SK94296A3

SK94296A3 - Enzymic preparation

Info

Publication number: SK94296A3
Application number: SK942-96A
Authority: SK
Inventors: Percy Jaquess; Corral Fernando Del
Original assignee: Buckman Labor Inc
Priority date: 1994-01-21
Filing date: 1995-01-06
Publication date: 1997-06-04
Also published as: CZ214496A3; ES2196058T3; PT740697E; ATE238407T1; JP3636465B2; FI119189B; AU3503999A; DE69530477D1; ZA9410124B; BR9506620A; NO963019L; FI962922A; FI962922A0; US5474701A; NZ279645A; CN1081670C; JPH09510606A; CA2180366C; NO963019D0; CN1146215A

Description

Oblasť techniky _μ Vynálezom je prípravok a spôsob zníženia množstva esterov h acylglycerolu vo vode.

V r*

Doterajší stav techniky

Japonský patent č. 68011290 popisuje prísadu do kúpeľovej vody, kde aditívum obsahuje lipázu, určité množstvo amylázy a iné zložky.

Japonský patent č. 62175419 popisuje kúpeľové činidlo, ktoré poskytuje účinok kúpeľa s minerálnymi prameňmi a obsahuje proteázový enzým. Iecitin a blok rudného prášku, ktorý eluuje rôzne kovy. Rastlinné materiály spolu s umelými alebo prírodnými vôňami a anorganickými soľami sú taktiež pripojené do kúpeľového činidla.

Stabilizácia vodného enzýmového prípravku použitím určitých esterov sa popisuje Shaerom v US patente č. 4548727. Ester, ktorý sa použil ako stabilizátor, má vzorec RCOOR', kde R je alkyl s jedným až tromi uhlíkami * alebo vodík a R' je alkyl s jedným až šiestimi uhlíkami. Ester je prítomný vo vodnom enzýmovom prípravku v množstve od 0,1 do asi 2,5 % r hmotnoslných. Enzýmová zložka, ktorá sa podľa patentu používa, je komerčný enzýmový prípravok predávaný v suchom prášku, roztoku alebo suspenzii, obsahujúci od asi 2 percent do asi 80 percent aktívnych enzýmov a nosič je síran sodný alebo vápenatý, chlorid sodný, neiónové povrchovo aktívne látky alebo ich zmesi, tvoriace zvyšujúcich 20 až 98 percent.

Guilbert a spol., US patent č. 4243543 popisuje stabilizáciu detergentných prípravkov, obsahujúcich proteolytický enzým. Detergentné prípravky sa stabilizujú prídavkom antioxidantu a hydrofilného polyolu k prípravku na stabilizáciu pH prípravku.

Weber, US patent č. 4169817 popisuje kvapalný čistiaci prípravok, obsahujúci stabilizované enzýmy. Prípravok je vodný roztok, obsahujúci od z- 10 % do 50 % hmotnosti pevných látok a obsahujúci detergentné buildery, povrchovo aktívne činidlá, enzýmový systém odvodený od Bacillus subtilis a enzým stabilizujúci činidlo. Stabilizujúce činidlá obsahujú vo vode vysoko rozpustné sodné alebo draselné soli a/alebo vo vode rozpustné hydroxyalkoholy a umožňujú, aby sa roztok skladoval počas predĺženej doby bez deaktivácie enzýmov.

Dorrit a spol., európsky patent č. 0352244 A2 popisuje stabilizované detergentné prípravky použitím amfotemej povrchovo aktívnej látky.

Kaminsky a spol., US patent č. 4305837 popisujú stabilizované enzýmové prípravky, obsahujúce stabilizujúci systém vápenatých iónov a karboxylové kyseliny s nízkou molekulovou hmotnosťou a alkohol s nízkou molekulovou hmotnosťou. Tento stabilizovaný enzým sa použil v delergentnom prípravku. Prípravok môže obsahovať neiónové surfaktanty, ktoré majú vzorec RA(CH2CH2O)_nH, kde R je hydrofóbna skupina, A je na ľ, báze skupiny nesúcej atóm vodíka a n predstavuje priemerný počet ' etylénoxidových skupín. R typicky obsahuje od asi 8 do asi 22 atómov uhlíka, .4» ale môže sa vytvoriť kondenzáciou propylénoxidu so zlúčeninou s nižšou molekulovou hmotnosťou, pretože n sa zvyčajne mení od asi 2 do asi 24. Nízkomolekulový alkohol, ktorý sa použije, môže byť buď monosýtny alkohol, obsahujúci od 1 do 3 atómov uhlíka alebo polyol, obsahujúci od 2 do asi 6 atómov uhlíka a od 2 do asi 6 hydroxyskupín. Kaminsky a spol. uvádzajú, že polyoly môžu poskytovať zlepšenú enzýmovú stabilitu a zahrňujú propylénglykol, etylénglykol a glycerín.

Tai, US patent č. 4404115 popisuje vodný enzymatický kvapalný čistiaci prostriedok, ktorý obsahuje enzýmový stabilizátor, pentaborát alkalického kovu, prípadne so sulfitom alkalického kovu a/alebo polyolom.

Boskamp, US patent č. 452922 taktiež popisuje vodný enzymatický detergentný prípravok so stabilizátorom na báze boritej kyseliny alebo soli boritej kyseliny s poylolom alebo polyfunkčnú aminozlúčeninu spolu s redukujúcou soľou alkalického kovu. V podstate sa používajú rovnaké polyoly ako v práci Kaminsky a spol.

Cardinall a spol., európska patentová prihláška 0376705 popisuje kvapalný detergentný prípravok, obsahujúci päť podstatných zložiek, zahrnujúcich neiónový detergent, výhodne kondenzačné produkty alkoholov s etylénoxidom, lipolytický enzým, nižší alifatický alkohol, majúci 1—3 atómy uhlíka, soľ nižšej alifatickej kyseliny, obsahujúcu 1—3 atómy uhlíka a prateolytický enzým. Vynálezcovia prehlasujú, že dosiahli zlepšené uchovávanie a stabilitu lipolytických enzýmov v prípravku, obsahujúceho proteolytické enzýmy a kvapalné detergenty za prítomnosti nižšieho alifatického alkoholu a soli nižšej karboxylovej kyseliny ako je mravenčan sodný.

Vyvinuli sa rôzne stabilné úpravy pre rekreačné vody ako sú kúpele s minerálnymi prameňmi a kúpaliská, kde jednou zo spoločných charakteristík týchto úprav je ich

3a aktívna zložka, triacylglycerolester-hydroláza, bežnejšie nazývaná lipáza. Lipázy sú v prírode všade prítomné a v širokom rozsahu sa vyskytujú v živočíchoch, rastlinách a mikroorganizmoch. Lipázy sa môžu izolovať vo veľkom iba z vybraných zdrojov na komerčné použitie ako je slinivka prasiat a určité mikroorganizmy. Za účelom účinnejšej funkcie je potrebné, aby tieto úpravy boli netoxické, biodegradabilné a účinné pri odstraňovaní olejových usadenín zvyčajne sa nachádzajúcich v prostredí kúpalísk a/alebo kúpeľov s minerálnymi prameňmi.

Pretože existujú veľké rozdiely v typoch lipáz vzhľadom k ich špecifikám pri hydrolýze partikuiámyc'n esterových väzieb acylglycerolesterov, optimu pH, teplotnému optimu ako aj ich kapacite, aby boli účinné na rôzne acyigiyceroíésterové substráty a najmä triacylglycerol substráty, je dôležité formulovať lipázy nielen so správnymi stabilizátormi na udržanie výsledkov dobrej aktivity v priebehu dlhého skladovania a použitia produktov, ale aj so správnymi chrániacimi látkami a emulgačnými činidlami.

Vďaka vlastnosti lipáz hydrolyzovať esterové väzby iba na rozhraní medzi lipidom a vodou, zvolili sa lipidové emulgátory na zväčšenie povrchu acylglykolesterového substrátu a tým k zvýšeniu rýchlosti hydrolýzy. Ináč povedané, reakčná rýchlosť lipázy na hydrolýzu esterových väzieb závisí na stupni emulzifikácie substrátu.

V súlade s tým by bolo žiadúce získať enzýmový prípravok na zníženie alebo podstatné odstránenie alebo odstránenie acylglycerolesterov z vody a najmä rekreačnej vody ako sú kúpele s minerálnymi prameňmi alebo voda z bazénov so zložením, ktoré poskytne optimálne reakčné rýchlosti a pripadne stabilitu, t. j. zložením, ktoré obsahuje správny výber a rovnováhu medzi emulgačnými činidlami, stabilizátormi a pripadne chrániacimi látkami.

Podstata vynálezu

Predložený vynález je zameraný na nový prípravok a spôsob, ktorý v podstate odstraňuje jeden alebo viac z predchádzajúcich a ďalších problémov spôsobených obmedzeniami a nevýhodami príbuzného odboru. Špecifickejšie je predložený vynález zameraný na prípravok vhodný na zníženie a v mnohých prípadoch na podstatné odstránenie alebo odstránenie acylglykolesterov z vody a najmä rekreačnej vody ako je voda kúpeľov s liečebnými prameňmi alebo voda v bazénoch. Tieto enzýmové prípravky sú upravené tak, aby reagovali s vysokými rýchlosťami a tiež na ošetrenie rôznych acylglycerolesterových substrátov. Spôsob spracovania vody na zníženie alebo podstatné odstránenie alebo odstránenie acylglykolesterových materiálov z vody za použitia týchto formulácií je taktiež časťou vynálezu.

Ďalšie rysy a výhody vynálezu budú zrejmé z popisu, ktorý nasleduje a čiastočne budú zrejmé z popisu alebo môžu byť poznané pri praktickom uskutočnení vynálezu. Výhody vynálezu sa získajú a uskutočnia uvedeným prípravkom a metódou, zdôraznenou najmä v popise a nárokoch.

V súlade s týmito a ďalšími výhodami a v súlade s cieľom vynálezu, ako sa uskutočnil a obšime popísal, vyvinul sa nový prípravok na minimalizáciu alebo podstatné odstránenie acylglycerolesterov z vody a spôsob použitia týchto nových prípravkov.

Nový prípravok na zníženie alebo podstatné odstránenie alebo odstránenie acylglycerolesterov vo vode obsahuje.

(a) lipázový enzým, (b) neiônové emulgačné činidlo, obsahujúce alkoholetoxylatované emulgačné činidlo, (c) chrániacu vo vode rozpustnú organickú kyselinu, zahrňujúcu nenasýtenú organickú kyselinu, majúcu od 2 do asi 10 atómov uhlíka a od 1 do asi 2 karboxylové skupiny, a (d) vo vode rozpustný stabilizátor, zahrnujúci polyol alebo zmes polyolov, ktoré majú 2 až asi 6 atómov uhlíka a 2 až asi 6 hydruxylových skupín,

Zistilo sa, že prípravok je účinný, najmä ak je

5a upravený tak, aby mal pH v rozmedzí od asi 3_:5 do asi 6_:8.

V inom uskutočnení sa lipázový enzým prípadne kombinuje s ďalším enzýmom, kde uvedený ďalší enzým je fosfolipáza, proteáza, amyláza, celuláza, pektináza, beta-glukanáza, izomeráza alebo redox enzým.

Vo vode rozpustnou organickou kyselinou ako chrániacou látkou môže byť kyselina sorbová a vo vode rozpustným stabilizátorom môže byť glycerín.

Lipázový enzým, neiónové emulgačné činidlo, vo vode rozpustná organická kyselina je chrániaca látka a vo vode rozpustný stabilizátor v ďalšom uskutočnení sú v podstate bibdegradabilné a v podstate netoxické.

Emulgačné činidlo môže byť neiónový alkoholetoxylátový kondenzačný produkt v podstate lineárneho alkoholu, ktorý má od asi 9 do asi 15 uhlíkov a etylénoxia v takom množstve, že uvedený etylénoxid je prítomný ako polyoxyetylénová skupina v množstve väčšom ako asi 50 mol % uvedeného alkoholetoxylátu, kde uvedený alkoholetoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.

Preferované neiónové emulgačné činidlo obsahuje v podstate lineárny C-|2'Cl5 alebo Cg-Cj jalkoholetoxylát, ktorý má asi 6 až asi 9,0 mol v priemere etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132, HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 -'C do asi 74 °C, bod tuhnutia od asi 7 *C do asi 24 ’C, bod vzplanutia od asi 168 ^eC do asi 188 °C a špecifickú hustotu od asi 0.967 do asi 0,991.

5b

Príklad neiónové'no emulgačného činidla zahrňuje v podstate lineárny C^-Cisalkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 7,2 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť asi 619, hydroxylové číslo asi 108. HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 °C, bod tuhnutia asi 21 °C, bod vzplanutia asi 177 ^eC a špecifickú hustotu asi 0,967.

Tieto prípravky zahrňujú aikylénoxiaové kondenzačné produkty, ktoré poskytujú spojenie oleja s vodou a majú vzorec:

RX(CH₂CH₂O)_nH kde molekulová hmotnosť emugačného činidla je v takom rozmedzí, že emulgačné činidlo je rozpustné vo vode pri teplote aspoň asi 10 °C a vyššej, kde R je oleofilná skupina, zahrňujúca:

(a) lineárny alkoholát s dostačujúcou molekulovou hmotnosťou preto, aby bol oleofilný a prípadne obsahoval určité alkylové rozvetvenie, ' (b) alkylfenol, (c) polyéter, kde uvedený polyéter je polyoxypropylénová skupina alebo bloková alebo heterická zmes polyoxypropylénových a polyoxyetylénových skupín,

X môže byť buď kyslík, dusík alebo síra, n je priemerný počet oxyetylénových jednotiek v hydrofilnej skupine a je väčší ako asi 5 na udelenie rozpustnosti vo vode uvedenému emulgačnému činidlu, hydrofilná skupina -(CH₂CH₂O)_n- tvorí viac ako asi 50 mol percent emulgačného činidla a pripadne obsahuje heterickú alebo blokovú zmes opakujúcich sa oxyetylénových skupín a oxypropylénových skupín.

Vynález tak zahrňuje jednak nový prípravok na zníženie alebo podstatné odstránenie alebo odstránenie acylglycerolesterov vo vode ako aj spôsob uskutočnenia takéhoto postupu, kde prípravok obsahuje enzým lipázu, neiónové emulgačné činidlo, vo vode rozpustnú organickú kyselinu ako chrániacu látku a vo vode rozpustný stabilizátor.

Enzým lipáza sa môže použiť sám alebo v kombinácii s inými enzýmami, takže lipáza bude tvoriť ľubovoľne od asi 100 % hmotn. alebo menej enzýmu ktorý sa použije v prípravku, kde je lipáza prítomná v takom množstve, že je účinná na podstatnú hydrolýzu lipidového materiálu, ktorý sa spracováva.

Napríklad sa môžu taktiež použiť fosfolipázy. Lipázy a fosfolipázy sú esterázové enzýmy, ktoré hydrolyzujú tuky a oleje napádaním esterových väzieb v týchto zlúčeninách. Lipázy pôsobia na triglyceridy zatiaľ čo fosfolipázy pôsobia na fosfolipidy. V priemyselnej oblasti predstavujú lipázy a fosfolipázy komerčne dostupné esterázy. Novo Nordisk ponúka dva kvapalné lipázové prípravky pod názvom Resinase™ a Resinase™ A 2X.

Dostupné sú komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce lipázy. Napríklad sú takéto prípravky dostupné pod ochrannými názvami Lipolase 100, Greasex 50L, Palatase^IMA, Palatase™M a Lipozyme™, ktoré všetky sú dodávané firmou Novo Nordisk.

Pankreatická fosfolipáza A2 sa môže použiť a je dostupná v kvapalnom enzymatickom prípravku predávanom ako LECITASE™ od Novo Nordisk. Iné enzýmy, ktoré sa môžu použiť s akoukoľvek z lipáz sú uvedené ďalej.

Proteázy sú dobre známou triedou enzýmov, ktoré sa často používajú v mnohých priemyselných aplikáciách, kde spôsobujú hydrolýzu peptidových väzieb v proteinoch a proteínových substrátoch. Proteázy sa používajú preto, aby pomáhali odstraňovať škvrny na báze proteínov ako sú krvné alebo vaječné škvrny. Kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce alkalické proteázy sa tiež ukázali vhodné ako disperzanty bakteriálnych filmov a povlakov riasami a hubami vo vodných chladiacich vežiach a skládkach kvapalín z metalurgického priemyslu.

Proteázy sa môžu charakterizovať ako kyslé, neutrálne alebo alkalické proteázy v závislosti na rozsahu pH, v ktorom sú aktívne. Kyslé proteázy zahrňujú mikrobiálne syridlá, renin (chymozín), pepsín a fungálne kyslé proteázy. Neutrálne proteázy zahrnujú trypsín, papain, bromelain/ficin, a bakteriálnu neutrálnu proteázu. Alkalické proteázy zahrňujú substilizín a príbuzné proteázy. Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce proteázy sú dostupné pod názvami Rennilase®, PTN (Pancreatic Trypsín NOVO), PEM (Proteolytic Enzýme Mixture), Neutrase®, Alcalase®, Esperase® a Savinase®, ktoré všetky dodáva Novo Nordisk Bioindustrials, Inc. z Danbury. CT. Ďalšia komerčná proteäza je dostupná pod menom HT-Proteolytic, dodávaná Solvay Enzýme Products.

Amylázy, ďalšia trieda enzýmov, sa taktiež využívajú v mnohých priemyselných a komerčných postupoch v ktorých katalýzujú alebo urýchľujú hydrolýzu škrobu. Trieda amyiáz zahrnuje a-amylázu, β-amylázu, amylglukozidázu (glukoamylázu), fungálnu amylázu a pullulanázu. Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce amylázy sú dostupné pod názvami BAN, Termamyl®, AMG, Fungamyl® a Promozyme®, ktoré dodáva Novo Nordisk a Diazyme L-200, produkt Solvay Enzýme Products.

Ďalšie komerčne cenné triedy enzýmov sú tie., ktoré hydrolýzujú vlákna. Tieto triedy zahrňujú celulázy, hemicelulázy, pektinázy a β-gíukanázy. Celulázy sú enzýmy, ktoré degradujú celulózu, lineárny glukózový polymér vyskytujúci sa v bunkových stenách rastlín. Hemicelulázy sú zahrnuté v hydrolýze hemicelulôz, ktorá podobne ako celulóza, je polysacharid, nachádzajúci sa v rastlinách. Pektinázy sú enzýmy zahrnuté v degradácii pektínu, karbohydrátu ktorého hlavnou zložkou je cukrová kyselina, βGlukanázy sú enzýmy zahrnuté v hydrolýze β-glukanov, ktoré sú taktiež podobné celulóze tým, že sú to lineárne polyméry glukózy. Spoločne, celulázy zahrňujú endocelulázu, exocelulázu, exocelobiohydrolázu a celobiázu a na účel predloženého vynálezu budú taktiež zahrňovať hemicelulázu. Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce celulázy sú dostupné pod názvami Celluclast³ a Novozym³ 188, ktoré obidva dodáva Novo Nordisk.

Hemicelulázy, ktoré sa môžu použiť, zahrňujú xylanázy. PULPZYM³ produkt, dostupný od Novo Nordisk, a ECOPULP³produkt, dostupný od Alko Biotechnology, sú dva príklady komerčne dostupných enzymatických prípravkov, obsahujúcich enzýmy na báze xylanázy.

Ako trieda zahrňujú hemicelulázy zmes hemicelulázy a galaktomanázy. Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce hemicelulázy sú dostupné ako PULPZYM³ od Novo, ECOPULP³ od Alko Biotechnology a Novozym³280 a Gamanase¹. ktoré sú obidva produkty Novo Nordisk.

Pektinázy, ktoré sa môžu použiť, zahrnujú ena’opolygalaktouronázu, exopoiygalaktouronázu, endopektát lyázu (transelimináza), exopektát lyázu (transelimináza), a endopektinlyázu (transelimináza). Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce pektinázy, sú dostupné pod názvami Pectinex^,MUltra SP a Pectinex¹*, obidva dodávané Novo Nora’isk.

β-Glukanázy, ktoré sa môžu použiť, zahrňujú lichenous, laminaronázu a exoglukanázu. Komerčné kvapalné enzymatické prípravky, obsahujúce β-glukanázy, sú dostupné pod názvami Novozym®234, Cereflo®, BAN, Finizym® a Ceremix®, všetky dodáva Novo Nordisk.

Ďalšia komerčne cenná trieda enzýmov sú izomerázy, ktoré katalyzujú konverzné reakcie medzi izomérmi organických zlúčenín. Sweetzyme™ produkt je kvapalný enzymatický prípravok, obsahujúci glukózu izomerázu, ktorú dodáva Novo Nordisk.

Redox enzýmy sú enzýmy, ktoré pôsobia ako katalyzátory v chemických oxidačno/redukčných reakciách a v súvislosti s tým sú zahrnuté v rozklade a syntéze mnohých biochemikálií. V súčasnosti mnoho redoxenzýmov nezaujíma prominentné miesto v priemysle, pretože väčšina redox enzýmov vyžaduje prítomnosť kofaktora. Avšak tam, kde kofaktory sú integrálnou časťou enzýmu alebo nemusia sa dodávať, sú redox enzýmy komerčne použiteľné.

Môžu sa použiť redox enzýmy, glukóza oxidáza a lipoxidázy (lipoxygenázy). Iné redox enzýmy majú možné aplikácie v rozmedzí od enzymatickej syntézy steroidných derivátov po použitie v diagnostických testoch. Iné redox enzýmy zahrňujú peroxidázu, superoxid dismutázu, alkohol oxidázu, polyfenol oxidázu, xantin oxidázu, sulfhydryl oxidázu, hydroxylázy, choiesterol oxidázu, laccasu, alkohol dehydrogenázu a steroid dehydrogenázy.

Neiónovými emuigačnými činidlami, ktoré sa výhodne používajú, sú tie, ktoré sú alkylénoxidovými kondenzačnými produktami, ktoré uľahčujú spojenie oleja s vodou a všeobecne majú vzorec:

RX(CH₂CH2O)_nH kde molekulová hmotnosť emuigaôného činidia je v takom rozmedzí, že emulgačné činidlo je rozpustné vo vode pri teplote aspoň asi 10 °C a vyššej alebo od asi 10 °C do asi 40 'C alebo vyššej. Emulgačné činidlá, ktoré sú v podstate tiež netoxické a v podstate biodegradabilné, sú preferované.

Vo vyššie uvedenom vzorci je R lineárny alkoholát dostačujúcej molekulovej hmotnosti preto, aby bol oleofilný a v niektorých prípadoch obsahuje alkylové rozvetvenie. Alko'noláty, ktoré obsahujú minimálne alebo v podstate žiadne alkylové rozvetvenie sú preferované, pretože sú biodegraaabilnejšie ako alkoholály s alkylovým rozvetvením. Radikál R môže byť taktiež na báze alkylfenolu ako je nonylfenol alebo polyéter ako je polyoxypropylénová skupina alebo bloková hetero zmes polyoxypropylénových a polyoxyetylénových skupín. Vo vyššie uvedenom vzorci X môže byť buď kyslík, dusík alebo sira alebo iná funkčnosť schopná napojenia polyoxyetylénového reťazca k oleofilnej skupine R. Východiskové materiály, ktoré sa môžu použiť z tohto posledného hľadiska, zahrňujú sekundárne aminy, Nsubstituované amidy a rnerkaptány. Vo väčšine prípadov musí byť n, priemerný počet oxyetylénových jednotiek v hydrofilnej skupine väčší než asi 5 alebo asi 6 na udelenie dostatočnej rozpustnosti vo vode preto, aby sa materiál mohol použiť. V akomkoľvek prípade, hydrofilná skupina, (-CH2CH2O)_n-) bude obsahovať viac ako 50 mol percent emulgačného činidla a najmä od asi 50 mol percent do asi SO mol percent. Hydrofilná skupina môže pripadne obsahovať heterickú alebo blokovú zmes opakovania oxyetylénových skupín a oxypropylénových skupín.

Vhodné emulgačné činidlo, ktoré sa môže použiť podľa predloženého vynálezu obsahuje hyarofob na báze uhľovodíkovej skupiny alifatického monosýtneho alkoholu, ktorý je lineárny alebo v podstate lineárny a obsahuje od asi 9 do asi 15 atómov uhlíka, kde uhľovodíková skupina je pripojená k nemu cez väzbu éterového kyslíka, oxyetylénový reťazec alebo heterický alebo blokový zmesný reťazec oxyetylénových a 1,2-oxypropylénových skupín.

Monosýtny alkohol všeobecne obsahuje zmes alkoholov (výhodne tých v podstate so zvonovou krivkou štatistickej distribúcie), majúcich od asi 9 do asi 11 atómov uhlíka, od asi 12 do asi 15 atómov uhlíka, od asi 12 do asi 13 atómov uhlíka a od asi 11 do asi 15 atómov uhlíka. Tieto povrchovo aktívne látky, majúce hydrofilnú skupinu na báze oxyetylénových skupín, sú zvlášť výhodné. Pretože emulgačné činidlá, ktoré sú preferované podľa predloženého vynálezu sú tie, ktoré napomáhajú systémom olej vo vode, sú preferované tie emulgačné činidlá, ktoré majú vysokú HLB hodnotu (hydrofilne-lipofilnú rovnováhu) t. j. od asi 8 do asi 18. Tiež by tieto emulgačné činidlá mali mať molekulovú hmotnosť, vzťaženú na OH číslo, od asi 270 do asi 790 a najmä od asi 425 do asi 610, a hydroxylové číslo (mg KOH/g) od asi 71 do asi 208, najmä od asi 92 do asi 132. Rôzne emulgačné činidlá, ktoré sa môžu použiť z tohto hľadiska, zahrňujú NEODOL' rad od Shell chemical, zahrňujúci NEODOL 91, etoxylátového radu na báze zmesi lineárnych alkoholov s asi 9 až asi 11 atómami uhlíka,

NEODOL 25 etoxylátového radu na báze zmesi lineárnych alkoholov, obsahujúcich od asi 12 do asi 15 atómov uhlíka, NEODOL 23 etoxylátového radu na báze zmesi lineárnych alkoholov, obsahujúcich od asi 12 do asi 13 atómov uhlíka a NEODOL 45 etoxylátového radu, obsahujúci od asi 11 do asi 15 atómov uhlíka. Porovnateľné emuigačné činidlá sa môžu taktiež použiť a sú dostupné pod ochranným názvom ALFONIC® (Conoco), POLYTERGENT® (Olín), BRU³ (ICI AMERICAS), PLURAFAC® (BASF Wyandotte), SURFONIC® (Texaco) a TERGITOL® (Union Carbide). Zvlášť sú preferované emuigačné činidlá typu NEODOL 25.

V jednom uskutočnení je alkohol, etoxylátové emuigačné činidlo, kondenzačný produkt v podstate lineárneho alkoholu, majúceho od asi 9 do asi 15 uhlíkov a etylénoxidu, kde uvedený etylénoxid je prítomný ako polyoxyetylénová skupina v množstve väčšom než asi 50 ml % uvedeného alkohol etoxylátu, kde uvedený alkohol etoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.

I keď v niektorých prípadoch bude emuigačné činidlo pôsobiť na stabilizáciu lipázy a ďalších enzýmov pri preferenčnom prijme vody, ktorá môže byť v prípravku a môže spôsobiť hydrolýzu enzýmu, preferuje sa, aby prípravok tiež obsahoval vo vode rozpustný stabilizátor ako je polyol alebo zmes polyolov, kde polyol má od 2 do asi 6 atómov uhlíka a od 2 do asi 6 hydroxylových skupín a zahrňuje materiály ako je 1,2-propandiol, etylénglykol, erytritan, pentaerytritol, glycerín, sorbitol, manitol, glukózu, fruktózu, laktózu a podobne. Preferované stabilizátory sú tie, ktoré sú v podstate netoxické a v podstate biodegradabilné.

Pripadne vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka, ktorá sa môže výhodne použiť, zahrňuje nenasýtenú alebo nasýtenú organickú kyselinu, majúcu od 2 do asi 10 atómov uhlíka a od 1 do asi 2 karboxylové skupiny. Tieto chrániace látky sa používajú k podstatnej minimaiizácii alebo podstatnému zabráneniu zničenia prípravku kvasinkami, hubami alebo inými mikroorganizmami. Jednou z preferovaných nenasýtených organických kyselín, ktoré sa môžu z tohto hľadiska použiť, je 2,4-hexadienová kyselina. Ďalšie nenasýtené kyseliny, ktoré sa môžu použiť zahrňujú buténové kyseliny (kyselinu krotónovú, vinyloctovú a metakrylovú; penténové kyseliny (tiglinovú kyselinu, angelikovú kyselinu a seneciovú kyselinu); hexénové kyseliny a tetrakrylovú kyselinu. Vo vode rozpustné kyseliny, ktoré sú v podstate tiež netoxické a v podstate biodegradabilné sa preferujú.

Iné nenasýtené kyseliny, ktoré sa môžu použiť z tohto hľadiska zahrňujú maleinovú kyselinu (cis-buténdiovú kyselinu) a fumarovú kyselinu (trans-buténdiová kyselina) ako i citrakonovú kyselinu (metyl-maleinová kyselina).

Iné kyseliny, ktoré sa môžu použiť zahrňujú kyselinu šťavelovú, malonovú, jantárovú, glutarovú. adipovú, pimelovú suberovú, azalainovú a sebakovú. Rôzne deriváty kyseliny malonovej, ktoré sú taktiež vhodné, zahrňujú alylmalonovú kyselinu, butylmalonovú kyselinu, dimetylmalonovú kyselinu, etylnialonovú kyselinu, etylénmalonovú kyselinu, hydroxymalonovú kyselinu, metylmalonovú kyselinu, oxomalonovú kyselinu a oxymalonovú kyselinu.

Rôzne deriváty jantárovej kyseliny, ktoré sa môžu taktiež použiť, zahrňujú dihydroxyjantarovú kyselinu, elyljantarovú kyselinu, hydroxyjantarovú kyselinu a metyljantarovú kyselinu.

Rovnako sa môžu použiť rôzne deriváty glutarovej kyseliny, zahrňujúce alfa-etylglutarovú kyselinu, beta-etylglutarovú kyselinu,, metylglutarovú kyselinu a beta-metylglutarovú kyselinu.

Výraz v podstate vo vode rozpustný, ako sa používa v tomto popise a v patentových nárokoch, bude označovať rozpustnosť jednotlivej zložky alebo celého prípravku pri koncentrácii a teplote použitia. V podstate netoxický sa opäť týka koncentrácie jednotlivých zložiek prípravku pri použití, ktoré nebudú podstatne škodiť životu rastlín alebo zvierat a ktoré sú z tohto hľadiska v súlade s federálnymi normami pre toxicitu. Podobne výraz v podstate biodegradabilný sa týka tých zlúčenín v prípravku alebo celého prípravku, ktoré za podmienok použitia môžu byť degradované konvenčnými mikroorganizmami v priebehu zodpovedajúcej doby. Výraz podstatne alebo v podstate ako sa tu používa, bude znamenať úplnú alebo takmer úplnú účinnosť.

Acylglycerolestery, ktoré sú spracovávané spôsobom podľa predloženého vynálezu zahrňujú triacylglycerol, diacylglycerol alebo monoacylglycerolestery, kde sa bude meniť dĺžka reťazca acylovej skupiny, ale väčšinou bude na báze nenasýtenej alebo nasýtenej mastnej kyseliny. Prípravok podľa predloženého vynálezu je upravený tak, aby bol účinný na spracovanie acylglycerolesterov, ktoré majú teplotu topenia v rozmedzí od asi 10 °C do asi 40 °C alebo výhodne pri alebo blízko teploty miestnosti.

Prípravok podľa vynálezu sa môže tiež upraviť pre rôzne aplikácie na spracovanie acylglycerolesterov vo vode tak, že lipázový enzým je prítomný v množstve od asi 5 do asi 20 % hmotn., alebo asi 7 až asi 18 % hmotn. alebo asi 8 až asi 15 % hmotn.; emulgačné činidlo od asi 0,5 do asi 20 % hmotn., alebo asi

0,7 až 18 % hmotn., alebo asi 0,8 až asi 15 % hmotn.; organická kyselina ako chrániaca zložka od asi 0,05 do asi 0,2 % hmotn., alebo asi 0,07 až asi 0,18 % hmotn., alebo asi 0,8 až asi 0,15 % hmotn.; vo vode rozpustný stabilizátor od asi 10 do asi 40 % hmotn., alebo asi 15 až asi 30 % hmotn. alebo asi 18 až asi 25 % hmotn. a zvyšok tvorí voda a prípadne vonné látky. Vyššie uvedená úprava sa môže použiť riedená vodou až po bod, kedy aktivita enzýmu lipázy podstatne klesá, čo môže odborník v odbore ľahko určiť.

pH vyššie uvedeného prípravku je v rozmedzí od asi 3,5 do asi 4,5 a pri zriedení na 100 ppm od asi 6,5 do asi 6,8. Rozmedzie pH je preto od asi 3,5 do asi 6,8, ale prípravok sa môže použiť v rozmedzí od asi pH 3,5 do asi pH 10.

Nasledujúce príklady sú ilustratívne pre vynález. Pokiaľ sa neuvádza ináč, sú všetky percentá hmotnostné.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Na stanovenie stability a pre porovnávanie hodnotenia relatívnej lipázovej aktivity sa použil postup Sigma Titrimetric procedúre (Sigma #-800). Olivový olej je substrát, ktorý sa použil v tomto postupe. Reakcie sa uskutočňovali 3 hodiny pri 30 °C.

Konečné body sa vypočítali titráciou 0,05 N NaOH do zaznamenania zmeny farby (pH indikátor: tymolftaleín) z bielej na svetlo modrú. Vypočítali sa Sigma-Teitz jednotky/ml a medzinárodné jednotky/l.

Kvapkový lypolytický test sa uskutočnil za použitia 35 g na liter deionizovanej vody bakteriologického média Spirit Blue Agar doplneného 3 % 1,2,3-tributyrylglycerolu ako lipidového substrátu. Substrát sa umiestnil na Petriho misku a v strede na výrobu jamky sa vyhĺbilo 1 cm hlboké jadro priemeru 5 mm. Prípravok, ktorý sa hodnotil sa potom zaviedol do jamky. Zónová alebo halo lipolýza sa zaznamenala ako tmavnutie média zo svetlomodrej na tmavomodrú v bode aplikácie. Reakčné rýchlosti sa hodnotili meraním priemeru zóny (mm) v priebehu času (1—24 hodín pri teplote miestnosti) a zaznamenávala sa relatívna aktivita. Odpočty priemeru sa odpočítali od priemeru odobratého agarového výrezu (5 mm). (Aktivity môžu byť ovplyvnené difúznymi rýchlosťami a proteínovými interakciami v médiu.)

Navrhol sa postup na simuláciu účinnosti produktov za použitia nádoby naplnenej 4 litrami vodovodnej vody s prebublávajúcim vzduchom (napomáha distribúcii produktu). Na poškodenie systému sa pridal 1 mililiter oleja (olivový olej alebo opaľovací olej) na 4 litre vody. Denné prídavky enzýmu sa aplikovali (1 oz/1000 galónov vody) a účinnosť sa zaznamenávala podľa stupnice: (0, nepozoroval sa žiadny olejový nádych; 1, 10 až 30 % nádychu zostáva; 2, 30—50 %, 3, 50—70 %; 3, 50—70 %; 4. 70—90 %; 5, 90—100 %). Navyše sa zaznamenávali akékoľvek ďalšie zmeny v kvalite vody (t. j. zákal alebo vločky).

Nakoniec na stanovenie enzymatickej stability prototypov s aditivami bazén/kúpeľ s minerálnymi prameňmi sa použil Sigma titračný postup používajúci olivový olej ako substrát. Zóna alebo halo sa merali po dvoch hodinách reakčnej doby. Kontaktné doby enzýmu vystaveného činidlám boli 30 minút až 1 hodinu.

Prípravky podľa predloženého vynálezu sa hodnotili s komerčne dostupnými činidlami pre bazény a kúpele s minerálnymi prameňmi. Výsledky sú uvedené v tabuľkách 1 až 4.

Tabuľka 1

Výsledky a diskusia

Zóna/halo kvapkový lipolytický test (mm) (Spirit Blue Agar: 1,2,3-tributyrylglycerol)

	Doba (h)
Produkt	0	1	2	4	8	24	DZ¹
Dissolve™	0	6	9	14	20	33	(9)
Spa Scum Gon™	0	7	9	14	20	37	(12)
Bio-Clear™	0	4	4	3*	0	0	«-*
Scum Digester™/bazén	0	4	8	14	20	37	(θ)
Scum Digester™/kúpeľ s min. prám.	0	5	8	14	20	37	(θ)
Nat. Chem./Baquacil	0	5	5	7*	7*	0
Nat. Chem./bazén	0	5	5	6*	8*	0
Nat. Chem./kúpeľ s min. prám.	0	2	2*	5*	0	0
úprava A1	0	7	10	15	23	40	(10)
úprava B1	0	7	10	15	23	41	(7)
úprava C1	0	6,5	10	15	22	38	(10)
úprava D1	0	7	9	15	21	38	(11)
úprava E1	0	7	10	15	23	39	(11)

* Pokles lipolytickej aktivity spôsobený možno proteínovou inaktiváciou. Normálne 1—2 mm priemerne v zmene je indikáciou 10-násobného rozdielu v lipolytickej aktivite. DZ¹ dvojitá zóna čistenia okolo bodu aplikácie, možno indikujúca migráciu mastného acylu, t. j. mastnej kyseliny esterif i kovanej v C-2 polohe náhodne migrujúca k C-1 alebo C-3 polohe. Odtiaľ sa rýchlo odštiepuje a vytvorí sekundárnu zónu pozorovanú po predĺžení inkubácie.

Nepozoruje sa žiadna dvojitá zóna.

Dissolve - ochranná známka Applied Biochemist

Spa scum Gon - ochranná známka Leisure Tíme

Bio-Clear - ochranná známka Hydrology labs

Scum Digester - ochranná známka Robarb

Natural Enzýme - ochranná známka Natural Chemistry

Natural Chemistry - ochranná známka Natural Chemistry

Tabuľka 2

Sigma diagnostický titračný lipázový test (#800)

Produkt	(3 hodiny inkubácie pri 30 °C)
Sigma-Teitz lipáza jednotky/ml	Medzinárodné jednotky/l
Dissolve™	33,35	9,338
Spa Scum Gon™	31,35	8,722
Bio-Clear™	0,75	210
Break-UP™	2,50	700
De-Skum™	2,30	644
Scum Digester™ /bazén	0,95	266
Scum Digester™/kúpeľ s min. prám.	0,55	154
Nat. Enzým./Baquacil	1,35	378
Nat. Chem./bazén	1,35	378
Nat. Chem./kúpeľ s min. prám.	0,75	210
úprava A1	0,55	154
úprava B1	0,55	154
úprava C1	39,95	11 186
úprava D1	36,65	10 262
úprava E1	1,85	518

Olivový olej (88 % nenasýtený, C:18) sa rutine používa ako substrát v tomto teste. Pokles pH vyvolaný uvoľnením voľných mastných kyselín sa upraví 0,05 N NaOH. Použitý indikátor: tymolftaleín. Približne menej ako 10 % variabilita sa pozorovala v tomto teste.

Break up: EZChlor ochranný názov

Break-up: ochranná známka EZ Chlór

Tabuľka 3

Kompatibilita úpravy C1 a inými bazénovými aditívami

Pokus 1

Reprezentatívne výsledky získané po postupných desaťnásobných riedeniach úpravy C1 Spirit Blue Agan tributyrin substrát

Pr. 1	Čas zdrž.	Desaťnásobné riedenie	(Priemer zóny v mm)
1/10	1/100	1/1000	1,10,00	1,100,00
2 h	16	15	13	12	9	halo*
4 h	20	19	18	6	12	7
6 h	24	23	21	19	14	9

* obvod otvoru

Tabuľka 4

Kompatibilita úpravy C1 s niekoľkými bazénovými aditívami

Produkt	Kone. (ppm)	Úprava C1 (riedenie)	Spirit Blue Agar metóda zóna lipolýzy (mm)2 kontakt
30 min	1 h	24 h
Baquacil	0 plus	1/1000	12	12	nd
Baquacil	40 plus	1/1000	12	12	nd
Baquacil	50 plus	1/1000	12	12	nd
Baquacil	50 plus	1/1000	12	12	nd
Baquacil	80 plus	1/1000	12	12	nd
Softswim B	0 plus	1/1000	nd	10	34
Softswim B	40 plus	1/1000	nd	10	31
Softswim B	50 plus	1/1000	nd	10	32
Softswim B	60 plus	1/1000	nd	10	32
Softswim B	80 plus	1/1000	nd	10	33
WSCP	1 plus	1/1000	10	11	nd
WSCP	2 plus	1/1000	10	11	nd
WSCP	4 plus	1/1000	10	11	nd
WSCP	5 plus	1/1000	10	11	nd
chlór	0 plus	1/1000	12(20)	12(20)	nd
chlór	2 plus	1/1000	11(19)	11(15)	nd
chlór	4 plus	1/1000	0(12)	0(9)	nd
chlór	8 plus	1/1000	0(10)	0(0)	nd
chlór	10 plus	1/1000	0(6)	0(0)	nd

			30 min	2 h	6 h	24 h
BCDMH	0 plus	1/1000	(45)	(45)	(45)	(45)
BCDMH	1 plus	1/1000	(40)	(43)	(45)	(41)
BCDMH	2 plus	1/1000	(35)	(35)	(36)	(41)
BCDMH	4 plus	1/1000	(10)	(10)	(θ)	(8)
BCDMH	8 plus	1/1000	(Q)	. (Q)	ÍQ1.	—(O)

nd - nestanovené

Zdroj chlóru: chloman vápenatý

Baquacil - ochranná známka Zeneca, biguanid Softswim B - ochranná známka Biolab. Inc., biguanid WSCP - ochranná známka Buckman Inc., polymérna kvartérna aminová zlúčenina

BCDMH (1-bróm-3-chlór-5,5-dimetylhydantoin) ¹ Zóna lipolýzy stanovená 2 hodiny po kontakte s produktom; čísla v zátvorkách sú stanovené 24 hodín po kontakte.

Tabuľka 5

Test simulácie použitia, využívajúci olivový olej ako substrát (nádobový test)

Produkt	1. deň	2. deň	3. deň
Dissolve™	3/vloč.	0/vloč.	0/vloč.
Spa Scum Gon™	5	4/vloč.	0/vloč.
Bio-Clear™	5	4	3
Scum Digester™/bazén	nd	nd	nd
Scum Digester™/liečebný kúpeľ)	3/vloč.	3/vloč.	0/vloč.
Nat. Enzyme/Baquacil	4	4/kalný	4/kalný
Nat. Chem./bazén	5	5	5
Nat. Chem./liečebný kúpeľ	4	4	3/kalný
úprava A1	3/kalný	0/kalný	0/kalný
úprava B1	3/kalný	0/kalný	0/kalný
úprava C1	0/vloč.	0/vloč.	0/vloč.
úprava D1	0/vloč.	0/vloč.	0/vloč.
úprava E1	nd	nd	nd
Kontrola	5	5	5

Nultý deň mali všetky nádoby odpočet 5. Dávky pre všetky enzýmové prípravky 0,3 ml na 3,785 I (doporučená dávka).

nd - nestanovené

Kalný: voda nie je číra alebo je zakalená

Vloč. = agregovaný plávajúci substrát (pokrač.) čísla v zátvorkách, stanovené 24 hodín po kontakte.

2) Doba kontaktu pred neutralizáciou produktu.

Kompozícia Al emulgačné činidlo Neodol 25-9¹ - 10% stabilizátor glycerol - 20 % lipáza Greasex™ 100-L - 10% vôňa (citrónová) - 0,1 % ‘ voda - 59,9 %

Λ ¹ Ci2-C-|5alkohol etoxylát etylénoxidu (EO); molekulová hmotnosť 610; hydroxylové číslo 92; priemerné číslo EO, 9; EO hmotn. % 67; HLB 13,3; bod zákalu 74 °C; bod tuhnutia 188 °C; špecifická hustota 0,982.

Prípravok Β1

Neodol 25-9¹ Glycerol Greasex 100-L polyvinylpyrolidín vôňa (citrónová) voda

10% 20% 10% 2% 0,1 % 57,9 %

¹ Ci2'θ15 alkoholetoxylát etylénoxidu (EO); molekulová hmotnosť 610; hydroxylové číslo 92; priemerné móly EO 9; EO hmotn. % 67; HLB 13,3; bod zákalu 74 °C; bod tuhnutia 24 °C; bod vzplanutia 188 °C; špecifická hustota 0,982.

Prípravok C1 Zložky: voda kyselina skorbová glycerín

Neodol 25-7¹Greasex citrónová bod vzplanutia pH pH 100 ppm hustota

68,8

0,1 %

20,0 %

1,0%

10,0%

0,1 % žiadny pod -5,5 °C 3,8 až 4,1

6,72

1,055 ¹C-|2-C-|5alkoholetoxylát etylénoxidu (EO); molekulová hmotnosť 619; hydroxylové číslo 108; priemerné mol EO 7,2; EO hmotn. % 61; HLB 12,2; bod zákalu 50 °C; bod tuhnutia 21 °C; bod vzplanutia 177 °C; špecifická hmotnosť 0,967.

Prípravok 01

Fyzikálne a chemické vlastnosti

Úprava 01:

PH pH(100 ppm) hustota bod vzplanutia viskozita vzhľad vôňa rozpustnosť

3,81 6,72 1,055 žiadny pod -5,5 °C 10 cps slabo zakalený biely citrónová veľmi rozpustný vo vode

optimálne rozmedzie aktivity:

pH rozmedzie teplotné rozmedzie

6—10 30—40 °C

Prípravok D1

Neodol 25-7¹glycerín Greasex 100-L	5,0 % 7,5 % 7,0 %
Polyvinylpyrolidón vôňa (citrónová) voda	2,0 % 0,1 % 78,4 %

¹ Ci2-C-|5alkoholetoxylát etylénoxidu (EO); molekulová hmotnosť 619; hydroxylové číslo 108; priemerné mol EO 7,2; EO hmotn. % 61; HLB 12,2; bod zákalu 50 °C; bod tuhnutia 21 °C; bod vzplanutia 177 °C; špecifická hustota 0,967.

Prípravok Ε1

Neodol 91-6¹ - 5,0% glycerín - 10,0%

Greasex 100-L - 10,0% vôňa (citrónová) - 0,1 % voda - 74,9 % ¹Cg-Cnalkoholetoxylát etylénoxidu (EO); molekulová hmotnosť 425; hydroxylové číslo 132; priemerné mol EO 6; EO hmotn. % 62; HLB 12,5; bod zákalu 52 °C; bod tuhnutia 7 °C; bod vzplanutia 168 °C; špecifická hustota 0,991.

Takto v jednom uskutočnení lipáza obsahuje od asi 5 do asi 20 hmotnostných percent lipázového enzýmu;

neiónové emulgačné činidlo je prítomné v množstve od asi 0.5 do asi 20 percent hmotnostných a obsahuje v podstate lineárny C-( 2~Cf 5 alebo Cg-Cj -j alkohol etoxylát, ktorý má asi 6 až asi 9,0 mol priemerne etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť stanovenú z OH čísla asi 425 až asi 610; hydroxylové číslo od asi 62 do asi 132; HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 °C do asi 74 °C, bod tuhnutia od asi 7 °C do asi 24 °C, bod vzplanutia od asi 168 °C do asi 188 °C a špecifickú hustotu od asi 0,967 do asi 0,991.

Vo vode rozpustná chrániaca organická kyselina je prítomná v množstve od 0 do 0,2 percent hmotnostných a vo vode rozpustný stabilizátor je prítomný v množstve od asi 10 do asi 40 percent hmotnostných.

Výhodne je neiónové emulgačné činidlo v podstate lineárny Ci2-Ci5alkohol etoxylát, ktorý má molekulovú hmotnosť asi 619, hydroxylové číslo asi 108, asi 7,2 mol priemerne etylénoxidu v kondenzáte, HLB rovnováhu asi 12,2a bod zákalu asi °C, bod tuhnutia asi 21 °C, bod vzplanutia asi 177 °C a špecifickú hustotu asi 0,967.

V ďalšom uskutočnení je vo vode rozpustnou chrániacou organickou kyselinou kyselina sorbová a vo vode rozpustným stabilizátorom je glycerín.

Na základe údajov získaných pH-Stat metódou všetky prototypy vyvinuté A1-E1, zahrňujúce Leisure Time Spa Scum Gon produkt mali najrýchlejšie rýchlosti hydrolýzy sledované Robarbs Scum Digester/bazén a Scum Digester/kúpeľ s minerálnymi prameňmi. Prípravky Natural Chemistry Nat. Enzyme/Baquacil, Nat. Enzyme/bazén a Nat. Enzýme liečebný kúpeľ, nevykazujú žiadnu aktivitu (hydrolýzu)s touto metódou, čo je možná známka nízkej aktivity zložky alebo nestability upravenej lipázy.

Sigma Titrimetric Assay ukazuje, že úpravy C1 a D1 majú najvyššiu hladinu aktivity oproti ostatným testovaným úpravám. Druhá najvyššia hladina aktivity sa pozorovala pri Dissolve™ Applied Biochemist. sledovaním Spa Scum Gon™ produktov od Laisure Time. Všetky iné prototypy od Natural Chemistry mali v tejto eseji nízku aktivitu.

Spirit Blue Agar lipolytický test ukazuje, že prípravky podľa predloženého vynálezu mali najvyššie hodnoty a najrýchlejšie rýchlosti hydrolýzy, potom nasledovali produkty Robarb, Leisure Time a Applied Biochemist. Produkty Natural Chemistry a Hydrology Laboratories Bio Clear, vykazujú zníženú aktivitu s časom v tejto eseji. Táto strata by sa mohla pričítať proteínovej inaktivácii lipolytickej aktivity. Ďalšie enzymatické eseje sa uskutočnili s týmito úpravami preto, či by sa nemohli pripadne použiť iné enzýmy (t. j. proteázy, fosfolipázy). S týmito produktami sa pozorovala určitá slabá fosfolipázová aktivita (údaje sa neuvádzajú).

Nakoniec štúdie simulujúce použitie vykázali niekoľko interakcii s rôznymi úpravami. Úprava C1 a D1 úplne hydrolyzujú triglyceridy a robia povrchovú vločku bez mastných kyselín. Úprava Robarb, Leisure Tíme a Applied Biochemist mali podobný, ale pomalší vločkový vývoj. Všetky produkty od Natural Chemistry a Hydrology Laboratories nevykazujú žiadne vločky; miesto toho sa voda veľmi kalí. Úprava A1 a B1 mali podobné výsledky, ale účinne odstraňujú povrchový lesk na 2. deň.

Z predložených materiálov je zrejmé, že prípravky podľa predloženého vynálezu ponúkajú účinné, netoxické, biodegradabilné stabilné úpravy, ktoré odstraňujú olejové usadeniny bežne sa vyskytujúce v bazénoch, kúpeľoch s liečebnými prameňmi a vaňových kúpeľoch. Prípravky majú široké rozmedzie lipolytickej aktivity u triglyceridov ako s krátkym tak s dlhým reťazcom; nasýtených olejov ako je kokosový olej, bravčová masť a kakaové maslo a nenasýtených olejov ako je olivový, jojobový a sézamový olej, čo sa nepozorovalo u mnohých iných komerčných produktov.

Odborníkom v odbore bude zrejmé, že je možné uskutočniť modifikácie a variácie v prípravku a spôsobe podľa predloženého vynálezu tak, aby sa pritom nenarušila jeho myšlienka. Tieto modifikácie a variácie a ich ekvivalenty tvoria taktiež časť tohto vynálezu za podmienky, že spadajú do rozsahu pripojených nárokov.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Enzýmový prípravok, obsahujúci zmes zlúčenín na zníženie množstva acylglycerolesterov vo vode, vyznačujúci sa tým, že tento prípravok obsahuje (a) lipázový enzým, (b) neiónové emulgačné činidlo, obsahujúce alkoholetoxylatované emulgačné činidlo, (c) ako chrániacu látku vo vode rozpustnú organickú kyselinu, zahrňujúcu nenasýtenú organickú kyselinu, majúcu od 2 do asi 10 atómov uhlíka a od 1 do asi 2 karboxylové skupiny, a (d) vo vode rozpustný stabilizátor, zahrňujúci polyol alebo zmes polyolov, majúcich 2 až asi 6 atómov uhlíka a 2 až asi 6 hydroxylových skupín.
2. Prípravok podľa nároku 1, ktorý má pH v rozmedzí od asi 3,5 do asi 6,8.
3. Prípravok podľa nároku 1, kde uvedený (a) lipázový enzým je prípadne kombinovaný s ďalším enzýmom, kde uvedeným ďalším enzýmom je fosfolipáza, proteáza, amyláza, celuláza, pektináza, beta-glukanáza, izomeráza alebo redox enzým.
4. Prípravok podľa nároku 3, kde uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka je nenasýtená karboxylová kyselina, ktorá má až asi 6 atómov uhlíka.
5. Prípravok podľa nároku 1, kde uvedený (a) enzým obsahuje lipázový enzým, uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina, ako chrániaca látka, zahrňuje kyselinu sorbovú a uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor, zahrňuje glycerín.
6. Prípravok podľa nároku 3, kde uvedený (a) lipázový enzým zahrňuje lipázu a je prítomný v množstve od asi 5 do asi 20 % hmotn., uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo je prítomné v množstve odasi 0,5 do asi 20 % hmotn., uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka je prítomná od asi 0 do asi 0,2 % hmotn., uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor je prítomný v množstve od asi 10 do asi 40 % hmotn., a zvyšok tvorí voda.
7. Prípravok podľa nároku 3, kde uvedený (a) lipázový enzým, uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo, uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka a uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor sú v podstate biodegradabilné a v podstate netoxické.
8. Prípravok podľa jedného z nárokov 1 až 7, kde uvedeným (b) emulgačným činidlom je alkoholetoxylátový kondenzačný produkt v podstate lineárneho alkoholu, ktorý má od asi 9 do asi 15 uhlíkov a etylénoxidu, pričom uvedený etylénoxid je prítomný ako polyoxyetylénová skupina v množstve väčšom než asi 50 mol. % uvedeného alkoholetoxylátu, kde uvedený alkoholetoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.
9. Prípravok podľa nároku 8, kde uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo je prítomné v množstve od asi 0,5 do asi 20 hmotnostných percent a obsahuje v podstate lineárny Οΐ2'θ15 θΙθόο Cg-C-nalkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 6 až asi 9,0 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132, HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 °C do asi 74 °C, bod tuhnutia od asi 7 °C, do asi 24 °C, bod vzplanutia od asi 168 °C do asi 188 ’C a špecifickú hustotu od asi 0,967 do asi 0,991.

-
10. Prípravok podľa nároku 9, kde uvedené (b) neiónové emuigačné činidlo je v podstate lineárny C-|₂-C-|5alkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 7,2 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť asi 619, hydroxylové číslo asi 108, HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 ^eC, bod tuhnutia asi 21 °C, bod vzplanutia asi 177 °C a špecifickú hustotu asi 0,967.
11. Prípravok podľa nároku 1, kde uvedený (a) enzým obsahuje lipázový enzým, uvedené (b) neiónové emuigačné činidlo obsahuje v podstate lineárny C-|₂-Ci5alkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 7,2 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť asi 619, hydroxylové číslo asi 108, HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 °C, bod tuhnutia asi 21 °C, bod vzplanutia asi 177 °C a špecifickú hustotu asi 0,967.

_v uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka je kyselina sorbová, a · uvedený )b) vo vode rozpustný stabilizátor zahrňuje glycerín.
12. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 7, kde uvedené neiónové emuigačné činidlo obsahuje alkylénoxidový kondenzačný produkt, ktorý poskytuje spojenie oleja s vodou a má vzorec

RX(CH₂CH₂O)_nH kde molekulová hmotnosť emulgačného činidla je v takom rozmedzí, že emulgačné činidlo je rozpustné vo vode pri teplote od asi 10 °C a vyššej, kde R je oleofilná skupina, zahrňujúca (a) lineárny alkoholát dostačujúcej molekulovej hmotnosti preto, aby bol oleofilný a prípadne obsahujúci určité alkylové rozvetvenie, (b) alkylfenol, alebo (c) polyéter, kde uvedený polyéter je polyoxypropylénová skupina alebo bloková alebo heterická zmes polyoxypropylénových a polyoxyetylénových skupín,

X môže byť buď kyslík, dusík alebo síra, n je priemerný počet oxyetylénových jednotiek v hydrofilnej skupine a je väčší než asi 5 pre udelenie rozpustnosti vo vode uvedenému emulgačnému činidlu, hydrofilná skupina -(CH2CH2O)_n- tvorí viac než asi 50 mol percent emulgačného činidla a prípadne obsahuje heterickú alebo blokovú zmes opakujúcich sa oxyetylénových skupín a oxypropylénových skupín.

36a
13. Spôsob úpravy vody, obsahujúcej acylglycerolestery zahrňujúci kontakt uvedenej vody s prípravkom, obsahujúcim zmes zlúčenín znižujúcich množstvo uvedených acylglycerolesterov, obsahujúcim (a) enzým lipázu, (b) neiónové emulgačné činidlo, (c) prípadne ako chrániacu látku vo vode rozpustnú organickú kyselinu a (d vo vode rozpustný stabilizátor.

Z
14. Spôsob podľa nároku 13, kde uvedený prípravok má pH v rozmedzí od asi 3,5 do asi 6,8.
15. Spôsob podľa nároku 13, kde uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka zahrňuje nenasýtenú alebo nasýtenú organickú kyselinu, ktorá má od 2 do asi 10 atómov uhlíka a od 1 do asi 2 karboxylové skupiny, uvedený (d) stabilizátor zahrňuje polyol alebo zmes polyolov, ktoré majú 2 až asi 6 atómov uhlíka a od 2 do asi 6 hydroxylových skupín.
16. Spôsob podľa nároku 15, kde uvedený lipázový enzým je prípadne kombinovaný s enzýmom fosfolipáza, proteáza, amyláza, celuláza, pektináza, beta-glukanáza, izomeráza alebo redox enzým.
17. Spôsob podľa nároku 16, kde uvedená vo vode rozpustná organická kyselina ako stabilizátor je nenasýtená karboxylová kyselina, ktorá má až asi 6 atómov uhlíka.
18. Spôsob podľa nároku 13, kde uvedená (a) lipáza zahrňuje lipázový enzým, uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo, zahrňuje alkoholetoxylátové emulgačné činidlo;

uvedená (c) ako chrániaca látka vo vode rozpustná organická kyselina, zahrňuje kyselinu sorbovú a uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor, zahrňuje glycerín.
19. Spôsob podľa nároku 15, kde uvedený (a) lipázový enzým zahrňuje lipázu a je prítomný v množstve od asi 5 do asi 20 % hmotn., uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo je prítomné v množstve od asi 0,5 do asi 20 % hmotn., uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka je prítomná v množstve od asi 0 do asi 0,2 % hmotn., uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor je prítomný v množstve od asi 10 do asi 40 % hmotn., a zvyšok je voda.
20. Spôsob podľa nároku 15, kde uvedený (a) lipázový enzým, uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo, uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka a uvedený (d) vo vode rozpustný stabilizátor sú v podstate biodegradabilné a v podstate netoxické.
21. Spôsob podľa nároku 20, kde uvedeným emulgačným činidlom je alkoholetoxylátový kondenzačný produkt v podstate lineárneho alkoholu, majúci od asi 9 do asi 15 uhlíkov a etylénoxidu, pričom uvedený etylénoxid je prítomný ako polyoxyetylénová skupina v množstve väčšom ako asi 50 mol. % uvedeného alkoholetoxylátu, kde uvedený alkoholetoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.
22. Spôsob podľa nároku 20, kde uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo je prítomné v množstve od asi 0,5 do asi 20 hmotnostných percent a obsahuje v podstate lineárny Cj2“Cl5 alebo Cg-Cjialkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 6 až asi 9,0 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132, HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 °C do asi 74 °C, bod tuhnutia od asi 7 °C do asi 24 °C, bod vzplanutia od asi 168 °C do asi 188 °C a špecifickú hustotu od asi 0,967 do asi 0,991.
23. Spôsob podľa nároku 22, kde uvedené (b) neiónové emulgačné činidlo je v podstate lineárny C^-Cisalkoholetoxylát, ktorý má v priemere asi 7,2 mol etylénoxidu v kondenzáte, molekulovú hmotnosť asi 619, hydroxylové číslo asi 108, HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 °C, bod tuhnutia asi 21 °C, bod vzplanutia asi 177 °C a špecifickú hustotu asi 0,967.
24. Spôsob podľa nároku 23, kde uvedená (c) vo vode rozpustná organická kyselina ako chrániaca látka je kyselina sorbová a uvedený (b) vo vode rozpustný stabilizátor je glycerín.
25. Prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, kde uvedené neiónové emulgačné činidlo obsahuje alkylénoxidový kondenzačný produkt, ktorý zabezpečuje spojenie oleja s vodou a má vzorec

RX(CH2CH₂O)_nH kde molekulová hmotnosť emulgačného činidla je v takom rozmedzí, že emulgačné činidlo je rozpustné vo vode pri teplote od asi 10 °C a vyššej, kde R je oleofilná skupina, zahrňujúca (a) lineárny alkoholát dostačujúcej molekulovej hmotnosti, aby bol oleofilný a prípadne má určité alkylové rozvetvenie, (b) alkylfenol, alebo (c) polyéter, kde uvedený polyéter je polyoxypropylénová skupina alebo bloková alebo heterická zmes polyoxypropylénových a polyoxyetylénových skupín,

X môže byť buď kyslík, dusík alebo síra, n je priemerný počet oxyetylénových jednotiek v hydrofilnej skupine a je väčší ako asi 5 na zabezpečenie rozpustnosti vo vode uvedeného emulgačného činidla, hydrofilná skupina -(CH2CH2O)_n- tvorí viac ako 50 mol percent emulgačného činidla a pripadne obsahuje heterickú alebo blokovú zmes opakujúcich sa oxyteylénových skupín a oxypropylénových skupín.