagidaki kardiyovasküler ve respiratuar parametreler, uygun basinç dönüstürücüleri ve kayit ekipmanina konan gerekli problar ve kateterlerin yerlestirilmesi sonrasinda ölçülür: santral venöz basinci (sol sahdamari vasitasiyla), arteriyel kan basinci ve kalp atis hizi (BP ve HR; sol karotid arter vasitasiyla), sol ventriküler basinç (LVP; sag karotid arter vasitasiyla sol ventrikül içine yerlestirilen bir Millar kateter (PAP; sol sahdamari vasitasiyla pulmoner arter içine yerlestirilen ARROW Berman anjiyografik balon kateteri kullanilarak [REP: AI-07134 4 Fr. 5ûcm], sag femoral arter içine yerlestirilen bir Pulsion 4F Thermodilution-katetere (PV2014L08N) bagli PICCO sisteminin (Pulsion, Germany) kullanilmasi ile kardiyak çikis (C0) ve ekstravasküler akciger su indeksi (EVWLI). CVP, BP, HR, LVP ve PAP'in ölçülmesi için kateterler, bir Ponemah kayit sistemine yerlestirilir. Arteriyel kan gazi analizi, P802/Fi02'yi belirlemek için gerçeklestirilir. ARDS'deki Amerikan-Avrupa Konsensüs Konferansi'na göre bir Pa02/Fi02 < 300 mmHg, akut akciger hasarinin varligi için gösterge olarak dikkate alinir. Uygulanan protokole bagli olarak deneylerin süresi, bagisikligi indükleyen akciger hasarinin tatbik edilmesinden sonra 4 ile 5 saat arasinda degisir. Deneyin sonunda domuzlar, eksanguinasyon yoluyla kurban edilir ve bronkoalveoler lavaj sivisi (BALF), akcigerlerden toplanir. BALF'nin hücresel içerigi, bir kan hücre sayici (Cell DYN 3700) kullanilarak belirlenir.
Tipik bir ayarlamada akut akciger hasari, bir endotrakeal tüp vasitasiyla her akciger içine 5 mg/kg vücut agirligi dozunda salindeki Lipopolisakkarid'in (LPS; Eko/i` 0111:B4; Sigma L2630) intratrekeal instilasyonu vasitasiyla indüklenir. PAP ve EVWLI; bagisikliga karsilik olarak Pa02/FI02, 300 mmHg'nin altina azaldigi esnada artar.
BALF'nin hücresel içerigi önemli ölçüde artar. LPS'yi iyilestiren ya da önleyen LPS bagisikligindan 15 dakika önce intravenöz-bolus olarak bu bulusun bilesik 1'inin tatbik edilmesi, degisiklikleri indükler.
Diger bir protokolde, etanol ile seyreltilen (1:1) oleik asit (OA; Sigma-Aldrich, 01008), 100 mg/kg vücut agirliginda nihai bir dozda 15 dakika boyunca intravenöz olarak zerkedilir. QA ile bagisiklik, PAP ile EVLWI'nin artisina ve 300 mmHg”nin altinda Pa02/Fi02'nin azalmasina yol açar. Degisiklikler, QU infüzyonunun baslamasindan 15 dakika önce bu bulusun bilesik 1'inin tatbik edilmesi ile iyilestirilir ya da önlenir. s 30 tig/kg vücut agirliginda örnek 1 dozlarinin (peptit bileseni olarak anilacaktir), tanimlanan test sistemlerinde aktif oldugu bulunmustur.
C. Farmasötik bilesimlerin örnek gösterilen s0mut örnekleri Bulusa göre bilesikler, asagidaki yollarla farmasötik preparasyonlar haline dönüstürülebilir: intravenöz çözeltisi: Bulusa göre bir bilesik, fizyolojik olarak kabul edilebilir bir çözücüdeki satürasyon çözünürlügünün altinda bir konsantrasyonda çözünür (örnek olarak pH 4 ila pH 7 tamponlari, izotonik sodyum klorür çözeltisi, %5 glikoz çözeltisi ve/veya %30 PEG 400 çözeltisi). Çözelti, filtrasyon yoluyla sterilize edilir ve steril ve pirojensiz enjeksiyon kaplari içine doldurulur. subkütanöz çözeltisi: Bulusa göre bir bilesik, fizyolojik olarak kabul edilebilir bir çözücüdeki satürasyon çözünürlügünün altinda bir konsantrasyonda çözünür (örnek olarak pH 4 ila pH 7 tamponlari, izotonik sodyum klorür çözeltisi, %5 glikoz çözeltisi ve/veya %30 PEG 400 çözeltisi). Çözelti, filtrasyon yoluyla sterilize edilir ve steril ve pirojensiz enjeksiyon kaplari içine doldurulur.
MABP sapmasi [%1 -0- 300 pg/kg ADM [4 hayvan ] ~0i Araç kontrolü [4 hayvan ] MABP sapmasi [%1 + 150 _ug/kg Örnek 1 [6 hayvan]

Claims (1)

  1. ISTEMLER . Bir ilaç olup, özelligi asagidaki formülün bir bilesigini n 0, 1, 2 veya 3 sayisini temsil eder, R1 hidrojen, metil, etil, n-propil veya izopropili temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer veya dallanmis PEG 20kDa ila 80kDa'yi temsil eder, veya bir inert toksik olmayan farmasötik olarak uygun bir eksipiyan ile kombinasyon halinde, tuzlari, solvatlari veya tuzlarinin solvatlarinin bir tanesini içermesidir, burada ilaç inhalasyona yönelik farmasötik bir formdadir. Istem 1'e göre ilaç olup, özelligi formül (I) bilesiginin asagidaki sekilde tanimlanmasi ile karakterize edilmesidir: n 1 veya 2 sayisini temsil eder, R1 hidrojen veya metili temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer PEG 40kDa'yi temsil eder. Istemler 1 ila 2'den herhangi birine göre ilaç olup, özelligi formül (I) bilesiginin asagidaki sekilde tanimlanmasi ile karakterize edilmesidir: n 1 veya 2 sayisini temsil eder, R1 hidrojeni temsil eder, R2 bir metoksi grubu ile sinirli olmayan lineer PEG 40kDa'yi temsil eder. Istemler 1 ila 3'ten herhangi birine göre ilaç olup, özelligi inhalasyona yönelik farmasötik formun bir toz solunum cihazi veya bir nebülizörden olusan gruptan seçilmesidir. Istemler 1 ila 4'ten herhangi birine göre ilaç olup, özelligi ACE inhibitörleri, anjiyotensin reseptör antagonistleri, beta-2 reseptör agonistleri, fosfodiesteraz inhibitörleri, glukokortikoid reseptör agonistleri, diüretikler, rekombinant anjiyotensin dönüstürücü enzim-2 veya asetilsalisilik asitten olusan gruptan seçilen ilave aktif bir bilesen ile kombinasyon halinde olmasidir. Istem 5'e göre Ilaç olup, özelligi aktif bilesenin enalapril, kinapril, kaptopril, lisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, perindopril, silazapril, imidapril, benazepril, moeksipril, spirapril ve trandopdan olusan gruptan seçilen bir ACE inhibitörü, losartan, kandesartan, valsartan, telmisartan ve embusartandan olusan gruptan seçilen bir anjiyotensin reseptör antagonisti, salbutamol, pirbuterol, salmeterol, terbutalin, fenoterol, tulobuterol, klenbuterol, reproterol ve formoteroldab olusan gruptan seçilen bir beta-2 reseptör agonisti, milrinon, amrinon, pimobendan, silostazol, sildenafil, vardenafil ve tadalafilden olusan gruptan seçilen bir fosfofiesteraz (PDE) inhibitörü, kortizol, kortizon, hidrokortizon, prednison, metil- prednisolon, predniliden, deflazakort, flokortolon, triamkinolon, deksametason ve betametasondab olusan gruptan seçilen bir glukokortikoid reseptör agonisti, furosemid, torasemid ve hidroklorotiyazid, rekombinant anjiyotensin dönüstürücü enzim-2 veya asetilsalisilik asitten olusan gruptan seçilen bir diüretikten olusan gruptan seçilmesidir. istemler 1 ila Gtdan herhangi birine göre ilaç olup, özelligi istemler 1 ila 6'dan herhangi birine göre bir ilacin etkili bir miktarinin bir insan veya hayvana uygulanmasini içeren, kalp yetmezligi, koroner kalp hastaligi, iskemik ve/veya hemorajik inme, hipertansiyon, pulmoner hipertansiyon, periferik arter tikanikligi hastaligi, pre-eklampsi, kronik obstrüktif akciger hastaligi, astim, akut ve/veya kronik akciger ödemi, inhale organik toz ile mantar partikülleri, aktinomisetik veya diger köken nedeniyle alerjik alveolit ve/veya pnömoni ve/veya radyasyon nedeniyle akut kimyasal bronsit, akut ve/veya kronik kimyasal akciger ödemi, nörojenik akciger ödemi, akut ve/veya kronik akciger manifestasyonlari, yetiskinlerde veya yenidoganlar dahil çocuklarda akut ve/veya kronik interstisyel akciger hastaliklari, akut akciger hasari / akut solunum bozuklugu sendromu (ALI/ARDS), ALI/ARDS ikincil pnömoni ve sepsis, aspirasyon pnömonisi ve ALI/ARDS ikincil aspirasyon, ALI/ARDS ikincil duman gazi inhalasyonu, transfüzyon-iliskili akut akciger hasari (TRALI), ALI/ARDS ve/veya ameliyati takiben akut pulmoner yetmezlik, travma ve/veya yaniklar ve/veya ventilatör kaynakli akciger hasari (VILI), mekonyum aspirasyonu takiben akciger hasari, pulmoner fibroz, dag hastaligi, glomerülonefrit, akut böbrek hasari, kardiyorenal sendromu, Ienfödem, inflamatuvar bagirsak hastaligi, sepsis, septik sok, bulasici olmayan kökenin sistemik inflamatuvar yanit sendromu (SIRS), inflamatuvar bagirsak hastaligi ve ürtikerden olusan gruptan seçilen bir kardiyovasküler, ödemli ve/veya inflamatuvar bozuklugun tedavisi ve/veya önlenmesinde kullanima yönelik olmasidir. istem 7'ye göre ilaç olup, özelligi kardiyovasküler, ödemli ve/veya inflamatuvar bozuklugun istemler 1 ila 6'da herhangi birine göre bir ilacin aktif bir miktarinin bir insana veya hayvana uygulanmasini içeren, pulmoner hipertansiyon, kronik obstrüktif akciger hastaligi, astim, akut ve/veya kronik akciger ödemi, inhale organik toz ile mantar partikülleri, aktinomisetik veya diger köken nedeniyle alerjik alveolit ve/veya pnömoni ve/veya radyasyon nedeniyle akut kimyasal bronsit, akut ve/veya kronik kimyasal akciger ödemi, nörojenik akciger ödemi, akut ve/veya kronik akciger manifestasyonlari, yetiskinlerde veya yenidoganlar dahil çocuklarda akut ve/veya kronik interstisyel akciger hastaliklari, akut akciger hasari / akut solunum bozuklugu sendromu (ALI/ARDS), ALI/ARDS ikincil pnömoni ve sepsis, aspirasyon pnömonisi ve ALi/ARDS ikincil aspirasyon, ALI/ARDS ikincil duman gazi inhalasyonu, transfüzyon-iliskili akut akciger hasari (TRALI), ALI/ARDS ve/veya ameliyati takiben akut pulmoner yetmezlik, travma ve/veya yaniklar ve/veya ventilatör kaynakli akciger hasari (VILI), mekonyum aspirasyonu takiben akciger hasari, pulmoner fibroz. dag hastaligindan olusan gruptan seçilmesidir. 9. Birformül (la) bilesigi 10 veya bunlarin tuzlarin, solvatlari veya tuzlarinin solvatlarinin bir tanesidir.
TR2018/02124T 2011-11-03 2012-10-30 Adrenomedullin'in polietilen glikol temelli ön ilacı ve bunun kullanımı. TR201802124T4 (tr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP11187735 2011-11-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201802124T4 true TR201802124T4 (tr) 2018-03-21

Family

ID=47146369

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2018/02124T TR201802124T4 (tr) 2011-11-03 2012-10-30 Adrenomedullin'in polietilen glikol temelli ön ilacı ve bunun kullanımı.

Country Status (45)

Country Link
US (3) US9603936B2 (tr)
EP (2) EP3075395B1 (tr)
JP (2) JP5995984B2 (tr)
KR (2) KR102004668B1 (tr)
CN (2) CN103998063B (tr)
AR (2) AR088582A1 (tr)
AU (2) AU2012331244B2 (tr)
BR (1) BR112014010708B1 (tr)
CA (1) CA2854134C (tr)
CL (1) CL2014000948A1 (tr)
CO (1) CO7020863A2 (tr)
CR (1) CR20140184A (tr)
CU (1) CU24184B1 (tr)
CY (2) CY1117354T1 (tr)
DK (2) DK2773376T3 (tr)
DO (2) DOP2014000078A (tr)
EA (2) EA029410B1 (tr)
EC (2) ECSP14013326A (tr)
ES (2) ES2568063T3 (tr)
GT (1) GT201400085A (tr)
HK (1) HK1246147A1 (tr)
HR (2) HRP20160285T1 (tr)
HU (2) HUE036535T2 (tr)
IL (3) IL232037B (tr)
IN (1) IN2014CN03290A (tr)
JO (2) JOP20190001B1 (tr)
LT (1) LT3075395T (tr)
MA (1) MA35618B1 (tr)
ME (1) ME02379B (tr)
MX (2) MX350341B (tr)
MY (2) MY194197A (tr)
NO (1) NO3075395T3 (tr)
PE (2) PE20181493A1 (tr)
PL (2) PL2773376T3 (tr)
PT (1) PT3075395T (tr)
RS (2) RS54623B1 (tr)
SG (2) SG10201607516SA (tr)
SI (2) SI2773376T1 (tr)
TN (1) TN2014000185A1 (tr)
TR (1) TR201802124T4 (tr)
TW (2) TWI583396B (tr)
UA (1) UA111098C2 (tr)
UY (2) UY37922A (tr)
WO (1) WO2013064508A1 (tr)
ZA (1) ZA201600434B (tr)

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20150000464A (ko) * 2011-11-03 2015-01-02 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 펩티드의 방출가능한 연결을 위한 티로신 기재의 링커
EP2896400A1 (en) * 2014-01-17 2015-07-22 Université Catholique De Louvain Method for increasing the bioavailability of inhaled compounds
JP6685046B2 (ja) * 2014-03-20 2020-04-22 国立大学法人 宮崎大学 長時間作用型アドレノメデュリン誘導体
AP2017009826A0 (en) * 2014-09-26 2017-03-31 Bayer Pharma AG Stabilized adrenomedullin derivatives and use thereof
KR102152437B1 (ko) 2015-09-18 2020-09-07 고쿠리츠 다이가쿠 호징 미야자키 다이가쿠 장시간 작용형 아드레노메둘린 유도체
EP3604538A4 (en) * 2017-03-29 2020-12-30 University of Miyazaki LONG-ACTING ADRENOMEDULLINE DERIVATIVE
GB201707938D0 (en) * 2017-05-17 2017-06-28 Univ Sheffield Compounds
CN114174326A (zh) 2019-06-18 2022-03-11 拜耳公司 长期稳定的肾上腺髓质素类似物及其用途
WO2021112220A1 (ja) * 2019-12-05 2021-06-10 国立大学法人 宮崎大学 異常タンパク質蓄積性神経変性疾患の治療剤
WO2021198327A1 (en) 2020-04-03 2021-10-07 Bayer Aktiengesellschaft Liquid pharmaceutical formulations polyethylene glycol-based prodrugs of adrenomedullin and use
JP2023520543A (ja) 2020-04-03 2023-05-17 バイエル アクチェンゲゼルシャフト 医薬製剤であるアドレノメデュリンのポリエチレングリコールベースのプロドラッグおよび使用
MX2023002850A (es) 2020-09-10 2023-07-07 Precirix N V Fragmento de anticuerpo contra proteina activadora de fibroblastos (fap).
CN112457218B (zh) * 2020-11-05 2022-08-09 宁夏医科大学 2,4-二氨基丁酸衍生物的合成方法
IL310248A (en) 2021-08-20 2024-03-01 Bayer Ag A process for the preparation of polyethylene glycol-modified adrenomedullin, its intermediates and their use
WO2023203135A1 (en) 2022-04-22 2023-10-26 Precirix N.V. Improved radiolabelled antibody
WO2023213801A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Precirix N.V. Pre-targeting

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5020040A (en) * 1987-06-24 1991-05-28 Digital Equipment Corporation Overwriting system for magneto-optical recording with self timing track
US4812590A (en) 1987-06-25 1989-03-14 Merck & Co., Inc. Carbamates of 4-hydroxyanisole as prodrugs for chemotherapy of melanoma
US6090800A (en) 1997-05-06 2000-07-18 Imarx Pharmaceutical Corp. Lipid soluble steroid prodrugs
US6624142B2 (en) 1997-12-30 2003-09-23 Enzon, Inc. Trimethyl lock based tetrapartate prodrugs
CA2292902C (en) 1999-12-24 2012-12-18 Alain Cadieux Use of calcitonin gene-related peptide in the prevention and alleviation of asthma and related bronchospastic pulmonary diseases
EP1243276A1 (en) 2001-03-23 2002-09-25 Franciscus Marinus Hendrikus De Groot Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs
WO2004019993A1 (en) 2002-08-30 2004-03-11 Ramot At Tel Aviv University Ltd. Self-immolative dendrimers releasing many active moieties upon a single activating event
JP2006507322A (ja) 2002-11-14 2006-03-02 シンタルガ・ビーブイ 多重自己脱離放出スペーサーとして構築されたプロドラッグ
WO2005009768A1 (en) 2003-07-23 2005-02-03 Meggitt Aerospace Equipment Composite seal
ES2741524T3 (es) 2004-03-23 2020-02-11 Ascendis Pharma Gmbh Profármaco polimérico con un enlazador autoinmolador
ATE534664T1 (de) 2004-05-24 2011-12-15 Inst Cardiologie Montreal Markierte adrenomedullinderivate und deren verwendung zur bilddarstellung und therapie
GB2427360A (en) 2005-06-22 2006-12-27 Complex Biosystems Gmbh Aliphatic prodrug linker
US8273325B2 (en) * 2006-12-20 2012-09-25 Ge Healthcare As Contrast agents
CA2686760C (en) 2007-05-11 2016-10-11 Institut De Cardiologie De Montreal Labelled adrenomedullin derivatives and their use for imaging and therapy
WO2011089214A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Ascendis Pharma As Carrier-linked carbamate prodrug linkers
KR20150000464A (ko) * 2011-11-03 2015-01-02 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 펩티드의 방출가능한 연결을 위한 티로신 기재의 링커

Also Published As

Publication number Publication date
EP3075395B1 (en) 2017-11-22
JP5995984B2 (ja) 2016-09-21
MX350341B (es) 2017-09-04
CR20140184A (es) 2014-05-27
HUE027333T2 (en) 2016-09-28
US20160367636A1 (en) 2016-12-22
BR112014010708B1 (pt) 2021-03-02
RS54623B1 (en) 2016-08-31
MY194197A (en) 2022-11-21
US20170204137A1 (en) 2017-07-20
ZA201600434B (en) 2017-05-31
CY1117354T1 (el) 2017-04-26
US10035818B2 (en) 2018-07-31
PL3075395T3 (pl) 2018-04-30
JP6177975B2 (ja) 2017-08-09
PL2773376T3 (pl) 2016-07-29
CA2854134A1 (en) 2013-05-10
PT3075395T (pt) 2018-02-13
AR088582A1 (es) 2014-06-18
ES2568063T3 (es) 2016-04-27
EP2773376A1 (en) 2014-09-10
HK1246147A1 (zh) 2018-09-07
AU2012331244B2 (en) 2017-06-15
CU24184B1 (es) 2016-07-29
ECSP14013326A (es) 2014-05-31
MX2014004384A (es) 2014-04-30
MY173372A (en) 2020-01-21
IN2014CN03290A (tr) 2015-07-03
JOP20190001B1 (ar) 2022-03-14
MX361287B (es) 2018-12-03
TN2014000185A1 (en) 2015-09-30
SG10201607516SA (en) 2016-10-28
BR112014010708A2 (pt) 2017-04-25
TWI653051B (zh) 2019-03-11
US9603936B2 (en) 2017-03-28
EP2773376B1 (en) 2016-01-13
JP2014532682A (ja) 2014-12-08
EA029410B1 (ru) 2018-03-30
EA025631B1 (ru) 2017-01-30
KR20180108892A (ko) 2018-10-04
NZ714621A (en) 2017-10-27
IL258229B (en) 2020-02-27
KR20150000462A (ko) 2015-01-02
ME02379B (me) 2016-06-20
WO2013064508A1 (en) 2013-05-10
IL258229A (en) 2018-06-28
CN107412740B (zh) 2021-02-09
HUE036535T2 (hu) 2018-07-30
ES2659195T3 (es) 2018-03-14
CO7020863A2 (es) 2014-08-11
TW201720467A (zh) 2017-06-16
CL2014000948A1 (es) 2014-09-05
CY1119897T1 (el) 2018-06-27
HRP20160285T1 (hr) 2016-04-22
IL252281B (en) 2021-01-31
CN103998063B (zh) 2016-09-21
GT201400085A (es) 2015-03-05
TW201332573A (zh) 2013-08-16
JP2017014264A (ja) 2017-01-19
CA2854134C (en) 2020-04-21
NO3075395T3 (tr) 2018-04-21
CN103998063A (zh) 2014-08-20
AU2017203423A1 (en) 2017-06-08
PE20181493A1 (es) 2018-09-18
CN107412740A (zh) 2017-12-01
MA35618B1 (fr) 2014-11-01
US9649363B2 (en) 2017-05-16
AR113830A2 (es) 2020-06-17
JO3385B1 (ar) 2019-03-13
ECSP18071104A (es) 2018-10-31
EA201600495A1 (ru) 2016-10-31
IL232037A0 (en) 2014-05-28
HRP20180319T1 (hr) 2018-03-23
EP3075395A1 (en) 2016-10-05
IL252281A0 (en) 2017-08-31
NZ622997A (en) 2015-12-24
SG11201400924TA (en) 2014-09-26
US20140287984A1 (en) 2014-09-25
UA111098C2 (uk) 2016-03-25
LT3075395T (lt) 2018-02-26
EA201400528A1 (ru) 2014-10-30
IL232037B (en) 2018-12-31
PE20141219A1 (es) 2014-09-13
JOP20190001A1 (ar) 2017-06-16
TWI583396B (zh) 2017-05-21
AU2017203423B2 (en) 2019-01-31
DOP2018000203A (es) 2018-10-15
SI2773376T1 (sl) 2016-05-31
KR102004668B1 (ko) 2019-07-26
SI3075395T1 (en) 2018-03-30
RS56819B1 (sr) 2018-04-30
UY37922A (es) 2018-11-30
AU2012331244A1 (en) 2014-04-17
KR101965467B1 (ko) 2019-04-03
UY34419A (es) 2013-05-31
DK2773376T3 (en) 2016-04-18
DOP2014000078A (es) 2014-07-15
CU20140051A7 (es) 2014-10-02
DK3075395T3 (en) 2018-02-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2017203423B2 (en) Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof
JP6051223B2 (ja) ペプチドの放出可能な結合のためのチロシンに基づくリンカー
JP2022537369A (ja) 長期安定化のためのアドレノメデュリン－類似体およびその使用
NZ714621B2 (en) Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof
NZ622997B2 (en) Polyethylene glycol based prodrug of adrenomedullin and use thereof