RO120042B1 - Utilizarea agenţilor antivirali pe bază de aminopurină, pentru tratamentul şi profilaxia infecţiilor cu viruşi care produc herpesul - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la utilizarea agenţilor antivirali pe bază de aminopurină, pentru tratamentul şi profilaxia infecţiilor cu viruşi care produc herpesul. Agenţii antivirali, cu formula A sau a unui bioprecursor, sau a sării acceptabile farmaceutic, a unui ester al acidului fosforic şi/sau a unui derivat aciclic al acestora, se utilizează pentru fabricarea unui medicament necesar pentru prevenirea sau tratamentul unei infecţii latente cu virus herpetic, la oameni, care se administrează cu cel puţin 18 h, după infecţie. ŕ

Description

Această invenție se referă la utilizarea agenților antivirali pe bază de aminopurină, pentru tratamentul și profilaxia infecțiilor latente, infecției cu virusuri care produc herpesul.

EP-A-141927 (Beecham Group p.l.c.) descrie penciclovirul, compusul cu formula A:

HO-CH₂-CH-CH₂-OH (A) și săruri, esteri fosfat și derivați acil ai acestora, ca agenți antivirali. Hidratul de sodiu a penciclovirului este descris în EP-A-216459 (Beecham Group p.l.c.). Penciclovirul și activitatea sa antivirală sunt descrise, de asemenea, în Abstract P. V 11-5, p.193 din Rezumat la al 14-lea Congres Internațional de Microbiologie, Manchester, Anglia, 7...13 septembrie, 1986 (Boyd și colab.).

Bioprecursorii activi oral, ai compusului de formula A, sunt compușii cu formula B:

HO-CH₂-CH-CH₂-OH (B) și săruri și derivați ai acestora, definiți în formula A, în care X este alcoxi 0,.6, NH₂ sau hidrogen. Compușii cu formula B, în care X este alcoxi Ο,.₆ sau NH₂, sunt descriși în EP-A141927, și compușii cu formula B, în care X este hidrogen, descriși în EP-A-182024 (Beecham Group p.l.c.), sunt promedicamente preferate. Un exemplu de compus cu formula B, preferat în mod deosebit, este cel în care X este hidrogen și în care cele două grupări OH sunt sub forma derivatului acetil, descris în exemplul 2 al EP-A-182024 și se numește famciclovir.

Compușii cu formulele A și B, sărurile și derivații acestora au fost descriși ca fiind utili în tratamentul infecțiilor produse prin virusuri herpes, cum ar fi herpes simplex tip 1 și herpes simplex tip 2.

Lucrări anterioare au dovedit că dacă tratamentul antiviral este întârziat câteva ore după infecție, atunci se stabilește latența. O dată ce s-a stabilit o infecție latentă, infecția poate reveni.

Acum, s-a dovedit, la șoareci, că tratamentul cu famciclovir poate preveni stabilirea latenței competente când tratamentul este început la 18 h (primul experiment) și până la 4 zile (al doilea experiment), după infecție. De asemenea, s-a dovedit acum, într-un experiment cu șoareci imunocompromiși, că latența poate fi prevenită. Avantajul clinic potențial este că un pacient, în 4 zile de la contact, poate fi tratat cu famciclovir, pentru a preveni nu

RO 120042 Β1 numai infecția acută, ci și dezvoltarea latenței și astfel evitarea revenirilor. Mai mult, se 1 consideră că poate exista o pierdere naturală lentă a celulelor infectate latent și infecțiile recurente pot fi necesare în scopul menținerii încărcării celulelor infectate latent, prin 3 stabilirea latenței în celule noi. Prin urmare, tratamentul supresiv cu famciclovir, pe o perioadă prelungită (până la câțiva ani), poate preveni ca celule noi să devină infectate 5 latent.

Rezultatul ar fi tratamentul curativ, pacientul nemaiavând reveniri.7

Problema, pe care o rezolvă invenția, este noua utilizare a compozițiilor pe bază de compus cu formula A.9

Prezenta invenție constă în utilizarea agenților antivirali, pe bază de aminopurină, cu formula A:11

O

«A

HO-CH₂-CH-CH₂-OH(A) sau a unui bioprecursor sau a sării acceptabile farmaceutic, a unui ester al acidului fosforic și/sau a unui derivat acil al acestora, pentru producerea unui medicament necesar pentru prevenirea sau tratamentul unei infecții latente cu virus herpetic la oameni, care se administrează cu cel puțin 18 h, după infecție.

Avantajul invenției constă în obținerea unui medicament, care administrat în doze optime, previne și tratează infecții letale cu virus herpetic.

Termenul ‘derivat acil’ se folosește aici pentru a include orice derivat al compușilor cu formula A, în care sunt prezente una sau mai multe grupări acil. Astfel de derivați sunt considerați bioprecursori ai compușilor cu formula A, suplimentar la acei derivați care sunt biologic activi în sine.

Compusul cu formula A poate fi în una din formele descrise în EP-A-216459 (Beecham Group p.l.c.).

Exemple de bioprecursori, săruri sau derivați acceptabili farmaceutic sunt cei descriși în referințele brevetelor europene menționate anterior.

Un compus cu formula B, de interes deosebit, este 9-(4-acetoxi-3-acetoximetilbut-1il)-2-aminopurină, cunoscut ca famciclovir (FCV), forma bine absorbită oral a penciclovirului (PCV).

Compusul cu formula A, bioprecursorii, sărurile și derivați ai acestuia se pot prepara cum s-a descris în brevetele europene menționate anterior.

Compusul, în special, famciclovirul, se poate administra la oameni pe cale orală, și poate fi condiționat sub formă de sirop, tablete sau capsule. Când este sub forma unei tablete, pentru obținerea acesteia, se poate folosi orice purtător acceptabil farmaceutic, adecvat compozițiilor solide, de exemplu, stearat de magneziu, amidon, lactoză, glucoză, orez, făină și talc. De asemenea, compusul poate fi condiționat sub forma unei capsule ingerabile, de exemplu, de gelatină, sau sub forma unui sirop, o soluție sau o suspensie. Purtătorii farmaceutici lichizi, corespunzători, includ alcool etilic, glicerină, soluție salină și apă, la care

RO 120042 Β1 se pot adăuga, pentru formarea siropurilor, agenți de aromatizare sau colorare. Sunt avute, de asemenea, în vedere, formulări cu eliberare prelungită, de exemplu, tablete care au o acoperire enterică.

Pentru administrare parenterală, sunt preparate sub formă de doză unitară, lichide care conțin compusul și un vehicul steril. în funcție de vehicul și concentrație, compusul poate fi suspendat sau dizolvat. Soluțiile parenterale sunt preparate în mod normal prin dizolvarea compusului într-un vehicul și sterilizare prin filtrare, înaintea umplerii în flacoane sau fiole adecvate și închidere. De asemenea, în mod avantajos, sunt dizolvați, într-un vehicul, adjuvanții, cum ar fi un anestezic local, conservanți și agenți de tamponare. Pentru mărirea stabilității, compoziția poate fi înghețată după umplere în flacon și apoi se îndepărtează apa sub vid.

Suspensiile parenterale sunt preparate substanțial, în același mod, cu excepția că se suspendă compusul în vehicul, în loc să fie dizolvat, și se sterilizează prin expunere la oxid de etilenă, înaintea suspendării în vehiculul steril. în mod avantajos, în compoziție se include un agent tensioactiv sau de umectare, pentru a facilita distribuția uniformă a compusului invenției.

Compoziții parenterale preferate sunt compoziții apoase care folosesc apă sterilă sau soluție salină normală, la un pH în jur de 7,4 sau mai mare, conținând, în special, hidratul de sodiu al penciclovirului.

Așa cum se obișnuiește în practică, compozițiile vor fi însoțite de obicei de instrucțiuni scrise sau tipărite, pentru utilizare în tratamentul medical, la care se adresează.

O unitate dozată, corespunzătoare, trebuie să conțină de la 50 mg până la 1 g de ingredient activ, de exemplu, 100 până la 500 mg. Astfel de doze pot fi administrate o dată până la de 4 ori pe zi sau, mai obișnuit, 2 sau 3 ori pe zi. Doza eficientă a compusului va fi, în general, în domeniul de la 0,2 până la 40 mg pe kilogram de greutate corporală pe zi, sau, mai uzual, 10 până la 20 mg/kg pe zi. în cazul famciclovirului, unitatea dozată va conține 125, 250, 500 sau 750 mg, de preferință, 125 sau 250 mg.

Pentru prevenirea instalării latenței, tratamentul se aplică, de preferință, cât mai curând posibil, după contactul cu virusul, de preferință în 18 h, cu toate că se acceptă până la 4 zile. Perioada de tratament este de obicei 3 la 14 zile, cel mai obișnuit, 5 la 10 zile, adesea 7 zile.

Pentru tratamentul bolii care revine, durata tratamentului este de până la 5 ani, de exemplu, până la 1,2, 3, 4 și 5 ani.

Prezenta invenție descrie și o compoziție farmaceutică pentru utilizare în tratamentul infecției latente cu virusuri herpes, care cuprinde o cantitate eficientă a unui compus cu formula A sau a unui bioprecursor sau a sării acceptabile farmaceutic, a unui ester fosfat și/sau a unui derivat acil al oricăruia de mai înainte și un purtător acceptabil farmaceutic.

Compusul de formula A și promedicamentele sale prezintă un efect antiviral sinergie în legătură cu interferoni; prin urmare, și tratamentul care folosește combinații de produse, cuprinzând aceste două componente, pentru administrare secvențială sau concomitentă, pe aceeași cale sau căi diferite. Astfel de compoziții sunt descrise în EP-A-271270 (Beecham Group p.l.c.).

Următoarele rezultate din studii pe animale ilustrează invenția.

TESTE LA ȘOARECI INFECTAȚI CU VIRUS HSV-1

S-a instalat o infecție cutanată prin inocularea pavilionului urechii șoarecilor cu HSV-1 (SC16) și s-au investigat efectele famciclovirului administrat oral asupra infecției virale latente.

RO 120042 Β1

S-au procurat șoareci femele BALB/c (Bantin and Kingman, Kingston, Huli, UK) în vârstă de 3 la 4 săptămâni și s-au inoculat o săptămână mai târziu. Suspensia de virus (10 μΙ) conținând 5 x 10⁴ p.f.u., s-a inoculat în lobul pavilionului urechii stângi. S-a măsurat grosimea pielii zilnic, la șoareci, individual, prin intermediul unui micrometru cu șurub. (Ref. Nash și colab., 1980, J. Gen. Virol. 48, 351...357). Acești șoareci au fost menținuți în viață timp de 3 (Testul 1) sau de 4 (Testul 2) luni și apoi au fost omorâți. S-au îndepărtat ganglionii trigeminali și ganglionii rădăcinii dorsale cervicale și s-au cultivat împreună. Acele culturi care prezintă răspuns viral, au fost înregistrate ca pozitive.

Testul 1. într-un prim experiment, șoarecii au fost tratați 18 h și tratamentul a încetat în ziua a 10-a după infecție.

Dintre cei 24 șoareci de control netratați, 12 au prezentat infecție latentă în ganglionii trigeminali (TG) și 20 au prezentat infecție latentă în ganglionii căii dorsale cervicale (DRG). Toți cei 24 șoareci de control au prezentat latență fie în ganglionii trigeminali, fie în ganglionii căii dorsale. Nici unul din șoarecii tratați FCV nu a prezentat vreo latență.

Testul 2. în al doilea experiment, tratamentul antiviral s-a inițiat în zilele 1,2, 3,4 sau 5 postinfecție (p.i.) și s-a oprit în ziua a 10 postinfecție. Compușii s-au administrat adlibitum în apa de băut, la 1 mg/ml (aproximativ 100 mg/kg/zi).

Rezultatele s-au prezentat în tabelul care urmează:

(Notă: Grupurile 1 și 2 au primit același regim de tratament, dar rezultatele s-au analizat separat).

	Latență tGrnn 11 1 «φ — <	Latență (Grup 2}	Total	Total acut
Terapie	TG	DRG	TG	DRG	fi Șoareci cn Virus + ve ganglioni pe ziua	% Șoareci cu virus t- ve ganglioni pe ziua
antivîrala	+ve/8	+ve/8	+ve/8	+ve/&	120(n=16)	GH)
(zile)	Lt Rt	lt Rt	It Kt	Lt Rt	L/kTG+DKG	L/RIG+DRG
Pfk i una	a 4	a 5	8 6	8 1	IOC	100
5-1Q	4 0	4 0	2____0	2____0	35	1.00
4-ÎLD	i o	2 0	9 0	0 0	13	100
3-10	9 0	0 0	0 0	0 0	0	0
2-10	0 0	0 0	0 0	0 0	o	0
1-10	0 0	0 0	0 D	0 0	0	0

După 4 luni, virusul latent s-a putut reactiva în explante ganglionare (trigemen 39 ipsilateral și contralateral și rădăcina dorsală), la toți cei 16 șoareci de control. Nu s-a reactivat virus latent din ganglionii șoarecilor tratați cu famciclovir, cu excepția ganglionilor 41 ipsilaterali, și numai când începerea terapiei s-a întârziat până în ziua a 4-a după infecție (2/16) sau ziua a 5-a p.i. după infecție (6/16). 43

Rezultate similare s-au obținut când s-au administrat compușii de două ori pe zi prin gavaj, la 50 mg/kg pe doză. 45

Testul 3. S-au imunosupresat șoareci cu ciclosporină A (CyA) din ziua a 2-a până în ziua a 10-a (ziua 0 fiind ziua infecției). Au fost grupuri de șoareci netratați (martor) sau 47 tratați cu famciclovir oral, la 50 mg/kg, de două ori pe zi, de la 22 h după infecție până la 5,5 sau 10,5 zile. S-au examinat ganglionii pentru regenerarea infecției virale 1 sau 4 luni mai 49 târziu și rezultatele sunt prezentate în tabelul de mai jos.

RO 120042 Β1

	LTG (n=6)	RTG (n=6)	LDR (n=6)	RDR (n=6)
Martor	6	4	6	3
FCV	0	0	0	0
TG = trigemen; D	RG = ganglioni răc	ăcină dorsală; L/R = stânga/dreapta

TESTE LA ȘOARECI INFECTAȚI CU VIRUS HSV-2

S-a instalat o infecție cutanată prin inocularea lobului urechii șoarecilor cu virus HSV2 și s-au investigat efectele famciclovirului administrat oral asupra infecției virale latente. Tratamentul a fost cu 50 mg/kg, de două ori pe zi, timp de 5 zile, începând la 22 h postinfecție.

Tabelul arată numărul de șoareci/grup cu infecție latentă pozitivă, în ganglionii trigemeni sau rădăcinii dorsale cervicale.

Nr. șoarecilor cu + ganglioni ve/numărul șoarecilor testați	% șoareci dând cel puțin unul + ganglion ve
Grup	Stâng T/G	Drept T/G	Stâng CDR	Drept CDR
Martor	10/10	10/10	10/10	6/10	100
famciclovir	0/10	0/10	0/10	0/10	0

T/G = trigemen; CRG = ganglionii rădăcinii dorsale cervicală 17

Claims (4)

1. Revendicări

   1. Utilizare a agenților antivirali pe bază de aminopurină, cu formula A:

   ho-ch₂-ch-ch₂-oh (A) sau a unui bioprecursor sau a sării acceptabile farmaceutic, a unui ester al acidului fosforic 33 și/sau a unui derivat acil al acestora, pentru producerea unui medicament necesar pentru prevenirea sau tratamentul unei infecții latente cu virus herpetic la oameni, care se 35 administrează cu cel puțin 18 h după infecție.
2. 2. Utilizare conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că tratamentul este 37 pentru virus herpetic tip 1.
3. 3. Utilizare conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că tratamentul este 39 pentru virus herpetic tip 2.
4. 4. Utilizare conform revendicărilor 1,2 și 3, caracterizată prin aceea că bioprecur- 41 sorul este 9-(4-acetoxi-3-acetoximetilbut-1-il)-2-aminopurină.

   RO 120042 Β1

   1 5. Utilizare conform revendicării 4, caracterizată prin aceea că 9-(4-acetoxi-3acetoximetilbut-1-il)-2-aminopurina se administrează în doză de 125, 250, 500, 750 mg sau 3 1 g, o dată, de două ori sau de trei ori pe zi.