TH63009A - วิธีการสำหรับการผลิตแอล-ทรีโอนีนโดยใช้แบคทีเรียของตระกูล Escherichia - Google Patents

Abstract

DC60 (21/04/46) ได้มีการเปิดเผยวิธีการสำหรับการผลิตแอล-ทรีโอนีนโดยใช้แบคทีเรียของตระกูล Escherichia โดยที่แบคทีเรียมีความสามารถผลิตแอล-ทรีโอนีน และได้ถูกดัดแปลงเพื่อให้การทำหน้าที่ของแอส พาร์เตท อะมิ โนทรานสเฟอเรสเด่นขึ้น ได้มีการเปิดเผยวิธีการสำหรับการผลิตแอล-ทรีโอนีนโดยใช้แบคทีเรียของตระกูล Escherichia โดยที่แบคทีเรียมีความสามารถผลิตแอล-ทรีโอนีน และได้ถูกดัดแปลงเพื่อให้การทำหน้าที่ของแอส พาร์เตท อะมิ โนทรานสเฟอเรสเด่นขึ้น

Claims (1)

ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา : 1.nbsp;ในบัญชีการเรียงตัว และ ที่ซึ่งมีการทำหน้าที่ของแอสพาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส 2. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 1 การทำหน้าที่ของแอส พาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรสถูกทำ ให้เด่นขึ้นโดยการเพิ่ม ปริมาณการแสดงออกยีนแอสพาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส 3. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 1 โดยที่การทำหน้าที่ของแอส พาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดยการเพิ่ม จำนวนชุดทำซ้ำของยีนแอสพาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส หรือ การ ดัด แปลงการเรียงตัวควบคุมการแสดงออกของยีนนั้นเพื่อให้การ แสดงออกของยีนจะถูกทำให้เด่นขึ้น 4. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 3 โดยที่จำนวนชุดทำซ้ำถูกทำ ให้เพิ่มขึ้นโดยการแปลงพันธุ์ ของแบคทีเรียด้วยเวคเตอร์ชุด ทำซ้ำต่ำที่มียีนนั้นอยู่ 5. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 2 ถึง 4 ซึ่งยีนแอสพาร์เดท อะมิโนทรานสเฟอเรสมีแหล่ง กำเนิดมาจากแบคทีเรียของตระกูล Escherichia 6. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 5 โดยที่ยีนแอสพาร์เตท อะมิ โนทรานสเฟอเรสถอดรหัสโปรตีน (A) หรือ (B) ต่อไปนี้ ; (A) โปรตีน ที่ประกอบด้วยการเรียงตัวกรดอะมิโนที่แสดงไว้ใน การเรียงตัวที่ 2 ในบัญชีการ เรียงตัว (B) โปรตีน ที่ประกอบด้วยการเรียงตัวกรดอะมิโนที่รวมถึง การหักออก, การแทนที่, การเติม ใส่ หรือ การเพิ่มของกรดอะมิโน ตัวหนึ่ง หรือ หลายตัวในการเรียงตัวกรดอะมิโนที่แสดงไว้ใน การเรียง ตัวที่ 2 ในบัญชีการเรียงตัว และ ที่ซึ่งมีการทำ หน้าที่ของแอสพาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส 7. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 5 โดยที่ยีนแอสพาร์เตท อะมิ โนทรานสเฟอเรสประกอบด้วย DNA (a) หรือ (b) ต่อไปนี้ ; (a) DNA ที่ซึ่งประกอบด้วยการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ของนิว คลีโอไทด์ที่ 1 ถึง 1196 ในการเรียง ตัวที่ : 1 หรือ (b) DNA ที่ซึ่งสามารถจับคู่ผสมได้กับการเรียงตัวนิวคลีโอ ไทด์ของนิวคลีโอไทด์ที่ 1-1196 ใน การเรียงตัวที่ : 1 หรือ ตัวทดสอบที่ซึ่งสามารถถูกเตรียมจากการเรียงตัวนิวคลีโอไทด์ นั้นภายใต้สภาวะ เข้มงวด และ ถอดรหัสสำหรับโปรตีนที่มีการทำ หน้าที่ของแอสพาร์เตท อะมิโนทรานสเฟอเรส 8. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 7 โดยที่สภาวะเข้มงวดเป็น สภาวะที่ซึ่งการ ล้างถูกทำที่ 60 ํC, และ ความเข้มข้นเกลือตรงกับ 1 x SSC และ 0.1% SDS 9. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 8 โดยที่แบคทีเรียได้ ถูกดัดแปลงต่อไปเพื่อทำให้มีการ แสดงออกเด่นขึ้นของยีนตัว หนึ่ง หรือ มากกว่าที่ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย - ยีนthrA กลางพันธุ์ที่ซึ่งถอดรหัสสำหรับแอสพาร์โตไคเนส โฮโมเซอรีน ดีไฮโดรจิเนส ที่ทน ทานต่อการกลับมายับยั้งโดยท รีโอนีน, - ยีนthrB ที่ซึ่งถอดรหัสสำหรับโฮโมเซอรีน ไคเนส, - ยีนthrC ที่ซึ่งถอดรหัสสำหรับทรีโอนีน ซินเทส, - ยีนthtA ที่ซึ่งถอดรหัสสำหรับโปรตีนที่คาดว่าผ่านเยื่อ หุ้ม 1 0. แบคทีเรียตามข้อถือสิทธิข้อ9 โดยที่แบคทีเรียนั้นได้ ถูกดัดแปลงเพื่อให้ปริมาณการแสดง ออกเพิ่มขึ้นของยีน thrA กลายพันธุ์, ยีนthrB, ยีนthrC และยีนrhtA 1

1. วิธีการสำหรับการผลิตแอล-ทรีโอนีน ที่ประกอบด้วยการ เพาะเลี้ยงแบคทีเรียตามข้อถือ สิทธิข้อ 1 ถึง 10 ในตัวกลาง เพาะเลี้ยงเพื่อผลิต และ สะสมแอล-ทรีโอนินในตัวกลางเพาะ เลี้ยงและ การเก็บรวบรวมแอล-ทรีโอนีนจากตัวกลางเพาะเลี้ยง นั้น