SU1056901A3 - Способ получени сесквитерпеновых производных или их солей - Google Patents

Abstract

Способ получени  сесквитерпено вых со.единений общей формулы - o-rvft: . Н( СНо Где RI - формильна .группа; Rj - карбоксильна  группа,, или R,«Rf внесте с атомами углерода бензольного кольца, с которым они св заны, образуют .лактоновое; кольцо но или их солей, о т л и ч а ю щ и и .т с   тем, что соединение формулы

Description

который  вл етс  характеристическим сигналом лакто;а. Интегральное соотношение -первого пика ко второму составл ет примерно 73:27. Через 2 после растворени  пик при 9,89 млн. дол. несколько увеличиваетс , интегральное соотношение пико достигает примерно 70:30. Такое интегральное соотношение достигаетс  через 2 ч после растворени , едва измен  сь после этого. Этот результат показывает что соединение (ГЪ;,) и соединение (Ib) наход тс  в равновесной смеси 7:3 в указанном растворителе . При. использовании в качестве растворител  метанола или пи ридина подобный ЯМР-спектроскопический анализ не приводит к конформаци соединени  () , которое  вл етс  таутомером соединени  (1Ъ.| ) .

П р и ,м е р 1. Раствор ют 2,1. г нитрата серебра в 1 мл воды и прибавл ют 3,5 мл 5,8 М водного .раствора гидроокиси натри . Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем прибавл ют раствор 1,0 г 6,7-дйокси-2,5, 5,8атетраметил-1 , 2, 3, 4, 4а, 5, 6., 7, 8, 8аг-декагидронафталин-1-спиро-2 (6,-7-диформил-4-окси-2, 3-дигидробензофурана ) в 2 мл этанола. Реакционную смесь перемешивают при Комнатной температуре в течение 1,5 ч, устанавливают рН равным, .примерно, 2 с помощью 2 н. сол ной кислоты. Реакционную смесь экстраги . руют таким же количеством по объёму этилацетата, отгон ют растворитель из экстракта при пониженном давлении . Остаток очищают хроматографией на колонке с силикагелем (ей .ликагель WaKo С-200), элюентом  вл етс  смесь хлорофррм-этил-ацета уксусна  кислота 100:50:2 (по объему ). Собирают фракцию, соответствующую Rf 0,37 при тонкослойной хроматографии, использу  смесь этил ацетат-хлороформ-уксусна  кислота в объемном соотношении 50:50:2 в качестве про вл ющего агента, или фракцию, соответствующую R 0,71 при тонкослойной хроматографии с использованием смеси бензол-бутанолуксусна  кислота в объемном соот-ношении 60:15:1 в качестве про вл гацего агента. Выпариванием растворител  из фракции получают 700 мг 4,6-диокси-8-оксо-2,3, 6, 8-тетрагндрофуро- (3,4-о)-бeнзoфypaн-2cшIpo-l .-(6 , 7-диокси-2, 5, 5|-8-тетраметил-1, , 4, 4а, 5, 6, 7, 8, 8а-декагидронафталина в виде светло-желтых аморфных кристаллов.

б.|з°-44,8°/. С 0,9, метанол) Элементный анализ дл  С зНзоО. Вычислено, %:: С 66,03; Н 7,18.

Найдено, %: б 65,93; Н 7,21.

() ЯМР - анализ проведен с использованием СД,ОД (Д55) в качестве растворител .

(ii) ЯМР - анализ проведен с использованием пиридина d (Две) в качестве растворител .

(iii ) ЯМР - анализ провод т через 2 ч и через 63 ч после растворени  (ЯМР - спектры через 2 .ч и через 63 ч после растворени  согласуютс  друг с другом).

В качестве растворител  используют диметилсульфоксид

Услови  измерени  при получении ЯМР - спектра следующие:

Спектральна ...

амплитуда9-100 5Г100 8«ДОО

Фильтр, С0,10/1 0,4

Рр мощность ,Q0,05 0,05 0,05 Врем  развертки ,

мин555

1 ирина развертки,

млн. дол.101010

Конец развертки , млн.дол,.000

I

Пример 2. Суспендируют 0,64 г окиси серебра в 1 н. водном растворе гидроокиси натри  и прибавл ют при перемешивании при комнатнСй температуре 1,0 г 6,7-диокси2 ,5, 5, 8а-.тетраметил-1, 2, 3, 4, 4а, 5, 6, 7, 8, 8а-декагидронафтаЛИН-1-СПИРО-2- (6, 7-диформил-4окси-2 , 3-дигидробензофуран.а) . Смесь перемешивают при этой же температуре в .течение 1 ч и промывают осадок 5 раз в 10 мл воды. Объедин ют промывные воды и фильтрат и прибавл ют концентрированную сол ную кислоту (36%) , устанавлива  рН 2-3 с последующим охлажден твм до 0-10°С. Собирают выпавшие кристаллы фильтрованием, промывают 5 раз в 10 мл лед ной воды и сушат. : Раствор ют сухие пороппсообразные кристаллы в 50 мл этилацетата,. от;Дел ют нерастворимый материал фильтрованием . Концентрируют фи.льтрат до объема 5 мл при пониженном давлении К концентрированному раствору приба .л ют 50 Ш1 лигронина, смесь хорошо перемешивают и оставл ют охлаждатьс до 0-10°С. Отфильтровывают выпавшие кристал.пы, дважды промывают их 20 м гидронина и сушат, получа  0,01 г 4,6-диокси-8-сксо-2, 3, 6, 8-тетрагидрофуро- (3, 4-0)-бензо-фуран-2- , спиро-1-(6, 7-диокси-2, 5, 5, 8а-тетраметил-1,-2, 3, 4, 4а56 , 7, 8, 8а-дакагидронафталина ) . Физико-химические свойства пол енного соединени  аналогичны приве денным в примере 1. Пример 3. Раствор ют 1,0 г 6,7 диокси-2, 5, 5, 8а-тетраметил1 ,2, 3, 4, 4а, 5, б, 7, 8, 8а-дека гидронафталин-1-спиро-2-(б,7-диформил-4-окси-2 , 3дигидробензофу рана) в 50 мл 10%-ного водного раствора гидроокиси натри  и в та г.е врем  пропускакэт через раствор возд при 50 С. раствор перемешивают в течение 30 мин, подкисл ют сол ной кислотой до рН 2-3, выпавшие кристал лы отфильтровывают. Кристаллы промы вают io мл холодной воды 5 раз и сушат . Раствор ют кристаллы в 50 мл этилацетата и отдел ют нерастворимый материал фильтрованием. Обрабатываю фильтрат активированным углем и кон центрируют до объема 5 мл при понижен-1ЮМ давлении. Концентрированный растп вор .. прибавл ют к 50 мл лигронина при интенсивном перемешивании. Выпавшие в осадок кристаллы собирают фильтрованием , промывают лигроином и сушат Получают 0,72 г 4,б-диокси-8-оксо2 ,3, б, 8-тетрагидрофуро-(3, 4-)- бензофуран-2-спиро-1-(6, 7-диокси 2, 5, 5, 8а-тетраметил-1, 2, 3, 4а, 5, б, 7, 8, 8а-декагидронафталина ). Физико-химические свойства полученного соединени  аналогичны приведенным в примере 1. П р и м е р 4. Раствор ют 1,0 г б, 7-диокси-2, 5, 5, 8а-тетраметил1 , 2, 3,-4-43-5, б, 7, 8, 8а-декагид ронафталин-1-спиро,2,-(б, 7-диформил-4-окси-2 , 3-дигидробензофурана ) в 25 мл 1 Н. водного рас-твора гидроокиси кали  и прибавл ют 50 мл водного раствора 0,578 г перманганат кали  част ми при перемешивании. После исчезновени  окраски перманганата кали  прекращают перемешивание Отфильтровывают осадок, использу селлаит в качестве вспомогательного вещества дл  фильтровани . Фильтрат подкисл ют сол ной кислотой до рН 2Отфильтровывают выпавшие в осадок кристаллы, промывают 10 мл воды 3 раза и затем сумат. .Высушенные кристаллы раствор ют в 30 мл этилацетата . Отфильтровывают нерастворимый материал, фильтрат обесцвечивают и концентрируют при пониженном давлении. К концентрированному раствору прибавл ют 50 мл лигроина и перемешивают смесь. Отфильтровывают выпавилие в осадок кристаллы, промывают лигроином и сушат при при пониженном давлении. Получают 0,9 г 4,б-диокси-8-оксо-2 , 3б ,. 8-тетрагидрофуро-(3 , 4-g)-бензофу ран-2-спиро-1- (6, 7-ДИОКСИ-2, 5-, 5, 8а-тетраметил-1 , 2, 3, 4, 4а, 5, б, 7, 8, 8а-декагидронафталина (11, Физико-х гмичешские свойства полученного соединени  аналогичны приведенным в примере 1. Пример 5. К 5 мл 0,4 н. водного раствора гидроокиси натри  и 5 мл этанола прибавл ют 418 мг 4,6-ДИОКСИ-8-ОКСО-2, 3, б, 8-тетрагидрофуро- (3, 4-)-бензофуран-2, спиро-1-(б, 7-диокси-2, 5, 5, 8а-декагидронафталина). Смесь перемешивают при 30-40 0 в течение 30 мин в токе азота. После реакции отгон ют растворитель при пониженном давлении. Остаток сушат, затем и прибавл ют туда 10 мл ацетона. Отфильтровывают часть, растворимую в ацетоне. Оставшиес  сырые кристаллы перекристаллизовЕлвают из смеси вода-ацетон. Получают 342 мг динатриевой соли б., 7-ДИОКСИ-2, 5, 5, 8атетраметил-1 , 2, 3, 4, 4а, 5, б, 7, 8, 8а-декагидронафталин-1-спиро-2- (7-карбоксилат-б-формил-4-оксид-2 , 3-дигидробензофурана в виде светло-желтых аморфныз кристаллов: 44,2°(С -1,25, НгО). Элементный анализ дл  Вычислено, %:С 59,74; Н 6,10. Найдено, %: С 59,48; Н 5,91. Ультра-фиолетовый спектральный анализ: Н,О 252. нм ( 20500) ,51моисс 330 нм { е 45900). ЯМР-анализ провод т, использу  (flSS) в качестве растворител . Услови  ЯМР-измерений следующие: спектральна  амплитуда 9-100; врем  развертки 5 мин; фильтр 0,1 с,ширина развертки 10 м.лн, дол.; PF мощность 0,05 мС; конец развертки О млн.дол. Пример б. Раствор ют в 10 мл этилацетата 418 мг 4,6-диокси8-ОКСО-2 , З-б, 8-тетрагидрофуро- (3 , 4-)-бензофуран-2-спиро-1-(б, 7 -диокси-2 ,5 ,5 ,8 а-тетраметил-1 ,2 ,2 ,4 ,4 а, 5 , б , 7, 8, 8а-д екагидронафталина) и при перемешивании прибавл ют 0,33 моль б н. водного раствора гидроокиси натри . Смесь перемешивают 10 мин в токе азота. Отфильтровывают выпавшие кристаллы, промывают их три раза 10 мл зтилацетата и сушат. Получают 390 мг динатриевой соли б, 7диокси-2 , 5, 5, 8а-тетраметил-1, 2, 3, 4, 4а, 5, б, 7,,8, 8а, декагидронаф алин-1-спиро-2-{7-карбоксилат-б-формил-4-оксид-2 , 3-дигидробензофурана ( 1Ь ) в виде светло-желтых аморфных кристаллов. Физико-химические свойства полученного соединени  аналогичны приведенным в примере 5. Термин комплемент относитс  к комплексной группе протеинов в жидкост х тела, котора , работа  вместе с антителсши и другими факфорами , играет важную роль как переносчик иммунных, аллергических, иммунохимических и/или иммунопатологических реакций. Реакции, в которых ,участвует комплемент, происход т в сьюоротке крови или в других жидкост х тела и, следовательно, рассмариваютс  как гуморальные реакции.

Известны соединени , обладающие антикомплементарной активностью, такие как этилендиаминотетрауксусна  кислота (ЭДТУК), Сальдокс, флоризин оксибензольные производные, гуанидины и феноксиацетс1миды, фосфонатные эфиры, хлорофиллин, глицирризин и т.п..

Однако эти соединени   вл ютс  неудовлетворительными дл  практических целей, так как  вл ютс  высокотоксичными или обладают низкой антикомплементарной активностью. В насто щее врем  не имеетс  коммерчески, доступных антикомплементарных соединений или агентов.

Терапевтические агенты. Полученные сесквитерпеновые производные ;общей формулы (I) и их соли  вл  ютс  полезными как препараты дл  лечени  нефрита. В этом случае их ввод т в фармацевтические рецептуры вместе с обычными фармацевтическими приемлемыми носител ми, которыми  вл ютс , например, разбавители или экципиенты, такие как наполнители, расширители, св -зующие, смачивающие агенты, дезинтеграторы, поверхностно-активные агенты и смазки, которые обычно примен ют дл  приготовлени  лекарств, завис щих от способа введени  единичных форм дезы.

Дл  лечени  могут быть выбраны .в соответствии с целью лечени  различные формы дозы и способы введени  лекарства как средства лечени  нефрита. Типичными формами дозы | вл ютс  таблетки, пилюли, порошки, :жидкие препараты, суспензии, эмульсии гранулы, капсулы, свечи и препараты дл  инъекции жидкости, суспензии, эмульсии и т.п.

При формовании фармацевтического состава в виде таблетки, содержащей сесквитерпеновое производное общей формулы (I) или его соль в качестве активного ингредиента, можно использовать широкий ассортимент известных носителей. Примерами подход щих носителей  вл ютс  экципиёнтй f лактоза , сахароза, элористый натрий, раствор глюкозы, мочевина, крахмал, карбонат кальци , каолин, кристалл .ическа  целлюлоза и кремниева  кислота ), св зующие (вода, этанол, прогпансл , простой сироп, глюкоза, крахмальный раствор, раствор желатина, карбоксиметилцеллюлоза, шеллак, метилцеллюлоза, фосфат кали  и поли

винилпирролидон), дезинтегрирующие агенты (сухой крахмал, альдегид натри , агаровый порошок, порошок ламинарии, кислый карбонат натри , Твин, лаурилсульфат натри , моноглицерид стеариновой кислоты, крахмал и лактоза), ингибиторы дезинтегрирог вани  (сахароза, глицериновый эфир стеариновой кислоты, крахмал, масло, какао и гидрированные масла), проматоры абсорбции (четвертичные аммониевые основани  и лаурилсульфат натри  задерживающие увлажнение агенты (глицерин и крахмал), абсорбенты .(крахмал, лактоза, каолин, бентонит и коллоидна  кремниева  кислота) и смазки (очищенный.тальк, соли стеариновой кислоты, порошок борной кислоты).

При формовании фармадевт1;ческого состава в виде пилюль может быть использован широкий ассортимент известных носителей. Примерами подход щих носителей  вл ютс  экципиенты (глюкоза, лактоза, крахмал, масло какао, отвержденные. .растительные масла, каолин и тальк), св зующие (порошок аравийской камеди, порошок трагаканта, желатин и этанол) и дизентегрируквдие агенты (ламинари  и агар). Пилюли и таблетки могут быт покрыты сахаром, желатином, пленкой могут быть покрыты двум  или более сло ми.

При формовании фармацевтического состава в виде свечей может быть использован широкий ассортимент известных носителей, например, масло, какао, высшие спирты, сложные эфиры высших спиртов, желатин и поусинтетические глицериды.

Когда из фармацевтического состав готов т препарат дл  инъекций, полученный жидкий раствор или суспензию предпочтительно стерилизуют и они  вл ютс  изотоническими по отнЬц1ению к крови. При формулировании фармацевтического состава в виде раствора суспензии или эмульсии могут быть использованы любые известные разбавители , например вода, этанол, пропиленглнколь , этоксилированный изостеарйловый спирт, полиоксиэтиленсорбит и сорбитановые сложные эфиры В терапевтический нефритовый агент могут быть введены хлористый,натрий глюкоза или глицерин в количестве, достаточном дл  получени  изотонических растворов. Кроме того, терапевтический агент может содержать обычные растворимые вспомогательные вещества, /буферы, болеутол ющие аген и консерванты, в некоторых случа х могут быть введены окрашивающие агенты отдушки, ароматизирующие вещес гва, подслащивателии другие ,лекарства. Количество соединени  общей форм ( ) или его фармацевтически приемл мых солей, которое в качестве актив ного ингредиента может быть введено в фармацевтический состав, полезный при лечении нефрита, не ограничива етс  и может мен тьс  в очень широк пределах. Поигодньм терапевтически эффективным количеством обычно  вл етс  1-70% от веса, предпочтитель но 5-50% от веса всего состава. Не имеетс  особых ограничений по способу применени  терапевтического агента как агента дл  лечени  нейри та. Терапевтический агент может быт введен любым способом, пригодным дл  конкретной формы терапевтическо го агента. Например, таблетки ,пилкши жидкие препараты, суспензии, эмульсии , гранулы и капсулы принимаютс  орально. Препараты дл  инъекций вво д т внутривенно одни или вместе с обычными вспомогательными агентами (глюкоза и аминокислоты). Кроме тог если требуетс , терапевтический агент может быть введен просто внут римымечнр, внутрикожно, подкожно ил в нутрибрюшинно. Дозировка лекарства дл  лечени  нефрита обычно выбираетс  в соответствии с целью использовани , си птомами и т.п. Дозировка соединени  формулы (1 ) 0,5-20 мг/кг веса тела в день, в одной или нескольких дозах. Соединени  .формулы (I) обладают антикомплиментарными активност ми и  вл ютс  полезными также как терапевтические агенты дл  лечени  ауто-иммунных болезней, коллагеновых заболеваний и ревматизма. Результаты испытаний .фармакологических действий соединений общей формулы ( I) и их солей. Испытуемое соединение ( 1Ь ) (ди натриева  соль) имеет различные заместители: R,-( (-COONol. Лнтйкомплиментарна  активность. измерена и подтверждена с помощью испытательной методики. В частности , в испытуемую-трубку загружали 0,5 мл водной дисперсии каждого из испытуемый соединений, 0,5 мл иммунных частиц (ЕА) , ,.,соде-ржащих 1-10 клеток/мл, 1 мл 5-кратно разбавленного раствора Веронального буферного раствора (GvB ), содер жащего изотонический желатин и 0,5 мл комплементной сыворотки (cj.p. с.), разбавленной в 150 pa3QVP-+ разбавленной жидкостью. Смесь выдерживают нагретой ,до в течени 60 мин. Затем прибавл ют 5 мл. охлажденного на льду физиологического солевого раствора. Смесь центрифугируют . Измер ют адсорбцию всплывшего сло  отделенного при и опт редел ют продолжительность инг бировани  гемолиза иммунных частиц испытуемым соединением. В табл.1 приведена величин активности . 50%-ного ингибировани  гемолиза Y (мл), измеренна  указанным методом. Остра  токсичность. ВеличиныШ ) дл  испытуемых соединений при оральном введении дл  крыс приведены в. табл. 1. Терапевтическое действие на нефрит нефротоксинного типа. Кору почки крысы гомогенизируют в равном количестве физиологического раствора. Гомогенизированную смесь смешивают с комплексной вспомогательной добавкой фрейнда (продукт кoIvu aнии Дифко) в объемном соотношении 1:1. Инжектируют 2 мл полученной смеси внутримышечно кролику (масса тела 3100 г) дл  иммунизации. Через 1,5 мес берут кровь из средца кролика и готов т сыворотку. Полученную сыворотку инактивируют при 5б°С в течение 30. . ((затем высаливают 40%-ным насыщен-, ным водным раствором сульфата аммони  и фракционируют. Собирают фракцию иммуноглобулин-у-глобулина (IgG ) , чтобы получить НТ. Подвод т оценку, использу  самцов крыс Вистар весом от 150 до 160 г. Дл  каждого соединени  делают три репликации. Испытуемое соединение ввод т.внутрибрюшинно, один раз каждые 24 ч в течение 7 дн. Спуст  1 ч после введени  испытуемого- соединени  на третий день примен ют НТ. НТ инжектируют внутривенно в количестве 1 мл в хвостовую вену каждой крысы. В качестве сравнительного соединени  используют хлорофиллин (СР), а дл  контрол  физиологический солевой раствор. Измер ют общий уровень протеинмочевины в общем количестве мочи, выделенной за 24 ч, турбидиметрическим методом, примен   бычий сывороточный альбумин в качестве контрол  в сочетании с сульфосалициловой кислотой. Полученные результаты приведены в табл.2. Каждое из испытуемых соединений, указанных в табл.3, вводили внутрибрюшинно крысам больным нефритом типа Гейманна (все тела от 300 до 350 г) один раз в день в течение 7 дн. , а затем измер ли количество протеинмочевины , мг/день, как описано выше. СР использовали дл  сравнени , а дл  контрол  использовали физиологический раствор. Дл  каждого испытуемогр соединени  делали три репли кации. Полученные результаты приведены в табл.З. Уровень протеинмочевины у здоровбп крысы составл ет от О ,5 до 5 кг/дн Когда уровень протеинкочевины превыш ет этот интервал становитс  больше 10 мг/дн., можно с уверенностью сказать, что возник нефрит. Как видно из результатов табл.2, нефрит встречаетс  в контрольной группе. 3 других группах количество протеин ючевины через 10 дн. после введени  вл етс  по существу таким J.e, как у здоровой крысы. Следовательно, введение предлагаемых соединений ингибирует первичную и вторичную ре акции. Когда такой же тест проводили с пре лагаемыми соединени м было обнаружено ,что все они ингибируют первичную ре акцию нефрита нефротоксинного типа. Терапевтическое действие на нефрит типа Гейманна. В тесте были использованы самцы крыс Вистер весом от 180 до 200 г. Кора почки крысы была зкстрагирована и гомогенизирована с равным количеством по объему физиологического раствора. Гомогенат центрифугируют при 1500G- в теч ние 1 ч. Всплывший верхний слой очи щают и смешивают с комплектной вспо могательной добавкой Фрейнда 37R .в объемном соотношении 0,4:1. Получен ную смесь инжектируют внутрибрюшинн крысам в количестве 0,5 мл на крысу После этого такое же количество всп могательной добавки вводили каждые 2 нед. до тех пор, пока уровень про теин-мочевины не превысил 100 мг/дн (в течение 6-8 нед). Через 2-3 нед. после начала испы тани  вес тела крысы увеличиваетс  до 400-500 г и нормальный уровень протеинмочевины равен 5-15 мг/дн. Ка видно из результатов табл.3 предлага мые соединени  могут лечить нефрит типа Гейманна. Этот тест проводили с другими со динени ми формулы и также была найдена суЩственна  активность при лечении нефрита типа Геймана. Пример 7. В колбу Сакагуг-ш емкостью 500 мл загружают 100 мл культурной среды (состав приведен ниже) и Stack vj Ъ ot rijssp К-76 культив руют при 28°С и рН 6 в течение 4 дн со встр хиванием. Рецептура культур ной среды, %: Глицерин. 0,5 Крахмал1,0 Лактоза0,2 Порошкообразные соевые бобы0,5 Дрождевой экстракт0,1 Солодовый экстракт 0,2 , 0,3 yjg5O40,05. В 30-литровый сосуд дл  ферменации загружают 20 л культурной реды указанного состава. Одну колу результирующей высе нной культуы культивируют при температуре кульурной среды 28С в течение 5 дн. ри перемешивании со скоростью 400 об/мин и аэрировании, проводимом со скоростью 1 л на 1 л культурной среды в минуту. Результиругаций культурный бульон центрифугируют со скоростью 8000 об/мин дл  удалени  микробных клеток. В супернатант добавл ют 5 л метанола, смесь перемешивают и отстаивают в течение 3ч. месь центрифугируют и удал ют тверые частицы. Супернатант экстрагируют равным объемом этилацетата. Растворитель, этилацетатного сло - отгон ют при пониженном давлении. Остаток раствор ют в метаноле и пропускают через колонку с активированным углем. Элюат концентрируют до сухого остатка при пониженном давлении. Сухую массу раствор ют в смеси хлороформ - этилацетат 1:1 (по объему) и подвергают гель-фильтрации через колонку с Сефадексом LH-20. Фильтрат подвергают тонкослойной хроматографии (с использованием в качестве несущего растворител  смеси этилацетатхлороформ-уксусна  кислота в объемных соотношени х 50:50:2) и собирают фракцию с Rf 0,34, обладающую антикомплементарной активностью. В другом варианте фильтрат подвергают тонкослойной хроматографии (с использованием в качестве несущего растворител  смеси бензол - бутанолуксусна  кислота в объемных соотношени х 60:15:5) и собирают фракцию с. Rf 0,58, обладающую антикомплементарной активностью. Выпариванием растворител  из ф)акции получают . 2,0 г б ,7-диокси-2, 5, 5, 8атетр метил-1 , 2, 3, 4,-4а, 5, 6 7, В, 8а-декагидронафталин-1-спиро-2- (6, 7-диформил-4-окси-2, 3-дигидробензофурана), представл гадего собой бледно-желтое слабо-кислотное соединение, обладающее антикомплементарной активностью. Получение этого соединени  подтверждаетс  следующими физико-химическИми свойствами. 1 - Л8° (С 2,5, метанол). Элементный анализ дл  С.2з Н joOg . Вычислено, %: С 68,64; Н 7,51. Найдено, %: С 68,58; Н 7,55. Анализ ультрафиолетового спектра поглощени  (УФ): этанол .-р 246 им ( е 16474), г макс 307 нм ( е 6659). ЯМР-анализ проводили с использованием в качестве растворител  пиридина - ds (2,2-диметил-2-силапентан-5-сульфонат натри ) (ДСС) в качестве внешнего стандарта. Услови  измерени  ЯМР следукадие: Амплитуда спектра Фильтр, с ,0,1 Выход радиочастоты , МГц0,5 Врем  развертки, мин,5 Ширина развертки, млн, дол10 . Конец развертки, млн. дол.О Пример 8. В колбу Сакагуш емкостью 500 мл загружают 100 мл . культурной среды, имеющей представ ленную ниже рецептуру, и известный штамм5ЪасЬуЬоЬг1 5 cbartarum ИфО 5389 культивируют в среде при температуре 28 С в течение 4 дн. при рН 6 со встр хиванием. Рецепту ра культурной среды, %: Глицерин0,5 Крахмал , 1,0 Лактоза0,2 Порошок из соевых бобов0,5 Дрожжевой экстракт 0,1 Солодовый экстракт 0,2 СаСОэ0,3 MgS040,05 В 30-литровый сосуд дл  ции загружают 20 л культурной среды указанного состава и две колбы с р зультируют-тей высе нной культурой к тивируют, при 2Э°С в течение 5 дн. с перемешиванием со скоростью . 30 об/мин и при аэрировании, провод мо, со скоростью 1 л Мд 1 л Среды в минуту. Результирующий культурны бульон центрифугируют со скоростью БООС об/мин дл  удалени , микробных клеток. В супернатйнт добавл ют 5 л мета нола, смесь перемешивают и отстаива в течение 3 ч. Смесь центрифугируют и твердые частицы удал ют. Супернатант экстрагируют равным объемом этилацетата. Растворитель этилацета иого сло  удал ют при пониженном да лении, провод  концентрацию до сухо го остатка. Остаток раствбр ют в метаноле и пропускают через колонку с активированньм углем. Элюат концентрируют до сухого остатка при пониженном давлении, раствор ют в смеси хлороформа и этилацетата 1:1 (по объему) и подвергают Гель-филь рации Через колонку с Сефалексом LH-20. Собирают фракцию активного пика тонко-слойной хроматографии. Выпариванием растворител  получают 2,2 г {б,7-диокси-2,5,5,8а-тетрамётил 1 ,2/3,4,43,5,6,7,8, Ба-дакагиД роиафталин-1-спиро 2-/С6., 7 -дифор-т мил-4 -окси-2 ,;3 -дигидробензофура представл ющий собой бледно-желтое слабокислотное соединение, обладающее антикомплементарной активностью. Это соединение имеет физико-химические свойства аналогичны соединению в примере 1. Пример 9.Stachijbot ys5p.T.789 культивируют и очищают по примеру 7, за исключением того, что используетс  приведенна  ниже культурна  среда, рН которой 7,5, и температура культивировани  поддерживаетс  равной 32°С. Состав культурной среды, %: .Глицерин0, 5 Глюкоза1,2. Настойка пшеницы0,5 Сухие дрожжи0,1 Солодовый экстракт0,2 MtfSO 0,05 Nace0,3 Так получают 6,7-диокси-2,5,5,8а-тетраметил-1 ,2,3,4,4а,5,б,7,8,8a-дeкaгидpoнaфт .aлин-l-cпиpo-2 /(6 ,7-диформил-4-окси-2 ,3-дигидробензофуран ) , представл ющий собой светло-желтое слабокислотное соединение, имеющее антикомплементарную активность . Физико-химические свойства данного соединени  соответствуют свойствам соединени , полученного в примере 7, П р и мер lO.Stachijbotrys 3р- Т-791 культивируют и очищают по примеру 7, за исключением того, что культурна  среда имеет указанный ниже состав и ее рН довод т до 5,5, температура среды поддерживает с  равной . Состав культурной , %: Глицерин0,5. Крахмал1,0 Сахароза0,2 Порошок из соевых бобов0,5 . Цептон0,1 Солодовый экстракт0,2 jyigSO 0,3 нее0,05 Так получают б,7-диокси-2 ,5,5,8а-тетраметил-1,2-3,4,4а, 5, б, 7,8, 8а-декагидронафталин-1-спиро-2 -(6 ,7-диформил-4 гокси23-дигидробензофуран ), представл ющий собой бледно-желтое слабокислое соединение, обладаюцее антикомплементарной активностью. Физикохимические свойства данного соединени  соответствуют свойствам сое динени , полученного в примере 1. Пример 11. динатриевой соли соединени  ( ГЬ ). и 250 мл глюкозы раствор ют в дистиллированной воде дл  инъекций до общегр количества 5 мл. Раствор выливают в ампулу емкостью 5 мл. Ампулу продувают азотом и нагревают в течение 15 мин при 121 С дл  стерилизации раствора, чтобы получить препарат дл  инъекции. . Пример 12. Используют SOU мг соединени  (1Ь) 5 мг сульфита натри  и дистиллированную воду дл  инъекций до общегчэ количества ,5 мл. Препарат дл  инъкции готов т по методике примера 7. Пример 13. Используют 500 мг соединени  (ib), 5 мг сульфита натри  и дистиллированную воду дл  инъекций до общего количества 5мл. Готов т препарат дл  инъекции по методике примера 1. Пример 14. Используют 75Q соединени  (1Ь) и полусинтетическое глицеридное основание до общего количества 2000 мг. Прибавл ют соединение (1Ъ) к пол синтетическому глицеридному основан смешивают и суспендируют при .. Смесь помещают в форму и да:ют ей са мопроизвольно остыть. Продукт удал  ют и, таким образом, получают свечу Пример 15. Используют 750 мг соединени , полученного в примере 1, 90 мг витамина Е и полусинтетическое глицеридное основание до общего количества 2000 мг. Свечу готов т по методике примера 10. Пример 16. 150мг соедине ни  (1Ь) 40 г Авиула, (торговое наименсГвание продукта фирмы Асахи Ка Кабушихи Кайыа) ,. 30 г кукурузного крахмала и 2 г стеарата магни  Ьмешивают и измельчают, а затем таблетируют с помощью pound ег и ,йокрывают сахаром ( R 10 мм), Полу ченные таблетки покрьшают пленкой покрывающего агента, состо щего из 10 г ТС-5 (торговое наименование 1окс1шропилметилцеллглози 3 г полиэтилен гликол  6000 продукт фирмы Shinetsu Chem I nd),40 г касторового .масла и 40 г метанола дл  производст ва таблеток, покрытых пленкой. Пример 17. 100 г соединен ( 1,), 40 г Авиуала, 30 г кукурузно

Величина антикомплементарной

Испытуемое соединение активности у , мл

Та б л и- ц а

Be личина ID 50 мг/кг крахмала и 2 г стеарата магни  смешивают ,измельчсиот,таблетируют с помо щьюроиг }ер и покрывают сахаром С«{10 I«M}, Полученные таблетки покрывают пленкой из пленкообразующего агента, состо щего из 5,7 г сополимера метилакрилата метакриловой кислоты, 0,6 г триацетина и 50,4 г этонола, дл  образовани  кишеч.ных покрытых таблеток. Пример18.150г соединени  (1ь) 1 г лимонной кислоты, 33,5 г лактозы, 70 г дикальцийфосфата, ;30 г Плон Плуроник Г-68 и 15 г лаурилсульфата натри  смешивают. Смесь просеипают через сито 60 и подвергают влажному гранулированию со спиртовым раствором, состо щим из 15 г поливинилпирролидона, 4,5 г Карбовакса 1500 (полиэтиленгликоль) и 45 г Карбовакса 6000 (полиэтиленгликоль ) . В некоторых случа х прибавл ют этанол (подход щее количество ) дл  превращени  порсхика в пастооб-: разную массу. Прибавл ют 30 г кукурузного крахмала и продолжают смешивание до тех пор, пока не образуютс  однородные частицы. Частицы пропускают через сито № 10, помещенное в желоб, сушат в печи при 100°С в течение 12-14 ч. Высушенные частицы просеивают через сито 16 и смешивают с 3 г сухого лаурилсульфата натри  и 3 г сухого стеарата магни . Смесь прессуют в желаемую форму на таблетной машине. Полученные таким образом сердцег в.инки обрабатьшают лаком и обсыпают тальком, чтобы предохранить от поглощени  влаги. Сердцевинки покрывают первым слоем, а затем лаком требующеес  количество раз, дл  перорального введени . Чтобы полностью закруглить и сгладить таблетки снова нанос т первый и сглаживающий слой, а окрашивающее покрытие нанос т до тех пор, пока не получают желаемый цвет. После сугчки покрытие таблетки полируют дл  придани  таблеткам равномерного блеска.

60 40

1в CVi orphi)2in

500 . Примечание. Дни представл ют исгщтуемого соединейи , которое было за 1

Хлорофиллин

(с Ьавне кие)

Т а и ц а 2 собой счет, времени от применени  ч перед применением НТ. Та б-л и ц а 3

Продолжение табл. 3

Claims (1)

1. Способ получения сесквитерпено? вых со.единений общей формулы

   Где - формильная группа;

   Rj - карбоксильная группа, или вместе с атомами углерода бензольного кольца, с’ которым они связаны, образуют .лактоновоё] кольцо W .

   'или их солей, отличающий.το я тем, что соединение формулы ная группа, (•подвергают окислению окисляющим, агентом, таким как окись серебра или перманганат щелочного металла, при температуре окружающей среды в присутствии гидроокиси щелочного металла или кислородом, или воздухом в присутствии гидроокиси щелочного металла при 50°С, .