SU1719974A1 - Способ определени тиопентала натри в крови - Google Patents
Способ определени тиопентала натри в крови Download PDFInfo
- Publication number
- SU1719974A1 SU1719974A1 SU894775734A SU4775734A SU1719974A1 SU 1719974 A1 SU1719974 A1 SU 1719974A1 SU 894775734 A SU894775734 A SU 894775734A SU 4775734 A SU4775734 A SU 4775734A SU 1719974 A1 SU1719974 A1 SU 1719974A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- sample
- optical density
- note
- blood
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицине и может быть использовано дл определени тиопентала натри в крови. Цель изобретени - повышение чувствительности способа - достигаетс за счет использовани йодо-азидной смеси в качестве реагента на тиопентал натри . 8 табл.
Description
Изобретение относитс к медицине, а именно к биохимическим методам исследований , и может быть использовано дл количественного определени тио- пентала натри (Т.Н) в биологическом материале.
Цель изобретени - повышение чувствительности способа.
Сущность метода заключаетс в том, что к йодо-азидному реактиву добавл ют пробу с ТН и измер ют падение экстинкции (ДД) через 1 мин на фотоэлектррколориметре ( А 340 нм).
#одо-азидна реакци чувствительна уже к 1 нг тиопентала. Линейна зависимость изменени (дД) от количества ТН в пробе находитс в пределах 5 - 100 нг.
В табл. 1 приведена зависимость изменени оптической плотности (ДД) от количества ТН (средние величины из трех измерений).
Воспроизводимость результатов определени ТН оценивают по результатам восьми опытов (табл. 2)
В табл. 2 показана воспроизводимость результатов определени тиопен тала натри (в пробах содер;китс по 10 нг вещества).
Специфичность способа определени ТН проверена на лекарственных препаратах , применение которых у больных совместно с ТН наиболее веро тно (табл. 3).
В табл. 3 показана специфичность метода определени ТН.
Пр мое определение ТН в плазме крови невозможно, так как плазма содержит вещества, способные давать йодо-азидную реакцию (табл. 4), по- этому необходимо предварительное извлечение ТН из плазмы крови.
В табл. 4 показано изменение оптической плотности после прибавлени плазмы крови, не содержащей ТН.
Способ экстракции ТН заключаетс в извлечении его хлороформом из кислой среды. К 0,5 мл плазмы крови, содержащей ТН, добавл ют 0,1 мл 0,1 М раствора сол ной кислоты и встр хивают с 8 мл хлороформа в течение
- Ф
Л
со со 1
4
5 мин. После центрифугировани при 3000 об/мин в течение 30 мин отбирают 2 мл хлороформного экстракта и выпаривают на вод ной бане при АО- 60°С досуха. В пробирку к сухому экстракту добавл ют 2 мл воды, размешивают и отбирают 0,02 мл дл определени ТН.
В табл. 5 показана характеристика способа экстракции ТН.
Таким образом, предлагаемый способ экстракции обеспечивает практически полное извлечение ТН, добавленного к плазме крови.
Дл проверки специфичности способа экстракции, провод т экстракцию хлороформом из плазмы крови, не содержащей ТН (табл. 6).
В табл. 6 показано определение специфичности экстракции ТН.
Из данных таблицы видно, что хлороформный экстракт такой плазмы не содержит соединений, способных давать йодо-азидную реакцию.
Определение ТН в крови больных во врем наркоза по данному методу показало , что через 15 мин после внутри- венного введени 600 мг препарата в крови обнаружено 12 мкг/мл ТН, что близко к концентраци м ТН в крови больных, определенных другими методами .
В табл. 7 приведены результаты определени концентрации ТН в крови больных.
В табл. 8 приведено сравнение флуориметрического и предлагаемого способов определени тиопентала.
I
П р им е р. Реактивы: хлороформ (очищен перегонкой), йодо-азидный . реактив,содержащий 0,6 М раствор азида натри , 0,0025 М раствор йода и О 1 М раствор сол ной кислоты (все реактивы приготовлены на бидистшши- рованной воде).
5
0
5
0
0
5
Ход определени .
К пробе плазмы крови прибавл ют 0,1 М раствор сол ной кислоты и хлороформ (соотношение 0,5:0,1:0,0). Пробу интенсивно встр хивают в колбе с притертой пробкой в течение 5 мин, а затем содержимое центрифугируют 30 мин при 3000 об/мин. Сухой пипеткой отбирают аликвоту хлороформного экстракта и на вод ной бане выпаривают досуха при 40 - 60°С. К сухому экстракту добавл ют 2 мл бидистиллированной воды, встр хивают и отбирают 0,02 мл дл анализа. В кювету помещают йодо-азидный реактив в составе, мл: 0,6 М раствор азида натри 0,15 0,1 М раствор сол ной кислоты 0,1; 0,0025 М раствор йода 0,15.
Измерение экстинкции йодо-азидной смеси провод т при 340 нм в кювете объемом 0,5 мл и длиной светового пути 10 мм. После этого к йодо-азидной смеси в кювете добавл ют 0,02 мл пробы и через 60 с провод т повторное измерение экстинкции и рассчитывают изменение оптической плотности.
При определении тиопентала в пробах плазмы, содержащих нанограммовые количества препарата, соответственно уменьшают количество воды, прибавл емой к сухому экстракту.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ определени тиопентала натри в крови путем экстракции препарата , обработки реактивом с последующим измерением оптической плотности смеси , отличающийс тем, что, с целью повышени чувствительности способа, экстракт суспендируют в воде, водную суспензию обрабатывают йодо-азидной смесью при их соотношении 1:25 с последующим измерением величины оптической плотности через 1 мин при 340 нм. i Таблица 1О (холостойопыт) 0,0405 0,1220,082Примечание. Проба содержит 0,15 мл 0,6 М раствора азида натри , 0,1 мл 0,1 М раствора сол ной кислоты и 0,15 мл 0,0025 М раствора йода. К пробе прибавл ют раствор ТН объемом 0,02 мл (в холостом опыте 0,02 мл воды ) . Фртометрирование провод т в кювете с длиной светового пути, см, при Х 340 нм.Т а б л и ц а 2 I Статистические параметрыCi iO,0275 - среднее квадратичное отклонение отдельных результатовX 0,156 - среднее арифметическоеS 0,00972 - средн квадратична ошибкаV 3,26% - коэффициент вариацииПродолжение табл. 1Таблица 317199748Продолжение табл.3 ,Примечание. Количество препаратов в 20 раз превышает количество ТН, вызывающее полное обесцвечивание йодо-азидной смеси.Объем плазмы, прибавленной к йодо-азйдной смеси0,02 0,02 0,021,05,050,0Примечание. Раствор плазмы, содержащей ТН, готов т следующим образом. К 0,25 мл плазмы крови добавл ют 0,25 мл раствора с известным содержанием ТН и провод т экстракцию по описанной схеме. Стандартный раствор сравнени готов т следующим образом. К 0,25 мл воды добавл ют 0,25 мл раствора ТН той же концентрации и развод т в 100, 500 и 5000 раз.Таблица 4Изменение оптической плотности д1,201 1,152 1,176Таблица 5О101719974ТаблицабКоличество плазмы .крови, мл -.,:. Д Д КОНТР°АЯQj01,00,01,00,0.д,.пп -т-.IТаблица 7Проба, вз та „ I Iна анализ, мл Д |С мкг | К С мкг0,5 0,537 0,542 0,15 80-0,15-12 0,5 0,541 0,5 0,548Примечание. С- концентраци ТН по графику, К - коэффициент разведени .Т а б ли ц а 8Количество тио- Флуоримет-т Предла- пентала в пробе, рический гаемый нгспособ,Ф„-ФК способ,5,0-0,08210,00,0400,136100,00,3980,403Точность определени при р - 0,95, п 8 4,02% 3,36%Примечание. Ф,п - флуоресценци пробы; Фк - флуоресценци контрол ; Д„ - оптическа плотность пробы; Дк - оптическа плотность контрол .Составитель С.Рыбалкин Редактор М.Петрова Техред М.ДидыкКорректор Л.ПилипенкоЗаказ 768ТиражПодписноеВНИИПИ Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5Производственно-издательский комбинат, Патент, г.Ужгород, ул. Гагарина,101
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU894775734A SU1719974A1 (ru) | 1989-11-20 | 1989-11-20 | Способ определени тиопентала натри в крови |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU894775734A SU1719974A1 (ru) | 1989-11-20 | 1989-11-20 | Способ определени тиопентала натри в крови |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1719974A1 true SU1719974A1 (ru) | 1992-03-15 |
Family
ID=21488103
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU894775734A SU1719974A1 (ru) | 1989-11-20 | 1989-11-20 | Способ определени тиопентала натри в крови |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1719974A1 (ru) |
-
1989
- 1989-11-20 SU SU894775734A patent/SU1719974A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Anal, letters, 1971, 4(2), 61. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Corn et al. | Rapid fluorometric assay for plasma warfarin | |
Griffiths et al. | Fluorimetric determination of plasma catecholamines: normal human epinephrine and norepinephrine levels | |
CA1087966A (en) | Process and a metachromatic composition for effecting a count of leucocytes, and more particularly of basophiles | |
SU1719974A1 (ru) | Способ определени тиопентала натри в крови | |
Olesen | Determination of phenobarbital and phenytoin in serum by ultraviolet spectrophotometry | |
SU1367838A3 (ru) | Способ определени антистрептолизин- @ -овых антител в крови (его варианты) | |
US3457045A (en) | Quantitative determination of serum calcium | |
Rochaeny et al. | Development and validation of an ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry method with liquid-liquid extraction for the quantification of sitagliptin in human plasma using nebivolol as internal standard | |
SU1529086A1 (ru) | Способ количественного определени новокаина | |
DeWolf et al. | Determination of phenprocoumon, an anticoagulant, in human plasma. | |
SU1727059A1 (ru) | Способ определени фторидов | |
SU1642379A1 (ru) | Способ качественного определени мерказолила | |
SU1767436A1 (ru) | Способ определени глюкозы в крови | |
SU1617341A1 (ru) | Способ количественного определени 3,6-диметил-1,2,3,4,4 @ ,9 @ -гексагидро- @ -карболина гидрохлорида | |
SU1578603A1 (ru) | Способ количественного определени бензилпенициллина в пробе | |
SU1760438A1 (ru) | Способ количественного определени новокаинамида | |
SU1163221A1 (ru) | Способ количественного определени новокаина | |
SU1465761A1 (ru) | Способ определени воды в диоксане | |
SU1188604A1 (ru) | Способ количественного определени ниаламида | |
SU1668924A1 (ru) | Способ количественного определени п-аминосалициловой кислоты | |
SU1337739A1 (ru) | Способ определени амитриптилина в лекарственных препаратах | |
SU1483342A1 (ru) | Способ определени ацефена | |
RU2070720C1 (ru) | Способ количественного определения церукала | |
RU2157532C1 (ru) | Способ определения перекисного окисления липидов крови | |
SU1213400A1 (ru) | Способ определени эрпенала |