SU447876A1 - Способ выделени антитромбина - Google Patents
Способ выделени антитромбинаInfo
- Publication number
- SU447876A1 SU447876A1 SU1818160A SU1818160A SU447876A1 SU 447876 A1 SU447876 A1 SU 447876A1 SU 1818160 A SU1818160 A SU 1818160A SU 1818160 A SU1818160 A SU 1818160A SU 447876 A1 SU447876 A1 SU 447876A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- gel
- column
- antithrombin
- antitrombin
- agarose
- Prior art date
Links
- 238000002955 isolation Methods 0.000 title description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 13
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 description 8
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 7
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 150000004676 glycans Polymers 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 150000004804 polysaccharides Polymers 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 2qpq Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 3
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N Heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 3
- 229960002897 Heparin Drugs 0.000 description 3
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N Cyanogen Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N Cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000633 Dextran Sulfate Drugs 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 2
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
Description
Изобретение относитс к области медицины и касаетс выделени антитромбина из продуктов , животного происхождени . Предложенный способ - новый, в литературе н описанный. изобретени вл етс выделение антитромбина из крови, выход которого превышает 90%. Эта цель достигаетс тем, что кровь обрабатывают сульфированным углеводом, например сшитым бромистым цианом, сульфированным полисахаридом с последующей элюцией адсорбированного антитромбииа. Способ осуществл ют следующим образом. Антитромбин получают при адекватном разделении от других протеинов исходного материала . Чтобы получить большее количество антитромбина, его адсорбируют из фракции Конха при добавлении гел к раствору этой фракции. После адсорбции гель отфильтровывают, промывают и элюируют. После фильтровани гел от элюата на Sephadex С150 получают чистый антитромбин. Примерами гелей, пригодных дл использовани в качестве адсорбентов, вл ютс следующие: сшитый сульфат декстрана; сшитый сульфат декстрана-агароза; сшитый гепарин; сшита гепарин-агароза; сшитый сульфат хондраутина-агарозы. Сшитые индивидуальные гели готов т при добавлении бромистого циана к раствору полисахарида , причем при установлении рН около И происходит сшивка между молекулами и образование гел . Смешанные гели получают при добавлении сульфированного полисахарида к гелю агарозы (Sephadex--- 4В, Pharmacia Fine Chemicals, Uppsala, Sweden) с последующим добавлением бромистого циана при рН 11. Эти типы гелей облегчают регулирование и получение более высоких скоростей , чем индивидуальные гели. Пример 1. К раствору 100 мл сульфированного декстрана (20 мг/мл) прибавл ют 5 г BrCN. Затем повышают рН до 11 в течение 7 мин с помощью 5М NaOH и оставл ют смесь на ночь при перемешивании. Образуетс паста белого гранулированного гел . Пасту набивают в небольшую колонку 5 мм X 8 см и уравновешивают буфером 0,02 М TRIS, 0,01 М соли лимонной кислоты и 0,15М NaCl (рН 8,5). Через колонку пропускают 2 мл нормальной плазмы. После прохода через колонку плазма тер ет свою свертываемость. Колонку С1 ачала
промывают исходным буфером, а затем элюируют част ми, увеличива концентрацию соли до 1 М iNaCl. Элюат содержит материал, который после диализа на фосфатном буфере удлин ет врем коагул ции нормальной плазмы после повторной рекальцификации от 3 до 45 мин. Иммунологический анализ показывает наличие в элюате антитромбина и некоторых липопротеинов.
Пример 2. Адсорбци из плазмы с помощью гел сшитой сульфированной декстранагарозы . Градиентное элюирование.
Сульфированный декстран готов т при смешивании раствора 30 мл сульфированного декстрина 15мг/мл, 50мл 4%-ных гранул полимиризованной агарозы и 1г BrCN (рН 11). Смесь выдерживают при перемешивании в течение 7 мин и поддерживают рН непрерывным добавлением NaOH. После этого добавление ш,елочи прекращают, и через 5 мин рН падает до 8,5. Перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, затем гель промывают. Заполн ют колонку полученной таким образом сульфированным декстраном-агарозой. На стадии адсорбции через колонку пропускают 3 мл нормальной плазмы, смешанной в соотношении 1:1 с буфером (0,02 М трис-буфер, 0,01 М соли лимонной кислоты, 0,015М NaCl, рН 8,5). После прохода через колонку элюат концентрируют до 3 мл объема и испытывают
на способность к коагул ции. Во врем прохода через колонку плазма тер ет свою способность к коагул ции. Адсорбированный материал десорбируют 0,02 М трис-буфером и 0,01 М соли лимонной кислоты (рН 7,3) при изменении концентрации NaCl от 0,15М. Элюат состоит из двух компонентов, одним из них вл етс липопротеинова фракци типа пре-бета и антитромбин П1. Идентификацию провод т иммунологическими и физико-химическими методами.
Пример 3. Адсорбци из плазмы гелем сшитой гепарин-агарозы.
Гепарин-агарозу готов т, как описано в примере 2, дл сульфированного декстранаагарозы . Вместо сульфата декстрана используют 30 мл раствора гепарина (500 мл). Гель помещают в колонку и провод т эксперимент , как описано в примере 2. Получают те же результаты.
Предмет изобретени
Способ выделени антитромбина, отличающийс тем, что материал животного происхождени , например кровь, обрабатывают сульфированным углеводом, например сшитым бромистым цианом, сульфированным полисахаридом с последующей элюцией адсорбированного целевого продукта.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE7111350A SE392038B (sv) | 1971-09-08 | 1971-09-08 | Forfarande for isolering av antitrombin ur blod eller blodprodukter |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU447876A1 true SU447876A1 (ru) | 1974-10-25 |
| SU447876A3 SU447876A3 (ru) | 1974-10-25 |
Family
ID=20293800
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU1818160A SU447876A3 (ru) | 1971-09-08 | 1972-08-08 | Способ выделения антитромбина |
Country Status (23)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3842061A (ru) |
| JP (1) | JPS5545528B2 (ru) |
| AT (1) | AT324549B (ru) |
| AU (1) | AU461865B2 (ru) |
| BE (1) | BE787284A (ru) |
| CA (1) | CA979805A (ru) |
| CH (1) | CH577829A5 (ru) |
| CS (1) | CS172957B2 (ru) |
| DE (1) | DE2243688C3 (ru) |
| DK (1) | DK131128B (ru) |
| ES (1) | ES406199A1 (ru) |
| FI (1) | FI50583C (ru) |
| FR (1) | FR2154483B1 (ru) |
| GB (1) | GB1356229A (ru) |
| HU (1) | HU165070B (ru) |
| IE (1) | IE36670B1 (ru) |
| IL (1) | IL39982A (ru) |
| NL (1) | NL154118B (ru) |
| NO (1) | NO135302C (ru) |
| PL (1) | PL83490B1 (ru) |
| SE (1) | SE392038B (ru) |
| SU (1) | SU447876A3 (ru) |
| ZA (1) | ZA726024B (ru) |
Families Citing this family (38)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3920625A (en) * | 1973-06-19 | 1975-11-18 | Kabi Ab | Isolation of coagulation factors from biological material using cross linked sulfated, sulfonated carbohydrates |
| US4022758A (en) * | 1973-06-19 | 1977-05-10 | Ab Kabi | Isolation of coagulation factors I and VIII from biological material |
| US4054557A (en) * | 1974-05-15 | 1977-10-18 | Ab Kabi | Growth promoting polypeptides and preparation method |
| US4103685A (en) * | 1976-01-05 | 1978-08-01 | Lupien Paul J | Method and apparatus for extravascular treatment of blood |
| NZ180198A (en) * | 1976-03-04 | 1978-11-13 | New Zealand Dev Finance | Cationic ion exchanger with a cross-linked carbohydrate marix |
| NZ180199A (en) * | 1976-03-04 | 1978-11-13 | New Zealand Dev Finance | Method of testing for the presence of elevated plasma liprotein concentration |
| US4087415A (en) * | 1976-06-09 | 1978-05-02 | William L. Wilson | Antithrombin III |
| JPS597693B2 (ja) * | 1978-01-07 | 1984-02-20 | 株式会社ミドリ十字 | 抗トロンビン製剤及びその製法 |
| DE2916711A1 (de) | 1979-04-25 | 1980-11-06 | Behringwerke Ag | Blutgerinnungsfaktoren und verfahren zu ihrer herstellung |
| US4210580A (en) * | 1979-06-19 | 1980-07-01 | David Amrani | Process for separation and isolation of AHF and fibronectin from blood plasma |
| US4278594A (en) * | 1979-06-19 | 1981-07-14 | David Amrani | Process for separation and isolation of AHF, von Willebrand's ristocetin cofactor (VWF:RCF) and fibronectin from blood plasma |
| SE422081B (sv) * | 1979-08-22 | 1982-02-15 | Ird Biomaterial Ab | Sett att pavisa proteolytiska enzymer |
| US4446314A (en) * | 1980-09-30 | 1984-05-01 | Cutter Laboratories, Inc. | Fractionation of heparin |
| US4386025A (en) * | 1980-09-30 | 1983-05-31 | Cutter Laboratories, Inc. | Method of preparing antithrombin |
| DE3038163A1 (de) * | 1980-10-09 | 1982-05-06 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Thrombininhibitor, seine herstellung und verwendung |
| FR2527222A1 (fr) * | 1982-05-19 | 1983-11-25 | Christine Fougnot | Procede de separation et de purification des proteases et des antiproteases de la coagulation sanguine, ainsi que du complexe protease/antiprotease |
| US4632981A (en) * | 1982-07-30 | 1986-12-30 | Genentech, Inc. | Human antithrombin III |
| CA1221307A (en) * | 1982-12-02 | 1987-05-05 | Nobutaka Tani | Adsorbent and process for preparing the same |
| US4515714A (en) * | 1983-03-09 | 1985-05-07 | Juridicial Foundation, The Chemo-Semo-Sero-Therapeutic Research Institute | Method for purification of hepatitis B virus surface antigen |
| AT379510B (de) * | 1983-05-20 | 1986-01-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation |
| AT379310B (de) * | 1983-05-20 | 1985-12-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines antithrombin iii-heparin- bzw. antithrombin iii-heparinoidkonzentrates |
| AU571078B2 (en) * | 1984-04-14 | 1988-03-31 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Purification of filamentous hemagglutinin |
| GB8505882D0 (en) * | 1985-03-07 | 1985-04-11 | Central Blood Lab Authority | Purification of blood coagulation factor viii |
| DE3519011A1 (de) * | 1985-05-25 | 1986-11-27 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur herstellung eines materials zur affinitaetschromatographie |
| US4656254A (en) * | 1985-12-02 | 1987-04-07 | Miles Laboratories, Inc. | Method of preparing alpha-1-proteinase inhibitor and antithrombin III |
| AT399095B (de) * | 1986-03-27 | 1995-03-27 | Vukovich Thomas Dr | Verfahren zur auftrennung von proteinen mittels gradientenelution und vorrichtung zur durchführung des verfahrens |
| US4749783A (en) * | 1986-07-11 | 1988-06-07 | Miles Laboratories, Inc. | Viral inactivation and purification of active proteins |
| CA1341379C (en) | 1988-04-28 | 2002-07-23 | Welfide Corporation | Purified antithrombin-iii and methods of producing the same |
| US5110907A (en) * | 1989-08-01 | 1992-05-05 | Alpha Therapeutic Corporation | Factor viii complex purification using heparin affinity chromatography |
| US7045585B2 (en) * | 1995-11-30 | 2006-05-16 | Hamilton Civic Hospital Research Development Inc. | Methods of coating a device using anti-thrombin heparin |
| US6491965B1 (en) | 1995-11-30 | 2002-12-10 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Medical device comprising glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| US6562781B1 (en) * | 1995-11-30 | 2003-05-13 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Glycosaminoglycan-antithrombin III/heparin cofactor II conjugates |
| EP0844254A3 (en) * | 1996-11-20 | 1999-05-12 | The Green Cross Corporation | Method for producing antithrombin-III, method for purifying it, and preparation containing it |
| AT405739B (de) | 1997-09-19 | 1999-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur reinigung von antithrombin iii |
| US8563693B2 (en) * | 2001-01-26 | 2013-10-22 | Acceleration Biopharmaceuticals, Inc. | Method of treating human immunodeficiency virus infection in a mammal comprising administering heparin-activated antithrombin III |
| EP1362127B1 (en) * | 2001-01-26 | 2007-11-07 | The General Hospital Corporation | Serpin drugs for treatment of hiv infection and method of use thereof |
| SE0203770D0 (sv) * | 2002-12-19 | 2002-12-19 | Biovitrum Ab | Method of separation |
| MX2007002085A (es) | 2004-08-20 | 2007-07-19 | Prometic Biosciences Ltd | Esquemas de aislamiento y purificacion consecutivos de proteinas mediante cromatografia de afinidad. |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE366760B (ru) * | 1967-12-18 | 1974-05-06 | J Sjoevall | |
| DE1907738A1 (de) * | 1969-02-15 | 1970-08-13 | Bayer Ag | Verfahren zur Abtrennung des Trypsin-Plasmin-Inhibitors vom Thrombin-Inhibitor in handelsueblichen Hirudinpraeparaten und in Hirudinrohpraeparaten |
-
1971
- 1971-09-08 SE SE7111350A patent/SE392038B/xx unknown
-
1972
- 1972-07-24 IL IL39982A patent/IL39982A/xx unknown
- 1972-07-26 FI FI722094A patent/FI50583C/fi active
- 1972-08-07 BE BE787284A patent/BE787284A/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-08-08 SU SU1818160A patent/SU447876A3/ru active
- 1972-08-23 JP JP8439172A patent/JPS5545528B2/ja not_active Expired
- 1972-08-28 CS CS7906A patent/CS172957B2/cs unknown
- 1972-08-30 ES ES406199A patent/ES406199A1/es not_active Expired
- 1972-08-31 DK DK430972AA patent/DK131128B/da not_active IP Right Cessation
- 1972-09-01 ZA ZA726024A patent/ZA726024B/xx unknown
- 1972-09-01 NL NL727211953A patent/NL154118B/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-09-06 PL PL1972157623A patent/PL83490B1/pl unknown
- 1972-09-06 IE IE1211/72A patent/IE36670B1/xx unknown
- 1972-09-06 DE DE2243688A patent/DE2243688C3/de not_active Expired
- 1972-09-06 AU AU46373/72A patent/AU461865B2/en not_active Expired
- 1972-09-06 CA CA151,075A patent/CA979805A/en not_active Expired
- 1972-09-06 US US00286732A patent/US3842061A/en not_active Expired - Lifetime
- 1972-09-07 GB GB4158872A patent/GB1356229A/en not_active Expired
- 1972-09-07 AT AT768872A patent/AT324549B/de not_active IP Right Cessation
- 1972-09-07 NO NO3184/72A patent/NO135302C/no unknown
- 1972-09-08 CH CH1324072A patent/CH577829A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-09-08 FR FR7231896A patent/FR2154483B1/fr not_active Expired
- 1972-09-08 HU HUKA1355A patent/HU165070B/hu unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU447876A1 (ru) | Способ выделени антитромбина | |
| US3842061A (en) | Method for isolation of antithrombin from animal tissue materials by adsorption on sulfated carbohydrate gel | |
| Hook et al. | Anticoagulant activity of heparin: separation of high-activity and low-activity heparin species by affinity chromatography on immobilized antithrombin | |
| US3920625A (en) | Isolation of coagulation factors from biological material using cross linked sulfated, sulfonated carbohydrates | |
| US4364861A (en) | Blood-coagulation-promoting products and methods of preparing them | |
| US4314994A (en) | Process for obtaining a plasminogen activator | |
| US4147765A (en) | Preparation of antiserum for quantitative determination of X and Y degradation products of fibrin and fibrinogen | |
| US4446126A (en) | Antithrombin-heparin complex and method for its production | |
| US3639559A (en) | Method of isolating antigens and/or antibodies from protein mixtur | |
| WO1999056126A2 (de) | Immunadsorptionsmatrix, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung | |
| US4169764A (en) | Process for production of urokinase | |
| US5055558A (en) | Method for the selective deproteinization of whey | |
| US4376727A (en) | Method of separating globin | |
| US4027012A (en) | Process for the extraction of components having anticoagulant activity "in vivo" from snake venoms and products obtained | |
| FI87044B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett medel med vilket man kan behandla hemofili a, som aer resistent mot faktor viii. | |
| US4960756A (en) | Lectin like protein substance, method of obtaining same and anti-tumor agent comprising same | |
| US3761586A (en) | Hemostatic agent and the process of preparing same | |
| DE2709500C2 (de) | Verfahren zur Reinigung von Heparin | |
| SU1419717A1 (ru) | Способ получени биоспецифических адсорбентов дл выделени фибронектина и коллагеназ | |
| CA1151542A (en) | Process for preparing the third component of the complement from human blood plasma | |
| Andersson et al. | Affinity chromatography of coagulation factors II, VIII, IX and X on matrix-bound phospholipid vesicles | |
| US4010074A (en) | Method for purification and recovery of urokinase | |
| SU1101294A1 (ru) | Способ получени сорбента дл хроматографии | |
| JPH07100718B2 (ja) | アビジンの製造方法 | |
| SU1578137A1 (ru) | Способ получени сорбента дл аффинной хроматографии |