SU1627087A3 - Способ получени диастереомера N- @ 4-[2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[2,3- @ ]пиримидин-6-ил)этил]бензоил @ -L-глутаминовой кислоты со значением [ @ ] @ -21,06 @ или диастереомера N- @ 4-[2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо[2,3- @ ]пиримидин-6-ил)этил]бензоил @ -L-глутаминовой кислоты со значением [ @ ] @ +31,09 @ или их фармацевтически приемлемых солей с основанием - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к гетероциклическим соединени м, в частности к получению диастереомера N-Ј4- -Г2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тет- рагидропирило 2,3-г(пиримилин-6-шГ этил бензоил - |-глутаминовой кислоты со значением (VI Ј89 им -21,06 или диастереомера Н-Ј4-Ј2-(2-амино- -4-гидрокси-Ь,6,7,8-тетрагидропиридо 2,3-dJпиримидин-6-ил)этил Ьензоил - -L-глутаминовой кислоты со значением С З 89мА1 +31,09 или их фармацевтически приемлемых солей с основанием, обладающих противоопухолевой активностью . Цель - разработка способа получени  более активных соединений. Получение ведут из диастереомеров ф-лы i (Л

Description

где R« и RZ (одинаковые или различные ) - С,г 4-алкил, R3- Н или С,-С6 ацил; конфигураци  атома углерода со знаком  вл етс  -конфигурацией, и хиральной кислоты. Полученные две диастереомерные соли указанного соединени  раздел ют, выдел ют из указанной соли катионную часть действием

основани  и удал ют зан тные группы. 1 Выделение сободного основани  провод т в виде отдельной стадии до или после удалени  защитных групп, либо с удалением защитных групп. Целевые продукты получают практически в виде индивидуальных диастереомеров. 2 табл.

и

Изобретение относитс  к способу получени  новых оптически активных форм N-( (2-амино-4-гидрокси- -5,6,7,8-тетрагидропиридо 2,3-dJnn- римидин-6-ил) этил бензоил -1,-глута- миновой кислоты, обладающих противоопухолевой активностью.

Цель изобретени  - разработка способа получени  оптически активных форм N-/4- 2- (.)- iHo-4-гидрокси-- 5,6,7 ,8-тетрагидропиридо {2,3-dJ пири- мидин-6-ил)этшЛ бензоилу-1,-глутами- новой кислоты, обладающих более высокой противоопухолевой активностью.

Пример 1. Смесь 1 г диэти-- лового эфира (2-ацетамидо-4- -гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропирндо 2,3-dJ пиримидин-6-ил)этил бензоилj- -1-глутаминовой кислоты и 880 мг d (+)-10-камфорсульфоновой кислоты в 50 мл безводного этанола кип т т 4 ч Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и оставл ют на сутки. Образовавшеес  белое твердое вещество отдел ют фильтрованием и подвергают дробной кристаллизации с получением 37 мг дистереомера В d (+)-10-камфорсульфоната диэтилового эфира (2-ацетамидо-4-гидро- кси-5,6,7,8-тетрагидропиридо 2 ,3-dj пиримидин-6-ил)этил бензоилj-L-глу- таминовой кислоты, т.пл.223-225 С,

ОС

Мь нм -го 0.

Из маточного раствора испарением удал ют растворитель и полученный твердый остаток дважды перекристал- лизовывают из этанола с получением диастереомера A d(+)-10-камфорсуль фоната диэтилового М-Г4- 2-(2-ацета- мидо-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо 2,3 }пиримидин-6-ил)этип бензоил -L-глутаминовой кислоты, .3Ь.

Раствор диастереомера В d(+)-10- -камфорсульфоната диэтилового эфира М-{4- 2-(2-ацетамидо-4-гидрокси- -5,6,7 , Зпетрагидропиридо (2,3-dJriH- римидин-6-ил)этил бензоил -L-глута- мнновой кислоты п 50 мл метанола, содержащего 3 мл 1 н.водного раствора гидроокиси натри , перемешивают 72 ч при комнатной температуре. После добавлени  2 мл уксусной кислоты смесь центрифугируют с получением диастереомера В М-/4- 2-(2-амино-4- -гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо 2,3-cfJ пиримидин-6-ил) этил бенчоил -

-

6270874

-L-глутамино ой кислоты, т.пл.22410

15

20

25

30

CQ 227 С (с разложением), cQJ|,MJ|| - -21,0581 (С 0,636, О, IN NaOH). 5 ЯМР (СОСЦ ), 5 : 1,85 (м, 2H)J 1,98 (м, 1Н); 2,25 (м, 1Н); 2,45 (м, 1Н); 2,68 (м, 1Н); 2,92 (м, 5Н); 3,25 (т, J 10 Гц, 1Н); 3,82 (д, J 10 Гц, 1Н); 5,13 (м, 1Н); 7,43 (д, J 9 Гц, 2Н); 7,84 (д, Л 9 Гц, 2Н).

Оптическа  чистота 97%.

По описанной методике, но использу  диастереомер A d (+)-10-камфор- сульфоната диэтилового эфира N-{4- - 2-(2-ацетамидо-4-гидрокси-5,6,7,8- -гетрагидропиридо 2,3-И |пиримидин-6- -ил)этил}бензоил j-I.-глутаминовой кислоты вместо В ичомера получают диастереомер А М-Г4-Ј.- (амино-4-гидро- кси-5,6,7,8-тетрагидропиридоГ2,3-dJ пиримидин-6-ил) этил -бензоилТ-1.-глу- таминовой кислоты, т.пл. 25И-255°С.

Пример 2. К раствору, содержащему 100 мг (0,187 ммоль) ди- ЭТИЛОРОГО эфира М-Г4- 2-(2-ацетами- до-4-окси-5,6,7,8-тетрагидропиридо Ј2, 3 пиримидин-6-ил)этил2бенэоил|- -L-глугаминовой кислоты п 6 мл сухого этанола, прибавл ют 122,7 г (+) -З-бромкамфор-8-сульфокислоты (0,374 ммоль). Полученную реакционную смесь кип т т с обратным холодильником в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и выдерживают в течение ночи. Твердый осадок собирают фильтрацией под вакуумом , получают 40 мг (31%) соответствующей соли.

ВЭЖХ-анализ указанного продукта показывает, что он обогащен диасте- реомером с коэффициентом обогащени  3,3 (соотношение 23:77) (С другой стороны, маточный раствор обогащен другим диастереомером с коэффициентом обогащени  3,2, соотношение 7:24). Повторение указанного ВЭЖХ- разделени  дает выделенный диастереомер с требуемой оптической чистотой 95.%.

Пример 3. Юг N-((2- -амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагид- ропиридо JJ2,3-d пиримидин-6-ил) этил бензоил}-1,-глутаминовой кислоты (В- диастереомер) суспендируют в 40 мл воды (рНл,5,0). к полученной суспензии прибапл ют ло капл м при перемешивании 8 мл 5,0 н.водного раст

35

40

45

16

вора гндрсх i-u и nnpi ii tiLiM p«ii вор 1,0 н.гнлропкиги натри  до тех пор, пока ь рчстр 41. it IK i т г   твердое вещр| 1во ( 3 , i i) , pH pacr вора при этом 8. ia i си при арлткч 50 мл метанол и р гс i n ч рыцержиьа г в холодильнике рчение ночи. Образующеес  ТПЕФГТПЈ i э ю соонра т г рацией, промывают неп пьшнм колиte- стпон холодного MLiaHo a и ( jiitfij в ( при комнат г т 4смгерчтуле, получаю дпугчтри вую сгл днастерео мера В N-J 4- 2- 2-амшю- -rnnpnicci,- -5,6 , 7 ,8-1 етрапг чоппр ц-о 2 , j-d ,inрНМИДНН-6-Ml ) i|jr , u A -I-r i г iминовой клслогы 5,1 г).

И К (bRi): V-i О- , 1Г-+0, if,n, 1600, 1548, 15V, Ы02, 13э8, 1310

Я1Ф С,ОС 1 Г, , J : /,7Ь (г , 2НУ Т - 6 Гц ; О (ьв, III, I - (J Ги, 5 Ы ; -J.34 CKI , 1Н, i 11 Гц, 2 ПО ; ,Q5 (MI, 111, I a 11,9 Гц), ,7 м, 24); 2,bri (rii, 1H, J 111 , j,

1 ,20 (т, H.

J - 7 n ), Л

2 Гц;, i, г м,

1 (м, 141

(м,

BlT-П I-l 1, ( - А , Г Я , I D. tO,

N 12/1.3.

4,F,c,, 07Ma,

Нонл- , ,

N 12,40

II I- II L i1 i ir,4 ч 111 (, л

РЕ де тт) 1 ii Oi ч ч

лейкемии огн i ,. С (if i-n. ri

реомерок i i i Tt с IK i i и

чкгперинс i i i ititr ( i с у- i и и j0 мкг/мп:

Лиа г, , i a и

Пплг- , ррг , .р И)

П р i м t р j. Н tтчмь ч i ) ласи мьпа ji Lj/R1 /Г ьмт t гн пи) i i i 1 т

KOtHO OnV OJliJ MP O 10 R I ()

Дл  ,тои г тип ч) и i ( no . г ny 10 Hbjic . К ( че HC. и ) -i j iv рНбрЮШИННО P К iilM ТЛ О1 1 I MCT i T-p .

рромера I - 2 -n - -i i -5, 6 , /, -т 5т pa ini pin l(f J при

МИЦИН fl - T - r,-lJOHl f T1И

новой к и п о i ( L ok op и ) через т ь i t IJT iit1 ХОЛИ О Г (i Я - j J rijfi1 ( iiЧ

ШИХ тт I КО ill 1Ч11Г } I lani

Г ОТ V Ч I М Н ,1 {

п м нос cos дине ie. на оснопанин чего подс«итьтают процент ингнбирова- .

Полученные результаты приведены в т а б п . 1 .

П р i м е р 6. Группы женгкгх особен мышей СЗН в количестве 10 шт. зфпкамт вн трибрюипыно в подмышечной обтастц клеткаги лимгЬосаркомы . и течение 8 чнеи ввод т испытуемое соединение внутрибрюшинно в эмуль- - 3орс СО,5 мл). Контрольные животные прохог  гакуп же обработку, но без игт1ытурмг о coenniiei rfp.

п 1 чаштые ре лътаты григедены р пч 2,

ii р и м е р 7. Группам мътле СЗН i мплонтирмп кчетки СЗН л тсмюкагцино 0

N i опорной ел°ты, г опе чего ввод т

n f, п; тьиые ЖИРОТ- чиг только ра ба М тель

in чет тании ni (ены в тЛ. II t и м е п р .

неточен пгатм ктеток миелом) ЗтбЗ митч1тнр т rp%nia мышеи , пост I-PIO ввод т ш мер г, при чтом iiHipo ii i цчьотрые г 1 л1 -,1-1 1Ь.

Ре льтаты мгпытаний даны в табт.4 (,вч три )1)юши1 но - 0,6 мл/день в Змуль- ibope p °ruiPFrfo в течение 10 дней).

Г1иа тсрромеры, получаемые по пред- т i / гособ , обо адаю: бопсе вы- HI i тптзоопухо е РОЙ активностью, ем их и относ тс  к группе MIr TTOI си жьгч оелинении.

Ф о I м п а изобретени 

Cnncic голччсии  диастереомера К (2-1МИНО-4-ГИДРОКСН-5,6,7,8-сгр г in ,3-с1 пиримидин-6- -in)oiin бонпоил - -глутаминовой кнсогы со значением jj/7 89 UM или . реомера т|-4-р-(2-ами: о-4- -г -гг01 гн-; ,(, 7 ,8-тет- а-идроп1ридо мрчм ) )тип бензоил - ,,памп( кислоты лачением

ГьП 2 ч-Ч.Г°° нпи их Лармацев-J 5йс)им

injitM-ipMbX солеи с основанием, отличающийс  гем, что ргст оп С и иттерео еров гощей формулы

хнхн

i; t en- н--0ьг°4| 9н сн7 сн гсоо ,

- VII

RjNH N N ,COOR,

i

R:

где R и R г - одинаковые или рачличные - С -С -алкил, - водород или C -Cg-ацил - L-конфигураци  атома

углерода,

подвергают обработке хиральной кислотой , раздел ют полученные две диасте- реомерные соли указанного соединени , выдел ют из указанной соли катионную часть действием основани  и удал ют защитные группы, причем выделение свободного основани  провод т либо н виде отдельной стадии до или после удалени  защитных групп, либо одно- временно с удапением защитных групп, дл  получени  диастереомера М-|4 -Ј2-(2-амнно-4-гидрокси-5,6,7,8-тет- рагидропиридо 2 ,З-d пиримидин-6-ил) этил бензоил}-1,-глутаминовой кислоты со значением оП

практически не содержащего диастереомера N-{4- -(2-амино- -гидрокси- -5,6,7,8-тетрагидропиридор,З-dJпири- мидин-6-ил) этид бенэоил -1,-глутаминовой кислоты со значением +

Lw

+31j09° или диастереомера N-f4- 2- -(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетра- гидро , 3-d пиpимидин-6-ил) этшг бен- зоил}-L-глутаминовой кислоты со значением ГоО Но +31,0чв, практичё- 5о нЛ

ски не содержащего днагтереомера N-J4 -Г2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8- -тетрагидропиридор, 3-с1 пиримидин- -6-ил)этил бензоил1,-Т,-глутаминовой кислоты со значением ga и/и

-21,06 или перевод в соль действием основани .

Таблица 1

Г( а б л и ц   3 .

Таблица 4

Claims (5)

1. Способ получения диастереомера

   N-^4-[]
2. 2- (2-амино-4-гидрокс.и-5,6,7,8-тсграгидг одиридо [?.,
3. 3-с1]пиримидин-6-ип)этил бензоил^-1.-глутаминовой кис.лоты с.о значением (j/J “21,06 или диастереомера n£-
4. 4-[2-(2-амино-4-гилрокси-5,6,7,8-тетпаридропиридо [_2, З-d] пирнмидин-6-ил) этил ] бензоил^ -L-глутаминспси кислоты со Го-’П ^г' +31,09° или их

   J 589 НМ гически значением фармацев• зоил] --Ϊ. - г 1 у Г аг.-еоеомер А и В) тмгряют !1ЯСГ\: оду злтных (полу о··,в55 paciвор формулы он н основанием, гем, что л и л с т е р е ом е р о в о б ще й приемлемых солей с ч а ю щ и й ся см ц и згк-^-СОМЬ^Н-СН^СНгСООЯ,

   COOR, с опухолями животных, и

   < ¹ ί' !’.1'4 X ’

   Ί ^R3 *

   - одинаковые или различные - С^-С^-алкил,

   - водород или С,-С^-ацил,

   - L-конфигурация атома углерода, подвергают обработке хиральной кислотой, разделяют полученные две диастереомерные соли указанного соединения, выделяют из указанной соли катионную часть действием основания и удаляют защитные группы, причем выделение свободного основания проводят виде отдельной стадии до или удаления защитных групп, либо временно с удалением защитных для получения диастереомера N-^4-^2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидропиридо [2,3-Н]пиримидин-6-ил) этил]бензоил]-L-глутаминовой кислоты со значением ~^?1»θ6°, • * · либо в после одногрупп,

   Соединение

   Доза, мг / кг практически не содержап(его диастереомера N-^4- [?.-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,3-тетрагидропиридор,З-d] пиримидин-6-ил) этил7бензоил^-Е- глутаминовой кислоты со значением Γλ/Ί²® ⁺

   L^WJ 669ям +31,09° или диастереомера N-£4-£2-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8-тетрагидро , 3-Д]]пиримилин-6-ил) этил] бензоил} -L-глутаминовой кислоты со значением 75^ +31 ,09^е , практически не содержащего диастереомера N-^4 -р-(2-амино-4-гидрокси-5,6,7,8—т етра гидропиридо [”2,3-И]]пиримидинi1|-Т.-глутаминовой
5. 5ВЭ НМ в соль действи-6-ил) этил]] бензоил^кислоты со значением

   -21,06° или перевод ем основания.