SU1568708A1

SU1568708A1 - Способ определени доксорубомицина

Info

Publication number: SU1568708A1
Application number: SU884619428A
Authority: SU
Inventors: А.А. Хабаров
Original assignee: Курский Государственный Медицинский Институт
Priority date: 1988-10-24
Filing date: 1988-10-24
Publication date: 1992-08-07

Abstract

Изобретение относитс к медицине, а именно к способам определени доксорубоющина и мо ет быть применено дл качественного и количественного определе1П1 этого соединени в лекарственных препаратах. С целью снижени предела обнаружени и упрощени анализа щюбы анализируемого Bt'DvecTiia растпор ют этаноле, прибавл ют ацетата магни , измер ют интенсивность флюоресценции при длине возбуждающего света 544 им и длине волны излучаемого света 598 нм. 1 табл.с ^

Description

Изобретение относитс к медицине, а именно к споспГьчм определени доксорубомицина , и может быть применено дл качественного и количественного определени этого соединени в лекарственных препаратах, в биологических жидкост х при изл5ченйи оптимальных доз и ритма их назначени индивидуальным больным, при токсикохимических , биофармацевтических исследовани х , а также в воздухе рабочей зоны промышленных предпри тий.

Целью изобретени вл етс снижение предела обнаружени доксорубомици ;а т почдухо рабочей -юны tipoMiniiiленных предпри тий и упрощение анализа в присутствии близких по структуре соединений.

Анализируемую пробу раствор ют в птаиоле. К 1 мл полученного рагтворл прибавл ют 8 мл этанола, 1 мл l/.-Hor раствора ацетата магни в этаноле перемешивают, а затем измер ют интенсивность флюоресценции полученного при этом раствора, спектр возбу здени флюоресценции которого от 440 нм до 560 нм с максимумом 544 нм, а спектр излучени флюоресценции от 560 до 650 нм с максимумом 596 нм.

Claims

Пр молинейна зависимость между интенсивностью флюоресценции и концентрацией доксорубомицина от 0,01 до 2) мкг/мл. Зп ис-11М(1СТ1. НИТРНСППШХ-.ТИ флюоресценции комплекса от концентрации ацетата магни приведена в таблице. К 0,1 мкг препарата прибавл ют 4 мл этанола, 1 мл 1%-ного раствора ацетата магни в этаноле, перемешива ют и и ультрафиолетовом свете ( 365 им) наблюдают оранжевую флюоресцен1у1ю . Пример
2. Количественное опредгление доксорубомицина в ампула по 0,01 г и О,О5-г лактозы. Томпую н веску (0,06 г) препарата помещают в мерную колбу емкостью 100 ми, приблил ют 70-80 мл отанола встр хивают до растворени и добавл ют этанол до метки. К 1 мл данног раствора прибавл ют 8 мл этанола, 1 мл 1%-ного раствора ацетата магни в этаноле, перемешивают и фпюоримет рируют относительно стандартного растимра доксорубомидина. Дл чего к 1 мл стандартного рас вора доксорубомицина с содержанием 100 мкг/мп в этаноле прибавл ют 8 мл этанола, 1 МП 1%-ного раствора ацетата магни и этлколе, псрсмсшинают и флюор1тмет рируют одновременно с испытуемыми растворами. Пример
3. Количественное определение доксорубомицина в сыво ротке крови.К 1-2 мл сыворотки крови прибавл ют 2 мгт дистиллирораниой воды, 3 мл фос(Ьлтного буферного раствора с рН В,2, 10 мл хлороформа и метанола (4 : 1) и встр хивают 3 мин. Затем 11;е)1Т1И1фу1ируют 2-3 мин при 3000 об/м )( лорги11прм11ый г.пой перенос т л ти.ша- рите.пьпую чашку и иыпаривают на вод ной бане досуха. К сухому остатку прибавл ют 9 мл этанола, 1 мл 1%-но го раствора ацетата магни в этаноле , п:peмerш вaют и флгоориметрируют относительно стандартных растворов доксорубомицина. Дл этого в р д пробирок внос т по 0,1; 0,5 и 1 мл с .тандартного раствора доксорубомида на с содержанием 5 мкг/мп, прибавл соответственно 8,9; 8,5 и 8 мл этан ла, по 1 МП 1%-ного раствора ацетат nartiHM н этаноле, перемешивают и сапюориметрируют одновременно с испы туемыми растворами. Способ определени доксорубомицииа характеризуетс низким предело обнаружени , а высока избиратель )a способность этого способа поэво л ет испол1 э 5 ать его в фармадевтичественного анализа в лекарственных формах, в воздухе рабочей зоны промытпенных предпри тий и при биофармацевтических и фармакокинетических исследовани х при разработке оптимальных лекарственных форм, дозы и ритма ее назначени дл оптимизации и ускорени лечени больных. Подобной реакции не дают и не мешают определению близкие по структуре соединени (оливомипин, брунеомицин, б;геомии ш, дактипомиции) , а также одновременно .назначаемые (аскорбинова , глютаминсва , никотинова , фолиева , Фолинова , дегидрофолиева кислоты, анальгин, промедол, морфин, аминезин, фенобарбитал, метотрексат, изопан, ноэмбихин, эмбихин, цикло( фосфан, тиофосфамид, дибунол, меркаптопу ин , фторафур, фторурацил), Способ более прост и экспрессен по сравнению с известным способом. И его осуществление требуетс в А р за меньше времени, упроп(ение достигаетс за счет исключени стадий экстрагировани и хроматографического разделени . При анализе используютс широкораспространенные реактивы, такие как ацетат магни , этанол, хлороформ, что определ ет экономическую целесообразность способа в практике аналитических и биохимических лабораторий при оценке эффективности и безопасности его назначени при лечении различных опухолей. Дл практического использовани способа не требуетс дополнительных исследований и специального обучени персонала, что также значительно упрощает анализ. Формула изобретени Способ определени доксорубомицина , включающий перевод анализируемой пробы в раствор, возбуждение и регистрацию флуоресценции раствора, по величине интенсивности которой проводитс определение, отличающийс тем, что, с целью снижени предела обнаружени доксорубомицина в воздухе рабочей зоны промышленных предпри тий и упрощени анализа в присутствии близких по структуре соединений, анализируемую пробу раствор ют в этаноле, добавл ют 0,81 ,5% раствора ацетата магни , облучают полученньпЧ раствор светом с длиной волны 5А4 им и регистрируют флуоресценцию на длине волны 598 нм.

Зависимость интенсивности флюоресценции комплекса доксорубомицииа от концентрации растпора ацетата мпгми при обгсме 1 мл

КонцентраЦИП ацетата магни , I

0,1 0,3 0,5 0,8 1,0 1.3 1,5

1568708

Относительна интенсивность флюоресценции , %

43 62 74 83 83 83 83