TH9145C3 - กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิกจากแบคทีเรียสังเคราะห์แสง - Google Patents

Abstract

DC60 (21/08/57) กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก จากแบคทีเรียสังเคราะห์แสงมีขั้นตอนดังนี้ a. การเตรียมกล้าเชื้อ โดยการถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสงซึ่งเก็บรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อ สูตร GM หรือ GS หรือ Ormerod มาเพาะเลี้ยงในอาหารสูตรเดียวกันดังกล่าวในภาชนะ เพาะเลี้ยง โดยปรับความเป็นกรดด่างของอาหารเพาะเลี้ยงดังกล่าวให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH ก่อนทำให้อาหารเพาะเลี้ยงปลอดเชื้อปนเปื้อนด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส นาน 15 นาที b. การเพาะเลี้ยงกล้าเชื้อ โดยถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสง (Rhodopseudomonas palustris KG31 ลงในอาหารที่ต้องการเพาะเลี้ยง บ่มภาชนะเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 35-40 องศาเซลเซียส ที่มีการให้ อากาศด้วยวิธีการใดวิธีหนึ่งที่เลือกได้ ได้แก่ การวางภาชนะเพาะเลี้ยงบนเครื่องเขย่าที่มี ความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที หรือการเติมอากาศเพื่อทำให้มีออกซิเจนที่ละลายใน อาหารเท่ากับ 5% ทั้งนี้เพื่อก่อให้เกิดการเติมอากาศและการผสมของสารอาหาร เพื่อให้ แบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโต จนกระทั่งแบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโตเข้าสู่ ระยะกึ่งกลางล็อคถึงระยะคงที่ C. การผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก กล้าเชื้อที่เตรียมได้จากข้อ b โดยถ่ายกล้าเชื้อดังกล่าวใส่ใน อาหารสูตร GM โดยใช้ปริมาณกล้าเชื้อ 5-10% เพาะเลี้ยงแบคทีเรียสังเคราะห์แสงในสภาพ ที่เติมอากาศแบบต่อเนื่อง โดยควบคุมออกซิเจนละลาย 5% และควบคุมความเป็นกรดด่าง ให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 จนเซลล์เจริญถึงระยะกึ่งกลางล็อค และเติมก๊าซไนโตรเจน หรือก๊าซอาร์กอน หรือก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ ในอัตรา 2% เพื่อให้ออกซิเจนละลายอยู่ใน 1-3% และควบคุมความเป็นกรดด่างให้อยู่ใน 6.0-6.5 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 ร่วมกับการเติมกรดลีวูลินิก และกรดโพรพิโอนิก ในปริมาณ 10 มิลลิโมลาร์และ 4 มิลลิโมลาร์ตามลำดับ d. หยุดการเพาะเลี้ยงเมื่อการเจริญของเซลล์เข้าสู่ระยะคงที่ กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิกจากแบคทีเรียสังเคราะห์แสงมีขั้นตอนดังนี้ a. การเตรียมกล้าเชื้อ โดยการถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสงซึ่งเก็บรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อ สูตร GM หรือ GS หรือ Ormerod มาเพาะเลียงในอาหารสูตรเดียวกันดังกล่าวในภาชนะ เพาะเลี้ยง โดยปรับความเป็นกรดด่างของอาหารเพาะเลี้ยงดังกล่าวให้อยู่ในช่วง 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH ก่อนทำให้อาหารเพาะเลี้ยงปลอดเชื้อบนเปื้อนด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 121/ C นาน 15 นาที b. การเพาะเลี้ยงกล้าเชื้อ โดยถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสง (Rhodopseudomonas palustris KG31 ลงในอาหารที่ต้องการเพาะเลี้ยง บ่มภาชนะเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ ช่วง 35-40/C ที่มี การให้อากาศด้วยวิธีการใดวิธีหนึ่งที่เลือกได้ ได้แก่ การวางภาชนะเพาะเลี้ยงบนเครื่องเขย่า ที่มีความเร็วรอบช่วง 200-250 รองต่อนาที หรือการเติมอากาศเพื่อทำให้มีออกซิเจน ละลายในอาหารเท่ากับ 5% ทั้งนี้เพื่อก่อให้เกิดการเติมอากาศและการผสมของสารอาหาร เพื่อให้แบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโต จนกระทั่งแบคทีเรียสังเคราะห์แสง เจริญเติบโตเข้าสู่ช่วงระยะกึ่งกลางล็อกถึงระยะคงที่ C. การผลิตกรด 5- อะมิโนลีวูลินิก กล้าเชื้อที่เตรียมได้จากข้อ b โดยถ่ายกล้าเชื้อดังกล่าวใส่ใน อาหารสูตร GM โดยใช้ปริมาณกล้าเชื้อในช่วง 5-10% เพาะเลี้ยงแบคทีเรียสังเคราะห์แสง ในสภาพทีเติมอากาสแบบต่อเนื่อง โดยควบคุมออกซิเจนละลายช่วง 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 จบเซลล์เจริญถึงระยะกึ่งกลางล็อคแล้วลดความเป็นกรดด่างของอาหาร เพาะเลี้ยงเป็น 6.0-6.5 10% NaOH และ 20% H3PO4 d. หยุดการเพาะเลี้ยงเมื่อการเจริญของเซลล์เข้าสู่ระยะคงที่ แก้ไข(21ส.ค.57) 1. กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก จากแบคทีเรียสังเคราะห์แสงมีขั้นตอนดังนี้ a. การเตรียมกล้าเชื้อ โดยการถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสงซึ่งเก็บรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อ สูตร GM หรือ G5 หรือ Ormerod มาเพาะเลี้ยงในอาหารสูตรเดียวกันดังกล่าวในภาชนะ เพาะเลี้ยง โดยปรับความเป็นกรดด่างของอาหารเพาะเลี้ยงดังกล่าวให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH ก่อนทำให้อาหารเพาะเลี้ยงปลอดเชื้อปนเปื้อนด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศา C นาน 15 นาที b. การเพาะเลี้ยงกล้าเชื้อ โดยถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสง Rhodopseudomonas palustris KG31 ลงในอาหารที่ต้องการเพาะเลี้ยง บ่มภาชนะเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 35-40 องศา C ที่มีการให้ อากาศด้วยวิธีการใดวิธีหนึ่งที่เลือกได้ ได้แก่ การวางภาชนะเพาะเลี้ยงบนเครื่องเขย่าที่มี ความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที หรือการเติมอากาศเพื่อทำให้มีออกซิเจนที่ละลายใน อาหารเท่ากับ 5% ทั้งนี้เพื่อก่อให้เกิดการเติมอากาศและการผสมของสารอาหาร เพื่อให้ แบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโต จนกระทั่งแบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโตเข้าสู่ ระยะกึ่งกลางล็อคถึงระยะคงที่ C. การผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก กล้าเชื้อที่เตรียมได้จากข้อ b โดยถ่ายกล้าเชื้อดังกล่าวใส่ใน อาหารสูตร GM โดยใช้ปริมาณกล้าเชื้อ 5-10% เพาะเลี้ยงแบคทีเรียสังเคราะห์แสงในสภาพ ที่เติมอากาศแบบต่อเนื่อง โดยควบคุมออกซิเจนละลาย 5% และควบคุมเป็นกรดด่าง ให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 จนเซลล์เจริญถึงระยะกึ่งกลางล็อค และเติมก๊าซไนโตรเจน หรือก๊าซอาร์กอน หรือก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ ในอัตรา 2% เพื่อให้ออกซิเจนละลายอยู่ใน 1-3% และควบคุมความเป็นกรดด่างให้อยู่ใน 6.0-6.5 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 ร่วมกับการเติมกรดลีวูลินิก และกรดโพรพิโอนิก ในปริมาณ 10 มิลลิโมลาร์และ 4 มิลลิโมลาร์ตามลำดับ d. หยุดการเพาะเลี้ยงเมื่อการเจริญของเซลล์เข้าสู่ระยะคงที่

Claims (1)

1. กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิกจากแบคทีเรียสังเคราะห์แสงตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่งการ เพาะเลี้ยงในขั้นตอน C กระทำโดยเพาะเลี้ยงแบคทีเรียสังเคราะห์แสงในสภาพที่เติมอากาศ แบบต่อเนื่อง โดยควบคุมออกซิเจนละลาย 5% และควบคุมความเป็นกรดด่างให้อยู่ในช่วง 6.5- 7.0 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 จนเซลล์เจริญถึงระยะกึ่งกลางล็อก และเติมก๊าซ ไนโตรเจน หรือก๊าซอาร์กอน หรือก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์ ในอัตรา 2% เพื่อให้ออกซิเจน ละลายอยู่ในช่วง 1-3% และควบคุมความเป็นกรดด่างให้อยู่ในช่วง 6.0-6.5 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 ร่วมกับการเติมกรดลีวูลินิกและกรดโพรพิโอนิก ในปริมาณ 10 มิลลิโมลาร์ และ 4 มิลลิโมลาร์ตามลำดับ แก้ไข(21ส.ค.57)

1. กรรมวิธีการผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก จากแบคทีเรียสังเคราะห์แสงมีขั้นตอนดังนี้ a. การเตรียมกล้าเชื้อ โดยการถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสง Rhodopseudomonas palustris KG31 ซึ่งเก็บรักษาในอาหารเลี้ยงเชื้อสูตร GM หรือ G5 หรือ Ormerod มาเพาะเลี้ยงใน อาหารสูตรเดียวกันดังกล่าวในภาชนะเพาะเลี้ยง โดยปรับความเป็นกรดด่างของอาหาร เพาะเลี้ยงดังกล่าวให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH ก่อนทำให้อาหารเพาะเลี้ยงปลอดเชื้อ ปนเปื้อนด้วยความร้อนที่อุณหภูมิ 121 องศา C นาน 15 นาที b. การเพาะเลี้ยงกล้าเชื้อ โดยถ่ายเชื้อแบคทีเรียสังเคราะห์แสง Rhodopseudomonas palustris KG31 ลงในอาหารที่ต้องการเพาะเลี้ยงสูตร GM หรือ G5 หรือ Ormerod อย่างใดอย่างหนึ่ง บ่มภาชนะเพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 35-40 องศา C ที่มีการให้อากาศด้วยวิธีการใดวิธีหนึ่งที่เลือกได้ จากการวางภาชนะเพาะเลี้ยงบนเครื่องเขย่าที่มีความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที หรือการเติม อากาศเพื่อทำให้มีออกซิเจนที่ละลายในอาหารเท่ากับ 5% ทั้งนี้เพื่อก่อให้เกิดการเติมอากาศ และการผสมของสารอาหาร เพื่อให้แบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโต เพาะเลี้ยงนาน 36-50 ชั่วโมง หรือจนกระทั่งแบคทีเรียสังเคราะห์แสงเจริญเติบโตเข้าสู่ระยะกึ่งกลางล็อค ถึงระยะคงที่ C. การผลิตกรด 5-อะมิโนลีวูลินิก กล้าเชื้อที่เตรียมได้จากข้อ b โดยถ่ายกล้าเชื้อดังกล่าวใส่ใน อาหารสูตร GM โดยใช้ปริมาณกล้าเชื้อ 5-10% (ปริมาตรต่อปริมาตร) เพาะเลี้ยงแบคทีเรีย สังเคราะห์แสงในสภาพที่เติมอากาศแบบต่อเนื่อง โดยควบคุมออกซิเจนละลาย 5% และ ควบคุมเป็นกรดด่างให้อยู่ใน 6.5-7.0 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 จนเซลล์ เจริญเติบโตถึงระยะกึ่งกลางล็อค และเติมก๊าซไนโตรเจน หรือก๊าซอาร์กอน หรือก๊าซ คาร์บอนไดออกไซด์ ในอัตรา 2% เพื่อให้ออกซิเจนละลายอยู่ 1-3% และควบคุมความ เป็นกรดด่างให้อยู่ใน 6.0-6.5 ด้วย 10% NaOH และ 20% H3PO4 ร่วมกับการเติมกรดลีวูลิ นิก และกรดโพรพิโอนิก ในปริมาณ 10 มิลลิโมลาร์และ 4 มิลลิโมลาร์ตามลำดับ d. หยุดการเพาะเลี้ยงเมื่อการเจริญของเซลล์เข้าสู่ระยะคงที่