SK75197A3 - Use of aminopurine antiviral agents - Google Patents

Description

Použitie aminopurinových protivírusových látok

Oblasť vynálezu

Vynález sa týka liečby latentnej infekcie, spôsobenej herpetickým vírusom. Výraz liečba sa tu používa aj vo význame profylaxie tam, kde je to vhodné.

Doterajší stav techniky

EP-A-141 927 (Beecham Group p.l.c) vir, zlúčeninu, ktorá má vzorec (A):

zverejňuje penciclo-

(A) a jej soli, fosforečnanove estery a acylderivaty ako protivírusovú látku. Hydrát sodnej soli pencicloviru sa zverejňuje v EP-A-216 459 (Beecham Group p.l.c.). Penciclovir a jeho protivírusová účinnosť je tiež zverejnená v abstrakte

P.Vil-5, strana 193 z Abstracts biology, Manchester, Anglicko, (Boye et al.).

Orálne účinné bioprekurzory (A) majú vzorec (B) :

of 14th Congress of Micro7. až 13. septembra 1986 zlúčeniny, ktorá má vzorec

(B) (CH₂)₂ ho-ch₂-ch-ch₂-oh a ich soli a deriváty, ako sú určené vzorcom (A); vo vzorci X znamená C-^ galkoxy, NH2 alebo vodík. Zlúčeniny so vzorcom (B) , v ktorom X je C-£_galkoxy alebo NH2 sú zverejnené v EP-A-141 927 a zlúčeniny so vzorcom (B), v ktorom X je vodík, zverejnené v EP-A-182 024 (Beecham Group p.l.c.), sú výhodnými proliečivami. Príkladom zvlášť výhodnej zlúčeniny so vzorcom (B) je taká zlúčenina, v ktorej X je vodík a v ktorej sú dve OH skupiny vo forme acetylového derivátu a ktorá sa opisuje v 2. príklade EP-A-182 024, v ďalšom texte označená ako famciclovir.

Zlúčeniny so vzorcami (A) a (B) a ich soli a deriváty boli opísané ako užitočné na liečbu infekcií, spôsobených vírusami herpes, ako sú l.a 2. typ vírusu herpes simplex.

Predchádzajúce práce ukázali, že oneskorenie zahájenia protivírusovej liečby o niekoľko hodín po infekcii znamená vznik latencie. Ak raz vznikne latentný stav, infekcia môže opäť vzplanúť.

Podstata vynálezu

Terajšími prácami na myšiach sa však zistilo, že liečba famciclovirom môže chrániť proti vzniku príslušného latentného stavu, ak sa liečba zaháji 18 hodín (prvý pokus) a do 4 dní (druhý pokus) po infekcii. Pri pokusoch sa teraz tiež zistilo, že uvedenej latencii sa môže predchádzať imunizovaním myší. Potenciálna klinická výhodnosť uvedených zistení je v tom, že v rozmedzí 4 dní po kontakte pacienta s infekciou možno liečbou s famciclovirom zabrániť nielen akútnej infekcii, ale tiež vzniku latencie a tak predísť jej opakovanému vzplanutiu. Ďalej sa predpokladá, že v organizme môže nastávať pomalý prirodzený úbytok latentné infikovaných buniek a na pretrvávanie zaťaženia organizmu latentné infikovanými bunkami sú potrebné opakované vzplanutia infekcie, aby v nových bunkách vznikla latencia. Preto predĺžená (až do niekoľkých rokov) udržiavaca liečba s famciclovirom môže chrániť nové bunky, aby podľahli latentnej infekcii. Výsledkom potom je kuratívna liečba, po ktorej pacient nemá reči divy.

Súčasný vynález podľa uvedeného predkladá spôsob liečby latentnej infekcie herpetickými vírusmi človeka, pričom uvedený spôsob zahŕňa podávanie účinného množstva zlúčeniny (A) človekovi, ktorý túto liečbu potrebuje

alebo podávanie bioprekurzora uvedenej zlúčeniny, alebo jej farmaceutický prípustnej soli, alebo fosforečnanového esteru a/alebo acylderivátu niektorej z predchádzajúcich látok.

Výraz acylderivát sa tu používa v tom zmysle, že zahŕňa akýkoľvek derivát zlúčenín so vzorcom (A), v ktorom je prítomná jedna alebo viac acylových skupín. Tieto deriváty sú zahrnuté ako bioprekurzory zlúčeniny so vzorcom (A) popri derivátoch, ktoré sú biologicky účinné per se.

Zlúčenina so vzorcom (A) môže byť jednou z foriem, zverejnených v EP-A-214 459 (Beecham Group p.l.c).

Príklady bioprekurzorov, farmaceutický prípustných solí a derivátov sú rovnaké, ako sa opisujú v už uvedených odkazoch na Európske patenty, ktorých podstata sa tu zahŕňa týmto odkazom.

Zlúčeninou so vzorcom (B) je najmä 9-(4-acetoxy-3-acetoxymetylbut-l-yl)-2-aminopurín, známy ako famciclovir (FCV), čo je dobre absorbovateľná orálna forma pencicloviru (PCV).

Uvedená zlúčenia so vzorcom (A), jej bioprekurzory, soli a deriváty sa môžu pripraviť tak, ako sa uvádza v už spomenutých odkazoch na Európske patenty.

Uvedená zlúčenina, najmä famciclovir sa môže podávať orálnou cestou ľuďom a môže byť v liekovej forme sirupu, tabliet alebo kapsúl. Ak je vo forme tabliet, možno na formuláciu práškovej zmesi použiť ktorýkoľvek vhodný farmaceutický nosič, napríklad stearan horečnatý, škrob, laktózu, glukózu, ryžu, múku a kriedu. Uvedená zlúčenina môže byť tiež v liekovej forme kapsúl na prehítanie, napríklad zo želatínových kapsúl, a kapsule môžu obsahovať uvedenú zlúčeninu v prášku, alebo vo forme sirupu, roztoku alebo suspenzie. Vhodné tekuté farmaceutické nosiče zahŕňajú etanol, glycerol, soľný roztok a vodu, do ktorých sa na vytvorenie sirupu môžu pridať chuťové, vonné alebo farbiace prísady. Predstaviteľné sú aj formulácie s oneskoreným uvoľňovaním liečiva, napríklad forma vnútorne poťahovaných tabliet.

Na parenterálne podávanie sa pripravujú jednotkové dávkové tekuté formy, ktoré obsahujú uvedenú zlúčeninu a sterilný tekutý nosič. Podľa druhu nosiča a koncentrácie môže byť uvedená zlúčenina buď rozpustená, alebo vo forme suspenzie. Parenterálne roztoky sa bežne pripravujú rozpustením zlúčeniny v nosiči a pred plnením do vhodných skúmaviek alebo ampuliek sa sterilizujú filtráciou a uzatvoria. V nosiči sa s výhodou rozpustia tiež prídavné pomocné látky, ako je miestne anestetikum, konzervačné a tlmiace prísady. Na zvýšenie stability sa kompozícia môže po naplnenení do obalu zmraziť a voda sa môže odstrániť vymrazením za vákua.

Parenterálne suspenzie sa pripravujú v podstate rovnakým spôsobom, ale·s tým rozdielom, že sa zlúčenina v nosiči miesto rozpúšťania suspenduje a pred suspendovaním sa sterilizuje vystavením účinkom etylénoxidu. Na uľahčenie rovnomerného rozptýlenia zlúčeniny z tohto vynálezu sa do kompozície s výhodou zahŕňa tenzid alebo zmáčadlo.

Výhodné parenterálne formulácie zahŕňajú vodné formulácie s použitím sterilnej vody alebo normálneho soľného roztoku pri pH okolo 7,4 alebo vyššom, najmä tie, ktoré obsahujú hydrát sodnej soli pencicloviru.

Je celkom zvyčajné, že sa ku kompozícii prikladajú písomné alebo tlačené pokyny, týkajúce sa príslušnej liečby.

Vhodná jednotková dávka môže obsahovať od 50 mg do 1 g účinnej zložky, napríklad 100 až 500 mg. Také dávky sa môžu podávať 1 až 4 krát denne, alebo zvyčajne 2 alebo 3 krát denne. Účinná dávka zlúčeniny v prípade famcicloviru vo všeobecnosti bude v rozmedzí od 0,2 do 40 mg na kilogram telesnej hmotnosti na deň, alebo častejšie 10 až 20 mg.kg^-3· na deň. Jednotkové dávky potom môžu byť 125 mg, 250 mg, 500 mg alebo 750 mg, výhodne 125 mg alebo 250 mg.

Na prevenciu vzniku príslušnej latencie sa liečba s výhodou zaháji čo najskôr po kontakte s vírusom, výhodne do 18 hodín od infikovania, hoci je prípustná doba do štyroch dní. Doba liečby je zvyčajne 3 až 14 dní, častejšie 5 až 10 dní, veľmi často 7 dní.

Na liečbu recidív vzniknutého ochorenia je doba liečby do 5 rokov, napríklad do 1, 2, 3, 4, alebo 5 rokov.

Tento vynález tiež zahŕňa použitie zlúčeniny so vzorcom (A) alebo jej bioprekurzora, alebo jej farmaceutický prípustnej soli, alebo fosforečnanového esteru a/alebo acylových derivátov niektorej z predošlých látok, pri príprave liečiv na použitie v liečbe latentných infekcií vírusmi herpes. Liečba sa môže vykonať hore opísaným spôsobom.

Vynález ďalej zahŕňa farmaceutickú kompozíciu na použitie pri liečbe latentnej infekcie vírusmi herpes, ktorá pozostáva z účinného množstva zlúčeniny so vzorcom (A) alebo jej bioprekurzora, alebo jej farmaceutický prípustnej soli, foforečnanového esteru a/alebo acylového derivátu niektorej predošlých látok, a z farmaceutický prípustného nosiča. Uvedené kompozície sa môžu pripraviť spôsobom, ako je opísané hore.

Zlúčenina so vzorcom (A) a jej proliečivá vykazujú synergický protivírusový účinok s interferónmi; preto v rozsahu tohto vynálezu je tiež liečba, využívajúca kombináciu látok, obsahujúcu dve uvedené zložky na spoločné alebo postupné podávanie, rovnakým alebo rozdielnym spôsobom. Uvedené produkty sa opisujú v EP-A-271 270 (Beecham Group p.l.c.).

V ďalšom uvedené výsledky štúdií na zvieratách podrobnejšie objasňujú vynález.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Pokusy na myšiach, infikovaných vírusom HSV-1

Vyvolala sa kožná infekcia myší zaočkovaním do ušnice vírusom HSV-1 (SC16) a skúmal sa účinok orálneho famcicloviru na latentnú vírusovú infekciu.

Samičky myší BALB/c (Bantin a Kingman, Kingstone, Hull, UK) sa kúpili v 3 až 4 týždni veku a zaočkovali sa týždeň neskôr. Suspenzia vírusov (10 μΐ) , ktorá obsahovala 5.10^ p.f.u. sa zaočkovala do pokožky ľavej ušnice. Každý deň sa u každej myši merala hrúbka pokožky mikrometrickou skrutkou (Nash et al., J. gen. Virol. 48, 351 až 357 (1980)). Myši sa chovali 3 mesiace (Pokus 1) alebo 4 mesiace (Pokus 2) a potom boli utratené. Odňali sa a kultivovali trigeminálna ganglia a cervikálna dorsálna koreňová ganglia. Kultúry, ktoré vykázali replikáciu vírusov sa zaznamenali ako pozitívne.

Príklad 1

V prvom príklade sa myši začali liečiť do 18 hodín a liečba sa ukončila 10 dní po infekcii.

Z 24 neliečených kontrolných myší vykázalo 12 latentnú infekciu v trigeminálnej ganglii (TG) a 20 vykázalo latentnú infekciu cervikálnej dorsálnej koreňovej ganglie (DRG). Všetkých 24 kontrolných myší vykázalo buď TG alebo DRG latenciu. Žiadna z myší, liečených FCV nevykázala nijakú latenciu .

Príklad 2

V druhom pokuse sa protivírusová liečba zahájila v 1.,

2., 3., 4. alebo 5. dni po infekcii (p.i.) a ukončila sa v 10. dni p. i. Zlúčeniny sa podávali v pitnej vode ad libitum pri 1 mg/ml (približne 100 mg.kg“l.deň“^).

Dosiahnuté výsledky sa uvádzajú v nasledujúcej tabuľke. (Poznámka: skupiny 1 a 2 boli liečené rovnakým režimom, ale výsledky boli vyhodnocované osobitne)

	Latencia (skupina	1)	Latencia (skupina	2)	Latencia spolu	Akútne spolu
Protivírusová terapia	TG +v/8	DRG +v/8	TG +v/8	DRG +v/8	% myší s i ganglia m 120(n=16)	/írus +ve i deň 8(n=8)
(dni)	Lt	Rt	Lt	Rt	Lt	Rt	Lt	Rt	L/RTG+DRG	L/RTG+DRG
Žiadna	8	4	8	5	8	6	8	2	100	100
5-10	4	0	4	0	2	0	2	0	38	100
4-10	2	0	2	0	0	0	0	0	13	100
3-10	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
2-10	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0
1-10	0	0	0	0	0	0	0	0	0	0

Latentný vírus mohol byť v gangliových explantoch (ipsilaterálny a kontralaterálny trigeminálny a dorzálny koreň) u všetkých 16 kontrolných myší po štyroch mesiacoch reaktivovaný. Latentný vírus nebol reaktivovaný z ganglií myší liečených s FCV, s výnimkou ipsilateralnej ganglie a iba vtedy, ak sa liečba oneskorila 4 dni (2/16) alebo 5 dní (6/16).

Podobné výsledky sa získali, ak sa zlúčeniny podávali dvakrát denne v potrave v dávke 50 mg.kg^-1.

Príklad 3

Myši boli imunizované Cyclosporinom A (CyA) od dňa -2 do dňa = 10 (deň 0 je deň infekcie). Jedna skupina myší nebola liečená (kontrolná) a druhá skupina bola liečená orálnym podávaním famcicloviru dvakrát denne v dávke 50 mg.kg^-1 od 22 hodiny po infekcii do 5,5 alebo 10,5 dní. Ganglia boli vyšetrené na reaktiváciu infekčného vírusu 1 až 4 mesiacov neskoršie; výsledky sa uvádzajú v nasledujúcej tabulke.

	LTG (n=6)	RTG (n=6)	LDRG (n=6)	RDRG (n=6)
Kontrola	6	4	6	3
FCV	0	0	0	0

TG = trigeminálna, DRG = dorsálna koreňová ganglia, L/R = ľavá/pravá

Pokusy na myšiach, nakazených vírusom HSV-2

Vyvolala sa kožná infekcia myší zaočkovaním do ušnice vírusom HSV-2 (Bry) a skúmal sa účinok orálneho famcicloviru na latentnú vírusovú infekciu. Liečba sa vykonávala s 50 mg.kg“! dvakrát denne po dobu 5 dní, počínajúc 22 hodín po infekcii.

Tabuľka uvádza počet myší/skupina s pozitívnou (+v) latentnou infekciou v trigeminálnej alebo cervikálnej dorsálnej koreňovej ganglii.

	Počet myší s +v gangliami /počet hodnotených myší	% myší, ktoré mali naj menej j ednu +v gangliu
Skupina	LTG RTG LCDRG RCDRG
Kontrola	10/10 10/10 10/10 6/10	100
famciclovir	0/10 0/10 0/10 0/10	0

L = lavá, R = pravá, TG = trigeminálne, CDRG = cervikálna dorsálna koreňová ganglia.

Claims (5)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použitie zlúčeniny so vzorcom (A) (A) (CH₂)₂

   HOCH₂-CH-CH₂-OH alebo jej bioprekurzora, alebo jej farmaceutický prípustnej soli, fosforečnanového esteru a/alebo acylderivátu niektorej z predchádzajúcich látok, pri výrobe liekov na použitie v liečbe latentnej infekcie vírusmi herpes.
2. 2. Použitie podlá nároku nej infekcie liečbou infekcie
3. 3. Použitie podľa nároku nej infekcie liečbou infekcie
4. 4. Použitie podľa nároku zlúčenina je famciclovir.
5. 5. Použitie podľa nároku dáva v dávke 125 mg, 25.0 mg, dvakrát alebo trikrát denne.

   1, v ktorom je liečba latent1. typom herpes simplex.

   1, v ktorom je liečba latent-

   2. typom herpes simplex.

   1, 2 alebo 3, v ktorom uvedená

   4, v ktorom sa famciclovir po500 mg, 750 mg, alebo 1 g raz,