SU1113126A1 - Способ получени средства,обладающего антидиуретическим действием - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИДИУРЕТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ , включающий обезжиривание задних долей гипофиза, экстракцию сырь , последующее осаждение балластных веществ с помощью раствора коллоидного железа и выделение целевого продукта, отличающийс  тем, что, с целью повышени  выхода целевого продукта, после лиофилизации экстракцию сырь  осуществл ют смесью этилового спирта и 4 М ацетатного буфера при их соотношении 3:1 и рИ 5,3, а при осаждении в экстракт дополнительно ввод т раствор аммиака, полученную жидкую фазу отдел ют фильтрованием, а осадок заливают раствором сол ной кислоты, нагревают и поспе охлаждени  в суспензию вновь добавл ют раствор аммиака, выпавший осадок отдел ют, а надосадочную жидё кость присоедин ют к первоначальному фильтрату. (Л

Description

Ь

1 1

Изобретение относитс  к технологии гфоизводства медицинских препаратов , обладающих антидиуретическим свойством и может быть использорано на предпри ти х медицинской и м сомолочной промышленности при производстве лекарственных средств из животного сырь , а получаемое в результате применени  изобретени  лекарственное средство может быть использовано в лечебно-профилактических учреждени х.

Извесгсн способ получени  средства , обладающего актидиуретическим действием, включающий обезЬоживание ацетоном замороженных задних долей гипофиза, экстракцик раствором уксусной кислоты, депротеинизирование экстракта обработкой раствором коллоидного железа и двууглекислого натри , отстаивание экстракта , фильтрование и установление рН 3,5 добавлением 2н, раствора сол ной кислоты, после чего экстракт упаривают с установлением в нем рН 6,5 с помощью 10%-ного раствора едкого натра.

Биологическа  активность полученного средства 0,25 МЕД jf 0,1 в 1 мг П.

К недостаткам известного способа получени  препарата адиурекрина относ тс  плоха  растворимость порошка адиуреюрина наличие в порош .ке большого количества балластных веществ трудность дозировани  и применени  препарата в медицинской практике.

Кроме того, при использовании порошка адиурекрина имеют место раздражение слизистой носа и другие нежелательные реакции. Выход конечного продукта адиурекрина сопровождаетс  низкой биологической активностью.

Цель изобретени  - повышение выхода целевого продукта.

Поставленна  цель достигаетс  тем что согласно способу получени  средства , обладающего антидиуретическим действием, включающему обезжиривание задних долей гипофиза, экстракцию сырь , последующее осаждение балластных веществ с помощью раствора коллоидного железа и вьщеление целевого продукта, после лиофилизации экстракцию сырь  осуществл ют смесью этилового спирта и4М ацетатного буфера при их соотношении 3:1 и

1262

рН 5,3, а при осаждении в экстракт дополнительно ввод т раствор аммиака , полученную жидкую фазу отдел ют фильтрованием, а осадок заливают

5 раствором сол ной кислоты, нагревают и после охлаждени  в суспензию вновь добавл ют раствор аммиака, выпавший осадок отдел ют, а надосадочную жидкость присоедин ют к первоначаль0 ному фильтрату.

Пример. 1 кг лиофильно высушенных задних долей гипофиза заливают смесью этилового спирта (2,А л) и 4 М раствором ацетатного

5 буфера рН 5,3 (0,8 л). Соотношение спирта и ацетатного буфера 3:1, Полученную массу пропускают через волчок . В реактор предварительно внос т 15 л этилового спирта и 5 л 4 М аце0 татного буфера. Смесь перемешивают в течение 3 ч при 25°С. Полученную суспензию обрабатывают на сепараторе, отдел   жмых от прозрачного экстракта .

5 Осаждение. К 2 л полученного экстракта при перемешивании добавл ют 40 л этилового спирта. Перемешивание продолжают 15 мин и оставл ют на 2 ч . Прозрачную надосадочную

0 жидкость декантируют, а нижний слой центрифугируют либо пропускают через сепаратор. Полученный осадок .промывают на нуч-фильтре, а затем сушат ацетоном и спиртом.

Последующа  сушка осуществл етс  в вакуум-сушильном шкафу при 40 С в течение 30 мин. Вькод сырца составл ет 500 г из 1 кг сублимированных гипофизов с биологической

активностью 12 МЕ/мг.

0,5 кг сырца с биологической активностью 12 ME раствор ют в 12 л 0,1%-ного растворе уксусной кислоты, перемешива  его при подогревании до . Такую температуру поддерживают в течение 1 ч. Далее температуру снижают до 20°С. Дл  освобождени  экстракта от белка к охлажденному раствору добавл ют 37 л воды и 15 л 10%-ного раствора коллоидного железа и довод т рН раствора до 6,6 12%-ным раствором аммиака. Вы павший осадок отдел ют с пс(ощью бумажного фильтра, а раствор со5 бирают в емкость. Отделенный осадок коллоидного железа вместе с фильтратом перенос т в экстракторный аппарат и заливают 30 л 0,1 н. 3 раствора сол ной кислоты при одновременном подогревании до в течение 16 мин, а.затем охлаждают до 30 С (15 мин), В суспензии устанавливают рН 6,5 путем добавлени  12%-ного раствора аммиака.. После установлени  н -жного рН в суспензии осадок отдел ют, а надосадочную жидкость присоедин ют к первоначальному фильтрату. Полученный осадок повторно помещают в емкость и дважды обрабатывают, как описано (2,5ч) после чего образуетс  высококонцентрированный раствор. Фильтраты объедин ют и довод т рН до 3,5. Биологическа  активность такого концентрированного раствора составл ет ME/мл. Данный раствор разбавл ют дистиллированной водой, консервируют нипагином, фильтруют и разливают в полиэтиленовые флаконы емкостью 1,5 мл с биологической активностью 20 и 40 ME/мл. Биологическую активность конечного продукта определ ют двум  методами: методом определени  биологической активности по вазопрессорному эффекту на белых беспородных крысах массой 250-300 г. основанным на способности вазопрессина, содержащегос  в препарате, повышать уровень артериального давлени  (испытани  приведены в сопоставлении с Международным стандартом ВОЗ); методом определени  биологической активности по способности препарата задерживать диурез у белых крыс с водной нагрузкой по сравнению с контрольной группой животных, которым не вводилс  испытуемый препарат. Результаты исследований антидиуре тической активности средств, получен ных известными предлагае ым способами проведенных через 5 ч после водной нагрузки (10 мл физиологического раствора в/бр.) представлены в таб264 лице (в 1 мл 20 Ед, животным ввод т по 0,02 Ед/100 г массы тела). Предлагаемый способ получени  антидиуретического препарата дает Возможность использовать конечный продукт в более удобной лекарственной форме, в виде носовых капель, а не в виде понюшек. Примером практической реализации предлагаемого способа  вл етс  нова  технологи  получени  лекарственного препарата, котора  предусматривает экстрагирование биологически активных веществ (нейропептццов) в раствор, который стандартизируетс  и может использоватьс  в.медицинской практике в виде носовых капель по следующей прописи: концентрированный раствор стандартизованного целевого продукта 35 мл (2000 НЕ); нипагин (консервант) 100 мг; дистиллированна  вода до 100 мл. Полученный раствор разливают во флаконы до 1 мл с 20 НЕ или АО МЕ/мп. При приготовлении раствора с 40 НЕ/мл целевой продукт в данной прописи удваиваетс . Предлагаемый способ обеспечивает получе1 ие антидиуретического средства с большим выходом. Практическое внедрение предлагаемого способа в производство способствует получению эффективного лекарственного средства дл  медицинской практики. Эффективность предлагаемой технологии выражаетс  в удешевлении технологического процесса получени  препарата за счет увеличени  выпуска готового лекар- ственного средства более чем в 1,5 раза по сравнению с адиурекрином . Удешевление технологического процесса составл ет 60% от прототипа и исключает необходимость в выпуске трудноиспользуемого и малоэффективного лекарственного препарата адиурекрина в порошке. Адиурекрин Контроль7,5 Опытна 6,8 Контроль8,1 Опытна 6,3 Контроль8,3 Опытна 6,5 Средство, полученное предп Контроль7 Опытна 4 Контроль8 Опытна 4,8 Контроль8,1 Опытна 4,5 бом 70 40 80 48 81 45

Claims (1)

1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕДСТВА, ОБЛАДАЮЩЕГО АНТИДИУРЕТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ, включающий обезжиривание задних долей гипофиза, экстракцию сырья, последующее осаждение балластных веществ с помощью раствора коллоидного железа и выделение це- левого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода целевого продукта, после лиофилизации экстракцию сырья осуществляют смесью этилового спирта и 4 М ацетатного буфера при их соотношении 3:1 и pH 5,3, а при осаждении в экстракт дополнительно вводят раствор аммиака, полученную жидкую фазу отделяют фильтрованием, а осадок заливают раствором соляной кислоты, нагревают и после охлаждения в суспензию вновь добавляют раствор аммиака, выпавший осадок отделяют, а надосадочную жидкость присоединяют к первоначальному фильтрату.