SU1158201A1 - Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих - Google Patents
Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих Download PDFInfo
- Publication number
- SU1158201A1 SU1158201A1 SU833646122A SU3646122A SU1158201A1 SU 1158201 A1 SU1158201 A1 SU 1158201A1 SU 833646122 A SU833646122 A SU 833646122A SU 3646122 A SU3646122 A SU 3646122A SU 1158201 A1 SU1158201 A1 SU 1158201A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- spleen
- acetone
- acetic acid
- substance
- extracted
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТИМУЛЯТОРА ИЗ СЕЛЕЗЕНКИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, вклюВСЕСОЮЗНАЯ 4 л. ;:(. , S15..-;4 ., чающий обработку органа ацетоном, его измельчение, получение надосадочной жидкости, обработку ее ацетоном с последующим отделением осадка, его экстракцией и лиофилизацией, о т л и Ч:а ю щ и ис тем, что, с целью повышени иммуностимулирующей активности, измельченную селезенку экстрагируют в 3%-ном растворе уксусной кислоты при рН 3,0-4,0, в присутствии хлористого цинка, а осадок, полученный после обработки экстракта ацетоном, экстрагируют водой в присутствии зксусной кислоты при рН 6,0-7,0 с последующим фипьтрованием и лиофштизацией. 5
Description
1 1 Изобретение относитс к медицинской промышленности и может быть использовано дл иммуностимул ции организма . Цель изобретени - повышение им муностимулирующей активности. Цель достигаетс тем, что согласно способу получени стимул тора из селезенки млекопитающих, включаюи1ему обработку органа ацетоном, его измельчение , получение надосадочной жидкости, обработку ее ацетоном с последующим отделением осадка, его экстракцией и лиофилизацией, измельченную селезенку экстрагируют в 3%ном растворе уксусной кислоты при рН 3,0-4,0 с добавлением хлористого цинка, а осадок, полученный после обработки экстракта ацетоном, экстра гируют водой в присутствии уксусной кислоты при рН 6,0-7,0 с последующим фильтрованием и лиофилизацией, Переработка путем экстрагировани измельченной селезенки в 3%-ном растворе уксусной кислоты позвол ет произвести гидролиз крупных белков . и других высокомолекул рных соединений , что способствует лучшей очист ке и устранению пирогенности. Добавление хлористого цинка способствует полному выделенш) из селезенки конечного продукта и лучшему осалодению его ацетоном. Экстракци осадка в воде при определенном рН (экстрагент - раствор уксусной кислоты) способствует растворению в воде наиболее активных веществ и позвол ет отделить от них нерастворимые балластные вещества путем фильтрации, Отклонение от заданных пределов .кислотности приводит к потере активного вещества. Существующие известные решени не имеют свойств, присущих предложенному . Концентраци спиртовой фракции, концентраци диализата, приводит к разрушению специфического начала вещества в результате гидролиза . Предложенное в известных способах отделение балластных веществ происходит за длительный период и малоэффективно. Отделение сопутствую щих веществ ведет к потер м. Способпрототип | вз тый эа базовый объект, позвол ет получить вещество, которое ингибирует синтез ДНК, но не оказьгеает стимулирующего действи . 2 на лимфоциты и активные Т-лимфоциты селезенки. Пример I. Берут селезенку крушюго рогатого скота, промывают водой. Селезенку помещают в ацетон, берут 1 часть селезенки и 10 частей ацетона с температурой -зс. Через 24 ч ацетон сливают, а селезенку 0,5 кг измельчают и помещают в реактор с мешалкой. Измельченную селезенку заливают 5 л раствора 3%-ной уксусной кислоты при рН 3,О, добавл ют 0,005 у.г хлористого цинка и экстрагируют 36 ч, перемешива 1 ч через каждые 8 ч. По окончании экстракции субстрата сливают и центрифугируют 15 мин со скоростью 3000 об/мин, надосадочную жидкость декантируют, к ней добавл ют 6 час- тай ацетона на 1 часть жидкости, перемешивают и формуют осадок 20 ч. Выпавший осадок высушивают на фильтре , измельчают и раствор ют 0,01 кг в 0,5 л воды с добавлением уксусной кислоты до ,0, В течение 2 ч непрерьшно перемешивают и удал ют балластные вещества путем фильтрации , Полученньй раствор стерильно фильтруют через пластины ЕК, разливают во флаконы так, чтобы в каждом содержалось 10 мг вещества и лиофилизируют. Выход активного вещества 0,005 кг, Пример 2, Берут селезенку животных, промывают водой и ацетоном , помещают 1 часть селезенки в 10 частей ацетона с температурой -5 С, Через 24 ч ацетон сливают. 10 кг селезенки измельчают на волчке , помещают в реактор и заливают 100 л раствора уксусной кислоты до рН 4,0, добавл ют 0,1 кг хлористого цинка и экстрагируют 36 ч, перемешива непрерьгоно по часу через каждые 8 ч. По окончании экстракции субстрат сливают и центрифугируют 15 мин со скоростью 3000 об/мин, надосадочную жидкость декантируют, к ней добавл ют 6 частей ацетона на 1 часть жидкости, перемешивают и формируют осадок 20 ч. Выпавший осадок высушивают на фильтре, измельчают и раствор ют 0,2 кг осадка в 10 л воды с добавлением уксусной кислоты до рН 6,0, Б течение 2 ч перемешивают и удал ют балластные вещества фильтрацией. Отфильтрованный раствор стерильно фильтруют через пластины ЕК& разливают во флаконы так, чтобы в каждом содержалось 10 мг веществаи лиофилизируют, Получают 0,1 кг активного вещества из 10 кг сырь . Пример 3, Берут свиную селезенку , промьгоают, помещают в ацетон г. температурой -5°С, выдерживают сутки,сливают ацетон. Берут 1 кг селезенки, измельчают и экстрагируют в 10 л 3%-ного раствора уксусной кис лоты при рН 3,5. Добавл ют 0,01 кг хлористого цинка, экстрагируют 36 ч попеременно перемепшва . По окончании экстракции субстрат сливают. центрифугируют, надосадочную жидкос декантируют,к ней добавл ют 6 часте ацетона на 1 часть жидкости,перемеш вают и формируют осадок за 20 ч.Пол . ченный осадок высущивают и измельча ют. Осадок в количестве 0,02 кг рас вор ют в 1 л воды с добавлением уксусной кислоты до рН 6,5, перемещи вают и удал ют балластные вещества фильтрацией. Раствор стерильно фильт руют и разливают во флаконы по 10 мг вещества, лиофилизируют. Выход активного вещества из исходного сырь составл ет 0,01 кг. Биологическую активность вещества вьщеленного из селезенки, оценивали по показател м иммунитета эксперимен тальных животных. Эксперименты проводили на 50-ти морских свинках, самцах весом 200250 г. Животные бьти разделены на 5 равных групп: контрольную и подопытные . Подопытным животным вводили по 0,1 мг (рекомендуема дл людей терапевтическа доза) активных веществ , выделенных из селезенки различными способами, растворенных в 0,5 мл физиологического раствора. Вещества вводили ежедневно внутримьшечно в течейие 20 дней. Контрольным животным по аналогичной схеме вводили по 0,5 мл физиологического раствора. На 21-е сутки всех, животных забивали, вьщел ли селезенку и лимфатические узлы. Ткань селезенки и лимфатических узлов гомогенизировали , выдел ли клетки и затем определ ли удельную концентрацию лимфоцитов (удельна концентраци - количество клеток в тыс чах на Г мг ткани) и активных Т-лимфоцитов ме
тодом спонтанного розеткообразованй с эритроцитами кролика. Известно, что лимфоциты и активные Т-лимфо1 1
Проведены эксперименты, подтверждающие высокую эффективность препарата в отношении стимул ции антител 1 4 циты вл ютс «тммунокомпетеитными клетками. Установлено, что введение вещества , полученного из селезенки по предложенному способу приводит к значительному увеличению лимфоцитов и активных Т-лимфоцитов в селезенке. Все остальные вещества, полученные известньми способами подобной активностью не обладали. При физико-химическом анализе выделенного из селезенки вещества установлено , что оно представл ет собой комплекс полипептидов. Изучение токсичности и аллергизирующих свойств выделенного вещества на лсивотных показало , что препарат из селезенки не обладает в терапевтических дозах подобной активностью. Это указьшает на перспективность препарата из селезенки дл применени в медицинской практике. Эксперименты, проведенные на животных , указьшают на тканеспецифическую стимул цию иммунокомпетентных клеток в селезенке под воздействием вещества, вьщеленного из этого же органа. Это вление может быть использовано дл создани лекарственного препарата с целью стимул ции активности клеток селезенки, где, как известно, происходит образование и функционирование антителообразующйх клеток после по влени антигенов в организме. Известно, что применение различных цитостатических средств, ионизирующей радиации, глюкокортикоидов приводит к резкому подавлению иммуногенеза. Поэтому применение в этих случа х препарата из селезенки вл етс целесообразным и полезным. Дл получени вещества предложенным способом имеетс в достаточном количестве сырье. Известно, что в селезенке присутствуют лимфоциты (антителообразующие клетки), которые осуществл ют выраотку антител на различные антигены. днако выработка антител лимфоцитами селезенки на р д антигенов недостаточна . Поэтому применение вещества, увеличивающего количество клеток в селезенке, позвол ет увеличить об- разование и выход антител.
на тимусзависимые антигены, Опыты проведены на 250 мышах-самцах, ли НИИ СВА, весом 18-20 г, которые были разделены на 5 групп. Мьгаам вводилм тимусзависимый антиген (эритроциты барана) в дозе клеток в 1 МП и сутки 3 раза ежедневно подкожно вводили в(ещество из селезенки по 0,1 мг на мышь а также вещества аналогов и прототипа. Затем через 7 дней мышей забивали, брали кровь и определ ли общеприн тым методом титр антител и количество антителообразующих клеток в селезенке.
Результаты опыта представлены в таблице
Из таблицы следует,что использование вещества из селезенки позвол ет значительно (статистически достоверно ) увеличить количество антителообразующих клеток и образование и выход антител.
Эти результаты могут быть использованы дл повьпиени выхода антител V животных - продуцентов антител при пол5гчении лечебных антисьшороток, что даст большой зкономический эффект . Это в.ещество также можно будет использовать и дл введени больным с целью стимул ции образовани антител при введении различных вакцин, к которым антитела образуютс в недостаточном количестве.
Статистически достоверно по сравнению с контролем (Р- 0,05)
Claims (1)
- СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТИМУЛЯТОРА ИЗ СЕЛЕЗЕНКИ МЛЕКОПИТАЮЩИХ, вклю чающий обработку органа ацетоном, его измельчение, получение надосадочной жидкости, обработку ее ацетоном с последующим отделением осадка, его экстракцией и лиофилизацией, о т л и ч :а ю щ и й с я тем, что, с целью повышения иммуностимулирующей активности, измельченную селезенку экстрагируют в 3/-ном растворе уксусной кислоты при pH = 3,0-4,0, в присутствии хлористого цинка, а осадок, полученный после обработки экстракта ацетоном, экстрагируют водой в присутствии уксусной кислоты при pH 6,0-7,0 с последующим фипьтрованием и лиофилизацией. 5
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU833646122A SU1158201A1 (ru) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU833646122A SU1158201A1 (ru) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1158201A1 true SU1158201A1 (ru) | 1985-05-30 |
Family
ID=21083203
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU833646122A SU1158201A1 (ru) | 1983-06-03 | 1983-06-03 | Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1158201A1 (ru) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995011659A2 (fr) * | 1993-10-18 | 1995-05-04 | Tsentr Embrionalnych Tkanei 'emcell' | Preparation pharmaceutique a proprietes immunocorrectrices basee sur une suspension cellulaire et procede de traitement du diabete sucre base sur son utilisation |
US5811399A (en) * | 1988-12-14 | 1998-09-22 | Cytran, Inc. | Pharmaceutical dipeptide compositions and methods of use thereof: immunodepressants |
US6368788B1 (en) | 1987-12-30 | 2002-04-09 | Cytran, Inc. | Method of treating complications in immunodepressed states resulting from HIV infection |
RU2648468C1 (ru) * | 2016-11-09 | 2018-03-26 | Общество с ограниченной ответственностью "Самсон-Мед" | Мембранный способ получения лекарственного средства на основе пептидов тимуса телят |
RU2790158C1 (ru) * | 2021-12-21 | 2023-02-14 | Игорь Закванович Зайцев | Способ получения противовоспалительного препарата на основе пептидов селезенки млекопитающих, препарат, полученный данным способом, и его применение |
-
1983
- 1983-06-03 SU SU833646122A patent/SU1158201A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Авторское свидетельство СССР 839090,кл. А 61 К 35/28,1979 (прототип) . * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6368788B1 (en) | 1987-12-30 | 2002-04-09 | Cytran, Inc. | Method of treating complications in immunodepressed states resulting from HIV infection |
US6777195B2 (en) | 1987-12-30 | 2004-08-17 | Cytran, Inc. | Pharmaceutical dipeptide compositions and methods of use thereof: immunostimulants |
US5811399A (en) * | 1988-12-14 | 1998-09-22 | Cytran, Inc. | Pharmaceutical dipeptide compositions and methods of use thereof: immunodepressants |
WO1995011659A2 (fr) * | 1993-10-18 | 1995-05-04 | Tsentr Embrionalnych Tkanei 'emcell' | Preparation pharmaceutique a proprietes immunocorrectrices basee sur une suspension cellulaire et procede de traitement du diabete sucre base sur son utilisation |
WO1995011659A3 (fr) * | 1993-10-18 | 1995-06-01 | Ts Embrionalnych Tkanei Emcell | Preparation pharmaceutique a proprietes immunocorrectrices basee sur une suspension cellulaire et procede de traitement du diabete sucre base sur son utilisation |
RU2648468C1 (ru) * | 2016-11-09 | 2018-03-26 | Общество с ограниченной ответственностью "Самсон-Мед" | Мембранный способ получения лекарственного средства на основе пептидов тимуса телят |
RU2790158C1 (ru) * | 2021-12-21 | 2023-02-14 | Игорь Закванович Зайцев | Способ получения противовоспалительного препарата на основе пептидов селезенки млекопитающих, препарат, полученный данным способом, и его применение |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SU1158201A1 (ru) | Способ получени стимул тора из селезенки млекопитающих | |
EP0573668A1 (en) | Bone reinforcing factor, and food and drink containing said factor | |
DE3421789C2 (ru) | ||
US5070076A (en) | Thymus-gland preparation and method for producing same | |
RU1417244C (ru) | Способ получения вещества, восстанавливающего функцию предстательной железы | |
SU1187824A1 (ru) | Способ получени иммуностимул тора | |
RU2041717C1 (ru) | Биологически активное средство, способ его получения и препарат, содержащий указанное средство, и способ использования препарата | |
US4908206A (en) | Extracts of embryonic organs, process for their preparation and pharmaceutical preparation containing them | |
RU2090194C1 (ru) | Способ получения препарата для лечения координаторных нарушений из мозжечково-стволового отдела головного мозга | |
RU2295963C1 (ru) | Способ получения иммуностимулятора | |
SU934589A1 (ru) | Способ получени полипептидов | |
RU2142284C1 (ru) | Способ получения средства с адаптогенным и противолучевым действием | |
US4701442A (en) | Treatment of symptoms of neoplastic diseases with nucleoproteins | |
US3466367A (en) | Preparation of growth regulating compositions comprising thymus extracts | |
RU2089204C1 (ru) | Способ получения пептидов, восстанавливающих функцию предстательной железы | |
RU2155068C1 (ru) | Способ получения вещества, стимулирующего антигеннезависимую дифференцировку в-лимфоцитов | |
RU2000061C1 (ru) | Способ получени белков, обладающих сродством к опиатным рецепторам | |
RU1522485C (ru) | Способ получения иммуностимулятора | |
SU571267A1 (ru) | Способ получени фитогемагглютинина | |
US4394374A (en) | Thymus gland extracts | |
RU1448443C (ru) | Способ получения вещества, восстанавливающего репродуктивную функцию из семенников половозрелого скота | |
CN109294984A (zh) | 一种体内高效扩增nk细胞的香菇多糖胶囊及其制备方法 | |
RU2177325C1 (ru) | Способ получения вещества, обладающего иммуностимулирующей активностью | |
RU2091073C1 (ru) | Способ получения иммуностимулятора | |
RU2062619C1 (ru) | Способ получения препарата фолликулостимулирующего гормона из аденогипофизов животных |