SU1732243A1 - Способ количественного определени фторафура - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к аналитической химии, а именТно к анализу лекарственных препаратов гетероциклического р да - фторафура, и может быть использовано в фармации. Цель изобретени  - повышение чувствительности, точности и специфичности определени . Дл  этого раствор анализируемой пробы обрабатывают резорцином, выпаривают, к остатку добавл ют концентрированную серную кислоту, нагревают , после охлаждени  обрабатывают гидроксидом кали  и измер ют оптическую плотность полученного раствора при 275 нм. Чувствительность 0,5мкг/мл относительна  ошибка 1,5%. 1 табл. 9 IB

Description

Изобретение относитс  к фармацевтической химии, преимущественно к анализу лекарственных веществ гетероциклического р да.

Фторафур-Н -(2-Фуранидил-5-фтор- урацил) - цитостатический препарат, относ щийс  к группе антиметаболитов.

Известны броматометрический метод, микробиологический метод, основанный на способности фторафура подавл ть рост Streptococcus faecal is штамм

543.

Недостатком этих способов  вл етс  неспецифичность и невысока  чувствительность , а при микробиологическом определении - трудоемкость, громоздкость и необходимость в создании специальных условий.

Наиболее- близким по технической сущности к достигаемому результату  вл етс  способ определени  фторафура по поглощению света в УФ-области спектра.

Недостаток способа - невысока  чувствительность и отсутствие специфичности вследствие того, что раствор фторафура бесцветен, а поглощение УФ-света в области 270 нм не отличает его от других веществ, способных поглощадь свет в этой области спектра.

Цель изобретени  - повышение чувствительности , точности и специфичности определени  фторафураs а также его лекарственных форм.

СО

ю ю

4

ОЭ

Поставленна  цель достигаетс  созданием условий дл  полного взаимодействи  минимальных количеств фторафура с резорцином и получение окрашенного соединени , избирательно поглощающего свет в УФ-области спектра .

Сущность способа заключаетс  в том, что под воздействием концентрированной серной кислоты при нагревании происходит разложение фторафура до тетрагидрофурана и 5-фторурацила. Тетрагидрофуран окисл етс  до  нтарного ангидрида, который конденсиру-  сь, с резорцином образует промежуточное соединение. Избыток раствора гидроксида кали  разрушает его, при этом образуетс  вещество желтого цве ta, имеющее хиноидное строение, способное при облучении УФ-светом про вл ть зеленую флуоресценцию.

По сравнению с известными предлагаемый способ позвол ет быстро и надежно определ ть препарат в концентраци х от 0,5 мкг в 1 мл и выше в субстанции, лекарственных формах, а также в извлечени х их внутренних органов и в биологических жидкост х.

Преимущества спектрофотометричес- кого метода количественного определени  фторафура видны из таблицы.

Способ осуществл ют следующим разом.

В термостойкие плоскодонные колбы , вместимостью 50 мл внос т от 0,1 до 2 мл 0,01%-ного водного раствора фторафура, прибавл ют по 0,4 мл 2,5%-ного раствора резорцина и выпаривают смесь на вод ной бане. К сухим остаткам прибавл ют по 0,5 мл концентрированной серной кислоты | марки х.ч. и нагревают колбы на элек-1 троплитке, накрытой асбестовой сеткой при TeMnepajype 130°С в течение

60 с. После охлаждени  в колбы внос т по 20 мл 10%-ного раствор а гидроксида кали  марки х.ч., хорошо перемешивают и определ ют оптическую плотность окрашенных в желтый цвет растворов на спектрофотометре в кювете 10 мм при длине волны 275 нм. Окрашивание полученного раствора

Q устойчиво в-течение 1 сут..

Параллельно с определением исследуемых растворов фторафура провод т определение стандартного раствора препарата, с которым проделывают те

5 же манипул ции. Раствором сравнени  служат реактивы, используемые при определении препарата, в тех же количествах и подвергшиес  такой же обработке , что и исследуемое вещество.

0 Оптическа  плотность окрашенных растворов подчин етс  закону Бугера- Ламберта-Бера в пределах концентраций 0,5-ЮО мкг в 1 мл.

Расчет концентраций провод т по

5 формуле

„ По Сет б В Г х .,„.

ист а

где DO - оптическа  плотность раст- 0 вора, полученного при обработке исследуемого препарата;

DCT- оптическа  плотность раствора , полученного при обработке стандартного раствора препарата;

Сст- концентраци  стандартного раствора препарата;

а - количество исследуемого препарата , г, или объем раствора , мл;

б - разведение исследуемого препарата; ,

в - объем стандартного раство- ра фторафура, мл;

г - количество препарата, содержащегос  в анализируемой лекарственной форме.

5

0

5

Примечание: дл  приготовлени  стандартного 0,01%-ного раствора фторафу1 ра в мерную колбу вместимостью 1 л внос т навеску 0,1000 г препарата, прибавл ют 2,6 мл 1 -ного раствора

гидроксида кали , перемешивают смесь до растворени  фторафура и довод т водой раствор в колбе до метки, повторив перемешивание раствора. Раствор сохран ют в холодильнике.

51

Дл  определени  фторафура во внутренних органах животных, леченных этим препаратом, часть органов гомогенизируют , берут точные навески, обрабатывают 2-3 мл 95%-ного этанола и оставл ют на 1 ч при перемешивании Суспензию центрифугируют, спиртовое извлечение отдел ют, а осадок вновь обрабатывают этанолом. Процесс извлечени  фторафура и отделение белков повтор ют, объединенные спиртовые извлечени  довод т до определенного объема, отбирают аликвоту и определ ют в ней содержание фторафура.

Пример 1. Определение фторафура в %-ном растворе дл  инъекций,

1 мл раствора из ампулы перенос т в мерную колбу, вместимостью 100 мл, довод т содержимое колбы дистиллированной водой до метки, хорошо перемешивают, отбирают из колбы 1 мл раствора в термостойкую колбу н 50 мл, прибавл ют 0, мл 2,5%-ного раствора резорцина и выпаривают смесь досуха. К остатку прибавл ют 0,5 мл концентрированной серной кислоты и нагревают колбу на электроплитке, накрытой асбестовой сеткой при температуре 130°С в течение 60 с. После охлаждени  в колбу внос т 20 мл 10%-ного раствора гидроксида кали , хорошо перемешивают и измер ют оптическую плотность окрашенного в желтый цвет раствора на спектрофотометре в кювете 10 мм при длине волны 275 нм.

Параллельно провод т определение со стандартным раствором фторафура, дл  чего навеску препарата 0,1000 г внос т в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавл ют 2,6 мл 1%-ного раствора гидроксида кали , довод т дистиллированной водой до метки, тщател

но перемешивают и дл  анализа отбирают 1 мл полученного раствора.

i

Раствором сравнени  служат реактивы , используемые при определении препарата, в количествах, используемых при определении фторафура, подвергшиес  такой же обработке.

Оптическа  плотность окрашенного раствора, полученного при анализе инъекционного раствора фторафура по описанной методике, равна 0,79 оптическа  плотность раствора, полученного при анализе стандартного раствора препарата, равна 0,20.

0

5

0

5

0

5

Концентрацию фторафур-л в растворе дл  инъекций рассчитывают по формуле

х Ох22:0 °1Л:Ш 3 95% х- 0)20-1 js..

П р и м е р 2. Определение фторафура в капсулах по 0, г.

Около 0,25 г (точна  навеска) препарата внос т в мерную колбу вмести- Мостью 250 мл, прибавл ют 5 мл 0,01 н. раствора гидроксида кали , перемешивают в течение 5 мин и дово4- д т дистиллированной водой содержимое колбы до метки. Колбу с раствором энергетично встр хивают и дл  отделени  от стеарата кальци  раствор фильтруют через бумажный фильтр. Первые 30-50 мл фильтрата отбрасывают , отбирают последующие 10 мл, внос т в термостойкую колбу на 50 мл и далее поступают как описано в методике спектрофотометрического определени  препарата,

Одновременно провод т определение с 1 мл 0,01%-ного стандартного раствора фторафура.

Оптическа  плотность раствора полученного из капсул фторафура, равна 0,196, окрашенного раствора из стандартного 0,01%-ного раствора 0,200. Навеска препарата 0, г. Содержание фторафура в капсуле рассчитано по формуле

X ОЛ2б10,ОЬ2§0:0

4 0,200-0,2 92-10°

П р и м е р 3° Определение фторз- 4Q фура в печени животных

Навески гомогенизированной печени массой 2 г обрабатывают 5 мл 95%-ного этанола, оставл ют на 1 ч

при периодическом перемешивании, белки отдел ют центрифугированием при 5000 об/мин в течение 10 мин, спиртовые извлечени  отдел ют, а осадки вновь обрабатывают 5 мл этанола , и эта процедура повтор етс  рновь Слитые вместе спиртовые извлечени  внос т в термостойкие колбы на 50 мл и провод т определение фторафура спектрофотометрическим методом nov приведенной методике. С целью снижени  ошибки из-за экстрактивных веществ из печени параллельно провод т те же операции с 2 г печени животных, которым фторафур не ввод т. Величи

ны оптическойk плотности растворов, полученных из спиртовых извлечений печени, не содержавшей фторафура, вычитаютс  из оптической плотности, полученной в результате определени  печени, содержавшей фторафур.

Проведено определение фторафура с 1 мл 0,01%-ного стандартного раствора фторафура. Оптическа  плотность раствора, полученного в результате анализа гомогената печени с фторафу- ром, за вычетом значени  оптической плотности из гомогената, не содержавшего фторафура, равна 0,06; 0,06; и 0,,05. Оптическа  плотность раствора, полученного при анализе 0,01%-ного стандартного раствора фторафура равна 0,20. Содержание фторафура в печени рассчитывают по формуле

W г

(1,25 мг).

8

Предлагаема  методика высокочувствительна , специфична, занимает несколько минут, относительна  ошибка составл ет ±1,5%.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ количественного определе- ни  фторафура, включающий измерение оптической плотности раствора, о т- личающийс  тем, что, с целью повышени  чувствительности, точности и специфичности определени , анализируемую пробу обрабатывают резорцином , выпаривают, к остатку прибавл ют концентрированную серную кислоту , нагревают, после охлаждени  добавл ют раствор гидроксида кали  и измер ют оптическую плотность полученного раствора.