SU1487642A1 - Способ определени рубомицина - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , а именно к способам определени  рубомицина в лекарственных формах и биологических жидкост х. Цель - повышение избирательности, чувствительности и экспрессности. К анализируемому раствору в диметилформамиде прибавл ют ацетат магни  в диметип формамиде. Измер ют интенсивность флуоресценции раствора в ультрафиолетовой области. Спектр возбуждени  флуоресценции лежит от 460 до 580 нм с максимумом 562 нм, спектр измерени  флуоресценции лежит от 570 до 660 нм с максимумом 616 нм. 4 табл.

Description

Изобретение относитс  к аиалити- , ческой химии, а именно к способам определени  лекарственного препарата рубомицина и может быть применено дл  анализа этого соединени  в различном биологическом материале, необходимом дл  клинических исследований дп  соединени  рациональной схемы лечени  индивидуального больного.

Цель изобретени  - повьппение чувствительности , избирательности и экс- прессности анализа биологических объектов с концентрацией рубомицина 0,01-30 мкг/мл.

Способ осуществл ют следующим образом .

Анализируемую пробу раствор ют в диметилформамиде, к 1 мл полученного раствора добавл ют 8 мл диметилформа- мида, 1 мл 1%-ного раствора ацетата магни  в диметилформамиде, перемешивают , а затем измер ют интенсивность флуоресценции полученного при этом 5 раствора, спектр возбуждени  флуоресценции которого лежит от 440 до 580 нм с максимумом 562 нм, а спектр излучени  флуоресценции от 570 до 660 нм с максимумом 616 нм.

Пр молинейна  зависимость между интенсивностью флуоресценции и кон- концентрацией рубомицина лежит от 0,01 до 30 мкг/мл (табл. 1).

Зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации.ацетата магни  в диметилформамиде приведена в табл, 2, Чувствительность способа 0,05 мкг/мл.

Пример 1. Качественное определение рубомицина.

К 0,1-1 мг препарата прибавл ют 5 мл диметилформамида, 1-2 капли 1%-ного раствора ацетата магни  в ди4;

00

Од

1 го

етш1формамиде, встр хивают и в ультафиолетовом свете со светофильтром ФС-3 наблюдают оранжевую флуоресценцию . Подобную флуоресценцию не , ают оливомицин, карминомицин, адриа- ицин, брунеомицин, дактиномицин, блеомицин (противоопухолевые антибиотики )

Пример 2, Количественное оп- ю ределение рубомицина в ампулах по 0,02 г. То.чную навеску (0,02 г) препарата помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, прибавл ют 70-80 мл диметилформамида, встр хивают до ра- fS створени  и добавл ют диметилформамид до метки. К 0,5 мл данного раствора, прибавл ют 8,5 мп диметилформамида, 1 мл 1%-ного раствора ацетата магни , перемешивают и флуориметрируют отно- 20 сительно стандартного раствора рубомицина . Дл  чего к 1 мл стандартного pac i Bopa рубомицина с содержанием 100 мкг/мл прибавл ют 8 мл диметил- форманида, 1 мл 1%-ного раствора 25 ацетата магни  в диметилформамиде, перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами,

Результаты количественного определени  рубомицина в лекарственной фор-зО ме представлены в табл. 3,

Пример 3, Количественное определение рубомицина в крови,

К 1-3 мл сыворотки крови прибав- л ют 2 МП дистиллированной воды, 2 мл буферного раствора с рН 8,4, 10 мл раствора хлороформа и метилового спирта (9:1), и встр хивают 2-3 минв Затем центрифугируют 2-3 мин при 40 3000 об/мин. Хлороформный слой перенос т в вьшарительнуто чашку и выпаривают на вод ной бане досуха, К сухому остатку прибавл ют 9 мл диметилформамида , 1 мл 1%-ного раствора ацетата 45 магни  в диметилформамиде, перенос т в кюветку и флуориметрируют относительно стандартного раствора рубомицина . Дл  чего в р д внос т по 0,1, 0,5, 1 мл раствора рубо- CQ мицина с содержанием Ю мкг/мл, прибавл ют соответственно 8,9, 8,5, 8 мл динетилформамида, по 1 мп 1%- ного раствора ацетата магни  в диметилформамиде , перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами. Результаты определени  рубомицина в крови приведены в табл. 4.

Предлагаемый способ определени  рубомицина в 5 раз чувствительнее известного, а высока  избирательна  способность этого способа позвол ет использовать его в фармацевтических и контрольно-аналитических лаборатори х ЦЗЛ дл  качественного и количественного анализа в лекарственных формах, в воздухе рабочей зоны про- мьинпенных предпри тий и при биофармацевтических и фарнатокинетических исследовани х при разработке опти- мап1ьных лекарственных форм, дозы и ритма назначени  дл  оптимизации и ускорени  лечени  больных.

Подобной реакции не дают и не метают определению близкие по структуре соединени  (оливомицин, карминомицин , адриамицин, брунеомицин, дактиномицин, блеомицин), а также одновременно назначаемые (аскорбинова , глютаминова , никотинова , фо- лиева , дегидрохолиева  кислоты; аминазин , анальгин, фенобарбитал, кор- диа1 1ин, димедрол, промедол, морфин, тиофосфамид, бензотеф, сарколизин, метотрексат, допан, новэмбихин, эм- бихин, циклофосфан, фосфамид, цитем- бена, дибунол, меркаптопурин, фтору- рацил, фторафур).

Предлагаемый способ более экспрес сен ПО сравнению с известным способом . На его осуществление требуетс  в А раза меньше времени, чем известным способом,, так анализ предлагаемы способом осуществл етс  за 20 мин, в то врем  как известным за 1,5 ч.

При анализе используютс  широкораспространенные реактивы, такие как ацетат магни , диметилформамид, хлороформ , что определ ет экономическую целесообразность предложенного способа в практике аналитических и биохимических лабораторий при оценке эффективности и безопасности его назначени  при лечении различных опухолей.

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  рубомицина, включающий растворение анализируемой пробы, возбуждение и измерение интенсивности его флуоресценции, по величине которой проводитс  определение, отличающийс  тем, что, с целью повышени  чувствительности, избир1ательности и экспрессности аналнза биологических объектов с концентрацией рубомицина 0,01-30 мкг/мл в присутствии противоопухолевых антибиотиков , анапиэ1фуемую пробу раствор ют в диметилформамиде, обрабатывают 1-2%-ным раствором ацетата маг- нн , облучают,при длине волны возбуж- даюиего света 562 нм и регистрируют интенсивность флуоресценции при длине волны 616 нм.

   Т а б л и ц а 1

   Таблица 3

   ,05 ,56 0,45 10,40 Относительна  ошибка a-tO,40Z

   14876Д2

   .Та блица

   Найдено, мкг/мл

   11.07.87 I 18.08.

   10 20 30

   6.3 2,6

   87

   7.4 2,9 0,7