SU1730147A1 - Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов - Google Patents
Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов Download PDFInfo
- Publication number
- SU1730147A1 SU1730147A1 SU904802442A SU4802442A SU1730147A1 SU 1730147 A1 SU1730147 A1 SU 1730147A1 SU 904802442 A SU904802442 A SU 904802442A SU 4802442 A SU4802442 A SU 4802442A SU 1730147 A1 SU1730147 A1 SU 1730147A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- water
- ammonium sulfate
- granules
- biocatalysts
- hours
- Prior art date
Links
Landscapes
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
Использование: биотехнологи , медицина , способы иммобилизации ферментов. Сущность изобретени : раствор восстановленного кератина и фермента- высаждают диспергированием .в смесь вода:эта- нол:сульфат аммони 6,0:1,5-2.0:1,0-1,1. Гранулы промывают водой и обрабатывают смесью вода:сульфат аммони :формальде- гид 30,0:5,0:1,0-3,0 в течение 3-4 ч при рН 7.0-7,5. 1 табл.
Description
Изобретение относитс к химии высокомолекул рных соединений, а именно к получению гранулированных нерастворимых форм иммобилизованных ферментов (биокатализаторов ) на основе природного биополимера-кератина , которые могут найти широкое применение в биотехнологии, медицине и биологии.
Известен способ получени биокатали- заторов на основе иммобилизованных ферментов их реакцией по SH-св з м с раствором восстановленного меркаптрэта- нолом кератина с последующим диспергированием с образованием хлопьевидного продукта..
Недостатком известного способа вл етс низка механическа прочность иммобилизованного продукта, что затрудн ет его практическое использование.
Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому вл етс способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов высаждением
Ё
восстановленного по SH-св з м кератина и фермента из водного раствора путем сушки при комнатной температуре с последующей обработкой полученных пленок глубаровым альдегидом при комнатной температуре и рН 8-9 в течение 5-6 ч.
Недостатками данного способа вл ютс невозможность получени продукта в виде гранул, что обуславливает плохие гидродинамические свойства и затрудн ет его применение в колоночныхсорбционных процессах, а также крайне низка механическа прочность Полученных пленок, которую невозможно определить известными методами.
Цель изобретени -улучшение гидродинамических свойств биокатализатора.
Поставленна цель достигаетс тем, что раствор восстановленного кератина и фермента высаждают при диспергировании в смесь, состо щую из воды, этанола и сульфата аммони , вз тчх в массовом соотношении 6.0:1,5-2,0:1,0-1,1 соответственно, и
Х| СО
О
Ј ы
дальнейшую обработку провод т альдегид- содержащим соединением при рН 7,0-7,5 в течение 3-4 ч, а в качестве альдегидсодер- жащего соединени используют смесь во- да;сул ьфат аммони :формальдегид в массовом соотношении 30.0:5.0:1,0-3,0 соответственно .
Это позвол ет получать нерастворимые формы иммобилизованных ферментов с улучшенными гидродинамическими свойствами за счет получени продукта в виде гранул правильной сферической формы с высокой механической прочностью (разрушающее напр жение 0,126-0,136 кг). Это дает возможность эффективно использовать биокатализаторы в колоночных сорб- ционных процессах.
Одновременно решаетс задача утилизации крупнотоннажных отходов птицеперерабатывающей промышленности, так как исходным сырьем дл получени растворов восстаннов енного кератина по стандартному способу вл ютс сырье перопуховое (ОСТ 10-02-01-06-87), запасы которого вл ютс возобновл емыми и практически неог- раниченными, утилизаци которых представл ет собой серьезную народнохоз йственную проблему.
Использование при высаждении диспергированием смеси вода:этанол:сульфат аммони , содержащей на 6,0 ч. воды менее 1,5 ч. этанола и менее 1.0 ч. сульфата аммони , а также более 2.0 ч. этанола и 1,1 ч. сульфата аммони , не позвол ет получить гранулы правильной сферической формы и ведет к образованию агрегатов денатурированного белка неправильной формы.
Использование дл обработки смеси вода:сульфат аммони :формальдегид, содержащий менее 5,0 ч. сульфата аммони и менее 1,0 ч, формальдегида, не позвол ет достичь высокой механической прочности гранул, а увеличение содержани сульфата аммони более 5,0 ч. и формальдегида более 3,0 ч. приводит к снижению активности иммобилизованного фермента.
Проведение реакции при рН ниже 7,0, а также выше 7,5 не позвол ет получить гранулы с высокой механической прочностью.
При обработке гранул реакционной смесью менее 3 ч не достигаетс высока механическа прочность продукта. Врем обработки более 4 ч. нецелесообразно, так как не приводит к существенному улучшению свойств конечного продукта.
Пример1.К25мл раствора восстановленного кератина добавл ют при перемешивании 3,69 мл 2 М раствора (NH4)2S04, содержащего 0,1 г лактатде- гидрогеназы с активностью 200 ФЕ/мг.
Провод т высаждение белка при диспергировании в 100 г высадительной смеси, содержащей воду, этанол и сульфат аммони в массовом соотношении 6,0:1,5:1,0 соответственно . Образовавшиес гранулы промывают водой и обрабатывают 100 г реакционной смеси, содержащей воду, сульфат аммони и формальдегид при массовом соотношении компонентов
0 30,0:5,0:1,0 соответственно, при рН 7,0 в течение 3 ч, затем промывают водой. Диаметр гранул 2,0 мм; лактатдегидрогеназа со- хран ет 88,5% исходной активности. Характеристики процесса и полученного
5 продукта представлены в таблице.
П р и м е р 2. Смешение компонентов и высаждение белка при диспергировании . провод т аналогично примеру 1. Образовавшиес гранулы обрабатывают 100 г реак0 ционной смеси, содержащей воду, сульфат аммони и формальдегид при массовом соотношении компонентов 30,0:5,6:1,0 соответственно , при рН 7,0 в течение 4 ч, затем промывают водой. Диаметр гранул 1,8 мм.
5 Лактатдегидрогеназа. сохран ет 82,3% исходной активности.
П р и м е р 3. Получение продукта и его обработку реакционной смесью ведут аналогично примерам 1 и 2, но при .рН 7,5.
0 Диаметр гранул ,1,82 мм. Лактатдегидрогеназа сохран ет 84% исходной активности. П р и м е р 4. К 25 мл раствора восстановленного кератина добавл ют при перемешивании 0,01 г уреазы с активностью 724
5 ФЕ/мг. Провод т высаждение белка при диспергировании в 100 г высадительной смеси, содержащей воду, этанол и сульфат аммони в массовом соотношении компонентов 6,0:1,5:1,0 соответственно. Гранулы
0 промывают водой и обрабатывают 100 г реакционной смеси, содержащей воду, сульфат аммони и формальдегид при массовом соотношении компонентов 30,0:5,0:3,0 соответственно , при рН 7,2 в течение Зч, за5 тем промывают водой. Диаметр гранул 1,68 мм. Уреаза сохран ет 62,5% исходной активности .
П р и м е р 5. К 25 мл раствора восста-. новленного кератина добавл ют при пере0 мешивании 0,01 г уреазы с активностью 724 ФЕ/мг. Провод т высаждение белка при диспергировании в 100 г высадительной смеси, содержащей воду, этанол и сульфат аммони при массовом соотношении ком5 понентов 6,0:2 ,0:1,1 соответственно. Гранулы промывают водой и обрабатывают 100 г реакционной смеси, содержащей воду, сульфат аммони и формальдегид при массовом соотношении компонентов 30,0:0,2:2,0 соответственно, при рН 7,0 в
течение 3,5 ч, затем промывают водой. У ре- аза сохран ет 64,0% исходной активности. Диаметр гранул 1,70 мм.
П р и м е р 6. Получение гранул провод т аналогично примеру 5. Гранулы обрабаты- вают реакционной смесью, содержащей воду , сульфата аммони и формальдегид при массовом сботношении компонентов 30,0:5,0:3,0 соответственно, при рН 7,5 в течение 4ч.
Диаметр гранул 1,60 мм. Уреаза сохран ет 60,2% исходной активности.
П р и м е р 7. К 25 мл раствора восстановленного кератина концентрацией 12,5% при перемешивании добавл ют 0,1 г фер- ментного препарата глюкозоизомеразы из Str. rubiginousus Cyomen Cokepn (Финл нди ), активностью 2820 ед/r. Провод т высаждение при диспергировании в 100 г высадительной смеси, содержащей воду, этанол и сульфат аммони в массовом, соотношении 6,0:1,5:1,0 соответственно. Образовавшиес гранулы промывают водой и обрабатывают 100 г реакционной смеси, содержащей воду, сульфат аммони и фор- мальдегид при массовом соотношении компонентов 3.0,0:5,0:1,-0 соответственно, при рН 7,0 в течение 3,0 ч, затем промывают водой. Диаметр гранул 2,0 мм, глюкозоизо- мёраза сохран ет 72 % /активности, разру- шающее напр жение 0,126 кг.
Приме р 8. К 25 мл раствора восстановленного кератина, концентрацией 12,0% при перемешивании добавл ют 0,01 г глю- козооксидазы активностью 1.18,700 ед. Да- лее процесс идет по примеру 7.,
.Диаметр гранул 2,0 мм, глюкозооксида- за сохран ет 64% активности, разрушающее напр жение 0,126 кг.
Примеры 9-12 (сравнительные). Процессы провод т аналогично примеру 1, соотношение компонентов высадительной и реакционной смеси, технологический режим процесса и свойства продуктов представлены в таблице.
Как видно из данных таблицы, предлагаемый способ позвол ет получать биокатализаторы с улучшенными по сравнению с известными способами гидродинамическими свойствами за счет получени конечного продукта в виде гранул правильной сферической формы с высокой механической прочностью (разрушающее напр жение 0,126-0,136 кг).
Биокатализаторы, полученные по предлагаемому способу, в колоночныхсорбцион- ных режимах позвол ют значительно повысить удельную нагрузку на препарат (более чем в 3 раза по сравнению с известными способами), что в свою очередь пр мо пропорционально продуктивности биокатализатора . Предлагаемый способ позвол ет сохран ть высокую активность иммобилизованного фермента. Способ вл етс технологичным , продукт может выпускатьс на серийном оборудовании. Предлагаемый способ дает возможность технологически просто утилизировать отходы птицеперерабатывающей промышленности.
Claims (1)
- Формула изо б р е т е н и Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов путем высаждени смеси восстановленного кератина и фермента из водного раствора с последующей обработкой альдегидсодер- жащим соединением при комнатной температуре , отличающийс тем, что, с целью улучшени гидродинамических свойств биокатализаторов , высаждение осуществл ют диспергированием в смесь, состо щую из воды, этанола и сульфата аммони при массовом, соотношении 6,0:1,5-2:1,0-1,1 соответственно, обработку а ьдегидсодер- жащим соединением провод т при рН 7,0- 7,5 в течение 3-4 ч. а в качестве альдегидсодержащего соединени используют смесь вода:сульфат аммо- ни :формальдегид в массовом соотношении 30,0:5,0:1,0-3,0 соответственно.Технологический режим процессе и свойств продуктовВ числителе указана величина после 5 ч испытаний, в знаменателе
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904802442A SU1730147A1 (ru) | 1990-01-26 | 1990-01-26 | Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU904802442A SU1730147A1 (ru) | 1990-01-26 | 1990-01-26 | Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1730147A1 true SU1730147A1 (ru) | 1992-04-30 |
Family
ID=21501967
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU904802442A SU1730147A1 (ru) | 1990-01-26 | 1990-01-26 | Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU1730147A1 (ru) |
-
1990
- 1990-01-26 SU SU904802442A patent/SU1730147A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Иммобилизованные ферменты. Под ред. И.В.Березина, К.Мартинек. М.: МГУ, 1976. Kfkkawa M.K., Sugiura M., Togoda H., A New Approach to Enzynu Immobilizaton in Keratlne Gel. Hikaki Kagaku, 1978. 24(2), 103- 108. * |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4806474A (en) | Preparation of mycelial chitosan and glucan fractions from microbial biomass | |
JP2599789B2 (ja) | 水―不溶性グルコースイソメラーゼ結晶およびその製造法 | |
DE69514865T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von L-Asparaginsäure | |
JPS60137289A (ja) | 固定化された微生物菌体もしくは酵素の製造方法 | |
JPS6023838B2 (ja) | 微生物の全細胞におけるスクロ−ス・ムタ−ゼの固定化方法 | |
SU1730147A1 (ru) | Способ получени биокатализаторов на основе иммобилизованных ферментов | |
US3960659A (en) | Treatment of proteinaceous material | |
JPH0556957B2 (ru) | ||
US3070595A (en) | Process for producing polysulfuric acid esters of polysaccharides | |
EP1566441A1 (de) | Gene, enthaltend eine für Hydroxynitrillyase codierende DNA-Sequenz, rekombinante Proteine mit Hydroxynitrillyase-Aktivität und deren Verwendung | |
JP2003277416A (ja) | 糖類を含むアクリルアミド水溶液 | |
US4069106A (en) | Immobilization of enzymes on keratin | |
JPH06263801A (ja) | シアル酸の調製法 | |
CN111073921A (zh) | 汀肝素钠的制备方法 | |
JP2774594B2 (ja) | 固定化酵母菌体 | |
JP4524522B2 (ja) | タンパク質含有廃水の処理方法 | |
CN114164238B (zh) | 一种l-酪氨酸的酶法合成方法 | |
JP2717227B2 (ja) | 固定化ウレアーゼとそれを用いた酒類の製造方法 | |
DE2439923B2 (de) | Verfahren zum fixieren von enzymen auf einem traegermaterial | |
SU1731815A1 (ru) | Способ получени иммобилизованных клеток, обладающих глюкозоизомеразной активностью | |
CA1281675C (en) | Product and process for increasing enzyme adsorption | |
JP2758475B2 (ja) | キトサンオリゴマー及びその製造法 | |
JPS6054037B2 (ja) | エラスタ−ゼの製法 | |
SU1294829A1 (ru) | Способ получени гидролизата из луб ной части отходов окорки древесины | |
JP2931623B2 (ja) | L‐フェニルアラニンの製造方法 |