SU1076089A1 - Способ диагностики ранней стадии ревматоидного артрита - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РАННЕЙ СТАДИИ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА путем определени  в сыворотке крови больного антител к цельным клеткам / -гемолитического стрептококка группы В, штамм 090R, в серологической реакции с последующим учетом результатов , отличающийс  тем, что, с целью повышени  специфичности и чувствительности способа, микробные клетки перед постановкой реакции обрабатывают раствором пепсина в течение 3tO,l ч, антитела определ ют в реакции св зывани  комплемента .

Description

d5

ос

UD

Изобретение относитс  к медицине а именно к ревматологии, и может быть использовац о. лл  дифференциальной диагностики ревматоидного артрита на ранних стади х.

Известен способ диагностики ранней стадии ревматоидного артрита путем определени  в сьшоротке крови больного антител к цельным клеткам -гемолитического стрептококка группы В, штамм 090R, в серологической реакции с последующим учетом результатов 1.

Однако известный способ  вл етс  малоспецифичным из-за наличи  перекрестно-реагирующих белковых антигенов и рецепторов к F фрагменту человеческого иммуноглобулина G в оболочке клеток стрептококка.

Цель изобретени  - повышение специфичности и чувствительности способа .

Указанна  цель достигаетс  тем, что согласно способу диагностики ранней стадии ревматоидного артрита путем определени  в сыворотке крови больного антител к цельным клеткам fi-гемолитического стрептококка группы В, штамм 090R, в серологической реакции с последующим учетом результатов , микробные клетки перед постановкой реакции обрабатывают раствором пепсина в течение 3tO,l ч, антитела определ ют в реакции св зывани  комплемента.

Способ осуществл ют следующим образом.

Клетки штамма 090R ГСВ выращивают на бульоне Хоттингера рН 7,6/ содержащем 140-160 мг% аминного азота и 1% глюкозы в течение 20 ч при . Клетки собирают центрифугированием при 3000 д, трижды отмывают физиологическим раствором рН 7,2 и ресуспензируют в физиологическом растворе рН 2,0, содержащем пепсин в концентрации 1 мг/мл (из расчета 500 мл исходной питательной среды - 10 мл раствора). После инкубации на вод ной бане при в течение 3 ч клетки трижды отмывают физиологическим раствором рН 7,2, ресуспензируют в 10 мл того же раствора и инкубируют на вод ной бане при 56°С в течение 1 ч, после этого

0 взвесь развод т физиологическим раствором рН;7.,2 до густоты 10 ед по

стандарту,добавл ют мертиол т в концентрации 1:10000 и хран т при 4°С, использу  при необходимости в каче5 стве антигена дл  РСК.

Кровь у больных берут из локтевой вены в количестве 5 мл и готов т сыворотку по общеприн той методике. При необходимости сыворотку мож.но хранить при - 20°С в течение 2 мес. без снижени  титра антител.

Эритроциты барана дл  постановки РСК хран т при 4С в растворе Алсевера , содержащем О,5% сульфацила-натс Ри  и 0,15% левомицетина, в течение 2 мес. без признаков гемолиза и бактериального роста. Комплемент дл  реакции титруют в День постановки опыта. РСК став т на холоде по общеприн той методике в объеме 0,5 мл, использу  полистироловые панели дл  титровани . Первым разведением сывороток больного  вл етс  1:4. Одна рабоча  доза антигена содержитс  в .0,г мл взвеси клеток штамма 090R

5 густотой 10 ед по стандарту.

Предлагаекым способом было обследовано 95 больных ревматоидным артритом с различной давностью заболеваний .

0 Таким образом, способ  вл етс  эффективным дл  дифференциальной диагностики ревматоидного артрита на ранних стади х, что подтверждаетс  данными таблицы.

25

20

13

96

92,31 95

28,76± 26,91+ 13,54± 1,35 1,27 1,16

30

21

50

66,67

86,49

2,35±

3,28t 1,13 1,14

310760894 ,

При обследовании группы из 34С-реактивный белок вы влен в 44,71±

больных ревматоидным артритом с дав-tl0,37% случаев. Разница между частоностью заболевани  до 1 года анти-. ° вы влени  антител к стрептококтела к клеткам штамма 090R, обрабо-ку и других патологических признатанным пепсином, вы влены в &7,5±6,9%ко статистически достоверна, случаев, повышенный титр ревматоид- 5 Применение изобретени  позвол ного фактора в 56,4б±10,3% случаей, .ет повысить специфичность и чувстповышенное содержание нейраминовойвительность способа диагностики

кислоты в 51,92+10,42% случаев иiревматоидного артрита.

Claims (1)

1. СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ РАННЕЙ СТАДИИ РЕВМАТОИДНОГО АРТРИТА путем определения в сыворотке крови больного антител к цельным клеткам β-гемолитического стрептококка группы В, штамм 090R, в серологической реакции с последующим учетом результатов, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности и чувствительности способа, микробные клетки перед постановкой реакции обрабатывают раствором пепсина в течение 3±0,1 ч, антитела определяют в реакции связывания комплемента.