CZ214496A3

CZ214496A3 - Enzyme composition

Info

Publication number: CZ214496A3
Application number: CZ962144A
Authority: CZ
Inventors: Percy Jaquess; Corral Fernando Del
Original assignee: Buckman Labor Inc
Priority date: 1994-01-21
Filing date: 1995-01-06
Publication date: 1996-12-11
Also published as: ES2196058T3; CA2180366C; AU733041B2; PT740697E; EP0740697A1; MX9602876A; DE69530477D1; BR9506620A; ATE238407T1; FI962922A; FI962922A0; WO1995020033A1; CN1146215A; SK94296A3; AU1682995A; JP3636465B2; JPH09510606A; EP0740697B1; FI119189B; CA2180366A1

Description

Dosavadní stav techniky

Japonský patent č. 68011290 popisuje přísadu do koupelové vody, kde aditivum obsahuje lipasu, určité množství amylasy a jiné složky.

Japonský patent č. 62175419 popisuje koupelové činidlo, které poskytuje účinek lázně s minerálními prameny a obsahuje proteasový enzym, lecitin a blok rudného prášku, který eluuje různé kovy. Rostlinné materiály spolu s umělými nebo přírodními vůněmi a anorganickými solemi jsou také inkorporovány do koupelového činidla.

Stabilizace vodného enzymového přípravku za použiti určitých esterů byla popsána Shaerem v Í,'S patentu č . 4548727. Ester použitý jako stabilizátor má vzorec RCOOR', kde R je alkyl od jednoho do tří uhlíků nebo vodík a R' je alkyl od jednoho do šesti uhlíků. Ester je přítomen ve vodném enzymovém přípravku v množství od 0,1 do asi 2,5 % hmotnostně. Enzymová složka, která se podle patentu používá, je komerční enzymový přípravek prodávaný v suchém prášku, roztoku nebo suspenzi, obsahující od asi 2 procent do asi 80 procent aktivních enzymů a nosič jako je síran sodný nebo vápenatý, chlorid sodný, neiontové povrchové aktivní látky nebo jejich smési, tvořící zbývajících 20 až 98 procent.

Guilbert a spol. US patent č. 424.3543 popisuje stabilizaci detergentních přípravků, obsahujících proteolytický enzym. Detergentni přípravky jsou stabilizovány přídavkem antioxidantů a hydrofiiního polyolu ke kompozici pro stabilizací pří kompozice.

Weber. US patent č. 4169817 popisuje kapalnou čistící kompozici, obsahující stabilizované enzymy. Kompozice je vodný roztok, obsahující od 10 % do 50 % hmotnosti pevných látek a . obsahující detergentni buildery, povrchově aktivní činidla, enzymový systém odvozený od Bacillus subtilis a enzym stabilizující činidlo. Stabilizující činidla obsahují ve vodě vysoce rozpustné sodné nebo draselné soli a /nebo ve vodě rozpustné hydroxya1 koho 1y a umožňují, aby byl roztok skladován po prodlouženou dobu bez deaktivace enzymu.

Dorrit a spol.. evropský patent č. 0352244 A2 popisuje stabilizované detergentni kompozice použitím amfoterni povrchové aktivní látky.

Kaminsky a spol. US patent č. 4305837 popisuji stabilizované enzymové kompozice, obsahující stabilizující systém vápenatých iontů a karboxylové kyseliny s nízkou molekulovou hmotností a alkoholu s nízkou molekulovou hmotnosti. Tento stabilizovaný enzym je použit v detergentni kompozici. Kompozice může obsahovat neiontové surfaktanty, mající vzorec RA(CH2CH2O)_nH, kde R je hydrofobní skupina, A je na bázi skupiny nesoucí atom vodíku a n představuje průměrný počet ethylenoxidových skupin. R typicky obsahuje od asi 8 do asi 22 atomů uhlíku, ale může být vytvořen kondenzací propy1enoxidu se sloučeninou s nižší molekulovou hmotností, poněvadž n se obvykle mění od asi 2 do asi 24. Použitý nízkomolekulární alkohol může být bud monosytný alkohol, připojený list obsahující od l do 3 atomů uhlíku nebo polynl, obsahující od G do asi 6 atomů uhlíku a od 2 do as i 6 hydroxyskupin. Kaminsky a spoí. uvádějí, že polyoly mohou poskytovat zlepšenou enzymovou stabilitu a zahrnuji propylenglykoi. ethylenglykol ε glycerin.

Tai, US patent č. 4404115 popisuje vodnou enzymatickou kapalnou čistící kompozici, která obsahuje enzymový stabilizátor, pentaborát alkalického kovu. popřípadě se sulfitem alkalického kovu a/nebo polyolem.

Boskamp, US patent č. 462922 také popisuje vodnou enzymatickou detergentní kompozici se stabilizátorem na bázi borité kyseliny nebo soli borité kyseliny s polyolem nebo polyfunkční aminosloučeninou spolu s redukující solí alkalického kovu. Používají se v podstatě stejné polyoly jako v práci Kaminsky-ho a spol.

Gard i na li a spol.. evropská patentová přihláška Cí 3 7 6 7 0 5 popisuje kapalnou detergentní kompozici, obsahující pět podstatných složek, zahrnujících neiontový detergent, výhodné kondenzační produkty alkoholů s e t hy 1 eno :< i dem , lipolytický enzym, nižší alifatický alkohol, mající i-3 atomy uhlíku, sul nižší alifatické kyseliny, obsahující 1-3 atomy uhlíku a proteo1ytický enzym. Vynálezci prohlašují, že získali zlepšené uchovávání a stabilitu 1ipolytických enzymů v kompozici, obsahující proteolytické enzymy a kapalné detergenty při zahrnují nižšího alifatického alkoholu a soli nižší karboxylové kyseliny jako je mravenčan sodný.

Byly vyvinuty různé stabilní formulace pro rekreační vody jako jsou lázně s minerálními prameny a koupaliště, kde jednou ze společných charakteristik těchto formulaci je jejich o ř i o oi e n v list aktivní složka, triacyig1ycerolester-hydrolasa, běžněji nazývaná lipasa. Lipasy jsou v přírodě všudy přítomné a v širokém rozsahu se vyskytuji v živočiších, rostlinách a mikroorganismech. Lipasy mohou být izolovány ve velkém pouze z vybraných zdrojů pro komerční použiti jako je slinivka vepřů a určité mikroorganismy. Za účelem účinnější funkce je žádoucí, aby tyto formulace byly netoxické, biodegradabilni a účinné při odstraňování olejových úsad obvykle se nacházejících v prostředí koupališť a/nebo lázní s minerálními prameny.

Protože existují velké rozdíly v typech lipas vzhledem k jejich specifitám v hydrolýze partikulárních esterových vazeb acy1glycerolesterů, optimu pH, teplotnímu optimu jakož i jejich kapacitě být účinnými na různé acy1gtyceroi estersubstraty a zejména triacy1g 1 ycero 1 substráty, je důležité formulovat Lipasy nejen se správnými stabilizátory pro udržení výsledků dobré aktivity během dlouhého skladování a použití produktů, ale také se správnými chránícími látkami a emulgačnimi činidely.

Díky vlastnosti lipas hydrolyzovat esterové vazby pouze na rozhraní mezi lipidem a vodou, byly lipidové emulgátory zvoleny ke zvýšení povrchu acylglykolesterového substrátu a tím zvýšení rychlosti hydrolýzy. Jinak řečeno reakční rychlost lipasy pro hydrolýzu esterových vazeb závisí na stupni emulzifikace substrátu.

V souiadu s tím by bylo žádoucí získat enzymový přípravek pro redukci nebo podstatné odstranění nebo odstranění acylglycerolesterů z vody a zejména rekreační vody jako jsou lázně s minerálními prameny nebo voda z bazénů se složením, které poskytne optimální reakční rychlosti a popřípadě, stabilitu, tj. složením, které obsahuje správný výběr a rovnováhu mezi emulgačnimi činidiy, stabilizátory a popřípadě chránícími látkami.

Podstata vynálezu

Předložený vynález je řízen na novou kompozici a způsob, který v podstatě odstraňuje jeden nebo více z předchozích a dalších problémů způsobených omezeními a nevýhodami příbuzného oboru. Specifičtěji je předložený vynález řízen na kompozici vhodnou pro redukci a v mnoha případech pro podstatné odstranění nebo odstraněni acylg1ykolesterů z vody a zejména připojený lis rekreační vody jako je voda iázni s Léčebnými prameny nebo voda v bazénech. Tyto enzymové kompozice jsou fo rmu L o vány tak aby reagovaly vysokými rychlostmi a také k ošetření různých acy1g1ycero1esterovych substrátů. Způsob zpracování vody pro redukci nebo podstatné odstranění nebo odstraněni acylg1yko1 esterovych materiálů z vody za použití těchto formulací je také částí vynáLezu.

Další rysy a výhody vynálezu budou zřejmé z popisu, který následuje a částečné budou zřejmé z popisu nebo mohou být poznány při praktickém provedení vynálezu. Výhody vynálezu budou získány a uskutečněny uvedenou kompozicí a metodou, zejména, zdůrazněnou v popisu a nárocích.

V souladu s těmito a dalšími výhodami a v souladu s cílem vynálezu, jak je proveden a široce popsán, byia vyvinuta nová kompozice pro minimalizaci nebo podstatné odstraněni acy 1 glycero1 esterú z vody a způsob použiti těchto nových kompozi c.

Nová kompozice pro redukci nebo podstatné odstraněni nebo odstraněni acylg1ycero1 esterú ve vodě obsahuje:

(a) lipasový enzym, (b) neiontové emulgační činidlo, obsahující a 1 koho 1ethoxy1 atováné emulgační činidlo, (c) chránící ve vodě rozpustnou organickou kyselinu, zahrnující nenasycenou organickou kyselinu, mající od 2 do asi 10 atomů uhlíku a od 1 do asi 2 karboxy1ových skupin, a (d) ve vodě rozpustný stabilizátor, zahrnující polyol nebo směs polyolů, majících 2 až asi 6 atomů uhlíku a 2 až asi 6 hydroxylových skupin.

Bylo zjištěno, že kompozice je zejména účinná, je-li připojený list a

formu 1 ována,	aby měl a	_PH v	rozmez í	od asi. 3,5 do asi 6,6.
V j i něm	pro v e d e ηí	j £	1 1 pa sovy·	e n z y ra p 0 p ř í p a d ě
kombinován s	dalším e n	zymem, kde uv	•edeným dalším enzymem je
f 0 s f 0 1 i p a s a .	p r 01 e a s a ,	amy	lasa. cel	u i a s a , p e k t i n a s a ,

be t a-g 1 ukanas a . isomerasa nebo redox enzym.

Ve vodě rozpustnou organickou kyselinou jako chránící látkou může být kyselina sorbová a ve vodě rozpustným stabilizátorem může být glycerin.

Lipasový enzym, neiontové emulgační činidlo, ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka a ve vodě rozpustný stabilizátor v dalším provedení jsou v podstatě biodegradabilni a v podstatě netoxické.

může být ne iontový alkoho ietboxy 1átový podstatě lineárního alkoholu, mající od a ethylenoxid v takovém množství, že přítomen jako po Iyoxyethyienová skupina asi 50 moL % uvedeného uvedený a 1 koho 1ethoxylát má HLB od asi

Emulgační č ini d1 o kondenzační produkt v asi 9 cl o a s i 15 a h i í k ů uvedený ethylenoxid je v množství větším než a 1 koho 1e tho xylátu. kde do as i 18.

Preferované neiontové emulgační činidlo obsahuje v podstatě Lineární C12-C15 nebo Cg-Ciíalkoholethoxyiát, mající asi 6 až asi 9,0 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132, HLB od asi 12.2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 °C do asi 74 ’C, bod tuhnutí od asi 7 ^JC do asi 24 ^:C, bod vzplanutí od asi 168 ’C do asi 188 ^JC a specifickou hustotu od asi 0.967 do asi 0.991.

připojený list b

Příklad neiontového emulgačního činidla zahrnuje v podstatě lineární C,2-C1salkoholethoxylát, mající asi 7,2 mol v průměru ethyIenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost asi 619. hydroxylové číslo asi 10S. HLB asi 12.2. bod zákalu asi 50 ⁵ 0, bod tuhnutí asi 21 ¹C, bod vzplanuti asi 177 ^,!C a specifickou hustotu asi 0,967.

Tyto kompozice zahrnují a 1ky1enoxidové kondenzační produkty, které poskytují spojení oleje s vodou a mají vzorec

RX(CH₂CH₂O)nH kde molekulová hmotnost emulgačního činidla je v takovém rozmezí, že emulgační činidlo je rozpustné ve vodě při teplot alespoň asi 10 'C a vyšší, kde R je oleofilní skupina, zahrnující (a) lineární alkoholát dostačující molekulové hmotnosti proto aby byl oleofilní a popřípadě obsahující určitá alkylová r o z v ě t v e η i , (b) a 1 k y 1 f e η o 1 , (c) polyether. kde uvedený polyether je po lyoxypropylenová skupina nebo bloková nebo heterická smés polyoxypropy1enových a polyoxyethylenových skupin,

X může být bud kyslík, dusík nebo síra, n je průměrný počet oxyethy 1 enových jednotek v hydrofilní skupině a je větší než asi 5 pro udělení rozpustnosti ve vodě uvedenému emulgačnímu činidlu, hydrofilní skupina -(CH₂CH2O)_n- tvoří více než asi 50 mol procent emulgačního činidla a popřípadě obsahuje heterickou nebo blokovou smés opakujících se oxyethy1enových skupin a oxypropyienových skupin.

Vynález tak zahrnuje jak novou kompozici látek pro h

redukci nebe; podstatné odstranění nebo odstranění acy1glyceroiesterú ve vodě jakož i způsobu provedeni takového procesu, kde kompozice obsahuje enzym Lipasu, neiontové emuigační činidlo, ve vodě rozpustnou organickou kyselinu jako chránící Látku a ve vodě rozpustný stabilizátor.

Enzym lipasa může být použit samotný nebo v kombinaci s jinými enzymy, takže lipasa bude tvořit libovolné od asi 100 % hmotn. nebo méně enzymu použitého v kompozici, kde je lipasa přítomna v takovém množství, že je účinná pro podstatnou hydrolýzu lipidového materiálu, který je zpracováván.

Například mohou být také použity fosfolipasy. Lipasy a fosfolipasy jsou esterasové enzymy, které hydroiyzuji tuky a oleje napadáním esterových vazeb v těchto sloučeninách. Lipasy působí na triglyceridy za t i mco fosfolipasy p ů so b ί na ťosfolipidy. V průmyslové oblasti představují lipasy a fosfolipasy komerčně dostupné esterasy. Novo Nordisk nabízí dva kapalné lipas,·,-vé přípravky pod názvem Resinase™ a P.esinase™ A 2X.

Jsou dostupné komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující lipasy. Například jsou takové kompozice dostupné pod ochrannými názvy Lipolase 100, Greasex SOL, Palatase~^MA. Palatase™M a Lipozyme™, které jsou všechny dodávány firmou Novo Nordisk.

Pankreatická fosfolipasa Az může být použita a je dostupná v kapalné enzymatické kompozici prodávané jako LECITASE^rv’ od Novo Nordisk. Jiné enzymy, které mohou být použity s jakoukoliv z lipas jsou uvedeny dále.

Proteasy jsou dobře známou třídou enzymů často používaných v mnoha průmyslových aplikacích, kde působí hydrolýzu peptidových vazeb v proteinech a proteinových substrátech. Proteásv jsou používány proto, aby napomáhaly odstraňovat skvrny na bázi proteinů jako jsou krevní nebo vaječné skvrny. Kapalné enzymatické kompozice, obsahující alkalické proteasy se také ukázaly jako vhodné jako disperzanty bakteriálních filmů a řasových a fungálních povlaků ve vodních chladících věžích a úložištích kapalin z metalurgického průmyslu.

Proteasy mohou být charakterizovány jako kyselé, neutrální nebo alkalické proteasy v závislosti na rozsahu pH, ve kterém jsou aktivní. Kyselé proteasy zahrnují mikrobiální sýřidla, renin (chymosin), pepsin a fungální kyselé proeasy.

Neutrální proteasy zahrnují trypsin, papain, bromeiaiπ/ficin. a bakteriální neutrální proteasu. Alkalické prot^ásy zahrnuji subtilisin a příbuzné proteasy. Komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující proteasy jsou dostupné pod názvy Rennilase⁸, PTN (Pancreatic Trypsin NOVO). ΡΕ.\Γ (Proteolytic Enzyme Mixture). Neutrase⁸, Aicalase⁸, Esperase⁸ a Savinase⁸. které všechny jsou dodávány od Novo Nordisk

Bi o industri a 1s, lne. z Danbury, CT . Další komerční proteasa je dostupná pod jménem HT-Proteolytic, dádáváno Solvay Enzyme

Products. j

Ϊ

Amylasy, další třída enzymů, jsou také využívány v mnoha průmyslových a komerčních procesech ve kterých působí katalýzu nebo urychlují hydrolýzu škrobu. Třída amylas zahrnuje a-amylasu, β-amylasu, amylglukosidasu (glukoamylasu), fungální amylasu a pullulanasu. Komerční kapalné enzymatické kompozice. „ 1 obsahující amylasy jsou dostupné pod jmény BAN, Termamyl⁸, |

AMG, Fungamyl⁸ a Promozyme^τ”. které jsou dodávánv od Novo

Nordiska a Diazyme L-2Ú0. produkt Solvay Enzyme

Products .

Dalši hydrolýzu pekt i nasy komerčné cenné třídy enzymů, jsou t vlákna. Tyto třídy zahrnují celulas a β-glukanasy. Celulasy jsou enzymy které působí herní celulasy, které degradují celulózu, lineární glukózový polymer vyskytující se v buněčných stěnách rostlin. Hemiceiuiasy jsou zahrnuty v hydrolyze hemiceluloz, která podobné jako celulóza, je polysacharid, nacházející se v rostlinách. Pektinasy jsou enzymy zahrnuté v degradaci pektinu, karbohydrátú jehož hlavní složkou je cukrová kyselina. β-Glukanasy jsou enzymy zahrnuté v hydrolýze β-glukanů, které jsou také podobné celulóze tím, že to jsou lineární polymery glukózy. Společně, celulasy zahrnují endoce1u1asu, exocelulasu, exoce1 ob iohydrolasu a celobiasu a pro účel předloženého vynálezu budou také zahrnovat hemicelulasu. Komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující celulasy jsou dostupné pod názvy Celluclast⁸ a Novozym^álSS, které jsou oba dosávány Novo Nord i s k.

Hemiceiuiasy, které mohou být použity zahrnují xyianasy. PULPZYM⁸ produkt, dostupný od Novo Nordisk, a ECOPULP⁸produkt, dostupný od Alko Biotechnology, jsou dva příklady komerčně dostupných enzymatických kompozic, obsahujících enzymy na bázi xyianasy.

Jako třída zahrnují hemiceiuiasy smés hemiceiuiasy a galaktomannasy. Komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující hemiceiuiasy jsou dostupné jako PULPZYM⁸ od Novo, ECOPULP⁸ od Alko B i o t echno 1 ogy a Novozym^R280 a Gamanase™, které jsou oba produkty Novo Nordisk.

Pektinasy, které mohou být použity, zahrnují endopo1ygalaktouronasu, exopo1 ygalaktouronasu, endopektát lyasu (transeiiminasa), exopektát lyasu (transe iiminasa), a endopektin lyasu (transeliminasa). Komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující pektinasy, jsou dostupné' pod názvy Pec t inex™L· 11 ra SP a Pectínex™, oba dodávané Novo No rd i sk.

0-Glukanasy, které mohou být použity, zahrnují lichenous. laminaronasu a exoglukanasu. Komerční kapalné enzymatické kompozice, obsahující β-glukanasy, jsou dostupné pod názvy Novozym^R234, Cereflo^R, BAN, Finizym^R a Ceremix^R, všechny dosávány od Novo Nordisk.

Další komerčně cenná třída enzymů jsou i some rasy, které katalyzují konverzní reakce mezi isomery organických sloučenin. Sweetzyme ^rprodukt je kapalná enzymatická kompozice, obsahující glukóza isomerasu. která je dodávána Novo Nordisk.

Redox enzymy jsou enzymy, které působí jako katalyzátory v chemických oxidačně/redukčních reakcích a v souvislosti s tím jsou zahrnuty v rozkladu a syntéze mnoha biochemika1 ií. V současnosti nezaujímá mnoho redoxenzymú prominentní místo v průmyslu, protože většina redox enzymů vyžaduje přítomnost kofaktoru. Avšak tam, kde jsou kofaktory integrální částí enzymu nebo nemusejí být dodávány, jsou redox enzymy komerčně použi telné.

Mohou být použity redox enzymy, glukóza oxidasa a lipoxidasy (1ipoxygenasy). Jiné redox enzymy mají možné aplikace v rozmezí od enzymatické syntézy steroidních derivátů po použití v diagnostických testech. Jiné redox enzymy zahrnuji peroxidasu, superoxid dismutasu, alkohol oxidasu.

Γ O polyfenol oxidasu, xanthin oxidasu, sulfhydryl oxidasu, hydroxylasy, cholesterol oxidasu, laecasu, alkohol dehydrogenasu a steroid dehydrogenasy.

Neiontovými emu i gačn i m i činidly, která se výhodné používají, jsou ta, která jsou al kyienoxidovými kondenzačními produkty, které usnadňují spojení oleje s vodou a obecné mají vzorec:

RX(CH2CH2O) nti kde molekulová hmotnost emulgačního činidla je v takovém rozmezí, že emulgační činidlo je, rozpustné ve vodě při teplotě alespoň asi 10 ’ C a vyšší nebo od asi 10 °C do asi 40 °C nebo výše. Emulgační činidla, která jsou také v podstatě netoxická a v podstatě biodegradabilní, jsou preferována.

Ve výše uvedeném vzorci je R lineární alkoholát dostačující molekulové hmotnosti proto, aby by i oleoťilní a v některtých případech obsahuje alkylová rozvětvení. Alkoholáty, které obsahuji minimálně nebo v podstatě žádná alkylová rozvětveni jsou preferovány, protože jsou biodegradabi1 nějši než alkoholáty s alkylovým rozvětvením. Radikál R může být také na bázi aikylfenoiu jako je nonylfenol nebo polyether jako je po 1yoxypropy1enová skupina nebo bloková nebo hetero směs po 1yoxypropy1enových a polyoxyethy1enových skupin. Ve výše uvedeném vzorci X může být bud kyslík, dusík nebo síra nebo jiná funkčnost schopná napojení polyoxyethylenového řetězce k oleofilní skupině R. Výchozí materiály, které mohou být použity z tohoto posledního hlediska, zahrnují sekundární aminy, N-substituované amidy a merkaptany. Ve většině případů musí být n. průměrný počet oxyethy1enových jednotek v hydrofilní skupině větší než asi 5 nebo asi 6 pro uděleni dostatečné rozpustnosti ve vodě proto, aby byl materiál i t použitelný. V jakémkoliv případě, hydrofilní skupina, (-(CH2CH2O)n~) bude obsahovat více než 50 mol procent emulgačního činidla a zejména od asi 50 mol procent do asi 80 mol procent. Hydrofilní skupina může popřípadě obsahovat heterickou nebo blokovou smés opakování oxyethylenových skupin a oxypropy 1enových skupin.

Vhodné emulgačni činidlo, které může být použito podle předloženého vynálezu obsahuje hydrofob na bázi uhlovodíkové skupiny alifatického monosytného alkoholu, který je lineární nebo v podstatě lineární a obsahuje od asi 9 do asi 15 atomů' uhlíku, kde uhlovodíková skupina je připojena k, přes vazbu etherového kyslíku, oxyethy1enový řetězec nebo heterický nebo blokový směsný řetězec oxyethylenových a t,2-oxvpropy 1enových s kup i n.

Monosytný alkohol obecné obsahuje směs alkoholů (výhodně těch s v podstatě zvonovou křivkou statistické distribuce), majících od asi 9 do asi ll atomů uhlíku, od asi 12 do asi 15 atomů uhlíku, od asi 12 do asi 13 atomů uhiiku a od asi 11 do asi 15 atomů uhiiku. Tyto povrchové aktivní látky, mající hydrifilní skupinu na bázi oxyethylenových skupin jsou zvláště J výhodné. Protože emulgačni činidla, která jsou preferována podle předloženého vynálezu jsou ta, která napomáhají systémům olej ve vodě, jsou preferována ta emulgačni činidla, která mají vysokou HLB hodnotu (hydrofilně-1ipofo lni rovnováhu) tj, od asi 8 do asi 18. Také by tato emulgačni činidla měla mít molekulovou hmotnost, vztaženo na OH číslo, od asi 270 do asi I

790 a zejména od asi 425 do asi 610, a hydroxylové číslo (mg j

KOH/g) od asi 71 do asi 208, zejména od asi 92 do asi 132.

Různá emulgačni činidla, která mohou být použita z tohoto hlediska, zahrnují NEODOL^R řada od Shell Chemical, zahrnující NEODOL 91, ethoxylátové řada na bázi směsi lineárních

2 alkoholů s asi 9 až asi 11 atomy uhiiku, NEGDOL 25 ethoxylátové řada na bázi směsi lineárních alkoholů.

obsahujících od asi 12 do asi 15 atomů uhlíku, MEODOL 23 ethoxylátové řada na bázi směsi lineárních alkoholů, obsahující od asi 12 do asi 13 atomů uhlíku a NEODOL 45 ethoxylátové řady, obsahující od asi 11 do asi 15 atomů uhlíku. Srovnatelná emulgační činidla mohou být také použita a jsou dostupná pod ochranným názvem ALFONIC⁸ (Conoco), POLYTERGENT^R (01in), BRL'³ (ICI AMERÍCAS), PLLRAFAC^R (BASF Wvandotte), SURFONIC^a (Texaco) a TERGITOL^R (Union Carbide). Zvláště jsou preferována emulgační činidla typu NEODOL 25.

V jednom provedení je alkohol ethoxylátové emulgační činidlo ondenzační produkt v podstatě lineárního aloholu, majícího od asi 9 do asi 15 uhlíků a ethylenoxidu, kde uvedený ethylenoxid je přítomen jako po iyoxyethy1enová skupina v množství větším než asi 50 mol ⁿn uvedeného alkohol ethoxy látu. kde uvedený alkohol ethoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.

I když v některých případech bude emulgační činidlo působit na stabilizaci lipasy a dalších enzymů při preferenčním příjmu vody. která může být v kompozici a mohly by působit hydrolýzu enzymu, je preferováno, aby kompozice také obsahovala ve vodě rozpustný stabilizátor jako je polyol nebo směs polyolů, kde polyol má od 2 do asi 6 atomů uhlíku a od 2 do asi 6 hydroxylových skupi a zahrnuje materiály jako je 1,2-propandi o 1 , ethylenglykol, erythritan, pentaerythri tol, glycerin, sorbitol, mannitol, glukózu, fruktozu, laktozu a podobné. Preferované stabilizátory jsou ty, které jsou v podstatě netoxické a v podstatě biodegradabilni.

Popřípadě ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka, která může být výhodně použita, zahrnuje η

nenasycenou nebo nasycenou organickou kyselinu, mající od 2 do asi 10 atomu uhlíku a od t do asi 2 kar boxy 1ových skupin. Tyto chránící látky se používají k podstatné minimalizaci nebo podstatnému zabráněni zničeni kompozice kvasinkami, houbám! nebo jinými mikroorganismy. Jednou z preferovaných nenasycených organických kyselin, které mohou být z tohoto hlediska použity, je 2.4-hexadi enová kyselina. Další nenasycené kyseliny, které mohou být použity zahrnují butenové kyseliny (kyselinu krotonovou. vinyloctovou a methakry1 ovou; pentenové kyseliny (tiglinovou kyselinu, angelikovou kyselinu a seneciovou kyselinu); hexenové kyseliny a terakrylovou kyselinu. Ve vodě rozpustné kyseliny, které jsou také v podstatě netoxické a v podstatě biodegradabilni jsou preferovány.

Jiné nenasycené kyseliny, které mohou být použity z tohoto hlediska zahrnuji maleinovou kyselinu (cis-butendiovou ?

kyselinu) a tumarová kyselina (trans-butendíová kyselina) jakož i citrakonová kyselina (methy1-maiei nová kyselina).

Jiné kyseliny, které mohou být použity zahrnují kyselinu sťaveiovou. malonovou, jantarovou, giutarovou, adipovou. pimelovou. suberovou, azelainovou a sebakovou. Různé deriváty kyseliny malonové, které jsou také vhodné, zahrnují !

allylma1onovou kyselinu, butylmalonovou kyselinu, dimethylraalonovou kyselinu, ethylmalonovou kyselinu, ethylenmalonovou kyselinu, hydroxymalonovou kyselinu, methylma1onovou kyselinu, oxomalonovou kyselinu a oxymalonovou kysel inu.

Různé deriváty jantarové kyseliny, které mohou také být použity, zahrnují dihydroxyjantarovou kyselinu, ethyl jantarovou kyselinu, hydroxyjantarovou kyselinu a me thyIjantarovou kyselinu.

Rovněž mohou být použity kyseliny, zahrnujíc; alfa-ethy be ta-e thy1glu tarovou kysel inu, různé deriváty glutarové igiutarov ou k yseli nu, methylglutarovou kyselinu be ta-me t hy1g1utarovou kysel inu.

Výraz v podstatě ve vodě rozpustný^. jak je použit zde v popise a v patentových nárocích, bude označovat rozpustnost jednotlivé složky nebo celé kompozice látek při koncentraci a teploté použití. V podstatě netoxický se opět týká koncentrace jednotlivých složek přípravku při použití, která nebude podstatně škodit životu rostlin nebo zvířat a která je v souladu s federálními normami pro toxicitu z tohoto hlediska. Podobně výraz v podstatě biodegradabilni se týká těch sloučenin v kompozici nebo celé kompozice, která za podmínek použití může být biodegradována konvenčními mikroorganismy během odpovídající doby. Výraz podstatné nebo v podstatě jak je zde použit, bude znamenat úplnou nebo téměř úpinou účinnost.

Acylglyceroíestery, které jsou zpracovávány způsobem podie předloženého vynálezu zahrnují triacylglycerol, diacy1g1ycero1 nebo monoacylglycerolestery, kde se bude měnit délka řetězce acvlové skupiny, ale většinou bude na bázi nenasycené nebo nasycené mastné kyseliny. Kompozice podle předloženého vynálezu je formulována aby byla účinná pro zpracování acy1glycero1 esteru, které mají teplotu tání v rozmezí od asi tO ’C do asi 40 C nebo výhodně při nebo blízko teplotymístnosti.

Kompozice podle vynálezu může také být formulována pro různé aplikace pro zpracování acyig l ycero1 esterú ve vodě tak.

že lipasový enzym je přítomen v množství od asi 5 do asi 20 % hmotn., nebo asi 7 až asi 18 % hmotn. nebo asi 8 až asi 15 % hmotn; emulgační činidlo od asi 0,5 do asi 20 % hmotn., nebo asi 0,7 až 18 % hmotn.. nebo asi 0.8 až asi ί 5 % hmo t n. ; organická kyselina jako chránící složka od asi 0,05 do asi 0?2 % hmotn., nebo asi 0,07 až asi 0,18 % hmotn., nebo asi 0,8 až asi 0,15 % hmotn.; ve vodě rozpustný stabilizátor od asi 10 do asi 40 % hmotn., nebo asi 15 až asi 30 % hmotn. nebo asi 18 až asi 25 % hmotn. a zbytek tvoří voda a popřípadě vonný mater iái.Výše uvedená formulace může být při použití ředěna vodou až do bodu, kdy aktivita enzymu lipasy podstatné klesá,' což může odborník v oboru snadno určit.

pH výše uvedené kompozice je v rozmezí od asi 3,5 do asi

4.5 a pří zředěni na 100 ppm, od asi 6,5 do asi 6,8. Rozmezí pH je proto od asi 3.5 do asi 6,8, ale kompozice může být použita v rozmezí od asi pH 3,5 do asi pH ÍO.

Následující příklady jsou ilustrativní pro vynález. Pokud není uvedeno jinak jsou všechna procenta hmotnostní.

Příklady provedeni vynálezu

Pro stanovení stability a pro srovnávací hodnocení relativních Upasových aktivity, byl použit postup Sigma Titrimetric proceduře (Sigma #-800). Olivový olej je substrát použitý v tomto postupu. Reakce byly prováděny při 30 °C po 3 hodiny.

Konečné body byly vypočteny titrací 0,05N NaOH do zaznamenání změny barvy (pH indikátor: thymo1ťta 1ein) z bílé na světle modrou. Byly vypočteny Sigma-Teitz jednotky/ml a mezinárodní jednotky/l.

S na

Kapková lypolytická esej byla provedena použitím 35 litr deionizované vody bakteriologického media Spirit Blue Agar doplněného 3 % l.2,3-tributyrylgiycero1u jako lipidového substrátu. Substrát by i umístěn na Petriho misku a ve středu pro výrobu jamky bylo vyhloubeno 1 cm hluboké jádro o průměru 5 mm. Kompozice, která byla hodnocena pak byla zavedena do jamky. Zonová nebo halo lipolysa byla zaznamenána jako tmavnutí media ze světlemodré na tmavomodrou v bodě aplikace. Reakční rychlosti byly hodnoceny měřením průměru zóny (mm) během času (i-24 hodin při teplotě místnosti) a byly zaznamenávána relativní aktivita. Odečty průměru byly odečteny od průměru odebraného agarového výřezu (5 mm). (Aktivity mohou být ovlivněny difuzními rychlostmi a proteinovými interakcemi v mediu).

Postup b y i n a v r ž e η p r o s i ni u i a c i ú č i η n o s t i při použití produktů použitím Lázně naplněné 4 iitry vodovodní vody s probublávajicím vzduchem (napomáhá distribuci produktu). K poškození systému byl přidán t mililitr oleje (olivový olej nebo opalovací olej) na 4 litry vody. Denní přídavky enzymu byly aplikovány '' 1 oz/1000 galonů vody) a účinnost byla zaznamenávána podle stupnice: (0, nebyl pozorován žádný olejový nádech; i 10 až 30 X, nádechu zbývá; 2 30-50 %, 3 50-70 %, 4 70-90 %, 5 90-100%. Navíc byly zaznamenávány jakékoliv další změny ve kvalitě vody (tj. zákal nebo vLočky).

Nakonec pro stanovení enzymatické stability prototypů s aditivy bazén/lázen s minerálními prameny byl použit Sigma titračni postup používající olivový olej jako substrát. Zóna nebo halo byly měřeny po dvou hodinách reakční doby. Kontaktní doby enzymu vystaveného činidlům byly 30 minut až l hodina.

Kompozice podle předloženého vynálezu byly hodnoceny s

Tabulka 2

Sigma diagnostická titraéní

Produkt	S i gma-Tei t z jednot ky/m1
D i s s o 1 v e τ m	3 3,35
Spa Scum Gon™	31,35
B i o-C 1 ear™	0,75
Break-Up^T »	2,50
De-Skum^{T M}	2,30
Skum Digester™/
bazén	0,95
Skum-Digester™/
lázeň s min.prám.	0,55
Nat.Enzym/
Baquac i 1	i ,35
Na t.Chem/bazén	1,35
Nat.Chem./
lázeň s min.prám.	0,75
formule Al	0,55
fo rmu1e Βl	0,55
formule Cl	3 9,95
formule Dl	36,65
formule El	1,85
Olivový olej (88%	nenasycený,

substrát v této eseji. Pokles mastných kyselin je vyrovnán thymo1fta 1ein. Přibližně méně lipasová esej f-áQQ) (3 hodiny inkubace při 30 lipasa mezinárodní j ed.no t ky / 1

9,338 8,722 2 10 700 64 4

266

154

78 3 7-5

10 154 154

1118 6 10262 518

C:I8) se rutinně používá jako pH vyvolaný uvolněním volných

0.05N NaOH. Použitý indikátor: než 10% variabilita byla pozorována v této eseji.

Break-up: EZChlor ochranný název Break-up: ochranná známka E'Z Chlor

Ρ ί,

Tabulka 3

Kompatibilita formule Cl a jinými bazénovými aditivy

Pokus 1

Reprezentativní výsledky získané po postupných desetinásobných

ředěních	f o rmu 1 e	Cl	Spirit	3 1 ue	Agar: tributyrin	s ubs t r
Př	. čas	deseti	násobná ř	eděn í	(průměr	zóny λ	< mm)
1	zdrž .	1/10	1/100 1/1100	1,10,00	1 ,	,100,00
2h	16	15	13	12		9	halo*
4h	20	19	18	6		12	7
6h	24	23	2 1	19		14	9
* <	ýbvod c	i t v o r u

; ;

Tabulka 4

Kompatibilita formule Cl s několika bazénovými aditivy

Produk t	konc.	formu1e Cl	Spirit Β i	ue Agar met	oda
	(ppm;	1 ředění)	Z ·) n i 1 ρ ()	i ý z y (mm)²
			(kontakt j
			30 min	1 h	24 h
Baquac i 1	0 plus	1/1000	12	12	nd
Baquaci 1	40 plus	1/1000	12	12	nd
Baquac i I	50 p 1 lí s	L/1000	12	12	nd
Baquac i I	50 plus	1/ 1000	12	12	nd
Baquac i 1	80 plus	1/1000	12	12	nd
Softswim	B 0 plus	1/1000	nd	10	34
Softswim	B 40píus	1/1000	nd	10	31
Softswim	B SOplus	1/1000	nd	10	32
Softswim	Β 60p 1 us	1/1000	nd	10	32
S o f t s w; m	8 SOplus	1/i 000	nd	10	3 3
WSCP	1 plus	1/1000	10	1 1	nd
WSCP	2 ρ 1 u 5	l/l000	10	l l	nd
WSCP	4 plus	1/1000	10	l 1	nd
WSCP	5 plus	1/1000	10	1 1	nd
chlor	0 plus	1/1000	12(20)	12(20)	nd
c h 1 o r	2 plus	1/1000	11(19)	11(15)	nd
chlor	4 plus	1/1000	0(12)	0(9)	nd
chlor	8 plus	1/1000	0(10)	0(0)	nd
chlor	10 plus	1/1000	0(6)	0(0)	nd
			30 min	2 h 6 h	24 h
BCDMH	0 plus	1/1000	(45)	(45) (45)	(45)
BCDMH	1 plus	1/1000	(40)	(43) (45)	(41)
BCDMH	2 plus	1/1000	(35)	(35) (36)	(41)

BCDMH 4 plus 1/1000

BCDMH S plus 1/1000 ( 1 0 ) ( 1 0) (9 ) co (0) (0) (δ) (0) nd - nestanoveno

Zdroj chloru: chlornan vápenatý

Baquacil - ochranná známka Zeneca, biguanid

Softswim B, ochranná známka Biolab lne., biguanid WSCP - ochranná známka Buckman lne., polymerní kvarterní aminová sloučenina

BCDMH (l-brom-3-chlor-5,5-d ime thy1hydanto i n) ¹ Zóna lipolýzy stanovená 2 hodiny po kontaktu s produktem; čísla v závorkách stanovena 24 hodin po kontaktu.

připojený í išt ~ 24

Tabulka 5

Esej simulace použití,	využ í vající	0	1 i vov ý olej	jako substrát
(trubková zkouška)
Produkt	l . den		2 . d e n	3 . den
Dissolve™	3/vloč.		0/vloč.	0/vloč.
Spa Scum Gon™	5		4/vloč.	0/vloč.
Bio-CIearTM	5		4	3
Scum Digester™/
bazén	nd		nd	nd
Scum Digester™/
léčebná lázeň	3/v1 oč.		3/vloč.	0/vloč.
Nat.Enzyme/Baquaci 1	1		4/ka 1ný	4/kalný
Nat.Chem./bazén	5		5	5
Nat.Chem./
léčebná Lázeň	4		4	3/ka1ný
formule Al	3/kaLny		0/k a 1ný	0/ka 1 ný
formule 31	3/ka lný		0/ka 1ný	0/kalný
formule Cl	0/vloč.		0/v 1 o č.	0 / v 1 o č .
formule Dl	0/vloč.		0/vloč.	0/vloč.
formu1? El	nd		nd	nd
kont ro1 a	5		5	5
Nultý den všechny vany	měly odečet	5	. Dávka pro	všechny
enzymové přípravky 0/3	ml na 3,735	1	(doporučená dávka).

nd - nestanoveno.

Kalný: voda není čirá nebo je zakalená Vloó. = agregovaný plovoucí substrát (pokrač.) čísla v závorkách, stanoveno 24 hodin po kontaktu. 2) Doba kontaktu před neutralizací produktu.

pr i po j eny ilsi

Kompozice AL

emuigační činidlo	N e od o 1 2 5 - 9 ¹	10 %
s t a b i 1 i z á t o r	g 1 y c e r o i	-	20 %
1 i p a s a	Td . Q r .α ' 1 Cl — Γ	-	i. tj %
vůně (citrónová;		-	0,1 %
	v o d a	-	5 9,9

¹ C12-C15a 1 koho 1 ethoxylát ethy1enoxidu (EO) ; molekulová hmotnost 610; hydroxylové čislo 92: průměrné číslo EG, 9; EO hmotn.% 67; HLB 13,3: bod zákalu 74 °C; bod tuhnuti ISS °C; specifická hustota 0.9S2.

Kompozice Bi

N e 0 d 0 1 2 5 - 9 ¹ -	10 %
G 1 y c e r 0 1 -	2 0 %
Greas e x 10 0-L	10 %
po lyvinylpyrroiidin -	2 %
vůně (citrónová)	0,1%
voda	57,9 %

¹ C12-C15 alkoholethoxylát ethylenoxidu (EO); molekulová hmotnost 610;, hydroxylové číslo 92; průměrné moly EO 9; EO hmotn.% 67; HLB 13,3; bod zákalu 74 °C; bod tuhnutí 24 °C; bod vzplanutí 188 ’C; specifická hustota 0,982.

propůjčuj· *. x j

Kompozice Cl

Složky:

voda kysel i n a s k o r b o v &

glycerin

N e o d o 1 2 5 - 7 ^{1 * * *}

Greasex L-100 c i t ronová bod vzp1anut i

PH pH 100 ppm hustota

S . ό i'· : /

J . . ,o

20,0 %

1.0%

10.0 %

0,1 % žádný pod -5,5 3.S až 4,1 6,72 1 ,055 ¹Ci2-Ci 5 a 1 koho 1ethoxy1át ethylenoxidu (EO): molekulová hmotnost 619; hydroxylové číslo 10S: průměrné mol EO 7,2; EO hmotn.% 61: HLB 12,2: hod zákalu 50 °C; bod tuhnut i 21 ^J C; bod vzplanutí 177 ⁵C: specifická hmotnost 0,967.

pripojtíliv iXSt

Kompozice Cl Fyzikální a chemické vlastnosti
Fo rmu1e Cl: r» ^T—	3,81
pH1 1 0 0 ppe)	6,72
hustota	1 ,055
bod vzplanutí	žádný pod -5,5 ' C
viskozita	10 c p s
vzh 1ed	slabé kalně bílý
vůně	cit ronová
rozpus tnos t	veimi rozpustný ve vodě
optimální rozmezí	aktivity:
pH rozmez í	6-10
teplotní rozmezí	30 - 40 °C

Kompozice Dl

Neodoi25-7^l	5.0 %
glycerin	7,5%
G r e a s e x i 0 0 - L	7,0 %
Polyvinylpyrro1idon	2,0%
vůně (citrónová)	0,1 %
voda	78,4 %

^JCi2—Cisalkoholethoxylát ethylenoxidu (EO) ; molekulová hmotnost 619; hydroxylové číslo 108; průměrně mol EO 7,2; EO hmotn.% 6t; HLB 12,2; bod zákalu 50 °C; bod tuhnutí 21 °C; bod vzplanutí 177 °C; specifická hustota 0,967.

Kompozice El

Neodol 91-6¹glycerin G r e a s e x 10 0 - L vůně (citrónová) voda

5,0 %

10.0 % 10,0 % 0,1 %

74,9 % ¹C9-Ciialkoholethoxylát ethylenoxidu (EO); molekulová hmotnost 425; hydroxylové číslo 132; průměrně mol EO 6; EO hmotn.% 62; HLB 12,5; bod zákalu 52 °C; bod tuhnutí 7 °C; bod vzplanutí 168 “C; specifická hustota 0,991.

Takto v jednom provedení lipasa obsahuje od asi 5 do asi 20 hmotnostních procent lipasového enzymu;

neiontové emulgační činidlo je přítomno v množství od asi 0,5 do asi 20 procent hmotnostních a obsahuje v podstatě lineární Ciz-Cis nebo Co-Cita 1 koho 1 ethoxyiát, mající asi 6 až asi 9,0 mol průměrné ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost stanovenou z OH čísla asi 425 až asi 610; hydroxylové číslo od asi 62 do asi 132; HLB od asi 12,2 do asi 13,3. bod zákalu od asi 50 ' C do asi 74 ’³ C, bod tuhnuti od asi 7 ’C do asi 24 ^;C, bod vzplanutí od asi 168 ”C do asi 188 ^! C a specifickou hustotu od asi 0,967 do asi 0,991 ve vodě rozpustná chránící organická kyselina je přítomna v množství od 0 do 0,2 procent hmotnostních a ve vodě rozpustný stabilizátor je přítomen v množství od asi 10 do asi 40 procent hmotnostních.

Výhodně je neiontové emulgační činidlo v podstatě lineární Ctz-Ci 5a 1 koho 1 ethoxyiát, mající molekulovou hmotnost asi 619, hydroxylové číslo asi 108, asi 7,2 mol průměrně ethylenoxidu v kondenzátu, HLB rovnováhu asi 12,2. bod zákalu asi 50 ’C, bod tuhnutí asi 21 specifickou hustotu asi 0,967

V dalším provedeni j e v e organickou kyselinou kyselina stabilizátorem je glycerin.

¹C, bod vzplanutí asi 177 'C a vodě rozpustnou chránící sorbová a ve vodě rozpustným

Na základě údajů získaných pH-Stat metodou všechny prototypy vyvinuté Ai-El, zahrnující Leisure Time Spa Scum Gon produk tněly nejrychleší rychlosti hydrolýzy následované Robarbs Scum Digester/bazén a Scum Digester/lázeň s minerálními prameny. Přípravky Natural chemistry

Nat.Enzyme/Baquaci 1, Nat Enzyme/bazén a Nat.Enzyme léčebná lázeň, nevykazují žádnou aktivitu (hydrolýzu) s touto metodou, což je možnou známkou nízké aktivity složky nebo nestability formulované lipasy.

Sigma Titrimetric Assays demonstruje, že formula Ci a Dl mají nej vyšší hladinu aktivity proti všem jiným testovaným formulím. Druhá nejvyšší hladina aktivity byla pozorována u Disso i ve^rΊ Applied Biochemist, následovaným Spa Scum Gon™ produktu od Laisure Time. Všechny jiné prototypy od Natural Chemistry měly v této eseji nízkou aktivitu.

Spirit Blue Agar lipolytická esej demonstruje, že kompozice podle předloženého vynálezu měly nejvyšší hodnoty a nejrychlejší rychlosti hydrolýzy, pak následovaly produkty Robarb, Leisure Time a Applied Biochemist. Produkty Natural chemistry a Hydrology Laboratories Bio Clear, vykazuji sníženou aktivitu s časem v této eseji. Tato ztráta by mohla být přičtena proteinové inaktivaci iipolytické aktivity. Další enzymatické eseje byly provedeny s těmito formulacemi proto, zda by mohly být popřípadě použity jiné enzymy (tj. proteasy, fosfo1ipasy) . S těmito produkty byla pozorována určitá slabá fosfoli pasová aktivita (údaje neuvedeny).

Konečně studie simulující použití vykázaly několik interakcí s různými formulemi. Formule Cl a Di zcela hydrolyzují triglyceridy a činí povrchovou vločku prostou mastných lyselin. Formule Sobarb, Leisure Time a Applied Biochemist měly podobný, ale pomalejší vločkový vývoj. Všechny produkty od Natural Chemistry a Hydrology Laboratoires nevykazuji žádné vločky; místo toho se voda velmi kalí.

Formule Al a BI měly podobné výsledky, ale účinně odstraňují povrchový lesk 2.den.

Z předložených materiálů je zřejmé, že kompozice podle předloženého vynálezu nabízejí účinné, netoxické, biodegradabi 1 ně stabilní formulace, které odstraňují olejové úsady běžně se vyskytující v bazénech, lázních s léčebnými prameny a vanových koupelích. Kompozice mají široké rozmezí lipolvtické aktivity u triglyceridú jak s krátkým tak s dlouhým řetězcem; nasycených oLejů jako je kokosový olej. vepřové sádlo a kakaové máslo a nenasycených olejů jako je olivový, jojobový a sezamový olej, což nebylo pozorováno u mnoha jiných komerčních produktů.

Odborníkům v oboru bude zřejmé, že je možno provést módifikace a variace v kompozici a způsobu podle předloženého vynálezu, aniž by byla narušena jeho myšlenka. Tyto modifikace a variace a jejich ekvivalenty tvoří rovněž část tohoto vynálezu za podmínky, že spadají do rozsahu připojených nároků.

Claims

E A Τ Ε Ν Τ O V É o-ijoc

1. Enzymová kompozice Látek, obsahující smés snížení množství acy1g1ycero1 esterů ve vodě, vyznačující se t í m. ž e t a t o obsahuj e (a) li pasovy enzym, (b) neiontové emulgační činidlo, obsahující alkoholethoxylatované emulgační činidlo, (c) chránící ve vodě rozpustnou organickou k zahrnující nenasycenou organickou kyselinu, i 10 atomů uhlíku a od l do asi 2 karboxylovýc (d) ve vodě rozpustný stabilizátor, zahrnují směs polyolů, majících 2 až asi 6 atomů uhlí hydroxy1ových skupin.
2. Kompozice podle nároku L. mající pH v rozmezí od asi 3.5 do asi 6.6.
3. Kompozice podle nároku l. kde uvedený li pasový enzym je popřípadě kombinován se dalším enzymem, kde uvedeným dalším enzymem je fosfo1 i pasa, proteasa, amylasa, celulasa, pektinasa, beta-g1ukanasa, isomerasa nebo redox enzym.
4. Kompozice podle nároku 3, kde uvedená ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka zahrnuje nenasycenou karboxylovou kyselinu, mající až asi 6 atomů uhlíku.
5. Kompozice podle nároku t, kde uvedený (a) enzym, obsahuje lipasový enzym, s 1 o u cenin ,ρη.Φ !'. i 3 i ¹ kompozic |--- yselinu, S >' » ' S mající od E do afsd h skupin, a— cí polyol nebo ku a 2 až asi 6 uvedená (c) chránící ve vodě rozpustná organická kyselina zahrnuje kyselinu sorbovou a uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor, zahrnuje glycerin.
6. Kompozice podle nároku 3, kde uvedený (a) lipasový enzym zahrnuje lipasu a je přítomen v množství od asi 5 do asi 20 % hmotn..

neiontová/ uvedené (b)kemu 1agční činidlo je přítomno v množství od asi 0,5 do asi 20 % hmotn., uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící složka je přítomna v množství od asi 0 do asi 0,2 % hmotn., uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor je přítomen v množství od asi 10 do asi 40 % hmotn., a zbytek tvoří voda.
7. Kompozice podle nároku 3, kde uvedený (a) lipasový enzym, uvedené (b) neiontové emulgační činidlo.

uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka a uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor jsou v podstatě biodegradabilni a v podstatě netoxické.
8. Kompozice podle jednoho z nároků 1 až 7, kde uvedeným (b) emulgačním činidlem je alkoholethoxylátový kondenzační produkt v podstatě lineárního alkoholu, mající od asi 9 do asi 15 uhlíků a ethylenoxidu, kde uvedený ethylenoxid je přítomen jako po 1yoxyethy1enová skupina v množství větším než asi 50 mol.% uvedeného a 1 koho 1ethoxy1átu, kde uvedený alkoholethoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.
9. Kompozice podie nároku 8. kde uvedené (b) neiontové emulgační činidlo je přítomno v množství od asi 0,5 do asi 20 hmotnostních procent a obsahuje v podstatě lineární C12-C15 nebo C9-C11 alkoholethoxylát, mající asi 6 až asi 9,0 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132. HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 ³C do asi 74 ^JC, bod tuhnutí od asi 7 'C do asi 24 ⁰C, bod vzplanutí od asi 168 ³ C do asi 188 a specifickou hustotu od asi 0,967 do asi 0,991.
10. Kompozice podle nároku 9, kde uvedené (b) neiontové emulgační činidlo je v podstatě lineární Ci2-C1salkoholethoxylát, mající asi 7,2 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost asi 619, hydroxylové číslo asi 108, HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 °C, bod tuhnutí asi 21 ³C, bod vzplanutí asi 177 ³C a specifickou hustotu asi 0,967.
11. Kompozice podle nároku i. kde uvedený (a) enzym, obsahuje lipasový enzym, uvedené (b) neiontové emulgační činidlo obsahuje v podstatě lineární C12-C15 a 1 koho 1ethoxy1át, mající asi 7,2 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost asi 619, hydroxylové čísio asi 108, HLB asi 12,2. bod -zákalu asi 50 °C, bod tuhnutí asi 21 °C, bod vzplanutí asi 177 ³C a specifickou hustotu asi 0,967, uvedenou (c) ve vodě rozpustnou organickou kyselinu jako chránící látkou je kyselina sorbová, a uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor zahrnuje glycerin.
12. Kompozice podle kteréhokoliv z nároků 1 až 7, kde uvedené neniontové emulgační činidlo obsahuje a 1 ky 1 enoxidový kondenzační produkt, který poskytuje spojení oleje s vodou a má vzorec

RX(CH2CH₂O)nH kde molekulová hmotnost emulgačního činidla je v takovém rozmezí, že emulgačni činidlo je rozpustné ve vodě při teplot od asi 10 'C a vyšší, kde R je oleofilní skupina, zahrnující (a) lineární alkoholát dostačující molekulové hmotnosti proto aby byl oleofilní a popřípadě obsahující určitá alkylová rozvětvení, (b) alkylfenol, nabo (c) polyether, kde uvedený polyether je po 1yoxypropy1enová skup ina nebo bloková nebo heterická směs polyoxypropylenových a polyoxyethylenových skupin,

X může být bucf kyslík, dusík nebo síra, n je průměrný počet oxyethylenových jednotek v hydrofilní skupině a je větší než asi 5 pro udělení rozpustnosti ve vodě uvedenému emulgačnímu činidlu, hydrofilní skupina -ÍCH2CH2O)_n- tvoří více než asi 50 mol procent emulgačního činidla a popřípadě obsahuje heterickou nebo blokovou směs opakujících se oxyethylenových skupin a oxypropy1enových skupin.
13. Způsob úpravy vody. obsahující acyIglycarolastery zahrnující kontakt uvedené vody s kompozicí látek, zahrnující směs sloučenin pro snížení množství uvedených acylglycerolesterů, zahrnující (a) enzym i i pasu, (b) neiontové emulgační činidlo, připadne/ (c) fCTÍráníci ve vodě rozpustnou organickou kyselinu a (d) ve vodě rozpustný stabilizátor.

14 . Způsob podle nároku 13, kde uvedená kompozice v rozmezí od as i 3,5 do as i 6,8. 1 5 . Způsob pod 1 e nároku 13 . kde

uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka zahrnuje nenasycenou nebo nasycenou organickou kyselinu, mající od 2 do asi 10 atomů uhiiku a od 1 do asi 2 karboxylovýcn skupin.

uvedený (d) stabilizátor zahrnuje polyol nebo smés polyoiů, majících 2 až asi 6 atomů uhlíku a od 2 do asi 6 hydroxylovýc s kup i n.
16. Způsob podle nároku 15, kde uvedený lipasový enzym je popřípadě kombinován s enzymem fosfolipasa, proteasa, amylasa, celulasa, pektinasa, beta-glukanasa, isomerasa nebo redox enzym.
17. Způsob podle nároku 16, kde uvedená ve vodě rozpustná organická kyselina jako stabilizátor je nenasycená karboxylová kyselinu, mající až asi 6 atomů uhlíku.
18. Způsob podle nároku 13. kde uvedená (a) lipasa zahrnuje lipasový enzym, uvedené (b) neiontové emulgační činidlo, zahrnuje alkoho1ethoxylátové emulgační činidlo:

uvedená (c) chránící ve vodě rozpustná organická kyselina, zahrnuje kyselinu sorbovou a uvedený (d) ve vodé rozpustný stabilizátor, zahrnuje glycerin.
19. Způsob podle nároku 15, kde uvedený (a) lipasový enzym zahrnuje lipasu a je přítomen v množství od asi 5 do asi 20 % hrnotn., neiontovéJ uvedené (b) remuiagční činidlo je přítomno v množství od asi 0,5 do asi 20 % hrnotn., uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící složka je přítomna v množství od asi 0 do asi 0,2 % hrnotn., uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor je přítomen v množství od asi 10 do asi 40 % hrnotn., a zbytek tvoří voda.
20. Způsob podle nároku 15, kde uvedený (a) lipasový enzym, uvedené (b) neiontové emulgační činidlo, uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka a uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor jsou v podstatě biodegradabi 1 ηí a v podstatě netoxické.
21. Způsob podle nárok 20, kde uvedeným emulgačním činidlem je alkoholethoxylátový kondenzační produkt v podstatě lineárního alkoholu, mající od asi 9 do asi 15 uhlíků a ethylenoxidu, kde uvedený ethylenoxid je přítomen jako polyoxyethy1enová skupina v množství větším než asi 50 mo1.% uvedeného aikoholethoxylátu, kde uvedený alkoholethoxylát má HLB od asi 8 do asi 18.
22. Způsob podle nároku 20, kde uvedené (b) neiontové emulgační činidlo je přítomno v množství od asi 0,5 do asi 20 hmotnostních procent a obsahuje v podstatě lineární C12-C15 nebo C9-C11 a 1 koholethoxylát, mající asi 6 až asi 9,0 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost od asi 425 do asi 610, hydroxylové číslo od asi 92 do asi 132, HLB od asi 12,2 do asi 13,3, bod zákalu od asi 50 ⁰C do asi 74 ’C, bod tuhnutí od asi 7 ’C do asi 24 °C, bod vzplanuti od asi 168 C do asi 188 ⁰ C a specifickou hustotu od asi 0,967 do asi 0,991,
23. Způsob podle nároku 22, kde uvedené (b) neiontové emulgační činidlo je v podstatě lineární Ci₂-Cisalkoho1ethoxylát. mající asi 7,2 mol v průměru ethylenoxidu v kondenzátu, molekulovou hmotnost asi 619, hydroxylové číslo asi 108. HLB asi 12,2, bod zákalu asi 50 ''C, bod tuhnutí asi 21 C, bod vzplanutí asi 177 °C a specifickou hustotu asi 0,967.
24. Způsob podle nároku 23. kde uvedená (c) ve vodě rozpustná organická kyselina jako chránící látka je kyselina sorbová a uvedený (d) ve vodě rozpustný stabilizátor je glycerin.
25. Kompozice podle kteréhokoliv z nároků i až 8. kde uvedené neniontové emulgační činidlo obsahuje alkylenoxidový kondenzační produkt, který poskytuje spojení oleje s vodou a má vzorec

RX(CH₂CH₂O)_nH kde molekulová hmotnost emulgačního činidla je v takovém rozmezí, že emulgační činidlo je rozpustné ve vodě při teplotě od asi 10 ⁰C a vyšší, kde R je oleofilni skupina, zahrnující (a) lineární alkoholát dostačující molekulové hmotnosti proto, aby byl oleofilni a popřípadě obsahuje určitá alkylová rozvětven ί, (b) alkylfeno 1 , (c) polyether, kde uvedený polyether je polyoxypropylenová skupina nebo bloková nebo heterická směs po 1yoxypropy 1enových a polyoxyethy1enových skupin,

X může být bud kyslík, dusík nebo síra, n je průměrný počet oxyethy1enových jednotek v hydrofilní skupině a je větší než asi 5 pro udělení rozpustnosti ve vodě uvedenému emulgačnímu činidlu, hydrofilní skupina -(CH2CH2O)_n- tvoří více než asi 50 mol procent emulgačního činidla a popřípadě obsahuje heterickou nebo blokovou směs opakujících se oxyethy1enových skupin a o^ypropylenových skupin.