SU1076833A1 - Способ определени триамтерена и его метаболитов в крови - Google Patents

Abstract

..СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИАМТЕFEHA И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В КРОВИ путем флюориметрии, отличающий с   тем, что, с целью повышени  чувствительности способа, в крови осаждают белки и из полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлажденным до (-10),- (-12) °С, (О Од 00 QO оо

Description

Изобретение относитс  к фармакокинетике лекарственных веществ и касаетс  способов определени  лекарственных вацеств в крови с целью увеличени  эффективности примен емых средств и уменьшени  их побочного действи .

Известен способ раздельного определени  триамтерена и его метаболитов в крови методом жидкостной хроматографии высокого разрешени  IJ.

Известна флюориметрическа  методика определени  триамтерена в биологическом материале f23.

Известен также способ, предусматривающий определение триамтерена в биологических жидкост х с помощью флюоресцентного метода СЗ J.

Недостаткам известного способа  вл етс  его мала  чувствительность не позвол кща  определ ть триамтерен в крови человека в динамике после приема терапевтических доз.

Цель изобретени  - повышение чувствительности способа, обеспечение многократного определени  трнамтерена в крови человека в динамике после приема терапевтических доз препарата.

Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу определени  триамтерена и его метаболитов в крови путем флюориметрии, в крови осаждают белки и из полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлаледенным до (-10) - (-12)С.

Способ осуществл ют следующим образом.

Из пальца больного берут микропипеткой Ofl мл крови. Пипетку промыаают только дистиллированной водой, так как растворы гепарина или цитрата вли ют на резулбтаты анализа. Кровь перенос т в пробирку диаметром 7 мм и длиной 50-60 мм, в которую предварительно отмерено 0,7 мкл охлажденного в морозильной камере холодильника до (-10) - (-12)с ацетона (ч .) . Содержимое пробирки перемещают 5 мин г при этом происходит осаждение белков плазмы и форменных элементов крови, которые не дают возможности провести анализ триамтерена в крови. Одновременно происходит экстракци  триамтерена из жидкой части крови и ее форменных элементов в ацетон, так как растворимость триамтерена в ацетоне весьма высока . Наилучша  экстракци  (более 90%) получена в ацетоне, другие жидкости (Н-бутанол, гептан, этилацетат, хлороформ, эфир, трихлоруксусна  кислота ) дают более низкие величины экстракции триамтерена. Дл  обеспечени  наименьшего исходного фона флюоресценции экстракцию триамтерена из проб крови производ т в охлажденном aieTOHe. Дл  лучшего осаждени  белков смесь став т в морозильную камеру холодильника, в которую заранее помещают ванну, наполненную 5 спиртом и создающую охлаждение до (-10) -(-12)С. Охлаждение пробирок с пробами крови производ т 30 мин. На всех этапах пробирки, содержащие ацетон, закрывают полиэтиленовыми

10 пробками дл  предотвращени  испарени  ацетона. После 30-минутного охлаждени  пробирки Центрифугируют при 3000 об/мин 5 мин, надосадочную жидкость сливают в другие пробирки

5 и флюориметрируют.

Флюориметрирование производ т на флюориметре или спектрофлюориметре, приспособленньЕми к работе с объемом жидкости 0,5 мл. Дл  этого использу0 ют кюветы, изготовленные из кварцевых трубок с внутренним диаметром Э мм или другие кюветы подход щего объема. При наличии высокочувствительного флюориметра типа Хитачи

5 возможно измерение флюорисценции в кюветах несколько большего объема. с соответствукщим увеличением объема ацетона, вз того дл  экстрагировани . Длина волны возбуждени  флюод ресценуии 360 нм, длина волны регистрируемой флюоресценции 458 нм. При работе с флюориметром возбуждение производитс  светом ртутной лампы при первичном светофильтре

,1- Уфе-б, при вторичном - ЖС-3 и синем светофильтре.

Пример. Больной Ф., 52 года) диагноз: гипертоническа  болезнь 11 стадии с преимущественным пораже0 нием сосудов головного мозга. Дл  лечени  заболевани  был назначен триампур в дозе: 2 таблетки 3 раза в день. Кажда  таблетка триампура содержала 25 мг триамтерена и 13,5 г

5 гипотиазида.

В первый час после приема триампура концентраци  в крови триамтерена нарастала, в 10.00 концентраци  триамтерена в крови оказываетс 

0 максимальной - 13, г/мл,

в течение последующих 4 ч концентрации в крови прогрессивно падает. Параллельно изменению концентрации триамтерена измен етс  и выделение.

триамтерена с мочой. Таким образом, наиболее существенный подъем концентрации триамтерена в моче и крови наблюдалс  5ч.

Больному Ф. в последующие дни триампур давалс  3 раза в день по

2 таблетки. Больной получал по

50 мг триамтерена и 25 мг гипотиазида в 8,00, 13.00 и 18.00 ч. Концентраци  триамтерена в крови в первые два дн  не определ лась, в течение

5 третьего, четвертого., п того дней

была равна 0,032-10 г/мп, в течение п того и шестого дн  она была равна нулю. Эти данные согласуютс  с результатами определени  препара-п . та в крови после однократного приела . Трехкратный прием триампура в течение дн  не может создать высокую посто нную концентрацию в крови в течение.суток, так как препарат обладает большой скоростью выделени . При этом достаточно высока  концентраци  в крови не создаетс  и днурез не возникает.

Предлагаемый способ достаточно прост, не требует дорогосто щей апгвратуры , удобен, так как позвол ет проводить многократные анализы крови у одного и того же больного в течение суток.

Способ может быть применен в услови х клиники и использован в поликлинических услови х дл  контрол  эффективности лечени  триамтереном и

препаратами, содержащими триамтерен .

Claims (1)

1. ..СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИАМТЕГЕНА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ В КРОВИ путем флюориметрии, отличающий с я тем, что, с целью повышения чувствительности способа, в крови осаждают белки и из полученной надосадочной жидкости экстрагируют целевой продукт ацетоном, охлажденным до (-10). - (-12) °C.

   м

   05 Ό0