SU1689853A1

SU1689853A1 - Способ определени клофелина

Info

Publication number: SU1689853A1
Application number: SU894669820A
Authority: SU
Inventors: Махбуба Наби Кызы Велиева; Мустафа Омар Оглы Велиев; Рашид Наби Оглы Мамедов
Original assignee: Азербайджанский Государственный Медицинский Институт Им.Н.Нариманова
Priority date: 1989-04-10
Filing date: 1989-04-10
Publication date: 1991-11-07

Abstract

Изобретение относитс к медицине, точнее к биохимии, может быть применено при судебно-экспертных исследовани х. Цель - возможность осуществлени способа при определении клофелина в биологической ткани. Пробу обрабатывают этанолом, в качестве окрашивающего индикатора используют раствор трироданоко- бальтат аммони , а перед фотометрией провод т реэкстрагирование хлороформом или ацетоном. 3 табл.

Description

Изобретение относитс к медицине, в частности к биохимии, и может быть применено при судебно-экспертных исследовани х .

Цель изобретени - возможность осуществлени способа при определении клофелина в биологической ткани.

Способ осуществл ют следующим образом .

К 100 г измельченного биологического материала прибавл ют 0,6 мг клофелина. перемешивают и через 24 ч извлекают кло- фелин троекратным настаиванием 70%-ным этанолом по 100 мл. Этанольные извлечени объедин ют, фильтруют, добавл ют 2 мл 0,5 М раствора триродано-кобальтата аммони , реэкстрагируют продукт реакции 10 мл хлороформа или 10 мл ацетона и провод т фотоэлектроколориметрические определени .

Расчет содержани клофелина определ ют по формуле

Dx а 100

Х%

Do b

где Dx - оптическа плотность исследуемого раствора;

Do - оптическа плотность стандартного раствора;

а - содержание клофелигна, мг, в стандартном растворе;

b - навеска клофелина, мг, в исследуемом растворе.

П р и м е р 1. Эксперименты in vitro.

Использовались различные органы подопытных животных (печень, почки, желудок, кишечник). Во врем экспериментов примен ют известный способ добавок, т.е. берут тщательно измельченные органы в количестве по ЮОг, прибавл ют 4 измельченных таблеток клофелина по 0,00015 (т.е. доза 0,6 мг клофелина), перемешивают и оставл ют при комнатной температуре (20°С) в течение 1 сут. Затем клофелин извлекают троекратным настаиванием 70%-ным этанолом по 100 мл. Обьединив этанольные извлечени , их центрифугируют, фильтруют и упаривают до сухого остатка, прибавл ют 10 мл 96%-ного этанола и 2,0 мл 0,5 М ;

СО

С

о

00

ю

00

ел со

раствора триродано-кобальтата аммони (при наличии клофелина образуетс изумрудно-синего цвета комплексное соединение , которое хорошо экстрагируетс хлороформом или ацетоном). Окрашенные хлороформные или ацетоновые фракции подвергают фотоэлектроколориметрирова- нию.

Измер ют оптическую плотность при длине волны около 570 нм в кювете толщи- ной 3 мм. В качестве раствора сравнени используют 0,5%-ный стандартный раствор клофелина (т.е. точную навеску 0,5000 г клофелина (ФС-42-1776-83), раствор ют в воде в мерной колбе с емкостью 100 мл. В 1 мл стандартного раствора содержитс 0,005 г клофелина, Раствор устойчив в течение 1 мес при хранении скл нок с притертой пробкой в защищенном от света месте. Результаты определени клофелина в пече|4и приведены в табл.1.

Описанный способ позвол ет определить в среднем 60,25+0,22% клофелина при содержании 10 мг в 100 г печени.

П р и м е р 2. Использу вышеописанный способ выделени клофелина из биоматериала , провели р д экспериментов с различными объектами биологического происхождени , в частности желудок и кишечник с содержимыми, почки, а при извле- чении из кррви и мочи использовались иным способом (т.е. из них непосредственно выдел ли клофелин (СМ5)з.

. Результаты проведенных исследований приведены в табл.2.

П р и м е р 3. Эксперименты в опытах in vivo.

Берут подопытных животных (кролики весом в 2,5-3 кг породы Шиншилла), которым парэнтерально ввод т клофелин в различных дозировках, мг; 0,6; 2; 5.5; 10. После затравки животных определ ют клофелин в различных биообъектах (параллельно провод т контрольные опыты).

Результаты опытов приведены в габп.З,

Применение способа в медицинской практике позволит определ ть содержание клофелина в различных объектах биологического происхождени как in vitro, так и in vivo и облегчит обеспечить возможность применени способа при проведении судебно- медицинских экспертиз

Claims

Формула изобретени Способ определени клофелина путем взаимодействи пробы с окрашивающим индикатором с последующей фотометрией продукта, отличают, мйх тем, что, с целью возможности осуществлени способа при определении клофелинэ в биологической ткани, пробу обрабатывают этанолом, в качестве окрашивающего индикатора используют раствор трироданокобальтата аммони , а перед фотометрией провод т реэкстрагирование хлороформом или ацетоном .

Т a G п м ц s 1

.%

582 61,2 60,3 55,8 70,5

Та б л и ца 3