SU934589A1 - Способ получени полипептидов - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОПИПЕПТИДОВ путем гомогенизации измельченной ткани железы тимуса, ценШ :ттщ |ЗГ::,,::,13 трифугировани , удалени  осадка, обработки надосадочной жидкости ацетоном с последующей фильтрацией,отличающийс  тем, что, с целью упрощени  способа и вьвделени  полипептидов основной природы , ткань тимуса после гомогенизации экстрагируют разбавленной уксусной кислотой в присутствии хлорида цинка в течение 48-72 ч, далее экстракт центрифугируют и дополнительно обрабатывают ацетоном.

Description

;О

СО Ji

СП

00

со 1 . Изобретение относитс  к химикофармацевтической промьшшенности и касаетс  получени  физиологически активных препаратов дл  лечени  иммунодефицитных состо ний. Известен способ получени  полипептидов путем гомогенизации измельченной ткани железы тимуса, центрифугировани , удалени  осадка , обработки надосадочной жидкости ацетоном с последующей фильтрацией ш. Однако указанный способ  вл етс  трудоемким, имеет сложную многостадийную технологию производства и не позвол ет получать р д биологически активных веществ, содержащихс  в тимусе. Цель изобретени  - упрощение способа и вьщеление полипептидов основной природы. Цель достигаетс  тем, что при осуществлении способа получени  полипептидов путем гомогенизации измельченной ткани железы тимуса, цен трифугировани , удалени  осадка, обработки надосадочной жидкости ац тоном с последующей фильтрацией, ткань тимуса после гомогенизации экстрагируют разбавленной уксусной кислотой в присутствии хлорида цин ка в течение 48-72 ч, далее экстра центрифугируют и дополнительно обрабатывают ацетоном. Способ по сн етс  следующим при мере м. Пример 1. Исходное количество тимуса 500 г. Ткань тимуса очищают от сосудов, сгустков крови жировой клетчатки, промьшают водой затем ацетоном и помещают в соотно нии 1:4 при 4-1 ОС. Через 24 ч аце тон сливают., а ткань тим,уса взвеши вают и гомогенизируют. Гомогенат помещают в 3%-ный раствор уксусной кислоты Из расчета 1 часть гомоген та на 6 частей раствора кислоты (,5-4,0). К раствору кислоты д бавл ют ZhClj из расчета 1 г ZnCl. на 1л 3% раствора кислоты. Экстра цию провод т Втечение 72 ч. По ок чании экстракции субстрат центрифу руют при 3000 сб../мин в течение 20 мин. К супернатанту добавл ют ацетон в соотношении 1,5 (1 часть супернатанта и 5 частей ацетона). Осадок промывают ацетоном и высуши вают на фильтре. Получают 5,0-5,5 белого порошка, содержащего физиологически активные вещества тимуса. Дл  получени  лекарственной формы препарата тимуса (тималина) получе.нный порошок раствор ют в 550 мл 5% уксусной кислоты. Раствор препарата стерилизуют фильтрацией и разливают в-стерильные флаконы по 1 ил, затем лиофилизируют и закрывают стерильными резиновыми пробками. В результате в одном флаконе содержитс  10 мг веществ, вьщел емых из тимуса. Пример 2, Исходное количество тимуса Ю кг. Ткань тимуса очищают от сосудов, сгустков крови, жировой ткани, промывают водой, затем ацетоном и помещают в ацетон в соотношении 1:4 при 4-10 С. Перед экстракцией ацетон сливают, а ткань тимуса взвешивают и гомогенизируют. Гомогенат ткани тимуса помещают в 3%-ный раствор уксусной кислоты из расчета 1 часть гомогената на 6 частей раствора кислоты (,5-4,0). К раствору кислоты добавл ют ZnClj из расчета 1 г ZnCl на 1 л 3%-ного раствора кислоты. Экстракцию провод т в течение 72 ч в емкости с ме- шалкой дл  периодического перемешивани  субстрата. По окончании экстрак-. ции субстрат центрифугируют при 3000 об /мин в течение 20 мин. К супернатанту добавл ют ацетон в соотношении 1:5. Осадок промывают ацетоном и высушивают на фильтре. Получают 100-110 г белого порошка, содержащего физиологически активные вещества тимуса. Дп  получени  лекарственной формы препарата тимуса (тималина) полученньц порошок раствор ют в 11% и 5%-ной уксусной кислоте. Раствор препарата стерилизуют фильтрацией и разливают в стерильные флаконы по 1 мл, затем лиофилизируют и закрывают стерильными резинов з1ми пробками. Один флакон препарата содержит 10 мг веществ, вьщеленных из тимуса. Полученный тималин представл ет собой комплекс веществ (нуклеопептидов и полипептидов) со следующими характеристиками . При изучении в эксперименте установлена высока  биологическа  активность препарата (стимул ци  клеточного иммунитета, процессов регенерации и гомопоэза). В терапевтических дозах препарат не обладает токсичес-

кими свойствами и не вызывает аллергических реакций.

Результаты экспериментального и клинического изучени  показали, что препарат обладает выраженной биологической активностью, котора  вьфажаетс  в усилении иммунологической реактивности (увеличение количества лимфоцитов, Т-лимфоцитов, антителообразующих клеток в селезенке в

Состав тималина

ответ на введение тимусзависимого антигена) и сможет найти широкое применение в медицинской практике дл  лечени  и преду11ре дени  р да заболеваний человека.

Способ получени  тималина позвол ет выдел ть нуклеопротеиды и пептиды основной природы отличаетс  простотой, содержит меньшее количество опера1щй 6 стадий).

Иэоэлектрическа 

точка

(to.2 ед.рН)

Нуклеопептиды 75-85 Кислые полипеп10-20 t5 Основные полипептиды 660 sSOOO 5000

Claims (1)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛИПЕПТИДОВ путем гомогенизации измельченной ткани железы тимуса, цен трифугирования, удаления осадка, обработки надосадочной жидкости ацетоном с последующей фильтрацией,· отличающийся тем, что, с целью упрощения способа и выделения полипептидов основной природы, ткань тимуса после гомогенизации экстрагируют разбавленной уксусной кислотой в присутствии хлорида цинка в течение 48-72 ч, далее экстракт центрифугируют и дополнительно обрабатывают ацетоном.

   СО

   00 hU сл 00 со