SK572003A3

SK572003A3 - Crystalline therapeutic agent

Info

Publication number: SK572003A3
Application number: SK57-2003A
Authority: SK
Inventors: Laurence James Harris; Richard Anthony Storey; Albert Shaw Wood
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2000-07-28
Filing date: 2001-07-18
Publication date: 2004-05-04
Also published as: NO20030416D0; ATE286901T1; WO2002010171A1; AP2001002234A0; MX233602B; KR100457937B1; UY26854A1; YU4703A; BR0112734A; CN1444585A; DZ3364A1; DE60108398D1; ZA200301457B; IL153226A0; DE60108398T2; EP1305314B1; AR032628A1; NO20030416L; GEP20053494B; MXPA03000856A

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka polymorfu 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu vzorca I

ktorý vykazuje PXRD obrazec v podstate definovaný ďalej.

Doterajší stav techniky

Ako je podrobne uvedené vo WO 01/27113, 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4, 3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazín je účinný a a selektiny inhibítor cGMP PDE₅ a je užitočný najmä pri liečení o.i. samčej erektilnej dysfunkcie.

Pre úspešné uplatnenie vo farmaceutickom priemysle je rozhodujúce, aby fyzikálnechemické vlastnosti účinnej látky boli známe alebo aby ich počas nevyhnutných procesov ako pri výrobe a farmaceutickom spracovaní, tak počas transportu, skladovania a konečnom.terapeutickom použití bolo možné rozumne predpovedať. V niektorých prípadoch zlúčeniny môžu vykazovať žiadúce medicinálne vlastnosti, ktoré však nie je možné preniesť na vhodnú farmaceutickú kompozíciu, pretože samotná účinná látka má neuspokojivé fyzikálne vlastnosti, napríklad zlé chemické alebo spracovateľské vlastnosti. Vo farmaceutickom priemysle je použitie stabilných kryštalických látok vysoko žiadúce, pretože kryštalické látky sú obvykle stabilnejšie ako ich amorfné náprotivky, majú určitú štruktúru, ktorú je možné reprodukovateľné charakterizovať rôntgenovou difrakciou, ktorú je možné využiť k identifikácii prítomnosti konkrétnej polymorfnej formy.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu je kryštalická štruktúra l-{6-etoxy-5 -[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo-[4,3d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridýlsulfonyl} - 4-etylpiperazínu.

Kryštalickú látku, ktorú vytvára l-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridýlsulfonyl}-4-etylpiperazín, definovanú v tomto texte, je tiež možné označiť ako nesolvatovaný produkt 1-{6--etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2metoxyetyl)-7-oxo-2H--pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3pyridylsulfonyl}-4-etyl-piperazínu. Prívlastok nesolvatovaný sa v tomto texte používa pre označenie produktu, ktorý v podstate neobsahuje žiadne zachytené rozpúšťadlo viazané v kryštálovej mriežke alebo inak zadržané alebo inak obsiahnuté v kryštáloch. Rozpúšťadlo zachytené na povrchu kryštalickej mriežky do tejto definície zachyteného rozpúšťadla nespadá, hoci kryštalická látka podlá vynálezu na svojom povrchu rozpúšťadlo prednostne nezachytáva. Pod pojmom v podstate žiadne rozpúšťadlo sa v tomto texte rozumie, že je zachytené v štruktúrnej mriežke kryštálu alebo zadržané v kryštale mene;

ako 1 %, prednostne menej ako asi 0,85 %, výhodnejšie menej ako asi 0,3 %, najmä 0 až 0,25 % všetkého rozpúšťadla.

Kryštály 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu s XRD definovaným ďalej majú vysokú teplotu topenia a úvodné výskumy ukázali, že sú nehygroskopické, stabilné a majú dobré formulačné vlastnosti.

—{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7—oxo2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl} -4-etylpiperazin vzorca I podlá vynálezu je možné pripravovať spôsobmi ilustrovanými v príkladoch uskutočnenia a preparatívnych postupoch.

XRD 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)—7oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}—4ethylpiperazínu vzorca I je možné charakterizovať spôsobom popísaným ďalej.

Rôntgenová difrakcia

Rôntgenový difrakčný (XRD) obrazec monokryštalu pre 1—{6— -etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazín s teplotou topenia 162 až 165°C (pripravený spôsobom popísaným v príklade 1) sa stanoví rôntgenovou difrakciou mono-kryštalu. Skúma sa reprezentatívny kryštál a súbor 0,lnm dát (maximum sin Θ/λ = 0,5) sa zhromáždi na difraktometri Siemens R4RA/v. Atómové rozptylové faktory sú prebrané z medzinárodných tabuliek pre rôntgenovú kryštalografiu (International Tables for X-Ray Crystallography, zv. IV, str. 55, 99, 149, Birmingham, Kynoch Press, 1974). Všetky kryštalografické výpočty boli uskutočnené pri použití systému

SHELXTL (G. M. Sheldrick, SHELXTL, User Manual, Nicolet

Instruments Co., 1981).

Simulovaný práškový rôntgenový difrakčný (PXRD) obrazec (ako je uvedený v tabulke 1 pre intenzity vyššie ako 1 %) sa generuje z dát monokryštalu za použitia difrakčného kryštalického modulu Cerius² za nasledujúcich podmienok: radiácia 0,154178 nm, polarizačný faktor 0,5 a žiaden monochromátor. Ako veľkosť kryštálu sa berie 50 x 50 x 50 nm³ s Lorentzovým tvarom piku. Difrakčné piky sa simulujú v rozmedzí uhla 2téta 2 až 55°. Kryštalografické výpočty (výpočty intenzity) sa uskutočňujú za použitia systému SHELXTL (G. M. Sheldrick, SHELXTL, User Manual, Nicolet Instruments Co.,

1981). Konečný R-index je 4,60 %.

Hlavné piky (v stupňoch Θ) simulovaného PXRD obrazca sú uvedené v tabulke I. Pod pojmom hlavné piky sa rozumia piky s intenzitou vyššou ako 1 %.

Tabuľka 1

Vzdialenosť d (nm)	Intenzita (%)	Vzdialenosť d (nm)	Intenzita (%)	Vzdialenosť d (nm)	Intenzita (%)	Vzdálenost d (nm)	Intenzita (%)
1,22486	1,24	0,42323	19,04	0,3061	9,18	0,24041	2,24
0,97301	100	0,41595	1,19	0,30483	2,22	0,23424	1,22
0,85596	36,31	0,40421	1,35	0,30428	1,94	0,2299	1,13
0,73923	15,02	0,39186	7,81	0,29929	1,59	0,2264	1,23
0,73856	8,35	0,38951	10,26	0,29804	2,1	0,22605	1,29
0,73284	1,69	0,38491	5,34	0,29403	3,46	0,22079	2,65
0,58222	14,49	0,38485	2,46	0,29073	1,74	0,21855	1,9
0,57617	1,96	0,38427	43,14	0,28719	1,68	0,21679	1,92

0,57461	43,25	0,37357	3,1	0,28532	4,7	0,21468	1,35
0,51166	7,17	0,36961	3,99	0,28122	11,19	0,21119	4,52
0,51078	32,71	0,36805	4,51	0,28097	2,82	0,20769	1,15
0,48807	17,47	0,36042	5,28	0,27776	2,17	0,20471	1,12
0,48674	10,85	0,35988	6,09	0,27774	1,46	0,2028	1,63
0,4865	10,98	0,35819	6,8	0,27162	1,76	0,19935	1,03
0,48425	13,19	0,35721	8,55	0,27041	3,63	0,19883	2,96
0,48018	3,32	0,35355	2,47	0,26875	1,42	0,19181	1,27
0,47632	10,57	0,3407	1,2	0,26443	2,19	0,19058	1,03
0,47491	4,16	0,33461	4,91	0,26084	3,75	0,1884	1,23
0,4641	1,96	0,33318	7,54	0,26025	1,6	0,18797	2,49
0,4629	19,73	0,33154	4,36	0,25809	1,31	0,18749	2,81
0,43314	9,53	0,32827	1,7	0,25448	1,21	0,17939	1,57
0,43301	3,65	0,32774	1,22	0,25438	3,26	0,17617	1,24
0,43066	26,66	0,32434	19,95	0,24325	2,47	0,17379	1,82
0,42909	51,91	0,3224	2,11	0,24212	1,24	0,17194	1,03
0,42798	24,75	0,30663	1,38	0,24163	4,39

Predmetom vynálezu je teda 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6, 7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl] -3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínová látka vykazujúca PXRD obrazec v podstate ako je definovaný v tabulke 1 pri meraní vyššie uvedeným spôsobom.

Ako bude odborníkovi v obore kryštalografie zrejmé, zatial čo relatívne intenzity rôznych píkov uvedených v tabulke 1 sa vplyvom rôznych faktorov, ako sú účinky orientácie kryštálov vo zväzku rôntgenových lúčov alebo čistota analyzovanej látky alebo stupeň kryštaličnosti vzorky, môžu meniť, polohy píkov zostanú v podstate rovnaké, ako sú definované v tabulke.

Odborníkom v obore kryštalografie tiež bude zrejmé, že merania pri použití iných vlnových dĺžok povedú k rôznym posunom podľa Braggovej rovnice ηλ= 2d sin Θ.

Také ďalšie PXRD obrazce 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu generované za použitia iných vlnových dĺžok sú považované za alternatívne vyjadrenie PXRD obrazca kryštalickej látky podlá vynálezu, a ako také spadajú do rozsahu tohoto vynálezu.

Rovnaká zlúčenina, ako je definovaná XRD obrazcom popísaným v tabulke 1, pripravená alternatívnym spôsobom (podrobne popísaným v príkladoch uskutočnenia) môže mať teplotu topenia v rozmedzí od 155 do 165°C (merané pri použití zariadenia Perkin Elmer DSC/TGA7 pri rýchlosti zahrievania 20°C/min).

Skúšky ukazujú, že kryštalická zlúčenina definovaná v tomto texte má sklon vyskytovať sa v jednej polymorfnej forme, ako je podrobne popísaná vyššie a ilustrovaná ďalej.

Monomorfné zlúčeniny sú pre farmaceutické účely obzvášť žiadúce.

Kryštalickú zlúčeninu podľa vynálezu, ďalej označovanú ako zlúčenina, je možné podávať samotnú, ale obvykle sa podáva v zmesi s vhodnými farmaceutickými expicientami, riedidlami alebo nosičmi, ktoré sú zvolené s ohľadom na zvolený spôsob podávania a štandardnú farmaceutickú prax.

Napríklad je možné ju podávať perorálne, bukálne alebo sub-linguálne vo forme tabliet, toboliek (ako mäkkých želatínových toboliek), ovulí, elixírov, roztokov alebo suspenzií, ktoré môžu obsahovať aromatizačné alebo farbiace činidlá, a sú určené pre okamžitú, odloženú, modifikovanú, riadenú, ako s trvalým uvoľňovaním, duálnu, alebo pulznú dodávku. Zlúčeninu je tiež možné podávať intrakavernálnymi injekciami. Zlúčeninu je tiež možné podávať v rýchlo sa dispergujúcich alebo rozpúšťajúcich formách alebo vo forme vysokoenergetickej disperzie alebo potiahnutých častíc. Vhodné farmaceutické formulácie zlúčeniny môžu byť podľa potreby potiahnuté alebo nepotiahnuté.

Také tablety môžu obsahovať excipienty, ako je mikrokryštalická celulóza, laktóza, citran sodný, uhličitan vápenatý, dibázický foforečnan vápenatý, glycín a škrob (prednostne kukuričný, zemiakový alebo tapiokový škrob), rozvolňovadlá, ako sodnú sol škrobového glykolátu, sodnú sol kroskarmelózy a určité komplexné silikáty, a granulačné spájadlá, ako sú polyvinylpyrrolidón, hydroxypropylmetylcelulóza (HPMC), hydroxypropylcelulóza (HPC), sacharóza, želatína a arabská guma. Okrem toho môžu obsahovať tiež lubrikačné činidlá, ako je stearan horečnatý, kyselina stearová, glycerylbehenát a mastenec.

Pevné kompozície podobného typu sa tiež môžu používať ako plnivá v želatínových tobolkách. Ako excipienty, ktorým sa v tomto ohľade dáva prednosť, je možné uviesť laktózu, škrob, celulózu alebo vysokomolekulárne polyetylénglykoly. Vo vodných suspenziách a/alebo elixíroch môže byť zlúčenina kombinována s rôznymi sladidlami alebo aromatizačnými činidlami, farbiacimi látkami alebo farbivami, s emulgačnými a/alebo suspenzačnými činidlami a riedidlami, ako je voda, etanol, propylénglykol alebo glycerol, a ich kombináciami.

Dávkovacie formy s modifikovaným a pulzným uvoľňovaním môžu obsahovať také excipienty, aké sú popísané u foriem s okamžitým uvoľňovaním, spolu s prídavnými excipientami, ktoré účinkujú ako modifikátory rýchlosti uvoľňovania, môžu byť obalené a/alebo začlenené do telesa zariadenia na dodávku liečiva. Ako neobmedzujúce príklady modifikátorov rýchlosti uvoľňovania je možné uviesť hydroxypropylmetylcelulózu, metylcelulózu, sodnú sol karboxymetylcelulózy, etylcelulózu, acetát celulózy, polyetylenoxid, xantánovú živicu, karbomer, kopolymér amóniummetakrylátu, hydrogenovaný ricínový olej, karnaubský vosk, parafínový vosk, acetát ftalát celulózy, ftalát hydroxypropylmetylcelulózy, kopolymér metakrylovej kyseliny a ich zmesi. Formy s modifikovaným a pulzným uvolňovaním môžu obsahovať jeden excipient modifikujúci rýchlosť uvoľňovaná alebo kombináciu takých excipientov. Tieto excipienty môžu byť prítomné v dávkovacej forme, t.j. matrici, a/alebo na dávkovacej forme, t.j. na povrchu alebo obale.

Formulácie s rýchlym dispergovaním alebo rozpúšťaním môžu obsahovať nasledujúce zložky: aspartám, acesulfám draselný, kyselinu citrónovú, sodnú sol kroskarmelózy, krospovidón, kyselinu diaskorbovú, etylakrylát, etylcelulózu, želatínu, hydroxypropylmetylcelulózu, stearan horečnatý, mannitol, metylmetakrylát, arómu mäty, polyetylénglykol, sublimovaný oxid kremičitý, oxid kremičitý, sodnú sol škrobového glykolátu, stearylfumarát sodný, sorbitol a xylitol. Pojmy dispergovanie a rozpúšťanie, ktoré sa používajú pri popise vyššie uvedených formulácií, závisia od rozpustnosti použitej liečivej látky, tzn. že keď je látka nerozpustná, je možné pripraviť dávkovaciu formu s rýchlym dispergovaním, a keď je rozpustná, je možné pripraviť dávkovaciu formu s rýchlym rozpúšťaním.

Zlúčeninu je tiež možné podávať parenterálne, ako napríklad intrakavernózne, intravenózne, intraarteriálne, intraperitoneálne, intracekálne, intraventrikulárne, intrauretrálne, intrasternálne, intrakraniálne, intramuskulárne alebo subkutánne, alebo za použitia infúznych techník. Zlúčenina sa najlepšie používa vo forme sterilných vodných roztokov, ktoré môžu obsahovať aj iné látky, napríklad soli alebo glukózu v množstve dostatočnom pre izotonizáciu roztoku vzhľadom na krv. Vodné roztoky by v prípade potreby mali byť účelne pufrované (prednostne na pH 3 až 9). Vhodné parenterálne formulácie sa pripravujú za sterilných podmienok štandardnými farmaceutickými spôsobmi, ktoré sú odborníkom v tomto obore dobre známe.

Denná dávka zlúčeniny na perorálne a parenterálne podávanie človeku bude obvykle ležať v rozmedzí od 10 do 500 mg/kg, a môže byť podaná vo forme jedinej dávky alebo niekoľkých čiastočných dávok.

Tablety alebo tobolky budú teda obsahovať 5 až 250 mg účinnej zlúčeniny pre podávanie jednej, dvoch alebo viac jednotiek naraz. Skutočné dávkovanie stanoví v každom konkrétnom príklade lekár tak, aby sa dosiahli optimálne výsledky u jednotlivých pacientov. Skutečne zvolené dávkovanie sa bude meniť v závislosti od veku, hmotnosti a odpovedi konkrétneho pacienta. Vyššie uvedené dávkovanie je teda uvedené ako príklad vhodný pre priemerný prípad a je samozrejmé, že v niektorých prípadoch bude vhodnejšie použiť zvýšené alebo znížené dávkovanie. Všetky také úpravy spadajú do rozsahu tohoto vynálezu. Odborníkom v tomto obore tiež bude zrejmé, že pri liečení niektorých stavov (ako MED alebo FSD) je zlúčeninu možné podávať vo forme jedinej dávky podávanej pódia potreby (t.j. ako je nutné alebo ako je žiadúce).

Príklad tabletovej formulácie

Tabletová formulácia typicky môže obsahovať asi 0,01 mg a 500 mg zlúčeniny, pričom hmotnosť tabletovej náplne môže byť v rozmedzí od asi 50 do asi 1000 mg. lOmg tableta môže mať napríklad nasledujúce zloženie:

Zložka % hmotn.

Zlúčenina vo forme voľnej kyseliny,
Voľnej bázy alebo soli	10,000
Laktóza
Škrob	21,375
Sodná soľ kroskarmelózy	3,000
Stearan horečnatý	1,500

*Množstvo sa obvykle upraví na základe aktivity liečiva.

Také tablety je možné vyrábať štandardnými spôsobmi, napríklad priamym lisovaním alebo granuláciou za vlhka alebo za sucha. Jadrá tabliet je možné opatriť vhodnými obalmi.

Zlúčeninu je tiež možné podávať intranasálne alebo inhalačné. Pritom sa účelne používajú inhalátory na suché prášky alebo aerosólové spreje uvoľňované z tlakovky, pumpičky, spreja alebo zahmľovača, poprípade za použitia vhodného hnacieho plynu, napríklad dichlórdifluórmetánu, trichlórfluórmetánu, dichlórtetrafluóretánu, hydrofluóralkánu, ako 1,1,1,2-tetra-fluóretánu (ΗΡΑ 134A®) alebo 1,1,1,2,3,3,3heptafluórpropánu (HFA 227EA®), oxidu uhličitého alebo iných vhodných plynov. V prípade tlakových aerosólových balení môže byť jednotková dávka určená spustením ventila uvoľňujúceho vopred stanovené množstvo spreja. Tlakovky, pumpičky alebo zahmľovača môžu obsahovať roztok alebo suspenziu účinnej zlúčeniny, napríklad za použitia zmesi etanolu a hnacieho plynu ako rozpúšťadla, a môžu prídavné obsahovať lubrikanty, napríklad sorbitantrioleát. Tobolky a patróny (ktoré sú napríklad zhotovené zo želatíny) na použitie v inhalačnom zariadení alebo insuflátore môžu obsahovať práškovú zmes zlúčeniny podlá vynálezu s vhodným práškovým základom, ako je laktóza alebo škrob.

Aerosólové prostriedky sú prednostne upravené tak, aby jedna dávka odmeraná spustením ventila obsahovala 1 až 50 mg zlúčeniny. Celková denná dávka za použitia aerosólu by potom mala ležať v rozmedzí od 1 mg do 50 mg. Podávanie sa môže uskutočňovať jednorázovo alebo, obvyklejšie, niekoľkokrát v priebehu dňa.

Zlúčeninu je tiež možné formulovať pre dodávku za použitia atomizéra. Formulácie pre atomizéry môžu ako solubilizátory, emulgátory alebo suspenzné činidlá obsahovať vodu, etanol, glycerol, propylénglykol, polyetylénglykoly s nízkou molekulárnou hmotnosťou, chlorid sodný, fluorované uhlovodíky, etéry polyetylenglykolu, sorbitan trioleát a kyselinu olejovú.

Zlúčeninu je tiež možné alternatívne podávať vo forme čapíkov alebo pesarov alebo je možné ju aplikovať topicky vo forme gélov, hydrogélov, lotionov, roztokov, krémov, mastí alebo zásypov. Tiež je možné ju podávať dermálne a do úvahy tiež prichádza transdermálne podávanie, napríklad za použitia transdermálnych náplastí. Je možné ju tiež podávať okulárne, pulmonárne alebo rektálne.

Za účelom oftalmického podávania je zlúčeninu možné formulovať do podoby mikronizovaných suspenzií v izotonickom sterilnom solnom roztoku s upraveným pH alebo, prednostne, do podoby roztokov v izotonickom sterilnom solnom roztoku s upraveným pH, ktoré poprípade obsahujú konzervačné činidlo, ako benzyl-alkóniumchlórid. Alternatívne môžu mať formu masti, ako vazelínovej masti.

Za účelem topickej aplikácie na kožu je zlúčeninu možné spracovávať do formy vhodných mastí, ktoré obsahujú účinnú zlúčeninu suspendovanú alebo rozpustenú v minerálnom oleji, kvapalnej vazelíne, bielej vazelíne, propylenglykolu, zlúčenine polyoxyetylénu a polyoxypropylénu, emulgačnom vosku a/alebo vode'. Alternatívne je zlúčeninu možné formulovať ako vhodné lotiony alebo krémy, v ktorých je suspendovaná alebo rozpustená napríklad v zmesi jednej alebo viac z nasledujúcich látok: minerálneho oleje, sorbitan monostearátu, polyetylenglykolu, kvapalného parafínu, polysorbate 60, cetylesterových voskov, cetaryialkoholu, 2-oktyldodekanolu, benzylakoholu a vode.

Zlúčeninu je tiež možné používať v kombinácii s cyklodextrínmi. O cyklodextrínoch je známe, že s molekulami liečiv tvoria inkluzné a neinkluzné komplexy. Vytvorenie komplexu liečivo-cyklodextrín môže modifikovať rozpustnosť, rýchlosť rozpustenia, biodostupnosť a/alebo stabilitu molekuly liečiva. Také komplexy sú obvykle užitočné vo väčšine dávkovacích foriem a pri väčšine spôsobov podávania. Ako alternatívu k priamej tvorbe komplexov s liečivami je cyklodextrín možné použiť ako pomocné aditívum, napríklad ako nosič, riedidlo alebo prostriedok zlepšujúci rozpustnosť. Vhodné príklady najčastejšie používaných alfa-, beta- a gammacyklodextrínov sú uvedené vo WO-A-91/11172, WO-A-94/02518 a WO-A-98/55148.

U ľudí sa obvykle dáva prednosť perorálnemu podávaniu zlúčeniny, pretože je najúčelnejšia a napríklad pri MED umožňuje vyhnúť sa dobre známym nevýhodám, ktoré sú spojené s intrakavernóznym (i.c.) podávaním. Pri typickom dávkovacom režime pri MED sa typickému mužovi- v prípade potreby podá 5 až 250 mg zlúčeniny. V prípadoch, keď recipient trpí poruchou prehítania alebo zhoršenou absorpciou liečiva po perorálnom podaní, je liečivo možné podávať parenterálne, sublinguálne alebo bukálne.

Pri použití vo veterinárnej medicíne sa zlúčenina podáva vo forme vhodných formulácií v súlade s normálnou veterinárnou praxou. Dávkovací režim a spôsob podávania, ktoré sú najvhodnejšie pre konkrétne zviera, zvolí ošetrujúci lekár.

Predmetom vynálezu je teda farmaceutická kompozícia, ktorej podstata spočívá v tom, že obsahuje kryštalickú zlúčeninu podlá vynálezu spolu s farmaceutický vhodným riedidlom alebo nosičom.

Ďalej je predmetom vynálezu veterinárna formulácia, ktorej podstata spočívá v tom, že obsahuje kryštalickú zlúčeninu podía vynálezu spolu s farmaceutický vhodným riedidlom alebo nosičom.

Kryštalickú látku definovanú v tomto texte je možné pripravovať spôsobmi popísanými v nasledujúcich preparatívnych postupoch a príkladoch uskutočnenia.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Preparatívny postup 1

Príprava východzích látok pre príklad 1

N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2- etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamid

(a) 2-hydroxy-5-sulfonikotínová kyselina

2-hydroxynikotínová kyselina (27 kg, 194,2 mol) sa po častiach počas 1 hodiny pri 50°C pridá k 30% oleju (58,1 kg), pričom vplyvom exotermickej reakcie dôjde na zvýšenie teploty na 82°C. Reakčná zmes sa ďalej zahreje na 140°C a pri tejto teplote udržuje 12 hodín. Potom sa obsah reaktora ochladí na 15°C a prefiltruje. Filtračný koláč sa pri teplote miestnosti resuspenduje v acetóne (33 kg). Vzniknutá suspenzia sa prefiltruje a produkt sa vysuší. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (35,3 kg, 83 %) vo forme bielej pevnej látky. Rozklad pri 273°C. δ (DMSO-dg): 7,93 (1H, d), 8,42 (1H, d), m/z (nájdené: 220 [M+H]⁺, 100%, C5H5NO5S vypočítané: 220,17).

(b) ety1-2-hydroxy-5-sulfonikotinoát

2-hydroxy-5-sulfonikotínová kyselina (500 g, 2,28 mol) sa počas miešania a zahrievania na 80°C rozpustí v etanole (2,5 litru). Po 30 minútach sa z roztoku oddestiluje 0,5 litra rozpúšťadla a k zmesi sa pridá čerstvý etanol (0,5 litra). Vzniknutá zmes sa znova zahreje na 80°C a po ďalších 60 minútach sa oddestiluje 1,0 litra rozpúšťadla a k zmesi sa pridá čerstvý etanol (1,0 litra). Vzniknutá zmes sa znova zahreje na 80°C a po ďalších 60 minútach sa z nej oddestiluje 1,0 litra rozpúšťadla. Reakčná zmes sa ochladí na 22°C a 16 hodín mieša. Vyzrážaný produkt sa odfiltruje, premyje etanolom (0,5 litra) a suší vo vákuu pri 50°C. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (416 g, 74 %) vo forme bielej pevnej látky. Rozklad pri 237°C. δ (DMSO-d₆): 1,25 (3H, t), 4,19 (2H, q),

7,66 (1H, d), 8,13 (1H, d), m/z (nájdené: 248 [M+H]⁺, 100 %, CgHiQNOgS vypočítané: 248).

(c) etyl-2-chlór-5-chlórsulfonylnikotinoát etyl-2-hydroxy-5-sulfonikotinoát (24,7 g, 0,1 mol) sa počas miešania suspenduje v tionylchlóride (238 g, 2,0 mol) a dimetylformamidu (1,0 ml). Reakčná zmes sa 2,5 hodiny zahrieva na spätný tok a potom sa z nej pri zníženom tlaku odstráni väčšina tionylchlóridu. Zvyškový tionylchlorid sa odstráni azeotropickou destiláciou s toluénom. Získa sa surová titulná zlúčenina (30,7 g, 108 %) vo forme žltého oleja, δ (CDCI3):

1,46 (3H, t), 4,50 (2H, q), 8,72 (1H, d), 9,09 (1H, d). Tento produkt sa použije priamo v nasledujúcom stupni.

(d) etyl-2-chlór-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinoát

Surový etyl-2-chlór-5-chlórsulfonikotinoát (30,7 g, predpoklad 0,1 mol) sa počas miešania rozpustí v etylacetáte (1.50 ml) . Vzniknutý roztok sa ochladí ladom a opatrne sa k nemu počas 30 minút pridá roztok N-etylpiperazínu (11,4 g, 0,1 mol) a trietylamínu (22,5 g, 0,22 mol) v etylacetáte (50 ml), pričom sa vnútorná teplota udržiava pod 10°C. Po dokončení prídavku sa reakčná zmes nechá zahriať na 22°C a 1 hodinu mieša. Pevná látka sa odfiltruje a filtrát sa skoncentruje pri zníženom tlaku. Získa sa surová titulná zlúčenina (37,1 g, 103 %) vo forme surovej žltej živice, δ (CDCI3): 1,10 (3H, t), 1,42 (3H, m), 2,50 (2H, m), 2,60 (4H, m), 3,19 (4H, m), 4,43 (2H, q), 8,40 (1H, d), 8,80 (1H, d), m/z (nájdené 362 [M+H]⁺, 100 %. C14H21CIN3O4S vypočítané: 362,85).

(e) etyl-2-etoxy-5-(4-etyľľpiperazinylsulfonyl)nikotinoát

Roztok etyl-2-chlór-5-(4-etyl-ľpiperazinylsulfonyl)nikotinoátu (36,1 g, 0,1 mol) v etanole (180 ml) sa počas miešania ochladí na 10°C a po častiach sa k nemu pridá etoxid sodný (10,2 g, 0,15 mmol). Počas prídavku sa teplota udržiava pod 20°C. Reakčná zmes sa mieša 18 hodín pri teplote okolia, a potom sa z nej odfiltruje zrazenina. K filtrátu sa pridá voda (180 ml) a vodná zmes sa 1 hodinu zahrieva na 40°C. Etanol (180 ml) sa oddestiluje pri okolitom tlaku a výsledný vodný roztok sa nechá schladnúť na teplotu okolia. Vyzrážaný produkt sa odfiltruje, premyje vodou a suší vo vákuu pri 50°C. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (12,6 g, 34 %) vo forme svetlo hnedej pevnej látky s teplotou topenia 66 až 68°C. δ (CDCI3):

1,04 (3H, t), 1,39 (3H, t), 1,45 (3H, t), 2,41 (2H, q), 2,52 (4H, m), 3,08 (4H, m), 4,38 (2H, q), 2,57 (2H, q), 8,38 (1H, d), 8,61 (1H, d), m/z (nájdené: 372 [M+H]⁺, 100 %. C^gH26N3O5S vypočítané: 372,46) (f) 2-etoxy-5- (4-etyľľpiperazinylsulfonyl) nikotínová kyselina etyl-2-etoxy-5- (4-etyľľpiperazinylsulfonyl) nikotinoát (10,2 g, 0,0275 mol) se rozpustí v toluénu (50 ml) a k vzniknutému roztoku sa pridá roztok hydroxidu sodného (1,1 g,

0,0275 mol) vo vode (20 ml). Táto dvojfázová zmes sa intenzívne mieša cez noc pri teplote miestnosti. Vodná fáza sa oddelí a jej pH sa prídavkom koncentrovanej kyseliny chlorovodíkovej nastaví na 5,6. Vyzrážaný produkt sa 15 minút počas chladenia ladom mieša s vodou, odfiltruje, premyje vodou a suší vo vákuu pri 50°C. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (4,1 g, 43 %) vo forme špinavo bielej pevnej látky s teplotou topenia 206 až 207°C. δ (CDC1₃): 1,25 (3H, t), 1,39 (3H, t), 2,82 (2H, q), 3,03 (4H, m), 3,25 (4H, m), 4,50 (2H, q), 8,25 (1H, d), 8,56 (1H, d), m/z (nájdené: 344 [M+H]⁺, 100 %. ^C14^H22^N3°5^S vypočítané 344,38).

(g) etyl-3-etyl-lH-pyrazol-5-karboxylát

K miešanému roztoku 2,2-dimetoxybutánu (10 g, 84,7 mmol) v dichlórmetánu (50 ml) sa pod atmosférou dusíka pri 0°C pridá pyridín (13,7 ml, 169,5 mmol). Reakčná zmes sa udržiava pri 0°C a počas 1 hodiny sa k nej pri konštantnom miešaní pridá roztok trichlóracetylchlóridu (18,9 ml, 169,5 mmol) v dichlórmetánu (35 ml). V priebehu reakcie sa zo žltooranžového roztoku začne vylučovať biela pevná látka. Reakčná zmes sa počas 20 hodín nechá zahriať na teplotu miestnosti a zredí sa etanolom (150 ml). Etanolická zmes sa ochladí na 0°C a počas 30 minút sa zmieša s hydrátom hydrazínu (8,2 ml, 169,5 mmol) vo forme roztoku v etanole (35 ml). Reakčná zmes sa zahreje na 50°C a pri atmosférickom tlaku sa z nej oddestiluje rozpúšťadlo. Teplota sa zvyšuje, dokiaľ sa v hlave destilačnej kolóny nedosiahne 78°C. Spätný tok sa udržiava ďalšie 2 . hodiny, potom sa zmes ochladí na teplotu.miestnosti a zredí vodou (250 ml) Z vodnej zmesi-sa pri zníženom tlaku odparí etanol. Zvyšok sa extrahuje dichlórmetánom (3 x 200 ml).

Spojené organické roztoky sa vysušia síranom horečnatým, prefiltrujú a filtrát sa odparí pri zníženom tlaku. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme hnedého oleja (12,05 g, 85 %) .

lH NMR (CDC1₃, 300 MHz): δ 1,20 (3H, t), 1,28 (3H, t), 2,67 (2H, q), 4,29 (2H, q), 6,55 (IH, s), 12,56 (IH, s)

LRMS m/z = 167,1 [M-H]⁺,. <3θΗ^2^Ν2°2 vypočítané: 168,2 (h) etyl-3-etyl-lH-pyrazol-5-karboxyiová kyselina

Vodný roztok hydroxidu sodného (10M, 100 ml, 1,0 mol) sa prikvapká k miešanej suspenzii titulnej zlúčeniny z preparatívneho postupu 1(g) (66,0 g, 0,39 mol) v metanole.

Výsledný roztok sa 4 hodiny zahrieva na spätný tok. Chladná reakčná zmes sa skoncentruje pri zníženom tlaku na objem asi 200 ml· a zredí vodou (200 ml). Vodná zmes sa premyje toluénom (3 x 100 ml). Výsledná vodná fáza sa okyslí koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou na pH 4 . Zhromáždi sa biela zrazenina, ktorá sa vysuší odčerpaním. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (34,1 g), δ (DMSO-dg): 1,13 (3H, t), 2,56 (2H, q), 6,42 (IH, s) (i) 4-Nitro-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina

Dýmavá ??? kyselina sírová (17,8 ml) sa prikvapká k miešanej ladom chladenej dymivej kyseline dusičnej (16,0 ml). Výsledný roztok sa zahreje na 50°C a po častiach počas 30 minút, keď sa teplota udržiava pod-60°C, sa k nemu pridá 3-npropyl-lH-pyra-zol-5-karboxylová kyselina (Chem. Pharm. Bull.,

1984, 32, 1568, 16,4 g, 0,106 mol). Reakčný roztok sa 18 hodín zahrieva na 60°C, nechá sa schladnúť a naleje sa na ľad. Biela zrazenina sa zhromáždi, premyje vodou a vysuší odčerpaním. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (15,4 g) s teplotou topenia 170 až 172°C. Analýza pre C7H9N3O4: vypočítané: C

42,21, H 4,55, N 21,10, nájdené: C 42,35, H 4,56, N 21,07 %. δ (DMSO-dg): 0,90 (3H, t), 1,64 (2H, m), 2,83 (2H, m), 14,00 (1H, s) (j) 3-etyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxylová kyselina

Podobným spôsobom, aký je popísaný v preparátívnom postupe 1(h) sa z titulnej zlúčeniny z preparatívneho postupu 2 (i) vyrobí zlúčenina uvedená v nadpise vo forme hnedej pevnej látky (64 %) . δ (DMSO-dg): 1,18 (3H, t), 2,84 (2H, m), 13,72 (1H, s) (k) 4-Nitro-3-n-propyl-lH-pyrazol-5-karboxamid

Roztok titulnej zlúčeniny z príkladu 1(i) (15,4 g, 0,077 mol).v tionylchlóridu (75 ml) sa 3 hodiny zahrieva na spätný tok. Chladná reakčná zmes sa odparí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa azeotropicky odparí s tetrahydrofuránom (2 x 50 ml) a potom suspenduje v tetrahydrofuránu (50 ml). Na vzniknutú suspenziu sa. počas miešania a chladenia ladom 1 hodinu pôsobí amoniakom. K.vzniknutej zmesi sa pridá voda (50 ml) a vodná zmes sa odparí pri zníženom tlaku. Pevný zvyšok sa tritúruje s vodou a vysuší odčerpaním. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (14,3 g) s teplotou topenia 197 až 199°C. Analýza pre 0711^0^46)3:

vypočítané: C 42,42, H 5,09, N 28,27, nájdené: C 42,35, H 5,07, N 28,38 %. δ (DMSO-dg): 0,90 (3H, t), 1,68 (2H, m), 2,86 (2H, t), 7,68 (1H, s), 8,00 (1H, s) (1) 3-etyl-4~nitro-lH-pyrazol-5-karboxamid

Podobným spôsobom, aký je popísaný v preparatívnom postupe 1(i) sa z titulnej zlúčeniny z preparatívneho postupu 1(k) vyrobí zlúčenina uvedená v nadpise vo forme bielej pevnej látky (90 %). 5 (DMSO-dg): 1,17 (3H, t), 2,87 (2H, m), 7,40 (1H, s), 7,60 (1H, s), 7,90 (1H, s). LRMS: m/z 185 (M+l) + (m) (i) 5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid

Zmes 3-etyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamidu (2,5 kg, 13,6 mol), uhličitanu sodného (1,8 kg, 17,0 mol) a 2-brÓmetylmetyletéru (1,98 kg, 14', 2 mol) v tetrahydrofuránu (22,5 litru) a vode (2,5 litru) sa 20 hodín počas miešania zahrieva na spätný tok, potom sa ochladí na teplotu okolia a pridá sa k nej dichlórmetán (67,5 litra) a voda (22,5 litra). Organická a vodná vrstva sa oddelí. Vodná fáza sa extrahuje dichlórmetánom (22,5 litru). Spojené organické roztoky sa destilujú pri atmosférickom tlaku počas dopĺňania etylacetátom (33 litrov) na konečný objem 17 litrov. Ochladená zmes sa 2 hodiny nechá granulovať pri teplote miestnosti, prefiltruje a premyje etylacetátom (2,5 litra). Získa sa 5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3 -karboxamid vo forme bielej kryštalickej pevnej látky (2,10 g, 57 %) s teplotou topenia 140°C. Analýza pre C 44,46, H 5,79, N 23,01 C9H14N4O4: vypočítané: 44,63, H 5,79, N 23,14 % δ (CDCI3): 1,18 (3H, t), 2,98 (2H, q), 3,22 (3H, s), 3,77 (2H, t), 4,28 (2H, q), 6,03 (1H, s), 7,36 (1H, s)

LRMS: m/z 243 (M+l) ⁺ (m) (ii) 5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid

Zmes 3-etyl-4-nitro-lH-pyrazol-5-karboxamidu (25 g, 0,136 mol), uhličitanu sodného (18 g, 0,17 mol) a jodidu sodného (20,4 g, 0,136 mol) sa pri teplote miestnosti suspenduje v etylmetylketónu (125 ml). K vzniknutej suspenzii sa pridá 2-brómetylmetyletér (12,8 ml, 0,142 mol). Reakčná zmes sa 70 hodín mieša pri teplote spätného toku, ochladí sa na teplotu okolia a pridá sa k nej voda (250 ml). Vodná suspenzia sa zahreje na teplotu spätného toku a pri tejto teplote sa udržiava po dobu 30 minút, a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Vylúčená zrazenina sa nechá granulovať 3 hodiny pri teplote miestnosti, od-filtruje a vysuší vo vákuu. Získa 5-etyl-l-(2-metoxyetyl)—4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamid vo forme žltej kryštalickej pevnej látky (24,3 g, 74 %). Údaje o tejto zlúčenine sú uvedené v preparatívnom postupe 1(m)(i).

(n) 4-Amino-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid

Zmes 5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-4-nitro-lH-pyrazol-3-karboxamidu (20 g, 82,6 mmol) a 5% palládia na uhlíku (1 g) v metanole (200 ml) sa v uzavretej nádobe pri 25°C podrobí tlaku 343,5 kPa a 15 hodín mieša. Potom sa reakčná zmes prefíltruje cez arbocel a filtračný koláč sa premyje metanolom.

Metanolický roztok sa podrobí destilácii pri atmosférickom tlaku a jeho objem sa doplní etylacetátom na 100 ml. Ochladená zmes sa nechá granulovať 2 hodiny pri teplote okolia, prefiltruje sa a filtrát sa premyje etylacetátom (20 ml).

Získa sa 4-amíno-5—etyl-1-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-3karboxamid vo forme bielej kryštalickej pevnej látky (15 g, 88 %) s teplotou topenia 131°C. Analýza pre C9H16N4O2:

vypočítané: C 50,94, H 7,55, N 26,42, nájdené: C 50,75, H 7,62, N 26,38 % δ (CDCI3): 1,20 (3H, t), 2,63 (2H, q), 3,32 (3H, s), 3,74 (2H, t), 3,.95 (2H, s), 4,15 (2H, t), 5,27 (1H, s), 6,59 (1H, s) LRMS:' m/z 213 (M+l) + (o) N-[3-Karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotínamid spôsob (a)

2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotínová kyselina - (2,31 kg, 6,73 mol) sa suspenduje v etylacetátu (16,2 litru). K vzniknutej suspenzii sa pri teplote miestnosti pridá 1,1-karbonyldiimidazol (1,09 kg, 6,73 mol). Reakčná zmes sa 40 minút zahrieva na 45°C, potom sa 40 minút mieša pri teplote spätného toku, ochladí sa na teplotu okolia a pridá sa k nej 4-amino-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (1,5 kg, 7,06 mol). Výsledná zmes sa ďalších 15 hodín mieša pri teplote spätného toku, ochladí a prefiltruje. Filtračný koláč sa premyje zmesou tvorenou 90 % vody a 10 % etylacetátu (2 ml/g). Získa sa N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-1H-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsufonyl)nikotinamid vo forme špinavo bielej kryštalickej pevnej látky (3,16 kg, 88 %) s teplotou topenia 156°C. Analýza pre C23H35N7O6S: vypočítané: C 51,40, H 6,53, N 18,25, nájdené: C 51,33, H 6,56, N 18,36 % δ (CDCI3): 1,04 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,44 (2H,

q), 2,54 (4H, m), 2,96 (2H, q), 3,12 (4H, m), 3,36 (3H, s), 3,81 (2H, t), 4,27 (2H, t), 4,80 (2H, q), 5,35 (1H, s), 6,68 (1H, s), 8,66 (1H, d), 8,86 (1H, d), 10,51 (1H, s)

LRMS: m/z = 539 (M+l)⁺ spôsob (b)

2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotínová kyselina (57,5 g, 0,08 mol) sa suspenduje v etylacetátu (0,193 litra) a k vzniknutej suspenzii sa pri teplote miestnosti pridá 1,1-karbonyldiimidazol (13,3 kg, 0, 082 mol). Reakčná zmes sa 15 minút zahrieva na 45°C, potom sa 60 minút mieša pri teplote spätného toku, ochladí na teplotu okolia a pridá sa k nej 4-amino-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (16,5 g, 0,078 mol). Reakčná zmes sa ďalších 17 počas miešania zahrieva na spätný tok. Výsledný roztok sa ochladí a pridá sa k nemu voda (0,07 litru) a etylacetát (0,17 litru). Vzniknutá suspenzia sa zahreje na 40°C. Organická vrstva sa oddelí a skoncentruje odparením 0,23 litra rozpúšťadla. Získaná suspenzia sa ochladí a nechá granulovať pri 0 až 10°C, prefiltruje a filtračný koláč sa premyje zmesou 90 % vody a 10 % etylacetátu (2 ml/g). Získá sa N-[3-karbamoyl-5-etyl-l- - (2metoxyetyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl )nikotinamid vo forme špinavo bielej kryštalickej pevnej látky (38,7 g, 89 %) s teplotou topenia 159 až 161°C. δ (CDC1₃): 1,04 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,61 (3H, t), 2,42 (2H,

q), 2,54	(4H,	m) , 2,96	(2H,	q) >	3,12	(4H, m), 3	, 36	(3H,	s) ,
3,81 (2H,	t) ,	4,27 (2H,	t) ,	4,78	(2H,	q) z 5,35	(1H,	s) ,	6, 68
(1H, s),	8,66	(1H, d),	8,86	(1H,	d) ,	10,51 (1H,	s)

LRMS: m/z = 538 (M+l)+

Príprava východzích látok pre príklad 2 (a) pyridín-2-amino-5-sulfonová kyselina

NH₂

P o=s=o

OH

2-Aminopyridin (80 g, 0,85 mmol) sa po častiach počas 30 minút pridá k oleu (320 g). Výsledný roztok sa 4 hodiny zahrieva na 140°C a potom sa ochladí. Reakčná zmes sa naleje na lad (200 g) a 2 hodiny mieša v kúpeli zo soli a ladu. Vzniknutá suspenzia sa prefiltruje a pevná látka sa premyje ľadovou vodou (200 ml) a chladným IMS (200 ml) a vysuší odčerpaním. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme pevnej látky (111,3 g).

LRMS: m/z 175 (M+l)⁺

b) Pyridín-2-amino-3-brom-5-^jsulf onová kyselina

NH_t

.Br o-s⁼o ' OH

Bróm (99 g, 0,62 mol) sa počas hodiny prikvapká k horúcemu roztoku titulnej zlúčeniny zo stupňa a) (108 g, 0,62 mol) vo vode (600 ml) tak, aby sa trvalo udržal spätný tok. Po dokončení prídavku sa reakčná zmes ochladí a vzniknutá zmes sa prefiltruje. Pevná látka sa premyje vodou a vysuší odčerpaním. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise (53,4 g).

δ (DMSO-dg, 300MHz): 8,08 (1H, s), 8,14 (1H, s)

LRMS: m/z 253 (M) ⁺

c) Pyridín-3-bróm-2-chlór-5-sulfonylchlórid

Ci .Br o=s=o

Cl

Roztok dusitanu sodného (7,6 g, 110,0 mmol) vo vode (30 ml) sa prikvapká k ladom chladenému roztoku titulnej zlúčeniny zo stupňa b) (25,3 g, 100,0 mmol) vo vodnej kyseline chlorovodíkovej (115 ml, 20%) takou rýchlosťou, aby sa teplota udržala pod 6°C. Reakčná zmes sa 30 minút mieša pri 0°C, ďalšiu hodinu pri teplote miestnosti a potom sa odparí za zníženého tlaku. Zvyšok sa suší 72 hodín vo vákuu pri teplote 70°C. Zmes tejto pevnej látky, chloridu fosforečného (30,0 g, 144,0 mmol) a oxychloridu fosforečného (1 ml, 10,8 mmol) sa 3 hodiny zahrieva na 125°C, potom ochladí a naleje na lad (100 g) . Vzniknutá pevná· látka sa odfiltruje a premyje vodou. Produkt sa rozpustí v dichlórmetánu, dichlórmetánový roztok sa vysuší síranom horečnatým a odparí pri zníženom tlaku. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme žltej pevnej látky (26,58 g) .

Ô (CDC1₃, 300 MHz): 8,46 (1H, s), 8,92 (1H, s)

d) 3-bróm-2-chlór-5-(4-etyIpiperazín-1-ylsulfonyl)pyridín ci · .Br

Roztok 1-etylpiperazínu (11,3 ml, 89,0 mmol) a trietylamínu (12,5 ml, 89,0 mmol) v dichlórmetánu (150 ml) sa prikvapká k ľadom chladenému roztoku produktu zo stupňa c) (23,0 g, 79,0 mmol) v dichlórmetánu (150 ml). Reakčná zmes sa hodinu mieša pri 0°C a potom skoncentruje pri zníženom tlaku. Hnedý olejovitý zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou na silikagélu za použitia elučného gradientu dichlórmetán : me-tanol (99 : 1 až 97 : 3). Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme oranžovej pevnej látky (14,5 g).

δ (CDC1₃, 300 MHz): 1,05 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,12 (4H, m), 8,24 (1H, s), 8,67 (1H, s)

e) 3-Bróm-2-etoxy-5-(4-etyIpiperazín-1-ylsulfonyl)pyridín

Zmes produktu zo stupňa d) (6,60 g, 17,9 mmol) a etoxidu sodného (6,09 g, 89,55 mmol) v etanole (100 ml) sa 18 hodín zahrieva na spätný tok, potom ochladí a skoncentruje pri zníženom tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi vodu (100 ml) a etylacetát (100 ml). Vrstvy sa oddelia a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom (2 x 100 ml) . Spojené organické roztoky sa vysušia síranom horečnatým a odparia sa pri zníženom tlaku. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme hnedej pevnej látky (6,41 g).

Analýza pre Ci3H20^BrN3°3^s: vypočítané: C 41,35, H 5,28, N 10,99, nájdené: C 41,27, H 5,33, N 11,11 % δ (CDC1₃, 300 MHz): 1,06 (3H, t), 1,48 (3H, t), 2,42 (2H, q),

2,56 (4H, m), 3,09 (4H, m), 4,54 (2H, q), 8,10 (1H, s), 8,46 (1H, s)

LRMS: m/z 378, 380 (M+l)⁺

f) etylestér pyridín-2-etoxy-5-(4-etylpiperazín-l-ylsulfonyl)-3-karboxylovej kyseliny

Zmes produktu zo stupňa e) (6,40 g, 16,92 mmol), trietylamínu (12 ml, 86,1 mmol) a bis (trifenylfosfín)palládia(0) v etanole (60 ml) sa 18 hodín pod atmosférou oxidu uholnatého za tlaku·1374 kPa zahrieva na 100°C, potom ochladí a odparí pri zníženom tlaku. Zvyšok sa prečistí stĺpcovou chromatografiou na silikagélu za použitia elučného gradientu dichlórmetán : : metanol (100 : 0 až 97 :

3) . Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme oranžového oleja (6,2 g).

δ (CDC1₃, 300 MHz): 1,02 (3H, t), 1,39 (3H, t), 1,45 (3H, t),

2,40 (2H, q), 2,54 (4H, m), 3,08 (4H, m), 4,38 (2H, q), 4,55 (2H, q), 8,37 (1H, s), 8,62 (1H, s)

LRMS: m/z 372 (M+l)⁺

g) Pyridín-2-etoxy-5-(4-etylpiperazín-l-ylsulfonyl)-3-

Zmes produktu zo stupňa f) (4,96 g, 13,35 mmol) a vodného roztoku hydroxidu sodného (25 ml, 2M, 50,0 mmol) v etanole (25 ml) sa 2 hodiny mieša pri teplote miestnosti, potom pri zníženom tlaku skoncentruje na polovičný objem, premyje etérom a 4M kyselinou chlórovodíkovou okyslí na pH 5. Vodný roztok sa extrahuje dichlórmetánom (3 x 30 ml). Spojené organické extrakty sa vysušia síranom horečnatým a odparia pri zníženom tlaku. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise vo forme zlatohnedej pevnej látky (4,02 g).

δ (DMSO-dg, 300 MHz): 1,18 (3H, t), 1,37 (3H, t), 3,08 (2H, q), 3,17 3,35 (8H, m), 4,52 (2H, q), 8,30 (1H, s), 8,70 (1H, s) hú 4- [2-etox-y-5- (4-etylpiperazín-l-ylsulfonyl) pyridín-3-ylkarboxamido]-1H-3-etyIpyrazol-5-karboxamid

Roztok 4-amino-3-etyl-lH-pyrazolkarboxamidu (WO 9849166, preparatívny postup 8) (9,2 g, 59,8 mmol) v N,N-di.metylformamidu (60 ml) sa pridá k roztoku produktu zo stupňa g) (21,7 g, 62,9 mmol), hydrátu 1-hydroxybenzotriazolu (10,1 g, 66,0 mmol) a trietylamínu (13,15 ml, 94,3 mmol) v dichlórmetánu (240 ml). K vzniknutej zmesi sa pridá hydrochlorid l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimidu (13,26 g, 69,2 mmol). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri teplote miestnosti, a potom sa z nej pri zníženom tlaku odstráni dichlórmetán. Výsledný roztok sa naleje do etylacetátu (400 ml) a etylacetátová zmes sa premyje vodným roztokem hydrogénuhličitanu sodného (400 ml). Vzniknutá kryštalická zrazenina sa odfiltruje, premyje etylacetátom a vysuší vo vákuu.. Získa sa zlúčenina uvedená v nadpise ve forme bieleho prášku (22 g).

ô (CDCI3+I kapka DMSO-d₆): 0,96 (3H, t), 1,18 (3H, t), 1,50

3H,	t) ,	2,25 2,56	(6H,	m) ,	2,84	(2H, q)	, 3,00	(4H, m)	, 4,70
2H,	q)'	5,60 (1H,	brs) ,	r 6,	78 (1H	, brs),	8,56	(1H, d),	8,76
1H,	d),'	10,59 (1H,	s) ,	12,	10-12,	30 (1H,	s)

LRMS: m/z 480 (M+l)⁺ (i) N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotínamid

I

2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotínová kyselina (2,31 kg, 6,73 mol) sa suspenduje v etylacetáte (16,2 litra). K vzniknutej suspenzii sa pri teplote miestnosti pridá 1,1-karbonyldiimidazol (1,09 kg, 6,73 mol). Reakčná zmes sa 40 minút zahrieva na 45°C, potom 40 minút mieša pri teplote spätného toku, ochladí na teplotu okolia a pridá sa k nej 4-amino-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-3-karboxamid (1,5 kg, 7,06 mol). Výsledná zmes sa ďalších 15 hodín mieša pri teplote spätného toku, ochladí a prefiltruje. Filtračný koláč sa premyje zmesou tvorenou 90 % vody a 10 % etylacetátu (2 ml/g). Získá se N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-1H-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsufonyl)nikotinamid vo forme špinavo bielej kryštalickej pevnej látky (3,16 kg, 88 %) s teplotou topenia 156°C. Analýza pre C23H35N7O6S: vypočítané: C 51,40, H 6,53, N 18,26, nájdené: C 51,33, H 6,56, N 18,36 %

Ô (CDC1₃): 1,04 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,44 (2H,

q), 2,54	(4H,	m) ,	2,96 (2H,	q), 3,12	(4H, m), 3	,36 (3H, s),
3,81 (2H,	t) ,	4,27	(2H, t),	4,80 (2H,	q), 5,35	(1H, s), 6,68
(1H, s),	8,66	(1H,	d), 8,86	(1H, d),	10,51 (1H,	s)

LRMS: m/z = 539 (M+l)⁺

Preparatívny postup 3 etylacetátový solvát 1-(6-etoxy-5-[3-etyl]-6,7-dihydro-2--(2metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-etylpiperazínu ο

/

OMe spôsob (a)

Za účelom prípravy zlúčeniny uvedenej v nadpise sa zmes titulnej zlúčeniny z preparatívneho postupu 1, N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-4-yl]-2-etoxy-5-(4—etylr 1-piperazinylsulfonyl)nikotinamidu (1,18 kg, 2,2 mol), tercbutoxidu draselného (500 g, 4,4 mol) a etylacetátu (193 g) v etanole (11,8 litru) 20 hodín zahrieva na 120°C a potom skoncentruje pri zníženom tlaku, oddestiluje sa asi 10 litrov rozpúšťadla. K zvyšku sa pridá voda (2,9 litra) a k vodnej zmesi sa počas miešania pri teplote miestnosti pridáva vodná kyselina chlorovodíková, dokial jej pH nedosiahne 7,5, a potom sa k nej pridá etylacetát (7,5 litra). Výsledná dvojfázová zmes sa zahreje na 55°C. Organická fáza sa oddelí a vodná fáza sa extrahuje ďalším etylacetátom (3,0 litra). Spojené organické fázy sa destiláciou pri zníženom tlaku skoncentrujú na konečný objem 4 litrov. Vyzrážaná pevná látka sa nechá ' granulovať 1 hodinu pri' 5°C, odfiltruje, premyje etylacetátom (1,2 litru) a vysuší vo vákuu. Získa sa 1-(6-etoxy-5-[3-etyl]6,7-di-hydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3d]pyrimidín-5—yí]-3-pyridylsulfonyl)-4-etylpiperazín vo forme svetlo žltej kryštalickej pevnej látky (877 g, 78 %) s teplotou topenia 157°C.

Analýza pre C23H33N7O5S.0,2 C2H5CO2CH3: vypočítané: C 53,21, H 6,49, N 18,25, nájdené: C 52,65, H 6,46, N 17,76 % (CDC1₃): 1,07 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,61 (3H, t), 2,44 (2H,

q), 2,57 (4H, m), 3,08 (2H, q), 3,Í5 (4H, m), 3,32 (3H, s),

3,92 (2H, q), 4,48 (2H, q), 4,77 (2H, q), 8,65 (1H, d), 9,06 (1Η, d). Spektrum tiež vykazuje signály, ktoré zodpovedajú zlúčenine solvatovanej etylacetátom.

LRMS: m/z 520 (M+l)⁺ spôsob (b)

Za účelom zlúčeniny uvedenej v nadpise preparatívneho postupu 3 sa zmes titulnej zlúčeniny z preparatívneho postupu 1, N-[3-karbamoyl-5-etyl-l-(2-metoxyetyl)-lH-pyrazol-4- -yl]2-etoxy-5-(4-etyl-l-piperazinylsulfonyl)nikotinamidu (34,6 g, 0,064 mol), terc-butoxidu draselného (14,8 g, 0,132 mol) a etylacetátu (8,5 g, 0,096 mol) v etanole (0,26 litra) 17 hodín zahrieva na 105 až 107°C a potom skoncentruje pri zníženom tlaku (oddestiluje sa celkom asi 0,16 litra rozpúšťadla). K olejovitému zvyšku sa pridá voda (0,28 litra) a vodná zmes sa mieša pri teplote miestnosti, pričom sa k nej pridáva vodná kyselina chlorovodíková, dokiaľ sa nedosiahne pH 7,5.

Vyzrážaná pevná látka sa nechá granulovať 1 hodinu pri -10 až 0°C, odfiltruje, premyje etanolom (0,4 litra) a vysuší vo vákuu. Získa sa 1-(6-etoxy-5-[3-etyl]-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazol[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3pyridylsulfonyl)-4-etylpiperazín vo forme svetlo žltej kryštalickej pevnej látky (23,3 g, 69,7 %) s teplotou topenia 168 až 170°C.

Ô (CDC1₃) : 1,07 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,61 (3H, t), 2,44 (2H, q), 2,57 (4H, m), 3,08 (2H, q), 3,15 (4H, m), 3,32 (3H, s),

3,92 (2H, q), 4,48 (2H, q), 4,77 (2H, q), 8,64 (1H, d), 9,05 (1H, d) .

LRMS: m/z = 520 (M+l)⁺ l-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo—2Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazín

Príklad' 1

Predloží sa 10 g (0,019 mol) zlúčeniny z preparatívneho. postupu 3(a), etylacetátového solvátu 1-(6-etoxy-5-[3—etyl]6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo- [4,3d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridýlsulfonyl)-4-etylpiperazínu a potom 12 ml/g (tedy 120 ml) 16% vody v etylalkohole. Výsledná suspenzia sa zahrieva na spätný tok. Výsledný roztok sa skoncentruje pri atmosférickom tlaku oddestilovaním 6 ml/g (teda 60 ml), potom ochladí na teplotu miestnosti. Pri 40°C dôjdé ku kryštalizácii. Získaná suspenzia sa ochladí na 5 až 10°C a 30 minút nechá granulovať. Zrazenina sa odfiltruje a premyje etanolom (2 ml/g, tedy 20 ml). Vlhká pevná látka sa suší cez noc vo vákuu pri 55 až 60°C. Získa sa biela kryštalická pevná látka (7,6 g, 76 %) s teplotou topenia 162 až 165°C.

Ô (CDC1₃): 1,05 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,43 (2H, r~

q), 2,57 (4H, t), 3,09 (2H, t), 3,Í5 (4H, t), 3,30 (3H, s),

3,93 (2Η, t), 4,48 (2H, t), 4,90 (2H, q), 8,65 (1H, d), 9,05 (1H, d), 10,65 (1H, s)

Príklad 2

1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo--2Hpyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-pyridýlsulfonyl}-4-etylpiperazín

Predloží se 10 g (0,019 mol) zlúčeniny z preparatívneho postupu 3(b), etylacetátového solvátu 1-(6-etoxy-5-[3—etyl]6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo- [4,3d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-etylpiperazínu a potom 12 ml/g (tedy 120 ml) 16% vody v etylalkohole.

Výsledná suspenzia sa zahrieva na spätný tok. Výsledný roztok sa skoncentruje za atmosférického tlaku oddestilovaním 9,5 ml/g (tedy 60 ml), potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Pri 40°C dôjde ku kryštalizácii. Získaná suspenzia se ochladí na 5 až 10°C a 30 minút nechá granulovať. Zrazenina sa odfiltruje a premyje etanolom (2 ml/g, tedy 20 ml). Vlhká pevná látka sa suší cez noc vo vákuu pri 55 až 60°C. Získa sa biela kryštalická pevná látka (9,4 g, 94'%) s teplotou topenia 158 až 160°C.

δ (CDCI3): 1,05 (3Η, t), 1,42 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,43 (2H, q), 2,57 (4H, t), 3,09 (2H, t), 3,15 (4H, t), 3,30 (3H, s),

3,93 (2H, t), 4,48 (2H, t), 4,90 (2H, q), 8,65 (1H, d), 9,05 (1H, d), 10,65 (1H, s)

Pri spôsoboch popísaných v príkladoch uskutočnenia je možné používať vodu a farmaceutický vhodné alkoholy, ako metanol, etanol, propanol, prednostne etanol alebo izopropylalkohol a ich zmesi. Tieto spôsoby je tiež možné použiť na prekryštalovanie titulnej zlúčeniny.

Odborníkom bude zrejmé, že solváty je možné pripravovať radom rôznych štandardných spôsobov, ktoré sú známe.

Ďalšie solváty 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl]-4-etylpiperazínu je možné pripravovať alebo z etylacetátového solvátu (zlúčeniny z preparatívheho postupu 3) alebo zo zlúčenín z príkladov 1 alebo 2. Také ďalšie solváty je možné napríklad pripravovať tak, že sa (a) východzia zlúčenina po predĺžené obdobie (ako napríklad po dobu asi 2 týždňov) mieša so skúšaným rozpúšťadlom (napríklad acetonitrilom), pevná látka sa odfiltruje a potom sa uskutoční PXRD analýza (ako je definovaná vyššie) tejto vlhkej, t.j. nevysušenej, pevnej látky (solvatovanej); alebo (b) východzia zlúčenina rozpustí v skúšanom rozpúšťadle (napríklad acetonitrilu) a z tohoto roztoku sa akýmkoľvek vhodným spôsobom, napríklad ochladením alebo za použitia odparovacích postupov, nechá vykryštalovať požadovaný solvát, a táto vlhká, t. j. nevysušená, pevná látka (solvatovaná) sa následne podrobí PXRD analýze.

Kryštalické zlúčeniny definované vyššie je možné pripravovať zo svojich solvátov desolvatáciou za použitia štandardných o sobe známych spôsobov, ako je pôsobenie tepla (prednostne pri asi 100 až 150°C) alebo pôsobenie podtlaku (pri teplote okolia a vyššej) alebo tak, že sa rozpustí v nesolvatujúcom rozpúšťadle (viď napríklad príklady 1 a 2). Odborník v tomto obore bude pri výrobe kryštalickej zlúčeniny definovanej vyššie schopný použiť alternatívne vysúšacie postupy.

Ako ďalšie solváty 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2—(2 metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu, ktoré je možné pripravovať, je možné uviesť solváty s n-butanolom, metyletylketónom (MEK), acetonitrilom, tetrahydrofuránom alebo toluénom. Prítomnosť solvatovanej látky je možné určit pomocou PXRD.

Napríklad acetonitrilový solvát 1-{6-etoxy-5-[3-ethyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu sa pripraví tak, že sa zlúčenina nejprv rozpustí v horúcom acetonitrile. Vzniknutý roztok sa pomaly ochladí a výsledná suspenzia sa nechá granulovať cez noc pri teplote okolia. Roztok sa odfiltruje za použitia podtlaku a oddelená pevná látka (solvát) sa nechá vysušiť za teploty a tlaku okolia. Prítomnosť solvátu sa detekuje pomocou PXRD. Alternatívnym spôsobom detekcie solvátu je sledovanie hmotnostného úbytku pomocou TGA. Aceto-nitrilový solvát je prítomný vo forme hemisolvátu, hoci do úvahy prichádzajú aj iné solváty.

Ukázalo sa, že z týchto solvatovaných látok v prípade sušenia pri asi 150°C vzniká voľná báza 1-(6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]37 pyrimidín-5-yl]-3-pyridylsulfonyl)-4-etylpiperazínu, ako dokladajú výsledky diferenciálnej skanové kalorimetrie (DSC).

DSC bola uskutočnená za použitia zariadenia Perkin Elmer DSC7/TGA7 pri rýchlosti zahrievania 20°C/min.

Na obr. 1 je znázornený graf DSC kryštalickej látky s PXRD obrazcom uvedeným v tabuľke 1 (zlúčeniny z príkladu 1); graf DSC etylacetátového solvátu (zlúčeniny z preparatívneho postupu 3); DSC graf acetonitrilového solvátu (solvátu zlúčeniny z príkladu 1, ktorý sa pripraví vyššie popísaným spôsobom). Z tohoto obrázku vyplývá, že ako etylacetátový, tak i metyl-etylketónový (MEK) solvát sa nejprv desolvatujú a uvoľnia kryštalickú látku definovanú vyššie, ktorá sa potom rozpúšťa pri teplote asi 160 až 165°C.

Claims

PATENTOVÝ NÁROK

1. Polymorf 1-{6-etoxy-5-[3-etyl-6,7-dihydro-2-(2-metoxyetyl)-7-oxo-2H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-5-y1]-3-pyridylsulfonyl}-4-etylpiperazínu, ktorý vykazuje simulovaný práškový rôntgenový difrakční obrazec s hlavnými pikami v podstate ako sú definované ďalej ?r

Vzdialenosť (nm) Intenzita (%) Vzdialenosť d (nm) Intenzita (%) Vzdialenosť d (nm) Intenzita (%) Vzdialenosť d (nm) Intenzita (%) 1,22486 1,24 0,42323 19,04 0,3061 9,18 0,24041 2,24 0,97301 100 0,41595 1,19 0,30483 2,22 0,23424 1,22 0,85596 36,31 0,40421 1,35 0,30428 1,94 0,2299 1,13 0,73923 15,02 0,39186 7,81 0,29929 1,59 0,2264 1,23 0,73856 8,35 0,38951 10,26 0,29804 2,1 0,22605 1,29 0,73284 1,69 0,38491 5,34 0,29403 3,46 0,22079 2,65 0,58222 14,49 0,38485 2,46 0,29073 1,74 0,21855 1,9 0,57617 1,96 0,38427 43,14 0,28719 1,68 0,21679 1,92 0,57461 43,25 0,37357 3,1 0,28532 4,7 0,21468 1,35 0,51166 7,17 0,36961 3,99 0,28122 11,19 0,21119 4,52 0,51078 32,71 0,36805 4,51 0,28097 2,82 0,20769 1,15 0,48807 17,47 0,36042 5,28 0,27776 2,17 0,20471 1,12 0,48674 10,85 0,35988 6,09 0,27774 1,46 0,2028 1,63 0,4865 10,98 0,35819 6,8 0,27162 1,76 0,19935 1,03 0,48425 13,19 0,35721 8,55 0,27041 3,63 0,19883 2,96 0,48018 3,32 0,35355 2,47 0,26875 1,42 0,19181 1,27 0,47632 10,57 0,3407 1,2 0,26443 2,19 0,19058 1,03 0,47491 4,16 0,33461 4,91 0,26084 3,75 0,1884 1,23 0,4641 1,96 0,33318 7,54 0,26025 1,6 0,18797 2,49

0,4629 19,73 0,33154 4,36 0,25809 1,31 0,18749 2,81 0,43314 9,53 0,32827 1,7 0,25448 1,21 0,17939 1,57 0,43301 3,65 0,32774 1,22 0,25438 3,26 0,17617 1,24 0,43066 26,66 0,32434 19,95 0,24325 2,47 0,17379 1,82 0,42909 51,91 0,3224 2,11 0,24212 1,24 0,17194 1,03 0,42798 24,75 0,30663 1,38 0,24163 4,39

pričom tento PXRD obrazec je vytvorený za použitia rôntgenového žiarenia medi K-alfal s vlnovou dĺžkou 0,154178 nm.