SU1378784A3

SU1378784A3 - Способ получени антрациклингликозидов

Info

Publication number: SU1378784A3
Application number: SU833590801A
Authority: SU
Inventors: Барджиотти Альберто; Пенко Серджио; Анна Мария Казацца Мисс
Original assignee: Фармиталиа Карло Эрба С.П.А. (Фирма)
Priority date: 1982-05-24
Filing date: 1983-05-17
Publication date: 1988-02-28
Also published as: ATA178083A; IT1206116B; IL68720A0; BE896775A; IE55231B1; IE831141L; US4522815A; FI831709L; FI75834B; DK219483A; DE3317702A1; IL68720A; CA1237714A; FI75834C; AU1455483A; DK219483D0; SE8302831D0; FR2527212A1; AU554416B2; CH655119A5

Abstract

Изобретение касаетс замещенных гликозидов, в частности получени антрациклингликозидов общих Лормул I и II с(о)снз он --он R ОН вон с(о)снз --он --ш он где R - Н (а);,ОСН (б), которые обладают противоопухолевой активностью . Цель изобретени - разработка нового способа получени более активных веществ указанного класса. Синтез соединений I и II ведут реакцией соединений формул III и IV О ОН R О ОН ОН СНч- с-о о Cri,Gl сл о 0-С(0)СНз Процесс ведут в хлористом метилене в присутствии трифторметансульфона- та серебра и молекул рных сит с последующим разделением и очисткой хроматографией на колонке. Последн заполнена силикагелем и процесс ведут с использованием смеси зтилацета- та и циклогексана (равные объемы)в качестве элюента. Защитные 0-ацетиль- ные .группы удал ют обработкой 0,2 н. раствором NaOH при комнатной температуре . Новые вещества обладают лучшим противоопухолевым действием, чем известные - доксорубицин и дауно- рубицин. Активна доза 3-4,4 мг/кг. 7 табл. 00 00 ч 00 4 СМ

Description

Изобретение относитс к способу получени новых а нтрациклингликозидов общих формул I и II

О

О онII

.C - CHs

он

где R - Н

(б),облада

ющих противоопухолевой активностью.

Цель изобретени - разработка способа получени гликозидных произ водных антрациклина, обладающих улучшенными свойствами по сравнению с противоопухолевыми препаратами-струк- турными аналогами: даунорубицином и доксорубидином

Пример 1. Получение 7-0-(2,6- дидеокси-о -Ь-арабиногексопиранозил)- дауномицинона Па и 7-0-.З б-три- деокси-оС- L-эритрогекс-2-енопирано- . зи.п -дауномицинона (На).

К раствору, содержащему 2 г да- уномицинона в 200 мл безводного хлористого метилена, прибавл ют 1}25 г хлорида 3,4-ди-0-ацетил-2,6-дидеок- си-(1-Ъ арабиногексопиранозилла, растворенные в 30 МП хлористого метилена J и 12 г молекул рных сит (4 А Мерк). Смесь обрабатывают 1,28 г трифторметансульфоната серебра раст воренными в 30 мл безводного диэти- лового эфира. Через 5 мин смесь нейтрализуют прибавлением 0,65 мл безводного коллидина. После выдержки в течение 30 мин при комнатной температуре органический раствор промываю насыщенным водным раствором кислого углекислого натри ; водой, Ojl н„

0

5

0

5

30

35

40

45

55

водным раствором хлористоводородной кислоты и, наконец, водой. Органическую фазу отдел ют и упаривают в вакууме до получени сухого остатка. Полученный остаток подвергают очистке с помощью хроматографии на колонке , наполненной кремневой кислотой, при применении в качестве элюируюшего средства смеси этилового эфира уксусной , кислоты и циклогексана (1:1 по объему). В результате порознь получают 0,9 г соединени формулы, Vap т.пл„ in-ne C, ПМР (CDCl): infer alia около l,235(d, CHj-C-S ); 1,95S (S, CHjCOGC) 2,07 § (S , CHjCOOC), 2,43S-(S, CHjCO); 5,20S (CH-7); 5,53 (S (CH-1 ) и 0,9 г соединени формулы Via, т,пл. 83-84 с.

Соединение формулы .Va (0,7 г) раствор ли в ацетоне (45 мл) и производили обработку 50 мл 0,2 н. водного раствора гидроокиси натри при комнатной температуре. Через 1 ч значение рН раствора доводили до 7, после чего производили экстрагирование хлороформом. После отгонки органического растворител в вакууме получали чистое соединение 1а с количественным выходом, т.пл, 161- 162 С, FD-MC: m/z 528 (М). После обработки соединени формулы Via в основных услови х получали в чистом виде соединение формулы На, т.пл. 181- 82 с. FD-MC: n/z 510 (М) ПЛР (CDClj): inter alia около l,40S (d5 СНз-С-5-),, 2,42:9 (S, CHjCO); 5,33 S (CH-7} , 5,588(CH-1 ) и 5,5-6,0 /m; CH-2 (CH-3),

П p и M e p 2. Получение 4-демет- окси-7-0- (2, б-дидеокси-оо-Ь-арабино- гексопиранозил)-дауномицинона (IB) и 4-деметокси-7-0-(2,3,6-тридеокси- оС-Ь-эритрогекс-2-енопиранозил)-дау- номицинона (Ив).

К раствору 0,74 г 4-деметоксидау- номицинона (Шв) в безводном хлористом метилена (70 мл) прибавл ют 0,65 г галогенида сахара формулы IV, растворенные в 10 мл хлористого метилена , и 5 г молекул рных сит (4 А Мерк), Смесь обрабатывают 0,64 г трифторметансульфоната серебра, растворенными в 15 мл безводного диэти- лового эфира. Через 5 мин реакционную смесь нейтрализуют прибавлением 0,4 мл безводного коллидина. После выдержки в течение ч при комнатной температуре органический раствор

промывают иасмщенным водным раствором кислого углекислого натри , водой , водным 0,1 и. раствором хлористоводородной кислоты и снова водой. Органическую) фазу отдел ют, после чего раствор упаривали до получени сухого остатка в вакууме. Полученный в результате этого остаток подвергают очистке с помощью хроматографии на колонке, заполненной кремневой кислотой, при применении в качестве элюирующего средства смеси хлороформа и ацетона (96:4 по объему). В результате получают 0,48 г соединени формулы Vb,, т.пл, 65-66 С, FD-MC: m/z 582 (М), и 0,43 г соединени формулы Vlh. Соединение Vh раствор ют в 20 мл ацетона и производ т обработку 20 мл 0,2 н. водного раствора гидроокиси натри при комнатной температуре. Через 1 ч значение рН раствора довод т до 7 и экстрагируют хлороформом. После отгонки органического растворител в вакууме получают чистое соединение формулы 1Ъ с количественным выходом, т.пл. , FD-MC: m/z 498 (м ). После обработки соединени формулы VIb в основных услови х получали чистое соединение формулы lib. IMP (CDCl) inter alia около 1,39 (CHj-C-5 ); 2,42& (S, CHj-CO), 3,50-4,00 5(m, и C-H-5 ); 4,08(f: , CHjO); 5,33iS:(bs, C-H-7), 5,58i(bs, C-II-l ) 5,65 (d, С-Н-З О, 5,93 .(d, C-H-fO.

Биологическа активность соединений На, Ib,

Соединени На и Ib были испытаны в сравнении с даунорубицином (ДНР) и доксорубидином (ДК) в in vitro и in vivo системах с целью установлени их цитотоксичности и противоопухолевой активности.

В табл. 1 приведены активности на Hela клетках, размножаюгщхс продуктивно in vitro (обработка 24 ч).

Соединение Па примерно в 25 раз менее цитотоксично, чем ДНР, и в 40 раз менее цитотоксично, чем ДК.

Первичные исследовани in vitro были проведены на CDF-1 мышах, стра- даю1 шх асцитической Р388 лейкемией (10 клеток/мышь). Результаты представлены в табл. 2 (обработка i.p. 1 раз в сутки). Соединени На, суспендировали в 10%-ном Tween 80 и инъицировали внутрибрюшинно. Сое- динение На оказалось менее токсичным и было инертным по отношению к Р388 асцитической лейкемие при двух- дозном .испытании, включа максималь- 5 переносимую дозу (ШД) 100мг/кг.

Соединение Ib было изучено in vitro на Heln и Р388 лейкемических клеток чувствительных (Р388) и устойчивых (Р388/ДК) к ДК, а in vitro- O на Р388 и Gi OKS leukemia. Значени , приведенные в табл. 3, показывают, что соединени Ib, исследованное на Hela клетках, размножаюглз хс продуктивно in vitro, в сравнении с изпест- 5 иыми соединег1и ми ДНР и 4-деметок- си-ДПР (4-дм-ДНР), в 3 и 6 раз менее цитоксично, чем ДНР и 4-дм-ДНР,

Соединение Ib было изучено на Р388/ДК in vitro.

0 Р388 и Р388/ДК лер1ке шческие клетки бьти отобраны из асцитической жидкости мышей и помещены дл выра- иивани в суспензию in idtro. Тесты на питотоксичность осуществл ли 5 путем воздействи на клетки препаратов в различных концентраци х в течение 48 ч. В конце экспозиционного периода клетки были подсчитаны с помощью счетчика Coulter клеток, а Q доза, котора дает 50%-ное

уменьи1ение количества клеток, в сравнении с необработанными контрольными клетками была рассчитана.

Табл. 4 показывает, что соединение Ib было приблизительно таким же цитотоксичным, как ДНР на Р388 лей- кемических клетках, и было очень активно по отношению к Р388/ДК лейке- мическим клеткам. ДНР было приблизительно в 500 раз менее активно по отнопению к устойчивым клеткам, чем к чувствительным клеткам.

Результаты первичного исследовани in , проведенного на CDF-1 мышах, страдающих асцитической Р388 лейкемией и обработанных i.p. через сутки после трансплантации опухоли, показаны в табл. 5.

Сравнение на максимальную пере- дозу показало, что соединение 0 Ib менее активно, чем ДНР и 4-дм-Д}1Р.

Результаты исследований, проведенных на СЗН/Ме мышах с i.v. трансплантированной Gross leukema, обработанных i.v. через сутки после 5 трансплантации опухоли, приведены в табл. 6. Соединени ТЬ оказались более токсичными и более сильнодей- ствуюшлми, чем родственные соедине5

0

5

ни о Сравнение максимальных переносимых доз показывает, что Ib более активно, чем ДНР. Соединение ТЪ далее исследовали на активность при введении через рот, на Gross leuke- nia трансплантированную i.v., в сравнении с ДНР, ДК, вводимыми i.v, и в сравнении с 4-дм-ДНР, вводимым через рот.

Данные, приведенные в табл. 7, показывают, обладает хорошей противоопухолевой активностью при введении через рот 1 раз в сутки в сравнении с активностью 4-дм-ДНР (где продемонстрирована как активна при введении через рот) и ДНР при введении i.v.

Таким образом, соединени 1Ъ и На обладают улучшенными свойствами по сравнению с противоопухолевыми препаратами - доксорубидином и даун рубицином.

Claims

Формула изобретени

, Способ получени антра1Д1клин- гликозидов общих формул

он

о он

где R - Н (а), OCHj б, отличающийс тем, что антрациклинон общей формулы

О

В О ОН ОН

где R имеет указанные значени , раствор ют в хлористом метилене и обрабатывают хлористьм 3,4-ди-()-аце- тил-2,6-дидезокси-/-Ь-арабиногек- сопиранозилом формулы

VN

о

ОССНч

и

о

в присутствии трифторметансульфоната серебра и молекул рных сит, полученную смесь гликозидов обших формул ОН О

,с-сн

он

оссн, II

о он н

.С-СНа

ОН

OCCHj

о

где R имеет указанные значени , раздел ют и очищают хроматографированием на колонке, заполненной сили- кагелем, с использованием смеси этил- ацетата и цикло.гексана 1:1 (по объему ) в качестве элюента, загщтные 0- ацетильные группы удал ют обработкой

0,2 Н. водным раствором гидроокиси натри при комнатной температуре.

Таблица

Число колоний, % от необработанных контрольных.

Таблица 2

инение

2,91600/100/10

4,4 165-1700/100/20

6,6 150-1600/107/20

751200/50/5

100900/101/10

4,4 220-2272/180/18

6,6 227-3052/260/26

10268-6106/26 . 3/26

Среднее врем выживани , % по отношению к необработанным контрольным клеткам;

Выжившие на продолжительное врем (60 сут); Оцененные на основе аутоптических исследований на

мертвых мышах;

Ланные двух экспериментов (range); Данные трех экспериментов (range).

137878410

ТаблицаЗ

Число колоний, % от необработанных

контрольных.

Доза, привод ща к уменьшению

количества клеток, в сравнении с необработанными контрольными;

Р388 лейкемические клетки, чувствительные к ДК ;

Р388.устойчивые к ДК; .

Отношение между на Р388/ДК и LD. на Р388.

ТаблицаА

дар

2,9

4,4

ДНР

нение

0,75

1,25

2,5

5

4,4,

6,6

10

159-194 140-184 163

140 163 63 220 305 610

0/18 0/18 0/8

0/8.

0/9

0/10

1/10

0/10

5/10

0/8

7/18

0/8

0/8

3/9

10/10

0/10

0/10

0/10

Таблица 6

Таблица

3,6

150

0/6

13

1378784

День после трансплантации опухоли; Данные двух экспериментов (rande).

14 Продолжение табл,7