SU819166A1 - Способ получени гидролизатов изМОлОчНОй СыВОРОТКи дл пРигОТОВлЕНи пиТАТЕльНОй СРЕды - Google Patents

Description

Изобретение относится к ветеринарной биохимии, в частности к способам получения питательных сред, используемых в ветеринарии и биологической промышленности.

Известен способ приготовления питательной среды для производства пенициллина, состоящий из предварительной очистки молочной сыворотки от белков при помощи растворимых солей кальция и карбонатов натрия, калия, аммония и т. д., после чего выпавший осадок отфильтровывают, а надетой используют в качестве основной питательной среды [1].

Недостатком этого способа является то, что полученная таким образом среда в связи с низкой питательной ценностью имеет ограниченное применение (используется только для производства пенициллина).

Известен также способ приготовления питательной среды для получения бактериального препарата молочнокислых бактерий, при котором в качестве основного сырья используют восстановленное обезжи- 25 ренное молоко или подсырную сыворотку.

В сыворотку (без отделения белков) при pH 6,5—7,0 и температуре 53—57°С добавляют ферментный препарат протомезентерин в виде 5%-ного раствора. После гидро- 30 лиза в среду вносят предварительно растворенные и профильтрованные ингредиенты, перемешивают и стерилизуют [2].

Недостатком этого способа является то, 5 что полученная питательная среда содержит незначительное количество азотистых веществ, что ограничивает применение ее для культивирования большинства микроорганизмов, используемых в производстве 10 вакцин.

В связи с низким содержанием азотистых веществ при получении питательной среды в. промышленном производстве создается необходимость переработки больших 15 объемов сыворотки, что значительно удлиняет технологический процесс и требует дополнительных материалов и оборудования. Кроме того, при этом способе в целевом продукте остается зйачительное количество лактозы, которое ограничивает рост целого ряда микроорганизмов.

С целью сокращения технологического процесса и повышения содержания азотистых веществ в целевом продукте по предлагаемому способу в исходной сыворотке проводят выделение белков с одновременным удалением лактозы путем доведения pH сыворотки до 8,3—8,5, а гидролизу подвергают выделившиеся белки.

Гидролизат готовят следующим образом.

* ' 3

Мблочйую сыворотку с молокозаводов после получения из нее творога или сыра фильтруют, pH фильтрата доводят до 3,3— 3,5, выпавший при этом осадок отделяют отстаиванием в течение 4—о часов или центрифугированием при 15000 об/мин. Полученный осадок гидролизуют. Для этого осадок разводят дистиллированной водой в соотношении 1: 1,5 или л ;2, доводят pH смеси до /,6—7,3, подогревают до 40— 47“С, дооавляют хлороформ, перемешивают и затем дооавляют сухой панкреатин из расчета 3—3,1% или поджелудочную железу из расчета 21)—21%· Смесь хорошо перемешивают и гидролизуют при 45—4ГС в течение 1—3 суток. Во время гидролиза проверяют неооходимые показатели — общий, аминныи азот, триптофан и коррегируют pH. После проведения гидролиза раствор фильтруют и стерилизуют и используют как питательную среду или ее компонент.

Пример 1. 100 л сыворотки молока фильтруют через ватно-марлевый фильтр. В фильтрате измеряют pH (ооычно сыворотка имеет кислые значения pH) и при помощи Ю7о-ного раствора NaoH доводят его до 3,3—з,а. при этом в осадок выпадают все фракции оелка, а в надетое остается жидкая часть сыворотки с растворенной в ней лактозой, микроэлементами и т. д. Полученный осадок отделяют отстаиванием в течение пяти часов, разводят его дистиллированной водой в соотношении 1 : 1,5, измеряют pH раствора и доводят 10%-ным раствором NaoH до 7,6—7,8. После перемешивания подогревают раствор до 47^иС, дооавляют 0,275 л хлороформа, после перемешивания — 0,775 кг сухого панкреатина. Проверяют pH полученного раствора и при изменении его вновь доводят до 7,6— 7,8. Гидролиз проводят при 47°С в течение трех суток. В течение первых суток через каждые 5—6 часов измеряют общий и аминный азот, pH и доводят его до 7,6—7,8. На вторые и третьи сутки два раза в день измеряют pH, который доводят до 7,0—7,2, а также общий и аминный азот. После окончания гидролиза смесь фильтруют через ватномарлевый фильтр и стерилизуют текучим паром дробно. Показатели гидролизата в конце гидролиза: pH — 6,8, аминный азот — 280 ψ-%, триптофан — 50мг%. Полученный гидролизат пригоден для использования в качестве питательной среды.

Пример 2. 100 л сыворотки молока фильтруют, pH фильтрата доводят 20%-ным раствором NaOH до 8,3—8,5. Выпавший осадок отделяют на суперцентрифуге при 15000 об/мин. Полученный осадок разво819166 дят дистиллированной водой в соотношении 1:2, доводят pH раствора до 7,6—7,8. После перемешивания подогревают раствор до 47^иС, дооавляют 0,3 л хлороформа, по5 еле перемешивания — 0,9 кг сухого панкреатина. Последующие операции — гидролиз, фильтрацию, стерилизацию — проводят аналогично примеру 1.

идролизат, полученный предложенным о спосооом, может Оыть использован как готовая питательная среда (примеры 1 и 2), как основа для мясной воды (при содержании аминного азота — 70—80 мг%, общего азота — 300—310 мг%), пептонов (при 5 полном расщеплении белка), а так же как основа для получения препаратов лактоглобулина и лактоальбумина.

Способ апробирован с положительными результатами на Слободзейском производ0 ственном предприятии ветпрепаратов «МолдзооветснаОпром». Ростовые свойства полученных гидролизатов проверяли по тест-штаммам: Staphylococcus aureus «Лоссманов», Escherichia coli шт. 675, Strepto5 coccus faecalis шт. 6783. При этом рост микрокультур соответствовал требованиям ГОСТ 13805—76 «Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей», ГОСТ 20729—75 «Питательные среды. Во0 да мясная», ГОСТ 20730—75 «Питательные среды. Бульон мясо-пептонный».

Предложенный способ, по сравнению с известным, менее продолжителен, позволяет получать гидролизат с высоким содер5 жанием азотистых веществ, что расширяет возможности его применения при использовании в биологической промышленности, занимающейся изготовлением ветеринарных препаратов.

Claims (1)

1. Формула изобретения

   Способ получения гидролизатов из молоч- . ной сыворотки для приготовления питательной среды, предусматривающий очистку, 5 ферментативный гидролиз и стерилизацию, отличающийся тем, что, с целью сокращения технологического процесса и повышения содержания азотистых веществ в целевом продукте, в исходной сыворотке ) проводят выделение белков с одновременным удалением лактозы путем доведения pH сыворотки до 8,3—8,5, а гидролизу подвергают выделившиеся белки.