SU1121007A1

SU1121007A1 - Способ определени циркулирующих иммунных комплексов

Info

Publication number: SU1121007A1
Application number: SU823426894A
Authority: SU
Inventors: Борис Иванович Рудык; Петр Васильевич Барановский
Original assignee: Тернопольский медицинский институт
Priority date: 1982-01-08
Filing date: 1982-01-08
Publication date: 1984-10-30

Abstract

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИШУННЫХ КОМПЛЕКСОВ, включающий титрование комплемента в сыворотке крови больного и определение антикомплементарности сыворотки по разности общей комплементарной актив-г ности и оставшегос несв занного комплемента иммунными комплексами, отличающийс тем, что, с целью повышени точности и упрощени способа, титрование исследуемой сыворотки больного и определени антикомплементарности сыворотки осуществл ют комплементом той же сыворотки .

Description

Изобретение относитс к медицине и ветеринарии, в частности к способа определени циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), и может быть использовано дл оценки при наблюдении за развитием и течением болезней у человека и животных, в особенности таких как болезни с диффузным поражением соединительной ткани, почек, аутоиммунные, цитопении, некоторые хронические болезни легких и сердца Известен способ определени 1ДИК по св зыванию иммунным комплексом исследуемой среды С,- -фракции компле мента человека, который позвол ет определ ть количество антиген не специфических комплементфиксирующих ЦИК l. Однако известный способ недостаточно точен, что затрудн ет определение ЦИК в малых концентраци х, так как используетс лишь один компонент () системы комплемента, а также сложен в учете конечного результата длителен в постановке реакции, и ело жен методическими приемами в получе нии чистой фракции что делает спо соб мало доступным. Кроме того, способ с использованием С о-фракции комплемента не позвол ет одновременно в одной и той же исследуемой среде определить общую комплементарную активность сыворотки и комплемента , поглощенный ЦИК, что важно дл суждени об участии комплемента в аутоиммунных реакци х Известен также способ определени ЦИК ПС антикомплементаркости сыворот ки, который основан на определении поглощени ЦИК исследуемой среды комплемента морской свинки 2j. Однако известный способ недостаточно точек, так как используетс гетерологический комплемент морской свинки. Цель изобретени - повьшецие точности и упрощение способа. Поставленна цель достигаетс тем, что согласно способу определени циркулирующих иммунных комплексов , включающему титрование компле-ментов в сыворотке крови больного и определение антикомплементарностк сыворотки по разности общей комплементарной активности и оставшегос несв занного комплемента иммунными комплексами, титрование исследуемой сыворотки больного и определение антикомплементарности сыворотки осуществл ют комплементом той же сыворотки . Способ реализуетс следующим образом . Определение общей комплементарной активности сыворотки. Берут 0,05 МП исследуемой сыворотки , 0,45 мл веронал-мединалового буфера с РН 7,3 и провод т титрацию. Определ ют общую гемолитическую активность в единицах комплемента по 50%-ному гемолизу сенсибилизированных эритроцитов барана (ЕД по СН) Затем определ ют антикомплементарность исследуемой сыворотки. Дл этого 0,1 мл исследуемой сыворотки инактивируют на вод ной бане при 5(°С на прот жении 30 мин, прибавл ют к ней 0,05 мл исследуемой неактивированной сыворотки (при низкой общей комплементарной активности исследуемой сыворотки добавл етс 0,1 мл) и 0,35 мл веронал-мединалового буфера с РН 7,3 (при низкой комплементарной активности 0,3 мл вероналмединалового буфера). Помещают в термостат на 2 ч при 37°С. После инкуба даи опредеттлют оставшийс комплемент (ЕД по CHgg). По разности общей комплементарной активности и оставшегос несв занного комплемента определ ют антикомплементарность сыворотки, т.е. количество ЦИК. Частное от делени общей комплементарной активности исследуемой сыворотки на количество ЦИК (антикомплементарность ) оцениваетс как коэффициент аутоим -1унизации (К) . Коэффициент аутоиммунизации находим по формуле: k где С - обща комплементарна активность сыворотки в (ЕД по CHjo); ИК - количество ЦИК (антикомплемектарность ) сыворотки в (ЕД по CHjo) Пример Производим расчет, Обща комплементарна активность исследуемой сыворотки 48 ЕД, Оставшийс комплемент - исследуемой пробе на ЦИК 44 ЕД. Количество ЦИК (а.нтнкомплементарность ) исследуемой сыворотки определ етс путем вычета от общего уровн комплемента количества последнего, оставшегос после поглощени ЦИК:

48-44 4 ЕД.

Kq (коэффициент аутоиммунизации)

г- 12 условных ед.

По предложенному способу наличие аутоиммунного компонента определ ют при величине коэффициента аутоиммунизации ниже 15 условных ед, риск развити аутоиммунизации процесса при величинах 15-20 условных ед., отсутствие аутоиммунизации и риска ее развити при величинах коэффициента бодее 20 условных ед.

Пример 1. Обследовано 20 больных с т желым течением бронхиальной астмы. Ни в одном случае не получено коэффициента аутоиммунизации выше 20 условных ед., а средн величина группе 16,413,4 условных ед.

П р и м е р 2. Обследовано 18 больных ревматоидным артритом и системной красной волчанкой, ни в одном

случае не получены величины коэффициента аутоиммунизации более условных ед, при средних величинах 12,1± i3 условных ед.

П р и м е р 3. Обследовано 20 пратически здоровых взрослых лиц, где во всех случа х коэффициент аутоиммунизации был выше 20 условных ед. и в среднем составл л 24,4±2,6 условных ед.

Всего бьшо обследовано 62 больных и в 73,1% случа х было определено наличие иммунных комплексов с назначением соответствующей терапии. По известному способу возможность обнаружени иммунных комплексов составл ет лишь 58-59%.

Таким,образом, предложенный способ повышает точность определени иммунных комплексов и упрощает методику определени , что делает его доступным дл лечебно-профилактических и научно-исследовательских медицинских учреждений.

Claims

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ИММУННЫХ КОМПЛЕКСОВ, включающий титрование комплемента в сыворотке крови больного и определение антикомплементарности сыворотки по разности общей комплементарной актив·? ности и оставшегося несвязанного ком племента иммунными комплексами, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и упрощения способа, титрование исследуемой сыворотки больного и определения ан тикомплементарности сыворотки осуществляют комплементом той же сыворотки .

1 1